Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Эпизоотология и комплексная иммунопрофилактика сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза овец

^ А^РГЫЗСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ВЕТЕРИНАРНЫЙ ИНСТИТУТ ^ Кыргызской аграрной академии

V4

На правах рукописи

ДЖЕТИГЕНОВ ЭЛЬМУРАТ АЛСЕИТОВИЧ

УДК 619:616 98:579.842.14С:579.841.93Б:39-022.6-084:636.32!28

ЭПИЗООТОЛОГИЯ И КОМПЛЕКСНАЯ ИММУНОПРОФИЛАКТИКА САЛЬМОНЕЛЛЕЗА, ХЛАМИДИ03Н0Г0 АБОРТА И БРУЦЕЛЛЕЗА ОВЕЦ

16.00.03—ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

БИШКЕК 1997

киргизская аграрная аяадзмка КЫРГЫЗСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДШАТЕЛЬСКИЙ ВЕТЕРИНАРНЫЙ ИНСТИТУТ

На правах рукописи

дзетягенов агыэгрАТ Адзвтшгч УДК 619:616.98:579.842.14С:579.841.93В:39-022.6-0В4:636.32/28

зшесотояотия и комплексная кашшрогаллкпз»

САЛ>ИОНЕЫЕЭА, ХЯАЩЩШОГО АБОРТА И БРУЦЕЛЛЕЗА ОЗЕЦ

16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, ыикология и иммунология

А В Т О Р Е'й'Е PAT

диссертации на соискание ученой.степени кандидата ветеринарных-наук

БИШКЕК 1997

Работа выполнена в лаборатории по изучению болезней овец Кыргызского научно-исследовательского ветеринарного института Киргизской аграрной академии.

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук

Рыскулов K.P.

Официальные оппоненты: доктор ветеранатзшз: наук,

профессор шанашев М.Й.

кандидат ветеринарных наук, ст, науч. сотр. Свярвденко В.Ф.

Ведущая организация: казахский научно-асследовагельс

кий ветеринарный институт

Защита диссертации состоится в №.00 часов на заседании специализированного совета Д 16.93.07 по специальности 16-00.03 - ветеринарная микробиология,вирусология,впизоотология.ыикология и иммунология в Кыргызском научно-исследовательском ветеринарном институте Кыргызской аграрной академии (720021, г.Бишкек, ул.Ток-тогула, 80 Кыргыз.ШВИ).

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке

Кыргыз.ЮШ.

Автореферат разослан

" $_ "(peßkCUL 1997 г.

Тченый секретарь специализированного совета кандидат б л ологсч е окшс наук

Н.А.Дуйшеев

СБДАЯ XAPAKTETIjCTHKA РАБОТЫ

Лятуадьность теки. В Кыргызской Республике ежегодно регистрируется до 15 нозологических единиц инфекционных болезней овец. . Наиболее широкое распространение имеют сальмонеллез, хламидиозннй аборт и бруцеллез, представляющие потенциальную опасность для здоровья человека и животных. Удельный вес этой группы абортогенных инфекций овец по отношению к другим заразным заболеваниям составляет: бруцеллеза - 48.2Z, хламидиозного аборта - 131 и сальмонеллеза - 3Z.

Установлено, что эпизоотические вспышки абортогенной патологии овец проявляются в форме ассоциативной (смешанной) инфекции, а общепринятые методы их специфической профилактики при этом являются мало эффективными (Матвиенко Б.А., 1964, Сафаров K.M. с сотр., 1967, Волкова A.A. с сотр., 1971, Байтурина О.Ш. с сотр., 1986). С учетом широкого распространения сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза овец и особенностей их эпизоотического проявления, разработка и усовершенствование существующих методов иммунопрофилактики остается актуальной задачей современной ветеринарной науки и практики.

Цель работы. Повысить эффективность специфической вакцинопрофи-лактикн сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза с применением комплексного метода иммунизации, что будет способствовать обеспечению эпизоотического благополучия в овцеводстве республики по абортогенным инфекциям.

Задачи вссдедаванкЗ.

- изучить краевую эпизоотологию и распространение сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза овец в Кыргызской Республике;

- изучить ноэоареал ассоциативной формы абортогенных инфекций овец; . . ■.-

- изучить динамику формирования группового иммунитета при комплексной иммунизации овец против сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза овец;

- разработать и апробировать схему вакцинации и рекомендации по комплексной иммунопрофилактике сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза овец.

Научная ноаязва. Впервые в Кыргызской Республике установлены зпи-зоотологическая особенность и нозоареал ассоциативной формы сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза овец.

Разработан метод комплексной иммунопрофилактики трех абортогенных

инфекций овец с учетом их ассоциативной формы проявления эпизоотических вспышек.

Определен иммунологический статус и динамика образования иммуно-компетентных клеток в организме овец при комплексной иммунизации против группы абортогенных инфекций.

Практическая значимость работы. Выяснен нозоареал абортогенных инфекций - сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза овец в республике и течение их в ассоциативной форме.

Разработан комплексный метод иммунопрофилактики этих инфекций, использование которого способствует сохранению эпизоотического благополучия республики. При этом предотвращаются возникновение и распространение сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза, сокращаются аборты овцематок в 3.8 раза, мертворожденна в 4 раза. Одновременно с этим сокращаются сроки вакцинации, затраты труда ветеринарных специалистов - в 2-3 раза и уменьшается стрессовый фактор у прививаемых животных.

Для практического использования данного метода разработаны рекомендации и схема комплексной иммунопрофилактики сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза.

Основные положения, выдвигаемые на защиту:

- материалы изучения краевой эпизоотологии и распространение сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза овец в Кыргызской Республике,.

- нозоареал и эпизсотологические особенности проявления' абортогенных инфекций в ассоцизтивной форме.

- динамика формирования группового иммунитета чпри комплексной иммунизации овец против абортогенных инфекций.

