Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Роль хронических поражение печени матери в формировании иммунных нарушений у потомства (экспериментальное исследование)

МгпнеторотЕО здравоозрааенпп РСФСР" Челябшскпй М8ДНЦИН0КПЙ институт

На правах рукописи

МИХАЙЛОВА Галина Ивановна

УДК 6П.018.53:612.64.062:61о.36-002.2

РОЛЬ ХРОНИЧЕСКИХ ДОРАШИЙ ПЕЧЕНИ МАГЕРИ 3

ФОНДИРОВАНИИ ШОТНЫХ НАРУШЕНИЙ У ПОТОМСТВА.

/экспериментальное иссаэдованае/

* с

14.СО.36 - Аллергология н иккунология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

\

Челябинск - 1990

Работа выполнена на кафедре гистологии и эмбриологии, в иммунологическом отделе ЦВМ Челябинского медицинского

института Ш РСФСР Научный руководитель: доктор медщщаских наук, профессор

Тедлова СЛ.

Научный консультант: кандидат медицинских наук, доцент

Брхвш Г.Б.

Официальные оппонента: доктор меднцвнониг наук,

Кищей Е.Г.

доктор медицинских наук, профессор Новиков В.Д.

Ведущее учреждение: Научно-исследовательский институт

экспериментальной медицины

. АЩ СССР Г. Дешшзсрад , £1$

Залита состоится 199Й^года в '' час,

на заседании спатщапизнровавного совета К.084.04.03 Челябинского медицинского института по адресу : 454092, г .Челябинск, ул.Воровсвого,&4. С диссертацией юожво ознакомиться в .библиотеке Челябинского медицинского института. л

Автореферат разослан " Ж М^Р^Лг/ 1990 года.

Ученый секретарь специализированного совета, ч

кяддидат медицинских наук, _

доцент К.МЛебедева

Актуальность проблема. Воспроизводство здорового поколения в снижение показателей перинатальной заболеваемости и смертности является актуальной общэбкололпеской и медико-сощалвной проблемой (Шаггмав М.М., Варганова Т.П. ,1332; Шоеелава Г.А. и др. ,1986; Морозова В.В. ,1989; Н- Р. ,1980; КпоЬкг Ц [I в}, ,1986). Данные литературы свидетельствует о том, что показатели здоровье новороддешых у человека в последние годы не ииевт тенденции к существенному улучшению, а в раде случаев дата снигаются (Зшин ЮЛ., 1384; Трунова Л.А. в др., 1989; Вель-ишев Ю.В., 1389 и др.).

Наряду с изучением аколох'ичесетзс аспектов неблагоприятных влияний ва состояние здоровья новорожденных в настоящее время возникает необходимость глубокого анализа взаимосвязи здоровья иатери и новоровдеиного, так как тесное взаимодействие этих двух организмов в системе мать-плод, осуществляемое при участии основная гомеостатнческшс систем - эндокринной, нейрогумораль-ной и ишутшой (Савчонков О.И., 1981; Алещенко И.Е.,1987; Вель-тишев О.Е., 1589), кожи? оказнвать самое непосредственное воздействие на формирование различных органов и систем ребенка.

На сегодня установлено, что одной из причин перинатальной патологии и смертности является экстрагенитальные заболевания материнского органззка (Гаркашева Н.Н. ,1978; Кондратович. Д.М., Стройкова А.С.,1986; Михайлова З.М. и др. ,1986; Дегтярева Э.1,1. и др.,1986; Пономарева Л.П. и др.Д988; Афошва 1.Г. и др., 1989; ЯЦоЫ СЛ е/ о1. ,1975).

Среда экстрагенитальнах заболеваний значительное место занимает хронические поранения гэпатобилиарной системы (Фарбер Н.А.,1970; Крутских В.В.Д976; Поднмова С.Д.,1975,1984 и др.), в последние годы отмечается значительный рост уровня данной па-

(

тологии среда лиц фортильного возраста Шодшова С.Д.,1384; Lefovics F. ei al. ,IS85;DroneW.£.t Yatiness M.N. ,1988).

Вместе с тем, хотя в доступной ты литература имеется многочисленные сведения о влиянии хронических поражений гепатобшш-арной системы на течение беременности и родов„ (Богд&_лгв Е.Г., 1978; Шехтман м.м.,1987; fieid it. ei al, jshb\K8ser о., friedberg J. ,i98i; ^ Zhong-da el si. ,is83;^ Tf. eioL

1986) в условиях клиники z эксперимента, однако сведений о влияний хронически: поражений печени матери на особенности роста и развития потомства в период раннего постнатального онтогенеза, в частности на развитие ишунно2 системы, явно недостаточно (Савченков Ю.И., Лобнщев К.С.ДЗЭД; Кетиладзд Е.С..Козлова Т.П. 1984; ОЪг/ел C.J. ei в/. ,1986), во и она носят противоречивый характер.

