Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Вопросы эпизоотологии, иммунологии, разработки и совершенствования оздоровительных мероприятий при лейкозе крупного рогатого скота

На правах рукописи

ЛЕБЕДЕВ АЛЕКСЕИ ФЕДОРОВИЧ

ВОПРОСЫ ЭПИЗООТОЛОГИИ, ИММУНОЛОГИИ, РАЗРАБОТКИ И СОВЕРШЕНСТВОВАНИЯ ОЗДОРОВИТЕЛЬНЫХ МЕРОПРИЯТИЙ ПРИ ЛЕИКОЗЕ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология.

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Курск - 2004

Работа выполнена в Курском Федеральном государственном научно-исследовательском институте агропромышленного производства, в Федеральном государственном общеобразовательном учреждении высшего профессионального образования «Курская государственная

сельскохозяйственная академия им. проф. И.И. Иванова»

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук

Евглевский Алексей Алексеевич

Официальные оппоненты: заслуженный деятель науки РФ,

доктор ветеринарных наук, профессор Ануфриев Александр Иванович

доктор ветеринарных наук, профессор Мищенко Владимир Александрович

Ведущая организация: Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины

Защита состоится 16.12. 2004 года в «11» часов на

заседании диссертационного совета1 Д 220.040.03 в Курской государственной сельскохозяйственной академии имени профессора И.И.Иванова по адресу: г. Курск, ул. К. Маркса, 70 КГСХА

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Курской государственной сельскохозяйственной академии им. проф. И.И.Иванова

Автореферат разослан

16.11.

2004 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Г.Ф.Рыжкова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. В структуре инфекционной патологии крупного рогатого скота лейкоз прочно занимает ведущее место, обогнав все вместе взятые заразные болезни (Гулюкин М.И. с соавт., 2002 г.).

В последнее десятилетие во многих регионах Российской Федерации распространение лейкоза приняло внушительные масштабы, серьезно угрожающие развитию молочного скотоводства. Не исключением в этом ряду является Курская область, испытывающая эпизоотический прессинг инфекции ВЛКРС.

Сложность решения проблемы лейкоза диктуется рядом обстоятельств, среди которых наиболее значимыми являются: отсутствие полных данных о причинах и механизмах, вызывающих безудержную пролиферацию клеток лимфоидного ряда с нарушением их созревания. Для объяснения этого явления выдвинуто очень много теоретических предложений и гипотез, но окончательного научного решения пока не существует. В этом аспекте больше вопросов и нет достаточно убедительного ответа. В эпизоотологии лейкоза пока необъяснимы причины и механизмы активации инфекционного процесса, когда между инфицированием и возможным заболеванием существует большой или пожизненный временной период. К сожалению, в настоящее время у практической ветеринарии нет средств активной профилактики лейкоза, что не позволяет в должной мере управлять эпизоотическим процессом.

Несмотря на значительное число научных исследований по проблеме лейкозов, во многих отношениях эта патология пока остается загадочной и вряд ли радикально разрешимой в ближайшем десятилетии. В этой связи профилактика и борьба с лейкозом базировалась и базируется на основе строгого выполнения комплекса мер по охране благополучных стад от заноса инфекции ВЛКРС, выявлении и удалении больных и инфицированных ВЛКРС животных (Апалькин В.А., 1993; Бусол В.А., 1988; Гулюкин М.И., 2002; Джупина СИ., 2001; Нахмансон В.М., 1995; Смирнов П.Н. с соавт., 1989; СимонянГ.А., 1997 и др.).

В последние годы значительно расширился объем научных исследований и получены новые данные по организации профилактических и противоэпизоотических мероприятий, позволяющие эффективно конструировать систему оздоровительных противолейкозных мероприятий в зависимости от степени поражения неблагополучного стада (Апалькин В.А., 1993; Бусол В.А.с соавт., 1999; Гулюкин М.И., 2001; Мельникова В.М., 2001; Смирнов П.Н., 1998; Симонян Г.А., 1997; Фогель Л.С, 2000 и др.).

Однако, они еще далеки от совершенства и требуют научно-производственной доработки с учетом региональных особенностей эпизоотии лейкоза. Признание болезни факторной значи ёцЬ^О^¡^доу^^вшмржность

БИБЛИОТЕКА СПеП| 09 Ш

более активного управления эпизоотическим процессом при оздоровлении неблагополучных по лейкозу стад.

В этой связи, изучение эпизоотического процесса при лейкозе и на этой основе совершенствование системы оздоровительных мероприятий, с учетом региональных особенностей, является весьма актуальным.

Цель работы. Изучить особенности и характер эпизоотического процесса при лейкозе крупного рогатого скота в Курской области и на этой основе внести коррективы, обеспечивающие повышение эффективности комплекса противоэпизоотических и оздоровительных противолейкозных мероприятий.

Для решения поставленной цели определены следующие задачи:

1. Изучить характер и особенности эпизоотического процесса при лейкозе крупного рогатого скота в Курской области и определить эффективность сложившейся системы оздоровительных противолейкозных мероприятий;

2. Научно обосновать, разработать и внедрить в производство региональную целевую программу борьбы с лейкозом крупного рогатого скота;

3. В рамках выполнения программы оздоровительных мероприятий провести разработку, экспериментальное и производственное испытание новых иммунотропных средств, повышающих иммунный статус животных в прогнозируемые периоды развития иммунодефицитов у коров и риске повышенной чувствительности к ВЛКРС.

Научная новизна.

- В настоящей работе впервые в условиях Курской области проведен ретроспективный анализ эпизоотии лейкоза крупного рогатого скота и дана оценка эффективности проводимой системы оздоровительных мероприятий, научно обоснована и разработана региональная программа борьбы с лейкозом на 2004-2010 гг.;

- Теоретически обоснованы, разработаны, запатентованы и экспериментально апробированы в производстве новые средства иммунотропного действия, позволяющие эффективно проводить коррекцию иммунного статуса коров в прогнозируемые периоды развития иммунодефицитов, что обеспечивает повышение устойчивости их организма к инфекции ВЛКРС.

Научная новизна работы подтверждается решением Роспатента Российской Федерации о проведении экспертизы по существу по двум заявкам на изобретение:

- «Способ получения препарата для повышения резистентности организма животных» (№ 2003135681/15 (038295) 2004 г.).

- «Способ получения препарата для повышения резистентности организма животных» (№ 2004116104/15 (017230) 2004 г.).

Практическая значимость. Научно обоснована, разработана и утверждена законодательным собранием региональная целевая научно-производственная программа оздоровления животноводства Курской области от лейкоза крупного рогатого скота.

В рамках выполнения научно-производственной программы оздоровления хозяйств Курской области от лейкоза:

- теоретически обоснованы, разработаны и апробированы в производстве новые средства с широким спектром иммунотропного и антиинфекционного действия, повышающие устойчивость организма животных к факторным болезням, в том числе и инфекции ВЛКРС.

- по материалам диссертации разработаны методические рекомендации «по организации противоэпизоотических мероприятий при лейкозе крупного рогатого скота в хозяйствах различных форм собственности, одобренные на заседании научно-технического совета агропромышленного комитета Курской области.

Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены и одобрены на научно-техническом совете агропромышленного комитета Курской области (Курск 2003, 2004 гг.); на расширенном заседании научно-координационного центра ФГУП «Курская биофабрика» (2003 г.); на ученом совете Курского НИИ АПП (2004 г.); на научно-практических конференцях профессорско-преподавательского состава факультета ветеринарной медицины Курской ГСХА (2003, 2004 гг.); на производственных семинарах ветеринарных специалистов Курской области (2002,2003,2004 гг.).

Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 5 научных работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 133 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов исследований, выводов, практических предложений и приложения. Работа иллюстрирована 13 таблицами. Список литературы включает 211 источников, в том числе 51 иностранного автора.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

- анализ эпизоотии лейкоза крупного рогатого скота в Курской области;

- результаты исследований по оценке влияния иммунного статуса коров на чувствительность животных к инфекции ВЛКРС;

- теоретическое обоснование разработки новых препаратов с широким спектром иммунотропного и антиинфекционного действия и результаты испытания их при инфекции ВЛКРС;

- теоретическое обоснование положений научно-производственной целевой программы оздоровления хозяйств Курской области от лейкоза крупного рогатого скота.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материалы, методы и объемы исследований

Основная работа выполнена в период с 2002 по 2004 гг. Исследования проводились в хозяйствах, ветеринарных лабораториях, станциях по борьбе с болезнями животных.

При выполнении поставленных задач использовали комплексный эпизоотологический подход, включающий методы: описательно-исторический, эпизоотологической статистики, эпизоотологического исследования, иммунологический анализ, экспериментальные исследования и опытно-производственные испытания.

Методом ретроспективного эпизоотологического анализа изучали территориальные границы, годовую и многолетнюю динамику инфицированности и заболеваемости лейкозом крупного рогатого скота. В рамках изучения динамики эпизоотии лейкоза проведен анализ противоэпизоотической эффективности различных систем оздоровительных мероприятий.

Для диагностики лейкоза крупного рогатого скота использовали общепринятые методы исследований: серологический, основанный на выявлении в реакции иммунодиффузии (РИД) в сыворотке крови инфицированных ВЛ животных специфических антител и гематологический. Серологическому исследованию на лейкоз подвергали сыворотки крови от животных в возрасте 6 месяцев и старше.

Результаты эпизоотологического обследования служили важным условием в вопросе прогнозирования развития эпизоотического процесса и определения варианта оздоровления хозяйства и разработки плана оздоровительных мероприятий.

Изучение изменений иммунного статуса проводили у клинически здоровых РИД+ коров в послеродовой период.

Состояние клеточного иммунитета контролировалось путем определения количества Т- и В-лимфоцитов по методике, разработанной Коромысловым Г.Ф. и Солодовниковым В.Л. (1982 г.), в частности, Т-клетки определяли в реакции спонтанного розеткообразования с эритроцитами

барана; В-клетки в реакции комплиментарного розеткообразования с эритроцитами мышей.

Уровень иммуноглобулинов класса G и М определяли методом прямой радиальной иммунодиффузии по методике Manchini (1965 г.) с использованием моноспецифических антисывороток, представленных профессором Федоровым Ю.Н.

В проведении исследований по изучению иммунного статуса животных участвовали научные сотрудники Курской ГСХА и Курского НИИ АПП, которым автор выражает благодарность и признательность.

Разработку способов получения новых иммунотропных препаратов провели с участием ведущих научных сотрудников Курской ГСХА, Курского НИИ АПП, Воронежского госагроуниверситета. На опытные образцы иммунотропных препаратов составлена научно-техническая документация, вошедшая в патентные документы.

Экспериментально-производственную апробацию опытных образцов новых иммунотропных препаратов провели в условиях двух длительно неблагополучных по лейкозу хозяйств с уровнем инфицированности инфекцией ВЛКРС 25-50%. Объектом для изучения влияния новых иммуномодулирующих препаратов на иммунный статус животных и их чувствительность к инфекции ВЛКРС служили коровы в послеродовой период. Длительность наблюдения составила от 60 дней до 9-10 месяцев.

В разработке основных положений научно-производственной целевой программы по оздоровлению животноводческих хозяйств Курской области от лейкоза крупного рогатого скота приняли участие ведущие научные сотрудники Курской биофабрики «БИОК», Курской ГСХА, Курского НИИ агропромышленного производства и ветеринарные специалисты управления ветеринарии Курской области. Научно-методическую и консультативную помощь в разработке региональной программы оказал профессор Гулюкин М.И.

Статистическую обработку цифровых показателей провели согласно методическим указаниям Ю.К.Баюн (1988 г.).

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Анализ состояния эпизоотической ситуации по лейкозу крупного рогатого скота в хозяйствах Курской области

Исходя из архивных материалов управления ветеринарии Курской области, первые случаи заболевания крупного рогатого скота лейкозом были зарегистрированы в 1973 году. Заболевание не носило массового характера, так как информация шла о выделении лишь единичных случаев, в основном при убое животных.

В начале 80-х годов, официально, неблагополучным пунктом по лейкозу

являлся совхоз «Марьино». Именно в этом хозяйстве заболевание лейкозом коров имело наибольшее распространение. Так, в 1982 году, используя гематологические критерии оценки, заболевание лейкозом было установлено у 18 коров. Сразу же во внимание были взяты все ближайшие к этому хозяйству стада и хозяйства, в которые завозились племенные телки из совхоза «Марьино». Первые гематологические исследования показали, что единичные случаи заболевания коров лейкозом были выявлены практически во всех стадах, в которые был завезен скот из совхоза «Марьино». Следует признать, что вплоть до 2000 года должной оздоровительно-профилактической работы с этой болезнью в Курской области не проводилось. По сути, все сводилось к отслеживанию эпизоотической ситуации по инфицированности ВЛКРС и удалению из стад больных лейкозом. Это привело к тому, что в настоящее время эпизоотическая ситуация по лейкозу крупного рогатого скота в Курской области выглядит следующим образом (таблица 1).

В целом, на 01.01.2004 г. в области зарегистрировано 69 неблагополучных пунктов и 134 потенциально-опасных, из которых:

- 25 хозяйств с процентом инфицированности до 10%;

- 67 хозяйств с процентом инфицированности от 10 до 30%;

- 81 хозяйство с процентом инфицированности более 30%..

Следует отметить, что наблюдается рост абсолютного количества инфицированных и больных животных, несмотря на сокращение поголовья крупного рогатого скота в области. Так процент инфицированности вырос с 7,9% в 1998 году до 11,9% в 2003 году. Эта болезнь прочно начала занимать первое место в структуре болезней инфекционной этиологии сельскохозяйственных животных.

Таблица 1 - Динамика выявления крупного рогатого скота, инфицированного ВЛКРС и больного лейкозом в Курской области.

Исходя из анализа эпизоотической обстановки наиболее неблагополучными по лейкозу крупного рогатого скота на территории Курской области являются: Льговский район —12, Глушковский -11, Курский

- 9, Курчатовский - 6, Горшеченский - 5, Золотухинский, Рыльский и Касторенский по 3 неблагополучных хозяйства и т.д.

Наибольший уровень инфицированности ВЛКРС зарегистрирован в хозяйствах Льговского - 36,5%, Курчатовского - 36,0%, Глушковского - 27,0%, Конышевского — 22,3%, Рыльского — 20,2% районов.

В остальных районах процент инфицированности ВЛКРС колеблется следующим образом:

- в 10 районах он оставляет от 5 до 10%:

- в 7 районах и городе Курске от 10 до 15%;

- в 6 районах менее 5%.

Наиболее чистыми районами являются: Советский - 0,7%, Фатежский -2,0%, Щигровский- 1,3%.

За последние 2 года вырос процент инфицированности ВЛКРС в ранее благополучных районах: Беловском с 4,2% в 2000 году до 8,3% в 2002 году, Болыиесолдатском с 0,7% в 2000 году до 3,6% в 2002 году.

Таким образом, приведенные данные свидетельствуют о широкомасштабном распространении лейкоза в Курской области.

