Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Влияние иммуномодуляторов и лактобактерина на морфофунциональные изменения в органах пищеварительного тракта телят при экспериментальном заражении микроорганизмами из семейства энтеробактерий и культурой пастерелл
Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Влияние иммуномодуляторов и лактобактерина на морфофунциональные изменения в органах пищеварительного тракта телят при экспериментальном заражении микроорганизмами из семейства энтеробактерий и культурой пастерелл
"ШСТЕРОТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ИСКОВОМ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ...'... ВЕТЕРИНАРНАЯ АКАДЕМИЯ имени К.И.СКРЯБИНА
На правая рукописи
ЛШ УН ЧОР
ВЛИЯНИЕ И®ШШООТЯТОРОВ Н ЛАКТВБАКТЕРШ1А НА ШРФОЗУНКЩЮНАЛЬНЫЕ 1ШЕНЕНШ В ОРГАНАХ ПИША-ШЧЗШЮГО ТРАКТА ТЕЛЯТ ПРИ ЭКСШЗРШШТАЛЬНШ
шщш юшюорганйяши из сщейства ' ЭЙГВРОЕШЕРЙ! и шшроЗ пдстшал
15.00.02 - патология;онкология п морфология ашвояшг
■ Автореферат диссертация на соискание ученой степени кандидата аетеринарншс наук
Москва - 1992
Бабота выполнена в Московской ордена Трудового Красного Знамени ветеринарной академии юл. К.И. Скрябина.
• Научный руководитель : доктор ветеринарных наук,
профессор ЖАРОВ A.B.
Официальные оппоненты
Заслуженный деятель науки Российской Федерации, доктор ветеринарных наук," профессор АРХШОВ Н.И. ;
кандидат ветеринарных наук МИНЕЕВА Т.Н.
Ведущая организация - Всероссийский ордена Ленина научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени Я.Р.- Коваленко.
Защита диссертации состоится в " ^ЬО " часов на заседании^ специализировалиого совета Д.120.36.01. по защите диссертации на соискание ученой степени доктора паук в Московской ордена Трудового Красного Знамени ветеринарной академии им. К,И. Скрябина' (109472,Mooj ул. Академика Скрябина, 23. Тел. 377--93-83).
С диссертацией моано ознакомиться в библиотека академш
Автореферат разоолан " k&JZ&'jus 1992 г.
Ученый секретарь специализированного совета
Слесаренко Н.А
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность теш. Во всех странах шра с интенсивным животноводством широкое распространение имеют острые желудочно-кишечные заболевания новорожденных животных, наносящие значительные потери народному хозяйству. Среда заболеваний новорожденных телят наибольший процент составляют желудочно-кишечные заболевания (В.П.Урбан,1978; В.М.Данилевский, 1989;, a. Huf-chi«on , 1979; З.Р. Allen. , ft.л. Smort et al. , 1985).Важ-ajxj роль в возникновения острых желудочно-кишечных заболеваний у телят раннего возраста играют нарушения состава нормальной иихрофяоры в желудочно-кишечном тракта и иммунологического со-атояния организма.
.. Лактобактерин и иммуномодулягоры как профилактико-лечебные зредотва применяет при даареи новорожденных. Лактобактерин об-надает антагонистической активностью в отношении условно-патогенных и патогенных бактерий и ве влияет на вирусы, которые могут осложнять течение болезни на фоне низкой резистентности организма, а иммуномодуяяторн.в cBotp очередь, повидают его имму-шбиологическуо активность (В.Я.Арион, 1982; Ю.Н.Лопухин,1982; 1.И.Коршуноа и соавт.,1986; Е.С.Воронин п соавт.,1988; В.А.Кир-шченок, 1989; Г.Н. Печников и соавт., 1989; А. ?агкв ,1974 ; J.S. 1ирву et Al. , 1984; Я. Fuller , 1986).
Патоморфологические•изменения в органах желудочно-кшечно-'о тракта новорожденных телят описаны в работах А.Ф. Ткачанко 1964), В.П. Шишкова (1968), Ф.И. Ибадуллаева (1970), Г.И. Конвой (1973), Т.И. Минеевой (1975), С.М. Сулейманова (1982), '.Г. Щербакова (1982), В.Г., ЗарЬаы (1976,1985), А.И.Федорова 1964,1972), М.А. Бадура (1969), В.Г, Ульянова (1969) и др. месте с тем, влияние лавтобактерина и иммуномодуляторов на орфофункциояальныа изменения в органах желудочно-кишечного ракта при острых желудочно-кишечных заболеваниях телят ранне-о возраста и при пастераллеээ телят изучено недостаточно.
Цель и задачи исследований. Целью нашей работы было изучена влияния иммуномодуляторов и лактобактерина на морфофункцио-альные изменения органов желудочно-кишечного тракта телят при кспериыентальном заражении микроорганизмами энтеробактерий и ультурой пастералл. В соответствии с целью были поставлены аедувдие задачи : 7/0
I. Изучить патоморфолотеческие и гистохимические изшнеяля в органах желудочно-кишечного тракта новорожденных телят, зараженных ассоциацией микроорганизмов из семейства эитеробактерий и культурой пастерелл.