- схема комплексной вакцинации в целях специфической профилактики абортогенных инфекции овец и оздоровление овцеводческих ферм (хозяйств) от сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на заседаниях ученого Совета Кыргызского НИШ (1991-1995 гг.); Межреспубликанской конференции по проблемам вирусологии и микробиологии (КазНИСХИ, 1994 г,); Республиканской конференции "Совершенствование мер борьбы с болезнями сельскохозяйственных животных" (г.Бишкек, 1994 г.); Заседании Научно-Технического Совета Научно-производственного Объединения по ветеринарии (1996 г.); Межлабораторном заседании Кыргызского научно-исследовательского института (1996 г."). Схема по комплексной иммунизации

против сальмонеллеза, хлачидиозного аборта н бруцеллеза овец апробирована в АО "Достук" Аламудунского района (1995 г.).

Публкязпки. По теме диссертации опубликовано ? научных работ, в том числе рекомендации - "Комплексная иммунопрофилактика сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза овец".

Обтьаа и структура диссертация. Диссертация излажена на 114 страницах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов исследовании, выводы, и практические предложения. Работа иллюстрирована 18 таблицами, 9 рисунками.

Список литературы включает 127 источников, в тол числе 14 иностранных.

МАТЕРИАЛЫ К МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Исследования проводились в лаборатории по изучению болезни овец Кыргызского научно-исследовательского ветеринарного института (Кырг. КИВИ) НПО по ветеринарии Кыргызской аграрной академии. Основные исследования диссертационной работы выполнялись в течении 1991-1995 гг. в соответствии с планом НИР института, утвержденного комитетом по науке и новым технологиям ЮН Кыргызской Республики (тема 05, N госрегистрации 190.0025495).

Зпизоотологические исследования проведены в шести областях республики, в том числе в неблагополучных хозяйствах Сокулукского, Аламу-цунского, Ысык-'Атинского и Джети-Огузского районов, с применением се-* рологических, бактериологических методов и статистических.данных.

Особенности эпизоотической ситуации в республике по абортогенным инфекциям свец изучали по материалам экспертйзных данных межрайонных, областных и Республиканской ветеринарных лабораторий, отчетности НПО по ветеринарии за последние 15 лет (1980-1995 гг.) и собственных исследований. Изучали распространенность бруцеллеза, сальмонеллеза, хламидиозного аборта овец в республике, прослеживалась динамика заболеваемости, учитывалось количество абортов' и мертвородцений. плода, особен^ ности распространения и проявления заболеваний. По методике И.А.Баку-лов^ (1982) определяли заболеваемость овец абортогенными инфекциями в пересчете на тысячу голое восприимчивого поголовья, вычисляли их удельный вес по областям и в целом по республике по отношения к другим заразным заболеваниям. По данным регистрируемости заболеваний составлена карта распространения абортогенных инфекций в Кыргызской Респуб-

- б -

лике.

Для проведения лабораторных и научно-производственных опытов пс комплексной шшунизации овец, против садьмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза были использованы вакцины: эмульсин-вакцина, инактивн-рованная против хламидиозного аборта овец; живая сухая вакцина протш сальмонеллеза из шташа 274 HAH Кыргызской Республики; живая суха* вакцина из шташа 19 Brucella abortus.

Комплексная иммунизация проводилась согласно наставлений по применению вышеуказанных биопрепаратов: хламидиозную вакцину вводили i верхнш треть шеи, подкояно в дозе 1 мл; садьмонедлезную - внутримышечно, в область внутренней стороны бедра в дозе 2 на; бруцеллезную -подкожно, в бесшерстную часть локтевого сустава в дозе 40 млрд. микробных клеток в объеме 2 мл.

Ассоциированная вакцинация проводилась смесью трех испытываемы* препаратов в объеме 5 ыл, под:кяшо, в область верхней трети шеи овны. Смесь вакцин против хламидиозного аборта и сальмонеллеза вводили подкожно в бесшерстную часть бедра в количестве 3 мл.

Изучение антигенной совместимости, реактогенности и конкуренцш вакцинных штаммов при комплексной иммунизации проводили в опытах на 4С морских свинках. Основные опыты ставили на 150 овцематках, клиническз 'здоровых, сзронегатавннд на абортогенные инфекции. До начала и в период опыта определяли клинико-гематологические и серологические показатели по общепринятым методам лабораторных исследований.

Динамику образования антител изучали по реакции агглютинации (РА] с бруцеллезным и сальмонеллезным антигенами и реакции связывания комплемента (PCR) с хламидиозкым антигеном. Реакцию считали положительно! с хламидиозным антигеном в титре 1:16, с бруцеллезным -"1:25 и с саль-монеллезным в титре 1:50.

Для изучения образования колострального иммунитета у ягнят, родив лих ся от комплексно иммунизированных овцематок, в течение 3-5 дне! после ягнения серологически исследовали сыворотки молозива.

При экспериментальном заражении комплексно вакцинированных « контрольных групп морских свинок и овцематок использовали зталонньй штаммы сальмонелл и хламидий, полученных в институте биохимии и физиологии HAH Кыргызской Республики. Инокуляцию возбудителя хламидиозногс аборта штамм "Ш" в инфекционном титре Ig 6.5 IQ6-33 ЭЛД-50/0,3 mj произвели подкожно в область бедра. Инокуляцию возбудителя сальмонеллеза штамм Salmonella abortus ovis - 372 в инфекционном титре (для бе-

лых (якей массой 14-16 г - 100-200 тыс. микробных клеток) ЛД-50 -2х105 м.к. провели в дозе 4 ылрд. м.к. внутримышечно в область бедра.

Контрольных и моновакцинированных животных заражали соответствующими эталонными штаммами в инфекционных дозах.

Изучение клеточного иммунитета у комплексно иммунизированных ди-вотных проводили по методике П.А.Триленко (1976) при определении опсо-но-фагоцитарной активности лейкоцитов и по методике В.Л.Солодовникова (198£>> при выявлении розетгюобразуглцих Т- и В-лимфоцитов. Розеткообра-зущими считали лимфоциты, плотно окруженные несколькими (не менее трех) зритроцитарнши маркерами, присоединившимися к их поверхности. В качестве эритроцитаркых маркеров для определения Т-димфоцитов использовали свежеприготовленную взвесь эритроцитов козла, а В-лимфоцитов -эритроциты быка.

