Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Иммунологические аспекты терапии и профилактики инфекционногоринотрахеита и вирусной диареи молодняка крупного рогатого скота
. и
АКАДЕМИЯ АГРАРНЫХ НАУК РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ
Л - гг.": -
О
БЕЛОРУССКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ВЕТЕРИНАРИИ ИМ. С.Н.ВЫ1ЛЕЛЕССКОГО
На правах рукописи УДК 6 (9:616.24-002-085.37-084:636.22/.28.082.35 Усов Сергей Михайлович
Иммунологические аспекты терапии н профилактики инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи молодняка крупного рогатого скота
.16.00.03 — ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология,микология н иммунология
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук
Минск 1998 г.
Научный руководитель-Научным консультант-
Работа выполнена в Белорусском научно - исследовательском институте экспериментальной ветеринарии им. С. Н. Вышелесского
доктор ветеринарных наук, старший научный сотрудник Красочко П.А. доктор ветеринарных наук, профессор, академик Академии аграрных наук Республики Беларусь Ковалев II.А.
доктор ветеринарных наук ' Объедков Г.А. кандидат ветеринарных наук, доцент Зелютков Ю.Г.
Оппонирующая организация - Гродненский сельскохозяйственный
Официальные аппоненты:
институт
-3
Защита состоится нии Совета по защите диссертаций Л Й
ЬрЛлШ года в 0.16.0) и Белору
Л9В
Ч
ОР
часов на заседа-
I Белорусском научно - исследовательском институте экспермиенталыюн ветеринарии им. С. II. Вышелесского по адресу: 223020, г. Минск, п/о Купцевщина, БелПИИЭВ им. С. И. Вышелесского
С диссертацией можно ознакоми гься в библиотеке Белорусского научно -исследовательского института экспериментальной ветеринарии им. С. II. Вышелесского -
Автореферат разослан 1998 года
Ученый секретарь Совета по защите диссертаций, доктор ветеринарных Сз*'
наук, профессор в я Лнжшк
Общая характеристика работы
Актуальность темы диссертации
Интенсивное ведение мясного и молочного скотоводства, сопровождающееся корнценграцией поголовья на небольшой плошали в значительной степени способствует быстрому распространению вирусных заболеваний, поражающих дыхательные нут н желудочно-кишечный тракт. Независимо от (яжелого течения респираторных и желудочно-кишечных заболеваний телят наступает значительное угнетение клеточных и гуморальных факторов иммунитета, активизация условно-патогенной микрофлоры и разлитие "энзоотической бронхопневмонии" приводящей к значительному отходу животных, снижению их продуктивности (Ё.В.Андрееп, Л И Драгомир, 1979; Я.Е.Коляков, 1986; В.П Литвин, А.И.Поживил, 1991 и др.). В этиологической структуре респираюрных и желудочно-кишечных заболеваний телят основную роль играют вирусы инфекционного ринотрахеига, диареи, парагрин-па-3, настсреллы, сальмонеллы и т.д. . При этом у переболевших животных отмечается значительное угнетение иммунной системы, особенно после переболевання инфекционным ринофахеитом и вирусной диареей (П.А.Красочко, 1997; В.Н.Сюрнп с соавт., 1998 и др.).
Известно, что вспышкам инфекционных заболеваний в условиях современной промышленной технологии способствуют снижение иммунолошческой реактивности организма, из-за недоразвитости иммунной системы молодняка (первичный иммунодефицит), пищевых токсикозов, некачественного кормления, а также "технологических стрессов". - безвыгульное и безвыпасное содержание животных, транспортировка, изменение микроклимата, формирование больших групп животных, малый фронт кормления, интенсивная эксплуатация (Е.В.Баева, 1991). Угнетенная иммунная система под воздействием вышеуказанных факторов не в состоянии противостоять даже вирусам и бактерия невысокой патогенноетыо.
Одним из ведущих звеньев патогенеза респираторных и желудочно-кишечных заболевании молодняка крупного рогатого скота является состояние иммунодепрес-сии. В Э70Й связи в комплекс лечебно-профилактических мероприятий при данных заболеваниях необходимо включать стимуляторы иммунной системы, снимающих иммунодспрессивное состоянии и нормализующие клеточный и гуморальный иммунитет до уровня здороваых животных.
Наиболее перспективным направлением в разработке методов иммуностимулирующей терапии и профилактики заболеваний молодняка является использование производных продуктов пчеловодства. Установлено, что при использовании человеком и животными пыльцы, перги, прополиса стнмулируегся Т-система лимфоцитов, особенно субпопуляция Т-хелперов, фагоцитарная активность кейтрофилоя, увеличивается активность гуморальных факторов иммунной зашиты (Н.М.Еремия, 1992; А.Кайяс, 1985; В.И.Кивалкина с соавт., 1988; С.Я Комаров, 1985, П.А.Красочко с соавг., 1997).
Ü связи с вышеизложенным, разработка современных и высокочувствительных методов иммунологической герани» и профилактики респираторных заболеваний, изучение роли вирусов в их возникновении, разработка новых средств и способов лечения и профилактики вышеуказанных заболеваний на современном этапе является актуальной задачей ветеринарной науки и практики.
Связь работы с крупными научными программами ^темами
Работа выполнялась с 1993 но 1998 годы в Белорусском научно-исследовательском институте экспериментальной ветеринарии им. С.Н.Вышелесского в рамках темы 04 научных исследований лаборатории острых вирусных инфекний "На основе биотехнологических методов разработать н усовершенствовать средства диагностики и профилактики наиболее распространенных инфекционных болезней, позволяющие обеспечить стойкое благополучие хозяйств и сохранность животных до 95-98% (№ госрегистрашш 142 oró декабря 1993 г.) и при реализации Международного научно-исследовательского Проекта, финансируемого Международным банком Реконструкции и развития "Охрана биологическою разнообразия лесов Беловежской пуши" .