.2. Исследовать влияние-лактобактерина и иммуномодуляторов (Х- и В-активина) на органы аелудочно-кишечного тракта новорожденных телят при острых желудочно-кишечных заболеваниях и па-стервллеэе.
3. Пронести сравнительный анализ патоморфологических и . гистохимических исследований органов желудочно-кишечного тракта у. голят разных груш.
Научная новизна. Установлены морфофункциональные изменения • в органах желудочно-кишечного тракта у телят при .экспериментальном заражении ассоциацией'микроорганизмов из семейства эитеробактерий ( Е. coli SPEC-Z, Salmonella typhi murium - 2, Citrobacter ircudi-2, Proteus vulgario-3» Klebsiella jpneimoniae-2) и культурой пастерелл ( Газ teure 11 a. multocida. . - соротипаш A.B.Д. и PasteufcollQ imemolytica • ). Показано положительное влияние лактобакгеркна и иммуномодуляторов (Т- и В-активина) на факторц неспзцифической резистентности п специфической иммунобиологической реактивности толяг.
Практическая ценность работа. Результата исследований о положительном влиянии лакгобактершю.н иммуномодуляторов.на морфа^уи-кциональные изменения в органах колудочно-кищачного тракта телят рашшго возраста позволяют.нспрльзовать их при лечении и профилактике указанных заболеваний. '.
Структура и объем диссертации. Диссертация состоят из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения полученных данных, выводов, рекомендаций по использованию научных выводов и списка литературы. Объем диссертации составляет 226 страниц машинописного такс та. .Диссертация содержит 21 таблицу, 58 рисунков. Список литературы включает SOI паимэ-иованко, из них 198 советских и 103 зарубсшшх авторов.
Осногшш положения диссертации, вшоокшо на защиту :
I. Данные морфофункциопалышх изменении органов келудочно-кшечиого тракта'телят, заракошшх &нторобактерияг,гд и культурой иасторалл. 1
2. Результаты сравнительного анализа влияния лакгобактери-на и иммуномодуляторов на органы желудочно-кишечного тракта телят, зараженных энтвробактериями и культурой яастеролл. ;
' СОБСТВЕННЫЕ ИССЯЕИОВАНШ
I. Материал в'метода исследования '
Представленная работа является составной частью комплексных исследований, проводимых на кафедре патологической анатомии п в лабораторий по изучению болезней молодняка К©А.
• Материалом, для исследования служили'рубец, сетка, книжка, сычуг, двенадцатиперстная, тощая, подвздошная, слепая, ободочная и прямалкяпкн и регионарные брыжеечные лимфоузлы, взятые . от 18 холят черно-яестроХ породы. Для исследования влияния лак-тобактерийа и шялуномодуляторов при диарее животные были разде-. ленн на 4 группа: телята из контрольной гругаш (2 зевотных), толята на 4-Я день поело заражоция ассоциацией микроорганизмов из семейства энтеробактврий (3 животных), телята на 4-й день после заражения'энгеробактараяка с предварительным применением лакто<Зактерина (4 животнше) и телята на 3-й день, после заражения энтеробактерияш о предварительным применением лактрбакте- • ряна и ищуномодуляторов (З аивотннзс). КааднЭ теленок был зара-sea в дозе 2 млрд микробных тол каадой культуры, состоящей из «ИкроЬрганизмов ! X. ео11ЕР£С-2, Salmonella typhi mirlum-г«Clt-ro^acter frevUlT2,Proteu » vulgàrle-iid.pne^fKii^K трименялл с момента рождения теленка в дозе I таблетки 3 раза J день (I тайлётка содержит 10 шрд микробных .тел Ii.fermenti Ю Ï-C4i.biplantàru« 8Р - A3 ' ); Т-активий и В-активин в до-ie соответственно I мг л6 мг вводили подкожно ; в области :шеи lia 5 дней до заражения энтеробактерияш. Для изучения влияния (ммуномодулягоров яри пастервллаза животные были разделены на I группы: телята на первый день\ посла заражения культурой па-терелл (. Fastéurella nul-tocl<t, A,B,V, Piwteurella haemolytic^ I : дозе I мл (I мл содержит 8000 микробных тел) внутримышечно в Фгасти крупа (3 животных) ;И телята на первый день после зара-ения культурой пастералл с.предварительным применением Т-акти-г ина и В-активина в дозе соответственно I мг и 3 мг за 30 мин о заражения. Экспериментальные телята на 3-й и-4-й дай после аралсения подвергались патологоанатомическому встрыпго в
секционном зале кафедры патологической анатомии и физиологии МВД. На каадоа животное бнл составлен протокол патологоанатоми-ческого вскрытия. Кусочки органов желудочно-кишечного тракта размером 1x1x0,5 см фиксировала в 10^-ном растворе нейтрального формалина z жидкости Карнуа.. Материал обрабатывали по общепринятой штодика на кафедре патологической анатомии (Д.Киссел,1962; Р.Дилли, 1969; Г.А.Меркулов,1969). С парафиновых блоков на рота-: 'ционноы микротоме модели (165) Rotocut ,Reichert Jung получили гистосрезы толщиной 5-7 шш. Из материала, фиксированного з IQg-HOM раствора нейтрального формалина, в замораживающем микротоме модели 1205 Reichert Jun£ готовили гистосрезы толщиной 15 мкм. Для обзорных целей гистосрезы окрашивали гематоксилином Майера в эозином; коллатвиоша волокна по вал Гиэону, Дезоксирибонуклеопротеидн .(ДНП) выявляли по фельгёну Р.-Розен-боку X., рибонуклеопротвиды (РШ) - по Брате Д. с гликоген -по Шабадашу A.JL, липиды - Суданом Ш по Дадди Л., эпителиальный, муцин (слизь) - альциановш синим во Моурп. Кроме того, ШЖ-ре-акцига ставили по Мак -Манусу Д.Ф.А., тканевые базофилы (лабро-цити) выявляли паноптичзскш методом по Паппонгейдзу А. Для дифференциации ДНП контрольные гистроерезы перед окрашиванием обрабатывали двзоксйрибонуклаазой, а для дифференции РШ - рибо-нуклеазой. В качестве контроля реакции на гликоген использовали гистосрезы, предварительно обработанные альфа- или бета-амилазой (Пирс Э., 1962; Кононский А.И., 1976). Гистохимические реакции на нуклеопротеида, гликоген, липиды» активность ШШ-реак-ции оценивали по четырзхбаяшьной.системе (Данилова K.M.,1974).
