Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Разработка и усовершенствование средств и методов лабораторной диагностики оспы овец и оспы коз

ДИССЕРТАЦИЯ
Разработка и усовершенствование средств и методов лабораторной диагностики оспы овец и оспы коз - диссертация, тема по ветеринарии
Машнин, Александр Валентинович Покров 2001 г.
Ученая степень
кандидата ветеринарных наук
ВАК РФ
16.00.03
 
 

Оглавление диссертации Машнин, Александр Валентинович :: 2001 :: Покров

1. ВВЕДЕНИЕ.

1.1. Актуальность темы.

1.2. Цели и задачи исследования.

1.3. Научная новизна.

1.4. Практическая значимость работы и реализация результатов исследований.

1.5. Апробация работы.

1.6. Публикации.

1.7. Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту.

1.8. Объем и структура диссертации.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Морфологическая и физико - химическая характеристика вирусов оспы овец и оспы коз.

2.2. Эпизоотическая обстановка по оспе овец и оспе коз.

2.3. Патогенез оспы овец и оспы коз и клиническое проявление болезни

2.4. Антигенная взаимосвязь между каприпоксвирусами.

2.5. Родство каприпоксвирусов с другими представителями семейства Poxviridae.

2.6. Генетическое родство каприпоксвирусов.

2.7. Диагностика оспы овец и оспы коз.

2.7.1. Вирусологические методы исследований.

2.7.2. Серологическая и ретроспективная диагностика ООиОК.

2.7.3. Молекулярно - генетические методы.

 
 

Введение диссертации по теме "Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология", Машнин, Александр Валентинович, автореферат

1.1. Актуальность темы

На сегодняшний день оспа овец и оспа коз (ООиОК) широко распространены в странах Африки, Азии, и Ближнего Востока. Данные заболевания наносят значительный экономический ущерб, состоящий как из прямых потерь - недополучения продуктов животноводства, так и из косвенных, а именно, затрат на проведение ветеринарно-санитарных и охранно-карантинных мероприятий.

На территории бывшего Советского Союза напряженную ситуацию по оспе овец и оспе коз удалось нормализовать после внедрения в 50-х годах гидроокись алюминиевых формолвакцин против оспы овец и оспы коз [4, 28].

С 1994 по 1997 гг. оспа овец и оспа коз вновь начали быстро распространяться по югу России, Северному Кавказу и странам СНГ [48. 112]. В этот период в РФ было зарегистрировано 80 неблагополучных пунктов, в которых заболело и пало 13023 и 6993 животных, соответственно. Отдельные случаи заболеваний регистрировались в 1999 г. в Читинской области и в 2000 г. в Астраханской области [112]. Одной из основных причин разви тия эпизоотии явилась несвоевременная диагностика заболеваний, приведшая к запоздалой информации о распространении инфекций. Поэтому для успешного контроля и борьбы с этими инфекциями особую актуальность приобретает разработка новых методов диагностики ООиОК.

Существующие на сегодняшний день серологические методы лабораторной диагностики ООиОК - реакция нейтрализации (РН). реакция диффузионной преципитации (РДП), реакция связывания комплемента (РСК) и ее варианты, реакция иммунной флюоресценции (РИФ), иммуноферментный анализ (ИФА) - направлены на обнаружение вирусных антигенов и вирус-специфических антител. В данных реакциях используются иммунореагет ы на основе поликлональных антител или специфических культуральпых антигенов. Однако., из-за близкого антигенного, серологического родства вирусов оспы овец и оспы коз (ВООиОК) с вирусом контагиозного пустулезного дерматита (ВКПД) и существующих перекрестных реакций между ними, данные методы обладают недостаточной специфичностью [66, 95, 117. 119. 105, 133]. Более того, способность близкородственного ВКПД и ряда других вирусов, вызывать заболевания с клинически сходной картиной требует развития чувствительных, специфичных и экспрессных методов дифференциальной диагностики. Одним из перспективных направлений в диагностике инфекций, в том числе и особо опасных вирусных болезней мелких жвачных, являются методы ИФА на основе моноклональных антител (МА), широко применяемые в лабораторной практике [23, 24, 41. 42].

Таким образом, указанные выше причины обусловливают актуальность разработки современных средств и методов лабораторной диагностики оспы овец и оспы коз на основе МА.

 
 

Заключение диссертационного исследования на тему "Разработка и усовершенствование средств и методов лабораторной диагностики оспы овец и оспы коз"

6. ВЫВОДЫ

1. Установлено, что перевиваемая линия клеток почки овцы обеспечивает высокое накопление ВООиОК, что позволяет получать концентрированные и очищенные вируссодержащие препараты с инфекционной активностью до 7,0-7,5 lg ТЦД50/см'1; активностью в РДП - до 1:8, пригодные для иммунизации животных с целью получения диагностических сывороток и МА.

