Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Морфофункциональное исследование лимфоидной ткани поросят при вторичных иммунодефицитных состояниях

ШШСТСРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ВОРОНЕНИЙ ГОСУДАРСТВЕ!ПШй АГРАРИЙ УНИВЕРСИТЕТ

На правах рукописи

БУТ Владимир Иванович УДК 619:616-092:636.52/58

КОРШУНЩтеНАЛЫЮЕ ТССЩОВЛИ}^ ЛШАЮВДНОй ТКАДО ПОРОСЯТ ПРИ ВТОРртЩЫХ ИЖШЮДЕ6И5ШШХ

состошшк

16.00.02 - патология, онкология и норфологня животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Воронеж-1992

Работа выполнена на кафедре патологической анатомии и патологической физиологии Харьковского зооветеринарного института кы.К.М.Бсрксенко

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор В. И. АЛА-ТЕШО

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор С.Н.СУЛСлЛЛ!ЮВ

кандидат ветеринарных наук, доцент БД.ГЛАДОВ

Ведущая организация: Украинский научно-исследовательский ветеринарный институт

Защита состоится * _ 199 ¿г. в ^ часов

на заседании специализированного совета К.127.54.03 при Воронежском государственном агроуниверситете по адресу: 394012, г.Воронеж, уд .Ломоносова, 114-а, ветеринарный факультет ВГАУ

Отзывы проспи присылать по адресу: 394012, г.Воронеж, 114-а, ветеринарный факультет ВГАУ

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института по адресу: 394012, г.Воронад, ул.Мичурина, I.

, Автореферат разослав (Ч,1\1 32_-

Ученый секретарь специализированного ~

совета, кандидат ветеринарных наук /¡¿¡У Н. А.ЧАПЛЫГИНА

Г. ОЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность теш. Иммунная система осуществляет комплекс реакций на огромное количество энзогенных и эндогенных факторов, обеспечивая антигенный гомеостаз и антикн$екционнук> устойчивость. Она принимает участие во всех физиологических и патологических процессах организма к тем самым поддерживает состояние здоровья в постоянно меняющихся условиях внешней среды (Петров Р.В., 1913).

Расстройства в различных звеньях ищунной скстёю приводят к снижению защитных сил организма и повышенной восприимчивости животных к заболеваниям. Б настоящее время среди различных нарушений ищунного ответа пристальное внимание исследователей привлекает проблема вторичных инаунсдефицитных состояний (Макаров В.В., Чевелъв С.$., 1982, 1983, 1984; Ляшенко Ю.И., 1937; ¿.Л Ы'ЛЛеЛ, 1985),

Важность проблеш заключается в том, что вторичные иммунодефицита сопровождают многие заболевания, нередко выступают как ведущий патогенетический признак и могут привести к неблагоприятному исходу болезни (КовалЬчук Л.В.Чередеев А.Н., 1984).

Однако, несмотря на широкое распространение вторичных имцунодефицитов остаются невыясненный некоторые вопросы, касающиеся механизмов их развития, диагностики, 'в честности морфологического проявления в органах ишцунокомпетентной систеш (Скуратовскнй И.5., 1985). Имеющиеся же морфологические исследования органов пшенной систеш носят в основном описательный характер без сопоставления паблидаешх морфологических изменений с уровнем функциональной активности .именной систеш, чде-

то без использования морфоыетрических методов, что не позволяет надежно оценивать морфофункцкональный аспект изучаемой проблема.

, Цель и задачи исследований. Делыо настоящей работы являлось изучение морфологических асиоп вторичных имцунодефицктных состояний различной этиологии у неонатальных поросят, разработка, общих морфофункциональных критериев, которые могли вы быть использованы для надежной диагностики данной патологии.

Для достижения згой цели наш были поставлены следующие задачи:

- провести патошрфологическое, гистологическое, ультраструктурное исследование тицуса, гистологическое исследование мззентериальных лимфоузлов и селезенки при развитии вторичных имцунодефицитов вторичной этиологии / в качестве такой модели был использован трансмиссивный гастроэнтерит свиней/.

- провести патошрфологическое, гистологическое, ультраструктурное исследование .тивдса, гистологическое исследование меэентериальных лимфоузлов и селезенки при развитии вторичных имфноде^шцитов шкотоксинной этиологии / на модели Т-2 мико-токсикоза/. '

- провести сравнительный анализ наблюдаемых морфологических измзнений и иш.уннологических показателей, отражающих степень дефектности звена именной системы.