При морфометрических исследованиях • определяли толщину слоев органов желудочно-кишечного т5закта, соотношение ворсинок и крипт в тонком отделе кишечника или ямочек а налез в сычуге, подсчитывали количество жолаз или крипт. В строме собственной пластинки и водслизисгой основе подсчитывали количество тканевых базофилов, лимфоцитов, нейтрофальных; лейкоцитов, плазмоци-тов и макрофагов, а такке находили их процентное соотнотзние. В брвкеечных лимфотичоскях узлах проводили измерение коркового, паракортикалъного и мозгового слоев, определили количзство тучных клоты: в корковом и мозговом веществе, количество лимфоцитов, нейтрофильных лейкоцитов, плазмоцитов к макрофагов, находили их процентное соогяошзяио (Даглегова Л.В., Капралова JT.T., Тер.мелзза А.Г., 1986). Микроскопические наблюдения проводили с помощью микроскопа МШ-З при уваличонии ок.х7„ х10 и объект.
х9, х20, х40. Полученные цифровые данные обрабатывали методом вариационного и однофакторного дисперсионного анализа.
2. Патоморфалогическив и гистохимические изменения , органов желудочно-кишечного тракта у телят раннего возраста, зараженных ассоциацией микроорганизмов из семейства энгеробактерий
У телят, зараженных энтеробактериями, патологоанатомические изменения были более тяяелые и характерны для острых желудочно-кишечных заболеваний. Патологические изменения в органах желудочно-кишечного тракта характеризуются набуханием слизистой оболочки, покрытием еб густой прозрачной или сероватого цвета слизью, гиперемией и точечно-полосчатым кровоизлиянием, а так&е эрозиями а изъязвлениями. Патологические изменения наблюдаются не только в сычуга и тонком кишечнике, но и в лредаелудко и толстом кишечнике в виде острого катарального воспаления. Регионарные брыжеечные лимфоузлы в области пораженного участка кишечника увеличены а объеме и гиперемированы.
При гистологических исследованиях в преджелудках наблюдается десквамация поверхностного слоя эпителия слизистой оболочки, вакуолизация эпителиальных клеток и инфильтрация нейтрофиль-ныма лейкоцитами» В сычуга установлены вакуолизация протоплазмы эпителиальные клеток, эрозия, некрозы и очаговые изъязвления слизистой оболочки и утончение её. Морфометрически толщина ямочек в фундальной части была равна 68,00+45,49 мкм против у контрольных - 108,00+48,00 мкм. Число желез в фундальной части у зараженных - 4,2+1,4 (у контрольных - 6,6+0,4; Р> 0,05).
В тонкой кишечнике обнаруживаются выраженный дескваматив-ннй катар и изменение формы ворсинок. Ворсинки подвергаются дес-квамации, оголению, утолщению, укорочению {В.П.Шишков,1967;Т.И. Нинеева, 1975).
Дистрофические и некротические процессы также характерны » толстом кишечнике. Изменения эпителиального покрова слизистой >болочки резко выражены во всех частях толстого отдела кишечника.
