Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Иммуноморфологические показатели у телят при применении вакцины БЦЖ и тубазида

КАЗАНСКИЙ ОРДЕНА ЛЕНИНА ВЕТЕИШАНШЙ Ш'ЛИТУТ ИМ. Н.Э.БАУМАНА

На правах рукописи

КШЛИЕВ КАЙСАР ШМГОШ

ИШНОМОРШОГОТЕСКИВ ПОКАЗАТЕЛИ У Ш!ГГ ПРИ ПШйЕНШШ ВАКЦИНЫ НИ И Т7БА31Щ

16.00.02 - Патология, онкология и морфология животных

I6.00.CC - Ветеринарная макробиология,

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

вирусология, эпизоотология, микология и .дмунодогия

Казань 1993

м

Работа выполнена .на кафедрах патологической анатог-пш и эпизоотологии Казанского ордена Ленина ветеринарного института иы. Н;Э,Беумана (г.Казань).

Научные руководители: доктор ветеринарных наук, заслуженный деятель науки Республики Татарстан, академик Т.З.ВДШСОВ,

доктор ветеринарных наук, заслуженный ветеринарный врач Российской Федерации, профессор И.А.САФИН.

О&гццальные оппоненты: ШдНШОВ Д.Ш. - доктор ветеринарных наук, профессор,

ХИСАМЩИНОВ А,Г. - доктор медицинских наук, профессор.

Ведущее учреждение: Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт (г.Казань).

Защита состоится »£« /Л 1993 года в '(О часов на заседании специализированного совета Д-120.22.01 при Казанском ордена Ленина ветеринарном институте имени Н.Э.Баумана (<!20074, Казань. Ветеринарный институт).

С диссертацией мокго ознакомиться в библиотеке Казанского ордена Ленина ветеринарного института имени Н.Э.Баумана.

Автореферат разослан " ^ ~/Y_1993 года.

Ученый секретарь специализированного-совета, доцент

ЧЕБОТАРЕВ В.Е.

I. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы» Туберкулез крупного рогатого скота наносит большой экономический ущерб хозяйствам, одерживает обеспече-. ние населения ценными продуктами питания и представляет опасность для здоровья людей (Благодарный H.A., 1972, 1980; Донченко A.C., 1971» 1977; Сиолшшюв Ю.И., 1980, 1931; Исхаков О.З., IS87.-I992; и ,цр.).

Мероприятия, регламентированные действующей инструкцией я направленные на ликвидацию туберкулеза, в первую очередь наиболеё эффективны в тех неблагополучных по туберкулезу крупного рогатого скота хозяйствах, где эта инфекция имеет незначительное распространение. В длительно неблагополучных пунктах, особенно при высокой заболеваемости животных туберкулезом, ohiî не всегда достигают цели. Это побуждает ветеринарную науку изыскивать новые и совершенствовать имеющиеся средства, а тагеке методы профилактики и борьбы с этой инфекцией.

При оздоровлении неблагополучных по туберкулезу стад крупно- . го рогатого скота с положительными результата!,ш апробировались туберкулостатические средства, в тал 'числе - тубазид. Применение последнего в неблагополучных по туберкулезу пунктах показало, что сроки оздоровления их можно значительно сократить (Ротов В.И., Г978; Хайкин Б.Я., I98S, 1989). При этом повторные вспышки болез-т в оздоровленных пунктах наблюдали реяе, чем в хозяйствах, оздоровленных без применения противотуберкулезных средств (Дндо-вецС.Р., 1980).

В системе мер профилактики туберкулеза У крупного рогатого зкота используются вакцина БЦ£ и тубазид (Гизатуллш: Х.Г. и соавт., [978, 1980; Хайкин Б.Я., 1980, 1985; Сафпн М.А., 1981? Пионткои-:кий В.И., 1984; Косилов И.А. и соавт., 1987; Ксцеев H.H., 1939).

Известно, что телята могут заразиться возбудителем туберку-юза в лостнатальном периоде от (Зольных коров через молоко, об-эат, объекты окружающей среды (Ротов В.И., Кочуричев П.И , Совчед-«о П.Е., 1973, 1978; Донченко A.C., 1977; Щуревсий В.Е., 1980, [983; Урбан В.П., 1986). Поэтому вырастить здоровый молодите в щительно неблагополучных по туберкулезу хозяйствах представляет 1начительные трудности. Больные туберкулезом телята, особенно со ¡крытым течением инфекции, представляют опасность в распростране-

ш заболевания. Использование изониаэида в таких хозяйствах монет обеспечить профилактику заболевания только в период применения, поэтому существует необходимость сочетанного приыенешш его с вакциной БЦ2.

Цель и задачи исследования. Целью наших исследований являлось сравнительное изучение иммуномор^ологических изменений в органах и тканях телят при применении тубазида и вакцины БЦК в благо* ^лучных и длительно неблагополучных хозяйствах, а также выявление эффективности различных схем применения вакцины БЦЗК и тубазида для профилактики ту1еркулеза телят.

В соответствии с этим били поставлены следующие задачи:

1) Изучить иммуноыорсЪологические изменения в органах и тканях телят, при: итых вакциной ЕЦЖ;

2) Выяснить гематологические сдвиги и морфологические изменения в органах телят, получивших тубазид;

3) Изучить млмуноыорфологпческке изменения в органах и тканях телят при сочетанием приыенешш вакцины БЩ и тубазида;

4) Изучить эффективность различных схем приыенешш вакцины БЦ2 и тубазида для профилактики туберкулеза у телят;

5) Разработать схему применения вакцтш БЦК и тубазида на телятах в раннем возрасте в хозяйствах, благополучных и неблагополучных по.туберкулезу.крупного рогатого скота.

Научная новизна -работы, В производственных условиях и "следовала эффективность применения вакцины БЦК и тубазида в отдельности и в сочетанком виде на'телятах в раннем возрасте в хозяйствах, благополучных и неблагополучных по туберкулезу крупного рогатого скота.

С помощью современных методов дана нммуноыорфологическая оценка эффективности применения вакцины'Щй и тубазида. Доказана эффективность этих препаратов при сочетанием применении и возмоа-ность выращивания здорового молодняка в длительно неблагополучных ио туберкулезу хозяйствах.