2. Разработана схема получения МА, позволившая получить 10 линий гибридных клеток, стабильно продуцирующих моноклональные антитела, специфичные к антигенным детерминантам полипептидов молекулярной массы 30 и 37 кДа вирусов оспы овец и оспы коз.

3. Установлено, что антигенные детерминанты полипептидов молекулярной массы 30 и 37 кД BOO, выявляемые МА клонов 010.2 и 08.3, соответственно, являются высоко консервативными, присутствуют у всех изученных штаммов ВООиОК и отсутствуют у антигенно-родственных и гетерологич-ных вирусов болезней мелких жвачных. Это позволяет использовать специфичные к указанным детерминантам моноклональные антитела для диагностики ООиОК методами гистохимического и твердофазного ИФА.

4. Разработана схема иммунизации коз, позволяющая получить гипе риммунные сыворотки, специфичные к антигенам ВООиОК с титром в РДП до 1:64 и РН до 1:256, пригодные для создания иммунореагентов, используемых в иммуноферментном анализе.

5. Разработан сэндвич метод твердофазного иммуноферментного анализа на основе МА клона 08.3 и специфического поликлонального конъюгата позволяющий обнаруживать антигены ВООиОК в пробах патологического материала (кожные поражения и хоаны) от инфицированных животных в титрах до 1:32 и 1:8, соответственно, и дифференцировать указанные возбудители от родственных и гетерологичных возбудителей болезней мелких жвачных.

6. Разработан метод двухфазного ингибирования твердофазного иммуноферментного анализа на основе МА клона 08.3 и специфического поли

128 клонального конъюгата, позволяющий обнаруживать в сыворотках крови животных специфические антитела к ВООиОК в титре до 1:32 -1:64 и дифференцировать их от антител, специфичных к гетерологичным возбудителям болезней овец и коз.

7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Данные, полученные в результате проведения экспериментальных исследований, позволяют рекомендовать для применения в лабораторной диагностике оспы овец и оспы коз чувствительные, специфичные и высоко воспроизводимые методы ТФ ИФА на основе МА.

2. Разработан и предложен для применения в практике ветеринарных лабораторных исследований "Набор препаратов для диагностики оспы овец и коз твердофазным иммуноферментным анализом на основе моноклональных антител". Разработана соответствующая нормативно-техническая документация (Временная инструкция по изготовлению и контролю "Набора.", Технические условия, Наставление по применению "Набора ."), утвержденная директором ВНИИВВиМ.

129

 
 

Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 2001 года, Машнин, Александр Валентинович

1. Ванновский Т.Я. Изучение оспы овец в условиях Средней Азии и разработка специфических средств борьбы с данными заболеваниями.// Болезни овец и коз. М.: Сельскохозяйственная литература. - 1965 - С. 57-64;

2. Ванновский Т.Я. Оспа коз и ее специфическая профилактика. Автореферат дис. . канд. вет. наук. Воронеж, 1966, 25 е.;

3. Гуненков В.В. Изучение наследственных признаков и негенетической реактивации некоторых вирусов группы оспы. Автореферат дис. . канд. биол. наук. Москва, 1966, 16 е.;

4. Гутира Ф., Марек И., Маннингер Р. и др. Оспа овец и оспа коз./ Частная патология и терапия домашних животных. М.: Сельскохозяйственная литература. - 1961. - т.1. - С. 427-444;

5. Диев В.Н., Соколов Л.Н., Окулова О.Н. и др. Получение антигена и гипериммунной сыворотки крови для диагностики оспы овец// Вирусные и микробные болезни животных. Сборник научных трудов. Владимир. -1995. - С. 131-134;

6. Иванющенков В.Н., Кекух В.Г., Кореба O.A. Реактогенные и имму-ногенные свойства вирусвакцины против оспы овец// Ветеринария. 1990. -№ 7. - С. 28-30;

7. Иванющенков В.Н., Кореба O.A., Кекух В.Г. и др. Биологические свойства вакцинного штамма НИСХИ вируса оспы овец// Ветеринария. -1990. -№ 8. С. 22-25;

8. Иванющенков В.И., Кореба O.A., Кекух В.Г. и др. Биологические свойства вакцинного штамма НИСХИ вируса оспы овец// Вирусные и микробные болезни животных. Сборник научных трудов. Владимир. - 1995. -С. 254-259;

9. Инструкция о мероприятиях по предупреждению и ликвидации оспы коз.// Ветеринарное законодательство. М.: Колос. - 1972. - т. 1 - С. 252254;

10. Инструкция о мероприятиях по предупреждению и ликвидации заболевания оспы овец.// Ветеринарное законодательство. М.: Агропромиз-дат. - 1972. - т. 4. - С. 384-388;

11. Западнюк И.Г., Западнюк В.И., Захария Б.В. Лабораторные животные. Разведение, содержание, использование в эксперименте. Киев; Вища школа. - 1983. - С. 195-223; 227-297;

