Бактерицидная активность сыворотки крови различных видов животных, её диагностическая значимость

Малёв, Анатолий Александрович

Диссертации по ветеринарии → Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Бактерицидная активность сыворотки крови различных видов животных, её диагностическая значимость

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Малёв, Анатолий Александрович Казань 2009 г.

Ученая степень: кандидата биологических наук

ВАК РФ: 16.00.03

Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Бактерицидная активность сыворотки крови различных видов животных, её диагностическая значимость

На правах рукописи

МАЛЁВ АНАТОЛИЙ АЛЕКСАНДРОВИЧ

БАКТЕРИЦИДНАЯ АКТИВНОСТЬ СЫВОРОТКИ КРОВИ РАЗЛИЧНЫХ ВИДОВ ЖИВОТНЫХ, ЕЁ ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук

1 з пОл

Казань-2009

003483579

Работа выполнена в Федеральном государственном учреждении «Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных» (г. Казань).

Научный руководитель:

доктор биологических наук, профессор Гильмутдинов Рустам Якубович

Официальные оппоненты:

доктор ветеринарных наук, профессор Садыков Нариман Султанович доктор медицинских наук Хаертынова Ильсняр Мансуровна

Ведущее учреждение:

ФГУ Федеральный центр охраны здоровья животных (ВНИИЗЖ), г. Владимир

Защита состоится «_£_» 2009 г. в «10» часов на заседании

диссертационного совета Д - 220.012.01 при ФГУ «Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных» (420075, г. Казань, Научный городок - 2).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУ «ФЦГРБ-ВНИВИ» (г. Казань)

Электронный вариант автореферата и текст объявления о защите размещен на сайте организации: http://www.vnivi.ru

Автореферат разослан «_3>_» 2009 г.

Учёный секретарь диссертационного а^

совета, кандидат ветеринарных наук ^^Шьв^Я***^^ В.И. Степанов

1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1 Актуальность темы. В решении современных как теоретических, так и практических проблем инфекционной патологии значительное место занимает оценка уровня естественной (врождённой) резистентности животных (Фролов А.Ф. и соавт., 1986; Полищук Е.И., Пархоменко Л.В., 1987). Естественная резистентность определяется клеточными и гуморальными факторами. К последним относят лизоцим, систему комплемента, пропердин и др., часто оцениваемые с по,мощью интегрального показателя - бактерицидной активности сыворотки крови (БАСК). Однако информативность (диагностическая значимость) показателя БАСК остаётся малоизученной. Несмотря на активное его использование для определения неспецифической резистентности организма в России и бывших социалистических странах, в целом за рубежом данный тест распространения не получил.

В нашей стране у сельскохозяйственных животных в большинстве случаев БАСК определяют нефелометрическим методом О.В. Смирновой, Т.А. Кузьминой (1966), хотя в последующем их методику модифицировали многие авторы (Марков Ю.М. и соавт., 1968; Сазонова И.М., 1977; Бухарин О.В., Созыкин В.П., 1979; Ароне P.M., Глейзер В.В., 1982; Максимюк К.Н., Телишевская Л.Я., 1995; Саруханов В.Я., Исамов H.H., 2001; Саруханов В.Я. и соавт., 2006, 2007). Поэтому актуальным является решение вопроса об использовании более удобных в исполнении, информативных методик. Кроме того, требует решения сама методология определения БАСК. Малоизученным остаётся влияние методических факторов на величину и, соответственно, информативность БАСК (вид тест-культуры и питательной среды, длительность инкубации, концентрация взвеси тест-культуры, степень гемолиза сыворотки крови, вакцинация и др.).

степень адекватности определения БАСК у больных животных с использованием общепринятых тест-культур бактерий относительно возбудителей различных инфекций.

Остаётся малоизученным вклад основных составляющих (лизоцима, пропердина, комплемента) в величину БАСК у различных видов животных. Решение данного вопроса является актуальным в плане более глубокого изучения неспецифической резистентности.

1.2 Цель и задачи исследований. Целью работы являлось изучение информативности показателя БАСК и основных её составляющих -лизоцима, комплемента, пропердина.

Для достижения указанной цели решались следующие задачи:

- сравнительно исследовать величину БАСК и её основных составляющих у млекопитающих различных видов;

- определить влияние на величину БАСК и её основных составляющих методических факторов (вида тест-культуры бактерий и питательной среды, концентрации взвеси тест-культуры, консервирования сыворотки крови холодом и фильтрацией, длительности инкубирования, степени гемолиза сыворотки крови, вакцинации);

- оценить вклад в формирование величины БАСК её основных составляющих (лизоцима, пропердина, комплемента) у животных различных видов;

- выявить наиболее доступные и простые в исполнении методики определения БАСК, лизоцима, комплемента и пропердина.

1.3 Научная новизна работы. Впервые комплексно рассматривается диагностическая значимость БАСК и зависимость её величины от методических факторов.

мясной воды повышает величину БАСК в сравнении с использованием МПБ на основе гидролизата Хотгингера. Выявлена зависимость величины БАСК, определяемой по О.В. Смирновой, Т.А. Кузьминой (1966), от длительности инкубирования проб: при увеличении её с 3 до З'ч происходит повышение БАСК. Впервые установлена обратная зависимость величины БАСК от уровня свободного гемоглобина в сыворотке крови на примере овец (г > -0,78; Р<0,05).

Проведено сравнение методик определения БАСК с выявлением наиболее простых в исполнении, высокоинформативных вариантов, что делает их Применение более доступным в лабораторной практике. Рассмотрен вклад основных составляющих (лизоцима, пропердина, комплемента) в величину БАСК у КРС. овёц и кроликов.

1.4 Практическая значимость работы. Предлагается при определении уровня БАСК у животных в норме применять микроорганизмы, относящиеся к разным группам по Граму, в частности Е. coli и В. subtilis. Это позволяет при определении БАСК оценить и все её составляющие (лизоцим, система комплемента, пропердин). В идеале, при определении БАСК у больных животных в качестве тест-культуры необходимо использовать возбудителя именно этого заболевания или, в крайнем случае, микроорганизм, который находится в одной группе, при окраске по Грамму, с патогеном.

Использование в качестве основы МПБ мясной воды повышает величину БАСК по сравнению с основой из гидролизата Хоттингера. К тому же, при использовании последнего возможны отрицательные значения БАСК.

При определении БАСК по О.В. Смирновой, Т.А. Кузьминой (1966) с использованием в качестве тест-культуры Е. coli увеличение длительности инкубации проб с 3 до 5 ч повышает величину исследуемого показателя, расхождение данных уменьшается.

Уровень свободного гемоглобина в сыворотке крови (степень гемолиза) обратно коррелирует с величиной БАСК.

Таким образом, при учёте всех рассмотренных методических факторов определения БАСК значительно повышается диагностическая ценность (информативность) данного показателя.

1.5 Апробация работы. Материалы, представленные в диссертации, доложены и обсуждены на научно-практических конференциях молодых учёных и специалистов: «Актуальные проблемы ветеринарии» (Казань, 2007); «Достижения молодых учёных в производство» (Казань, 2008); на Международных научно-практических конференциях: «Проблемы профилактики и борьбы с особо опасными экзотическими и малоизученными инфекционными болезнями животных», труды, посвященной 50-летию ВНИИВВиМ (Покров, 2008); «Достижения супрамолекулярной химии и биохимии в ветеринарии зоотехнии» (Москва, 2008); «Современные научные тенденции в животноводстве» (Киров, 2009); на Всероссийской научной конференции: «Диагностика, лечение и профилактика опасных инфекционных заболеваний. Биотехнология», посвящённой 80-летию со дня основания ФГУ «48 ЦНИИ Минобороны России» (Киров, 2008).

1.6 Публикации результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 8 научных работ, в том числе 1 - в издании, рекомендованном ВАК РФ.

1.7 Основные положения, выносимые на защиту:

1. Величина БАСК зависит от следующих методических факторов: вида используемой тест-культуры (Е. coli и В. subtilis) и питательной среды (МПБ на основе гидролизата Хоттингера и мясной воды), длительности инкубации проб (3 и 5 ч). Существует высокая отрицательная корреляция между концентрацией свободного гемоглобина в сыворотке крови (степень гемолиза) и величиной БАСК у овец.

2. Величина БАСК и активность комплемента у кроликов снижаются вдвое после вакцинации, что свидетельствует об отрицательном влиянии иммунизации на неспецифический гуморальный иммунитет.

3. Сельскохозяйственные животные в порядке снижения величины БАСК распределяются следующим образом: КРС, кролики, овцы; по содержанию пропердина - КРС, овцы, кролики; по уровню лизоцима - КРС, кролики, овцы. У кроликов уровень пропердина ниже, чем у овец, однако их БАСК выше, что свидетельствует о ведущей роли в формировании бактерицидное™ сыворотки крови у этих животных других факторов -лизоцима, комплемента.

1.8 Объём и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 129 страницах компьютерного текста, состоит из следующих разделов: введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов, практических предложений, списка использованной литературы. Работа содержит 19 таблиц, проиллюстрирована 14 рисунками. Список использованной литературы включает 255 библиографических источника, в том числе 67 на иностранном языке и 1 ссылку на интернет-сайт.

2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа выполнена в лаборатории культур клеток и гибридомной технологии ФГУ «Федеральный Центр токсикологической и радиационной безопасности животных» (г. Казань) в течение 2006-2009 гг.

Материалом для получения сыворотки служила кровь, забираемая у клинически здоровых нестельных коров чёрно-пёстрой породы в возрасте 4-6 лет массой от 300 до 400 кг (60 голов), поступавших на конвейер ОАО «Казанский мясокомбинат» из местностей, благополучных по инфекционным заболеваниям. Кровь брали из ярёмной вены стерильно специальными системами во флаконы ёмкостью 250 мл. Для получения сывороток крови от овец и кроликов использовали здоровых животных из вивария ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ». Кровь у овец в возрасте 3-х лет (20 голов) брали из ярёмной вены, у кроликов (12 голов) - из ушной вены.

БАСК определяли по О.В. Смирновой, Т. А. Кузьминой (1966), В .Я.

Саруханову, H.H. Исамову (2001) с использованием Е. coli и В. subtilis; питательных сред: МПБ на основе гидролизата Хоттингера, МПБ на основе мясной воды, мясо-пептонного агара (МПА).

Содержание лизоцима в сыворотке крови определяли по методу С.С. Киселя (1972), используя в качестве тест-культуры Mic. lysodeikticus, выращиваемого на МПА с 1% глюкозой; препарат лизоцима фирмы «ApplliChem» (Германия); фосфатный буфер (рН=6,2).

Комплемент в сыворотке крови определяли по Г.Ф. Вагнеру (1963), применяя гемолитическую сыворотку кролика фирмы «Микроген» (Россия); эритроциты барана.

При определении пропердина в сыворотке крови по Г.С. Томилке, И.С. Старостиной (1984) использовали: препарат зимозана фирмы «Fluka» (Швейцария); альбумин сухой бычий (БелНИИЭМ, Белоруссия); буферы: веронал-мединаловый, трисовый, глициновый. При определении белка по О. Lowry et al. (1951) применяли реактив Фолина - Чокалтеу фирмы «Рапгеас. Quimica. SA» (Испания).

При определении свободного гемоглобина в сыворотке крови использовали набор химреактивов для определения гемоглобина крови гемиглобинцианидным методом - «Гемоглобин-АГАТ», фирмы «АГАТ-МЕД» (Россия), согласно инструкции по определению гемоглобина крови гемиглобинцианидным методом (1974).

Биохимические показатели сыворотки крови определяли на биохимическом анализаторе фирмы «Daytona» (Англия) с использованием реактивов фирмы «Randox» (Англия).

При изучении влияния иммунизации на величину БАСК применялась вакцина против некробактериоза - «ВУП». Сыворотку крови от 12 здоровых кроликов получали до и через 3 недели после иммунизации.

Цифровой материал подвергался статистической обработке на персональном компьютере общепринятыми методами вариационной

статистики (Плохинский H. А., 1978) с вычислением средней арифметической (М), ошибки средней арифметической (±ш), коэффициента вариации (Cv), уровня достоверности (Р) и коэффициента корреляции (г) с использованием программы Microsoft Excel.