Научная новизна работы.

, I. Впервые обнаружены и изучены признаки тканевых перестроек в центральных и периферических органах иммуногенеза гно-тобиотических и конвенциональных поросят при вторичных имадуно-дефицитах вирусной и микотоксинной этиологии.

Н

2. На основании анализа полученных данных и сопоставительного изучения морфологических признаков разработаны и предложены новые экспериментально обоснованные критерии морфологической диагностики вторичных иммунодефицитов.

Научная м■практическая ценность работы.

1. Определены'критерии иш^нодефицигных состояний:

а) выведен индекс тицуса, позволяющий ориентировачно судить о наличии вторичного им.(уноде$ицита;

б) определены общие морфологические признаки вторичных ишфнодефицитов, дающие возможность надежно диагностировать данную патологию.

2. Проведен сравнительный анализ морфологических реакций при иш^нодефицигах различной этиологии, в результате которого выявлены наиболее характерные их проявления как на свето-оптическом, так и на ультраструктурном уровнях.

3. Изучены основнне иммунологические показатели, отражающие степень дефектности определенных звеньев иммунной, сио-теш, которые могут быть использованы совместно с патоморфо-логкческиш данными для углубленной комплексной диагностики вторичных и№(унодефицигов и расшифровки их механизмов.

На защиту выносится:

I. Вторичные имцунодефщиты, воспроизведенные в изученных моделях, имеют свое морфологическое выражение в органах иммуногенеза: " • •

а) в тиодсе - акцидентальная трансформация различной степени, вплоть до атрофии органа.

б) в селезенке - эти изменения касаются значительного уменьшения относительной доли белой пульпы на срезе, отсутст-

вия светлых центров в фолликулах, снижения плотности в них клеточных элементов и уровня нуклеопрогеидов в лимфоидных клетках.

. в) в лимфоузле - уменьшение количества лимфокдных фолликулов, их размеров, отсутствие в н"х светлых центров, снижение' плотности лимфоцитов в межфолликулярной зоне и уровня ДНК и РНК в имаднокомпетентных клетках.

2. Морфофункциональнне процессы, наблюдаемые в изученных органах, коррелируют с ищунологическими показателями.

3. йыцуноморфологические реакции у конвенциональных и гнотобиоткческих поросят характеризуются небольшими количественными, но не качественными различиями, что позволяет использовать поросят-гнотобиотов в качестве более тонной информативной экспериментальной модели.

Апробация работы.

Основные результаты заложены, обсуждены и одобрены на научных конференциях Харьковского ЗВИ /1988,1989/, на 10-й •и 11-й Всесоюзных конференциях по патологической анатомии сельскохозяйственных животных /Саратов,1987; Харьков, 1990/.

Реализация результатов исследования.

Полученные данные вошли в "Методические рекомендации по диагностике, им^нодефчцитсв поросят", утвержденные ученым Советом Харьковского зооветеринарного института.им.Н.М.Борисенко, приказ 5? 15 от 30.12.1988. Результаты исследований используются в учебном процессе кафедр микробиологии, вирусологии и патологической анатомии Харьковского зооветеринарного института.

Публикация.

По теме диссертации опубликовано 4 печатные работы. е

Об^ем и структура работа.

Диссертация изложена на 120 страница* машинописного текста исоотоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсукцения результатов, выводов, указателя литературы, включавшего ¿^источников, из них -f2 иностранных и приложения. Работа иллюстрирована микрофотографиями и таблицами.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа проведена в 1986-1989 годах на кафедрах патологической анатомии, микробиологии и вирусологии Харьковского аоо- ' ветеринарного института им.П.Я.Борисенко.

Исследования по моделированию вторичных илунодефицитов вирусной этиологии проводились на гнотобиотических и конвенциональных поросятах 3-7-дневного возраста. Гнотобиотических поросят, полученных гистеротоиивй, содержали в гнотобиотических изоляторах.

Для экспериментального заражения использовал» эпизоотический штамм вируса трансшссивного гастрЬвнтерита свиней, поддерживаемый пассалами на поросятах-гнотсбиотах суточного возраста. 10 %-ную суспензии ктаечнюга инфицированных поросят, разведенной средой 199 1:100, вводили ноаорально в дозе б мл на животное.

