Автореферат диссертации по ветеринарии на тему О причинах ареактивности к туберкулину у телят вакцинированных БЦЖ
РГ6 од
; ^хасля.акатшя сельскохозяигсшенных наук
Казахский научно-исследовательский
ветеринарный институт
На правах рукописи
ибрагимов шагуан муташович
удк - 619:576.652.211:615.371-053.2:636.2
о причинах ареактивности к туберкулину у телят вакцинированных вцп
16. 00. 03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология
Автореферат
диссертации на соискание ученей степени кандидата ветеринарам наук
Апматы - 1993
Работа выполнена в лабораторий по изучению туберкулеза ЗапКазНИВС Казахского научно-исследовательского ветеринарного института (КазНИВИ).
Научные руководители:
Официальные оппоненты:
- доктор ветеринарных наук, профессор Д. Д. НОВАК
- доктор ветеринарных наук,
В. И. ПИСШКОВСКИИ
кандидат ветеринарных наук X. Н. ИЛИЕАЕВ
Ведущая организация
- Всероссийский инстшут экспериментальной ветеринарии им. Я Р. Коваленко (г. Москва).
Защита диссертации состоится "_и_ 1993 г.
в " 14 " часов на заседании специализированного Совета, К 020. 60.01 в Казахском научно-исследовательском ветеринарном институте по адресу: 460029, г. Алма-ш, пр. Райымбе-ка, 223, КазНИШ.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Казахского научно-исследовательского ветеринарного института.
Автореферат разослан
1993 г.
Ученый секретарь специализированного Совета, доктор ветеринар!с-к наук Ж/,, _ К ф. КЕРИКЖАНОВА
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Туберкулез крупного рогатого окота при-5одит к большим экономическим потерям б животноводства, СЯИЖ9-шю удовлетворения потребностей населения в необходимых про-1уктах питания и представляет опасность для здоровья человека. Таким образом оздоровление хозяйств от этой инфекции является »ктуальной задачей.
В настоящее время в странах СНГ в комплексе протавотубер-:улезных мероприятий, в неблагополучных по туберкулезу крупного рогатого скота хозяйствах применяют вакцину БЦ2.
Х.Г.Гйзатуллиннм и М.А.Сашиным (1979), М.А.Сашиным (1981) лределена прививочная доза вакцины БЦН в количестве I мг яа дного тавотного, установлено появление аллергических реакций а вну грикожное введение туберкулина через 1-1,5 месяца и оо-ранэние их до Ю-12 месяцев, показана возможность персистен-ли микобактерий БЩ в организме животных б виде - форм до •»х лет и наличие иммунитета у 80-67,5^ животных при экспери-ентальном заражении. С учетом данных других исследователей нло разработано временное наставление по применению векданн ЦК, утвержденное 17В МСХ СССР 20 марта 1980 года, в которое несли изменения и дополнения в 1982, 1983 и 1985 годах.
Вопросы ареактнвности к туберкулину у вакцинированных те-ят ш оставались не изученными. Согласно наставлению по при-енению вакцины ВПЖ от 22.02.65 года телят прививают в 10--15 яевном возрасте, по истечению 2-х месяцев их проверяют внутри-ожной тубекруяиковой пробой и не реагирующих животных перево-ят на откорм для убоя яа мясо. Такая рекомендация не получила олжного отражения в специальной литературе- в связи о недоста-очной изученностью. Это создало новые проблемы особенно при
применение противотуберкулезной вакцины БЦЕ в неблагополучных хозяйствах мясного направления.
Тагам образом изучение причин ареактивности телят к туберкулину после вакцанаши их БЦЯ является актуальной проблемой.
Цель и задали исследований. Основной целью исследования являлось изучить частоту случаев ареактивности вакцинированных ЕЩЕ телят и выяснить причину такого состояния в специализированных хозяйствах мясного направления.
Для достижения этой цели были определены следующие задачи:
1. Установить частоту ареактивного состояния к туберкулину привитых БНК телят, при введении вакцины обычным и безыгольным методами в различные сезоны года.
2. Изучить причины ареактивности телят вакцинированных БЦЯ к туберкулину: в зависимости от общей реакшвности организма, возраста и влияния низкой температуры внешней среды.
3. Определить напряженность иммунитета у аре активных телят.
4. Изучить морфологию иммунокомпонентных органов у аре-активных телят в сравнительном аспекте.
5. Изучать перскствндаю штамма ЕЩЕ в организме ареактив-ных телят.
Поставленные вше задачи нашли свое разрешение в диссертационной работе, основные положения которой выносятся на защиту.
Научная новизна.Впервые у привитых БЦК телят мясных пород экспериментально установлены временный характер и частота аре-активности к внутрикожному введению туберкулина, зависимость ее от возраста, индивидуальной реактивности кожи животных, сроков после прививки, сезона года,гипотермии в зимнее время, не зависит от неспепифаческой функциональной активности Т-лимфоци-
тов в реакции с фитогемагглютаишом, у реактивных животных отмечена клеточная, а у ареактквных - гуморалько-клеточная форма ответа иммунокомпетентных органов.