3 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Влияние на величину БАСК вида используемой тест-культуры и состава питательной среды, консервации сыворотки холодом и фильтрацией

С целью выявления влияния видовой принадлежности тест-культуры микроорганизма и состава питательной среды на величину БАСК исследована бактерицидность сыворотки крови КРС по В.Я. Саруханову, Н.Н. Исамову (2001) с использованием Е. coli (грамотрицательный микроорганизм) и В. subtilis (грамположительный микроорганизм) на МПБ с основой из гидролизата Хотгингера и мясной воды. Результаты исследований представлены в табл. 1.

Сыворотка крови после однократной заморозки, фильтрации и хранения в течение 1,5 мес. при 2-4 °С часто проростает, что приводит к её выбраковке. Количество проростов увеличивается после повторной фильтрации и хранения сыворотки крови при 2-4 °С в течение 6 мес. В связи с этим нами оценено влияние консервации сыворотки крови холодом и фильтрацией на величину БАСК, определённую по В.Я. Саруханову, Н.Н. Исамову (2001). Данные представлены в таблице 1.

Таблица 1 - Влияние вида тест-культуры и питательной среды, консервации сыворотки крови холодом и фильтрацией на величину БАСК (%)

Вид Варианты МПБ на основе ...

микро- сыворотки гидролизата мясной воды

организма Хотгингера

М±ш Cv (%) М±ш Cv (%)

1 2 3 4 5 6

В. subtilis свежая -26,4±1,6 12,4 38,3±3,3 17,1

__Продолжение таблицы 1

1 2 3 4 5 6

свежая 48,6±3,9 14,1 60,7±5,4 15,5

Е. coli после фильтрации и хранения при 2-4 °С в течение 1,5 55,3±1,8 4,5 70,0±1,1 2,2

мес

Примечание: Р<0,01.

Как видно из таблицы 1 для тест-культуры Е. coli величина БАСК выше в сравнении с В. subtilis: при применении МПБ на основе гидролизата Хоттингера разница составляет 75 %, мясной воды - 22,4 %. Мы предполагаем, что при определении БАСК с использованием в качестве тест-культуры грамотрицательного микроорганизма (Е. coli) косвенно оценивается уровень комплемента и пропердина в сыворотке крови, а при использовании грамположительного (В. subtilis) - лизоцима. Следовательно и величина БАСК будет зависеть от содержания в сыворотке крови соответствующих факторов и может существенно различаться, что показано нами.

При использовании в качестве основы МПБ мясной воды величина БАСК выше в сравнении с основой из гидролизата Хоттингера - для Е. coli разница составляет 12 %, для В. subtilis - 64 %. Мы связываем это, во-первых, с тем, что на МПБ с основой из мясной воды рассмотренные микроорганизмы растут интенсивнее чем с основой из гидролизата Хоттингера. Следовательно, прирост оптической плотности в контроле выше, разница между оптической плотностью в контроле и опыте возрастает и, соответственно, повышается величина БАСК. Во-вторых, согласно О.В. Боровикову, A.M. Катханову (1985), отдельные партии питательных сред (бульон Хоттингера) могут обладать антикомплементарной активностью и, таким образом, в значительной степени ингибировать этот компонент бактерицидной системы.

Из таблицы 1 видно, что после однократной заморозки, фильтрации и хранения сыворотки крови КРС при 2-4 °С в течение 1,5 мес величина БАСК

была незначительно выше (5-10 %), по сравнению с результатами, полученными со свежей сывороткой. Таким образом, можно констатировать отсутствие влияния на величину БАСК перечисленных процедур.

В таблице 2 приводятся данные по влиянию на величину бактерицидной активности (%) сыворотки крови КРС её повторной фильтрации и хранения при 2-4 °С в течение 6 мес. БАСК определяли по О.В. Смирновой, Т.А. Кузьминой (1966) с использованием Е. coli и В. subtilis.

Таблица 2 - Влияние повторной фильтрации и хранения при 2-4 °С в течение 6 мес сыворотки крови КРС на величину её бактерицидной активности (%)

Вид микроорганизма Варианты сыворотки МПБ на основе ...

гидролизата Хоттингера мясной воды

М±ш Cv (%) М±ш Cv (%)

Е. coli после фильтрации и хранения при 2-4 °С в течение 1,5 мес -131,1±37,2 40,2 27,1±1,7* 8,6

В. subtilis 47,5±0,4 1,6 57,4±0,7** 2,4

Е. coli после повторной фильтрации и хранения при 2-4 °С в течение 6 мес -134,2±10,2 10,8 -11,3±1,0** 12,3

В. subtilis -12,7±5,3 58,9 30,7±9,1* 41,8

Примечание: *,** - уровни достоверности различия, соответственно Р<0,05; <0,001.

Установлено, что в результате повторной фильтрации и хранения сыворотки крови при 2-4 °С в течение 6 мес. БАСК снижается при использовании Е. coli на 3,1 (гидролизат Хоттингера) и 38,4 % (мясная вода), а при использовании В. subtilis - на 60,2 (гидролизат Хоттингера) и 26,7 % (мясная вода). Таким образом, повышение числа проростов сыворотки крови после повторной фильтрации и хранения при 2-4 °С в течение 6 мес по нашему мнению связано с негативным влиянием перечисленных факторов консервации на составляющие БАСК (лизоцим, пропердян, комплемент). 3.2 Влияние на величину БАСК концентрации взвеси тест-культуры

При определении БАСК по О.В. Смирновой, Т.А. Кузьминой (1966) в пробу вносится 1 капля суточной бульонной культуры тест-микроба, в

которой согласно авторам содержится 5-6 млн. микроб, кл. По нашему мнению, различные суточные бульонные культуры будут отличаться по концентрации микроорганизмов и, соответственно, в 1 капле будет содержаться различное количество тест-микроба. Это может существенно повлиять на величину БАСК ввиду неидентичности условий опыта. Кроме того, при применении метода О.В. Смирновой, Т.А. Кузьминой (1966) с длительностью инкубации 3 ч и использованием Е. coli величина БАСК ниже литературных данных, а также при применении МПБ на основе гидролизата Хоттингера выражается отрицательными числами.

В связи с этим мы решили стандартизировать содержание тест-культуры в 1 капле до 5 млн микроб, кл., а также проверить зависимость величины БАСК от количества вносимой тест-культуры, добавляя в пробу 5, 100 и 150 млн микроб, кл. Для этого выращивали Е. coli на скошенном МПА при 37 °С 24 ч, затем смывали бакмассу стерильным 0,9. %-ым раствором NaCl, которым полученную взвесь доводили до концентрации 500 млн микроб, кл./мл.

Результаты опытов приводятся в табл. 3.

Таблица 3 - Зависимость величины БАСК (%) у КРС от количества Е.

coli, вносимой в пробу

Количество Е, coli в пробе(млн микроб, кл.) МПБ на основе... М±ш Cv (%) Прирост Д в контроле (ед. опт. плотн.)

5 (стандарт) гидролизита Хоттингера -58,3±7,6 15,8 0,0047

мясной воды 67,2±8,8 21,8 0,0210

гидролизата Хоттингера -3,6±1,2* 2,6 0,0048

мясной воды 23,5±8,1* 13,8 0,0056

100 гидролизата Хоттингера -131,4±9,4* 26,3 0,025

мясной воды 18,6±4,8* 10,8 0,036

150 гидролизата Хоттингера -58,0±9,0 26,4 0,028

мясной воды 32,6±1,8* 7,7 0,047

Примечание: * - уровень достоверности различия, соответственно Р<0,05

Выявлено, что внесение в пробу стандартизированного количества микроорганизмов - 5 млн. микроб, кл. (1 и 2 серии опытов) не привело к стабильности результатов. Так, серии опытов 1 и 2 существенно отличаются по величине БАСК: при применении МПБ на основе гидролизата Хоттингера она составляла -58,3 % и -3,6 % соответственно, а при использовании МПБ на основе мясной воды 67,2 % и 23,5 % соответственно. Также из таблицы 3 видно, что увеличение количества вносимой в пробу тест-культуры до 100 и 150 млн. микроб, кл./мл снижает величину БАСК.

Из таблицы 3 следует, что применение МПБ на основе мясной воды повышает величину БАСК в сравнении с основой из гидролизата Хоттингера, при использовании которого она выражается отрицательными величинами. На МПБ с основой из мясной воды Е. coli растёт лучше, так как прирост оптической плотности в контрольной пробе за 3 ч выше в сравнении с МПБ на основе гидролизата Хоттингера, чем по нашему мнению объясняются более высокие величины БАСК. Так, прирост оптической плотности в контрольной пробе при использовании МПБ на основе мясной воды выше в сравнении с использованием основы из гидролизата Хоттингера в 1 серии опытов на 0,016 ед. оптич. плотности, в 3 серии опытов - на 0,011 ед. оптич. плотности, в 4 серии опытов - на 0,019 ед. оптич. плотности. 3.3 Влияние на величину БАСК длительности инкубирования

В методике определения БАСК по О.В. Смирновой, Т.А. Кузьминой (1966) длительность инкубирования составляет 3 ч, однако при данной продолжительности инкубирования величина БАСК является низкой (табл. 3). Мы решили оценить влияние длительности инкубации на величину БАСК, увеличив её до 5 ч. БАСК определяли с применением суточных бульонных культур Е. coli и В. subtilis.

Данные представлены в таблице 4.

Таблица 4 - Влияние длительности инкубирования на величину БАСК (%) у

КРС

МПБ на основе... Длительность инкубирования, ч

3 (станда эт) | 5

В. subtilis Е. coli

M±m С,(%) M±m С, (%) М±ш Cv (%)

гидролизата Хоттингера 47,5±0,4 1,6 -78,0±27,1 49,2 63,7±1,6 5,0

мясной воды 57,4±0,7** 2,4 18,6±2,7* 20,2 77,1*1,6** 4,3

Примечание: *, ** - уровни достоверности различия, соответственно

Р<0,05; <0,001.

Из таблицы 4 видно, что увеличение длительности инкубации с 3 до 5 ч при определении БАСК с использованием Е. coli приводит к повышению её величины как при использовании МПБ на основе гидролизата Хоттингера -разница составляет 141,7 %, так и мясной воды - разница составляет 58,5 %, приводя её в соответствие с литературными данными.

Также из таблицы 4 следует, что величина БАСК при длительности инкубации 3 ч и применении В. subtilis является высокой и стабильно положительной как при использовании МПБ на основе гидролизата Хоттингера (47,5 %), так и мясной воды (57,4 %).

При макро- и микроскопии контрольных и опытных проб при длительности инкубирования 3 и 5 ч наблюдался бактерицидный эффект сыворотки крови. Однако, при инкубировании в течение 3 ч наблюдаются отрицательные значения БАСК при использовании Е, coli и МПБ на основе гидролизата Хоттингера (-78 %). В этом случае можно констатировать наличие ложноотрицательной реакции, поскольку при увеличении длительности инкубации до 5 ч происходит повышение величины БАСК, которая становится стабильно положительной и соответствует литературным данным. Это происходит, по нашему мнению, за счёт существенного прироста оптической плотности (Д) в контроле через 4-5 ч, поскольку к этому времени лаг-фаза, вследствие интенсивного размножения микроорганизма (Е. coli), переходит в экспоненциальную. А

оптическая плотность в опыте остаётся неизменной. Поэтому, чем больше длительность инкубации, тем выше Д в контроле и соответственно разница между Д опыта и контроля, дающая возрастающее значение БАСК. Всё это говорит о зависимости величины БАСК при использовании в качестве тест-культуры Е. coli от длительности инкубирования и, соответственно, от прироста Д в контроле.

Высокие значения БАСК при инкубации проб в течение 3 ч и использовании В. subtilis (табл. 4) в отличие от применения Е. coli объясняются тем, что В. subtilis за 3 ч инкубирования успевает достаточно размножиться в контроле и дать необходимый прирост Д в нём. В результате этого разница между Д в контроле и опыте увеличивается, давая положительные данные.

3.4 Влияние на показатель БАСК уровня содержания гемоглобина в сыворотке крови

В процессе получения сыворотки достаточно высока вероятность гемолиза крови. Кроме того, концентрация свободного гемоглобина в крови может варьировать и от состояния исследуемого животного. В организме постоянно имеет место так называемый физиологический гемолиз вследствие естественного старения эритроцитов. Между тем, в доступной литературе отсутствуют публикации о влиянии содержания гемоглобина в сыворотке крови на величину БАСК.

