Автореферат и диссертация по медицине (14.00.30) на тему:Трансмиссия возбудителя чумы "неблокированными" блохами

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН

КАЗАХСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭПИДЕМИОЛОГИИ, МИКРОБИОЛОГИИ И ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ

На правах рукописи УДК 616.981.452—036.21 СУЛЕЙМЕНОВ Бахтияр Мукашевич

ТРАНСМИССИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЧУМЫ «НЕБЛОКИРОВАННЫМИ» БЛОХАМИ

/

1 4.00.30 — эпидемиологи^

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Алматы — 1995 г.

Работа выполнена в Казахском противочумном научно-нсследователы ском институте Министерства здравоохранения Республики Казахстан.

ОФИЦИАЛЬНЫЕ ОППОНЕНТЫ:

доктор мед. наук, проф. С. А. АМИРЕЕВ; доктор мед. наук, проф. И. Л. МАРТИНЕВСКИЙ; доктор мед. наук, проф. Б. К. САНСЫЗБАЕВ.

ВЕДУЩЕЕ УЧРЕЖДЕНИЕ: Карагандинский государственный медицинский институт.

Защита диссертации состоится * ' У _на заседании специализированного совета Д 09.08.0! при НИИ эпидемиологии, микробиологии и инфекционных болезней МЗ Республики Казахстан (480002, г. Алма-ты, ул. Макатаева, 34).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке НИИ ЭМИБ МЗ РК, г. Алматы.

II о

Автореферат разослан « » ЮЯД г,'

Ученый секретарь ' .

специализированного совета \ 'I \

доктор медицинских наук V) МН^/^ Т. Д. УКБАЕВА

■ ы« 1л.'

Обмая характеристика работы

АКТУАЛЬНОСТЬ. Проблема энзоотии чумы по длительности и интенсивности исследований существенно выделяется в ряду природноочаговых инфекционных болезней. Парадоксальность ситуации состоит.в том, что интерпретация важнейших положений проблемы, зачастую имеет прямо противоположную направленность. Это позволяет уже открыто' трактовать современное состояние изучения проблемы энзоотии Чумы как кризисное (Анисимов и др., 1985 и др.).

Подобное'положение, наглядная иллюстрация замечавия Ю.М.Ралля (1965) о том, что "любая цепочка взаимосвязанных факторов, наблюдаемых в природе ила опыте, многими немедленно объявляется закономерностью". В результате, метод редукции-сведения свойств целого х свойствам частей (Тюхтин, Ур-манцев 1988), составил стратегию научного поиска. *

Представленные варианты гипотез, отстаивающие приоритетность сохранения возбудителя чумы в виде спорадических случаев (Марин и др., 1972), в носителях и переносчиках в слабовирулентной форме (Домрадский и Др., 1961), в блохах в "замурованных" норах (Акиев, 1969), в форме "теллурической" чумы (Ва1Ъагагс1 et а1., 1963), в • микроочажках (Наумов, 1955), в клещах (Классовский, 1986), в сапрофитной форыэ после трансформации возбудителя (Соколов и др.6 1984), в симбиозе с сапрбфитами почвы в 1,-форме (Ларина, Сагимбеков, 1990), в корнях растений (Ривкус и др., 1Э90), в исходной }>орме в виде сапрофитов (Солдаткин, Руденчик, 1988) и т.д., за позволяпт судить об авторской оценке "экологического со>-церяания" тех отдельных феноменов, которое привлекаются'»

качестве основных аргументов взглядов их авторов.

Одни из истоков современного кризиса базируется на феномене бактериального "блока" цредкйлудка у 0лох (Васо, Martini, 1914), положенный в основу так называемого специфического механизма передачи чумного микроба (Бибикова, Классовскнй, 1974)« До настоящего времени<ан является ведущим инструментов познания эпизоотического процесса^ Такой механизм передачи сразу поставил чуму в исключительное положение среди всех прирорноочаговых болезней, возбудители которых передаются "нсблокированными" блохами, независимо от формы и размеров их клеток - вирусы, риккетсии, бактерии в т.д. Необходимость критического. анализа современных представлений о механизме передачи возбудителя чумы достаточно обоснована результатами экспериментальных и полевых наблюдений. Настоящие исследования посвящены характеристике альтернативного механизма передачи возбудителя чумы "деблокированными" блохами и обоснования его значения в (механизме энзоотии чумы.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ. Экспериментальное обоснование определяющей роли вирулентных свойств лоибуднталя чумы в передаче его ' "неблокированнымн" блохами, как основы трансмиссивного механизма энзоотии чумы. Для достижения цели были пост»ъпены следующие задачи)

1. Определение основных условии эффективной передачи возбудителя чумы "неЬлокироиамнимч" Олохами.

2. Определение эффективности передачи возбудителя чумы "неблохированными" блохами рода Xuuoptsylla.

3. Изучение оcot и* ниостии инфекционного нроциссд у лдбо—

раторных и диких грызунов, вяэзаниог'о укусом одной "яеблохи рованной" блохи.

4. Анализ механизма энзоотии чумы при ,условии трансмиссии возбудителя1 "небпокированными" блохами.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Впервые экспериментально обоснована трансмиссия возбудителя чумы "небпокированными" блохами, как основной механизм передачи в природных очагах.

Доказана определяющая роль клеток возбудителя, с наличием детерминант вирулентности в развитии инфекционного процесса у грызунов после трансмиссии "неблокированными" блохами.

*

Выявлено пммунодепресспвноа действие "укусов" незара-хенных блох на организм грызунов.

Даны качественно новые интегральные признаки основного переносчика - иммунодепрессивное действие на организм хозяина и трансмиссия вирулентного фенотипа возбудителя чумы.

ч

Впервые доказана возможность развития гранулематозного воспаления у лаьораторных животных и диких грызунов при трансмиссии возбудителя одной "небпокированной", блохой и при наличии низких концентраций! чумного микроба в заражающий эктопаразитов крови.

Показана диагностическая ценность методов определения цнтоцидной активности фагоцитов и проявлений хронического инфекционного процесса (гранунемалозяого воспаления, гипер-чувствотгельности замедленного титга) в? системе чумпойг микроб I- одна "деблокированная" блоха - один грызун.

В итоге,.экспериментально обоснованы новые приоетэтетм в одной из ключевых проблем энзоотии чумы - механизм® передачи

возбудителя. .

ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ. Результаты исследований позволяют обосновать механизм энзоотии чумы с позиций функциональных взаимоотношений членов биоценоза, определить рациональную схему контроля эпизоотического состояния территории очага и разработать программу научных наблюдений за всеми фазами эпизоотического процесс*.

Разработаны методы наблюдения за эпизоотическим про-йессом по тестам изменения фагоцитарной активности полиморф-ноядерных лейкоцитов, аллергической перестройки и гистологических изменений в организме носителей.

Доказана роль фагоцитирующих клеток в механизме естественной изменчивости чумього микроба.

Результаты нееледов*ний в течение ряда лет используются в курсах лекций при подготовке советских и зарубежных специалистов по особо опасным инфекциям.

Практическое применение перечисленных разработок подт-■ - / верждг<но восемью актами депонирования штаммов.

ПОЛОЖЕНИЯ, ВНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ г

1. Несостоятельность трансмнссни чумного микроба "блокированными" блохами, кок основного механизма его циркуляции в природных очагах и гнпотоз с неиараэнтарноП фазой переживания возбудителя.

2. Условия эффективной передачи чумного микроба "небло-кированнымн" блокам;!.

3. Особенности пнфикционного процесса у лабораторных и диких грызунов при укуси одноЛ 'Чи-Олокированной" блохи.

4. Системно-функциональные основы трансмиссивного характера энзоотии чумы.

4

АПРОБАЦИЯ. Материалы диссертации обсуждены на научных конференциях Талды-Курганской (1989), Гурьевской (1989), Уральской (1987-89) противочумных станций, Казахского (Среднеазиатского) противочумного научно-исследовательского института (1986-1994), противочумных учреждений Средней Азии и Казахстана (19891.

ПУБЛИКАЦИИ. Результаты исследований изложены в 33 работах, опубликованных з зарубежных.издательствах, или материалах республиканских конференций.

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ. Диссертация состоит из введения, четырех глав, заключения, выводов, списка литературы и оформлены на 172 страницах машинописного текста. Рукопись иллюстрирована 15 таблицами и 20 рисунками. Список использованной лнтераьуры содержит наименования работ на русском и иностранном языках.

СОДЕРЖАНИИ РАБОТЫ

ГЛАВА I. Механизм передачи возбудителя в современных гипотезах природной очаговости чумы.

Многолетнее изучение закономерностей эпизоотического процесса не привело на сегодняшний день к выработке единого взгляда на механизм энзоотии чумы. (Ралль, 1965; Козлов, 1979 и мн.др.). Цо отношению к прочности связи возбудителя с носителем и переносчиком все гипотезы можно разделить на две группы:

1. Гипотезы с паразитарным механизмом циркуляции чумного микроба (Тинкер, 1940; Иофф И,др., 1951 и мн.др.).

