Использование серологического теста РИД для выявления больных лейкозом животных

Бахметьева, Светлана Васильевна

Диссертации по ветеринарии → Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Использование серологического теста РИД для выявления больных лейкозом животных

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Бахметьева, Светлана Васильевна Благовещенск 2006 г.

Ученая степень: кандидата ветеринарных наук

ВАК РФ: 16.00.03

Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Использование серологического теста РИД для выявления больных лейкозом животных

На правах рукописи

Бахметьева Светлана Васильевна

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ СЕРОЛОГИЧЕСКОГО ТЕСТА РИД ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ БОЛЬНЫХ ЛЕЙКОЗОМ ЖИВОТНЫХ

16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией, иммунология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Благовещенск - 2006

Работа выполнена в Государственном учреждении Дальневосточном зональном научно-исследовательском ветеринарном институте

Научный руководитель:

доктор ветеринарных наук Гаврилова Галина Антоновна

Официальные оппоненты: - доктор ветеринарных наук, профессор

Салимов Рафаэль Маммедсапим оглы

- кандидат ветеринарных наук Копейкин Юрий Александрович

Ведущая организация - ФГОУ ВПО Приморская государственная

сельскохозяйственная академия (г. Уссурийск)

Защита состоится «19» мая 2006 г. в 14 часов на заседании диссертационного совета КМ 220.027.01 в Дальневосточном государственном аграрном университете (675005, Благовещенск, ул. Политехническая, 86)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Дальневосточного государственного аграрного университета (675005, Благовещенск, ул. Политехническая, 86)

Автореферат разослан

2006 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор ветеринарных наук, профессор

Мандро Н.М.

Мта

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В настоящее время среди инфекционных болезней сельскохозяйственных животных особого внимания заслуживает лейкоз крупного рогатого скота (Г.А. Симонян, 1997; П.Я. Гущин, 1999; Г.Ф. Коромыслов, 1999; B.JI. Тихонов, 1999; Ю.П. Смирнов, 2002; Г.А. Гаврилова, 2005; М.И. Гулюкин, 2005; А.М. Смирнов, 2005).

Открытие вируса лейкоза крупного рогатого скота (J. Miller et al., 1972), разработка методов его обнаружения позволили по-новому строить как диагностику, так и систему оздоровления стад крупного рогатого скота от лейкозов.

Известные на сегодняшний день методы прижизненной диагностики, основанные на детекции ВЛКРС при помощи РИД с гликопротеидным антигеном, различных модификаций ИФА и ПЦР, достаточно эффективны в борьбе с лейкозом. Об этом свидетельствуют многочисленные сообщения о положительных результатах, полученных в различных регионах РФ и за ее пределами (Н.И. Петров, 1997; JI.A. Иванова, 1999; А.А. Русинович, 1999, 2004; В Л. Тихонов и соавт., 1999; Т.В. Щекотурова и соавт., 1999; А. Горбунов и соавт., 2000; М.И. Гулюкин и соавт., 2000, 2001; А.Т. Татарчук и соавт., 2001; В.В. Храмцов, 2001; Н.Т. Джапаралиев, 2002; К. Klintevall, 1995; В. Kozaczynska, 1999 и др.).

Однако, появление в оздоровленных хозяйствах вновь инфицированных вирусом лейкоза особей ставит под сомнение полноту выявления больных лейкозом и вирусоносителей. Такие животные способствуют распространению инфекции, обуславливая непрерывность эпизоотического процесса и, как следствие, сохранение напряженной эпизоотической ситуации во многих регионах РФ (ПЛ. Смирнов и соавт., 1989; И.И. Русанов, 2002; МЛ. Гулюкин, 2005; И.М. Донник, 2005).

В связи с этим разработка и совершенствование методов и средств диагностики лейкоза по-прежнему остается важной задачей исследователей (Н.А. Мальцева, 2002; МЛ. Гулюкин и соавт., 2002; A.M. Смирнов, 2005 и др.). Особый научный и практический интерес представляет изучение диагностических возможностей серологического (РИД) метода исследования крупного рогатого скота на лейкоз для выявления заболевания животных на ранних стадиях развития инфекционного процесса.

Цель работы.

Изучить распространенность лейкоза крупного рогатого скота в Амурской области и выявить взаимосвязь титра антител к антигенам ВЛКРС при серологической (РИД) диагностике лейкоза крупного рогатого скота с гематологическими показателями инфицированных вирусом лейкоза животных.

рос национальна«

Основны* задачи исследований:

1. Изучить уровень инфицированности крупного рогатого скота вирусом лейкоза в Амурской области.

2. Выявить корреляционную зависимость титра антител к антигенам ВЛКРС при серологической (РИД) диагностике лейкоза крупного рогатого скота с гематологическими показателями инфицированных вирусом лейкоза животных.

3. Усовершенствовать методику использования серологического теста РИД для выявления больных лейкозом животных.

Научная новизна.

Впервые изучена распространенность лейкоза крупного рогатого скота в Амурской области, определен характер динамики проявления эпизоотического процесса, установлена зараженность ВЛКРС быков-производителей в зависимости от породного состава.

Выявлена прямая умеренная связь титра антител к антигенам вируса лейкоза крупного рогатого скота и количества лейкоцитов крови, а также прямая значительная связь титра антител к антигенам ВЛКРС и абсолютного количества лимфоцитов периферической крови по «лейкозному ключу».

Усовершенствована методика выявления больных лейкозом животных с использованием серологического теста РИД.

Практическая значимость работы.

Данные по распространенности лейкоза в стадах крупного рогатого скота сельскохозяйственных предприятий и индивидуальных подворьях граждан области использованы для разработки рекомендаций по проведению профилактических и оздоровительных противолейкозных мероприятий в Амурской области, которые нашли отражение в Комплексной программе «Экономическое и социальное развитие Амурской области на 2004 -2010 гг.».

Выявление в стаде серопозитивных животных с высокими (1:8 и выше) титрами антител к антигенам вируса лейкоза крупного рогатого скота может служить диагностическим и прогностическим признаком развития лейкозного и эпизоотического процессов.

Усовершенствованная методика диагностики лейкоза крупного рогатого скота с использованием РИД упрощает выявление больных животных, сокращает срок их нахождения в стаде, тем самым способствует снижению напряженности эпизоотической ситуации по лейкозу, дает возможность при однократном взятии для серологического в РИД исследования крови крупного рогатого скота на лейкоз повторного использования испытуемых положительно прореагировавших в РИД сывороток крови, проста в выполнении, не требует больших материальных затрат, дополнительных реакти-

bob и времени на проведение гемато- логических исследований, доступна любой ветеринарной лаборатории.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на Второй научной конференции с международным участием «Проблемы инфекционной патологии в регионах Сибири, Дальнего Востока и Крайнего Севера» (г. Новосибирск, 2002); на совместном заседании Бюро Отделений ветеринарной медицины и зоотехнии Россельхозакадемии «Опыт и стратегия борьбы с лейкозом крупного рогатого скота в племенных хозяйствах России» (г. Москва, 2002); на международной научно-практической конференции «Биологические ресурсы Российского Дальнего Востока» (г. Благовещенск, 2004); на 1-ой , IV-ой , V-ой региональных межвузовских научно-практических конференциях «Молодежь XXI века: шаг в будущее» (г. Благовещенск, 2002,2003, 2004); на ученых советах ДальЗНИВИ (2000 - 2005).

Публикации результатов исследований. По материалам исследований опубликовано 10 работ (из них 3 - в реферируемых журналах), в которых отражены основные положения и выводы по теме диссертации.

Основные положения, выносимые на защиту:

- результаты изучения распространенности лейкоза крупного рогатого скота в Амурской области;

- материалы по выявлению корреляционной зависимости серологических (РИД) и гематологических показателей при развитии лейкозного процесса;

- усовершенствованная методика выявления больных лейкозом животных.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 134 страницах компьтерного текста. Состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений, списка использованной литературы и приложения. Работа иллюстрирована 12 таблицами, одним рисунком. Список использованной литературы включает 260 источников, в т.ч. 44 - иностранных авторов.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Материалы и методы исследований

Работа выполнена в 2000 - 2005 гг. в лаборатории вирусологии ДальЗНИВИ, в хозяйствах Амурской области, на базе районных ветеринарных лабораторий в соответствии с заданиями тематических планов НИР института по государственным научно-техническим программам (№№ гос. per. 01.99.0010757; 01.2.00306833) и договорами с АПК Амур-

ской области (№ 10-99; № 10-01). Использовали эпизоотологический, серологический (РИД), гематологический методы исследований.

При изучении эпизоотологических аспектов лейкоза крупного рогатого скота использовали рекомендации И.А. Бакулова (1979), В.М. На-хмансона и соавт.(1981), ретроспективные и экспериментальные приемы и способы исследований (В.А. Бусол, 1982). Использованы данные ветеринарной отчетности, материалы областной и районных ветеринарных лабораторий, результаты собственных исследований.

Исследования проводили согласно методическим указаниям по диагностике лейкоза крупного рогатого скота (М., 2000). Для серологической диагностики использовали реакцию иммунодиффузии (РИД) в агаровом геле согласно наставлению (1987). Использовали наборы Курской биофабрики. При обнаружении антител к BJIKPC серологические исследования проводили в титрах до предельного разведения, начиная с разведения 1:2. Исследовано 2853 пробы крови крупного рогатого скота, в том числе от коров - 1599, телок разного возраста - 761, быков - 493. Проверка усовершенствованной методики проведена на поголовье 1583 голов.

Для гематологических исследований использовали стабилизированную 10 %-ным раствором «Трилон Б» кровь. Количество лейкоцитов определяли в камере Горяева, лейкоцитарную формулу выводили в мазках крови, окрашенных по Паппенгейму. Показатели абсолютного количества лимфоцитов оценивали по "лейкозному ключу". Микроскопирование проводили под иммерсией с помощью бинокулярного микроскопа «Биолан» (увеличение х900).

Для изучения инфицированности ВЛКРС быков-производителей работа проведена в 73 хозяйствах различных форм собственности 9 районов Приамурья, представленных колхозами, ООО, ТОО, СХА, агрофирмами, СП, ЗАО, СПК, КФХ, ОПХ, учхозом, частным сектором и подсобным хозяйством, РИД и гематологически исследовано 188 имеющих статус племенных быков-производителей четырех пород. При обнаружении антител к вирусу лейкоза серологические исследования проводили в титрах до предельного разведения.

Исследования по выявлению взаимосвязи титра антител к антигенам ВЛКРС с гематологическими показателями инфицированных вирусом лейкоза животных выполнены в базовом хозяйстве - СХА «Согласие» Ивановского района Амурской области. В опыте было 174 телочки, которых в двухмесячном возрасте метили жидким азотом. Содержание и кормление групповое. Наблюдения, серологические (РИД), а по достижении двухлетнего возраста в том числе и гематологические исследования опытных животных проводили до 39-месячного возраста (срок наблюдения).

При обнаружении антител к ВЛКРС отбирали сыворотки крови, положительно прореагировавшие в РИД и проводили их разведение в 2, 4, 8, 16 и т. д. раз до предельного разведения, при котором обнаруживались ан-

титела к антигенам BJIKPC. Проведено 12803 исследования. Для разведения испытуемой положительной в РИД нативной сыворотки крови дополнительно к перечисленному в разделе 2.1.4. «Методических указаний по диагностике лейкоза крупного рогатого скота» (2000) оборудованию требуются стандартные планшеты для серологических реакций.