Нами на овцах оценено влияние содержания свободного гемоглобина в сыворотке крови на величину БАСК, которую определяли по В.Л. Саруханову, H.H. Исамову (2001) с использованием в качестве тест-культуры Е. coli.

Результаты исследований представлены в таблице 5.

Таблица 5 - Влияние концентрации свободного гемоглобина на величину

БАСК у овец

МПБ на основе... БАСК (%) Свободный гемоглобин (г/л) Цвет сыворотки крови

М±т Cv(%)

гидролизата Хоттингера -91,6±19,6* 48 2,3 красный

мясной воды -40,2±15,6* 87

гидролизата Хоттингера -19,9±3,5* 53 2,0 светло-красный

гидролизата Хоттингера -48,2±4,4* 18 Ц6 светло-розовый

мясной воды 4,4±0,9* 37

гидролизата Хоттингера 2,3±0,5* 28 1,5 бесцветный

мясной воды 28,6±3,1* 22

гидролизата Хоттингера -3,3±1,2 68 1,3

мясной воды 19,7±2,0 20

Примечание: * - уровень достоверности различия, соответственно Р<0,05

Как видно из таблицы 5, при снижении уровня свободного гемоглобина в сыворотке крови величина БАСК возрастает. Между БАСК и концентрацией свободного гемоглобина в сыворотке крови имеет место высокая отрицательная корреляция (г > -0,78; Р<0,05). Это можно объяснить угнетением активности определённых составляющих БАСК (лизоцима, комплемента, пропердина) свободным гемоглобином. Так, Э.П. Ченчикова и соавт. (1986), Н. Milgrom et al. (1980) указывают на гипокомплементемию при гемолитической анемии.

3.5 Изменение БАСК и активности комплемента у кроликов после иммунизации

Достаточно актуально в раскрытии механизмов поствакцинальных осложнений является определение влияния вакцинации, активизирующей выработку соответствующих антител, на неспецифическое звено иммунитета. Публикации по данному вопросу единичны.

Для выявления влияния иммунизации на величину БАСК и активность комплемента использовали в качестве биологической модели кроликов, которым вводили вакцину против некробактериоза - «ВУП». БАСК определяли до и через 3 недели после иммунизации по В.Я. Саруханову, H.H.

Исамову (2001) с использованием Е. coli. Применяли МПБ на основе мясной воды. В результате иммунизации БАСК у кроликов снизилась в 2 раза: с 45,9±0,9 до 22,6±5,4 % (Р<0,05). Активность комплемента сыворотки крови у кроликов через 3 недели после иммунизации также снизилась в 2 раза: с 24,9±0,1 до 12,7±0,4 % (Р<0,005).

Выявлена высокая положительная корреляция (г) между БАСК и уровнем комплемента, которая составляла до иммунизации 0,87 и после -0,92 (Р<0,05).

Снижение величины БАСК и активности комплемента у кроликов после иммунизации может способствовать повышению их заболеваемости в поствакцинальный период.

3.6 Видовые особенности основных составляющих БАСК и их вклад в формирование её величины

Важным в раскрытии механизмов естественного иммунитета у различных видов животных является сравнительное изучение БАСК и основных её составляющих - лизоцима, комплемента, пропердина, а также их вклада в формирование её величины.

Данные по содержанию лизоцима и пропердина в сыворотке крови КРС, кроликов и овец представлены в таблице 6.

Таблица 6 - Содержание лизоцима (мкг/мл) и пропердина (мкг/мл) в сыворотке крови различных видов животных

Показатель Вид животного

КРС Кролик Овца

М±т Cv М±т СУ М±т Cv

(%) (%) (%)

лизоцим 4,0±0,2 5,2 3,0±0,1* 3,3 1,0±0,1** 14,8

пропердин 492,2±24,4 7,0 197,5±1,2** 0,8 293,9±12,2* 5,9

Примечание: *, ** - уровни достоверности различия, соответственно Р<0,01; <0,001.

Как видно из таблицы 6, самый высокий уровень лизоцима имеет место в сыворотке крови у КРС, у кроликов его меньше в 1,3 раза, у овец - в 4 раза.

Наиболее высокое содержание пропердина в сыворотке крови наблюдается у КРС, у овец его меньше в 1,7 раза, у кроликов - в 2,5 раза.

В использованной методике определения пропердина применяется веронал-мединаловый буфер (ВМБ), компонентами которого являются сильнодействующие вещества - снотворные. Мы решили заменить его на другие буферы, приготавливаемые из более доступных ингредиентов: трисовый, глициновый. В качестве объекта исследования использовали сыворотку крови КРС.

Результаты определения пропердина в сыворотке крови КРС с использованием ВМБ, трисового и глицинового буферов, а также 0,9 %-го раствора №С1 представлены в таблице 7.

Таблица 7 - Содержание пропердина (мкг/мл) в сыворотке крови КРС при использовании различных буферных систем и 0,9 %-го раствора №С1

Серии опытов Буфер 1

веронал-мединаловый (контроль) трисовый глициновый 1 0,9 % ЫаС1 ! 1

1 520±б,4 480±5,7 490±6,4 ! 282±3,4*

2 445±4,6 430±7,4 420±5,8 ! 277±6,6*

3 432±8,3 395±4,3 445±8,5 ; 279±7,5*

Итого 465,7±33,6 435±23,0 451,7±26,1 1 279,3±1,8*

Примечание: * - уровень достоверности различия, соответственно Р <

0,01.

Как видно из таблицы 7, замена ВМБ на трисовый и глициновый существенно не повлияли на величину определяемой концентрации пропердина. Однако применение 0,9 %-го раствора №С1 вместо ВМБ уменьшило величину содержания пропердина в 1,8 раза, что связано, по нашему мнению, с растворением осадка при отмывании комплекса пропердин-зимозан 0,9 %-ым раствором КаС1.

Сельскохозяйственные животные в порядке снижения величины БАСК распределяются следующим образом: КРС, кролики, овцы; по содержанию

пропердина - КРС, овцы, кролики; по уровню лизоцима - КРС, кролики, овцы. По величине БАСК и содержанию пропердина у сывороток овец и кроликов имеется несоответствие: у овец БАСК ниже, а содержание пропердина выше, чем у кроликов. Это говорит о ведущей роли в формировании бактерицидности сыворотки крови кроликов других факторов - лизоцима, комплемента. Показана высокая степень прямой корреляции между БАСК и активностью комплемента у кроликов (г=0,87; Р<0,05).

Установлена высокая степень прямой корреляции (г) между БАСК, определённой по В.Я. Саруханову, H.H. Исамову (2001) с использованием Е. coli, и уровнем пропердина в сыворотке крови у КРС, которая составляет при использовании МПБ на основе гидролизата Хотгингера 0,59 и при использовании МПБ на основе мясной воды 1,0 (Р<0,001). Между БАСК и уровнем пропердина в сыворотке крови у овец существует средняя и высокая степень прямой корреляции (г): при применении МПБ на основе гидролизата Хоттингера она составляет 0,34, при применении МПБ на основе мясной воды составляет 0,86 (Р<0,001).

4 ВЫВОДЫ

1. Показана зависимость величины БАСК от вида используемых питательной среды и тест-культуры микроорганизма. Применение в качестве основы МПБ мясной воды повышает величину БАСК в сравнении с основой из гидролизата Хоттингера. При применении в качестве тест-культуры Е. coli величина БАСК, определяемая по В.Я. Саруханову, H.H. Исамову (2001), составляет 48,6 (МПБ на основе гидролизата Хоттингера) и 60,7 % (МПБ на основе мясной воды), а при использовании В. subtilis она варьирует от -26,4 (МПБ на основе гидролизата Хотгингера) до 38,3 % (МПБ на основе мясной воды).

длительности инкубирования до 5 ч величина БАСК повысилась: при использовании в качестве основы гидролизата Хоттингера она составляла 63,7 %, мясной воды - 77,1 %.

3. Консервация сыворотки крови КРС холодом (однократная заморозка, хранение при 2-4 °С в течение 1,5 мес) и её фильтрация не влияют на величину БАСК. Повторная фильтрация, хранение сывороток в течение 6 мес. при 2-4 °С снижают величину БАСК как при использовании Е. coli, так и В. subtilis.

4. Показана высокая отрицательная корреляция между концентрацией свободного гемоглобина в сыворотке крови овец (степень гемолиза) и величиной БАСК: при применении МПБ на основе гидролизата Хоттингера г равняется -0,78 (Р<0,05), при применении МПБ на основе мясной воды он составляет -0,95 (Р<0,05).

5. Иммунизация на примере кроликов негативно влияет на величину БАСК и активность комплемента. Так, БАСК и активность комплемента, составлявшие до вакцинации против некробактериоза 45,9 и 24,9 %, через 3 недели после вакцинации снизились в 2 раза - 22,6 и 12,7 % соответственно.

6. Замена веронал-мединалового буфера на трисовый и глициновый существенно не влияет на величину определяемой концентрации пропердина в сыворотке крови КРС, тогда как применение вместо веронал-мединалового буфера 0,9 %-го NaCl снизило определяемую величину в 1,8 раза.

Выявлена высокая степень прямой корреляции между БАСК и уровнем пропер дина в сыворотке крови у КРС: при использовании МПБ на основе гидролизата Хоттингера г=0,59 (Р<0,001) и при использовании МПБ на основе мясной воды г=1,0 (Р<0,001). Между БАСК и уровнем пропердина в сыворотке крови у овец существует средняя и высокая степень прямой корреляции: при применении МПБ на основе гидролизата Хоттингера г=0,34 (Р<0,001), при применении МПБ на основе мясной воды г=0,86 (Р<0,001).

5 ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. При определении БАСК у животных в норме, необходимо применять микроорганизмы, относящиеся к разным группам по Граму, например Е. coli и В. subtilis. В идеале, при определении БАСК у больных животных в качестве тест-культуры необходимо использовать возбудитель конкретного заболевания или, в крайнем случае, микроорганизм, который находится с патогеном в одной группе при окраске по Граму, Рекомендуется использовать в качестве основы МПБ мясную воду, поскольку при этом повышается величина БАСК по сравнению с использованием основы из гидролизата Хоттингера. Рекомендуется при определении БАСК по О.В. Смирновой, Т.А. Кузьминой (1966) с применением Е. coli увеличить продолжительность инкубации пробы с 3 до 5 ч.

2. Для адекватной оценки показателя БАСК необходимо использовать негемолизированную сыворотку крови, на физиологическом уровне содержания свободного гемоглобина.

3. При определении пропердина по Г. С. Томилке, Н.С. Старостиной (1984) допустима замена дефицитного веронал-мединалового буфера на трисовый, или глициновый.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Малёв, A.A. Влияние вида микроорганизма, используемого в качестве тест-культуры, на результаты определения БАСК / A.A. Малёв, Э.Р. Галиуллина, Ю.В. Булычева //. Актуальные проблемы ветеринарии: Матер, научно-практической конференции молодых учёных и специалистов, 29 июня 2007 г. - Казань, 2007. - С. 119-121.

2. Малёв, A.A. Особенности определения БАСК с использованием тестовых культур микроорганизмов из разных таксономических групп / A.A. Малёв // НИВА Татарстана. - 2008. - №4. - С. 43.

3. Малёв, A.A. Влияние на показатель БАСК уровня содержания гемоглобина в сыворотке крови овец / A.A. Малёв // Достижения молодых учёных в производство: Научно-практическая конференция молодых учёных и специалистов, посвященная 100-летию со дня рождения профессора Х.Х. Абдуллина. - Казань, 2008. - С. 158-161.

4. Малёв, A.A. Диагностическая значимость показателя бактерицидной активности сыворотки крови: достоинства и недостатки метода / A.A. Малёв, Р.Я. Гильмутдинов // Проблемы профилактики и борьбы с особо опасными экзотическими и малоизученными инфекционными болезнями животных: Труды Международной научно-практической конференции, посвященной 50-летию ВНИИВВиМ.-Т. 2.-Покров, 2008.-С. 141-144.

5. Малёв, A.A. Методические особенности определения БАСК / A.A. Малёв, Р.Я. Гильмутдинов // Диагностика, лечение и профилактика опасных инфекционных заболеваний. Биотехнология: Материалы Всерос. научной конференции, посвящённой 80-летию со дня основания ФГУ «48 ЦНИИ Минобороны России». - Киров, 2008. - С. 190-193.

