Автореферат и диссертация по медицине (14.00.02) на тему:Печень и печеночные лимфатические узлы матери и потомства при физиологической и осложненной беременности в условиях фармако- и фитокоррекции (анатомо-экспериментальное исследование)

На правах рукописи

Копылова Лилия Евгеньевна

ПЕ.ЧЕНБ И ПЕЧЕНОЧНЫЕ ЛИМФАТИЧЕСКИЕ УЗЛЫ МАТЕРИ И

ПОТОМСТВА ПРИ ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ И ОСЛОЖНЕННОЙ БЕРЕМЕННОСТИ В УСЛОВИЯХ ФАРМАКО- И ФИТОКОРРЕКЦИИ (Анатомо-эксперименталыюе исследование)

14.00.02 - анатомия человека

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата медицинских наук

Новосибирск -2009

003477241

Работа выполнена в Научно-исследовательском институте клинической и экспериментальной лимфологии Сибирского отделения РАМН (г. Новосибирск)

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор

Асташов Вадим Васильевич

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор кандидат медицинских наук, доцент

Летягин Андрей Юрьевич Рынгач Галина Михайловна

Ведущая организация: Сибирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию (г. Томск)

диссертационного совета Д 208.062.05 при Новосибирском государственном медицинском университете Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию (630091, Новосибирск, Красный проспект, 52; тел.: (383) 229-10-83)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Новосибирского государственного медицинского университета Росздрава

Автореферат разослан « У2" » 2009 г.

Защита состоится

часов на заседании

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук, профессор

А. В. Волков

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Одной из наиболее актуальных проблем современной экологической медицины и, в частности экологической и восстановительной лимфологии, является хроническая и острая экзогенная интоксикация, при которой наиболее часто поражается печень - один из важнейших органов поддержания гомеостаза и детоксикации организма, а также ее регионарный лимфатический аппарат. Поскольку именно в гепатоцитах осуществляется метаболизм стероидных гормонов, то при наличии патологического процесса в печени возможно нарушение гормонального баланса и, соответственно, процессов оплодотворения, наступления и течения беременности. Беременность, являющаяся своеобразной дополнительной нагрузкой для всего организма, также влияет на функцию печени и ее регионарный лимфатический аппарат.

Согласно концепции Ю. И. Бородина о лимфатическом регионе, дренируемый орган и регионарные лимфатические узлы представляют собой единую функциональную гомеостатическую единицу. Поэтому актуально исследование печени и печеночных лимфатических узлов матери и потомства при физиологической беременности и при беременности, осложненной хронической интоксикацией, что позволит выявить характерные морфо-функциональные преобразования в органе и оценить состояние дренажно-детоксикационной и лимфопролиферативной функций регионарных лимфатических узлов.

В комплексе методов дренажа интерстиция широко используются фитопрепараты, обладающие лимфокоррегирующими и лимфостиму-лирующими свойствами за счет высокого содержания растительных биофлавоноидов, витаминов и микроэлементов. В настоящее время все большее внимание клиницистов привлекают немедикаментозные методы коррекции патологических процессов в акушерстве. Актуально исследование действия фитопрепарата, содержащего растения с антиоксидантным и гепатопротекторным действием (БАД к пище «ПикСил») для коррекции структуры печени и лимфатических узлов при беременности, осложненной хронической экзогенной интоксикацией.

Цель исследования. Выявить морфофункциональные преобразования печени и печеночных лимфатических узлов матери и потомства при физиологической и осложненной хронической интоксикацией

СА

тетрахлорметаном (ССЦ) беременности в условиях фармако- и фитокоррекции.

Задачи исследования:

1. Изучить морфофункциональное состояние печени и печеночных лимфатических узлов матери и потомства (14 суток) при физиологической и осложненной хронической интоксикацией тетрахлорметаном беременности.

2. Исследовать морфофункциональное состояние печени и печеночных лимфатических узлов матери и потомства (14 суток) при беременности, осложненной хронической интоксикацией тетрахлорметаном, на фоне коррекции фармпрепаратом «Эссенциале».

3. Изучить морфофункциональное состояние печени и печеночных лимфатических узлов матери и потомства (14 суток) при беременности, осложненной хронической интоксикацией тетрахлорметаном, на фоне коррекции фитопрепаратом «ПикСил».

4. Исследовать морфофункциональное состояние печени и печеночных лимфатических узлов матери и потомства (14 суток) при беременности, осложненной хронической интоксикацией тетрахлорметаном, в условиях сочетанной коррекции фармпрепаратом «Эссенциале» и фитопрепаратом «ПикСил».

Научная новизна. В работе впервые проведен сравнительный структурный анализ печени матери и потомства, выявлены особенности строения печеночного лимфатического узла у потомства. Показано, что при осложненной хронической интоксикацией ССЦ беременности структурные преобразования в печеночных лимфатических узлах и печени у матери и потомства (14 суток) однотипны и однонаправлены. Это позволяет прогнозировать патологические изменения в органах и обосновывает применение средств гепато- и лимфокоррекции при осложненной беременности. В работе впервые доказано, что гепатопротекторный препарат «Эссенциале» усиливает крово- и лимфонаполнение печени (перипортальные пространства Малла), активирует лимфопролиферативные процессы в печеночных лимфатических узлах матери и потомства при беременности, осложненной хронической интоксикацией ССЦ. Впервые показано, что фитопрепарат «ПикСил» обладает как гепатопротекторным действием, так и лимфостимулирующим и лимфокорригирующим действиями при беременности, осложненной хронической интоксикацией ССЦ. В работе впервые представлены данные, свидетельствующие о синергичности действия лекарственного препарата «Эссенциале» и фитопрепарата «ПикСил» по

восстановлению структурно-функциональных взаимоотношений в печеночных лимфатических узлах и печени матери и потомства при осложненной хронической интоксикацией ССЦ беременности.