Цель и задачи исследований
Целью настоящих исследований явилась ра ¡работка и усовершенствование методов профилактики и терапии ннфекцнонною ропот рахемia и вирусной диареи молодняка крупного рогатою скота с использованием биологически активных препаратов из продуктов пчеловодства.
Для выполнения указанной пели были поставлены следующие задачи:
1. Провести серологическое обследование крупного рогатою скою в в хозяйствах Гродненской области для изучения роли вирусов ш/фекниоиното рано-трахеита и диареи в этиологической структуре респираторных заболеваний.
2. Отработать технологические параметры изготовления биологически активного препарата из пчелиной перги.
3. Определить сосюяние иммунитета у юлят при инфекционном рннотра.хеи-ie и вирусной диарее, провести иммунокоррекшно у больных с номошыо разработанною препарате.
1 Разработан, способ стимуляции посгвакцинального иммунитета у телят при инфекционном ptnioipaxeine и вирусной диарее с использованием разработанного препарата.
5. Изучить п|юфнлактнческую, иммунологическую и экономическую эффективность препарата на основе пчелиной перги при респираторных заболеваниях телят.
Объект и предмет исследования
Основным объектом исследовании были теля1а черно-пестрой породы из жн-вотноиолческнх хозяйсп Гродненской области. В опытах lio изучению иммунологи-
ческой н профилактическом зффекшвности иммуностимулирующего препарата из продуктов пчеловодства иснолыовано 2120 телят 2-6 месячного возраста черно-пестрой породы, 25 кроликов породы белый великан, 50 белых мышей и 70 белых крыс.
В работе исполыовали вакцины против инфекционного ринотрахента «Монорин» производства Покровского завола ветреиараюв и вирусной диареи производства Ставропольской биофабрнкн.
Для опенки иммунного статуса и диагностики иммунопатологии использованы штаммы: Е. coli, М. lysodeicticus, Пас. subtilis, St. epidermidis№56.
Предметом иследова/тй служили 200 сывороток крови коров, 163 здоровых телят 1-б-ги месячного возраста, 37.1 телят, больных респираторными заболеваниями 1-6 месячного Bojpacia, 523 ]елят, переболевших респираторными заболеваниями 1-6 меся'шшо возраста, 88 молодняка крупного рогатого скота старше 6 месячного возраста из неблагополучных но респираторным н желудочно-кишечным заболеваниям хозяйств Гродненской области. Выполнено более 2500 серологических, 700 иммунологических и иммунохнмичсских исследований.
Гипотеза ,
В условиях Республики Беларусь широко распространены заболевания, проявляющиеся у новорожденных телят поражением желудочно-кишечного тракта, у телят старше 1-1,5-месячною возраеза - поражением органов дыхания, а у взрослых животных - поражением органов воспроизводства, в этнологии которых предположительно играют роль вирусы инфекционного ринотрахеита н вирусной диареи. Специфическая профилактика и терапия этих заболеваний не всегда успешна, поэтому мы предположили наличие возрастной н ностинфекционной иммуиодёирессии у животных. После проведения серологических Исследований, подтверждения роли вышеуказанных возбудителей в патологии крупного рогатого скота, а также изучения состояния иммунитета при этих инфекциях нами была выдвинута вторая часть гипотезы о разработке и использовании биологически акпдагого препарата из продуктов пчеловодства целенаправленно воздействующего на иммунную систему и обменные процессы организма телят, а также позволяющего симулировать поствакшшальный иммунитет.
Методология и методы проведенных исследований Для решения поставленных задач по разработке препарата нз продуктов пчеловодства и изучении ее иммунологической и профилактической эффективности при инфекционном рнпотра.чеите и вирусной диарее необходимо было использовать серологические, иммунологические, физико-химические методы исследований.
Серологические методы преследовали цель обнаружения в сыворотках крови от животных с различным клиническим состоянием противовирусных антител в реакции непрямой гемаппотниации (РИГА) в модификации НАКрасочко с соаат
(1988) и иммуноферменгный анализ (Х.Шютт, 1985, В.Н.Сюрин с соаат., 1986 П.А.к'расочко с соавг., 1991).
Для оценки состояния иммунитета определяли: содержание 'Г-и В-лимфоцитов но ДК. Новикову и В.И. Новиковой (1979); бактернциднук активность сыворотки крови но О.В. Смирновой II Т.А. Кузьминой (1968); концентрацию лщоцима в сыворотках крови и мир бета-лнзшюв но В.Г. Дорофейчуку (1972); бактериальный титр интерферона с помощью пефелометрического метода по Н.1;. Мурашовой с соавт. (1971); общий белок сыворотки крови с помошыо рефрактометра 1Т1А-2 (Н.М.Беляков, 1978).
Биометрическую обработку цифровою материала, полученного в экспериментальных исследований, проводили по Р.Б Стрелкову (1966) с учетом рекомендаций П.Ф. Рокицкого (1967).
Экономическую эффективность применении разработанной вакцины рассчитывали согласно «Методике определения экономический эффективности ветеринарных мероприятий» (Москва, 1982 г.), а также в соответствии с «Методикой опреде-. ления экономической эффективноент использования в сельском хозяйстве результатов научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ новой техники, изобретений и рационализаторских предложений», утвержденной МСХ СССР в 1983 г.
Научная новизна.
