Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Пути повышения эффективности применения противобруцеллезных вакцин
КАЗАХСКАЯ АКАДЕМИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК Казахский научно-исследовательский ветеринарный институт
' I 0 О Д На правах рукописи
УДК 619:619.981.42:615.371:136.2
МИНЖАСОВ КАНАТ ИСМАИЛОВИЧ
1УТИ ПОВЫШЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ ПРОТИВОБРУЦЕЛЛЕЗНЫХ ВАКЦИН
16.00.03 - ветеринарная микробиолог. \
ИММУНОЛОГИЯ, ЭПИЗООТОЛОГИЯ »: инфекционные болезни животных
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук
Алматы, 1996
Работа выполнена в отделе бруцеллеза Казахского научно-следовательского ветеринарного института Казахской академии С( скохозяпственных наук
Научный консультант -
доктор ветеринарных наук, профессор, член-корреспонд^ КазАСХН Н.П.ИВАНОВ
Ведущая организация
Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальне Востока
Официальные оппоненты:
доктор ветеринарных наук, профессор В.И.ПИОНТКОВСКИЙ
доктор ветеринарных наук,
профессор
В.И.КИМ
доктор ветеринарных наук,
профессор
И.И.ГУСЛАВСКИЙ
Защита диссертации состоится
1996 Г
часов на заседании специализированного совета Д 55.03. при Казахском научно-исследовательском ветеринарном институте адресу: 480016, г. Алматы, проспект Райымбека, 223.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.
Автореферат разослан
1996 г.
Ученый секретарь специализированного совета, дЛ доктор ветеринарных наук _ Б.Ф.Керимжан
ОЩЛЯ ХАРАКТЕРНО!ИКА РАБОТЫ
Актуальность. Одним из факторов, сдеркивагяцих развитие аквотноводетгл з Республика Казахстан, являются инфекционные болезни квотных. При этой особое иесто занимает бруцеллез„ тая как он наносит огромный экоиокический ущерб и имеет большое социальное значение.
За период, прошедший со врэкени открытия В. Брюс, 1686 г., возбудителя заболевания, достигнуты большие успехи з области изучения гаиогих вопросов эпизоотологии и эпидемиологии болезни, клинячески:: проявлений ее и патогенеза, разработки средств и катодов диагностики и специфической профиантики и т.д.
Эта болезнь не регистрируется в ряде стран Восточной Евро-кы и иногих регионах СНГ.
Однако проблема повсеместной ликвидации бруцеллеза представляет еще значительные трудности вследствие широкого его распространения, болыяой пораженное?« поголовья аивотньзг, ва- ; риабельности и убикаитарности возбудителя болезни, т.е. способности его к обктаикэ а организме сам« разнообразных гидов аси-пьж существ, а также, в ряда случаев, латентного тетания эабэ-леэания и связанной о атгш слсиноста диагностики н ■созцифачес-гсой профилактики,,
Уместно отметить, что официыьнвэ ссгдоиая гвтэрннаряой а медицинской отчетности не э полной з^рэ отрагвт ястпикеэ кояо» пвимэ степени распространения бруцеллеза»
К настоящего' вредоии з К&эахстакв 20% яоэяйотэ ягяяятся неблагополучными по бруцзляезу яругагого рогатого скота. Одаако втеявиь распространения бруцзллезнсЛ гафкцпя ¡га территории
рэсдубликя иэ одикакоса, «Jo.se э 90;? ка&гаговвяупнаго вого» догья Я1УПНОГО рогатого саота содержится э евворшх а цеитрагь-нш: областях» Различил э эпизоотической смусцип по бруцеллезу огдвльяых рогколов, ия природио-гзогрзфичзсяис? и яозяйствето-экоионичгсгае есобеккома трэбуэ* зылвлепкл факторов, емзига^ ¡¡яр» вяляаиэ на распространение н тэчгнкз шгфэюзш, сроягленяз за0огзе?якя, а т«ю*в изиеггзняя наиболее оффектигаык сисгвя ов-доропитвльных неровриятий.
Вря стой весьма взяиуэ.рсаъ эмшпэт спец|ф«йвваа ярофя-я&иика болезни.
Вопросам;! епзцгфшгсяоЯ оро^ялахтяки бруцеллеза ярупного
рогатого скота занимаются со времени открытия возбудителя»
К настоящему времени наиболее широкое применение для иммунизации крупного рогатого скота получили вакцины из штаг-мов 19 и 82. Однако эти препарата имеют и существенные недостатки (И.А.Коснлоэ, А.А.Новицкий, 1990 и др.).
так, вакцина из шт&кма 19, как и другие агглвтиногенше вакцины, является достаточно имкуногзнкой, но обладает выраженными антигенными свойствами, что препятствует проведению дифференциальной диагностики в шствакцинальныЯ период (U.A.ХрияенкоР 1972 и др.).
Вакцина из шт&кма 82 яаляется слабоаггявтмногенмой, но обладает высокой рзактогеиностья. Ее прививки стельным кеикцуи-ным животным Еызываат аборты и другие осложнении (Н.П.Иванов, 1985).
Указанныэ и другие нкнэ предлагаемый вакцинные препараты, будучи в организме животных, создал)? иммунитет веська относительной напряженности (Е.С.Орлов к др., 1965)„ Кроме того, на выработку ижунитега оказывает существенное влияние соответствующий генотип животных, иедунный статус поголовья, что часто не учитывается при разработке схем использования лротиаобруцзл" аезнык препаратов (Е.Каняигитов, Х995).
Данный вопрос в полной ttsps не ос воден н в специальной литературе, что требуэт дополнительных изысканий в аспект® со-Бериенстьования всей протквобруцзллезной системы.
Цель w задачи исследований. Цельо настоящий исследований' является изыскание путей повызенкя эффективности пркиаиения протизобруцеллвзньсс вакцин н& основа биологических особенностей макро- и шкроорганизиа м даразитохоэяинньк отношений.
3 связи с зтин на р&эреиеки® поставлены еяедуицие задачи §
1. Уточнить эпизоотическую ситуации по бруцеллезу крупного рогатого скота на территории Республики Казахстан.
2. Установить эффективность прикакгнмя противобруцеялезных вакцин для иммунизации крупного рогатого скота в зависимости о? впиэоотическоя гитуацнио
3. Изучлкь воамоянос¥ь выявления латентных фора течения бруцеллеза среди крупного рогатого скота путем использования вакцины из штекаа 82.
4. Изучить взаимосвязь реактивности организма яивоишх к напряженности, специфического »дыунктета к бруцеллезу а поствак-
зинадьикй период.
ô. Разработать способ дг.ф^ер-знциации еакцимироЕгниого крупного рогатого скота от спонтанно больнмх бруцеллезом кивот-си«.
6. Разработать ептишяьнуп систему прогивебруцэллезнык мероприятий и предложить ее для производства*
Научная новизна - Определены особенности эпизоотической ситуации по бруцеллезу крупного рогатого скота з различных регионах Республики Казахстан, с учетом применения средств специфической профилактики;
- Установлена эффективность применения противобруцедлезких закцил для икцуииэ&ции крупного рогатого скота в зависимости о? опкзоотичаскоя ¿етуации хозяйств;
- Разработан 1*етод провокации я&тгнткых форы тачания бру-цэллеза с одновременным индуцированием иая^питота и снижения проявлений абортогеиныя саопстз сакцини мэ атгмка 82 (г.пилено свидетельством)г
- Разработан способ дифференциации сяаборэактивных к бру-цаллеэу пипоткых от толерантных, ареактигных и и!<чуисдс$ицнтн1зс а потчигния ййкуиного статуса путей повторного введения препарата (эацкщени свидетельством и патентом Роспубляки Каззхстея);
» Разработал способ дифференциации вакцинировашплс жяаот-и«х cï спонтанно бояь:о» бруцеллезом (аег,кц8ив патсгвтси Республики К&захстея);
- Разработана оптимальная система противоЗруцеяяегкык из» рояриятчЯ, отзотпя^их требования« ринсптоЯ зкопекчг.:: й г.иого~ у*лзд.оети хозяйствования ;
- СЗебцетл раэультдтм иссяедозгнкя я показали пути ;• г&зятясясстн прп?.:знзмкл кратиссЗруцздлезжхх
Яраят;г4';с~гя .цокноегь работн. Ксподьзоззяиэ в регионах с различной закаэоти'-теской ситуацизЯ ко бруцеллезу сруакэго рогатого cnoT'i сггтеоргы1иэациокно-хозяГ.стЕстгс:, ззторгаарпо-еслп^прак р сгз'П'-'Л'.-у.юс зотаркнарн:« юрояри?:гия,, тзючгясряг vrpyxvjо'-г.'з суэц-втп ст.'.пщгтро.Х;л,;гтинк для еэодзямя кп^гт.сгз статуса к аалвз"нпя лашшшх форм Сруцеялога, тэяэ-ракетпе, я адодгтизшлс лпеоткнх, а такте способа
диатлоатизен арадзхпргг'.гот р&епростряигпкз к-гфящиа, скидает розкспаость заретмпм аигокшх îi зиачвтеяько ccxçsriaa* snwc&nttscxre погори и ерэкл оэдорэзления хозяйств.
Основные положения, выносимые на защиту» _ Данные изучения особенностей эпизоотической ситуации по бруцеллезу крупного рогатого скота а различных регионах Республики Казахстан;
■ Результаты определения эффективности применения противо-бруцеллезных вакцин для имцунизации крупного рогатого скота в различной эпизоотической ситуации;
Данные о возможности использования вакцины из штамма 82 для выявления латентных форм бруцеллеза, создания иммунного фона и предотвращения поствакцинальных абортов у коров;
Результаты изучения взаимосвязи реактивности организма животных к напряженности специфического шедунитета в поствакцинальный период;
Метод дифференциации вакцинированных животных от спонтанно больных и место его использования при оздоровлении животных от бруцеллеза крупного рогатого скота;
Схема применения противобргуцеллезкых вакцин и пути повы-иения эффективности их использования.
Апробация. Материалы диссертации доложены и обсуздены на научно-практической конференции иолодых ученых и специалистов КазНИЕИ и АЗВИ (Ллы&ти, 1584), на заседании сотрудников отдела бруцеллеза ВДЙИЭБ им.Я^Р.Коваленко Шосгта, 1966, 1989), на республиканской научно-практической хон(|срг>щии иолодых учемыа и специалистов по проблемам интенсификации животноводства в Казахской ССР (Чимкент, 2986), конференциях молодых ученых КазНИЕИ (Алматы, Х987, 1988, 1989 гг„), на республиканских семинарах-совещаниях и конференциях по проблеме бруцеллеза м туберкулеза сельскохозяйственных животных (Алматы, 1987; Петропавловск, 1988; ¡Какбыл, 1990), на Всесоюзных корвдинационных совещаниях ( 1осква, 1990; Новосибирск, 1991), на Всесоюзной конференции "Актуальные вопросы профилактики? бруцеллеза м организации медицинской помощи бояьиьш" (Новосибирск, 1989), Ш Все— соизной конферзнцки по эпизоотологии (Нозоскбирск, 1991-1995; Тбилиси, 1990), на заседании рабочей комиссии ОНКеет по вопросу профилактики бруцеллеза ы ■губэркуяэза йиеотнух (Москва, 1990), на г&седаниях секции ветеринарии НхС М2Х Республики Казахстан (Алиаты, 3990), ученых Советах Казахского НИН! (едегодио при ввехупиваями отчэтов),
Предлокенкя по материал ей диссертации г.свытяид з хозяйсч-
sax Ксстанайско" (1926-1992 гг.), ЯалЗьиской (I9S6-I992 гг.),Северо-Казахстанской (IS86-I989 гг.)„Акмолинской (ISS6-IS09 гг.) областям Республики Казахстан.
Публикация результатов исследований.' По те^э диссертации опубликовано 4.0 работ, где отражены основные положения к выводы, содержащиеся в материалах Всесоюзных и республиканских научных конференциях, Сборниках трудов ВНИИШ, ИЭЕСиДВ,Казахского НКВИ.СемЗЕИ, а вуркало "Ветеринария","Аграрная наука для страл СНГ","Вестник сельскохозяйственной науки Казахстана" и других нзучно-произЕОДСтвешых изданиях.
Обгем и структура диссертации. Диссертация изложена на 320 страницах !/лл;'ноп;1си, содержит 21 таблицу» Она состоит из введения, обзора литературы, результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических предложений,списка использованной литературы' включающего 2Б0 наименований к приложения.
МАТЕРИАЛ И ЬЕТЦДЫ ИССЩОВЖЙ
Работа выполнялась в I9S3-I99i гг. з отделе бруцеллёза Казахского НИВИ, в S11.) "Налганыс* Казахского НИВИ, в Ксрдайскои районе Жамбылс-коГ; области, Кашянгтском районе КостснаПсз:ой области и других хозяйствах Республики Казахстан.
Отдельные фрагьгенты работ выполнялись совместно с В.И.Езлобабсн, З.М.Антехоеым, ДЛ.%рагбесе181, БЛоКуттукоЕкм, В.И.Прадатезико, Л.И.Просхуркной, Т.В.Е-еГ.ы
В экспериментальны: исследованиях использовано 1000 ¡.юрских свинок !', 300 голоа круглого рогатого скота, с производстгбншх усяови-пх опыты проводились на поголовье свкас 50 тысяч крупного рогатого
СКОГД-с
Зпкзсстйхесяая ситуация по бруцеллёзу крупного рогатого скота, з целта по рзспублика уточнялась согласно сетергна^ноИ отчетности ■з периоды -борьбы о указанным заболеванием и с учетов прж.:о-
срадстп спецг.фпческсЯ профилактики.
Исследования по определению иммунокомпетентных клеток выполнены на крупном рогатом скота (совместно с Т.Б.Елейы и Л.И.Проскуриной, 1986).
- С целью выявления скрытых форм течения бруцеллёза среди крупного рогатого скота был использован метод провокации с г.оыогць-э вакцины из штамма 62 путем введения ее первично в дозе I млрд и.к. с последующим лэ истечении месяца проведением диагностических исследований на бруцеллёз. При этом положительно реагирующих животных, подвергали у боа и бактериологическое исследован;;» с постановкой биопробы. В случае получения положительного результата бактериологических исследований и данных, подтверздаищих наличие полевьк культур8 животных прмзнаЕали больными.
Наличие иммунного фона после введения малых доз вакцины и возможность предотвращения поствакцинальных абортов проверяли путем последующих инъекций полной дозы препарата стельным животным. Отсутствие клинически;? проявлений бруцеллёза свидетельствовало о специфической устойчивости коров к патогенном действию бруцелл п там/л 62.
Ищукологнческую реактивность при бруцеллёзе крупного рогатого скота л ее взаимосвязь с напряжённость» специфического поствакцинального иммунитета изучали дутем исследования в качестве препаратов, определяющих ответную реакция организма кизотных, использовали вакцину из штамма 15, ПЦС и гистамин.
Опыте-по дшиоу вопросу проводили в £П0 "Залгамыс"Казахского КЖ-1 и хозяйствах Кордайского района 1змбылскоЯ области.
Напряжённость к.щунигетг. к бруцеллёзу у унсизотных, кза^унизироБан-нкх вакцинами из штакмов 15,1С4-М и 82 определяли путем заражения их • вирулентной культурой Б.абортус 54 и последующего убоя и проведения бактериологического исследования (органов и лимфатических узлов),
Д»ффере!Щиаци:о вакцинированных • аиаоткых от спонтанно больных прс-■ водил к путе;.; г ггаковки РВД с О-ПС антигеном ИЗВСцЦЗ и КазНИВИ ив-тодика получения которого описана е специальном разделе диссертации.
Система противобруцеллёзных мероприятий "разрабатывалась путем тщательного анализа эффективности применения резличнвд противобруцел» лезкых вакцин с учетом эпизоотической сигу&цш региона и отдельных хозяйств.
Рекомендованная нами сксзека противобруцеллёзнь.:-: мероприятий учтена при разрабо г к? планов республика с ках по СерьСе с бруцеллёз-»
ной инфекцией.
Данные эпизоотической ситуации б хозяйствах, где использована предлагаемая паки протипобруцеллезная система, служили -оценкой ео зф£ективности и степени ее внедрения в производство.
Изучение особенностей эпизоотической ситуации по бруцеллезу крупного рогатого скота на территории Республики Казахстан
На территории Республики Казахстан степень распространения бруцеллезной инфекции носит не равномерный характер, что связано с краевыми (природно-хозяйственныш) особенностями и степенью выполнения прогивобруцеллезных мероприятий.