2. Гипотезы предполагавшие закономерный выход чумного микроба за пределы цепи носнтель-переносчнк, т,.е. непараэи-тарный период переживания чумного микроба.(Ролд^р^ин, Руден-чнк, 1988; Дятлов, 1988 и др.).

Механизц "блоковой" передачи доминирует, в,., оддотезах первой группы и частично второй - в период циркуляции, возбудителя среди грызунов.

Каковы же характеристики передачи чумного микроба "блокированными" блохами, вызывающие сомнение в закономерности такого механизма трансмиссии возбудителя?

1. Несоответствие способности или чартр/гыо.6раэовд*дая. блока фоновым видам блох (Бибикова, Классовскл«, 1974; ВаггоидЬв, 1947 и мь.др.). .

2. Видовые различия в количестве поглощлецеднкр^идо,, (Бат лашов и др.).

3. Заьисимосп> образования "блока" от числа ас^г/фщенных клеток чумного микроба (Бибикова, Кнассовекий., 1974 ). ;

4. Краткая продолжительность жизни "блокированныхн-блох (Бибикова, Классовскии, 1974; Каг1тлп а1., 1958).

5. Затрудненное питание (Бибикова, Кг.ассовокий, 1974; Новокрещенова, 1973).

6. Ограниченная подвижность (ЬпПикова, Классовскии, 1974; Новокрещенова, 19 73).

7. Краткость периода аора-.ттояьиост» "блокированных"

/

блох (Бибикова, Классовскнй, 19/',).

8. Низкая ннфекциозность укус.» "блокированных" блох (Бибикова, Классовскии, 1У74).

9. Экологическая 'необоснованность циклической смены фенотипов чумного ;Шйроба ('Браун, 19<бй:; ;Burrows, Bacon, 1956; Burrows, 1957 й'йн.др.)-

Необходимо тМкхе учитывать, что естественнорезистентные и иммунные Прызуйы 'Исключаются из числа особей, способных йбеспечит'ь бЬгктёрйемйю достаточной степени (септицемию). Специфические антитела и стабильно низкая температура нор существенно препятствует flpdyeccy "блокирования". Полная неопределенность в срока* образования блока свидетельствуют о незакономерном характере 'данного феномена.

С учетом одновременного 'и пастояййого влнЯййя всех этих

факторов на "блокообраао'вание"., ^бЗДь'йа'й '^йнйсть такогб Ш-

■

ханиэма передачи, прн нал'йчйй У'стй'йчйвого ЬасШбШШк энзоотии чумы, представляется сомнитей'ь'йУй-. '

Мы считаем, что передачу чуКЙбго мййроба "блок^р'бвайны-•ми" блохами необходимо квалнфиг^фоЧга'гь fcaK сДуЧ'ай'йу'кЬ', {кё имеющую закономерного характера и, 'Не б^ЩекШИ&Ь

механизм передачи возбудителя чумы % '6fo й'рй^'бй'ййх очгкй'х".

Что касается механизма передаЧ'й Й Ь'пй'отезах

с предполагаемым непаразнтарным периодом его Йе^'ёЗтЬгкййй', 'to можно констатировать его отсуиствйгй - йвто'ры йё ЙЙут дАльйге свободной интерпретации К&к'ого- Ш-й Ай^й'орнгого ут-

верждения своей йгозй^яй-.

Ь итоге, вместо ^ейеййя npcfeft'eWti-, возММ'Й'т {ряд допол-ннтейьных вопросов: пр»фода и прй^йна стаб»йЬ&о'с£Й свойст'6 чумного.микроба, отсутствие следов п^едшественникУЙ й меЖй-Jдовых контактов, нехайй'зМ йередачп и Wh . другие. Ь ряде случаев бозййКйет необХвйНЙвЬФЬ обоснования видовогб статуса Возбудимей» чуШ-.

- 10 -

Но нашему ынениг-., основная роль в обеспечении трансмиссивного характера энзоотии чумы, принадлокит "набло-кированныы" блохам.

ГЛАВА 2. Условия эффективной передачи возбудителя чумы "неблокированными" блохами.

Исследования по изучение -эффективности передачи чумного микроба "неблохированншш'* блохами были начаты достаточно давно (Голов, Иофф, 1927 ; Деревянченко с соавт., 1962 ; Blanc, Baltazard, 1942 к-мы.др.).

Основу все* опытов составляла групповая подкормка зараженных блох, причем, в итоге лишь констатировались факты наличия или отсутствии эффективной передачи.

При анализа данных работ мы выявили два чрезвычайно важных, на наш взгляд, пол.женияг

1. Ни в одной работе, посвященной передаче чумного микроба блохами, не рассматривается роль в этом процессе темпе-ратуроэавнсимых антигенов и свойств (37*), определявших егг вирулентность.

2. Не дифференцируются результаты исследований, сходны-с работой, например, Д.À.Голова, И.Г.Иоффа от исследований, сходных, например, с рлбоюй Дпровянчеихо с соавт.

Эти данные послужили отправной точкой для выяснения ро ли вирулентных свойств чумного микроба в передаче его "ньб локированными" блохами.

Исследование проводили с использованием белых мышей, блох X.cheopie и штаммов чумного микроба N 143S и 185? (Среднеазиатский пустынный очаг, l,P)U для белых мышеи 344 г 160 м.к.) •

цив возбудителя в дозах, достаточных, для развития септической формы. Пониженная температура хранения блох, задержи вая размножение клеток, проявила себя как важный фактор, стабилизирующий заразительность блох на протяжении довольна длительного времени - 12 суток (срок наблюдения).

Интересны результаты второго этапа исследования - пре-дачи чумного микроба "свежепившими" («ерез 3-4 часа после заражения) блохами с дозированным .заражением, (таблица 2). -Для эффективной передачи возбудителя вполне достаточно кратковременного кормления блох на х'рызунах. Эффективность ее аналогична предыдущим сериям опытов. На отмечено влияние па интенсивность передачи количества блох (1-5), кормившихся на мыши, по-вудимому, из-за незначительных колебаний в ино-кулируемых дозах.

Итоги их, в абсолютных цифрах, позволяют сделать вывод об определяющем значении полного набора свойств и признаков чумного микроба, ответственных за его вирулентность в передаче его "неблокированными" блохами - из 249 белых мышей у 28 отмечена септическая и у 2 локальная форма чумы.

Вирулентная форма возбудителя обеспечивает эффективную передачу даже при очень низких концентрациях микроба в заражающей блох крови (10 тыс. м.к./мл) н коротком периоде п:: питания на грызуне. Необходимо указать на отмеченную нами особенность - при наличии в заражающей крови 100 тыс. м.к./мл в индивидуальных посевах блох отмечается рост 10-40 колоний, если концентрация клеток ш'жр> - посевы всегда отрицательные.

Таблица 2

Передача малых доз Y.pestis 1435(ЬД5о -344 м.к. "свежепившими" блохами

¡М |Ко-во |Концентра- |Длитель-|Количество мышей (Сроки |

|груп-|ство ¡ция чумного I ность ___гибели |

|пы ¡блох ¡микроба в ¡кормле- ¡в ¡из них с ¡мышей | | ¡на од-Ьфови ¡ния (в ¡труп-¡септической!(в су-|

| ¡и.мыли)(м.к./мл) ¡часах) ¡пе ¡формой ¡тках) |

50 тыс.

10

5 мни.

10'тыс. 20

100 тыс.

7 3

13

10 мпн. "

20 2

7-12

7

3

1

10 млн. 3 7 2 13-15

10 тыс.

10 млн.

20

2

5-7

10

14

3

5

*) Чумной микроб ы.Ц1!;:с-|| из селезенки

ринированной крови морских сьннок. Заражение грызунов строго индивидуально - одна блоха - один грызун (18-20 часов). До заражающего кормления блохи содержались при 13-15вС в течение 3-6 суток. Так как возбудитель чумы относится к факультативным внутриклеточным паразитам (Burrows, Bacon, 1956), специфическим для которых•является хронический инфекционный процесс, мы исследовали наиболее важный начальный период его развития (до 30-45 суток), определяющий дальнейшее его течение.

Лабораторные методы регистрации инфекционного процесса включали бактериологический, серологический, биологический методы, метод определения изменений цитоцндной активности фагоцитов з НСТ-таете, внутрикожные аллергические пробы с Ъсновнымн антигенам!, возбудителя и гистологическую характеристику гранулематозн^го воспаления.

1. Эффективность передачи возбудителя чумы блохами рода Xenopaylla

Результаты исследований отражены в таблице 3.

Основной вывод, который можно сделать из результатов данных исследований, это равная эффективность передач возбудителя чумы - по количеству септических форы, у различных видов блох рода Xenopaylla. В данную таблицу не вошел разовый опыт с блохами X.confomu й - эффективность передачи укусами единичных блох составляла 254 - из 12 белых мышей у 3-х зарегистрирован сепсис. Париабельность Заражающих доз не отражается на результатах, г (.'-видимому из-за незначительных колебаний инокулируеыых доз микроба.