Для патоморфологичесюи и гистологических исследований брали от 6 забитых овец кусочки тканей с мест инокуляции вакцин, из внутренних паренхиматозных органов и регионарных лимфотических узлов. Пробы органов фиксировали в 10%.-ном растворе нейтрального формалина, а затем обезвоживали, уплотняли в спиртах возрастающей концентрации и заливали целлуидгогам. Гистосрезы окрашивали гематоксилином и эозином. .

. Научно-производственные опыты по комплексной вакцинации овец проводили в АО "Достук" Аламудунского района,, неблагополучного по сальмо-неллезу, хламидиозному аборту и бруцеллезу. Опыты ставили на.2068 головах шести отар овцематок,- идентичных по иммунному фону,- возрасту и находящихся в аналогичных условиях содержания.

Статистический анализ полученных цифровых" данных проводили с оценкой среднеарифметических значений и их стандартных-отклонений, используя метод оценки критерия Стьвдента-(Ь) согласно методикам, описанным И.П.Ашмариным и А. А. Воробьевым (1962).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Эпизоотологическая характеристика инфекционных болезней овец в Кыргызстане

При изучении эпизоотической ситуации по инфекционным болезням овец в республике за последние 15 лет было установлено, что еяегрдно регистрируется до 15 нозологических единиц. За период 1981-1985 гг. в Ошской и Чуйской областях регистрировалось до 15 единиц, в Нарьшской -до 12, в Ысык-Кульсксй - до 11 и Таласской - до 9 инфекционных заболеваний. Из них наиболее часто встречались такие болезни, как бруцеллез,

сальмонеллеа, хламидиозный аборт и каосгрэдиоэы, на долю которых приходилось до 90.51 регистрируешь случаев.

Учитывая широту распространения болезней абортогенной этиологии провели анализ данных по этим заболеваниям. При этом установлено, что за 1986-1990 гг. в республике из инфекций абортогенной этиологии наиболее широкое распространение имели бруцеллез, хламидиозный аборт и сальмонеллеа и в виде спорадических случаев - листериоз и кампилобак-териоз.

Нозоареал саяьмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза изучали по регистрируемости, заболеваемости, удельному весу, а также по но-аологкческому профилю.

Удельный вес этой группы заболеваний по отношении к другим инфекциям составляет основную доля, среди эпизоотий в республике (см. табл.1).

Таблица 1.

Удельный вес абортог-чных инфекций овец в Кыргызской Республике

Заболело инфекционными болезнями

в том числе абортогенными

Годы Всего голов бруцеллез хламидиозный аборт сальмонеллеа .

| голов г уд.вес (%) голое уд. вес т голов уд.вес «)

1 1990 1991 1992 1993 1994 39286 25732 14375 13483 11961 14112 14627 6146 8073 5520 35.9 56.8 42.7 59.8 46.1 1758 2689 2394 1593 939 4.4 10.4 ч, 16.6 11.8 7.8 285 1353 . <54 201 426 2.3 5.2 1.8 1.8 4.0 ]

В среднем за 5 дет 9695.6 48.2 1874 12.7 504 з.о 1

Как видно иа таблицы 1, за последние пять лет удельный вес бруцед^ деза составил 48.21, хламидиозного аборта - 12.72 и сальмонеллеза - ЗХ по отношению к другим нозологическим единицам, зарегистрированным в республике. ■ .

Заболеваемость овец рассчитывали путем отношения больных животных на 1000 голов восприимчивого поголовья. Показатель заболеваемости бру-

дешевом в среднем за последние пять лет по республике составил 2.08, хламидиозным абортом - 0.29 и сальмонеллезом - 0.09 единиц.

Расчеты определения нозологического профиля абортогенных инфекций овец также показывают, что наибольшее распространение среди этой группы заболеваний имеют бруцеллез - 78.6%, затем хлачидиозньй аборт -16. 42 и меньше всего среди абортогенных инфекций отмечался сальмонеллез -4.12.

Анализ эпизоотических данных показывает, что абортогенные'инфекции распространены по всей республике с доминированием их в Опекой области. Бруцеллезная инфекция преобладает в Нарынской зоне, где удельный вес ее по отношению к другим нозологическим единицам,регистрируемых в данном регионе, доходит до 902. В то яе время, в Нарынской области отмечаются единичные случаи заболевания овец салыюнеллезом. Хлашадиоз-ный аберт распространен по всей республике, но преобладает в Чуйской зоне, где удельный вес по отношению к другим заболеваниям достигает 272. , ' ':■

Анализ эпизоотического состояния за последние 15 лет показывает, что вспышки инфекций абортогенной этиологии периодически встречаются по всей республике. При сравнении статистических данных начала 80-х с данными начала 90-х годов вырисовывается следующая картина; ' бруцеллез в начале 80-х преобладал в Таласской области (77.62), а в 90-х - в Нарынской (902) и Ыськ-Кульской (802) областях; сальмонеллез в 80-х чаще регистрировался в Оаской области (56.2%), а в 90-х - в Ысык-Кульской (10.52); хламидиозный аборт за анализируемый период характеризуется территориальным доминированием в Чуйской зоне (272). V.

По данным эпизоотодогических' исследований составлена карта распространения абортогенных инфекций овец в Кыргызской'Республике, из которой. видно, нозоареал абортогенных инфекций овец на территории Кыргызстана наблюдается повсеместно: и ■ преимущественно в ассоциативной форме. . Чаще всего смешанная форма бруцеллеза,. хламидиозного аборта и сальмонеллеза ' встречается в Оеской,; Джалал-Абздской,- Таласской н Ысык-Кульской областях.