При выявлении факторов, способствующих распространению инфекции и влияющих на интенсчшость течения эпизоотического процесса нами на территории Республики Казахстан установлено пять эпизоотологических районов, в которкз отнесены определенные области согласно их административной очерчекности и имеющие на большей части своей территории сходные природно-хозяйствен-ныз условия по предпосылкам к возникновению м характеру распределения и течения инфекции.
В первый эпизоотологический район нами отнесены пять северных областей республики. Природные условия зтой зоны (длительный-зимний период и т.д.) определяют хозяйственный уклад. Технология скотоводства базируется, в основной, на сто плохом содержании9 что з значительной мерз оказывает влияние на интенсивность эпизоотического процесса, а следовательно, и применение специфических средств борьбы с бруцеллезом.
Зо «торой зпиэоотологический район включени три (Дктюбин-ская, Западно-Казахстанская, Атырауская) запгщнкз области Казахстана. Характерным для этой группы областей является развитое мясное С5сотободстео. Хозяйства по производству иолока со~ средэточсна лигь вокруг промышленных центров. Особенности мясисто скотоводства (подсосный кс-год выращивания телят, длительный или круглогодичный пастбищный мзтод содержания, отсутствие турэтис отелов '.1 т.д.) о казнями? влияние на распространенно и течение бруцеллезной инфэкцин, что необходимо учитывать при-разработке специпльнвх 2е?еринарпос мероприятий.
Третий зпизоотологичоский район включает Карагакдкнсяу» и Еезказганскую области. Это полупустынная зона с разко выраженной КСНТИИЗНТаЛЬНОСТЬП климата. Прирздшз условия и рост горо-
дов и рабочих поселков определили развитие как мясного гак и молочного скотоводства.
В хозяйства:; с высокой концентрацией скота, расположенных ¡¡¡округ городов, нередко имеет место острое течение инфекции. Б хозяйствах мясного направления интенсивность эпизоотического процесса синкена. Соответственно этому трзбуется дифференцирование специальных ветеринарии" мероприятий 1! особенно применение противобруцеллезнкх вакцин.
Четвертый эпизоотодогический район включает пслупустикнув, горнуп и прэдгорнуа зоны юга и юго-востока республики (Кзыл-Ординская. Жакбыяскоя, Шымкентская, иалдыкорганскаяс Алиатинская области).
Характерным душ этой группы областей является развитое овцеводство, которое занимает 40!» сельскохозяйственного производства, Количество крупного рогатого скота б этой зоне относительно меньше. Однако концентрация его достаток» высокая из-за вытеснения на пастбищах овцепоголовьеы. Здесь наиболее длительный летний пастбшцный период. Б этой зоне, в силу природных факторов, получили развитие как мясное, так к молочное скотоводство. Последнее сосредоточено, в основном, в местах орошаемого земледелия вокруг промьжтенных центров. Мивотньк» ч&це находятся на пастбигрю-стоЛтовом содержании. Климатические условия и связанная с этим технология отрасли нередко оказыьа»? положительное алияииэ на результативность противобруцедлвзш« мероприятий.
Пятак зиизоотологическиа район содержит Ссыипалатинскус к Восточно-Каэахстш^скув области. Характерный для этого региона, наряду с природно-кликатичзским разнообразие«, является наличие больвого кохичества скотопрогонных трасс республиканского к иевдукауодного значения, что нередко оказывает влияние на распространение инфекции. Однако более выраженная интенсивность эпизоотического процесса проявляется в хозяйствах с высокой концентрацией скота, находящегося на стойловом содергкюк-л.
Следует попинать, что представленное пааи зиизоотологичес-коз районирование по бруцеллезу ке полностью отражает однородность области по предпосылке« в отношении «фзкциокннх наболс-ЕШ1ий, т.к. в пределах дес.е одной области существует вертикальная и горизонтальная зональность со срсгк'ч здяяКстесннкми условиями. 1«к, например, Ал&аткнская область делится на полуаустш-
иую, пустынную, горную и предгорную части. В горной и предгорной зонах специализируются на молочном скотоводстве, а в пустынной и полупустынной зонах занимаются мясным скотоводством и овцеводством. Северо-Казахстанская область почти целиком входит в район Западно-Сибирской низменности с присущими для нее почвенко-кли-матическими и экологическими условиями. В этом регионе имеется северная лесостепная зона с большим количеством осадков в летний период. Лесной массив занимает до 2о5& площади. Скотоводство здесь, в основном, стояловое. Южная часть этой зоны имеет значительно меньше леса. Здесь отмечается полустойловое содержание скота. На юго-востоке и юго-западе этой же области наблюдаются . суховеи, что сказывается на технологии содержания скота и, естественно, результативности противоэпизоотических мероприятий.
Зональное деление имеет место и в других областях Казахстана и в определенной степени оказывает влияние на формирование эпизоотической обстановки в том или ином регионе и эффективность проводимых мероприятий. :
Главными хозяйственными факторами, влияющими на распространение бруцеллезной инфекции и эффективность проводимых мер, являются концентрация скота, технология животноводства, длительность стойлового периода (связано с природными условиями), а также уровень ветеринарно-санитарных мероприятий, который зависит от обеспеченности кадрами, материально-техническими средствами (дезосредства, техническая оснащенность н т.д.).
В аспекте изложенного нами проведен■анализ эпизоотической обстановки по бруцеллезу в целом по республике и отдельных,опи-сенных нами, эпизоотологических районах.
В Республике Казахстан система противобруцеллезных мероприятий, начиная с 1954 года, включала иммунизация крупного рогатого скота ааяцикоЯ из сгашсда 19. В нзкоторых областях республики допускалась неоднократная ревакцинация коров, а а ряде хозяйств ее проводили до прекращения появления положительно реагирующих животных сроди молодняка и быков-производителей (Во-стощ!о»К,г-а;: сг:лл, Семипалатинская, Карагандинская, СевероКазахстанская и др.). Применение вакцины из итакма 19 с цель» икцунизпции ливотншс против бруцеллеза в комплексе о другими органиэоционно-хозяЯстпенишя и ветеринарно-санитариыии мероприятиями позволило в определенной меро сдерживать распространение бруцеллеза и республике и заболеваемость животных в б л а-
гоиолучных хозяйствах. Эта мера способствовала оздоровлению юю-гих хозяйств и в целом улучшила эпизоотическую ситуацию.
Вместе с тем, как показывает анализ данных ветеринарной отчетности, желаемых результатов в оздоровлении всего поголовья крупного рогатого скота в подавляющем большинстве областей не получено.
После прекращения иммунизации коров, число положительно реагирующих при очередных исследованиях стало возрастать и к концу 1974 года достигло 4% (табл.1). Причем наибольшее количество таких животных вццелено в Центральном (5,2$), Западном (4,9^), и Северном (4,5?з) опиэоотологических районах, особенна в Карагандинской (6,8%), ТоргаЯской (6,5^), Актюбинском (5,7$), Акмолинской (5,4$), Кокшетоуской (4,7%) н других областях.
Таблица I.
Некоторые данные о заболеваемости крупного рогатого скота бруцеллезом в Республике Казахстан за 1974 год
!№!Эпизоото-1Выявлено больных %\наличие?К-ро неблагоп-х хоо-в пп1логичес- !--!х-в в общей ПГналйчйю
!кие 'всего ! коров !от общ,'численности!хозяйств в {районы ! ! (числен.!в рсспу- !элизоотол-х !' I___!_1в респ.'блике_!районах
I. Северный 4,5 9,2 40,2 оо„8 80,0
2. Западный 4,9 .6,0 11,9 15,6 76,1
3. Центральный 5,2 7,2 5,9 7,4 71,7
Юкный 4,4 5,2 31,8 15,0 2?, 3
5. Восточный 1,9 4,4 10,2 6,0 34,1
Итого по
республике 4,0 6,4 100,0 100,0 57,8
Большое количество положительно реагирующих животных, выявленных при исследовании после применения вакцины из штата 15, нз мог. ) быть сдано на убой в связи с необходимостью выполнения плановых заданий по сдаче государству животноводческой продукции. Передержка больных бруцеллезом коров без должной их изоляции вызывала обострение инфекции и массовое перезаражение скота.
В северной зоне республики, где имеет место ряд вышеописанных наш факторов, способствующих распространению инфекции (стойловоо содержание, высокая концентрация скота, слабая инсоляция в связи с продолжительным зимним периодом и т.д.), количество неблагополучных хозяйств здесь достигло 60&. В то же
зрзмя в юго-восточной аоне этот показатель колебался от 27 до
Таким образом, прекращение или снижение иммунизации скота резко обострило эпизоотическую ситуацию по бруцеллезу крупного рогатого скота в республике, особенно в Северном, Центральном и Западном эпизоотологических районах.
3 этой связи, с октября 1974 года, а в большинстве областей с 1975 года, в комплекс противобруцеллезиых мероприятий была включена иммунизация животных вакциной из итамма 82. Иммунизации подвергали все возрастные группы маточного поголовья крупного рогатого скота. В результате уже на второй и последующие годы после применения вакцины в комплексе с ветеринарно-сат нитарныыи мерами в ряде областей и в целом по республике получены определенные положительные результаты как в оздоровлении неблагополучных хозяйств, так и в снижении заболеваемости, что показано в таблице 2.
Таблица ?..
Данные о заболеваемости крупного рогатого скота бруцеллезом и количестве неблагополучных пунктоп в Республике Казахстан в период 1974 =» 197/ годы
!?!? ¡Эпизоотоло-пп ¡гические Iвайоны ! * !
1974 !
1975
! 1976
( 1977
I. Северный 15 19 4,4 20 13 4,3 33 20 3,1 49 18 23
Я. Западный 3 13 5,0 7 7 4,9 10 2 4,3 13 4 3,4
Зо Центральный б 3 5,2 I 5,6 8 Ъ 3,8 & 2 2,6
4» Ввзшй 16 30 4 ,3 28 33 3 »3 35 15 Я,4 36 18 1,7
5. Восточный II 12 1,9 II 34 1,8 14 2 1,0 Г-Т ?. 0,9
Итого: 51 83 4,0 б? ,:,э 3,7 100 44 3,1 123 44 2,6
Каи видно из данных, прнведенкух в таблице Я, заболеваемость крупного рогмого скота п Соросом опизоотологическом районе снизилась с э 1574 роду до 2,8$ в 1977 году. Соот» вотстеошо в Зйпздном - с % до 3,4%, Центральном - с 5,2/> до 2,65, НЬяиом - с 4,3)1» до 7.,7% и "Восточном 'с 1,% до 0,6».
Оцолиуая ебщео нликние иммунизации коров на эпизоотически обстановку, шш10 'констатировать, что о тех областях, где вакцинация кроюдндась с болыжи охватом, там ботее выраженное ешке-нио заболеваемости и .угягныаение числа ноблегополучшас пунктог
Тан, например, в 1974 году процент заболеваемости в Карагандинской области составил 6,6, а в Незказганской он был равен 2,1° В 1975 году в Карагандинской области было иммунизировано 35,0 тысяч коров, в 1976 - 24,1 тысячи, в 1977 - 19,0 тысяч и в 1978 - 15,0 тысяч голов.
Таким образом, Есего вакцинировано за указанный период 93,0 тысячи коров, т.е. почти все имеющееся поголовье.
В Жезказганской области за это время иммунизировано только 3 тысячи коров или 20$ от наличия их в области. Заболеваемость среди указанного контингента животных в Незказганской области, начиная с 1975 года, постоянно возрастает, тогда как в Карагандинской уровень заболеваемости снизился более, чем в
2 раза» Количество оздоровленных хозяйств соответственно равно
3 и 30, т.е. в Карагандинской области оздоровлено хозяйств в 10 раз болызе, нежели в Жезказганской.
.В Атырауской области за указанный период вакцинировано более 40,0 тысячи коров. При исследовании в 1976 году 75,2 тысячи голов крупного рогатого скота выявлено 3,8 тысячи положительно реагирующих животных, что'составляет 4,9£, а в IS79 году из исследованных 77,5 тысячи голов выявлено только 1,5 тысячи больных или 1,9«. К 1980 году здесь оставалось линь три неблагополучию; хозяйства.
. Наглядно проявилось улучшение эпизоотической обстановки в Восточном эпизостологическом районе, где в IS75-76 годах, в основномj асе поголовье коров и телок в неблагополучных хозяйствах било иммунизировано вакциной из штамма 82.
Из 229,9 тысячи коров одномоментно (независимо от периода стельности) вакцинировано в двух областях (Семипалатинской и Восточно-Казахстанской) 181,0 тысяч голов. Следует особо отметить, что 1бласти Восточного эпиэоотологического района имеют значительные предпосылки для распределения инфекционных болез-. ней зследствии отгонного метода животноводства и пересечения территория, как указано нами Еьетя, многих хозяйств межгосударственными и республиканскими трассами перегона скота» Однако, своевременная иммунизация маточного поголовья, в комплексе с другими мерами (изоляция и убой больных, проведение взтерииарно-сонитарных мероприятий и т.д.) позволила добиться значительных успехов в борьбе с бруцеллезом крупного рогатого скота» За плть лет (1975-1980 гг.) в этом регионе оздоровлено 96 и осталось на
1.01.1981 лкаь 26 неблагополучных хозяйств из 244 имеющихся.
Однако, по истечении трех и боле® лет после ревакцинации коров пакциной из штамма 82, уровень заболеваемости начинает -снова возрастать, что показано в таблице 3.
Таблица 3.
Некоторые показатели эпизоотической ситуации по бруцеллезу крупного рогатого скота в 1570-1981 гг.
№ пп
Юпизоотоло-!гические
!районы ?
!
1778 ТРГ
!
|ХХ|1 л .^¡ф л'он о.еГ ¡п а ч I о л о! его '<3>о Гю о п4^ )Я\ | а) а) о X !« Я 'г; Д
1979 ГГо
• г: л ! о >>!а> и
1980 -тто
I сгр I ко Ьо ( • еггх. I га
!ОХ'Я Ж 1ГО Д
!
Т
!о ж 1ю а ! п ш
!
1981
те
гт
>хг{ I л. з; . Е ! а> >>! <и Е-> ! . й. I й>
(Ю 0)
а «
....
Ш
сто I «о ?о
!о X I <д Ж 1<Ч
I. Северный 57 17 3,6 35 18 3,9 34 6 4,2 21 15 4,7
2. Западный 14 3 3,7 8 2 2,9 7 8 3,7 13 4 3,4
3. Центральный 15 4 3,8 4 7 4,5 7 I 3,9 3 3 3,5
4. ЮюшП 52 25 2,1 36 18 2,0 30 22 2,3 22 15
5с Восточный 20 9 0,8 25 2 0,8 16 3 0,6 14 7 0,6
Итого; ¡57 48 2,9 108 42 3,3 94 40 3,3 73 44 3,5
Данные таблицы 3 свидотельствуит о необходимости периодического подъема шатунного уровня поголовья крупного, рогатого скота, находящегося в зоне с широким распространением инфекции» Такое явление, вероятно, коано объяснить недостаточны« жгмуни" тэтой, особенно у коров, через определеннее время после вакцинации при содержании их в хозяйствах с относительной изоляцией значительного количества больного бруцэллезом скота, а тптезе з условиях неблагополучного окружения и неудовлетворительного проведения ваторинар!0-сгмп:тарных гароприятий.
Так, ка 1975 год э хозяйствах республики оставалось 89,6 тысяч больных пивотннх, а я 1979 количество такого скота достигло 132,0 тысяч, в 1580 году ■= 155,6 тысяч, из которых около 80$ составляли корою.
Крою того, в некоторых областях ккезт »»сто сложившиеся краевые оппзсотологичэскиэ особенности. Так, з Северо-Каэахстяя-екоЯ области «югояратнгя Еакц:я?еция взрослого поголовья атомном 18 (особенно в так иаэн»»вш«- "эмкнутих" по причине высокой поргленности скота тубориуяэзоа) не позволяла п послодущоа проводить в полной мерз диагностические исследования«.
Нагда оточено, что в отдаленны*} сроки посла вакцинации имеет место выявление роагирувщих на бруврллез зиготных в неко-
торых оздоровленных и ранее благополучных хозяйствах» Тщательный анализ соответствующих данных по Алматииской области показал, что выявление положительно реагирующих в оздоровленных (с помощью вакцины из штамма 82) хозяйствах полностью прекращается лишь по истечении трех-четырех лет после снятия ограничений (при тщательной санации внешней среды), что свидетельствует о наличии возбудителя инфекции в определенном нозореате»
Приведенные денные по заболеваемости животных бруцеллезом в целом по республике за ряд лет явились основанием для проведения з хозяйствах повторной ревакцинации коров.