Усгако&тено, что повышение устойчивости у вакцинированных БЦЕ киБотник происходит за счет активации как клеточной, тазе и гуморальной систем иммунитета, Разработана оптимальная схема иммунизации телят вакциной БЦЕ в сочетании с тубазидом.

Тсорэткчоетсая и практическая ценность. Данные, полученные с -использованием ссзремененных методов, дали возможность судить о

степени' выраженности шллуноморфодогических V зменешй в органах и тканях телят при применении вакцины ЕЦИ и т\базида.

Проведенный анализ клеточных реакций в иммунокогшетентных органах югаотннх, позволили определить, что вакцина БЦК при сочетанием применении с тубазидом вызывает выраженные иммуноморфологиче-ские изменения в органах, способствует активации клеточных элементов ретикулогистиоцятарной системы.

Внедрение результатов исследований. Результаты проведенных исследований, сформулированные в диссертации, внедрены а совхозах "Кушумский" Зеленовского района, имени "Абэя" Срыыского района и учебно-опытном хозяйстве "йрудзенское" Западно-Казахстанского СХИ Западно-Казахстанской области республики Казахстан, а также в учебный процесс на кафедрах эпизоотологии и патологической анато-'яга Западно-Казахстанского сельскохозяйственного института и в работах ШВСа.

Апробация -работы. Основные положения диссертационной' работы положены и получили положительную оцешеу на конференции молод*« ?чених и специалистов в г. Уральске в 1392 г., на юбилейной научно-производственной конференции Казанского ветеринарного института а 1993 году.

Публикация. По теге диссертации опубликовано 3 статьи л 2 зтагьи находятся в печати.

Объем и структура .диссертации. Материалы диссертации излоне-ш на 128 страницах машинописного текста, нипочаот введение, обзор литературы, материалы и методы, собственные исследования, за-слючение, выводы и приложения. Списов литературы состоит из 221 юточника, из которых 54 иностранных. Работа иллюстрирована 13 таблицами и 17 рисунками.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Материалы и методы исследований

Работа выполнена в 1983-1992 гг. (номер Тосрегистра :и 51860030373) на базе кафедр патологической анатомии и эпизоотологии Казанского ордена Ленина ветеринарного института им. Н.Э.Батана и в учебно-опытном хозяйстве "йрунзенское" Западао-Казах-¡танского СХИ, в совхозах "Кушумский", дазни "Абся", а такке в фугих хозяйствах Западно-Казахстанской облаем республики Ка-1ахстан.

Изучение млуног.юрфологичесмк изменений в органах и тканях подопытных шнзогних, профилактической эффективности применения тубазида и вакцины ЕЦ£ проводили на 80 телятах двухнедельного возраста, в дуух сериях опытов,

В первой серии опытов бшо 12 групп по 5 телят в каздои груше, в том числе 6 групп контрольных. Первая серия опытов проводилась в благополучных хозяйствах по туберкулезу крупного рогатого скота: учебно-опытном хозяйстве "^унзенское" Западдо-' Казахстанского СХИ и в совхозе им. Абая.

Первая и вторая группы зшвотных были привиты вакциной Щ>1 в дозе I мг внутрикожно в 0,2 кш растворителя, изготовленного Ставропольски/. НИН вакцин и сывороток. •

£ивотние третьей и четвертой групп получали тубазид с молоком в дозе 10 мт на кг.н.м. перорально, в течение 30 дней. Через 10 дней после прекращения дачи тубазида ¡¡швоише этих групп были вакцинированы ЩХ в дозе I мг внутрикожно в 0,2 ш растворителя.

Пятая и шестая группы телят получали тубазид с ¡иолокоы в ■дозе 10 мг на кг.к.ы. перорально. В каздой группе имелись по 5 контрольных' животных.

Во второй серии опытов животные были разделены на 4 группы по 5 голов в каждой. Эта серия опытов проводилась в неблагополучном по туберкулезу совхозе "Кушумскин". квотные первой группы были вакцинированы БЦд в дозе I мг внутрикожно е 0,2 ш растворителя. Вторая группа получала тубазид с молоком в дозе 10 1лг на кг.н.м. перорально в течение 30 дней. Через 10 дней после прекращения дачи тубазида животные этой группы били вакцинированы ЕВД в дозе I мг внутрикожно в 0,2 мл растворителя. 'Гретья группа получала тубазид-с молоком : дозе 10 лог па кг.х:.м. в течение 30 дней, Животные четвертой группы служили контролем.

В экспериментах испшьзовали отечественны!! противотуберкулезный препарат - тубазид, изготовленный на заводе "Акрихин".

Тубазид (изониазид, гинк) - белый кристаллический порошок горького вкуса, легко растворим в воде, трудно растворим в спирте. Применяются водные растворы (Ш 6,0-7,0), молекулярный •зес 137,15. '¿шлрнческая фзрдула С6Н?03. • -

Черва 14 месяцев после вакцивацнк и дачи тубазида по 3 аи-ьог:шх из х?авдой группы бшш убито на санбойае Уральского шсо-исмбшти Ту-Ш и внутренние органы подвергались тцато::ыю;.]у

' иатологоанатошческому осмотру, патматериал от них исследогаяи лабораторными методами (бактерноскопичсский, бактериологический, гистологический) па туберкулез.

Для лабораторных исследований использовали внутренние паренхиматозные органы (кусочки печени, легких, миокарда, почек-, селезенки) и лимфатические узлы (заглоточные, нргдяопаточные, средо-стсгаше, бронхиальные, брыксечные, надвыгляшше, околоушные).

При проведении лабораторных исследовали"! пользовались "Методическими указаниями по диагностике туберкулеза животных'', утвер-вдешшш ГУБ [/¡CiL СССР II февраля 1978 г., "Ыетодаш лабораторной диагностики туберкулеза',' утвержденными постановлением Государственного Комитета СССР по стандартам от 9 февраля IS84 г. J 45, "Наставлением по диагностике туберкулеза животных", утверзденнш 1УБ Госагропрома СССР от 25 февраля 1986 г.

Взятые кусочки органов фиксировали в ICfS-ном растворе нейтрального формалина, обезволивали q спиртах возрастающей концентрации и уплотняли заливкой в парафин (М.И.Меркулов, IS69).

