Автореферат и диссертация по медицине (14.00.17) на тему:Роль компонентов опиатной системы в формировании алкогольной мотивации у крыс

РГ6 од

2 э 1995 На "1,а»ах рукопией

№

ХОХЛОВА Лилиана Ипанппна

РОЛЬ КОМПОНЕНТОВ ОПИАТНОЙ СИСТЕМЫ В ФОРМИРОВАНИЙ АЛКОГОЛЬНОЙ МОТИВАЦИИ У КРЫС

14.00.17 — нормальная физиологии

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Курск — 1995

Диссертация выполнена в Курском государственном медицинском университете.

Научный руководитель —

член-корреспондент РАМН, заслуженный деятель науки РФ, профессор А. В. Завьялов

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор В. И- Комиссаров кандидат биологических наук, профессор И. П. Бигюков

Ведущее учреждение —

НИИ нормальной физиологии им. П. К- Анохина РАМН

Зашита состоится ¿¿¿^/¿У_1995 года

в _часов на заседании диссертационного совета

(К 084.57.01) при Курском государственном медицинском университете (305033, Курск, ул. К. Маркса, 3)-

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке университета.

Автореферат разослан « (¿¿¿¿^ 1095 г

Учений секретарь диссертационного сонета кандидат медицинских наук доцент

¡Ц'

В. В. Новиков

- 3 -

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ АКТУАЛЬНОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

В настоящее время одной из .самых распространенных наркоманим является алкоголем. При этом особую важность в формировании алкогольной мотивации многие авт:. ¿ы отводят эндогенной опиатной системе (Буров Ю.В., 198с, Билибин Д.П., Дворников В.Е-, 1991, Врапш E.ü., 1991).

Известно, что поведенческие и мотизьционные различия особей коррелируют с уровнем эндогенных опиаткых пептидов (George S.R. et al, 1991), а так же могут быть обусловленными особенностями нзйрот-рансмитгеряого балланса разных систем (Willis G.L.. 198?). Очевидно, что для проявления такого сложного фенотипического признака, как алкогольная мотивация, необходимо сочетание множества определенны/, особенностей биологических систем организма (Дроздов А.S. и др.,

Накопленные в последние годи данкыз о структуре и функции ог -атной системы дают возможность более детального кручения вопроса об участии различных ее компонентов в формировании биологических и патологических мотиваций. Анализ да.лух литературы позволяет предположить, что они играют неодинаковую роль в хановлеяии и pi ¡витии алкогольной зависимости (Анохина И.П. и др., 1988, Котов A.B. и др., 1989).

Так, например, Ю.В.Буровым и Н.К.Ведерникозой (1985) показано, что у особей, склонных в условиях свободного выбор?, к потреблению этанола, имеется генетически-обусловленный дефицит нейоопептидоз, функция которых связана с активаций системы положительного подкрепления. Введение в организм этанола приводит к изменению соотношения компонентов опиатной системы (Юхаваков Р.Ю. и др., 1983). слигснен-тиды, в частности лей-знкефалин - его производные, способна восстанавливать нарушенную поступлением в организм этанола химическую vm-

тирании основных биологический могизацкй (Судаков К.В., 1990), сникать активное ь эмоционально-негативной системы мозга (Ляшев Ю.Д. и др.', 1?01), а так у.е уменьшат;) спонтанное потребление атанпла крысами, не подвергавшимися предварительному действию этанола (Бап<И С.

а"1, , 1990''. Даларгин - синтетический аналог лей-знкефал"ча - коррелирует последствия алкогольной эу^ркопатии у кр^с (Маизелис М.Я. V др., - 39). Траяскраккалькая электроствмуляция, здэываящая увеличение хпкцечхргми ою вдов к крови, применяется для лечения больню алкоголивмом (Лебедев В.П. и др., 1989).

Таким образом, представляется необходимым выжленке особенностей формирования алкогольной мотивации , животных, отличсиощкхс.ч "г отоиедо предпочтения этане "а воде, в условия;; дейетгяя на оргазму, раолкччык -фш оров химического, физического, зсосоциа^..когс ¿¿рейтера.

Диссертационное исследование (номер государственной рвгистраци; С1.9.4С008705) выполнено по основному плану научно-исслсдовательско: работы Курского государственного медицинского университета по проблеме 001 "Механизмы системной организации физиологических функций : норме и ~ри патологии" и гссудаштвеннскг.., чно-технической програм ме 0,69.13 "Разработать л внедрить методы и средства .фофилактик.: раннгй диагностики к лечения алкоголизма".

