Автореферат и диссертация по медицине (14.00.14) на тему:Трансформированные клетки с различным метаститическим потенциалом; анализ дифференциально экспрессирующегося гена shMDG1
- Ученая степень
- кандидата биологических наук
- ВАК РФ
- 14.00.14
Оглавление диссертации Исаченко, Надежда Александровна :: 2005 :: Москва
Основные обозначения и сокращения
Введение
Обзор литературы
Глава 1.
1. Основные свойства трансформированной клетки, обеспечивающие процесс метастазирования
1.1. Потеря зависимости от ростовых факторов
1.2. Нечувствительность к ингибиторам роста
1.3. Уклонение от клеточной гибели
1.4. Способность к бесконечному делению
1.5. Способность к стимуляции ангиогенеза
2. Изменение клеточной адгезии - необходимое свойство метастазирующей клетки
Глава 2.
3. Молекулярные шапероны в процессе канцерогенеза
3.1. Классификация шаперонов
3.2. Регуляция экспрессии шаперонов
3.2.1 Экспрессия шаперонов в опухолях
3.3. Роль шаперонов в индукции пролиферации и угнетении апоптоза
3.3.1. Шапероны плазматической мембраны
3.3.2. Шапероны цитозоля
3.3.3. Митохондриальные шапероны
3.3.4. Ядерные шапероны
3.3.5. Шапероны эндоплазматического ретикулума
3.4. Роль кошаперонов в определение специфичности и интеграции шаперонов HSP90 и HSP
3.4.1. Молекулярные кошапероны класса Hsp40 (MDG1)
3.4.2. Открытие и исследования функций кошаперона ERdj4/MDGl
Введение диссертации по теме "Онкология", Исаченко, Надежда Александровна, автореферат
Несмотря па огромные успехи в исследовании механизмов канцерогенеза, на сегодняшний день метастазировапие изучено далеко не полностью. Одним из наиболее значимых методом при изучении канцерогенеза является анализ клеточных линий, полученных из клеток опухолей или трансформацией in vitro. Метод трансформации клеточных культур вот уже 50 лет считается одним из самых действенных в отношении поиска генов, вовлеченных в канцерогенез. В изучении процесса метастазирования в физиологических условиях значимые результаты могут быть получены при введении полученных клеточных линий сингенным животным или бестимусным мышам. Для этой цели животному ортотопично вводится исследуемая клеточная линия. При моделировании поздних стадий метастазирования клетки вводятся непосредственно в кровеносное русло. Данные методы классифицируются как анализ спонтанного и экспериментального метастазирования, соответственно.
Наиболее адекватное исследование метастазирования включает введение подопытным животным пары клеточных линий, отличающихся по метастатическому потенциалу, но близких по остальным биологическим характеристикам, например, клеточных линий, полученных из опухолей схожей этиологии, но отличающихся по уровню метастазирования.
Одной из самых перспективных клеточных моделей для изучения метастазирования является система клеточных линий, полученных в результате инфицирования первичных эмбриональных фибробластов сирийского хомячка (HEF) различными изолятами штамма Schmidt-Rupin D (SR-D) вируса саркомы Рауса (RSV) в лаборатории противоопухолевого иммунитета НИИ Канцерогенеза РОНЦ РАМН под руководством д.б.н. Галины Исааковны Дейчман. Все полученные линии имеют типично трансформированный фенотип и являются высокотуморогенными для сингенных животных. При внутривенном введении взрослым хомячкам, клетки всех линий проявляют высокую экспериментальную метастатическую активность (ЭМА). Значительные отличия выявлены при исследовании споптаппой метастатической активности (СМА) при подкожном введении исследуемых клеточных культур. Следует отметить, что условия СМА-теста более приближены к естественным процессам метастазирования, чем тест ЭМА.
В представленной работе использовались две линии этой серии - низкометастазная HET-SR и высокометастазная HET-SR1, согласно тесту СМА. Линии HET-SR и HET-SR1 отличаются по последовательности v-src, введенного при инфекции различными изолятами RSV-SR-D. Клеточная линия HET-SR содержит иизкометастазпый вариант vsrcLM (low metastasis), а высокометастазная линия HET-SR1 - v-srcHM (high metastasis). При подкожном введении животным опухолевых клеток HET-SR, метастазы либо не формировались вообще (50% случаев), либо образовывались в количестве 1-20 у одного животного. Клетки линии HET-SR1 формировали от 30 до 300 метастазов в легких животных.
Для сравнения экспрессии генов в клетках с различным метастатическим потенциалом в лаборатории регуляции клеточных и вирусных онкогенов НИИ Канцерогенеза использовали метод дифференциального дисплея, с помощью которого получены фрагменты кДНК генов, высоко экспрессирующиеся в низкометастазпой HET-SR или в высокометастазной HET-SR1 линиях. Один из фрагментов, длиной в 365 нуклеотидов, выделенный из линии HET-SR, проявил гомологию с геном дифференцировки эндотелия 1 - MDG1 (microvascular differentiation gene 1), относящимся к 40-му классу белков теплового шока (Hsp40).