Гистосрезы изготовляли на стягам микротоме и окрашивали гематоксилин-эозином по Романовскому-Гимза и Ван-Низону.

Содержание ИЖ определяли по Браше, гликогена - по Еабадаиу и щелочную фосфагазу - по Гомори. Аллергическую реактивность вотных на туберкулин изучали методом внутрикожнои туберкулииовоД пробы. Для этого использовали туберкулин очищенный (ЩИ) для 'ше-копитавщих, изготовленный Курской биофабрикой.

Введение туберкулина животным и учет реакции производили в соответствии с наставлением по его применению.

Определение функциональной активности лимфоцитов периферической крови у яивотшх, привитых БЦЕ, проводили: реакцией бласт-•гранейорпадии лимфоцитов (ЕБТЛ) по методике, щзелдохениой И.М.Авербахом и соавт. (1974), в модификации М.А.Сафяна и ссазт. (i960).

Определение количества Т-тлякфоцитов в периферической крови методом спонтанного розеткообразования с эрит^цитами барана (Е-РОК) по Д.П.Лея и соавт. (1978).

Статистическую обработку цифровых данных проводили на SH.I "Электроника МК-56" (Р.Х.Тукшаитов, Н.Х.Кигматуллш, IS34) с заданной надежностью достоверности Р-35% или уровнем значимости ч = 0,05.

2.2. Имыуноморфологические изменения в органах и тканях телят, привитых ватажной ЫЩ

Иммунизация телят против туберкулеза вакциной БЦЖ обуслошд-вает не только вцработку специфического иммунитета, но и вызывает ряд физиологических сдвигов (В.Н.Черниговский, Г.С.Нан, Б.И.Аль-бертинский, 1862).

Одним из механизмов усиления иммунных реакций организма под воздействием ЕД1% по данным ¿&/-С4 (1976), может быть действие вакцины на регуляцию перемещения лиыуюцитов к лимфоидаыы тканям.

Противотуберкулезный иммунитет у .вакцинированных животных оценивается по различном показателям: по усилению лпыфэидной реакции, гиперплазии ретикулярных и эндотелиальных клеток лиыфоид-ных органов, по аллергически,1 туберкулиновым реакциям и т.д. В последние годы предложены и другие показатели, такие как реакция бласттраясформации яшлшоцитов (РБТЛ), методы -оценки Т- и В-систеы иммунитета.

В нашх опытах состояние клеточного иммунитета изучали с помощью РБТЛ через 7, 15, 30, 60, 120, 240, 360 дней после иммунизации телят вакциной БЦ£. В-качестве специфического антигена стимулятора использовали туберкулш ПВД для илекопитащих.

Исследованием установлено, что показатели реакции бласттранс-форыации в культурах клеток периферической крови у.опытных групп телят через 7-15 дней в средней составило 17,99+0,54 при контроле 2,28+ОДЭ. В дальнейшей отмечаюсь повышение показателей РБТЛ до 22,55+0,52 к 2-х месячному возрасту. К концу года показатели РБТЛ. соста^лиш 17,13+0,43.

Такпгл образом результаты исследований свидетельствуют, что у привитых БЦК животных специфическое антигешюе раздражение клеточных элементов сохраняется до I года (срок наблюдения). Содержание Т-розеткообразуюпрх лшфоцитов у контрольных здоровых телят составило 61,6+0,6 клеток.

Через 15 дней после вакцинации у всех подопытных животных отмечено постепенное повышение количества в периферической крови функционально активных категорий лимфоцитов. К этому сроку исследования у всех подопытных животных отмечено повышение уровня Т-ро-зеткообразуюцих клеток до 63,4+0,3. Причем повышение числа В-лиы-фоцитов.происходите сравнительно медленнее, чем Т-клеток. Содер-

сание В-лшфоцитов к 1-му месяцу нсследовашн составило 51,3+0,9$.

Через 1-2 месяца после вакцинации у псе:: огошшх ¡швотных [ачалось значительное увеличение содержания в периферической кро-!и функционально активных категории лиииоцитол и составило Т-лим-юцитов 64,4+0,6, Б-лшлрцлтоп 52,1+0,7.

Как видно из приведенных данных, вакцина» чя те.ят БД},' обусловливает залетные изменения з количестве тллуиокомпетентных ш-■ок крови, уровень содержания которых нормализуется лишь примерно ; концу года поело иммунизации. Гля выяснения иапря^шюсти иглму-:итета у подопытных телят при иммунизации вакциной мы проводин шялуноморфологнческие исследования их органов и тканей в лагололучнш: и неблагополучном хозяйствах. Ъ опытах, проведении:; а первом этапе, при лосдеубойном осмотре патсморфологлческпс -"->-[енешгя в органах п тканях еиеотных из благополучных хозяйств 1ши в основном однотипны, поэтому приводим их общее описание.

В лимфатических узлах и селезенке гаиотных, ионизированных ротив туберкулеза, отмечены усиление лшдоидно-пгперпластической икрофагальноЦ и плазпосттарлоп реакции, а такпг» пошисгакй рас-:ад зра>:ых лимфоцитов. Реактивные центр« фешпшулов заглоточного, редяопаточного, средостонного лимфоузлов тлела; срашптелъ-;э рунные размеры и содержали значительное количество ретикулярчых леток, бластов, единичные лимфоциты и макрофаги. В контррегко-арнше и отдельных лимфоузлах изменения те же, что в вышеописанных лыфатнческих уапах, но лшфоидно-пролийератишые процесс:! внране-ы слабео.

В печени рисунок дольчатого строения сохранен, отмечается меренное полнокровно сосудов органа, гепатоцнты о явлениями зер-истой дистрофии, отмечается уменьшение в них РНК я гликогена, ■вездчатые ретшсулозидотедиоцпты умеренно проотферпруют, В парен-име органа и ксгдолькоеоп соединит ельной ткани встречается оча-овое скопление лшлфоидоо-гистиоцнтарннх ¡слеток, которые ыссхжл .остигагат значительных размеров. Среди печеночных клеток заметно величение гепагоцитов, имеющих пшерхро.'яша г дтиоиднне ядра, ыпокарде подопытных квотных отмечались зернистая дистрофия, езкое уменьшение содержания гликогена и очаговые скопления лим-оидно-гистицитарных клеток в интерстициальной ткаш. Гликоген охранялся лишь в нервных элементах проводящей системы. В надпо-ечниках клетки клубочковой и пучковой зон коркового слоя органа аделялись умерешой пиронинофшшей цитоплазмы. В почках подопыт-

них животных увеличивалось число пораяенных нефронов, причем наиболее выраженные патоморфологические изменения обнарукивались в сосудистых клубочках.