ГЛАВА 3. Характер инфекционного процесса у лабораторных и диких грызунов после укуса "деблокированной" блохи.

Способность "неблокнрованных" блох X.cheopie вызывать септическую форму у высокочувствительных к чумному микробу белых мышей, поставила перед необходимостью изучения следующих вопросов t

- сравнительной эффективности передачи чумного микроба одной "неблокированной" блохой других видов рода Xenopsylla,

- характера инфекционного процесса у лабораторных и диких грызунов, вызванного одной "ниблокированной" блохой.

Условия изучения первого вопроса были аналогичны предшествующим исследованиям!

- »

- содержание зараженных блох при 13-15°С после заражающего кормления;

- заражение белых мышей по схеме одна блоха - одна мышь (18-20 часов).

Штамм Y.pestis 224 (Среднеазиатский пустынный очаг, LD50 Для белых мышей - 180 м.к.). Блохи - X.cheopie,

X.skrjabini, X.caspica, X.conformis (однократно) из инсектария института. Продолжительность наблюдения за белыми мышами - один месяц.

Для решения второго вопроса в качестве объекта передачи были выбраны морские свинки, белые крысы и большие песчанки с неэнзоотичной территории. В качестве переносчиков использовались блохи X.cheopis, X.skrjabini, X.caspica. Блох заражали на шкурках белых мышей взвесью штамма y.pestis 161 (Leu-, Сред.Аз.пустынный очаг, LD50 для белых мышей - 85

м.к.) выращенного при 37°. Концентрация возбудителя в разных сериях опытов колебалась от 10 тыс. до 50 млн. в 1 мл дефиб-

• Таблица 3

Эффективность передачи возбудителя чумы одиночными "неблокир'ованнымн" блохами рода ХвпорвуНа

|Ш[Вид блох ¡Концентрация ¡Количэс- ¡Из них пало с септ. |пп| ¡микроба в за-|тво белых| формой чумы

| | {разкавщей кро-|лых мышей |_

[• | {ви в мк/мл | в опыте | всего ¡в процен. 1_1-:—|-1-1-1-

1. Х.сЬеорив 10млн.-25млн. 291 36 12,3+1,92

2. Х.сазр1са "58 7 12,04,30

3. Х.вкг^аМп! " , 77 13 16,8±4,28

4.Х.сЬеор1е Ютыс ."-ЮОтыс. 45 б 13,3+5,11

5. Х.сЬоор1в 25млн. 70 -(контроль)

*) Контрольные блохи заражались Х.рев^з 1435,

• 'V

выращенном при 28°

Чтобы облегчить окончательны*! вывод об эффективности юредачк возбудителя чумы "небпокированными" блохами, прнве-1ем итоговые цифры всех трех этапов исследований(таблица 4).

Септпческне формы чумы, избранные в качестве индикатора :ри работе с высокочувствительными. белыми мышами на ¡динственные показатели процесса - из 120 выживших в послед-|ец серии мышей, у четырех в реакции нейтрализации антигена РНАг) зафиксированы специфические антитела 1:40-1:80. Вся :умма полученных результатов бесспорно подтверждает и выдерет наиболее важный момент этой передачи - ведущее значение

Таблица 4

Суммарные показатели эффективности передачи возбудителя ' чумы "неблокироваиными" блохами рода ХепорзуНа.

^ этапа [общее количе- ¡общее | количе- | I

¡исследо- ство б/мышей |ство септнче- [ % 1

ваний 1. ¡скнх форм чумы| 1

' 1 155 14 9

2 94 . 12 12,6

- 3 471 62 10,3

Итого 720 88 10,2

вирулентных свойсть возбудителя в трансмиссии, обуславливающих высокую инвазивность единичных клеток микроба.

Данный момент таено увязывается еще с двумя важными признаками. Во-перьы;:, эпизоотическое значение приобретают бактериемии у грызунов любой интенсивности. А таких, не соответствующих но уровню "блокообразованив", регистрируется достаточно много (Головко и др., 1979 а мн.др.). Во-вторых, незначительное количество клеток микроба сводит до минимума патогенное действие на прерноечика, который выполняет свои функции, обладая максимальной активностью при движении и питании. Температура окружающей среды, как всеобъемлющий фактор-, выступает как важный регулятор цпнтельности периода заразительности блох.

И, наконец, вси вышеперечисленные положении полностью исключают необходимость гмины фенотипа и обеспечивают чумному микробу циркуляции в тим или ином природном очаге в ти-

ппчной для вида форма. В этом, по наяойу ¡вггенн», ключ к познанию стабильности циркулирующей популяции возбудителя и отражение автономного цнкла ее существования, который, по мнению И.И.Шмальгаузела (1968) повышает устойчивость живых систем В эволюции и составляет ее "генеральную линию".

Передача возбудителя чумы в вирулентной форме "иеблоки-рованнымн" блохами, лишена недостатков "блоковой" передачи, неопределенности других механизмов; еще не представленных в многочисленных гипотезах и, по нашему мнению, является эсновным и исходным моментом в расшифровка трансмиссивного юханпзма энзоотии чумы.

2. Характеристика инфекционного Процесса у лабораторных и диких грызунов после укуса одной "неблокированной" блохи

Септические формы чумы у белых мыией не превышает 16% в тачальный период процесса. У части особей наблюдается вкра-эотка специфических антител, часть гибнет без бактериологи-деского подтверждения чумы. Следовательно, и у высоко-1увствительных грызунов манифестнка формы процесса наблюда-этся у незначительной доли популяции..

На следующем этапе исследований по трансмиссии возбудителя "Неблокированнымй" блохами были использованы морскиэ :вш!кй - 18, белые крысы - 85 н большие песчанки - 113.

Бактериологическое исследование. В различные сроки юеле заражения- пали 8 морских свинок, 8 белых крис и 14 ЗоЛЬШНХ песчанок. Бактериологическое-исследование кек паузах, так и забитых поело окончания наблюдения грызунов отри-?ательное.

Свдрлохаае-Схоа..I'еле дэканпьи Серологическому исследованию в реакциях пассивной гвмагглютинации (ЕПГА) и нейтрализации антигена (РИЛг) с чумными зритроцитариыми дивгвосгику-мами были подвергнуты сыворотки выживших грызунов (30-40 сутки).

Специфические антитела были выявлкиы только в РНАг - у 15 белых крыс,- г 140 - 1:320, у 2-Х больших песчанок - 1180 - 1:640 и у одной морской свивки - 1:160. В предыдущих сериях у белых мышей в РНАг антитела были выявлены в четырех случаях — J. ■ 40 - J.:B0, Результаты свидетельствуют, во-первых, о жизнеспособности малых доз вирулентной формы микроба ь широком, по степени резистентности, диапазоне организмов грызунов, во-вторых, о практически затруднительном обнаружении особей с антитопами вна- фа^ы острых проявлений чумы различной интенсивности. .

В контроле - п сыворотках 18 больших песчанок после укуса одиночных блох, зараженных »вирулентной формой штамма y.pestis 161, вырацонного при 28*, специфических антител выявлено не было.

Изменение, Фагоцитарен активности.__хюдцнегрфиоядедша

лейкоцитов„грызуне»* Ынрокчи диапазон степени инфекционной чувствительности-различных видов грызунов к возбудителю чумы является общеизвестным фактом. lio мнению Ю.МЛ'алля (ll<65t "у основешх и второстепенных носителей чумы имеются различия в фагоцитарной активности". До настоящего времени это но получило конкретного подтверждения, тем более, что фагоцитарная система является ведущей в патогенезе чумы (Покровская, Ка-ганова, 1947; Burrow¡i, Ьлгои 1!>Ь6, и др.). Отсюда необходимость в наличии данных о( антимикробном потенциале фагоцитоД

1елоБека, яивотпых н т.д. п дипгкяив ого изменений при инфекционном процессе.

Исходя из'этс>го, мы впервые получили такую характер энстнку в норме и при экспериментальной чуме. В результате 5ыли получены достоверные различия в показателях антнмнкроб-юго потенциала фагоцитов у чувствительных и резистентных 5Ндов животных. Прг! экспериментальной чума отмечено фазное 1змененне антимикробного потенциала, полиморфноядерных лейкоцитов, коррелирующее с данными о видовой чувствительности грызунов. Отличия "лабораторной" и "дикой" чумы определили юобходимость изучения реакции фагопитирующнх клеток при •стественном методе заражения грызунов - укусом блох. Данные габлюдения впервые проведены нами на белых крысах п ' больапх 1есчанках. Исходную реакцию фагоцитов определяли поизмепе-шям цитоцидного потенциала полиморфноядерпых лейкоцитов в 1СТ-тесте непосредственно перед выпуском на 18-20 часов на сакдого грызуна по одной "неблокированпой" блохи Х.саврЛса зараженной У.рез^в 161, 10 тис. м.к./мл крови (для белых срыс) и 10 млн м.к./мл кровн (для больших песчаник), выраженном при 37°. Результаты приведены в таблице 5.

