Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Бивалентная вакцина против инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота

Академия аграрных наук Республики Беларусь Белорусский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. С. И. Вышелесского

УДК 619:616.98:578:616-076:616-084

од

• .по

Белявская Татьяна Васильевна

Бивалентная вакцина против инфекционного рннотрахента и вирусной диареи крупного рогатого скота

16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степей(I кандидата ветеринарных наук

Минск - 1998 г.

Работа выполнена в Белорусском научно - исследовательском институте экспериментальной ветеринарии им. С. Н. Вышелесского

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, старший

научный сотрудник Красочно П.Л.

Научный консультант: академик Академии Аграрных наук

Республики Беларусь , доктор ветеринар ных наук, профессор Ковалев H.A.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Ерошов А.И.

кандидат ветеринарных наук Шнмко В.В.

Оппонирующая организация - Витебская Государственная академия

ветеринарной медицины

| /,• ss; Sc'с f

Защита состоится ____1998 года в ____часов на за-

седании Совета по защите диссертации Д 05.16.01 в Белорусском научно -исследовательском институте экспериментальной ветеринарии им. С. II. Вышелесского по адресу: 223020, г. Минск, и/о Кунцевщина, БелШШОВ им. С. Н. Вышелесского

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Белорусского научно - исследовательского института экспериментальной ветеринарии им. С. Н. Вышелесского

/ . . /\ у

Автореферат разослан ''>•' 1998 года

У ченый секретарь Concia по кишпе диссертаций, доктор ветеринарных наук, профессор

В. Л.

Лннник

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Промышленное ведение животноводства с концентрацией поголовья одновозрастных животных на ограниченных площадях, комплектование комплексов сборным поголовьем (и хозяйств-поставщиков с разной эпизоотической ситуаций способствует широкому распространению пневмо-энгеритов молодняка крупного рогатого скота, которые наносят большой экономический ущерб. В этиологической структуре пневмоэнтеритов телят особое место принадлежит вирусам инфекционного ршютрахеита и диареи, которые вызывают у молодняка поражение респираторных органов и пищева'ри !елыюго тракта, а у взрослых — заболевания репродуктивных органов. Успешная борьба с этими заболеваниями возможна только при наличии надежных Средств специфической профилактики.

Связь работы с крупными научными программами, темами

Работа выполнялась в Белорусском НИИ экспериментальной ветеринарии им. С.Н.Вышелесского с 1994 по 1997 г. и являлась частью темы "На основе биотехнологических методов разработать и усовершенствовать средава диагностики и профилактики наиболее распространенных инфекционных болезней, позволяющие обеспечить стойкое благополучие хозяйств и сохранность животных до 95-98% (№ госрегистрации 142 от 6 декабря 1993 г.).

Цель и задачи исследований

Цель исследований - разработка бивалентной вакцины против инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота и изучение ее иммунологической и протйвоэпйэоотической эффективности. Для выполнения поставленной цели были запланированы следующие задачи:

1. Изучить распространение moho- и ассоциированных инфекции инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатою скота в условиях Республики Беларусь.

2. Сконструировать бивалентную вакцину против инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота и изучить ее иммуногениость.

3. Изучить иммунологическую и противоэппзоотическую эффективность бивалентной вакцины против ПРТ и ВД крупного рогаюго скота.

4. Разработать нормативно-техническую документацию на бивалентную вакцину против ИРТ и ВД крупного рогатого скота.

Объект и предмет исследования

Основным объектом исследований были телята черно-песгрой породы из животноводческих хозяйств Республики Беларусь. В опытах по изучению иммунологической и профилактической эффективности бивалентной вакцины использовано 1432 теленка 2-6 месячного возраста черно-пестрой породы, 50 кроликов породы белый великан, 200 белых мышей.

В работе использовали вакцинные штаммы вируса инфекционного риио грахеи га «МВА-2/К1» и "КМПЭВ-6", вируса диареи «ВК-1№ 28>> "КМИЭВ-7", эпизоотические штаммы - вируса ПРТ — «4016», диареи - ЛУ 10.

Для оценки иммунного сгатуса и диапюешкп иммунопатологии использованы штаммы: Е. coli. М. lysodeiclicns. Вас. subtilis, St. epiderro¡dis № 56.

Предметом исследовании служили 1617 сывороток крови коров, 213 телят до 1 месячного возраста, 1 559 гелят. больных респираторными заболеваниями 1-6 месячного возраста, 1202 гелят, переболевших респираторными заболеваниями 1-6 месячного возраста. 876 молодчика крупного рогатою скота старше Ь месячного возраста. Выполнено более 11000 cepo.ioi нческих. 5500 иммунологических и имму-похимнческнч исследовании.