Целесообразность иосзодоаадая влияния хронического поражения печени матери на ишувологичаciiyo реактивность потомства обусловлена не только ростом заболеваемости, ш и тем обстоятельством , что в последние годы в инициации в развитии хронических поражений печени особое кесто отводится иммунной системе (Логинов А.С., Блок Ю.Е.,1937; Могск У. , 1988;ftthr //, Ш//fj.t 1989).

Однако с сожалением приходится отметить, что глубокого систематического анализа обиебиалогических аспектов влияния патологии печени матери на жизнеспособность а развитие потомства, становление его иммунологических функций на инициацию иммунопатологических реакций до сих пор йе проводилось, что и послужило предпосылкой для проведения данного исследования.

Целью настоящего экспериментального исследования является анализ иммунных нарушений у потомства от матерей с хроническими

поражениями печени.

Задачи исслеяоБзтя.

1. Изучить вяияяиа хронических поражений гапатобилиарной систеын санок крыс ез степень фазяологиче ской зрелости а потомства.

2. Изучить струкх'урыо-^зпзкиасшальнна особенности клеточного ишунатета у потомства матерей с хроническими экс. зримен-талышад поранениями печени •

3. Изучить влияние хронических поражений печени самок на состояние гуморального иммунитета потомства.

1

Научная новизна. Впервые проведен анализ иммунологических нарушений у потомства, розданного от матерей о хроническими поражениями печени аутоиммунной и холастатичесяой природы. Экспериментально доказано, что хроническая патология гепатобилиарной системы у матери приводит к нарушаша становления нормальных функций у потомства о преедушаственнш нарушением клеточного звена иммунитета, а такке к развитию сенсибилизации но гуморальному типу в печеночным антигенам, особенно выраженной при аутоиммунном пораезнии печени у матери.

Проведенные акспернмвнтальнне исследования является ..обоснованием язя целенаправленного анализа, контроля состояния иммунологических функций у новоровдзнннх, родившихся от матерей с хронической патологией пэчеш, перспективности разработок в сфере их иымуЕомодуляции.

Практическое значеше и внедрение подученных ■результатов.

В процессе исследований разработаны экспериментальные модели по воспроизводству хронического аутоиммунного и холестатичес-кого поражений печени (рац.предложение Л 2 от 13.01.87; Л 7 от

- в -

4.03.88; Л 13 от 18.03.88) и внедрены в экспериыентальные исследования ШИЛ Челябинского медицинского института.

В настоящем исследовании, посвященном разработке научной проблемы влияния хронических поражений печени матери различной этиологии на иммуналогичаскую реактивность потомства, содераатся ряд новых положений, имевших практическое значение.

Полученные результаты теоретически обосновывают необходимость выделения детей от матерей о гепасобшшарной патологией в группу ишунологичесхого риска.

Адробапия работа. Основные положения диссертации доложаны на УП Всероссийском съезда датских врачей (Иваново,1986), на П Всероссийском съезде ¿ГЗ (Ленинград,1988), на IX н I научных конференциях "Факторы клеточного и гуморального иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях" (Челябинск, 1288,1989), на 2Ш нэучной конференции: патофизиологов Урала "Патология щхятя, Еровз и регулирующих систем организма и принципы коррекций нарушений" (Ижевск, 1989), на научной конференции "Реактивность г регенерация тканей" (Ленинград, 1990), на заседаниях Челябинского отделения общества АГЭ (1989,1990), на совместном заседании кафедр шаунологии, гистологии в микробиологии (1990).

Положения, выносимые на защиту.

1. У животных с хронический аутоиммунным и холе статическим поражением печени рокдается потомство с признаками физиологической незрелости.

2. Потомство от ыатерей с патологией печени характеризуется селективным дефектом тимус-зависимого звена иммунитета центрального и периферического характера.

3. Патогенетическая схема развития иммунных нарушений у потомства от матерей с патологией печени.

Публикации. По теме диссертации опубликовано II печатных работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 147 страницах машинописного текста, иллюстрирована 30 табл ;аш и 29 рисунками, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, собственных результатов, главы обсуждения, выводов и списка литературы, вклвчаилего 194 отечественных я иностранных источников - 103.

