Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:ХЛАМИДИОЗНЫЙ АБОРТ ОВЕЦ В УКРАИНСКОЙ ССР И НЕКОТОРЫЕ БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ВЫДЕЛЕННЫХ ШТАММОВ ХЛАМИДИЙ

; v госагропром бсср -"

белорусский научно-исследовательский институт экспериментально!! ветеринарии нм. с и. вышелесского

' - . " На правах рукописи .

Для служебного пользования

Экз. № 000097 *

ГЕРИЛОВИЧ Павел Петрович

УДК 619:616.98:587 831.1:636.3

ХЛАМИДИОЗНЫЙ АБОРТ ОВЕЦ . В УКРАИНСКОЙ ССР И НЕКОТОРЫЕ

БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ВЫДЕЛЕННЫХ ШТАММОВ ХЛАМИДИЙ

16.00.03 — ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология и микология

гл - ■

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

"Минск 1986

' Работа выполнена в Украинском ордена Трудового Красного .. < Знамени научно-исследовательском.институте экспериментальной..*-.:...,.. • ветеринарии .'Г:'Л.;:.. ■ .■ ■ •v ■■ І-Л '■

• Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, ■-. г.. ■:.■'.'■■' ■ . ' ' профессор Андреев Е.В.

Официальные оппоненты:- доктор ветеринарных наук,. ' .~ ■;;:* профессор Ковалев H.A..

.■■""■. кандидат биологических наук,

-..'доцент BopTHirv* ЬЛ.

Ведущее учреждение: Всесоюзный ордена Ленина научно-исследовательский, институт экспериментальной ветеринарии имJ Я.Р.Кова- ■ ■'. " ленко . --у- - ■ V';"

Запрета диссертация состоится * ' г,

в*. /У. часов на заседании специализированного совета KI22.I4.0I. при Белорусском научно-исследовательском'институте вксперииентальнойветеринарииим.С.Н.Вышелесскогопоадресу: £23020. г.Минск, п/о ІСунцешцина,„ул.Вышелесского,2, БелНЙИЭВ С диссертацией можно ознакомиться в би&лиотеке института. .

Автореферат разослан ' * 1966 г. ■

Ученые секретарь специализированного совета'■;■■. ■

доктор ветеринарных наук \ В.Я.Линних - -

. . .".:71 " . Белорусский научно-

"исследовательский-. ■

■ Т ""''.■/■ ■^."-J .■■ ИНСТИТУТ- эксперимен-

_ : .. . . тальной ветеринарии : .,;-..'Госагропрома БССР,1936 .

ОЩЛЯ ХАРШЕРИСШа РАБОТЫ

Аутуадьносу^ темы. Известно, что одной на причин» существенно сдершвшицих развитие овцеводства» является хланидмоэныЯ аборт овец, который имеет достаточно широкое распространение как за рубежом, так к в кашей стране /А.А.Волкова, 1967; D.Д.Караваев, Н.Н.Крюков, 1970; В.Л.Ковалев, 1970; Р.Х.Хаыадеев, Х.З.Гаф-фаров, 1973; Г.А.Сарыев и сотр., 1973; П.М.Митрофанов, I960 ; Ы.К.Штефан, 1983 ; Stamp J.I. et al. I960; Olroud P., Bog»r T. •t »г.195б; Baselhoret 1.1957 ; Огнянов Д., I960; Сеыержжмев Б., 1969 ; 8Ь»*м p.s. Х9ЙО; и др./.

В Украинской ССР найлсдается концентрация овцепоголовья на! ограниченной территории в связи о высокой распаханностм> земель, а его, в свои очередь, влечет за собой изменение традиционной технологии содержания овец, создаются новые условия дал течения опиэоотического процесса при различных инфекционных заболеваниях« Хяашщиозкый аборт овец наносит значительный экономический ущерб народному хозяйству. Вместе с тем, многие вопроси эпизоотологии и особенно меры борьбы с этим заболеванием в Украинской ССР пока недостаточно изучены, а ряд полезных разработок не внедрены в: ветеринарную практику, что в значительной мере снижает эффективность ветеринарных мероприятий.

Цель работы, Выявить закономерности проявления болезни и течения анзоотий хламцдиозного аборта овец в Украинской ССР и .разработать комплекс мероприятий, повышающий эффективность борьбы с ним. ■*-'.'■

Задачи исследований.

I. Изучить*эпизоотическуо ситуации по хлемндиоэноцу аборту.

овец в УССР, определить «пипттд^иуи "аЧя"Ч" . '-

РГАУ-МСХА имени К.А. Тнмнрнззвэ ; ;

ЦНБ кмснн Н.И. Железнояа j Фонд научньД Литературы

заболевания в инфекционной патологии овец и эффективность проводимых оздоровительных мероприятий.

2. Изучить нлинино-влиэоотологичосние особенности проявления хлаиидийной инфекции в стационарно неблагополучных овцеводческих хозяйствах^

3. Выделить штаммы возбудителя хламидиоэного аборта овец и изучить их биологические свойства}

4. Изучить серологические и гематологические сдвиги у переярок* окспериыеятально зараженных штаммами хламидмй, выделенными от овец и крупного рогатого скота {

5. В эксперименте на овцах и ягнятах воспроизвести хлами-дноэный конымктивнт;

6. Разработать комплекс ветеринарно-санитарных мероприятий, ловшавдих эффективность борьбы о хламидиоэным абортом овец.