Целыо данной работы являлось изучение участия гена дифференцировки эндотелия 1 в реализации метастатического фенотипа различных клеточных линий. В ходе исследования предполагалось решить следующие задачи:
1) Получить полпоразмерную копию хомячкового гена дифференцировки эндотелия 1- shMDGl (Syrian hamster homologue of MDG1);
2) Подтвердить диффсренциалыюсть экспрессии гена shMDGl в клеточных линиях HET-SR и HET-SR 1;
3) Получить модельную систему клеточных культур, стабильно экспрессирующую кДНК гена shMDGl;
4) Изучить влияние экзогенной экспрессии гена shMDGl на способность клеточных линий образовывать метастазы в легких сингенных животных;
5) Оценить уровень экспрессии человеческого гена ERdj4/MDGl в опухолевых и нормальных тканях.
В результате исследований впервые получена и депонирована в GenBank последовательность открытой рамки считывания хомячкового гена дифференцировки эндотелия 1 - shMDGl. Показано, что экспрессия гена shMDGl повышена в низкометастазирующей линии HET-SR по сравнению с высокомстастазирующей НЕТ-SR1. Методом трансформации получены клеточные культуры, стабильно экспрессирующие кДНК гена shMDGl. При введении последних сингенным животным показано снижение метастатической активности исходных родительских культур. Более того, мы впервые показали, что инъекция ДНК гена shMDGl в опухоль, сформированную высокометастатической клеточной линией, снижает её метастатическую активность.
Изучено влияние продукта гена shMDGl на пролиферацию клеток с различным метастатическим фенотипом. Также впервые показано негативное влияние экспрессии этого гена на Asn-зависимое Р(1,6)-гликозилирование, характеризующие клетки с высоким уровнем метастазирования.
Изучение механизмов прогрессии модельных клеточных линий является фундаментальной проблемой современной онкологии и может способствовать разработке новых методов терапии злокачественных новообразований. В ходе работы сконструирован набор генно-инженерных векторов, содержащих ген shMDGl, а также получена панель RSV-трансформированных клеточных культур с высокой экзогенной экспрессией данного гена, которые могут быть использованы в дальнейших исследованиях в области экспериментальной онкологии.
Обзор литературы.
На сегодняшний день принято считать, что для образования злокачественной и активно метастазирующей опухоли у человека, клеткам необходимо накопить не менее 6-10 генетических нарушений определенного спектра [Hanahan et al., 2000].
В ходе развития первичной опухоли отдельные клетки приобретают способность к отрыву от неё и образованию новых колоний в другом микроокружении, т.е. метастазированию. Rene Bernards и Robert Weinberg выдвинули гипотезу о появлении метастатических детерминант не только в процессе прогрессии, но и на самых ранних стадиях канцерогенеза [Bernards et al., 2002].
Таким образом, во-первых, объясняется тенденция некоторых опухолей метастазировать достаточно рано в процессе канцерогенеза (например, рак молочной железы). Во-вторых, не существует генов, ответственных исключительно за метастазирование, а ряд нарушений онкогенов и генов-супрессоров ассоциированы не только с трансформацией, но и с дальнейшим озлокачествлением клеток. Наиболее ярким подтверждением этой гипотезы является анализ ДНК опухолей с помощью технологии микрочипов. Kang и van't Veer продемонстрировали, что экспрессия генов в первичной опухоли и в произошедших от неё метастазах практически идентична [van't Veer et al., 2002; Kang et al., 2003]. Безусловным подтверждением гипотезы являются также изучение индукции метастазирования онкогенами ras, туе, sre в клеточных линиях грызунов. В частности, в представленной работе исследуется генная экспрессия двух клеточных линий с различной метастатической активностью, полученных введением двух мутантов онкогена v-sre.
Первая глава данного литературного обзора посвящена краткому описанию признаков, необходимых для формирования метастатического фенотипа. Во второй главе обзора обобщены данные по изучению роли молекулярных шаперонов в канцерогенезе и, в частности, в процессах метастазирования.
Заключение диссертационного исследования на тему "Трансформированные клетки с различным метаститическим потенциалом; анализ дифференциально экспрессирующегося гена shMDG1"
Выводы.
1) Впервые получена полноразмерная копия микроваскулярного гена дифференциации 1 хомячка - shMDGl (зарегистрирована в GenBank под номером AY532644).
2) С использованием двух независимых методов (Нозерн-блот гибридизация, RT-PCR) показано, что эндогенная экспрессия гена shMDGl повышена в низкометастазной клеточной линии HET-SR по сравнению с высокометастазной линией HET-SR1.
3) Получены клеточные культуры, стабильно экспрессирующие продукт гена shMDGl.
4) Обнаружено подавление способности клеточных линий HET-SR и HET-SR 1 образовывать метастазы в легких сингенных животных под действием экзогенной экспрессии гена shMDGl.