Теоретическая и практическая значимость. Изучение особенностей морфофункциональных преобразований печени и печеночных лимфатических узлов матери при физиологической беременности расширяет и дополняет представления о течении беременности и функциональных изменениях в организме беременных. Обнаруженные характерные структурные преобразования в печеночных лимфатических узлах, паренхиме и строме печени матери и потомства при беременности, осложненной хронической интоксикацией ССЦ, позволят производить адекватный подбор лекарственных средств для коррекции функций лимфатической системы, профилактики повреждений тканевого микрорайона печени. Полученные нами структурные данные об усилении крово- и лимфонаполнения печени, активации Т-зависимого звена иммунного ответа в лимфатических узлах матери при беременности, осложненной хронической интоксикацией ССЦ, в условиях введения препарата «Эссенциале» позволяют сделать заключение о ценности этого способа коррекции для практического здравоохранения и целесообразности его дальнейшего изучения. Восстановление структурно-функциональных взаимоотношений в печеночных лимфатических узлах и печени матери при коррекции хронической интоксикации фитопрепаратом «ПикСил» является аргументом для использования этого препарата в качестве вспомогательного средства в лечении патологических состояний при беременности. Результаты исследования сочетанного использования препаратов (лекарственный препарат «Эссенциале» и фитопрепарат «ПикСил») показали перспективность применения данного метода в восстановительной медицине и профилактической лимфологии, направленного на улучшение метаболизма клеток печени, восстановление структурно-функциональной организации регионарных лимфатических узлов и усиление дренажно-детоксикационного потенциала в лимфатическом регионе. Результаты работы позволяют разработать и расширить схемы вспомогательной терапии у женщин, страдающих токсическим гепатитом, в условиях реабилитационных отделений и санаторно-курортных учреждений.

Положения, выносимые на защиту:

1. Печеночные лимфатические узлы матери (21-е сутки беременности) и потомства (14-е сутки) различаются по своей структурно-функциональной

специализации (компактный и промежуточный тип строения соответственно), анатомической организацией коркового вещества; в печени матери на 21-е сутки физиологической беременности увеличиваются размеры перипортальных пространств Малла.

2. Хроническая интоксикация ССЦ при беременности приводит к подавлению лимфопролиферативной функции (уменьшение размеров вторичных лимфоидных узелков, числа незрелых лимфоидных клеток) в печеночном лимфатическом узле и расширению перипортальных пространств Мапла в печени матери, а у потомства (14-е сутки) изменяет тип структурно-функциональной специализации печеночного лимфатического узла.

3. Монокоррекция препаратами «Эссенциале» и «ПикСил» при осложненной хронической интоксикацией ССЦ беременности активирует лимфопролиферативную функцию печеночного лимфатического узла матери и потомства (увеличение размеров Т- и В-зон, числа незрелых лимфоидных клеток), репаративные процессы в печени (увеличение доли диплокариоцитов, ядерно-цитоплазматического соотношения, восстановление размеров синусоидов), вызывает изменение размеров перипортальных пространств Малла в печени матери.

4. Сочетанное применение препаратов «Эссенциале» и «ПикСил» при беременности, осложненной интоксикацией ССЦ, способствует выраженному восстановлению структуры печеночного лимфатического узла (соотношение Т- и В-зависимых зон, клеточный состав, стромально-паренхиматозное соотношение), печени (уменьшение очагов дистрофии и некроза, расширенных синусоидов, восстановление размеров перипортальных пространств Малла) у матери и потомства.

Апробация результатов исследования. Основные результаты исследования доложены и обсуждены на научной конференции с международным участием «Проблемы лимфологии и интерстициального массопереноса» (Новосибирск, 2004), II съезде лимфологов России (Санкт-Петербург, 2005) и на I Сибирском съезде лимфологов с международным участием (Новосибирск, 2006).

Внедрение результатов в практику. Фитопрепарат «ПикСил» в качестве вспомогательного средства внедрен в комплекс лечебно-реабилитационных мероприятий терапевтических отделений санатория «Парус» (Новосибирская обл., пос. Кудряшовский) для пациенток, страдающих заболеваниям печени. Результаты исследования морфофункциональных преобразований печени и

печеночных лимфатических узлов матери и потомства при физиологической и осложненной беременности внедрены в практику научно-исследовательской работы лаборатории ультраструктурных исследований НИИКиЭЛ СО РАМН (г. Новосибирск). Данные об особенностях структурной организации печени и печеночных лимфатических узлов матери и потомства при физиологической и осложненной беременности в условиях фармако- и фитокоррекции используются в учебном процессе на кафедре фундаментальной медицины медицинского факультета Новосибирского государственного университета по курсу топографической анатомии и оперативной хирургии.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 работ, из них одна -в ведущем научном журнале, рекомендованном ВАК для публикаций результатов диссертационных исследований.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 221 странице машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описаний материалов и методов исследования, 5 глав собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и списка литературы, содержащего 240 источников (182 отечественных и 58 иностранных авторов). Работа содержит 57 рисунков и 31 таблицу.

Личный вклад автора. Весь материал, представленный в диссертации, получен, обработан и проанализирован лично автором.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование одобрено локальным этическим комитетом НИИ клинической и экспериментальной лимфологии Сибирского отделения РАМН. В соответствии с поставленными задачами в эксперименте использовали крыс -самок популяции Вистар в возрасте 4-5 месяцев со средней массой 250 -300 г., которые были получены из вивария НИИ цитологии и генетики Сибирского отделения РАМН (г. Новосибирск). Всего в работе использовано 140 взрослых животных и 50 потомков. Животных содержали на стандартном рационе при свободном доступе к воде и пище. Животным, участвующим в эксперименте, создавалась модель хронической интоксикации тетрахлорметаном по методике Н. П. Скакуна (1992): 25-процентный масляный раствор ССЦ вводился эндогастрально в дозе 0,1 мл на 100 г массы животного два раза в неделю в течение 28 дней; для усиления токсического действия ССЦ вместо воды животным давали 5-процентный раствор этилового спирта в

свободном режиме в течение 28 дней создания модели. По окончании токсического воздействия часть самок подсажена к самцам, первым днем наступления беременности считали день обнаружения сперматозоидов в вагинальных мазках. Коррекция хронической интоксикации проводилась с 7-х суток беременности (в период органогенеза) в течение 10-14 дней. Препарат «Эссенциале» вводился внутрибрюшинно в дозе 0,1мл на 100 г массы в разведении на 5-процентном растворе глюкозы. Фитопрепарат «ПикСил» животные получали энтерально в течение 14 суток из расчета 7 мг/сут на 100 г массы утром во время кормления с 7-х суток беременности. Проводилась монотерапия каждым из этих препаратов и сочетанная коррекция. В процессе эксперимента животные разделены на следующие группы: 1 - интактные небеременные самки (контроль); 2 - самки с физиологической беременностью; 3 - экспериментальная группа небеременных самок с хронической интоксикацией СС14; 4 - экспериментальная группа самок с беременностью, осложненной хронической интоксикацией ССЦ без коррекции; 5, 6, 7-группы самок с беременностью, осложненной хронической интоксикацией ССЦ, в условиях коррекции, соответственно, препаратом «Эссенциале», фитопрепаратом «ПикСил» и сочетанной коррекции этими препаратами. В эксперименте также использовано 14-суточное потомство женского пола от каждой экспериментальной группы.