6. Малёв, A.A. Изменение БАСК у кроликов после иммунизации / A.A. Малёв, Е.К. Акимов, Р.Я. Гильмутдинов II Достижения супрамолекулярной химии и биохимии в ветеринарии зоотехнии: Международная научно-практическая конференция, 22-25 сентября, 2008 г. - Москва, 2008. - С. 154.

7. Малёв, A.A. Влияние на величину БАСК консервации сыворотки крови холодом и фильтрацией / A.A. Малёв, Р.Я Гильмутдинов // Современные научные тенденции в животноводстве. Ч. 2. Ветеринарная медицина: Сборник статей Международной научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения П.Г. Петского, 16-17 апреля 2009 г. - Киров, 2009. - С. 167-169.

8. Малёв, A.A. Методология изучения бактерицидной активности сыворотки крови при оценке неспецифической резистентности животных / A.A. Малёв, Р.Я. Гильмутдинов // Ветеринарный врач. - 2009. - № 5. - С. 2527.

Отпечатано в ООО «Печатный двор», г. Казань, ул. Журналистов, 1/16, оф.207

Тел: 272-74-59,541-76-41,541-76-51. Лицензия ПД №7-0215 от 01.11.2001 г. Выдана Поволжским межрегиональным территориальным управлением МПТР РФ. Подписано в печать 30.10.2009г. Уел п.л 1,4 Заказ МК-6738. Тираж 100 экз. Формат 60x841/16. Бумага офсетная. Печать - ризография.

Оглавление диссертации Малёв, Анатолий Александрович :: 2009 :: Казань

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 БАСК и её основные составляющие у животных различных видов.

1.1.1 БАСК.

1.1.2 Лизоцим.

1.1.3 Система комплемента.

1.1.4 Пропердин.

1.2 Методы определения БАСК и её основных составляющих.

1.2.1 БАСК.

1.2.1.1 Нефелометрические методы.

1.2.1.2 Бактериологические методы.

1.2.2 Методы определения основных составляющих БАСК - лизоцима, комплемента, пропердина.

1.3 Влияние методических факторов на величину БАСК и её основных составляющих.

1.3.1 Механизмы нейтрализации микроорганизмами гуморальных факторов неспецифической резистентности макроорганизма.

1.3.2 Зависимость БАСК и её составляющих от состояния организма животного.

1.3.2.1 Физиологические состояния (возраст, беременность, генетические факторы, условия транспортировки, содержания).

1.3.2.2 Патологические состояния.

1.4 Использование сыворотки крови животных в микробиологических питательных средах.

1.5 Особенности направленности изменений БАСК и её основных составляющих у животных различных видов.

2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1.1 МАТЕРИАЛЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1.2 МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.2 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.2.1 Влияние на величину БАСК вида используемой тест-культуры и состава питательной среды.

2.2.2 Влияние на величину БАСК консервации сыворотки крови холодом и фильтрацией. ^

2.2.3 Влияние на величину БАСК концентрации взвеси тест-культуры. ^

2.2.4 Влияние на величину БАСК длительности инкубирования. ^

2.2.5 Влияние на показатель БАСК уровня содержания гемоглобина в сыворотке крови.

2.2.6 Изменение БАСК и активности комплемента у кроликов после иммунизации. ''

2.2.7 Видовые особенности БАСК и основных её составляющих (лизоцима, пропердина).

2.2.8 Степень зависимости БАСК от основных её составляющих и биохимических показателей у различных видов животных.

3 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ВЫВОДЫ.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Введение диссертации по теме "Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология", Малёв, Анатолий Александрович, автореферат

Актуальность темы. В решении современных как теоретических, так и практических проблем инфекционной патологии значительное место занимает оценка уровня естественной (врождённой) резистентности животных (Фролов А.Ф. и соавт., 1986; Полищук Е.И., Пархоменко JI.B., 1987). Естественная резистентность определяется клеточными и гуморальными факторами. К последним относят лизоцим, систему комплемента, пропердин и др., часто оцениваемые с помощью интегрального показателя - бактерицидной активности сыворотки крови (БАСК). Однако информативность (диагностическая значимость) показателя БАСК остаётся малоизученной. Несмотря на активное его использование для определения неспецифической резистентности организма в России и бывших социалистических странах, в целом за рубежом данный тест распространения не получил.

В большинстве существующих методов определения БАСК в качестве исследуемого микроорганизма используются штаммы кишечной палочки, (Красильников А.П., Романовская Т.Р., 1999). Между тем, вызывает вопросы степень адекватности определения БАСК у больных животных с использованием общепринятых тест-культур бактерий относительно возбудителей различных инфекций.

Цель и задачи исследований. Целью работы являлось изучение информативности показателя БАСК и основных её составляющих - лизоцима, комплемента, пропердина.

Для достижения указанной цели решались следующие задачи:

- сравнительно исследовать величину БАСК и её основных составляющих у млекопитающих различных видов;

- определить влияние на величину БАСК и её основных составляющих методических факторов (вида тест-культуры бактерий и питательной среды, концентрации взвеси тест-культуры, времени инкубирования, консервирования сыворотки крови холодом и фильтрацией);

- оценить вклад в формирование величины БАСК её основных составляющих (лизоцима, пропердина, комплемента) у животных различных* видов;

Научная новизна работы. Впервые комплексно рассматривается диагностическая значимость БАСК и зависимость её величины от методических факторов.

Показано, что величина БАСК различается при использовании в качестве тест-культур Е. coli (грамотрицательный микроорганизм) и В. subtilis (грамположительный микроорганизм). Установлено, что применение в качестве питательной среды МПБ. на основе мясной воды повышает величину БАСК в сравнении с использованием МПБ на основе гидролизата Хоттингера. Выявлена зависимость величины БАСК, определяемой по О.В. Смирновой,

Т.А. Кузьминой (1966), от длительности инкубирования проб: при увеличении её с 3 до 5 ч происходит повышение БАСК. Впервые установлена обратная зависимость величины БАСК от уровня свободного гемоглобина в сыворотке крови на примере овец (г > -0,78; Р<0,05). Проведено сравнение методик определения БАСК с выявлением наиболее простых в исполнении, высокоинформативных вариантов, что делает их применение более доступным в лабораторной практике. Рассмотрен вклад основных составляющих (лизоцима, пропердина, комплемента) в величину БАСК у КРС, овец и кроликов.

Практическая значимость работы. Предлагается при определении уровня БАСК у животных в норме применять микроорганизмы, относящиеся к разным группам по Граму, в частности Е. coli и В. subtilis. Это позволяет при определении БАСК оценить и все её составляющие (лизоцим, система комплемента, пропердин). В идеале, при определении БАСК у больных животных в качестве тест-культуры необходимо использовать возбудителя именно этого заболевания или, в крайнем случае, микроорганизм, который находится в одной группе, при окраске по Грамму, с патогеном.

Использование в качестве основы мясо-пептонного бульона (Mi ЛЬ) мясной воды повышает величину БАСК по сравнению с основой из гидролизата Хоттингера. К тому же, при использовании последнего возможны отрицательные значения БАСК.

При определении БАСК по О.В. Смирновой, Т. А. Кузьминой с использованием в качестве тест-культуры Е. coli увеличение длительности инкубации проб с 3 до 5 ч повышает величину исследуемого показателя, расхождение данных уменьшается.

Уровень свободного гемоглобина в сыворотке крови (степень гемолиза) обратно коррелирует с величиной БАСК.

Апробация работы. Материалы, представленные в диссертации, доложены и обсуждены на научно-практических конференциях молодых учёных и специалистов: «Актуальные проблемы ветеринарии» (Казань, 2007); «Достижения молодых учёных в производство» (Казань, 2008); на Международных научно-практических конференциях: «Проблемы профилактики и борьбы с особо опасными экзотическими и малоизученными инфекционными болезнями животных», труды, посвященной 50-летию ВНИИВВиМ (Покров, 2008); «Достижения супрамолекулярной химии и биохимии в ветеринарии зоотехнии» (Москва, 2008); «Современные научные тенденции в животноводстве» (Киров, 2009); на Всероссийской научной конференции: «Диагностика, лечение и профилактика опасных инфекционных заболеваний. Биотехнология», посвященной 80-летию со дня основания ФГУ «48 ЦНИИ Минобороны России» (Киров, 2008).

Публикации результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 8 научных работ, в том числе 1 - в издании, рекомендованном ВАК РФ.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

1. Величина БАСК зависит от следующих методических факторов: вида^ используемой тест-культуры (Е. coli и В. subtilis), вида питательной среды (МПБ на" основе гидролизата Хоттингера и мясной воды), длительности инкубации проб (3 и 5 ч). Существует высокая отрицательная корреляция между концентрацией свободного гемоглобина в сыворотке крови (степень гемолиза) и величиной БАСК у овец.

2. Величина БАСК и активность комплемента у кроликов снижаются вдвое после вакцинации, что говорит об отрицательном влиянии иммунизации на неспецифический гуморальный иммунитет.

3. Сельскохозяйственные животные в порядке снижения величины БАСК распределяются следующим образом: КРС, кролики, овцы; по содержанию пропердина — КРС, овцы, кролики; по уровню лизоцима — КРС, кролики, овцы. У кроликов уровень пропердина ниже, чем у овец, однако их БАСК выше, что свидетельствует о ведущей роли в формировании бактерицидности сыворотки крови у этих животных других факторов - лизоцима, комплемента.

Объём и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 131 страницах компьютерного текста, состоит из следующих разделов: введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов, практических предложений, списка литературы. Работа содержит 19 таблиц, проиллюстрирована 14 рисунками. Список использованной литературы включает 255 библиографических источников, в том числе 67 на иностранном языке и 1 ссылку на интернет-сайт.

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертационного исследования на тему "Бактерицидная активность сыворотки крови различных видов животных, её диагностическая значимость"

выводы

1. Показана зависимость величины БАСК от вида используемых питательной среды и тест-культуры микроорганизма. Применение в качестве основы МПБ мясной воды повышает величину БАСК в сравнении с основой из гидролизата Хоттингера. При применении в качестве тест-культуры Е. coli величина БАСК, определяемая по В .Я. Саруханову, H.H. Исамову (2001), составляет 48,6 (МПБ на основе гидролизата Хоттингера) и 60,7 % (МПБ на основе мясной воды), а при использовании В. subtilis она варьирует от -26,4 (МПБ на основе гидролизата Хоттингера) до 38,3 % (МПБ на основе мясной воды).

2. Величина БАСК положительно коррелирует с длительностью инкубации проб. При 3-часовой инкубации с использованием МПБ на основе гидролизата Хоттингера БАСК у КРС равнялась -78 %, а с использованием МПБ на основе мясной воды - 18,6 %. При увеличении длительности инкубирования до 5 ч величина БАСК повысилась: при использовании в качестве основы гидролизата Хоттингера она составляла 63,7 %, мясной воды - 77,1 %.

6. Замена веронал-мединалового буфера на трисовый и глициновый существенно не влияет на величину определяемой концентрации пропердина в сыворотке крови КРС, тогда как применение вместо веронал-мединалового буфера 0,9 %-го №С1 снизило определяемую величину в 1,8 раза.

7. Сельскохозяйственные животные в порядке снижения величины БАСК распределяются следующим образом: КРС, кролики, овцы; по содержанию пропердина - КРС, овцы, кролики; по уровню лизоцима - КРС, кролики, овцы. У кроликов уровень пропердина ниже, чем у овец, тогда как БАСК выше, что свидетельствует о ведущей роли в формировании бактерицидности сыворотки крови кроликов других факторов - лизоцима, комплемента. В частности, показана высокая степень прямой корреляции между БАСК и активностью комплемента у кроликов (г=0,87; Р<0,05). Выявлена высокая степень прямой корреляции между БАСК и уровнем пропердина в сыворотке крови у КРС: при использовании МПБ на основе гидролизата Хоттингера г=0,59 (Р<0,001) и при использовании МПБ на основе мясной воды г=1,0 (Р<0,001). Между БАСК и уровнем пропердина в сыворотке крови у овец существует средняя и высокая степень прямой корреляции: при применении МПБ на основе гидролизата Хоттингера г=0,34 (Р<0,001), при применении МПБ" на основе мясной воды г=0,86 (Р<0,001).