5) shMDG не влияет на пролиферацию и миграцию клеток in vitro
6) Показано, что экспрессия р(1,6)-гликозилированных белков коррелирует с метастатическим потенциалом - в высокометастазной линии HET-SR1 наблюдается повышенная экспрессия р-(1,6)-гликозилированных белков, а в низкометастазных клеточных линиях HET-SR и HET-SRl/shMDGl она практически не наблюдается;
7) Первичный скрининг опухолей человека различного гистогенеза в отношении активности человеческого гомолога гена shMDGl показал снижение его экспрессии в ряду норма-опухоль-метастаз при раке желудка.
Заключение.
Молекулярные шапероны являются типом клеточных белков, участвующих во всех клеточных процессах - от синтеза белка до дифференциации клетки. В настоящее время накопилось достаточно фактов, демонстрирующих вовлеченность шаперонов в процессы канцерогенеза и метастазирования. Шапероны препятствуют запуску программ ы клеточной смерти и способствуют проведению митогенного сигнала. Повышенная экспрессия отдельных представителей классов Hsp70, Hsp90 наблюдается во многих типах опухолей. Более того, такие опухолевые клетки становятся резистентными к хемотерапевтическим лекарствам.
Перспективным направлением в данной области является изучение механизма подавления опухолевыми клетками апоптотической программы в результате индукции деградации ЭПР белков (ERAD).
Нами впервые выделен и охарактеризован представитель генов дифференцировки эндотелия хомячка - shMDGl, относящийся к семейству молекулярных шаперонов Hsp40, локализованных в эндоплазматичсском ретикулуме. Двумя независимыми методами (Нозерн-блот гибридизация, RT-PCR) мы показали, что экспрессия гена shMDGl повышена в пизкометастатичсской клеточной линии HET-SR по сравнению с высокометастатической линией HET-SR1. Более того, экзогенная экспрессия данного гена в изучаемых клеточных линиях HET-SR и HET-SR1 снижает их метастатический потенциал при внутривенном и подкожном введении сингенным животным.
Кроме того, в данной работе была предпринята попытка ДНК-вакцинации с использованием плазмидной конструкции, несущей ген shMDGl. Данный эксперимент является незавершенным, и многое остается невыясненным, однако полученные результаты о снижении метастазирования в легких подопытных животных, на наш взгляд, свидетельствуют о целесообразности ведения дальнейшей разработки генотерапевтических подходов к лечению таких опухолей человека, как рак желудка. Это подтверждается проведенным нами первичным скринингом условно нормальных, опухолевых и метастатических тканей, взятых у пациентов, страдающих раком желудка.
Способность подавлять метастатическую активность является впервые охарактеризованным свойством не только для данного класса молекулярных шаперонов, но и для системы деградации белков эпдоплазматического ретикулума, в котором, по-видимому, участвует shMDGl.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2005 года, Исаченко, Надежда Александровна
1. Akalin A., Elmore L.W., Forsythe Н. L., Amaker В. A., McColIum E. D., Nelson P. S., Ware J. L., Holt S. E. (2001). A novel mechanism for chaperone-mediated telomerase during prostate cancer progression. Cancer Res. 61, 4791-4796.
2. Aldrian S., Trautinger F., Frohlich I., Berger W., Micksche M., Kindas-Mugge I. (2002). Overexpression of Hsp27 affects the metastatic phenotype of human melanoma cells in vitro. Cell Stress Chaperones 7, 177- 185.
3. Altmeyer A, Maki RG, Feldweg AM, Heike M, Protopopov V, Masur S, et al. (1996) Tumor-specific cell surface expression of the KDEL-contalning, endoplasmic reticular heat shock protein gp96. Int J Cancer 69:340-9.
4. Beere HM, Green DR (2001) Stress management heat shock protein-70 and the regulation of apoptosis. Trends Cell Biol. Jan. 11(1): 6-10.
5. Berger B.J.; Muller T.S.; Buschmann I.R.; Peters K.; Kirsch M.; Christ В.; Prols F. (2003) High levels of the molecular chaperone Mdgl/ERdj4 reflect the activation state of endothelial cells. Exp Cell Res, 290,1,82-96
6. Bernards R.; Weinberg R. A. (2002) A progression puzzle. Nature, 418, 823.
7. Bies C., Guth S., Janoschek K., Nastainczyk W., Volkmer J., Zimmermann R. (1999) A Scjlp homolog and folding catalysts present in dog pancreas microsomes. Biol. Chem. 380, 1175-1182
8. Brightman S. E., Blatch, G. L., and Zetter B. R. (1995) Isolation of a mouse cDNA encoding MTJ1, a new murine member of the DnaJ family of proteins. Gene (Amst.) 153, 249-254
9. Buckhaults P.; Chen L.; Fregien, N.; Pierce M., (1997), Transcriptional regulation of N-acetylglucosaminyltransferase V by the src oncogene, J Biol Chem, 272, 19575-19581.