ЦЕЛЬ И ОСНОВНЫЕ ЗАДАЧ?! ИССЛЕДОВАНИЯ

Цель настоящей работы состояла в выявлении особенностей влиянк различных компонентов ошатной системы организма на формирование ал когодьь_>й мотивации у крыс в зависимости от уровня исходного и пр! обретенного влечения к этанолу. В соответствии с этим представлыюс

.".;-о"жодимым пеакть следугаке задачи:

1) кзу1- тъ вдизн»» синтепического аналога лгй-знкефнлина дала! гии*. и агочкета иа-опидтйых рецепторов ьи дккачи^у формир^

абропмьной ют$>закии V крыт. £ равных услсгияк с истэьзогош

м виуггибрюшинного введения и инсталляций на конъюнктиву глаза;

2) иэууть особенности влияний дачаргина на поведение крыс с азным уровнем алкогольной мотивации;

3) исследовать влияние транскраниальной электроотимуляцки на ормирование алкогольной мотивации у лиеотных с различным исходным тношением к этанолу; ,

4) выявить особенности формирования биологически отрицательной еакции на зтанол у крыс (на базе оборонительной реакции);

5) выявить особенности влиьния даларгина на высшие мозговые

4..

ункции пациентов, страдающих хроническим анкоголигмом, при его иьо-илляциях на конъюнктиву глаьа.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

Для решения задач настоящего исследования была предложена моди-ицкрованнаэ методика разделения крыс: по уровни исходной алкогольной отивации, позволяющая упростить и ускорить отбор предпочитающих и твергающих этанол животнь; для изучения у них реакций ыстивацтанной феры.

Предложен метод тормеж нил алкогольно'"' мотивации у крко, оСес-8чивйюи5?й нетравматичиый доступ к мотивациогеькым структурам мозга, о есть, инстилляции даларгинг на коп-конктиву глаза.

Доказана зависимость подкрепляющего действия экзогенного лиган-а опкатных рецепторов мо-ткпа корзина от уровня алкогольной мо'пиа-ии у разных групп кр..,о.

Проведен «нзлив связей между -.коголъной и питьео^й мотившший животных в равных условиях.

Показана вогмохность воздействия транскран/.алоно,"; электр»«стичг:-иции на предпочтение этанола -чвотш с резким исходнш у^и-.ом лкогольнои мотивации.

Ноячяна и лр-юрчтвткосп. исс.ледоьания голгз^^еы' рачи^к'-м;: орекпм пое?ложели«м (Ы 1 ЮЗ-Р'1). 1!ор4а:;я пакета на патент ('приори-

тегнай ^правка ьо ВИНИГП N 93053100).

НАУЧНО ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

5 ходь проведенных исследований выявлены особенности формирова ная алкогольной мотивации у дивотьых при введении агонис^в опиатны рецепт ироз.

Созданы экспериментальные модели для изучения участия различны компонентов о"чатаой г.ист<=>мы в развитии алкогольной мотивации у кри в акисимости ог исходной предрасположенности к потреблению этанола

Выявленные закономерности псслую:.ли основой для экспериментам»' ного изучения влияния даларгина на состояк э внимания и пау.яти паци еятоз, сгрздоющих алкоголизмом.

Показаны особенности влияния перспективного безлекарственнол метода транскраниапы. т злектротииуляции на развитг алкс тно; мотивации у животных с различным ее исходиим уровнем.

Проведенные исследования позволяют наметить пути разработки методов патогенетической терапии хронического алкоголизма у людей < учетом полученных зиам"* о мехг..тэмах формирования алкогольной мо'гч-вад!-и у животных, а так же характера реакции подкрепляющих систем нг дополнительное введение агонистов ошатных рецепторов и транскрами-апъкую элентростимуляцгао.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗА1ЩТУ

1. Введение синтетического аналога лей- нкефалина даваргинг вчутриСрюшинно у на контент ву глаза тормозит алкогольную мотивация V ¡редпочитащих зтанол крыс и увеличивает потребление этанола от-верл'^цимч его лмвотшмм.

Л Рьынше морфина вызывает * дальнейшее усиление алкоголь?"V ; рации V прздпочк-гатея.ч этачол крыс и стимулирует нормирование > оддепчюотм : отвергающих зтанол живот-'':;.

3. Транскраниачьная электростимуляиия вызываем разнонаправленные сдвиги в потреблении этанола у животных в зависимости ст исходного уровня алкогольной мотивации: увеличивает потребление з салола у отвергающих его крыс и тормозит - у предпочитающих.

4. Введение далар1..на пациентам, страдающим хроническим алкоголизмом, улучшает у них показатели внимания и памяти.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ

Материалы диссертационного исследования докладывались и обс.ух-цались на конференции молодых ученых КГМИ "Актуальные вопросы экспериментальной и клинической медицины и фармации", 1993; ?г XVI Международной „аучной конферг дии молодых ученых и студентов "Созсеменные вопросы экспериментальной ч прикладной физ^логии" (Москва. 1993), и Р°спуб жачской научной конференции "Проблемы фаомацич. подготовки и использования провизорских ¿«дров" (Пятигорск, 1993).

