Автореферат и диссертация по медицине (14.00.11) на тему:Состояние свободнорадикальных процессов у больных сифилисом

На правах рукописи

БЖАХОВА Фатима Каральбиевна

СОСТОЯНИЕ СВОБОД«ОРАДИКАЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ У БОЛЬНЫХ

СИФИЛИСОМ

14.00.11- кожные и венерические болезни

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Санкт-Петербург 2008

149

003459149

Работа выполнена в ГОУ ВПО «Кабардино-Балкарский государственный университет им. Х.М. Бербекова» Федерального агентства по образованию

Научный руководитель:

доктор медицинских наук профессор Нагоев Беслаи Сафарбиевич

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук профессор Сухарев Алексей Владимирович доктор медицинских наук профессор Королькова Татьяна Николаевна

Ведущая организация: ГОУ ВПО «Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. академика И.П. Павлова»

Защита состоится » 2009 года в_часов на заседании совета по защите

докторских и кандидатских диссертаций Д 215.002.01 при Военно-медицинской академии имени С.М. Кирова (194044, Санкт-Петербург, ул. Академика Лебедева, д. 6)

С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке Военно-медицинской академии имени С.М. Кирова

Автореферат разослан « / » декабря 2008 года

Ученый секретарь совега доктор медицинских на™;/профессор Пономаренко Геннадш-НШсолаевич

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность исследования. Проблема лечения сифилиса до сих пор остается одной из главных задач венерологов многих стран (Goh В.Т. et al., 2001; Rubins S.A. et al., 2000; Потекасв H.C., Потекаев C.H., 2002), не толькэ из-за высокой конгтагиозности заболевания, но и по той причине, что, прогрессируя, болезнь может привести к инвалидности и даже летальному исходу, инфекция может передаваться также ребенку от матери транспланцетарно (Rubins S.A. et al., 1995; Tikhonova L.T. et al., 2003). В течение последних десятилетий наблюдается рост заболеваемости сифилисом, связанный с медико-социальными и социально-экономическими факторами. Среди инфекций передающихся половым путем (ИППП) сифилис и гонорея составили 86% (Брико Н.И. с соавт., 1999). Социальные, медицинские, демографические факторы (половая распущенность молодежи, безработица, алкоголизм, наркомания, миграция населения), низкий уровень сексуального и общественного образования способствуют росту числа больных ИППП (Адаскевич В .П., 1999; Рубине С.А. с'соавт., 2004).

Участились случаи скрытого с ифилиса, отмечается рост заболеваемости сифилисом среди детей (Скрипкин Ю.К. с соавт., 1999). В последние годы увеличилась частота поздних форм сифилиса, в том числе латентного (Прохоренкова В .И., 2002; Потекаев U.C. с соавт., 2003).

Сифилис является весьма тяжелым заболеванием из-за полисистемности проявления болезни. Установлено, что ИППП, в том числе и сифилис, являются биологическими кофакторами, способствующими передаче ВИЧ - инфекции «эпидемический синергизм» (Скрипкин Ю.К., 2001). Сифилис сопровождается закономерными реакциями со стороны макроорганизма, что характеризует стадийное течение классического сифилиса. Важным компонентом патогенности бледной трспоне.мы является способность микроорганизма прикрепляться к клеткам макроорганизма. При размножении их в периваскулярной зоне мукополисахаридаза трепонемы разрушает мукоидное вещество вокруг сосудов, что вызывает спадение их стенок с последующим тромбозом и формированием эндо- и периартериитов, некроза и изъязвления тканей (Кубанова А .А. с соавт., 2005).

Актуальность изучения процессов, происходящих в организме при сифилисе, обусловлена не только широким распространением инфекции, но и влиянием ее последствий на репродуктивное здоровье нации в целом, а также социальной значимостью результатов проведенных исследований в группах риска (Ротаиэв C.B., Фриго Н.В., 2007).

В последние годы возрос интгрес к исследованиям свободнорадикального перекисного окисления липидов (ПОЛ), как механизма играющего большую роль в патогенезе многих заболеваний. Все клетки живого организма обладают способностью к генерации активных форм кислорода, и, поэтому, развитие окислительного стресса возможно в любых органах' и тканях. В нормальных условиях жизнедеятельности при функционировании живых систем в условиях физиологического оптимума существует про- и антиоксидантное равновесие, которое является важнейшим механизмом окислительного гомеостаза. Нарушение стационарного состояния свободнорадикального окисления (СРО) на фоне угнетения антиоксидантной системы (АОС) является механизмом развития многих патологических состояний (Владимиров Ю.А., 1998; Нагоев B.C., Иванова М.Р., 2002; Нагоев Б.С., Маржохова М.Ю., 2003, 2004; Gutteridge J.M.C., Halliwell B.C., 2000).

Для диагностики патологии свободнорадикальных процессов и оценки эффекшвности проводимого лечения принято определять в плазме крови и эритроцитах содержание продуктов радикалообразования, а также показателей ангаоксидатной защиы организма (Маржохова М.Ю., Иванова М.Р., 2002). При достаточно высоком содержании антиоксидантов в организме образуется лишь небольшое количество продуктов СРО, участвующих в регуляции многих физиологических процессов. Уменьшение же содержания антиоксидантов в тканях приводит к тому, что продукты свободнорадикальных процессов начинают производить вместо физиологического патологический эффект. Коррекция нарушений процессов радикалообразования может предотвратить развитие патологического процесса или облегчить его течение (Хараева З.Ф., 2002; Нагоев Б.С., Иванова М.Р., 2003; Bast А.Т. et al., 1991).

Несмотря на имеющиеся достижения в изучении патогенеза сифилиса, неясна роль состояния системы ПОЛ при различных клинических формах сифилиса, тем более, что большинство рутинных серологических методов диагностики не всегда отвечают требованиям в

Л

\ У

силу своей неспецифичности (Иванов A.M., 2000). В литературе, отсутствуют сведения о механизме ПОЛ у больных сифилисом. Отсутствуют данные о влиянии суперинфекции на состояние ПОЛ в сопоставлении с клинической картиной заболевания. Поэтому, изучение прооксидантной и антиоксидантноЙ систем при сифилисе представляет несомненный интерес в плане углубления представления о патогенезе этого заболевания, улучшения его диагностики и определения схем рациональной и адекватной терапии.

Цель работы. Исследовать состояние прооксидантной и антиоксидантноЙ систем у больных сифилисом в зависимости от клинической стадии заболевания, наличия осложнений твердого шанкра и сопутствующих инфекций передаваемых половым путем.

Задачи исследования:

1. Изучить уровень активности перекисного окисления линидов по изменению уровня малонового диальдегида в плазме крови у больных сифилисом.

2. Оценить у больных сифилисом состояние свободнорадикальных процессов по уровню активности пероксидазных систем нейтрофильных лейкоцитов путем проведения спонтанного НСТ-теста.

3. Исследовать динамику уровня церулоплазмина у больных сифилисом в зависимости от клинической стадии, осложнений твердого шанкра, а также от наличия сопутствующих ИППП.

4. Изучить активность каталазы эршроцигов в динамике заболевания у больных с различными клиническими формами сифилиса.

5. Провести оценку информативности динамики показателей ПОЛ (малонового диальдегида, церулоплазмина и каталазы) и НСТ-теста путем сопоставления с маркерами системного восполительного процесса (количеством лейкоцитов, палочкоядерным сдвигом, СОЭ).

Научная новизна. Проведено динамическое комплексное исследование показателей прооксидантной и антиоксидантноЙ систем крови больных с различными клиническими формами сифилиса. Установлены особенности изменений показателей прооксидантной и антиоксидантноЙ систем крови в зависимости от клинической стадии заболевания, наличия осложнений твердого шанкра и сопутствующих инфекций передающихся половым путем.