Для гистологических исследований после эвтаназии животных под эфирным наркозом забирали образцы печени и регионарные печеночные лимфатические узлы, располагающиеся в гепато-дуоденальной связке. Исследуемый материал забирали на 21-й день беременности у матерей, у потомства - на 14-е сутки жизни. Используя принцип морфометрии, в лимфатических узлах определяли относительные площади мозгового и коркового вещества и составляющих их структур: первичных и вторичных лимфоидных узелков, межузелковой и паракортикальной зон, мозговых тяжей и синусов, а также краевого синуса, трабекул и капсулы. В каждой экспериментальной группе рассчитывали индекс соотношения удельных площадей коркового и мозгового вещества (К/М индекс), по которому определяли структурно-функциональный тип лимфатических узлов (Бородин Ю. И., 1986). Объем преимущественно Т-зависимой зоны лимфатического узла определялся как объем паракортикальной зоны. Суммарный объем преимущественно В-зависимой зоны определялся как сумма объемов первичных и вторичных лимфоидных узелков и мозговых тяжей.

Изучение клеточного состава различных зон лимфатических узлов проводили с помощью стандартной закрытой квадратной тестовой системы, вмонтированной в окуляр микроскопа (Стефанов С. Б., 1985). Препараты изучали с использованием иммерсионного объектива при конечном увеличении в 900 раз. Выделение структурных компонентов и клеточных элементов лимфоидной паренхимы в лимфатических узлах проводили согласно Международной гистологической номенклатуре под редакцией В. В. Семченко с соавт. (1989). Морфометрические исследования образцов печени проводили с помощью светооптического микроскопа с использованием иммерсионного объектива при конечном увеличении в 630 раз. Все исследования проводились в промежуточной зоне. Методом точечного счета в печени определяли удельные площади цитоплазмы и ядер гепатоцитов, синусоидов и синусоидных клеток. Из полученных данных вычисляли ядерно-цитоплазматическое отношение в гепатоцитах, коэффициент отношения площади синусоидов к площади гепатоцитов (Vizzotto L., 1989), отношение количества синусоидных клеток и диплокариоцитов к общему числу гепатоцитов и отношение площади паренхиматозных клеток к общему числу гепатоцитов. Для определения удельной площади структурных изменений тканей органов использован способ по А. В. Муратову с соавт. (1997). В качестве морфологических маркеров были выбраны стереотипные структурные изменения. Кроме того, учитывались относительная площадь перипортальных пространств Малла и у потомства очаги кроветворения в печени. Для изучения репродуктивной способности животных определялась предимплантационная и постимплантационная и общая эмбриональная смертность (Малашенко А. М., Егоров И. К., 1967). Статистическая и математическая обработка данных проводилась с помощью методов вариационной статистики с применением метода дисперсионного анализа. Вероятность различий между группами данных считалась достоверной при значениях Р<0,05. Компьютерная обработка данных проводилась в системе Windows (Microsoft Excel).

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Структурное исследование печени и печеночных лимфатических узлов матери и потомства при физиологической беременности. Результаты проведенных нами исследований показали следующее: структурно-функциональная организация печеночных лимфатических узлов матери при

физиологической беременности соответствует компактному типу (к/м индекс -2,06 ±0,08). На 21-е сутки физиологической беременности в регионарных лимфатических узлах печени выявлены характерные структурные преобразования (приложение А): угнетение лимфопролиферативной функции (уменьшение площади Т- и B-зависимых зон на 9 % и 13 % соответственно, вторичных лимфоидных узелков в 2,1 раза, числа иммунобластов в герминативных последних в 1,9 раз и количества зрелых плазматических клеток в мозговых тяжах на 40 %, по сравнению с контролем); увеличение лимфонаполнения печеночных узлов (увеличение размеров мозговых и краевого синусов). Эти изменения сопряжены с расширением перипортальных пространств Малла в печени (их относительная площадь увеличивается в 7 раз). На 21-е сутки физиологической беременности в печени матери возрастает ядерно-цитоплазматическое соотношение в гепатоцитах 0,18 ± 0,005 (в контроле-0,13), увеличивается численная плотность паренхиматозных клеток, появляются расширенные синусоиды, стаз крови в синусоидах и центральных венах. Эти изменения в печени обусловлены активацией обменных процессов в организме беременной, характерные изменения сосудистого и лимфатического русла, возможно, обусловлены гиперволемией, повышением внутрибрюшного давления и затруднением венозного и лимфатического оттока из брюшной полости.

Печеночный лимфатический узел потомства на 14-е сутки постнатального развития относится по своей структурно-функциональной специализации к промежуточному типу (к/м индекс - 1,0 ± 0,05) с выраженным преобладанием в корковом веществе первичных лимфоидных узелков, вторичных лимфоидных узелков не обнаружено. Печень потомства на 14-е сутки онтогенеза имеет характерное дольчатое строение, в паренхиме встречаются очаги кроветворения, гепатоциты имеют меньший размер по сравнению со взрослыми животными, но большее ядерно-цитоплазматическое соотношение (0,24 ± 0,006). Увеличена численная плотность гепатоцитов и диплокариоцитов, относительная площадь синусоидов и синусоидных клеток (по сравнению со взрослыми животными). Выявленная особенность строения печеночных лимфатических узлов потомства (отсутствие герминативных центров), по-видимому, связана с незрелостью B-клеточного иммунитета в раннем онтогенезе (Butler G. Et all, 1987).

Структурное исследование печени и печеночных лимфатических узлов матери и потомства при осложненной хронической интоксикацией

СС14 беременности. При беременности, осложненной хронической интоксикацией ССЦ, печеночный лимфатический узел сохраняет функциональную специализацию компактного типа (к/м индекс - 2,05 ± 0,08). Выявлено уменьшение относительной площади вторичных лимфоидных узелков в 2 раза, в герминативных центрах которых уменьшается число незрелых лимфоидных клеток (иммунобласты - в 2,4 раза, средние лимфоциты-в 3,4 раза по сравнению с физиологической беременностью), на фоне расширения мозговых синусов (приложение А).