Для изучения динамики развития вторичного иммунодефицит-ного состояния животных забивали в определенные сроки после заражения: 14, 24, 48, 72, 95, 120, 144 часа.

Моцелирова,те вторичного иммунодефицита иикотокс.тансй

этиологии провопили на 3-7-аневных конвенциональных поросятах

»

г

е использованием Т-2 микотоксша. 3 предваритедьнюс экспериментах были установлены дозы, вызывающие остров (1-2 иг/кг живой массы или 1/2 - 1/4 ДЦд)) к иодострое (0,3 - 0,5 ыг/кг) течение шкотоксикоза.

Материалы для изучения ищуногзр^ологических, имцунологи-ческих, ультраструктурных реакций служили кровь, ткмус, селе-аонкв и ысзенгеркальше лимфатические узлы.

На вскрытии проъодок экстирпацию тицуса, определяли его абсолюнув дассу и выводили индекс органа, для чего использовали формулу:

«„^а_орга)а_(г2__.. х Ю00; масса животного(г) Для гистологических к гистохимических исследований материал фиксировал;, в 10^-ном растворе нейтрального формалина, жидкостях ¿Сарнуа и Буэна.

После фиксации материал обрабатывали по общепринятым методикам /Лилли Р.,1969/, используя заливку в парафин. Срезы толщиной 4-6 мкм получали на ротационном микротоме ДОС-2, ок-рапиаали гематоксилкн-оозшом, азур Л - эозином, метиловым зеленым ~ пирснином по Браше, по Фельгену, по Каллори, !Ш1К-реак-цией. ' ' . ■ ''

Для электронно-микроскопических исследований кусочки органов объемом I фиксировали в ном растворе глптаральде-гида с последующей дофиксэцией М-ным раствором осмиевой кислоты. Срезы толщиной 25^45 ни, полученные на ультрашкротоые У4Ш1-4 контрастировали 1/6-ныы водным раствором уранилецетата и ватеи цитратом свинца по Р^йнольдсу. Сеточки просматривали на микроскопе УЭШ-100 и ЕМ-1003.

Для суждения о характере изменений и динамике клеточных популяций в тимусе определяли среднюю площадь долек, соотноше

Л

кие площадей коркового и мозгового слоев, количество и разме-. ры телец Гассаля, подсчитывали абаот'этноз содержание" ткмоцитов в корковом и мозговом слоях.

В лимфоузлах определяли количество и размеры фолликулов, диаметр их реактивных центров, относительную площадь фолликулов, плотность клеточных зон в них, развитие межфолликулярной зоны и мозговых тякей. 3 селезенке определяли размеры фолликулов, относительную площадь белой пульпы срезе, плотность ' клеток в фолликулах.

Площади структурных компонентов и клеточные Ълемзнты подсчитывали при помощи морфометрической сетки, содержащей 256 квадратов с площадью квадрата 0,01 при увеличении окуляра х 7 и объектива х 8. Количество клеточных элементов подсчитывали по Есей площади сетки. Размеры структурных единиц определяли с помощью окуляр-микрометра ЮВ-1-15.

Количество лейкоцитов подсчитывали по общепринятой методика в каюре Горяева. Зыделение лимроцитов из крови животных проводили по методу 171. Воушг- (1968) путем центрифугирования в градиенте плотности фиколл-верографина (1,077 г/мл).

Для идентификации Т-лкм^оцитов использрвали тест спон- ' тайного роэеткообразования с эритроцитами барана по IV .^Цл?, (1372), для В-лимфоцитов - тест спонтанного роэеткообразова-ния с эритроцитами шаш (Бп^НН в А, ). .

11-оксикортикост'ероиди определялись в лаборатории эндокринологии НИЙЭХГ унифицированным методом по (флюоресценции в серно-спиртовом реактиве.

При использовении морфоыетрических методов исследования проводилось математическая обработка материала методом вариа-

циснной статистики с вычислением средней арифметической, среднего квадратическсго отклонения, средней ошибки средней величины. Достоверность различий средних сравниваемых показателей , определяли по критерию Сгыодента. Значение фактора достоверности оценивали по таблицам вероятности. Различия принимали за достоверные при значении Р<: 0,05.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ЖСЛВДОВШЯ.