Практическая ценность работы. Результата исследований показали недостаточность внутрякожной туберкулиновой пробы для опенки протективных свойств вакшнн Б1Щ а послу жили основой для пересмотра сроков оценки ее раантогенноста и дополнений к существу щей схеме противотуберкулезных мероприятий в специализированных хозяйствах мясного направления.
Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на конференции молодых ученых в Западно-Казахстанском СХИ (г.Уральск, 1986), на научно-лракткчзской конференции, посвященной 70-летию ССОР (Алма-Ата,1987), на межвузовской конференции молодых ученых и специалистов Западно-Казахстанского СХИ (г.Уральск, 1991), на Ученом совете Западно-Казахстанской НИВС (г.Уральск,19Э1) и на меялабораторном соб-ранки в Казахском НИШ (г.Алма-Ата,1992).
Публикация. Основные положения диссертационной работы опубликованы в 4-х научных отатьях.
/Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на IOO страницах машинописного текста а состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обобщения, выводов и списка литературы. Работа проиллюстрирована 23 таблицами. Список литературы включает 129 наименований источников, из них 105 на русском и 24 на иностранном языках.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
: Работа выполнялась в соответствии о планом научно-исследовательских работ в лаборатории по изучению туберкулеза Запад-
но-Казахстанской НИВС Казахского НИВИ и в специализированных совхозах мясного направления "Булдуртинский", "Яосалинский" и "Джамбейтинский" Джамбейтинского района Западно-Казахстанской области.
Частоту ареактивности телят к внутрикожному введению ППД-туберкулина для млекопитающих по сезонам года изучали при обычном и струйном методе введения вакционы в первые дни жизни и через 2 месяца после прививки ВЦП. Вакцинацию телят БЩ и ту-беркулинизацию через 2 месяца проводили в соответствии с наставлением по применению вакцины БЩЕ, утвержденным ГУВ ШХ СССР от 22.02.85 и наставлением по применению туберкулинов для аллергической диагностики туберкулеза у млекопитающих и птиц, утверждены I7B МСХ СССР от 09.02.78. Вычисляли процентное соотношение не реагирующих телят на внутрикожную туберкулиновую пробу (ВТП) к общему количеству вакцинированных животных по сезонам года ( февраль-март, май-июнь, сентябрь-октябрь). При этом аре активными считали телят, у которых в месте введения туберкулина не наблюдалось каких-либо изменений или отмечалось при пальпаши уплотнение о горошину без признаков воспаления. Реагирующими считали телят у которых в месте введения наблюдался воспалительный отек о повышением местной температуры и утолщением кожной складки на 3 мм и более.
Реактивность к внутрикожному введению туберкулина у вакцинированных БЦЖ телят в 3D-I5 дневном возрасте изучали через 2 месяца после прививки в 2-х специализированных совхозах мясного направления "Булдуртинский" и "Джамбейтинский" в феврале-марте 1985-86 гг. ооответотвенно на 218 и 275, в нюне 1985-86 г - на 406 и 251 и в октябре 1985 года - на 234 телятах. .
В совхозе "Булдуртинский" изучали интенсивность аллерги-
зских реакций через 2 месяца после вакшнаши зимой (275 те-та), летом (406 телят) и осенью (234 теленка).
В опыте на 300 телятах изучали по трем сезонам года ( по )0 телят на каждый сезон) реактивность к внутрикожному введе-•ш туберкулина через два месяца после вакшнаши в Ю-15 днев-эм возрасте безыгольным инъектором "Овод" в дозз I мг и объеме ,2 мл и обычным шприцом с иглой - в дозе I мг и объеме 0,3 мл ^гласно наставлению.
Данные об интенсивности аллергической реакции обрабашва-[ статистически по Н.В.Садовскому (1975).
Зависимость реактивности к внутрикожному введению тубер-тта у телят чер>ез 2 мео. посла вакцннапяи ЕЦЕ от реактив-зсти кожи к гистаминовой пробе определяли по методике Д.Д.Hoik (1965).
В совхозе "Булдуртинский" телятам перед иммунизацией БЦЕ первые дни жизни внутрикожно вводили 0,1 раствор гистамина дозе 0,2 мл. Результаты реакции учитывали через 30-60 минут юле введения гистамина. Затем это телята были вакцинированы ¡Д. Через 2 месяпа после прививки их подвергали туберкулики-1ШП1. Результаты гистаминовой пробы перед вакцинацией сопоо-;вляли с туберкулиновой. Данный опыт провели весной на 95 и том - ка 90 телятах.
Двум группам телят ( по 10 голов в каждой): ареактивным пытнал) и реагировавшим по истечению 2 месяцев после вакда-ши БЦЖ на внутрикохное введение туберкулина вводили внутри-жно 0,1% раствора гистамина. Реакции учитавали черкез 30-60 н.
Реактивность к туберкулину в зависимости от возраста у квитах BUS телят изучали в совхоза "Булдуртинский". В опыт
были взяты 6 групп телят ( по 32 головы в каэздой) в возрасте 1-3, 15-20 , 30-45 дней, 2-х, 4-х и 6-7 месяцев.