Научная новизна. Впервые проведен анализ и обобщены данные распространения и проявления хламидиоэного аборте овец в Украинской ССР за период 1973-1994 гт.. составлена картограмма распространения хламидиоэного аборта овец, определен економическяй ущерб, наносимый овцеводству втиы заболеванием в республике, изучены причины повторных всшшек заболевания 8 ранее оздоровленных хозяйствах.

Изучены биологические и антигенные свойства штаммов хлами-днй, выделенных от рогатого скота а Украинской ССР; показатели Ярови при экспериментальном заражении овец культурами хламиднй.

Определена чувствительность хладедийного гемагглютинина к ряду фиэико-химичесних факторов.

В системе мер профилактики и ликвидации хламидиоэного аборта: овец с цель» сохранности приплода показана экономическая целесообразность обработок суягных овец антибиотиками тетрациклн-нового ряда. На основании проведенных исследований разработаны

мероприятия по оздоровлению хозяйств от хлаыидиоэного аборта овец.

Практическая ценность. Разработанные мероприятия включены в "Методические рекомендации по диагностике, профилактике и лечению хламидиозного аборта овец", которые внедрены в двух областях Украинской ССР; внедрение мероприятий позволило снизить экономический ущерб« наносимый хозяйствам этим заболеванием и повысить аффективноеть борьбы с ним.

. Выявленная закономерность периодичности вспывек заболевания позволит прогнозировать эпизоотическую ситуацию по хламидиоз-ному аборту овец в ранее неблагополучных хозяйствах.

Апробация работы. Основные материалы диссертации доложены и обсуждены на конференции молодых ученых и специалистов /Харьков, 1963 г./, посвященной 60-летию образования УШИЭВ,' на конференции молодых ученых Укр.НИВИ /Киев, 1985 г./, на Всесоюзной научно-методической конференции "Меры профилактики, борьбы о респираторными, желудочно-кишечными и другими инфекционными болезнями овец" /Новочеркасск, 1985 г./, на заседаниях Ученого Совета УШИЭВ /1983, 1964, 1985 гг./.

Публикации, По теме диссертации опубликовано 3 научных статьи,

: Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 220 страницах машинописного текста и состоит из введение, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, предложений для практики, списка литературы и приложения. Диссертация иллюстрирована 34 табли-. цами, 16 рисунками, в том числе 2-мя картограммами к 3~мя фотографиями. Список литермуры состоит из 196 источников, из кото-рык 94 иностранные.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

I.'Материмы и методы

. Изучение эпизоотологии хламидиоэного аборта овец в Украинской ССР проводили на основании материалов отчетности Главного управления ветеринарии Министерства сельского хозяйства УССР с 1973 по 1904 гг., отчетов о работе республиканской, областных и районных ветеринарных лаборатория, документов ветеринарного учета районных станций по борьбе с болезнями сельскохозяйственных животных, а также собственных данных обследования хо-аяйств.

Закономерности проявления эпизоотического процесса при хламидиозном аборте овец изучали с использованием методов, изложенных в Рекомендациях по методике эпизоотического исследования /под редакцией И.А.Бакулова, 1975/, в Методических указаниях по впязоотологическоцу обследованию Аі.А.Бакулов, Г.Г.Юрков, А.П.Песковацков, В.А.Ведерников, 1982/. ,

Определяли распространенность заболевания, уровень и динамику заболеваемости, проводили анализ динамики интенсивности проявления епиэоотеческого процесса с учетом сезонности. Результаты анализа полученных материалов отображали в таблицах, графиках, диаграммах и картограммах. Статистическую обработку »пи-зобтологичесхих данных проводили по методикам, изложенным в книге: "Математические методы в эпизоотологии" /И.Г^Гаршмс, В.М.Константинов, 1975/.

. Изучая экономический ущерб и экономическую эффективность' проводимых оздоровительных мероприятий в неблагополучных по хламидиозноцг аборту овец хозяйствах, производили расчеты по

методике, описанной в книге "Организация и экономика ветеринарного дела" под редакцией А.Д.Третьякова /1963/•

Возбудителя хламидиозного аборта овец выявляли методом световой микроскопии мазков-отпечатков плаценты, вцпелениЯ иэ родовых путей абортировавших овец, паренхиматозных органов абортированных плодов и мертворожденных ягнят. Маэки-отпечатки из патологического материала фиксировали метиловым спиртом и окрашивали по Романовскому-Гимза.

Выделение, культивирование и определение инфекционного титра культур возбудителя проводили на 6-7-дневт« куриных эмбрионах /КЭ/ путем инокуляции хламидиосодержащего материала в желточный мешок. Для заражения на хорионаллантоисцую оболочку использовали 9-10-дневных КЭ. Всего в работе использовали 5116 КЭ.

