Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.07) на тему:Клинико-гормональная характеристика доимплантационного периода коров-доноров эмбрионов

рГ Б ОД

1 '¿.ДЬИ , • .

ШШЛЕГСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА И ПРОДОВОЛКУШШ '.

российской адрАЦни • ■

САНКТ-ПЕТЕРВУШЗШ ГОВДРСТВЕННАП №ЩШ ' ' ЗЕТЕРШАРНСЙ МЕДЩИШ ■ 'Г

•г:.

I. :

На правах рукописи

• ЖШЕРОВИЧ ЗШАВДА. МЩЙЛСВНА

Щ 612.61/.62-08Г.004.1г 612,64»089,67:636,2

КЛИКЖО-ГОШОШШЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ДСШШШАЦИСШОГО

периода жкв-доноров эмбрионов, У

16.00.07 - акушерство и иекусстээвдое осемйыениэ

V 5 :: АВТ0РЕ5ЕР А Т Л;

диссертации ка соискание учёной степени . кандидата ветеринарных наук '

Санкт-Петербург 1994

■ Работа вышшййа на ¿офедре акушерства,' гинекологии и искусственного осеменения сельскохЬзяйственнкх кивотнш: р > Санкт-Петербургского ветеринарного института. <

•. Научный руководитель - доктор ветеринарных наук, професс

■*.•' ■ • V 4 - i . ' • '".•■ Давыдов В.У; ' ■ ",/.} Г i V-/: .-X "■' ' .'■; . '■ : ;

. О^ициаяыше оппоненты; доктор ветеринарных наук, професс 5 '-.'у .• Е^янов A.A.

. .. ' •". кавдвдат ветеринарных наук,зтарпг

I ... V . научный сотрудник Шорников B.B.J

Ведутся организащк - Саратовский зооветеринарный инстит

, Задета диссертацта состоится "23 * JXС1994 в 13 чаоов на заседанйяспвциализированного совета К 120.20.0 в Сагот-Летербургской государственной айадемии ветеринарной медицины/IS6084, Санкт-Петербург, ул. Черниговская, Б/.

• С диссертацией могио ознаасииться в библиотеке Санкт--Пвтербургсной государственной академии ветеринарной медицины

Автореферат разослан _ 1994 года.

Учёный секретарь специализированного совета дошит

Сафронов E.H.

I. ОЩАЛ ХАГЖШРЛШ РАШШ

Актуальность теш. Метод трансплантации оабрионоо у крупного рогатого скота давно привлекает внкшздо многих исследователей. Применэтш указанного штода в скотоводотйа олссоботсуит интенсификации использования генетически вндшрхой самон, воспроиа- . водотву потомства от бесплодных коров и наполсяозрэжа тёлок, ' оздоровления стада от илфзкциокннх болезной, транспортировке pa-* родыщай из одной страна в другую, прощдэш!» исследований в облает» биотехнологии животноводства /полусонно хнмарша яивотиых, культивировали?! и оплодогяорошш яйцэнлэт iñ vüw , получение траногенщх животных, клонироваша/. В иаотояи^о а раня, в сложившейся оконош1чоской ситуации¿ мзтод порэоадан ембрионоз о*ал аа-и бола о аятуалон, так как благодаря криоконоорпировашйз иожно во--хранить генатический потенциал плэшшшх высокоцэшш к opon. ■

Одгаш из ответственных этапов в биотвхнодрпгсоспои цикле :: ?рансплднтации эмбрионов у животных, в том чиолэ и у крупного-; рогатого скота, в усдогияя üi явяшотся индукция и синхронизация полиовуляцйи, оплодотворешга, формировадао я развитие эмбрионов в доимплантационирм периода, Вкоото о тем, в тохиологш! трансплантации аибрионоз тэт мэсго проблема, которое носят скорее биологический, чем технологический характер' и выход эмбрионов, при этом, пока ещё внсокозариабелен и непредсказуем,

Отечественная /Прокофьев Ю. ,1983} Бучко A.M.,Смолянинов Б.В., Роэгана Й.й.,1988; Рябых В,П.,1988; Алексеенкр А.Н.,Гавриков А.И., Йаслёв Ц.И.,1589; Антанз В.В.,1990} ¡'¿адасон В.В.,1990{ Смыслов, ва Н.И.,1990} Ширивв В.М.,1991} Гория В.В. ,15удевич И.И.,1992/ и",

зарубежная ¡Toot п., tm ; Pbtxm J- Ш?: СгипЫ ¿., Ш', V Xasulz ÓcAMtdvt. Т., X¿ext$> M.J&j; Ъспаб&о*. /990; ftaJlrt. /33 О i ÓcutmArtdL #.,№0f литература свидетельствует о большом количестве исследований, направленных на нахождение надёжных методов прогноза супаровуляторной рзакции. Однако, В связи с отсутствием стандарта в используемых.§СГ-првпаратах для индукции множественной овуляцияj эффективность предлагаешь методически прогнозируемых подходов полиовуляции на может явиться общепризнанным критерием. - ..,.