3.1. Морфофункциопальная характеристика лимфоидных органов контрольных животных.

Изучение тилуса контрольных поросяг, как конвенциональных, так м гногобиотических показало, что к моменту рождения тицус представляет собой полностью сформированный орган. Индекс тщрса поросят данной возрастной группы колеблется в пределах от 2,40 до 4,15.

При гистологическом исследовании установлено, что тицус представляет собой дольчатый орган. Средняя площадь долек составила 0,37 + 0,08 ш?. В каждой дольке четко дифференцированы два слоя - корковый, занимающий периферийное положение и мозговой, расположенный в Центре дольки (рис.4). Относительная площадь.коркового слоя была в пределах 56,2 + 6,£$, мозгового - 43,8 + 5,55?. Строма как коркового, так и мозгового слоев состоит из ретикуло-эпигелиальных клеток с отростками, образуя сетчатую структуру. Ячеи сети густо заполнены ти-шцитами. Плотность распределения клеточных элементов, основную массу которых составили малые тимоциты, в корковом слое была значительно выше, чем в мозговом, вследствие чего корковый слой на срезе выделялся своей более темной окраской. Реакциями &льгена и по Браше хорошо определялось, что корковые

Ю-

тимоциты содержали большее количество ДНК. Плотность клеток . в корковом слое равнялась 28200 + 1650 кл/ка/", плотность распределения клеточных элементов в мозговой зоне составила 17600 + 950 клДаЛ

Максимальное количество телец Гассаля в срезах мозгового слоя не превышало 5. Размеры тимических телец значительно варьировало от 18,2 мкм до 94,1 мкм, однако средний диаметр этих образований составил 33,8 + 5,2мкм.

Гистологическими исследованиями выявлено, «то у контрольных неонатальных поросят мезёнтериальные лиьфэузлы'не завершают своего развития, особенно это прослеживается у гнотобио-тов, паренхима лимфоузла которых не четко разграничена, на корковое и мозговое вещество, часть .фолликулов не оформлена, а состоит из слабо контурированных скоплений ллм£оидных клеток. Средние размеры фолликулов составили 114 + 10,8 мкм. Светлые центры не обнаруживаются. Относительная площадь,'.занимаемая, фолликулами на срезе, равнялась 18,2$. Мэлфшшкулярное плато развито слабо, в нем преобладали .малые лимфоциты. Плотность лимфоидных клеток в нем составила. 19540 кл/м.£. Мозговое вещество представляло собой скопление лимфоцитов, образующих удлиненные тяжи - мякотные шнуры, в которых также выявлялись плазматические элементы и моноциты. •

Изучая селезенку выявлено, что ретикулярная строма, состоящая из" соединительнотканных клеток Сфибробластов, ретикулярных клеток) и фибриллярных элементов, образует ячеи, заполненные различными лимфоидными элементами и сравнительно редко встречающими плазматическими клетками.

Красная и белая пульпа заметно дифференцированы. Белая

пульпа продставленя скоплениями лимфоцитов вокруг пульпарннх

И

сосудов, образующих лимфогдкые фолликулы (уаег.кк). При окраске по Фельгеку паденно в этой зоне отмечается накболызая концентрация ДНК. Iii в одном случае у контрольных животные этой возрастной группы не выявляются светлые центры фолликулов, Морфо-метрическиш исследованиями определено, что диаметр лимфатических фолликулов был в пределах 81,7 ьмм, а плотность распреде-

?

ления в них лимфолдных клеток составила 21420 кл/мм . 0б!дая доля белой пульпы на поперечном срезе ергана осостагляет 22,4Й от его обцей слэдеди. Здесь же встречаются одиночные макрофаги и плазматические клетки.

3.2. Ыорфофункциональиые изменения тицуса

при вторичных млцунодефицптнкх состояниях.

При изучении тицуса на макроскопическом уровне в первый исследуешй срок (14 час.) развития иммунодефицита вирусной этиологии отличий от норш не отмечали.

Гистологическим исследованием установлено, что корфомет-ричеекпе показатели также не выходили за пределы статистических достоверных колебаний средних величин, установленных у контрольных животных. Однако отчетливо выявлялись признали, характеризующие начало перестройки гистофиэиологической структуры органа, что проявлялось в очаговом исчезновении тимоцитов из коркового слоя, увеличении количества вакулизированкых ре-тикулоэпителиальных клеток в мозговом веществе.