Полученные данные на наш взгляд, отражают принципиальный характер ответной реакции, фагоцитов на внедрение инфэх-дионного агента. В отличие от шприцевого метода заражения, три естественном .методе фаза депрессии активности полиморф-зоядерных лейкоцитов (ПМЛ) чрезвычайно растянута. У белых 1рыс только после IV недели значения НСТ-теста превысили контрольные данные. Только у одной особи значение НСТ-теста

Таблица 5

Характер изменения митоцидного потенциала полиморфноядерньц лейкоцитов грызунов после индивидуального заражения чумой "неблокированиой" блохой X.caspica

| N | Вид |________Злаленна__H C I -- i&STß---------------[

| груп-{грызунов | к-во | перед {к-во j___Педали______________I

¡пы I ' j исслеи.j зара-¡иссл.j I | II | III | IV |

| I (грызун.¡жен. ¡грыз.| 1111

I_I__-__I__I--1-1-1---1-1-1

1. Белые. 52 5,764 52 3,4± 4,2+ 4,6+ 6,2± крысы - 0,36 0,35 0,53 0,35 0,51

2. Большие 25 45,84+ 29 19,37± ' песчанки 4,3В 2,14

Bat».различия опытных н контрольных значений НСТ-тьста статистически достоверны - Р<0,001.

к концу I недели превышали контрольные. У больших песчанок только у 3-х особей была отмечена обратная реакция на укус зараженной блохи. В остальных случаях отмечено снижение значений НСТ-теста.

Характер изменеиия цитоцидного потенциала ПНЛ позволяет расшифровать ряд "белых пятен" начального периода инфекционного процесса. Во-первых, фагоциты чутко реагируют на присутствие малых доз пирулечтиой формы возбудителя чумы. Отсутствие бурной реакции, вероятно, отражает истинную картину развития хронической формы чумы, наличие которой заре-

гистрировано в дальнейших исследованиях. В отсутствие факторов, способствующих обострению процесса, разлитие- хронической формы чумы'практически но отрекается на здоровье грызуна. Напротив, происходящие иммунные процессы являются дополнительным Механизмом зашиты от ряда инфекционных болезней.

Во-вторых, малые ннокулируемые допы возбудителя наглядно демонстрируют высокий уровень адаптации к крайне агрессивной среде теплокровного организма. В-третьих, фуькцию переносчика выполняют все .взятые в опыт "неблокпровашша" Опохп. Таким образом, ёстественный механизм заражения грызунов обуславливает плавное развитие инфекционного процесса и

t

встреча носителя с возбудителем не носит характера трагедии. Наоборот, их взаимная адаптация обеспечивает нормальную жизнедеятельность возбудителя и повышопие иммуиого статуса хозяина .

Патоморфологическое нсслепованпа. Отсутствие интенсивного размножения возбудителя у морских свинок, белых крыс и больших песчанок после укуса "неблокированной" блохи, закономерно выдвигает на первый план вопросы об эпизоотической роли таких передач в естественной популяции грызунов.

Внутриклеточные паразиты (к таким относится и возбудитель чумы) вызывают преимущественно хронический процесс, интимные механизмы которого подробно изложены в обширней литературе (Маянский, Маянскин, 1989; Йегер, 1986 ш мн.Др.). Хроническое воспаление развивается в случаях, когда '-&ген>г с умеренной силон действует в течение длительного времени (Турк, 1985) . Его универсальным проявлением является гшфек-Пяспная гранулема, с хорошо изученный механизмом п чдккяои

развития (Кононов, • Зиновьев, 1964? Струков, Кауфман, 1982; Williams >* Williams, 1983 и мн.др.). '

Стадии хронических инфекции, соответствующие гранулема-тоэному воспалошио (эпителиоидно-клеточиый гранулематоз, ЭК-гранулематоз), характеризуются низкой конт'вгяозностью и олигобациллярностыо поражений. ЭК-гранулемы могут перелети-ровать в организме неопределенно долгое время и являются механизмом персистеиции возбудителя в постоянным источником рецидива активного процесса при временном снижении уровня защитных сил организма. При чуме ЭК-гранулемы, как признак иммуных процессов, описаны Л.Н.Котургой (1958, 1962 и т.д.) и др. авторами. Исходя из краткого изложения характеристики гранулематозного воспаления как типовой реакции оргаиизыа .при хронических инфекциях, основу патоморфологическнх исследований в наших опытах составляли поиски инфекциониых грану--лем у грызунов, зараженных укусом одиночных "неблокирован-ных" блох при их индивидуальном кормлении на каждом зверьке.

Всего было исследовано 15 морских свинок, 77 белых крыс и 119 больших песчанок (из них 19 песчанок контрольных, зараженных штаммом 161-28' , концентрация 50 млн. м.х,/мл крови). Морские свинки гяабиты на 34 сутки, белые крысы на 33-48 сутки, большие песчанки на 21-49 сутки. Помимо этого, на н«-.личие гранулем был исследован полевой материал, добытый осенью'1988 г. на территории Южного Прибалхашья. Из песчанок 27 отловлены в зоне длительного протекания апизоо-тнй (Таукумский э/о), остальные t» зоне эпизоотии,, начавшейся в 1986 г. (Каройский о/о).

В итоге, инфекционные чпителнондноклеточные гранулемы были обнаружены у 53* мооских свинок, 32* белых крыс и 23?

олыаих песчанок. Преимущественная локализация гранулем в 1»ечени связана с физиологией ПМЛ, клеток с коротким периодом циркуляции в крови - 5-7 часов (Маянский, Маянский, 1989) и тесной связью с печенью. Гранулемы всех видов грызунов чаще были единичными, реже множественными, с локализацией в перн-иаскулярных пространствах, связаны с адвентициальной оболочкой кровеносных сосудов. У отдельных особей гранулемы подвергнуты частичному или полному склерозу или некрозу. Из 9 2 больших песчанок, отловленных в поле, в 13% случаях выявлены Гранулемы, в большей степени характерные для очага в песках Таукумы.

У части грызунов выявлены морфологические признаки, характерные для затяжного течення чумы.

В итоге, картина пагоморфологическпх изменений в органах грызунов и частота гранулематозного воспаления - от 2 3 до 53%, в зависимости от их вида, еще одно бесспорное доказательство двух важнейших признаков трансмиссивного механизма передачи чумного микроба:

- во-первых, способности практически каждой "небпокиро-ланпой" блохи передавать необходимое, для возникновения хронической формы чумы, количество клеток возбудителя;

- во-вторых, значения индивидуальной и видовой резистентности грызунов для реализации эффективной передачи возбудителя.

Исследование эффективности____кожно-алпергических_проб..

Мнение о специфичности и механизме развития гиперчувствн-тельности замедленного типа (ГЗТ) однозначно н не требует доказательств. Использование ГЗТ при чуме в кожно-аллерги-ческнх пробах известно достаточно давно (Коробкова, 1955;

Шмутор с соавт., 1957 и мн.др.). Как правило, объектом исследования в работах данного плана являлась лабораторные и дикие грызуны, иммунизированные или.зараженные значительными лозами вакцины или вирулентных штаммов.

В нашу задачу входило изучение эффективности основных антигенов чумного микроба в кокно-аллергических пробах в условиях инфицирования грызунов малыми дозами вирулентных клеток чумного микроба - после индивидуального заражения одной "неблокированной" блохой.

В качестве диагностикумов в аллергических пробах были использованы следующие антигены чумного микроба, выделенные нами из вакцинного штамма EV. 1. Капсульный антиген. 2. Ли-пополисахарид капсул!.ного антигена. 3. Лнпополисахарид (ЛПС) клеточной стенки (при двух температурах выращивания микроба - 28° н 37° и получения ШК' (+4° и +63"). . 4. Антиген Буаве-на. Ь. Основной сонатнчискии антиген (ОСА).

Предварительный отбор антигенов проводили на белых крысах через 7-10 днин после заражения индивидуально укусами одиночных "иеблокнрованнмч" блох (концентрация Y.paatis 161 (37°) 50 млн.м.к. в I мл крови или 50 м. т.. того же штамма п/к).

Специфичность аллергических проб с вышоуказенными антигенами проверялась на боных крысах, зараженных У.psoudotu-berculoaia, Y.enterocolit.i<.'a, H.abortus, F. tularonaib, E. coli, S.typhimurium, E.ru:iiop«.it..i,t, L.monocytogenoB, Str.hemo-

Ütii UB .

Предварительное нспитанп«.' продемонстрировало преимущество липополисахарпца, полученного "холодным" методом н антигена Буавена. Дашши антигены, л также фракция I, были

апробированы еще раз ил 20 иалых сусликах и К' полуденни-песчанках, через две подели после» подкожного длражгнн»-100-100 тыс.м.к. вирулентных штаммов чумнэго микроба

Во всех опытах введение 100 мкг. в 0,1 мл фп июяси • ческого раствора внутрикожно и положительных случаях выаыва по образование папул череп 2'1 часа величиной от 0,.! <0,2 сы до 1/0x1,0 см.

В опыте грызуны были заражены индивидуально укусами единичных "неблокированных" блох. Сроки пссгакг,вки проб колебались от 21 до 4 4 суток.