Гипотеза

В условиях Республики Беларусь широко распространены заболевания, проявляющиеся у новорожденных телят поражением желудочно-кншсшою тракта, у (еля) старше 1-!.5-месячною возраста - поражением органов дыхания, а у взрослых животных - поражением органов воспроизводства. Такой симптомокомплекс позволил нам выдвинуть гипотезу, что э:и заболевание вызывается вирусами инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи или их ассоциацией. После проведения диагностических исследовании и подтверждения нашей гипотезы о роли вышеуказанных во )буди гелей в наголо! пи крупного рогатого скота нами была выдвинута вторая час п. пшотен>( о рафаботке к использовании бивалентной вакцины против инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи для их специфической профи.так I тс и у крупного рогатого скота.

Методоло! 11я и методы проведенных исследований

Для решения посчавленных задач по разработке бивалентной вакцины прот ив IIРТ и ВД крупног о рогатого скот а и изучении ее иммунологической и прозпвоэннзоогнческоп эффективности необходимо было нспользоиаIь серологические, впрусодо!ичеекие, иммунологические, физико-химические методы исследований.

Серологические методы преследовали цель обнаружения в сыворотках крови от животных с различным клиническим состоянием противовирусных антител. Для этого применили реакцию нейтрализации на культуре клеток (А.Ф.Карышева с соавт. 1983, В.Н.Ск-рин с соавт. 1986); реакцию непрямой гемагглготннацни (РИГА) в модификации П. А. Красочно с соавт (1988); иммуноферментный анализ (Х.Шюгт, 1985, В.Н.Сюрин с соавт., 1986; П.А.Красочко с соавт., 1991).

Вирусологические методы применяли для репродукции и накопления вирусов. С -той целыо использованы первично трипсинн-зированные культуры клеток почки эмбрионов коровы, а также перевиваемые клетки почки теленка ПТ (линия Таурус) или МДБК. Культуру выращивали на 0,5%-ном гидролизате лактальбумина или 5%-ном гемогидролизатс с добавлением 10% нормальной или фетальнон

сыворотки крупного рогатого скота и антибиотиков (Н.И.Смирнова с еоавт, 1978; В.Н.Сюрин с соавт., 1986)

Для изучения реактогенных и иммуногенных свойств бивалентной вакцины против ИРТ и ВД крупного рогатого скота опыт проведен на белых мышах п телятах.

Для оценки состояния иммунитета определяли: содержание Т-и В-лимфоцитов но Д.К. Новикову и В.И. Новиковой (1979); бактерицидную активность сыворотки крови по О.В. Смирновой и Т.А. Кузьминой (1968); концентрацию лизоцима в сыворотках крови и титр бета-лнзинов по В.Г. Дорофейчуку (1972); бактериальный тигр интерферона с помощью нефелометрического метода по Н.Е. Мурашовой с соавт. (1971); общий белок сыворотки крови с помощью рефрактометра РПА-2 (Н.М.Беляков, 1978).

Иммуноглобулины классов М и й выделяли из сыворотки крови крупного рогатого скота по Й. Броку (1985) с дальнейшей очисткой полученных фракций методом гель-фильтрации .

Биометрическую обработку цифрового материала, полученного в экспериментальных исследований, проводили по Р.Б Стрелкову (1966) с учетом рекомендации П.Ф. Рокицкого (1967).

Экономическую эффективность применения разработанной вакцины рассчитывали согласно «Методике определения экономический эффективности ветеринарных мероприятий» (Москва, 1982 г.), а также в соответствии с «Методикой определения экономической эффективности использования в сельском хозяйстве результатов научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ новой техники, изобретений и рационализаторских предложений», утвержденной МСХ СССР в 1933 г.

Научная новизна.

Ни основании изучения распространение в животноводческих хозяйствах Республики Беларусь возбудителей вирусных пневмознтеритов установлена устойчивая ассоциация возбудителей инфекционного рино-трихента н вирусной диареи н дано обоснование для конструирования бивалентной вакцины.

Отработаны способы культивирования монокомпонентов вакцины вакцины против инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота в различных клеточных системах, изучена возможность одновременного и отдельного их культивирования.

Сконструирована бивалентная живая кульгуральная вирусвакцина против инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота и тучен иммунный ответ у молодняка крупного рогатого скота при иммунизации моно компонентами и бивалентной вакциной.

Изучена иммунологическая и прогивоэпизоотическая эффективность бивалентной живой кульгуральнон аирусвакцпны против инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота в условиях производства.