Через 24 часа гистоструктурные изменения прогрессировали: истощение коркового слоя приобретало более распространенный характер, плотность распределения тимоцитов в коре снижалась до 20800 кл/ш£, относительная площадь коркового вещества составила 40,8 + 5,4$. При электронномикроскопическоы_иссле~

■iL

довании отмечали дистро^/ю тимоцитов, проявляющуюся набуханием митохондрий с частичным лизисом кргст, гетерогенизациеЯ матрицей цитоплазм, исчезновением полисом, дегракуляцкеЯ канальцев эргастоллазны, £рагмгнтарными разрывам:! плэзмадеммк.

В дальнейшей с развитием патпроцесса отмечали постзг.ен-ное снижение индекса тецуса у гнотобиотов до 0,74.через 96 чесов посла заражения до 0,52 через 114 часа после эаракз-нпя у конвенциональных животных, что, соответственно, составило v• 23% от первоначальной массы органа.

ha светооптичееком уровне наиболее информативными кркте- -риями оказались следующие морфокетрические параметры: абсолютная площадь долек, которая с развитием патпроцесса уменьшилась с 0,37 + 0,08 wfi до 0,26 + 0,05 у гнотобиотов и с 0,44 •+ . 0,07 ш/ до 0,18 + 0,03 i.af" у конвенциональных животных; относительная площадь, занимаемая корковым и мозговым слоями, динамика показателей которых явно прослеживалась в сторону умень-. шения коркового слоя с 56,2 + 6,8- % до 27,4 + 7,1 % к 72 часам для гнотобиотов и с 51,2 + 5,2 % до 20,5 + 4,8 % к 96 часам для конвенционных животных (в более поедние сроки определить этот показатель не представлялось возможным из-за исчезновения границ между слоями); плотность тимоцитов в обоих слоях: у контрольных животных в корковом слое составила усредненно 27900 + 1755 кх/ш£, в мозговом 17250 + 945 кл/iai2 к 96 часам

для гнотобиотов эти показатели снижались до £7750 + 1070 кл/мм^ и 5500 + 850 кл/мл? к 144 часам для конвенциональных животных.

На ультраструктурном уровне з терминальные сроки отмечали дистрофию тимоцитов и эпителиальных клеток как коркового, так и мозгового слоев, которая достигала степени некробиоза и некроза с кариорексисом и плазыолизисом, вследствие чего

f3

формировались зоны клеточного детрита, ограниченные свободно лежащими клетками к активно пролиферирующими фибробластами.'

Исследованиями тиодса на макроскопическом уровне через 8 часов после введения Т-2 токсина как в дозе 0,5 мг/кг, так и 2,0 мг/кг выраженных ¡¡вменений не обнаруживали. Индекс органа был в пределах 2,5 - 2,9.

При гистологическом исследовании отмечались начальные этапы акцидентальной трансформации. Дольки площадью 0,42+0,07 сохраняли четкое деление на корковый и мозговой слои: соотношение их не отличалось от норда - 59,0+6,1 % среза дольки занимал корковый и 41,0+2,7 % мозговой. В корковом слое наблюдался процесс фагоцитоза тимоцитов макрофагами, вследствие чего отчетливо выделялись просветленные участки. В некоторых долях такие просветленные участки, сливались, образовывали значительные зоны опустошения. Плотность корковых тимоцитов в связи с этим была снижена и составляла 19000+650 кл/м/. В мозговом слое выражены деструктивные процессы, проявляющиеся распадом тимоцитов, из-за чего весь слой усеян клеточным! детритом. Плотность мозговых тимоцитов также была существенно 'снижена и равнялась 10200+910. .

На ультраструктурном уровне наблюдалась дистрофия эпителиальных клеток, тимоцитов коркового и мозгового.слоев, что проявлялось в уменьшении количества свободных рибосом, набухании и,-лизисе митохондриальных крист, исчезновении канальцев гранулярной андоплазматяческой сети.

• . Макроскопическим исследояачием установлено, что через 24 часа индекс тшцусв равнялся 2,2 - 2,7. Заметное снижение этого показателя до 1,5 - 1,8 отмечалось через 48 часов после введения 0,5 кг'/кг токсина. При этом у некоторых животных в шейных

участках наблюдались одиночные точечные кровоизлияния.