Макроскопические изменения органов телят, привитых БЦЕ в неблагополучном хозяйстве в печеночном, бронхиальном, подчелюстном, околоушном лимфоузлах и селезенке характеризовались сглаженностью рисунка фолликулярного строения? фолликулы небольшое размеров, в них преимущественно выявляются малые и средние лимфоциты и небольшое число бластных клеток. Лимфоидная ткань коркового вещества узла гиперплазирована, мякотные шнуры утолщены, инфильтрированы в основном зрелыми плазмоцитаыи, мозговые синусы умеренно расширены, в них обнаруживаются единичные макрофаги. Периваскулярная ткань трабекул местами инфильтрирована лшфопдно--гистиоцптарныш клетками с примесью эозшюфшюв.

Степка сосудов трабекул с явлениями мукоидаого набухания, местами в состоянии фибрипоидаого некроза и деструкции. Изменения в паренхиматозных органах (печень, почки, миокард) характеризовались зернистой дистрофией. Внугрвдолысовые эндотелиоцити печени умеренно пролпферируют, сосуды органа налиты. Местами в легких отмечалось очаговое утолщение альвеолярных перегородок за счет инфшштрацки иг лтююидао-гнетиоцитарныыи клеткш.ш.

Таким образом при применении .ЩИ у подопытных животных развиваются пшер1шастическо-1фолиферативные процессы в лиыфоидной ткани, активация клеток ретикуло-гистиоцитарной системы во внутренних органах, повышение проницаемости капилляров, нередко явлен] лимфостаза, выпот ненннх сеток фибрина или однородно-гомогенной базофнльной массы в синусах. Разроет фиброзной ткани в л: .40узлах развитие специфических Есштелиоидно-клеточных гранулем отмечаются у животных из неблагополучных в отношении туберкулеза хозяйств.

I

2.3. Изучение гематологических показателей и патоморфологическюс изменений в органах телят, получишпх тубазид

В работе использовали телят в шзрасте 30 дней с массой тела 30-43 кг черно-пестрой, симментальской, казахской белоголовой пород, тещах средни» упитанность. За 10 дней до начала исследований телята подвергались проверке на туберкулез аллеригческш пето дом. Результаты этих исследований были отрицат&яыш.

Телята получали корма и воду вволю. Б состав рациона входили: сено, силос, сенаж, концентраты, травяные гранулн, поваренная соль.

Общее клиническое состояние определяли общепринятыми методами (А.М.Смирнов, П.Д.Конопелько, В.С.Постников и др., 1981).

Уровень активности ¡теток крови определяли по изменениям количества Т- и' В-димфоцнтов и РБТЛ. Исследования показали, что у телят в месячном возрасте, получивших тубазид, в отлично ог» взрослых нивстных, уровень содержания функционально актишых категории лимфоцитов в периферической крови заметных сдвигов не претерпевает, отмечено лишь незначительное повышение Т-лшлфоцитов (63,3+1,6$) при контроле (62,9+0,8/2) на 60 день исследования, и В-лшлфоцлтов (48,2+1,6^) при контроле (47,1+1на 120 день. Показатели реакции бласттрансформации лимфоцитов у подопытных животных так;:;е но претерпевали больших изменений. Таким образом, тубазид не оказывает существенного влияния на количественные изменения и уровень активности РБТЛ в крови телят.

Защитно-приспособительные реакции в органах и тканях ::лвот-ных в неблагополучном хозяйстве при применении тубазлда ь основном выявлялись в печеночной и мезентерналышх лимфатических узлах > В этих лимфоузлах рисунок фолликулярного строения был сглажен, в расширенных герминативных центрах клеточные элементы располагались разрекенно, в них преобладающими были бластные клетки и фигуры митоза. Сохранившиеся вторичные узелки имели разрешенное расположение клеточных элементов, в некоторых герминативных центрах содержалось значительное количество бластных клеток и единичные макрофаги с желто-коричневым пигментом» Лз-п-лфоидная ткань коркового вещества умеренно пршшферировал. В корковом веществе узла, к:--^альтрирокишс:.! з основном малыми и средними лимфоцитами, встречались очаговые скопления бластьнх базофяльних клеток. Центральные синусы слегка расширены, в них обнаруживается единичные макрофаги и лимфоциты, отмечаются явления лимфостаза в синуг-ax с признаками начала формирования фиброзной ткани. Ешш саг.еищ такие выпот нежных сеток фибрина в просвет центральных синусов . и повышенный распад зрелых лимфоцитов в корковом веществе. Стенки артериол, венул и капилляров с явлениями мукоидного набухания. Мякотные шнуры инфильтрированы большим числом шазкоцптов. Пара-кортикальная зона узла имела разрешенное расположение клеточных

моментов. Отмечалось разрыхление и отек периваскулярной ткани трабекул, инфильтрация ее эозшюфилами.

Печеночные клетки с явлениями белковой дистрофии. В леших отмечалось очаговое утолщение альвеолярных перегородок за счет иыТлльтрации их лимфоидно-гистиоцитарными клетками. Изменения и печеночном, брыж.еечноы,средостенном лимфоузлах телят при применении тубазида в благополучном хозяйстве в отличие от неблагополучного проявлялись однотипно. Однако в лимфоузлах и селезенке этих кивотных происходило утолщение мякотных шнуров и инфильтрация их большим числом плазмоцитов с богатым содержанием в них Н1К. Пери-васкулярная соединительная ткань трабекул разрыхлена, отечная, паракортикальнсл зона лимфоузлов имела разреженное расположение клеток.

Б лимфоузлах телят из неблагополучных хозяйств рисунок фолликулярного строения был сгла&ен, сохранившиеся фолликулы имели разрешенное расположение клеточных элементов, лимфоидная ткань коркового вещества умеренно гипершгазирована, в ней обнаруживались небольше очаговые скопления из 5-6 эпителиоидных клеток.