По результатам разработки бивалентной живой кульгуральнон пи-русвакпппы против инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крушин о рогатого скота подготовлена заявка в Государственный патентный комитет Республики Беларусь (заявка № 97(1693 от 11 декабря 1997

г.).

Практическая ценность.

Подготовлена нормативно-техническая документация ( временная инструкция по изготовлению и контролю, технические условия, временное наставление по применению) па бивалентную живую культуральную • вирусвакцину против инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота, отработана технология ее производства в условиях лаборатории острых вирусных инфекций БелНИИЭВ им. С.Н.Вышелесского.

Экономическая значимость полученных результатов Внедрение в практику бивалентной живой кульгуральнон внрусвак-цпны против инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота показало профилактическую эффективность 87-94% и позволило достигнуть окупаемости ветеринарных мероприятий 5,74-8,08 рубля на рубль затрат.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту -распространение инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи и их ассоциаций в животноводческих хозяйствах Республики Беларусь, позволяющее рационально планировать протнвоэпизоотических мероприятий на уровне отдельной области и республики в целом.

-методы культивирования монокомпонентов, конструирования бивалентной живой культуральной вирусвакцины против инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота и ее иммунологической активности, что по)воляет получать у иммунизированных телят напряженный иммунитет против инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи.

-профилактическая и иммунологическая эффективность бивалентной живой культуральной вирусвакцины против инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота в условиях производства, что позволяет повышать сохранность телят и предотвращать их непроизводительное выбытие.

Личный вклад соискателя Исследования по изучению распространения ИРТ и ВД крупного рогатого скота и их ассоциаций в животноводческих хозяйствах Республики Беларусь, отработке методов культивирования монокомпонентов бивалентом вакцины на культуре клеток, конструированию бивалентной живой культуральной вирусвакцины против ИРТ и ВД крупного рогатого скота, изучению ее иммунологической и профилактической эффективности проводились лично под руководством академика ААН РБ Ковалева H.A. и док юра ветеринарных наук Красочко П.А. Долевое участие в совместных работах составляет от 40 до 75V

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены и одобрены: на ккекшияч Ученою Совета Белорусского Н1111ЭВ им. С.И.Вышелесскою (19l)-t-1ЧЧ7 i.e.). научно-пракгичеекой конференции "Збережетсп, молодняка c/i inapini - лнюрука розвигку тварннимтви Украпш" (Харьков, 1994), Международной научно-практической конференции "Научно-технический прогресс в сельскохозяйственном произ-

водстве" (Минск, 1997); Международной научно-практической конференции "Зооанзропонозные болезни, меры профилактики и борьбы" (Гродно. 1997), I-íí итоговой научно-практической конференции "Современные проблемы инфекционной патологии человека - эпидемиология, клиника, микробиология, вирусология и-.иммунология" (Минск, 1998).

Публикации

По материалам исследований опубликовано 7 научных работ, Из них 2 в сборниках трудов институтов. 4 тезиса докладов, I статья в журнале.

Структура и объем диссертации

Диссертационная работа изложена на 156 страницах машинописного текста и состоит из: введения, общей характеристики работы, обзора литературы по теме и выбора направления исследований, изложения обшей методики и основных методов исследований, 3 глав собственных исследований, анализа и обобщения ре)ультатов-исследований, выводов .и практических предложений. Список использованной литературы включает 218 наименование работ отечественных и зарубежных авторов. Материалы диссертации иллюстрированы 26 таблицами и 15 рисунками.. В приложении на 17 страницах, приводятся документы и таблицы, подтверждающих результаты отдельных работ, их научную и практическую значимость.

РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ИССЛКДОПАНИЙ

Эпизоотическая ситуация по ИРТ и ВД крупного-рогатого скота в хозяйствах Беларуси.

Обследование коров в хозяйствах Республики Беларусь показало высокую степень инфицированности взрослых животных вирусами диареи - 83,1% и инфекционного ринотрахеита - 62,4%.

Иинфекционный ринотрахеит чаще регистрировали в Брестской и Минской областях (соответственно 91,2% и 74,1%) реже в Витебской и Гродненской областях ( 50,2 и 51,3%). Вирусная диарея была наиболее распространена в Минской, Гродненской, Брестской областях (89,8%, 91,7% и 94,5%), несколько меньше в Витебской ц Гомельской (65,9 и 80,1%). Такое широкое распростране-

ние возбудителей данных заболеваний указывает на персистеицию вирусов и свидетельствует о перезаражении новорожденных телят еще в раннем постна-тальном периоде развития. При анализе сочетания инфекции антитела к одному из возбудителей (ИРТ или ВД) установлены только у 15,2% обследованных животных, a в ассоциации ИРТ+ВД у 61,3% животных. Это свидетельствует об ассоциативном течении инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи, определяющем более тяжелое течение заболевания у молодняка.