Таблица К

Частота положительных аллергических проб с ' антигенами чумного микроба (ЧН} у грыз'нов, зараженных укусом "неЬлоклровмнной" блсхи

¡Вид грызунов |Количество! _____Анхиген. ЧМ

[ ¡грызунов ! | ' ¡штигон

| группе ! ."-] | ЛПС ¡Ьуавена

морские свинки 15 1 ' 2

белые крысы 7 7 3 23 12

большие песчанки -100 - б 2.

Итого в Ч 185 2,1 16,1 7,5

Пипополисахарид заметно выделяется по частоте положи■ гельных р > 'ультатов среди всех групп жиьотных. Величина папул колебалась от 0,2x0,2 см до 1,2x1,2 см. На него приходится л основная доля интенсивных реакций - из 31 я 9 случа чх размер папул составлял 0,5x0,5 см и выше. такие реакции

- 28 -

характерны для белых крыс п больших песчанок.

Наличии и интенсивность положительных проб не коррелируют ни с дозой возбудителя"в заражающей блох крови, ни с наличием специфических антител, ни с наличием инфекцион-но-эллергических гранулем. Например, для грызунов с гранулемами отмечешь минимальная интенсивность реакций, а при малых концентрациях мьхроба 50 тыс. м.к./мл величина папул достигала 1,2x1,2 zu. Аналогично соотношение и с наличием антител .

Рол1 ЛПС патох^енезе чумы общеизвестна - он определяет основную картину инфокцнонного процесса и его использование в аплерги шской диагностике чумы вполне обосновано как пс специфичности, так и по чувствительности. Наличие незначительной доли перекрестных реакций с возбудителем псевдотуберкулеза не может исказить общей кар.'нны в случае полевы: испытаний.

Использование иммунодепрессантов пля повышения чувстви теяьноглш^дабааазсорннх методов исследования. Сложность проб лемы энзоотии чумы определяет необходимость расширения прак тических аспектов применения-различных методов лабораторног исследования материала.

Преодоление недостаточной разрешающей способности тог или иного метода, дает повышение чувствительности только од ного конкретного метода. Более продуктивным, на наш взгляд является воздействие непосредственно на объект исследовани - грызуна, с целью обострения подострых и хронических фор инфекции. Наиболее перспективным в этом плане представляютс иммунодепрессанты (Браткова и др., 1961; Hayashida, 1957 мн.др.). Приоритет здесь до сих пор остается за кортикостс

роидамн. Ны расширили круг прзпаратод с иммунодепреосивным действием за счет аыииокпспот, в частности цистенна, превышавшего по своей активности кортизон- X-D50 Y.pestie "435 для

белых мышей после внутрнбрюшинкого введения 10 мг. цнстеина составляла 39 м.к. (кортизон 5 мг. ri/к - 138 м.х., хоктроль - 501 м.к.) (Сулейменов и др., 1990) . В опыте были использованы кортизон и цнстеин. 127 белых крыс было заражено 50 м.к. штамма Y.peatis 161. На 7-10 сутки пало 37 осооей, из них 7 с бактериологическим подтверждением процесса. Через 40 дней 40 крысам п/к был введен кортизон (22 м."> , остальным цнстеин внутрибрышинко tиг). Через од» у неделю зшвотпы* были исследованы в аллергических пробах <: фракцией X и лапо-полисахаридом чумного микроба. После учет-* результатов ка-. потные забиты с бактериологическим и серологическим исследованием.

Результаты бактериологического исследования бкли отрицательными. Обращает внимание высокий проиочт, положитальннх результатов серологнчсских и аллергических т'.'лтов.

В обеих группах в 3 2г» случаев обнаружены специфические антитела - титры РНАг от 1:'Ю до 1:320, в одном случае li 1280 (цистеин). В группе, обработанной кортизоном, количество положительных аллергических проб состги чдло 10% (F I> и 20% (ЛП'С), в группе, обработанной цистеинсм соответственно б% и 32%. Величина папул колебалась от 1,2x0,3 см до 0,9x1,0 см. Боле,- интенсивные реакции отмечены в первой группе -0,4-0,7x1.1 см. Как и в предыдущих исследованиях, не отмечена корреляция между наличием антител » положительными аллергическими пробами. Таком потаит позытепия чувствительности методов исследования мо«.-т Ыпч. применим для решения лекото-

ммк вопросов эизсотжи чумы.

Подводя итоги изучения особенностей инфекционного про-юггоа грызунов, вызванного укусом одной ."неблокированной" блохи отметим, что все виды блох рода ХепореуНа обладают примерно равной степенью инфекциозности в случае заражения их вирулентной фоимон возбудителя. Их инфекциозность не зависит от концентрации возбудителя в заражающей блох крови. Пониженная гоипература внешней среды играет роль стабилизирующего и пропопгноутщ<эго фактора инфекциозности "неблокиро-ванных" блох. Иг данных выводов вытекают органически связанные с ними следующие положения:

- эпизоотическую значимость имеет бактериемия любой нн-тенсивностл;

- постоянная циркуляция возбудителя в вирулентной форме отражает автономный цикл его развития г определяет стабильность его свойств;

- в передаче возбудителя основное место" принадлежит здоровым, активным блохам;

- укус одной зараженной "неблокированной" блохи обуславливает развитие хронического процесса в виде грануле-матозного воспаления, представляющего собой типовую реакции организма и механизм персистенции возбудителя.

ГЛАВА IV. Системно-функциональные основы трансмиссивного механизма энзоотии чумы.

Неизменность ситуации в эпизоотологии чумы сохраняет значение высказывания Ю.М.Ралля (1965) о том, что "эпизоотологию интересуют типичные законы, обеспечивающие опдовуе жизнь чумного микроба в природе".

- 31 -

настоятельная необходимоегь позненил загонои формирования н дальнейшего эволюционного развития уровней организации материи, привела в науке к внедрения сиегемкого подхода к объектам изучения. Этот принцип получит своо развитие и в эпизоотологии чумы. ¡1. С . Солдаткнн (19(58) за систему принимал комплекс грызун-блоха-микроб, И.П.Козлов (19/9) - ош'.зоотя-ческий процесс. Однако трнара грызун-блок.а-мнкроб каг. ,с;1сте-мА, не может обеспечить долговременного суцестчования возбудителя инфекционной болезни среди животгых. а ипиэоотичаскяй процесс трактуется как процесс распространенны зозбудителя инфекционной болезни среди животных. Понятия "энзоотия" или "энзоотический процесс" значительно шпре ч вклвчадат в аебя эпизоотический процесс, как этап энзоотии -ледователькс, от>ект-систомы, вобранные И.С.Солдаткиным и М.П.Козловым не отличаются целостностью н но могут обасдечт^гь д^-, говромонно-го существования микроба.

В.С.Трхтдн ,н Ю. А .У.рмаццор раскрытая суть пра-

вильного родхода к изучаемому . лала»л »ы2сд о том,

что отображение структуры ц организации объекта-системы выступает главной интегральной характеристикой знания об эбъокте. Системному, анализу энзоотлн чумы должна грддшество-1ать характеристика участников энзоотического процесса, раскрывающая основной механизм их взаимоотношении. При этом, юпупяциониый подход к рассмаиригаемому вопросу (Айала, .984; некий, 1986 и др.), является единственно прием»

|ймым, отвечающим сущности поставленной задачи.

ПОПУЛЯЦИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ

Уннкальный хар.эгт>;р эволюционного пути зозбудителл чумы

подчеркиваемся специализацией только двух видов палочковидных форм микроорганизмов - возбудителей чумы и Туляремии к трансмиссивному механизму передачи. Стабильная приуроченность' чумного микроба к грызунам, отличающихся относительно невысокими продолжительностью жизни и степенью резистентности, значительной численностью и плотностью поселений, соответствующи< оптимуму эстафетной передачи, носит свой индивидуальный эволюционный смысл. В отличии, например, oi возбудителей туборкулиза, проказы и т.п., приспособленных г длительно живув ш хозяевам, или обитателей кожных покровов i: кишечника с nnv.ee жесткими требованиями к видовому составу хозяев. Oi ределенные параметры геграфических зон активны; природных очагов чумы, обьясняются, повидимому, соответствием их оптимуму трансмиссии возбудителя.

Свойства чумного микроба - выраженная температуроза-висимость (37°) синтеза антигенов и связь их с вирулент-.ностыч (Higuchi et al., 1959; Burrows, 1966 и др.), питательные потребности (Burrows, Jillet, 196G и др.), стабиль ность свойств шумного микроба в пределах ареала конкретны носителей и различие их по природным очагам (Мартиневский 1969 и др.), внутриклеточный характер паразитизма (Burrows 1963), особенности инфекционного процесса у грызунов (Ралпь 1965 и др.) и сопряженность изменения свойств возбудителя с сменой хозяев в очагах (Некипелов, 1962 и др.), наглядны показатели эволюционной направленности процесса специализа ции к условиям теплокровного организма. Высокая степень па бильности •вирулентных свойств микроба, предполагает необхо димость резкого ограничения "экологической ниши" возбудите ля, в максимальной степени способствующей сохранению ста

билыюсти свойств популяции чудного микроба и природных очагах. Это возможно При обеспечении циркуляции его только в вирулентной форме (37° ) , соответствующая! его видовому статусу, что согласуется с тезисами И.И.Шмальгаузена (1969) об "ограничении понятня адаптации" , и "автономности развития, как генеральной лшшн эволюции". Вирулентность возбудителя чуми является интегральным свойством, имеющим основное экологическое значение и положение о нем, как об основном условии сохранения патогенных бактерий в популяции хозяина (Браун, 1968), для чумного микроба абсолютно во ьсох отношениях.