Установлена ведущая роль вирусов диарей и инфекционного ринотрахеига в заболевании телят респираторными болезнями в хозяйствах Гродненской области.
Впервые теоретически обоснованы и практически использованы новые иммуностимулирующие препараты на основе продуктов пчеловодства (заявка на и ¡обретение в Государственный патентный комитет Республики Беларусь № 960314 от 24 нюня 1996 г., положительные решения патентного комитета Республики Молдова №№> 1122, 1123, 1124 от 21 ноября 1997 г).
Практическая значимость работы
Результаты экспериментальных исследований обогащают современные знания по вопросам, патогенеза, лечения н профилактики респираторных болезней молодняка крупного рогатого скота, что позволяет повысить эффективность борьбы с данными заболеваниями. Изучена роль вирусов инфекционного ринограхеига и диареи в животноводческих хозяйствах Гродненской области, состояние иммунной системы при данной патологии у телят. Разработанные средства, способы и схемы применения иммуностимулирующего препарата для профилактики и терапии респираторных заболевании геляг позволяют значительно сократить заболеваемость и непроизводительное выбытие. Предложения для практики прошли комиссионные проверки и апробации в Белорусском НИИЭВ им. С.Н.Вышелесского и животноводческих .хозяйствах Гродненском области.
Применение указанных разрабоюк в услогиях производства позволяет в 3-5 раз сократить заболеваемость и непроизводительное выбытие молодняка крупного рогатого скота от респираторных заболевания.
На основании проведенных исследований разработаны и утверждены:
«Методические рекомендации по комплексной профилактике и терапии пиевмоэнтеритов гелят» Рассмотрены и утверждены отделом ветеринарии управления сельского хозяйства Смоленской области 6 апреля 1994 г.
«Методические рекомендации но иммунологической диагностике, профилактике и терапии вир)смо-Пакгериалышх пиевмоэнтеритов у телят» Рассмотрены и утверждены на заседании секшш производства, переработки продукции животноводства и ветеринарии НТС Минсельхозпрода Республики Беларусь 27 декабря 1995 г, протокол № 4.
Разработана нормативно-техпическая документация на иммуностимулирующий препарат "Лштстимулин-Л".(ирелставлеиа для расмогреиия на Ветбиофармсо-вете Минсельхозпрода Республики Беларусь).
Экономическая значимость полученных результатов ,
Иммуностимулирующий препарат из продуктов пчеловодства «Аннстимулин-Д» может производиться биологической промышленностью и использоваться как высоко-эффективное средство профилактики и терапии респираторных инфекций. Препарат конкурентоспособен я сравнении с аналогами. Окупаемость петершшрных мероприятий при использовании препарата "Ашгстимулин-А" для профилактики и терапии инфекционного рниотрахеита и вирусной диареи телят составляет в среднем 40,39 рублей на 1 рубль затраг.
Основные положения диссертации, выносимые на защиту
Результаты изучения распространения инфекционного рниотрахеита и вирусной диареи крупною рогатою скота в животноводческих хозяйствах Гродненской области, позволяющие рационально планировать ирошвоэшпоотнческтте мероприятия на уровне области;
- состояние иммунитета у телят при инфекционном ринотрахеите и вирусной диарее крупного рогатого скота, что являете я теоретическим обоснованием стимуляции иммунной системы и позволяет повысить эффективность комплекса лечебно-профилактических мероприятий;
- результаты разработки, апробации и использования иммуностимулирующих препаратов из продуктов пчеловодства, позволяющие усовершенствовать технологию (иготопдения пренарга и повысить эффективность профилактики респираторных заболеваний;
- результаты стимуляции поствакцинального иммунитета при инфекционном рипотрахеите и вирусной диарее крупного рогатого скота с помощью препарата
"Анисшмулнн-А", позволимте понысшь зф'К'кшвпо.ль их снепифческон профилактики в условиях производил на
Личный вклад соискатекя
Исследования по ограбо1ке оптимальных схем, способов иммуножническо'и профилакт нкн и терапии рсснира горных заболевании и их нр/шеиспнь' в жпвошо-водческих хозяйствах проводились лично сопска юлсм При выполнении комплексных разработок - личный вклад соискателя составлял 40 - 80%.
Совместно проводимые рабош с доктором ветеринарных паук профессором Ковалевым И.А., доктором ветеринарных наук Красочко И.А , кандидатами ветеринарных наук Красочко И А , Ивановым В.Е., Малиновским ИФ., Ивановым А Т. обуславливались их методическим руководством разработками и совместными исследованиями но изучению распространения возбудителей респираторных инфекций а хозяйствах, лабораторными исследованиями по изучению состояния иммунитета после обработки препаратом "Анисшмулнн-А" и иостакшшалыюго иммунитета.
Апробация результатов диссертации
Основные положения диссертационной рабош доложены и одобрены: на заседаниях Ученого Совета Белорусского НИИ')!) им С.Н.Вышелесскою (1994-1998 гг.; научно-практической конференции "Гяшехнилог/я петрипарних прси.цичи (Харьков, 1993 г.); научно-нракшческоп конференции "Тихнслт ни получения и выращивания здоровою молодняка сельскохозяйственных животных и рыбоиоса-дочного материала (Витебск, 1993 г.); . научно-практической, конференции по животноводству н ветеринарной медицине (Витебск, 1994 г.); 1-й Международной научно-практической конференции "Ветеринарные и зоиннженерные проблемы животноводства" (Витебск, 1996 г.); Научно-практической конференции, посвященной 45-лепно Гродненского СХИ "На>ка-нроизводегву" (Гродно, 1996 г.); 5-й научно-практической конференции но апигерашш "Пчелы н ваше здоровье" (Сочи, 1996 г.); Международной научно-практической конференции, посвященной 50-летю Ьел-НИИМСХ "Научно-технический прогресс в сельекохозяй-стпенном произволеIне" (Минск, 1997 г.); 6-й научно-практической конференции по апнгерапип "Апитерапия сегодня" ([.Рыбное Рязанской области).