10. Bukau В., Horwich A.L. (1998) The Hsp70 and Hsp60 chaperone machines. Cell 92, 351-366
11. Cantley L.C., and Neel B.G. (1999). New insights into tumor suppression: PTEN suppresses tumor formation by restraining the phosphoinositide 3-kinase/AKT pathway. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96, 4240^1245.
12. Caplan A.J. (1999). Hsp90's secrets unfold: new insights from structural and functional studies. Trends Cell Biol 9, 262- 268.
13. Cardozo C., Michaud C., Ost M., Fliss A., Yang E., Patterson C., Hall, S., Caplan A. (2003). C-terminal Hsp-interacting protein slows androgen receptor synthesis and reduces its rate of degradation. Arch Biochem Biophys 410, 134- 140.
14. Cavallaro U., Christofori G. (2004) Cell adhesion and signaling by cadherins and IG-CAMS in cancer. Nat Rev Cancer 4, 118-132.
15. Charette SJ, Landry J. (2000) The interaction of HSP27 with Daxx identifies a potential regulatory role of HSP27 in Fas-induced apoptosis. Ann N YAcad Sci. 926:126-31
16. Chavany C, Mimnaugh E, Miller P et a!. (1996) pl85cerbB2 binds to GRP94 in vivo. JBC. 271,4974.
17. Coussens L., Werb Z. (2002) Inflammation and cancer. Nature, 420, 860-866.
18. Csermcly P., Schnaider Т., Soti C., Prohaszka Z., Nardai G. (1998) Pharmacol. Ther., 79, 129-168.
19. Csermely P. (2001). Chaperone overload as a possible contributor to civilization diseases. Trends Genet 17, 701- 704.
20. Cutress R., Townsend P., Brimmell M., Bateman A., Hague, A., Packham G. (2002). BAG-1 expression and function in human cancer. Br J Cancer 87, 834- 839.
21. Davis RJ (1994) MAPKs: New JNK Expands the Group. TIBS 19, 470.
22. Dc Maio A (1999) Heat shock proteins. Facts, Thoughts Dreams. Shock 11, 1.
23. Dennis J.W.; Laferte, S.; Waghorne C.; Breitman M.; Kerbel, R.S. (1987) Beta 1-6 branching of Asn-linked oligosaccharides is directly associated with metastasis. Science, 236, 582-585.
24. Donze, O., Abbas-Terki, Т., Picard, D. (2001). The Hsp90 chaperone complex is both a facilitator and a repressor of the dsRNA-dependent kinase PKR. EMBO 20, 3771- 3780.
25. Downward J. (1998). Mechanisms and consequences of activation of protein kinase B/Akt. Curr. Opin. Cell Biol. 10, 262-267.
26. Dyson N., Howley P.M., Munger K., Harlow E. (1989). The human papillomavirus-16 E7 oncoprotein is able to bind to the retinoblastoma gene product. Science 243, 934-937.
27. Ellgaard L„ Helenius A. (2003) Quality control in the ER, Nat Rev Mol Cell Biol 4, 181191.
28. Eustace В., Jay D. (2004) Extracellular Roles for the Molecular Chaperone, hsp90. Cell Cycle. 14; 3(9).
29. Evan G., Littlewood T. (1998). A matter of life and cell death. Science 281, 1317-1322.
30. Fang S.; Lorick K. L.; Jensen JP.; Weissman A. M. (2003) RING finger ubiquitin protein Iigases: implications for tumorigenesis, metastasis and for molecular targets in cancer, Semin Cancer Biol, 13, 5-14.
31. Fedi P., Tronick S.R., Aaronson S.A. (1997). Growth factors. In Cancer Medicine, pp. 41-64.
32. Ferrarini M, Heltai S, Zocchi MR, Rugarii C. (1992) Unusual expression and localization of heat-shock proteins in human tumor cells. Int J Cancer, 51: 613-9.
33. Fewell SW, Travers KJ, Weissman JS, Brodsky JL. (2001) The action of molecular chaperones in the early secretory pathway. Annu Rev Genet-, 35: 149-191.
34. Friedlander R, Jarosch E, Urban J, Volkwein C, Sommer T. A regulatory link between ER-associated protein degradation and the unfoldedprotein response. (2000) Nat Cell Biol; 2: 379-384.
35. Fink A. L. (1999). Chaperone-mediated protein folding. Phys.Rev. 79, 425-449.
36. Finlay C., Hinds P., Tan Т., Eliyahu D, Oren M, Levine A. (1988) Activating mutations for transformation by p53 produce a gene product that forms an HSC70-p53 complex with an altered halfe-life. Mol. Cell. Biol. 8, 531.
37. Frisch, S.M. (1999). Evidence for a function of death-receptor-related, death-domain-containing proteins in anoikis. CurrBiol 9, 1047-1049.