В печени матери на 21-е сутки осложненной хронической интоксикацией СС14 беременности выявлены характерные структурные воспалительные преобразования: стаз крови, расширение синусоидов, очаговая и диффузная лейкоцитарная инфильтрация на фоне выраженного расширения перипортальных пространств Малла, их относительная площадь - 5,0 ± 0,08 (при физиологической беременности - 2,3 % ± 0,05 %). Дистрофия и некроз гепатоцитов встречаются реже, чем при интоксикации тетрахлорметаном у небеременных самок, возрастает ядерно-цитоплазматическое соотношение (0,25 ± 0,004). Расширение перипортальных пространств Малла косвенно может свидетельствовать о застое лимфы и, возможно, о повышенном лимфообразовании при беременности.

У потомства при осложненной беременности выявлены изменения структурно-функциональной специализации регионарных лимфатических узлов печени на компактный тип (к/м индекс - 4,65 ± 0,08) с выраженным преобладанием вторичных лимфоидных узелков (1,19 % ± 0,03 %) и увеличением размеров паракортикальной зоны (Т-зависимой) в структуре коркового вещества. Такое структурное преобразование лимфатических узлов может свидетельствовать о выраженной антигенной стимуляции лимфатической системы печени потомства, активации дифференцировки Т-клеток и раннем созревании гуморального иммунитета, что подтверждается данными по исследованию клеточного состава функциональных зон печеночного лимфатического узла: увеличение относительного числа иммунобластов в паракортикальной зоне и незрелых плазмоцитов в мозговых тяжах. В печени потомства появляются клетки с вакуолярной дистрофией и очаги некрозов, уменьшается количество диплокариоцитов и площадь неизмененных синусоидов, появляются расширенные синусоиды, увеличиваются размеры перипортальных пространств Малла.

По всей видимости, существует несколько механизмов описанных

изменений соименных органов у потомства. Первый механизм связан с проникновением накопившегося в организме беременной самки тетрахлорметана через плацентарный барьер к плоду, второй механизм связан с возможными путями негенетической передачи информации за счет развития эндогенной интоксикации в организме матери.

Структурное исследование печени и печеночных лимфатических узлов матери и потомства при осложненной хронической интоксикацией СС14 беременности на фоне коррекции препаратом «Эссенциале». Введение препарата «Эссенциале» матери при беременности, осложненной хронической интоксикацией ССЦ, активирует лимфопролиферативные процессы в печеночных лимфатических узлах (приложение А): увеличиваются размеры Т-зависимой зоны на 16% по сравнению с осложненной беременностью, вторичных лимфоидных узелков и числа незрелых лимфоидных клеток в них (иммунобласты, средние лимфоциты увеличиваются в 2 раза). «Эссенциале» оказывает гепатопротекторное действие, вызывает усиление крове- и лимфонаполнения в печени матери при осложненной беременности. Выявлено возрастание относительной площади неизменных гепатоцитов, уменьшение гепатоцитов в состоянии дистрофии и некроза, увеличение площади неизменных синусоидов и значительное расширение перипортальных пространств Малла - 4,4 % ± 0,06 % (физиологическая беременность - 2,3 % ± 0,05 %). Полученные данные могут свидетельствовать о том, что в условиях применения «Эссенциале» при осложненной беременности развивается эффект «метаболической лимфостимуляции» на уровне тканевого микрорайона печени, обеспечивающий ускоренное восстановление структуры органа.

У потомства от матерей с осложненной беременностью и коррекцией препаратом «Эссенциале» печеночные лимфатические узлы относятся к компактному типу (к/м индекс - 4,39 ± 0,08), выявлены характерные структурные преобразования, выражающиеся в увеличении площади В-зависимой зоны-14,92 %±0,6 % (потомство при осложненной беременности-12,59 %± 0,97 %) за счет возрастания размеров первичных и вторичных лимфоидных узелков и увеличении относительного числа незрелых лимфоидных клеток (в 1,6 раз) в герминативных центрах последних. Эти изменения свидетельствуют об активации пролиферативных процессов в печеночном лимфатическом узле потомства и более раннем созревании гуморального иммунитета. В печени обнаружены признаки структурного

восстановления и активации репаративных процессов, аналогичные материнским: увеличение площади неизмененных гепатоцитов, доли двуядерных гепатоцитов и площади синусоидов, уменьшение площади дистрофии и некроза, ядерно-цитоплазматического соотношения в сравнении с группой без коррекции. Сохраняется лейкоцитарная инфильтрация печени и расширение перипортальных пространств Малла. Можно предположить, что лечение матерей препаратом «Эссенциале» способствует уменьшению выраженности лимфотоксикоза в лимфатическом регионе печени, а сам препарат обладает лимфокоррегирующими свойствами, тем самым, обеспечивая активацию лимфодетоксикационных функций в лимфатических узлах потомства.

Структурное исследование печени и печеночных лимфатических узлов матери и потомства при осложненной хронической интоксикацией CCI4 беременности на фоне коррекции фитопрепаратом «ПикСил».

Энтеральное введение фитопрепарата «ПикСил» матери при беременности, осложненной хронической интоксикацией СС14, оказывает гепатопротекторное и лимфокоррегирующее действия, способствует восстановлению структурно-функциональных взаимоотношений в печеночных лимфатических узлах и печени у матери: в регионарных лимфатических узлах печени выявлено увеличение размеров В-зависимой зоны, площади вторичных лимфоидных узелков в 1,9 раз (приложение А), числа иммунобластов и средних лимфоцитов в герминативных центрах (в 2 раза по сравнению с осложненной беременностью), уменьшение отека и склерозирования стромы лимфатического узла. По-видимому, эти изменения связаны с действием биофлавоноидов, содержащихся в лекарственных растениях, которые могут вызывать повышение энергетического потенциала клеток (Григорьев В. Н., 1988). По литературным данным известно, что входящие в состав лекарственных растений биофлавоноиды и эфирные масла обладают высокой антиоксидантной активностью за счет торможения процессов липидной пероксидации и оказывают мембранстабилизирующее и протективное действие при поражениях печени (Wang X.,Yang В., 1995; Бродский А. В., 1988; Макарчук H. М., 1990).