Опубликованное!ь результатов.
По теме диссертации опубликовано 15 научных работ, в том числе 3 статьи, 7 тезисов докладов, 2 методические рекомендации, 3 положтельных решения на патенты.Общее количество опубликованных материалов - 69 страниц.
Структура и обьем диссертации
Джсертоюнння работа пложена на^55 страницах машинописного текста и состоит и>. иледення. обпей характеристики работы, обзора литературы по теме и
выбора направления исследований. изложения оГчнен методики и основных метолом исследований, 5 i гмв собственных исследований, анализа н обобщения результатов исследований, выводов н практических предложений. Список использованной литераторы включает наименование работ отечественных и зарубежных авторов. Материалы лисгертэшш иплюориропаиы таблицами. В приложении на 22 страницах, приводится документы и таблицы. подтверждающих результаты отдельных работ, их научную и практическую значимость.
результаты жслкгим! нтАЛьиых исслгдиллниН
Серологическое обследование круши»« роснгого скита при паm.ioiни ортяноп дыхания в Гродненской «блясти
Наличие а и/шел к вирусам-возбудителям респираторных штфекштй в сыворотках крови крупного рогатого скота различных половозрастных групп к клинического состояния свидетельствует о степени ннфнпнрованостн стад и также о пере-болепании молодняка вирусными инфекциями. Результат обследования животноводческих \озяйпв в Гродненской области свидетельствуют о высокой степени инфицированное ги взрослых животных вирусами Ш'Г и ВД. При ттом наибольшее распространение имела вирусная лиарсп (ч4,5"'о взрослых животных имели диагностический титр антител), несколько меньшее Ш'Г (56,0%) (габл. )).
Таблица I.
Результаты выявления антител к вирусам ИРТ и вирусной диареи у крупного рогатого скота различного1 клинического состояния и половозрастных трупп с
помощью РИГА
№№ п/н Группы крупного рогатого скота Кол-во обслед. хоз-в 8 Инфекционный ринотрахеит Вирусная диарея
кол-во исслел. н[н>С положительный результат кол-во исслед . проб положительны й результат
кол-во процент кол-во 189 процент
1 Коровы 200 112. 56,0 200 91,-
2 Телята здоровые 1-6 мес возраста 12 163 43 26,3 163 65 39,9
3 Телята, больные ОРЗ 1-6 мес. возраста 30 373 138 36,9 373 235 63,0
4 Телята, переболевшие ОРЗ 1-6 мес. возраста 29 523 263 50.2 • 523 436 83,3
5 Телята, старше 6-месячного возраста . ! 4 88 76 «6,4 88 82 93.1
Полученные результаты по распространению вирусов ИРТ и ВД среди взрослых коров свидетельствуют о широком распространении данных возбудителей среди воспроизводящего зюголовья. Тем самым инфицированные животные способствуют перезараженню новорожденных телят еще в раннем препагальном периоде развития теленка. Это приводит к массовым вспышкам пневмоэнтеритов телят, особенно при возникновении нарушений в кормлении, содержании животных, стрессовых ситуациях.
Проведенные исследования об уровне антител к вирусам ИР Г и ВД в сыворотках крови телят, переболевших респираторными заболеваниями, свидетельствуют о том, что у причиной заболевания телят являются в основном вирусы диареи и инфекционного ринотрахеита. Так, у переболевших респираторными заболеваниями телят антитела к вирусу диареи выявлялись у 83,3% обследованных животных, а вирусу ИРТ - у50,2%
Проведенный анализ уровня антител к вируеам-во¡будигелям респираторных инфекций у телят, переболевших респираторными заболеваниями, показывает их этиологическую в патологии органов дыхания
I
Иммуностимулирующие пропищим в гераини и профилактике ннрусщ.тх респираторных инфекции телят.
Отработка технологии изготовления препарата 'Аиистимулин-А" И 1ьсспи>, что цветочная пыльца (обножка), пчелиная перга -уникальные природные продукты, являющиеся концентратом биологически активных веществ. Накопленные в мировой практике данные но их использованию для повышения пмтушыш нчсской резистентности организма человека и животных позволили провесш исследования по применению цветочной пыльцы и пчелиной перт и для стимуляции иммунной системы молодняка крупного рогатого скота при респираторных заболеваниях.
На первых этапах исследований нами щучено влияние экстарактов и тндро-лизаюв из пыльцы и перги в вистемг ин вшро При лом установлено, что изучаемые биологически активные вещества, выделенные из продуктов пчеловодства значительно активизируют иммунокомпетешные клоки организма здоровых животных, а также способствуют восстановлению угнетенных звеньев иммунитета у больных животных до уровня клинически здоровых.
Результаты иммунологической оценки вытяжек, экстрактов и гидролизатов из перги позволили нам в дальнейшем провести исследования и о отработке технологических параметров изготовления препарата.
Выбор был остановлен на шдролнзате перш, который обладал рядом преимуществ по сравнению с водными и спиртовыми вытяжками и экаактами:
а) большой выход конечного продукт ин> 80°Ь) при небольших затратах материальных средств:
б) несложные технологические процессы при изготовлении препарата;
ь) возможность выпуска препарата в условиях производственных лаборато-
рии;
г) высокая иммунологическая активность препарата;
Для изготовления иммуностимулирующего препарата из пчелиной перш методом гидролиза предусмотрены следующие технологические приемы:
— Подбор перги, отделение ее от сот. Перга должна быть без плесени, посторонних загрязнений. В рамках должно быть до 75-80% заполненных пергой сот.