Общебиологичэскип закономврности эндокринной регуляции ову-ляторнгй деятельности яичников у самок, естественно, олрэдэляют клиническое состояние половых лгалёз, соответствующее конкретно^ стадии астрального цикла. Вместо с тем, клиническая оценка ооо-

яичников не всегда объективно отражает функциональную £ •тиеность гонад и степень "подготовленности" дачников к интенс! ной гонадотропной стимуляции множественной овуляции. Поэтому, . 'знание только, эндокринного статуса не может явиться критерием, Vхарактеризующем стадию астрального цикла. . ' ,, В связи с' вышеизложенным, нам представлялось целесообразнь и в теоретическом, и в практическом отношении проведение как к ничаеких, так и евдохринних исследований состояния гонад на ра личных этапах цикла подготовки коров-доноров к получению эмйри 'нот* Ото позволит получить качественно новые данные, раскрывай щие механизмы ре&тазации воздействия' экзогенных гонадотропинов на (Фолликула- и оогенэз у коров-доноров эмбрионов,

■ Цель и задачи исследований. Основная цель настоящей работа состояла в определении клиникс-гормонального состояния яичнино у ¡коров-доноров эмбрионов в период специфической гормональной индукции, полкоауляииа и в дотатантациокный период* Исходя иа бтого, налог были поставлены следуюгцие задачи: •

1. Оценить диагностическую информативность клинических нри тернов отбора-доноров эмбрионов в биотехнологии трансплантации

. заредшей.

2. Определить хлиническими методами э-^фективность полиовул. торной реакции коров-доноров при использовании различных гонад, тройных комплексов, '

■ 3. Определить динамику и выявить, особенности взаимоотношеи стероидных гормонов /прогестерона., эстрадиола-17^, тестостерон* а сыворотке крови керов-доноров в процессе стщуляции суперову-пятерной реакции, формировании и развитии вибрионов в доищдан-талонный период. "

4. Выяснить роль глюкокортикоадной Лункции до и после инду! ; ции полиовуляции.

5. Установить взаимосвязи клинико-ендокринкого состояния д< нора с полиовуляторной реакцией,- количеством и качеством пблуч« ных вибрионов.

Научная новизна. Впервые проведено комплексное клиник о-яаб< раторнсе исследование состояния яичников коров-доноров на раз® ных этапах цикла биотехнологии змбриотрансплантации. Получены I вые данные о роли состояния яичников в прединдукционный период, способствующие повышению эффективности суперовуляции при отборе , коров-доноров вибрионов.

Определено значение глюкокортикоидиой функши коры надпвче;

ников в период индукции полиовуляции и в доишлантационкяй периед.'

Выявлена взаимосвязь клинического состояния «¡«ников,; конце ц-традии половых и надпочечниковых стероидов, с, супоровудятор'ноИ реакцией, числом и качёством полученных эыбрионо?, . Д;',,' '.у

Практическая ценность. Полученные дайзые о. клииико-эвдокрин-ном состоянии, яичников в гтредивдукционньгй период рекомендуется использовать в качестве, методического подхода при отборе допоров, что позволит повысить эффективность вызывания множественной овуляции.

Для увеличения выхода качественных эмбрионов, следует учитывать и корректировать эндокринный уровень половых и надпочочни-ковых гормонов в период индукции полиовуляции у коров-доноров.

, Материалы исследований нашли применение в научно-практической деятельности биотехнологического центра НПС "Генофонд" Ленинградской области и в работе Могилёвского селекциошю-биотех--нологического центра по разведению крупного рогатого скота рее-публики'Беларусь. . •;■'

Теоретические положения работы используются в учебном процессе Санкт-Петербургской государственной академий ветеринарной медицины и Белорусской сельскохозяйственной академии. ? "

Положения, выносимые на залиту«, . '

1. Оценка клинического состояния яичников в качестве диагностического критерия при отборе коров-доноров эмбрионов.

2. Изучение динамики и взаимоотношений стероидных гормонов /прогестерона, эстрадиола-1?^ ( тестостерона/ в сыворотке крови коров-доноров в процессе стимуляции суперовулйторной ре акции,формировании и развитии эмбрионов в доимплантационном: периода. Л ;

3. Взаимосвязь эндокринного фона коров-доноров с'пояиовулй-торноА реакцией» количество« и качество« полученных эмбрионов.

4. Рот глзжокортикоидной функции корн надпочечников в про-цвесепояиовудяции и в доишлантациоиныа пэрйод.