Поражение регионарных лимфоузлов обычно пропорционально пощаженным участкам кишечника. Характерным является изменение моз- ' 'ового слоя узла в виде гиперемии, отёка диапедезных кровоизлия-шй, разроста ретикулярных клеток. Обнаруживаются гиперплазия юркового слоя, образование фолликулов без центра размножения.' 'еактивные центры фолликулов нечетко выражены -за счет заполне-[ия лимфоцитами, -лейкоциташ, гистиоцитами, и макрофагами. ': .-У/0 •
^ Гистохимические исследования показывают, что у телят, зараженных энтеробактериями, слизеобразование а поверхностном'эпителии происходит неравномерно. В сычуге, где сохранена эпителиальная структура, обычно ШИК-раакция бияа положительной,окрашивание альциановым синим било слабо положительным. У телят из контрольной группы ШИК- и альциановоположигельные вещества содержались в большом количестве, их интенсивность была неравно-'. « мерной в разных участках слизистой оболочки. Наличие кислых гли-козоашногликанов, окрашивающихся альциановым синим, в зоне ■ интенсивного клеточного деления обеспечивает надёжную защиту молодого эпителия от протеолитического действия желудочного сока.(Д.С. Саркисов, Л.И. Аруин, В.П. Туманов, 1982). Учитывая защитную роль кислых гликозаминогликанов, можно предполагать, что у телят при острых желудочно-кишечных заболеваниях нарушается клеточное обновление слизистой оболочки желудка. В слизистой тонкого и толстого, отделов кишечника ¡гоже отмечено уменьшение количества гликозоаминогликанов,-что является одним из факторов, способствующих нарушению обменных процессов (М.А.Бабур,1967).
• Согласно В.П.Шшдкову (1967), у 'телят при острых желудочно-кишечных заболеваниях изменения в белковом, углеводном и жиро- : вом обмене вещестб сочетались со снижением количества РНП в клетках печени, нервной системы, хшшечного эпителия, что также установлено нашими исследованиями в эпителиальных клетках пред-желудков, сычуга и кишечника..
Как отмечал ряд.авторов, в норма в кишечнике существует градиент РНП, при котором «лотки крипт содержат много РНП, •' в клетках, покрывавдих ворсинки, РВД значительно меньше к концену . трация их отчетливо. снижается по направлению к вершине крипт и ворсинок. В наших исследованиях этот градиент РНП сохраняется у контрольной группы, а у зараженных телят оп отсутствовал. В эпителиальных покровах желудочно-кишечного тракта у зараженных телят количество ДНП уменьшено по сравнению с незараженнышг, в генеративной зона слизистой оболочки. . ,
К.А. Зуфаров (1970), АЛЛ. Уголев (1978) отмечают, что при гиперплазии органов желудочно-кишечного тракта увеличивается масса и поверхность слизистой,оболочки оставшихся но пораженны-,ш отделов, удлиняются и расширяются ворсинки и в криптах возрастает митоиЛеский индекс. В наших исследованиях не наблюдались выраженные пролиферативныа изменения слизистой оболочки в качестве колшенсаторно-приопоооблталышх процессов, ведущие
к увеличению всасывающей поверхности. Оголение ворсинок и дес-' квамация эпителиального покрова кишечника говорят.о полной блокаде митоза, как это наблюдается в материалах, окрашенных по . Фельгону-Розенбеку, с уменьшением количества ДНП. '
3. Влияние лактобактерина на морфофунквдональные изменения в органах желудочно-кишечного тракта у телят, зараженных асйоциацией микроорганиз- : мов из семейства энтеробактерий
Наши исследования показывают, что лактобактерин благотворно влияет па морфофункционашше изменения в органах желудочно-кишечного тракта у телят, зараженных энтеробактериями. При патоло-гоанатомическом исследовании отмечали более локализованные и конео выраженные изменения п органах желудочно-кишечного тракта. Патологоанатомические изменения наблюдались в сычуге и кишечнике, характеризовались слабо, выраженными воспалительными процессами..
При гистологическом исследовании установлен острый катаральный гастроэнтерит со слабо выраяфшыш десквамативными и некротическими изменениями. У данных телят наблюдалось хорошее развитие желез и крипт, в частности, бруннеровых желез. В подвздошной кишке отмечали более выраженную гиперемию, выраженное развитие пей-еровых бляшек. У телят, зараженных энтеробактериями с предвари-, тельнш применением лактобактерина, предаелудок сохраняет нормальную структуру, слизистая оболочка сычуга и кишечника меньше подвержена деструктивным изменениям, чем у зараженных, что доказывалось не только гистологическими, но и морфометрическими данными. У телят данной группы толщина ямочек и желез кардиальной, фуядальной и пилорической частей сычуга равно 128,00+18,55 и 250,00+32,39; 150,00+28,89 и 301,52+12,79; 141,00+19,07 и 263,00 +29,05 мкм против у зараженных 84,00+42,77 и 240,00+30,02 ; 88,00+5,33 и 258,33+5,33; 85,74+0,94 и~284,80+73,72 мкм(Р> 0,05). В кишечнике большой разницы морфометрических показателей между двумя группами не наблюдала. Соотношение толщины ямочек (ворсинок) и желез (крипт) в сычуге а гонком кишечнике было больше,чем у зараженных телят. У телят при заражении энтеробактериями с предварительным применением лактобактерина соотношение ямочек й желез кардиальной части равно 0,54+0,12; фундальной - 0,51+0,10; пилорической - 0,58+0,14; против у зараженных - 0,41+0,20; 0,31+0,16; 0,30+0,21. Морфометрически установлено, что у зараженных телят с предварительным приманенном лакто'бактерина количество. желез и крипт больше, чем у зараженных," но на предварительно :
л^е-
обработанных лактобактерином.