Оценка эффективности противолейкозных оздоровительных мероприятий на примере опытно-производственного хозяйства (ОПХ) Курского НИИ агропромышленного производства

В вопросе разработки методологии борьбы с лейкозом заслуживают внимание результаты проведения оздоровительных мероприятий в ОПХ Курского НИИ агропромышленного института. Официально данное хозяйство является неблагополучным с 1992 года. Именно на 1992-1993 гг. инфицированность ВЛКРС достигла максимального уровня и составляла 43% и 46%. Оздоровительные мероприятия в хозяйстве велись путем изоляции из стад больных лейкозом животных. При этом разделения стад на серопозитивных и серонегативных животных не проводилось. Вскоре стало вполне очевидным полная неперспективность данного метода проведения оздоровительных мероприятий, так как снизить количество реагирующих не удалось, несмотря на то, что выбраковывались в первую очередь сероположительные животные (таблица 2).

Таблица 2 - Годовая динамика показателей инфицированности крупного рогатого скота ВЛКРС в ОПХ Курского НИИ АПП

годы %

1992 43

1993 46

1994 1995

38,7 \ 36,7

1996

35

С 1997 года для оздоровления данного хозяйства мы избрали более радикальный метод, основанный на полном удалении из 3-х неблагополучных стад всех серопозитивных животных.

Как показали дальнейшие исследования, полная выбраковка РИД-положительных животных позитивно отразилась на показателях эпизоотической ситуации. В течение 1997-1998 гг., несмотря на учащение диагностических исследований, реагирующие животные выделялись в единичных случаях. В 2001 году были полностью сданы на убой реагирующие коровы с молочного комплекса этого хозяйства. Начиная с 2002 года и по 2004 случаи выявления серопозитивных животных в этом хозяйстве прекратились.

Следует отметить, что помимо проведения специальных противолейкозных мероприятий, серьезное внимание уделялось целому комплексу организационно-хозяйственных, зоотехнических и ветеринарно-санитарных мероприятий. В частности, большое внимание было уделено селекционно-племенной работе по воспроизводству стада. В плане оздоровления хозяйства от лейкоза приоритет в комплектовании стад отводят потомству, полученному только от здоровых коров старше 5 лет, как наиболее лейкозоустойчивых.

Достигнутые успехи по оздоровлению данного хозяйства от лейкоза убедительно подтверждают эффективность проведенных оздоровительных мероприятий, основанных на учащении серологических исследований, своевременном и полном удалением из стад не только больных, но и инфицированных ВЛКРС животных, с последующим вводом потомства, полученного от лейкозоустойчивых коров и выращенных в изолированных условиях. Такой метод оздоровления, на наш взгляд, является показательным и нами взят за основу при разработке целевой научно-производственной программы по оздоровлению животноводческих хозяйств Курской области от лейкоза крупного рогатого скота.

Теоретическое обоснование методологии и организация оздоровительных противолейкозных мероприятий в Курской области

Масштабность распространения эпизоотии лейкоза крупного рогатого скота в хозяйствах Курской области показывает, что традиционная система оздоровительных мероприятий не позволяет в должной мере контролировать и управлять эпизоотическим процессом, обусловленным ВЛКРС. Подобное положение дел привело не только к большим экономическим потерям, но и может привести к непредсказуемым последствиям социального характера, учитывая, что ВЛКРС представляет непосредственную опасность для здоровья людей.

Недостаточная изученность лейкоза крупного рогатого скота и отсутствие у значительной части ветврачей районов необходимого опыта в

проведении противолейкозных мероприятий поставили перед нами задачу объединения усилий ученых и практиков в борьбе с этим заболеванием в рамках научно-производственного противолейкозного центра (НППЦ). Для разработки научно-обоснованной системы оздоровительных мероприятий решением Правительства Курской области на базе Курской биофабрики «БИОК» и Курской областной ветеринарной станции был создан научно-производственный противолейкозный центр. К организации работы центра были привлечены все ведущие научные сотрудники Курской биофабрики «БИОК», Курской ГСХА, Курского НИИ агропромышленного производства и практические ветеринарные врачи области.

Структура НППЦ включает в своем составе три подразделения: лабораторно-методическое, производственно-организационное и научно-исследовательское.

Лабораторно-методическая работа возложена на Курскую областную ветеринарную лабораторию. В ее функции, помимо диагностической работы, входит освоение современных методов диагностики лейкоза и создание единой методологии диагностической работы для всей сети ветеринарных лабораторий.

Производственно-организационная работа возложена на Курскую областную ветеринарную станцию. Ее сотрудники отслеживают эпизоотическую ситуацию по каждому неблагополучному стаду, на основании чего разрабатывают комплексные планы оздоровления стад, курируют организацию и ход оздоровительной работы.

Научно-исследовательскую работу, равно как и работу НППЦ возглавляет начальник управления ветеринарии области.

Таким образом, организация НППЦ призвана стать инициатором разработки и внедрения в производство научно-обоснованной методологии и реализации новых организационно-экономических форм в оздоровлении хозяйств области от этого опасного заболевания животных.

Первой задачей противолейкозного центра была разработка основных положений научно-производственной целевой программы «Профилактика и оздоровление хозяйств от лейкоза крупного рогатого скота в Курской области на 2004-2010 гг.».

Исходным началом внедрения программы в производство являлось определение степени региональной распространенности лейкоза путем проведения мониторинга эпизоотической ситуации и уточнения эпизоотического статуса, потенциально опасных в отношении ВЛКРС стад. Следующим этапом являлся выбор наиболее оптимальной методологии оздоровления неблагополучных стад. В 2004 году на основании проведенного мониторинга эпизоотии лейкоза для каждого неблагополучного хозяйства, с учетом его экономических и технологических возможностей, разработаны и реализуются в производстве конкретные программы оздоровительных

мероприятий.

На наш взгляд, методология изучения лейкозной инфекции должна опираться на комплексный подход. Прежде всего, должна даваться общая эпизоотическая оценка конкретного стада, а в последующем разрабатываться стратегия и тактика оздоровительной работы. Именно с этих позиций подходит ветеринарная служба области в вопросе управления эпизоотическим процессом лейкоза крупного рогатого скота и рекомендует использование нескольких вариантов:

- При уровне инфицированно дойного стада до 10% оздоровление рекомендуется вести путем сдачи на убой всех положительно реагирующих в РИД животных. Для ускорения процесса оздоровления предусмотрено учащение сроков проведения серологических исследований всех животных до одного раза в квартал и получения двух отрицательных результатов. Такой метод оздоровления, начиная с 2004 года, применяется в 5 хозяйствах.

- При инфицированности стад от 10% до 30% оздоровление проводится путем разделения стад на РИД-положительных и РИД-отрицательных животных. В последующем серонегативных животных раз в квартал контролируют серологическим методом, а серопозитивных через каждые шесть месяцев исследуют гематологическим методом. Животных, признанных больными лейкозом, немедленно сдают на убой. Такой метод оздоровления применяется в 32 хозяйствах. Большое внимание при проведении оздоровительных мероприятий в таких хозяйствах отводится изолированному выращиванию здорового молодняка для замены инфицированных коров. Следует признать, что внедрение этого метода оздоровления сопряжено с трудностями, связанными с расформированием производственных групп коров, оплатой труда доярок.

- При уровне инфицированности, превышающем 30%, стадо объявляют «замкнутым». Всех взрослых животных исследуют гематологическим методом через каждые 6 месяцев. Оздоровление таким методом осуществляют за счет формирования нового стада Рид-отрицательными нетелями с обязательным изолированным их растелом.