38. Frydman J., Hohfeld J. (1997). Chaperones get in touch: the Hip-Hop connection. Trends Biochem Sci 22, 87- 92.
39. Foley K.P., and Eisenman R.N. (1999). Two MAD tails: what the recent knockouts of Madl and Mxl tell us about the MYC/MAX/ MAD network. Biochim. Biophys. Acta 1423, 37-47.
40. Fujita Y., Krause G, Scheffner M, Zechner D, Leddy HE, Behrens J, Sommer T, Birchmeier W. (2002) Hakai, a c-Cbl-like protein, ubiquitinates and induces endocytosis of the E-cadherin complex. Nature Cell Biol. 4, 222-231.
41. Funasaka T, Haga A, Raz A, Nagase H. (2001) Tumor autocrine motility factor is an angiogenic factor that stimulates endothelial cell motility. Biochem Biophys Res Commun, 285: 118-28.
42. Gabai VL, Mabuchi K, Mosser DD, Sherman MY, (2002) Hsp72 and stress kinase c-jun N-terminal kinase regulate the bid-dependent pathway in tumor necrosis factor-induced apoptosis. Mol Cell Biol.-, 22 (10): 3415-24.
43. Gardner R. G., Swarbrick G. M., Bays N. W., Cronin S. R., Wilhovsky S., Seelig L., Kim C. Hampton R. Y. (2000) Endoplasmic reticulum degradation requires lumen to cytosol signaling. Transmembrane control ofHrdlp by Hrd3p. J. Cell Biol. 151, 69-82.
44. Garrido C., Fromentin A., Bonnotte В., Favre N., Moutet M., Arrigo A., Mehlen P., Solary E. (1998). Heat shock protein 27 enhances the tumorigenicity of immunogenic rat colon carcinoma cells. Cancer Res 58, 5495- 5499.
45. Gildea J., Seraj M., Oxford G., Harding M., Hampton G., Moskaluk C., Frierson H., Mark R. Conaway, and Dan Theodorescu (2002) RhoGDI2 Is an Invasion and Metastasis Suppressor Gene in Human Cancer, Cancer Research 62, 6418-6423.
46. Guo, H. В.; Lee, I.; Kamar, M.; Pierce, M. (2003) N-acetylglucosaminyltransferase V expression levels regulate cadherin-associated homotypic cell-cell adhesion and intracellular signaling pathways JBC, 52, 52412-52424.
47. Gupta S, Knowlton AA. (2005) HSP60, Bax, apoptosis and the heart J Cell Mol Med.; 9(1): 51-8.
48. Haigh NG, Johnson AE. (2002) A new role for BiP: closing the aqueous translocon pore during protein integration into the ER membrane. J Cell Biol; 156: 261-270.
49. Hanahan D., Weinberg R.A. (2000) The hallmarks of cancer. Cell, 10, 57-70.
50. Halevy O, Michalovitz D, Oren M (1990) Different tumor-derived p53 mutants exhibit distinct biological activities. Science 250, 113.
51. Harding H.; Calfon M.; Urano F.; Novoa I.; Ron D., (2002) Transcriptional and translational control in mammalian unfolded protein response Annu Rev Cell Dev Biol 18: 575-99.
52. Hayflick L. (1965) The limited in vitro lifetime of human diploid cell strains. Exp. Cell Res., 37, 614-636.
53. Hershko A., Ciechanover, A. (1998) The ubiquitin system. Annu. Rev. Biochem. 67, 425479.
54. Hettinga JV, Lemstra W, Meijer C, Los G, de Vries EG, Konings AW and Kampinga HH. (1996). Heat-shock protein expression in cisplatin-sensitive and -resistant human tumor cells Int. J. Cancer, 67, 800-807.
55. Holt S.E., Aisner D.L., Baur J., Tesmer V.M., Dy M., Ouellette M., Trager J.B., Morin G.B., Toft D., Shay J.W., Wright W.E., White M. A. (1999). Functional requirement of p23 and Hsp90 in telomerase complexes. Genes Dev 13, 817-826.
56. Hohfeld J. (1998). Regulation of the heat shock conjugate Hsc70 in the mammalian cell: the characterization of the anti-apoptotic protein BAG-1 provides novel insights. Biol Chem 379, 269-274.
57. Hynes R.O. (2003) Metastatic Potential: Generic Predisposition of the Primary Tumor or Rare, Metastatic Variants Or Both? Cell, 113, 821-823.
58. Jeon E, Kim HD, Kim JS (2003) Pluronic-graftcd poly-(L)-lysine as a new synthetic gene carrier.JBiomedMaterRes. 15; 66(4):854-9.
59. Johnson J., Corbisier R., Stensgard В., Toft D. (1996). The involvement of p23, hsp90, and immunophilins in the assembly of progesterone receptor complexes. J Steroid Biochem Mol Biol 56, 31-37.
60. Jolly C.J, Morimoto R.I. (2000). Role of the heat shock response and molecular chaperones in oncogenesis and cell death. J Natl Cancer Res Inst 92, 1564— 1572.