МЕТОДЫ иссвдовшя

Для проведения экспериментов пспользоганы 866 самок крыс линии "Вястар" и их потомство э период раннего посгнатального онтогенеза (I, 15, 30 и 45 дань). Исследовали животных трех групп: в I х'рушцу веши животные от здоровпх матерей, во 2 группу - от самок с хроническим экспериментальным аутоиммунным пора-гением печени, в 3 группу - тавотные от самок с хронически экспериментальным холестатическим поражением печени.

Хроническое аутоиммунное поражение печени создавали путем многократной сенсибилизации животных гомологичным антигеном печени с адыавантом Фрейда по методике Зодотаревского В.Б. г Тугариновой В.Н. (1972) в нашзй модификации. 0 развитии а'утоим-мунного поражения печени у опытных нзвотннх судили на основании повышенного татра печеночных аутоавтптел, повышенного содержания в сыворотке гашаглобулинов в морфологическим изменениям печени.

Ироническое холестатическое поражение печени моделировали путем дозированного сужения пузырного протока по методу Тарахов-

ского Ы.1. в нашей модификации. О хроническом холестатическом поражении печени судили на основании морфологических и гистохимических изменений в печени.

Для оценки степени физиологической зрелости потомства самок крыс с поражениями гепатобилиарной систеш определяли общее число животных в пометах, их половую принадлежность, весовые параметры, мертворождаемость, выживаемость к исходу 2 и 15-х суток, динамику накопления массы тела в ранний период постна-тального онтогенеза и другие показатели.

Для оценки становления иммунного статуса у потомства опытных животных в ранний постнатальный период использовали иммунологические, морфологические и гистохимические методы исследования.

Клеточный иммунитет оценивали моделированием реакции повышенной чувствительности замедленного типа ОНЗГ) по методу/?//. 1х0гдгШ1д£ (1974). Степень выраженности реакции оценивали спустя 24 часа после введения разрешающей дозы антигена (ЭБ и печеночный £Г) путем определения разницы в отеке подушечек задних лапок (опыт-контроль) с помощью инженерного микрометра МК-025 с точностью до 0,01 мм, а также по разнице веса подколенных лимфатических узлов. О степени зрелости поверхностных детерминант судили по способности к розетк'ообразованию {^мйй! Н. е1 о]. ,1972).

Гуморальный иммунный ответ оценивали по числу антителобра-зующах клеток (АС&) в селезенке методом локального гемолиза в жидкой фазе ,1953) в модификации ^.(илп^/мт

(1965) и е!а1. (1974) как на 10® кариоцитов, так и на

весь орган. Кроме того, изучали влияние спленопитов на процессы антителобразования (в продуктивную фазу) и формирование реакции ПЧЗТ ( в экспрессивную Фазу), а также оценивали состояние

поверхностных детерминант спленоцитов с помощью реакции образования Е-РОК, тормостабильньк Е-РОК, теофюршнрезистентных Е-РОК.

Для оцещи мищюокруаешя спленоцитов нами исследовано функциональное состояние селезеночных макрофагов, выделяемых по методу DS.Hosier (1972): фагоцитарную функции по способности к захвату инертных частиц латекса, функционально-метаболическую активность с помощью НСТ-теста {Purk ß.1 dal. fj968). Результаты НСТ-теста оценивали с помощью цитофотометрической насадки Ш31-1А (Рассохин А.Г., Крашенинникова Е.А.,1939). функциональное состояние селезеночных макрофагов оценивали также по уровню лизосомальной активности (Да.Ддагл,1980) с помощью люминесцентного микроскопа (И-ЗУ42 с использованием светофильтров С-З-С, 24-4, Б-3 и 8-3, С-С, 15-2).

Иммунный статус оценивали такяе по структурным изменениям в иммунокомпетентных органах на серийных гистологических срезах, окрашенных гематоксилин эозином, галлоцианином, серебром по Гордону и Свиту, пинрофуксином, с помощью сетки Автандилова (1978,1990) определяли площади коркового п мозгового вещества в тимусе, красной и белой пульпы, Т- и B-зон в селезенке. Кроме того, определяли суммарное число ядросодериашх клеток на единицу условной площади, численность популяций лимфоидных клеток (малые, средние и большие) в тимусе и селезенка, а такге число пиронинофильннх клеток в селезенке по Браше.