12. Кадошников Ю.П., Деменев В.А., Гайдомович С.Я. и др. Иммуно-электронная микроскопия вирусов комплекса клещевого инцефалита// Вопросы вирусологии. 1984. - № 1. - С. 114-118;

13. Кадымов У.Г., Кунаков A.A., Седов В.А. Оспа овец.// Инфекционные болезни овец. М.: Агропромиздат. - 1987. - С. 186-191;

14. Кадыров У.Г., Борисович Ю.Ф. Оспа животных. М.: Колос. -1981. - 167 е.;

15. Калишникова А.Г., Клейменова Н.И. Кормление сельскохозяйственных животных. М.; Росагропромиздат - 1988. - С. 277-303;

16. Керембекова У.Ж. Совершенствование средств и методов лабораторной диагностики оспы овец. Автореферат дис. . канд. вег. наук. Алмата, 1994,27 с.;

17. Керембекова У.Ж., Гононов Ю.М., Пасечников Л.И. и др. Получение диагностических препаратов для серологических реакций при оспе овец// Вестник сельскохозяйственной науки Казахстана. 1992. - № 3. - С. 122-123;

18. Керембекова У.Ж., Пасечников Л.Н., Никитин Е.Б. и др. Разработка микромодификации РСК для диагностики оспы овец// Вестник сельскохозяйственной науки Казахстана. 1994. - № 2. - С. 45-48;

19. Керембекова У.Ж., Гононов Ю.М., Пасечников Л.Н. и др. Совершенствование средств и методов лабораторной диагностики оспы овец// Актуальные проблемы вирусологии. Тезисы докладов научной конференции. -Гвардейский. 1994. - ч. 1. - С. 135-136;

20. Копа В.А., Пасечникова Ж.И. Изучение возможности выращивания вируса оспы овец штамма НИСХИ без смены ростовой среды// Актуальные проблемы вирусологии. Тезисы докладов научной конференции. Гвардейский. --1994. - ч. 1 - С. 59;

21. Курченко Ф.П., Ива,нющенков В.Н., Уфимцев К.П. и др. Эффективность сухой вирусвакцины из штамма НИСХИ против оспы овец// Ветеринария. 1991. -№ 10. - С. 21-23;

22. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высшая Школа. - 1990. - 352 е.;27а. Лярски 3. Диагностика вирусных болезней животных. М.: Колос. - 1980.-400 е.;

23. Лихачев Н.В. Гидроокисьалюминиевая формол вакцина против оспы овец// Ветеринария. - 1945. - № 2-3;

24. Лихачев Н.В. Оспа.// Вирусные болезни животных. М.: Сельскохозяйственная литература, плакаты и журналы. - 1963. - С. 45-65;

25. Лихачев Н.В., Сюрин В.Н., Цион P.A. и др. Вирусные болезни животных. М.: Сельскохозяйственная литература, плакаты и журналы. - 1963. -С. 45-77;

26. Малахова И.В., Зорин Е.В., Новохватский A.C. Хранение и восстановление гибридом, продуцирующих моноклональные антитела к вируснымантигенам// Молекул, генетика, микробиол. и вирусол. 1985. - № 3. - С. 4144;

27. Мамадалиев С.М., Рынбаев М.Б., Уфимцеф К.П. и др. Лабораторная диагностика оспы овец в хозяйствах Актюбинской и Кзыл Ординской областей// Актуальные проблемы вирусологии. Тезисы докладов научной конференции. - Гвардейский. - 1994. - ч. 1. - С. 134;

28. Меркулов Г.А. Курс патологогистохимической техники. Л.: Медицина. - 1969. - С. 235-236;

29. Наставление по применению гидроокисьалюминиевой формолгли-цериновой вакцины Таджикской НИВОС против оспы коз.// Ветеринарное законодательство. М.: Колос. - 1972. - т. 1. - С. 568-569;

30. Никулин А.Н. Разработка ассоциированной вакцины против сибирской язвы и оспы овец. Дисс. канд. вет. наук. Покров, 2000, 114 с.;

31. Недосеков В.В. Разработка и совершенствование средств и методов оценки эффективности вакцин против бешенстваю. Дисс. канд. вет. наук. Покров, 1998, 182 е.;

32. Скалинский Е.И., Борисович Ю.Ф. Электронномикроскопическая диагностика оспенных болезней животных// Ветеринария. 1974. - № 8. - С. 110-112;

33. Скалинский Е.И., Борисович Ю.Ф. Структура и морфогенез вируса оспы коз//Ветеринария. 1975. -№ 7,- С. 39-41;

34. Скалинский Е.И., Борисович Ю.Ф. Методические указания по лабораторной диагностике оспы крупного рогатого скота, овец, коз . свиней и верблюдов. 1985. - 9 е.;

35. Стрижаков А.А. Получение и использование моноклональных антител к вирусу катаральной лихорадки овец. Дисс. канд. биол. наук. Покров, 1994, 148 е.;