В последних 3-х группах животных прививали вакциной после туберкулиниэаши. Животных всех групп вакцинировали Б1Щ одновременно согласно наставлению. Через 60 дней телят всех групп подвергали ВЗП. Выявленное количество ареактивных и слабо-реагирукхцих телят по кавдой группе и интенсивность аллергической реакции обрабатывали статистически по Садовскому.
По этой же схеме был проведен опыт на 169 гол. в условиях летнего содержания скота на пастбище.
Влияние низкой температуры внешней среды на реактивность вакцинированных БЦ2 телят изучали в двух опытах.
I опыт. Из числа вакцинированных по истечении 2 месяцев со дня иммунизации вакциной БЦ2 5 телят с матерями перевели в холодное помещение о те;.*пературой воздуха от -13 до ~19°С. Других 5 телят содержали в телятнике при температуре -I - +4°С. Одновременно обе группы телят подвергали исследованию внутри-кожной туберкулиновой пробой. Через 30 дней после туберкулини-заши или через 3 месяца со дня вакцинации БЦН эти же группы животных исследовали ВШ в условиях обычного содержания, т.е. в телятнике.
2 опыт. Во втором опыте наш изучено влияние низкой температуры на течение поствакшяальных аллергических реакций на туберкулин у телят через 3 месяца после прививки БЦ2.
Из числа вакцинированных телят были созданы 2 группы по 5 голов в каздой по принципу аналогов. По истечению 2-х месяцев со дня введения БВД обе группы животных исследовали аллергически в условиях обычного содержания, т.е. в телятника, где температура воздуха была в пределах от -I до +4°С. Через 30 дне
о ______________________________
посла контрольной туберкулинкзаши или через 3 месяца со дня вакцинации телят опытной группы перевели в холодное помещение о температурой от -9 до -14 °С. Одновременно опытную и контрольную группы телят исследовали BUI.
Для определения напряженности иммунитета использовали 14 голов телят казахской белоголовой порода, раздечетшх на 3 групп»,'.
Группа й I - 5 телят, не реагировавшие на туберкулин через 2 месяца после вакцинации БЦЕ ( опытная группа).
Группа № 2 - 4 теленка, реагировавшие на введение туберкулина через 2 месяца после вакцинации БЦа.
Группа #3 - 5 телят, не-вакцинированные; (контрольные). Все телята были заражены трехкратной заражающей дозой вирулентной культуры М. бовис-8, из расчета 0,03 it на I кг живой лассы. По истечении 3-х месяцев со дня заражения всех животных /били и подвергли послеубойному осмотру. Для бактериологического исследования брали подчелюстные, заглоточные, бронхиальные, зредостенные, прздлопаточные лимфоузлы, в т.ч. регионарные к ¿есту введения культуры, а также кусочки паренхиматозных орга-гов. Предпосевную обработку материала проводили по Гону, посе-зы - по А.П.Аликаевой (1964) и Д.Д.Новак (1968). Для посева использованы среды Гельберга и Левекитейна-йенсена. Микроскопию мазков проводили по Циль-Яильсену» Бкопробу ставили на 28
Xtf /. f
«роликах по два на каждую продут. Индекс инфщированности шре-
« а • юо
?еляли по формуле: X 3--- ,
В • U
?де X - индеко инфицированности, а - число объектов, из которых изолированы культуры, в - число животных в опыте, С - чис-ю объектов взятых для бактериологического исследования. Патоморфологичэское исследование органов и тканей 3-х
ареактивных и 3-х реагировавших на туберкулин телят проводилось в лаборатории электронной микроскопии патоморфолотаи КаэНИ ведущим научным сотрудником, канд.вет.наук К.А.Кашкинбаевым. Всего исследовано 716 гистологических срезов.
Функциональную активность Т~лимфоцитов определяли путем внутрикожного введения фитогвмагглютикина в дозе 80 мкг в объеме 0,2 мл на одну голову по методике Я.О.Пракоа (1983).
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Реактивность к внутрикоясному введению туберкулина у вакцинированных Б1Щ телят в различные сезоны года
В совхозах мясного направления "Булдуротнский" и "Дкам-бейтанский" в течение 1985-1986 гг. проведены опыты по вакцинации телят Б1Щ под матерями в возрасте Ю-15 дней в различные везоны года и определению реактивности их к внутрикодному введению туберкулина. Результаты исследований представлены в таблицах I и 2.
Таблица I
Ареактивность к внутрикожному введению туберкулина ■у вакцинированных БЦЯ телят в различные сезоны года
; 1985 Г. j 1986 Г. года ¡Исслед.| Не реагировало? Исслед.! Не реагировало _!твлят 1~голГ~! j i телят ! гол. ! j
Февраль-март 218 26 11,9 275 32 11,6
Июнь 406 19 4,6 .251 Ю 3,9
Октябрь 234 II 4,7 - • -
Как видно из таблиц I и 2 реактивность к туберкулину в феврала-марте у привитых телят была понижена. Количество pea-
Таблица 2
Интенсивность аллергических реакций на туберкулин у телят вакцинированных БЦ£ в различные сезоны года
! Кол-во ! Интенсивность ал~ Сезоны года ! голов ! лергическях реак-_! в опытах_! ций (в ш)
Зима 275 3,6*0,8
Лето 406 7,3 - 0,4
Осень 234 8,1 £ 0,7
гирувдих на туберкулин колебалось в пределах 88,1-88,4^, а утолщение кожной складки составило 3,6 - 0,8 мм, анергия к туберкулину - 11,6-11,9$. Тогда как в июне количество реагя-рущих на туберкулин телят повысилось до 35,4-96,Й и интенсивность аллергических реакций - до 7,3 £ 0,4 мм.В октябре количество реагирующих на туберкулин телят составила 95,3^, а интенсивность аллергических реакций - 8,1 ^0,7 мм.