При изучении колострального иммунитета у новорожденных телят установлены низкие титры антител (3-4 log2) к вирусам течении инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи.

После переболевания респираторными болезнями у теляг тигры антител резко возрастают до 5-7 log2. что свидетельствует о роли вирусов инфекционного ринограхеита и вирусной диареи в этологии болезни. При исследовании 2119 сывороки- крови телят i;í различных хозяйств Республики Беларусь у больных теля г антитела к одному вирусу обнаруживались у 30,1% животных, а ассоциации у 50,7% животных.

У переболевших теляг антитела к одному m вирусов установлены у 19,1%, к ассоциациям у 68,9%. У молодняка старше 6 месяцев соответственно - 15,1% и 78.3%. Полученные данные свидетельствуют, что у геляi инфекционный рино-трахент п вирусная диарея чаще про i скис г » ассоциации, что вьпыиае! необходимое! ь проведения одновременной иммунонрофилак тики.

l'a tpaño i ка (мша.тещ noii вакпнмы про i ни ипфекциопши о рпио-ipavenui и вирусной диареи upviuioio ¡wiaioio скиш.

£í?J 'Родхкцпя ai i_ej lyupoinmii и .\__ii па ммоп вирусов 111'Г п В Д при раз-Дсльщ>м _н._co!iM ест ншшщиров a i щ ¡ i

Для нпоюв.тення моновакцпп прошв 11PI и ВД крупною poiaioro croia и ci ю. и» i\ Н. i ai 1СН> п|онаь'1ыс ш i аммы: ИРГ - МВД 2/SI. ВД - В К"-1 Л!' 28 и первично 1рш1сишнпрованньк- кулыуры НЭК пли Ть. В качесте пикпельпых KV.H.IVрл.1ьиы\ сред применяю i фсд\ I11'». и 5' .uici;ui.">\мина i ii.ipo.ni un. cpe.iv 'li ла. Однако ми ни мюльные среды не проп)ио.ы ка в Республике be.i.ip\ci. н ошосшельно доро! не. В республике на предирииi пи "Дпалек" на.мя-ен вып\ск среды для кулыур К.1СЮК - 5% i е\н идроли¡a ia. к ко троп адаисировин ряд не-

ревиваемых клеточных линий крупного рогатого скота ГГГ-линия "Таурус", МДБК, ПТ-80.

Нами проведена работа по адаптации апенуированных штаммов ИРТ (МВА 2/81) и ВД (ВК-1 № 28) к новым перевиваемым клеточным линиям, адаптированным к гемогидролизату на протяжении II) пассажей. Выяснилось, что вышеуказанные перевиваемые культуры можно с успехом использовать для накопления вирусной массы при конструировании вакцины. Особенно высокий инфекционный титр установлен при культивировании вирусов на перевиваемых клетках МДБК.

При оптимизации культивирования апенуированных и адаптированных штаммов вирусов ИРТ п ВД к перевиваемым культурам клеток изучено раздельное и совместное их культивирование. Оценку репродукции вирусов ИРТ и ВД при раздельном культивировании на культуре клеток МДБК производили после их ги грации, а после совместной репродукции - с помощью перекрестной нейтрализацию каждого из вирусов стандартными моноспецифичеекимн сыворотками. Было выяснено, что при совместном культивировании на культуре клеток штаммы ИРТ и ВД репродуцируются не в одинаковой степени. Вирус диареи угнетал накопления вируса ИРТ из-за его быстрой репродукции. При ра мель-ном культивировании вирусов ИРТ и ВД происходила их активная репродукция и накопление на культуре клеток МДБК в высоких л и ipax ( до 6,5 ТЦД 50/мл).

Отработка соотношения дот монокомнонентов при конструирова-ШL'L&üiliЫЦ' 1IX!ÜliLüУкппньы[р_(1Ш в ИРТ и ВД на теля_гак.

Для отработки оптимальных доз вирусных компонентов были испытаны ра'шые соо i ношения пиру со» между собой (ги 1ры вируса по 6 ТЦД 50 мл).

В от,не на серонегативных 1еля1ах 1,5-2 месячной) Binpacia в колхозе "Paccnei" Кировскою района были сформированы Hjpyini телж, коюрым диажды с шиервалом 21 я ,кг,с 4 мл игпpaipaxexn.m) была введена бивалсшная вакцина в различных соотношениях и моновакпина.