У ■больных различными клиническими формами сифилиса обнаружена активация процессов свободнорадикалыюго окисления, выражающаяся в возрастании уровня малонового диальдегида (МДА) в плазме и тетразолиевой активности гранулоцитов (НСТ-тест) на фоне истощения антиоксидантноЙ защиты организма, отражающегося в угнетении церулоплазмина (ЦП) плазмы и каталазы эритроцитов (КЭ).

У больных со скрытым ранним сифилисом установлено умеренное повышение уровня МДА и ^ тетразолиевой активности гранулоцитов на фоне незначительного снижения уровня церулоплазмина и

каталазы эритроцитов с постепенной нормализацией данных показателей по окончании специфической терапии, а у больных с активными проявлениями сифилиса отмечаются выраженное увеличение показателей прооксидантной системы крови и показателей НСТ-теста.

Выявлены более выраженные изменения показателей ПОЛ у больных сифилисом с сопутствующими ИППП и осложнениями твердого шанкра.

Установлено, что у больных сифилисом выраженные изменения изученных показателей системы ПОЛ, могут указывать на возможный неблагополучный прогноз заболевания (развитие серорезистентных форм сифилиса).

Практическая значимость работы. Определение уровня малонового диальдегида и активности НСТ-теста может быть использовано для определения глубины патологического процесса у больных сифилисом.

Показано, что выраженные изменения антиоксидантноЙ защиты организма, проявляющиеся в угнетении уровня церулоплазмина плазмы и каталазы эритроцитов могут свидетельствовать о развитии серорезистентных форм сифилиса.

Выявленные закономерности изменений показателей свободнорадикального окисления липидов могут быть использованы в качестве дополнительных критериев для диагностики тяжести

патологического процесса и о развитии серорезистснгных форм сифилиса, и могут служить дополнением к общепринятым методам исследования.

Личное участие автора в получении результатов. Автор осуществил планирование исследования, выполнил весь объем клинико-биохимических исследований на различных стадиях заболевания. Автором лично сформирована база да иных, проведены статистическая обработка и обобщение полученных данных.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. У больных различными формами сифилиса происходит повышение активности ПОЛ (повышение уровня МДА) и повышение активности НСТ-теста, зависящее от клинической стадии, наличия осложнений твердого шанкра и сопутствующих заболеваний передающихся половым путем.

2. У больных сифилисом происходят изменения метаболической активности пейтрофильных гранулоцитов, что проявляется усилением тетразолиевой активности.

3. Комплексное определение уровней показателей перекисного окисления и метаболической активности лейкоцитов у больных сифилисом является эффективным и доступным способом оценки формы течения, глубины патологического процесса, а также для прогнозирования серорезистентных форм сифилиса.

Реализация и внедрение результатов исследования. Работа выполнена в рамках комплексного плана научных исследований Кабардино-Балкарского госуниверситета по программе «Университеты России», «Фундаментальные исследования» по проблеме «Состояние прооксидантной и антиоксидантной систем организма при инфекционных заболеваниях различной этиологии» (Государственная регистрация во ВНТИ - центре 012005001782). Материалы диссертационной работы внедрены в практику работы Республиканского кожно-венерологического диспансера МЗ КБР.И используются в учебном процессе на кафедрах дерматовенерологии, инфекционных болезней, микробиологии и иммунологии Кабардино-Балкарского госуниверситета.

Апробации диссертационного материала. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на: ежегодных итоговых конференциях сотрудников Кабардино-Балкарского госуниверситета (г. Нальчик, 2004-2007), заседаниях научной ассоциации инфекционистов КБР и Кабардино-Балкарского филиала научного общества дерматовенерологов (г. Нальчик, 20042007), на научно-практических конференциях «Достижение медицинской науки -практическому здравоохранению (г. Нальчик, 2005-2007), Всероссийской научной конференции аспиратов и молодых ученых «Перспектива-2007» (г. Нальчик, 2007), X Всероссийской научно-практической конференции «Молодые ученые в медицине» (г. Казань, 2005), II Российской научной конференции «Приоритетные направления науки и техники» (г. Астрахань, 2005), УН съезде инфекционистов России (г. Н.Новгород, 2006), III международной научной конференции (т. Ксмер, 2007), Международном Евро-Азиатском Конгрессе по Инфекционным Болезням (г. Витебск, 2008), XII Российской научно-практической конференции (г. Махачкала, 2008). По материалам диссертационной работы опубликовано 15 научных работ, в том числе в журнале, рекомендуемом ВАК.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 149 страницах машинописного текста и содержит: введение, 4 главы, заключение, выводы, рекомендации и указатель литературы, включающий 172 отечественных и 58 иностранных авторов. Иллюстрации представлены 18 таблицами, 24 рисунками и 15 выписками из клинических наблюдений.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материал и методы исследовании Работа выполнена на базе ГУЗ козкно-веперологического диспансера МЗ КБР. Под наблюдением находилось 176 больных с различными формами сифилиса, находившихся на лечении в стационаре с 2004 по 2007 г. Из них с первичным сифилисом - 10 (5,6 %), вторичным свежим - 20 (11,3%), вторичным рецидивным - 44 (25%), скрытым ранним - 75 (42,6%), с серорезистентностью - 27 (15,3%) больных. Среди обследованных больных 97 (55,1%) женщин, и 79 (44,9%) мужчин от 16 до 73 лет. Основное количество больных сифилисом представлено возрастным диапазоном от 20 до 40 лет, что

соответствует возрастному пику сексуальной активности. Все 100% больных имели половой путь заражения. Случаев бытового инфицирования не зарегистрировано.

Диагноз сифилиса во всех случаях устанавливали на основании клинической картины и серологического обследования (КСР, РИФ-абс., РИФ-200, обнаружение бледной трепонемы в сифилидах). Другие инфекции передаваемые половым путем (ИППП), диагностировались методом бактериоскопии, культурально (гонорея, трнхомониаз). Больные сифилисом с сопутствующими ИППП и другими заболеваниями выделены в отдельную группу, составившую 73 человек.

15,3%

11,3% 5,6%

^скрытый ранний ^первичный Овторичный свежий ^вторичный рецидивный Исерорезисгентность

Рис. 1. Распределение больных в зависимости от клинической формы заболевания Особенности клинических проявлений и течения современного сифилиса не укладываются в классические каноны, и связаны с изменением иммунологической реактивности организма (Калугина О.Г., 2003). Среди особенностей современного течения сифилиса в литературе отмечается учащение случаев развития множественных твердых шанкров (от 2 до 20) у 30-60% больных, более частая регистрация язвенных, карликовых и гигантских твердых шанкров, осложненных в виде фимоза и парафимоза, экстрагенитальных первичных сифилом, отсутствие регионарного лимфаденита у 5-9% больных первичным сифилисом (Яговдик Н.З., с соавт., 1997; Хайдуков А.Ч., 2001). Полиорганная патология, обусловленная сифилисом, особенно без поражения кожи, при жизни больного может оказаться нераспознанной (Кулагин В.И., с соавт., 2001).

Частота клинических симптомов, выявленная у обследованных нами больных, представлена в табл.1

Для формулирования клинического диагноза пользовались общепринятой классификацией сифилиса, согласно которой первичный сифилис разделяли на серонегативный и серопозитивный периоды, вторичный сифилис - на свежий и рецидивный, а скрытый - (до 2 лет давности) и поздний (более 2 лет) (МКБ IX,X).