В этих опытах у привитых БЦН телят установлены значительные колебания поствакцинальных реакций на туберкулин, в зависимости от сезонов года. В период благоприятных условий ( июнь и октябрь) реактивность к туберкулину у вакцинированных телят была в 2-2,5 раза выше, чем в феврале-марте.
Аналогичный результат получен при введении вакплны БЩЕ безыгольннм опоообом, где процент ареактивиих телят к туберкулину в феврале составило - 12, в мае - 4 и сентябре - 2. При введении вакцины БЦК шприцом о иглой этот показатель составил соответственно Ю, 4,0 и 0%, то есть разница, была на существенной. Интенсивность аллергических реакций при прививке вакцины отруйным способом составила соответственно 4,4 - 0,3; 6,4 - 0,4 и 6,5 -0,5 мм, при показателе в контрольной группе ооответ -
отвенко 4,5 - 0,2, 6,5 - 0,4 и 6,82 - 0,3 мм. То есть разница интенсивноега реакций у животных опытной и контрольной групп также была не существенной.
Изучение зависимости результатов внутрикож-ной туберкулиновой пробы у привитых БЦК телят от чувствительности кожи к гистамину
В опытах на 95 и 90 телятах в разные сезоны года проводили определения общей реактивности организма гистаминовой пробой. При этом из 95 телят в марте и 90 телят в июне 1986 г. на гиотамин кв реагировали соответственно 23 (24,3$) и 7 (7,750 животных. После определения общей реактивности организма, телят вакцинировали БЦК. При исследовании туберкулиновой пробой 95 и 90 телят через 2 месяца посла прививки БЦЙ, из 23 и 7 нереагировавщих на гистамия не реагировали на туберкулин соответствен™ II и 3 гол., что составляет 11,6 и 3,3% от общего количества иммунизированных животных. На туберкулин не реагировали только те животные, которые не дали реакцию на гиотамин. Это свидетельствует о зависимости реактивности привитых БЦК животных к туберкулину от исходной общей резистентности макроорганизма до прививки.
Во втором опыте определяли чувствительность кош к гаста-.мкку через 2 месяца посла прививки БЦ1 яа 2-х группах животных. В первой группе - 10 телят не реагировавших на ВШ через 2 месяца после вакцинации БЦК ( опытная), во второй - Ю телят, реагировавших на туберкулин пооле прививки вакцины (контроль).
Реакцию на гиотамин в первой группе отметили только у 6 телят о интенсивность» в вредней 1,4 мм. Контрольные животные реагировали на эту пробу о интенсивностью 5,7 мм в среднем.
Полученные результаты свидетельствуют о прямой корреля-
гавной связи между чувствительностью кожи к гиотамияу и интенсивностью реакций на туберкулин после вакцинации телят БЦЖ, Ери низкой чувствительности кожи к гастамину ошибалась иктен-давяость рзакций на BUL
Неодинаковый уровень чувствительности кожи у телят к гио-самину до введения и к туберкулину после введения Б1Ш очевидно ззязан о индивидуальными особенностями формирования обдей и ¡пецифической рзактивноста в период онтогенеза. В то же время j первом опыте не все животные имевшие негативную реакции на таотаминовую пробу отрицательно реагировали на туберкулин» что го-видимому связано о повыиением уровня общей реактивности организма по истечению 2 мес. после прививки ЫЦ. В связи с этим 5ыло проведено исследование ареактавных телят в более отдаление срони после вакцинации БШ.
Из 1619 телят, исследованных через 2 мзсяпа после вакщ-тции БЩ, не реагировало на туберкулин 107 или 6,6:?. Через 5 мес. - из Ю7 телят не реагировало только 13 или 0,8^ к общему числу иммунизированных. Через 4 мае, посла вакцинации из [3 арвактивных к туберкулину телят дали реакции 6. Черпз 5 глэ-зяпев - из 5 оставшихся ареактазныш телят у двух отмзчъш реакцию на BHI. Из трех толят, сохранивших ареактивность к туберкулину» два педваргнули убою и последующему исследованию. При этом свойственных туберкулезу изменений у них не обнаружено, Зактериологическим исследованием и бкопробой ка морских свинках туберкулез не подтвержден.
В проведенных опытах у подавляющего числа привитых БПД телят аре активность к ВШ через 2 мзо. после прививки была временной, и о возрастом они уже реагировали на туберкулин. Это может быть связано о генетическими и физиологическими осо-
бенноотямк формирования аллергической реактивности организма отдельных телят в отногенезе.