Выделенные культуры возбудителя идентифицировали методами световой и электронной микроскопии с использованием негативного контрастирования. Электронную микроскопию изучаемых штаммов хламидий проводили совместно1со старшим научным сотрудником УНИИЭВ Коноваловым В.Н. Серологическую идентификацию выделенных культур возбудителя осуществляли в реакции связывания комплемен та /РСК/ с. хламидийной и орнитозной иммунными' сыворотками биофабричного производства. .

В опытах по изучению спектра патогеиности выделенные штаммов хламидий использовали 12 переярок породы прекос, 3 овцы, 5 ярит. Для изучения спектра патогеиности выделенных культур и референтных штаммов хламидий /"Лисий" и "К-2" из Таджик НИВИ/ использовали 100 белых мышей и 30 морских свинок.

Агглютинирующие свойства аллантоисной жидкости КЗ,., инфицированных штаммами хламидий, изучали в реакции гемагглютинации

?

аритроцитов кур, человека /0(1) группы крови/, морских свинок и барана, Аллантоисную жидкость КЭ, инфицированных выделенными и референтными штаммами хламидий, разводили от 1:10 до 1:10240 стерильным физиологическим раствором /рН 7,4/. добавляли 0,8 % - ную суспензию эритроцитов в соотношении 1:1, встряхивали и помещали на I час в термостат при температуре 37°С. Изучали воздействие на гемагглптинин хламидий различных физико-химических факторов. Специфичность хламндийного гемагглптинина определяли в реакции торможения гемагглвтинации /FITA/ с сыворотками экспериментально и естественно инфицированных хламидия-ми животных.

Сыворотки крови от больных и экспериментально зараженных животных исследовали в РОС с орнитоэкым группоспецифическин антигеном по общепринятой методике. Разведение сывороток крови готовили от 1:5 до 1:320.

2. Распространение и основные показатели эпизоотического процесса при хламцдиозноы аборте овец в Украинской ССР

В Украинской ССР хлаыидиоэный аборт овец впервые эарегист-

і

рнрован в 1973 году. За период с/1973 по 1984 г. в республике зарегистрировано 206 неблагополучных по отому заболеванию пунк- . тов, в которых заболелоЗ1793• головы овец, За ©тот период исследовано серологически 3.7 млн.проб сыворотки крови от овец.

Анализ данных ветеринарной отчетности по хламидиоэноцу аборту овец за анализируемый период /1973-1994 гг./ в разрезе областей свидетельствует о значительном распространении данного заболевания на территории республики. Только в двух областях из 25 - Волынской и Закарпатской не зарегистрированы случаи

абортов среди овец ХЛВМИДИЙНОЙ этиологии» что объясняется сравнительно ограниченным ввозом овец в названные области из других регионов. '

Динамика интенсивности эпизоотического процесса заболевания в течение анализируемого периода характеризовалась следую- * щими особенностями: четко прослеживается два подъема количества заболевших овец в республике - первый в 1975 г. / 2980 голов овец/ и второй в 1978-1900 гг. с максимальным пиком, приходящимся на 1979 г. /7371 голова овец/. Количество выявленных неблагополучных пунктов в республике по хламидиоэноцу аборту овец также имело два подъема: в 1975 г. /15/ и в 1978 г. /33/. С 1979 по 1964 г. количество неблагополучных по заболеванию пунктов находилось в пределах 25 ... 14.

Наибольшее количество неблагополучных по заболеванию пунктов и Зольных овец зарегистрировано в Житомирской - 40 /19,4 % / и 3599 /П,3 %/, Крымской - 32 /15.5 % / я 8268 /26,0 % / и в Ивано-бранковской - 20 /9,7 % / и 2389 /7,5 % / областях соответственно.

.На основании данных по выявлению неблагополучных по хлаки-диозноыу аборту овец пунктов (в разрезе областей) нами состав-., лена картограмма распространения заболевания в Украинской ССР.

С 1976 по 1980 г. в республике количество серологических, исследований на хламидиоэный аборт овец значительно увеличилось, ЧТО было обусловлено введением в ветеринарную практику "Временного наставления по постановке и учету РСК и РДСК при диагностике энзоотического аборта овец и коз". После 1980 г. с введение)* в практику массовой вахцинопрофилактихи хламидиозного аборта и отменой серологических исследований на данное заболевание, кроме случаев, связанных о установлением диагноза (Инструкция по.

профилактике и ликвидации хламидиоэного (энзоотического) аборта овец и коэ, утвержденная Главным управлением ветеринарии Ю СССР 12.02.1901 г.) частота серологических исследований резко снизилась. Всего за анализируемый период - (1973-1984 гг.) исследовано 3,7 млн.проб сывороток крови и выявлено более 48 (1,3 %) тыс. положительно реагирующих на хламидиоз овец.

Заболеваемость овец хламидиозньм абортом по республике в расчете■на 10000 голов была максимальной в период 1978-1979 гг.-6,5-6,16 и минимальной 8 1934 г.-0,07. Самая высокая заболе- -ваемость овец хламидиозтм абортом отмечалась в Ивано-Франков-скойобласти в 1979 г. - 67,6:10000, а минимальная в Одесской области в 1964 г. - 0,03:10000 голов.