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. При определении БАСК у животных в норме, необходимо применять микроорганизмы, относящиеся к разным группам по Граму, например Е. coli и В. subtilis. В идеале, при определении БАСК у больных животных в качестве тест-культуры необходимо использовать возбудитель конкретного заболевания или, в крайнем случае, микроорганизм, который находится с патогеном в одной группе при окраске по Граму. Рекомендуется использовать в качестве основы МПБ мясную воду, поскольку при этом повышается величина БАСК по сравнению с использованием основы из гидролизата Хоттингера. Рекомендуется при определении БАСК по О.В. Смирновой, Т.А. Кузьминой (1966) с применением Е. coli увеличить продолжительность инкубации пробы с 3 до 5 ч.

3. При определении пропердина по Г.С. Томилке, Н.С. Старостиной (1984) допустима замена дефицитного веронал-мединалового буфера на трисовый, или глициновый.

Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 2009 года, Малёв, Анатолий Александрович

1. Азаубаева, Г. Особенности естественной резистентности шадринских гусей / Г. Азаубаева, С. Суханова // Птицеводство. 2007. - № 6. - С. 7.

2. Алексеева, С.А. Влияние «Лигногумата КД» калиевого и натриевого на защитные свойства организма кур-несушек / С.А. Алексеева, Д.П. Глебов // Ветеринарная патология. 2007. - №2. - С. 220-223.

3. Ароне, P.M. Об определении бактерицидной активности и активности ß-лизинов сыворотки крови / P.M. Ароне, В.В. Глейзер // Лаб. дело. 1982. -№8. - С. 490-492.

4. Багдасаров, A.A. Изучение пропердиновой системы организма / A.A. Багдасаров и др. // Проблемы гематологии и переливания крови. 1958. -№2. - С. 3-7.

5. Багдасаров, A.A. Пропердиновая система организма / A.A. Багдасаров, И.Л. Чертков, М.О. Раушенбах. М.: Медгиз, 1961. - С. 33-43.

6. Бажов, Г.М. Племенное свиноводство / Г.М. Бажов. СПб.: Лань, 2006. -384 с.

7. Байматов, В.Н. Коррекция неспецифической резистентности организма коров в зоне с недостатком йода / В.Н. Байматов, Э.Р. Исмагилова // Ветеринария. 2000. - № Ю. - С. 38-41.

8. Бакирова, Г.Х. Иммуноморфологические реакции в организме животных под влиянием медовых композиций с лекарственными растениями: Автореф. дисс. . канд. биол. наук. / Г.Х. Бакирова. Уфа, 2005. - 16 с.

9. Балахнин, И.А. Динамика иммунологических показателей у карповых рыб при воздействии метиленовой синькой / И.А. Балахнин и др. // Физиол. журн. 1989. - Т. 35. - № 4. - С. 44-52.

10. Балахнин, И.А. Вплив автолизату гриба роду Fusarium на деяки имунологични та биологични покажники стану организму коропа / И.А. Балахнин и др. // Укр. биохим. журн. 1992. - Т. 64. - №4. - С. 101-105.

11. Барановский, П.В. Содержание сывороточного лизоцима, ß-лизинов и гетерофильных антител / П.В. Барановский, Н.Д. Лобанова // Лаб. дело. -1981.-№12.-С. 750-751.

12. Билимова, С.И. Характеристика факторов персистенции энтерококков / С.И. Билимова // ЖМЭИ. 2000. - №4, Прил. - С. 104-105.

13. Биргер, М.С. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования / М.С. Биргер. М., 1982. — 464 с.

14. Богачёв, A.C. Естественная резистентность организма самок пятнистого оленя / A.C. Богачёв, Е.А. Кирьянов // Ветеринария. 1978. - №8. - С. 93.

15. Бондаренко, В.З. Изучение активности лизоцима у овец, вакцинированных против кампилобактериоза / В.З. Бондаренко и др. // Контроль и стандартизация средств специфической профилактики и диагностики инфекционных болезней животных, М. 1984. - С. 37-40.

16. Борина, М.Л. Определение бактериостатической активности крови у больных мочеполовым туберкулезом / М.Л. Борина // Лаб. дело. 1973. -№10. -С. 613-615.

17. Боровиков, О.В. Способ определения бактериостатической активности сыворотки крови в отношении стафилококков / О.В. Боровиков, А.М. Катханов // Лаб. дело. 1985. - №2. - С. 113-115.

18. Булханов, Р.У. Показатели естественной резистентности организма крупного рогатого скота при экспериментальном бруцеллезе / Р.У. Булханов, Б.М. Камалов, Э.У. Умеров // Тезисы науч.-практической конференции. 1988. - С. 10-11.

19. Бутовецкий, Л.Д. Состояние неспецифического иммунитета у больных сифилисом / Л.Д. Бутовецкий и др. // В сб. «Неспецифический иммунитет», Оренбург. 1973. - С. 42-43.

20. Бухарин, О.В. Механизмы выживания энтерококков в организме хозяина / О.В. Бухарин, С.И. Билимова, К.Л. Чертков // ЖМЭИ. 2002. - №3. - С. 100-106.

21. Бухарин, О.В. / О.В. Бухарин и др. // БЭБ и М. 1996. - №2. - С. 174-176.

22. Бухарин, О.В. Микробные ингибиторы лизоцима / О.В. Бухарин, А.В. Валышев // ЖМЭИ. 2006. - №4. - С. 8-13.

23. Бухарин, О.В. Лизоцим и его роль в биологии и медицине / О.В. Бухарин, Н.В. Васильев. Томск: Изд-во Томского университета, 1974. - 209 с.

24. Бухарин, О.В. Фотонефелометрический метод определения бактерицидной активности сыворотки крови / О.В. Бухарин, В.Л. Созыкин //В сб.: Факторы естественного иммунитета, Оренбург. 1979. - С. 43-45.

25. Бухарин, О.В. Факторы персистенции и (или) патогенности вибрионов и аэромонад различной экотопической принадлежности / О.В. Бухарин, А.В. Бойко, Л.А. Журавлева // ЖМЭИ. 1998. - №5. - С. 30-33.

26. Бухарин, О.В. Шигеллы и шигеллезы / О.В. Бухарин, В.М. Бондаренко, В.В. Малеев. Екатеринбург: УрО РАН, 2003. - 179 с.

27. Бухарин, О.В. Антилизоцимная активность менингококков / О.В. Бухарин и др. // ЖМЭИ. 1991. - №7. - С. 17-20.

28. Бухарин, О.В. Факторы персистенции кишечной микрофлоры при дисбиозе / О.В. Бухарин, А.В. Валышев // Вестн. РАМН. 1997. - №3. - С. 19-22.

29. Бухарин, О.В. Антилизоцимная активность анаэробных бактерий фекальной микрофлоры человека / О.В. Бухарин, А.В. Валышев, Н.Н. Елагина // ЖМЭИ. 2000. - №5. - С. 20-22.

30. Бухарин, О.В. Персистентный потенциал условно-патогенных микроорганизмов / О.В. Бухарин, А.В. Валышев, С.В. Черкасов // Эпидемиол. и вакцинопроф. 2005. - Т. 4. - № 23. - G. 43-48.

31. Бухарин, О.В. Таксономическое значение способности бактерий рода Staphylococcus к инактивации ряда факторов естественнойпротивоинфекционной резистентности / O.B. Бухарин, Д.Г. Дерябин // ЖМЭИ. 1996. - №4. - С. 30-33.

32. Бухарин, О.В. Сальмонеллы и сальмонеллезы / О.В. Бухарин, Ю.Д. Каган, A.J1. Бурмистрова. Екатеринбург: УрО РАН, 2000. - 257 с.

33. Бухарин, О.В. Влияние циклоферона на биологические свойства бактериальных внутриклеточных патогенов / О.В. Бухарин и др. // ЖМЭИ 2005. - №3. - С. 8-10.

34. Бухарин, О.В. Антилизоцимная активность L-форм Mycobacterium tuberculosis / О.В. Бухарин, Б Л. Усвяцов, B.C. Голанов // ЖМЭИ 2000. -№3. - С. 27-28.

35. Бухарин, О.В. Влияние лекарственных растений на антилизоцимную активность микроорганизмов / О.В. Бухарин, O.E. Челпаченко, Б.Я. Усвяцов // Антибиот. и химиотер. 2003. - №5. - С. 11-14.

36. Вавилова, JI.M. Методы тестирования комплемента / JI.M. Вавилова, H.H. Кузнецова, Т.В. Голосова // Лаб. дело. 1991. - №4. - С. 6-10.

37. Вагнер, Г.Ф. / Г.Ф. Вагнер // Лаб. дело. 1963. - №1. - С. 44-46.

38. Валеева, P.P. Неспецифический препарат иммуноглобулинов и его влияние на резистентность организма индюшат / P.P. Валеева, Н.С. Миронова, В.Т. Курдюков // Тезисы докладов третьей Всесоюзной конференции, Москва. 1987. - С. 207-208.

39. Валышев, A.B. Факторы персистенции энтеробактерий фекальной флоры при дисбиозе кишечника / A.B. Валышев, Ф.Г. Гильмутдинова, C.B. Фомичева //ЖМЭИ. 1996. - №3. - С. 96-98.

40. Валышев, A.B. Влияние бифидобактерий на антилизоцимную активность энтеробактерий / A.B. Валышев и др. // ЖМЭИ. 2000. - №4, Прил. - С. 77-79.

41. Валышев, A.B. Влияние инулина на биологические свойства энтеробактерий / A.B. Валышев и др. // ЖМЭИ. 2000. - №1. - С. 79-80.

42. Валышев, A.B. Оценка влияния лекарственных препаратов на биологические свойства Clostridium difficile / A.B. Валышев и др. // ЖМЭИ. 2003. - №4. - С. 85-88.

43. Валышев, A.B. Механизмы формирования бактериально-грибковых ассоциаций в кишечнике человека / A.B. Валышев, Н.Б. Перунова, О.В. Бухарин // Пробл. мед. микол. 2004. - Т. 6. - № 2. - С. 65.

44. Воронин, Е.С. Иммунология / Е.С. Воронин. М.: Колос-Пресс, 2002. -408 с.

45. Воронина, Л.Г. Антилизоцимная активность возбудителя в диагностике и прогнозировании течения гонококковой инфекции / Л.Г. Воронина // ЖМЭИ. 1997. - №4. - С. 96-98.

46. Габрилович, И.М. Гетерогенность антилизоцимной активности в популяциях условно-патогенных энтеробактерий / И.М. Габрилович и др. // ЖМЭИ. 1994, Прил. - С. 32-33.

47. Герке, B.C. Биохимические аспекты саркоптоза лисиц и песцов: Автореф. дисс. . канд. вет. наук. / B.C. Герке. Санкт-Петербург, 2004. — 23 с.

48. Гнездилова, Л.А. Действие лигфола на естественную резистентность организма овец / Л.А. Гнездилова-и др. // Ветеринария.— 2007. №2. - С. 10-12.

49. Грант, Х.Я. Сравнительная оценка некоторых методов количественного определения лизоцима^в сыворотке крови / Х.Я; Грант, Л.И. Яворковский,

50. И.А. Блумберг// Лаб: дело; 1973. - №5. - С. 300.

51. Григорьева, Т.Е. Обмен веществ и неспецифическая резистентность у свиней крупной белой породы в условиях недостаточности минеральныхвеществ в рационе / Т.Е. Григорьева, Г.И. Иванов, Г.Ф. Олышева // Сельскохозяйственная биология. 2003. - №6. - С. 40-43.

52. Грошева, Г.А. Взаимосвязь факторов естественной устойчивости организма птиц и иммунитета при вакцинации / Г.А. Грошева, Н.Р. Есакова // Ветеринария. 2000. - №8. - С. 24-27.

53. Гиматдинов, Г.В. Естественная резистентность первотёлок различных генотипов / Г.В. Гиматдинов, Г.С. Шарафутдинов // Материалы Междунар. научно-произв. конф. по актуаль. пробл. Агропромышленного комплекса. Ч. 2. Казань, 2003 С. 294-295.

54. Горовиц-Власова, JI.M. / JI.M. Горовиц-Власова // Вестн. микробиол. и эпидемиол. 1923. - №4. - С. 26.

55. Гудкова, А.Ю. Заражённость матерей гельминтами и иммунный статус молодняка / А.Ю. Гудкова и др. // Вет. врач. 2003. - № 3 (15) - С. 67-70.

56. Гуркина, В.Д. Влияние повышенной температуры воздуха на биохимические показатели сыворотки крови подсосных свиноматок / В.Д. Гуркина // Труды ВНИИВС. Москва, 1983. С. 36-38.