Аллергические реакции на туберкулин у телят привитых БЦЕ в зависимости от возраста
Изучение аллергических реакций на туберкулин у телят привитых БВДС в зависимости от возраста проводили на 192 телятах ( о 1-3 дн. до 6-7 мео.) из которых сформировали 6 групп по 32 гол. в каждой. Телятам всех групп одновременно привили вакциной БЩЕ. Телят трех групп о 2 мео. розраота и старше перед вакцинацией исследовали ВШ и реагирующих не выявили.
Через 2 мео. После вакданапии 1-3 дневных телят ( 33 гол.) аллергическую реакцию более 3 мм отметили у 21 гол., 3 мм и ниже - у 4, не реагировало - 8 гол., интенсивность реакции соотавила в среднем 3,8 - 0,5 ш; у 15-20 дневных (32 гол.) соответственно 25, 4, 3 и 5,4 % 0,5; 30-45 - дневных ( 32 гол.) 25, 3, 4 и 5,6 - 0,6; 2-меоячных (32 гол.) - 26, 4, 2 и 6,8 t 0,7; 6-7 месячных (32 гол.) -23, I, I и 7,8 ± 0,6 мм.
Полученные данные свидетельствуют о прямой зависимости реактивнооти к туберкулину от возраста телят. Наибольшее количество нервагируицих и со слабыми реакциями на туберкулин иммунизированных телят оказалась в группе 1-3 дневных, о увеличением возраста происходило уменьшение числа первых и нарастание интенсивности аллергических реакций.
Аналогичный опыт провели в июле меояце на пастбище. В этом случае была также выявлена зависимость реактивности к туберкулину от возраста вакцинированных'телят, но количество не реагирующих в раннем возрасте было меньше, а интенсивность аллергических реакций значительно выше. Через 2 мес. после
инъекции БЦ2 1-в дневных телят (28 гол.) аллергическая реакция более 3 ш отмечена у 21 гол., 3'мм и ниже - у 4, но реагировало - 3 гол., интенсивность аллергических реакций составила в среднем 4,8 £0,5 мм; 15-20 дневных (28 гол.)- соответственно 24, 2, 2 и 5,7 £ 0,4; 30-45 дневных ( 23 гол.) - 25, I, 2 и 6,6 £ 0,4; 2 меоячных - 24, 3, I и 7,3 £0,4; 4 .месячных (29 гол.) - 28, I, 0 и 8,2 £ 0,4 ; 6-7 месячных телят ( 28 гол.) выше 3 мм реагировало 28 и интенсивность реакций была в среднем 10,3 £ 0,4.
Более высокая реактивность телят к туберкулину после их вакцинации БЦЖ летом свидетельствует об усилении общей реактивности организма, по сравнению о весенним периодом.
Известно: в реализации гаперчувствительности замедленного типа (ГЧЗТ) участвуют Т-клетки. Более низкая реактивность вакцинированию- БЦ8 телят возможно связана с низкой функциональной активностью Т-лимфоцитов непосредственно после рождения. Для выяснения этого вопроса изучали функциональную активность Т-лимфоцитов в различных возрастных группах путем внутрикожного введения §итогемагглютинина (ФГА) в дозе 80 мкг ( 0,2 мл 0,04$ раствора ФГА) на I теленка.
В опыте использовали 30 телят казахской белоголовой породы в возрасте о первого дня до 4 мео., которых разделили на 5 групп по 6 голов. Каждую группу разделили на две подгруппы по 3 животных: первая подгруппа - опытная - телятам вводили ФГА, вторая подгруппа - контрольная - внутрикожно вводили по 0,2 мл физиологического раствора. Реакцию оценивали через 24 часа после введения растворов.
Положительную реакцию ФГА отмечали у телят начиная о 2 меоячного возраста, при отсутствии ее в контроле. С увеличе-
нием возраста нарастала интенсивность реакпии ФАГ (1,3 мм в 1У подгруппе, 1,6 мм - в У подгруппе), что может свидетельствовать о повышении функциональной активности Т-лимфоштов.
Состояние клеточного иммунитета у ареактавных телят изучали через 2 месяца после вакцинации БЩ. Из 217 привитых телят в эти сроки на туберкулин не реагировали 13 животных (6,0/5), которым внутрикожно вводили 0,04$ раствор (80 мкг) ФГА. Для контроля ФГА ввели 13 реагировавшим на туберкулин телятам.
Полученные результаты показывают, что после прививки БЦЖ Т-лимфоциты у ареакгивных телят этого возраста активно участвуют в клеточных реакциях и по функциональной активности не отличаются от Т-лимфоштов реагирующих на туберкулин животных -утолщение кожной складки на введение ФГА у первых составило 1,79 ± 0,2, а у вторых - 1,76 ~ 1,5 мм.
Вместе с тем нами изучены интенсивность и сроки угасания аллергических реакций у привитых БЩЕ телят разных возрастов.