Исследование положительно реагирующих сывороток крови в разведениях проводили по той же методике, что и для нативной сыворотки. Отличием являлось то, что все 4 периферические лунки одной фигуры в чашке Петри заполняли разведенной в 2, 4, 8, 16 раз испытуемой сывороткой > крови одного животного. При оценке реакции учитывали максимальное

разведение, при котором образуется специфическая линия преципитации, которая соединяется с полосой преципитации контрольной сыворотки, образуя непрерывную линию.

При достижении опытными животными двухлетнего возраста проводили гематологические исследования.

Для изучения неспецифических защитных механизмов и специфического иммунного ответа у животных, находящихся на разных стадиях инфекционного процесса лейкоза, исследовали сыворотку от 27 коров. Определение общего белка сыворотки крови проводили биуретовой реакцией, белковых фракций сыворотки крови - турбидиметрически, фагоцитарной активности нейтрофилов (ФА), фагоцитарного индекса (ФИ), фагоцитарного числа (ФЧ) по Емельяненко (1987), лизоцимной активности (JIA) сыворотки крови по Дорофейчику (1968), циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) методом преципитации в 3,5%- ном растворе полиэтиленглико-ля. Определяли титр нормальных антител (THAT), элиминирующую способность крови (ЭСК). Исследования проведены в трехкратной повторно-сти. Выполнено 340 анализов.

Статистическая обработка проведена по И.А. Ойвину (I960). Полученные данные обработаны с помощью методов альтернативного варьирования и вариационной статистики. Среднее арифметическое (М), ошибка средней (т), показатель достоверности (t), коэффициент корреляции (г) ' расчитывались по общепринятым формулам (JI.C. Каминский, 1964; И.Т.

Шевченко и соавт., 1970).

2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1 Распространенность лейкоза крупного рогатого скота в Амурской области

Анализ материалов ветеринарной статистической отчетности, научных публикаций прошлых лет показал, что в Амурской области заболевание крупного рогатого скота лейкозом впервые зарегистрировано в 1961 г. в совхозе «Егорьевский» Благовещенского района, где выращивали сим-ментализированный скот. В 80 - 90-е гг. лейкоз крупного рогатого скота проявлялся серологически (РИД) с тенденцией к распространению.

В 90-е гг. резкое уменьшение численности молочного скота послужило причиной создания отрасли мясного скотоводства за счет завоза чистопородного скота и проведения промышленного скрещивания маточного поголовья симментальской и черно-пестрой пород с быками мясных пород. Отдельные случаи обнаружения лейкоза у крупного рогатого скота не принимались во внимание. Серологические (РИД) исследования на лейкоз до 2000 г. проводились в объеме 10 % поголовья. Невысокий процент выявленного серопозитивного скота приводил к тому, что его, как правило, выводили из стада. Считалось, что на этом мероприятия по борьбе с лейкозом были выполнены.

Распространению лейкозов крупного рогатого скота в области характерны приуроченность хозяйств к урбанизированным районам южной зоны и увеличение количества животных, генетически предрасположенных к лейкозу, в частности, черно-пестрой породы, количество которой и ее помесей в эти годы ежегодно увеличивалось.

С 2000 г. в области увеличился объем серологических (РИД) исследований крупного рогатого скота на лейкоз: за 2000 - 2003 гг. он в среднем составил 61 %, в том числе коров 39,7 % в 2000 г. с увеличением до 52,9 % в 2003 г. (табл. 1).

Таблица 1 - Охват поголовья крупного рогатого скота серологическими _(РИД) исследованиями на лейкоз в Амурской области_

Год Исследовано в РИД, %

всего в т.ч. коров

2000 64,3 46,2

2001 46.8 19,4

2002 67,6 40,4

2003 64,4 52,9

Инфицированность крупного рогатого скота вирусом лейкоза составила в среднем 10,0 ± 0,76 % (Р<0,001) с ростом этого показателя с 8 % в 2000 г. до 11,7 % в 2003 г. Динамике эпизоотического процесса характерно ежегодное стабильное увеличение серопозитивности животных в среднем на 1,2 %. Заболеваемость крупного рогатого скота лейкозом составила в среднем за анализируемый период 0,41 ± 0,08% (Р<0,05), при этом следует отметить ее рост в 3,5 раза с 0,17% в 2000 г. до 0,59% в 2003 г. (табл. 2).

Таблица 2 - Показатели интенсивности проявления лейкозного процесса крупного рогатого скота в Амурской области в динамике за 4 года, %

Показатели Год Средний показатель Р<

2000 2001 2002 2003

Заболеваемость 0,17 0,41 0,48 0,59 0,41 ± 0,08 0,05

Преваленткость 8,0 10,4 11,7 10,0 ± 0,76 0,001

В хозяйствах разных форм собственности и личных подворьях граждан четырех районов (Благовещенского, Ивановского, Константинов-ского, Тамбовского) южной зоны Приамурья с наиболее развитым животноводством лейкозная инфекция регистрируется практически во всех гуртах крупного рогатого скота общественного и частного секторов. Зарегистрировано 106 неблагополучных пунктов, из них с пораженностью до 10 % -70, до 30 % - 25, свыше 30 % - 11 пунктов. Количество вирусоносителей колеблется от 0,4 до 66,6 %. Охват поголовья серологическими (РИД) исследованиями составил в среднем 42,1 % с колебаниями от 1,5 до 100 %. Таким образом, за период 2000 - 2003 гг. в области отмечается рост инфицированное™ крупного рогатого скота ВЛКРС и его заболеваемости лейкозом. Показатель инфицированности скота ВЛКРС в целом по области к 2004 году перешагнул 10 %-ный барьер и составил 11,7%. Районов, где крупный рогатый скот свободен от ВЛКРС-инфекции, в Амурской области нет.

Из представленного материала следует, что в Амурской области длительное время имеется постоянный источник ВЛКРС-инфекции.

В связи с тем, что в хозяйствах Амурской области просматривается тенденция распространения лейкозной инфекции и увеличения заболеваемости животных лейкозом, следовательно, существуют пути и механизм передачи вируса, который обеспечивает непрерывность и развитие эпизо-

этического процесса. К такому механизму передачи ВЛКРС мы предположительно отнесли быков-производителей, использование которых стали практиковать в Амурской области в 90-е годы для осеменения коров и телок наряду с искусственным осеменением.

2.2.1 Исследование на лейкоз быков-производителей

В 73 хозяйствах 9 районов области исследовано 188 имеющих статус племенных быков-производителей четырех пород. Инфицированность быков-производителей вирусом лейкоза в хозяйствах обследованных районов колеблется в пределах 6,25 - 56,3% (табл. 3).

Таблица 3 - Результаты серологического исследования быков-производителей на лейкоз по районам Амурской области

Район Обследовано Исследовано РИД(+), Инфициро-

хозяйств быков, гол. гол. ванность, %

Серышевский 7 16 9 56,3

Ивановский 7 21 11 52,4

Тамбовский 11 41 15 36,6

Белого рский 10 22 7 31,8

Ромненский 4 10 3 30,0

Константиновский 13 21 5 23,8

Октябрьский И 31 7 22,6

Свободненский « 10 1 10,0

Благовещенский 4 16 1 6,25

Всего 73 188 59

Из 73 хозяйств инфицированных ВЛКРС быков-производителей выявили в 37 (50,7%). Из 59 серопозитивных в РИД быков-производителей у трех обнаружены морфологические изменения крови, свойственные больным лейкозом животным по «лейкозкому ключу».

Вирусом лейкоза крупного рогатого скота наиболее инфицированы быки-производители черно-пестрой породы (48,9%), наименее - симментальской (23,8%) (табл. 4).

Быки-производители, используемые в хозяйствах Амурской области для вольной случки коров и телок, являются источником ВЛКРС-инфекции, способствуют ее распространению.

Учитывая растущий характер динамики показателей, есть все основания опасаться дальнейшего роста инфицированности и заболеваемости животных лейкозом в Амурской области.

Таблица 4 - Инфицированность быков-производителей в зависимости от породы

Район Порода

черно-пестрая красно-пестрая герефорд-ская симментальская

Тамбовский 19(10) 11(2) 10(3) 1(0)

Константине вский 6(3) 9(2) 4(0) 2(0)

Ивановский 7(4) нет 12(6) 2(1)

Белого рский 4(3) 4(2) 10(2) 4(0)

Октябрьский 10(3) нет 12(1) 9(3)

Серышевский нет 2(1) 13(8) 1(0)

Свободненский нет КО) 8(1) 1(0)

Ромненский 1(0) нет 8(2) 1(1)

Благовещенский породный состав не учитывался

Всего 47(23) 27(7) 77(23) 21 (5)

Примечание: в скобках указано количество инфицированных ВЛКРС голов из числа исследованных

2.3 Экспериментальные исследования в производственных условиях по изучению титра антител к ВЛКРС у крупного рогатого скота и их взаимосвязи с гематологическими показателями

Цель исследования - изучить динамику титра антител к антигенам вируса лейкоза крупного рогатого скота в возрастном аспекте и их возможную корреляцию с развитием инфекционного процесса у спонтанно зараженных ВЛКРС животных, связав их в последующем в единый патогенетический процесс.

Исследования выполнены в базовом хозяйстве СХА «Согласие» Ивановского района Амурской области. При первичном обследовании 330 голов дойного стада на лейкоз реакцией иммунодиффузии антитела к ВЛКРС обнаружены у 46,6% коров. Сформировали опытную группу из 174 телочек по мере отела как серопозитивных так и серонегативных коров. Наблюдения и серологические исследования проводили на одних и тех же животных от рождения до 39-месячного возраста (срок наблюдения). Использовали реакцию иммунодиффузии в агаровом геле согласно наставлению (1987). Применяли наборы Курской биофабрики. При обнаружении антител к вирусу лейкоза исследования в РИД проводили до предельного разведения, при котором выявлялись антитела к ВЛКРС (табл. 5).

Таблица 5 - Динамика титров антител к ВЛКРС в крови молодняка крупного рогатого скота

Возраст животных Титр антител

М± т

1-26 ди 1 .4,0 ± 1,30

2,5-5,5 мес 1 3,0 ±0,59

13 мес 1 • 5,8 ±0,80

18-19 мес. 1 : 5,5 ± 3,57

22 мес. 1 :6,6 ±2,29

26 мес 1 . 9,7 ± 1,37

30 мес 1 -7,5 ±0,91

36 мес 1 :9,0 ± 1,66

39 мес. 1 : 13,7 ±3,15

Изучение титра антител к ВЛКРС в возрастной динамике у крупного рогатого скота показало достоверное их нарастание. У опытных животных в 39-месячном возрасте титр антител к антигенам ВЛКРС составил 1:13,7 ± 3,15 (Р<0,001). Это в 3,42 превышает этот показатель у этих же животных, когда они находились в 1 - 26-дневном возрасте (1: 4 ± 1,30).

При достижении опытными телками двухлетнего и трехлетнего возраста одновременно с серологическими (РИД) были проведены гематологические исследования (табл. 6).

Таблица 6 - Гематологические показатели у крупного рогатого скота в возрастной динамике

Показатели 2 года 3 года

РИД(+) (п=43) РИД(-) (п=36) РИДЫ (п=36) РИД(-) (п=34)

Лейкоциты, Ю'/л 13,97±3,75 7,98±0,48 13,61±1,29 7,74±0,69

Абсолютное количество лимфоцитов, 109/л И,00±3,55 5,70±0,11 12,00±1,31 5,57±0,49

Содержание лейкоцитов и абсолютного количества лимфоцитов у инфицированных ВЛКРС животных в двух- и трехлетнем возрасте достоверно увеличено по сравнению с их количеством у РИД-отрицательных. У РИД-положительных животных эти показатели практически не отличаются

в абсолютных величинах, но в относительном соотношении у животных в трехлетнем возрасте лимфоцитов в 1,1 раза больше, чем в двухлетнем.