ПУБЛИКАЦИИ. По матер! лам работы опубликовано 3 стагей СТРУКТУРА И ОБЪЕМ' 'АБОТЫ

' Диссертация изложена на 163 столицах клинописного текста, хстонт кз введения. обзора литературы (глаза 11, описания методов исследования (глава 2), изложения собственных результатов и их со-;улдения (глава 3), гчключэння и выводов., списка цитируемой литора-гуры. Работа иллюстрирована 13 рисункам, 22 таблицами, 1 схемой. Указатель литературы Еглшчазт 192 работы (к;-? них 103 отечественных').

ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИСОЛЬДОЗАНИЯ

Эксперименты проводились на белых беспородных крысах-самцах

Для реализации поставленных задач было выполнено 28 серий лее г.сдовгнкй, в обобщенном виде представленных в таблица 1.

Таблица 1

Распределение акспер-^мен^чпьного материала по сериям псследова нлй.

■Характер экспериментов

1г

Количество животных

исходное

Кручение влкяни« даларгина на форми- 285 рсвание и развитие алкогольной мол,и-Еации прк внутрибрюшиннои введении в разных условиях.

2. Исследование дозоза^лсимого эффекта 533 даларг'на на алкогольную мотивацию при ик-тилляциях на конъюнктив/ глава.

3. Изучение особенностей поведения и Ь2 э.аектроболрвой чувствительности ири введении далар1 ,ша.

I, Исследование ел/яния морфина на ал- 237 кегельную мотивацию в разных условиях.

5. Влияние эмоционального стресса на 40 потребление этанола.

6. Анализ взаимоотношений алкогольной и 80 литьевой котиващ"*.

7. Изучение влияний транскраниальной 139 элекгростамуляции на потребление жидкостей крысами.

ИЭ

117

Ш

56 72

18

36 22

КС

58

101

63 79

25

ВСЕГО:

1426 ' 462 356

Примечание: КПЗ - крысн, по .дпочитающие этанол, КОЗ - крысы, с вергаощяе этанол.

Для исследований использовались предпочитающие и отвергающи этанол -фысц, отобранные по ревультагам его добровольного потребле ния в условиях свободного выбора между водой и .15% раствором этане лом. Отвергающими этанол считали животных,' потребляющих в среднем сутки не Ос.—'е 107» ог общего объема ладкооти в виде раствор

етачола, а предпочитающими - тел, которые потребляли в сутки в в.д раствора ыгшола нэ менее 70% от общего объема жидкое»: (Буров 10. В и и , .

После 10-дневного изучения фсвс-^ого ястргбдения жздксстзй с лп-зоткнмн проводились »кслердаенты и параллельно велось наблюдение ал .стреблеякем 15% раствора этане а и воды.

С целью стимуляции опиатной системы примг «лея синтетический аналог дей-эякефал..на ; гааргкн, разработзчнкй и синтезированный во Всероссийском кардшлогическс... научном центре М. 31. Титовым В нгитх исследованиях использовалось внут^лбрхшикное введение препарата дозах 1, 10. 30 и Ю0 икг/кг. В трех сериях исследований шреде.чГг-лось влияние препарата на алкогольную мотивацию V крыс при ссдерлл-нии жизотинх в изолированны/ клегсах. при групповом содержании и после длительной полупринудительной алкоголизгкии

Для центрального введения дэларгкна применялись его ик^тилляци на конъюь. .тиву глаза р дозах 0.1, 1 и 10 мкг при кэолирэгшыом и групповом содержании и кктраназаяъное введение пептида в дозе 10 миг один раз в сутки. Оптимальная доза определялась л осле од ) окра'. инстилляции даларгина на слизистую оболочку г .газа. Инстйллщии производились с помощью стандартного дозированного микром-вектора с г -лиеинилоеым наконечником.

В качестве лигьнда опиатных рецепторов ко—типа использовало:! морфина гидрохлорид. Его применяли.с "елью Еоздействия на алкоголь -яую мотивацию у коне и вводили внутрибрюшь.на ь дозе 0.05 I ' кг/кг. Помимо внутр/брзквчнного введения, ирикшзлисл инсталляции на ки;гж>и-ктиву глаза 10 мкг препарата с той хе цеям.

,Для активации опиатной системы также применялась ¥раяс:крзи.я;'!>-ная электросткмуляци? Т1ри этом использовались параметру. рекэуеьдс-ванные В.П.Лебедевым и сотр. (1988) для тпьискоакиадьной аддасса-нальгеэии (сочетание постоянного тока и прямоугольник импульс^? с частотой 70 Гц и длительностью 2.С-3.5 мс, соотношением «¡с-слсного и среднего импульсного токов 2:1). В эксперимент« под-

кожные игтльчатые ¡элэктродн» которые взодиллсь киыелч в ¿оСл-ук; область (катод) я позади ушныг. ргкоьин (азод) после легкого сп1гс1«ог оглуыеккя. Прслолхк«•ельносъ ГЭС составляла 15 »«кч, лри яг*1.' ес.адчи

на суммарного тока была 1.0 мА.