Смертность при данном заболевании в целом по республике варьировала от 0,56:10000 голов в 1975 году до 0:10000 в 1994 г., в среднем за анализируемый период составила 0,1&(Л,054 на 10000 (Р<0,01). .

Летальность при.хламидиозном аборте была самой высокой в 1983 г. - 20,2 % от числа больных овец.

Изучение сезонных изменения интенсивности эпизоотического процесса и клинического проявления хламириозного аборта овец показало, что заболевание регистрируется во все сезоны года, но клиническое его проявление связано с периодом окотов в зимне-весенний сезон.

В инфекционной патологии органов размножения овец,, вызываемой различными возбудителями, хламидиозный аборт имеет значительный удельный вес. За анализируемый период в Украинской ССР листериоэом заболело 38305 овец - 30,3 хламидлозным абортом - 31793 (29,2 %), пастереллезом - (10,0 %), инфекционным

зпидидимиток - 17364 (16,0 %), сальпти.^.^зом - 2201 (2,0 %) и кампилобакте риоэ ом - 744 (0,7 Я овец.

3. Распространение хламидиоэного аборта овец в Харьковской области

Наряду с изучением эпизоотологии хламидиоэного аборта овец на территория Украинской ССР tt .ee отдельных административных областей по материалам отчетности 1УВ МСХ УССР, провели детальное эпиэоотологическое обследование Харьковской области и ее неблагополучных по заболеванию пунктов ( эпизоотических очагов ).*

Изучение эпизоотологии хламидиозного аборта овец в Харьковской области показало, что источником заболевания явились племенные овцы порода мерннофляйш, завезенные из ГДР в 1975 год/. В. дальнейшем в различных районах области источником инфекции служили латентно больные животине, закупленные в ранее неблагополучных по этому заболеванию овцеводческих хозяйствах* Всего заболевание зарегистрировано в девяти хозяйствах шести (24 %) районов Харьковской области, Б некоторых из лих отмечались повторные вспышки заболевания о интервалом 2-3 года«.

Самая высокая заболеваемость овец хламидао зным абортом в области за период 1977-1985 гг. была зарегистрирована в 1079 г, - 18,2:10000, не отмечено случаев заболевания овец хламидиоэом в 1984 г. В среднем пс Харьковской области за период-регистрации • хламидиоза (1977-1985 гг.) заболеваемость составляла 7,32*2,2 на 10000 голов /?< 0,01/.'

4* Экономическая эффективность ветеринарно-санитарных мероприятий в хозяйствах, неблагополучных по хлшдаиоз-ному аборту овец

Результаты изучения эффективности оздоровительных мероприятий при хламщшоэном аборте овец в колхозе им. Ватутина

В-Бурлукского района Харьковской области показали, что применение вакцкнопрофилактики на половозрелом овцепоголовъе способствует резкому- сокращению абортов и мертворождений, но полностью заболевание не искореняет. Ягнята, полученные в неблагополучных по заболеванию отарах, оставались скрытыми носителями хламидой и при их первой суягности заболевание проявлялось клинически. Удалить из отары всех абортировавших и латентно больных- овец практически было невозможно, 5 связи с этим применяли с лечебно-профилактической цель» обработку овец неблагополучной отары при вспшке заболевания антибиотиками тетрациклинового ряда и вакцинацию всего поголовья в течение 2-3 лет, включая подученный приплод.

6 неблагополучной по хламиди ознобу аборту овец отаре наблюдался падеж ягнят по причине пневмознтеритов хламидийной этиологии. Хорошие результаты при лечении таких ягнят получены путем применения тетраолеана в дозе 25 мг/кг живой массы в течение 5 дней. Экономическая эффективность лечебных мероприятий на I рубль затрат составила 12,9 рубля. Лечение ягнят, больных пневмоэнтеритами хламидийной этиологии, позволяло повысить сох. ранность приплода, полученного в неблагополучной по заболеванию отаре. /'

По нашим расчетам коэффициент ущерба на одно заболевшее хламидиоэнда абортом животное в Украинской ССР составлял 45,5 рублям Убыток, нанесенный заболеванием овцеводческим хозяйствам УССР, составил за период 1973-1984 гг. 1,44 млн.рублей.

Коэффициент экономического ущерба при оздоровлении неблагополучного по хламидиозноцу аборту овцепоголовья с помощью антибиотикотерапии с последующей вакцинацией в течение 2 лет

на одно заболевшее животное снижался до 13,5 рубля. Экономическая эффективность проведенных ветеринарно-санитарных мероприятий в колхозе им. Ватутина за 2 года составила в среднем 3 рубля на I рубль ветеринарных затрат.

5. Некоторые биологические свойства выделенных штаммов . хламидой

Из патологического материала от абортировавших овец и абортированных плодов в колхозе им. Ватутина В-Вурлукского района н совхозе им. Петровского Изюмского района Харьковской области выделили культуры возбудителя хламидиозного аборта овец.