Для оценки внутриклеточного метаболизма иммунокомпетентных клеток нами проводились гистохимические исследования, выявляющие уровень активности окислительно-восстановительных ферментов сукцинатдегидрогеназы (СДГ) и Л -глицерофосфатдегидрогеназы (/ -ГФДГ) с использованием нитросинего тетразояия (Пирс Э.,1962; Нарциссов Р.П.,1969; Луппа,1980), а такжа маркер лизосом и пока-

затель катаболических процессов кислую фосфатазу (КФ) методом азосочетания по (Кйсляк B.C. .Ланская Р.В.,

1978), неспецифическув эстерззу (НЭ) методом Нахласа.

Все экспериментальные данные подвергали статистической обработке с вычислением средней арифметической (М), ошибки средней арифметической Ш), квадратичного отклонения Достоверность различий рассчитывали по критерию Огьвдента ( i ) и считали значимым при р< 0,05 (Углов Б.А.,1986).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИСОИЩОВАШШ

■ . ( Согласно данным, полученным в ходе эксперимента, при хроническом аутоиммунном и хояестатическом поражении печени самок крыс, т.е. у животных 2 и 3 групп, раздается физиологически незрелое потомство, о чем свидетельствует увеличение процента мертвороздаеыости, особенно у животных 3 группы (в 2,9 раза), в снижении выживаемости {во 2 группе в 1,07, в 3-в 1,25 раза), в достоверном сниаении численности плодов в пометах у самок опытных групп (соответственно в 1,1 и 1,2 раза), в запаздывании на 2-3 суток открытая глаз, отлипания ушных раковин, открытия ушных шелей, появлении первичного шерстного покрова, а также в повышенной массе тела плодов при снижении темпов прироста массы тела опытных яивотанх к 45 дав.

Изучение влияния хронических поражений печени самок различной этиологии на иммунологическую реактивность потомства в ранило сроки постнаталького онтогенеза позволило выявить угнетение клеточйого иммунитета. Об этом свидетельствует изменения веса тимуса, который значительно снижен, особенно на 30-й день (во 2 группе - в 1,6 раза, в 3 - в 2 раза) и на 45-й день (2 группа - в 2,17 раза, 3-е 1,8 раза) по отношению к контролю,-

0 депрессия ялеточнкх иммунных реакций свшзгельотвуаг саике-нио интенсивности реакции ШЗТ к 45чгу дна раннего постнаталъ-ного онтогенеза (табл.1) как по валпчино отзка стопы, так и по разнице взса подколенных лимфатических узлов. Наиболее внраяев-ноо снигепиэ- реающв аабладается у потомства 3 группы животных.

При постановке реакции Е-розвткообразоваыш тимоцитов число Е—РОК (табл.1) в опытных группах нлке, чем в контроле. При этом наименьшая температурная устойчивость Е-РОК. выявлена на ЗО-й л 45-й дшг после рождения (соответственно 65,57$ а 83,9$ от контрольных значений, что в соответствии с литературными данными (Адашламудова Т.С., 1380; Маркова И.О., 1987;И/ал5Ьсидк-/омгх М.Е. а( а1. ,1979), коаэт свадэтельстЕОЕась о недостаточной степени зрелости тимоцитов. Установленное в наваг исследованиях увэличениэ числа теофаллЕпреэЕстентншС тккоцатов з средней па 10-20^ к контролю монет свидетельствовать о спешащих хелперпо-супрзссорпого равновесия з сторону хелпороз Д е^а/.

1981).

При оценка внутриклеточного кзтаболксг.'л тешщтов наблюдается увэдлчение среднего ГЕСТОХЕшческого показателя (СГД) цитохимической. реакции на СДГ оштшгх групп животину, по сравнению с контролем (в 1,13 раза во 2-й а в 1,48 раза в 3-й группах). Сравнительный анализ уровня активности окислительно-восстановительных ферментов при подсчете отношения феригнта глвдерофосфат-ного шунта с/-ГФ,ДГ к активности фзрмента цикла Кребса Са1.' показал, что у опытных животных первоначально нарастает активность

1 -ГФДГ па фоне, снижения, активности СДГ, к дня отмечается повышение активности последнего.

При хронических поранениях печени самок у потомства в тнда-цатах наш установлена более высокая активность гидролитических

Таблица I

Характеристика реакции 1НЗТ и Е-розеткообразующэй способности тимоцитов у экспериментальных животных (М+№)

Группа| Число животных | Бозраст животных в сутках

! 1 Ч .т. 1 ! 1 I 15 1 I 30 !