С целью определения особенностей поведенческой £ :тивносхи крыс I ргхных "ловких активации опиатной системы применялась установка, совмешдтацая в себе элементы "открытого поля" и открытой плооцадки, предоженчаь Л.В.Марцонь я Н.Г.Шепельской (1980).

Параллельно с изучением поведения проводилось исследование порога болевой реакции при злектрокожнсй стимуляции по методике, река-.мевдоЕаннол для указанных целей Я.Бурешом и др. (1991)

Исследовг ие влияния данар^ина на внимание и память при его ин-^'илдяциях на слиз"отую сболоч;<у гла?чого яблока проводилось в первом наркологическом отделении Областного центра "Здоровье" на пациентах, страдаодах алкоголизмом, в состош и алкогольного дилирия и ашюголького абсгинегтного синдрома. В качестве критериев аф^.кткв-ности препарата использовались тесты, оценивающие объем и точность кратковременной число. м и вербгтьной памяти, внимание в корректурной пробе (по таблицам Анфимова) и способность к абстрактному мышлении (для оценки логичности последовательности рассуждений).

Босле проведения гестов пациента*: основной группы ежедневно в течение < дней проводил; ъ инсталляции даларгина на кон-монктиву гл~-за в дозе 350 мкг в 0.04 мл физиологического раствора. Пациенты контрольной группы получали тем же путем эквивалентный объем физиологического растьорз.

Результаты исследований ст"тистически обрабатывались с использованием непараметрического критерия Вилкоксона-Манна-Уитни. В некоторых исследованиях при анализе резул! "гатсв применялся параметрический критерий Сгьвдента и метод корреляционного залива.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

.- метзлненнш ня>.;и исследований по изучению влияния д;

лар<-ика иа алкогольную «отиг.лцж> при внутрибршиином шя.»д«нии было

обнаружено, что у предпочитающих этанол крыс дозы 3,10 и 30 мкг/кг вызывали достоверное (р<0.05) уменьшение потребления этанола как в период инъекций, tat: и после их отмены. Дога 100 мкг/кг достоверного увеличения потребления этанол? по сравнению с контрольной группой не вызывала.

У изначально тверагацих этанол крыс все вводимые дозы вызывали достоверное увеличение потрем 1екия этанола как на фоне инъекций да-ларгина, так и псоле его отмены, потребление ¿;сды заметно уменъма лось лишь при введений дозы 1.00 мкг/кг.

Следовательно, наиболее выращенное влияние на алкогольную и питьевую мотивации при знутриОрюшкнпом введении даларгин сказывает в дозе 10 мкг/кг, а наиболее продолжительное - при введении дозы Р-С мкг/кг.

С ц' ъю исключения влияния изоляционного стресса на активацию опиатной системы при внутрибрюшинном введен и даларгина было проведено 2 сеоии ь :едоваяий с групповым содержанием животных. При этом обнаружено, что введение предпочитающим этанол крысам даларгина внутрибршинно в дозе 30 мкг/кг вызывало достоверное (р<.0,05) снкл..-ние потребления этанола в среднем з 2.7 раза по сравнении с исходными данными и в 2.1 по сравнению с контрольной группой в дни инъекций препарата ив 4,3. - 3.2 раза соответственно после их отмена.

У отвергающих этанол крыс в этих же условия*, наблюдаюсь достоверное увеличение потребления этанола в по сравнению с контрольной группой.

Результаты, полученные при изучении влияния дaJ^apгк,!-, н* исходную алкогольную мотивацию у крыс, послужили основой для проъедоиия двух серий исследований на животных с ьырабогакпой алкогольной мотивацией. После длительной полупринудительной алкоголизации вт-д^/е даларгина в дозе 30 мкг/кг выеывает достоверное {p<0.0fj> ск>№>ш;е потребления этанола как в группе предпочктагащ:.*, так и откргьпил этанол крыс (рис.1).

1В -

«¡1

о

12 3 4

3

Б

2 а

-20 -40 -60 ■80

гЛи:.1. Изменен"-.! потребления зтанола крысами в течение 1-го - л4-го (А) к ^6-го - 0-1 _ (2) дней внутрибрквдшяых инъекций дааар-пша в доае 30 мкг/кг после пслупоинудительной алкоголизации. Примечание: - - достоверные отль ,ия от показателей контрольных групп 1 и 2 - опытная и контрольная группы крыс с вчсо кой алкогольной к тивадией, 3 и 4 - опытная и контрольная груспн животных с низкой алкогольно!, мотивацией.