36. Стрижакова О.М. Получение моноклональных антител и разработка на их основе средств и методов дифференциальной диагностики трансмиссивного гастроэнтерита свиней и респираторной коронавирусной инфекции свиней. Дисс. канд. вет. наук. Покров, 1995, 147 е.;

37. Сюрин В.Н., Белоусова Р.В., Фомина Н.В. Оспа овец и оспа коз.// Диагностика вирусных болезней животных. М.: Агропромиздат. - 1991. -С. 21-26;

38. Сюрин В.Н., Белоусова Р.В., Соловьев Б.В. и др. Обнаружение и идентификация вирусспецифического антигена в реакции диффузионной преципитации.// Методы лабораторной диагностики вирусных болезней животных. М.: Агропромиздат. - 1986. - С. 207-220;

39. Сюрин В.Н., Белоусова Р.В., Соловьев Б.В. и др. Реакция нейтрализации.// Методы лабораторной диагностики вирусных болезней животных. -М.: Агропромиздат. 1986. - С. 258-256;

40. Сюрин В.Н., Самуйленко А.Я., Соловьев Б.В. Поксвирусные инфекции.// Вирусные болезни животных. М.: ВНИТИБП. - 1998. - С. 722770; ♦

41. Ургуев К.Р., Ашахоц Х.М. Эпизоотология и меры борьбы с особо опасными болезнями животных// Ветеринария. 2000,- № 1. - С. 8-11;

42. Херрингтон С., Макти Дж. Молекулярная клиническая диагностика. Методы. Издательство: Мир. - 1999. - 588 е.;

43. Animal virus research institute. Rapport for 1984-1985,- p. 34-37;

44. Belvval L. M., Nivsarkar A. E., Mathur P. B. et al. Epidemiology of sheep pox// Trop. Anim. Hlth. Prod. 1982. - v. 14. - p. 229-233;

45. Bhambani B. D., Krishnamurthi D. An immunodiffusion test for laboratory diagnosis of sheeppox and goatpox// J. Сотр. Path. 1963. - v. 73. - p. 349;

46. Bhat P. P. A comparison of genomes of sheep pox virus isolates// Indian J. Exp. Biol. 1989. - v. 27. - p. 714-717;

47. Bhat P. P., Mishra B. P., Bhat P. N. Identification and size variation of terminal fragments of sheep pox virus genome// Indian J. Exp. Biol. 1991. - p. 434-436;

48. Bhat P. P., Mishra B. P. Restriction enzyme profiles as molecular epidemiological tools for characterizing seep-pox virus genomes// Indian J. Anim. Sci. 1989.-v. 59.-p. 1475-1490;

49. Bidjeh K., Ganda K., Didnimbaye C. Goat pox virus in Chad: study of the pathogeny of the virus in sheep and goats// Revue Elev. Med. Pays trop. -1991. v. 44. - p. 33-36;

50. Black D. N. The capripoxvirus genome// Rev. Sci. tech. Off. int. Epiz. -1986. v. 5. - p. 495-501:

51. Black D. N., Hammond J. M., Kitching R. P. Genomic relationship between capripox viruses// Virus Research. 1986. - v. 5. - p. 277-292;

52. Borrel A. Epithelioses infectienses et epitheliomas// Ann. Inst. Paster. -1903. v. 17. - p. 81:

53. Buller R. M., Palumbo G. H. Poxvirus pathogenesis// Microbiol. Rev. -1991. v. 5. - p. 80-122;

54. Cam V. M. An antigen trapping ELISA for the detection of capripoxvirus in tissue culture supernatant and biopsy samples// J. Virol. Meth. 1995. - v. 51. -p. 95-102;

55. Cam V. M. Control of capripoxvirus infection// Vaccine. 1993. - v. 1 1.- Issue 13. p. 1275-1279;

56. Cam V. M. Kitching R. P., Hammond J. M. et al. Use of a recombinant antigen in an indirect ELISA fq>r detecting bovine antibody to capripoxvirus// J. Virol. Meth. 1994. - v. 49. - p. 285-294;

57. Capstick P. B., Coackley W. Protection of cattle against lumpy skin disease. 1. Trial with a vaccine against Neethling type infection// Res. Vet. Sci. -1961. v. 2. - p. 362-368;

58. Chand P., V. D. P., Garg S. K. et al. Counter-immunoelectrophoresis for rapid diagnosis of sheep pox// Br. Vet. J. 1985. - v. 141. - p. 124-128;

59. Chand P., Kitching R. P., Black D. N. Western blot analysis of virus-specific antibody responses for capripox and contagious pustular dermatitis viral infections in sheep// Epidemiol. Infect. 1994. - v. 113. - p. 377-383;

60. Coons A.H., Crech H.J., Jones R.N. Immunological properties of an antibody containing a fluorescent group// Prot. Soc. exp. Biol. Med. 1942. - v. 47.- p. 200-204;