Таблица 1

Частота клинических симптомов у 'Зольных сифилисом__

Симптомы Сифилис I Сифилис II свежий Сифилис II рецидивный Абсолютные цифры %

Тв. шанкр генитальный 10 19 1 30 17

Индуративный отек. 1 - - 1 0,6

Осложненный тв. шанкр 3 3 4 10 5,7

Розеолезный сифилид 1 18 8 27 15,3

Папулезный сифилид - 1 37 38 21,6

Алопеция - - 2 2 1,1

Сифилитич. ангина - - 7 7 3,9

Регионарный аденит 9 9 3 21 11,9

Полиаденит 1 8 34 43 24,4

Реакция обострения 9 12 25 46 26,1

Итого обследовано 34 70 121 225 100

В литературе много раз приводились данные о сочетанных инфекциях урогенитального тракта. Заболевания, вызванные одним возбудителем (моноинфекция) в последнее время встречаются крайне редко (Кубанова АА., 2002). Отмеченный в последние годы значительный рост заболеваемости сифилисом в РФ повлек за собой и увеличение заболеваемости среди беременных. Многими авторами отмечается, что особенностями современного сифилиса является преобладание скрытых и рецидивных форм, малосимптомное течение инфекции у беременных (Борисенко К.К. ссоавт., 1990).

Из сопутствующих заболеваний передающихся половым путем у обследованной категории пациентов по частоте на первом месте стоит трихомониаз - 43 (24,4%) пациента, за ним следовали больные с гонореей - 1? (4,5%), урогенитальным кандидозом (УГК) - 2 (1,1%). Количество больных женщин с сопутствующей беременностью составили - 9 (5,1%), группа больных, с сопутствующими заболеваниями различной этиологии (гепатит С, чесотка, наркомания, хронический алкоголизм, псориаз, психические заболевания) составила 11 человек (6,2%).

Всем больным проводились дополнительные методы исследования. При традиционном клшшко-лабораторном исследовании периферической крови у 20 больных сифилисом (11,4%) выявлены умеренное повышение СОЭ (от 8 до 12 мм/ч), и умеренный лейкоцитоз (от 9 до 11-10'/л). Как правило, эти изменения наблюдались у больных с активными формами сифилиса, с сопутствующими заболеганиями и с осложнениями.

Специфическое лечение больных активными и скрытыми формами сифилиса проводилось водорастворимым пенициллином (бензилпенициллин-натрий) по 400 тыс. ЕД.,-каждые 3 часа, внутримышечно. На курс лечения больным первичным и вторичным свежим сифилисом 44,8 млн. ЕД. (14 дней), больным вторичным рецидивным, ранним скрытым сифилисом и серорезистентностью - 89,6 млн. ЕД." (28 дней). Серологический контроль излечениости проводили с применением стандартного КСР (РСК с трсполемным и кардиолипиновым антигенами, микрореакция преципитации с кардиолипиновым антигеном) в количественном варианте.

С целью решения поставленных задач использовался комплекс биохимических методов исследования состояния свободнорадикальных процессов и аптиоксидантной защиты организма. Состояние СРО оценивалось по уровяо малонового диальдегида в плазме крови по Ushiama M. (1978) в реакции с тиобарбитуровой кислотой. Изучение метаболической активности нейтрофилов проводилось в реакции поглощения и восстановления нитросинего тетразолия (НСТ- тест). Исследование спонтанного НСТ-теста проводили по методике Stuart J. с соавт. (1975) в модификации Нагоева Б.С. (1983). Количественную оценку цитохимических реакций проводили, основываясь на принципах Kaplow L.S. (1955) и выражали показатели в условных единицах (усл. ед.). Определение уровня церулогшазмина в плазме 1фови проводилось методом Равшга Т. (2000), и каталазу эритроцитов по рекомендации Карпищенко А.И. (1999). Кровь больных обследовалась при поступлении, затем на фоне проводимой терапии на 10-15 сутки, далее перед выпиской из стационара на фоне разрешившихся клинических проявлений, и через 1-1,5 месяца после выписки из стационара. При сравнении значений МДА, спонтанного НСТ-теста, ЦП и каталазы эритроцитов в зависимости от пола достоверных различий не найдено.

С целью объективизации оценки полученных количественных данных, а также для определения степени достоверности собранного материала результаты исследования подверглись математической обработке. Степень достоверности определяли согласно критериям Стьюдента (р<0,05), которые позволяют работать с относительно небольшой выборкой клинического материала (Бирюкова Р.Н., 1965; Урбах В.Ю., 1975). Она проводилась на персональном компьютере с использованием статистических функций редактора электронных таблиц Excel из пакета Microsoft office.

Нормальность распределения признака в выборках проверялась с помощью критерия согласия %1 -Пирсона. Дисперсии признавались равными при достижении F-критерием уровня значимости р>0,05 (Е.А. Лукьянова, 2002).

Оценка ПОЛ у здоровых. Определение «собственной нормы» признано необходимым в проведении биохимических, цитохимических, иммунологических и иных исследований (Шубич М.Г., Нагоев B.C., 1980), в связи с различиями выпускаемых реактивов, настройки применяемой

техники, различий рабочей среды, естественными индивидуальными погрешностями исполнителей.

Оценка изменений содержания показателей активации процессов перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты у обследованных больных невозможна без стандартизации 4 физиологических показателей уровня МДА, показателей НС'Г - теста, церулоплазмина и каталазы в исследуемых средах здоровых людей. Для этого с помощью используемых методик были установлены пределы колебания содержания исследуемых показателей в крови практически здоровых лиц, то есть "собственная норма", поскольку эта норма зависит от многих факторов. ,

Определение уровня МДА, показателей НСТ-теста, ЦП в плазме крови и каталазы эритроцитов проводилось у 60 практически здоровых людей от 20 до 50 лет (студентов и доноров Республиканской станции переливания крови), среди которых было 32 мужчины и 28 женщин. Контрольные исследования проводились параллельно обследованию больных сифилисом, что позволило в большей степени исключить влияние случайных факторов. Показатели прооксидантной и антиоксидантной систем у здоровых людей представлены в табл. 2."

Таблица 2

Уровни исследуемых показателей у лиц контрольной группы

Исследуемый показатель п Хппп - Хшах Х±щ Х±2в

Малоновый диальдегид (ммоль/л) 60 0,74 - 3,93 2,1±0,09 0,69 0,72-3,48

НСТ-тест (усл. ед.) 60 2-33 13±0,8 6,2 2-26

Церулоплазмин (мг/л) 60 390-418 403±6,2 48 307-499

Каталаза эритроцитов (ммоль/(минхл) 60 64,2 - 67,0 66,8±1,3 10,1 46,6-87,0

Полученные у здоровых людей показатели свободнорздикального окисления совпадают с показателями, выявленными многими другими авторами у здоровых лиц (Хайдуков А.Ч., 2001; Афашагова М.М., 2005; Тлупова М.В., 2005). Репрезентативность выборки, большой объем, специфичность и воспроизводимость использованных методов позволили расценивать полученные данные как критерии нормы, которые могут быть использованы в качестве исходных критериев для оценки результатов биохимических исследований в клинической практике и в научных лабораториях.

Состояние прооксидантной и антиоксидантной систем зг больных сифилисом. Комплексное изучение показателей прооксидантной и антиоксидантной систем организма в динамике патологического процесса у больных сифилисом выявило важные закономерности. Результаты проведенных исследований показали, что усиление процессов перекисного окисления липидов при сифилисе подтверждается закономерным возрастанием содержания малонового диальдегида в сыворотке крови с максимальным значением в периоде клинических проявлений заболевания, в среднем в 2,7 раз превышающее нормальные показатели. Обнаружена достоверная зависимость уровня МДА от периода патологического процесса, от наличия осложнений твердого шанкра и сопутствующих ИППП. Отмечено повышение концентрации МДА у больных сифилисом с активными клиническими проявлениями с постепенным снижением параллельно разрешению клинической симптоматики (табл. 3). Достоверно более высокие изменения уровня МДА отмечены у больных с осложнениями твердого шанкра. При этом уровень изучаемого показателя даже через 1 месяц после выписки у больных с осложнениями твердого шанкра оставался заметно выше нормы.

Таблица 3

Содержание малонового диальдегида в плазме крови больных сифилисом в зависимости от клинического варианта (мкмоль/л)

Группа обследованных перио ды п Хтш-Хтах Х±т ±8 Р р.