В печени выявлено восстановление структурной организации паренхимы и кровоснабжения органа (восстановление площади синусоидов, ядерно-цитоплазматического соотношения в гепатоцитах - 0,16 ±0,02, уменьшение площади гепатоцитов с дистрофией и зон некроза), уменьшение размеров

перипортальных пространств Малла (1,3 % ± 0,05 %). Полученные данные могут свидетельствовать о том, что в условиях применения фитопрепарата «ПикСил» при осложненной беременности развивается лимфодинамический эффект и ускоряется дренаж интерстициального пространства на уровне тканевого микрорайона печени.

Энтеральное введение фитопрепарата матери при беременности, осложненной хронической интоксикацией СС14, способствует сохранению структурной организации соименных органов и у потомства, оказывая лимфокоррегирующее действие: в печеночном лимфатическом узле выявлены структурные признаки активации лимфопролиферативной функции -увеличение площади вторичных лимфоидных узелков в 3 раза, площади В-зависимой зоны лимфатического узла на 20 %, числа незрелых лимфоидных клеток в структурно-функциональных зонах по сравнению с потомством при осложненной беременности. В печени потомства выявлено сохранение структурной организации: увеличивается площадь неизмененных гепатоцитов, уменьшается площадь гепатоцитов в состоянии дистрофии, возрастает количество двуядерных гепатоцитов - 3,93 % ± 0,16 %, увеличивается количество и площадь синусоидных клеток, восстанавливаются размеры синусоидов и перипортальных пространств Малла.

Структурное исследование печени и печеночных лимфатических узлов матери и потомства при осложненной хронической интоксикацией ССЦ беременности на фоне сочетанной коррекции препаратом «Эссенциале» и фитопрепаратом «ПикСил». Сочетанное введение лекарственного препарата «Эссенциале» и фитопрепарата «ПикСил» матери при беременности, осложненной хронической интоксикацией ССЦ, в большей степени, чем при монокоррекции, способствует восстановлению цитоархитектоники и микроциркуляции в печени и в печеночных лимфатических узлах (приложение А): соотношение площадей структурно-функциональных зон в лимфатических узлах приближается к значениям, характерным для физиологической беременности: выявлено увеличение площади Т-зависимой зоны, числа иммунобластов в герминативном центре вторичных лимфоидных узелков (в 1,6 раз по сравнению с осложненной беременностью). В печени уменьшается выраженность воспалительного процесса, проявления сосудистой дистонии и стаза крови, уменьшается количество расширенных синусоидов и восстанавливаются размеры перипортальных пространств Малла (1,0 % ± 0,03 %). На фоне сочетанной

коррекции восстанавливается ядерно-цитоплазматическое соотношение в гепатоцитах (0,15 ± 0,003), значительно уменьшается некроз и дистрофия паренхиматозных клеток.

Сочетанное введение препарата «Эссенциале» и фитопрепарата «ПикСил» матери при осложненной хронической интоксикацией СС14 беременности, по-видимому, оказывает не только гепато- и лимфопротективное действие, но и лимфокоррегирующее действие на регионарные лимфатические узлы и тканевой микрорайон печени за счет активации механизмов метаболической и динамической лимфостимуляции и механизмов лимфопоэза, что выражается в структурных преобразованиях в лимфатических узлах (зональность, клеточный состав) и в печени (восстановление размеров интерстициальных пространств).

Сочетанное введение лекарственного препарата «Эссенциале» и фитопрепарата «ПикСил» матери при беременности, осложненной хронической интоксикацией ССЦ, способствует сохранению структурно-функциональной организации печеночных лимфатических узлов и печени у потомства в большей степени, чем при монокоррекции.

Печеночный лимфатический узел потомства относится к промежуточному типу (к/м индекс - 1,2 ± 0,05) также, как у потомства при физиологической беременности (во всех других экспериментальных группах печеночный узел меняет функциональную специализацию на компактный тип). Увеличивается площадь вторичных лимфоидных узелков, возрастает количество иммунобластов в герминативных центрах - 33,17% ±1,3% (у потомства осложненной беременности - 14,6% ±0,9%) и незрелых плазмоцитов в мозговых тяжах. В печени восстанавливается ядерно-цитоплазматическое соотношение в гепатоцитах, сеть неизмененных синусоидов и размеры перипортальных пространств Малла. Уменьшается дистрофия и некроз паренхиматозных клеток (изменения аналогичны материнским).

Исследование репродуктивной способности животных. Показано, что наиболее высокая общая (37,5 %) и предимплантационная (29,17 %) смертность - в группе беременных животных с хронической интоксикацией ССЦ. Самая высокая постимплантационная смертность (19,05 %) - в группе беременных животных с хронической интоксикацией ССЦ на фоне коррекции препаратом «Эссенциале». Самая низкая постимплантационная и общая эмбриональная смертность отмечена при физиологической беременности и при осложненной

хронической интоксикацией беременности на фоне сочетанной коррекции (14,82% - общая; 4,17% - постимплантационная). Указанные изменения связаны, по всей видимости, с дополнительной активацией микроциркуляторного русла плаценты (за счет высокой концентрации биофлавоноидов в фитопрепарате «ПикСил»), и соответственно, улучшением маточно-плацентарного кровообращения, а также снижением эндогенной интоксикации, развивающейся на фоне поражения печени.

Анализ результатов исследования позволяет заключить следующее: выявленные структурно-функциональные изменения печеночных лимфатических узлов и печени у матери и потомства показали, что использование лекарственного препарата «Эссенциале» и фитопрепарата «ПикСил» как при монокоррекции, так и при сочетанном применении, обладает лимфостимулирующим, лимфокоррегирующим и гепатопротекторным эффектом при беременности, осложненной хронической интоксикацией ССЦ, что является аргументом для использования этих препаратов в качестве вспомогательного средства при осложненной беременности

ВЫВОДЫ

1. Структурно-функциональная специализация печеночных лимфатических узлов матери при физиологической беременности соответствует компактному типу. На 21-е сутки физиологической беременности в регионарных лимфатических узлах печени выявлены характерные структурные преобразования, сопряженные с расширением перипортальных пространств Малла в печени: угнетение лимфопролиферативной функции (уменьшение площади Т- и В-зависимых зон, вторичных лимфоидных узелков, числа иммунобластов в герминативном центре вторичных лимфоидных узелков, количества зрелых плазматических клеток в мозговых тяжах) и лимфонаполнение печеночных лимфатических узлов (увеличение размеров мозговых и краевого синусов).