Для изучения де^твия дагаргина при центральном ^ведени" в 8 сериях опытов применялись инсталляции пептида на конъюнктиву глаза. Однократное введение даларгина . а слизистую оболочку г. ¿за в дозах 1, 10 и 100 мкг вцрив&ю уменьшение потребления этанола крысами. При этом, наиболее выргаленный ингибируюший аффект на алкогольную мотивацию дозы 1С и 100 мкг оказывают на 3-й -7 й дни после инсталляции, в то время как доза 1 м.обладает слабым отсроченным ; чйствием и ~е максимальный эффект приходится на б-й-8-й дни после введения препарата, когда наблюдал зь достоверные (р<0.05) отличия от контрольной группы. Таким образом наиболее бистро воен. .гамма, стабильный и самый продолжительный эффект вкяь .ен в группе, однократно подучившей препарат в добе 10 мкг. У отвергающих этанол животных во всех опытных группах наблюдалось достоверное (р<0.05) увеличение потребления этачолг

При групповом содержании крыс инсталляции даларгина р. доге 1С мкг з течении 5 дней выгьшали достоверное уменьшение потребления >такила не г'-иько ъ группе предпочитающих, но и в группе отвергающих этанол жмвэтшк, что указывав? на зависимость эффекта от у< лчвкй с -д<*-р,к'г.ния, т.е. от наличия изоляционного стресса. Во зхч г. опытных

1

группах- наблюдалось достоверное (р<0 05; уменьшение потребления воды.

В л^ух отдельных сериях исследований изучатась гОДекхигвосгь инсталляций даларгинг после 5 месяцев полугринуд. ельнсй алкоголизации. Обнаружено, что, в отличие от с '¿тов на иокачаль.чо отвс-огаюших этанол крис&х, введение даларгина отвергающим этанол крысам после ^лкоголисации вызывает значительное уменьшение потреб, тт зтау\ла, так хе. как и у предпочитающих этанол квотных.

Таким озранам, ¡¡с основам .и проведенных в условия* узолпрсзая-юго и группового содержглия экспериментов и полученных результате», можно предположить, что в процессе торможен!"" алкогельасй мотивации у поедпочктачвдих этанол крыс ¿1ркнима;от участие центральные и периферические опиатные рецепторы, активируемые либо непосредс"' енно да-л^.гйвш, либо его метаболитами.

Возможно, также, что вводимый дал'оргин нивелирует суцестчухнди1* у предпочитающих ртаиол крыс недостаток в лигаядах б-опиатных рецепторов и, ™ем са\:ум активирует эндогенную систему положительного подкрепления. По мнению Д.П. ,илибина и В.Е.Дворникова (1991), важнее значение в формировании алкоголизма играг.г к только концентрация чвдогенных опиоадов, но и соотношение их количества числа специфических мест связиг чия. Поступление б организм этанола, по дачнкм Н.А.Беляева {1991), уьеличизаег выделение звкефалинов, что и-.; короткое вр; . ниве' 'рует изначальный дисбаланс. Вероятно, такое де, чо более физиологичное действие окагкзает и дал„ргин, приведя в соответствие с ' Числом рецепторов количество ли^ ачдов. Молк*1 предположить, что наибольшее зн. ¡ение в эффелтах ."-ларгина игрг т активация о-опиатней системы. Однако, нельзя не учитывать возможное.л влияние пептида и на \1-опиатные рецепторы. 4

Тсрмо.чяшее влияние дмаргина на питьевую к алкогольную мотивации может быть евгза-о как с-его тормозящим в таянием ча импульсную активность по' чтивно-подкрепляющих зон гипоталамуса (Михайлова Н.Г., Зг'чеМ'.о ''..я., 1983), так и особенностями влияния на водге-олектуо-

Д "X

ж ный ^алланс и секреции вазопрессикч (Б.Д.Слепушкин и др., 1988).

Косвенным подтверждением ' япидния даларгина на питьевые центры служат ревультс ч изучения функционального состояния центров алкогольной и питьевой мотивации по наличию споррелирсванности в потреблении этанола и воды в различная условиях. Обнару ено, что внутриб-рюшинисе введение даларгина не оказывало выраженного влияния на соотношение индексов .лнфазкости (МС) и контрфазности (ИК).

В отличие от внутрибрюашнного введения, при инстилляцилх даларгина в дозе 10 мкг на слизистую оболочку глаза выя.лено достоверное .увеличение ИС и, соответственно, уменьшение Ж по сравнению с ин-тактными животными и параллельной контрольной группой.

Таким образом, при периферическом (вну■рябрюшиняом) введении даларгин не оказывает выраженного в.. л на функциональную сопряг н.ность центров алкогольной-и литьевой мотивации. В то же время, при инстилля шх даларгина на конъюнктиву глаза кгчс, предпочитавши;: этанол, отмечалос* значительное увеличение ИС. Вероятно, центральное введеии» препарата приводит к синхронизации циклической активности цчтров питьевой и алкогольной мотиъации.

Изучение поведения в "открытом поле" показало, что однократное внутриОрюшинноо введение даларгина в дозе 10 мкг/кг и однократная инсталляция пептида т конъюнктиву глаза достоверно (р<0.05) уменьшают горизонтальную и вертикальную активность у предпочитающих этанол животных и увеличивает показатели исследотзательско"' деятельности у отвергавших этанола крыс.