Брыжеечные лилйоузлы маньша подвергались патологическим изменениям, имели более сохраненную структуру у телят 1-ой группы, по сравнению с телятами 2-й группы; но лимфофолликулы в них мало развиты и со слабо выраженными центрами размножения.
Гистохимические исследования показали, что у зараженных телят. с предварительной обработкой лакгобактерином повышена се- . креция слизи (гиперсекреция) и увеличено количество бокаловидных клеток; активизирован митотнческий процесс в генеративной зоне слизистой оболочки пищеварительного тракта. Количество нейтральных -и кислых глюкозамйногликалов'увеличено на поверхности слизистой оболочки .равномерно у телят-данной группы в отличие от зараженных, но не обработанных лакгобактерином. У телят данной группы клетки перешеечной области сычуга и в криптах кишечника, где происходит миготический процесс, содержали нейтраль-' ные гликозаминогликаны; количество кислых гликозаминогликанов в них по сравнению с поверхностным эпителием несколько возрастает. В частности, выраженное повышение слизеобразования обнаруживается в слизистой оболочке прямбй кишки. У .телят донной группы в генеративной зоне колудотао-кишечного тракта содержание ДШ и РШ увеличено по сравнению с другими областями, фигуры митоза и количество ядер в повышенном числе обнаруживаются именно в клетках этой зоны.
Морфоыегрически установлено, что у телят данной группы лейкоцитарная и лимфоодхарная реакции неравномерно повышены в зависимости от состояния органов желудочно-кишечного тракта. В сычуге и тонком кишечнике, где чаще наблюдался серозный отёк, разница ..между двуш группами не существенна. Но в толстом кишечнике количество лейкоцитов у телят подопытной группы в слизистой оболочке слепой кишки равно 9,88+0,39 против у зараженных - 2,98+0,85.(Р < 0,05), ободочной - 10,78+1,81 против у зараженных"- 6,35+2,40 (Р > 0,05); в прямой - 13,05+2,35 против у аараженних 3,80+2,50, (Р < 0,05). Количество лплфовдтов.плаз-моцитов и макрофагов умеренно повышено. В мозговом синусе лимфатических узлов количоство лейкоцитов у телят подопытной группы было 4,95+1,65, лимфоцитов - 49,03+4,22, плазмоцитов -15,05+2,49, макрофагов - 14,95+1,44 против у зараженных -7,26+4,50; 33,3-7+8,25; 1,80*1,62 и' 18,63+3,35 (Р > 0,05)\ Как показывают количественные измерения тучных клеток в собственной пластинка и в подслизистой основе желудочно-кишечного тракта',
телят данной группы количество тучных клеток повышено по срав-вниш с показателями у зараженных (Р > 0,05). Количество ниро-инофлльных клеток меньше, чем у зараженных, но больше, чем у елят из контрольной группы.
Вышеизложенные материалы позволяют заключить о благотворном лиянип лактобактерина на органы желудочно-кишечного тракта тент при заражении их энтеробактериями с точки зрения нормализа-ии микрофлоры, подавления развития патогенных и условно-пато-еняых микроорганизмов из семейства энтеробактерий; уменьшвнно-о действия патогенных антигенов; положительного влияния на санаторную функцию и пищеварение, которые описаны рядом авторов О.В. Чахова, 1972;. В.Т. Петровская и соавт.,1977; К.Я.Соколова, 980; Е.С. Воронин и соавт., 1988).
4. Влияние лактобактэрнна и ишуномодуляторов (Т- и • В-акгивщш) на морфофункциональные изменения ор-
-•. ганов желудочно-кишечного тракта у телят,зараженных ассоциацией микроорганизмов из семейства энтеробактерий ■
При исследовании органов желудочно-кишечного тракта у телят одопытной группы было установлено, что патологоанатомическиа змененил в'них отсутствуют. При гистологических исследованиях бнаружено,-что.органы желудочно-кишечного тракта имеют четко цражошшб морфологические и морфомэтрическио показатели,близкие нормо, а патогистологические изменения характеризуются ограни-зшшм и слабо выражонншл воспалительным процессом.