Было установлено: после введения вакцины БЦЖ независимо от возраста телят, максимальное количество реагирующих на туберкулин животных выявлено в первые 3-4 месяца. Интенсивность же реакций аависвла от возраста привитых БЦК телят: чем старше телята, тем больше было утолщение кожной окладки. У те«ят первых 3-х групп к 7 месяцу аллергичеокие реакции полностью ис- ^ зеэали, тогда как в последних 3-х группах количество реагирующих животных составило от 9,1 до 31,2^ ( таблицы 3 и 4).
Влияние низкой температуры внешней среды на реактивность организма вакцинированных БЦЕ телят
»
Влияние различных температурных режимов содержания вакцинированных БЦЖ телят на реактивность их к туберкулину изучали в двух опытах.
Сроки угасания поствакшшальных реакшй на туберкулин у привитых БЦН телят
груп!^0 ПЫ ¡вот-¡ншс 1--г г Воз- ! 1 раст ) 1 1 Число реагирующих телят чзрез:
2 мес. г 3 мае. 1 4 мзс. 5 мес. ! 6 мес. 7 МЗС.
к-во ! %- [к-во ! % ! к-во '■'% 1 к-во Г % ! к-во 1 ¡г • /0 к-во ! %
I 33 1-3 дн 25 75,7 32 97,0 33 100,0 18 54,5 3 9Д — _ <
2 32 15-20 29 90,6 31 96,8 32 100,0 18 56,2 5 15,6 -
3 32 30-45 26 86,2 32 100,0 32 200,0 22 68,7 6 16,7 - -!
4 32 2 мес. 30 93,7 32 100,0 32 Ю0,0 26 86,2 II 30,6 4 12,5
5 32 4.мес. 30 93,7 32 Ю0,0 32 100,0 28 86,2 13 40,6 3 9,1
6 32 6-7 мес. 30 93,7 32 100,0 32 Ю0,0 31 96,8 22 68,7 10 31,21
Таблица 4 ;
Интенсивность аллергических реакций у телят привитых БЦ2 в зависимости от | с!
возраста и срока туберкуяинизации 1
" .....!К-вО| Й^ЗЕМ им 1нас ! -г Воз- } раст » 1 С р ОКИ и с с ледова н II я !
2 мес. ! 3 ! мес. ! 4 мес. 1 • 5 мес. ■ 6 мес. ! 7 мес. 1 ! 1
I 33 1-3 дя з,а ¿0,5 5,9 ¿0,3 5,6 ¿ 0,6 1,5 £ 0,3 0,2 ± 0,1 0 :
2 32 15-20 дн 5,4 - 0,5 7,7 ¿0,4 5,5 ¿ 0,3 1,8 ¿ 0,4 0,4 ¿0,2 о-
3 32 3045 дя 5,6 - 0,6 7,9 ¿0,4 5,9 - 0,3 2,2 ¿0,3 0,5 ¿ 0,2 0
4 32 2 мзс. 6,1 ± 0,5 8,9 ¿0,4 7,7 ¿ 0,4 3,4 ¿ 0,3 1,4 - 0,4 0,3 ^ 0,1
5 32 4 мес. 6,8 ¿0,7 9,8 ¿0,6 8,1 ¿0,5 4,1 ¿0,3 1,7 ¿0,4 С,3 ± 0,1
6 32 6-7 «80. 7,8-0,6 Ю,8 -0,4 10,2 - 0,4 5,3 - 0,3 3,0 - 0,4 1,0 - 0,3
В начале изучали влияние низкой температуры на проявление аллергических реакций на туберкулин черва 2 месяца после .вакцинации БЦК. Опыт ставили на 2-х группах телят, иммунизированных БЦЯ в ноябре 1987 года.
Первая группа (опыт) - 5 телят, которых перед и в период Ьостановки ВШ через 2 месяца после вакцинации, т.е. в январе 1988 года, содержали вместе о матерями в тамбуре скотопомещения где температура колебалась от -13 до -190С, вторая группа (контроль) - 5 телят вместе о матерями находились в помещении, где температура была от -I до +4°С. Телят обеих групп одновременно подвергали туберкулинизаши. При этом охлаждение вакцинированных талят приводило к снижению реакции на ВШ вплоть до полной а реактивности. Интенсивность аллергических реакций в опытной группе составила в среднем 2,2 - 0,5 мм, причем теленок инв. # 3708 вообще не реагировал на ВШ. Телята же контрольной группы реагировали на ВШ о увеличением кожной складки в ореднем на 6,6 £ 0,9 мм.
При переводе этих же телят в обычные условия содержания произошло восстановление чувствительности кожи на ВШ и интенсивность аллергических реакций составила в среднем 6,2 - 0,5, а у контрольных - 6,4 г 0,3 мм.
В другом опыте изучали влияние ниакой температуры на течение поствакцинальных реакций на туберкулин у телят через 3 месяца после прививки БЦЕ.
■ По истечению 2-х меояцев о начала вакцинации животных обеих групп .были исследованы ВШ при обычных температурных режимах содержания и при этом интенсивность аллергических реакций в опытной и контрольных группах в среднем была соответственно 6,4 ¿0,8 и 6,4 * 0,6 мм. Затем животных опытной группы через
30'дней перевели для проведения ВШ в холодное помещение с температурой от -9 до -14 °С. При этом у них интенсивность аллергических реакций оказалась ниже (3,2 * 0,4), чем в контрольной ( 6,8 - 0,4 мм).