Аналогичные по направлению сдвиги в поведении были обнаружены после 4-х недельного внутрибрюшинного введения дацаргина в дозе 30 мкг/кг животным, предпочитающим и отвергающим зтачрл, пред зрительно подвергшимся полупринудительной алкоголизации г течение 5 месяцев.

Таким образом, спектр поведенческой а!:тивности животных с разным урс. .¡ем алкогольной мотивации под влиянием даларгина приобретает ъид, свойственный противоположной группе.

При .юучения эл'-чтроболевой чувствительности у животных с раг

- 1*5 -

ным уровнем алкогольной мотивации выявлено достоверное (р<О.С№) увеличен "е порога как у предпочитающих,• так и у отвергающих этанол крыс при внутрибрюшишюм введении даларгина в д-^ъе 10 мкг/кг и от-с-утстьие эффекта при инсталляциях на конъюнктиву глаза 10 мкг грепа-рата (таблица 2).

Таблица 2.

1орог электроболевой'чу живительности у крыс с разным уровнем алкогольной мотивации через Ь и 30 минут после однократного Бнугрибря-сиьного введения даларгина (М+ш).

Время изучения электроболевой чувствит аности Группа животных

К 1 Э опытная К Л э контрольна. К 0 3 опытная КОЗ контрольна*

При внутрибрюшинном введении

исходные данные через 5 минут через 30 минут 21.6+0.8 20. "H.i 26.3+1.9*1 24.1+0.9 48.1+1.0*| 23.8+0.3 25.4+0.9 27.0+0.8 29. 7+1.2* Ü8.64.4 26.571.2 21.9+.' .0

При инсталляциях на конъюнктиву глазо

исходные данные через Б минут через 30 минут 20.6+2.1 ' т.6+2.1 1 • :.•? 26.2+1.7 24.8+1.1 25.2î .4 23.7+1.1 27..5+2.9 26.2+2.1 24.G+C.Ö 20,7+С.7 23.5+1.Я

Примечание: * - достоверные (р<0.05) отличга от исходных данных.

Бесспорный интерес представляет изучена алкогольной мотивации людей. Однако, выяв..гние уровня добровольно i потребления алкоголя тем предоставлении свободного доступ к. нему, затруднено, Позтиму, качестве критериев действия даларгина на мозговые функции исполь-вались внимание и память пациентов. Инсталляции даларгина па коьъ-ттиву глаза пациелтов в дозе 350 мкг в течение ? дн^л вы';ыгапо до-зверное (р<0.05) улучшение зрительной, слуховой, числовой илож :>-■понентной памяг/,' объема и точности оаботы з корректур,. JÎ. проб?, •aie .жо посоиюс'1'и к абстряглоованил покати?

Так, при исиояьгсвании' тестов на м^:ааич?ское гянсмив-чги" ибо-

тр&кхных геометрических фигур было выявлено положительно^ влияние препарата (увеличение на 40.0% сразу после окончая!,.* воздействия и на а 1% череа 7' дней souxe-otms.hu у ялц, получавших дяяаргин в сравнении с контрольной группой;. Показатели вербальной и слох-но-коаяонентяой числовой памяти увеличивались на -Т.3-<i4.2% и 123.ь-168.8% ооотвртств енно.

по сезультат-м. корректурной пробы производительность (о6а;ес число п, -смотренных знаков) увеличивалась по сравнению с контрольной группой на 21.5% с-раву после окончания введения препарата и на 37.32 через 7 д л! после его отмены, а точность работы - соответственно нз 27.3 и 34.ОХ. При этом относительной количество ошибок в основной группе достоьерно (р<0.05) уменьшалось.

Введение лигакда цгопиатчну.рецепторов такхе неоднозначно изме-ь..дс алкогольную мотивацию у крыс. У предпочитаю^'« этанола крис ьнутриоргашин. je введение морйша в дозах 0.05 : 1 мг/кг вызывал«, увеличение потреб, ния этанола по сразнению с контрольной группой i 1.4 и 1 п раза соответственно.

После отмены введения корфина истребление этанола в этих группах по сравнению с контрольной значительно увеличивалось и в средне; превышало ее показатели в 1.5 - 2.Я раза. Свободный доступ к раство ру могф'на не выявил статистически-зкачдаых различий в его потреблении между животными опытных и контрольных групп.

' В тех же условиях отвергающие этанол крысы достоверно болм (р:0.05) (в 3.8 - 4.9 раза соответственно) потребляли раствора мор 4ина, чем кивотные контрольной группы. Внутрибршинное введение мер фина не увеличивало пс реблекие этанола отвергающими этанол крысами Следовательно, у предпочитающих этанол гадвотных, в ^тличие о етвергакацих, при внутрибрюшинном введении морфи"а не происходит фор мироъанм наркотической зависимости .