На светооптическом уровне в эти сроки отмечали нарастание деструктивных процессов. Дольки площадью 0,37 + 0,05 хотя и сохранили деление на корковый и мозговой слои, были усеяны клеточным детритом. Относительная площадь коры 48,6+^7,1^. Плотность тимоцитов в ней снижалась до 14600+1350 кл/мн^; плотность мозговых тимоцитов составила 9025£775 кл/ьй£. Ретшуло-эпителий набухший, тельца Гассаля неболытее на ранних стадиях • развития, без ороговевающкх концентрических напластований. По вселу мозгово1.5у слою громадное количество дегранулируккцих эо-зинофилов. Характерным признаком в эти сроки было наличие кровоизлияний либо в мзвдольковые пространства, либо в паренхкцу органа. Иногда наблюдались кровоизлияния в дольку с полным нарушением ее структурной организоции . Пр.. электронношкроскопи-ческом исследовании в ткани тиьуса обнаруживались обширные поля, заполненные клеточным детритом, среди которого располагались пикнотичесии измененные ядра тимоцитов и фрагмонты ядер эпителиальных клеток.

3.3. Морфз^ункционаЛьные изменения периферических лш^окдлнх органов при развитии вторичных иммунодефицитов.

Начало перестройки гистофизиологической структуры лимфоузла отмечалось уже через 14 часов после заражения вирусом ТШ с отчетливым контурированием небольших первичных фолликулов, в некоторых из которых наблюдалось разрежение центральной части фолликула. Н 48 часам формировались все структурно-функциональные зоны. Размеры первичных фолликулов составили 1<7+13,7 мкм, вторичных - 135,5+8,7 мкм, диаметр светлых центров - 70,0+5,2 мы. Относительная площадь фолликулов увеличи-Г5

валась до 28,9/5 площади среза.

В терминальной стадии заболевания обнаруживались заштно выраженные деструктивные изменения, Орган обедневал лииТоид-ны1Я элементам, местами' встречались запустевшие ячея. Лим-фоидные фолликулы малочислены, келкие, но содержали светлых центроЕ. Диаметр этих образований снижался до 97,1+11,2 ¡¿км, а их относительная площадь составила снинена до 12500+

2050 кл/мм^ плотность клеточных элементов в ызкфоллккулярной зоне. При окраске по Браше отмечалось резкое ослабление окрашивания цитопдазш иывфнокошетентнах клеток.

При исследовании селезенки на ранних стадиях развития патологического процесса вирусной этиологии (14-24 час.) гксто-структурных изменений, перестройки ее зон и иэмвнения их соотношения, а таадв.заметных явлений раздражения органа отмечено не было. Однако среди моноцитов обнаруживались клетки с пикно-морфгада ядрами, местами наблюдалась ванулизация и зернистый распад цитоплазш макрофагов и плазматических клеток.

В дальнейшем прослеживалась отчетливая закономерность в реакции органа, проявляющаяся в уменьшении доли белой пульпы занимаемой на срезе, диаметра лимфоидных фолликулов, плотности распределения в них клеточных элементов, содержанки нуклеопроте-идов в пиронинофильных бластах и плазматических клетках.

Так, при исследовании селезенки в терминальную фазу развития »-.имаднодефицитного состояния установлено, что доля белой пульпы на срезе снизилась до 15,6^, диаметр лимфатических фолликулов равнялся 59,6+4,0 мкм, плотность лимфоидных' клеток упала до 6460+240 кл/ш£, что составило 30,12« от плотности клеток в лимфофолликулах контрольных животных. При окраске по Броне и »ольгену выявлено выраженное ослабление окраски ткани

Ы

и более рыхлое расположение гранул РЖ и Д1И в бласгах, лимфоцитах и плазтттескпх клетках, что свидетельствовало о снижении в них количества нугслеопротендоа.

Изучал реакции ыезептериальных лимфоузлов на введение кикотокс'ина выявлено, что гистологические изшнения имели однотипный характер, И различались только по степени выраженности. Уже через 8 та. отмечали выраженнув инволюцию коркового вещества до 25,от площади среза при дозе 2 мг/кг Т-2 токсина и до 28,9% - при 0,5 мг/кг токсина, В сохранившихся фолликулах отсутствовали светлые центры, диаметр их составил 92,1+ 12,5 мкм. По всей паренхиме лимфоузла обнаруживался базофильнай гиперхродаыЛ клеточный дегриг, особенно часто наблвдвеыай э местах скопления дистрофически измененных лимфоцитов.