I 35 1.33,1 ±1,5 2.22,5 ¿0,14 3.86,53+0,64 4.71,1 +3,5 50,1+1,1 24,0+0,35 86,5+0,85 58,3+2,0 77,5 +3,6 35,0 +0,53 89,26+0,83 45,7 +2,0 78,75+1,1 37,65^0,23 90,3 ¿0,3 69,1 +4,1

2 30 1,27,5 +1,9 2.18,0+0,21 3,84,79+0,8?' 4.88,9 +3,0 . 48,3+1,9^ 20,0+0,6 85, ¿0,7 75,(¿1,9 60,0±2,3 28,СМ;0,25' 85,4+0,7 50,0+2,5 51,66±3,0 28,5 +0,5 84,5 ±1,1 84,2 ±3,1

3 30 1.22,75+1,5 2.19,0 +0,6 3.81,77+2,84 4.76,27+1,7 27,5+1,0 • 18; 75+0,77 84,2^2,1 82,3+0,82 53,2Е±2,67 22,0 +0,26 58,53+1,7 -80,9^1,9 19,1 ±2,8 30,0 ±0,3 75,8 ±1,4 73,78±1,6

I - разница величины отока (хЮО) ш; 2 - Е-РОК {%); 3 - термостабильные Е-РОК; 4 - теофиллинрвзнстентные Е-РОК в %; х - результаты по сравнению с контролем недостоверны (р>0,05)

-13-

ферментов И> я НЭ (в среднем соответственно во 2 группе - в 1,6 раза; 1,4 раза и в 3 группе - в ¿,4; 1,7 раза) по отношению к контроля.

При проведении корреляционного анализа установлено увеличение сопряженности активности СДГ на большинства сроков исследования у животных опытных групп (Л от 0,7 до 0,99) в сравнении о контролем, что сввдетельстзует о дясбалансох внутриклеточного метаболизма в тимоцитах. ^ г

Таким образом, у потомства тавотных от матерей с хроническими поразеншши печени в тимоцатах происходит изменение интенсивности цитохимических реакций и перестройка корреляционных

связей между ниш.'

В то яэ время на фоне оннзения веса тпмуса уменыаается число

дцросодеряащах клеток в нем, олределяе.чнх с поыощыа камеры Го-ряева и на гистологических срезах, ... такзе уменьшается площадь коркового и увеличивается площадь мозгового вещества на большинстве сроков исследования, о чем свидетельствует значение коэффициента К, выранавдего отношение данных площадей (во 2 группе -2,02; в 3 - 2,52; в контроле - 3,04). О функциональной перестройке тимуса у опытных 'зивотннх свидетельствует и изменение соотношения популяций малых н большая тшлоцнтов в различных зонах тимуса.

Так, в субнаяоуляряой зон© тимуса опытных групп гивотных на большинстве сроков исследования количество малых тииоцитоз снияено по сравнении, с контролем, а содержание больяшх - увеличивается (табл.2).'В то же время во внутреннем корковом слое тимуса содержание малых тимоцитов в опытных группах изменяется " неоднозначно: у 2-й грушш кявотпых сннаено по сравнении с контролем, а у 3-й грушш оказалось более высоким, цри этом число

Таблица 2

. Содержание ыазшх н бояытаг тшэдатов в субкапсуляраоа и внутренней корковой зонах (М^пО в % (^Ю) .

--г-----......•■"■•Г—'—---"-

Возраст 5 | |

животных { I группа 2 группа • 3 группа

в сутках }_ } . 1______

Мгшые тшовдтн

I • I. 22,5*0,25 11,6+0,3 22,6+0,3^"

2. 32,55+1,8 05^0,Г7* 38,8^0,31

15 I. 25,£МЗ,46 .'•'■. 25,3£0,25 • 19,%0„37

2. 34,7+1,8. 32,8+0,32?:" 42,9+0,66

30 I. 19,9+0,4 13,^3,46 ■25,%0,48

2. ■ 36,4±2,0 ■ 31,26*1,4* 49,4+2,0

45 ч I. '.18,1+0,6 . - " . - 13^Д9 Х8,2±0,4Я

2. '33,1+0,89 ■'.■31,1+2^ . Больше ТЕаОЦЙТЕ 44,27

I * I. 13,6^0,16 .31,8+0,3 20,6+0,4

2. 6,2+0,4 •• . 3,35+0,13 4,0^0,1

15 I. 13,2+0,29 20,9+0,38 16,2+0,3

2. 5,9+0,28: 4,26+0,03 3,0^0,15

30 I. 15,2+0,35 21,6+0,35

2» 4,6±0,05 4,0^0,09 ' 2,5+0,24 '