Пр' инсгилляциях-морфина в дозе 10 мкг на конъюнктиву глаз крыс, чредюччташих этанол, отмечается достоверное (р<0.05) увели чениз по^еолуния этанола. Предоставление свободного доступа к раст jopv морфина не выявили существенным различий в егс потреблении мел

ду животными опытной и контрольной групп. 3 то же время огвергатедие ' этанол коысы ь опытной группе достоверно бсльнэ потребляли раствора морфина, чем в контрольной (таблица 3).

Таблица 3.

Потребление жидкостей предпочитающими и отвергающими этанол крысами до, на фоне и после отменыинсталляций морфина на коьсюяктиву г зга (мл/кг, М+т).

Группа животных Потребляемые жидкости Дни наблюдений

1-й - 10-й 11-Й- 17-й 18-Й-24-Й 25- й- 28-й

Опытная 1'ЛЭ этанол вода морфич 17.5+3.1 47.3+4.8 23.1т2.е* 41.5+3.7 21:0-^.4 44.1+3.6 ?п.0+2.5 с .572.7 5.0x1.7

Контрольная КПЗ этанол вода . морйин 18.2+2.4 53.8+4.6 15.6^.4 53.9+3.4 16.3+2.4 49.3+3.7 17.0+1.8 49.9.3.0 4.2*0.9

Опытная КОЭ этанол вод . морфин 2.3+0.7 94.1-8.3 1.0+0.8 76.0+4.9 3.6+1.2 69.6+4.5 1.7+0.8* 38 &+3.3 г 24.5+4.8*

Контрольная КОЭ этанол вода морфин 2.7+0:8 88.4+7.8 1.4+0:7 80.7+4.5 2.1+1.0 75.3+5 1 3.4+1.0 56.4+0.7 6.4+1.0

Примечание. * - достоверные (р<0.01', отличия-в потреблении жидкостей между опытными и соответствующими контрольными группами.

После 5 месяцев полупринудительной алкоголизации инсталляции на • слизистую оболочку глаза морфина в дове 10 мкг вызывали -остов^рное (р<0.05) увеличен;'? потребления этанола в пытиых групп х как предпочитающих, так и отвергаюсих этанол крыс. При свободном уступе к морфину предпочитающие этанол животные потреб,<шли его раствора в 4.5 раза больше;,' «ем в контрольной гауппе, а отвергающие - в 2А раза.

Таким образом, де>рмироваше наркотической зависимости после насильственного введения морфина происходит быстрее у -изначально ст-ве тающих этанол крыс, а у предпочь-гаа'цнх - только послу нредварч тельной алкоголизации.

Транскраниальная элекгростиыуляцяя ('ГЭС) достоверно чр<0.05) уменьшала потребление этанола в опытной группе предпичитащих зтг»:ол крыс г > сравнена с исходна уровнем и даьн^ми контрольной группы в среднем на 37.5 и 38.2%. В течение 6 дней после отмены Т0С,показатели потребления этанола в опытной грулн? оставались си'.женнызд по сравнению с фоном и потреблением этанола в контрольной группе е. среднем на 31.6 и 40.8% соответственно (рис. 2).

мл\кг 50

40

Л)

20

мл\кг

5 4

1-10

1-10

Л-1

11-15

1-15 1

Чл [Т]

1 1

1

т *

1

2

т *

16-20 . \

21-25

г * -4-д

2

[Т

16-20 *

21-25

г!-

Л-

26-30 дни

Т

1г

26-30 дни

Рлс-.г. Потребление этанола предпочитающими ('А) и отвергающими (,В) этанол крысами на фоне транскраниальной электростймуляции. Стрелками п. .сазаны дни проведения ТЭС. 1-контродьная группа. 2-опыткая группа. * - достоверные (р<0.05) отличия между опытными г. кс^трольнымч группами

Для крыс, отвергающих зтанел, как в опытной группе, так и в контрольно . отмечалось повышение потребления этанола на 3-й - 5-й

дни поел» начала ГЭС. Однако у хиьоткыч опытной группы эго увеличение было вкре ?но в среднем в 3.0 раза больше, чем у крыс контрольной группы (рис.2).

ВЫВОДЫ

1. Введение даларгина (в дсза< 3, 10 и 30 мкг н; 1 кг массы тела внутр.чбршияно и 1,10 и 100 мкг при инсталляции на слизистую оболочку глаза) вызывает - условиях свободного выбора уменьшение потребления этачола у лредпочитаоцих его ирис и, напротив, гюгшение его потребления у крыс с исходно низкой алкогольной мотивацией.

