Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Лейкоз крупного рогатого скота

ВЫВОДЫ

1. В экспериментальных исследованиях на крупном рогатом скоте и овцах изучены инфекционные и онкогенные свойства ретровируса типа С, выделенного от больного хроническим лимфолейкозом животного. Показано, что выделенный вирус является этиологическим агентом лейкоза крупного рогатого скота. На телятах черно-пёстрой и овцах каракульской пород воспроизведен лейкоз. Инкубационный период у различных животных колеблется от трёх месяцев до пяти лет. Продолжительность болезни у отдельных животных также колеблется в широких пределах - от 6 месяцев до 5 лет.

2. На основании широкомасштабных исследований оптимизированы условия выделения вируса лейкоза крупного рогатого скота с лимфоцитами крови от инфицированных животных и поддержания его в лабораторных условиях. В иативных инфицированных лимфоцитах вирус находится в интегрированном состоянии и с помощью электронной—микроскопии вирусные частицы не обнаруживаются. Репродукция вируса и выявление вирусных частиц наблюдается только после культивирования лимфоцитов в питательной среде. Инфекционные свойства вируса находятся в прямой зависимости от жизнеспособности лимфоцитов.

3. Наиболее высокий уровень жизнеспособности и вирус продуцирующей активности лимфоцитов наблюдается через 48 часов при культивировании их на среде ДМЕМ с 20% сыворотки крови овец или плодов коровы при исходной концентрации 5 х Ю6 клеток в 1 мл. Установлена прямая зависимость интенсивности репродукции вируса в культурах лимфоцитов от выраженности инфекционного процесса у донора лимфоцитов.

4. В результате комплексного изучения культуральных свойств вируса лейкоза крупного рогатого скота установлено, что монослойные культуры клеток селезёнки и лёгкого эмбрионов коров и овец являются наиболее чувствительными и могут быть использованы для поддержания изолятов вируса на протяжении 5-7 пассажей.

5. Установлено, что репродукция вируса лейкоза крупного рогатого скота не сопровождается разрушением клеток мишеней. Цитопатогенное действие вируса проявляется образованием синцитиев в монослое чувствительных клеток.

6. Разработанная модификация теста синцитиеобразования, позволяет выявлять и титровать вирус лейкоза крупного рогатого скота и антитела к гликопротеидному антигену вируса в реакции нейтрализации. Препараты, способствующие проникновению вируса в клетку (ДЕАЕ - декстран, полибрен и диметилсульфоксид), повышают чувствительность теста в 1,5 раза.

7. Получена новая перевиваемая линия клеток ТЭК МВА 76, хронически инфицированная отечественным штаммом вируса лейкоза крупного рогатого скота, которая используется для изучения биологических свойств вируса и служит источником вируса и вирусных антигенов для производства биопрепаратов.

8. Разработана и освоена технология промышленного производства набора для серологической диагностики лейкоза крупного рогатого скота методом РИД.

9. В экспериментальных исследованиях показана принципиальная возможность заражения животных путём нанесения вируса лейкоза крупного рогатого скота на неповреждённую слизистую оболочку носа. При этом динамика развития инфекционного процесса не отличается от таковой, наблюдаемой при парентеральных способах заражения. Слизистая оболочка носа в естественных условиях может служить воротами инфекции, являясь одним из путей горизонтального распространения вируса лейкоза крупного рогатого скота.

10. Сравнительно низкая инцидентность инфекции, вызываемой вирусом лейкоза крупного рогатого скота, в неблагополучных стадах позволяет отнести лейкоз к заболеваниям с невысокой конгагиозностью.

11. У крупного рогатого скота и овец установлены породные различия по степени устойчивости к заболеванию лейкозом. В условиях эксперимента не удалось воспризвести заболевание у телят зебувидной и бушуевской пород и у овец романовской породы, тогда как бессимптомная инфекция была воспроизведена у этих животных.

12. В период стельности у коров происходит снижение уровня антител к вирусу лейкоза крупного рогатого скота в крови и их аккумуляция в секрете молочной железы. В первой порции молозива заражённых вирусом лейкоза коров уровень антител к гликопротеидному антигену в 10 раз выше, чем в сыворотке крови. У новорожденных телят, получивших первую порцию молозива, ттр антител в крови превышает таковой в крови матери, персистенция антител сохраняется до 6 месяцев. Благодаря колостральному иммунитету свыше 80% телят, рождённых от инфицированных матерей, остаются свободными от вируса лейкоза.