Выделенные штаммы возбудителя хламидиозного аборта овец 1 кэ паренхиматозных органов абортированных плодов были условно обозначены "25" и "О", Агент "Ц-66", выделенный Л.О.Бабкиным в 1966 г. из селезенки.коровы, был индентифицирован нами также как штамм хламидий. ■ ' '

При культивировании изучаемых штаммов хламидий в желточных мешках КЭ наблюдали характерные изменения у павших эмбрионов в виде кровоизлияний в области туловища, головы, ног, гиперемию сосудов желточного мешка. С помощью световой микроскопии идентифицировали элементарные тельца изучаемых /"25", "О" и "И-бб"/ и референтных/*Лисий" и "К-2" ТадлшкНИШ/ штаммов по размеру И форме. По Романовскочу-Гимза элементарные тельца хламидий окрашивались в сине-фиолетовый цвет на голубом фоне клеток, располагались скоплениями в цитоплазме клеток.и вне их. Под электронным микроскопом элементарные тельца выделенных штаммов хламидий имели округлую форму, диаметром 290-350 нм.

В РСК хламидик обладали выраженными антигенными свойствами.

Приготовленные из них группоспецифические антигены по методу В.И.Червонского И О.М.Поповой /1959/, выявляли комплементевя-эыващие антитела, в орнитозной и хламидийной сыворотках биофабрк-чного производства в резведениях от 1:20 до 1:40.

Изучение спектра патогенноети выделенных ытаммов хламидий проводили на белых мышах и морских свинках. Внутрибршияное введение возбудителей хламкдиоза не вызывало гибели беременных мышей. Они приносили мертвое и нежизнеспособное потомство. Подкожное и интраназальное заражение белых мышей вызывало их гибель на 8-1? сутки. Клинически заболевание у зараженных белых мывей проявлялось потерей аппетита, адинамией, вэъерошенностью волосяного покрова.

Изучаемые штампы хламцпий вызывали аборты /100 % / у беременных морских свинок. Спустя 3-6 суток после абортирования часть морских свинок погибала. Процент гибели зависел от инфекционного титра штамма хламидий. При заражении культурой хлами- ■ дий "25я гибель морских свинок составила - 40 "О" - 20 %, "Лисий" - 80 % и "К-2" - 60 %. После абортирования в результате заражения культурой хламидий "И-66" гибели среди морских свинок не отмечено.

Клинически заболевание у заражённых морских свинок проявлялось потерей алпетита( волосяной покров тусклый, взъерошен. . У абортировавших животных наблюдались истечения из половой щели, плацента гиперемирована с участками некроза. В маэках-отпе-чатках из паренхиматозных органов абортированных плодов выявляли элементарные тельца хламидой. В сыворотках крови от абортировавших морских свинок в РСК с орнитозным антигеном установлен но наличие комплементе вяз ыващих антител в титрах 1:5 - 1:20.

Изучение патогенных свойств штатов хлащдий "25" и "М-бб", выделенных от овец и китного рогатого скота, на переярках, 14

овцах и ягнятах показало, что у переярок хлемцдии вызывали повышение температуры тела до 39,9-41,0°С. На 3-4 день заражения угнетение и субфебрилъная лихорадка перемежающегося типа.

На 5 день после заражения у переярок двух подопытных групп была выявлена лейкопения (4,1±1,4 и 2,9+0,2Ч09 клеток/л крови, Р< ,0,05). На 15 день у одного животного отмечен лейкоцитоз (12'10® клеток/л крови), шесть имели нормальное количество лейкоцитов и у одного животного сохранялась лейкопения (3,2*10^ клеток/л крови). На 40 день у животных подопытных групп вновь зарегистрировали лейкопению (5,0+0,3 - 4,8^0,3*10® клеток/л крови), К 60 дню у 7 животных количество лейкоцитов находилось в пределах физиологической нормы и у одного животного сохранялась выраженная лейкопения (3,6:10® клеток/л крови).

У переярок контрольной группы в течение всего опыта количество лейкоцитов оставалось в пределах физиологической нормы (6,4 - 10,0*10® клеток/л крови).

Лейкоцитарная формула до заражения у переярок была в пределах физиологической нормы. На пятый день после заражения отмечалась нейтрофилия с резким регенеративным сдвигом ядра влево. У животных первой группы (штамм "25") процент юных4нейтрофилов и палочкоядерных составлял в среднем 2,0±0,4 и 7,3^1,5, соответственно, от общего количества лейкоцитов. У животных второй группы .(гаташ "¡4-66") количество шък и палочхоядерных нейтрофилов составляло 1,5±0,3 % и 7,8^0,5 %, Нейтрофилия у животных наблюдалась в течение 55 дней после заражения (срок наблюдения). На 46-60 день у зараженных живогных отмечалась эоэинофилия. Процент эозинофилов у животных первой группы составил 15,8+2,8 -II,'8+1,4 /?< 0,01/, второй группы - 14,3±Г,8 /Р< 0,02/ -10,5+1,2 /?< 0,1/ от общего количества лейкоцитов.