Здоровые 60 0,74-3,93 2,1 ±0,09 0,69 - -

Сифилис скрытый ранний Г~1 36 3,29-6,51 4,91 ±0,11 0,75 ко,001 -

и 36 2,69-5,57 4,06±0,07 [А6 <0,001 <0,001

ш 33 1,61-4,86 3,27±0,08 0,68 <0,001 <0,001

IV 31 0,81-4,22 2,48±0,09 0,76 <0,01 <0,001

Сифилис вторичный рецидивный 1 24 5,43-6,87 6Д2±0,17 0,48 (<0,001 -

II 23 4,64-5,62 5,02±0,14 0,39 <0,001 <0,001

ш 19 3,32-4,66 3,97±0,16 0,45 <0,001 <0,001

IV 18 1,98-3,19 2,62+0,15 0,42 <0,01 г=0.001

Серорезистентность 9 3,34-4,63 3,96=0,13 0,41 <0,001 -

II 9 2,37-3,77 3,08±0,14 0,44 <0.001 <0,001

ш 8 1,56-3,34 2,42±0,16 0,48 >0,05 <0,001

IV 8 1,37-2,79 2,12±0,17 0,48 >0,05 >0.05

Сифилис первичный [ 8 9,11-10,6 9,86±0,15 0,47 <0,001 -

II 8 7,26-8,64 7,96±0,14 0,44 <0,001 <0,001

III 8 5,25-6,87 6,05±0,16 0,51 [<0,001 ко,001

IV 7 3,29-4,81 4,04±0,18 0,51 <0,001 <0,001

Сифилис вторичный свежий I И 5,87-9,21 7,59±0,11 0,75 <0,001 -

а 11 4,61-8,07 6,35±0,)2 0,79 <0,001 <0,001

ш 10 3,66-4,43 5,06=0,1 0,64 <0,001 кЩГ~

IV 10 2,19-5,61 3,92±0,13 0,8 [<0,001 <0,001

Примечание: Здесь и в табл 5, 6: Периоды исследования соответствуют: I - периоду разгара, И - угасания клинических симптомов, Ш - перед выпиской из стационара; IV- ч/з месяц после выписки. Р — достоверность различия по отношению к группе здоровых, Р1 — достоверность различия по отношению к предыдущему периоду.

после выписки

□здоровые И с согг/тствующей патологией Обез сопутствующей патологии

Рис.2. Динамика показателей МДА (ммоль/л) у больных сифилисом на фоне сопутствующих

ИПШ

Примечание: Здесь и в рис. 3-5 обознач. у столбцов - значения доверит, интервала

При изучении активности прооксвдантной системы у больных сифилисом, протекающем на фоне сопутствующих ИППП, были получены достоверно более высокие значения МДА (рис.2). Наиболее значимые повышения уровня данного показателя констатированы при поступлении в стационар (6,21 ± 0,1 ммоль/л) с постепенным снижением к периоду разрешения клинических проявлений (4,19 ± 0,11 ммоль/л). Однако уровень МДА в группе больных сифилисом с сопутствующими ИППП оставался достоверно более высоким в сравнении с группой обследованных без сопутствующих заболеваний в соответствующих периодах. В периоде угасания клинических симптомов, параллельно положительной клинической динамике, снижение уровня изучаемого показатели также происходило медленнее у пациентов с наличием сопутствующих заболеваний. После полного курса специфического лечения в этой группе больных также не отмечено нормализации уровня МДА. Только спустя 1 мес. после выписки из стационара, у 16 больных сифилисом с сопутствующими заболеваниями уровень МДА оказался в пределах нормальных величин.

Таким образом, данные о характере переписного окисления липидов у больных сифилисом на примере изучения МДА, полученные в настоящем исследовании, очевидно, свидетельствуют о важной роли накопления недоокислснных продуктов в развитии патологического процесса при сифилисе.

Функциональный метаболизм «живых» лейкоцитов, изученный при помощи спонтанного тсста восстановления нитросинего тетразолия, показал значительную активацию прооксидантной системы на фоне ранних активных форм сифилиса. На фоне первых инъекций этиотропного препарата (пенициллина) у большинства обследованных больных зарегистрирован прирост тетразолиевой активности с максимумом на фоне реакции обострения Лукашевича-Яриша-Гергсгеймера. Подобную закономерность, очевидно, можно объяснить эвдотоксинемией на фоне массовой гибели бледных трепонем. У больных скрытыми ранними формами подобная закономерность со стороны НСТ-теста не прослеживалась. В связи с этим, прирост НСТ-восстановительной способности нейтрофилов на фоне начатого лечения может иметь дифференциально-диагностическое значение, свидетельствуя о недавнем инфицировании.

Таблица 4

Динамика показателей спонтанного НСТ-теста у больных сифилисом в зависимости от _ периода заболевания (усл. ел.)____

Период исслед-я п Xmin -Xmax X±m ±S Р Р!

Здоровые 60 2-33 13±0,8 6,2 - -

При поступлении 71 24-74 S2±0,6 6,7 <0,001 -

Через 10-14 дней 69 11-56 36±0,5 6,1 <0,001 <0,001

-Через 25-28 дней 65 7-43 23±0,5 5,9 <0,001 <0,001

Ч-з 1 мес. после выписки 59 3-31 16±0,6 6,9 >0,05 <0,001

Примечание: Р - достоверность различия по отношению к здоровым лицам, Pi - достоверность различия к предыдущему периоду Величины, полученные нами при комплексном обследовании контрольной группы, совпадают с показателями, выявленными другими авторами у здоровых лиц (Нагоев Б.С., 1985; Хайдуков А. Ч., 2001; Сабанчиева Ж.Х., 2008).

У больных сифилисом с серорезистентностъю зарегистрированы умеренно высокие показатели НСТ-теста, не имеющие тенденции к нормализации в динамике. Подобная же закономерность имелась у больных с замедленной негативацией КСР. Поэтому, НСТ-тест, очевидно, может служить прогностическим критерием, проявляя монотонно высокую активность у лиц с формирующейся серорезистентностъю.

Достоверно более высокие значения тетразолиевого теста выявлены у больных сифилисом с сопутствующими гонореей и трихомониазом (рис. 3). Отсюда следует полагать, что тетразолиевая активность лейкоцитов напрямую связана с остротой воспалительного процесса в мочеполовой системе.

при поступи. 10-14 день 25-28 день ч/з 1 мес. после

выписки

а здоровые ■ больные без сопутствующих ИППП □ больные с сопутствующими ИППП

Рис.3. Показатели НСТ- теста (усл. ед) у больных сифилисом с сопутствующими ИППП

Однако даже после полноценного лечения больных сифилисом показатели тетразолиевого теста длительно оставались выше нормальных величин. Этот факт, вероятно, обусловлен различными эндогенными факторами и патогенетическими механизмами, связанными с хроническими воспалительными заболеваниями внутренних органов и интоксикациями.

Таким образом, полученные в настоящем исследовании данные свидетельствуют о важной роли прооксидантных процессов в развитии патологического процесса у больных сифилисом, что позволяет использовать НСТ-тест с диагностической и прогностической целью в комплексном обследовании пациентов.

Аптиоксидантная система. Скорость свободнорадикального окисления и концентрация свободных радикалов у человека в норме поддерживается на определенном физиологически оправданном уровне антиоксидантной системой, противодействующей процессам запуска и развития свободнорадикальных реакций. При достаточно высоком содержании антиоксидантов в организме образуется лишь небольшое количество продуктов ПОЛ, участвующих в регуляции сложных физиологических процессов, уменьшение же содержания антиоксидантов в тканях приводит к тому, что продукты ПОЛ начинают производить вместо физиологического «патологический эффект» (Нагоев Б.С., Маржохова М.Ю., 2002).