45 X. 16,0+0,28 ; - 22,3+0,4 . . 18,54-0,33

2. -5,15*Р,03 6,2+0,24 2,7±0,2

i. - число тейодитов в субкапсулярво^ зоне; 2. - число теыоци-тоз во ЁЕутрзаНЭЙ корковой 8030$

х - результаты по сравнении с.контролем недостоверны (р>0,05) больших тюлоцктов в данной зоне тицуса опытных доотных снижено по. сравнении с контролем на болклинства сроков исследования.

Выявленные нами изменения соотношения поцудяцнй тешцйгсв в субкапсудярной и внутренней карково! зонах могут свидетельствовать о ЗункщгоналъяоЁ перестройке органа. .

Б ходе эксперимента нами выявлены струкгурно-функциональЕые изменения в селезенке у потомства животнех опытных групп на фоне

доличания относительного взса салезашей (в среднем на 1,7%). В частности, выявлено увеличение относительной площади белой пульпы на Я) и 45-й дни постнатальнсго онтогенезе в среднем на 1,8$, что сопровождалось уменьшением клеточной плотности лимфо-идвнх элементов, возможно, за очет увеличения содержания больших лимфоцитов в В-зоне лимфоздннх фолликулов (реактивный центр, мантийная зона), В то же время в Т-зоне (пернартериальная зона) наблюдается снияение числа больших лимфоцитов во 2 группе и увеличение малодщйеренцировашых форм у 3 группы (рисЛ).

О накоплении бластннх форм лимфоцитов свидетельствует и увеличение числа лиронинофильных клеток в В-зонах, особенно у '45-дневных гивотяых обеих опытнкх групп (соответственно 4.32,62+ 27,1; 202,31+13,5 при р<0,05) по сравнении с контролем (65,5+ 4,74 при р< 0,05),

Перестройка структурно-функциональных параметров селеззнки опытных животных сопровождается такаа напряг чкем внутриклеточного метаболизма, о чем свидетельствует величина среднего гистохимического показателя цитохимической реакции в спланоцитзх особенно для гидролитических ферглэнтоз КФ и НЭ (соответствэнно 1,32 и 1,31 во 2 группе и 1,40 и 1,48 раза в 3 группе по отнонению к контролю).

3 ходе исследования гуморального звена иммунитете нами выявлены корреляционные езязи ыеэду морфологичг ноши изменениями в селезенке с иммунологическими сдвигами в организма .тавотных. У потомства сачок крыс с хроническими поражениями печени набл»- ■ дается стимуляция гуморального ишушгеета, что ее-пагдвтся в увеличении абсолютного Ч"сла!антйтелобразуидщг клеток в селезенке и ссооашю у 2 группы животных, где на всех сроках исследования число а0.{ значительно лрэвыкаот их уровень в контроле. Так, не-

пример, на 30-й день посла роздения их уровень составил 50311,08+1535,4 (р<0,05), в контроле - 26558,44*310,34. Сходная динамика наблюдается и при исследовании числа АСЕ иг расче-

е

та на 10° клеток.

Проведенные ваш исследования селезеночных макрофагов указывают на снижение числа фагоцитов-^ селезенке. Так, к 45-му дню после рождения в опытных группам животных число, фагоцитов соответственно составляло 32,0*0,59 (р< 0,05) и 36,0+2,16 (р< 0,05) в контроле - 40;0±Q,7 (р<0,05). В то Ее время фагоцитарный индекс,, а также интенсивность внутриклеточного метаболизма, оцениваемого с помощью НСТ-теста, усилился (соответственно в 1,6 и 1,2 раза), что свидетельствует о их стимуляции (Галактионов В.Г., Й78 fuller Ш, Turk J.L., 1978).

Возрастание хелперной популяции сшганоцитов в опытных группах гивотних мокно объяснить увеличением числа .^/^-продуцирующих клатой у иммунизированных интактних реципиентов при трансплантация ш сингенных спленодатов опытных животных в продуктивную фазу антителогешза. При атом коэффициент стимуляции (отношение числа АОК в опыте к таковому в контроле) составил в среднем 1,44 по абсолютному АОК и 1,59 по относительному. В то же время спленоциты опытных животных в условиях сингенного переноса нммунизирозваншш реципиентам в экспрессивную фазу ПЧЗГ вызывают ее угнетение, о чем свидетельствует коэффициент супрессии (СА), превышающий таковой в контроле (I группа - 42,0; 2 -45,0; 3 группа - 55,31 на 30-й день).