2. При беременности, осложненной хронической интоксикацией ССЦ, выявлены характерные структурные воспалительные преобразования в печени матери (изменения в стромально-сосудистом компоненте: стаз крови, лейкоцитарная инфильтрация), на фоне выраженного расширения перипортальных пространств Малла. В печеночных лимфатических узлах матери выявлено уменьшение относительной площади вторичных лимфоидных

узелков, в герминативных центрах которых уменьшается число незрелых лимфоидных клеток (иммунобласты, средние лимфоциты), на фоне расширения мозговых синусов.

3. Регионарный лимфатический узел печени потомства на 14-е сутки постнатального развития (физиологическая беременность) относится по своей структурно-функциональной специализации к промежуточному типу с выраженным преобладанием в корковом веществе первичных лимфоидных узелков. У потомства от матерей с осложненной хронической интоксикацией СС14 беременностью выявлены изменения структурно-функциональной специализации регионарных лимфатических узлов печени (компактный тип) с выраженным преобладанием вторичных лимфоидных узелков и увеличением размеров паракортикальной зоны (Т-зависимой) в структуре коркового вещества.

4. Введение препарата «Эссенциале» матери при беременности, осложненной хронической интоксикацией ССЦ, оказывает гепатопротекторное действие, вызывает усиление крове- и лимфонаполнения в печени матери и активацию лимфопролиферативных процессов в печеночных лимфатических узлах: увеличение размеров Т-зависимой зоны, вторичных лимфоидных узелков и числа незрелых лимфоидных клеток в них. В печени выявлено возрастание численной плотности неизменных гепатоцитов, уменьшение гепатоцитов в состоянии дистрофии и некроза, увеличение площади неизменных синусоидов и значительное расширение перипортальных пространств Малла.

5. У потомства (14-е сутки) от матерей с осложненной хронической интоксикацией ССЦ беременностью и коррекцией препаратом «Эссенциале» в регионарных лимфатических узлах печени выявлены характерные структурные преобразования, выражающиеся в расширении корковых промежуточных синусов, увеличении площади В-зависимой зоны за счет возрастания размеров первичных и вторичных лимфоидных узелков, числа незрелых лимфоидных клеток в герминативных центрах последних. В печени обнаружены признаки структурного восстановления и активации репаративных процессов: увеличение числа неизмененных гепатоцитов, доли двуядерных гепатоцитов, уменьшение площади дистрофии и некроза, ядерно-цитоплазматического соотношения в сравнении с группой без коррекции.

6. Энтеральное введение фитопрепарата «ПикСил» матери при беременности, осложненной хронической интоксикацией ССЦ, оказывает

гепатопротекторное и лимфокоррегирующее действия, способствует восстановлению структурно-функциональных взаимоотношений в печеночных лимфатических узлах и печени у матери: в регионарных лимфатических узлах печени выявлено увеличение размеров В-зависимой зоны, площади вторичных лимфоидных узелков, числа иммунобластов и средних лимфоцитов в герминативных центрах, уменьшение отека и склерозирования стромы лимфатического узла; в печени - восстановление структурной организации паренхимы и кровоснабжения органа (восстановление площади синусоидов, ядерно-цитоплазматического соотношения в гепатоцитах), уменьшение размеров перипортальных пространств Малла.

7. Энтеральное введение фитопрепарата «ПикСил» матери при беременности, осложненной хронической интоксикацией ССЦ, способствует сохранению структурной организации соименных органов у потомства, оказывая лимфокоррегирующее действие: в печеночном лимфатическом узле выявлены структурные признаки активации лимфопролиферативной функции -увеличение площади вторичных лимфоидных узелков, площади В-зависимой зоны лимфатического узла, числа незрелых лимфоидных клеток в структурно-функциональных зонах; в печени - сохранение структурной организации (плотность гепатоцитов, количество и площадь синусоидных клеток, размеры синусоидов).

8. Сочетанное введение лекарственного препарата «Эссенциале» и фитопрепарата «ПикСил» матери при беременности, осложненной хронической интоксикацией СС14, в большей степени, чем при монокоррекции, способствует восстановлению цитоархитектоники и микроциркуляции в печени и в печеночных лимфатических узлах. Соотношение площадей структурно-функциональных зон в лимфатических узлах приближается к значениям, характерным для физиологической беременности: выявлено увеличение площади Т-зависимой зоны, числа иммунобластов в герминативном центре вторичных лимфоидных узелков; в печени - уменьшение выраженности воспалительных изменений в паренхиме, проявлений сосудистой дистонии и стаза крови, уменьшение количества расширенных синусоидов и восстановление размеров перипортальных пространств Малла.

9. Выявлено, что сочетанное введение лекарственного препарата «Эссенциале» и фитопрепарата «ПикСил» матери при беременности, осложненной хронической интоксикацией ССЦ, приводит к снижению общей эмбриональной смертности, способствует восстановлению структурно-

функциональной организации печеночных лимфатических узлов и печени у потомства в большей степени, чем при монокоррекции: в печеночных лимфатических узлах увеличена площадь вторичных лимфоидных узелков, количество иммунобластов в герминативных центрах возрастает; в печени -увеличены площади цитоплазмы и площади ядер гепатоцитов, на фоне восстановления размеров синусоидов.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Полученные нами данные о восстановлении структурно-функциональных взаимоотношений в печеночных лимфатических узлах и печени матери при коррекции хронической интоксикации фитопрепаратом «ПикСил» позволяют рекомендовать данный фитопрепарат в качестве вспомогательного средства в лечении патологических состояний при беременности. Учитывая улучшение репродуктивной способности животных и снижение перинатальных потерь на фоне применения фитопрепарата «ПикСил», возможно рекомендовать использование данного фитопрепарата в акушерстве при комплексном лечении нарушений фетоплацентарного комплекса. Результаты сочетанного применения препарата «Эссенциале» и фитопрепарата «ПикСил» (улучшение метаболизма клеток печени, восстановление структурно-функциональной организации регионарных лимфатических узлов) позволяют расширить схемы вспомогательной терапии у женщин, страдающих токсическим гепатитом, в условиях реабилитационных отделений и санаторно-курортных учреждений.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Копылова JI. Е. Морфологическое исследование печени крыс при беременности, осложненной токсическим гепатитом и у потомства / JI. Е. Копылова, Е. В. Старкова, Н. Н Бурчак // Морфология. - № 3. - Том 133. -2008.-С. 55.