Для оценки состояния антиоксидантной системы в крови больных сифилисом определяли уровень церулоплазмина и каталазы эритроцитов. В результате динамического исследования антиоксидантной системы плазмы крови у больных сифилисом обнаружена достоверная зависимость уровней церулоплазмина и каталазы эритроцитов от клинической формы сифилиса, наличия осложнений твердого шанкра, а также от наличия сопутствующих ИППП. Отмечено снижение концентрации ЦП и КЭ на фоне клинических проявлений заболевания с постепенной нормализацией параллельно разрешению клинической симптоматики (ЦП=364 ± 4,2 мг/л и КЭ=62,7±0,87 ммоль/мин х л) (рис. 4, табл. 5).

припоступл. 10-14день 25-28 день через 1 мес. после

выписки

Ш здоровые ■ больные сифилисом

1

Рис. 4. Динамика показателей церулоплазмина(мг/л) у больных сифилисом

Таблица 5

Содержание каталазы эритроцитов у больных сифилисом в зависимости от клинической формы заболевания (ммоль/мин х л)

Группа обследованных периоды п Хтт - Хтах Х±т Р Р!

Здоровые 60 64,2 - 67,0 66,8±1,3 10,1 - -

Сифилис скрытый ранний I 46 49,3 - 70,2 59,7±1,4 9,5 <0,001 -

II 74 50,7-69,6 60,2±0,97 8,3 <0,001 >0,05

III 72 51,9-72,4 61,9±1,1 9,3 <0,01 >0,05

IV 71 53,5-74,1 64,8±1,2 10,1 >0,05 >0,05

Сифилис вторичный рецидивный I 9 59,7 -62,5 56,1±2,1 5,9 <0,001 -

II 9 51,3-63,8 59,6±2,0 5,7 <0,001 >0,05

III 9 53,7-68,1 60,4±2,2 6,2 <0,01 >0,05

IV 8 56,2-70,8 64±2,4 6,3 >0,05 >0,05

Серорезистентность I 11 54,9-68,6 61,5±!,9 6,0 <0,05 -

II 11 53,4-70,3 61,8±2,1 7,3 <0,05 >0,05

III 10 56,3-71,2 64,1 ±2,3 6,9 >0,05 >0,05

IV 9 58,9-72,1 66,5±2,4 6,8 >0,05 >0,05

Сифилис первичный I 10 46,2-61,1 54,0±2,1 6,6 <0,001 -

11 10 49,7-63,5 5 6,1 ±2,2 6,9 <0,001 >0,05

III 9 , 51,1-65,2 58,1±2,1 6,6 <0,001 >0,05

IV 9 54,3 - 68,3 61,3±2,3 6,5 <0.05 >0,05

Сифилис вторичный свежий I 11 44,9 - 65,7 55,2±1,4 9,6 <0,001 -

II 11 47,2 - 68,5 57,8±1,5 9,8 <0,001 <0,01

III 10 50,6-68,7 59,5±1,3 8,3 <0,01 >0,05

IV 9 50,8-72,3 61,6±1,6 9,9 <0,001 >0,05

Достоверно более низкие показатели уровня ЦП и КЭ констатированы у больных сифилисом с осложнениями твердого шанкра и сопутствующими ИППП (рис. 5.)

припоступл. 10-14 день 25-28 день(перед ч/з 1 мес. после

Шздоровые выпиской) выписки

Ш больные без сопутствующих заболеваний □ больные с сопутствующими заболеваниями

Рис. 5. Содержание каталазы эритроцитов (ммоль/мин х л) у больных сифилисом в зависимости от наличия сопутствующих ИШ1П

На фоне сопутствующих ИППП отмечены более низкие показатели ЦП и КЭ. Это, видимо, связано с дополнительным влиянием хронических воспалительных очагов на состояние перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты организма. Данные о состоянии антаоксидантной системы крови у больных сифилисом на примере изучения ЦП и КЭ, полученные в настоящем исследовании свидетельствуют о серьезных нарушениях в системе "СРО/АОС", а также о важной роли этих нарушений в развитии патологического процесса у больных сифилисом.

Для выяснения вопроса о диагностической ценности описанных выше изменений показателей ПОЛ у больных сифилисом в сравнении с классическими гематологическими показателями (лейкоцитоз, палочкоядерный сдвиг влево, повышение СОЭ), была поставлена задача, дают ли биохимические компоненты самостоятельную новую информацию или они дублируют гематологические показатели. Информативность признака зависит от частоты, с которой он встречается при данном заболевании и сходных болезнях, подлежащих дифференциальной диагностике (Гублер Е.В., 1970). Содержание палочкоядерных нейтрофилов более 5% считали ядерным сдвигом влево, число лейкоцитов менее 8 х 10/л и повышенным считали СОЭ выше 15 мм/час (Гольдберг Д.И., Гольдберг Е.Д., 1970; Соколова В.В., Грибова И.А., 1972). За верхнюю границу нормы МДА, ЦП, КЭ и спонтанного НСТ-тесга принимали величины, полученные при обследовании здоровых лиц. Установлено отсутствие сопряженности (табл. 6) между изменением активности спонтанного НСТ-тесга нейтрофилов, уровней КЭ, МДА и ЦП с одной стороны и между гематологическими сдвигами - с другой (р>0,05).

Таблица 6

Сопряженность показателей прооксидантнон и антноксндантной систем крови и гематологических показателей у больных сифилисом

Изученные показатели п Период иссл.-я Лейкоцитоз Палочкоядерный сдвиг СОЭ

* Р X2 Р Г Р

МДА 124 I 1,672 >0,05 0,805 >0,05 0,002 >0,05

148 II 0,160 >0,05 0,242 >0,05 0,468 >0,05

143 1П 0,184 .>0,05 1,183 >0,05 0,809 >0,05

135 IV 0,740 >0,05 1,871 >0,05 1,497 >0,05

НСТ-тест 124 I 1,963 >0,05 1,892 >0,05 0,019 >0,05

148 II 1,295 >0,05 1,589 >0,05 0,174 >0,05

143 га 1,443 >0,05 0,770 >0,05 0,049 >0,05

135 IV 1,039 >0,05 0,002 >0,05 0,366 >0,05

ЦП 124 I 0,032 >0,05 0,189 >0,05 0,441 >0,05

148 и 0,279 >0,05 0,384 >0,05 0,002 >0,05

143 ш 0,298 >0,05 1,459 >0,05 0,012 >0,05

135, IV 0,878 >0,05 0,001 >0,05 0,434 >0,05

КЭ 124 I 0,171 >0,05 0,058 >0,05 0,533 >0,05

148 II 1,295 >0,05 1,589 >0,05 0,174 >0,05

143 га 0,776 >0,05 0,488 >0,05 0,151 >0,05

135 IV 0,171 >0,05 0,008 >0,05 0,054 >0,05

Таким образом, отсутствие закономерной сопряженности между показателями прооксидангной и антиоксидантной систем и гематологическими показателями позволяет утверждать, что сравниваемые показатели не дублируют друг друга. Следовательно, исследования показателей состояния свободнорадикальных процессов и антиокислительной активности дают обширную дополнительную информацию о развитии патологического • процесса у больных сифилисом в динамике заболевания. Учитывая высокую информативность, доступность, воспроизводимость и апробированность, методы определения изменений процессов перекисного окисления можно рекомендовать к широкому применению в практическом здравоохранении для определения состояния прооксидантной и антиоксидантной систем организма у больных сифилисом наряду с общепринятыми клинико-лабораторными и серологическими методами.

ВЫВОДЫ

1. У больных сифилисом происходит достоверное повышение. уровня малонового диальдегида в плазме крови, зависящее от клинической формы сифилиса, наличия осложнений твердого шанкра и сопутствующих Ш11111, что свидетельствует о возрастании активности процессов перекисного окисления липвдов при данном заболевании. В группе больных сифилисом выявлено, что после полного курса специфического лечения не происходит восстановление уровня малонового диальдегида.