Апробашя работы. Основные результаты диссертационной работы доложены и обсуждены на. 47-Й, 48-й научных конференциях молодых учёных» аспирантов Санкт-Петербургского.Ветеринарного института /1993,1994/$ 1«, научных конференциях проАесеорско-препод&аатеяь-екого состава, научных сотрудников и аспирантов ШбВЙ /1993,1994/,

Публикация. По теме диссертации опубликовано Й паучнав работы в материалах конференций/1.■' ' >

Структура и объём работу. Диссертадияизложана т ':" ' стра-< ницах машинописного текста я состоит из вв»детя, обзора: дитвра-

тура, ооейз^шшх «содадоватй, ебе^дета, виаедов, прайттэо-тх преляожштй, етта иотармура» ярпжшния, Список литературы аплачлйт 231 кстсч$п1к, в тол 115 ииострашпвс авторе®. P&Sota mm^speiiara 21 рисунком и 18 тй&кщакп.

. ' ; а. Ш1ШШГП КВД1 ПССДЗДОВШЯ '' ' . ; .

■ Рйбйтй кыполнйпа к ШХ-1994 годах на кафедае. шсушротва» -пшекологш я иадусстиенного осемонэния сздьсйохоэкйотосюьк зш-ёоиш Сшш^ШтербургсжоЙ гсауцаратгешой акадзгш ввтерштрноЕ Мйдщшии З.пспорлшнталыш гюеяедсвшвш проводились ® шамтэ-■Хдзй ¡т, Герзщтго района ■Когллёаш>й обтаета росцублики

Ши&руйЬ* ■ ';. ; Ч \

В ctmfut «опоаь^сгашо Щ кррэв ч2рно-айстрой переда б иозрас ?о е ирадукгшгость» 5»? sho. .rt «ososa эа йа»?ациа, Ко-

, ртен-донэра бйая огофаш е учтет йгаппэотгтазегж дашййс* которая шцтч&т йр^отательнооть п рагудяркоегь иевовах ц>жяов,©г-' сутетеад швояопш» Баодздювдш щутрзншх: по-

ловых способом по оЦзпршшгой

методп». 10 дда лидадарэвшшогоиет '

cnomMmöi^' iiöKeabro дата» Дяй шщукщщ позмойуллгиш ЙСЯОЛЬЙО-вакй шйда^ршша пранэрати гшкфтзарисго гфттщщщ /«СГ-п,. прояавэда^эе СЕ\, & SO ш1; фадшгарошт, производство

' Литва, й арозшодоето ТОР» в

общаО дезе 4Ш. Ш/» Bparsspaa введет § рааа в «jTJta в тачзняа ■ 4-5 'дгггй. Пртеташща? Г^ шраёаг шййщрев&эз! с дезй SOö&mv на ,3-4 ©^рабсггз»* Шяуе&тат» оееиаиеаае проведала хгараз 12-24 чат ада® шчаяа задрува» огбарюм на;? дань

посла ййрйора ©¿ттзт ттарургичзсмс* ггэтодсм. Для ънядаажя ncu&HbasBÄsa ереду м&аайфтрро&ааи та кого-

; див© ЁЯЗа /Сергей !»•&»» '»а» норказшегэ» дэ-

n ездама жгяяодгшф&зта яШ^аяхти.

геодтдоэд itepsmW te esaspssfsa щ-mx трщьхзш рздикаиу-noasmaem» штода&и ürfep три® s^o^a т .

рйше®« Kmisufpaipa ь «орк jeijös» удашэзшъ ь

едаиадолУ»»/«*» пг/мв/ Ф цэйш удайисго ерав^

■ гата wös^iem ^эрмста ® рюш аитразеда. (- ; l^t« © иссждевст йрэ®» сиверка кровк

шдаий ^Ш ^WSJSKJÖB.

е-'"' " '"-.

Полученные данные статистически обработаны методом Стьга,цента, при этом вычислялись: средняя арифметическая /М/, её сродное квадратичное отклонение Ы, коэффициент корреляции /ч/ и пока-' затель достоверности /Р/.

. 3. ГЕЗУЛЬГАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЭДСЕАШЙ

3,1. Клинические аспекты становления ответной реакции яичников у коров-доноров на гор-^ мональную индукцию множественной овуляции.

Прогноз суперовуляторноИ реакции яичников по клиническим критериям, доступиш в условиях практического использования катода трансплантации является чрезвычайно актуальной проблемой. Это обусловлено, в первую очередь, отсутствием, в большинства случаев, возмояности проведения экспресс-анализов состояния функции яичшгкоа в предимплантационный период. Среди прочих факторов,накладывающих негативное воздействие и на характер полиовуляторноЯ реакции'« на клиническое состоявде репродуктивных органов, является. отсутствий стандартизированных препаратов гонадотропного /ФСГ-препараты/ и лютеолитического /простагландини группы 2/де(!-ствия, используемых при визнвшши шокествениой овуляции. Однако, использование стандартизированных /по соотноизни» ССГ и ЛГ/ и апробировшпшх препаратов дает совершаю непрогнозируемую поли-овуляторнуэ реакцию, о чём свидетельствуют данные, приведённые на рис Л. Из рисунка. вццнр, что лишь половина .обработагашх наии швотннх даёт высокий полиовуляторжгй эффект. Отсутствуют достоверные различия по средней полиовуляториой рзощтт /10,03+0,67 для ФСГ-п, 8,91+0,71 для фоллитропииа и 0,09+1,00 для фоллшгогро-пина/, а также по количеству зародаей, полученных при нзвлечз-Ш1И соответственно 5,92+1,19; 5,21+1,03; 6,72+0,96,