Комплексное применение вакцин против сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза

В опыте на лабораторных животных у морских свинок после вакцинации было отмечено повышение температуры тела на 1°С, на месте введения взкцин гиперемия и припухлость. Все эти признаки исчезали в течение 5

дней.

Гематологические исследования показали смещение лейкоцитарной формулы в сторону ликфоцитозз, количество общего белка увеличилось незначительно. Эти изменения, вследствие реактивности организма на инокуляция вакцинных антигенов., к 15-20 дни нормализовались. Серологическими исследованиями выявлено, что максимальное количество антител в крови вакцинированных животных отмечается на 15-20 день.

Экспериментальное заражение овец,, иммуниаированных одновременно тремя вакцинами показало, что эти вакцины, примененные комплексно, не теряют своих ишуногенных свойств.

Проведенными исследованиями установлено, что при одновременном введении вакцин, происходящие гематологические и биохимические изменения в крови и иммунологическая перестройка организма в целом соответствуют моновакцинации испытуемыми препаратами. Кроме того, комплексное применение вакцин не вызывает конкуренции вакцинных штаммов,, а также суммации реактогенности антигенов.

Результаты этих исследований явились основанием для проведения опытов на овцах.

На первом этапе исследований были проведены опыты по комплексной иммунизации овец против сальмонеллеза и хламидиозного аборта, в которых было использовано 45 овцематок. Подопытных животных разделили на 4 группы: 1-я груша - комплексно иммунизированная, 2 и 3 группы моно-вакцинированные, 4-я группа - интактные животные.

Иммунизация проиедена согласно наставлениям применяемых вакцин. После вакцинации проводили клинические наблюдения за животными, в результате чего установлено, что реактивность организма при комплексной иммунизации соответствует моновакцинациям, эффект сутйции реактогенности вакцин отсутствует. Динамика образования антител на сальмонел-лезный антиген при комплексной вакцинации отличается от моновакцинации болое высоким титром (1:200) в ранние сроки иммунитета, тогда как при обычном методе иммунизации в этот период иммуноглобулины выявлялись в титрэ 1:100. Максимальное образование антител отмечается на 15-й день в титре 1:800. Динамика образования антител на хламидиозный антигей соответствует моновакцинации, при этом максимальное накопление нх наблюдается нз 25 день в титре 1:256.

Биохимические изменения в сыворотке крови (увеличение количества гамма-глобулинов н уменьшение альбуминов) соответствует иммунной перестройке организма. -

На 25 день после иммунизации провели экспериментальное заражение стзотных эталонными штаммами хламидиозного аборта и сальионедлеза. После заражения у подопытных животных наблюдали сначала снижение общего количества антител, а затем резкий скачок его вверх, который мы связываем с повышенной чувствительность*) иммунной системы к '.'вводимым антигенам, что подтверждает высокую иммунологическую активность организма по отношении к данным возбудителям.

Через месяц после заражения все овцематки контрольной непривитой группы абортировали, из опытной комплексно вакцинированной абортироЕа-ла только одна овцематка, причем в патматериаде плода м выделениях из матки возбудители хламидиоза и садьманеллеаа не были обнаружены.

На втором этапе исследований изучали формирование иммунитета при комплексной иммунизации против сальмонеллеза, хламидисзкого аборта и подключено третье, широко распространенное заболевание - бруцеллез. Опыты провели на 73 овцематках.

Перед постановкой опыта провели клинико-гематологические исследования, показатели которых соответствовали физиологической норме данного вида животных. Для определения серофона у всего поголовья подопытных овцематок были проведены серологические исследования.

■. Для проведения опытов было сформировано 7 групп: 1-я группа -комплексно вакцинирована против сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза; 2-я группа - ассоциировало иммунизирована этими де вакцинами; 3-я группа - ассоциированно иммунизирована против хламидиозного аборта и сальмонеллеза; 4-я группа - комплексно вакцинирована против хламидиозного аборта и бруцеллеза;" 5-я группа - комплексно вакцинирована против сальмонеллеза и бруцеллеза; 6-я группа - разделена на три подгруппы и каждая подгруппа моновакцинирована против сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза; 7-я группа - интактные животные.

Комплексная иммунизация подопытных кцвотных проведена в различные участки тела, а ассоциированная - предварительно смешанные вакцины - в одну точку тела животного. •

После вакцинации проводили наблюдения за реактогенностыо при комплексном и ассоциированном применении биопрепаратов и сравнение ее с моновакцинацией. В первый день у комплексно привитых животных температура тела в пределах нормы (39.9°С), на месте введения вакцин гиперемия, сальмонеллезная вакцина у некоторых животных вызывала легкую хромоту. При ассоциированной иммунизации . наблюдалось незначительное повышение температуры (в среднем 40.2°С), а на месте инокуляции - ги-

перемия, горячая припухлость.

В группе контрольно вакцинированных животных: вакцина против' хламидиозного аборта на месте щгьекции вызывает слабую гиперемию, температура тела животного - 39.3°С; на месте введения сальмонеллезной вакцины отмечали гиперемию, у некоторых животных биопрепарат вызывал легкую хромоту, температура - 39.3°С; у овец, привитых бруцеллезной вакциной, ва месте инъекции гиперемия и небольшое повышение температуры тела - 39.9°С. - . -

На вторые, гретъи сутки имеющиеся внешние клинические признаки исчезали, за исключением группы ассоциировашю привитых животных, у которых припухлость все еще отмечалась.

У животных, привитых различными методами и в различных сочетаниях вакцин, изучали формирование иммунитета.

1. Гуморальный иммунитет.

С целью изучения иммуногенеза при различных методах иммунизации, . проводили еженедельное серологическое исследование сыворотки крови у подопытных животных. ;

На сальмонедлезный антиген динамика роста антител при комплексной и моновакцинации идентична, максимальное накопление иммуноглобулинов в этих случаях наблюдается на 21 день в титре 1:806, Комплексная иммунизация против сальмонеллеза и бруцеллеза в начальный период антителоге-неза в своей динамике несколько задерживается, но максимальный титр набирает в срок. При ассоциированной иммуниаации тремя вакцинами отмечается низкий титр антител (1:400), а при ассоциированном применении против хламидиозного аборта и сальмонеллеза максимальный титр отмечается на 28 день после вакцинации.