Изучением возможной взаимосвязи титра антител с гематологическими показателями (табл. 7) установлено, что при таком высоком титре антител (1:13 ± 3,15) количество лейкоцитов и абсолютного числа лимфоцитов в единице объема крови по «лейкозному ключу» соответствуют показателям гематологически больным животных. При выявлении зависимости между этими биологическими явлениями (титр антител - лейкоцитоз и титр антител - абсолютный лимфоцитоз) отмечается умеренная связь титра антител к вирусу лейкоза и количеством лейкоцитов крови (Р < 0,05) и прямая значительная связь титра антител к вирусу лейкоза с абсолютным количеством лимфоцитов крови (Р < 0,01).

Таблица 7 - Корреляционная зависимость между уровнем антител к ВЛКРС и содержанием лейкоцитов и лимфоцитов в крови животных

Титр антител Количество Г| Количество Ъ

лейкоцитов, лимфоцитов,

тыс/мкл тыс/мкл

1:13,7 ±3,15 13,61 ± 1,29 0,46 ±0,17 12,0 ±1,31 0,50 ±0,17

Примечание: Г) - коэффициент корреляции между уровнем антител и содержанием лейкоцитов; г2 - коэффициент корреляции между уровнем антител и содержанием лимфоцитов

На следующем этапе исследований из возможного числа опытных животных 2 - 4-летнего возраста подобрали серопозитивных телок и молодых коров в количестве 27 голов и такого же возраста 8 серонегативных животных. Сыворотку крови серопозитивных животных исследовали в разведениях, одновременно провели гематологические исследования. Полученные данные сравнили с показателями "лейкозного ключа" для крупного рогатого скота 2 - 4-легнего возраста (табл. 8).

При выявлении специфических преципитирующих антител к антигенам вируса лейкоза в разведении 1 : 8 - 1 : 64 достоверно увеличивается количество лейхоцитов и абсолютное количество лимфоцитов до показателей, свойственных больным лейкозом животных по «лейкозному ключу». В нативной сыворотке и в разведениях до 1 : 4 гематологические показатели спонтанно зараженных ВЛКРС животных соответствуют по «лейкозному ключу» показателям здоровых животных.

Таблица 8 - Гематологические показатели крови крупного рогатого скота 2 - 4-летнего возраста, серопозитивного и сероиегативного в РИД к ВЛКРС

Г р У Огноше-ние животных к ВЛКРС■ Количество лейкоцитов, Абсолютное количество лимфоци- Больные лей-козом животные по «лейкоз-ному ключу» Здоровые животные по «лейкдоному ключу»

п п а РИД тыс/мкл тов, тыс/мкл кол-во лейкоцитов, тыс/мкл абсолютное кол-во лимфоцитов, тыс/мкл кол-во лейкоцитов тыс/мкл абсолютно* кол-во лимфоцита тыс/мкл

1. РИД(-) (п = 8) 7,31*0,46 5,46 ± 0,35 до 11,0 до 7,7

2 РИД(+)

- натив-на*,12,14 (п = 10) -втитрах 1 8-1:64 (п= 17) 8,95 ± 0,92 17,1 ± 1,44 Р<0,001 7,28 ± 0,62 15,53 ± 1,53 Р0.001 >11,0 >10,0

Примечание. РИД (-) - животные, не зараженные ВЛКРС;

РИД (+) - животные, зараженные ВЛКРС; Р - (уровень доверительной вероятности) определяли в группе РИД(+) животных

С помощью корреляционного анализа определили связь титра антител к антигенам вируса лейкоза крупного рогатого скота с гематологическими показателями опытных животных. Для получения более точных показателей натуральные числа титра антител ввиду их большого разброса (1 : 2 - 1 : 64) были прологарифмированы и обработаны математически, после чего среднее арифметическое логарифма титра антител переводили в натуральные числа (табл. 9).

У зараженных вирусом лейкоза животных, сыворотка крови которых дает положительную РИД в разведении 1 : 8 и выше, установлена прямая умеренная связь титра антител с количеством лейкоцитов крови (Р < 0,05) и прямая значительная связь титра антител с абсолютным количеством лимфоцитов крови (Р < 0,001).

Таблица 9 - Корреляционная связь между уровнем антител к ВЛКРС и содержанием лейкоцитов и абсолютного количества лимфоцитов в крови крупного рогатого скота, спонтанно инфицированного вирусом лейкоза

Титр антител кВЛКРС в РИД Количество лейкоцитов, тыс/мкл Г1 Абсолютное количество лимфоцитов, тыс/мкл Ъ

1:7,07±1,25 14,44±1,41 0,45±0,17 12,47±1,25 0,61 ±0,15

Примечание, п - коэффициент корреляции между уровнем антител и количеством лейкоцитов; т2~ коэффициент корреляции между уровнем антител и абсолютным количеством лимфоцитов

Результаты наших исследований показывают, что развитие инфекционного процесса при лейкозе крупного рогатого скота сопровождается увеличением титра антител к ВЛКРС. Отмечена прямая корреляция между титром антител к вирусу лейкоза и гематологическими показателями, свойственными больным по «лейкозному ключу» животным.

2.4 Показатели естественной резистентности коров, инфицированных ВЛКРС и больных лейкозом

Цель опыта заключается в изучении неспецифических защитных механизмов и специфического иммунного ответа у животных, находящихся на разных стадиях инфекционного процесса при лейкозе.

Дня исследования отобрали 27 коров, которые они были исследованы на лейкоз клинически, серологически (РИД) и гематологически. РИД-положительные сыворотки крови исследовали в разведениях. Подсчитывали лейкоциты, выводили лейкоцитарную формулу, показатели абсолютного количества лимфоцитов оценивали по "лейкозному ключу".

У коров, прореагировавших в цельной сыворотке и в разведении 1:2 - 1:4, показатели крови находятся в пределах физиологической нормы. У коров, сыворотка крови которых реагирует при разведении 1:8, отмечается лейкоцитоз (24,00 ± 2,62 • 10 9/л), относительный (88,70 ± 1,30%) и абсолютный (21,11 ± 1,19 • 10 9/л) лимфоцитоз. Показатели достоверны (Р<0,001).

Использовали некоторые тесты, с помощью которых возможно оценить естественную резистентность инфицированного и больного лейкозом крупного рогатого скота.

Установлено достоверное (Р<0,001) снижение титра нормальных антител до 1 : 39,80 ± 2,20 у животных с высоким титром антител к BJIKPC. Титр нормальных антител серонегативных и серопозитив-ных животных, татр антител к антигенам BJIKPC которых не превышал 1 : 4, составил соответственно 1 : 50,85 ± 1,17 и 1 : 48,63 ± 1,23. Следовательно, THAT сыворотки крови у коров, реагирующих в РИД при ее разведении в 8 раз, ниже в 1,27 и 1,22 раза по сравнению с серопонегативными и реагирующими в нативной сыворотке и при ее разведении в 2 - 4 раза соответственно.

У животных, прореагировавших в РИД в титре 1 : 8, наблюдается также достоверное (Р<0,001) снижение лизоцимной активности сыворотки крови до 6,00 ± 3,22%. В группе свободных от вируса лейкоза коров и инфицированных BJIKPC, реагирующих в нативной сыворотке и в титрах 1 :2 - 1:4, показатель лизоцимной активности был выше в 2,3 - 2,6 раза и составил соответственно 14,01 ± 1,28 и 15,63 ± 2,66%.

Выявлено достоверное (Р<0,001) увеличение элиминирующей способности крови до 32,18 ±0,13 тыс.мкб.тел, у коров, реагирующих в титре 1:8. У РИД (-) и РИД (+) животных, реагирующих в нативной сыворотке и в титрах 1 : 2 - 1 : 4, эти показатели составили соответственно 8,13 ± 1,08 и 8,39 ± 1,30 тыс.мкб. тел. Увеличение элиминирующей способности сыворотки крови инфицированных вирусом лейкоза животных с высокими титрами антител к антигенам BJIKPC свидетельствует о высокой функциональной нагрузке на макрофаги.

Таким образом, у серопозитивных в отношении BJIKPC животных, сыворотка крови которых реагирует в РИД при ев разведении в 8 раз и выше, повреждается функция естественной защиты, о чем свидетельствуют факты достоверного снижения лизоцимной активности сыворотки крови (Р < 0,001), элиминирующей способности крови (Р < 0,001), титра нормальных антител (Р < 0,001).

2.5 Проверка метода выявления больных лейкозом животных

Результаты экспериментальных исследований крупного рогатого скота на лейкоз проверены на базе ОПХ ВНИИ сои, колхоза «Луч», СХА «Согласие», КФХ «Зенит» и «Баскиаз» на поголовье 1583 голов.

Результаты проверки усовершенствованной методики диагностики лейкоза крупного рогатого скота с использованием РИД на поголовье коров первого отделения в одном из хозяйств области приведены в таблицею.

В исследуемом стаде из 297 голов выявлено инфицированных BJIKPC 85 коров (28,6 %). Серопозитивных животных по показателям титра антител к антигенам вируса лейкоза разделили на 2 подгруппы. В первую включили 67 голов, которые реагировали в РИД с нативной сыворот-

кой и при еб разведении в 2 - 4 раза, во вторую - 18 голов, которые реагировали в РИД при разведении сыворотки крови в 8 -16 раз.

Таблица 10 - Гематологические показатели крови крупного рогатого скота 3 - 6-летнего возраста, серопозитивного и серонегативного в РИД по отношению к ВЛКРС

г Отноше-ние Количест- Абсолют- Больные лейкозом Здоровые жи-

р животных к во лейко- ное коли- животные по «лейкоз- вотные по «лей-

У ВЛКРСв цитов, чество ному ключу» козному ключу»

п РИД тыс/мкл лимфоци- кол-во абсолют- кол-во абсолютно«

п тов, лейкоци- ное кол-во лейкоци- кол-во

а тыс/мкл тов, лимфоци- тов лимфоцито

тыс/мкл тов, тыс/мкл тыс/мкл

тыс/мкл

1 РИД о 7,85 ±0,26 4,92 ± 0,43 до 11,0 ДО 7,7

(п =212)

2 РИД(+)

■ нагивная, 8,10 ± 0,45 4,91 ± 0,40

1-2, 1-4

(п*67)

- в титрах 18

- 1.16 13,50 ± 1,67 11,31 ±2,53 >11,0 >10,0

(п = 18)

Примечание. РИД (-) - животные, не зараженные ВЛКРС; РИД (+) - животные, зараженные ВЛКРС;

У 67 животных первой подгруппы, прореагировавших в нативной сыворотке и при её разведении в 2 - 4 раза, выявлено нормальное количество лейкоцитов (8,10 ± 0,45) и нормальное абсолютное количество лимфоцитов в 1 мкл периферической крови (4,91 ± 0,40).

У 18 животных второй подгруппы, сыворотка крови которых прореагировала в РИД при еб разведении в 8 - 16 раз, выявлен лейкоцитоз (13,50 ± 1,67 тыс/ мкл), абсолютный лимфоцитов (11,31 ± 2,53 тысУмкл), относительное содержание лимфоцитов составляет 83,8%, то есть, в данном случае гематологические показатели (количество лейкоцитов, относительное содержание лимфоцитов, абсолютное количество лимфоцитов) по «лейкозному ключу» свойственны показателям больных лейкозом животных.