При этом в каждом эпизоотологическом районе имели место особенности организационных форм борьбы с бруцеллезной инфекцией (в Северном - создание внутрихозяйственных специализированных ферм, в Центральном - межхозяйственных ферм по выращиванию ремонтных телок, в Южной и Восточном иммунизация с диагностическим исследованием и т.д.).
Темпы оздоровительных работ за период 198&-Х995 годы приведены нами в таблицах 4,5.
1аблица 4
Некоторые показатели эпизоотической ситуации по бруцеллезу крупного рогатого скота в 1С66-1990 годы
КНЗпизоотоло-шНгические (районы
I !
-1 1986 1 1987 ! 1968 * 1969
! ~~ " ""
I1" 11 л
(о » 1»Н (и. С I
!о -о £
сто 0>
О4^ Й сЗ п т* ! г
I л
[ ! ¡О ! О 2 I ьго Го ш « РГ-—. о «5 оз 1о X I п »о
т
| о. в ' о
в I Л
IV Н
Ч 1
. - ОЙ
I ста Ро <ц ■ га^-ч , й сз 1 о рс ; ю <о
, « п V
! О о I 0> 1 Й-С 1 к; I
1 о 1 о 5
[ и>
) Л СЙ
1 о Ж 1(1»
1990
-гр
! о « 1Р.С
■19-Д-
, з л ! а> Е-9 и I ■ о X
<и
! а! аЗ 1 а я
1. Северный 57 2,6 76 2,3 48 2,1 53 1,8 21 1,1
2. Западный 18 1,5 31 1,6 28 1,2 8 1,7 18 0,5 3„ Центральный 10 2,6 27 2,5 17 2,3 10 1,9 9 0,7 4» Южный 17 1,5 гЗ 1,5 18 1,1 5 1,1 ХО 0,4 5. Восточ; лй 4 0,7 7 0,4 5 0,3 X 0,2 2 0;Х
Итого; 106 5,7 164 Х,6 116 1,4 77 1,3 60 0,5
Данные таблиц показывают, что на всем протяжении выполнения планируем« мероприятий, специфических для кавдого зпизо-отологического района, идет неуклонное снижение ааболеваемости и числа "неблагополучных пунктов. Однако, э некоторых регионах каждого эпизоотслогичесиого района имела место недостаточная эффективность проводимых мор, что требовало'тщательного анализа и разработки дополнительных мероприятий по повышения эффзктив-
Таблица Ь.
Некоторые показатели эпизоотической ситуации по бруцеллёзу крупного рогатого скота в 1991-1995 годы
Ьи'Эпизоотологкч! 1991 I " " 199Д л ? 1993 1 1994 ! 1995 пп! районы Ш ¿£!0 . ! 1 о ¿ГТЯПЛТ"
Тки ч1 зчк о 2 | ч и ч I е е « I ж к н I !=ГЬ X I О й I I О I I ЧЭ 0> > ССО Х.О 2 , I >» О 2, 1>л I 'по^'вв'чий I =5 О) 1ои>Ьо [сссТющГсссЪ Юге] сз«1п:гс I со га 1 Я-1 Й Я-1Й ______' ■ , ', П ¡П 1П_!_ ! !п О . ' О а' И Я1 О
I. Северный 27 0,6 35 1.9 39 0,7 I 0,8 7 4,3
2. Западный 9 2.7 5 0,6 ■5 0,5 2 1.4 I 2,6
3. Центральный 4 13,9 I 0,5 3 0,8 - .1,7 - 7,4
4. Юаный II 1,3 5 0,2 8 ОД I 1Д 4 1,5
5. Восточный I 2,1 3 од 2 0,16 1.5 2 3,7
"ТТтого: 1 ,о '4У U,о 0,4 4 1.J ТПГГ9
кости оздоровительных работ. В частности, изыскание путей повышения эффективности применения вакцин, диагностических средств, а также препаратов, определяющих реактивность организма животных.
Изыскание оптимальных парметроэ применения вакцин против бруцеллёза крупного рогатого скота
Определение динамики наличия противобруцеллезиых антител у телят, иммунизированных вакцинами из птаммов 19,10445 и 62
Возможность использования для специфической профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота вакцин из а?а?.;шв 19,104-'.! и 82 а сравнительном аспекте изучена недостаточно.
В связи с этим наш была поставлена задача определить антигенное ¡1 иммуногенныз свойства вакцин из втаммов 19,104-М и 82 б экспериментальных и производственных условиях.
В опыте использовано 150 голов крупного рогатого скота галловейс-кой породы, которые были завезены в £П0 "Налгомыс" Казахского НИВИ кз Нарынкольского района Алмзтинской области.
Работа проводилась на телятах, которые до отбивки находились на подсосе под кагеряии до 4-5 месячного возраста. Перед тонизацией все »ивотные были исследованы на бруцеллёз и получены отрицательные результаты. Из общего колич&ства яивоишх били сформированы 4 группы по 30 голов в иаздой. Телятам первой группы инъецировали
вакцину из HTaitt'ii 19 в дозе 80 иярц и.к., телятак
П группы вводили вакцину из штамма 104-М также в дозе 80 млрд МоК,, телятам Ш группы вводили вакцину из штамма 82 в дозо 100 млрд ы.к»» У группа была контрольной, то есть не привитые»
Динамику появления и угасания антител в сыЕоротке крови иммунизированных животных изучали а РА и РДСК с биофабричными антигенами через б, 15, 30, 60, 90, 120 и 150 дней после вакцинации» Результаты серологических исследований суммировали и выводили величины средних титров.
У животных первой группы агглютинины были выявлены на 7-г сутки в титре 320 ЫЕ, затем до 15-ти суток идет нарастание их количества и к отоцу сроку они достигают максимальной величины 445 М2. Затем наблюдается снижение количества агглютининов к на 150-е сутки они исчезают.
Номллементсвязываищие вещества были выявлены на 7-е сутки в незначительном титре (1:10), после чего на 15-е сутки наблюдается резкий подъем их числа до максимального титра (1:89), затеи едет снижение титров и на 150-е сутки они не обнаруживаются«
При введении животный второй группы вакцины из штамма. 104-М в дозе 80 иярд м.к„ агглютинины были выявлены на 7-е суткя в максимальном титре 190 US, после чего идет снижение их колк« чесхва и на 90-г сутки агглютинины ко выявлялись«
. Хомплеыентсвязывазщие вещества были выявлены якшь на 15~<э сутки а максимальном титре ,/:32í; затеи мде? сишгвшэ мк содержания и иа 150-« сутки они нэ обнаруаиваютса«
Ирм введении низотным третьей группы вакцины из цтеигма 82 в дозе 100 млрд МоК» агглютинины были выявлены на 7-е сутки а титре 40 LE, затем на 15-е сутки вдет нарастания титров до 120 МЕ0 посла чего идет снижение и на 1Ю-® сутки сны нэ обнарулива-
ютсяо
Комплеизнтевязывающие вещества выявлены только на 15-а сутки в титре 2,5, затем на 60-е сутки достигает максимальной величины и на 90-8 сутки полностью угасаит,,
Таким образом, при введении гелятау 4-5 -желчного ¡возраста противобруцеллезных вакцин из етаздмов 19, I04-" и 62 установлено, что титра антител (агглютинины к комплвйдантезяаывавчиа ства) раньше угасают у яквотиых, Рвкшшировягшмг етемвоа 82 (то есть через 3 месяца), затем у гивогнмх, йакц'!«н;ротшьк втаа-ззог: 1С-1-И и 19 (чорез 5 месяиев). Однако у животных, им^нйэироаам-
кых вакциной из штамма 104-М, агглютинины угасают раньше и титры антител их ниже, нежели у животных, вакцинированных птаммон 19, Поствакцинальные исследования ливотных следует проводить-соответственно не ранее 6 месяцев после иммунизации.
Далее, с целью изучения антигенных свойств вакцин из штаммов 19 и 82 в полной и малой дозах нами проведен дополнительный опыт на 200 здоровых в отношении бруцеллеза телках 4-5-месячного возраста совхоза "Таврический" Восточно-Казахстанской области (совместно с В.М„Антюховым).
Перед иммунизацией телят исследовали на бруцеллез в РА, РДСК и РВП, при этом во всех случаях получили отрицательные результаты.
Животных отбирали по принципу аналогов и разделяли соответственно на 4 группы; по 50 голов в каждой. Телок первой группы иммунизировали вакциной из итак.« 82 в дозе 100 млрд и. к., для животных второй группы применили сниженную в 5 раз дозу этого se препарата, то есть 20 цлрд м.к., животных третьей'-группы вакцинировали вакциной из штампа 19 в дозе БО млрд м.к., а телятам четвертой группы инъецировали вакцину в доз® 3 $,ярд
Й.Ко
Сыворотку крови исследовали «sepes 5, 15, 30 дней и далее ежемесячно, до полного угасания антител по каддой группа (с антигенами иэ sr и r форм бруцелл). При этой обнаружено, что при введении вакцины из птакда 82 в дозе 100 млрд м.к» аг~ гдотингега били выявлены на 5-з сутки у 32Ж яивотных. Далоэ на 15-о сутки ело нарастание количества реагирующих до после чего на 30-з сутки наблодаатся снижение их 'числа до 16$ и на 90~s сутки агглютинины не обнаруживается«,
В то да вредя когзгяеиентсвязывезссдае вещзства выявлялись на 5—3 сутки у 8$ аивотных, далее на 15—о сутки число реагируя-цих увеличилось до 14%, затеи на 30-е сутки ело снижение та количества и на 60-е сутки иоипяоиентсвязывсщ1:о гецеетза т улавливалась.
Введение вокцгаш из вта»т.82 в доза 10 шрд м.к« определило следующие показатели в данешмю накопления и угасания антител» ч
Агглэткнкна обнаруживались а сыворотка кров« технизированных х:п:-от'пгх на 5-о сутетз d 40% случаев, долее на 15-о сутки наблюкпяся незначительный подъем до ЛЛ%, т. 30-е сутки сняя&-
лись до 16$ и на 60-е сутки не выявлялись.
Коыплементсвязывагощие вещества отмечались у 4% животных в реакции со стандартным антигеном и у 2$ животных с антигеном из штамма 52 лишь на 15-е сутки. В дальнейших исследованиях положительно реагирующих животных не выявлено.
На введение вакцины из штамма 15 в полной дозе (80 шрд м.к„) количество реагирующих животных в РА на 5-е сутки составляло 66%, на 15-е сутки процент реагирующих достигал максимального пика 98$, после чего установили снижение количества реагирующих животных и на 150-е сутки антитела не обнаруживали,,
В РДСК на 5-е сутки выявили 643» реагирующих животных, затеи на 15-е сутки отмечено незначительное их увеличение, до 70$. После чего на 30-е сутки наблюдалось снижение числа реагирующих и на 180-е сутки комплементсвязывеищих веществ не обнаруживали.
При инъекции вакцины из штамма 19 в малой дозе, то есть 3 шрд м.Ко,, выявлены следующие особенности: агглютинины на 5-е ■сутки отмечались у "74% кивотных, затем на 1о-е сутки их количество увеличилось до 96$ с последующим снижением на 30-е сутки и на 90-е сутки положительно реагирующих не регистрировалось*
При постановке РДСК с сыворотками крови телят, иммунизированных полной и малой дозами вакцины из штамма 19с принципиальных различий не имелось» Антитела в сыворотке крови животных не обнаружены»
Таким образом^ результаты серологических исследований телок свидетельствовали, что болез выражение реакции протекали у животных третьей группы, привитых стандартной дозой вакцины из штамма 19, то есть 80 млрд мл<», ъ сравнении с показаниями в группах, где вводилась вакцина в малой дозе. Наиболее низкие показатели реакций отмечены за второй группе животных, вакцинированных лой дозой г кцины из штампа 82»
Динамика количества противобруцеллозных антител у телок случного возраста (16-18 месяцев), ренм-муиизированных вакцинами из штаммов 19, 104-М к 82 в малых и■полных дозах (3 и 100 илрд и»к.)
СЬыт был продолжен на этом же поголовье по истечении 10-12 'месяцев в 5П0 "Лалгамыс" на телках случного возраста в количество 120 голов, из которых сформировано 4 группы по 30 голов в каздой, Кромо этого, 30 голой слукили контролем, то
есть не вакцинированные. Перед иммунизацией все животные были исследованы на бруцеллез и получены отрицательные результаты. Ранее телята а 4-5-месячном возрасте были привиты противобруцелч-лезными вакцинами из штаммов 19, 104-М и 82 в стандартных дозах, то есть 80-100 млрд м.к. , затем их реиш,(унизмровали по гомологичному иммунное фону в малой и полной дозах (3 и 100 шрд м.к.).
Динамику появления и угасания антител в сыворотке крови ре имму н из и ро е а) шых животных изучали в РА и РДСК с биофабричными антигенами через 15 , 30 , 60 , 90 , 320 и 150 дней после вакцинации.
При этом выявлено, что повторное введение вакцины из штамма 19 в дозе 3 млрд м.к. индуцирует у животных выработку агглютининов, количество которых на 15~е сутки было равно 114,3 НЕ, после чего на 30-е сутки наблюдается нарастание их числа до максимума - 122,2 ЫЕ, а затем с 60-х суток идет снкиениз их количества и на. 150-е сутки они не обнаруживаются»
Комплементсвязыващие вещества максимального пика достигают на 15-е сутки, а к 1Ь0-м суткам полностью угасают.
На введение вакцины из штампа 104-М в дозе 3 гард а.к» агглютинины у животных были выявлены на 15-е сутки исследования в титре 138,8 ЫЕ, затем идет снижение юс количества и. на 159-0 сутки не выявляются«
Комллементсвязывающие вещества выявлены на 15-е сутки, затем идет нарастание, их числа, достигая максимальных величин на 120 сутки, а на 150-е сутки угасают.
В то ясе время введение вакцины из штампа 82 п дозе 100 млрд м.к. выявили следующие закономерности» Агглютинины были обнаружены на Х5-о сутка о максимальном титра, а на 120-« сутки полностью угасают.
Кокллекектсвязывшацио вещества выявлены в РДСК на 15-е сутки й титре 5,0, зато:.! идет подъем до 8,0, после чего идет снижение м на 150-й сутки угасалт.
Гаккм обраэоме диагяостячедкке исследования яивотюое, рз-ийцунизированных противобруцеллезшаш вакциной» из ататов 19, 104-М з г шых долгие и 82, могло проводить по истечении о месяцев ПОСЛО КЩунИЗОДИИ«
Далее, нами изучена динамика показаний кммунологичзских реакция у рекьаунизировзнных телок в производственных условиях»
Опыты проводили в благополучном по бруцеллезу совхозе "Кайенский" Таврического района Восточно-Казахстанской области на поголовье половозрелых телок.
Все подопытные телята в 4-5-месячном возрасте были нмцуни-зированы мшда вакциной из штамма 62 в полной дозе (100 шрд м.к.). Указанное поголовье разделили на 8 групп по 20 голов в каждой. За 2-3 месяца до осеменения животных реиммунизировали вакциной из штаьша 19 в следующих дозах: I, 3, 10, 80 млрд м.к. Аналогично описанному другие группы (5, 6, 7, 8) животных иммунизнровачи вакциной из штамма 82 в дозах I, 5, 10 и 100 млрд м.к.
В результате проведенной работы установили, что при введения вакцины из штамма 19 в дозе I шрд м.к. агглютинины выявляются па 5-е сутки у 12,5$ животных, далее наблюдается подъем количества реагирующих на 30-« сутки до 37,7$, после чего на 90-е - 150-е сутки сохранились на уровне 12,5$ м на 180-е сутки угасают..