Данные. результате скорее свидетельствуют не о качестве препаратов /каздыв последующие серии 1СГ-пропаратсп тп^пт свои осо-бешюсти популяционного воздействия на полнонуляториую реакции/, а о фенотипической особенности ответной рзакции яичников у поров -доноров, В связи с зт.шд, представляло интерес изучить клштчэс-кую характеристику состояния репродуктивной функции на различии* этапах индукции шояеетпенной овуляции и получения зародишзЯ.

Piic. I. Реакция яичников коров-доноров при испольэоаанп различных гонадотропшх препаратов. По оси ординат - количество йнвотных в процанга по оон абсцисс - нояиоауляториая рэакцшгЛ - mi : кая; 2 - средняя; 3 - высокая. Гонздотропят ир паратн:5ИЗГ-п - (vffifo фоллитрошш - Г"*?! Яоллип! трошш - УЩ.

ЗЛ.1. Влитие разшров яичников у коров-доноров в ла-теинозу» йаау астрального цикла а& оообанности полиовуляторной ро&кидк» количество и качество повлечённых эмбрионов.

Исследования проводились на 14 животных, которых раздели: «а 2 групш по исходному состоандо яичников на 8-й дань полоз цшсла, предшествующего аддукции полиовуляции. Состояние гошу оценивал:? по следующим показателям; длине, ширине и толщине s кика, выражешш в сшшшатрах» Первую группу составили miBoi у которых произведение вше указанных параметров не превшал< 10 см^. Во втору» группу вошли животные, у которых объём хот; одного из яичников был больше 10 см3. Наблюдения проводились дневно до момента извлечения эмо'рионоп. При воздействии вкоог ного ФСГ-n на коров 1-й группы отмечалась увеличение размерю обоих яичников в 6-9 раз. Линашка ипменения параметров гонад коров 2-й группы носила несколько иной характер. В частности, личина правого яичника изэднякасъ аналогично животным первой 8

группы. Размеры левого яичника, несмотря на то, что в исходно)* состоянии были почти в два раза меньше параметров правого, ко дню извлечешя змбрионоз значительно превысили их. При анализа эффективности использования коров-доноров первой н второ!» групп отметили увеличение числа овуляций/соота9тствешю:0,00+0,76; 11,03+0,91/ и числа извлечённых эмбрионов /5,50+2,09; 8,99+1,3?/ в пользу коров 2-й группы. Дтя выяснения выявленной тевденции провели анализ полученных: результатов у коров этой группы в зависимости от исходного местонахождения жёлтого тола на одном из яичников в лютеиновую фазу астрального цикла, предшествующего полиовуляции.

Таблица I.

Характеристика полиовуляторной реакции яичников в зависимости от исходного местонахождения колтого тела полового цикла.

Местонахождение кёлтого тела

Показатели' ' на правом яичника на левом ястнике

I группа,п =4 , 2 группа,п =4

Общее число овуляций 13,75+2,71 10,50hl,32

в том числа:в правей 5,25+0,06 5,25+0,85

и левом яичниках 8,50+1,22 5,25+0,62

Всего получено зародышей 12,50*1,78 '. 5,50+1,55

в т.ч.: из правого рога 4,5C/7l,93 3,OOTO,7Ü

из левого рога 0,00+1,85 ? . 2f5oTo,86

из них: полноценных 9,30Т0,93 . ' 4,40+0,50' v

-• из правого рога . 3,5(^0,80 • 2,40+0,20

из левого рога 5,83fr,20 ■ 2,00+0,25

Эффективность извлечения ,5$ 90,1 52,4

Из анализа данных, предотавлзншк в ?абл1ще I следует, что -число лзвлечешшх зародышей имеет достоверное различие мзгду группами /Р< 0,05/, тогда как количество диагносцнруешх овуляций существенно не отличается /Р> 0,05/. Учитывая, что технология извлечения эмбрионов стандартна длл всех ответных, а разяща з эффективности получоншх зигот очевидна мопно с определенной' долей объективности рекомендовать использование пшотннх з начзс<* тве доноров, у которых жёлтое тело полового цикла» прэдкествуп-я'его полиовуляции, располагается на правом я:птнлт.

3,2. Эндокринные механизмы регуляции репродуктивной . . '• -тункп!!м доимплантационного периода короз-доно- ' • пор.эм^пчонпп. 9 .