На бруцеллезный антиген динамика роста антител при комплексной и моновакцинацин в первые 7 дней достигает уровня 1:200 и максимальное количество, в разведении 1:1600, отмечается на 28 день. Комплексная иммунизация против бруцеллеза и сальмонеллеза в своей динамике роста антител доходит до уровня 1:800 ка 28 день, а при сочетании бруцеллеза и хламидиозного.аборта этот же титр наблюдается на 21 день. При ассоциированной иммунизации тремя"вакцинами отмечается низкий уровень антител (1:400> на бруцеллезный антиген.

На хламидиозный антиген у ыоновакцинированных животных максимальный титр антител отмечается на 28 день, а при комплексной - на 35 день. При ассоциированной иммунизации тремя вакцинами максимальный

уровень антител отмечается на порядок ниже по сравнению с моновакцинацией.

В дальнейшем в течении 10 месяцев изучали серопозитивность сыворотки крови животных при различных методах и сочетаниях вакцин. При этом установлено, что вакцина из штамма 274 против сальмонеллеза, как при moho-, так и при комплексной вакцинациях вызывает постепенное снижение количества иммуноглобулинов и минимальный допустимый диагностический титр отмечается на седьмом месяце, а при ассоциированной вакцинации - на-, пятом. Вакцина против хламидиозного аборта снижает свой вакцинный процесс в организме до минимального ■диагностического титра на 10 месяце.'

При иммунизации вакциной из шта\;ш 19 резко сокращается количество антител на 2-3 месяце. При моновакцинации диагностический титр отмечается на 6-7 месяце, а при комплексной - на 7-8. Ассоциированная вакцина держит серопозитивность до 5-6 месяца.

С целью определения икмуногенностн вакцин.при различных методах иммунизации овец провели их экспериментальное заражение. В остром опыте были использованы эталонные штаммы.

После заражения в контрольной группе непривитых животных в тече--вие месяца абортировали все овцематки (100Z), в контрольной шновакци-вированной против хламидиоза и зараженная соответствующей культурой -£02, а в группе комплексно привитых абортировавшие и давпие мертвый приплод составили 6,62. . В группе ассоциирование вакцинированных абортировало 402 овцематок.

2. Клеточный иммунитет

Известно, что клеточный иммунитет играет важную роль в специфической резистентности организма. Фагоциты в кооперации с Т- и В-лимфоцитами являются основой иммунной системы. В связи этим были проведены исследования по определению накопления иммунокомпетентных клеток при гамплексной иммунизации.

В опыте участвовала 32 овцематки, которые.были разделены на 3 групп. Животные одной группы вакцинировали комплексно тремя, вакцинами, грех других - двумя в различных сочетании. Контролем служили три группы моновакцинировзнных и группа интактных животных.

Фагоцитарную активность лейкоцитов подопытных животных изучали зжемесячно в течение полугода с помощью опсоно-фагоцитарной реакции, проводимой с культурой S. abortus ovis штамм 372 для определения 45А к

- и -

сальмонеллам и с культурой Вг. оухэ агаым 424/1. для определения ФА » бруцеллам {см. табл. 2).

Таблица 2.

Фагоцитарная активность лейкоцитов при комплексной иммунизации овец

Группы животных Вакцинированы против заболеваний Штаммы■ культур Фагоцитарный индекс (М±м), Z

.•фоновый уровень максимальный уровень

I Хлашдиоз ' : Сальмонеллез Бруцеллез 3?2 424/1 23.3+1.7 72.0±3.4 "". 74.7+4.4 118.7±4.7

и Сальмонеллез Хламидиоз 372 "22.3+1.0 91.6±4.1

III Хламидиог Бруцеллез .424/1 80.б±3.0 117.0+2.7

IV Сальмонеллез Бруцеллез 372 424/1 .'.' 57.0±1.7 71.0±2.7 79.0±3.7 •140.б±9.9

V Сальмонеллез 372 51.0±2.7 103.3±3.4

VI Бруцеллез 424/1 98.6±5.8 157.6+10.9

VII Интактные 372 68.6±5.1 70.6+1.0

VIII Интактные. 424/1 68.0±4.4 : 67.0+2.7

Как видно из таблицы 2, фагоцитарная активность лейкоцитов у сальмонеллам у комплексно вакцинированных животных возрастает в 3.1 раза по сравнению с фоновыми показателями; у вакцинированных комплексно против сальмонеллеза и хламидиозного аборта - в 4.1 раза; у вакцинированных против сальмонеллеза и бруцеллеза - в 1.5 раза. Моновакцинация повышает фагоцитарную активность в 2 раза. В контрольной интакт-ной группе увеличение ФА не отмечается.

Большая фагоцитарная активность иммунокомпетентных клеток при иМг мунизации против сальмонеллеза и хламидиозного аборта объясняется стимулированием адъюванта хламидиозной вакцины сальмонеллезаых.вакцинньи штаммов, а торможение ФА к сальмонеллам при вакцинации с бруцеллезной вакциной - как конкуренцию двух живых вакцинных культур, в которо! концентрация бруцеллезной доминирует над сальмонеллезной.

Оагоцитарная активность лейкоцитов к бруцеллам при комплексной (

моиовакцинацан возрастает а 1.0 раза; при сочетания бруцеллезной вакцины с хламндиозной - в 1.5, а при комплексной против бруцеллеза и сальмонедлеза - в 2 раза.

Фагоцитарная активность клеток кггаунной системы при комплексной иммунизацга тснсазывгет, что вакцинный процесс в организме животных заканчивается через, 6 месяцев, а при моновакцинации - через 4.' Следовав тельно,. метода комплексной иммунизации оказывает пролонгирующее действие на сальцонеллезный и бруцеллезный антигены.

Таблица 3.