Таким образом установлено существенное влияние низких температур внешней среды на снижение чувствительности привитых БЦ2 телят к ВШ, что можно объяснить нервно-гуморальной регуляцией клеточной и сосудистой реакций кожи под воздействием холода.
Напряженность иммунитета у привитых БЩ телят к возбудителю туберкулеза в зависимости от чувстви- . тельности их к туберкулину через 2 месяца после прививки
При постановке опыта на 14 телятах по определению напряженности иммунитета установлено следующее:
Содержание общего белка, альбуминов в двух опытных группах телят до заражения было в пределах нормы с более высоким содержанием глобулинов, по сравнению с контрольной группой ( табл. 5).
Таблица 5
Содержание общего белка и иммуноглобулинов у телят опытных групп г/%
Группы' Общий белок | Альбумины | Глобулины
I 7,24 - 0,5 2,8 ¿ 0,4 5,06*0,5
П 7,16 - 0,6 2,08 £ 0,5 5,10 - 0,6
Ш 8,02 ± 0,5 3,72 ¿ 0,5 4,28 *0,5
Более высокое содержание глобулинов в опытных группах телят по-видимому связано иммунологической перестройкой организма после вакцинации НИ.
Максимальный подъем аллергических реакций отмечен через 30 суток после заражения во всех группах. В первой группе вак-линированных БЦ2 телят, через 30-60-90 дней после заражения реакций на туберкулин по интенсивности были самыми низкими, а самыми высокими - в контрольной группе ( табл. 6).
Таблица 6
Интенсивность аллергических реакций на ВШ у телят до и после заражения МТ.бовис-8
Реакция на { Интенсивность реакций на туберкулин
туберкулин • после заражения через:_
до згражен.' зр дн. I 60 дн. ! 90 дн.
Группа телят
Из числа вак-шнированных:
нереагировавшие 0 7,80,5 5,8 г 0,4 4,6 £ 0,6
реагировавшие 8,5 - 1,6 13,25- 1,4 10,75^ 1,6 8,0 £ 1,1
невакпиниро-ванные
18,2 ± 0,65 14,2 £ 0,9 11,0 £ 0,75
Через 3 месяца после заражения провели убой опытных и контрольных телят на санитарной бойне Уральского мясокомбината.
Послеубойным исследованием у трех контрольных телят в регионарных к месту заражения предлопаточных, а также в оредо-стенных и подчелюстных лимфатических узлах обнаружили мелкие казеозные очаги. У двух контрольных и всех телят первой и вто-^ рой групп видимых изменений не обнаружено.
При бактериологическом исследовании материала от телят контрольной группы выделено 24 культуры вирулентного штамма М бовис-8. Количество выделенных культур на одну голову составило. 4,8. У животных I и П группы изолированы всего по одной культуре из регионарного лимфоузла, у остальных животных исходные культуры МТ не выделены. Индекс инфицированное га у телят контрольной группы составил 12, в I и П группах соответственно
,5 и 0,65.
Результаты экспериментального изучения позволяют судить ) достаточной напряженности иммуштстэта против туберкулеза у гривитых БЦЗ телят, как в группе аре активных, так и в группе «агировав'иих на туберкулин через 2 маоша после прививки.
Иммуноморфология ватгдавниого ярошсса у телят арэ-активных и чувствительных к туберкулину через 2 месяца после прививки БЩС
При сравнительном морфологическом исследовании иммуноком-[етентных и паренхиматозных органов телят 5-6 месячного возраста, вакцинированных БЦК в стандартной дозе, у реактивных на губеряулин животных обнаружили в целом характерные для вакшн-юго процесса изменения иммунных структур регионарных и отда-1енных к месту инъекции вакцины лимфатических узлов и селезен-си. У ареактавных на туберкулин телят, убитых через 2 месяца юсле вакцинации, иммунная реакция лимфоидных органов и ткани сарактеризовала раннюю стадию клеточной перестройки, т.е. стадо гуморального и гуморально-клеточного типа иммунного ответа. Гогда как у чувствительных к туберкулину телят - иммунизированных БЦЖ - позднюю стадию проявления иммуиоморфологии, т.е. стацию реакции клеточного типа.
Персистеншя микробактерий BUS в организме ареактавных и чувствительных к ВШ телят
В период 1985-89 гг. провели контрольный убой II ареактавных и 6 чувствительных к туберкулину телят, посла ваквдна-ции БЦД. Из II ареактавных телят 6-были убиты через 2 месяца после вакпннащи БЦХ, 4 - через 3 и 2 - через 5 месяцев. Лимфатические узлы и внутренние органы подвергли бактеркологичес-
кому исследованию на предмет выделения БВД. Из 6 телят реагировавших на ВШ, осуществлен убой 3-х через 2 месяца после при-.вивки БЦД, 2 гол. через 3 месяца и 2 - через 5 месяцев. При бактериологическом исследовании у 2-х ареактивных и 2-х чувствительных к туберкулину телят, убитых через 5 месяцев, из лимфатических узлов и внутренних органов культуры БЦД .не выделено. Биопроба на кроликах также была отрицательной.