3,2.1. Динамика прогестерона, эстрадиола-Г?р, тестостерона в сыворотке крови в лютеиновуга ^зу полова-, го цикла,до и после индукции полиовуляции у коров.

Динамика концентрации половых гормонов в крови коров-доноро] представлена в таблице 2. Таблица 2.

Динамика концентрации половых гормонов в сыворотке -крови п'лютеиновую *аэу астрального цикла, до и после шщукции полиовуляции. /п «10/

Дни полового цикла - Прогестерон кг/мл Эстрадиол-17й пг/мл ■ Тестостеро] Пг/МЛ

0 0,36+0,04 25,94+1,68 43,52+4,71

I 0,31+0,07 23,48+1,85- 49,47+4,06

2 0,34+0,08 21,15+1,61 37,69+3,34

-3' С, 31+0,09 22,20+1,90 56,1&к4,10

4 0,40+0,09 25,57+1,62 49,41+4,63

5 0,44+0,10 23,5572,17 . 53,03+4,50

6 , 0,53£о,1Я 23,21+2,00 53,46+3,27

7 0,67+0,21 ' 24,40+2,24 51,75+4,32

В 0,72+0,22 25,42+1,99 47,81+2,42

9х о,&ио;п 81,©8^3,34 44,63+2,87

10 0,68+0,16 22,08+1,33 45,98+3,51

II 0,76+0,21 24,08+1,74 51,96+3,50

12 0,60+1,63 29,77+1,71 47,70+4,52

13 0,3-1+0,59 31,97+1,62 56,45+4,39

0х* 0,28+0,49 25,92+1,70 49,97+2,94

1 0,24+0,03 19,67+1,22 ' 36,22+1,98

2 0,26*0,03 23,12+2,06 43,05+4,74

О О 0,50+0,07 23,13+1,37 55,83+4,70

4 3,39+0,83 23,95+0,95 64,39+5,56

5 0,96+0,15 25,93+1,07 55,70+5,67

6. 2,12+0,04 ■ 26,10+1,32 62,87+6,00

17ХХХ 2,39+0,03 27,35+1,04 72,31+5,08

Примечание: х - 9-13 - гонадотропная стимуляция полиовуляции хх - 0 - искусственное осеменение ххх -7 - извлечение эмбрионов ■ Данные таблицы показывают, что лютоиновал -*аза астрального цикла коров-доноров, предшостпуюцого индукции полиовуляции, -ха-10

растеризовалась в среднем низким уровнем прогестерона вплоть до начала стимуляции болликулогенеза. При отом, всё же отмечается двухкратное повышение концентрации гормона перед началом введения ФСГ-п. В период гонадотропной стимуляции концентрация прогестерона сохранялась на одном уровне. Синхронизация полиовуляции ' простаглаидином PgA сопровождалась резким снижение).! уровня гормона в крови, который сохранялся до 3-го дня после осеменения. Затем наб..вдалось повышение секреции прогестерона до момента извлечения эмбрионов. Последнее свидетельствует о наличии значительного количества активной прогестеронсинтезирующзй ткани в яичниках коров-доноров. На 4-й день после осеменения отмечен раз. кий подъём концентрации прсге<:.терона /Р< 0,001/, который, видимо, связан с выходом ембрионов В полость матки.

Анализируя динамику эстрадиола-17/з в сшзоротке крови видим, что на 4-й день астрального цикла наблюдается подъём концентрации 'гормона в 1,2.раза, других изменений.в лютеиновую фазу полового цикла не отмечено. При гонадотропной стимуляции $олликуло* генеза обнаружено ровно?,тарное повышение секреции эстрадиола-17,3 с резким подъёмом к 12-13-му дням. В первый день после осемэнэ-ш1я отмечен спад уровня гормона в 1,6 раза. В дальнейшей, до дня извлечения эмбрионов, наблюдали равномерное увеличение концзнт-' рации эстрадиола-17р.

Анализ динамики тестостерона показывает незначительное его повышение в лютеиновую toy овариального цикла сэ сроднасуточными колебаниями. При обработке гонадотропнши препаратами наблюдается активизация акдрогенной функции, которая достигает максимального уровня к 13-?,зу дню.'' Во вреда суперовуляции концентрация тестостерона сшиаятся на 6415. После оплодотворения откачено увеличзшю секреции гормона в два раза до момента вымывания за-родыией. ' • ~

Полученные результаты убедительно свидетельствуют о том, что й процессе индукции полиовуляцйи, после осетштя и в донмплзл-тационннй период в .эндокринной системе короз-доноров происходит значите льные измене шт.

3.2.2. Дина\ияа половых гормонов в крови коров-доноров в процессе стимуляции суперовуляции и в доимплан-тациодакй период при различно!! эмбриопродуктивности.