Пролиферация Т- и В-лимфоцитов при комплексной ккмунизацяя

Группы животных Вакцинированы против заболеваний Лимфоциты 1 . Розеткообразувщие клетки (М±м), 7. j

фоновый уровень максимальный уровень j

I Хламидиоз Сальмонеллез Бруцеллез Т-клетки В-кгеткк 58.1+2.3 23.1+6.1 72.5+4.6 27.5Î2.1

' II Сальмонеллез Хламидиоз Т-клетки В-клетки 62.0+2.9 20.0±1.2 79.8+2.7 28.2±3.5 |

III Сальмонеллез . Бруцеллез Т-клетки В-клетка 63~0±1.1 21.3+0.8 75.0±4.2 | 25.4±1.2

IV Хд^мидиоз Бруцеллез Т-клетки В-клетки 53.7+4.4 22.0±1.4 69.7+3.7 26.4±1.8 j

V Сальмонеллез Т-клеткн Б-клетки 59.4+1.7 21.3+1.1 72.5±2.9 j ■25.4+2.2 j

VI Хламидиоз Т-кяетка В-клетки 56.3+1.2 ; 22.4±1.6 70.4+3.6 26.3+2.6

VII Бруцеллез Т-клетки В-клетка б1."7±1.6 20.6±1.2 72.7±3.4 26.8±2.4

I

Исследования по определению Т- и й-лимфоцитов проводили в эти же сроки. При ко.лтлекспсй иммунизации максимальный уровень Т-клеток нз 3-4Х выше,- чем при мэнэвакцинированных'(см. табл. 3). В грушах, где применяли хламидиозную вакщшу з раалнчньи сочетаниях, пролиферация иммунокомпетентных клеток вьше чем в группах, где данная вакцина не применялась. Повышение Т- и В-клетог. в этих группах опять те метаю объяснить иммунсмодулирующим действием адъюванта хламидиозной вакцины.

Кроме того были установлено, что на 5-й день Т-лимфоцитов обнару живается на 10Х выше, а В-лимфоцитов на ЗХ ниже фонового уровня. Н, 30-й день отмечается максимальное увеличение количества Т- и В-лимфоцитов, соответственно на ,25 и 192. На третьем месяце наблюдается резкое снижение Т-лимфоцитов. На шестом месяце иммунокомпетентные клети находятся в пределах фонового: уровня.

С учетом того, что В-^имфоциты.ответственны за выработку антител наблюдается прямая корреляция .в динамике роста и спада иммуноглобулинов и В-лимфоцитов.;

З.- Колостральный иммунитет

С целью изучения формирования колострального иммунитета у ягнят рожденных от комплексно привитых овцематок, провели серологически* исследования сыворотки молозива на наличие антител на садьмонедлевнш и бруцеллезный антигены. В результате установлены, что максимально! образование иммуноглобулинов наблюдается на 30-32 дни после вакцинации. В этот период агглютинины выявляются в сыворотке молока в разЕе-дении 1:400 с сальмонеллезным антигеном и в разведении 1:200 - с бру-целлезньм. Следовательно, комплексный метод вакцинации не препятствуем образованию колострального иммунитета у ягнят.

4. Батоморфологические изменения в организме вакцинированных животных

Патоморфологическими исследованиями установлено, что при комплексной иммунизации овец тремя вакцинами против сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза не наблюдается патологических сдвигов i организме животных. Через месяц после.иммунизации на месте инъекции з подкожной клетчатке выявляются очаги скопления клеточных элементов, состоящих из гистоцитов и лимфоидных клеток. Особенно часто они встречаются вокруг кровеносных капилляров и образуют как-бы муфты.. Эндотелий сосудов находится в состоянии набухания. На месте введения бруцеллезной вакцины среди клеточных элементов обнаруживаются, эпителиальные клетки, иногда в виде небольших скоплений.

В регионарных лимфоузлах изменения характеризовались слабым-раздражением герментативных центров вторичных уалов, заполнением их клерками лшмфоидного и плазматического ряда. Краевые синусы слегка расширены и выполнена клетками ретикулоэндотелия. При введении бруцеллезное вакцины в регионарном лимфоузле выявляются среди клеточного составе лимфофолликулов и группы эпителиальных клеток.

Описанную вьае гистокартину в регионарных лимфатических узлах и в •канях на месте введения вакцин можно охарактеризовать как законченной :тадией иммуноморфологического ответа на введение взгаданных агентов. !ыявляемая гиперплязия ретикуло-зндотелиальной системы не имеет лег в-, [еративных сдвигов и характеризуется, доброкачественностью и- по сконча-1ии бактериологической фазы вакцинных процессоа не остается мсрфологи-[еских изменений.

Научно-производственный опыт и апробация метода комплексной иммунизации овец

Научно-производственный опыт по комплексной ишунизации овец про-¡ели в АО "Достук" Аламудунского района. В опыте использовали две ота-;ы овцематок, одна из которых служила контролем. Все подопытные живот-ие расположены в предгорье Ала-Тоо в урочище Кур-Кондай, идентичны по злмунноыу фону, половозрастному составу, условиям содержания и кормле-гия. Хозяйство ранее неблагополучно по сальмонеллезу, хламидиозксыу ¡борту и бруцеллезу. Иммунизация в опытной отаре проведена комплекс-га. 1осле вакцинащш проводили наблюдение за животными с учетом реакции на шедение вакцин, динамики образования иммунных белков и эффективности ¡спытуеиого метода.

По результатам расплодной кампании установлено, что в опытной )таре от 419 овцематок получено 458 ягнят, абортировавших маток нет. В контрольной отаре из 435 овцематок абортировали и дали мертвый приплод )3 овцематки или 21,42 от всего пеголовья. В крови одной из. овцематок 1а 5-й день после аборта выявлены антитела'на хламидиозный антиген в♦ •итре 1:255," из органов абортированного плода выделен вирус, идентифицированный в дальнейшем как возбудитель хламидиозного аборта.