ПОПУЛЯЦИЯ НОСИТЕЛЯ

Основу - функциональных взаимоотношений Vitoценоза популяций носителя - вопбупптоля - переносчика состаоля^т популяция носителя, как "экологическая доминантл" biuv; ;иоза (Одум, 1975), определяющая Xi<.p.*KTt:p взаимосвязей всех его членов, видовой состав к своисгва поп'/ляцнй эндо-(во и.удиталя) и эктопаразита (переносчика).

Важнейшим признаком популяции ноонтоля издается определенный видовой уровень речнстентности, обусловлсщшй приоритетностью фагоцнтарнон системы иммунитета (Р/минцлв, 1973; Малиский, 1.965; Klabarioff, Clare, 1987), в том числе и при чумо (Ралль 1965; Мяуог, 1950; Burrowu, Bacon, 1956 и до.). Ведущая роль фагоцитарной системы гродемонстрнрозана нами на иитактных животных различных видов, при экспериментальной чума и np¡¡ наблюдениях за цнтоцндной активностью полиморфно-ядерных лейкоцитов больших песчанок, п прзциссе эпизоотии в Южном Прибалхашье (I¡í i>hkou и Др., 1990), выполненных под налим руководством.

- 34 -

В опытах in v.-^tro, in vivo нами впервые доказано мутагенное действие ф »гоцитирующих клеток грызунов на чумной микроб - получен иырокий спектр мутантов по питательным потребностям, вирулентности. Внутриклеточный характер паразитизма чункого микроба обуславливает преимущественно хронический ннфе! цио;1нпй процесс (Ковалевский, 1983; Адаме, 1983 и др.)» что впервые продемонстрировано нами на модели одна "неблокированкан" finoxíi - один грызун. Частота гранулематоз-ного воспаления обратно пропорциональна степени видовой резистентности грц-'у юв - морские свинки - 56%, белые крысы -32%, большие песчанки - 23%. В попевыз* услойиях, в зоне эпи-зоотий, инфекционные гранулемы обнаружейы нами в 1'3% случаев.

Уровень популяционной резистентности носителя,

Представляем собой лимитирующий фактор гпя степени популяционной Вй^уЯентностн возбудителя, что Четко-прослеживается по feeем п£Йродным очагаМ чумы - более резистентному носителю соответствует более вирулентный возбудитель и наоборот.

Особенности паразитизма чумного мй(сроба и специфики ^анулематозйого Процесса (Ковалевский, 1983 и др.) позволяет отнести последний к постоянному источнику инфекции i В основе циркуйяций чумного микроба лежйт обязательная Передача его какдоМу йо.вому поколению ГрЫзуИов. В зависимости от условий темпы ее или ускорены - оотрая эпизоотия, или очейь замедлены и отдельные, регистрируемые случаи чумы у грЫзуйов создают впечатление спорадических, диффузно распределяющихся случаев. Снижение численности основного носителя в процессе эпизоотии никогда не достигает критического уровня (Варшавский, Шилов, 1973 и др.) и в природном очаге всегда име-

- 35 -

ются условия для циркуляции ч/много микроба.

Эти функции могут бить реализованы только доминирующим видом грызуна. Следовательно, категории основного носител> экологически обоснована.

ПОПУЛЯЦИЯ ПЕРЕНОСЧИКА

Экспериментальный материал продемонстрировал высокук. инфекциозность укуса одной "неблокнрованной" блохи при обязательном наличии в нем внрулинтной формы возбудители. Это неизбежно влечет признание эпизоотической значимости бактериемии любой интенсивности, наличие которые отмечалось многократно (Лаврентьев, 196<1; Островский, Солдаткин, 1965 и др.).

Общепринято, что роль переносчика огран.'ч^каечся сохранением на какое-то времн розбу^итсля и перацлчей ••„о носителю - реципиенту.

Очевидно, что с этих позиций ысото перс •(<-,счи»:а выделя-атся своей выраженной ¡м'тивноотью и односторонней зависимостью от прокормитепя. Мы считаем такую-трактовку роли переносчика неполной. В этой связи мы обратили внимание на три £акта>

- развитие эпизоотии чумы в условиях повышенного обилпя юсптелей I! переносчнкои;

- наличие определенных периодов повышенной численности 5лох в шг^- тн;

- осо.'.нностн пшмния блох, требующие обязательного участия в этом процессе ¿»нтнкоагуляптов, являющихся иммуко-шпрэссантами (ШлОалпн, 1'£-ров, 1908).

Мы предположили ся"> иммунодчпроссипном влиянии мн-)жест-

-36-

ввиных укусов бпох на организм грызуна.

Это подтвердилось в наших опытах с укусами незасаженных блох белых ыыш-эй и белых крыс и последующим определением величины чумното микроба. Укусы блох Х.сЬеор1в почти в

27,9 посыпают чувствительность белых мышей, а Х.сазр1са в б раз чувствитечыюсаь белых крыс. Сопоставление данных с действием :100 ад. гопарина (повышение чувствительности в 3 раза), позволяет определить степень нммунодепрессивного влияния укусов блох как достаточно интенсивное.

СледовательН'>, блохам принадлежит активная роль кндук-торов эпизоотического процесса, обусловленная их функцией постоянного "нммунодепрессивного пресса". Такая функция может быть свойственна только наиболее массовому виду переносчика - отсюда экологическая обоснованность критерия

ч

основного переносчика.

По нашему мнению, популяция переносчика в природном очаге осуществляет две органически связанные функции - передача возбудитэля и йммунодепрессивное действие на организм носителя.

В процессе взаимоотношениям популяций носителя, возбудителя ц переносчика необходимо выделить следующие основные положения.

Для популяции, носителя:

- роль экологической доминанты;

-'специфический патогенез инфекционного процесса с ведущей ролью фагоцитарной системы иммунитета;

- ведущий характер хронического (гранулематозного) воспаления и эпизоотическая значимость бактериемии' любой степени;

- популлционная резистеьтность, кок "^имитирующий" фактор для вирулентностн популяции возбудителя;

- экологическая обоснованность критерия основного носителя в конкретном природном очаге.

Для популяции возбудителя чумы:

- внутриклеточный паразитизм;

- мутационный характер изменчивости;

- циркуляция.по цепи носитель-переносчик только в ти-1НЧНОЙ вирулентной форме, как основное условие сохранения ияда»

- эпизоотическая значимость бактериемии любой интенсивности .

Для популяции переносчика!

- передача возбудителя чумы в вирульнтпон £юрие "небло-кирозанными" блохами, как основной механик трансмиссии;

- функция постоянного "иммунодепроссивного пресса", как кпжнейшея условие активно '] индукции .зпизооти «г ^кого процесса;

экологическая обоснованность критерия осьэвного переносчика.

Мы считаем, что терминальные состояния у любого из членов эпизоотическои три.чш - агоналмгыЛ сепсис у носителя, слабая вирулентность у бозбудителя, "блок"- ироджелудкЯ у блох не являются факторами эпизоотического процесса.

Дан"!^^ положения позволяют определить взаимодействие популяций ОСНОВНОГО носителя, возбудителя чумы и основного нереносчика, как эполюцнезино обоснованные, достигшие уооан.'» пзаимообусловлсшпн.тн и н^алмочависимости.

- 38 -ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Ю.М.Ралль (19<i5) определил- причину неудачи научного осмысления природного процесса, указав на необходимость син-тезного познания всех членов триады с позиций их единства и взаимообуслсвпеннис'гп,. а не их взаимосвязи.

Биоценоз, .¿ложившийся в природном очаге, представлен популяциями носителя, переносчика и возбудителя, где среди важнейших пуиппакпь популяции необходимо выделить ее устойчивость (Одуи, 19 '5), а характер нх связи определить как взаимозависимый (11ажо, 1975).

Популяция носителей в биоценозе выполняет функцию экологической доминанты (Одум, 1975) и определяет основные характеристики возбудителя и переносчика.

В специфическом механизме .патоге :еза выделяется непосредственное взаимодействие чумного микроба, как внутриклеточного паразита (Burrows, 1963), с функциональными элементами фагоцитарной системы иммунитета (Голубинский и др., 1985 и др.), обуславливающими механизм естественной изменчивости (Атчабарс.з, 1990).

Популяционная резистентность грызунов представляет собой лимитирующий фактор естественного отбора возбудителя чумы.