Таким образом, нами в условиях хозяйства подтверждено, что у животных, сыворотка крови которых реагирует при исследовании в РИД на лейкоз при её разведении в 8 и более раз, происходит развитие инфек-

ционного процесса и их можно относить к больным лейкозом. Совпадение высоких титров антител к антигенам ВЛКРС при серологической (РИД) диагностике лейкоза с гематологическими показателями серо-позитивных животных, -выходящими за пределы нормы, является прямым подтверждением развивающейся в организме животных лейкозной патологии.

ВЫВОДЫ

1. В Амурской области Дальневосточного федерального округа отдельные случаи заболевания крупного рогатого скота лейкозом отмечены с 60-х годов прошлого столетия. В настоящее время районов, свободных от лейкозной инфекции, в области нет. Уровень инфицированности крупного рогатого скота ВЛКРС к 2004 году составил 11,7%.

Уровень напряженности эпизоотического процесса лейкоза крупного рогатого скота в Амурской области определяется как стабильно растущий. Динамике эпизоотического процесса лейкоза крупного рогатого скота характерно ежегодное стабильное увеличение серопозитивности животных на 1,2% и заболеваемости - с 0,17% в 2000 году до 0,59% в 2003 году.

2. У инфицированных ВЛКРС животных в возрастной динамике установлена прямая корреляционная связь титра антител к антигенам ВЛКРС с гематологическими показателями, свойственными больным лейкозом животным.

Достоверное совпадение высоких (1 : 8 и выше) титров антител к антигенам ВЛКРС с выходящими за пределы нормы показателями относительного и абсолютного количества лимфоцитов является прямым подтверждением развивающейся в организме животных лейкозной патологии. Животных, сыворотка крови которых реагирует в РИД при исследовании на лейкоз при ее разведении в 8 и более раз, следует относить к больным лейкозом.

3. Установлена зависимость показателей естественной резистентности от специфического иммунного ответа животных, реагирующих в РИД в нативной сыворотке крови и при её разведениях. Эта зависимость выражается в достоверном (Р<0,001) повреждении функции естественной защиты у инфицированных ВЛКРС животных, сыворотка крови которых реагирует в титре 1:8 и выше.

4. Научно-обоснованная усовершенствованная методика выявления больных лейкозом животных с использованием РИД дает возможность при однократном взятии для серологического исследования крови на лейкоз повторного использования испытуемых сывороток крови.

4.1. На первом этапе исследований с помощью РИД выявляют инфицированных ВЛКРС животных (на это уходит 4-6 дней).

4.2. После этого на втором этапе дополнительно проводят серологические исследования испытуемой положительной в РИД сыворотки крови в разведениях. При обнаружении в ней специфических преципи-тирующих антител к антигенам вируса лейкоза в титре 1 : 8 и выше животное оценивают как больное лейкозом (на это требуется еще 2-4 дня).

5. Предлагаемая методика ускоряет выявление больных лейкозом животных, сокращает срок нахождения их в стаде, тем самым способствует снижению напряженности эпизоотической ситуации по лейкозу, является простой и доступной для выполнения в любой ветеринарной лаборатории.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Рекомендации по проведению профилактических и оздоровительных противолейкозных мероприятий в Амурской области включены в Комплексную программу «Экономическое и социальное развитие Амурской области на 2004 - 2010 гг.».

Усовершенствованную научно-обоснованную методику выявления больного лейкозом крупного рогатого скота с использованием РИД необходимо рекомендовать для внедрения в лабораторную практику.

Основные материалы диссертации опубликованы в работах:

1. Бахметьева, C.B. Распространение лейкозной инфекции у быков-производителей / C.B. Бахметьева ; науч. рук. Ю.А. Макаров // Тезисы докладов 2-ой межвузовской научно-практической конференции «Молодежь ХХГ века: шаг в будущее» / [АГМА]. - Благовещенск, 2001. -Вып. 2.-С. 32-33.

2. Бахметьева, C.B. Оценка показателей естественной резистентности коров, инфицированных ВЛКРС и больных лейкозом / C.B. Бахметьева ; Науч. рук. Г.А. Гаврилова // Молодежь XXI века: шаг в будущее : материалы четвертой регион, науч.-практ. конф. / ДальГАУ. - Благовещенск, 2003. - С. 315 - 316.

3. Бахметьева, C.B. Эпизоотическая ситуация по лейкозу быков-производителей / Г.А. Гаврилова, Ю.А. Макаров, C.B. Бахметьева, Я.Г. Диких // Ветеринария. - 2003. - №6. - С. 10 - 12.

4. Бахметьева, C.B. Диагностика лейкоза крупного рогатого скота / Г.А. Гаврилова, Ю.А. Макаров, C.B. Бахметьева / Ветеринария. -2004.-№1,-С. 20-23.

5. Бахметьева, C.B. Выявление больного лейкозом крупного рогатого скота с использованием РИД : Метод, рекомендации / РАСХН. Дальневост. научн.-метод. центр. ДальЗНИВИ. - Благовещенск, 2004. -13 с.

6. Бахметьева, C.B. Развитие эпизоотического процесса лейкоза крупного рогатого скота в Амурской области / Г.А. Гаврилова, C.B. Бахметьева // Биологические ресурсы российского Дальнего Востока : материалы междуиар. науч.-практ. конф. / ДальГАУ. - Благовещенск, 2004. - С. 111-114.

7. Бахметьева, C.B. Распространенность лейкозной инфекции в Среднем Приамурье / C.B. Бахметьева ; науч. рук. Г.А. Гаврилова // Молодежь XXI века: шаг в будущее : материалы пятой науч.-практ. конф. / АмурНЦ ДВО РАН [и др.]. - Благовещенск, 2004. - Т. 3. - С. 105 - 107.

8. Анализ эпизоотической ситуации по лейкозу крупного рогатого скота на Дальнем Востоке / Ю.А. Макаров, Г.А. Гаврилова, C.B. Бахметьева. - Благовещенск: РАСХН, Дальневост. науч. - метод, центр, ДальЗНИВИ, 2005. - 28 с.

9. Бахметьева, C.B. Неспецифическая резистентность коров, инфицированных и больных лейкозом / Г.А. Гаврилова, C.B. Бахметьева // Сибирский вестник с.-х. науки. - №1. - 2005. - С. 118 - 121.

10. Бахметьева, C.B. Ретроспективный обзор по распространению лейкозов крупного рогатого скота на Дальнем Востоке / Ю.А. Макаров, Г.А. Гаврилова, C.B. Бахметьева, Е.А. Ян : сборник научных трудов, посвящ. 70-летаю ДальЗНИВИ. - Благовещенск, 2005. - С. 64 - 69.

Бахметьева Светлана Васильевна

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ СЕРОЛОГИЧЕСКОГО ТЕСТА РИД ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ БОЛЬНЫХ ЛЕЙКОЗОМ ЖИВОТНЫХ

Автореферат

Лицензия ЛР 020427 от 25.04.1997 г. Подписано к печати 12.04.2006 г. Формат (¡q х 84 X«

Уч.-изд. л. - 1,0. Тираж 100 экз. Заказ 69.

Огпечатано в отделе оперативной полиграфии издательства ДальГАУ 675005, г. Благовещенск, ул. Политехническая, 86

( í

SLOCGk

2H7S H-817»

Оглавление диссертации Бахметьева, Светлана Васильевна :: 2006 :: Благовещенск

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Социально-экономические аспекты лейкоза крупного рогатого скота.

1.2. Возбудитель лейкоза крупного рогатого скота, его свойства.

1.3. Прижизненная диагностика лейкоза крупного рогатого скота.

1.3.1. Клинические методы.

1.3.2. Гематологический метод.

1.3.3. Серологические методы.

1.3.4. Молекулярно-биологический метод.

1.3.5. Биологическая проба, экспресс-методы.

Введение диссертации по теме "Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология", Бахметьева, Светлана Васильевна, автореферат

В настоящее время среди инфекционных болезней сельскохозяйственных животных особого внимания заслуживает лейкоз крупного рогатого скота (Г.А. Симонян, 1997; П.Я. Гущин, 1999; Г.Ф. Коромыслов, 1999; В.Л. Тихонов, 1999; Ю.П. Смирнов, 2002; Г.А. Гаврилова, 2005; М.И. Гулюкин, 2005; A.M. Смирнов, 2005).

Причиняемый лейкозом значительный экономический ущерб складывается из недополучения молока и приплода, преждевременной выбраковки коров и быков-производителей, материальных затрат на проведение противо-лейкозных мероприятий (В.Н. Нахмансон,1968; И.Н. Никитин, 1987; П.Н. Смирнов и соавт., 1991, 1992; В.А. Бусол и соавт., 1994; Г.А. Симонян, 1996, 1997; Ф.Ф. Хисамутдинов и соавт., 1996; И.Н. Никитин и соавт., 1999; Ю.П. Смирнов, 1999; W. Stahl, Е. Wiesner, 1956; О. Svanberg et al., 1957). Установлено достоверное снижение питательной ценности молока инфицированных BJTKPC коров из-за уменьшения показателей общего белка и большинства аминокислот, в том числе пяти незаменимых (Л.Г. Бурба и соавт., 1988; У. Динчева и соавт., 1988; П.Н. Смирнов и соавт., 1992; А.И. Кузин и соавт., 1999; Е.Н. Закрепина., 2001). Продукты от больных лейкозом животных содержат вредные метаболиты триптофана и других циклических аминокислот, обладающие бластомогенным эффектом (Н.М. Климов и соавт., 1974; Г.Л. Коромыслова, 1974). При передержке инфицированных вирусом и больных лейкозом коров в стаде повышается число случаев с опухолевыми поражениями органов и скелетной мускулатуры, что приводит к утилизации туш.

Известные на сегодняшний день методы прижизненной диагностики, основанные на детекции BJIKPC при помощи РИД с гликопротеидным антигеном, различных модификаций ИФА и ПЦР, достаточно эффективны в борьбе с лейкозом. Об этом свидетельствуют многочисленные сообщения о положительных результатах, полученных в различных регионах РФ и за ее пределами (Н.И. Петров, 1997; J1.A. Иванова, 1999; А.А. Русинович, 1999, 2004; B.JT. Тихонов и соавт., 1999; Т.В. Щекотурова и соавт., 1999; А. Горбунов и соавт., 2000; М.И. Гулюкин и соавт., 2000, 2001; А.Т. Татарчук и соавт., 2001; В.В. Храмцов, 2001; Н.Т. Джапаралиев, 2002; К. Klintevall, 1995; В. Ко-zaczynska, 1999 и др.).

Однако, появление в оздоровленных хозяйствах вновь инфицированных вирусом лейкоза особей ставит под сомнение полноту выявления больных лейкозом и вирусоносителей. Такие животные способствуют распространению инфекции, обуславливая непрерывность эпизоотического процесса и, как следствие, сохранение напряженной эпизоотической ситуации во многих регионах РФ (П.Н. Смирнов и соавт., 1989; И.И. Русанов, 2002; М.И. Гулюкин, 2005; И.М. Донник, 2005).

В связи с этим разработка и совершенствование методов и средств диагностики лейкоза по-прежнему остается 'важной задачей исследователей (Н.А. Мальцева, 2002; М.И. Гулюкин и соавт., 2002; A.M. Смирнов, 2005 и др.). Особый научный и практический интерес представляет изучение диагностических возможностей серологического (РИД) метода исследования крупного рогатого скота на лейкоз для выявления заболевания животных на ранних стадиях развития инфекционного процесса.

Цель работы.

Изучить распространенность лейкоза крупного рогатого скота в Амурской области и выявить взаимосвязь титра антител к антигенам BJIKPC при серологической (РИД) диагностике лейкоза крупного рогатого скота с гематологическими показателями инфицированных вирусом лейкоза животных.