2. Ослабление даларгином алкогольной мотиешци у предпочитающих этанол крыс указывает на снижение активности эмоцк наяьво-негаткзкой системы мозга, так как эффект пептида уменьшается при устранении изоляционного стресса ,, групповое содер/ ние) и поскольку при вседе-нки в тех же дозах далзргия вызывает у крыс этой группы аналге¿ичес кий эффект при злектроболевом раздражении кожи и сяиленле ориентировочно- исслидовате >ского поведения в открытом поле.

3. Противоположные эффекты даларгина у крыс с исходно низкой алкогольной мотивацией свидетельствуют о меньшей возбудимости у них опиатных рецепторов. Подтверждением этого являются слабо выраженное антиноцицептивное действие пептиде. / этих животных и отсутствие активирующего влияния даларгина на алкогольную мотивацию у отвергающих этанол крыс после устранения изоляционного стресса и:. следовал ел! о, лри. снижении акти юсти эмоционально-негативной системы мозга, а также после длит- ч.ней (5 месяцев) полупринудительной ал эголи~аци".

4. Введение мог ;;ча в дозах 0.05 и 1 ...кг на 1 кг м^ссы внутрчб-рюшинно и 10 мкг при инсталляциях на конъюнктиву глаза вызывает усиление исходной алкогольной мотивации у предпочитающих этанол крыс и формирование наркотической зависимости у отвергающие

. и. После л лих (5 месяцев) алкоголизации введение морфина

в тп,к-ние 7 , юл вызывает предпочтение его раствора крысами как с

высотам, так и с низким уровнем приобретенной алкогольной мотивации.

и. • Транскраниальнач электростммуляция, примененная в' режимах, достаточных для активации андогенной опиатной системы, оказывает модулирующее влияние на алкогольную мотивацию: ослабляет исходно высокую мотивацию и усиливает исходно низкую.

7. Инстилля! й 350 мкг даларгина на слизистую оболочку глаза пациента в состоянии ачкогольного абстинентного сндрома улучшает у них внимание и память.

НАУЧНО- ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

\. При использовании даларгина необходимо учитывать ворможность его стимулирующего влияния на аткогольную мотивацию в случаях генетически- обусловленного отсутствия алкогольной мо чвации. Так как у животных со сформованной алкогольной мотивацией даларгик уменьшает потребл лие этанола, следует детально изучить возможность клинического поименения пептида при алкоголизме.

2. Необходимо широкое клиническое исследование эффектов даларгина при введении на конъюнктиву глаза и возможности коррекции нарушений внимания и п^яти при алкоголизме с использованием указанного пути введения.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Взаимоотношение питьевой и алкогольной мотивации у крыс // XVI Международная научная конференция могодых учеких: Тег докл.- М, 1993. - 0.3?. (с-оавт. А. В.Завьялов).

2. Влияние эмоционального стресса на потребление этанола крысами // ггуальныо волрссы экспериментальной у. "лияическоп медицины и Агдгл.ац?1и: Тн?. докл.- Курск, 1992,- С.46-47.

3. шике синтетического аналога лей-знкефалина даларгина ■

'Нормирование алкоголь ной мотивации у предрасположенных к потреблению этанола ,;рыс // Реслубл. яаучн. копф." по фармации и фармакологии: Тез. дом,- Пятигорск. 1993,- С.340- 350.

4. Изменение алкогольной ч питьевой »«отявашга V крыс под влиянием ;;нстилляций далгргяна на конъюнктиву глаза.- Курск, 1994,- 6

с.-д-гч. -¡с штат эо.о5.а1.-- хаз-к

5. Влияние даларпша ка ¿ысиие мозговые функции пациентов, "традачпдех хроют'"' ¡-п» »шздгонизком.- ■ -оск» 1594.-й е.- Деп. во ;НЧШ 27.10.3'!.- Л ОЗ-.-'-В Л. «соагг. А.З.Завь?.:ов, В.В.Снндеев).

6. -7~е/:ги а яоло^аон я прчобретенной <.-.г:-о»,олько/» мотивации у Г'О'1 :;:;с:'1!лляиия;! морфина "'н коюшкгкьу глрзй.- Курок, 1994.-8

:. ■ ' ■ £РИШ ?7,12.9-1.- :! 3077- В 94. (соавт. А.В.Завьялов).

7. " -л,.,-то •транскрэ.ии?::^ злектроотимуляиии на исходную алко-•с.-.' .. -л-.-•> •/ ксь: /-• 'язиол. аур." СССР им. Сеченова.-1995.-"•\р."г и ¿2-2"." (соавт. А.З.Завьялов;,'

Я. Блилчие морфина на исходную алкогольную мотивацга у крыс //Зчс^сопи. кли;п*ч. фармакология.- 1995.- Т. 53, N 3,- С. 131-135. Тсоавт. Д.З.Отльн-ов).

Пс-гпхпио и печать •-/. с '■' ■ '* Заказ /- . Т:^^» • V с

ротсприктиая, формат .'/■'■ '._усл. кит.листов / /

'.Стрекал городская телеграфия. 305004 г.Курок ул .Ленина д.77