В печени, почках, миокарде и надпочечниках подопытных телят обнаруживались полнокровие сосудов, зернистая дистрофия паренхиматозных элементов и очаговая пролиферация лимфоидно-гистиоци-тарных клеток. Печеночные клетки с явлениями зернистой дистрофии, отмечалась умеренная пролиферация звездчатых ретнкуло-эндотелио-.цитов, сосуды органа бшш умеренно налиты. Б отдельных дольках органа в цитоплазме гепатоцитов выявлялись мировые капли.

Как видно из наших исследований при применении тубазида телятам благополучных и неблагополучных в отношении туберкулеза хозяйств изменения в органах и тканях характеризовались умерен-ншл полнокровием сосудов, зернистой дистрофией паренхиматозных элементов, очагоьой пролиферацией лимфоидно-гистиоцитарпых клеток, хшровой инфильтрацией гепатоцитов в отдельных дольках.

2.4. Изучение гематологических показателей и имыуно-морфологических изменений в органах телят при сочетанном применении вакцины ЩК и тубазида

Изучение 1'- и В- систем иммунитета и РБТЛ, поддерживающих постоянство внутренней среды организма, позволяет объективно оценивать тжунолох'кчеекпй статус организма кивотных.

Результаты наших исследовании по из„ чешю соотошшн иммунной системы при сочетанном применении вакцины БЦК и тубазида показали, что содержание Т-розеткообразущдах лимфоцитов у контроль-шве телят составляет 61,3+0,6)», В-лимфюцитов 48,9+1,3. У подопытных животных через 7 дней после прим.нения вакцины ЫЩ и тубазида отмечено повшегше Т-лиыфоцитов до 62,2+0,0$, В--лимфоцитов до 48,9+1,3, а показатели реакции бласттрансфюртции в периферической кроЕИ к этому сроку исследования составило 18,41+0,58 при контроле 2,43+0,63?». В дальнейшем,через 30 дней, такие происходило постепенное повышение Т-лиыфоцитов до 65,3+0,3^ при контроле 61,9+0,95?, количество лимфоцитов составило 53,9+1,6$ при контроле 47,7+0,2. Повышенное количество бластных клеток оставалось до 30 дня исследования и составило 23,24+1,29$ при контроле 2,76+0,63$,

Из приведенных данных видно, что динамика количественного показателя Т- и В-лимфоцитов, а такие РБТЛ а основном совпадают, что подтверждает специфичность это реакций.

Наиболее выраженные юялуноморфологические изменения в органах и тканях телят при сочетанном применении вакцины ЫЩ и тубазида из благополучного хозяйства развивались на месте введения, а таюле в регионарных к месту введения вакцины (заглоточных,подчелюстных, околоушных) и контрегионарных лимфоузлах, в печени и легком. В лимфоузлах рисунок фолликулярного строения сохранен, фолликула цмеют слабо выраженные герминативные центры, но с раз-рекенннм расположением клеточных элементов. Лимфоидная ткань коркового вещества умеренно гипэрплазирована, паракортикальная зона с разрешенным расположением клеточных элементов, шкотнне шнуры утолщены, инфильтрированы большим количеством плазмоцитов. В контрегионарных лимфоузлах изменения характеризуются умеренно выра-кенн ной лимфощою-гипсрпластическсй реакцией и плазматизацисй мякот-нах шнуров. Отмечается повышенны.'! распад зрелых лпь-.оцитов, которые обнаруживаются в виде отдельных участков в лиыфоидной ткани с резкой базофидией деструктированни:. лнмфюцитов. Так:;се наблыда-ется лиыфостаз синусов нередко с выпотом неяных сеток фибрина. Кроге того, встречаются очаговые; местами диффузные скопления зозинофилов в лимфюидной ткани.

В просвете синусов, кроме эозинофилыгон массы, наблюдалось значительное количество лимфоцитов. В отличие от других групп хш--вотных происходило разрастание молодой грануляционной ткани по

Ходу трабекул. Б почет обнаруживалось умеренное полнокровие сосудов, гепатоцпты били с явлениями зернистой дистрофии. Б легких отмечалось умеренное полнокровие органов, утолщение стенок мек-альвеолярных перегородок за счет инфильтрации их лимфоидно-гистио-цитарныыи клетками.

У животных из неблагополучных по туберкулезу хозяйств лимфо-идно-гиперпластическая реакция зыражена значительно сильнее, иммунопатологические процессы в виде повышения проницаемости капилляров, деструктивных изменений тканевых элементов трабекул проявлялись ярче. В ллмфофолликулах некоторых лимфоузлов обнаруживались лимфоциты и единичные бшасткне клетки, лиыфоэдкая ткань коркового вещества была умеренно гиперплазирована. В печени, почках, миокарде шмуноыорфодогические изменения характеризовались зернистой дистрофией и зшровой ин^яшьтрациеН паренхиматозных элементов. В надпочечниках наблюдалось расширение коркового вещества за счет гиперплазии клеток пучковой и сетчатой зон.

Таким образом, сочеташое применение вакцины ЕЩ! и тубази-да, как в благополучных так и в неблагополучию; в отношении туберкулеза хозяйствах, взывает выраженные иммуноморцологические изменения во внутренне, органах животных и обусловливает создание достаточного напряненного иммунитета.

3. ИЗУЧЕНИЕ ЗОФЕКШШОСШ РАЗЛИЧНЫХ СХЕЬМтШШНЛЯ ВАВДШ БЦК И ТУЕАЗВДА. ДЛЯ ШШ'ЛАГСПК! ТУГЕИУ-ЛБЗА 7 ТЕШ

Эффективность применения вакцины БЦЗ и тубазида для профилактики туберкулеза изучали на телятах до месячного возраста, а так;;е на молодняке крупного рогатого скота, находящегося на откорме, по следующим двум схемам: I) применение вакцины Б1Ц и тубазида без ревакцинации, 2) с ревакцинацией.

При схеме без ревакцинации телят вакцинировали однократно в возрасте 10-15 дней.