Vi laiioB.ieno. чю при введении телятам бивалентной ¡закипит,! прошв ИР1 и ВД. в различных соо iношениях шмечаекя выработака специфических ачпмч'л Суля но иммунному о i ногу, оп гичальное соотношение компонентов вирусов 11РГ и ВД, в вакниие было 1:1 при инфекционном титре вирусов 6,0 ТЦД 50/мл

Введение моновакцин и бивалентной вакцины в оптимальных соотношениях вызывало существенное повышение неспецифического гуморального и клеточного иммунитета - в 1,5 раза увеличивалось количество лнзоцима. 1,61 раза повышалась бактерицидная активность сыворотки крови, в 1,2 раза титр) интерферона.

Иммунологическая перестройка организма телят после иммунизации бивалентной вакциной против ИРТ и ВД.

Для, изучения клеточного и гуморальпог о иммунного статуса телят, привитых бивалентной вакциной против ИРТ и ВД крупного рогатого скота в сравнении с моновакиинами был поставлен опыт в.СКП "Острометчево" Брестского района. Установлено, что после введения телятам бивалентной п моновакцин против ИРТ и ВД, отмечается заметная иммунологическая перестройка организма животных. У телят активизируется биосинтез антител М и в классов на!20-130%, повышается концентрация в крови иммуноглобулинов ^ О на 0,7 г/лн ^ М классов на 1,8 г/л, увеличивается количество Т-лимфоцнюв на 12,8% и В-лимфощпов на на 5,9%, число апппенсвяшвающих клеток возрастает в 4,3-4,6 раза.

Изучение напряженности иммунитета у телят, иммунизированных бивалентной вакциной против ИРТ и ВД

При изучении напряженности иммунитета у телят иммунизированных бивалентной вакциной против ИРТ и ВД крупного рогатого скота был поставлен опыт в условиях вивария БелНИИЭВ на 12 клинически здоровых телятах, возрастом 2,5-3 месяца. Телят первой подопытной группы в количестве 4-х ю-лов иммунизировали вирусвакциной бивалентной живой культуральной против ИРТ и ВД крупного рогатог о скота интраграхеально в дозе 2 мл двукратно с интервалом 21 день. Телята второй и третьей подопытной групп - невакцини-рованные. Вакцинированных (1-я подопытная группа) и невакцннированных (2-я подопытная группа) телят заражали эпизоотическими штаммами вирусов ИРТ (4016) и ВД (ВЛУ-10). Через 21 день после заражения невакцннированных телят убили для изучения патологоанатомических изменений . Через 30 дней после второй иммунизации телят заражали вышеуказанными эпизоотическими штаммами вирусов интраграхеально в объеме 50 мл каждого вируса. В результате все животные оказались устойчивы к заражению. Клинических признаков за:

болеваиия у иих не было выявлено. У невакциннрованных телят после заражения наблюдались все клинические признаки болезни.

У вакцинированных и зараженных телят были изучены: титр антител к вирусам I1PT и ВД в РИГА, количество Т и В лимфоцитов, лизоцимная и бактерицидная активность сыворотки крови, титр бета-лизннов.

У телят, зараженных эпизоотическими штаммами, и у вакцинированных бивалентной вакциной отмечалось повышение количества антител в обоим вирусам, но у вакцинированных содержание антител было достоверно большим (Р < 0,01). Вакцинация бивалентной вакцинной против ИРТ и ВД вызвала увеличение Т- и В-лимфоцитов, титры интерферона, концентрацию лизоцима в крови и бактерицидную активность сыворотки крови, бега-лизинов. У зараженных телят отмечалось снижение этих показателей, указывающее па выраженное иммуподепрессиное действие.

Профилактическая и противоэпизоотическая эффективность бивалентной вакцины против ИРТ и ВД крупного рогатого скота.

Профилактическая и противоэпизоотическая эффективность бивалентной вакцины против ИРТ'и ВД крупного рогатого скота испытана в неблагополучных по ИРТ и ВД хозяйствах кировского и Брестского районов.

В результате исследований, проведенных в СКП' "Острометчево" Брестского района установлено , что из 100 невакциннрованных животных заболела 81 голова или 81%, пало и вынуждено убито 18 или 18%, среднесуточный привес на 1 животное составил 415 грамм, затраты на лечение 78000 руб. Среди 100 вакцинированных животных заболело 9 (9%) или на 72% меньше, чем в контрольной группе; падеж и вынужденный убой в данной группе отсутствовал, тогда как в контрольной группе пало 18 телят: среднесуточный привес составил 505 г или на 90 г больше, чем у невакпинированных животных. Затраты на лечение одного вакцинированного теленка составляли в среднем 25000 руб. или на 52000 меньше. Исследования, проведенные в Колхозе "Рассвет" им. К.П.Орловского Кировского района показали, что из 140 невакциннрованных животных заболело 119 телят или 85%, пало и вынуждено убито 25 или 17,8%, среднесут1 очный привес на 1 животное составил 327 грамм, затраты на лечение 91000 руб. Среди 250