57. Гурьянов, Н.И. Усовершенствование технологий получения сывороток крови кур, бычков, эмбрионов коров и изучение их свойств при культивировании клеток и вирусов: Автореф. дисс. . канд. биол. наук / Н.И. Гурьянов Казань, 1992. - 19 с.

58. Давыдов, О.Н. Патология крови рыб / О.Н. Давыдов, Ю.Д. Темниханов, Л.Я. Куровская. Фирма «Инкос», 2006 - 206 с.

59. Данилова, Т.Г. К методике определения пропердина / Т.Г. Данилова // Лаб. дело. 1972. - №2. - С. 121.I1.из

60. Денисенко, В.Н. Бактерицидная активность сыворотки крови телят в онтогенезе / В.Н. Денисенко, П.А. Емельяненко, М.Н. Тулупова // Ветеринария. 1976. - № 10. - С. 38.

61. Дерябин, Д.Г. Факторы персистенции в биологической характеристике Neisseria gonorrhoae / Д.Г. Дерябин, Н.Р. Ахунова, О.В. Бухарин // ЖМЭИ. 1998. - №6.-С. 33-37.

62. Джавадов, А.К. Влияние аскорбиновой кислоты и свекловичной патоки на некоторые показатели резистентности свиноматок / А.К. Джавадов, В.А. Мещерякова // Сельскохозяйственная биология. — 2008. №4. - С. 41-45.

63. Дорожкова, И.Р. Частота индикации L-форм микобактерий туберкулеза под влиянием циклосерина и его сочетаний с другими препаратами / И.Р. Дорожкова, А.Р. Волк // Антибиотики. 1972. - №9.

64. Дорофейчук, В.Г. Определение активности лизоцима нефелометрическим методом / В.Г. Дорофейчук // Лаб. дело. 1968. - №1. - С. 28-30.

65. Досон, Р. Справочник биохимика / Р. Досон М.: Изд-во «Мир», 1991. -544 с.

66. Евтушенко, А.Д. Модифицированный способ бактериологического определения бактерицидной активности сыворотки крови / А.Д. Евтушенко, Т.Х. Тимохина, Г.А. Аргунова // Лаб. дело. 1982. - №12. - С. 41-42.

67. Елизаров, Е. Каролин в комбикормах для мясных кур / Е. Елизаров, В. Манукян, И. Егоров // Птицеводство. 2007. - №6. - С. 59-60.

68. Емельяненко, П.А. Методические указания по тестированию естественной резистентности телят / П.А. Емельяненко и др. М.: MB А, 1980. - 64 с.

69. Желтова, В.И. Чувствительность кишечной палочки различных серотипов к бактерицидному действию сыворотки / В.И. Желтова, А.И. Рязанова // В сб. тр. «Неспецифический иммунитет», Оренбург, 1973. С. 70-71.

70. Желтова, В.Н. К методике определения бактерицидных свойств сыворотки нефелометрическим способом / В.Н. Желтова, Т.В. Дубинец // Факторыестественного иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях, Омск, 1976. Вып. 4. - С. 9-10.

71. Забродин, В.А. Длительная консервация сывороток крови северных оленей / В.А. Забродин и др. // «Иммунитет сельскохозяйственных животных»: Труды ВИЭВ, М. 1989. - Том 67. - С. 159-161.

72. Зайцева, Г.А. Фагоцитоз и бактерицидные свойства сыворотки крови у больных с гипопластическим состоянием кроветворения / Г.А. Зайцева, H.A. Федоровская, Н.С. Тестоедов // Терапевтический архив. 1970. - № 6. - С. 60-63.

73. Закарян, JI.M. Устойчивость к антибактериальному действию крови как одна из биологических характеристик стафилококков / JI.M. Закарян // Лаб. дело. 1985. - №12. - С. 750-752.

74. Игнатова, С.Г. Роль комплемента в защите макроорганизма от бактерий / С.Г. Игнатова//ЖМЭИ. 1987. - №5. - С. 97-102.

75. Израитель, H.A. Бактерицидная активность сыворотки больных склеромой и здоровых людей и ее роль в противосклеромном иммунитете / H.A. Израитель, C.B. Шиманович // Здравоохранение Белоруссии. 1971. -№10.-С. 92-93.

76. Инструкция по определению гемоглобина крови гемиглобинцианидным методом: Приказ Министра Здравоохранения- 15.10.74. М.: 1974. - № 960.

77. Исламова, С.Г. Бактерицидная активность крови коров разных пород по сезонам года / С.Г. Исламова, Ф.А. Исламов // Материалы всероссийской науч.-практич. конференции Уфа: Башкирский ГАУ, 2006 - С. 176-178.

78. Каграманова, К.А. Сравнительная характеристика методов определения активности лизоцима / К.А. Каграманова, З.В. Ермольева // Антибиотики.- 1966.-№Ю.-С. 917-919.

79. Кармолиев, Р.Х. Воздействие янтарной кислоты на липидный обмен и резистентность организма цыплят / Р.Х. Кармолиев, М.С. Найденский, В.А. Лукичева // Ветеринария. 2000. - №7. - С. 40-43.

80. Карпенко, Л.Ю. Биохимические показатели естественной резистентности и иммунной реактивности организма собак и кошек / Л.Ю. Карпенко, В.В Тиханин // Ветеринария. 1997. - №6. - С. 56-58.

81. Кветная, А.С. Адаптационные механизмы формирования бактерионосительства Corynebacterium diphtheriae / А.С. Кветная и др. // ЖМЭИ. 2000. - 4, Прил. - С. 31-36.

82. Козиненко, И.И. Иммунологические показатели у карпов при воздействии сапролегниевых грибов в эксперименте / И.И. Козиненко и др. // Рыбн. хозяйство. Киев: Урожай. - 1989. - вып. 43. - С. 64-67.

83. Кольман, А.Э. Методы определения содержания лизоцима / А.Э. Кольман // Антибиотики. 1967. - Т. 12. - №8. - С. 741.

84. Кисель, С.С. Улучшенная турбидиметрическая методика определения активности лизоцима / С.С. Кисель // Здравоохранение Белоруссии. 1972.- №5 С. 36-38.

85. Кириллов, В.А. Факторы персистенции Helicobacter pylori / В.А. Кириллов, О.Б. Дронова, О.В. Бухарин // ЖМЭИ. 2003. - №4. - С. 8-11.

86. Кириллов, Д.А. Модифицирующее действие Saccharomyces boulardii на биологические свойства энтеробактерий / Д.А. Кириллов и др.,// ЖМЭИ.- 2002. №4. - С. 57-59.

87. Кириллов, Д.А. Влияние иммуномодулятора полиоксидония на биологические свойства микроорганизмов / Д.А. Кириллов и др. // ЖМЭИ. 2003. - №4. - С. 74-78.

88. Йегер, JI. Клиническая иммунология и аллергология: Перевод с немец. / JI. Йегер. М.: Медицина, 1986. - Т. 1. - С. 196-236.

89. Козлов, Л.В. Способ определения функциональной активности компонента С4 комплемента человека / Л.В. Козлов и др. // Бюл. №14. -Опубл. 20.05.2000.

90. Козлов, Ю.А. Питательные среды в медицинской микробиологии / Ю.А. Козлов. М.: Медгиз, 1950. - 250 с.

91. Коляков, Я.Е. Иммунитет животных / Я.Е. Коляков М., 1975. - 208 с.

92. Кондратьева, И.А. Действие лекарственных препаратов на молодь радужной форели / И.А. Кондратьева, A.A. Киташова, А.Ю. Наумова // Вопросы рыболовства. 2002. - т. 9. - № 1. - С. 125-136.

93. Коробко, A.B. Влияние эситофана на резистентность телят / A.B. Коробко // Ветеринария. 2000. - №5. - С. 46-48.

94. Кочемасова, З.Н. Микробиология / З.Н. Кочемасова, С.А. Ефремова, Ю.С. Набоков. М.: Медицина, 1984. - 352 с.

95. Кошкина, H.A. Влияние латентного анаплазмоза на показатели иммунитета овцематок / Н:А. Кошкина и др. // Ветеринарная патология. -2007.-№2.-С. 59-63.

96. ЮО.Красильников, А.П. Микробиологический словарь-справочник / А.П. Красильников, Т.Р. Романовская. Минск: Асар, 1999'. - 400 с.

97. Красильников, А.П. Определение бактерицидной активности сыворотки крови методом реплик / А.П. Красильников, Л.П. Титов // Лаб. дело. -1981.-№4.-С. 245-247.

98. Красочко, П. А. Распространение инфекционных и инвазионных заболеваний у беловежских зубров / П.А. Красочко и др. // В сб. «Сохранение биологического разнообразия лесов Беловежской пущи» под ред. Лучкова А.И. Каменюки - Минск. - 1996. - С. 225 - 233.

99. ЮЗ.Крицын, С. Возрастные изменения лизоцимной активности в сыворотке крови здоровых лошадей / С. Крицын, А. Вахта // Ветеринария сельскохозяйственных животных. 2008. - №12. - С. 31-32.

100. Кудрина, Н.В. Система комплемента при бактериальных инфекциях / Н.В. Кудрина, H.H. Беседнова, Л.М. Вавилова // ЖМЭИ. 1997. - №5. - С. 7477.

101. Кузник, Б.И. Иммуногенез, гемостаз и неспецифическая резистентность организма / Б.И. Кузник, Н.В. Васильев, H.H. Цыбиков. М.: Медицина, 1989.-320 с.

102. Юб.Кульберг, А.Я. Регуляция иммунного ответа / А.Я. Кульберг. М.: Медицина, 1986. - 223 с.

103. Кутищев, И. Воздействие лития глицината на цыплят / И. Кутищев // Птицеводство. 2006. - №9. - С. 33.

104. Лагунова, О.Н. Иммуностимулятор грамин / О.Н. Лагунова, A.A. Ивановский // Сборник научных трудов, посвященных 75-летию НИИ микробиологии МО РФ, Киров. 2003. - С. 211-212.

105. Лазарев, Н.П. Влияние адаптогенов на бактерицидную активность крови сонной артерии, яремной и воротной вен овец / Н.П. Лазарев // Тр. Свердлов, научной ветеринарной станции. 1973. - Вып. 7. - С. 130-133.

106. Ларионов, Г.М. Вопросы инфекционной патологии Забайкалья / Г.М. Ларионов, Л.В. Ларионова Чита, 1972. - ч. 3. - С. 202-203.

107. Ш.Леонова, Е.С. Система комплемента у новорожденных с гнойно-септическими заболеваниями и у их матерей / Е.С. Леонова, Г.В. Рябинская, Д.В. Стефани // Педиатрия. 1987. - №9. - С. 45-48.

108. Лесняк, А.П. Продуктивность и качество продукции кроликов при адаптации к различным условиям содержания в центрально-чернозёмной зоне: Автореф. дисс. . канд. сельскохоз. наук / А.П. Лесняк Белгород, 2006. - 20 с.

109. Лихачев, H.B. Иммунология и ее роль в борьбе с инфекциями животных / Н.В. Лихачев // Проблемы иммунитета сельскохозяйственных животных: Материалы совещания ВАСХНИЛ. М.: Колос. - 1966. - С. 176-196.

110. Лысенко, С. Пробиотики для цыплят-бройлеров / С. Лысенко, А. Бараников, А. Васильев // Птицеводство. 2007. - № 5. - С. 31 - 32.

111. Максимюк, H.H. Модификация метода определения бактерицидной активности сыворотки крови / H.H. Максимюк, Л.Я. Телишевская // Ветеринария. 1995. - №2. - С. 35-36.

112. Малахов, Ю.А. Лептоспироз животных / Ю.А. Малахов. М.: Агропромиздат, 1992. - 239 с.

113. Малко-Скрозь, В.П. Опыт определения бактериостатической активности крови / В.П. Малко-Скрозь, Э.А. Лютик // Проблемы туберкулеза. -1973. -№5. С. 85-86.

114. Маренков, В.Г. Естественная резистентность и продуктивное долголетие коров чёрно-пёстрой породы / В.Г. Маренков // Сельскохозяйственная биология. 2004. - №4. - С. 89-93.

115. Мартынова, В.А. Состояние системы комплемента при инфекционных и неопластических процессах / В.А. Мартынова, Т.В. Голосова // Лаб. дело. -1989.-№2.-С. 4-9.