Через 24 - отмечалось нарастание дистрофических процессов, причем корковый слой еще более истончался и занимал 18,б£ площади среза. Артериоли и иосткапиллярше векуяы тонкостеины, отдельные участки стенки разрушены с выходом эритроцитов в охога-сосудистое пространство. Через 48 часов после введения токсина в дозе 0,5 мг/кг выявлялось полное нарушение цитоархитектсники органа. Корковый слой представлял собой не четко определяемые скопления малых и средних лимфоцитов, из «фолликулярная зона была значительно разрежена, фактически, представлена единичными лимфоцитами, вокруг которых был.разбросан клеточный детрит.

При изучении гистологической структуры селезенки через 8 часов после введения токсина отмечалась гипертрофия строш ор гана. Отчетливо выражены признаки расстройства кровообредения: стаз с паретическим расширением крупных венозных'сосудов, нарушение целостности стенки сосудов и выход форменных элементов крови за пределы сосудистого тракта.

Количество лиа}сцитоз белой пудыш резко уменьшено. Часто вокруг центральной артерии обнаруживались концентрические кольца ретикулярных волокон, в ячеях которых были видны единичные лии^оциты. Существуйте лииКщиты дистрофмчны, с гиперхром-юш ядрами, утрачивали контактны с ретикулярными клетками и уезду собой. Белая пульпа чрезвычайно отечна. В участках особенно выраженной дистрофии лимфоцитов отмечалась интенсивная пролиферация ретикулярных клеток, появление фибробластов и. фиб роцитов различной степвш зрелости.

Через 24-48 часа по::де ваеденкя Т-2 токсина отмечается выраженная дезорганизация тканевых структур. Оформленные лимфатические фолликулы отсутствовали. Белая пульпа сохранялось лишь в виде следов. Целые и разрушенные макрофаги содержали зерна гешсидерина. Последний а виде точечной однородной массы определялся по бсс^' ср^зу как в бедой так и,особенно, в красной пульпе.

йцо более били шравены признаки расстройства кровообращения , проявлявшиеся стазои сосудов, пару ионием целостности сосудистой стенки и ьыходоа форимых ояеиентов крови за пределы сосудистого русла с обауршм гчиоррагическии пропитыва шеи участков СадоЯ пульпы селезенки,

3.4. Динашка »изцунологпч&епшх и эндокринологических показателей при развитии 1 ' втортпгх кицунодаЗ щитов.

Изучая икиунол отеческие параметра (количество Е^ и Ем рогеткообрязуездх лимГсцпго*) установлено, что у контрольных животных уровень Т-л;',и|<ядитоь составил <55,546,2$ (гнотобиото) к 47,2+7,1^ (конвенциональные), <Ьл::м:<т:*то9 13,4+2,5 (гиото-

биоты и 13,8+1,8 ( конвенциональные).

С развитием иммунодефицита вирусной этиологии наиболее заметные изменения происходили в системе Т-лимфоцитов, уровень которых незначительно, но достоверно снижался уже через 24 часа до 38,9_+4,7^. Такая тенденция сохранялась и в дальнейаем. В терминальных фазях их уровень падал до 19,1+2,6%. Уровень В-клеток характеризовался стабильностью, только на поздних стадиях он снижался до 8,2+1,3$.

Сравнение иммунологических показателей контрольных животных с данными полученными при развитии иммунодефицита микоток-синной этиологии выявило резкое угнетение обеих звеньев иммунитета. Процент Т-лимфоцитов через 8 часов (0,5 мг/кг) снижался до 31,0+5,2^, а к 48 часам он падал до 8,3+3,ЕЙ. Уровень В-клеток к этому сроку составио 2,4+0,7$. Доза токсина 2 мг/кг вызвала еще более выраженное снижение Т-клеток до 5,0+1,2 и В-кле-ток до 2,8+0,9 через 24 часа после введения.

Изучая уровень П-оксккортикостероидов установлено, что в норка этот показатель составлял 90-135 нмоль/л. С развитием иммунодефицита вирусной этиологии он возрастал прямо пропорционально его сроку и к 96-144 часам доходил до 740-833 нмоль/л. Сходная динамика этого показателя наблюдалась и при иммунодефиците микотоксинной этиологии, когда его уровень к 24-48 часам доходил до 420-517 нмоль/л.