Групп (»специфические ко шц еиентс вяз ыв&пци в антитела к ор-- нитоэноцу антигену выявили на 10 день после заражения в титрах 1:5 - 1:20 у 6 /75 %/ животных, на 15 день в титрах 1:5 - 1:40 у всех зараженных животных. На 46 день опыта хламидийные антитела выявили только у 2 (25 50 зараженных животных в титрах 1:5 - 1:10, на £0 день у 5 (62 %) и тигре 1:5 - 1:10 и у одного животного в титре 1:80.

У переярок контрольной группы серопоз итивности к группо-специфическоцу оркитозноцу антигену в течение всего опыта выявить не удалось.

Одна из переярок, зараженная штаммом хламидий, выделенным от крупного рогатого скота, оказалась суягной и на 50 день после заражения принесла нежизнеспособного ягненка, который через несколько часов после рождения пал.'У'етой переярки,в отличие от несуягных,в течение 46 дней после инокуляции хламидий отмечалась лейкопения«

У несуягных овец хлаыидийная инфекция независимо от использованного для заражения штамма хламидий протекала без видимых клинических признаков. На 90 день после заражения животные подопытных групп были подвергнуты убою. В мазках-отпечатках из селезенки, печени, легких и слизистой матки, окрашенных по Романовскоцу-Гкмза, выявляли 'элементарные тальца хламидий. В селезенке и печени они выявлены у 100 % (б) зараженных животных, в легких у 50 % (4) и в слизистой матки у одного животного (12,6 %).

У овцы, родившей нежизнеспособного ягненка, элементарные тельца хламидий выявили также в мазках-отпечатках из молочной

железы и подчелюстных лимфатических узлов. 16

6. Экспериментальный конъюнктивит хламидийкой этиологии

Дія воспроизведения хламидиозного конъюнктивита использовали 3 овцы возрастом 1,5 года и 5 ягнят.3-месячного возраста. Заражение '-животных проводили 10 %-ной суспензией желточных мелков КЭ, инфицированных хламидиями штаммов "25м и "И-66", в рет-робульбарное пространство н под конъюнктиву третьего века. Контрольным животным вводили аналогичным способом 10 ^-ную суспензию желточных мешков КЭ, не инфицированных хламидиями.

У зараженных уламидиями животных отмечали повышение температуры тела на 2-3 день после инокуляции хламидий до 41,0°С, тогда как у животных контрольной группы температура тела быка в пределах 38,6-Э0,9°С. В эти же сроки у зараженных хламидиями животных отмечали отек третьего века, фолликулит и слезотечение. На 5-6 день наблюдался отек век,"незначительное сужение глазной щели, сероэно-слизистые выделения из глаза. Конъюнктива третьего века гиперемирована, отечна, фолликулы увеличены, бело-роэового цвета размером с просяное верно и более. На 10...15 сутки после заражения отечность конъюнктивы исчезла, . однако слабші гиперемия и фолликулярная реакция сохранилась в течение 36 дней (срок наблюдения).

У контрольных животных на месте введения суспензии желточного мешка КЭ наблюдалась слабая гиперемия конъюнктивы, которая на 2-3 день после инокуляции исчезла.

До заражения у животных всех групп количество лейкоцитов было в пределах физиологичесхоЯ нормы. На 5 день у зараженных животных отмечалось снижение количества лейкоцитов крови до 4,3±0,Э - 5,8+0,4 '10® клеток/л крови /Р< 0,01/.отом у животных, зараженных штаммом хламидий "25",лейкопения была более

17

выраженной. На 14-21 день у животных подопытных групп количество лейкоцитов находилось в пределах физиологической'норны (7,8±0,I2 - 8,8±1,5 клеток/л крови)« а на 25 день вновь снизилось до 4,5^0,5 - 5,б±0,1 клеток/д крови /Р< 0,02/. Выраженная лейкопения у животных этих групп_ наблюдалась до 38 дня заражения (срок наблюдения).

У животных контрольных групп количество лейкоцитов находилось в пределах физиологической нормы.

При исследовании сывороток крови зараженных хламчдиями овец и ягнят комплементосвязываюцие антитела к орнитозноцу антигену выявили на 14 день после инокуляции только у овец в титре 1:10, У ягнят комплементе вяз ыващие антитела зарегистрировали на 21 день после заражения в титре 1:5. К 25 дню титр антител у всех зараженных овец и ягнят достигал 1:10« К 33 дню у ягнят он снизился до 1:5 (у одного ягненка антител выявить не удалось), у овец находился в пределах 1:10.

В мазках-отпечатках, окрашенных по Романовскоцу-Гимза, элементарные тельца хламидий выявили у 100 % зараженных овец и ягнят в селезенке и печени и только у одного животного в легких.

7. Изучение гемагглютиниигщих свойств штаммов хламидий, выделенных от животных различных видов

Для размножения хламидий использовали 9-10-дневные КЗ, которым на хорионаллантоисцую оболочку инокулировали 10 %-ную суспензию желчных ыепжов КЭ, инфицированных штаммами хламидий "25", "О", "К-2" (хламидиоэного аборта овец), "Н-бб" (вцделен от крупного рогатого скота) и "Лисий" (выделен от лисицы).