Таким образом, учитывая вое вышеизложенное, можно заключить, что в опытных группах животных имеет место напряженность функций гуморального иммунитета. Усиление реакции антителобразова-ния, выявленное у животных опытных i-рупп, можно объяснить в све-

те этих результатов увеличением активности макрофагов, игравших важную роль в презентации и инициации гуморальных реакций, увеличением числа Т-хелперов и уменьшением числа Т-супрессоров.

В нашем исследовании был установлен высокий уровень противо-печеночных ААТ, поэтому стимуляция гуморального звена иммунитета у опытных животных может быть связана с проникновением печеночных антигенов матери в кровоток плода и высоким уровнем развития антительного ответа к этим антигенам у плода, чему и соответствует высокий уровень ААТ в сзгоротке опытных животных (1:320, 1:640, 1:1280).

Проведенное наш исследование ишунного статуса потомства самок с хроническим аутоиммунным и хроническим холестатическим поражением печени показывает некоторую связь мелду глубиной изменения иммунологической реактивности потомства и природой хронического поражения печени самок: при аутоиммунном поражении печени у матери структурно-функциональные изменения органов иммуногенеза более выражены по ряду показателей по сравнении с хо-лестатической группой.

Предполагаемые механизмы, леяащие в основе развития иммунных нарушений у потомства от матерей с патологией печени, представлены наш в виде схемы (рис.1). Как видно из схемы, в целом, развивающийся комплекс изменений иммунной системы у потомства матерей с патологией печени может возникать в результате проникновения через фето-плацентарный барьер из материнского организма патологических продуктов метаболизма, что наиболее типично для холестатической Форш патологии печени, а также специфических антител, циркулирующих иммунных комплексов и других гуморальных факторов иммунной системы, сенсибилизированных цитотоксичес-*

ких Т-лиифоцитов, что приводит в нарушениям гоодостаза плода,

Нарушение метаболизма

Патология печени у матери

Дезинтоксикацион.. функции

Л±.

Антигенемия

Фето-плацентарный

барьер

Нарушение гомэостаза плода и нормальных условий морфогенэза

Центральный орган:

Г

о

№

О

&

Й

Г

73

тимус

© ф «

О ®

а «

3

Периферический орган:

селезёнка

Р* р

ф

г

1 1 1 1

* —1 i 1

о

-«ч-1

и о

& а

гнетение клеточного звена

. о

Е*

§

Усиление гуморального звена

ГЗТ, ГНТ к печёночной ткани

м

ОС

Рис Л. Патогенез развития ищушшх нарушений у потомства от матерей о патологией печени.

Примечание:_ литературные данные ____ собственные исследования

включая и иммунный гомеостаз (особенно типично для аутоиммунного поражения печени). Форкирушаяся дисфункция иммунной системы проявляется дисбалансом гуморального и клеточного звена иммунитета, который характеризуется резкими структурно-функцпональны-т изменениями центральных и г эрифэрических органов иммуногенеза при усилении активности гуморальных реакций иммунитета и иммунопатологии, изменением интенсивности клеточных и гуморальных иммунных реакций, развитием гшхерчувствительности к ткани печени.

Таким образом, вероятно, как нарушения функции печени (органа-мишени), так и нарупешэ развития иммунной системы плода пра гепатопатологии у матери, связана с феноменом проникновения •антигенов, протившечешчных антител, щгтоннноз, циркулирующих и&змушшх комплексов, шмунокомпэтентных клеток.

В связи с лышзизлсЕеннш, на основании полученных нами результатов, а также ванных литературы (Данькина H.H. ,1982; Трунова A.A. а др. ,1989; flüiett Мч Hofö/t Т- ISС J. etol. ,1986), устававливашиа глубокие нарушения иммунитета у • потомства, можно, сделать заключение о том, что потомство от матерей с хроническими поражениями печени относится к шлмунокош-ромевтированной группе риска.

.завода

1. При экспериментальных хронических поранениях печени снижается репродуктивная способность у яивотных, что пр хвляется

з увеличении мергаороддаемости и снигении численности плодов з пометах.