— Проведение гидролиза.
— Фнльграция полученного гидролизата.
— Определение концентрации сухих веществ в типролизаге и его качественного состава.
И и отопление рабочей концентрации препарата.
— Стерилизация полученною препарата.
—Контроль из1 отопленного препарата на стерильность, безвредность, биологическую активность, подлинность.
Па осцоаашш проведенных исследований нами разработана инъекционная форма иммуностимулирующего препарата на основе гидролизата пчелиной перги и названа нами "Апистнмулин-А".
[Ьучщне____X {iii^M i^^ioiTi носки л_____и___аллергических свойств__препарата
"А!НШ1ицулпн_:Д-Д11Я полной биологической оценки препарата "Аписгнмулин-А" на органнш лабораторных и сельскохозяйственных животных проведены серии исследований по определению его токсичности, аллер| енности, а также изучению его влияния па иммунитет, обменные процессы организма животных.
Иследоиаиия по определению токсичности и аллергеннос-тн препарата пропс;! с мы па базе лаборатории!) токсикологии КелНИИЭВ совместно с кандидатами ветеринарных наук А.Т.Иваиовым и И.Ф.Малиновским.
В результате проведенных исследований по изучению острой токсичности на белых мышах и крысах установлено, что препарат "Аписгнмулин-А" в изучаемых дозах не оказывал отрицательной) воздействия на организм животных. При этом после ведения препарата "Аиистимулип-А" не отмечалось гибели крыс и мышеи, а также не сопровождалось какими либо отклонениями в физиологическом состоянии животных. На вскрытии убитых мышей и крыс не обнаружено патологоанатомнче-скич изменений внутренних органов (печень, почки, сердце, желудок и кишечник). Исследования по определению аллергенное!и препарата "Апистимулнн-А", проведенные на кроликах и крысах покати их отсутствие.
ш^с гв iUKi!!UiiMajil(iEOiLy XJ^MT
Для опенки влияния воздействия препарата "Апистимулнн-А" на организм сельскохозяйственных животных был проведен опыт на телятах для отработки оптимальной терапевтической дозы и изучению влияния "Апистимулина-А" на иммунную систему н обменные процессы организма.
Г) результате проведения OIH.II о в но отработке оптимальной дозы препарата и кратности использования установлено, что оптимальным является трехкратная внутримышечная обработка животных с интервалом в 3-5 дней в дозе 0,5-1,0 mi /кг живой массы. В далышПшем imm нропгмено тиученпе пиинпия на иммунную систему и обменные процессы opianniMa телят после их обработки "Аиистимулином-Л"'. Установлено, что препарат "Лпистимулин-А" способствует актнвтации биосинтеза интерферона, повышает бактерицидную и лизошшиую активность сыворотки крови. Паи ном активность интерферона возрастала па 5-18%, бактерицидная активность сыворотки крови - на 3-15%, лизоцимная - на 1,5- 5,5 мкг/мд.
Препарат также активизировал и клеючный иммунитет. При этом в основном активизируются Т- и И-звеньп нммушиета и фаюцтпарная активность нейтрофилов Так, количество Т-лпмфошпов у теляг всех опьмпых ipymi возросгало па 4-8%, В-лимфоцнтов - на 5-10%, фагоцитарное число на 15-25%, фагоцитарный индекс - в 1,8-7,5 рата
Кроме стимулирующею влияния на иммунную систему введение телятам "Апистимултша-А" также активизирует и обменные процессы организма При ним увеличивается конпешрания общею белка, процентное соотношение альбумин, 1лобул1нн)в, активизируется ферментная система крови, уменьшается концентрация мочепичны и мочевой кислоты, креатннппа.
Трехкратная обработка здоровых 1сля|"Апнстимулином-А" в оптимальной терянеаппсснои дозе 0,5-1,0 mi/к г жинон массы вызывает наиболее выраженную стнляцшо имушпета и обмена вещее/и у обработанных животных.
Иммунодефицит и его коррекция при инфекционном рннотрахенте и вирусной диарее у телят После изучения влияния "Аннстнмулнна - А" на ортатппм здоровых животных нами проведены соотнес шующие исследования на больных инфекционным рннотрахеигом и вирусной днарсей телятах. Персболеванис телят вышеуказанными нпфекннямн сопровождается значительным птегенисм клеточного (уменьшение количества Т- и В-лнмфоцитов, активности фагоцитарной активности нейтрофилов, снижения титра интерферона) и гуморального (уменьшение бактерицидной, лизоцимной и бета-литнческон активности сыворотки крови, измененя в содержании гамма-глобулинов, снижение альбумино-глобулинового соогпонтенпя) звеньев иммунитета, т.е у телят отмечен вторичный приобретенный иммунодефицит под воздействием возбудителей инфекционного ринограхепта и вирусной диареи. Наряду с этим у телят значительно поражены основные биохимические показатели, что указывает па угнетение обменных процессов организма. Трехкратная обработка таких телят "Апистимулнном-А" способствует восстановлению основных звеньев иммунитета и обмена веществ до уровня клинически здоровых животных. При этом отмечено возрастание угнетенных показателей на 10-25% по сравнению с больными телятами. Это свидетельствует о том, что обработка теляг препаратом'
и
приводит к быстрейшему иоееганонлсшно нарушенного иммунитета и обмстш веществ и приводит к быстрейшему выздоровлению больных телят.