Содержание половых гормонов в сыворотке крови определялось

и'

у коров-доноров с различной эмбриопродуктивностью: низкой - шнь шз 3-х эмбрионов /1-я группа/, средней - 4-7 эмбрионов /2-я груп па/ и высокой - больше 7 эмбрионов,/3-я группа/. Полученица данные о концентрации прогестерона в сыворотке крови у коров-доноров показывают, что перед гонадотропной стимуляцией на 8-й день полового цикла уровень гормона достоверно выше в группах с высокой и средней эмбриопродуктивностью /0,82+0,03 нг/ыл и 0,64+0,0Е иг/ил/ по сравнению с 1-й группой животных /0,55+0,02 нг/мл, >Р< 0,05;0,001/. Во время стадии возбуждения, то есть через 48-7£ часа после инъекции простагландина, происходит падение уровня прогестерона. Причём снижение уровня гормона отличается в исследуемых группах. В первой группе концентрация снижается в 2,9 раза, во второй - в 3,4 раза, в третьей - в 4,9 раза. В первую неделю поело осеменения наблюдается активизация прогестагенной фу! ции с достоверным преобладанием прогесгеронешш в группах с высокой и средней эмбриопродуктивностью /3,10+0,03 и 2,95+0,ОбитЛ по сравнению с 1-й группой /1,49+0,05 иг/мл, Р< 0,001/.

Концентрация эстрадиола-17/ в сыворотке крови у коров-доно-' ров.с различной ¡эмбриопродуктивностью на протяжении исследуемом периода-изменялась незначительно, за исключением периода гонадотропной стимуляции фолликулогенеза и суперовуляции, где наблюда; ся достоверный 'подъём .уровня горцона. в . группа* со оредшш /32,3! +0,73 пг/мл/ и высоким' /37,90+1,55 пг/мл/ выходом эмбрионов, Зп свидетельствует 'о связи секреции астрадиола-17р с количеством растущих .фолликулов, и овуляцией яйцеклеток.

Динамика концентрации тестостерона в сыворотке крови у коро) -доноров В1 первую недели полового цикла-и но' время гормональной обработки достоверно Не отличается мевду тремя наблюдаемыми гру нами, В период искусственного осеменения уровень тестостерона в группа с низким выходом эмбрионов достоверно выше /49,53+2,29 пг/цл/ по сравнению с двумя другими группами /35,00+2,79 пг/мл; 35,50+3,15 пг/мл, Р< 0,05/,'что, вероятно, езязано с большим чи лол шовулированших Фолликулов, которые продуцируют дндрогеш.' К концу первой недели посла осеменения наблюдается постепенное повышение уровня тестостерона. Ко дню извлечения зародцяей эти показатели составляют 77,52+4,13 пг/мл; 70,32+3,15 пг/мл для •грэтьей и второй групп по сравнению с первой /58,73+1,98 пг/мл, Р<0,05; 0,01/. Эти данные свидетельствуют..-'об активизации обмен лшх процессов в организме корон-доноров, при беременности.

3.3. Динамика кортизола в сыворотка крови у коров-доноров в лютеиновую Ячхзу полового цикла, во время индукции полиовуляции и в доимплантаци-

ошшй период. |

Полученные данные концентрации кортизола в сыворотке крови у коров-доноров показывают, что лютепновач ^аза полового цикла характеризуется невысоким уровнем гормона с незначительными среднесуточными колебаниями /35,99+4,35 - 53,76+4,50 нг/мл/.При гоиадотропной стт1уляции наблюдается повышение секреции кортизола в 1,4 раза. Поело введения ПГГ^^ через сутки уровень кортизола повысился ещё в 1,4 раза и цсстиг уровня 102,34+6,64 нг/ил /Р< 0,005/. На таком я» уроь"о концентрация кортизола оставалась ещё два дня, то,есть во зрэмт эструса и супепопуляции. На 2-й день после осеменения отметили снижение секреции кортизола на 56,4 "Л, а затем наблюдали повышение глтакокортикоидной активности до дня извлечения 'онбрпоноп.

Содержание кортизола в сыворотке крови у коров-доноров с различной эмбриопродуктивноотьй представлено в таблице 3. Анализируя полученные результаты обнаружили достовер!шэ отлшшя по нс-следуе?«ш группа;,!. В группе хнвотшх с шшзш выходом опбрионоз /меньше трёх/ перед гормональной обработкой /на восьмой день полового щтла/ отмечено газкез содерглшэ кортизола /27,00+3,00 нг/мл/ по сравнений со второй и трзтьеЛ группх'ят /47,97+5,85 и 54,66+5,52 нг/мл; Р< 0,01; 0,005/. При введении простагландина

отмечено повышение уровня гормона в 1,2-1,9 раза без достоверных отличий по исследуеивд группа!,!. Во врэш еупзровуляции наблюдается достоверное уведичэтта .секреции кортизола у поров со средним /113,00+8,21 нг/мл/ и высоки?! /101,36+9,69 от/ш/ выходом зародышей по сравнению с группой кивотшх с низкой знбрпо-продуятивноетью /47,66+4,66 нгАп, Р< 0,001/. На седьмой дзиь после осеменения концентрация кортизола била в 1,5 раза пкпга у коров-доноров с выходом эмбрионов болъда четырех, чем у коров с низкой эмбриопродуктившетыо.