Комплементсвязьгеаюцие вещества были обнаружены на 15-е сутки у 12,5$ животных, затек на 30-е сутки их количество достигает 25,0^ и на 90-е сутки'не обнаруживались»
На введение этой тс вакцины, но в дозе 3 илрд м.к. агглютинины выявляются на 1-й день у 11,1$ животных, далее на 30-й -90-fi день вдела реагирующих животных возрастает до 33,3$ и на 120-q сутки у II,животных и уже на 90-е сутки но выявляются, то есть РДСК была отрицательной»
Введение вакцины из штамма 19 в концентрации 10 млрд м.к» характеризуется появлением агглютининов на 15-е сутки у 8,3% животных, затем ¡¡а 30-е сутки достигает своей максимальной величины, что составило 41,поело чего на 90-120-е сутки агглютинины сохраняются у 3,3$ животных и на 150-о сутки не обнаруживаются»
Комплементсвязывагоциэ вещества выявлены па 5-15 сутки у 33,3!« животных^ с 30 по 150-е сутки с 28,0 до 0,3^ и на 180-е сутки не выявляются»
На введение стандартной дозы вакцины га штамма 19, то есть 80 шрд и.к., агглютининн выявляются на 15-е сутки у 8,ЭХ животных, "затем идет нарастание количества реагирующих еиоотннх до 41,6ÇS, и на 120-е сутки положительные реакции отсутствовали,
Комгшсшнтсвязыгаадио вещества выявляются ."a 5-Î5 сутки у • 33,Зй жпоотнкх, заток идет постепенное снижение реагнру»с;;:х жи~
вотных до 8,3% и на 160-е сутки и на 180-е сутки полностью исчезают.
При иммунизации з стандартной дозе, то есть 100 млрд м.к, ■ агглютинины выявляются на 15-е сутки у 1,155 реагирующих животных, далее на 90 сутки доходят до 2,2% и на 120-е сутки реагируют отрицательно,
Комплексктсвпзывающие вещества выявляются на 5-е сутки у Z,2?o животных, затем идет их нарастание на 30-е сутки до 44,4$ и на 90-е сутки не обнаруживаютсяо
После инъецирования животным Еакцин из атамыов 19 и 82 установлены следующие особенностио Наиболее выражены иммунологические реакции организма реимцунизированных тзлок наблюдаются при инъекции вакцин в дозах 10, 80 шрд м.Ко штак-ла 19 и 100 млрд ы.к. штамма 82. При вакцинации телок вакциной из итакма 82 в дозе I, 5 и 10 шрд м. к<> антитела в сыворотка гсровм но выявляли в течение всего периода исследований»
Динамика наличия агглютининов и комплекент&иксируя-щих веществ у коров после первичной и поатёдующих реим^унизации их вакцинами из птаммоз 19 „ I04-Ü м 82 ■
С этой целью в совхозе "Каменский" Таврического района Восточно-Казахстанской области подобрано 120 норов трох-сс:.ялет-него возраста, ранее и т.гун из про в aw rux в 5-8»1гасячном и I6--I8-кесячном возрасте вакциной из шгаыма 19.
Из названного «мела животных 50 были ревакцвдирозагеа вакциной из птямма 19 в ыалой дозе, 40 ревакцинированы вакциной кз итаroa 101-М и 30 подвергнуты ревакцинации лакцкной иэ штамма 82. Поствагсцинаяьным исследованиям сыворотки крови коров подвергнуты через 20, 50, 90, 120, 150, 180 и 240 дней после вакцинации»
Анализ проведенных нами исследований по обнаружения агглютининов м комплемзнтсвязываихцих веществ у крупного рогатого скота различных возрастов после введения км противобруцеллезных вакцин из DT&.VMOо 19, I04-.M показывает, что максимальные титры их обнаруживаются через 15-30 дней. Этот период являатся наиболее приемлемым для проведения диагностических исследований с целью установления наличия им?.?унного фона у животных и, в случае его отсутствия, принятия нербходшлых мер для повышения специфической резистентности организма животных. В дальнейшие поствак-цииальные сроки идет снижение количества агглютининов и комлле-
ментсвязыващих антител, полное угасание которых наблюдается у животных до полового созревания через б месяцев и у взрослых животных, невакцинированных в период полового созревания до осеменения, также через 6 месяцев, а у коров, повторно ревакциниро-ванных вакцинами из штаммов 19 и 104-М через 7-8 месяцев после введения агглютиногенных вакцин и через 6 месяцев после введения вакцины из штамма 82. Эти данные могут быть взяты за основу для проведения дальнейших научных наблюдений в производственных условиях, где может иметь место антигенное раздражение, вызванное родственной по антигенной структуре микрофлорой и показанием возбудителя болезни в субинфицирующих дозах, что требует проведения дополнительных опытов в производственных условиях»
Напряженность иммунитета у крупного рогатого скота после вакцинации его противобруцеллезными вакцинами в различных дозах
Одним из главных показателей оценки противобруцеллезньгх ьакцин является способность их создавать иммунитет у животных, способный защитить их от заболевания в очаге инфекции.
Опыты по данному вопросу проводились нами как в экспериментальных, так и в производственных условиях» В первом случае заражение животных осуществляли оттитрованной дозой вирулентной культуры 3.abortus ЬА, во втором - животных оставляли в очаге инфекции вместе с контрольными группами и по истечении определенного времени проводили бактериологическое исследование,,
Из числа подопытных животных, с цель® изучения напряженности иммунитета, по истечении года после рекммунизации противобруцеллезными вакцинами из штаммов 19, 104-М и 82 провели комиссионное заражение совместно с сотрудниками ШЗВ 25 голов нетелей, находившихся под опытом в ЭПО "Жалгамыс" Казахского НИВИ„
Указанные животные в возрасте 4-5 месяцев привиты (I августа 1987г.) и в возрасте 15-18 месяцев (I октября 1988г.) ревак-цинированы против бруцеллеза разными вакцинами по схеме 19 ПД + + 29 ВД, 82 ОД + 82 ЦД, 104-М ПД + 104-М ЦД, 19 11Д + 82 ОД,
Заражение проводили взвесью бруцелл в физрастворе, содержащей в I мл SD. млн м.к. (определенного по оптическому стандарту) по 0,05 мл конъюнктивально в оба глаза при помощи иприца-дозатора Титертек.
Спустя 63 дня после'заражения данные нетели были подвергнуты убою и исследовали бактериологически лимфатические узлы н
паренхиматозные органы.
Результаты бактериологических исследований показали, что из 5 животных первой группы не заразились 4 (иммунитет у 80% _ животных), из второй группы все б (иммунитету 100% животных) и из четвертой группы 4 (иммунитет у 8055 животных). У всех 4-х контрольных животных развилась генерализованная форма инфекции.
Таким образом, по истечении года после реиммунизации телок наиболее эффективными схемами оказались: штамм 19 + штамм 82, далее 19 + 19 (малая доза) и 82 + 82 (полные дозы). В то же время вакцина из штамма 104-М оказалась меное имцуногенной в сравнении с вышеуказанными препаратами.
Следовательно , в данном случае регионарная инфекция была у особей со слабыми клеточной и гуморальной реакциями. Тогда как хороао виратсенные клеточные и гуморальные реакции наблюдались в сочетании со стерильным иммунитетом.
Полученные нами экспериментальные данные в сравнительном аспекте по изучению и определению иммунитета у крупного рогатогй скота после реиммунизации вакцинаш из атаммов 19, 104-4! и 82 по истечении года подтвердило несовершенство существующих схем применения противобруцеллезных вакцин. Согласно существующей инструкции предусмотрена ревакцинация по истечении 2-х лег указанными препаратами в хотя ужэ через год вакцина из штамма 104-И оказалась менее техногенной даже в сравнении с вакцинами из штаммов 19 и 82.
Поэтоцу изучение иммунитета по истечении полутора и двух лет является актуальной задачей, необходимой для правильного определения сроков ревакцинации яивотных против бруцеллеза существующим вакцинами.
В этой связи из числа оставшихся в опыте ЭП0 "Жалгамыс" 15 голов крупного рогатого скота были заражены вирулентной культурой в.abortus в дозе 50 млн м.к, яо1гьюнктивально по вышеописанной методике.
По истечении 2 месяцев после заражения провели убой и бактериологическое исследование органов. Результаты бактериологического исследования показали, что через 44 дня после заражения у всех трех контрольных животных выявлена генерализованная форма инфекции с индексом инфицированности 31,5. Из 3-х ревакцини-ровалных телок вакциной из ттахвш 82 по гомологично^ фону, культура вцделена у одной (иммунитет 66,6). Из животных первой
25
Схема I
КМ Первично 1шмунизировано!Реиммуниэировано!Кол-во! Номера пп!вакциной из шт. в дозе 1в дозе __ _____ ?голов & животных
1. 19 (80 млрд м.к.) 19 (3 млрд м.к.) 3
2. 19 (80 шрд м.к.) 82 (100 шрд м.к.) 3
3. 104-Ы (80 млрд м.к,) 104-М (3 шрд м.к.) 3
4. 82 (100 млрд м.к.) 82 (100 клрд ы.к.) 3
5. Контрольные, 3 не вакцинированные
3860, 5938 16.
3835, 3859, 3880
5923, 3893, 5914
5324, 381I, 26
5921, 5901, 5916
и второй групп иммунными оказались по одному животному (33,3^), у ревакцинированных" вакциной из штамма 104-М противостояли заражении две нетели (иммунитет 66,
Р результате проведению: исследований установлено, что наиболее аффективной схемой оказались 82 + 82 (бб,б^), затем 104-М + 104-М малая доза препарата (66,б/о), далее 19 ОД + 19 ВД и 19 ЦД + 62 ЦД (33,3*).
Полученные нами данные свидетельствуют о том, что им^'нитет по "истечении 1,5 лет после ревакцинации противобруцеллезньжш вакцинами оказывается недоетатошюП напряженности, максимальный процент иммунитета -66,655, а в других группах еще меньше 33,3$, что еще раз подтверждает эффективность ежегодной ревакцинации коров, учитывая сложную зпизоотологическу» обстановку в республике по бруцеллезу крупного рогатого скота.
Нами установлено„ что схема введения вакцины из штамма 82 по фону штамма 39 имеет свои особенности и преимущества, в частности, по фону штамма 19 на проявляются абортогенные свойства вакцины из таима 82, создается грунт иммунитета, выражающийся в повышении напряженности иммунитета и имеется возможность для выявления толерантных животных в неблагополучных хозяйствах. Целесообразность схемы 19 + 82 подтверждена также показателями гуморального и клеточного иммунитета, где показано предпочтение указанной схеме иммунизации крупного рогатого скота против бруцеллеза.
Сопоставление клеточных и гуморальных компонентов иммунного ответа показало, что у части особей при отсутствии положительной РА имело место выраженная клеточная реакция. Поэтому дальнейшее
изучение клеточного компот ..¿а иммунитета при бруцеллезе является важной задачей в научно-теоретическом и прикладном аспекте.
Выявлена эффективность применения вакцин по гомологичному . фону штамм 62 + штамм 82 и штамм 19 + штамм 19 1.!Д, в то же время применение вакцины из штамма 02 взрослым животным по фону sit шли 19 в некоторых случаях способствует длительному сохранении в сыворотке к рог» и иммунизированных животных противобруцеллезньос поствакцинальных антител.
В то же время вакцина из штамма 104-М по схеме иммунизации телят полной дозой (ВО млрд м.к.) и ревакцинация малой дозой (3 млрд м.к.) показала себя менее имцуногенной вакциной в сравнении с данными при использовании сочетания 19 и 82„
В производственных условиях применение вакцины из штамма 104-М в малой дозе при иммунизации крупного рогатого скота в хозяйствах Костанайской области показало, что штамм оказался чрезмерно реактогенным и антигенным препаратом, вызывающим в организме взрослых-животных активную продукцию специфических противобруцеллезных антител.
В совхозе "Каменский", после угасания поствакцинальных реакций у животных, реиммунизированных вакцинами из штампов 19 и 82 по истечении года изучили в сравнительном аспекте наличие иммунитета путем прямого заражения кх вирулентной культурой а. abortus 54 в дозе 20 млн м.к., которую вводили подкожно в область средней трети аеи в объеме 4 мл в стационаре отдела бруцеллеза Казахского ИКВИ. В опыт взято 19 хнвотных, в том числе 16 опытных и 3 контрольных» Данные »квотные были им.«унизированы нами противобруцеляеэными вакцинами по следующим схемам:
1 группа. Полная доза вакцгаш из штакгд 82 (100 млрд м.к.) + талая доза вакцины из штамма 19 (3 млрд м.к.).
2 группа. Полная доза вакцины из аташа 82 + полная доза из итамма 19.
3 группа. Полная доза вакцины из штамма 82 + полная доза вакцины из атемма 82 (10 млрд м.к,).
4 группа. Полная доза оякщиш из итакг.а 82 + полная доза вакцины из штамма 62.
Заражение животных проводили" вирулентной культурой о4 is дозе 20 млн м.к.
В целях проверки иммунного состояния подопьтгых животных через 30 дней после заражения подвергли убоо на санитарной бойне
Алматинского мясокомбината, где от кавдого животного взят материал (17 объектов и 16 плодов) для бактериологического исследования- и постановки биопробы.
В результате исследования установлено, что все контрольные животные не противостояли заражению и от них вццелили 8 культур бруцелл вирулентного штамма.
В то же время телки, ре имму низ про ванные вакцинами из штаммов 19 и 82, противостояли заражению. При этом показатели имк^у-нитета были неодинаковыми. В частности, наиболее устойчивыми к заражению бруцеллезом являлись животные, реиммунизированные полной 'дозой вакцины из штамма 82. В других случаях количество им-цунных было примерю равное. Важно отметить, что по числу выделенных культур малые дозы из штаммов 19 и 82 по имцуногенности не уступали полной.'Кроме того, во всех случаях плоды стельных животных оказались стерильными, бруцеллы смогли изолировать только из лимфоузлов и органов матерей.
Изолированные культуры бруцелл подвергли индикации и идентификации по общепринятым методам исследования.
Вышеуказанные факты позволяют заключить, что для ревакцинации телок наиболее целесообразным является введение вакцин из штаммов 82 в полной и 19 в малой дозах (то есть 100, 3 и 10 млад м.к,). Преимуществом малых доз по сравнению с полными является то, что при почти одинаковом уровне имцунитета титры поствакцинальных антител после введения первых угасают раньше, что дает возможность серологические исследования проводить в минимальные поствакцинальные сроки.
Оставшееся в совхозе "Каменский" поголовье, ревакцинирован-ное по указанным схемам, отелилось нормально. После отела животных исследовали с помощью серологических реакций. При этом получен двукра- ;ый отрицательный результат (акт прилагается).
Таким образом, через год после реимцунизации против бруцеллеза телок вакцинами из штаммов 19 и 82<в разных дозах, установлено, что наиболее оптимальными оказались схемы 82 ЦЦ + 19 ВД (ищ^унитет 75$£), в сравнении с 82 + 19 ЦД (где иммунитет тоже составил 7Е#). Однако введение ыалой дозы штамма 19 по фону шташа 8¿ дает возможность в болев короткие сроки исчезновению в крови поствакцинальньос антител и проведения диагностических исследований, а создаваемый при этом иммунитет равнозначен все-' дению полной дозы препарата.
При сравнении эффективности схем введения вакцин из штамма 82 полная и малая доза,также выявлены закономерности, подтверждающие эффективность малой дозы штамма 82 в дозе 10 «лрд и. к. в. сравнении со 100 млрд м„к. При этом титры при 10 млрд м.к, в сыворотке крови имьунизированных животных не выявляются, а иммунитет не уступает таковоку от полной дозы вакцины (75$).
Полученные нами данные, свидетельствующие о том, что иммунитет при введении вакцины из штамма 82, в основном, сохраняется а течений года, позволяют рекомендовать ежегодную ревакцина-цив коров против бруцеллеза вакциной из штамма 82 в дозе 10 млрд м.к. Это повысит эффективность производимых противобруцеллезных мероприятий.
Предлагаемые нами схемы применения противобруцеллезных вакцин нашли свое отражение в соответствующих рекомендациях, защищены охранными документами (Куал!к и патентом Республики Казахстан) к включены в комплексный план основных мероприятий по оздоровлению животноводческих хозяйств от заболеваний бруцелле- ' зом и туберкулезом на 1991-1995 гг. и 1996-2000 годы.
Определение возможности использования вакцины из штамма 82 с целью провокации латентных форм течения бруцеллеза среди крупного рогатого скота
В связи с широким применением для иммунизации животных против бруцеллеза вакцины из слабоагглотиногенного штамма 82, представляет интерес выяснить возможность его использования для провокации латентных форм течения болезни. При ото1.! на первом этапе работы ваяно определить сроки исчезновения антител из сыворотки крови еивотнис после введения различных доз вакцины из штамиа 62.
■Для изучения данного вопроса паки, совместно с В.И.Белова-бои проведен опыт в сПО "Жавгамыс" Казахского НИЕИ, где в экспериментальных условиях использовано 50 коров.