В преджелудках ороговеваюций процесс четко выражен, базаль,-ий, шиповатый, зернистый и роговой слои имеют свои характерные собенности. Ямочки и железы хорошо развиты и их плотность рас-эложения увеличена. У данных телят толщина ямочек и крипт желез оставляет 124,00+38^16 и ¿91,33+20,67 мкм в кардинальной части ичуга, в фундальной - 136,00+4,00 и I82,00j;58,00, в. пилориче-кой - 196,00+4,00 и Г76,67+70,68.мкм. Соотношение толщины ямо-эк и аелоз в кардаальной части равно 0,62+0,14, в фундальной -,82+0,24, в пилорической - 0,76+0,32. Таким образом, соотиоше-яа ямочек и желез у телят данной группы больше, чем у телят ругих групп. Количество желез в сычуге в кардцальной части рав-з 7,36+1,94, в фундальной - 6,67+0,33 и в пилорической - 8,88+ ,13. Эти морфомотрическме данные показывают, что у телят под-зытной грухпш больше развиты ямочки и железы, с более широкой щеварительной поверхностью. Большинство поверхностных и ямоч-а апитедзоцитов ш,!оот свою структурную полярность, апикальная
И( базальная части их хорошо различимы. У телят данной группы гистологические изменения в сычуге характеризуются повышенным сли-зеобразовакием и высоким уровнем митозов; количество добавочных клеток увеличено. Местами наблюдаются сравнительно сильная гиперемия, слабый отёк и инфильтрация , лейкоцитами и лимфоцитами. В кишечнике большинство ворсинок и крипт сохраняют свой покровный эпителий, некоторые ворсинки, в частности их апикальные части, подвергаются слущиванию. Шаровидная или яйцевидная форма ворсинок, слипание ели срастание их но характерны. Толщина ворсинок и крипт в 12-перстной кишке равно 267,67+48,79 и 277,67+17,02,в тощей - 371,00+77,00 и 218,00+46,00, в подвздошной - 327,67+ 35,48 и 245,33+18,67 мкм. Толщина крипт в слепой кишке равна 396,67+48,25, в ободочной - 426,33+27,79, в прямой - '385,67+ 58,Ов мкм. Йоотношение ворсинок и крипт а 12-перстной кишке равно 0,91+0,23, в тощей - 1,86+0,75 и в подвздошной - 0,93+0,14; количество крипт в 12-перстной кишке - 10,75+0,88, в тощай -7,00+5,-00, в подвздошной - 9, ОМ), 40, в слепой - 6,63+0,49, в : '■„ ободочной - 6,38+0,93 и в прямой - 6,44+0,29. Соотношение толщины ворсинок и крипт у телят, данной грушш менее отличию от 1 телят третьей груши и больше - от телят второй грушш.
Патогистологические исследования показали, более выраженный защитно-приспособительный процесо в сычуга и кишечника (хорошее развитие желез и крипт, умеренная гиперсекреция, увеличение количества бокаловидных клеток); воспалительный процесс протекает со слабо выраженной дескваыацией эпителия. Пейеровы бляшки и другие лимфоидане образования шали четко вырезанный центр раз= мнохения, повышенную гиперемию и были хорошо развиты. Брыаеечные лимфатические узлы хорошо сформированы и отчетливо дифференцированы о гиперплазией коркового вещества, формированием вторичных и третичных фолликулов и образованием центра размножения и о гиперемией.В.М. Журавлева соавт.(1990) пишут, что введение вшуноиодулируццих препаратов оказывает определенное стимулирую- . щее влияние на лимфатические узлы в ва иммунокомпетентные клетки плазматического ряда. '
Гистохимические исследования дают основание предполагать о том, что у телят данной грушш наблюдается усиленное функционирование клеток поверхностного й вдипточного эпителия желудочно-кишечного тракта, интенсивная ыорфофуикциональная дафферекциров-ка клеточных элементов желез и кряпт, что, по-видимому, обусловлено интенсивностью яолудочно-кшкин&го пищеварения и повышением
ащптно-приспособитальных процессов. У телят данной группы повинна секреция слизн, которая окрашивается интенсивно не только ШИК-реакции, но и альциановым синим, содержание ДНП и РШ уве-ичено в органах желудочно-кишечного тракта, высока митотичео-ая активность в зоне регенерации. Что касается лейкоцитарной еакции, то у данных телят наблюдалось достоверное повышение ко-ичества лейкоцитов'в собственной пластинка подвздошной кишки в мозговом синусе лимфатических узлов. Количество тучных кле-ок повышено в тонком кишечнике и количество пиронинофильных леток - в сычуге и тонком кишечнике, где обнаруживаются более ыраженные изменения. В литературе отмечают, что ишуномодулято-н вызывают гиперплазию лимфатических узлов, оказывая стимуяи-укщее влияние на лимфатические узелки, паракортикальную зону, орковое. штата, мозговые тяжи, мозговой промежуточный синус, a акже на клеточные реакции (бласттрансформациа, количество мито-ически делящихся клеток, лимфобластов, макрофагов и плазматиче-ких клеток разной степени дифференциации; наблюдается известный араллелизм между степенью перестройки подвздошного лимфагиче-кого узла и введением синтетических иммуномодуляторов (Ю.И.Бо-эдин и соавт., 1990)..
i Наши исследования показали, что у зараженных талят с приме-энием.лактобактерина и иммуномодуляторов.защитно-приспоообитель-зя реакция более выражена, чем у зараженных; телят с применением штобактерина, что также.отмечает ряд авторов (Т.Н.Грязнева, ,Б. Павлова, Е.С. Воронин, 1991;А.М.Никитеяко,Л.А.Зайка,1984).