вакцинированных животных заболело 23 (9,2%) или на 75,8% меньше чем в контрольной группе; падеж и вынужденный убой в данной группе составил 3 головы (1,2%), тогда как в контрольной группе пало 25 телят; среднесуточный привес составил 487 г или на 160 г больше, чем у невакцинированных животных. Затраты на лечение одного вакцинированного теленка составляли в среднем .33000 руб. или на 58000 меньше.

Экономический эффект на опытную группу за период опыта в СКП "ОстромсТчево" Брестского района составил 14 348 000 рублей, окупаемость ветмеропрнятий - на 1 рубль затрат составила 5,74 рубля, а колхозе "Рассвет" Кировского района экономический эффект на группу составил 66 630 000 рублен, а окупаемость ветмеропрнятий -8,08 рублей на 1 рубль затрат.

ВЫВОДЫ

1. В животноводческих хозяйствах Республики Беларусь отмечается высокая степень инфицпрованности крупного рогатого скота вирусами инфекционного ринограхеига и вирусной диареи которая

' достигает у коров соответственно 62,4% и 83,1%, больных телят - 37,9 и 42,1%, а у переболевших телят - 60,8 и 68,1%.'

2. Мононнфекции ИРТ и ВД выявляют у 2,3 и 12,9% коров, ассоциации ИРТ+ВД - у 61% животных, у больных телят соответственно мононнфекции у 3,6 и 30,2%, ассоциация - у 32,8%, у переболевших телят - 4,3, 10,0 и 51,9%.

3. Раздельное культивирование адаптированных вирусов ИРТ и ВД на перевиваемых культурах клеток МДБК позволяет достигнуть инфекционного титра вирусов 6,0-6,5 ТЦД 50/мл. При совместном культивировании титр вирусов значительно ниже 3,0-4,0 ТЦД 50/мл.

4. Иммунизация телят бивалентной вакциной против ИРТ и ВД с инфекционным титром 6,0 ТЦД 50/мл при соотношении монокомпонентов 1:1 в сравнении с моновалентными Вакцинами способствует выраженному иммунном ответу, у-тел»*, проявляющемуся активизацией биосинтеза антител ^ М и О-классов, эндогенного.

интерферона, повышения концентрации иммуноглобулинов Ig M и lg G-клаееов, увеличением количества Т- и В-лимфоцитов и антиген-связывающнх клеток.

5. Телята, вакцинированные вируевакциной бивалентной живой культуральиой против ИРТ и ВД устойчивы к экспериментальному заражению эпизоотическими штаммами указанных вирусов. В условиях производства профилактическая эффективность вакцины составляет 90,8-91%.

6. Иммунизация телят бивалентной вакциной против ИРТ п ВД крупного рогатого скота снижает их заболеваемость в 3,1 раза, вынужденный убой и падеж в 3,1 раза, способствует повышению среднесуточного прироста живой массы иа 60%, экономическая эффективность 5,74 - 8,08 рублей иа I рубль затрат.

П Р А К I И Ч Е СКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Нормативно-техническая документация на "Вирусвакцину бивалентную живую культуралыную против инфекционного pnnoipaxen-та и вирусной диареи крупного рогатого скоза" (технические условия, временная инструкция по изготовлению и контролю, временное наставление по применению).

2. Заявка на изобретение в Государственный Патентный комитет Республики Беларусь на "Вирусвакцину бивалентную живую культу-ральную против инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота" (заявка № 970693 от I 1 декабря 1997 г.)

Список оиубликопанных работ по теме диссертации

1. Изучение этиологической структуры вирусных респираторных инфекций телят в Беларуси I П.А.Красочко, И-А.Красочко, Т В. Белявская, 11. В.Шаденко //Збережешсть молодняка с/г тварнн -запорука розвитку твариництва Украши. 36.статей иаук.-иракз.конф./ Укр.ААН, Ин-т эксперим.и клин. вет.медицины- Харьков. 1994,- 10-12,

2. Состояние колострального иммунитета у телят при иневмоэн-тсритах / К]меочко П.А., Кра'-очко H.A.. Белянска:-; Т.В., Грибко С.Н., Щаденко 11.В. // Ученые записки Витебском Государственной академии ветеринарной медицины. Т.32,- Витебск, 1995.- С. 26-27.