Указанное поголовье разделено на 5 групп по 10 голов в каждой» Ллс-отннм перзоЯ группы вакцину иэ.птадаа 82 ?водили в дозе I илрд Не к., коровяи П-Й группы^ в дозе 5 ;ирд к. к., 0-й - 10 илрд и.к., 1У-Й - 20 шрд м.н. Нивотник У-Й группы вакцинировали полной дозой препарата <100 шрд М,к.). Последующие диагностические исследования (РА и-РДСК) проводили через 15, 30, 45 ы 60 дней после введения препарата.
Установлено, что наиболее выраженная июзунологическал реак-
тквкость организма животных отмечается на введение вакцины из штамма 82 в дозе 10 млрд м.к. (титры агглютининов и комплемент-связывающих веществ).
Б тс же время вакцина в дозах 2-5 млрд м.к. вызывает выработку антител в значительно меньших количествах и уже через 2 месяца после -вакцинации они не обнаруживаются в серологических реакциях (РА, РДСК).
Полученные наш данные свидетельствуют о том, что дазу вакцины, содерхалую 1-5 млрд м.к., воэмокно использовать для испытания с целью провокации латентных форы бруцеллеза.
Испытание этого метода провели d колхозе Джангильдина Новороссийского района Актюбинской области на двух гуртах коров (¡фстафина - 212 голов и Курмангабаева 20? голов).
При очередном исследовании■с данных гуртов были выявлены единичные случаи положительно реагирующих, в частности, по 3 животных с каждого гурта.
Уместно отметить, что б предыдущих исследованиях также имели место случаи обнаружения животных с позитивны,ш показаниями серологических реакций^
Одновременно, при взятии крови животным была введена вакцина из штамма 82 в дозе I- млрд м.к. (с целью провокации)о
Последующие диагностические исследования проводили по истечении 30 дней. Полученные при этом результаты показали, что введение малых доз вакцины из штамма Е2 способствовало более полному выявления больных екеотных и получению групповых отрицательных результатов. В то хе время в контрольных группах продолгали обнаруживаться больные животные»
Описанный опыт наглядно проиллюстрировал возможность ускоренного оздоровления поголовья с помощью вакцины из штамма 82, На со. :об выявления бруцеллоносителей у крупного рогатого скота видано свидетельство на "ноу-хау" № 0020II5, заключающийся в том, что используется штамм 62 в дозе'1-5 млрд м.к.,' а т'акке повторным введением 20 и ICO млрд м.к. этой вакцины'.
Получив предварительные положительные результаты, нами в совхозе "Кудуксайский" Новороссийского района Актюбинской области кыцунизировано I/IC0 дозой вакцины из штамма с2, 25 гуртов коров и подвергнуто днагностичзсксцу исследованию через 45 дней с последующей рееакцшацией полной дозой вакцины7 из итаыма 82. Три гурта телок 1937 года роздения обследованы И ревакцинированы
только одной полной дозой вакцины из атамма 82.
Из 3555 голов крупного рогатого скота указанных выше гуртов выявлено -126 (3,5%) больных бруцеллезом животных. Через 6 месяцев все поголовье исследовали на бруцеллез. При этом в 14 гуртах у коров получены двукратные подряд отрицательные результаты при исследовании на бруцеллез.
В II гуртах при первичном исследовании выделены едини'шо реагирующие животные и при повторном исследовании получены негативные показания при диагностическом исследовании на бруцеллез. В то ке время в трех гуртах, где животных иммунизировали согласно наставлению (однократно вакциной из итамма 82) постоянно выделялись положительно реагирующие животные.
Учитывая полученные результаты, мы реаили провести провокацию скрытого бруцеллоносительства в других, числящихся благополучными, хозяйствах, где выделялись единично реагирующие на бруцеллез животные. Опыт проведен в совхозе "Новотроицкий" Новороссийского района. Из трех гуртов Еьделенк от 2 до 5 положительно реагирующих животных. Использование предлагаемого нами метода позволило в течение 3-х месяцев практически получить групповые отрицательные результаты.
Для выявления скрытого бактерионосительства приемлем метод провокации с использованием живой вадцины из штамма 82 в дозе I млрд м.к. в качестве специфического провоцирующего препарата, а ревакцинация згой вакциной создает достаточно напряженный иммунитет и при проведении комплекса ветеринарно-санитарных мероприятий ускоряет оздоровление хозяйств республики от бруцеллеза.
Обобщенные данные по этому вопросу отражены в рекомендациях "Профилактика бруцеллеза у крупного рогатого скота и выявление толерантных и бруцеллоносителей". Утвервдена ГУВ «!СХ Ресг.убл! и Казахстан, Алматы, 1391 год.
Изыскание метода предотвращения поствакцинальных абортов у крупного рогатого скота при' иммунизации вакциной из атаима 62
г/ами была изыскана доза вакцины из птамма 82, которая в организме животного индуцировала иммунитет, предотвращающий проявление абортогенного действия вакцины из итакка 82.
С этой целью нами подобрана группа коров а количество 23 голов, 18 кз которых введена вакцина из атамма 82 э дозе I шр^
м.к. и 10 животным - полная доза (100 млрд м.к.). Наблюдение проводили в течение 30 дней. . •
За этот период из числа животных, вакцинированных полной дозой, 7 абортировало в разное время после инъекции вакцины, а в опытной группе абортов среди животных не наблюдалось» После чего коровам опытной группы введена вакцина в полной дозе. Последующие наблюдения до конца опыта показали у всех коров нормальный приплод. Опыты проводились совместно с сотрудниками СемЗВИ (В.С.Степин и другие).
Таким образом нами установлено, что предварительное введение малой дозы вакцины иэ штамма 82 провоцировало латентное течение бруцеллеза, чем способствовало более полноцу выявлению больных животных, а также создавало достаточный иммунитет для предотвращения поствакцинальных абортов.
Изучение возможности повышения проявления имцуногенности противобруцеляезных вакцин
Нами была поставлена задача изучить напряженность иммунитета к бруцеллезу у животных при различных способах ш,&унизации с целью вовлечения в имзднный процесс болькего количества лимфоузлов и органов, ответственных за выработку антител и определить при этом значение местного иммунитета.
Опыты проводили в благополучном по бруцеллезу совхозе "Узун-АгачскиГ;" Еамбылского района Ал мат икс кой области.
В опыт были вэягы телята 4-5-меслчного возраста, ранее иммунизированные вакциной из штамма 19 в дозе 80 и 3 млрд м.к. одноместно в область.средней трети шек. При ревакцинации поголо-вьо животных, первоначально иммунизированное полной дозой вакцины в количестве 40 голов были разделены на 2 группы по 20 голо г.. Одной группе вакцчну вводили в область с родне!'! трети шеи, другой - кногоместно, » различные участки тела. Шюотные, технизированные малой дозой вакцины из итамма 19, также были, разделены на 2 группы по 20 голов, одну кз которых рентгенизировали малой дозой одноместно, другую - многоместно.
С целью изучения антигенных свойств различных доз иакцинн из итамш 13 при повторном ^ведении ее, сыворотки крови исследовали в РА, РДСК через ХЬ, 30 дней и далее ежемесячно до полного угасания титров антител. При этом у аивотных, ранее вакцинированных полной дозой вакцины из стажа 19, после повторного все-
денин этой же вакцины в малой дозе одноместно в среднюю треть шеи наибольший титр агглютининов (382,5 МЕ) выявлен на 15-е сутки, затем идет его снижение, на 30-е сутки до 170,0 МЕ, на 60-е - 36,8 МЕ, 90-е - 2,3 МЕ, на 120-е сутки указанные антитела не обнаружены. Наличие комплементевязываллцих веществ отмечено на 15-е сутки в титре 10,6 VE, на 60-е сутки 0,2 МЕ и на 120-е сутки не выявлены.
У животных, реиммунизированных малой дозой вакцины из штамма 19 многоместно (дробно, в различные участки тела) по фону первичного введения полной дозы одноместно, агглютинины выявлены в максимальном титре на 15-е сутки (642,8 МЕ), затем идет снижение их количества на 30-е сутки до 253 МЕ, 60-е сутки - 117,8 МЕ, 90-е - 14,2 МЕ и на 120-е - антитела не обнаружены. Комплемен'т-свяэывающие вещества достигают максимальной величины на I5-« сутки после реиммунизации (титр 15,7 МЕ), затем отмечено их снижение на 30-е сутки до 9,2-МЕ, 60-е - 1,07 МЕ и на 80-е сутки их присутствоие в сыворотке крови не обнаружено.
Все животные на 15-30 сутки после повторного введения вакцины в сыворотке крови имели антитела, вступающие в реакцию с . розбенгал антигеном. На 60-е сутки снижение процента положительно реагирующих и на 90-е сутки во всех случаях получены отрицательные показания.
Животные, первично иммунизированные малой дозой вакцины из штамма 19, были ревакцинированы одноместно этой же дозой препарата через год и четыре месяца. При этом агглютинины наибольшего титра достигали на 15-е сутки (492 МЕ), затеи на 30-е сутки наблюдали снижение их до 200 &Е, после чего, на 60 сутки, дохо-. дят до 42,8 МЕ, на 90 - 7,1 МЕ и на 120-е сутки исчезают. Коип-лементсвязывающие вещества выявлены на 15-е сутки в титре 2,f МЕ, затем на 30-е сутки идет некоторый подъем их титра до 3,4 МЕВ после чего идет снижение до 0,3 МЕ, на 60-е сутки полностью отсутствуют. • •
Другая группа животных, первично иммунизированных малой дозой вакцины из ©гамма 19, бичи регммунизированы в той же дозе», но дробно, в различные участки тела. При этом агглютинины выявлены на 15-е сутки э титре 420 МЕ, затем идет подъем мх количества на 30-« сутки до 425 МЕ,--после чего отмечено стжение »х количества в РА и на 60-о сутки титр указашгых антитэя был равен 103,1 МЕ, 90-е сутки - 9,З.И2 и на I20-O сутки получены отрица-
тельк^е результаты. Коыплементсвязывающие вещества на 15-е сутки обнаружены в максимальном количестве (16,4 ME), на 30-е сутки отмечено снижение их количества до минимума (0,6 Ï.2) и на 120-е сутки они не обнаружены.
Таким образом, при реиммунизации телок вакциной из штамма 19 в малой дозе дробно, в различные участки тела, по фону ранее проведенной вакцинации полной дозой, иммунологические реакции выракень: более интенсивно, чем у животных, ревакцинированных одноместно, по такому ке именному фону. Из полученных нами данных следует, что ре иммунизации телок целэ ' гС^ззно проводить вакциной из штамма 13 в малой дозе и вводить ее дробно, в ризличные участки тела, что способствует повышению уровня накопления антител с последующим относительно быстрым ее исчезновением.
Напряженность'иммунитета у крупного рогатого скота через б и 13 месяцев после реиммунизации их вакциной из штамма 19 в малой дозе.
С целью определения напряженности противобруцеллезного им-1/<унитета у ревакцинированных нетелей через б месяцев после повторного введения вакцины в малой дозе, в стационаре отдела бруцеллеза Казахского НКВИ, 20 ревакцинированных и 5 контрольных (интактных) нетелей 3.04.85 года были заражены вирулентной культурой в. ebortusb4, конъюнктивально в дозе 15 млн м.к. (по бруцеллезному стандарту цутности).
По истечении месяца в результате бактериологических исследований установлено, что у всех подопытных животных, ревакцинированных малой дозой, через б месяцев после повторного введения вакцины сохранялся абсолютный иммунитет к указанное эаралаадщей дозе при выделении-культуры бруцелл от 4-х контрольных животных.
По истечении 13 месяцев после ревакцинации проведено повторное определение имгмунитета у нетелей. Для отого из числа оставшиеся в хозяйство ревакцинированных животных, 15 голов (§ из них ранее, п 4-5-месячном возрасте были вакцинированы полной, а 9 -малой дозой вакцины из егшжа 19) к 3 здоровых неикаунизированных, подвергнуты эараяенко ьирулен-.'ной культурой в. nbortuo 54 конъюнктивально.
Сыворотки крови нивотньцр исследовали е РШ, РА, РДСК через 6, 16, 30, 45 и 58 дней после заражения. Животные на.53 день после заражения подвергнуты убой с целью бактериологического исследования внутренних ааренхиздтезных органов, лимфоузлов (2S объек-
тов и 15 плодов). Возраст плодов был от 3-х до 8 месяцев).
Прививка полной и малой доз вакцины из штамма 19 телкам в 3-4-месячном возрасте и ревакцинация их малой дозой (3 млрд м.к.) этой же вакциной обеспечивает в течение 13 месяцев 86,8$ животных от заболевания при экспериментальном заражении.
Проведенные нами исследования были теоретически и практически подтверздены на крупном рогатом скоте при введении вакцины из штамма 19 многоместно, то есть в различные учистки тела. При этом было показано значение метода введения препарата с целью вовлечения в иммунный процесс большего количества лимфатических узлов и органов, ответственных за выработку антител, тем самым повышается эффективность ревакцинации крупного рогатого скота при бруцеллезе.
Эффективность применения вакцины из штамма 19 в малой дозе для иммунизации крупного рогатого скота против бруцеллеза в производственных условиях
Эпизоотическая ситуация по бруцеллезу крупного рогатого скота в района?на начало опыта
В Камышнинском-районе крупный рогатый скот выращивают в 16 хозяйствах, из которых 3 специализируются в молочном, 13 - а мясном направлении. Согласно данным ветеринарной отчетности, с 1981 по 01.01.86г. в районе числилось 10 неблагополучных по бруцеллезу крупного рогатого скота хозяйств, в том числе 2 - молочного и 8 - мясного направления. Из них б хозяйств неблагополучны по двойной инфекции (по бруцеллезу и туберкулезу)» По бруцеллезу мелкого рогатого скота и других животных район числится благополучным с 1985 года.
С 1986 года на телкад случного возраста стали применять вакцину из штамма 19 в дозе 3 млрд м.к. в 8-ми хозяйствах из 16, имеющихся в районе. В 19обг„ ревакцинировано толок перед случкой вакциной из штамма 19 а малой дозе в хозяйствах: им.Алтыисарина в количестве Ь80 голов, в "Бестпуском" - 125, "Дружба" - 218„ им.Клочкова - 360, им.Островсксго - 482, им.Пушкина - 323, "Тач-дыкольский" - 2ÜI, им.Фрунзе - 50}.
Итого по району в 1986 году ревакцинировано телок а количестве 2933.
Абортов среди привитого поголовья не было и растел простел нормально. После растела в-1988 году были проведены серологичзс-
кие исследования на бруцеллез в количестве 2733 голов, ранее ре-вакцинированньос вакциной из штамма 19 в малой дозе, среди них реагировало положительно 125 голов, процент заболеваемости составил 4,0.
В 1937 году вакцину из штамма 19 в этой же концентрации (3 шрд м.к.) применили на телках перед случкой в 9 хозяйствах
ИЗ "16.
В хозяйствах: им.Алтыисарина - 610, "Бестауский" - 250, "Бестюбинский" - 713, "Ворошиловский" - 836, "Дружба" - 104, "Камышнинский" - 933, "Краснооктябрьский" - 634, им.Островского - 691, "Свободный" 615. Итого по району реию^унизировано перед случкой 5386 телок.
Острых вспышек бруцеллеза (абортов) среди этого поголовья не отмечалось»
В 1987 году в совхозе "Бестюбинский", кроме телок перед случкой, привили малой дозой из штамма 19 коров в количестве 1900 голов по фону вакцины из штамма 82, через год, в 1938 году, при серологическом исследовании из этого поголовья вцделено 33 головы положительно реагирующих животных или 1,7$, что подтверждает эффективность вакцины из штамма 19 в малой дозе (3 млрд м.к.).
В совхозе им.Фрунзе в 1986г0 было ревакцинировано 594 телки малой дозой штамма 19. При исследовании после растела в 1988 году из 414 положительно реагирующих не вцделено, растел прошел нормально, при серологическом исследовании были получены отрицательные результаты. В совхозе км.Островского в 1986г. было икму-: низиросано 492, абортов не было и при исследовании после растела из 400 голов выделено 2 или
В совхозе им.Пушкина при исследовании 274 первотелок выделено 5 больных, что составило I,L>/L
В хозяйствах, где применяется вакцина из штамма 19 в малой дозе, телочек 4-¿»месячного возраста вакцинируют полной дозой препарата, а в тех хозяйствах, где этих телок вакцинируют не в 3-5;месячном возрасте, а 8-12-месячном возрасте, то есть тек самым сокращают сроки между вакцинациями, после отела идет значительное выделение положительно реагирующих животных.