61. Kang Y., Siegel PM, Shu W, Drobnjak M, Kakonen SM, Cordon-Cardo C, Guise ТА, Massague J. (2003). A multigenic program mediating breast cancer metastasis. Cancer Cell 3, 537-549.
62. Kang Y., Siegel P., Shu W., Drobnjak M., Kakonen S., Cordon-Cardo C., Guise Т., Massague J. (2003). Cancer stromal cells interact and influence one another Cell 3, 537549.
63. Kaufman R. (2002) Orchestrating the unfolded protein response in health and disease J. Clin. Invest. 110: 1389-1398.
64. Kelley WL (1998) The J-domain family and the recruitment of chaperone power Trends Biochem Sci. 23(6):222-7.
65. Kerr J.F., Wyllie A.H., Currie A.R. (1972). Apoptosis: a basic biological phenomenon with wide-ranging implications in tissue kinetics. Br. J. Cancer 26, 239-257.
66. Kinzler KW., Vogelstein B. (1996). Lessons from hereditary colorectal cancer. Cell 87, 159-170.
67. Kurisu J., Honma A., Miyajima H., Kondo S., Okumura M., Imaizumi K., (2003) MDGl/ERdj4, an ER-resident DnaJ family member, suppresses cell death induced by ER-stress, Genes Cells 8 189-202.
68. Lee Ann-Hwee, Iwakoshi NN., Glimcher, LH., (2003), XBP-1 regulates a subset of endoplasmic reticulum resident chaperone genes in the Unfolded Protein Response. MCB, 23, 7448-7459.
69. Levine AJ. (1997) p53, The cellular gatekeeper for growth and division. Cell; 88: 323-31.
70. Lorick KL, Jensen JP, Fang S, Ong AM, Hatakeyama S, Weissman AM. (1999) RING fingers mediate ubiquitin-conjugating enzyme (E2)-dependent ubiquitination. PNAS; 96: 11364-9.
71. MacRae Т.Н. (2000) Structure and function of small heat shock/alpha-crystal Iin proteins: established concepts and emerging ideas. Cell Mol. Life Sci., 57, 899-913.
72. Manjili M, Wang X, MacDonald I, Arnouk H, Yang G, Pritchard M, Subjeck JR. (2004) Cancer immunotherapy and heat-shock proteins: promises and challenges. Expert Opin Biol 77?e/\;4(3):363-73.
73. Malumbres M, Barbacid M. (2003) RAS oncogenes: the first 30 years. Nat Rev Cancer. 3(6):459-65.
74. Molinari M, Helenius A. (2000) Chaperone selection during glycoprotein translocation into the endoplasmic reticulum. Science; 288: 331-333.
75. Morimoto, R. I. (2002). Dynamic remodeling of transcription complexes by molecular chaperones. Cell 110, 281-284.
76. Murakami Y, Fukazawa H, Mizuno S, Uehara Y (1994) Conversion of epidermal growth factor (EGF) into a stimulatory ligand for A431-cell growth by herbimycin A by decreasing the level of expression of EGF receptor. Biochem. J. 301, 57.
77. Multhott G, Hightower LE. (1996) Cell surface expression of heat shock protein: and the immune response. Cell Stress Chaperones; 1: 167-76.
78. Multhoff 0, Botzler C, Wiesnet M, Muller E, Meier T, Wilmanns W. (1995) A stress-inducible 72-kDa heat-shock protein (HSP72) is expressed on the surface of human tumor cells, but not on normal cells. Int J Cancer, 61: 272-9.
79. Nabi, IR., Raz, A. (1987) Cell shape modulation alters glycosylation of a metastatic melanoma cell-surface antigen Int. J. Cancer 40, 396-402.
80. Nabi, I. R., Watanabe, H., Silletti, S., Raz, A. (1991) Tumor cell autocrine motility factor receptor. EXS 59, 163-177.
81. Nawrocki-Raby, В., Gilles C, Polette M, Bruyneel E, Laronze JY, Bonnet N, Foidart JM, Mareel M, Birembaut P. (2003) Upregulation of MMPs by soluble E-cadherin in human lung tumor cells. Int. J. Cancer 105, 790-795.
82. Netzer, W.J., Hartl, F.U. (1998) Protein folding in the cytosol: chaperonin-dependent and -independent mechanisms. Trends Biochem. Sci., 23, 68-73.
83. Nollen E., Morimoto R.I. (2002) Chaperoning signaling pathways: molecular chaperones as stress-sensing 'heat shock' proteins. Journal of Cell Science 115(14) 2809-2816
84. Oda Y, Hosokawa N, Wada I, Nagata K. (2003). EDEM as an acceptor of terminally misfolded glycoproteins released from calnexin. Science, 299: 1394-1397.