13. Внутриутробное заражение плодов вирусом лейкоза крупного рогатого скота имеет важное значение в распространении вируса в популяции восприимчивых животных. При 70% заражённости взрослого поголовья стада вирусом лейкоза у 4,1% новорожденных телят наблюдается внутриутробное заражение.

14. Разработана математическая модель распространения вируса лейкоза в популяции крупного рогатого скота, которая позволяет прогнозировать эффективность различных схем оздоровления неблагополучных по лейкозу хозяйств.

15. Разработанные и апробированные в хозяйствах Вологодской и Московской областей схемы оздоровления неблагополучных по лейкозу стад, основанные на серологической диагностике и проведении ветеринарно-санитарных и организационно-хозяйственных мероприятий, позволяют в течение 3-6 лет (в зависимости от эпизоотической ситуации и технологии ведения животноводства) обеспечивать стойкое благополучие по этой болезни, не нарушая селекционно-генетической работы и не снижая продуктивности стада.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

На основании многолетних исследований этиологии лейкоза, биологических свойств вируса лейкоза крупного рогатого скота и широких серо-эпизоотологических исследований нами были разработаны рекомендации и предложения, нашедшие отражение в следующих документах и публикациях:

1. Временные матодические рекомендации по постановке реакции иммунодиффузии для выявления антител к антигену р24 онкорнавируса в сыворотке крови крупного рогатого скота при диагностике на лейкозы. Одобрены ГУВ МСХ СССР 26.05.76 г.

2. Временная методика постановки реакции иммунодиффузии (РИД) для серологической диагностики онкорнавирусной инфекции при лейкозах крупного рогатого скота. Рекомендована ГУВ МСХ СССР 18.08.77 г.

3. Авторское свидетельство №702073 от 14.08.1979 г. "Клеточная линия тимуса эмбриона крупного рогатого скота МВА-76 -продуцент онкорнавируса типа С (ТЭК МВА-76)".

4. Авторское свидетельство №820015 от 5.12.1980 г. "спсоб получения вакцины против лейкоза крупного рогатого скота".

5. Методические рекомендации по определению инфекционного бычьего лейкозного вируса (БЛВ) методом синцитиеобразования. Одобрены Отделением ветеринарии ВАСХНЙД 9ю10.1980 г.

6. Рекомендации по оздоровлению неблагополучных по лейкозу крупного рогатого скота хозяйств с использованием серологического метода диагностики. Одобрены ГУВ МСХ СССР 23.10.1982 г. и утверждены Производственным управлением сельского хозяйства Вологодского областного Совета народных депутатов 30.11.1982 г.

7. Инструкция о мероприятиях по борьбе с лейкозом крупного рогатого скота. Утверждена ГУВ МСХ СССР 29.12.1984 г.

8. Научно-техническая документация (ТУ 46-21-21-73-85, временная инструкция по изготовлению и контролю, временное наставление по применению) на "Набор для серологической диагностики лейкоза крупного рогатого скота, опытная партия", утверждена ГУВ МСХ СССР 21.11.1985 г.

9. Методические указания по диагностике лейкоза крупного рогатого скота. Утверждены ГУВ Госагропрома СССР 27.06.1985 г. № 115-6а.

10. Комплексный план борьбы с лейкозом крупного рогатого скота в хозяйствах Вологодской области на 1986 - 1990 гг. Вологда 1985 г.

И. Научно-техническая документация (ТУ 10-19-442-87, временная инструкция по изготовлению и контролю, временное наставление по применению) на "Набор для серологической диагностики лейкоза крупного рогатого скота, серийное производство", утверждена ГУВ Госагропрома СССР 25.05.1987 г.

12. Рационализаторское предложение "Способ получения лейкозного диагностикума", признанное и принятое ГУВ Госагропрома СССР. Удостоверение № 439-11/1966-568/29 от 05.02.1987 г.

13. Лекция "Виру лейкоза крупного рогатого скота". Москва, 1986 г.

14. Листовка ВДНХ СССР "Профилактика лейкоза крупного рогатого скота" (1986 г.).

15. Инструкция о мероприятиях по борьбе с лейкозом крупного рогатого скота, утверждена ГУВ Госагропрома СССР 09.08.1989 г.

16. Методические рекомендации "Дифференциальная диагностика гемобластозов и онковирусной инфекции у сельскохозяйственных животных". Утверждены отделением ветеринарии ВАСХНИЛ 20.04.1990 г.

17. Правила по профилактике и борьбе с лейкозом крупного рогатого скота. Утверждены заместителем министра МСХиП РФ 23.02.1999 г. № 133-2/1509.