После 2-х последовательных пассажей легко адаптировались к размножению на хорионаллаытоиеной оболочке КЗ хламидии

штаммов "Лисий" и "И-66", вызывая гибель зараженных эмбрионов (50-100 %) на 4-9 день.

У павших КЭ отмечали отечность хорионаллантоисной оболочки» бело-серые поражения на месте введения суспензии хламидий и по ходу кровеносных сосудов, напоминающие "бляшки", увеличение количества аллантоисной жидкости в сравнении с контрольными КЭ. Сосудистая реакция в желточном мешке зараженных КЭ была выражена слабо.

Хламидии вшивали задержку роста массы тела КЭ. Масса тела эмбрионов, погибших в течение 4 пассажей на 14-19 день инкубации, при инфицировании штаммом хламндий "Диска", равнялась 11,2^0,4, штаммом "Ы-66" - 10,8±0,4 г. Касса контрольных КЭ в эти же сроки равнялась 20,5±1,0 г! В мазках-отпечатках из пораженных участков хорионаллантоисной оболочки КЭ, инфицированных штаммами хламидий "Лисий" и "М-бб", во всех случаях выявлены элементарные тельца возбудителя. '

(./" Аллантоисну» жидкость КЭ, инфицированных хламндкямн штаммов "25", "О", "К-2", "Лисий" й "М-бб" на хорионаллантоисную

оболочку, исследовали в реакции гемагглютинации (РТА) с 0,8 % -

\

ной суспензией эритроцитов петуха на стерильном физиологической растворе /рН-7,4/. Б результате в аллантоисной жидкости КЭ, инфицированных штаммами хламидий "Лисий" и "М-бб", выявили ге-магглютинин к эритроцитам петуха в титрах 1:20 - 1:10240. В аллантоисной жидкости КЭ, инфицированных штаммами хламидий "25", "О" и "К-2", гемагглютинин к эритроцитам петуха отсутствовал. При инфицировании изучаемыми шташамя хламидий КЭ в

желточный мешок в аллантоисной жидкости гемагглютинин к эритроцитам петуха выявить не удалось. Отрицательными были результаты исследования аллантоисной жидкости контрольных ,КЭ.

При заражении КЭ различными дозами культур хламидий

штаммов "Лисий" и "М-66" существенного различия в титре гемагглютинина не отмечено.

В аллантоисной жидкости КЗ, инфицированных штаммами хлами-дий "Лисий* и "Н-66я, гемарглютинин выявили также к еритроцитам человека (0/1/ группа крови) в титрах 1:320 - 1:2560 и к эритроцитам морской свинки и барака в титрах 1:16 - 1:32.

Супернатант, полученный в результате улътрацентрифугиро-вания (20 тыс.я ) аллантоисной жидкости КЭ, сохранял гемаг-ГЛЕГТИНИрутеще свойства в более низком титре по сравнению С ИСХОДНЫМ материалом. Осадок также обладал гемагглютинируицими свойствами. В мазках, приготовленных из осадка, выявляли обильное содержание элементарных телец хлаыидий, в то время как в супернатанте они отсутствовали. Это указывает на наличие двух типов гемагглютинина у хламцдий: связанного с элементарными тельцами возбудителя и растворимого. Обработка аллантоисной жидкости КЭ диэтилевым зфирои повышала титр гемагглютинина в 4 раза, что, по-видимоцу, объясняется дезинтеграцией субъединиц гемагглютинина, входящего в состав элементарны* телец хлаыидий.

Гемагглютинин хламидий является термолабильной субстанцией и полностью разрушается при 60°С в течение часа. Прогревание инфицированной аллантоисной жидкости в течение часа при 50°С снижало ее гемагглютинирующую активность в 2-8 раз, при 55°С в 8-32 раза.

'Воздействие хлороформом, ультрафиолетовыми лучами, длительное хранение при 4°С, многократное замораживание и размораживание значительно снижало титр гемагглютинина. Полностью разрушал гемагглютинин хламидий 2 %-ныЙ раствор едкого натра.

Специфичность хлададийного гемагглютинина изучали в реакции торможения гемагглютинации (РТГА) с сыворотками експеримен-20

талько зараженных кроликов и сыворотками естественно янфициро- • ванного крупного рогатого скота, положительно реагирупцими в РСК с орнитозным антигеном.

Сыворотки кроликов вызывали задержку гомагглпгинации в титрах от 1:10 до 1:320 и имели хламидийные комплемектсвязываю-щие антитела к орнитозному антигену в титрах 1:10 - 1:40.

У естественно инфицированных животных титр комплементевя-зыващих антител к орнитозному антигену был выявлен в пределах 1:10 - 1:20, в РТГА эти же сыворотки вызывали задерику гемаг-глютинации в титрах 1:160 - 1:640. Следует отметить, что у одного животного комшіементсвяз ывающих антител к орнитозному антигену в титре 1:5 и выше выявить не удалось, а в РТГА эта сыворотка вызывала задержку ге«агглютинации в разведении 1:320 -1:640.