2. Копылова Л. Е. Лимфатический регион печени матери и потомства при беременности, осложненной действием экотоксикантов / Л. Е. Копылова, Е. В.Старкова, В. В. Асташов // Бюллетень Сибирского отделения РАМН. -№5(133).- Новосибирск, 2008. - С. 41 -46.

3. Старкова Е В. Лимфатический регион при действии дестабилизирующих факторов в онтогенезе / Е. В. Старкова, Л. Е. Копылова, Л. М. Узварик, Н. Н. Бурчак, В. В. Асташов // Вестник лимфологии. - № 2. - Москва, 2008. -С. 31-32.

4. Копылова Л. Е. Обоснование использования фитосборов для коррекции токсического гепатита у беременных (экспериментальное исследование) / Л Е. Копылова, Е.В.Старкова, H.H. Бурчак // Сибирский консилиум. - № 4 (59).

- Новосибирск, 2007. - С.43-44.

5. Старкова Е.В. Лимфоидные органы при беременности у животных -геронтов и на фоне ведения фитокомплексов / Е. В Старкова, Л. Е. Копылова, H.H. Бурчак // Сибирский консилиум.-№ 7 (62). - Новосибирск, 2007. -С.237-238.

6. Старкова Е.В. Исследование факторов «малой интенсивности» на лимфатическую систему в онтогенезе / Е. В. Старкова, Л. М. Узварик, В. В. Асташов, Л. Е. Копылова // Проблемы лимфологии и интерстициального массопереноса : материалы научной конференции с международным участием.

- Новосибирск, 2004. - Т. 1. - С. 96 - 99.

7. Копылова Л Е. Исследование лимфатического региона печени при беременности, осложненной токсическим гепатитом / Л. Е. Копылова, Е. В. Старкова, В. В. Асташов // II съезд лимфологов России : тезисы докладов и сообщений. - Санкт-Петербург, 2005. - С. 157-159.

8. Старкова Е. В. Лимфатический регион печени при беременности, осложненной токсическим гепатитом в условиях коррекции лекарственными

препаратами / Е. В. Старкова, JI. Е. Копылова, Н. В. Белова, В. В. Асташов // Проблемы экспериментальной, клинической и профилактической лимфологии : материалы I Сибирского съезда лимфологов с международным участием. -Новосибирск, 2006. - С. 315-317.

9. Starkova Е. V. Investigations of lymphoid organs during pregnancy in animals of the senior age group and under condition of use of phytocomplexes with the raised maintenance of phytohormones / E. V Starkova, L. E. Kopylova, N. N Burchak // Euromedica: Internationaler Kongress Fachmesse. - Hannover, 2007.-P. 68-69.

10. Копылова Л. E. Морфологическое исследование печени крыс при беременности, осложненной токсическим гепатитом, у потомства и на фоне диеткоррекции / Л. Е. Копылова, Е. В. Старкова, H. Н. Бурчак // Фундаментальные проблемы лимфологии и клеточной биологии : материалы международной конференции. - Новосибирск, 2008.-Том 1, —С. 192-194.

ПРИЛОЖЕНИЕ А

Относительные размеры структурно-функциональных зон печеночного лимфатического узла матери при физиологической и осложненной беременности в условиях фармако- и фитокоррекци (х 8х) (%)

Структурно-функциональные зоны Экспериментальные группы

Интакт.самки (контроль) Физиологич. беременность Беременность + ССЦ Беременность + ССЦ + «Эссенциале» Беременность + ССЦ + «ПикСил» Беременность + ССЦ + «Эссенциале» + «ПикСил»

Герминативный центр 1,88 ±0,28 0,88 ± 0,05а 0,85 ± 0,05а 1,22 ±0,05 1,77 ±0,1 0,61±0,02

Корона 1,38 ±0,27 0,62 ± 0,02о 0,62 0,02п 0,99 0,03 1,79 0,12 0,43 0,01

Вторичные лимфоидные узелки 3,26 ± 0,27 1,5 ± 0,04а 1,47 0,04а 2,21 0,08 3,56 0,11 1,04 0,02

Первичные лимфоидные узелки 0,56 ± 0,03 0,9 ± 0,09 0,90 0,09 1,15 0,12 1,88 0,19 1,12 0,12

Межузелковая зона 2,22 ± 0,33 3,91 ± 0,55п 3,91 0,55а 8,12 0,52 8,3 0,41 . 1,00 0,16

Паракортикальная зона (Т-зона) 61,67 ± 1,26 57,6 ± 1,92п 57,64 1,92а 68,4 1,65 56,7 1,4 61,21 1,48

Мозговые тяжи 18,82 ±0,69 17,31 ± 1,2 17,31 1,2 9,93 0,5 16,45 0,78 17,60 0,61

Мозговые синусы 11,63 ±0,5 13,7 ± 0,77п 13,78 0,77а 6,61 0,45 10,04 0,78 13,17 0,87

Капсула 1,22 ±0,21 2,31 ±0,23 □ 2,32 0,23а 1,45 0,14 1,84 0,19 2,24 0,35

Трабекулы 0,01 ±0,001 0,5 ± 0,02а 0,50 0,02а 0,1 ±0,01 0,1±0,01 0,73 0,05

Краевой синус 0,2 ±0,01 1,57 ± 0,09а 1,57 0,09а 1,50 0,2 1,0 0,02 1,6 0,05

Промежуточный синус 0,32 ± 0,06 0,59 ±0,06 0,59 ± 0,06 0,62 ± 0,07 0,19 ±0,06 0,3 ± 0,08

Корковое вещество 67,71 ±0,5 63,91 ± 0,65а 63,92 ± 0,65а 79,88 ±0,61 70,44 ± 0,53 64,37 ± 0,45

Мозговое вещество 30,45 ± 0,8 31,01 ±0,9 31,09 ±0,9 16,54 ±0,5 26,49 ± 0,78 30,77 ± 0,74

В-зона 22,64 ± 0,7 19,71 ±0,44о 19,68 ± 0,44а 13,29 ±0,23 21,89 ±0,36 19,76 ±0,25

Корково-мозговой индекс 2,22 ± 0,08 2,06 ± 0,08 2,05 ± 0,08 4,83 ± 0,26 2,66 ± 0,08 2,09 ± 0,09

о - отличия достоверны в сравнении с интактными небеременными самками (контролем) при Р 0,05

- отличия достоверны в сравнении с физиологической беременностью при Р 0,05

- отличия достоверны в сравнении беременностью, осложненной хронической интоксикацией ССЦ без коррекции при Р 0,05

Отпечатано в типографии Новосибирского государственного Технического университета 630092, г. Новосибирск, пр. К. Маркса, 20, тел./факс: (383) 346-08-57 формат 60x84 1\16, объем 1.5 пл., тираж 100 экз. заказ № 135 подписано в печать 03.09.09 г.