Так, в совхозе "Ворошиловский", где б 1968 году было исследовано 169 таких коров первого стела,- выделилось положительно реагирующих 21, что составило 12.4^.
В 1987 году по району положительно реагировало на бруцеллез 691 животное, из них быков-производителей 51, коров 190, телок перед случкой 55, телят 4-5-месячного возраста 74.
По состоянию на I октября 1990 года в районе числится 3 неблагополучных пункта (из них 2 по туберкулезу и бруцеллезу).
До начала испытания в 2 хозяйствах из 13, предназначенных для испытания, находилось 10619 коров, привитых полной дозой штамма 19 и содержались в "замкнутых" стадах, а то же время в 3 остальных хозяйствах стад не было.
Несмотря на неполный охват поголовья, несвоевременную иммунизацию, а также иммунизацию без предварительного исследования в оздоравливаемьос хозяйствах, рациональная схема применения вакцины из штамма 19 в системе мер борьбы с бруцпллезом крупного рогатого скота, в целом позволила улучшить эпизоотическую ситуацию по бруцеллезу в районе: оздороалено 7 неблагополучных хозяйств, оказавшихся в зоне испытания вакцины из штамма 19 в малой дозе, поставить одно хозяйство на контроль (совхоз им.Клоч-кога), снизить число реагирующих на бруцеллез животных.
Так, если в 1987 году в указанных 13 хозяйствах было выявт лено 713 голов крупного рогатого скота (2,5%), реагирующих на бруцеллез, и том числе 290 коров и 42 быка-производителя, то о 1989 году реагировало 530 голов (1,8$), в том числе 209 коров и 25 быков-производителей, а за 9 месяцев 1990 года 235 голов крупного рогатого скота (0,91$), в том числе 40 коров (0,6$) и 7 быков-производителей (0,9&).
На период опытов снизилось число абортов бруцеллезной этиологии у коров на фермах 13 хозяйств з 1986 году зарегистрировано 87 абортов в 8-хозяйствах,- а в 1989 году - 46 в 7 хозяйствах, за 9 месяцев 1990 года соответственно 15 в 4 хозяйствах.
В остальных 3 хозяйствах, где применяется вакцина из штамма 82, в 1986 году зарегистрировано 20 абортов в одном хозяйстве, в 1939 - 4 аборта в одном хозяйстве и в 1990 году 2 аборта в одном хозяйстве, которые били подтверждены бактериологически.
Серологические исследования "^рвотелок, ревакцинированных малой дозой штамма 19, показачи, что поствакцинальные антитела э сыворотке крови, как правило, исчезают на 16-18 месяц посла вакцинации.
Оздоровление хозяйств при пирокои распространении бруцеллеза достигнуто без завоза животных из-за пределов района.
Тем не менее за указанный период не во всех хозяйствах удалось полностью освободиться от,"замкнутых" стад. Отсутствие возможности полной изоляции таких животных не способствует быстроцу оздоровлению хозяйств.
Следует также отметить, что результаты применения малых доз более четко проявились в хозяйствах мясного направления (оздоровлено 7 хозяйств), чем в стадах молочного направления, что объясняется отрицательной ролью поточно-цеховой системы на фермах молочного направления (где неизбежно идет смешивание разных возрастных групп) при недостаточно четкой системе ыечения и учета животных.
Таким образом, установлена противоэпизоотическая эффективность вакцины из штамма 19 в малой дозе (3 глрд м.к.) при проведении цротиЕобруцеллезных мероприятий. • •
Аналогичный опыт был проведен в Кордайскоы районе Еамбыл-ской области. По состоянии на 01,01.07г. Кордайский район числился благополучным по бруцеллезу крупного и мелкого рогатого скота. Хозяйства этого района числились благополучными с 1972г. (за исключением совхоза "Путь Ленина", где в 1987-1980гг„ был регистрирован бруцеллез). Однако в последующие годы процент реагирующего на бруцеллез крупного рогатого скота в общественных стадах составил в 1985г. - 2,6£, в 1986г. - 1,052, в 1987г.- 2,6$, в том числе количество коров в хозяйствах (с 1985г„ - 412, Х93бг„ -117, 1937г. - 318, 1968г. - 207 голов).
В совхозах "Сары-Булакский", "Кок-Кайнарский" и колхозах им.Чапаева и им.Коминтернс эти показатели были особенно высокими Так, в 3985г. при многократных серологических исследованиях количество больных коров достигло в совхозах "Сары-Булакский" -116 (14,255), "Кок-Кайнарский" - 36 (1&,2£), в колхоза:: им.Чапаева - 1С <5,0&), им .Коминтерна -42 (12,2£).
Выборочные исследования коров,■проведенные в 1986 году, выявили также высокую пораженность соответственно 4 (2,£$), 6 (9,2Й), 16 (3,75), 57 (16,656) голов.
■ Е 1987 году эпизоот.—'ическая ситуация по бруцеллезу о районе продолжала осложняться, возникли 2 неблагополучных пункта по бруцеллезу (совхоз им.Розн Люксембург и колхоз "Комцунисти-чееккй"), возросло одело реагирующих на бруцеллез жиготкых при серологических исследованиях.
С учетом ослокнивюейся эпизоотической ситуации применение
малых доз вакцины из штамма 19 с разрешения ветеринарного отдела области в 1988 году распространено и на остальные хозяйства.
Применение малых доз вакцины из штамма 19 в системе проти-вобруцеллезных мероприятий для специфической профилактики бруцеллеза у крупного рогатого скота позволило стабилизировать положение по бруцеллезу, оздоровить 2 неблагополучных пункта, при этом сохранить поголовье скота. В 1987-1989 гг. заболевание людей бруцеллезом вида абортус но отмечено.
Анализ результатов серологических исследований четырех подопытных хозяйств показывает, что за 1987-88гг. в совхозе "Са-ры-Булакский" не отмечены реагирующие на бруцеллез животные среди телок 4-5 месячного возраста (исследовано 1037 голов), телок перед случкой (исследовано 919 голов) и быков-производителей.' За указанный период исследовано 190 первотелок, привитых малой дозой штамма 19. Через 18-20 месяцев после ревакцинации реагирующих на бруцеллез животных но выявлено»
В колхозе им.Чапаева тагсхо нет выделений реагирующих среди телок 4-6-месячного возраста и телок перед случкой. При исследовании сывороток крови 37 первотелок на бруцеллез не обнаружен. .
Через 20-28 месяцев после ревакцинации полной дозой □тамма 19 у 895 коров выделено 8 голов, реагирующих на бруцеллез в низких титрах (0,55$).
В совхозе "Кок-Кайнарский" при исследовании 292 телок 4-6-кесячного возраста в 1987 году и 5 месяцев 1990 года реагирующих на бруцеллез среди 817 исследованных не выявлено.
Из 1225 телок случного возраста, исследованных серологически в 1937-90гг. выявлено лишь одно ¡-.квотное, реагирующее на бруцеллез (1988 год).
3 1968-89гг. было исследовано 237 первотелок, ревакщтир1-вагоок перед осеменение?.« малой дозой, реагирующих но выявлено. В I99C году исследовано 127 коров-перЕотелок и 174 коровы второго отела, ревакцинированных вакциной из от шла э дозе 3 чдрд и.к. При этом реагирующих среди 127 голов не выпилено, а среди 174 коров выявлена одна голова, положительно реагирующая о РА в титре 2СЭ «Е н 5 коров - сомнительно, при исследовании пвроэ *'сспц указанию: животпих были получены отрщ&телышз розультят«!»
Таким образом, несмотря на значительная уволичгшо поголовья скота в районе за сит аивотных 6 хозяйств другого ряЯсиа» за период опытов количество реагирующее: «п Зруцаллез здэотмкх
стало снижаться, составив в 1989 - 3-17, а за 4 месяца 1990 года 23 головы.
В 3-х хозяйствах из 4-х, определенных для проведения опыта, среди телок 4-Ь-месячного возраста и перед случкой реагирующих на бруцеллез животных не регистрируется»
В благополучных хозяйствах поствакцинальные реакции у коров, привитых малой дозой штамма 19, выпадают через Ib-I8 месяцев.
В целом применение в системе противобруцеллезных мероприятий вакцины из штамма 19 в малой дозе (3 млрд м.к.) для ревакцинации телок случного возраста и коров создает благоприятную обстановку в условиях выполнения общих ветеринарно-санитарных и других мероприятий для полного оздоровления хозяйств Кордайского района от бруцеллеза.
Изучение роли реактивности организма крупного рогатого скота в выработке противобруцеллезного им1цукктета
Нами была поставлена задача в экспериментальных условиях выяснить частоту случаев выявления имлунологически толерантных к бруцеллезу телок в хозяйствах Республики Казахстан с помощью вакцины из штамма 19, так как это имеет большое практическое значение.
С этой целью нами в экспериментальных условиях в ЭПО "Еал-гамые" Казахского НИШ проведена вакцинация телят 3-5-месячного возраста вакциной из штамма 19 в дозе 80 млрд м.к., согласно существующее наставления. До опыта все животные были исследованы fia бруцеллез в РА, РСК и РБП„ При этом получены отрицательные результата. Крот тог о, бил и исследованы на реактивность организма путей- ьнутрикоглого игедения с правой стороны в область средней трети шеи ПЦС (дкештропная цитогоксическаи сыворотка), а с левой стороны - ^истеши, ПЦС была разработана к получена на кафедре хирургии и основ ветеринарии Адматинского эоовстсрииарюго института.
По результатам этгос исследований «ивотиые были разделены на 4 группы: орсакпшше, слаборсактивные, срсдиореактивные и високорсактивные к ионизированы вакциной из отамыа 19 и полной дозе (80 додо м.к. ).
Но истечении 20 дней поело вакцинации у названных животных нами взята кровь для исследования на содержание антител с целью
выявления ареактивных и толерантных к бруцеллезу животных. При исследовании сывороток крови 35 иммунизированных телят отрицательные результаты РА были у 10, негативные показания РДСК отмечены в 16 случаях, по РБП не реагировали 12 животных. -При этом пробы крови с отсутствием агглютининов не имели комплементсвязы-вающих веществ и антител, улавливаем« Р£П, т.е. по РДСК недовы-явлено б, а в РБП 3 животных в сравнении с РА. При анализе показаний РДСК и РБП выявлено, что из числа реагирующих в пластинчатой реакции агглютинации 3 пробы имели негативные показания РДСК, что свидетельствует о взаимном дополнении данных иммунологических реакций.
По истечении 7 дней от отрицательно реагирующих по РА 8 животных и Ь, имевших позитивные показания РА (2 гол.), РА и РДСК (I гол.), РА, РДСК и РВИ (2 гол.), для контроля, повторно взята кровь и исследована по названным диагностическим тестам. При этом получены аналогичные результаты, за исключением 3 животных, реагирующих ранее только по РА или РА и РДСК, они имели позитивные показания по всем трем диагностическим реакциям. Важно отметить, что из числа ареактивных животных по аллергопробе с НДС не было реагирующих и на вакцину из штамма 19, что свидетельствует с возможном отсутствии у животных толерантного состояния.
По истечении 12 суток при очередном серологическом исследовании среди отрицательно реагирующих у трех животных (6174, 1822, 136!) обнаружены камплементфиксирующие вещества в диагностических титрах.
Кз этих 8 животных нами сформировано две группы по 4 головы. Жиеотным первой группы ввели повторно вакцину из штамма 19 в принятой дозе (60 млрд м.к.), телятам другой группы ввели ПЦС для возможного проявления анамнестических реакций на ранее введе: уи дозу вакцины с помощью -неспецифического раздражителя.
В связи с вше наложенный ш проверили ттние ПЦС . на появление антител в крови животных, учитывал, «то она готовилась на основе неполного пдгпванта йрейнда (как дополнительней раздражитель). В результате наших исследования установлено, что введение НДС не стимулирует дополнительную выработку шпитсл, з то же врем в 1-й группе, где вводили вакцину из штамма 19 э полной дозе (£0 млрд м.к.) у сяабореахтивннх яивотных имоло место появление антител в сыворотке крови у всех иммунизированных телят.
По истечении 7 дней животных подвергли обследованию с помощью РА, РДСК, PS1. При этом выяснили, что при повторном введении вакцины из штамма 19 ранее отрицательно реагирующим животным наблюдается выработка антител, улавливаемых в иммунологических реакциях.
В результате проведенных нами исследований установлено, что в" неблагополучных хозяйствах отрицательно реагирующие на первичное введение бруцеллезного антигена* животные не всегда являются толерантными, что вызывает необходимость дополнительного исследования их на реактивность или допривить и исследовать через 7 дней с целью выявления истинных толерантных животных, тем самым сохранить телок, необходимых для воспроизводства стада.
Данные, полученные нами в эксперименте, подтверждены и в производственных условиях при исследовании животных на титр по истечении 20 дней после иммунизации. В частности, в Северо-Ка-захстанской, Костанайской, Жамбылской и других областях Казахстана наблюдаются такие гхе закономерности после применения вакцины из штамма 19.
Учитывая, что при бруцеллезе у телок заболевание, в основном, проявляется в виде абортов, нами предложена схема иммунизации указанного контингента животных, включающая проведение поствакцинальных исследований на титр агглютининов и, в случае необходимости, дополнительной ревакцинация.
В 1992 году при исследовании ревакцинкрованных телок на титр в разрезе хозяйств Кордайского района йамбылской области были получены следующие результаты. По району ревакцинировано телок перед случкой вакциной из штамма 19 в малой дозе 20С6, исследовано на титр в РА - 1505, реагировали положительно - 1344, отрицательно 169, что составило ÏÏ,2£с
Вса; телкам, отрицательно реагирующим не вакцину из штампа Ï9, повторю инъецирована вакцина и дополнительно исследованы ¡¡а титр. При этом лишь единичные случаи выявления животных с огрицагелышкк яотзшшяшг РА, которые были удалены из стада.
Таким образом, все телки перед осеменением имели единый противобруцеллезиый имцунный фон, который создан вакциной из шгамт .19, что, в своя очередь, профкявкгировало развитие инфекции и предохрсышо указсиних животных от абортов бруцеллезной отколоти*
В свяог. с атки кы рекомендуем для одзиягшаг истинио
толерантных к бруцеллезу животных определять после повторного введения препарата, с цель» исключения как ареактивных, так и слабореактивных к бруцеллезу животных. Новизна указанного метода подтверждена выдачей нам охранных документов (КуэлТк АИНСО У 109 и патент Республики Казахстан по заявке 15 940992.1).
Изыскание метода дифференциации вакцинированных
животных от спонтанно больных при бруцеллезе
крупного рогатого скота
В.М.Чекншзв и соавт. (1993) предложили метод выделения 0-ПС антигена с несколько иными свойствами. По данным автороэ, ГИД с этим препаратом удавалось дифференцировать гглвотных, низированных и многократно реиммунизированньх вакцинами из ятакмов 19, 82 и 104-4! от больных бруцеллезом или иерсиниоэом.
Результаты испытания антигена в РИД в экспериментальных и производственных условиях В.М.Чекишевым в соавт. (1993) пока-' золи, что этот тест высокосг.ецнфичен и выявляет животных, у которых бруцеллез в дальнейшем был подтвержден бактериологически.
Учитывая сложную эпизоотическую ситуации по бруцеллезу крупного рогатого скота в Северо-Каэахстанской области Респуб~ лики Казахстан, с цельп оздоровления неблагополучных хозяйств,' где для иммунизации применялась вакцина из птакма 19, наки испытан 0-ПС антиген ИЗВСгДВ.
С этой цельа использовали сыворотки крови коров, ранез (1-1,5 года назад) имт-униэированных вакциной из итамма 19 в полной дозе (50 гард м.к.) и при исследовании по РА и РСК среди шж выделено 34,5% положительно реагирующих животных.
При этом в РДД на бруцеллез с 0410 антигеном положительно реагировало 1,7% коров, а остальные животные имели отрицательные показания данной реакции.