Из двух ареактивных телят, подвергнутых убою через 3 месяца после вакцинации БВД, у одного реагировавшего теленка из предлопаточных лимс^атических узлов изолировали и идентифицировали культуру штамма БЦЕ.
От убитых через 2 месяца после вакцинации БЦД б ареактивных и 2-х чувствительных к туберкулину телят из регионарных к месту вакшнаши предлопаточных лимфоузлов также выделили и идентифицировали культуру БЦЕ.
Эш исследования также свидетельствуют о том, что при пер-оистенпии микобактерий БЦК в организме телят у отдельных инди-видумов не проявляется чувствительность к туберкулину, что обусловлено рядом изложенных выше причин.
ВЫВОДЫ
I. Аллергия к внутрикожному введению туберкулина у телят ^ через 2 месяца после прививки вакцины БЦЕ колебалась от 3,9 до 11,9$ в зависимости от сезона года, при интенсивности аллергических реакций - от 3,6 - 0,9 до 8,1 ¿0,7 мм. Наибольший процент ареактивных телят выявлено в зимне-веоенний период. Наименьшее - летом и осенью.
2.. Сравнительным испытанием игольного и безыгольного методов введения вакцины не выявлено существенной разницы в проявлении' аллергической реактивности животных к туберкулину.
_____________________________________________________________________________________
3. ¿реактивность у привитых БЦ£ телят при вкутрикожком вве— ;енш туберкулина через 2 месяца носила временный характер
ia связь с чувствительностью кожи к гиотаминовой пробе. Через 3 ¡всяца после прививки реактивность к туберкулину проявлялась у Q%, а через 4-5 месяцев - у 10055 ранее ареактшзных животных.
4. Аллергическая реактивность к туберкулину у пркэатпх Б1£ ■елят зависела от возраста. Количество реагирующих в туберкулин ивотных и интенсивность реакций повышались с возрастом животных, осле прививки реактивность нарастала и независимо от возраста оотигала максимума через 3-4 месяца.
Неспецйфическая функциональная активность Т-лимфоцитов в ре-кпии с фитогемагглютинином у телят хорошо проявляется с 2-х маячного возраста и коррелирует с реактивностью к туберкулину.
5. Аллергическая реактивность к туберкулину у вакшнкрован-ых телят зависит от влияния на организм холода, как фактора сни-ающего чувствительность кожи, и даже ведущего к исчезновению закшй на ВТП,
6. Напряженность иммунитета у привитых БЦ2 телят при экспе-шентальном заражении через 2 меояца после (вакцинации) иммуни-апии вирулентной культурой МТ бовис-8 не зависела от чувствитель-юти к ВТП.
7. У арёактивных к внутрикожному введению туберкулина телят, зивитых БЦЖ, при иммуноморфологическом исследовании установлена ^морально-клеточная, а у реактивных - клеточная форма ответа (мунокошетенткых органов.
8. Араактавность к туберкулину у привитых БЦЕ телят проявлять при персистенцяи в их организме микобактерий БЩГ.
9. Проверка на реактивность у привитых БЦЗ телят мясных по->д наиболее эффективна через 3 месяца после вакцинации.
10. Применение вакшны БЦЖ в стационарно неблагополучном по
туберкулезу крупного рогатого скота мясного направления в оовхо: "Булдуртинский" Джамбейтинского района Уральской области в комплексе противобруцеллезных мероприятий позволило оздоровить его в течение трех лет. На оздоровление аналогичного хозяйства без применения вакцины БЦЕ потребовало 5 лет.
ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ПРАКТИКИ
Результаты изучения реактивности привитых БЦЕ телят мясных .пород нашли отражение в Рекомендации "По применению различных схем химио-и вакцинопрофилактики при туберкулезе крупного рогат< го скота", которые утверждены научно-техническим советом ГУВ Министерства сельского хозяйства и продовольствия КазССР от II. 10.1991 г., протокол № 16.
СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО TEMS ДИССЕРТАЦИИ;
1. Ибрагимов Ш.М. Влияние общей реактивности организма на реактивность вакцинированных БЦЕ телят// Тезисы докладов областной научно-практической конференции молодых ученых и специалистов//г. Уральск, 1987,-С. 41-42.
2. Ибрагимов Ш.М. О причинах аре активности телят, иммунизированных ВЩ, к туберкулину// Совершенствование мер борьбы о бруцеллезом о туберкулезом с/х животных // Сб. науч. тр.КазНИВИ Алма-Ата, 1988.- С. 99-Ю4.
3. Ибрагимов Ш.М. О причинах ареактивности телят, иммунизированных БЦЕ, к туберкулину ( 2-е сообщение) // Вестник сельскохозяйственных наук Казахстана 1990, № 9. - С. 73-75
'4. Ибрагимов Ш.М. Динамика поствакцинальных реакций в разных возрастных группах, иммунизированных БЦК // Тезисы докладов межвузовской конференции молодых ученых и специалистов // Ураль 1991,- С. 75-76.
им