2. У больных сифилисом выявлено достоверное возрастание тетразолиевой активности гранулоцитов в спонтанном НСТ-тесте. Умеренно выраженные и длительные изменения показателей НСТ-теста, не имеющие тенденции к нормализации в динамике, могут свидетельствовать о возможном развития серорезистентных форм сифилиса.

3. В группе больных сифилисом обнаружено снижение уровня церулоплазмина, более выраженное в период активных проявлений сифилиса, при наличии осложнений твердого шанкра и сопутствующих ИППП, что связано с дополнительным влиянием воспалительных очагов на

состояние антиоксидантной защиты организма.

4. У больных сифилисом происходит достоверное снижение активности внутриклеточного антиоксиданта каталазы эритроцитов; степень снижения данного показателя зависит от клинической формы заболевания, наличия осложнений твердого шанкра и сопутствующих ИППП.

5. У больных сифилисом отсутствует сопряженность между изученными показателями ПОЛ (малоновый диальдегид, церулопламин плазмы, каталаза эритроцитов) и маркерами системного восполения (количеством лейкоцитов, палочкоядерным сдвигом, СОЭ), что свидетельствует об их высокой информативной значимости для верификации диагноза.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Больным с различными клиническими формами сифилиса для оценки глубины патологического процесса следует осуществлять мониторинг активности свободнорадикальных процессов и антиоксидантной защиты организма.

2. Длительные нарушения состояния свободнорадикальных процессов и антиоксидантной защиты организма могут свидетельствовать о развитии серорезистентности и возможных осложнений твердого шанкра, а также о наличии сопутствующих заболеваний.

3. Величины уровней изученных показателей у здоровых людей могут быть использованы в качестве исходных критериев для оценки результатов исследований прооксидантных и антиоксидантных компонентов крови в клинической практике и научных исследованиях (МДА -2,1±0,09 ммоль/л; спонтанный НСГ-тсст - 13±0,8 усл. ед.; ЦП - 405±б,2 мг/л; КЭ - 6б,8±1,3 ммоль/мин х л).

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Бжахова Ф.К. Тетразолиевая активность лейкоцитов у больных сифилисом /Ф.К. Бжахова,

А.Ч. Хайдуков // Тез. научн. работ. X Всеросс. научпо-практ. конф. Казань, 2005. - С. 73. Z Бжахова Ф.К. Состояние прооксвдантно-антиоксидантной систем и показателей лейкоцитарного индекса интоксикации крови у здоровых / Ф.К. Бжахова, М.М. Афашагова, A.B. Ахохова, З.А. Камбачокова, М.В. Тлупова // Достижения медицинской науки -практическому здравоохранению // Матер, научно-практ. конф. - Нальчик, 2005. - С. - 7.

3. Бжахова Ф.К. Клинико-лабораторная характеристика больных сифилисом / Ф.К. Бжахова //

Достижения медицинской науки - практическому здравоохранению // Матер, научно-практ. конф. - Нальчик, 2005. - С. 21-22.

4. Бжахова Ф.К. Состояние прооксидантной и антиоксидантной систем крови у больных сифилисом / Ф.К. Бжахова // Достижения медицинской науки - практическому здравоохранению // Матер, научно-практ. конф. - Нальчик, 2005. - С. 21-22.

5. Бжахова Ф.К. Состояние прооксидантной системы крови у больных сифилисом / Ф.К.

Бжахова // Матер. II научно-практ. конф. Приоритетные направления науки и техники //Фундаментальные исследования. Астрахань, 2005. - № 9. - С. 6.

6. Бжахова Ф.К. Состояние свободнорадикального перекисного окисления липидов у больных

сифилисом на примере малонового диальдегида / Ф.К. Бжахова II Вестник КБГУ, серия «Медицинские науки»,- Нальчик, 2006. -№ 9. - С. 15 -18.

7. Бжахова Ф.К. Состояние прооксидантной системы крови у больных сифилисом / Ф.К. Бжахова // Матер, научно-практ. конф. VII съезда инфекционистов России. Нижний Новгород, 2006. - С. 95.

8. Бжахова Ф.К. Особенности клиники первичного сифилиса на современном этапе / Ф.К. Бжахова// Перспектива-2007// Матер, научно-практ. конф. - Нальчик, 2007. - Т.4. - С. 93.

9. Нагоев Б.С. Состояние перекисного окисления липидов у больных сифилисом / Б.С. Нагоев, Ф.К. Бжахова // Тез. науч. работ 1П Медицинск. Конф.// Современные наукоемкие технологии II Турция, Кемер, 2007. - № 9. - С. 62-63.

10. Бжахова Ф.К. Изучение состояния антиоксидантной системы крови у больных сифилисом на примере церулоплазмина ! Ф.К. Бжахова // Достижения медицинской науки -практическому здравоохранению // Матер, научно-практ. конф. - Нальчик, 2007. - С. 35.

11. Нагоев Б.С. Динамика показателей свободнорадикального перекисного окисления липидов у больных сифилисом / Б.С. Нагоев, Ф.К. Бжахова // Современный мир, природа и человек. «Естествознание и гуманизм». Томск, 2007 - Т. 4, №4. - С. 32-34.

12. Нагоев Б.С. Состояние свободнорадикального переюгсного окисления липидов у больных сифилисом / Б.С. Нагоев, Ф.К. Бжахова // Российский журнал кожных и венерических болезней. - 2008. - № 2. - С. 54-56.

13. Нагоев Б.С. Динамика изменений малонового диальдегида и НСТ-теста у больных сифилисом / Б.С. Нагоев, Ф.К. Бжахоза // Матер. Международный Евро-Азиатского конгресса по Инфекционным Болезням, - Витебск, 2008. - Т. 1.-С. 101-102.

14. Бжахова Ф.К. Изменения показателей малонового диальдегида и НСТ-теста у больных сифилисом / Ф.К. Бжахова // Актуальные вопросы теоретической и практической медицины//Матер, научно-практ. конф. - Нальчик, 2008. - С. 36-38.

15. Нагоев Б.С. Состояние окислительного метаболизма лейкоцитов у больных сифилисом /

Б.С. Нагоев, Ф.К. Бжахова // Инфекционные болезни: актуальные вопросы в клинике и эксперименте // Сборник научн. трудов XII Российской научно-пракг. конф. - Махачкала, 2008.-С. 300-301.

Формат 60x84 '/16. Заказ №1012

Подписано в печать 16.12.08

Объем 1 пл._Тираж 100 экз.

Типография ВМедА, 194044, СПб., ул. Академика Лебедева, 6

Актуальность проблемы. Проблема сифилиса до сих пор остается одной из главных задач венерологов многих стран (Goh et al., 2001; Rubins et al., 2000; H.C. Потекаев, C.H. Потекаев, 2002), не только из-за высокой контагиозности заболевания, но и по той причине, что, прогрессируя, болезнь может привести к инвалидности и даже летальному исходу, инфекция может передаваться также ребенку от матери транспланцетарно (Rubins et al., 1995; Tikhonova et al., 2003). В течение последних десятилетий наблюдается рост заболеваемости сифилисом, связанный с медико-социальными и социально-экономическими факторами. Среди инфекций передающихся половым путем (ИППП) сифилис и гонорея составили 86% (Ronn с соавт., 1998, Н.И. Брико с соавт., 1999). Социальные, медицинские, демографические факторы (половая активность молодежи, безработица, алкоголизм, наркомания, миграция населения), низкий уровень сексуального и общественного образования способствуют росту числа брльных ИППП (В.П. Адаскевич, 2001; А.Рубинс с соавт., 2004).

Участились случаи скрытого сифилиса, отмечается рост заболеваемости сифилисом среди детей (Ю.К. Скрипкин с соавт., 1999). По некоторым данным, в последние годы, увеличилась частота поздних форм сифилиса, в том числе латентного (В.И. Прохоренкова, 2002; Н.С. Потекаев с соавт., 2003; Caudies et al., 2003).