85. Oki Y, Youncs A. (2004) Heat shock protein-based cancer vaccines. Expert Rev Vaccines. 3(4):403-ll.
86. Piatelli M. J., Doughty C., Chiles Т. C. (2002). Requirement for a hsp90 chaperone-dependent MEK1/2-ERK pathway for В cell antigen receptor-induced cyclin D2 expression in mature В lymphocytes. J Biol Chem 277, 12144- 12150.
87. Plemper R, Bohmler S, Bordallo J, Sommer T, Wolf D. (1997) Mutant analysis links the translocon and BiP to retrograde protein transport for ER degradation. Nature; 388: 891895.
88. Polanowska-Grabowska R., Gear, AR. (2000). Heat-shock proteins and platelet function. Platelets 11, 16-22.
89. Pratt WB., Toft DO. (2003). Regulation of signaling protein function and trafficking by the hsp90/hsp70-based chaperone machinery. Exp BiolMed 22S, 111- 133.
90. Przepiorka D., Srivastava P.K. (1998) Heat shock protein peptide complexes as immunotherapy for human cancer. Molecular Medicine Today, 4: 478-484.
91. Prols F., M.P. Mayer, O. Renner, P.G. Czarnecki, M. Ast, C. Gassier, J. Wilting, H. Kurz, B. Christ, (2001) Upregulation of the cochaperone Mdgl in endothelial cells in induced by stress and during in vitro angiogenesis, Exp. Cell Res. 269, 42-53.
92. Prols F.; Liehr Т.; Rinke R.; Rautenstrauss B. (1997) Assignment of the microvascular endothelial differentiation gene 1 (MDG1) to human chromosome band 14q24.2—>q24.3 by fluorescence in situ hybridization. Cytogenet Cell Genet, 19, 149-150.
93. Ran R, Lu A, Zhang L, Tang Y, Zhu H, Xu H, Feng Y, Han C, Zhou G, Rigby AC, Sharp FR. (2004) Hsp70 promotes TNF-mediated apoptosis by binding IKK gamma and impairing NF-kappa В survival signaling Genes Dev. 15;18(12):1466-81.
94. Ren J., Li Z., Qi Chen, Lin Z., Hongguang Zhu (2004) Co-administration of a DNA vaccine encoding the prostate specific membrane antigen and CpG oligodeoxynucleotides suppresses tumor growth, J Translational Medicine, 7, 104-109.
95. Ritossa F. (1962) A new puffing pattern Induced by temperature shock and DNP in Drosophila. Experientia; 18: 571-3.
96. Ribatti D. (2005) The crucial role of vascular permeability factor/vascular endothelial growth factor in angiogenesis: a historical review Br J Haematol.-, 128(3): 303-9.
97. Riera M, Chillon M, Aran JM, Cruzado JM, Torras J, Grinyo JM, Fillat С (2004) Intramuscular SP1017-formuIated DNA electrotransfer enhances transgene expression and distributes hHGF to different rat tissues J Gene Med.; 6(1):111-8.
98. Sakahira H., Nagata S. (2002). Co-translational folding of caspaseactivated DNase with Hsp70, Hsp40, and inhibitor of caspaseactivated DNase. J Biol Chem 277, 3364-3370.
99. Samali A, Cai J, Zhivotovsky B, Jones DP, Orrenius S (1999) Presence of a pre-apoptotic complex of pro-caspase-3, Hsp60 and HsplO in the mitochondrial fraction of jurkat cells. EMBO. 15;18(8):2040-8.
100. Samali A., Orrenius S. (1998). Heat shock proteins: regulators of stress response and apoptosis. Cell Stress Chaperones 3, 228-236.
101. Schmitt, С. A. (2003) Senescence, apoptosis and therapy cutting the lifelines of cancer. Nat Rev Cencer, 3, 286-295.
102. Schnaider Т., Oikarinen J., Ishiwatari-Hayasaka II., Yahara, I., Csermely P. (1999). Interactions of Hsp90 with histones and related peptides. Life Sci 65, 2417-2426.
103. Serrano M., Lin A., McCurrach M., Beach D., Lowe S.W. (1997). Oncogeneic ras provokes premature cell senescence associated with accumulation of p53 and pl6INK4A. Cell 88, 593-602.
104. Soti Cs., Csermely P. (1998). Molecular chaperones in the etiology and therapy of cancer. Pathol Oncol Res 4, 316- 321.
105. Shen Y., Meunier L., Hendershot L.M., (2002) Identification and characterization of a novel endoplasmic reticulum (ER) DnaJ homologue, which stimulates ATPase activity of BiP in vitro and is induced by ER stress, J. Biol. Chem. 277, 15947-15956.
106. Fang S., Ferrone M., Yang C., Jensen J., Tiwari S., Weissman AM. (2001). The tumor autocrine motility factor receptor, gp78, is a ubiquitin protein ligase implicated in degradation from the endoplasmic reticulum. PNAS, 98; 14422-14427.