Из девяти ферм, неблагополучных по туберкулезу крупного рогатого скота, где применяли вакцину ЕЦЫ и тубазид в течение 1,5-2 лет, полностью прекратилось выделение животных, реагирующих на туберкулин, на 4 фермах (44,45?), снизилась заболеваемость на 3 фермах (33,3%), на прением уровне заболевание осталось в одной

ферме и лишь в одной - заболеваемость возросла.

Во всех хозяйствах резко снизились случаи обнаружения на мясокомбинатах туберкулезных поражений в органах и тканях кнвот-1.ЫХ.

Следовательно, применеше вакцины ЬЩ- и тубазида в комплексе протпьотуберкулезних мероприятий позволшю в течение одного года добиться редкого снижения уровня заболеваемости кивотных туберкулезом, а через 3 года и оздоровления от туберкулеза <14, хозяйств.

Применение вакцины ЕЦ^ и тубазида с последующе!! ревакцинацией скота иакцшюи проводили так>:;е на Ъ неблагополучных формах, крупного рогатого скота. Через 1,5 года после ревакцинации и применения тубазида из 9 ферм били признаны оздоровленными 7 ферм (77,7?»), снижена заболеваемость на двух фермах. {22,2%). Ухудшение эпизоотической ситуации не было отмечено ни на одной из ферм.

Следовательно, в превалирующем большинстве ферм использование на телятах тубазида с вакцинацией и ревакцинацией вакциной БЩ£ оказало полонительнсю влияние на сницение заболеваемости гш-вотннх туберкулезом.

Вакцину ЕЦ.: с тубазидом по этой ке схеме применяли в неблагополучном по туберкулезу хозяйстве с мясным направлением животноводства. При проведении комплекса оздоровительных мероприятий в течение 2 лет достигнуто резкое сшиекие заболеваемости и прекращение дальнейшего выделения реагирующих на туберкулин Ш1В0тт!х.

В настоящее время вакцину ЕЦИ и тубазид по предложенной Hai.ni схеме применяет на молодняке крупного рогатого скота мяснох'о на-прааления в большинстве хозяйств области, в том числе и в благополучных по туберкулезу, где существует угпоза заноса инфекции с молоком или при контакте с больными яшвотпиш на пастбищах и водопоях.

Применение вакцины ЕЦ- и тубазида на молодняке в откорме предусмотрено перспектишым планом основных мероприятий по оздоровлении нпвотноводческих хозяйств на 1990-1355 гг., утвержденным Госагропромом Западно-Казахстанской области.

3.1. ¿кспериментальные и производственные исследования эффективности применения вакцины БЦЖ и ту-базида на телятах в ршшем возрасте в хозяйствах, благополучных и неблагополучны): по туберкулезу крупного рогатого скота

Опыты в благополучных по туберкулезу крупного рогатого скота хозяйствах проводились на молодняке в возрасте до 15 дней. Эти фермы находятся в окружении хозяйств, неблагополучных по туберкулезу, где существовала угроза заноса инфекции из-за контакта кивотных на пастбищах, а также во время водопоя и др.

Иммунизацию вакциной БЦН и применение тубазкда проводили на 231 телятах. После получения обнадеетваюцкх результатов наш рекомендована разработшшая схеш оздоровления для внедрения в благополучии;-: и неблагополучннх хозяйствах, скот которых в летний период пользевался отгонными пастбищами. Проводилось такие сравнительное изучение имыуноморфологических изменений в органах и пештх ':г„;ят в благополучных и неблагополучных по туберкулезу крупного рогатого скота.

Приученные нами полоп-лтелыше результаты изучения эффективности вакцины БЩ; и туба<шда позволили перейти к производственным отггсач. С это;'! целью , в Западно-Казахстанской области в двух благошмучних по туберкулезу крупного рогатого скота хозяйствах - учебно-опытное хозяйство "Фрунзенское", совхоз имени Лйая ' Срымского района мясного направления,- и в длительно неблагополучном по туберкулезу крупного рогатого скота хозяйстве "Кушумскпй" Зеленовского района были проведены производственные испытания разработанной наш схемы оздороатепяя от туберкулеза.

Совхоз "ГСушумский" Зеленовского района был неблагополучен по туберкулезу крупного рогатого скота с 1981 г. При туберкулшшза-ции постов ¡но выявляли реагирующих глвотных. Только за 1985 г. быно обнаружено 120 больных, в том числе 87 коров и 33 головы молодняка разного возраста. Туберкулез был подтвержден при вег-санэксп'тгазе туш животных, реагирующих на туберкулин, и при лабораторном исследовании патологического материала. Молоко от коров исгтьзоБали после пастеризации непосредственно в хозяйстве на кор" телятам. При такой эпизоотической обстановке оздоровле- . 1ше стя-'Ш проводить путем замены неблагополучных стад здоровым

поголовьем. Однако неоднократные попытки замены неблагополучных стад в этих хозяйствах здоровий молодняком, завезенным из благополучных хозяйств', не давали ожидаемого результата, так как завезенные животные через 6-8 месяцев после поступления в хозяйство, как правило, оказывались зарагенньш туберкулезом и их сдавали на убой.

В такой экстремально:! ситуации в общий комплекс противотуберкулезных мероприятий включили применение вакцины БЦ£ и тубазида. 1дя хозяйства был составлен комплексный план оздоровительных мероприятий с учетом интенсивности эпизоотического процесса, условий ведения животноводства. Планы были согласованы с руководите-тяыи, специалистами хозяйств и районов, утверадены раЦцсполкоиа-ли. В планах оздоровления хозяйств предусматривали оргшшзацион-ю-хозяйственнне, ветеринарно-санитарние п специальные противотуберкулезные мероприятия, а именно, систематическое исследование зсего поголовья крупного рогатого скота на туберкулез, немедден-ian сдача на ydoit реагирующих на туберкулин ;швот! к, пастериза-01Я или кипячение молока и применение его в виде обрата или ЗЦЫ, >егулярная своевременная текущая санитарная обработка п дезинфек-цш помещений, а такге выгулов н т.д. Применение вакцины ЕЦЕ и -убазида проводили согласно схемам, описанным шше для кавдого :озяиства. План оздоровительных мероприятий предусматривал огора-сивание ферм, строительство сакпропусюяпсов, оборудование навозо-ранилищ для биотернического обеззараживания навоза и оборудовэ-ие дезобарьеров; в летнее время. - лгтерное содержание животных ; подвозкой кормов. Контролем служили не прингше животные этих :е хозяйств, которых систематически исследовали на тубер!сулез, >еагирувдих сдавали на убой. Мероприятия по оздоровлении хозяйств 1 туберкулеза проводили при нашем непосредственном участии совестно с ветеринарными специалистами хозяйств и районов. О ре-ультатах исследований систематически ¡"'формировали ветеринарный тдел Госагропрома Западно-Казахстанской области.