Для подтверждения результатов научно-производственных опытов была гроведена апробация метода комплексной вакцинации овец против аборто-•енных инфекций в том "же хозяйстве. В опыт были включены 4 отары, одна га которых слуззиа контролем.

По итогам расплодной кампании выяснено, что по трем опытным ота->ач абортировало 3.72 овцематок, что в 3.8 раза меньше по сравнению с контрольной, а мзртзоротцдения составляли 3.12, что в 4 раза меньше по ¡равнению с контрольной отарой.

Подученные результаты еще раз показали эффективность комплексной ашунизации озец против абортогенных инфекций, которая создает надеж-¡ый иммунный фон при одновременном сокращении количества абортов я

мертворовдений плода в стационарно неблагополучных; хозяйствах.

ВЫВОДЫ Я ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Эпизоотическая ситуация в Кыргызской республике по инфекционным болезням овец характеризуется частотой регистрируемости бруцеллез« (40,51), сальмонеллеза (27,2Х), хламидиозного аборта (13,IX) и клост-ридиозов (20,42), на долю которых приходится 90,5Х от числа установленных болезней;

2. В республике ежегодно' -регистрируется более 15 нозологически единиц инфекционных болезнен ове^,/ из них" наиболее широкое распространение имеют бруцеллез, сальмонеллез и хламидиоэный аборт, представляющие потенциальную опасность для здоровья человека и животных;

3. Зпизоотологические особенности абортогенных инфекций овец определяются частыми выявлениями болезни (13,1 - 40,5%), сезонностью ] проявлением вспывек болезней в ассоциативной форме, территориально доминированием и периодичностью эпизоотических вспышек по зонам республики;

4. Установлено, что при одновременной вакцинации овец против хламидиозного аборта и сальмонеллеза аффект суммации реактогенности отсутствует, в организме животных создается напряженный и продолжительный иммунитет (до 8-11 месяцев) против этих инфекций;

5. При комплексной иммунизации овец эмульсин-вакциной против хламидиозного аборта, сальмонеллезной вакциной из штамма 274 и бруцеллезной вакциной штамма 19 реактивность привитых животных и продолжительность иммунитета соответствует показателям моновакцинации каждого биопрепарата;

6. Одновременное применение вакцин против сальмонеллеза и хламидиозного аборта, стимулирует образование антител на сальмонеллезны! антиген. Бруцеллезная вакцина при комплексном применении незначительна сдерживает антителогенез на сальмонедлезный антиген, ввиду его большо] концентрации по отношению к сальмонеллезной, которая не влияет на фор-

_ мирование иммунитета против этих двух заболеваний;

7. Фагоцитарная активность лейкоцитов к сальмонеллам при комплексной вакцинации возрастает в два раза больше, чем при моновакцинации, а к бруцеллам - соответствует моновакцинации. Фагоцитарная активность при комплексной вакцинации завершается на шестом месяце, а пр) моновакцинации - на 4 месяце;

8. Максимальное количество Т-лимфоцитов отмечается на 30-й день I

на.27. вше, чем у моновакцинированных. На шестой месяц после вакцинации количество В-лимфоцитов в группе комплексно вакцинированных против сальмонеллеза и бруцеллеза и их могга вакцинации отмечается на фоновом уровне, что означает снижение действия вакцинных штаммоз на иммунную систему;

9. Патоморфологические и гистологические исследования внутренних органов и. тканей с мест инокуляции вакцин показали, что при комплексной иммунизации овец тремя вакцинами резких патологических сдвигов в организме животных не наблюдается, происходите гистологические изменения характерны для иммунной перестройки организма;

10. При комплексном методе иммунизации с применением вакцин против сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза овец создается устойчивая иммунная защита. Это? метод иммунопрофилактики является удобным и оффективным, особенно при ассоциативной форме течения инфекции, при этом сокращаются сроки вакцинации, затраты труда ветспециа-листов и уменызается стрессовый фактор у прививаемых животных;

11. По результатам научно-производственных опытов и апробации схемы комплексной иммунопрофилактики овец установлено, что в трех опытных отарах в среднем абортировало 3,7% овцематок или в 3,8 раза, з мертворсждений плода в 4 раза меньше, по сравнению с контрольными (122), что подтверждает высокую эффективность этого метода.

Практические предложения

1. Для комплексной иммунизации овец протиз абортогенных инфекций предлагаем использовать: сухую живую сальмонеллезную вакцину из штамма' 274, инактшзированную эмульсин-вакцину против хламидиозного аборта и сухую живую бруцеллезную вакцину из штамма 19.

2. В зависимости от эпизоо1ической обстановки хозяйства (фермы) по сальмонеллезу, хламидиоаному аборту и бруцеллезу, комплексную имму-низацтчо овец рекомендуется проводить в следующих сочетаниях: а) саль-монеллез, хламидиозный аборт и бруцеллез; б) бруцеллез и сальмонеллез; в) сальмонеллез и хламидиозный аборт; г) хламидиозный аборт и бруцеллез.

3. Ревакцинацию животных необходимо проводить ежегодно за 1-1,5 месяца да - или через 1,5 месяца после осеменения.

4. Ко?<плексную иммунизация против бруцеллеза, сальмонеллеза и хламидиозного аборта предлагаем проводить в неблагополучных фермерских и крестьянских хозяйствах Ошской, Ддзлад-Лбадской, Таласской, Чуйской

и Нсык-Кулъской обл^тей, а одновременную иммунопрофилактику хламидио-за и бруцеллеза в Нарынекой зоне. .

5. Результаты работы вошли в рекомендации по комплексной иммунопрофилактике сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза ове! одобренного ученым Советом Кыргызского НИВИ и Научно-техническим Советом НПО по ветеринарии (1996);

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Джетигенов Э.А.Материаш.по комплексной иммунизации овец против хламидиозного и паратифозного абортов //Совершенствование мер борьбы с болезнями сельскохозяйственных животных: Сб. науч. тр./Кырг. СХИ. -Бишкек. - 1994. --Ч.2.- С. 7£-75.