3.4. Корреляционный анализ! взаимосвязи уровня половах и надпочечниковмх стероидов с по-лиовуляторной реакцией, количестве»» и качеством полученных эмбрионов.

В результате статистической обработки установлено, что кон' 13

Таблица 3

Концентрация кортизола в сыворотке крови у коров-доноров с различной омбриопродуктивностью /М+/Т1 , нг/мл/.

Дни полового ___ Эмбриопродуктивность.

цикла низкая средняя высокая .

0 . . '24,66+2,40 48,12+4,27 29,08+3,?

I 40,13+2,43 52,47+5,01 43,36+4,«

2 39,16+3,53 37,23+3,92 43,26+3,С

з ; •'. ■ 43,1(^4,55 36,46+3,53. 40,80+4,';

4 36,33+1,63 : 49,00*5,26 44,40+4,4

5 " ' 34,80+3,29 33,86+2,06 34,12+2,6

6 41,00+5,15 47,80+4,93 46,94+5,2

7 • 39,86+3,77 - 53,25+5,43 54,40+5,4

8 ' 27,00+3,00 ■ 47,97+5,85 ■ 54,66+5,Е

9х 27,0(М,72 52,47+4,58 57,2%5,2

10 . " 32,00+3,09 ■ 41,67+3,27 . 46,5&+4,€

II 40,15+4,00 43,87+4,90 51,72^5,4

12 78,90+2,58 69,35+5,17 62,06+5,1

13 ' - 65,76*2,55 . ■ 131¡1(^7,56 65,34+3,6

Охх ■ ; '55,83+1,44 • 125,50+8,22 94,76+7,2

I '■:' •. 47,66+4,66 * ■' 113,ООТ8,21 101,36+9,6

2 .' 27,13+2,86 . '' 57,50+1,31 • 41,40+4,4

з' ..'■ 37,53+3,24 ' ' " 52,47+2,25 60,60+5,5

" 4 • '".'■■■ '■39.33+3,40 ...; 64,35+1,87 - 66,2%4,3

. 5 ; ' . - - 36,90+3,27 55,75+4,82 47,48+3,8

6 • V 59,00+1,67 72,75+4,63 74,32+4 ,'2

• 72,50+7,60 . ' 111,7(^6,00 114,10^9,6

V- Примечание: смотрите таблицу 2.

ценграция прогестерона в сыворотке крови коррелирует с число»? овуляций и эмбрионов на 7-8-й дни полового цикла перед гормональ ной обработкой /X =0,96-0,97, Р< 0,05/. Также выявлена достоверная корреляционная связь уровня прогестерона с числом полученных эмбрионов на 6-7-й дни после осеменения /1=0,93, Р< 0,05/. V При анализе данных о связи концентрации эстрадиола-17р с су-изровуияторной реакцией была выявлена достоверная корреляция па 10-П-й дни астрального цикла /-г =0,92-0,98, Р< 0,01/. Достоверной связи уровня гормона с числом и качеством полученных имбрио-' 14 > ' ' л

Hon из обнаружено. • v •-

Кощентрация тестостерона в сыворотке крови коррелирует с ■числом овуляций и эмбрионов на 9-й день полового цикла /г=0,05, Р< 0,05/. Это, вероятно, связано с том, что при гонадотрспной: . стгалуляцга! фоллзшулогенэза происходит активизация биосинтеза эстрогенов, где тестостерон является промепуточня! продуктом. Об-.--, наругата тазохз достоверная положительная связь содержания тестов cfepona в арови с число« овуляций, количеством л качеством э'мбф!-онов,- начиная с 4-го дня после ссем&ненля и до момента извлечения-энбрлоноы /1=0, f 2-0, 97; Р< 0,05-0,001/, tiro страдает активность, нетаболпчзскнх процессов в ^-дашлантацконний период у коров-дс-» ; нсроа 55.1брлонов,'.. ;< " ;

При анализа вэаткзс .яз)Г"6одер:какта нортизола в крови у коров с подиовулятсрнсй реакцией и шходси.вабрисноз была установлена полоазмельпая достоверная корреляция йа 11-й ijei-te астрального -Л цщла,-'а.такгв та.4»й». 7-й дни поела оеб^гейенш. Это свйдегельс!-вует о тон, что активизация: гдкковортпяоздноЯ функции про;!схог;*г-: в наиболее.критические периода воспроизводства». -