107. Shevde L.A., Welch D.R., (2003) Metastasis suppressor pathways an evolving paradigm, Cancer Letters 198, 1-20.
108. Silberstein S, Schlenstedt G, Silver PA, Gilmore R. (1998) A role for the DnaJ homologue Scjlp in protein folding in the yeast endoplasmic reticulum. J Cell Biol. 16; 143(4):921-33.
109. Skowronek MH., Rotter M., Haas IG. (1999) Molecular characterization of a novel mammalian DnaJ-like Sec63p homolog. Biol. Chem. 380, 1133-1138.
110. Stceg P.S. (2003) Metastasis suppressors alter the signal transduction of cancer cells, Nat. Rev. Cancer, 3, 55-63.
111. Syken J, De-Medina T, Munger K. (1999) TID1, a human homolog of the Drosophila tumor suppressor l(2)tid, encodes two mitochondrial modulators of apoptosis with opposing functions Proe. Natl. Acad. Sci. USA, 96, 8499-8504.
112. Stevenson F., Ottensmeier C., Johnson P, Zhu D, Buchan SL, McCann K., Roddick J., King T, McNicholl F, Savelyeva N, Rice J. (2004) DNA vaccines to attack cancer. PNAS, 2:14646-52.
113. Takayama S., Sato Т., Krajewski S., Kochel K., Irie S., Millan J. A., Reed J. C. (1995). Cloning and functional analysis of BAG-1: a novel Bcl-2 binding protein with anti-cell death activity. Cell, 80, 279-284.
114. Suto R, Srivastava PK. (1995) A mechanism for the specific immunogenicity of heat shock protein-chaperoned peptides. Science, 269:1585-8.
115. Tamura Y, Peng P, Liu K, Daou M, Srivastava PK. (1997) Immunotherapy of tumors with autologous tumor-derived heat shock protein preparations. Science: 278: 117-20.
116. Tavoloni N., Inoue H. (1997) Cellular aging is a critical determinant of primary cell resistance to v-src transformation, J Virology, 71, 237-247.
117. Thorstensen L, Qvist H, Nesland JM, Giercksky KE, Lothe RA. (2001) Identification of two potential suppressor gene regions on chromosome arm 14q that are commonly lost in advanced colorectal carcinomas. Scand J Gastroenterol., 36(12): 1327-31.
118. Udono H, Srivastava PK. (1994) Comparison of tumor-specific immunogenicities of stress-induced proteins gp96, hsp90, and hsp70. J Immunol', 152: 5398-403.
119. Ungewickell. E. Ungewickell H, Holstein SE. (1997) Functional interaction of the auxilin J domain with the nucleotide- and substrate-binding modules of Hsc70. J Biol Chem. 1; 272(31): 19594-600.
120. Wadhwa R, Taira K, Kaul S (2002) Ah Hsp70 family chaperone, mortalin/mthsp70/PBP74/Grp75: what, when, and where? Cell Stress Chaperones 7, 309-316.
121. Weinberg R. (1995). The retinoblastoma protein and cell cycle control. Cell 81, 323-330.
122. Whitesell L, Sutphin PD, Pulcini EJ, Martinez JD, Cook PH (1998) The physical association of multiple molecular chaperone proteins with mutant p53 is altered by geldanamycin, a HSP90-binding agent. Mol. Cell. Biol. 18, 1517.
123. Xie Q, Khaoustov VI, Chung CC, Sohn J, Krishnan B, Lewis DE, Yoffe В (2002) Effect of tauroursodeoxycholic acid on endoplasmic reticulum stress-induced caspase-12 activation. Hepatology. 36(3): 592-601.
124. Xu Y, Singer MA, Lindquist S (1999) Maturation of the tyrosine kinase c-Src as a kinase and as a substrate depends on the molecular chaperone HSP90. PNAS USA 96, 109.
125. Yarden Y., Ullrich A. (1988). EGF and erbB2 receptor overexpression in human tumors. Growth factor recepor tyrosine kinases. Annu. Rev. Biochem. 57, 443-478.
126. Yeatman TY. (2004) A Renaissance for src, Nat Rev Cancer 4, 470-480.
127. Young RA, Elliott TJ. (1989) Stress proteins, infection, and immune surveillance. Cell; 59: 5-8.
128. Young D, Roman E, Moreno C, O'Brien R, Born W. (1993) Molecular chaperones and the immune response. Philos Trans R Soc Loud В Biol Sci; 339: 363-7.
129. Zhang X, Li J, Sejas DP, Rathbun KR, Bagby GC, Pang Q. (2004) The Fanconi anemia proteins functionally interact with the protein kinase regulated by RNA (PKR). J Biol Chem. 279(42): 43910-9.
130. Zhang W, Hirshberg M, McLaughlin SH, Lazar GA, Grossmann JG, Nielsen PR, Sobott F, Robinson CV, Jackson SE, Laue ED. (2004) Biochemical and structural studies of the interaction of Cdc37 with Hsp90. J Mol Biol. 16; 340(4): 891-907.