61. Datta S., Soman S. P. Dot-immunobinding technique in differential diagnosis of pox disease of sheep and goats// Indian J. Anim. Sci. 1990. - v. 60. -p. 1186-1187;

62. Davies F. G. Characteristics of a vims causing a pox disease in sheep and goats in Kenya, with observation of the epidemiolody and control// J. Hyg. -1976. v. 76. - p. 163-171;

63. Davies F. G. Observations on the epidemiolody lumpy skin disease in Kenya// J. Hyg. 1982. - v. 88. - p. 95-102;

64. Davies F. G., Atema C. The antibody response in sheep infected with a Kenyan sheep and goats pox virus// J. Сотр. Path. 1978. - v. 88. - p. 205-210;

65. Davies F. G., Atema C. Relationship of capripox viruses found in Kenya with to Middle Eastern strains and same orthopox viruses// Res. Vet. Sci. -1981. -p. 253-255;

66. Dronin J. Cloning of human mitochondrial DNA in Escherichia coli/7 J. Mol. Biol. 1980. - № 140. - p. 15-34;

67. Eairwearther N. F., Lyness V. A., Packard D. J. et al. Cloning, nucleotide sequencing, and expression of tetanus toxin fragment С in Escherichia coli// J. Bacteriol. 1986. - v. 165. - p. 21-27;

68. Fazekas de St. Groth S., Scheidegger D. Production of monoclonal antibodies: Strategy and tactics// J. Immunol. Meth. -1980. v. 35. - p. 1-22;

69. Fehrnstrom H., Moberg U. SDS and Conventional Polyacrylamide Gel Electrophoresis with LKB 2117 Multiphor// LKB Application Note 306. 1997;

70. Femier F. Классификация и номенклатура вирусов// Acta virol. -1976. v. 20. - p. 170-176;

71. Fenner F. Portraits of viruses: the Poxviruses// Intervirology. 1979. - v. 11. -p. 137-157;

72. Gelderblom H., Ozel M. Zur Virusdiagnostik mit dem Electronen-microskop// Kleintier Praxis. 1983. - v. 28. - s. 39-45;

73. Gershon P. D., Black D. N. A comparison of the genomes of capripox-virus isolates of sheep, goat, and cattle// Virology. 1988. - v. 164. - p. 341-349;

74. Gershon P. D., Kitching R. P., Hammond J. M. et al. Poxvirus genetic recombination during natural vims transmission// J. Gen. Virol. 1989. - v. 70. -p. 485-489;

75. Gispen C. Analysis of pox virus antigens by means of double diffusion. A method for direct serological differentiation of cowpox// J. Immunol. -1955. v. 74. - p. 134;

76. Gooding J. V. Antibody production by hybridomas// J. Immunol. Metli. 1980. - v. 39. - p. 285-308;

77. Goswami T. K., Soman J. P. Immune responses of goats to goat pox vaccine// Indian vet. J. 1988. - v. 65. - p. 1-5;

78. Gulbahara M. Y., Cabalar M., Gul Y. et al. Immunohistochemical detection of antigen in lamb tissues naturally infected with sheeppox vims// J. Vet. Med. B. -2000,- v. 47. p. 173-181;

79. Heder R. S., Hamblin C. Neutralizing antibodies to lumpy skin disease in african wild life// Comp. Immun. Microbiol. Infect. Dis. 1983. - v. 6. - p. 209213;

80. Hajer 1. Abbas B., Samra A. M. T. Capripox vims in sheep and goats in Sudan// Revue Elev. Med. Pays trop. 1988. - v. 41. - p. 125-128;

81. Hamblin C., Anderson E. C., Jago M. et al. Antibodies to some pathogenic agents in free living wild species in Tanzania// Epidemiol. Infect. 1990. -v. 105.-p. 585-594;

82. Ireland D. S., Binepal Y. S. Improved of capripoxvirus in biopsy samples by PCR// J. Virol. Meth. 1998. - v. 74. - p. 1-7;

83. Joklik W. K. The purification of four strains of poxvirus// Virology -1962. v. 18. - p. 9-18;

84. Joshi R. K., Chandra R., Rao V. D. P. et al. Coagglutiation test: a simple and rapid diagnostic technique for doat pox// Trop. Anim. Hlth. Prod. 1989. - v. 21.-p. 233-235;

85. Joshi R. K., Chandra R., Rao V. D. P. et al. Detection of goat-pox antigen and antibody by counter-immunoelectrophoresis// Indian J. Anim. Sci. 1990. -v. 60. - p. 34-35;

86. Kitching R. P., Hammond J. M., Black D. N. Studies of the major common precipitating antigen of capripoxvims// J. gen. Virol. -1986. v. 67. - p. 139-148;

87. Kitching R. P., Hammond J. M., Taylor W. P. A single vaccine for the control of capnpox infection in sheep and goats// Res. Vet. Sci. 1986. - v. 42. -p. 53-60;