■' 1......; • .завода ' У

» ; * 1 * * *

; V.-.' ' -' -а ,

■ I.. Эффективность подугэняя гса^еагавшах онбряонов короз^ -доноров при использовакди стгщдартгжфсаакнж. гормскалькак препаратов зависит от «сходного клапачесяого есстояпяя гонад, опре-делящегося да только' размерна.:», но и мзстетзжддгзптен гастсго ■ -■тела- полового цикла в пользу правого шгашка. • - ■

2. Использовашые. гонадотропкка препараты-/£ЙГ-п, фойлагро~. 'пин, фоллшссгарогин/ ш пшют достоверных отличий по' супереэуял-. .торному эффекту* чийлу.и качеству йолученшх эмбрионов. ;

.'. 'Э; „Содеряйнйе-.шжшах -вт^ровдшх 'горноибв. в сывфотка вровп у норов-доноров находится В1 "тесной взаимосвязи с физиологическим состояние« организма й подаергаётся йта*йй&&'шц-том&йенйяи во'Д '-время процесса биотехнологии эмбрпдпересадки..- • . ...

.4. Пэрод гормональнойа?лг^ляцйей фолликулогенеза на 7-8-й дни полового щета уровень-прогестерона в сыворотке крови досто-. верно вше у коров с- высоким уровюм эмбрионов* что', следует учи-;тнвааъ_пр» отборе норов-донороз. - _ -

5. Доготлантационный период характеризуете®' активацией про- • гестагенной Функции с достоверным преобладание-.* прогеетерснемии у зеров-доноров с высокой эмбриопродуквгошс^ьэ» ...". ^ ■ "

: - . 15

: 6, При^введении препаратов фолликулостимулирующего гормона отмечено повышение концентрации эстрадиола-17|> в сыворотке крс ви у коров-доноров, которая тесно коррелирует с числом овуляци$

* на ХО-11-й полового цикла, ' ,/]

; , 7. Динамика концентрации тестостерона достоверно не отличается в лютеиновую фазу астрального цикла и при гонадотропной . 'стимуляции фоллйкулогенеза, В период суперовуляции уровень .горя мона достоверно выше в группе-коров-доноров: с низким выходом,' ( эмбрионов. ;

! 8, В доимплантационный период у коров-доноров отмечается ав тивизация авдрогенной функции яичников, что свидетельствует об усилении.метаболических процессов в организма коров-доноров в процессе формирования и развития зародышей,

• [;'[■ -9, В динамике концентрации кортизола в течение лютеиновой "фазы полового цикла, в процесое индукции полиовуляции и в доим*

плантационный период обнаружены кратковременные подъёмы уровня г гормона, которые соответствуют, наиболее критическим периодам Процесса воспроизводства /лизис жёлтого тела, суперовуляцая, вя ход эмбрионов в полость матки, бластогенез/, .

/ 10. На определённых этапах подготовки, коров-доноров к получа нив эмбрионов выявлена тесная корреляционная связь уровня половых и надпоч$чйикйвых стероидов р пдлвдвулятсфнрй реакцией, чис дои и качеством полученных эмбрионов, . ; •• ' •'-,?••' '

1/г^у ■ ' ; У.-шщтт производству

.. I, Для увеличения выхода качественных эмбрионов в прёдиндук цяонный период следует принимать во внимание исходное клиническое состояние яичников о'обязательным учётом размеров и мест она хоядения жёлтого тела полового одкла на правом яичнике. „.<

8. С целью повышения еМехтивности суперовуляторного ответа V*'выхода качественных эмбрионов необходимо'учитывать и корректи :*ровать уровень половых и-чадпочечниковых гормонов в процессе ян дукции полйовуляции. ->"у_ /*''

3. Теоретические и практические разработки рекомендуется ие Пользовать в учебном процессе ветеринарных и зоотехнических

"ВУЗов, а также для слушателей курсов повышения квалификации.

- ■- ■ - .•

;; ■ СПИЗСК РАБОТ, СГОГЕШШАННЫХ ПО ТЕМЕ' ^

г ■;;■ : I" - V ' ' ДИССЕРТАЦИИ: • : { ; Г- •

<- и ' ' : ,

Давидов В.У., Жолнерович З.М., Степанов Г.С. ,Глюнокорти-

коидная активность в процессе индукции полиовуляции и в продам-, плантационный период у коров-доноров эмбрионов.//Тез. докл. наручной. контор»; СПб. вет. института.- СПб, 1992.-СЛ4-15. , : . ,-",

2, Давыдов В.У., Жолнэр^йч З.М. Э^фэнтивность индукции.по-;, , лиовулящга у коров гонадотртй^ш гормонами.//Матер. Научной ко1К: •фер. ттроф.-преподавательско^состма,. научн. сотр. и аспирантов СЙб.»вет.:института / Актуальные проблема ветеринарии".-Спб, 199-4, -С Л 6..