Для реализации поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Изучить уровень инфицированности крупного рогатого скота вирусом лейкоза в Амурской области.

3. Усовершенствовать методику использования серологического теста РИД для выявления больных лейкозом животных

Научная новизна.

Впервые изучена распространенность лейкоза крупного рогатого скота в Амурской области и определен характер динамики проявления эпизоотического процесса, установлена зараженность ВЛКРС быков-производителей в зависимости от породного состава.

Практическая значимость.

Выявление в стаде серопозитивных животных с высокими (1 : 8 и выше) титрами антител к антигенам вируса может служить диагностическим и прогностическим признаком развития лейкозного и эпизоотического процессов.

Положения, выносимые на защиту:

- результаты изучения распространенности лейкоза крупного рогатого скота в Амурской области;

- усовершенствованная методика выявления больных лейкозом животных.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на Второй научной конференции с международным участием «Проблемы инфекционной патологии в регионах Сибири, Дальнего Востока и Крайнего Севера» (г. Новосибирск, 2002); на совместном заседании Бюро Отделений ветеринарной медицины и зоотехнии Россельхозакадемии «Опыт и стратегия борьбы с лейкозом крупного рогатого скота в племенных хозяйствах России» (г. Москва, 2002); на международной научно-практической конференции «Биологические ресурсы Российского Дальнего Востока» (г. Благовещенск, 2004); на Iой , IV-ой , V-ой региональных межвузовских научно-практических конференциях «Молодежь XXI века: шаг в будущее» (г. Благовещенск, 2002; 2003; 2004); на ученых советах ДальЗНИВИ (2000 - 2005).

Публикации. По материалам исследований опубликовано 10 работ (из них 3 - в реферируемых журналах), в которых отражены основные положения и выводы по теме диссертации.

Объем и структура. Диссертация изложена на 134 страницах компьтер-ного текста. Состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений, списка испльзованных источников, приложения. Диссертация иллюстрирована 12 таблицами, 1 рисунком. Список использованной литературы включает 260 источников, в т.ч. 44 - иностранных авторов.

Заключение диссертационного исследования на тему "Использование серологического теста РИД для выявления больных лейкозом животных"

ВЫВОДЫ

3. Установлена зависимость показателей естественной резистентности от специфического иммунного ответа животных, реагирующих в РИД в на-тивной сыворотке крови и при её разведениях. Эта зависимость выражается в достоверном (Р<0,001) повреждении функции естественной защиты у инфицированных ВЛКРС животных, сыворотка крови которых реагирует в титре 1:8 и выше.

4.1. На первом этапе исследований с помощью РИД выявляют инфицированных ВЛКРС животных (на это уходит 4-6 дней).

4.2. После этого на втором этапе дополнительно проводят серологические исследования испытуемой положительной в РИД сыворотки крови в разведениях. При обнаружении в ней специфических преципитирующих антител к антигенам вируса лейкоза в титре 1 : 8 и выше животное оценивают как больное лейкозом (на это требуется еще 2-4 дня).

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 2006 года, Бахметьева, Светлана Васильевна

1.Амиров, С.Х. Гематологический профиль крупного рогатого скота неблагополучных по лейкозу стад / С.Х. Амиров // Тр. ВИЭВ. - 1991. - Том 70. - С. 30-34.

2. Анфалова, Т.В. Макрофаг в системе действующих Т- и В-клеток /, Т.В. Анфалова, В.Г. Галактионов // Итоги науки и техники: Общие вопросы патологии. М.: ВИНИТИ, 1977. - Т.5. - С. 61-80.

3. Бакулов, И.А. Метод эпизоотологического исследования / И.А. Бакулов, В.А. Ведерников // Руководство по общей эпизоотологии. М., 1979.-С. 89-110.

4. Бакулов, И.А. Эпизоотический процесс: теоретические аспекты проблемы. И.А. Бакулов, В.В. Макаров // Вестник сельскохозяйственной науки.- 1986.-№ 11.-С. 111-118.

5. Баркова, Н.В. Влияние физиологического состояния животных на динамику антител к ВЛКРС / Н.В. Баркова // Тр. ВИЭВ. 1999. - Т. 72. - С. 177-180.

6. Белоногов, А.Н. Использование герефордской породы для создания мясного скотоводства в Дальневосточном регионе / А.Н. Белоногов, A.M. Половинко. М.: АОЗТ "Зоосалон", 1999. - 108 с.

7. Бергольц, В.М. Иммунология и иммунотерапия лейкоза / В.М. Бергольц, Н.С. Кисляк, В.С Еремеев. М.: Медицина, 1978. - 404 с.

8. Бирбин, С.С. Изучение связи эпидемиологических и эпизоотологиче-ских показателей гемобластозов по материалам Саратовского гематологического центра / С.С. Бирбин и др. // Тезисы докладов Всесоюзной конференции. Белая Церковь, 1982.-С. 188.

9. Божко, С.П. Применение спектрофотометрии для диагностики лейкоза крупного рогатого скота / С.П. Божко // Вестн. Омск. гос. аграр. унта.-1998.- №2.-С. 61.

10. М.Бурба, Л.Г. Основные результаты научных исследований по проблеме лейкозов сельскохозяйственных животных и птиц, проводимых странами -членами СЭВ / Л.Г. Бурба // Бюлл. ВИЭВ. М., 1977. - Вып. 30. - С. 4 - 12.

11. Бурба, Л.Г. Диагностика лейкозов сельскохозяйственных животных / Л.Г. Бурба, А.А. Кунаков. М.: Колос, 1983. - 191 с.

12. Бурба, Л.Г. Профилактика и борьба с лейкозом крупного рогатого скота / Л.Г. Бурба // Вестник с.-х. науки. 1986. - № 10. - С. 109-113.

13. П.Бурба, Л.Г. Лейкозы и злокачественные опухоли животных / Л.Г. Бурба, А.Ф.Валихов, В.А. Горбатов. 2-е изд., перераб. и доп. - М. : Агро-промиздат, 1988. - С. 116-117.

14. Бусол, В.А. Материалы к изучению эпиззоотологии лейкоза крупного рогатого скота в Украинской ССР / Л.Г. Бусол : автореф. дис. . канд. вет. наук. Белая Церковь, 1969. - 18 с.

15. Бусол, В.А. Методические рекомендации по эпизоотологическому исследованию при лейкозе крупного рогатого скота / В.А. Бусол. М. : 1982. - 12 с.

16. Бусол, В.А. Выявление ВЛКРС посредством полимеразной цепной реакции / В.А. Бусол и др. // Ветеринар, медицина. 1998. - Вып. 74. - С. 35-44.

17. Бусол, В.А. Тест-система для выявления ВЛКРС полимеразной цепной реакцией / В.А. Бусол, Лиманская О.Ю., Лиманский А.П., Цымбал В.И. // Ветеринария. 1999. - № 6. - С. 27-30.

18. Валихов, А.Ф. Изучение онкорновируса, выделенного при лейкозе крупного рогатого скота / А.Ф. Валихов // Проблемы экспериментальной онкологии и лейкозов человека и животных. М., 1979. - С. 205-212.

19. Валихов, А.Ф. Лейкоз крупного рогатого скота (вирусологические аспекты) / А.Ф. Валихов, В.П. Шишков, Л.Г. Бурба. М.: ВНИИТЭИСХ.1980.-77 с.

20. Васильев, Н.Т. Лейкозы сельскохозяйственных животных / Н.Т. Васильев, Н.В. Румянцев. М. : Колос, 1975. - 304 с.

21. Васильев, Н.Т. К характеристике общебиологических основ иммунитета / Н.Т. Васильев // Витамины и иммунитет. Томск, 1979. - С. 4-60.

22. Галеев, Р.Ф. Вирусологическое исследование телят, рожденных от коров, инфицированных онкорновирусом / Р.Ф. Галеев // Докл. ВАСХНИЛ.1981. -№ 10.-С. 44-46.

23. Галеев, Р.Ф. Инфекционность крови в зависимости от персистентно-го лимфоцитоза и титров антител gp51 и р24 к антигенам ВЛКРС / Р.Ф. Га-леев//Тр. ВИЭВ.-Т. 70.- 1991.-С. 80-83.

24. Галиулина, Р.В. О лейкозах крупного рогатого скота в Приморье / Р.В. Галиулина, Е.А. Кирьянов, С.В. Гриненко // Болезни животных и их профилактика. Владивосток, 1987. - С. 32-36.

25. Галиулина, Р.В. Лейкоз крупного рогатого скота в рамках программы голштинизации животноводства / Р.В. Галиулина, С.Н. Амелин // Проблемы ветеринарии Приморского края : Сб. науч. трудов. Уссурийск, 1996. - С. 62 -67.

26. Галиулина, Р.В. Система борьбы с лейкозом крупного рогатого скота / Р.В. Галиулина, Л.А. Глумова // Проблемы ветеринарии Приморского края : Сб. науч. трудов. Уссурийск, 1996. - С. 67 - 73.

27. Говалло, В.И. Иммунология репродукции / В.И. Говалло. М. : Медицина, 1987.-304 с.

28. Горбунов, А. Опыт оздоровления хозяйств Вологодской области от лейкоза крупного рогатого скота / А. Горбунов, А. Кузнецов, Л. Семина, С. Тимошина // Вет. газ. 2000. - № 13. - С. 5.

29. Гулюкин, М.И. Результаты серологических и морфологических исследований крови телят от инфицированных вирусом лейкоза и больных лимфолейкозом матерей / М.И. Гулюкин, Л.Г. Бурба, Л.А. Иванова // Ветеринария. 1985.-№ 11. - С. 32-38.

30. Гулюкин, М.И. Научные основы профилактики и борьбы с лейкозом крупного рогатого скота / М.И. Гулюкин и др. // Тр. ВИЭВ. 1999. - Т. 72. -С. 38-47.

31. Гулюкин, М.И. Эпизоотологическая оценка методов прижизненной диагностики лейкоза крупного рогатого скота / М.И. Гулюкин и др. // Вестн. РАСХН. -№ 3. 2000. - С. 60-62.

32. Гулюкин, М.И. Лейкоз крупного рогатого скота одна из важнейших проблем ветеринарии / М.И. Гулюкин, Н.В. Замараева, Г.Ф. Коромыслов // Ветеринарная газета. - 2001. - № 5. - С. 1-2.

33. Гулюкин, М.И. Разработка эффективных мероприятий против лейкоза крупного рогатого скота / М.И. Гулюкин и др. // Ветеринария. 2002. -№ 12.-С. 3-8.

34. Гулюкин, М.И. Профилактика и меры борьбы с лейкозом в высокопродуктивных и племенных хозяйствах / М.И. Гулюкин, И.И. Барабанов,

35. А.И. Иванова, К.П. Грек // Научные основы профилактики и лечения болезней животных : сб. научн. тр. ведущих ученых России, СНГ и др. стран. -Уральское изд-во, Екатеринбург, 2005. С. 5 - 9.

36. Гулюкин, М.И. Обзор эпизоотической ситуации по лейкозу крупного рогатого скота / М.И. Гулюкин, Г.А. Симонян, Н.А. Амирокова // Ветеринар, жизнь. 2005. - №16. - С. 7.

37. Джамбулатов, М.М. Содержание нитратов и нитритов в кормах хозяйств плоской зоны республики Дагестан / М.М. Джамбулатов, Г.И. Зубаи-лов // Экологические аспекты эпизоотологии и патологии животных : материалы междунар. конф. Воронеж, 1999. - С. 296-297.