5. Влияние иммуномодуляторов (Т- и В-активины) на морфофункциональные изменения органов желудочно-кишечного тракта у телят, зараженных культурой пастэрелл
Согласно дашьаГряда авторов (Ф.М.Орлов, 1971; Р.В. Душк, )87; G.R. c*rter ■, I960), при сверхостром и остром течении , ютереллеза обнаруживают измено1Шя, свойственные септицемии : южественяно кровоизлияния, гиперплазию лш.*$атичвских узлов, соплекиэ сорозяо-фябрянозного экссудата, наличие многих инфиль- • атов в подкожной клетчатке, в слизистых и серозных оболочках, наших патологоанатомических исследованиях установлено, что у 1лят, зараженных культурой пастеролл, в органах желудочно-ки-1Чного тракта проявлены, в основном, сильная гиперемия, отйч-сть, повышение слизеобразования, но не характерны точечные , ювоизлияния и геморрагическое воспаление, а также на^Злюдалось льное поражение прадаелудков, которое редко отмечалось при
острых желудочно-кишечных заболеваниях и характеризовалось ¡набуханием, серозным отёком и гиперемией слизистой оболочки.У .телят, зараженных культурой пастерелл с предварительным применением Шг ыуномодуляторов патологоанатоыичаские изменения характеризова- ' лись менее выраженным и ограниченным серозно-катаралышм гастроэнтеритом и лимфаденитом. При гистологических исследованиях-сычуга телят, зараженных культурой пастерелл, наблюдаются некротические и десквамативные процессы, сосудистая реакция типа гиперемии и диапедеза эритроцитов, изменение ямочной и ворсинчатой | структуры, атрофия слизистой оболочки и пролифэративныа процессы в собственной пластинке. У телят, зараженных культурой пастерелл с применением иммуномодулдторов, вышеизложенные изменения менее выражены и с преобладанием дистрофических процессов типа слизистой дистрофии и гиперемии.
Как показывают морфометрические данные, у телят,зараженных культурой пастерелл, толщина ямочек и налез в кардиальных частях равна 84,00+0,00 и 188,00+28,00, в фундашшх - 81,33+16,11 и 238,33+19,72, в шиоричоских - 68,67+34,38 и 437,00+103,17 против у зараженных телят с применением иммуномодуляторов - 95,33+ 14,44 и 257,00+53,98; 142,00+10,39 и 310,00+49,65; 172,00*38,16 и 371,33+72,45 мкм (Р > 0,05). Соотношение толщины ямочек и желёз у зараженных телят равно в кардиальных 0:12+0,12, в фундаль-ных - 0,33+0,04, в пилорических - 0,20+0,10 против у зараженных телят с применением иммуноыодулятором - 0,40+0,09; 0,49+0,22 ; 0,46+0,22 (Р > 0,05). Как видно из цифровых данных, слизистая оболочка у зараженных телят более изменена, чем у зараженных телят с црШацшшвы Иммдаомодуляторов. Количество желёз в кардиаль них частях равно 8,31+1,65, в фундальных - 5,44+0,45, в пилорических - 5,87+0,22 против у зараженных телят с применением имму-номодуляторов соответственно - 13,33+0,75; 12,25+0,24; 11,49+ 0,18. Разница между двумя группами достоверна (Р < 0,05).
В тонком в толстом кишечнике телят, зараженных культурой пастерелл, гистологические изменения характеризуются некротическим и десквамативныэ. процессом, расширением и полнокровием сосу дов, изменением ворсинок и крипт, тогда как дистрофический процесс слабо выражен. У телят, зараженных культурой пастерелл с применением ишуномодуляторов, наблюдаются повышенная слизистая дистрофия, слабо выраженные некроз, дисквамация и сильная гиперемия. У телят, зараженных культурой пастерелл, изменение форм ; и величины ворсянок наблюдается часто, ворсинки укорочены,деформированы, некротизирозвны. У телят, зараженных культурой
юстеролл, толщина, ворслЬок и крипт в 12-парстной кипка равна [20,00+79,31 и 338,67+42,31, в тощей - 233,33+29,06 и 325,33+ 14,56, в подвздошной - 172,00+89,35 и 357,07+70,11.мкм против у зараженных телят с применением иммуномодулятороз - 200,00+60,00 I 413,00+36,59; 258,67+30,70 и 252,00+54,44; 288,33+36,55. и 135,00+68,73 мкм (Р > 0,05). Соотношение толщины ворсинок и <рипт у зараженных телят в 12-перотной кишке равна 0,42+0,32, в ющей - 0,77+0,18, в подвздошной - 0,61+0,22 против у зараженных :елят с применением имлуномодулягоров - 1,25+0,52 ; 0,90+0,11, 5,68+0,99 (Р > 0,05). Толщина крипт в слепой кишке у телят,зара-генных культурой паотерелл, равна 380,33+71,37, в ободочной -$77,33+38,94, в прямой - 315,33+30,34 мкм против у зараженных :елят с применением иммуномодулягоров - 346,00+21,93; 352,00 + !6,72; 373,33+56,96 мкм (Р > 0,05). У телят, зараженных культурой тсгерелл с применением иммуномодуляторов, в пзйеровых бляшках пе »ткочались четкие типичные фолликулы, а встречались диффузные щмфоцитарныо скопления без разделения и•образования фолликулоз, (а всем протяжении кишечника с хорошо сохраненной, слизистой обо-гочкой. Такие диффузные лимЬоцитаркыа инфильтраты наблюдались нэ 'олько 'в подвздошной кишке, но и в других отделах, кишечника. Нам гредставляется, что такая форма скопления лимфоцитов без четких фолликулярных структур имеет определенное значение в отношении »ыстрого проявления иммунной реакции. У зараженных телят состояла лимфатических узлов характеризуется резкой гиперемией кровэ-юсных.сосудов, уменьшением в размерах фолликулоз и коркового ве-¡ества п опустошением их от лимфоцитов, пекробиотический процвс-юм. У зараженных телят с. применением иммуномодулятороз в лимфо-■ических узлах обнаруживаются гиперпластические процессы и резкая гиперемия, хорошее сформирование фолликулов и пролиферация ашфобластов, плазмойластов и макрофагов.