4. В Ы В О Д и

1. Вторичные итунодефицатые состояния поросят находят 4 свое выражение в морфо-фунщиональных изменениях центральных

и периферических органов ташунной системы.

2. 3 тимусе при вторичном иммунодефиците вирусной атиоло-гии критериями данной патологии являются:

а) индекс ти^са, отражающий относительную &йссу органа, снижение показателей которого в два и более раза позволяет предположить развитие вторичного иммунодефицита; ;

б) наличие ярко выраженной акцидентальной инволюции вплоть до развития атрофии органа.

3. В тимусе при вторичном иммунодефиците шкотокскнного происхождения 'отмечается быстрое развитие дистрофических изменений с обнаружением начальных признаков акцидентальной трансформации.

4. 3 селезенке признаками развития вторичного гааунодефи-цита является, уленьшение относительной доли белой пульпы паренхима за счет уменьшения лимфатических фолликулов и их разуйров, опустошение их лимфоцитами и плазматическими клетками, отсутствие в них сЪетлых центров, снижение содержания РНК и ДКС в ищунобластах, плазмобластах и плазматических клетках.

5. Б лимфоузлах эти изменения затрагивают все структурно-функциональные 'зоны органа! уменьшение вплоть до исчезновения количества лимроидных фолликулов, их размеров, отсутствие в них светлых центров, снижение ыттности лимфоцитов в межфолликулярной коре, степени их пиронинофмлии; в мякотных тяжах отмечаются рдшичныв плазматические клетки, власть' и малые лимфоциты, незначительное снижение нуклеопротеидов, в связи

с чем наблюдается потеря структурной организации лимфоузла,

6. Отмечается фазовый характер развития имцунодефицитно-го состояния через стадии тревоги, напряжения до срыва компенсации,

7. Параллельное обнаружение угнетения иммунологических показателей при развитии вторичных икпфнодефицитов подтверждает правильность интерпретирования конкретных морфологических признаков, составляющих морфологический субстрат данной пато- ' логии.

8. Наличие стресса является одним из факторов, опосредующих развитие вторичных имцунодефицитных состояний с, различной этиологией.

м

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРИЛОЖЕНИЯ

I, Результаты проведенных исследований вошли в:"Методические рекомендации по иммуноморфологической диагностике иыцуно-дефицитов поросят", одобрены и рекомендованы методической комиссией ветеринарного факультета и утверждены Ученым Советом Харьковского зооветеринарного института им.Н.М.Борисенко (протокол )? 15 от 29.XIIЛ988)Г"

АЗ.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РЙЕОТ по ШЕИЩАМ ДГОС2ШЦИИ.

1. Бут В.И. Морфологические еспекты диагностики икмунодефици-тов вирусной этиологии / Материалы УН съезда Украинского микробиологического общества.Киев-Черновцн,1989.-С.191.

2. Квачев В.Г., Бут В.И. Инволюция тимуса при трансмиссивном гастроэнтерите свиней / Ветеринария - 1990.-Ш.-С.29-32.

3. Бут В.И. Морфология ткьуса при трансмиссивном гастроэнтерите свин8Г!//Диагностика, патоморфология, патогенез и профи-

• лактика болезней в прошшенном животноводстве/Ыезквузовский научный сборник.Часть 1.-!Тзд-во Саратовского университета.-1990.

4. Апатенко В.Ы., Бут.З.И. Им.унодефициты поросят и латомор-фология тпг.уса при некоторых заболеваниях /В1снпк аграриях нау к. -1991. . -С. 22-23.

¿Г З&йг&Ъ// ¿/ Да/г> / //- еогус^&с^&^'с/

Сол ¿Л Т ¿>/пл.гее. ауи^ г^и^х^т/г е>/' ¿1

¿курган ¿"иЬ^см

Ответственный за выпуск _

одп. к псч. /С СЧ r/JL Формат 60X44'/«. Еуиаг» тип. Печать офсетнм. Ус*, пет. «. ЛР «.-изд. л. с Тираж {CL* экз. За«. Л //«//, Бесплатно.

Харьковское межвуэовскте арендное полиграфическое предприятие. 310(193, Харьков, ул. Саердлот», IIS.