Полученные в РТГА о серопозитивными сыворотками животных данные свидетельствуют о специфичности хламидийного гемагглюїи-нина. 4

вывода

1. Хламидиозный аборт овец имеет значительное распространение в Украинской ССР (зарегистрирован' в 23, из; 25-ти областей). Наивысший уровень заболеваемости 8,39:10000 ^лов в республике отмечен в 1979 г. Наивысшие уровни заболеваемости овец в расчете на 10000 голов зарегистрированы в Ивано-йранков-ской, Житомирской, Львовской И Крымской областях (76,5t 47,7; 34,9 и 24,7, соответственно).

2. Установлен зимне-весенний подъем интенсивности эпизоотического процесса, связанный с периодом ягнения и

характеризующийся клиническим проявлением заболевания.

3. Первичным источником хламидийной инфекции в Харьковской области явились овцы породы меринофляйш. В дальнейшем заболевание распространилось по районам области СО скрыто инфицированными животными из хозяйств ранее неблагополучных по хламидиозному аборту овец.

4. Среди инфекционных заболеваний овец, вызывающих патологию плодоношения, в Украинской ССР, хламидиозный аборт занимает одно из ведущих мест.

б. В неблагополучных по хламидкозноцу аборту овец хозяйствах наблюдаются периодические С интервалом £-3 года вспдаки

клинического проявления заболевания в виде абортов и мертвому

рождений.

6. Лечебно-профилактические обработки суягных овец антибиотиками тетрацикяинового ряда снижают тяжесть клинического проявления заболевания, но полностью аборты не профмлактируют. Лечение слабых и больных ягнят, полученных в неблагополуч-

. них по хдамидиозноцу аборту овец отарах, способствует повышению сохранности приплода.

7. Вакцинопрофилактика в сочетании с другими ветеринарио-сани-

тарными мероприятиями является надежной мерой борьбы с хла-

кидиозным абортом овец. Наиболее рациональная схема вакцина-

і ' . -ч-п,- ч

ции: один раз в год перед случкой в течение 2-3 лет всего

' поголовья овец, включая ягнят, в. В экспериментальных условиях установлена патогенность штаммов хламидий "25" .и "М-бб" для 'переярок, взрослых овец, ягнят и лабораторных животных (белых мышей и.морских свинок).

! ' Л I '

Хламидии вызывают у зараженных животных аборты, гибель приплода, сероэно-катаралышй конъюнктивит, длительную

лейкопению, нейтрофилмю с резким регенеративны! сдвигом влево, эозин офилис, образование комплементсвязыващкх антител.

9. Штаммы хламидий "Лисий* и "Ы-66" при размножении на хорион-аллантоисной оболочке 9-10 дневных куриных вибрионов образуют в алдантоисной жидкости специфический гемагглюполш.

ПРЕДЛОЖЕНИЙ ДИЯ ПРАКТИКИ

1. В системе оздоровительных мероприятий рекомендуется сочетать лечебную обработку поголовья неблагополучной по хламидиоэно-ЧУ аборту овец отары антибиотиками тетради клинового ряда . пролонгированного действия с поел едущей профилактической вакцинацией всего поголовья хоэяйотва в течение 2-3 дет подряд-

2. Курс лечения ягнят больных пневмоЬнтерятамк хламцшйной этнологии продолжается 4-8 дней. Антибиотики тетрацпсяипово-го ряда в лечебных дозах (20-30 ВД^кг живой массы) вводятся одно-двухкратно.

3. Результата наших исследований нашли отражена» в "Методических рекомендациях по диагностике, профилактике и лечению хламцдиозкого аборта овец", одобрены методкотссяеД УНИИЭВ (протокол № 16 от 24.П. 1965 г.), внедрены в хозяйствах Харьковской и Крымской областей Украинской ССР и в учебном процессе при изучении курса эпизоотология и организации ве-

. теринартого дела в Харьковском зооветеринарном институте им. Н.и,Бориоенхо. \

ХЛТЕВШШ ДИССЕРТАЦИИ ИЗЛОЖЕНЫ в'сЛВДУЩИХ РАБОТАХ •

- I. Герялоенч О.П. Керн борьбы а хламкдяоэом овец. - Сб. Ветеринария, - Киев: Урожай, 1985, вып. 60, о.87-28.

2. Бабкин А.в., Галицев Н.й., Ивановская Л.В., Герилович П.П. Изучение серопоэктивности к хлаыидивноцу антигену у животных из стад, пройденных по воспроизводству.Тезисы докладов республиканской научно-практической конференции "Ветеринарные проблемы промышленного животноводства". - Белая«-Церковь, 1985, ч.Ш, с.93-94. ■ .

3. Бабкин А.З., Герилович И.О., Диренко П.II. Методические рекомендации во диагностике, профилактике и лечению хламидиозного аборта овец. Харьков, 1966, о.20. .

Подписано в печать Бумага тип. № I Ус*, п.*. Л, Ъ& Тираж 100

Бел. НИИЭВ им. С.Н.Вшелвеского. 223020, Нине*, п/о Кунцевщии*.

.Отпечатано ка ротапринте Беа'НИИНГИ, 220004, г. Минок,

Д1.08. 19ве г, Шорлт 60 х 04 1/16 Офоетная печать Уч.изд. 1,02 Заказ Бесплатно