Гистохигдоческие изменения совпали с гистологическими, что ¡видетельствует о нарушении защитно-приспособительной функции п >егенератявного процесса у телят, зараженных культурой пастероял; :ильно уменьшено количество ШИК-пататлтвльного вещества, РНЕ к . Ш по сравнению с телятами с применением иммуномодуляторов. !ор$о;летраческио данные показывают, что у зараженных телят с риыененпем иммуномодуляторов количество лимфоцитов и пиронико-яльных клеток в некоторых отделах желудочно-кишечного тракта плъно увеличено с наличием достоверной разницы по сравнению с араженными телятами, что, по-видимому, связано с положительным
влиянием иммун омодулят оров • # ¿,
В литературе мы не нашли данных о применении иммуномоду-ляторов при пастереллеза, многие авторы отмечает положительное влияние их при других заболеваниях (Т.В. Павлов, 1989; Е.С.Воронин, ЛЛ. Ставцева, Т.Н. Грязнева, 1990).
ВЫВОДЫ
1. У новорожденных телят, экспериментально зараженных ассоциацией микроорганизмов из семейства энтеробактерии ( В. coli, ЕРВС-2, Salmonella typimuriura-2, Citrobacter freudi-2, Proteua vuigBj-is-3i>a.fotu»p»;£i^), развивается острый катаральный гастроэнтерит, характеризующийся ярхо.выражашшми' .альтеративнйми (ди-строфичесюйаи и некротическими), экссудатзвными (гиперемией, . серозным отёком и диапедезом) и слабо выр^ённышГпрога^ратйв-ными процессами, что приводит -к яар^ёпйю шаде.в^
ции, защитно-приспособительных и регенераторных реакций. ;
2. Влияние лактобактернна, на. органы ж^дотао^йашечного : тракта телят, зараженных ассоциацией1шсроорганпзмов из семейства энтеробактерий, выражается более означеннымпоражением, повышенной защитно-приспособительной реакцией^'(^взшением.количества обкладочных, слизеобразуицих и -ту^шых'-клатой), и'шЩе-у верительной функции (повышением количесгважелёзвсычуте, . крипт и бруннеровых желез, гиперсекрецией).
3. Кошлексное применение лактобактернна и иммуномодулято-ров (Т- и В-активкна) на телятах, зараЕенннхассоцкадаеймикро-организмов из семейства энтеробактерий, отзывает положительное влияние не только на неспецифические факторы резистентности к пищеварительные железы, но и на спацифическу1) шллукобиалогиче-скую реактивность с активацией лейкоцитарной и лшлфоцитагяой ' реакций,' выраженным формированием и дпффере-чцированием пейеро-вых бляшек и регионарных лш|атических узлов, повыш9нием количества пирояинофильннх (лиь^юбластов и плазмобластов) и тучных клеток в них и в стг"мо слизистой оболочки.
4. Культура пастералл у 45-даевных телят вызывает острое . катарально-некротнчэское воспаление органов желудочно-кишечного тракта и острый серозно-некротический лимфаденит. При этом развиваются атрофия, некроз и дескваыацня эпителия слизистых оболочек, гиперемия и стаз, снижается количество лимфоцитов в
;орковом и мозговом вещество мезентеральных лимфатических уз-;ов и пейеровых бляшек; низка лейкоцитарная реакция.
5. Иммуномодуляторы оказывают положительное влияние на ораны желудочно-кишечного тракта телят, зараженных культурой астерелл. Влияние иммуномодуляторов характеризуется ограничении и менее выраженным поражением органов желудочно-кишечного ракта, диффузной лимфоцитарной реакцией, повышенным лейкоцито-ом, увеличением количества клеток монснуклеарно-макрофагальной : плазмоцитарной систем.
СВЕДЕНИЯ О ФАКТИЧЕСКОМ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ПОЛУЧЕННЫХ .' НАУЧНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ
Полученнце данные используются в учебном процессе и в лабо-аторной практика.патологической анатомии а физиологии имени .И. Коропова Московской-ветеринарной академии им. К.К.Скрябина.
РЕШ-.ЕВДЩИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ
1. Получашше данные рекомендуем использовать для дальнай-ого изучения вопросов патогенеза, патоморфогенеза и диагности-и острых желудочно-кишечных заболеваний п пастораллеза толят,
2. Результаты исследований о положительном влляшш лакто-¡актерина и иммуномодуляторов (Т- и В-актиэина) на органы желу-;очно-кимечпого тракта рвхомэпдуем использовать для их лримеяэ-1ш при лочошш и профилактике указанных заболеваний.
3. Результаты проведенных исследований могут бить исполь-ованы при издании соответствующих учебных пособий и в учебном
Г1
:роц9ссв в зооветеринарных вузах. «