38. Джапаралиев, Н.Т. Молекулярно-биологические методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота : автореф. дис. . канд. биол. наук / Н.Т. Джапаралиев; ВНИИЗЖ. Владимир, 2002. - 110 с. .

39. Донник, И.М. Биологические особенности и устойчивость к лейкозу крупного рогатого скота в различных экологических зонах Урала : автореф. дис. . д-ра ветеринар, наук / И.М. Донник. Новосибирск, 1997. - 40 с.

40. Доронин, Н.Н. Лейкоз крупного рогатого скота / Н.Н. Доронин, В.А. Бусол, Г.Х. Субаев. Киев: Урожай, 1976. - С. 199.

41. Дорофейчук, В.Г. Определение активности лизоцима нефелометри-ческим методом / В.Г. Дорофейчук // Лаб. дело. 1968. - № 1. - С. 28.

42. Дун, Е.А. Роль быков-производителей в распространении лейкоза крупного рогатого скота / Е.А. Дун // Бюл. ВИЭВ. 1968. - Вып. 5. - С. 9295.

43. Дун, Е.А. Роль быков-производителей в передаче лейкоза крупного рогатого скота/ Е.А. Дун : автореф. дис. .канд. вет. наук. -М., 1969. 18 с.

44. Емельяненко, П.А. Иммунология животных в период внутриутробного развития / П.А. Емельяненко. М.: Агропромиздат, 1987. - 215 с.

45. Ермолаев, Б.Б. Клинико-морфологическая диагностика лейкоза крупного рогатого скота / Б.Б. Ермолаев : автореферат диссертации. М., 1966.

46. Ерошин, В.А. Водорастворимые белки и свободные аминокислоты в лейкоцитах крупного рогатого скота, больного гемобластозами / В.А. Ерошин, A.M. Лактионов // Вестн. с.-х. науки. 1972. -№ 10. - С. 80-86.

47. B.М. Нахмансон // Бюлл. ВИЭВ. 1974. - Вып. XLII. - С. 97-98.

48. Зональная система земледелия Амурской области / Под ред. А.Ф. Гудкина. -Благовещенск, 1985.-279 с.

49. Иванова, Л.И. Персистенция колостральных антител к вирусу лейкоза у телят / Л.А. Иванова и др. // Тр. ВИЭВ. 1991. - Т. 70. - С. 16-21.

50. Иванова, Л.А. Опыт применения ИФА для выявления антител к вирусу лейкоза на заключительном этапе оздоровления / Л.А. Иванова и др. // Тр. ВИЭВ. 1999. - Т. 72. - С. 202-209.

51. Испулаев, А.И. Диагностическая ценность РИД с полипептидным (р24) антигеном ВЛКРС в выявлении больного лейкозом крупного рогатого скота : Дис. .канд. ветер. наук/ИЭВСиб и ДВ. -Защ. 93.06.15. 134 с.

52. Каминский, Л.С. Статистическая обработка лабораторных и клинических данных / Л.С. Каминский. Л. : Медицина, 1964. - 252 с.

53. Канеп, В.В. Лейкозы и лимфомы в Латвийской ССР / В.В. Канеп и др. // Тезисы докладов Всесоюзной конференции. Белая Церковь, 1982.1. C. 186.

54. Кашин, А.С. Совершенствование лабораторного дела приоритетная задача ветеринарной науки и практики / А.С. Кашин и др. // Современные проблемы эпизоотологии : материалы междунар. науч. конф. / РАСХН, Сиб.отд-ние. - Новосибирск, 2004.-С. 110-113.1.l

55. Кашин, А. С. Об обеспечении устойчивого ветеринарного благополучия животноводства на фоне антропогенных аномалий региона / А. С. Кашин // Вестн. РАСХН. 2001. - № 5. - С. 76-78.

56. Климов, Н.М. Метаболизм триптофана в организме крупного рогатого скота при лейкозе / Н.М. Климов, Г.Л. Коромыслова // Бюл. ВИЭВ. 1974. -Вып. 17.-С. 50-51.

57. Клиническая иммунология и аллергология. Т. 1 : Пер с нем. / Под ред. Л. Йегера.-2-е изд., переработанное и дополненное-М.: Медицина, 1990. -528 с.

58. Коваленко, Я.Р. Формирование иммунологического статуса у молодняка сельскохозяйственных животных / Я.Р. Коваленко // Вестн. с.-х. науки. -1979.-№2.-С. 50-58.

59. Коромыслов, Г.Ф. Основы профилактики и ликвидации лейкоза крупного рогатого скота / Г.Ф. Коромыслов, Л.Г. Бурба, В.М. Нахмансон // Ветеринария. 1993. - № 4. - С. 7-11.

60. Коромыслов, Г.Ф. Основные пути и перспективы научных исследований по проблеме лейкозов сельскохозяйственных животных / Г.Ф Коромыслов и др. // Тр. ВИЭВ. 1999. - Т. 72. - С. 3 - 11.

61. Коромыслова, Г.Л. Метаболиты триптофана в лейкоцитах крови и органах крупного рогатого скота при лейкозе / Г.Л. Коромыслова // Бюл. ВИ-ЭВ, 1974. вып. XYII. - С. 52 - 53.

62. Крикун, В.А. О путях распространения вируса лейкоза крупного рогатого скота в естественных условиях и условиях эксперимента / В.А. Крикун // Актуальные вопросы этиологии, патогенеза и диагностики неоплазий е.- х. животных.-М., 1984.-С. 10-13.

63. Крикун, В.А. Лейкоз крупного рогатого скота и иммунологическая толлерантность / В.А. Крикун // Ветеринария. 2002. - № 6. - С. 7-9.

64. Кудрявцева, Т.П. Распространение лейкоза крупного рогатого скота по данным гистологической диагностики / Т.П. Кудрявцева // Тр. ВИЭВ. -1972.-Т. XL. С. 380-392.93 .Кудрявцева, Т.П. Лейкоз животных / Т. П. Кудрявцева. М.: Россель-хозиздат, 1980. - 158 с.

65. Кузин, А.И. Продуктивность и качество молока у коров при лейкозе / А.И. Кузин, Е.И. Закрепина // Тр. ВИЭВ. 1999. - Т. 72. - С. 215-217.

66. Кузнецов, А.П. Экономический ущерб, причиняемый лейкозом крупного рогатого скота / А.П. Кузнецов, И.Н. Никитин // Ветеринария. 1993 -№8.-С. 14-16.

67. Кузнецова, Н.В. Использование полимеразной цепной реакции для выявления инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого скота / Н.В. Кузнецова, Н.В. Кузнецов, Г.А. Симонян // Ветеринария. 1997. -№ 5. - С. 12-15.

68. Кукайн, Р.А. Вирусологические аспекты изучения этиологии лейкоза / Р.А. Кукайн и др.. Рига : Зинатне, 1973. - С. 84.

69. Кульберг, А.Я. Молекулярная иммунология / А.Я. Кульберг. М.: Высшая школа, 1985. - 286 с.

70. Кунаков, А.А. К вопросу ветсанэкспертизы и оценки продуктов убоя при лейкозе / А.А. Кузнецов, И.Г. Серегин // Тр. ВИЭВ. 1999. - Т. 72. - С. 232-234.

71. Лактионов, A.M. К итогам изучения лейкоза крупного рогатого скота / A.M. Лактионов // Тр. Всесоюзного ордена Ленина института экспериментальной ветеринарии. Том. XL. - 1972. - С. 183-195.

72. Левашов А. Т. Гематологическая диагностика лейкоза крупного рогатого скота пути интенсификации / А. Т. Левашов // Проблема оздоровления хозяйств от лейкоза крупного рогатого скота: Тез. докл.

73. Всесоюз. науч.-произв. конф., Новосибирск, 11-13 апреля 1990 г. -Новосибирск, 1990.-С. 73-74.

74. Левашов, А.Т. Использование серологического теста РИДр24 для выявления коров, больных лейкозом / А.Т. Левашов, В.В. Смирнова // Тезисы докладов 3 Всесоюзной конференции по эпизоотологии. -Новосибиск, 1991. С. 86-87.

75. ЮЗ.Лемеш, В.М. Лейкоз крупного рогатого скота в Белоруссии (эпизоотология, диагностика, меры борьбы) / В.М. Лемеш. Автореф. дис.докт.ветеринар, наук. М., 1987. - 38 с.

76. Лемеш, В.М. Особенности распространения и меры борьбы с лейкозом в условиях Белоруссии // Тезисы докладов III Всесоюз. конф. по эпизоотологии, Новосибирск, 24 26 сент., 1991. - Новосибирск, 1991. - С. 87 -88.

77. Ломакин, А.И, Диагностика лейкоза крупного рогатого скота с помощью полимеразной цепной реакции / А.И. Ломакин, Л.Б. Прохватилова, С.С. Рыбаков, В.В. Дрыгин, А.А.Гусев // Тр. ВИЭВ. 1999. - Т. 72. - С. 192201.

78. Макаров, В.В. Прогресс в таксономии и классификация зоопатоген-ных вирусов / В.В. Макаров, О.И. Сухарев // Вестн. РАСХН. 2000. - № 5. -С. 69-74.

79. Макаров, Ю.А. Анализ эпизоотической ситуации по лейкозу крупного рогатого скота на Дальнем Востоке / Ю.А. Макаров, Г.А. Гаврилова, С.В. Бахметьева. Благовещенск : Амурстат, 2005. - 28 с.

80. Мальцева, Н.А. Лейкоз крупного рогатого скота: разработка методов лабораторной диагностики и средств специфической профилактики : Дис. . д-ра биол. наук / ГУ НИИВ РАМН. Защищена 2002.06.17. - 185 с.

81. Мельникова, Н. 1нфрачервона спектроскотя у д1агностищ лейкозу велико! poraToi худоби / Н. Мельникова, Н. Калшш, В. Левенцов, В. Макит-рук // Вет. медицина Украши. 1996. - № 5. - С.12-13.

82. Н.Меньшикова, З.Н. Индикация вируса лейкоза крупного рогатого скота в лейкоцитах кроликов / З.Н. Меньшикова // Тр. ВИЭВ. 1999. - Том 72.-С. 249-252.

83. Методические указания по диагностике лейкоза крупного рогатого скота // ГУВ МСХ СССР. М.: 1989.

84. Методические указания по диагностике лейкоза крупного рогатого скота : утв. Департаментом ветеринарии М-ва сел. хоз-ва Рос.Федерации 23.08.00.-М., 2000.-21 с.

85. Методические указания по тестированию естественной резистентности телят. М., 1980. - С. 13-15.

86. Москалик, Р.С. Инфицированность и гематологические показатели у потомства здоровых и больных лейкозом коров / Р.С. Москалик, А.И. Ма-каршина, А.В. Николаева // Ветеринария. 1986. - № 7. - С. 34-35.

87. Москалик, Р.С. Изучение инфицированности вирусом лейкоза крови и ее компонентов / Р.С. Москалик // Ветеринария. 1988. - № 9. - С. 30- 31.

88. Москалик, Р.С. Роль профессиональной этики в решении проблемы лейкоза крупного рогатого скота / Р.С. Москалик // Тр. ВИЭВ. 1999. - Т. 72. - С. 69-67.

89. Мурватуллоев, С.А. Пренатальная передача вируса и антител потомству от коров, инфицированных вирусом лейкоза / С.А. Мурватуллоев // Методы и средства борьбы с инфекционными болезнями животных. Душанбе, 1984.-С. 32-36.