гол.нцоллхеига ¡1.внруспо1Ьанаре!Х_ишнюго ротачш^скота В современных условиях ведение животноводства, связанное с нарушениями в кормлении, содержании животных, постоянным» стрессами приводит к сильному ущегеншо иммунной системы. В идеальных условиях профилактическая эффективность вакцин достигает 90-100%, но учитывая вышесказанное иммунизация телят на фоне нарушений обменных процессов организма, угнетения иммунной системы приводит к значительному снижению эффективности вакцин. Для решения вопроса повышения эффек-швичсш иммунизации пчряду с улучшением технологии содержания и кормления животных, важным моментом являйся стимуляция поствакнииалытого иммунитета с помощью иммуностимулирующих препаратов.
Для активизации иммунного отпета при вакцинации против инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рот итого скота использован ратработан-иый препарат "Апистимуяин-А". При этом изучался иммунный ответ ортанкзма телят на введение моновакцин против ИРТ и ВД на фойе стимуляции пост вакцинального иммунитета« помощью препарата "Аиистимулин-А".
Пммунщания телят моновлмипшми против против инфекционного рииотрахеита и вирусной цнврсн способе! «овала значительной и иммунологической перестройке орпиннма животных, пктикизанни клеточных и ¡уморальных факторов иммунитет - выработкой противовирусных антител О и ^ М-классов, повышением количества Г- и В-лимфоцитов, антигеисвязывающих клеток, увеличением титра интерферона. Вакцинация телят на фоне стимуляции иммунитета способствовала активизации иммунного ответа организма. При этом повышался титр противовирусных антител на 1,5-2,0 1од2, количество Т- и В-лимфоцигов на 5-15%, иммуноглобулины !ц О и 1ц М-классов на 10-15%, пир интерферона па 8-15% но сравнению с живоштыми, получавших вакцины без активизации иммунитета.
Разработки и внедрение в условиях производства комплексной системы иммунологической диагнос! ики, профилактики и и'р-лчип »нрусиых ртчиира-торнм* инфекний телят.
На основании проведенных исследований разработана н внедрена в производство комплексная система иммунологической днат ностикн, профилактики и терапии вирусных респираторных инфекций телят, которая включает в себя следующие мероприятия:
1. Установление диагноза заболевания с помощью сеоролоГнческих тестов (РНГА.ИФА, РП).
2. Активная иммунизация воспроизводящего поголовья (стельных коров) и молодняка живыми вирус-вакцинами против инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи ( в зависимости от эпизоотической ситуации хозяйства но данным инфекциям).
H
3. Иммуностимулирующая терапия и профилактика иммунодефицнтных состояний телят
4. Противовирусная и антибактериальная терапия и профилактика вирусных респираторных инфекции н осложненных условно-,патогешюП'микрофлорой заболеваний органов дыхания.
Использование комплекса мероприятий в хозяйствах позволяет снизить заболеваемость в 3-5 раза, непроизводительное выбытие телят в 2-3 раза. Окупаемость ветмероприятий от нсполдеовачня системы составляет 5.92 рубля на 1 рубль затрат.
11M КОДЫ
1. В этиологической структуре вирусных респираторных заболевании крупного рогатого скота в Гродненской области у коров основной удельный вес занимают занимает вирусная диарея - 94,5%, ИРТ - 56,0%, '»то свидетельствует о высокой степени инфицированное™ взрослого поголовья в неблагополучных по ОРЗ хозяйствах.
2. Анализ результатов серологического обследования переболевших респираторными заболеваниями телят в хозяйствах Гродненской области показывает, что у 83,3% имеются антитела к вирусу диареи и у 50,2% - к вирусу ИРТ, что свидетельствует о роли вышеуказанных возбудителей в патологии респираторных органов и желудочно-кишечного тракта.
3. Гндролизат пчелиной перш "Апистимулин-А" является нетоксичным, неаллергенным препаратом, который при обработке животных активизирует основные звенья клеточного и гуморального иммунитета и обмена веществ.
4. У больных и переболевших респираторными заболеваниями телят отмечается угнетение основных звеньев иммунитета ( уменьшение количества'!- и В- лимфоцитов, снижение активности фагоцитоза, снижение активности гуморальных факторов иммунитета), которое восстанавливается под воздействием обработок "Апистимулином-А" до уровня клинически здоровых животных.
5. Вакцинация телят вирусвакцинами против инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота на фоне активизации иммунной системы "Апнстимулином-А" вызывает достоверную стимуляцию основных звеньев клеточного и гуморального иммунного ответа .
6. Комплексная система иммуностимулирующей профилактики и терапии респираторных заболеваний молодняка крупного рогатого скота позволяет снизить заболеваемость телят п 2-5 раз, а непроизводительное выбытие в 1,5-3,5 ра-за.Экономическая эффективность от применения иммуностимулирующих и лечебно-профилактических препаратов и схем лечения при респираторных заболеваниях телят составляет 5,26 на 1 рубль затрат.
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
1.Методические рекомендации но иммунологической диагностике, профилактике и терапии вирусно-бактсриальпых пневмознгеригов у телят» Рассмотрены и утверждены на заседании секции производства, переработки продукции животно- .
водства и ветеринарии 11ТС Минсельхозпрода Республики Беларусь 27 декабря 1995 г, протокол № 4.