- Независимо от уровня инфицированности стада предусмотрен и рекомендуется вариант ускоренного оздоровления. Серологические исследования в таких случаях проводят с интервалом в 10 дней. Серопозитивных животных немедленно выводят из стада. При получении первого отрицательного результата следующее исследование проводится с интервалом в 30-45 дней. При получении повторного отрицательного результата всех животных старше 6-месячного возраста исследуют два раза с интервалом в 3 месяца. При получении отрицательных результатов серологических исследований хозяйство признают свободным от инфекции

ВЛКРС.

Обязательным условием реализации «Программы» является изолированное от взрослого поголовья выращивание ремонтных телок и контроль их благополучия серологическим методом раз в 6 месяцев. При выявлении серопозитивных животных их переводят в группу откорма. Реализация ремонтного молодняка из благополучных по лейкозу хозяйств разрешается в возрасте не моложе 9 месяцев.

По нашим данным животные черно-пестрой породы крупного рогатого скота отличаются более высокой частотой заболеваемости лейкозом (28,2%), чем особи симментальской породы (17,3%). В Курской области все хозяйства, занимающиеся разведением черно-пестрой породы коров, являются неблагополучными по лейкозу.

В ходе многолетних наблюдений нами установлено, что коровы, имеющие высокую молочную продуктивность, также наиболее подвержены заболеванию лейкозом и, в этой связи, постоянно составляют группу риска. В возрастном аспекте наиболее восприимчивы коровы 3-4 лактации, нежели молодые и более старые особи.

Таким образом, в молочном скотоводстве области акцент делается на разведение симментальской породы, как наиболее устойчивой к инфекции ВЛКРС.

В связи с тем, что областная противолейкозная программа требует научной проработки ряда проблем, нами развернуты научные исследования по выявлению факторов, провоцирующих активацию инфекционного процесса у инфицированных и повышенную восприимчивость к инфекции ВЛКРС здоровых животных. Проводимая в данном направлении научно-исследовательская работа отражена в следующих разделах нашего диссертационного исследования.

Характеристика иммунного статуса коров при лейкозе в до- и послеродовый периоды

Справедливо полагая, что роды с неизбежной родовой травматизацией и послеродовый период способны оказать значительное влияние на иммунный статус коров, в этой связи мы поставили перед собой задачу по изучению глубины таких изменений и, по возможности, сопоставить насколько данные иммунного статуса коррелируют с активацией иммунного процесса при инфекции ВЛКРС. В возрастном отношении объектом исследований являлись коровы 3-4 лактации, так как, исходя из динамики выявления реагирующих в РИД животных, именно эта возрастная группа является наиболее чувствительной к инфекции ВЛКРС. В качестве фонового контроля мы использовали данные иммунного статуса этих же животных за 30 дней до родов.

Таблица 3 - Содержание Т- и В- лимфоцитов в крови РИД ± коров

Группа коров Срок исследования, день

До родов за После родов

30 дней 7-9 20-21 29-30 44-45

Т-лимфоциты, % (М ± ш)

52,2±1,4* 41,2±1,3* 44,8±1,6** 49,3±1,2** 51,6±1,8**

Сероне- Т-хелперы

гативные 23,5±0,17** 19,2±0,35** 20,5±0,39** 22,4±0,28** 22,5±0,53**

РИД- Т-супрессоры

(п=9) 11,2±0,25** 13,7±0,18* 11,6±0,15** 11,8±0,18* 11,5±0,24*

В-лимфоциты

22,8±0,40** 21,0±0,22** 22,5±0,16** 22,8±0,23** 22,5±0,17**

Т-лимфоциты

Серо- 48,6±1,5 38,5±1,4 39,0±1,5 41,2±1,3 43,8±1,5

Т-хелперы

позитив- 18,8±0,12 16,3±0,31 16,3±0,24 16,7±0,18 17,1 ±0,23

ные РИД+ (п=9) Т-супрессоры

12,8±0,31 14,1 ±0,26 13,7±0,32 12,6±0,27 12,5±0,35

В-лимфоциты

27,2±0,52 27,3±0,24 27,7±0,16 28,3±0,24 28,1±0,43

Примечание: различия в показателях сравниваемых групп статистически достоверны * (р<0,05), ** (р<0,001)

Сравнивая до- и послеродовые показатели содержания Т-лимфоцитов, можно высказать вполне определенное предположение, что ранний послеродовый период сопровождается развитием Т-клеточного иммунодефицита. В подтверждение этого предположения служит индекс соотношения субпопуляций Тх и Тс. Если до родов он составлял у РИД- 2,9, то на 7 дней после родов он снизился до 1,4, что ниже физиологическидопустимого уровня. Еще более низкие показатели относительного содержания Т-лимфоцитов были выявлены у РИД+ коров как до, так и после родов. Индекс соотношения Тх и Тс по группе РИД+ коров во все периоды контрольных исследований был ниже физиологически допустимого уровня.

Низкие показатели содержания Т-лимфоцитов в послеродовый период и выраженные изменения в соотношении Тх и Тс, в сторону увеличения последних свидетельствовали о явном снижении функционирования системы клеточного иммунитета.

Как известно, развитие Т-клеточного иммунодефицита чревато повышенной восприимчивостью организма животных к инфекционным

болезням, особенно вирусной этиологии.

Анализ изменений в гуморальной системе иммунитета показал, что у большинства РИД+ коров уровень содержания В-лимфоцитов был значительно выше, а иммуноглобулина G ниже, чем у серонегативных особей (таблица 4).

Таблица 4 - Уровень иммуноглобулинов Ми G в сыворотке крови РИД ± коров в до- и послеродовый период

№

п/ п

Группа коров

До родов

М, мг/см

После родов, день

30

До родов

в, мг/о^

После родов, день

30

РИД-

(п=9)

2,62±0,18

2,10±0,44

2,94±0,77

18,3±0,25*

15,5±0,27*

17,6±1,08

РИД+

2,58±0,43

2,10*0,30

3,02±0,12

16,21±0,48*

13,8±0,42*

16,2±0,84

Примечание: различия в показателях сравниваемых групп статистически достоверны * (р<0,05), ** (р<0,001)

Снижение показателей содержания Т-лимфоцитов, соотношения Тх и Тс, иммуноглобулина класса G у РИД+ коров как в до-, так и послеродовый периоды, можно рассматривать как неблагоприятный прогноз в отношении возможной активации инфекционного процесса. Результаты последующих гематологических исследований (таблица 5) подтвердили наше предположение. Выраженного роста числа лейкоцитов и лимфоцитов у клинически здоровых коров не наблюдалось.

Таблица 5 - Средние показатели лейкоцитов и лимфоцитов (тыс/мкл) у РИД± коров в до- и послеродовый период_

№ п/п

Группа коров

Показатели

До родов

Лейко циты

Лимфо циты

30

Лейко циты

Лимфо циты

После родов, день

60

Лейко циты

Лимфо циты

90

Лейко циты

Лимфо циты

РИД+

13,8± 0,26»

9,80± 0,48*»

14,52± 0,28»

10,74± 0,36»»

14,87± 0,45»»

11,22± 0,18»»

14,78± 0,26»»

11,10± 0,46»»

РИД-(п=9)

8,54± 0,39

5,81± 0,62

7,82± 0,47

5,42± 0,52

8,45± 0.28

5,93± 0,46

8,52± 0,37

5,5 8± 0,29

Примечание: различия в показателях сравниваемых групп статистически достоверны * (р<0,05), ** (р<0,001)

Таким образом, исходя из прослеженной динамики гематологических показателей, можно сделать заключение, что послеродовый период у коров является наиболее критическим в отношении активации инфекционного процесса при лейкозе крупного рогатого скота. В свою очередь, резкое снижение иммунного статуса у серонегативных коров оздоравливаемого от лейкоза стада, вполне может обусловить их повышенную чувствительность к инфекции ВЛКРС.