Указанный иегод путей очистки и выяатекия болькьк йивэтйьег позволяет проводить оздоровление неблагополучных хозяйств и контролировать эпизоотическую ситуацию среди икцункэиросЕШЫх визотныхо
Нам (К.И.Микзсасов, НвП.Кваноэ, В»ИоПрцдатченков 1094) бик получен 0-ПС антиген для дифференциации ганцинира шатая апзотк от спонтанно больных при бруцеллезе крупного рогатего скота (по норой, более доступной по простоте технолога» кэтодико). А55НСО У 160 и патент Республики Казахстан £ 95С296Л}. •
Полученный авторами антиген апробирован на чувствительность и специфичность в РИД, в сравнении с РА и РСК, в качестве контроля использовали антиген ИЗВОДЕ, с сыворотками крови положительно реагирующих коров, принадлежал],их владельцам Андреевского совхоза (с.Бостаидык) Виикульского района Северо-Казахстанской области.-При сравнительном изучении чувствительности и специфичности 0-ЛС антигена ИЭВСиДВ с испытуемым 0-ПС антигеном КазНИВИ при исследовании сыворотки крови положительно реагирующих на бруцеллез коров установлено ЮОЙ совпадение. При этом было исследовано 794 сыворотки крови,положительных в РА, РСК оказалось 142, в'РИД с испытуемым и О-ПС антигеном КазКЙВЛ было выявлено 71 голова, которые были изолированы.
Далее 0-ПС антигены ИЭБСкДВ.и К&зНИВИ были апробироЕаны в Кордайском районе Жамбылской области для определения эпизоотической ситуации в неблагополучных по бруцеллезу хозяйствах, где применялись живые противобруцеллезные вакцины.
По истечений года после реиььунизеции вакциной из штамма 19 в малой дозе (3 шрд м. к.) коровы бати исследована в РА, РСК с целью дифференциации вакцинированных животных от спонтанно больных в РИД. При этом были получены следующие результаты.
По району при исследовании из 6610 коров положительно реагировали в РЦД лииь 17 голов. Таким образом нами установлено, что прл помощи РДД с 0-ПС антигеном КазНИВИ представляется возможным выявлять спонтанно больных бруцеллезом животных и, в свои очередь, дифференцировать их от вакцинированных вакциной из штамма 15 животных.
Наблюдения показывают, что использование этого антигена позволяет выявлять дополнительно скрытые формы бруцеллеза средк крупного рогатого скота£ следить и контролировать эпизоотическую ситуации то бруцеллезу, а также способствовать оздоровлению хозяйств, неблагополучных по бруцеллезу крупного рогатого скота.
Система протавобруцеялезных мероприятий с учетов краевых особенностей эпизоотологии к досжениК науки и передового опыта
На&»! бьшо показано, что ка территории Республики ¡Сазахстан выделяется пять эпиаоотологкческих районов, рьзличащихся ис природно-зсоэяйственнш показателям,' степени заболеваемости скота, поракзквости поголовья кивоттк, концентрации их земельных уго-
дий и технологии животноводства и т.д.
Так, в Северной зоне Республики, где большая часть хозяйств имела "замкнутые" фермы по причине высокой пораченности скота бруцеллезом и туберкулезом, первоочередной мерой является организация специализированных ферм по изолированному выращиванию ремонтных телок от отрицательно реагирующих коров неблагополучных хозяйств»
В условиях широкого распространения инфекции важным звеном противоэпизоотических мероприятий является профилактика заболевания среди телок, выращиваемых на специалиэ'прованных фермах для замены стад с высокой пораженностыо указанными инфекциях«.
С целью сн'/ленля напряженности эпизоотической ситуации (предотвращение абортов, новых случаев заболевания и т.д.) коров неблагополучных стад с большой пораженностыо бруцеллезом и туберкулезом подвергают иммунизации наиболее им:/уногеннсй . и ыалопатогенной противобруцеллезной . вакциноЯ-.из: штамма 19«
Многократная и.умунизация указанной вакциной создает большие трудности в последующей дифференциальной диагностике. Возникает острая необходимость включения в систему мероприятий дифференциальных тестов, одним из которых является ЩД с предложенным нами 0-ПС антигеном.
Молодняк (телочки) крупного рогатого скота необход ¡то подвергать вакцинации вакцинами» с помощью которых представляется возможным определить иммунологическую реактивность и выбраковку' аивотнюсо представляющих опасность в эпизоотологическом отношении .
В хозяйствах с большой пораяенностью скота бруцеллезом и туберкулезом создается специализированная ферма по выращиванию ремонтных телок для полной замены неблагополучного поголовья» Описанная схема противобруцеллезных мероприятий примени-тельна для относительно крупных (100 я более коров) коллективных, крестьянских, фермерских хозяйств по производству молока»
В хозяйствах мясного направления этой зоны с п&стЗгецно-стойловым содержанием скота и где осуществляется периодическое доение коров, молодняк целесообразно вакцинировать в 4-6-кесяч-нсм возрасте с период их содержания с матерями (находящихся на подсосе) вакциной из итамма 19 в полной дозе о Первые постпакцк-нпльные дг.агксотические исследования проводят з возрасте 10=12
месяцев. Б дальнейшем ревакцинация животных проводят в 18-месячном возрасте вакциной из штамма 12 в малой дозе с последующей ревакцинацией коров через каздыс 1,5-£ года. Контроль .за благополучием хозяйства осуществляют путем бактериологического исследования плодов и серологических исследований быков-производителей и маточное поголовье с помощью РИД с 0-ПС антигеном (испытаны в совхозах Кадашнинского района Костанайской области).
Профилактические мероприятия базируются на проведении иммунизации молодняка вакциной из штамма 19 по описанной наш схеме, а взрослое поголовье вакциной из штамма 82. Реищунизи-рун г через каздаш 1,5-2 года до ликвидации угрозы заражения животных.
. В хозяйствах с невысоким процентом заболеваемости, до 1С$ в течение года и отсутствием случаев острого проявления болезни, с целью профилактика заболевания здоровых животных применяют вакцину из Етадаа 82 как для вакцинации молодняка, так и взрослого поголовья.
При использовании агглатиногенных вакцин мероприятия проводят по следующим схемам*, в хозяйствах телят в возрасте 4-5 месяцев иммунизируют вакциной из штамма 19 в полной (80 млрд м.к.) дозе и по истечении 15-20 дней сыворотки крови исследуют а РА на наличке агглютининов.
Животных, имеющих отрицательные показания диагностических исследований после повторного введения вакцины, необходимо считать толерантными. Повторная ревакцинация вакциной из штамма 19 у сяабореактивных животных значительно повьшает устойчивость их к бруцеллезу.
Через 32 месяцев (за 2-3 месяца до осемзнения), после предварительного исследования на-бруцеллез, отрицательна реагирующих телок реимцунизируот отой кэ вакциной шлой (3 щрд а.к.) дозой и вакцины из штамма 19.
Через 1-2 месяца после растела норов исследуэт. на бруцал» лез и отрицательно реагирующих гивотньас реишунизяруот ежегодно малой дозой (3 гард и. к.) вакцины из шха&ш 19 в течение 3-4 лет до ликввдацкн угрозы заражения.
В хозяйствах благополучных £1 е ограниченным распространен тюы бруцеллеза проводят мероприятия по следующей схеь®:
В благополучных хозяйствах толок 4-5-месячного возраста имцунизируог вакциной из штампа 82 после предварительного иселе-
дования на бруцеллез а РА и РСК и удаления из стад положительно реагирующих, телок за 2-3 месяца до осеменения реи.щунизируют этой же вакциной, осеменяют и формируют в отдельную группу. На бруцеллез исследуют через б месяцев после вакцинации, а затем через 1-2 месяца после растела животных всей группы.
В случае опасности заражения проводят вакцинацию коров в дозе 10 млрд м.к. (вместо 100 млрд м.к., предусмотренных наставлением) и в дальнейшем исследуют на бруцеллез на истечении б месяцев после прививки вакцины. Коров в дальнейшем ревакциниругат ежегодно в малой дозе штамма 62, т.е. 10 трд м.к. Исследования животных прозодят до и после ревакцинации, как описано выше»
С целью ускоренного оздоровления неблагополучных хозяйств после применения вакцины из штата 82 (в дозе 100 млрд м.к<>) по истечении 1-2 месяцев исследуют сыворотки крови с. 0-ПС антигеном в РИД Для определения спонтанно больных бруцеллезом животных.
При оздоровлении неблагополучных по бруцеллезу хозяйств с применением вакцины из штамма 62 исследования на бруцеллез начинают проводить через б месяцев после введения препарата и продолжают ежемесячно до получения групповых отрицательных результатов. При этом положительно реагирующие животные могут выявляться в течение 8-10-кратных исследований, так как постановка РА, РСК не обеспечивает 100$ выявления всех больных животных в гурте.
В связи с этим возникает необходимость изыскания метода выявления скрытых форм течения бруцеллеза с использованием сла-боагглютиногенного вакцинного штамма 62 и повышения специфической устойчивости к бруцеллезу, что позволит более успешно проводить борьбу с бруцеллезом крупного рогатого скота0
При провокации латентного течения инфекции у крупного ро гатого скота предусмотрено вьедениз вакцины из штамма 82.3 два этапа. Вначале у коров или телок 17-1о->несячного возраста берут кровь и одновременно вводят 1/100 дозы вакцины из штамма 62, подкс:«но в область средней трети -шеи. Выявленные положительно реагирующие животные яри первичном диагностическом исследовании удаляются, а оставшихся повторю подвергают исследовании по истечении 4о-сО дней после инъекции вакцины.
ливотньк с позитивными показаниями имг^нологкчесяих реакций удаяяат из стада, а ниеьщкх отрицательные показания иммунизируя? вакциной из отаима 82 (5 ил - 100 нлрд н.н0)о Животных, при
исследовании сыворотки кроэи которых получены показания РА 2:100 к РДСК 1:5 дЕа креста и вьше, считают больными,,
Таким образом, изложенные нами системы мероприятий, включают .щке диагностические приэмыСклассические, дифференциальные и провоцирующие), профилактически меры (системы применения противобру-целлёзных вакцин) и Еесь комплекс-организационно-хозяйственных и ветернпарно-санитарных мероприятий (специализированные фермы,, изолированное выращивание животных, отбор их по степени реактивности), обеспечивает успех оздоровительных мероприятий при бруцеллёзе крупного рогатого скота для Северной зоны Республики.
Второй, Западный, э'пизоотологичзский район, как было показано вызе, характеризуется развитием,в основном, мясного скотоводства. Ка него приходится 70% всего мсяного скота, находящегося в республике. Особенностью мясного скотоводства является пастбищное и паст-бищно-стойловое содержание с подсосным методом выращивания телят.
Как показано проведенными нами исследованиями эффективной в борьбе с бруцеллёзом круга г ого рогатого скота оказывается система мероприя'ГИЯ, включающая применение вакцины иэ шта*«а:а 39. в полной дозе. Последующие диагностические исследования на бруцеллёз необходимо проводить с 0-ПС антигеном в РОД.
Первичная иммунизация животных экономически оправдывается при отбивке телят от матерей в возрасте 10-12 месяцев посла предварительного исследования на бруцеллёз. Как показали наш исследования, г-акцинация телок в атси возрасте, вызывает циркуляция антител в течение 8-10 месяцев. В этой связи повторная ревакцинация возможна лишь после отела.и а дальнейшем с последующей реикцунизацией сзрослого маточного поголовья.
Контроль за эпизоотическим состоянием по бруцеллёзу рекомендовано проводить по результатам исследований Оыков-произнодителе!:, маяодшса перед первичной иммунизацией 5! бактериологического исследования йбортцровекннх ажодо» и р необходима случаях короэ с 0-ПС антигеном КааНИБИ.
Третий, Центральный, зпизоотодогический район характеризуете;, примерю равшзл сооукогекиск мясного ы молочного сцо-гоьодстэа. ПротиЕОбруцеллёз!!к? мредрздтея необходимо проводить с использование« вакцчкы из огеаа'л 62с С цель« уточнения ол:!зоотигчскс5: ситуаций ПО бруцеллезу КРУПНОГО рогатого ската К ЗЫЛЙЛСНИЛ СКрУТЫл форм гечеккп болезни,' необходим дяя игду.'мзации корор использовать вакцину из стаама 62 Сизтод ггроьокацпи и псслсдога:г,:е ЩЦ с 0-ПС ан-ггегеж-. КазНИЕИ).
При острой вспыяке бруцеллёза необходимо использовать антибактериальный препарат КазНИЕИ (КЛ1.Иванов. .В.Б.Тен. .В.К.Белобаб, 1988), с целью купирования инфекции и предотвращения поствакцинальных абортов.
Е хозяйствах, где занимаются мсяным скотоводством, рекомендуем использовать лизь вакцину из ыгамма 19 в малой дозе с исследованием на ареактивность и толерантность (по выае описанной методике), (испытаны в хозяйствах Ульяновского района Карагандинской области).
Четвертый, йхный, эпизоохологический район характеризуется развитием овцеводства до 40 % сельскохозяйственного производства.
Для этой зоны характерно такхе развитие мясо-молочного ското- . водства. Для специфической профилактики бруцеллёза крупного рогатого скота Е'.гококо используется вакцина из штамма 82, которая применяется в полной (100 млрд м.к.) и малой (10 млрд м.к.) дозе в зависимости от эпизоотической ситуации хозяйств.
В неблагополучных по бруцеллёзу хозяйствах с цель» ускоренного оздорэаления мы рекомендуем использовать метод провокации с использованием вакцины из штамма 62 и одноаременного создания единого противобруцеллёзного имцунного фена и снижения проявлений абортоген-ных свойств препарата.
Наиболее целесообразным для этого региона является сочетанное применение препаратов из штаммов 19 и 52, с целью выявления толерантных и скрытых форм течения бруцеллёза среди крупного рогатого скота. Все диагностические исследования проводят с учетом использования названных выше вакцин (испытаны в хозяйствах Ксрдайского района Замбылской области).
Пятый, Восточный, эпизоотологический район характеризуется развиты;.! мясо-молочным скотоводством с отгонно-пастбицнкм со-юркание:.: животных, наличием значительного количества скотопрогонных трасс и большей концентрацией поголовья. Система противобруцеллёз-ных мероприятий включает проведение диагностических исследований молодняка и его иммунизацию, половозрелых телок за 2-3 месяца до их осеменения с обязательной ревакцинацией коров вакциной из птемка 82. Противобруцеллёзкые мероприятия а мяском скотоводстве характеризуются преимущественным использованием вакцины йз штамма 19 для им-унизацни молодняка и взрослого поголовья, за иегдпчениеа бккоа-производителей. Диагностические исследования проводят в строгом соответствии по их применению (испытаны в хозяйства;*: Таврического района Восточно-Казахстанской области).
В нашей работе отражены лиль наиболее характерные для каждой зоны особенности, которые поглодают большинство хозяйств, располо-аенных на данной территории. Проведение оздоровительных мероприятий с нааим участием, как было показано выше, показало наибольшую эффективность при использовании рекомендуемых нами противоэпизоотичес-ких средств к методов.
ВЫВОДЫ.
1.Б Республике Казахстан по предпосылкам к распространению бруцеллёзной инфекции среди крупного рогатого скота взделяится, в основном, пять эпизоотологических районов: Северный, Западный, Центральный, Южный, Восточный, которые необходимо учитывать при разработке системы противобруцеллёзных мероприятий.'
•При широком распространении бруцеллёзной инфекции и высокой
заболеваемости скота борьба с этим заболеванием должна проводиться с применением средств специфической профилактики.
3.Наибольший эпизоогологический эффект применения противобруцеллёзных вакцин для иммунизации крупного рогатого скота отмечен в условиях изолированного выращивания телок на специализированных фермах.
4.В условиях Северного Казахстана, где имеет место широкое распространение бруцеллёзной инфекции и большая поражекность скота, наиболее эффективны!« методом оздоровления является полная замена неблагополучного стада-иммунными животными.
5.Применение вакцины из штампа 19 в полной дозе для ионизации и репммунизации крупного рогатого скота способствовало снижению напряжённости эпизоотической ситуации•(снижение числа абортов, заболеваемости и т.д.), но не давало возможности достигнуть полного оздоровления хозяйств,
6.Вакцина из штамма 19 б дозе 3 млрд м.к. позволяет профилактк-ровать заболевание здорового поголовья и в значительно более короткие сроки (через год, полтора) после вакцинации проводить выявление больных аиЕотнкх в стадах вакцинированного поголовья, что способствует более быстрому (2 раза) оздоровлен!® хозяйств,
7.Комплексное исследование (РА.РДСК и РБП) теля? месячного возраста через 20 дней после ЕЕедения вакцины из сгшага 19 обеспечиваем выявление ареактивиых кивоткц::, а дополнительная иммунизация отрицательно реагирующих с последующим исследованием дает возможность выявлять особей с толерантным состоянием организма.
3. Еж о годная технизация короь протяв бруцеллёза вакциной кз ятамиа 19 к последующее (по истечении двух месяцев) исследование
сыворотки крови с 0-ПС антигеном КазНИВЯ в И1Д, дает розможность
снизить напряженность эпизоотической ситуации по бруцеллёзу крупного рогатого скота, предотвратить перезарахенпо животных и ускорить оздоровление хозяйств.