Возбудитель чумы об/тдает всеми признаками адаптации к условиям теплокровного организма (Burrows,' Bacon, 1966). Внутриклеточный паразитизм обуславливает хроническое грану-лематозное воспаленно, как основную форму процесса и механизм персистенцпи возбудителя (Ковалев, 1983 и ДР-).

Популяции переносчика, как необходимому фактору цирку-

1 - 39 -

[яции возбудителя, свойственны две основные функции.

Первая - передача возбудителя "деблокированными" блоха-;и. Это обеспечивает чумному микробу циркулями» в типичной [ля конкретного очага вирулентной форме (принцип автоном-юсти развития). При этом эпизоотическую значимость приобретет бактериемии любой интенсивности, а в передача участвуют ктивные, здоровые особи.

Вторая - иммунодепрессивное действие укусов блох, как хтивный индуктор эпизоотического процесса.

Эти положения выявляют полную взаимозависимость и взаи-ообусловленность популяций основного носителя, возбудителя основного ■переносчика и соответствуют выводу Ю.Оцума 1975) о "выраженной тенденции экосистем »1 популяций эвог.ю-иониролать на основе естественного отбор1 I здкнм образом, тобы достигнуть состояния саморегуляции".

Таким образом, в основе механизма энзоотии чумы лежит волюцвиино обусловленное- взагчоцействне попупщнй основного □ситепя, возбудителя н оснсе::?" плносчика клю самерегу-ирующийся механизм естественного отбора и сохрл 1ения видов.

ВЫВОДИ

1. Передача возбудителя чумы в вирулентной, типичной тя каждого очага, форме "неблокированными" блохами составит осн л-1 лй трансмиссивный механизм циркуляции чумного *кроба в природных очагах.

"Ухусы" одной .зараженной "неблокирсваннон" блохи выэы-»ют снижение цигощмл.ои активности полнморфноядерных пейко-1ТОВ у грызунов (Оопых крыг - ¿,76 + - 3,4 ± 0,35;

больших песчанок - 45,84 + 4,38 - 18,37 ± 2,14), что доказы вает способность практически каждой блохи передавать возбудитель без наличия бактериального блока преджелудка.

2. Наличии у возбудителя известных детерминант вирулентности, зависимых от температуры среды (36°-37°) обеспечивает у грызунов развитие инфекционного процесса после егс трансмиссии "неблокированными" блохами. Укусы одной "небло-кированной" блохи вызывают септическую форму у белых мыше£ (12,0 + 4,38 - 16,8 + 4,28%) независимо от вида блох и концентрации мнкроГ» (10 тыс. - 25 млн. м.к./мл) в заражающей блох крови.

3. У относительно резистентных грызунов - морских свинок, белых крыс, больших песчанок, "укусы" одной "неблокиро-ванной" блохи обуславливают развитие гранулематозного воспаления как типовой реакции организма у< и хронической форме инфекции. Последнее,как основа хронической формы чумы, обусловливающее персистенцйю возбудителя, обеспечиваеа устойчивую циркуляцию чумного микроба в популяции носителя.

Инфекционное. эпптелиоидно-клеточные гранулемы формируются у 534 морских свинок, ' 38% белых крыс, 23% болыпия песчанок в эксперименте и - 13% больших песчанок на эпизоо-тийном участке.

4. Функция .постоянного "иммунодепрессивного пресса", наравне с передачей возбудителя, составляет интегральную характеристику основного переносчика чумного микроба.

Укусы незараженных блох повышают чувствительность белы» мышей к возбудителю чумы в 27,9; белых крыс - в 6 раз, пс сравнению с 100 ер. гепарина - ь 3 раза.

5. Эволюционно обоснованное взаимодействие популяций

эсновного носителя, возбудителя и основного переносчика и эчагах чумы находится на уровне взаимозависимости н кзаимоо-5условленности.

Популяция основного носителя, как "экологическая доыи-|анта" биоценоза, определяет видовой состав и свойства попу-|яций эктопаразитов и возбудителя, их стабильность по прнн-(ипу элиминации всех уклонений от нормы, механизм наиболее шгодных для биоценоза взаимостнощчний, гдо особая ропь при-1адлежит хроническому гранулематозному Bocria.ioi.vio.

Популяция эктопаразитов обеспечивает циркуляцию возбу-[нтеля в типичной дня каждого очага вирулентной форма и яв~ тется постоянным активным индуктором зпиьоотичбского провеса .

6. Эпизоотический проц&сс в природш х о'/гтах чумы родставляет собой механизм естественного отбора и сохранена видов основного носителя, возбудитэля I основного перо-осчнкп.

«

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Сулейменов Б.М. Штамм бактерий Y,pestis, преднаэн; чениый для проведения генетических и эпизоотологических на( людений / Авт.свидетельство N 4725090/13 (104044).

2. Сулеимонов Б.М. Штамм бактерий ï.pestis, предназн« ченный дчя проведения генетических и микробиологическ! исследований. / Авт. свидетельство N 4725093/13 (104041).

3. Сулеймешт Б.М. Системно-функциональные осно: трансмиссивного механизма энзоотии чумы// Современные аспе; ты эпипнадзор*! за особо опасными инфекциями. - Алма-Ат 1990. - С.44-47.

4. Сулейменов Б.М. Реакция фагоцитов грызунов после з ражения возбудителем чумы одной "неблокированной" блохой. Матер, ыехгос.н.-практ.конф. "Профил. ¿тика и меры борьбы чумой", - Алматы, - 1994, - С.130-131.

5. Сулейменов Б.М. Иммуно-генетические аспекты пр исхождения и эволюции возбудителя чумы. // Матер, ме гос.н.практ.коаф. "Профилактика и меры борьбы с чумой поев.100-летию откр.возб.чумы. - Алматы, 1994, - С.131-132

6. Сулейменов Б.М. Биоценотическая функция основно переносчика возбудителя чумы. // Матер, межгос.н.-прак конф. "Профилактика, и меры борьбы с чумой", поев.100-лез откр.возб.чумы. - Алматы, 1994, - С.189-191.

7. Сулейменов Б.М. Иммунодепрессивное действие пер носчиков возбудителя чумы на грызунов в процессе питания. Депонир. в Казгос.ИНТИ, N 5580-Ка94.

8. Сулейменов В.М. Инфекционный процесс у грызуг после трансмиссии гозбудителя чумы одной "неблокировг

- 43 -

"блохой. II Депоннр. в Каэ .гос.ИНТН, N 5Г.81-Кл94.

9. Сулейменов Б.М. Аллергически« пробы у грызунов после' ясмассии возбудителя чумы орной "нвблинированпой" Önoxofi Дапонмр. в Каз.гос.НИТИ, N 5582-Ка94.

10. Сулейыенов Б.М. Экспериментальное обоснование пснзссш! возбудителя чумы "неблокнровапиымн" блохами. // опар, а Каз.гос.ННТИ, N 5583-Ка94.

11. Сулайменов Б.И. Эффективность передачи возбудителя ы "иеблокнроваинымн" блохами il Допонир. в Клз.гос.ННТН, 5t34-Ka94.

12. Сулейыенов Б.П., ЛйхнмБаев* А.М., «[спя S.M. Имиуно-рассивноа действие.- аминокислот при экспериментальной чуме Чат. . регион.совеиьпротивоч.учрежд. по ог 1Дэи,,эинзоот. н 5>.ООН. - Куйбышаз, 1990«. - С.200-201 .

13. Сулеймзиоа V.U., Атчабауов Б.Б., Рдхма"лулов Р.Р., каноа Н.С. Аргинннзашюнмыо вирулентны« штампы чумного роба аз Зауральского стопного очага чунь. II Нат.рэги-:опещ.протнвоч.учрежд. по "»nnüct;. .'.'П'иоот, к проф. >собо :я.инф. - Куйбышев, 19906. - С.201-203.

14. Сулейменов Б.Н., Атчабаров Б-Р. Функциональные спя-юпуляций носителя, возбудителя, переносчиков в природных ^ах чумы // Организация зпнднадзора при чума п меры an галактики. Иатор.межгос.научи.практ.хонф. - Алма-Ата, !. - 2. - С.274-276.

15. Сулейменов U.M., Матаков М.И. Влияние антител к шчным члтигенам чумного микроба на интенсивность блоко-130вання // "XII межрысп.ниучн.прдкт.конф.протнвоч.уч-¡.Ср.Азии и Казахстана по проф. чумы. - Алма-Ата, 1')05, --45.

- 44 -

16. Сдоюйменоа Б.М., Матаков М.И., Исин Ж.М., Коту] Л.Н., /Атчабаров !Б.Б. Экспериментальное обоснование механи передачи шовОудителя чумы // Мат.обл.научн.практ.конф. гу] евокой проинвоч. станции по проф. особо опасных инфекций Гурьев,, й»89, - С.179-191.

¡1/7. 'Сулейменов Б.М., Матаков М.И. Условия передачи ш бущнгвеля чудо Чкеблокйрованными" блохами // Мат.регион.^ вещ.протпвоч.учрежц. шо эпидем. бэпизоот. и проф. оо опасных нн^>екцн!й. — Куйбышев, 1990в. - С.203-205.