3. Белявская Т.В. Неспецифнческий гуморальный иммунитет при ассоциации инфекционного ринограхеита и вирусной диареи // Ветеринарная наука-нрои зводству. Сб. научн. трудов, БелНИПЭВ., Вып.32,- Минск, 1996,- С.27-31.

4. Технологические основы изготовления вакцинных препаратов •для профилактики заболеваний телят / H.A.Ковалев, П.А.Красочко,

И.А.Красочко, Т.В.Белявскан// Научно-технический нрогросс и сельскохозяйственном производстве. Матер. Междунар. паучио-ириктнч.конф., поев. 50-летию. БелНИИМСХ./ ААН РБ, БелНН-ИМСХ.'18-19 сентября 1 997 г.- Минск., 1997. С.136.

5.Красочко П.А., Белявская 'Г.В., Колопицкая Е.Г. Специфическая профилактика инфекционного ринограхеита и вирусной диареи крупного рогатого скота ассоциированной вакциной // Зооаитропо-нозпые болезни, меры профилактики и борьбы. Матер. Межд.научн.-иракт. конф.г.Гродно 23-24 октября 1997 г..-Минск, 1997.С.36-37.

6. Иммунологическая эффективность трехвалентной вакцины пптнв инфекционного ринограхеита, вирусной диареи и парагриипа-3 крупного рогатого скота/ Н.А.Ковалев, И.А.Красочко, Е.Г.Колоницкая, И.П.Иванова, Т.В.Белявская / / Современные проблемы инфекционной патолоии человека (эпидемиология, клиника, микробиология, вирусология и иммунология./ Статьи и тезисы докл. 1 итоговой научно-практич.конф. - г.Минск, БелНИИЭМ, 8-9 апреля 1998 г.. Минск, 1998. С.-457-458.

7. Состояние иммунитета при вакцинации телят бивалентной вакциной против инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи / Н.А.Ковалев, П.А.Красочко, И.А.Красочко, Т.В.Белявская // Becni акадэмп аграрных навук Pacnyöjiik-i Беларусь. -1998.- № 2.

i V

Рэчюмэ

Билиускаи Гашиша BacLieyna

Ьшллснгпаи и..........а супраш» {пфекцмГшпги рынатpa\ei гу i

liipvciian n.Hipii Су иной рагатай жывслы

К.иочаиып слоны : шфекцыйны рынатрахе1г, вфусная дыярэя, бшалентная вакцина, ¡муналапчная перабудова аргашзма, ¡муштэт, рэакцыя пепрамой гемаглю-Hiiiam.ii, гумаральны i клетачны ¡мунгпг.

Аб'ект лас.челпаннп — цяляты, трусы, мыты.

■Мпа лис,le.iiiaiiiiwy -- распрацоука б1валептнай вакцыны супраць IPT i ВД буйном рагатай жывелы i вывучэнне яе ¡муналапчнай i супрацьэшзаатычнай эфектыунасш. Мэту дасяга.-н шляхам пастаноую спецыяльных вопытау на 1432 цялятах 2-6-месячнага узроету, 50 rpvcax, 200 белых мышах, даследвання 4667 пробау сыва-paTKi Kpbini, nacTaiioyni 1 1 ООО сералапчных рэакцый, 5 500 ¡муналапчных i ¡Mynaxj личных aiwiiiay.

Иппжовап imnhnn даследвання заклгочаецца у вывучэнт распаусюджвання у жывелагадоучых таспадарках Рэспуб.гпю Беларусь IPT i ВД i ix асацыяцын, адпрацо-уцы спосабау культывавання монакампанеитау супраць IPT i ВД буйной рагатай жывелы у розных клетачных астэмах, вывучэнш магчымасш сумеснага культывавання, канструзраваиш бшалентнай жывой культуральнан в1русвакцыны супраць IPT i ВД буйной рагатай жывелы i вывучэнт ¡муналапчнай перабудовы аргашзма маладмяка буйной рагагай жывелы пры ¡мушзацьп монакампанентам1 i 01валентнай вакцыпай супраць IPT i ВД, вывучэнш ¡муналапчнай i с,г—^ацьэтзаатычнай эфектыунасш б1валетнай* жывой кульгуральнай в1русвакцмны с,. ..раць IPT i ВД буйной рагатай жывелы ва ум'овах вытворчасш. Па вышках pacnpanoyKi падрыхтавана заяука у Джяржауны патэнтны калптэт Рэспублш Беларусь ( N 970 693 ад 11. 12. 97). Укара-ненне у практыку б1ва.тентнай жывой культуральнай вфусвакцынм супраць IPT i ВД буйной рагатай жывелы паказала яе высокую прафпактычнуго эфектыунасш», якая складае 87 - 94"?^ . шго дазваляе значна зшзшь захворванне i адыход маладняка, па-пысщь прадуктыунасиь i дасягнуць акупнасш ветэрынармых мерапрыемствзу пры выкарыстанж распрацоум 5.7J - 8.08 рубля на рубель затратау.