©.Профилактическая иммунизация крупного рогатого енота вакциной из штамма Е2 (10 млрд м.к.) ежегодно в благополучно и угрожаемых по гглссу инфекции хозяйствах, создает дастагоикыГ. прстивобру-целлёзный мя^унитет, позволяющий предотвратить возникновение инфекции.
10.Использование О-ПС антнгена КазИИБИ при исследовании сыворотки крови в И!Д позволяет дифференцировать юедунноо поголовье от больного бруцеллёзом.
11.Повышение иммунного лротивобруцеддёзного состояния аиззт-иьк, отрицательно и сомнительно реагирующих по РД ц РСК через 2520 да ей пс ел о вакцинации ях гламмом 19 в количестве 3 шрд м.к., достигается путем повтзркоЯ иммунизации их этой асе дозой вакцина.
12.Схема оздоровления хозяйств от бруцеллёза, аключа^щат и:з.ункзац;га телят в дозе ЙО млрд м.к. сакциной из штамма 19 и 100 ?.'лрд м.к.- из птамма £2, а взрослого поголоеьл указанными вакцина-:;и о дезе соответственно 3 млрд м.к. и 10 млрд м.к. с последующи?; диагностическим исследованием сызороток крэзи через 2-3 месяца П1Д, позволяет в 2 раза сократить сроки оздоровления неблагополучных хозяйств и повысить экономический эффект Еетеринариьк меропр-.ш-» тай при бруцеллёзе крупного рогатого скота.
13.Поэтапное введение коровам саадкны из эта«ма 52 первично
в дозе -I нлрд м.к. и по истечении одного месяца в дозе 10 шрд и«к. создает протнвобруцэллёзныЯ ккчунитет, профилактарует постваяцина-льш:э аборты у хаготикх и дает воэмокность с помощь» диагностических исследований, проводимых перед второй инъекцией вакцины, ыпв-лять аявотиых с латентным течением инфекции,
14.Разработанная нами система прстивойруцеллезньк мероприятий, яшис^аищаяся в оптимизации применения средств специфической профилактики в проведении диагностичзских исследований,^ позволяет при комплексном ее осущест&лснки в определенных апиэоотодогических районах снизить заболеваемость хизотных и ускорить оздоровление хозяйств.
15.УстаноРленныз н&ми ептиаглыше дозу вакцин яри икцуиизоглх яру иного рогатого скота, сроки проведения вакцинации на разлижгс
половозрастных группах "'.иготньгх, возислность сочатанкого пр»::-:ене— ния средств спец;:~,чческой профилактики с учетом 5кологичес?«« свойств гакцинк ;; реактивности органиэмг. зигютнкх позволяет з кенк-
ретнкх эпигоотологических регионах республики повысить эффективность использования средстз специфической профилактики в борьбе с бруцеллезом крупного рогатого скота.
П?ак7,ЖС»Н пРЕдапжя
1,При разработке протиБобруцеллёаных мероприятий использовать эпизоотологяческое районирование для составления оптимальной системы профилактических и оздоровительны:« мер.
2,Для ка-кдого эппзоогологического района использовать разработанную нами систем применения противобруцеллёзных вакцин.
3,При разработке планов противобруцеллёзных мероприятий учитывать биологические свойства вакцин (анткгенность, патогенностьt им-^нзгенность) и реактивность макроорганизма.
,4.В сложной эпизоотической ситуации, где имело место массовое и многократное применение вакцин, шире использогать разработанный нами дифференциальный диагностический чест.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО МАТЕРИАЛАМ ДИССЕРТАЦИИ
1.Мин;хасов К.И. Динамика поствакцинальных реакций у привитых против бруцеллёза морских свинок.//Вестник сельскохозяйственной науки Казахсгана-Алыа-Ата, IS5-1 - ¡} 7- C.7I
2.Минжасоз К.К. Динамика поствакциналькых реакций у морских свинок, пр-лг/лнх в резные точки против бруцеллёза.//Труды КазНИЕИ.-Алка-Ата, IS64 -С.20
3.Машсасов К.И. Изучение напряжённости иммунитета против бруцеллеза в зависимости от способа к места введения вакцины из штаьт 15 в опытах на морских свинках //Материалы конференции молодых ученых
I: специалистов КазЖВй и JSEi- Алма-Ата,IS34- С.2?
¿.Мигадсов К.И. Зависимость иммунитет». к бруцеллезу у мэрсках сеннок от способа к кеста ьасдений вакцины кг втаиаа 19. //Трудк (йхзНЯВИ-Алка'-Ата, 1965 -СЛ7
о.Кинжасос К.И-. i Сарсенов М.С. »Квшкинбаев К,А, Динаыика угасания посгвакцинальни: антител у крупного рогатого скота, привитого вакциной из атамиа 19,//Вестник сельскохозяйственной науки Казахстана 7 -С. 65 •
• с.Какаасов К.И. ,Серсснов У.С» ^фекткшоств вакцинация нрцгшого рогатого скота ткцяиоИ яз атакма IS о ыасой дозе.//В кн: Проблем гапенсификацик аивстнзгодстаа. в'Казахстане.-Чимкент,IS5C-C.S9
"..'¿•исхасое Н.й.,Сарсенов К.С. .Клочков A.A. Инцунат&г к бруцеллезу у нгталей с отдаленные сроки после решоунизация.//Зесткяк сальско-ксзлйсгвеннай науки Казахстана.-1936.-М1-С.с9
2.С. B.C. Проскурина Л.й, ,&khsüco3 К.И. Антггенреакулакъ«
метки в кропи крупного рогатого скота при экспериментальном бруцеллёзе. /Я. Ветеринария, I9S5.-'¡7.-С. 31
9Л'инласоэ К.И. Зависимость показаний иммунологических реакций от дезы и метода введения вакцины из атамма 19, // Труды КазКИЕИ, I966.-C.70
Ю.Икнгасов К.И. и др. Наставление по применению вакцины из штамма 19 в малых дозах для иммунизации крупного рогатого скота против бруцеллёза. Утверздено ГУЗ Госагропрока СССР, Москва,1906
П.Минжасоз К.И. Способ профилактики, бруцеллёза у племенных животных .//Труды К&зНИВ»!.-Алма-Ата,1963.-С.41
12.Нурабаеи Д.А..Млюгассв К.;'. Сравнительная эффективность применения протиЕобруцеллёзных вакцин из итаымоз Бр.абортус 19 и 82 в хозяйствах Косдайского района Дкамбулской области за период с I973-I9Ö7 ггö //Труды КазНИЕИ,1988.~С.44
ЗЗ.Мпнжасов К.К.уЕзлоба5 В.И.,Тен В.Б. Изучение антигенности Bai:— цин из штаммог 19,104-" и 62 при помощи з, SR, R и Ь антигенов. //Сб.научных трудов Е^'БкТл.-Омск,1969.-C.I5
14.Мишсасов К,'/..Иванов К.П. ,Степин B.C. .Проскурина Л.К. Имглуни-зация против бруцеллёза нетелей и половозрелых телок. Рекомендация Утв. НТС Госагропрока КазССР, Алыаты,1959
15.Ременцова МЛ.!. .Цирельсон Л. .Грушкна Т.В. .Минжасоз К.И. .Бекза-тез К. Протиэобруцеллёзные мероприятия мясной и мелочной проимплек-костк//Утв. зам.министра здравоохранения КазССР С.Кле5ановым.-Алма~ Ата Д969
16.Мштаасоз К.И. Иммунологическая реактникссхь ерггтгжа телят
на введение различных противобруцеллёзных закцин из агадоов 19,1С4-М и 62 //Материала У республиканской конференция молодых ученых, Тбилиси,I9C9.-C.I44
17.Ант»хов В,а.,Микжассв К.И. Зависимость показаний иицунк эта у реюэдниэироз&инух нетелей от дозы вакцин из стакмоз 39 и 62.// Рзстнак сельскохозяйственной науки Казахстана.-1969, g 3.-С.69
Зб.Антюхоп В.М.,Яга «асов К.К. Изыскание оптимальнее доз противо-бруцеллезных вакцин для льгуказацаи крупного рогатого скота против бруцеллёза.. Депонароэлна в КсэНИИН'Х -И.-IS20.-3 4.-С. 127
19.Кацова .Т.Е. .Бочекалоэа B.C. .Бзаенова. Т.В. Кшгасов К.И. селкк и другие биохимические показатели кроеи у за?сцинировгшнух и зарзлеен-бруцеллезом первотелок. //Труды КазЬШ! Д«.ма-Ата, ISC0.-C .16 ЗО.Иванов Я.П.,Мину.асов К.Й..Еэлобаб Й.И.,ягудкн ?.Г.»Hypaiaen Д.Л. Состояние иммунитета к бруцеллёзу у коров, привитых вакцина«:? из лтамхоз I9.IC4-M и 62.//Труди КазКШ,1993.-С.77
21.Ан?юхов Е.Ы. ,Мгас?,асов К.И. Зависимость реактогенности вакцин из итшшоЕ 19 и 82 от дозы, применяемой для т&унизации телят против бру цгллёза./Депонирована а КазКИЖГЛ.-М.,1990, № 4.-C.I44
. 22.Иванов Н.П,,Еело5аб В,И..Микжасов К.И.,Хасенов E.G. Ускоренный катод оздоровления хозяйств от бруцеллёза. //Вестник сельскохозяйственной науки Казахстана.-I9S0.-С.75
23.Блейм Т.В. .Проскурина Л.И.,£тегин В..С. ,К«нжасов К.И, Бруцеллин-реактивные клетки в крови крупного рогатого скота, инфицированного бруцелламл через розные сроки после реБакцинации.//латериалы итоговой конференции ученых института.-Семипалатинск,IS90,-С.64
24.Минжасов К.И..Иванов Н.П.,Белоба5 В.И..Хасеноз Е.С..Нусабаев Д./ Профилактика бруцеллёза у крупного рогатого скота и выявление толеран-.
бруцеллоносителей. Алматы,Изд-во: Кайнар.-Утв» НТС Госагропрома КазССР.-1991
йо.Минжасов К.И.,Иванов Н.П. ,Бедойр.б Р.И. Дасенов E.G. Способ выявления бруцеслокосителей у крупного рогатого скота.Свидетельсгзо на ноу-хау №0020115. 1991
26.it:icsacoD К."..Анткхое Б.Ы.,Спняц;ш А.Г..Сейдахкетова Р.Д. Изучение специфической реактивности организма крупного рогатого скота при бруцеллёзе.//Труды ИЗВСцДВ.-Иовосибирск,1991.-СЛ9
27.Пеонов Н.П..Белобаб В.И.,Минжасов К.И„,Хасеноа Е.С. Эффективность вакцины из стажа 82 при выявлении латентных фсрл бруцеллёза у крупного рогатого скота в производственных условиях //Труды КазНИШ Алыа-Ата,1991.-С.3
2о.Мк.чл:асов К.И. ,Абсатиров Г.Т.,Абуталкпов А.А, „Гуснгноз Ь!.Г„ Рекомендации по технизации крупного рогатого скота вакциной из вин-мь 19 в надой дозе и комплексе противобруцеллёзных мероприятий в хо~ з.чЛстэги мясного направления.-Уральск ,!S90
29.лгуд;ш Р.Г. .Стасов К.К. ,Нурабае& Д.А. Опыт применения мала;: доз еахцины кз итамла 19 против бруцеллеза крупного рогатого скота ь Дгацбулсхой о5яасг..//Научн. труды НЭЗСиДВ.-Х591.-С.192
¿O.O.A.Xsasi«,,К.И.&тхасов.»В.Н.Грузглцева. ,К»Б,0раз5еков Эффективность краиеяення. еллергека КагНПШ прл диагностике бруцеллёза крупного рогатого скота в океперикзнтйльшгх усговшвс.//Грудм КазКИШ, Алмг>Атг.,1991.-С.6
Ы.Бле&й-Т.Е..Прсскуряча Л.'Л»Дгг;асов К.И., Стека; B.C. Экспе-ряквнталыкЛ бруцеллез у крупного рогатого скота, интактного и пр::аи того шахцуниги >яэ втгжмов 19,62,104-М. //Груды КазНИБ/!,Алма-Ата, 199; -С. 52
5-1 .
Зг.К.И.Минжасов. ,Антюхов В.М. .Куттуков Б.Ч.,Нурабаев Д.А; Применение вакцины из штамма 19 с различной реактивностью животных. // Труды КазНИЕИ, Алматы,1993.-С.4о
33.Иванов. Н.П. ,Придатченко В.И, ,Мш*£сов К.И. Метод получения бруцеллёзного антигена.//Куэл1к АИНСО № 160.-1994
34,1мИкжасо5 К,К» Метод дифференциации слабореактивных кивотных от толерантных. //Куэл1к АИ11С0 » 109.-1994
35.!.!инжасов К.И» Способ дифференциации слабореактивных'телят, привитых вакциной из штамма 19 бруцелла абортус, от толерантных. Патент Республики Казахстан по заявке № 949952.1. 1994
36.Мигаасов К.VI, .Иванов Н.П..Придатченко В.И, .Куттуков БоЧорАн-тюхов В.М. Способ получения антигена для серологической диагностики , бруцеллёза крупного рогатого скота. Патент Республики Казахстан яо заявке № 950296.1. 1995
37-Мин«;асову К.И. .Куттукову Б.Ч. Метод предотвращения аборта бруцеллёзной этиологии у первотелок.//Куэл1к АИНСО №252.-1995
38.Куттуков Б.Ч..Минжасов К.И.Эффективность вакцины из штамма 19 с целью выявления толерантных и латентных форм бруцеллёза у крупного рогатого скотаУ/Я.Аграрная наука для стран СНГ.-Москва,1995.-С.8
39-Минжасов К.И, Результаты испытания вакцины из штамма 19 в надой -дозе (3 млрд я.к.) в Республике Казахстон.//Труды КазНИЕИ, 1393.
40.Р.ГьЯгудин. .Минжасов'К.К. .Вайбурин И„С,,Тарам С.И. Конъюккти-еояышй метод иммунизации крупного рогатого скота вакциной из атам-ма 19, /Материалы научно-практической конференции.-Новосибирск,1995 -С Л 02
Кш^касон Канат Исмаа^да
"Ьгуцсллеэга карей сагцадала цоедаиудыц 'Ш!мдШгЫ
арттыру голдары" Мардэр{геряхк гаашыныц доктору «шымк атат» алу vbím
I6.0t)„03. - малдэр!герлгк микробииюгняе к'.-,муимогь;яь
au6pi:cr¿oтя жсж- ы&ядин, ми^чдаллиц ауруяаш,
Ёруцеллегга t;apo¡J вакцннгаш цолдена отар-иг i pi караш вруцеляездеи сацтандыру»
Диссертация штермалшда ipi караны бруцеяяезг* ¡«apea
муидаган кезде закцинани ^оадш:у.дь:н THh.y?J.siri «Заяцдаяодо.
Осы мьк.сатта вакцинаш кол дану дык зр тг psi cxewaaapá кем тес!адср! еынакды, соидай-е^ Цаза:',стан Peonyйли каск tan одмать да мая ее i руд i н spexHosiiciepiH ескере етьрь'п бруцеяжвэге да&пйз кою ясно сацтандыру т©с«дар1 насаадЫо
■iinHsnv «.»mat Î яч a 11 ay l сЧ.
ways of Mqh'-ef feetivn annlicatl on vKrin« itth brucellosis
of horned eatUs".
■'o for ясМсис ^езгяе the fioitor af the veterinary ssisfiic.
tâ 39.33. ïetstla^rY.nlî toMoloir, Hiimol 0(!Y."inUcotoi5<jv *n4 Snfgt-
tl en S lînsss oí annals, •"sbvcct a: tnïïSi-Matlin-.Proûiit 1 as ti с brucellosis at hornea ïUtle
4t th aralicatUn sntlSrUíel 1 osts vac:ina.
In the Sissertatisn oUerUls thsre trs «»ays <>f the perfect entlbruce! lests anions alth nnunuatlan harneé cattle a.ja¡nist bfUïâllosis.ln this orlet nets tested di ffirent seheses and aethoás latroáuíittu Ibis mdne ani.alsa «erfcei methods divpostt; end ittmi Îaetîï tit's take into consl«tetloa sseelal catUe-bree'îtng-ksesiati on tHs Republic ol liiskhstan terri torv.