Получение и применение биологически активного препарата на основе пчелиной перги и янтарной кислоты для нормализации нарушенного иммунитета при лейкозе

При разработке такого препарата наше внимание привлекла технология получения апистимулина. Апистимулин представляет собой кислотный гидролизат пчелиной перги. По данным Новикова О.Б. (2003 г.) и Грибко СМ. (1998 г.) апистимулин обладает разносторонней биологической активностью. Опыт его применения свидетельствует о том, что он позволяет повысить сопротивляемость организма животных к инфекционным болезням вирусной этиологии.

Однако, вышеуказанный препарат, наряду с положительными качествами, не может в полной мере удовлетворить запросы ветеринарного здравоохранения. Прежде всего повышенная кислотность препарата делает возможным его применение методом per.os1. Применение препарата методом per. os' неизбежно связано с его большими расходами, трудностями соблюдения дозировок. Доступность сырья также имеет свои пределы. В этой связи практическую ветеринарию более устроил бы препарат для инъекций. Последнее возможно лишь при устранении побочного действия повышенной кислотности. В свою очередь, важное значение приобретает выбор кислоты для проведения кислотного гидролиза пчелиной перги. Решая этот вопрос, мы решили провести кислотный гидролиз с использованием янтарной кислоты. Сама по себе янтарная кислота представляет универсальный биогенный стимулятор, играющий важную роль в обмене веществ живой клетки от растений до человека

Таким образом, уникальные свойства янтарной кислоты и предопределили ее использование при проведении кислотного гидролиза пчелиной перги. Инактивацию повышенной кислотности целевого продукта провели 10% раствором NaOH, переведя янтарную кислоту в ее соль -сукцинат натрия. При этом выпадение соли в осадок не наблюдалось. Полученный конечный продукт имел рН=7,0, что не являлось препятствием для его парентерального применения. В качестве пролонгатора использовали гидроокись алюминия.

Результаты испытания янтарного апистимулина на коровах, неблагополучного по лейкозу стада в прогнозируемый период развития иммунодефицитного состояния

Объектом для испытания иммуномодулирующих свойств препарата служили РИД± коровы за 15-20 дней до отела. Количество животных в опытной и контрольной группах составило по 15 голов в каждой. Опытные группы коров были подвергнуты обработке янтарным гидролизатом перги в дозе 5,0 мл. Препарат вводили по 5 мл подкожно. Каких-либо осложнений на

введение препарата не отмечалось, за исключением небольших припухлостей, аналогичных, как и при введении других биопрепаратов в аналогичных дозах.

Таблица 6 - Влияние янтарного гидролизата пчелиной перги на

Группа коров Срок исследования, день

До родов за 30 дней После 1 эодов

9-10 29-30

1 2 3 4

РИД-

1. опытная 2. контрольная Т-лимфоциты, % (М±ш)

49,5±1,6 49,7±1,2 46,2±1,4** 42,1 ±1,5 47,5±1,3 46,3±1,6

опытная контрольная Т-хелперы

22,9±0,26 22,9±026 19,2±0,44* 17,6±0,27 21,4±0,35* 19,3±0,22

опытная контрольная Т-супрессоры

11,9±0,24 12,8±0,32 11,8±0,33* 13,7±0,15 11,7±0,25 12,6±0,48

опытная контрольная В-лимфоциты

22,9±0,62 22,7±0,38 22,0±0,24 22,4±0,16 23,7±0,48 23,5±0,16

РИД+

3. опытная 4. контрольная Т-лимфоииты, % (М±т)

48,2±1,4 48,4±1,3 44,3±1,3 41,2±1,6 45,8±1,4 42/7±1,2

опытная контрольная Т-хелперы

18,6±0,21 18,3 ±0,52 17,2±0,23 15,7±0,42 17,9±0,26 16,5±0,22

опытная контрольная Т-супрессоры

12,4±0,18 12,5±0,24 12,8±0,32 14,3±0,15 12,2±0,17 12,0±0,42

опытная контрольная В-лимфоциты

24,4±0,23 24,5±0,17 22,8±0,46 22,4±0,32 28,4±0,12 28,8±0,25

Примечание: различия в показателях опытной и контрольной групп достоверны *(р<0,01) **(р<0,05)

Исходя из отраженной в таблице 8 динамики показателей Т-лимфоцитов и их субпопуляций Тх и Тс следует, что применение янтарного гидролизата пчелиной перги позитивно отразилось на состоянии клеточной системы иммунитета. В частности, у коров обеих подопытных групп в ранний послеродовый период выраженного снижения количества Т-лимфоцитов и их субпопуляций не произошло. Напротив, у контрольных групп животных

изменения носили выраженный характер.

Так индекс соотношения Тх и Тс у опытных животных находился практически на нижней границе физиологической нормы (1,7), в то время как у контрольных животных второй группы он был на уровне 1,2 на 10 день и 1,51,6 на 30 день.

У РИД+ коров соотношение Тх и Тс в послеродовый период изменялось от 1,3 на 10 день до 1,5 на 30 день, соответственно у контрольных (РИД+) животных он составил 1,1 на 10 день и 1,4 на 30 день.

В отношении популяции В-лимфоцитов влияние янтарного гидролизата пчелиной перги было не столь выраженным, тем не менее, нивелирование показателя снижения количества В-клеток в послеродовый период у опытных животных третьей группы (РИД+) может свидетельствовать о мягком стимулирующем действии препарата и на гуморальную систему иммунитета.

Результаты гематологических исследований подопытных животных мы приводим в таблице 7.

Таблица 7 - Влияние янтарного гидролизата пчелиной перги на показатели лейкоцитов и лимфоцитов (тыс/мкл) у РИД+ коров в до- и

послеродовый периоды

Показатели

№ Груп-па До родов После родов, день

п/п коров 30 60 90

Лейко циты Лимфо циты Лейко циты Лимфо циты Лейко циты Лимфо циты Лейко циты Лимфо циты

1 Опытная 14,2± 0,21 10,2± 0,29 14,3± 0,25 10,5± 0,32 14,5± 0,29 10,9± 0,28 14,7± 0,33* 10,9± 0,52*

2 Контрольная 13,76± 0,47 9,84± 0,37 14,7± 0,32 11,2± 0,18 15,6± 0,35 11,6± 0,29 16,2± 0,12 11,7± 0,27

Примечание: * различия в показателях опытной и контрольной групп достоверны (р<0,01)

Данные гематологических исследований показали, что у 3 из 15 коров (РИД+) не отмечалось роста числа лейкоцитов и лимфоцитов, как при первом, так и последующих (с интервалом 30 дней) двух исследований. Напротив, у животных контрольной группы (8 особей) лейкоцитоз и лимфоцитоз имел выраженную тенденцию роста. Прирост числа лейкоцитов у них составил от 9 до 42%, а лимфоцитов от 12 до 37%.

Таким образом, применение янтарного гидролизата пчелиной перги не только оказало выраженное стимулирующее действие на Т- и В-системы иммунитета, но и замедлило темпы развития инфекционного процесса у РИД+ животных.