88. Kitching R. P., Smale C. Comparison of the external dimensions of capripoxvims isolates// Res. Vet. Sci. 1986. - v. 41. - p. 425-427;

89. Kitching R. P., Taylor W. P. Clinical and antigenic relationship between isolates of sheep and goat pox viruses// Trop. Anim. Hlth. Prod. 1985. - v. 17,-p. 64-74;

90. Kohler G., Milstein C. Derivation of specific antibodyproducing tissue culture and tumor lines by cell fusion// Eur. J. Immunol. 1976. - v. 6. - p. 51 1519;

91. Laemmly U. K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the heard of bacteriophage T4// Nature. 1970. - v. 227. - p. 61-67;

92. Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A.L., Randall R.J. Protein measurement with the folin phenol reagent// J. Biol. Chem. 1951. - v. - 193. - p. 265275;

93. Mangana-Vougiouka O., Markoulatos P., Koptopoulos G. et al. Sheep poxvirus identification by PCR in cell cultures// J. Virol. Meth. 1999. - v. 77. - p. 75-79;

94. Markoulatos P., Mangana-Vougiouka O., Koptopoulos G. et al. Detection of sheep poxvirus in skin samples by a multiplex polymerase chain reaction// J. Virol. Meth. 2000. - v. 84. - p. 161-167;

95. Manual of standards for diagnostic tests and vaccines// O. I. E. 1996. -p. 119-127;

96. Mariner J. С., House J. A., Wilson Т. M. et al. Isolation of sheep pox virus from a lamb in Niger// Trop. Anim. Hlth. Prod. 1991. - v. 23. - p. 27-28;

97. Mathews R. E. F. Classification and nomenclature of viruses// Intervi-rology- 1982. v. 17. - p. 1-199;

98. McKinney M. M., Parkinson A. A simple, non-chromotographic procedure to purity immunoglobulins from serum and ascites fluid// J. Immun. Meth.- 1987. v. 96. - p. 271-278;

99. Michael A., Saber M. S., Sooliman S. M. Control of lumpy skin disease outbreak in Egypt with Romanian sheep pox vaccine// Assiut Vet. Med. J. -1996. v. 36. - p. 173-180;

100. Murray M., Martin W. В., Koylii A. Experimental sheep pox. A histological and ultrastructural study// Res. Vet. Sci. 1973. - v. 15. - p. 201-208;

101. Oi V.T. & Herzenberg L.A. (1980) Immunoglobulin-producing hybrid cell lines. In: Mishell B.B. & Shiigi S.M. (Eds.), Selected Methods in Cellular Immunology, Freeman, pp. 351-372;

102. О IE. Bulletin 1993 -1999 -v. 104-111;

103. Pandey R., Singh I. P. Cytopathogenicity and neutralization of goatpox virus in cell culture//Res. Vet. Sci. 1970. - v. 11.-p. 195-197;

104. Pandey R., Singh I. P. Растворимые антигены вирусов оспы овец и коз, исследованные методом иммунодиффузии в агаровом геле// Acta virol. -1972.-v. 16.-p. 41-46;

105. Plowright W., Ferris R.D. The growth and cytopathogenicity of sheep-pox vims in tissue cultures// Brit. J. of Exp. Pathology 1958. - v. XXXIX. - p. 424-435;

106. Rao S. M. V., Malik B. S. Применение метода электроиммунодиф-фузии для определения антигенных взаимоотношений между вирусами оспы овец и оспы коз// Acta virol. 1983. - v. 27. - p. 177-179;

107. Rao S. M. V., Malik B. S. Реакция перекрестной нейтрализации между вирусами оспы овец, оспы коз и контагиозно'гб пустулярного дерматита// Acta virol. 1979. - v. 23. - p. 165-167;

108. Rao Т. V. S., Malik P, Nandi S. et al. Evaluation of immunocapture ELISA for diagnosis of goat pox//Acta virol. 1997. - v. 41. - p. 345-348;

109. Rao S. M. V., Malik B. S., Sharma S. N. Антигенные взаимосвязи вирусов оспы овец, коз и контагиозного пустулезного дерматита// Acta virol.- 1984. v. 28 - p. 380-287;

110. Rao T. V. S., Negi B. S. Evaluation of different serological tests for the diagnosis of goat pox using soluble antigens// Trop. Anim. Hlth. Prod. 1997. -v. 4.-p. 235-239;

111. Rao T. V. S., Negi B. S., Bansal M. P. Isolation and characterization of soluble antigens of sheep poxvirus// Indian J. exp. Biol. 1997. - v. 35. - p.597-602;

112. Rao T. V. S., Negi B. S., Bansal M. P. Identification and characterization of differentiating soluble antigens of sheep and goat poxviruses// Acta virol. -1996.-v. 40. p. 259-262;