В 1989 г. в совхозе "КушумскшГ веред началом ошпа ни одно ивотное на введение туберкулина не реагировало. В группе живот-ых, обработшшых вакциной БЦК и тубазвдом с профилактической елью, реагирующих так&е не выделялось. Все животине этой группы еагировали на туберкулин через 45 дней после вакцинации. Пост-экцинальная реакция на туберкулин у яивотных сохранилась до 180

Дней, затем она начала постепенно снижаться. Аллергические реакции прекратились полностью через 12 месяцев после вакцинации.

Б группе животных, подвергнутых профилактической обработке одним только тубазидом, через 90 дней после окончания его дачи появились реагирующие на туберкулин животные. Количество реагирующих постепенно увеличилось и к 12 месяцам достигло 4.3Г.

Аналогичные данные получены и в контрольной группе. В группе вакцинированных кивотных, которым не давали тубазид, через 45 дней поме вакцинации реагировали на туберкулин все животные. Постьакцпиальная аллергическая реакция у всех кивотных сохранилась до 120 дней, затем она постепенно снижалась и полностью прекратилась через 12 месяцев после иммунизации. Не отмечено их и через 16 месяцев после вакцинации.

Аллергические реакции на туберкулин у вакцпштрованных кивотных характеризовались пояачеьлем припухлости с утолщением коя-Ho't склад'лш на 3-5 мм, которая к 12 месяцам полностью исчезала.

После убоя телят контрольной группы и лабораторного исследования от них патматериала через 12 месяцев после начала опыта туберкулез установлен у пяти из 40, то есть у 10,4% и у двух (4,3;i) лз 46 телят, который задавали тубазид в течение 30 дней. Туберг.улзз не установлен в группе ;:л:вотных, обработанных тубазп-до:л и in.i ^газированных, в возрасте 45 дней вакциной Lit. с профилактической цегьп.

Таким образом, в производственных условиях получен высокий протигоэпизооткческий эффект при применении тубазида и вакцтш БЦЖ, а таое от применения одно;! вакцины. При этом установлено, что наиболее напряженный шл.-унитет вырабатывается у телят, вакцинированных в раннем возрасте до 15 дней с последующей ревакцинацией через год.

Проверка продолжительности литугатета после однократной вак-цинашн телят в раннем возрасте с помощью постановки ЕБТЛ и аллергических псследовэлий доказала, что иммунитет достаточной напря-женипоти против заражения туберкулезом сохраняется в течение 1012 песчцев.

<3 результате внедрения комплекса мероприятий против туберкулеза с применением вакцины НЛ! и тубазида в 1990 г. хозяйство было признано оздоровленным от туберкулеза крупного рогатого скота и с "его бил oFi..; карантин. В'течение последующих трех лет совхоз

остается благополучным, о чей свидетельствуют результаты плановых ллергических исследовании нивотных на туберкулез и данные ветери-арно-санитарной экспертизи при убое ¡.а1вогннх на мясокомбинате.

Таблица

Результаты лабораторных исследований патмпте1иьла от нивотных из неблагополучных хозяйств

руппа

Метод ! Кол-во! профилактики¡голов '

^Результаты исследований

(Реагпро- ¡/станов- ( ¡вало пе- \ лен ту- ! ¡ред убоем{беркулез | \гол/% ¡на вскры—| | ¡тии ;

Гисто- (Заболело логия ;всего ¡голов

! !

1 БИЯ 48

2 БШ и тубазид 89

3 Тубазид

4 Контроль

'16 48

отр. отр. отр. отр.

отр, отр. отр. отр.

2 2 о 2

4,3 4,3 4,3

5 5 5 5

10,4 10,4 10,4

4. РАЗРАБОТКА И АПРОШЕМ СХЕШ СОЧЕТА1ШОГО ПРШШШЙ ЕЛЩШ БЦл И ТУЕАЗГЩА ДЛЯ 11Р0-5АТАКТШ1 ТУБЕРКУЛЕЗА ОТТ В НЕБЛАГОПОЛУЧНЫХ ПО ТУБЕРКУЛЕЗУ ХОЗШКТРАХ

Апробация схемы сочетанного применения вакцины БШ; и туба-да .для профилактики туберкулеза у молодняка крупного рогатого ота в неблагополучных пунктах проводили в совхозе "КушуысклЙ" леновского района Западно-Казахстанской области.

Ретроснектншш анализ эпизоотической ситуации по туберкуле-в совхозе "Куыумский" показал, что причинами вспышки заболевая являются: оставление в хозяйстве Ш1 вира^ишние с целью вос-оизводства телят от большее коров; скаргляишние телятам непас-ризованного молока а обрата, щцае скота на пастбодз -, тде ра-э содержались болыше туберкулезом зишгнне и зр.

При исследовглЕК па туберкулез в марте 0X9 газа аз 230 ко--р. реагирующих на туберкулин не иоко. В нояОдо ¡г., ¿21 ?оров на

туберкулин реагировали 5 животных. В январе 1990 года из 207 коров реагировали на туберкулин 12 голов и из 331 головы молодняка - 2. Бее реагирующие животные (19 голов) были сданы на мясокомбинат, у б (3I,5JK) вз них на секции были обнаружены туберкулезные изменения.

После убоя реагирующих на туберкулин кивотных и проведения в животноводческих помещениях дезинфекции 171 первотелок бита обработаны тубазидоы н привиты вакциной ЫЦ. IIa протяжении всего опыта ати яивотныэ шали контакт с неблагополучным по туберкулезу поголовьем коров н, .следовательно, подвергались интенсивному инфицированию возбудителем туберкулеза бычьего вида (по результатам бактериологических исследований).