Получение формолянтарного спленолизата для нормализации нарушенного иммунитета у коров

Решая проблему повышения устойчивости животных к наиболее распространенным инфекциям, нами осуществлена разработка иммунотропного препарата с широким спектром антиинфекционного, иммуностимулирующего и антистрессового действия. В основу получения нашего препарата положена известная методика Филатова П.Ф. Однако, гидролиз биологически активных веществ из паренхиматозных органов, в частности селезенки, провели янтарной кислотой. Выбор в отношении использования тканей селезенки для получения иммунотропного препарата обусловливался, с одной стороны, практически неограниченной доступностью тканевого сырья, что само по себе очень важно, а с другой стороны, положительным опытом применения спленоферонов в ветеринарной практике. Спленоферон является активным интерферогеном и в этой связи обладает способностью подавлять репликацию широкого спектра вирусов, в том числе онковирусов. По данным Ивановского С.А и Мусиной Н.Ю. (1994 г.) спленоферон не дает побочных реакций, безвреден, и его можно использовать совместно с другими препаратами.

Полученный по нами разработанной методике препарат представляет собой биологически активную жидкость, очищенную от неэкстрагированной тканевой биомассы.

Опыты, проведенные на белых мышах, показали, что полученный янтарный гидролизат селезенки обеспечивал защиту животных при заражении заведомо смертельной дозой Е. coli и S. aureus на уровне 60-70%.

При добавлении в препарат формалина уровень защиты составлял не менее 70%. Как показали бактериологические исследования биоматериала от павших белых мышей, иммунизированных за 6 часов до заражения, выделенная исходная культура по вирулентности значительно уступала культуре, выделенной от павших интактных животных контрольной группы. Полученные нами результаты в известной степени согласовывались с результатами исследований Ласкавого В.Н. (1995 г., 1997 г.), показавшему, что парентеральное введение низких концентраций формалина обеспечивает снижение вирулентности возбудителей вирусного трансмиссивного гастроэнтерита и классической чумы свиней непосредственно в организме животных. В свою очередь, наши первоначальные наблюдения (1989 г., 1990 г.) показали, что подкожные инъекции 0,3-0,5% формалина реагирующему на туберкулин крупному рогатому скоту вызывало у них полное редуцирование повышенной чувствительности замедленного типа (ПЧЗТ). При этом, у инфицированных атипичными микобактериями животных, как правило, ПЧЗТ на введение туберкулина более не восстанавливалось, что указывало на прекращение вегетирования их в организме.

Испытание формолянтарного спленолизата на коровах неблагополучного по лейкозу стада в прогнозируемый период развития иммунодефицитного состояния

Объектом для испытания иммуномодулирующего препарата, как и в предыдущей серии опытов, являлись коровы за 25-30 дней до отела. Опытные и контрольные группы были сформированы из коров РИД± 3-4 лактации. Численность животных в каждой группе составила по 20 голов. Опытных коров из числа РИД± подвергли разовой иммунизации формолянтарным гидролизатом. Препарат вводили подкожно в дозе 5,0 мл. Как и в предыдущей, так и в этой серии опытов в задачу наших исследований входило изучение влияния препарата на иммунологические и гематологические показатели иммунизированных животных.

В ходе проведения иммунологических и гематологических исследований нами были получены следующие результаты, отраженные в таблицах 8 и 9.

Таблица 8 - Влияние формолянтарного спленолизата на динамику Т и В-лимфоцитов крови РИД± коров в послеродовый период_

Группа коров

Срок исследования, день

До родов за 30 дней

После родов

9-10

29-30

РИД!

опытная контрольная

Т-лимфоциты, % (М±т)

51,7±1,2 52,0±1,3

49,6±1,7 47,3±1,2

52,8±1,4* 49,1±1Л

опытная контрольная

23,2±0,38 23,2*0,33

Т-хелперы

22,3 ±0,2 8 18,2±0,19

24,7±0,42 21,0±0,13

опытная контрольная

12,3±0,26 13,1±0,17

Т-супрессоры

12,9±0,18* 14,5±0,27

12,5±0,26 12,4±0,32

опытная контрольная

23,6±0,18

23,2±0,43

В-лимфоциты

21,8±0,52

21,4±0,37

24,2±0,17

23,8±0,21

РИД+

опытная контрольная

Т-лимфоциты, % (М±т)

47,5±1,2 47,8±1,7

45,6±1,5* 39,4±1,2

47,6±1,4* 40,8±1,3

опытная контрольная

17,9±0,41 18,2±0,32

Т-хелперы

17,0±0,28* 15,2±0,30

18,3±0,26* 15,8±0,34

Т-супрессоры

опытная 12,6±0,12 12,8±0,18 11 ¿±0.15

контрольная 12,7±0,28 13,6±0,21 12,7±0,36

В-лимфоциты

опытная 26,8±0,43 25,6±0,22 26,0±0,23*

контрольная 27,6±0,18 27,0±0,41 28,4±0,18

Примечание: * различия в показателях опытной и контрольной групп достоверны 0X0.01)

Таблица 9 - Влияние янтарного спленолизата на показатели лейкоцитов и лимфоцитов (тыс/мкл) у РИД+ коров в до- и послеродовый периоды _____________________________

Показатели

№ Группа До родов После родов, день

п/п коров 30 60 90

Лейко циты Лимфо циты Лейко циты Лимфо циты Лейко циты Лимфо циты Лейко циты Лимфо циты

1 Опытная 14,7± 0,18 10,4± 0,23 14,0± 0,34 10,6± 0,18 15,2± 0,22 10,5± 0,12 15,7± 0,44* 10,7± 0,22*

2 Контроль ная 14,6± 0,43 10,3± 0,42 15,1± 0,22 11,7± 0,24 17,5± 0,26 11,6± 0,27 17,9± 0,39 12,2± 0,24

Примечание: * различия в показателях опытной и контрольной групп достоверны <р<0,01)

Как свидетельствуют результаты иммунологических исследований, применение данного иммуногена сопровождалось выраженной стимуляцией Т-системы клеточного иммунитета. На это указывает тот факт, что при контрольных исследованиях на 10 день после родов общее количество Т-лимфоцитов у коров из опытной группы (РИД-) составило 50,8± 1,7%, против 47,3±1,2 у особей из контрольной группы.

Прослеживая динамику содержания Т-лимфоцитов и их субпопуляций в более отдаленной после родов период (30 день) установили, что у серонегативных коров опытной группы общее содержание Т-клеток достигло уровня дородового показателя. При этом индекс соотношения Тх и Тс находился на уровне 2,1. Это свидетельствовало о полном восстановлении функциональной способности Т-системы клеточного иммунитета. В том же русле изменялись показатели содержания Т-лимфоцитов и их субпопуляций и у серопозитивных коров опытной группы с той лишь разницей, что на 30-й день после отела индекс соотношения Тх и Тс был на уровне 1,6, что несколько ниже физиологической нормы. У серопозитивных коров контрольной группы содержание Т-лимфоцитов на 30-й день после родов составило 42,7±1,3 против

44,8±1,7 до родов, а индекс соотношения Тх и Тс составил соответственно 1,4 и 1,3.

Анализируя динамику изменений общего количества лейкоцитов и лимфоцитов, следует отметить, что у серопозитивных коров опытной группы на 30-й день после родов их уровень соответствовал дородовым показателям. Лишь на 60-й и 90-й дни отмечена слабая тенденция роста числа лейкоцитов и лимфоцитов. Напротив, у серопозитивных коров контрольной группы уже на 30 день наблюдалась тенденция роста количества лейкоцитов и лимфоцитов. К периоду завершения исследований общее число лейкоцитов и лимфоцитов у серопозитивных животных контрольной группы превышало дородовый показатель на 12,3 и 11,8%.

Исходя их полученных результатов иммунологических исследований, можно сделать заключение о том, что применение янтарного спленолизата позволило в значительной мере предотвратить развитие Т-клеточного иммунодефицита у здоровых животных, которое отчетливо проявилось у коров контрольной группы на 90-й день после родов.