113. Regenmortel van M. H. V., Fanguet C. M., Bishop D. H. L. Et al. Virus Taxonomy. Classification and Nomenclature of Viruses. Seventh Report of the International Committee on Taxonomy of Viruses. Academic press. 2000. - p. 137-157;

114. Report for 1984-1985. Pirbright.- p. 34-36;

115. Rolirer H. Handbuch der Virusinfektionen bei Tieren. Jena: Gustav Fishcer. 1967. - B. II. - T. 1. - s. 445-450;

116. Saiki R. K., Gelfand D. H., Stoffel S. Science. v. 239. - p.487;

117. Sambyal D. S., Singh I.P. Cutaneous hypersensitivity in sheep injected with sheep pox virus soluble antigens// Zbt. Vet. Med. 1980. - B. 27. - s. 544548; •

118. Sarkar P., Singh S. J\, Pandey A. K. et al. Application of fluorescent antibody test in the diagnosis of sheep-pox, and study of sheep-pox vims multiplication in cell-culture// Indian J. Anim. Sci. 1980. - v. 50. - p. 428-433;

119. Selected methods in cellular immunology. (Ed. by Mishell B.B., Shiigi S.M.) W.H. Freeman and Company. San Francisco. 1980, p. 486;

120. Schumperli D., Lagadec R., Muller M. K. DNA sequence homology estimation by combinatorial analysis of endonuclease restriction data// J. Gener. Virol. 1977. - v. 38. - p. 161-166; *

121. Sharma R. M., Bhatia H. M. Contagious pustular dermatitis in goats// Indian J. Vet. Sci. 1958. - v. 28. - p. 205-210;

122. Sharma B., Negi B. S., Pandey A. B. et al. Detection of goat pox antigen by the counter Immunoelectrophoresis test// Trop. Anim. Hlth. Prod. 1988. -v. 20.-p. 109-113;

123. Sharma S., Negi B. S., Yadav M. R. Применение ELISA для выявления антигена и антител к вирусу оспы коз// Acta Virol. 1988. - v. 32. - p. 65-69;

124. Sharma S.N., Nilakantan P. R., Dhanda M. R. A preliminary note on pathogenicity of sheep and goat pox viruses// Indian Vet. J. 1966. - v. 43. - p.673;

125. Sharma B.J., Sambamurthi B. Detection of sheep pox virus multiplication in sheep cells by acridine orange staining// Indian J. exp. Biol. 1977. - v.15. p.239-240;

126. Sharma A., Sharma K. N. Application of srid and micro-ELISA for detection of sheep-pox vaccination response in crossbred lambs// Indian J. Virol. -1990. v. 6. - p.80-82;

127. Sinigari N. A., Moorthy A. S., Rao P. R. Sheep pox// Livestock Adviser. 1990. - v. 15. - Issue 3. - p. 40-42;

128. Soliman S. M., Zhagloul W. A., Micheal A. et al. Studies of sheep and goat pox viruses from naturally infected animals// Assiut Vet. Med. J. 1996. - v. 35.-p. 29-38;

129. Srivastava R. N., Singh I. P. A study on the role of cellular and humoral factors in immunity to sheep-pox// Indian J. Anim. Sc. 1980. - v. 50. - p. 861-886;

130. Terinha A. M., Vigario J. D., Nunes Petisca J. L. et al. Autoradiographic study on sheeppox vims infection// J. of Bacteriology. 1965. v. 90. -p. 1703-1709;

131. Vigario J. D., Ferraz F. P. Study of sheeppox virus synthesis by fluorescent antibody technique// Am. J. Vet. Res. 1967. - v. 28. - p. 809-813;

132. Woods J. A. Lumpy skin disease a review// Trop. Anim. Hlth. Prod. - 1988.-v. 20-p. 11-17;

133. Woodroofe G. M., Fenner F. Serological relationship within the poxvirus group: an antigen common to all members of the group// Virology 1962. - v.16.-p. 334-341.

134. Российская академия сельскохозяйственных наук

135. Всероссийский научно-исследовательский ннсштут ветеринарной вирусологии и микробиологамоО* '. Г.С г ч'О. г:;:.1. Г:^ У'.1.1'6-1 0фдкс: (СЭДУО: 97 55 >&

136. ВРЕМЕННОЕ НАСТАВЛЕНИЕ | по применению «Набора препаратов дня диагностшш оспы овец и коз твердофазным иммуноферментным анализом на основе моноклональных антител»1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

137. При проведении лабораторной диагностики руководствуются ''Правилами работы и охраны труда в ветеринарных лабораториях", утвержденными Министерством сельского хозяйства СССР 14 января 1975 г/ : ^

138. Набор применяют с разрешения Департамента ветеринарии Минеельхоза Российской Федерации. ,

139. Директор Всероссийского НИИ .детеринарной виру2000 г.