90. Нахмансон В.М. Некоторые аспекты эпизоотологии ВЛКРС в хозяйствах, неблагополучным по лейкозам крупного рогатого скота / В.М. На-хмансон, Е.А. Дун // Теоретические и практические вопросы ветеринарии : тез. докл. Тарту, 1983. - Т. 3. - С. 124-129.

91. Нахмансон, В.М. Лейкоз крупного рогатого скота / В.М. Нахмансон. М. : Россельхозиздат, 1986. - С. 81-82.

92. Нахмансон, В.М. Вопросы эпизоотологии лейкозов / В.М. Нахмансон // Лейкозы и злокачественные опухоли животных / под ред. В.П. Шишкова, Л.Г. Бурбы.-М. : Агропромиздат, 1988.-С. 115-133.

93. Нахмансон, В.М. Эпизоотология крупного рогатого скота / В.М. Нахмансон : тез. докл. III Всесоюз. конф. по эпизоотологии. / ВАСХНИЛ, РАСХН, ИЭВСиДВ. Новосибирск, 1991. - С. 92-93.

94. Незаметдинова, К.А. О факторах неспецифической резистентности здоровых и инфицированных вирусом лейкоза коров.различных пород / К.А. Незаметдинова, Х.С. Салимов, М.К. Бутаев // Сельскохозяйственная биология. 1990. - № 4. - С. 160-163.

95. Непоклонов, Е.А. Состояние и перспективы развития ветеринарной службы / Е.А. Непоклонов // Ветеринар. Газ. 2003. - № 11. - С. 2 -3; №12. -С. 10-11.

96. Никитин, И.Н. Организация и экономика ветеринарного дела / И.Н. Никитин с соавт. М.: Агропромиздат, 1987. - 352 с.

97. Павлова, Е.И. Биохемилюминесценция крови крупного рогатого скота и перспективы её использования в диагностике лейкоза / Е.И. Павлова, С.А. Стрельцов, А.Ф. Рябцев, А.Т. Левашов, П.Н.Смирнов // Сиб. вестн. с.-х. науки.-1997.-№3-4.-С. 76-80.

98. Паракин, В.К. Эпизоотологические и эпидемиологические особенности распространения лейкозов крупного рогатого скота и человека / В.К. Паракин и др. // Тезисы докладов Всесоюзной конференции. Белая Церковь, 1982.-С. 187.

99. МО.Пахомов, П.И. Химический состав мяса крупного рогатого скота, больного лейкозом / П.И. Пахомов // Учен. зап. ВГАВМ. 1998. - Т. 34. - С. 168-170.

100. Петров, Р.В. Иммунология / Р.В. Петров. М.: Медицина, 1982. -368 с.

101. Петров, Н.И. Оздоровление хозяйств от лейкоза крупного рогатого скота / Н.И. Петров // Ветеринария. 1997. - № 9. - С. 10-12.

102. Пешкус, Ю.К. Иммунологическая и функциональная характеристика иммуноглобулинов крупного рогатого скота при лейкозе : автореф. дис. . д-ра биол. наук / Ю.К. Пешкус. М., 1991. - 42 с.

103. Плященко, С.Н. Естественная резистентность организма животных / С.Н. Плященко, В.Т. Сидоров. Л. : Колос, Ленингр. отд-ние, 1979. - 181 с.

104. Пономарева, Е.Д. Некоторые особенности сочетанного заболевания острым лейкозом и туберкулезом / Е.Д. Пономарева, В.Д. Гольдштейн // Пробл. туберкулеза. 1972. - № 1. - С. 50-53.

105. Мб.Правила по профилактике и борьбе с лейкозом крупного рогатого скота / МСХиП РФ. М., 1999. - 12 с.

106. Примов, С.Н. Распространение лейкоза среди крупного рогатого скота в Каракалпакской АССР / С.Н. Примов // Тезисы докладов III Всесоюз. конф. по эпизоотологии, Новосибирск, 24 26 сент., 1991. - Новосибирск, 1991.-С. 87-88.

107. Прохватилова, Л.Б. Диагностика лейкоза КРС методом полимераз-ной цепной реакции / Л.Б. Прохватилова, А.И. Ломакин, С.Н. Колосов, В.В. Дрыгин, С.С. Рыбаков, А.А. Гусев // Вестн. РАСХН. 1998. - № 5. - С. 6568.

108. Рабухин, А.Е. Туберкулез и лейкоз / А.Е. Рабухин, И.А. Кассирский, А.Г. Ламбина // Терапевтический архив. 1961. - № 3. - С. 12-20.

109. Разумовская, В.В. Совершенствование системы управления эпизоотическим процессом лейкоза и бруцеллеза крупного рогатого скота / В.В. Разумовская : автореф. дис. . .д-ра ветеринар, наук. Барнаул. - 2004. - 40 с.

110. Розанцев, К.Э. Цепная полимеразная реакция in vitro новый подход в диагностике / К.Э Розанцев // Бюл. ВИЭВ. - Вып. 75-76. - 1991. - С. 47-50.

111. Румянцев, Н. В. Современные данные по лейкозу крупного рогатого скота / Н.В. Румянцев, Т.М. Шатерникова // Ветеринария. 1963. - № 4. - С. 20-26.

112. Русев, Р. Проучване на зависимостта между пролиферативната ак-тивност иброя на левкоциттете в кръвна на левкозни крави / Руси Русев, Валентин Цуцумански // Вет. мед. 1997. - № 1, 2. - С. 100-101.

113. Русинович, А.А. Эпизоотическая характеристика лейкоза крупного рогатого скота / А.А. Русинович // Известия Акад. аграрных наук Республики Беларусь. 2002. - № 1. - С. 73-77.

114. Русинович, А.А. Ликвидация лейкоза крупного рогатого скота в хозяйствах с разной эпизоотической ситуацией / А.А. Русинович // Ветеринария. 2004. - №3. - С. 7-9.

115. Русанов, И.И. Ветеринарные проблемы скотоводства в отношении хронических инфекций в Калининградской области / И.И. Русанов, А.И. Ва-сюков // Сб. научн. трудов КНИИСХА. Калининград, 2004. - С. 105 - 114.

116. Салимов, Х.С. Иммунологическая диагностика онкорновирусной инфекции у крупного рогатого скота / Х.С. Салимов // Иммунология и иммунотерапия лейкозов человека и животных / УзбНИВИ. Ташкент, 1984. - С. 129.

117. Симаков, В.Е. К изучению лейкозов крупного рогатого скота в Приморском крае и Амурской области / В.Е. Симаков // Сельскохозяйственная наука к 50-летию Якутской АССР. Якутск, 1972. - С. 75-77.

118. Симаков, В.Е. К вопросу распространения лейкоза крупного рогатого скота на Дальнем Востоке / В.Е. Симаков // Эпизоотология, профилактика и лечение болезней животных на Дальнем Востоке : сб. науч. тр. Благовещенск, 1976.-С. 58-61.

119. Симаков, В.Е. Клинико-гематологическая характеристика и меры профилактики лейкозов крупного рогатого скота на Дальнем Востоке / В.Е. Симаков // Эпизоотология и патогенез болезней сельскохозяйственных животных / ДальЗНИВИ. Омск, 1979. - С. 3-7.

120. Симаков, В.Е. Распространение лейкозов крупного рогатого скота в зоне Байкало-Амурской магистрали / В.Е. Симаков // Там же. С. 8-11.

121. Симонян, Г.А. Морфологические изменения крови и пунктата костного мозга у коров при лейкозе / Г.А. Симонян // Ветеринария. 1963. - № 6. -С. 33-38.

122. Симонян, Г.А. Начальная стадия лейкозного процесса у крупного рогатого скота / Г.А. Симонян // Бюлл. ВИЭВ. 1974. - Вып. XVII. - С. 7174.

123. Симонян, Г.А. Развернутая стадия лейкоза крупного рогатого скота / Г.А. Симонян // Там же. С. 75-77.

124. Симонян, Г.А. Лейкоз крупного рогатого скота / Г.А. Симонян // Животновод.- 1996.-№ 10. С. 40-41; № 12.-С. 16-17.

125. Симонян, Г.А. Экономический ущерб от лейкоза / Г.А. Симонян // Животновод. 1997. - №5. - С.11 - 12.

126. Симонян, Г.А. Динамика развития инфекционно-патологического процесса при лейкозе / Г.А. Симонян // Тр. ВИЭВ. 1999. - Т. 72. - С. 26-32.

127. Смирнов, A.M. Наука и практика / A.M. Смирнов // Ветеринар, газ. -2003.-№ 11.-С. 15; № 12.-С. 15.

128. Смирнов, A.M. Наука и практика / A.M. Смирнов // Ветеринар, газ. -2003.-№ 13.-С. 2.

129. Смирнов, П.Н. Патогенез гемобластозов крупного рогатого скота (иммунологические аспекты) : автореф. дис. . д-ра ветеринар, наук / П.Н. Смирнов. Казань, 1988. - 35 с.

130. Смирнов, П.Н. Организация эффективной борьбы с лейкозом крупного рогатого скота / П.Н. Смирнов, А.Г. Незавитин // Ветеринария. -1991. -№ 10.-С. 7-9.

131. Смирнов, П.Н. Проблемы лейкоза животных / П.Н. Смирнов. Новосибирск : Сов. Сибирь, 1992. - С. 117-118.

132. Смирнов, Ю.П. Генетический и экологический анализ факторов, детерминирующих предрасположенность к канцеро- и лейкогенезу / Ю.П. Смирнов // Тр. ВИЭВ. 1999. - Т. 72. - С. 87- 96.

133. Смирнов, Ю.П. Основные пути распространения лейкоза / Ю.П. Смирнов // Ветеринар, газ. 1999. - № 4. - С. 3-4.

134. Смирнов, Ю.П. Меры эфективной борьбы с лейкозом крупного рогатого скота / Ю.П. Смирнов // Достиж. науки и техники АПК. 2002. - №6. -С.10.

135. Смирнов, Ю.П. Эпизоотология лейкоза крупного рогатого скота в ассоциации с другими инфекциями / // Вестник РАСХН. 2004. - № 2. - С. 62-65.

136. Сторожилова, Т.П. Стратегия борьбы с лейкозом крупного рогатого скота в Ленинградской области / Т.П. Старожилова, Н.И. Петров, Б.И. Свиридов//Зооиндустрия. 2001.-№ 12.-С. 11-12.

137. Сюрин, В.Н. Диагностика вирусных болезней животных : Справочник / В.Н. Сюрин, Р.В. Белоусова, Н.В. Фомина. М.: Агропромиздат, 1991. -С. 274-291.

138. Татарчук, А.Т. Оздоровительные противолейкозные мероприятия на Среднем Урале / А.Т. Татарчук, В.А. Красноперов // Ветеринар, газ. 2001. -№ 12.-С. 2-3.

139. Тихонов, В.Л. Региональная эпизоотология Иркутской области по лейкозу крупного рогатого скота / В.Л. Тихонов // Проблемы инфекционной, инвазионной и незаразной патологии животных в Нечерноземной зоне РФ. -Н. Новгород, 2001. С. 58-62.

140. Федоров, Ю.Н. Иммуноглобулины овец в онтогенезе / Ю.Н. Федоров : Тезисы докладов Всесоюзной научной конференции ВГНКИ. М., 1981.-С. 117.

141. Филатов, П.В. Современные данные о лейкозах крупного рогатого скота и птиц / П.В. Филатов // Проблемы борьбы с лейкозом крупного рогатого скота. М., 1965. - С. 7-19.

142. Хаитов, P.M. Иммунология репродукции / P.M. Хаитов, М.Ш. Вербицкий // Итоги науки и техники. Онтогенез иммунной системы / ВИНИТИ. М., 1986. - Т. 14 : Иммунология. - С. 72-76.