10. Сулаймонсш Ш.'М., Матаков М.И., Атчабаров Б Трансмиссия .возйуднтепя чумы "нёблокированными" блохами Проблемы ООН. - Сащжзчив,, 1994, N 102 '(71-71),, - С.37-45.

19. Атчабаров Ф.<Б.„ Сулейменов Б.М., Исин Ж.М. Мутаг ное действие фагоцитов на чумной микроб. // ЖНЭИ, 1989, V - С.ОиО-14.

2(0. «Атчабаров Ш.Б. , Сулейменов Б.М., 1Нсин Ж.М. Мутаг. ная активность фагоцитов большой песчанки. // Матер.ре: он.совещ.црзтивочум.учрежд. по эпид.,эпиз. и проф. ос опасных инфекций. - Куйбышев., 1990, - С.21-22.

21. Атча^баров Б.Б., Сулейменов Б.М. Изменчивость чум го микроба под действием фагоцитирующих клеток // Эког .1991,(а), - Томск, N 1, 1. 3. 9.

22. Атчабаров Б.Б., Сулейменов Б.М., Майкаяов Н.С. I пуляционные взаимоотношения основных носителей и возбудят чумы в природных очагах- // Натер.5 объед.съезда П» ев.эОвд.,инфекц. - Алма-Ата, 1991, - 1-1У, - С.118-121,

23- Атчабаров Б.Б., Сулейменов Б.П., Майканов В.С. . гннинзавасимая вирулентная популяция чумного микроба 3 ральского степного очага чумы // Генетика, мнкробиол. в

- 45, -

шенствование лабчдиапност.особоа опасных инфекций. - Сара , 1ОД4,- С.98-106.

24. Атчабаров Б.В., Сулепменов Е.Ч., Тугамьаеэ Т.И логические аспекты изменчивости чумного микроба // Орга-ацня эпиднадзора при чуме и меры ее профилчктикн. Ма-.межгос.н.практ.копф. - Алма-Ата, )992. -2. - С.183-186.

25. Псин Ж.М., Суленменов F.MI И вопросу сб анткбакте-льных свойствах гммунын сыворотках при>чуме.// Иимуноло-

и спец.профилактики особо опасных инфекций.. - Саратов, 6. - С.25-32.

26. Иснн Ж.И., Сулепменов Б.М. Сравнстальное пзучоине нмпкробного потенциала полиморфнондерчых лейкоцитов жи-ных с различной видовой чувствительность* к возбудителю ы.// Мокдунар.жури. "Гигиены, эппдемиолоrihi, мчкробтэло-

н иммунологии". - Прага, 1987 , N - . 335.

27. Исин Ж.М., Суленменов Б.М., Айки:.оаев A.b. Кисло-зависимый цитоциднын потенциал фагоцитов лак основа разня чувствительности грызунов к чуме // V ке*респуб.хонф. оргологов и иммунологов Казахст. и респлубпнк Ср.Азии ч. с Пленумом Научного Совета по иммунологии AilK СССР. »-Ата, 1986.

28. Иснн Ж.М., СулеГ1м«;нов U.M., Айкнмбаог A.M. Измена-антимикробного потенциала фагоцитирующие клеток больших

jaHOK при экспериментальном чумы II ШМЭИ, Коскпа, 1987. •• I. _ г . '7-88.

29. ). .in Ж.Н., ТугамОсН.'В Т.Н., Суп'.'йменоп Б.М. Роль эн-жсина в патогенезе чупнои инфекции ,'/ Сб. работ "Ракте-1ьные токсины" ЛЭМ им. II .Ф. I яма леи , 1V87 . - С.51-34

30. Млйканов Н.С., Лтчабчров В. В., Суленменов Б.М.

Условия сушествовлния аргининзависимой вирулентности поп ций чумного мнкро'За в Зауральсхом степном очаге.// Матар обгед.съезда гигилн.эпид.,инфекц. - Алма-Ата, 1991. - I - С.131-132.

31. Мабкаио:-! II.С., Атчабаров Б.Б., Сулейменов Б.М., гамбаев Т.Н., Р.гхманкулов P.P. Экологические аспекты uhj ляцин аргинив»авнсимой вирулентной популяции чумного мик] в песках Бийрюк (Зауральский степной очаг). // Организг эпиднадьор» при чуме и меры ее профилактики. Матер. » гос.н.-прак'^.конф. - Алма-Ата, 1992, - 2. - С.237-240.

32. Тугапбаев Г.И., Сулейменов Б.М., Атчабаров Б. Майканов I.e., . Рахманкулов P.P. Антигены чумного ыикроЕ аллергической диагностике экспериментальной чумы. // Ме» нар.симпозиум по аллергологии и клинической иммунолог Тез. докл. - Алма-Ата, 1992, раздел - С.198.

33. Тугамбаев Т.И., Сулейменов Б.М., Дмитровский А. Беэверхнни A.b. Иммуноглобупиновый эритроцитарный диагиос кум против липоп(>лислхарида возбудителя чумы // Матер.к гос.н .'-практ. конференции "Организация эпиднадзора при ч и методы ее профилактики". - Алма-Ата, 1991, Т.1. С. 166-168.

-47-

Кысцаша шзмуш

Сулойванов Бахтияр Мвдзд-улы

#

i 1цдэт1н цоздырушысын "tyUíhcío" 0ургвлерд1ц тасшллдлуы-

Зтдэшолога.ч мамаьдыгы бойшпа ьэднцчкз дикторы riuiuwi дэрекаь1н а."у yiüíh ^иссврпадипль^ яунисынич tyIHhI."

Тещбасн: гиОО.ЗО-эги^эшохогия.

Оба цоздирушыск }цдэт}н1н белоецдШг! т^ш-рмурага тэтелд! / öKOHAiri белгШ.бул глгдай "'хуШнсгз" бурлелордгч тасушылщ

ццШггн арттьради, Тндвттелм:1п0н Мр б'^'гэнщ ¡загуилам ак +

цшщардыц12,0-4,38 - 16,4,28 процзнтйде сшей: лайдр 6vi-обага тои!цд! квм{рта1лерд1н арасында- тем!л св.'.^а^ ид'. % /, arç вгиукуПрыкта /28% /, улкон цуитьи^ак! !^ /¿3% / узацка «¿zrsn гранулеыатоэдоц цабыиуда киктш«сыэ втел'. 05а щаздыргшьас« -ерхангон "гуГ.íhcís" йургвн:ц шагуындн у цуПрицтарда /5,76-0,36, улкон цумтшч■ .ндаринда

37±2,14/ нв)форыалк< ядролыц ац цан /ерш!»

оцидт!к бэлсэдхлIrin тешндетзд!.

Зэрлз»<5огон бургелврдхн ш&гуы ком1руга!лард1ц oía iwrlH ¿лщушылья* rçacheTira кер} девр яасаЯды» осины« салдаршин гиацандарды /27есо/,ац о гоу к.уЯрыцтардил /5осо/ саз}итал-j осе .

Ibrk ' сацтауши, цоэдыруши »aie жуитыругашлр арасында !лд1л(к rçaiuiiac бар екендЖ аныктйлды.бул гагдаЙ оба бис»->зын кураДтым Yii буынды napiU.¡TTfK еис-ллдг.о.'м та.элерж.ц ни сурыпта^' жа;>: тур оьктау №ханиз4ыж<н. terfaln кура^ды.

- 48 -SUMMARY

Sul< imenov Bahtiyar Mukashevich

Transmission of Yersinia pastis by "non-blocked" flat

For confirmation of the Degree the Doctor of Medical Science Code: 14.00.30. - Epidemiology

Tra-nsnisdior. :>f Yersinia pestis by "non-blocked" fl<

as principal ntechaniaui of its circulation vas conflin

experimentally. Having by agent well-known determinants

'virulence, dependent on yemperature (37s) defines

effectiver.es« of Yersinia pestis microbe transmission

"non-blocked.'1 fleas. Stings of one flea condition sepsis

12,OS 4>3*8 - 16f8±4,28% of white mice and chronoc granulai

tose inflamation in more resistant rodents - guinea p

(53%), white cat* (38%), Rhombomys opiraus Licht. (23%).

( Sting» of one infected "non-blocked!". flea cai long-term1 decrease of cytocydic activity of polumorphonuc ar leucucytes in white rates (5,7610,35-3,410,35) and in poimura (45,84+19,37+2,114), which has a great interest knowledge of the initial phase of pathogenesis in infectii prove*» and proves the possibility of phactieallty e "non-blocked" flea to transfer X.pestis.

Stints of non-infected fleas show iirjt\unodle|jre®»ive , tion on rodents. "Sensitiveness of white mice to1 Y. pestis creases 2'7 times, of white' rate - 6 times. «

Analysis of ftmcti' nal connection of principal! carr populations, of aren't® an<3 principal carrier testify int dependewtcharaeter of their interaction, being the nscten of natural «election and1 preservation of the species, cask biotreaosis.

DTf.en«-,'<2,t-i-0 4 ~u!«jay)CUj>uJLC 7-fJC, faja&xa+t H^ifCLf** * ?ci - 11C.