В свою очередь, стимулирующее действие янтарного спленолизата на Т-систему клеточного иммунитета у серопозитивных коров позволило существенно замедлить темпы развития лейко- и лимфоцитоза. Последнее свидетельствует о замедлении развития инфекционного процесса в целом.

Таким образом, результаты наших исследований свидетельствуют о том, что развитие Т-клеточного иммунодефицита в послеродовый период создает основу для «закладки» активности лейкозного процесса у инфицированных и потенциально инфицированных возбудителем ВЛКРС коров. В свою очередь, применение с превентивной целью новых иммунотропных препаратов позволяет профилактировать развитие послеродового иммунодефицита у здоровых коров, а у инфицированных существенно замедлить темпы развития инфекционного процесса.

Последнее может иметь положительное значение с позиции не только профилактики вероятного развития у инфицированных животных собственно лейкозного процесса, но и в вопросе более активного управления эпизоотическим процессом.

ВЫВОДЫ

1. Эпизоотия лейкоза крупного рогатого скота приняла широкое, но неравномерное распространение в животноводческих хозяйствах Курской области, превысив по числу эпизоотических очагов все остальные болезни вместе взятые.

2. Применяемая традиционная система оздоровительных мероприятий в условиях широкого распространения инфекции ВЛКРС в большинстве случаев не позволяет стабилизировать эпизоотическую обстановку.

3. Высокие показатели выявления серопозитивных в РИД животных, без подтверждения диагноза на лейкоз гематологическим и патоморфологическим методами свидетельствуют как о широте распространения инфекции ВЛКРС, так и о возможной циркуляции возбудителя с пониженной вирулентностью.

4. Метод систематических серологических исследований, изоляция серопозитивных и удаление из стад больных лейкозом животных затягивает оздоровление неблагополучных хозяйств на годы. При этом затраты на проводимые мероприятия не восполняются. Наиболее экономически оправданным и эффективным методом оздоровления является полный вывод из стад серопозитивных животных с последующим учащением серологических исследований оставшегося поголовья.

5. Оценка иммунной системы коров выявила низкий иммунный статус в послеродовый период, выраженный в достоверном снижении количественных показателей Т-лимфоцитов и их основных субпопуляций, изменение индекса соотношения Т-хелперов и Т-супрессоров в сторону последних. Причем, у серопозитивных коров иммунная недостаточность выражена в большей степени.

6. Развитие иммунной недостаточности у серопозитивных коров в послеродовый период вызывает активацию инфекционного процесса, выраженную в росте популяции лейкоцитов от 9 до 42% и лимфоидных клеток от 12 до 37%.

7. Разработаны два новых иммунотропных препарата с широким спектром действия: янтарный апистимулин и формолянтарный спленолизат.

8. Применение янтарного апистимулина и формолянтарного спленолизата коровами в прогнозируемые периоды развития иммунодефицитов обеспечивает повышение содержания в крови Т-лимфоцитов, нормализацию индекса соотношения Т-хелперов и Т-супрессоров, замедление процесса лейко-и лимфоцитоза у серопозитивных животных.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА

- Для повышения эффективности оздоровительных мероприятий при эпизоотии лейкоза крупного рогатого скота научно обоснована, разработана и реализуется в производстве целевая научно-производственная программа, предусматривающая активное воздействие на все звенья эпизоотического процесса. Программа одобрена законодательным собранием Курской области (2003 г.).

- В рамках выполнения программы разработаны, запатентованы и частично внедрены в производство новые иммунотропные препараты с широким спектром антиинфекционного и иммуномодулирующего действия,

»24055

позволяющие существенно снизить риск активации инфекционного процесса при лейкозе в прогнозируемые периоды развития иммунодефицитов у животных.

- Разработаны методические рекомендации по организации противоэпизоотических мероприятий при лейкозе крупного рогатого скота в хозяйствах различных форм собственности. Методические рекомендации рассмотрены и одобрены научно-техническим советом комитета агропромышленного комплекса Курской области (2003 г.).

- Разработан и выпущен плакат «Лейкоз крупного рогатого скота и меры борьбы с ним».

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Лебедев А.Ф. Характеристика иммунной системы коров с разным клиническим статусом / Лебедев А.Ф., Лебедева М.Г., Евглевский А.А., Воробьева Н.В.// Мат. НПК факультета ветеринарной медицины Курской ГСХА. 2003. С. 44-45.

2. Лебедев А.Ф. Эпизоотология лейкоза крупного рогатого скота в Курской области и необходимость ее решения программными методами / Лебедев А.Ф.// Сборник научн. трудов Курской ГСХА. 2003. С. 52-54.

3. Лебедев А.Ф. Лейкоз крупного рогатого скота: состояние, проблемы и перспективы развития исследований / Лебедев А.Ф., Евглевский А.А7/ Сборник научн. трудов Курской ГСХА. 2003. С. 54-56.

4. Лебедев А.Ф. Эпизоотическое состояние по инфекционным болезням и пути ее решения / Лебедев А.Ф., Горжеев В.Н., Евглевский А.А., Коваленко А.М., Стегний Б.Т.// Сборник научн. трудов Мин. Образования РФ Курский госуниверситет. Курск. 2004. С. 5-8.

5. Лебедев А.Ф. Экспериментальное изучение обезвреживающего действия янтарной кислоты на вируссодержащий материал / Лебедев А.Ф., Евглевский АЛЛ Мат. НПК факультета ветеринарной медицины Курской ГСХА. 2004. с. 31-32.

ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Способ получения препарата для повышения резистентности организма животных. Решение Роспатента о проведении экспертизы по существу от 3 марта 2004 г. по заявке на изобретение № 2003135681/15 (038295).

2. Способ получения препарата для повышения резистентности организма животных. Решение Роспатента о проведении экспертизы по существу от 6 сентября 2004 г. по заявке на изобретение № 2004116104/15 (017230).

Формат 60X80 1/16. Бумага для множительных аппаратов. Печать на копировальном аппарате КГСХА. Усл. печ. л. 1,0. Уч.-изд.л. 1,0 Тираж 100 экз.

Актуальность проблемы. В структуре инфекционной патологии крупного рогатого скота лейкоз прочно занимает ведущее место, обогнав все вместе взятые з;аразные болезни (Гулюкин М.И., 2002 г.).

В последнее десятилетие во многих регионах Российской Федерации распространение лейкоза приняло внушительные масштабы, серьезно угрожающие развитию молочного скотоводства. Не исключением в этом ряду является Курская область, испытывающая эпизоотический прессинг инфекции BJIKPC.

Сложность решения проблемы лейкбза диктуется рядом обстоятельств, среди которых наиболее значимыми являются: отсутствие полных данных о причинах и механизмах, вызывающих безудержную пролиферацию клеток лимфоидного ряда с нарушением их созревания. Для объяснения этого явления выдвинуто очень много теоретических предложений и гипотез, но окончательного научного решения пока не существует. В этом аспекте больше вопросов и нет достаточно убедительного ответа. В эпизоотологии лейкоза пока необъяснимы причины и механизмы активации инфекционного процесса, когда между инфицированием и возможным заболеванием существует большой или пожизненный временной период. К сожалению, в настоящее время у практической ветеринарии нет средств активной профилактики лейкоза, что не позволяет в должной мере управлять эпизоотическим процессом.

Несмотря на значительное число научных исследований по проблеме лейкозов, во многих отношениях эта патология пока остается загадочной и вряд ли радикально разрешимой в ближайшем десятилетии. В этой связи профилактика и борьба с лейкозом базировалась и базируется на основе строгого выполнения комплекса мер по охране благополучных стад от заноса инфекции BJIKPC, выявлении и удалении больных и инфицированных BJIKPC животных (Апалькин В.А., 1993; Бусол В.А., 1988; Гулюкин М.И., 2002; Джупина С.И., 2001; Каратаева Т.Д., 1995; Нахмансон В.М., 1995; Смирнов П.Н. с соавт., 1989; Симонян Г.А., 1997).