143. Хисамутдинов, Ф.Ф. Затраты на проведение противолейкозных мероприятий / Ф.Ф. Хисамутдинов, И.И. Никитин // Ветеринария. 1996. - № 9.-С. 19-21.

144. Храмцов, В.В. Факторы, коррелирующие со степенью распространения лейкоза крупного рогатого скота и выявление животных группы риска : автореф. дис. .канд. ветеринар, наук / В.В. Храмцов. Новосибирск, 1987. -17 с.

145. Шевченко, И.Т. Элементы вариационной статистики для медиков / И.Т. Шевченко, О.П. Богатов, Ф.П. Хрипта. Киев : Здоров'я, 1970. - 105 с.

146. Шишков, В.П. Опухоли и лейкозы животных (биологические, экономические и ветеринарно-медицинские аспекты) / В.П. Шишков // Проблемы экспериментальной онкологии и лейкозов человека и животных / под ред. Л.М. Шабада, В.П. Шишкова. М., 1979. - С. 6-8.

147. Шишков, В.П. Экспериментальные исследования по выявлению он-корнавируса в сперме быков-производителей / В.П. Шишков и др. // Актуальные вопросы ветеринарной вирусологии : сб. науч.тр. Казань, 1980. - С. 5.

148. Шишков, В.П. Иммунологические аспекты ветеринарной лейкозоло-гии / В.П. Шишков // Иммунология и иммунотерапия лейкозов человека и животных : тез. докл. Всесоюзн. конф. / Самарканд, 9 11 октября, 1984. -Ташкент. - 1984. - С. 3-5.

149. Шишков, В.П. Иммунология лейкозов / В.П. Шишков, А.Ф. Валихов // Лейкозы и злокачественные опухоли животных. М., 1988. - С. 78-95.

150. Шишков, В.П. Лейкозы и злокачественные опухоли животных / В.П. Шишков, Л.Г. Бурба. М.: Агропромиздат, 1988. - 301 с.2Ю.Шишков, В.П. Наступление на лейкозы животных / В.П. Шишков // Наука и человечество.-М.: Знание, 1988.-С. 103-113.

151. Шишков, В.П. Лейкозы животных общебиологическая и социальная проблема / В.П. Шишков // Сб. науч. тр. / РАСХН, Сиб. отд-ние. - Новосибирск, 1998.-С. 72-82.

152. Шуринова, С.А. Применение полипептидного антигена /Р24/ для серологической диагностики лейкоза крупного рогатого скота / С.А. Шуринова, А.Г. Дрогун // Ветеринарная наука производству : межведомств, сб. -Вып. 31./ ВНИИЭВ. Минск, 1993. - С.28-31.

153. З.Щеглова, Н.Е. Роль телят в поддержании неблагополучия стад крупного рогатого скота по лейкозу / Н.Е. Щеглова // Вет. медицина. Экон., соц. и экол. пробл. Харьков, 1990. - С. 128-129.

154. Щекотурова, Т.В. Оздоровление хозяйств Вологодской области / Т.В. Щекотурова, А.П. Кузнецов, Е.А. Маринин // Состояние, проблемы и перспективы развития ветеринарной науки России : материалы науч. сес. РАСХН. М., 1999. - Т. 1. - С. 225-226.

155. Щекотурова, Т.В. Исследования на лейкоз в РИД и ИФА секрета молочной железы коров / Т.В. Щекотурова, В.А. Романова, А.В. Щекотуров // Тр. ВИЭВ. 1999. - Т. 72. - С. 213-214.

156. Щекотурова, Т.В. Ообенности серологической диагностики лейкоза крупного рогатого скота / Т.В. Щекотурова, В.А. Романова // Тр. ВИЭВ. -1999.-Т. 72.-С. 137-140.

157. Altanerova, V. Infection of rats with bovine leukemia virus: establishment of a virus-producing rat cell line / V. Altanerova et al. // J. Gen. Virol. -1989. Vol. 70, № 7. - P. 1929-1932.

158. Burny, A. Bovine leukemia virus involvement in enzootic bovine leukoses / A. Burny et al. // Advances in Cancer Res. 1978. - Vol. 28. - P. 251311.

159. Burny, A. Bovine leukemia virus: Molekular Biology and Epidemiology / A. Burny et al. // Viral Onkology. 1980. - P. 231-289.

160. Burny, A. Charakterization of cellular sequences flanking an integrated bovine leukemia virus genome / A. Burny et al. // J. Virol. 1984. - Vol. 52, № 3.-P. 988-990.

161. Burhy, A. Enzootic bovine leukemia: its relevance as a model system for human T-cell leukemia / A. Burny et al. // Lymphoma Virus. Gold Spring Harbor, N.Y. 1984.-P. 17-24.

162. Cerny, L. Mohou spermatozoidy Ieukozniho byka prenazet virus leucozy skotu / L. Cerny, C. Altaner, K. Hejlicek // Veterinarstvi. 1988. - Vol. 38, № 8. -P. 343-344.

163. Danes, M. Comparative data with agar gel immunodiffusion test in se-rodiagnosing enzootic bovine leukosis virus (BLV) infection / M. Danes, B. An-tonela // Stud. And Res. Vet. Med. 1995. - № 3. - P. 32-36.

164. Deren, W. Wydajnose mleczna krow zakazanych wirusem BLV / W. Deren, J. Rulka // Med. Veter. 2001. - R. 57, № 12. - S. 899-901.

165. Deshayes, L. Proteins of bovine leukemia virus. Characterization and reactions with natural antibodies / L. Deshayes et al. // J. Virol. 1977. - № 21. -P. 1056-1060.

166. Donham, K.J. Relationships of bovine leukemia virus prevalense in dairy herds and density of dairy cattle to human lymphocytic leukemia / K.J. Donham, L.F. Burmeister, S.F. Vanlier, T.C. Greiner // Amer. J. Vet. Res. 1987. - Vol. 48, №2.-P. 235-238.

167. Ferrer, J.F. An evalution of the role of milk in the natural transmission of BLV / J.F. Ferrer, C.E. Piper // Ann. Rech. Vet. Luxemburg, 1979. - Vol. 9. - P. 803-807.

168. Gillette, K.G. Demonstration of abnormal antigen in bovine Lymphosarcoma by immunofluorescence / K.G. Gillette, C. Olson, S. Ttkeli // Am. J. Vet. Res. 1969. - Vol.30. - P. 975-980.

169. G6tze, R. Die Leucose des Rindes, ihre hamatologische und klinische Diagnose / R. Gotze, G. Rosenberger, G.Ziegenhagen. Mh. Vet. - Med., 1954. -Bd. 9.-S. 517.

170. Klintevall, K. Bovine leukemia virus : apid detection of proviral DNA by nested PCR in blood and organso of experimentally infected calves / K. Klintevail, A. Ballagi-Pordany, K. Naslund et al. // Vet. Microbiol. // 1994. Vol. 42. -P. 191-204.

171. Klintevall, K. Bovine leukemia virus: Course of infection and means of detection: Diss. Dok. Naturwiss. / K. Kllintevall // Swed. Univ. Agr. Sci. Uppsala, 1995.-204 p.

172. Kono, Y. Syncytium indution inhibitien test with complement for detection of antibodies against bovine leukemia virus / V. Kono, W. Irishio, H. Sentsni N. // Canad. J. Сотр. Med. 1983. - Vol. 47, № 3. - P. 219-328.

173. Kono, Y. Development and serial passage peraistent lymphcytsis associated with bovine leukemia virus infection in cattle / Y. Kono et al. // Jap. J. Vet.Sci.-1989.-Vol. 51, № l.-P. 60-69.

174. Kozaczynska, B. Diagnostic value of different ELISA kits for the determination of antibodies against bovine leukemia virus (BLV) / B. Kozaczynska // Bull. Vet. Inst. Pulawy. 1999. - Vol. 43, № 2. - P. 133-138.

175. Lassauzet, M.-L.G. Lack of evidense of transmission of bovine leukemia virus by rectal palpation of dairy cows / M.-L.G. Lassauzet, M.C. Thurmond, R.W. Walton // J. Amer. Vet. Med. Assoc. 1989. - Vol. 195, № 12. - P. 1732-1733.

176. Lerski, Z. Bialaczka bydia a zdrowie czlowieka / Z. Lerski // Med. wet. -1989.-Vol. 45.-P. 18-19.

177. Losjeczka, K. Rola mleca w szerzeniu sie enzootyczne j bialaczki bydia ( EBB) / K. Losjeczka, S. Klimentowski // Med. wet. 1988. - Vol. 44, № 4. -P. 213-214.

178. Meiron, R. Humoral and cellular responses in calves experimentaly infected wirth bovine leukemia virus (BLV) / Meiron R. et al. // Vet. Immunol, and Immunopathol. 1985. - Vol. 9. - P. 105-114.

179. Miller, J.M. Virus-like particles in phytohemagglutininstimulated lym-phocite cultures with reference to bovine lymphosarcoma / J.M. Miller et al. // J. Natl. Cancer Inst. 1969. - Vol. 43. - P. 1297-1305.

180. Miller, J. M. Precipitation antibodi to an internal antigen of the C-type virus associated with bovine lymphosarcoma / J. M. Miller, C. Olson . J. Natl. Cancer Inst. - 1972, v. 49. - № 5. - p. 1459-1462.

181. Miller, J.M. Serologic response of cattle following inoculation with bovineleucemia virus/ J.M. Miller, M.J. Van Der Maaten // Bibl. Haematol. -1976.-v. 43.-P. 187-189.

182. Miller, J.M. Use of glycoprotein antigen in the immunodiffusion test for bovine leukemia virus antibodies / J.M. Miller, M.J. Van Der Maaten // Eur. J. Cancer.- 1977.-v. 13.-P. 1369-1375.

183. Mussgay, M. The bovine leukosis virus / M. Mussgay et al. // Med. Mikrobiol. Immunol. 1977.-P. 131-138.

184. Sagata, N. Complete nukleotide sequece of the genome of bovine leukemia virus: its evolutionary relationship to ofter retroviruses / N. Sagata et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1985. - Vol. 82. - P. 677-681.

185. Svanberg, O. Die Umweltbedingungen der Rinder leukose in Schweden / O. Svanberg, E. Aberg, E. Steen // Mh. Vetmed. 1957. - № 12. - S. 15 - 17.

186. Teilen, G.N. Vaccination against bovine leukemia virus infection / G.N Teilen et al. // Fourth Intern. Symp. on bovine leukosis. Bolgaria, 1982. - P. 547-560.

187. Thiry, L. Bovine leukemia virus related antigens in lymphocyte cultures infected with AIDS-associated viruses / L. Thiry et al. // J. Cell. Biochem. -1985. - Vol. 227. - P. 1482 - 1484.

188. Tolle, A. Die fluoreszenzserologische Diagnose der Rinderleucose / A. Tolle // Dt. Tierarztl. Wschr. 1961. - Bd.68. - S. 193 - 202.

189. Pieskus, J. Detection of BLV infection by ELISA and PCR / J. Pieskus et al. // Towards Livestok Disease Diagn. and Contr. 21st Century: Prog. Inst. Symp., Vienna, 7 11 apr., 1997. - Vienna, 1998.-P. 531-532.

190. Van Der Maaten, M.J. Susceptibilityof cattle to bovine leukemia virus infection by various routesof exposure / M.J. Van Der Maaten, J. M. Miller // Adv. Compar. Leuk. Res., 1977. P. 29 -32.

191. Wiesner, E. Die Leukose des Rindes / E. Wiesner. Viena, 1967. - 1641. P