2. Джетигенов Э.А. Комплексная иммунизация" овец против бруцеллеза, сальмонеллеза и хламидиозного аборта//Совершенствование мер борьбь с болезнями сельскохозяйственных животных: Сб. науч. тр./Кырг.СХИ.-Бишкек. - 1994. - 4.2. - С. 75-78.

3. Рыскулов К.Р., Джетигенов Э.А. Опыт комплексной иммунизации овцематок против хламидиозного и сальмонеллевкого абортов//Актуадьные проблемы вирусологии: Тезисы докл. науч. конф./КазНИСХИ. -1994. - 4.2. - С. 93-94.

4. Рыскулов K.P., Джетигенов Э.А. Майгулакова Л.Т. Комплексная иммунопрофилактика сальмонеллеза, хламидиозного аборта и бруцеллеза овец: Рекомендации/ Бишкек. - 1994. - 4 С.

5. Рыскулов K.P., Джетигенов Э.А., Майгулакова Л.Т. Эпизоотология абортогенньи инфекций овец в Кыргызстане //Меры борьбы с болезнями сельскохозяйтсвенных животных: Сб. нач. тр./Кырг.НИВИ. - 1996. - Вып. 5. - С. 48-53.

6. Рыскулов K.P., Джетигенов Э.А., Майгулакова Л.Т. Комплексная иммунопрофилактика смешанных абортов у овец//Меры борьбы с болезнями сельскохозяйственных животных: Сб. научн. тр./Кырг.НИВИ.- 1996. - Вып. 5. - С. 54-57

7. Джетигенов Э.А. Иммунитет у овцематок при одновременной вакцн1 нации против группы абортог'енных инфекций//Меры борьбы с болезнями сельскохозяйственных животных: Сб. науч. тр./Кырг.НИВК. -1996. Вып.5. - С. 58-60.

Джетигеяов Э:Л.

Койлордун сальмонеллезунун. хламидиоздуу абортунун жала бруцеллезунун эпизоотологиясы жана комплекстуу иммунопрофилактнкасы

(Кыскача мазмуну)

Диссертация койлордун хламидиоздуу абортунум, сальмонеллезунун жаиа бруцеллезунун слецификалык эффектуулугун жогорулатуу максатында - ущул ыландарга карпш иммунизапяянын комплекстуу методун иштеп чыгууга арналгак.

Бул иште Кыргыз Республикасындагы абортогендуу ннфекцпялар боюнча эпизоотологиялык абалга анализ берплип, ыладдардын бул тобунун есуусуяде ассоциативдуу форма бар зкени белгиленди. Нозологиялык формалардын таркалган зоналары, ошоядой эле алардын басымдуулук кылган территориялары келтирилген маалыматтарда ачык кврсвтулгвн.

Иште иммунитеттин тузулуу маселесине кенири орун берилген. Ар бир антигенге антинерселердин есуу динамякасы жана антинерсегенезде чагылдырылуучу вакцина штаммдарынын органазмдегя ез ара аракеттери каралгак. Вакцияаларды бир убакта колдонуу вакшша штаммдарынын реактогендуулугун,суммациялакуусун чакырбай турганы жана серопозитивдуулуктун узактыгы, ошоядой эле вакцняаларды комплекстуу колдонууда алардын аммуногендуулугу аныкталган.

Бир убакытка иммундештирууде клеткалык иммунитет маселесп да баяндалган. Сальмонелла менен бруцеллага лейкоцштердин фагоцитездук активдуулугу изилделил,анын кебейуусунв же азаюусуна таасир этуучу факторлор каралтан. Т-жана В-лимфоцитгерднн пролиферациясы жана алардын антинерселердин всуу динамякасы менен болгон корреляциясы кврсвтулгвн.

Иммундештируу учурунда ткандарда жаяа клеткалар арадык боштуктарда пайда болгон езгеруулердун калбагандыгы патоморфологиялык жана гастологвялык изилдевлер менен аныкталды.

Диссертацияда илимий-ендуруштук • тажырыйбалардын жаяа койлордуя комплекстуу иммунопрофилактикасынын схемасынын аппобацняеынын натыйжалары боюнча тажырыйба коюлган уч короодо орто эсеп менен 3,7%, контролдогу короого салыппырганда 3,8 эсе аз соолук козу салганы жана 4 эсе аз козу влуу туулгааы кврсвтулгвн.

Jetigenov E.A.

Epizootology and complex immunoprophyiaxis of ovin salmonellosis,chlamydial abortion and brucellosis

His dissertation is dedicated to elaborate the complex method c immunization of sheep against chamidial abortion, salmonellosis an brucellosis, for Increased efficacy of specific prophilaxic of thos diseases.

The analysis of the episootology of abortive infections is give in the thesis. It is noted that assosiated forms of those diseases ar registered of ten. The data directly show zones of spread of nozologi forms and their territorial dominans. Periodicity are frequecy of epi zootical outbreaks .of abortive infections of sheep.

The dinamics of antibody production to each antigen are conside red, as are the interaction of vaccine strains in the and the effec of there interaction on antibody production. It was determined tha simultaneous administration vaccines does not result in additive rate, of local reaction. Immunogenicity of vaccines administered with tb complex method and duration of seroimmunity were determined.

The question of cell-mediated:immunity with simultaneous immuniza tion was discussid. The. pragocytic activity of leucocytes to salmonel la and brucella was studied and factors were observed whifch increasi or diminish pragocytosis.

The proliferation T- and B-lymphocytes and the correlation witl dynamics of antibody production were investiqated.

Pathomorphology and histologic research methods demonstrated im-munogicaly helpful changes in tissue and intercellular space. In tht end of the bacteriologic phase of, the vaccine process there are nc morphologic changes. , .

In thes study of complex irmunoprophy 1 axis of sheep 3 experimental flock had abortionsrates 3.7Z, thes was 3,8 times less than in control flock, and perinatal-death rates of offspring were 4 times lezi than in the control flock.