2. Заявка на изобретение № 960314 от 24 июня 1996 г. . поданная в Государственное патентное ведомство Республики Беларусь "Средство для стимуляции иммунной системы организма сельскохозяйственных животных "Апистимулин-А", способ его получения и способ стимуляции иммунной системы организма сельскохозяйственных животных"
3. Проект нормативно-технической документации на иммуностимулирующий препарат "Аписгимулин-А" (представлен для рассмотрения на Ветбиофармкомис-сшо Минсельхозпрода Республики Беларусь.
Список опубликовании* работ но теме диссертации
1. Красочки П.А, Усов С.М. Эффективность использования вакцины "Монорин" для профилактики инфекционного рниотрахеита/Пехнологня получения и выращивания здорового молодняка сельскохозяйственных животных и рыбо-посадочного мате-риале. Тез. докл. рес-публ. научно-пракг. конф.-Минск, 1993.-С. 106107.
2. Методические рекомендации но комплексной профилактике и терапии пневмоэнтеритов телят / Красочко П.А., Ковалев H.A., Шашенько А.С.,Усов С.М. и др.- Смоленск, 1994,- 15 с.
3. Иммунологическая диагностика и профилактика вирусных респираторных инфекций крупного рогатого скота /Красочко П.А.. Красочко И.А., Лесневский В.А., Усов С.М.// Матер республ. научн.-практ. конф. по живот-новодству и ветерн-нар-ной медицине,- Витебск, 1994.-С.70.
4. /Цн вакцин нрош шфекшйного pimorpaxeiiy та eipyciioi дщре! на имунну систему телят/ Красочко П А., Ковалев Н А., Красочко H.A., Усов С.М.// Biorexiiojioii« ветеринарних препарат. Матер.наук.-практ. конф.-Харькои, 1993.-С.85-86.
5. Методические рекомендации по иммунологической диагностике, профилактике и терапии вирусно-бактериальных пневмоэнтеритов те-
лят//П.А.Красочко; Н.А.Ковалев, С.М.Усов и др. Минск, 1996. -16 с.
6. Инфицированность стад коров вирусами инфекционного ринотрахеита и диареи / Красочко П.А., Красочко И.А., Грибко С.М. Усов С.М.// Ветеринарные и зооинженерные проблемы животноводства. Матер. 1-й Международной научн.-лракт.конф.- Витебск, 1996,- с. 114-115.
7.Красочко П.А.. Иванов В.Е., Усов С.М Использование рифа циклона при лечении энтеритов у телят//Наука-производству Тез. научн.-практ конф., гтося.45-летто Гродненского СХИ.-Гродно, 1906.-С.67-68.
8. Применение молотивного жира в вектеринарной практике// Красочко П.А..Иванов В.Е., Усов СМ, П.А.Климович//Наука-производству. Тез. научн,-практ конф., иоев.45-иетию Гродненского СХИ.-1 родно, 1996.-С.66-67.
9. Изучение влияния иммуностимулирующего препарата из перги на обменные процессы у телят// Ковалев Н А. Красочко П.А., Усоя СМ.// Апитерапия сегодня (сборник 5), Матер. 3-й научн-практ.конф. по апитерапии "Пчелы и ваше здоровье"-Рыбное, 1997,- С. ЮЛ-107.
10. Усов С М., Красочко П.А. Влияние иммуностимулятора "Апистимулин-А" на показатели обмена веществ телят// Научно-технический прогресс в сельскохозяйственном производстве. Матер.Междунар. научно-практнч.конф., поев. 50-летиго. БелИИ-ИМСХ Минск, 1997,-С.138-139.
П.Усоь С.М., Красочко П.А. Белки крови телят после обработки иммуностимулятором "Апистимулин-А//Апитерапия сегодня. Матер. VI научно-нракг. конф. по апитерапии. г.Рыбное Рязанской обл. 14-17 октября 1997 г.. Рязань, 1998.-С.67-70.
12. Красочко П.А., Красочко И.А., Усов С.М. Влияние препарата "Апистимулин-А" на состояние иммунитета И обменные процессы организма здоровых телят/ Весш Акадэми аграрных навук Рзпубдг'кг Беларусь.- 1998. № 3 (в печати).
13. Положительное решение Патентного ведомства Республики Молдова №
1122 от 13 ноября 1997 г, МКИ А61К 35/78, 38/01. Средство для стимуляции иммунной системы животных /П.А.Красочко, Н.Г.Еремия, С.М.Усов и др.. Заявл. 26.12.1996.
14. Положительное решение Патентного ведомства Республики Молдова №
1123 от 13 ноября 1997 г. МКИ А61К 35/78, 38/01. Способ получения средства для стимулирования иммунной системы животных /П.А. Красочко, Н.Г.Еремия, С.М.Усов н др.. Заявл. 26.12.1996.
15. Положительное решение Патентного ведомства Республики Молдова №
1124 от 13 ноября 1997 г МКИ А61К 35/78, 38/01. Меюд стимулирования иммунной системы животных. /П.А.Красочко, Н.Г.Еремия, С.М.Усов н др.. Заявл. 26.12.1996.
о
РЭ'НО М 3 Усну Сергей Миайла»1ч
(муналагршыя аспекты тэряпН I нрафыакплкз ¡ифекныйнага рына-
трахеггу 1 «¡руснян дыирэ! мялндпмку буйнай рагатай жывелм
Клшчавыя слови: буйная рагатая жывела, в ¡рус ¡нфекцыйната рынатра-хепу, в1'рус дыярм, вакцына, ¡мунастымулятар, прадукгы пчалыицтва, ¡муштэт, кроу.
Аб'скт двслсляванииу. пяляты, каровы, белыя мышы, белые паную, трусы.