В последние годы значительно расширился объем научных исследований и получены новые данные по организации профилактических и противоэпизоотических мероприятий, позволяющие эффективно конструировать систему оздоровительных противолейкозных мероприятий в зависимости от степени поражения неблагополучного стада (Апалькин В.А., 1993; Бусол В.А. с соавт.,1999; Гулюкин М.И., 2001; Мельникова В.М., 2001; Смирнов П.Н., 1998; Симонян Г.А., 1997; Фогель JI.C., 2000). Однако, они еще далеки от совершенства и требуют научно-производственной доработки с учетом региональных особенностей эпизоотии лейкоза. Признание болезни факторной значительно расширяет возможность более активного управления эпизоотическим процессом при оздоровлении неблагополучных по лейкозу стад.

В этой связи, изучение эпизоотического процесса при лейкозе и на этой основе совершенствование системы оздоровительных мероприятий, с учетом региональных особенностей, является весьма актуальным.

Цель работы. Изучить особенности и характер эпизоотического процесса при лейкозе крупного рогатого скота в Курской области и на этой основе внести коррективы, обеспечивающие повышение эффективности комплекса противоэпизоотических и оздоровительных противолейкозных мероприятий.

На решение поставленной цели определены следующие задачи:

1. Изучить характер и особенности эпизоотического процесса при лейкозе крупного рогатого скота в Курской области и определить эффективность сложившейся системы оздоровительных противолейкозных мероприятий на основании чего научно обосновать современную методологию организации системы мер по оздоровлению неблагополучных по лейкозу хозяйств.

2. Научно обосновать, разработать и внедрить в производство региональную целевую программу борьбы с лейкозом крупного рогатого скота.

3. В рамках выполнения программы оздоровительных мероприятий провести разработку, экспериментальное и производственное испытание новых иммунотропных средств, повышающих иммунный статус животных в прогнозируемые периоды развития иммунодефицитов у коров и риске повышенной чувствительности к BJIKPC.

Научная новизна.

- В настоящей работе впервые в условиях Курской области проведен ретроспективный анализ эпизоотии лейкоза крупного рогатого скота и дана оценка эффективности проводимой системы оздоровительных мероприятий, научно обоснована и разработана региональная программа борьбы с лейкозом на 2004-2010 гг.;

- Теоретически обоснованы, разработаны, запатентованы и экспериментально апробированы в производстве новые средства иммунотропного действия, позволяющие эффективно проводить коррекцию иммунного статуса коров в прогнозируемые периоды развития иммунодефицитов, что обеспечивает повышение устойчивости их организма к инфекции BJIKPC.

Научная новизна работы подтверждается решением Роспатента Российской Федерации о проведении экспертизы по существу по двум заявкам на изобретение:

- «Способ получения препарата для повышения резистентности организма животных» (№ 2003135681/15 (038295) 2004 г.).

- «Способ получения препарата для повышения резистентности организма животных» (№ 2004116104/15 (017230) 2004 г.).

Практическая значимость. Научно обоснована, разработана и утверждена законодательным собранием региональная целевая научно-производственная программа оздоровления животноводства Курской области от лейкоза крупного рогатого скота.

В рамках выполнения научно-производственной программы оздоровления хозяйств Курской области от лейкоза:

- теоретически обоснованы, разработаны и апробированы в производстве новые средства с широким спектром иммунотропного и антиинфекционного действия, повышающие устойчивость организма животных к факторным болезням, в том числе и инфекции ВЛКРС.

- по материалам диссертации разработаны методические рекомендации «по организации противоэпизоотических мероприятий при лейкозе крупного рогатого скота (ВЛКРС) в хозяйствах различных форм собственности», одобренные на заседании научно-технического совета агропромышленного комитета Курской области.

Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены и одобрены на научно-техническом совете агропромышленного комитета Курской области (Курск 2003, 2004 гг.); на расширенном заседании научно-координационного центра ФГУП «Курская биофабрика» (2003 г.); на ученом совете Курского НИИ A1I11 (2004 г.); на научно-практических конференциях профессорско-преподавательского состава факультета ветеринарной медицины Курской ГСХА (2003, 2004 гг.); на производственных семинарах ветеринарных специалистов Курской области (2002, 2003, 2004 гг.).

Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 5 научных работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 133 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы,

5.0. ВЫВОДЫ

1. Эпизоотия лейкоза крупного рогатого скота приняла широкое, но неравномерное распространение в животноводческих хозяйствах Курской области, превысив по числу эпизоотических очагов все остальные болезни вместе взятые.

2. Применяемая традиционная система оздоровительных мероприятий в условиях широкого распространения инфекции ВЛКРС в большинстве случаев не позволяет стабилизировать эпизоотическую обстановку.

3. Высокие показатели выявления серопозитивных в РИД животных, без подтверждения диагноза на лейкоз гематологическим и патолого-морфологическим методами свидетельствуют как о широте распространения инфекции ВЛКРС, так и о возможной циркуляции возбудителя с пониженной вирулентностью.

4. Метод систематических серологических исследований, изоляция серопозитивных и удаление из стад больных лейкозом животных затягивает оздоровление неблагополучных хозяйств на годы. При этом затраты на проводимые мероприятия не восполняются. Наиболее экономически оправданным и эффективным методом оздоровления является полный вывод из стад серопозитивных животных с последующим учащением серологических исследований оставшегося поголовья.

5. Оценка иммунной системы коров выявила низкий иммунный статус в послеродовый период, выраженный в достоверном снижении количественных показателей Т-лимфоцитов и их основных субпопуляций, изменение индекса соотношения Т-хелперов и Т-супрессоров в сторону последних. Причем, у серопозитивных коров иммунная недостаточность выражена в большей степени.

6. Развитие иммунной недостаточности у серопозитивных коров в послеродовый период вызывает активацию инфекционного процесса, выраженную в росте популяции лейкоцитов от 9% до 42% и лимфоидных клеток от 12% до 37%.

7. Разработаны два новых иммунотропных препарата с широким спектром действия: янтарный апистимулин и формолянтарный спленолизат.

8. Применение янтарного апистимулина и формолянтарного спленолизата коровами в прогнозируемые периоды развития иммунодефицитов обеспечивает повышение содержания в крови Т-лимфоцитов, нормализацию индекса соотношения Т-хелперов и Т-супрессоров, замедление процесса лейко- и лимфоцитоза у серопозитивных животных.

Ill

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА

- Для повышения эффективности оздоровительных мероприятий при эпизоотии лейкоза крупного рогатого скота научно обоснована, разработана и реализуется в производстве целевая научно-производственная программа, предусматривающая активное воздействие на все звенья эпизоотического процесса. Программа одобрена законодательным собранием Курской области (2003 г.).

- В рамках выполнения программы разработаны, запатентованы и частично внедрены в производство новые иммунотропные препараты с широким спектром антиинфекционного и иммуномодулирующего действия, позволяющие существенно снизить риск активации инфекционного процесса при лейкозе в прогнозируемые периоды развития иммунодефицитов у животных.

- Разработаны методические рекомендации по организации противоэпизоотических мероприятий при лейкозе крупного рогатого скота в хозяйствах различных форм собственности. Методические рекомендации рассмотрены и одобрены научно-техническим советом комитета агропромышленного комплекса Курской области (2003 г.).

- Разработан и выпущен плакат «Лейкоз крупного рогатого скота и меры борьбы с ним».