Важным компонентом патогенности бледной трепонемы является способность микроорганизма прикрепляться к клеткам макроорганизма. При размножении их в периваскулярной зоне мукополисахаридаза трепонемы разрушает мукоидное вещество вокруг сосудов, что вызывает спадение их стенок с последующим тромбозом и формированием эндо- и периартериитов, некроза и изъязвления тканей (А.А Кубанова с соавт., 2005).

Сифилис является весьма тяжелым заболеванием из-за полисистемности проявления болезни. Установлено, что ИППП, в том числе и сифилис, являются биологическими кофакторами, способствующими передаче ВИЧ -инфекции «эпидемический синергизм» (Ю.К. Скрипкин, 2001; Ж.Х. Сабанчиева, 2008). Сифилис сопровождается закономерными реакциями со стороны макроорганизма, что характеризует стадийное течение классического сифилиса. Актуальность изучения процессов, происходящих в организме при сифилисе, обусловлена не только широким распространением инфекции, но и влиянием ее последствий на репродуктивное здоровье нации в целом, а также социальной значимостью результатов проведенных исследований в группах риска (С.В. Ротанов, Н.В. Фриго, 2007).

Вещества, имеющие структуру, подобную липополисахаридам, обнаруживаемые как на клеточной стенке трепонем, так и на мембране лейкоцитов, обладают иммуносупрессорной активностью. Вместе с тем было доказано и прямое токсическое воздействие бледной трепонемы на синтез макромолекулярных соединений (ДНК, РНК, белки) (А.А. Кубанова с соавт., 2005).

В последние годы возрос интерес к исследованиям свободнорадикального перекисного окисления липидов (ПОЛ), как механизма играющего большую роль в патогенезе многих заболеваний.

Многие авторы указывают на влияние липополисахарида бактерий на активацию процессов перекисного окисления липидов. Не вызывает сомнений, что при нарушении механизмов регулирования процессов свободнорадикального окисления (СРО), сопровождающихся избыточным накоплением свободных радикалов, которые вызывают нарушение проницаемости, структуру и функции биомембран, повреждение липидов, белков, (Ю.А. Владимиров, 1998; В.Г. Зайцев, В.И. Закревский, 1998; И.А. Волчегорский с соавт., 2003), нуклеиновых кислот, изменение биоэнергетики, регуляторных и защитных функций, иммунитета (М.Ю.

Маржохова, М.М Иванова, 2002; З.Ф. Хараева, 2002; Б.С. Нагоев, М.Ю. Маржохова, 2003, 2004; З.А. Камбачокова, 2006).

Для диагностики липоперекисной патологии и оценки эффективности проводимого лечения принято определять в плазме крови и эритроцитах содержание продуктов перекисного окисления липидов, а также показателей антиоксидантной защиты организма. В качестве показателя активности прооксидантной системы наиболее известным является малоновый диальдегид (МДА). МДА накапливается в крови при синдроме интоксикации, сопровождающем многие заболевания. Но при достаточно высоком содержании антиоксидантов в организме обязуется лишь небольшое количество продуктов ПОЛ, участвующих в регуляции многих физиологических процессов. Уменьшение же содержания антиоксидантов в тканях приводит к тому, что продукты перекисного окисления липидов начинают производить вместо физиологического, патологический эффект.

Актуальность изучения состояния перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты при различных заболеваниях связана с их важным значением в биохимических процессах, в метаболизме органов и тканей (Б.С. Нагоев, М.Ю. Маржохова, 2003, 2004; З.А. Камбачокова, 2006; М.Х. Нагоева, 2008). Определение содержания продуктов ПОЛ при патологических состояниях организма является одним из высокочувствительных диагностических тестов, позволяющих выявить нарушение интимных механизмов на ранних стадиях патологического процесса.

Процессы свободнорадикального окисления (СРО), лежащие в основе метаболизма всех клеток и определяющие адаптивную состоятельность организма к действию повреждающих факторов, являются не только необходимым звеном жизнедеятельности клеток, но и выступают как универсальное неспецифическое звено механизмов развития многих патологических процессов (Б.С. Нагоев, М.Ю. Маржохова, 2004; Ю.О. Каблахова, 2005; З.А. Камбачокова, 2006; Ж.Х. Сабанчиева, 2008). В настоящее время не вызывает сомнений, что процессы СРО играют важную роль в жизнедеятельности клеток, так как протекают и в нормально метаболизирующих клетках (М.Ю. Маржохова, 2004).

Перекисное окисление липидов идет со значительной скоростью, но стационарная концентрация перекисей довольно мала вследствие наличия мощной многокомпетентной антиоксидантной системы (М.Ю. Адрианова с соавт., 2001). Срыв физиологической антиоксидантной защиты организма ведет к чрезмерному увеличению продукции активных форм кислорода, инициирующих лавинообразное разветвление процессов перекисного окисления в тканях. Образование свободных радикалов и реактивных метаболитов является одним из основных механизмов ведущих к гибели клеток. Например, в развитии некротического повреждения гепатоцитов при окислительном стрессе, принимают участие такие высокоактивные молекулы как суперактивный радикал, перекись водорода, гидроксильный радикал, ионы гипохлорита, синглетный кислород, пероксирадикалы.

Исследование состояния и возможных механизмов нарушения регуляции кислородзависимых процессов предоставляет возможность выяснения общих закономерностей и уточнения патогенеза токсического повреждения клеток при многих патологических процессах, в том числе и при ИППП (Н.М. Овчинников с соавт., 1997; Ж.Х. Сабанчиева, 2005).

Решение этих вопросов тесно связано с фундаментальными общебиологическими проблемами, такими как: образование свободнорадикальных форм кислорода и азота, пероксидной модификацией липидов и белков, функционированием биомембран, компартментализацией биохимических реакций и может быть весьма полезным для выяснения сложных, многоуровневых взаимоотношений различных метаболических звеньев при токсическом повреждении клеток (В.А. Барабой с соавт., 1993).

Поскольку основным фактором инициирования реакций перекисного окисления липидов служат активные формы кислорода, представляет интерес изучение показателей, характеризующих состояние перекисного окисления липидов. Оказалось, что при многих заболеваниях, сопровождающихся клеточной гипоксией, одновременно наблюдается повышенное содержание продуктов перекисного окисления липидов в клетке. Интересно, что активность перекисного окисления липидов возрастает в клетках, как при гипоксии, так и при гипероксии, но значительно отличается по темпам и уровню в клетках разных органов и даже разных структурах одной и той же клетки (Ю.О. Каблахова, 2005).

Нарушение стационарного состояния свободнорадикального окисления (СРО) на фоне депрессии антиоксидантной системы (АОС) является механизмом развития многих патологических состояний (Б.С. Нагоев, М.Р. Иванова, 2002; 2003; Б.С. Нагоев, М.Ю. Маржохова, 2003; 2004; Gutteridge, Halliwell, 2000).

Результаты интенсивного изучения процессов перекисного окисления липидов в последние годы способствовали изменению представлений о биологической роли перекисей и пониманию важности значения перекисного окисления для метаболизма органов и тканей (М.В. Тлупова, 2007; М.Х. Нагоева, 2008). Следует отметить что, несмотря на имеющиеся достижения в изучении сифилитической инфекции, остается множество вопросов, касающихся состояния системы ПОЛ при различных клинических формах сифилиса. В доступной литературе нет исчерпывающих сведений об этом механизме при сифилисе. Отсутствуют данные о влиянии суперинфекции на состояние ПОЛ в сопоставлении с клинической картиной заболевания. Поэтому, изучение прооксидантной и антиоксидантной систем при сифилисе представляет несомненный интерес в плане углубления представления о патогенезе этого заболевания, улучшения его диагностики, назначения рациональной и адекватной терапии.