Мэга дасдедвачияу. распрацоука I удасканолеине метадау прафшрктым и тэрапм шфекцыннага рынатрахеггу I шруснай дыярэ! мададняку буйнай ра-гатай жывелы ч викарыстаннем б1ядапчна акшуных прэпарагоц з прадуктау пчальшнтва. Мзта даеягнута пастаноукай спепыяльных доследау на 2266 ця-лятах, 25 трусах, 50 белых мышах и 70 белых пакуках.
Нннукопа» натзиа даследаншу заключаешь у выяуленш вядучай рол! шнруеау дыярн I п;фекцыйнага рынатрахепу пры захпорваши цялят рэс|нрагорным1 хворобам! у гаспадарках Гродзенскай вобласщ, тэарэтычным абаспаванш I практичным выкарысташп новых ¡ммунатымул1руючых прэпа-ратау на аснове прадуктау пчалыицтва (заявка на вынахолшцтва у Дзяр-жауны папнтны к;Ш1 гл Рэспубл1(а Беларусь № 960314 от 24 чэряеня 1996 г., станоучыя рашэпж патэн гнага кампэга Рэспубл1ю Малдова №№ 1122, 1123, 1124 от ! 1 Л1стапада 1997 г).
Па выт:;ах праведзеных даследавапняу падрыхтаваНы I згцвержаны 2 метадычиыя рэкамепдацыг I нарматыуна-тэхшчцая дакументапыя на ¡муна-стымулфуючы прзпарат "Лгпстымулш-А"(перададзена для ра1гледж:цтя па Петб|'яфармсавет Мшсельхозхарчу Рэспублш Ведарусь).
Укараненн'е у практику ¡мунаетьгмуш'руючага прэнарага "Лтпстымудж-Л" наказала яго высокую лячэбна-ирафшактычную эфектыунасць, склалаю-чую 80-95%, акуппасш, вегэрмнарных мерапрыемстнау састаудяе у сярэдтм 40,39 рублей на 1 рубель затрат.
РЕЗЮМЕ Усов Сергей Михайлович
Иммунологические аспекты терапии н профилактики инфекционного ринограыита я вирус/шй диярен молодняке крупного рогатого скота Ключеьчгс слова: крупный рогатый скот, вирус инфекционного ринотрахеи-1а, вирус диареи, вакцина, иммуностимулятор, продукты пчеловодства, иммунитет, кровь
'"'".ект исследования: телята, коровы, белые мыши, белые крысы, кролики.
Цель исследования: разработка и усовершенствование методов профилактики п терапии инфекционного ринограхеита и вирусной диареи молодняка крупного рогатого скота с использованием биологически активных препарате из продуктов пчеловодства. Цель достигнута постановкой специальных опытов на 2266 телятах, 25 кроликах, 50 белых машах и 70 белых крысах.
Научная новизна исследований заключается в установлении ведущей роли вирусов диареи п инфекционного ринограхеита в заболевании телят респираторными болезнями в хозяйствах Гродненской области, теоретическом обосновании и практическом использовании новые иммуностимулирующих препаратов на основе продуктов пчеловодства (заявка на изобретение в Государственный патентный комитет Республики Беларусь № 960314 ог 24 июня 1996 г., положительные решения патентного комитета Республики Молдова Мз 1122, ! 123, 1124 о г II ноября 1997 г).
На основании проведенных исследований разработаны и утверждены 2 методических рекомендации и Нормативно-техническая документация на иммуностимулирующий препарат "Апнстимулин-А"(представлена для ра-смотрения на Всгбиофармсовет Минсельхозпрода Республики Беларусь).
Внедрение в практику иммуностимулирующего препарата "Апистимулин-А" показало его высокую лечебно-профилактическую эффективность, составляющую 80-95%, окупаемость ветеринарных мероприятий составляет в среднем 40,39 ■ рублей на 1 рубль затрат.
SUMMARY
Usov Sergey Mihailovich
The immunological aspects of therapy and prophylaxie of infectional rhinotracheitis and virai diarrhae of calves
Key words; cattle, virus of infectional rhinotracheitis, virus of diarrhae, vaccine, immunostimulate preparation, the products of bee-breding, immunity, blood.
The siibjekt of research; calves, cows, white mice, white rats, rabbits.
The aim of researh: the developing and improvement of methods of profilaxie and therapy of infectional rhinotracheitis and viral diarrhae of calves using biologically active preparations of bee-breding. To active the objects special tests were carried out' on 2266 calves, 25 rabbits, 50 white mice and 70 white rats.
The scientifice novelty of researh consists in installation of main role of infectional rhinotracheitis and viral diarrhae in calve's diseases in Grodno region, in therpical substantion and practical use of new immunostimulative preparations on the base of bee-breding products (Claim № 960314 of June 24, 1996 tothe state Patent Committee of Republic of Belarus, positive desigious of State Patent Committee of the Republic of Moldova .№.N2 1122,1123,1 124 of November 11, 1997. In accordance whith research results 2 metodica) recomendations and norinative-tecnical documents on immunostimulative preparate "Apiatimulin-A" (the materials are represented to Vetbiopharmcommitee of Ministry of Agriculture of Belarus) were developed and ipaintained. The introduction in practice of immunostimulative preparate "Apiatimulin-A" proved its hight therapy-prophylactic efficiency, that 80-96%, veterynary measures expenses are justified 40,39 rubles / 1 ruble of expenses.
unHcnno K riewrn 03.Uu.*)br. Tup fiat 100 aica. 3nR*a ¡> I13»
tieufvrfiHO hr poronpvwre JDealMHMUK.. ¡¿20012, r.&mcK, Tcwi<5yxKHa,2I.