116. Машадиева, В.В. Фармакокоррекция иммунобиохимического статуса у собак, больных чумой плотоядных: Автореф. дисс. . канд. вет. наук / В.В. Машадиева Казань, 2005. - 20 с.

117. Мильдзихова, И.Б. Антилизоцимная активность менингококков, выделенных у бактерионосителей в закрытых коллективах с различной эпидемиологической обстановкой / И.Б. Мильдзихова и др. // ЖМЭИ. -1993.-№4.-С. 21-25.

118. Мильман, М.Ш. К определению комплементарной активности сыворотки крови / М.Ш. Мильман, А.И. Литвин // Лаб. дело. 1973. - №10. - С. 604606.

119. Недугова, Г.И. Получение очищенного Clq компонента комплемента и его характеристика / Г.И. Недугова, И.В. Рубцов // Лаб. дело. - 1987. - №7. - С. 542-547.

120. Обрывин, В.Н. Влияние препаратов гамавит и гапавет на токсический иммунодефицит у белых крыс / В.Н. Обрывин, Г.А. Жоров, П.Н. Рубченков // Ветеринарная патология.- 2008. №3. - С. 119-125.

121. Османова, М.М. Культивирование гонококков в жидких питательных средах /М.М. Османова и др. // ЖМЭИ. 1987. - №2. - С. 3-7.

122. Павличенко, Е.В. Влияние абиотических факторов и биологически активных веществ на естественную резистентность мясных утят: Автореф. дисс. . канд. биол. наук /Е.В. Павличенко. -М., 2005. 18 с.

123. Павлюхина, Л.В. Лизоцим / Л.В. Павлюхина, В.К. Лепахин // Большая медицинская энциклопедия. М.: Сов. энциклопедия, 1985. - Т. 13. - С. 105-106.

124. Платонов, А.Е. Бактерицидное действие нейтрофилов человека на менингококки in vitro / А.Е. Платонов и др. // ЖМЭИ. 1999. -№3.~ С. 4652.

125. Плохинский, H.A. Математические методы в биологии / H.A. Плохинский. -М.: МГУ. -1978. -226 с.

126. Плященко, С.И. Естественная резистентность организма животных / С.И. Плященко, В.Т. Сидоров Л.: Колос. Ленингр. отд-ние, 1979. - 184 с.

127. Подосинников, И.С. Содержание СЗ-компонента комплемента в сыворотке крови больных детей / И.С. Подосинников и др. // Лаб. дело. -1989. -№7.-С. 57-58.

128. Поздеев, O.K. Медицинская микробиология / O.K. Поздеев М.: ГЭОТАР-Медиа, 2005. - 768 с.

129. Полищук, Е.И. Бактерицидное действие сыворотки крови человека на К. pneumoniae / Е.И. Полищук, Л.В. Пархоменко // Кишечные инфекции: Республиканский межведомств, сборник. Киев, 1987. - В. 19. - С. 61-65.

130. Пудовкин, Д.Н. Иммунологические аспекты патогенеза энтерита у телят: Автореф. дисс. . канд. вет. наук / Д.Н. Пудовкин С.-П., 2004. - 18 с.

131. Радчук, H.A. Ветеринарная микробиология и иммунология / H.A. Радчук и др.. М: Агропромиздат, 1991. - С. 118-184.

132. Резникова, Л.С. Комплемент и его значение в иммунологических реакциях / Л.С. Резникова М.: Медицина, 1967. - 272 с.

133. Родин, В.И. Санитарно-гигиеническая оценка беспривязного стойлово-выгульного выращивания ремонтного молодняка крупного рогатого скота / В.И. Родин // Труды ВНИИВС, Москва. 1983. - С. 8-16.

134. Ройт, А. Основы иммунологии / А. Ройт М: Мир, 1991. - 328 с.

135. Романов, Е.А. Усовершенствование технологии изготовления и оценка эффективности ассоциированной вакцины против рота-, корона-, герпесвирусной и эшерихиозной диареи новорожденных телят: Дисс. . канд. вет. наук / Е.А. Романов. Казань, 1999. - 165 с.

136. Романова, А.Ф. Справочник по гематологии / А.Ф. Романова и др. -Киев: Здоровье, 1997. 321 с.

137. Рухадзе, Э.З. Динамика бактерицидного действия сыворотки крови и системы пропердина у различных экспериментальных животных / Э.З. Рухадзе // ЖМЭИ. 1960. - №1. - С. 121-125.

138. Савилов, П.Н. Лизоцимрегулирующая функция печени при хроническом гепатите и частичной гепатэктомии / П.Н. Савилов, С.Я. Дьячкова // Вестн. Смолен. Мед. Акад. 2003. - № 1. - С. 108-111.

139. Сазонова, И.М. Об оценке бактериолитической активности сыворотки крови / И.М. Сазонова // Лаб. дело. 1977. - №7. - С. 418-420.

140. Сазонова, И.М. Бактериолитические свойства сыворотки крови у больных ревматизмом / И.М. Сазонова // Лаб. дело. 1980. - №6. - С. 362-365.

141. Самсонова, А.П. Чувствительность к бактерицидному действию нормальной сыворотки крови штаммов Е. coli, содержащих плазмиды множественной лекарственной устойчивости / А.П. Самсонова, B.C. Левашев // ЖМЭИ. 1994. - №6. - С. 33-34.

142. Саруханов, В.Я. Бактерицидные свойства крови различных видов сельскохозяйственных животных под влиянием голодания и облучения / В.Я. Саруханов, H.H. Исамов // Сельскохозяйственная биология. 2001. -№2. - С. 80-82.

143. Саруханов, В.Я. Метод определения бактерицидной активности крови крупного рогатого скота / В.Я. Саруханов, H.H. Исамов, В.Н. Кудрявцев // Сельскохозяйственная биология. 2006. - № 6. - С. 121-123.

144. Саруханов, В.Я. Модификация метода определения бактерицидной активности крови сельскохозяйственных животных / В.Я. Саруханов и др. // Сельскохозяйственная биология. 2007. - №2. - С. 119-122.

145. Саушкин, В.В. Влияние ивермага и альбазена на иммунобиологическую реактивность организма овец / В.В. Саушкин, A.C. Топала // Ветеринария. -2007. -№12.-С. 30-32.

146. Семерджиев, В. Възрастови особенности в активността на лизоцима и комплемента при сименталски говеда и мясодайни кръстоски / В. Семерджиев и др. // Животн. Науки 1994. - Г. 31. - бр. 1/4. - С. 204-206.

147. Сенько, А. Оллзайм Вегпро и витамин С для утят / А. Сенько и др. // Птицеводство. 2007. - №6. - С. 17.

148. Сидоров, М.А. Определение зоопатогенных микроорганизмов: Справочник / М.А. Сидоров, Д.И. Скородумов, В.Б. Федотов. М.: Колос, 1995. - 320 с.

149. Слоним, A.A. Определение бактерицидной активности сыворотки крови и лимфы / A.A. Слоним, Ю.Д. Толчеев // Лаб. дело. 1989. - №7. - С. 65-66.

150. Смирнова, О.В. Определение бактерицидной активности сыворотки крови методом фотонефелометрии / О.В. Смирнова, Т.А. Кузьмина // ЖМЭИ. -1966. №4.-С. 8-11.

151. Смирнова, О.В. По поводу критических замечаний относительно метода определения бактерицидной активности сыворотки крови при использовании фотонефелометра / О.В. Смирнова, Т.А. Кузьмина, И.Б. Исиченко // Лаб. дело. 1981. - №10. - С. 626-628.

152. Сотиров, Л.К. Концентрации лизоцима сыворотки и активность комплемента у различных,пород свиней и.их родственных кроссов / Л;К. Сотиров // Revue Med; Vet. 2006. - T. 157. - №3. - С. 143-148.

153. Степанов, В.И. Естественная резистентность свиней с различной стресс-реактивностью / В.И. Степанов, В.Х. Федоров, А.И. Тариченко // Ветеринария. 2000. - №7. - С. 37-40.

154. Степанов, В.И. Естественная резистентность и продуктивность свиней новых мясных типов / В.И. Степанов и др. // Ветеринария. 1998. - №8. -С. 34-37.

155. Супоницкая, В.М. Бактерицидные свойства крови при заболевании брюшным тифом / В.М. Супоницкая // Врачебное дело. 1963. - №11. - С. 90-93. ,

156. Сурикова,, Е.В. Факторы персистенции клебсиелл / Е.В. Сурикова // ЖМЭИ. 1994, Прил. - С. 104 - 106.

157. Тараканов, Б.В. Микрофлора пищеварительного тракта, неспецифическая резистентность и продуктивность поросят при применениилактоалиноварина / Б.В. Тараканов и др. // Ветеринария. 1999. - №8. -С. 51-54.

158. Тарханова, И.А. Комплемент / И.А. Тарханова // Большая медицинская энциклопедия. М.: Сов. Энциклопедия, 1985. - Т. 11. - С. 381-383.

159. Титарева, Г.М. Штаммовые и подвидовые отличия в устойчивости Yersinia pestis к бактерицидному действию сыворотки / Г.М. Титарева и др. // Сборник научных трудов, посвященных 75-летию НИИ микробиологии МО РФ, Киров. 2003. - С. 121-122.

160. Титарева, Г.М. Анализ депозиции и деградации СЗ компонента комплемента на поверхности клеток Y. Pestis / Г.М. Титарева и др. // Сборник научных трудов, посвященных 75-летию НИИ микробиологии МО РФ, Киров. 2003. - С. 122-123.

161. Томилка, Г.С. Модификация метода определения пропердина в сыворотке крови / Г.С. Томилка, И.С. Старостина // Лаб. дело. 1986. - №2. - С. 126127.

162. Топурия, Г.М. Иммунобиохимические показатели организма коров в техногенных провинциях / Г.М. Топурия, К.А. Вожжова // Вестник российской сельхоз. науки. 2007. - №1. - С. 63-64.

163. Улимбашев, М.Б. Резистентность, гематологические показатели и продуктивные особенности коров бурой швицкой породы при отгонно-горном содержании / М.Б. Улимбашев // Сельскохозяйственная биология. -2007.-№6.-С. 97-100.

164. Улимбашев, М.Б. Иммунологическая реактивность голштинизированного красного степного скота / М.Б. Улимбашев // Вестник российской академии с/х наук. 2008. - №6. - С. 76-77.

165. Фролов, А.Ф. Чувствительность штаммов Proteus mirabilis к бактерицидному действию человеческой сыворотки / А.Ф. Фролов, Л.В. Пархоменко, И.Г. Лукич // Микробиологический журнал. 1986. - Т. 48. -№3. - С. 23-26.

166. Храбустовский, И.Ф. Методические рекомендации по определению естественной резистентности животных в условиях интенсивного их использования / И.Ф. Храбустовский и др.. Харьков: УкрНИИ экспериментальной ветеринарии, 1974.

167. Храмов, Ю.В. Суточная динамика гуморальных факторов защиты у интактных коз и при электрообезболивании / Ю.В. Храмов, В.М. Мешков // Доклады РАСХН. 1999. - № 3. - С. 43-44.

168. Чайникова, И.Н. / И.Н. Чайникова и др. // Russ. J. Immunol. 2004. - T. 9. - №1. — С. 153.

169. Ченчикова, Э.П. Имму но дефициты и аллергия / Э.П. Ченчикова, С. А. Верескова, JI.A. Туманова. М., 1986. - С. 102-103.

170. Чередниченко, Р.П. Повышение резистентности организма к экстремальным воздействиям / Р.П. Чередниченко Кишинев, 1973. - С. 267-272.

171. Чернин, В.В. Состояние неспецифической реактивности при острых пневмониях / В.В. Чернин и др. // Сб. трудов Орен-го мед. института, Оренбург. 1973. - С. 152-154.

172. Чернохвостова, Е.В. Пропердиновая система / Е.В. Чернохвостова // Большая медицинская энциклопедия М.: Сов. энциклопедия, 1985. - Т. 21.-С. 158-159.

173. Шаталов, C.B. Изменения естественной резистентности у стельных коров разных пород / C.B. Шаталов // В сб. «Диагностика, профилактика и лечение болезней сельскохозяйственных животных в зоне северного кавказа», Новочеркасск. 1984. - С. 48-52.

174. Шеенков, Н.В. Антилизоцимная активность бактерий рода Brucella / Н.В. Шеенков и др. // ЖМЭИ. 2000: - №4, Прил. - С. 99-100.