140. РОСС1-ШСКАЯ АКА ДШТ 1Я СЕЛ ЬСКОХОЗЯ! КЛЕЕННЫХ НА УК !Х;Г.Р< ХХШЧСКНН Н1ПI ВСГЕР1 II (АРНОЙ ВИРУСОЛОГИ!I II МИКРО!:н ЮЛОП.Н!1. ВНШВВНк!)1. ОКИ1. УДК1. Группа1. Р311. С О Г Л А С О 15 А И (3).ч 'леоиггель ;:у л. т: >; о

141. Департамента ветеринарии Мшгселъхоза России1. В. Селиверстов1. У Т В с Р Ж Д А Ю

142. Директор Всероссийского Шйй веи?р «парной-. вирусология и1. Котляров2000 г.2000 г.

143. НАБОР ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ОСПЫ ОВЕЦ И КОЗ ТВЕРДОФАЗНЫМ ИММУНОФЕРМЕНТНЫМ АНАЛИЗОМ НА * ОСНОВЕ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ1. Техшпес кие уел обил ТУ

144. На ошлтпую партию в количестве 25 наборов

145. Срок БЕСДСШЬТ с 2000 11 - I 1.

146. Арок действия до 2002 1 I - А1. СОГААС(Ж-АЮ

147. Директор Всеросея1к:соГ1> Государственного НИН контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов1. А. Л. Иашш1. Покрои. 2000 1-,144I11рОДОЛЛ-Г.С1ГИО ТТГП'ЛЪНОГО ;'.!•:; ' ТСХ1Ш1. ТУ

148. Члешсорресиондехгг РАСХН, д.в.н., профессор1. Втядняков Н.Ф.| 2000 г.

149. Зав. лаооратория гшзоотол опш.'1 ВНИИВВиМ РАСХНкандидат биологических наук1. Стрк,;<аков А.А9 " 2000 г.1. Аспитант ВНИИВВиМ РАСХНУ1. Машкин А.Ь. ¥ " 2000 г.

150. Ст. кауч. сотр. лаборатори "Диагаосиг ВШШВВиМ РАСХ11 кандидат биологических наук1. Новикова МБ- $ /солу^хт г.

151. Науч. сото. лп6ора1ор<щлД|т^р1о<лшат: ВЖИВВиМ РАСХ11 ' кандидат ветеринарных наук1. СОГЛАСОВАНО УТВЕРЖДАЮ

152. Директор ВНИИ по контролю, стандартизации и сертификации препаратов доктор ветеринарных наук1. А.Н. Панин 2000 г.

153. Временная инструкция по изготовлению и контролю «

154. Набора препаратов для диагностики оспы овец и коз твердофазным иммуноферментным анализом на основе моноклональных антител"1. Покров 2000

155. Директор Всероссийского НИИ веЩинарной вирусоло1. В.М. Котляров40 " ¿н>лЪрз2000 г.

156. Российская академия сельскохозяйственных наук

157. ВСЕРОССИЙСКИЙ НА УЧИО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ

158. ИНСТИТУТ ВЕТЕРИНАРНОЙ ВИРУСОЛОГИИ И МИКРОБИОЛОГИИ601120, г. Покров* Владимирской обл. Телефоны: 6-29-88,6-10-821. На -Nb о т

159. Межлабораторных комиссионных испытаний образцов "Набора препаратов для диагностики оспы овец и коз твердофазным иммуноферментным анализом на основе мококлональных антител"

160. Дтя комиссионных испытаний были представлены две экспериментальные серии указанного "Набора."', изготовленные в марте н мае 2000 г. Протокол испытаний прилагается.1. Заключение комиссии:

161. Препараты "Набора." по внешнему виду, цвету, растворимости, активности н специфичности соответствуют требованиям проекта ТУ.

162. У1ВЕРЖДАЮ Директор ВНИИВВиМ1. В.М Котляров1. И0 » ^Л 200000 г1. ПАСПОРТ

163. На серию № 1 Ангасьгворотка к вирусу оспы коз 1. Реагент1. Группа вирус1. Штамм "Монгольский"1. Тип

164. Титр (гомолопстный и гетершогачный)а) РСК нуи б) РН 1:32-1:64в) РДП 1:32д) МФА я другие метода4. Чистотаа) наличие вирусов отсутствуютб) наличие бактерий отсутствую:в)микоплаз мстсугствуюг) бшюк„мг% отсутствуют

165. Характеристика серий а) общий объем 75 млб) объем в ампуле 1 см'в) метод консервирования лиофшшзация без стабилизатораг) дата закладки 26.04.2000 г.д) условия и метод хранения в лпофизпшфоваш-гом виде при минус1.!

166. Допатшзггелыше данные активность в РН 1:32-1:64 и РДП 1:32

167. Препарат изготовит Машнин А, В. Б злышев В М.

168. Препарат проверил Машнин А В. Щетникова Л. А.1. Дата 26.01 2000 г.

169. В.В. Курганов В.М. Балышев