Ео мере о зла первотелок,' телята;.! давали губазид с молоком один раз в сутки в дозе 10 ыг на I кг юз вой массы животного в течение 30 дней, через 10 дней попе прекращения дачи тубазида еи-Еотнне были вакцинированы ЫЩ. Тубазид не оказывал отрицательного действия на общее состояние организма телят. Вакцинированный тиодняк содераался изоли1„ханно от взрослого поголовья животных.

В послемадозишый период телятам скармливали заменитель цельного молока (ЗЦМ). Всего была привита 91 голова молодняка. Через 45 дней после закцинрцин телята были исследованы внутрикок-ной туберкулиноьой пробой. Из общего числа 13 (8,3^) не реагиро-. вали на внутрикевную туберкулинощи пробу. Этих кивотных допри-шли вакциной ЩК.

После отела коров, молодняк. • которых обработали тубазидом к вакцинировали ЫЩ, сдали на мясокомбинат. На вскрытии у 24 (14,7$) коров из 163 бати обнаружены туберкулезные изменения в лимфатических узлах и внутренних органах.

Молодняк крупного рогатого скота, который получал тубазид в сочетании с вакциной БЦН, через год после вакцинации был исследован внутрикояной туберкулиновой пробой. Всего исследована 91 голова. У всех исследованных животных внутрикохная туберкулиновая реакция была отрицательной, то есть они оказались здоровыми.

Таким образом,это поголовье яивотных бшго благополучно по туберкулезу. Следовательно, разработанная наш схема сочетагаюго применения тубазида и вакцины ЕДЕ оказалась высоко эффективной далее в неблагополучном хозяйстве со значительным поражением скота туберкулезом.

ВЫВОДА

«

1. При сочетанном применении вакцины ЕЩЕ и тубазида на телятах происходит ишуноморфшогическая переотройка организма, проявляющаяся лимфоидио-гшерпластической, ыакрофагальной и.плазмо-клегочной реакциями в лимфоузлах а селезенке, а таедз активацией клеток ретикулогистиоцитарной систеш во внутренних органах. .

2. Сочетанное применение вакцины ЕЦВ и тубазида у подопытных телят вызывает активацию Т- и В-дшфоцатов, максимальное число которых в периферической крови обнаруживается через 30 даей после обработки и в течение месяца коррелирует показателями реакций бласттрансформации лимфоцитов.

3. В неблагополучных по туберкулезу хозяйствах сочетшшое применение вакцины БЦХ и тубазида позволило защитить всех подопытных хелят от заражения туберкуле- м.

•1. В производственных условиях с'о значительной степенью рас-пространешш туберкулеза при сочетанном приленени" тубазида и ззкцины БЦН получен высокий противоэггазоотический эффект.

5. Защшю-пролифсратиише реакции элементов.РЭС, во внутренних органах при применении вакцина ЕЦД и тубазида, характеризот-шсь повышением биологической активности ретпкулоклеточиого про-аюерлта, о чем свидетельствовало'накопление ццтоплазматического Ж и гликогена, а такав поетаешё в этих клетках актншостн нпс-юй фосфатазы.

6. Сочеташое применение тубазида и вакцины БЩ1 в комплексе шструктивных мероприятий: надежно предохраняет телят от заражения ■уберкулезом, однако необходимы строгий учет и контроль дачи пре-'аратов.

7. При применения одного тубазида на телятах в неблагополуч-ц благополучных в отношении туберкулеза хозяйствах установле-

ы умеренная лшлфоидао-гшерплаотическ^я реакция в лшфоидних оралах, a Tarase развитие белковой дистрофии и явления инфильтра-ибного ожирения гепатоцитов,

8. Эффективность применения вакцины БЦЖ и тубазида зависит

т возраста крупного рогатого скота. Применение тубазида новороя-егашм телятам до месячного возраста с последующей иммунизацией ак.диной БЦН обеспечивает полную защиту организма от заражения юс эзбудятелем туберкулеза в неблагополучных хозяйствах.

9. Разработанная в использованная наш схема иммунопрофилактики туберкулеза с применением вакцины БЦЕ и тубазида позволяет получить в неблагополучных хозяйствах здоровый молодняк крупного рогатого опота п сокращает сроки оздоровления хозяйств от туберкулеза.

В системе противотуберкулезных мероприятий, в длительно неблагополучных по туберкулезу крупного рогатого скота хозяйствах, рекомендуется.сочетанное применение вакцины БЦЕ и тубазида. Туба-зид применяется новородденнш телятам из расчета 10 мг на I кг живой шссы в течение 33 дней, и через 10 дней кивотные иммунизируются вакциной Б1Щ.

Результаты применения вакцины БЦН и тубазида на молодняке крупного рогатого скота нашш отражение в "Рекомендациях но применению различных схем химао- и вакцинопрофшактшш при туберкулезе крупного рогатого скота", которые утверждены научно-техническим советом ГУБ Министерства ссгьсшго хозяйства в продовольствия . Казахской ССР от П.10.1991 г., протокол й 16.

1. Кушалдев К.Е. Показатели крови у телят при отдельном в

' сочетанием взедешш вакцинн БЦК и тубазида. // Экологические ос-нош совершенствования ветеринарных и зоотехнических мероприятий в животноводстве: Мег.нузовский .сборник научных трудов. - Казань, 1992. - с. 112-113.

2. Кушалдев К.Е. ]Ь;.уноморфологиче«ше изменения в органах и тканях телят, привитых вакциной БЦЕ. // Пути увеличения производства г резервы повышения качества сельскохозяйственной продукции: Тезисы докл. ХП научно-произв. конференции молодых ученых

и специалистов (экономика, механизация, агрономия, ветеринария) /, Оренбург, 1993. - о. 143.

3. Ицрисов Г.З., Авзалов Ф.З., Залялов И.Н., Садаков Н.И., Цуллакаев О.Т., Ьехтер И.Г., Кушалиев К,Ж. Отчет по НИР за 1992 год (промежуточный). Изучить патшорфологиз, иммуноморфологию и диагностику некоторых инфекционных и незаразных заболеваний,сельскохозяйственных животных. Номер госрегистрацк: 01910052865., КБИ, 35 с. • 1 '

ИРЩОШЯ ДЛЯ ПРАКТИКИ

СПИСОК НАУЧНЫХ РАБОТ