2. Хронические поранения печена матери аутоиммуки го и хо-лестатического характера обусловливают рождение физиологически незрелого потомства, " чем свидетельствует крупноплодно, cr seme гизнеспособкости новорожденных, задержка признаков исчезло-

вешя етатураахаоот посла рождения, нарушение динамики накопления массы тела в раннем постнатальвом периоде, а хавке отавов-лечения функций иммунной системы.

3. У потомства от самок с хроническим.поражением печени в различные сроки раннего постнатаяьаого онтогенеза происходит усиление гуморального иммунитета ^увеличеше площади В-зон в селезенке, числа больших лимфоцита, Шфсданофйлмд клеток,

^И-продущруитх АСЕ, растет стамуашрушее воздействие сплено-цитов в продуктивную фазу иммуногенеза в системе адоптивного переноса.

4. Нарушение становления функций иммуногенеза у потомства от матерей с патологией печена характеризуется селективным дефектом тимус-зависимого звена иммунитета центрального и периферического характера.

5. Потсниство от матерей с хроническим "аутаишдуннш* и "хо-лестатическим" порааением печени яшштся иммунологически комп-ронентированнш в связи с дефектом становления клеточного иммунитета с параллельным развитием реакции . пщерчув ствительнос ти замедленного типа к аллогенвой ткани печени. -

СЛИСОК РАБОТ, ОПУШШОВАНШ ПО ШВДДШ ДИССЕРТАЦИИ

1. Брихин Г.В., Михайлова Г.И., Грачев А.Ю. Состояние реак- ■ тивности потомства матерей с хроническим поражением печени // Тез. докл.УП Всероссийского съезда детских врачей. - Иваново, 1987. - С.163.

2. Брютн Г.В., Гребенш Н.Г., Михайлова Г.И. Влияние хронических заболеваний печени матери на иммунореактивность потомства Ц Вопросы охраны материнства и детства.- 1988. - Л ГО.-С.75.

3. Брюхин Г.В., ¡Михайлова Г.й. Цитохимическая характеристика

лимфоцитов периферической крови потомства матерей с хроническим поражением печени // Система кроветворения развивающегося организма в норме и патологии: Сб.научн.тр.- Челябинск, 1988.-С.39-43.

4. Брпхин Г.В., Гребенвк Я.Г. .Михайлова Г.И. Состояние им-мунореактивности потомства матерей с афоническим поражением печени // Факторы клеточного и гуморального иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях: Тез.докл.к IX меяинститутской научн.конф. -Челябинск, 1988. - С.16-Г.

5. Калугина М.А., Брюхин Г.В. .Гребенюк Н.Г. .Михайлова Г.й., Грачев A.D. Состояние органоз и систем потомства, рожденного от матерей с хроническими поражениями печени // Тез.П Всероссийса. съезда АГЭ.-Ленинград, 1988. - C.I8.

6. Врихин Г.В., Михайлова Г.И. Антитзлобразугааая способность селезенки потомства самок крыс с хроническими поранениями печени // Фнзиол.журн.- 1988.- JS 2.- С.97-100.

7. Брюхин Г.В.,. Михайлова Г.И. Некоторые аспекты идаунитета у потомства матерей о хроническим аутоиммунным поражением пе- . чени // Патология дыхания, крови и рзгулирулцих систем организма и прандапы коррекции нарушений : Тез.ХШ конф.патофизиологов Урала. - Ижевск,IS89.- С.5-6.

8. Брксгн Г.В., Грачев A.B., Гребенш Н.Г, Михайлова Г.Й., ПивеньГ.В. СЬ'руктурно-^уЕкцгональные аспекты кадунор«.' жтивности потомства матерей с хроническим экспериментальным аутоиммунным поражением печени // Реактивность и регенерация ткан 2: Тез. ' докл.научн.конф. - Я..1990.- G.II

9. Брисга Г.В., Шхайлогз Г.И. Структурно-функциональная

о

характеристика тимуса потомства матерей с хронически». порааа-• нием печени // Педиатрия, ЗШШ, а 30-66-В от 6.06'.90,

10. Брютк Г.В., "ихайлоза Г.И., Грачев A.D., Гребзшск Т.Г., Пивень Г.В. Структурно-функциональные изменится тимуса у лстсмст-

га самок с хроническим поражением печени s условиях эксперимента// Мат.коЕф. института по итогам научных исследование в ХП пятилетка. - Челябинск,1990,- С.84-8Б.

П. Бригин Г.В., Михайлова Г.й. Интенсивность реакции гиперчувствительности замедленного типа у потомства самок с хроническим поражением печени // Физиод.журнал.- 1990.- т.36, Л 6.-С. 99-3X32.