Цель работы. Изучение в динамике состояния прооксидантной системы и антиоксидантной защиты организма у больных сифилисом в зависимости от клинической стадии заболевания, наличия осложнений твердого шанкра и сопутствующих инфекций, передаваемых половым путем.

Задачи исследования:

1. Изучить уровень активности перекисного окисления липидов по изменению уровня малонового диальдегида в плазме крови у больных сифилисом.

2. Оценить у больных сифилисом состояние свободнорадикальных процессов по уровню активности пероксидазных систем нейтрофильных лейкоцитов путем проведения спонтанного НСТ-теста.

3. Исследовать динамику уровня церулоплазмина у больных сифилисом в зависимости от клинической стадии, осложнений твердого шанкра, а также от наличия сопутствующих ИППП.

4. Изучить активность каталазы эритроцитов в динамике заболевания у больных с различными клиническими формами сифилиса. •

5. Провести оценку информативности динамики показателей ПОЛ (малонового диальдегида, церулоплазмина и каталазы) и НСТ-теста путем сопоставления ' с маркерами системного воспалительного процесса (количеством лейкоцитов, палочкоядерным сдвигом, СОЭ).

Научная новизна. В работе проведено динамическое комплексное исследование показателей прооксидантной и антиоксидантной систем крови больных с различными клиническими формами сифилиса. Установлены особенности изменений процессов перекисного окисления липидов и показателей антиоксидантной системы крови в зависимости от периода, клинической стадии заболевания, наличия осложнений твердого шанкра, сопутствующих инфекций передающихся половым путем. Полученные в результате проведенных исследований новые данные об изменениях в состоянии перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты у больных сифилисом расширяют наши представления о патогенезе заболевания, открывают перспективы для разработки более совершенных способов лечения.

Практическая ценность работы. В результате проведенных исследований установлено повышение активности перекисного окисления липидов, зависящее от клинического течения сифилиса, наличия осложнений твердого шанкра и сопутствующих ИППП. Определение уровня малонового диальдегида и активности НСТ-теста может быть использовано для определения глубины патологического процесса у больных сифилисом.

Показано, что выраженные изменения антиоксидантной защиты организма, проявляющиеся в угнетении уровня церулоплазмина и каталазы эритроцитов, могут свидетельствовать о развитии серорезистентных форм сифилиса.

Реализация и внедрение результатов исследования. Работа выполнена в рамках комплексного плана научных исследований Кабардино-Балкарского госуниверситета по программе «Университеты России», «Фундаментальные исследования» по проблеме «Состояние прооксидантной и антиоксидантной систем организма при инфекционных заболеваниях различной этиологии». Номер государственной регистрации во ВНТИ - центре 012005001782.

Результаты диссертационной работы доложены на многих научно-практических конференциях и достаточно широко опубликованы в печати. Материалы диссертационной работы внедрены в практику работы Республиканского кожно-венерологического диспансера МЗ КБР и используются в учебном процессе на курсах и кафедрах дерматовенерологии, инфекционных болезней, микробиологии и иммунологии Кабардино-Балкарского госуниверситета.

Личное участие автора в получении результатов. Автор осуществил планирование исследования, выполнила весь объем клинико-биохимических исследований на различных стадиях заболевания. Автором лично сформирована база данных, проведены статистическая обработка и обобщение полученных данных.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. У больных различными формами сифилиса происходит повышение активности ПОЛ (повышение уровня МДА) и повышение активности НСТ-теста, зависящее от клинической стадии, наличия осложнений твердого шанкра и сопутствующих заболеваний передающихся половым путем.

2. У больных сифилисом происходят изменения метаболической активности нейтрофильных гранулоцитов, что проявляется усилением тетразолиевой активности.

3. Комплексное определение уровней показателей перекисного окисления и метаболической активности лейкоцитов у больных сифилисом является эффективным и доступным способом оценки формы течения, глубины патологического процесса, а также для прогнозирования серорезистентных форм сифилиса.

Публикации: по материалам диссертационной работы опубликовано 15 научных работ, в том числе в центральном журнале, рецензируемом ВАК: «Российский журнал кожных и венерических болезней». Апробация диссертационного материала. Основные положения i диссертационной работы доложены и обсуждены на ежегодных итоговых конференциях сотрудников Кабардино-Балкарского госуниверситета (Нальчик, 2004-2007), на заседаниях научной ассоциации инфекционистов КБР и Кабардино-Балкарского филиала научного общества дерматовенерологов (Нальчик, 2004-2007), на научно-практических конференциях «Достижение медицинской науки - практическому здравоохранению (Нальчик, 2005-2008), на Всероссийской научной конференции аспирантов и молодых ученых «Перспектива-2007» (Приэльбрусье, 2007), на X Всероссийской научно-практической конференции «Молодые ученые в медицине» (Казань, 2005), на II Российской научной конференции «Приоритетные направления науки и техники» (Астрахань, 2005), на YII съезде инфекционистов России (Н.Новгород, 2006), на III международной научной конференции (Турция, Кемер, 2007), на Международном Евро-Азиатском Конгрессе по

Инфекционным Болезням (Витебск, Республика Беларусь, 2008), на XII Российской научно-практической конференции (Махачкала, 2008).

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 149 страницах машинописного текста и содержит: введение, 4 главы, заключение, выводы, рекомендации и указатель литературы, включающий 172 отечественных и 59 иностранных авторов. Иллюстрации представлены 18 таблицами, 24 рисунками и 15 выписками из клинических наблюдений.

выводы

1. У больных сифилисом происходит достоверное повышение уровня малонового диальдегида в плазме крови, зависящее от клинической формы сифилиса, наличия осложнений твердого шанкра и сопутствующих ИППП, что свидетельствует о возрастании активности процессов перекисного окисления липидов при данном заболевании. В группе больных сифилисом выявлено, что после полного курса специфического лечения не происходит восстановление уровня малонового диальдегида.

2. У больных сифилисом выявлено достоверное возрастание тетразолиевой активности гранулоцитов в спонтанном НСТ-тесте. Умеренно выраженные и длительные изменения показателей НСТ-теста, не имеющие тенденции к нормализации в динамике, могут свидетельствовать о возможном развития серорезистентных форм сифилиса.

3. В группе больных сифилисом обнаружено снижение уровня церулоплазмина, более выраженное в период активных проявлений сифилиса, при наличии осложнений твердого шанкра и сопутствующих ИППП, что связано с дополнительным влиянием воспалительных очагов на состояние антиоксидантной защиты организма.

4. У больных сифилисом происходит достоверное снижение активности внутриклеточного антиоксиданта каталазы эритроцитов; степень снижения данного показателя зависит от клинической формы заболевания, наличия осложнений твердого шанкра и сопутствующих ШИШ.

5. У больных сифилисом отсутствует сопряженность между изученными показателями ПОЛ (малоновый диальдегид, церулоплазмин плазмы, каталаза эритроцитов) и маркерами системного воспаления (количеством лейкоцитов, палочкоядерным сдвигом, СОЭ), что свидетельствует об их высокой информативной значимости для верификации диагноза.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Больным сифилисом для оценки глубины патологического процесса следует осуществлять мониторинг активности свободнорадикальных процессов и антиоксидантной защиты организма.

2. Длительные и стойкие нарушения состояния свободнорадикальных процессов и антиоксидантной защиты организма могут свидетельствовать о развитии серорезистентности, а также о наличии сопутствующих заболеваний.

3. Величины уровней изученных показателей у здоровых людей могут быть использованы в качестве исходных критериев для оценки результатов исследований прооксидантных и антиоксидантных компонентов крови в клинической практике и научных исследованиях (МДА — 2,1±0,09 ммоль/л; спонтанный НСТ-тест - 13±0,8 усл. ед.; ЦП - 405±6,2 мг/л; КЭ - 66,8±1,3 ммоль/мин х л).