РЕЗЮМЕ Белявская Татьяна Васильевна

Бивалентная оакцшш против инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи крупного рогатого скота

Ключевые слова: инфекционный ринотрахеит, вирусная диарея, бивалентная вакцина, иммунологическая перестройка организма, иммунитет, иммунизация, иммуноферментный анализ, реакция непрямой гемаглюцинации, г уморальный и клеточный иммунитет.

Объект исследования: телята, кролики.

Цель исследования - разработка бивалентной вакцины против ИРТ и ВД крупною рогатого скота и изучение ее иммуполо! ической и противоэпиюотической эффективности. Цель достигалась постановкой специальных опытов па 1432 телятах 2-6 месячного возраста: 50 кроликах. 200 белых мышах, исследования 4667 сывороюк крови, поаановки 11000 серологических реакций,5500 иммунологических и пммупохимпческих анализов.

Научная новизна исследований заключается в изучении распространении в животноводческих хозяйствах Республики Беларусь ИРТ и ВД и их ассоциации. Отработаны способы культивирования монокомноненгов против ИРТ и ВД крупного рогатого скота в различных клеточных системах, щучена возможность совместного культивирования. сконструирована бивалентная живая культуральная вирусвакцина прошв ИРТ п ВД крупного рогатого скота и изучена иммунологическая перестройка организма молодняка крупного рогатого скота при иммунизации монокомионенгами и бивалентной вакциной против ИРТ и ВД крупного рогатою скота, изучена иммунологическая и нрошвоэпизоотическая эффективность биваленшой живой кулыуральной вирусвакцины против ИРТ и ВД крупного рогатою скота в условиях производства. По результатам разработки подготовлена заявка в Государственный патентный комитет Республики Беларусь (заявка N 970693 от 11 декабря 1997г.).

На основании результатов исследований подготовлена нормативно-техническая документация (временная инструкция по изготовлению и контролю, технические условия, временное наставление по применению). Внедрение в практику бивалентной живой кулвтуральной вирусвакцины против ИРТ и ВД крупного рогатого скота показало ее высокую профилактическую эффективность, составляющую 87-94%, что позволяет значительно сократить заболеваемость и отход молодняка, повысить продуктивность и достигнуть окупаемость ветеринарных мероприятий при использовании разработки 5,748,08 рубля на рубль затрат.

IS

SUMMARY Fat) ana Vasilycvna Belyavskaya The bivalent vaccine against infectious rhinotrachcitis and viral diarrhea of cattle Key words: infectious iliinotracheitis, viral diarrhea-, bivalent vaccine, immunologic reformation of the organism, immunity, immunization, immunoenzymatic test, indirect hemagglutination test, humoral and cellular immunity.

Tire subject of the research are calves, rabbits, mice. The object of the research is to develop a bivalent vaccine against infectious iliinotracheitis (1RT) and viral diarrhea (VD) of cattle and to study its immunologic and antiepizootic efficiency. To achieve the object special tests were carried out on 1432 2-6-month- old calves, 50 rabbits, 200 white mice; 4667 blood sera were tested, 1 1000 serological tests and 5500 immunologic and immunochemical analyses were carried out.

The scientific novelty of research consists in studying of prevalence of IRT and VD and of their associations in animal husbandries of the Republic of Belarus; methods of cultivation of monocomponents against IRT and VD of cattle are worked up in various cellular systems, possibility of a combined cultivation is studied; a bivalent live cultural virus-vaccine against IRT and VD of cattle is developed and immunologic reformation of the organism of young animals after immunization by components and by bivalent vaccine against IRT and VD of cattle is investigated; immunologic artd antiepizootic efficiency of bivalent live cultural virus-vaccine against 1TR and VD of cattli is studied under production conditions. According to results of research a claim to the State Patent Committee of the Republic of Belarus ( Claim N 970693 of December 11, 1997) is prepared.

In accordance with research results normative-technical documents ( provisional instructions on preparation and control, technical conditions, provisional recommendations on use) are prepared. The introduction in practice of the bivalent live cultural virus-vaccine against IRT and VD of cattle proved its high prophylactic efficiency, that is 87 - 94%, and this permits to decrease significantly morbidity and mortality of cattle youngsters, to increase productivity and to make it possible that veterinary measures expenses are justified ( 5.74 - 8.08 rubles / I ruble of expenses thanks to use of the recommendations worked out).