175. Шеенков, Н.В. Характеристка антилизоцимного и антикомплементарного признаков у бруцелл при экспериментальной инфекции / Н.В. Шеенков и др. // ЖМЭИ. 2002. - №3. - С. 12-16.

176. Шкуратова, И.А. Влияние витадаптина на естественную резистентность сухостойных коров и их потомства / И.А. Шкуратова и др. // Ветеринария. 2007. - №7. - С. 14-15.

177. Щеголева, И.А. Иммунохимическое определение фракции СЗ комплемента человека / И.А. Щеголева, В.Н. Чеботкевич // Лаб. дело. -1980.-№9.-С. 542-543.

178. Элконин, Л.Г. К вопросу о взаимоотношении факторов естественного и приобретённого иммунитета. Сообщение 1. Изменение лизоцимной и комплементарной активности сыворотки крови под влиянием вакцинации / Л.Г. Элконин // ЖМЭИ. 1963. - №2. - С. 105.

179. Эпштейн-Литвак, Р.В. Питательные среды. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования / Р.В. Эпштейн-Литвак. М.: Медицина, 1967. - С. 44-88.

180. Яковлев, А.Г. / А.Г. Яковлев и др. // Микробиол. журн. 2001. - №4. - С. 123-124.

181. Яранцева, С.Б. Общее состояние и показатели естественной резистентности у нетелей чёрно-пёстрой породы при разных способах содержания / С.Б. Яранцева // Сельскохозяйственная биология: 2008. -№6.-С. 91-94.

182. Audran, R. / R. Audran // Transfusion. 1959. - V. 2, №1. - P. 29-46.

183. Audran, R. / R. Audran // Biol. med. 1960. - V. 49, №4. - P. 363-390.

184. Bond, G. Serological Studies of the Reptilia: II. The Hemolytic Property of Snake Serum / G. Bond, N. Scherwood // J. of Immunol. 1939. - №36. - P. 11-16.

185. Brown, E. Bacteria and Complement / E. Brown // Curr. Top. Microbiol. Immunol.-Berlin. 1985.-Vol. 121.-P. 159-187.

186. Callerio, С. / C. Callerio // 1-ый Межд. симп. по Флеминг, лизоциму. -Милан. 1959.-С. 19.

187. Clas, F. Bacteria and Complement / F. Clas, G. Schmidt; M. Loos Berlin, 1985.-P. 19-72.

188. Da Costa Cruz, J. Sur un nouveau constituant de l'alexine / J. Da Costa Cruz, H. De Penna // Soc. Biol. 1930. - V. 104. - P. 688-689.

189. Fleming, A. On a remarkable bacteriolytic element found in tissues and secretions / A. Fleming // Proc. Roy. Soc. Ser B. 1922. - V. 93. - P. 306.

190. Gallaciner, I. A selective oleic albumin agarmedium for cultivation of M. bovis /1. Gallaciner, D. Horwill // J. Hyg. Camb. 1977. - № 779. - P. 155.

191. Giclas, P. Complement activity in normal rabbit bronchoalveolar fluid. Description of an inhibitor of C3 activation / P. Giclas et al. // Amer. Rev. Resp. Dis. 1987. - V. 135, № 2. - P. 403-411.

192. Hegedus, A. Quantitative Bestimmung der Komplementbestandteile / A. Hegedus, H. Greiner // Z. f. Immunitatsf. 1938. - V. 92, №1. - P. 1-9.

193. Huddlesson, J. / J. Huddlesson et al. // J. Bact. 1945. - V. 50. - P. 261-270.

194. Invernizzi, F. Osservazioni sui rapporti il potere battericida del siero e il sistema properdino-complemento / F. Invernizzi, P. Taschini, C. Ortolani // Giorn. Malat. Infet Paras. 1959. - V. 2, № 3. - P. 237-238.

195. Irwin, M. / M. Irwin, D. Berman // Bactericidal testin. Brucellosis. New York. — 1950.-P. 102- 109.

196. Kabot, E. Experimental Immunochemistry / E. Kabot, M. Mayer Sprinfïeld, 1964.-P. 140.

197. Karolcek, J. / J. Karolcek, U. Older // Csl. Epidem. 1959. - V. 8. - P. 105-106.

198. Kent, J. Adaptation of the zymosan assay of properdin to animal sera / J. Kent, A. Toussaint, W. Hook // Proc. Soc. Exptl. Biol. a. Med. 1957. - V. 96, № 3. -P. 676-678.

199. Kogler, W. Studien zur quantitativen Serum-properdinbestimmung / W. Kogler, F. Scheiffarth, W. Frenger // Acta haemat. (Basel). 1961. - V. 26. - P. 49.

200. Kolar, V. / V. Kolar et al. // Neoplasma (Bratisl.). 1967. - V. 14. - P. 67.

201. Lazzaro, C. Ricerche in vitro sul potere treponemicida del sistema del properdin del siero di sangue umano normale / C. Lazzaro // Minerva dermat. tor. 1959. -V. 34, № 4. - P. 278-281.

202. Lie, O. Markers of Resistence to Infection in Dairy Cattle / O. Lie // Thesis. -National Veterinary Institute, Oslo, Norway. 1985. - chapt V.

203. Litwack, G. Photometric determination of lysozyme activity / G. Litwack // Proc. Soc. exp. Biol. (N. Y.). 1955. - V. 89, № 3. - P. 401-403.

204. Livansky, J. Experimental Immunochemistry / J. Livansky, Z. Jezkova -Sprinfield, 1963. V. 10. - P. 605.

205. Livansky, J. / J. Livansky, L. Jezkova // Neoplasma, 1964. T. 11. - P. 71.

206. Lowry, O. Protein measurement with the Folin phenol reagent / O. Lowry et al.//J. Biol. Chem.- 1951.-V. 193, № l.-P. 265-275.

207. Mancini, G. Immunochemical quantitation of antigens by single radial immunodiffusion I G. Mancini, I. Herenens I I Immunochemistry. 1965. - № 2. - P. 235-249.

208. Meyer von, F. Umweltbedingte und genetische Aspekte der Lysozymkonzantration des Blutserums von Schweinen / F. Meyer von, G. Erhart, B. Senft // Zuchtungskunde. 1983. - V. 55, №2. - P. 114-121.

209. Mc Kenzie, D. Complement reactivity of cancer patients: measurements by immune hemolysis and immune adherence / D. Mc Kenzie, J. Colsky, D. Hetrick // Cancer Res. 1967. - V. 27, № 12. - P. 2386-2394.

210. Milgrom, H. Activation of the fourth component of complement (C4): assessment by rocket immunoelectrophoresis and correlation with the metabolism of C4 / H. Milgrom et al. // J. Immunol. 1980. - V. 124, № 6. -P. 2780-2785.

211. Muller-Eberhard, H. Complement / H. Muller-Eberhard // Ann. Rev. Biochem. 1975. - V. 44.-P. 695.

212. Muschel, L. / L. Muschel, H. Treffers // Fed. Proc. 1952. - V. 11. - P. 477485.

213. Oiling, S. I S. Oiling // Scand. J. Infect. Dis. 1977. - V.10.

214. Oravec, C. / C. Oravec, J. Cambelova // Neoplasma (Bratisl.). 1971. - V. 18. -P. 141.

215. Osserman, E. Serum and urinary lysozyme in monocylic and monomyclocytic leukemia / E. Osserman, D. Lawlor // J. Exp. Med. 1966. - V. 124. - P. 921931.

216. Pariy, R. A rapid and sensitive assay of muramidase / R. Parry, R. Chandau, K. Shahani // Proc. Soc. Exp. Biol. (N.Y.). 1965. - V. 1, № 119. - P. 384-386.

217. Pillemer, L. / L. Pillemer et al. // Science. 1954. - № 120. - P. 279.

218. Pillemer, L. / L. Pillemer // Ann. New York Acad. Sei. 1956. - № 66. - P. 233.

219. Pruzanski, W. / W. Pruzanski et al. // Arthr. and Rheum. 1974. - V. 17. - P. 207-217.

220. Pruzanski, W. / W. Pruzanski et al. // Cancer Res. 1975. - V. 33 . - P. 20482053.

221. Quie, P. Humoral factors in host defense against microbial invaders / P. Quie // Scand. J. Infec. Diseases. 1981. - № 31, SuppL -P.34-40.

222. Rahman, H. Effect of korepinephrine on growth of falmenella and its enterotoxiri production / H; Rahman, R. Reissbrodt, H. Tschape // Indian J. Exp. Biol. 2000. - V. 38, № 3. - P. 285-286.

223. Reed, W. Serum factors responsible for killing of Shigella / W. Reed, E. Albricht // Immunology. 1974. - V. 26, № 1. - P; 205-215.

224. Rice, Ch. / Ch. Rice, P. Boulanger // J. Immunol. 1952. - № 68. - P. 197.

225. Rice Chr., E. / E. Rice Clir., C. Crowson // J: Immunol. 1950. - №65: - P. 201. •

226. Rosenberg, E. / L. Rosenberg, D. Tachibana // J. Immunol. 1962. - V. 89, №6.-P. 861-867.

227. Sotirov, L. Phenotype characteristic and inheritance of lysozyme and complement activity in swine / L. Sotirov // Thesis. Trakia University, Stara Zagora, Bulgaria. - 1991.

228. Smolelis, A. / A. Smolelis, S. Hartsell // J. Bact. 1952. - V. 63. - P. 665.

229. Taschini, P. Considerazioni sull'attivita del potere battericida del siero nei confronti di germi gramnegativi properdino-sensibili / P. Taschini et. al. // Riv. 1st. sieroterap. ital. 1958. - V. 33, № 5. - P. 351-359.

230. Taylor, P. Bactericidal and Bacteriolytic Activity of Serum Against Gramnegativ Bacteria / P. Taylor // Microbiol. Rev. 1983. - V. 47, № 1. - P. 46-83.

231. Taylor, P. In: Virulence Mechanisms of Bacterial Pathogens / P. Taylor, Ed. J.A. Roth. Washington, 1988. - P. 107-120.

232. Taylor, J. / J. Taylor // J. appl. Bact. 1962. - V. 25. - P. 54-62.

233. Terry, W. / W. Terry, T. Borsos, H. Rapp // J. Immunol. 1964. - V. 92, №4. -P. 576.

234. Topley, W. The Principles of Bacteriology and Immunity / W. Topley, G. Wilson. 1964.

235. Vorlender, K. / K. Vorlender // Z. Immunitatsf. 1950. - V. 107, №3/4. - P. 278-309.

236. Waisbren, B. Effect of wide-spectrum antibiotics on bactericidal activity of human serum: in vitro and in vivo / B. Waisbren, I. Braun // Amer. J. Med. Sei. 1964. -V. 248, № 1. - P. 56-60.

237. Wardlaw, A. Replacement of magnesium by cobalt and manganese in the interactions of the properdin system with bacteria and with zymosan / A. Wardlaw, L. Blum, L. Pillemer // J. Immunol. 1958. - V. 81, № 1. - P. 43-47.

238. Wardlaw, A. The demonstration of the bactericidal activity of the properdin system / A. Wardlaw, L. Pillemer // Ann. N.-Y. Ac. Sei. 1956a. - V. 66, № 2. -P. 244-246.

239. Wardlaw, A. The properdin system and immunity. V. The bactericidal activityof the properdin system / A. Wardlaw, L. Pillemer // J. exp. Vet. 1956b. - V. \ 103, №5.-P. 553-575.

240. Wedwood, R. The kinetics of the bactericidal acticity of the properdin system / R. Wedwood, L. Pillemer // Ann. N.-Y. Ac. Sei. 1956. - V. 66, № 2. - P. 247250.

241. Willers, J. / J. Willers, K. Pondman, K. Winkler // Vox Sangiunis. 1959. -№4-P. 21.

242. Winkelstein, J. The role of complement in the host's defense against Streptococcus pneumaniae / J. Winkelstein // Rev. Infect. Diseases. 1981. -V. 3, № 2. - P. 289-298.

243. Zia, S. / S. Zia, Teng-Ting-Liu // Peking Natural History Bulletin. 1950. - V. 18, №3.-P. 189-194.

244. Zucker, S. Plasma muramidase: a study of methods and clinical applications / S. Zucker et al. // J. Lab. clin. Med. 1970. - V. 75. - P. 83.255. www.Likar.info