Актуальность исследования.

Одной из наиболее актуальных проблем современной экологической медицины и в частности, экологической и восстановительной лимфологии, является хроническая и острая экзогенная интоксикация. Возникновение и развитие хронической экзогенной'интоксикации вызывает стереотипные реакции со стороны организма: нарушение гемодинамики и процессов проницаемости, изменение функции дыхательных ферментов, метаболический и циркуляторный ацидоз. В подобных условиях наиболее часто поражается' печень — один из важнейших органов'поддержания гомеостаза и детоксикации организма,-а также ее регионарный лимфатический аппарат, через который оттекает до 70% лимфы, поступающей в цистерну грудного лимфатического протока (Бородин Ю. И., Мичурина С. В., 1998). В настоящее время хронические заболевания печени; обусловленные попаданием в. организм токсикантов из окружаю--щей среды, относят к экологически зависимой патологии (Колесников С. И., Мичурина С. В. с соавт., 1986, 1995).

Поскольку именно в гепатоцитах осуществляется метаболизм стероидных гормонов, то при наличии патологического процесса в печени, возможно нарушение гормонального баланса и, соответственно, процессов оплодотворения, наступления и течения беременности. Беременность, являющаяся своеобразной дополнительной нагрузкой для всего женского организма, также влияет и на функцию печени и ее регионарный лимфатический аппарат.

В" связи с этим является актуальным изучение структурной организации регионарных лимфатических узлов печени при физиологической беременности, что позволит оценить состояние их дренажно-детоксикационной и лимфопро-лиферативной функций. Благодаря выраженным адаптационным возможностям печени, у большинства женщин при физиологической беременности не возникают функциональные расстройства и морфологическое её поражение (Белякова F. И., 1998; Серов В. И., 2001; Varma R. R., 1987). Беременность на фоне патологии: печени всегда протекает с осложнениями, такими: как: угроза прерывания, недонашивание, токсикозы, слабость родовой деятельности, акушерские кровотечения,. внутриутробная асфиксия плода (Безнощен-ко Г. Б., 2004; Hieber Ji Р, 1977; Schreyer P., 1982; Riley С. A., 1987). В свою очередь беременность также влияет на течение патологического процесса в печени.

В соответствии с концепцией Ю. И. Бородина (1989) - морфофункцио-нальный статус лимфатического узла может рассматриваться в качестве маркера средового прессинга на лимфатическую систему и? компенсаторно-приспособительных реакций: в организме. В связи с этим, исследование регионарных лимфатических узлов печени; при; хронической интоксикации тетра-хлорметаном и этанолом на; фоне беременности позволитвыявить особенности их: структурной организации; отражающие степень выраженности лимфотокси-коза.в тканевом микрорайоне печени. В? литературе отсутствуют точные количественные данные о структуре печени и ее: регионарных:лимфатических узлах при беременности на фоне хронической! интоксикации тетрахлорметаном'.

Результаты исследований ВОЗ позволили отнести тетрахлорметан (четы-реххлористый углерод) к наиболее приоритетным экотоксикантам окружающей среды и - потенциально канцерогенным для человека веществам. Экспериментально доказано, что гепатит, вызываемый, введением:тетрахлорметана, по многим показателям сходен с клиническими, формами гепатитов; аг печень является органом, наиболее подверженным его воздействию- (Шкурупий В. А., 1973;. Скакун Н. П. с соавт., 1989, 1992; Султанова JI. И., 1989; Колпаков М. А., 2001 и: др:). Исследования регионарных лимфатических узлов печени при хронической интоксикации тетрахлорметаном, проведенные рядом авторов (Шарайки-наЕ. П., 1976, 1978; Мичурина С. В., 1995; Ищенко И. Ю., 2003; Юро-ва Е. Г., 2003) свидетельствуют о выраженном угнетении их дренажной и лим-фопролиферативной функции.

Не смотря на развитие фармакологии, спектр фармакологических препаратов, обладающих гепатопротекторным действием, обновляется: медленно. Одним из наиболее распространенных препаратов, используемых в медицине как гепатопротектор, является «Эссенциале». Отсутствие литературных данных делает актуальным изучение воздействия фармакологического препарата «Эссенциале» на печень и ее регионарные лимфатические узлы при беременности, осложненной хронической экзогенной интоксикацией, а также исследование данных объектов у потомства в раннем постнатальном онтогенезе. В комплексе методов дренажа интерстиция широко используются биологически активные добавки к пище (БАД к пище), обладающие лимфокоррегирующими и лимфо-стимулирующими свойствами (Ю; И. Бородин, 2000), за счет высокого содержания растительных биофлавоноидов,, витаминов и микроэлементов. Применение специально подобранных фитопрепаратов, обладающих свойствами лим-фостимулятора и стимулятора внешнего дренажа, при хронической интоксикации приводит к активации дренажно-детоксикационных функций печеночных и брыжеечных лимфатических узлов(Юрова Е. Г., 2003).

Вопрос об использовании фитопрепарата, содержащего растениях анти-оксидантным и гепатопротекторным действием (БАД к пище «ПикСил») для коррекции структуры печени и лимфатических узлов при беременности, осложненной хронической экзогенной интоксикацией, нигде не освещался, хотя, известно, что введение антиоксидантов резко уменьшает токсическое действие тетрахлорметана, предотвращая развитие некроза (Зыков А. А., 1989; InderR. Е., 1999). Этот вопрос является актуальным ещё и потому, что в настоящее время-все большее внимание клиницистов привлекают немедикаментозные методы коррекции патологических процессов в акушерстве (Радзин-ский В. Е., 1998; Серов В. Н., 2001; Владимиров А. А. с соавт., 2004).

Отсутствие научных данных об особенностях структурных преобразований в печени и печеночных лимфатических узлах при беременности, осложненной хронической экзогенной интоксикацией в условиях сочетанной фарма-ко- и фитокоррекции явилось основанием для выполнения исследования и обусловливает актуальность работы с теоретической и практической точек зрения.

Цель работы.

Выявить морфофункциональные преобразования печени и печеночных лимфатических узлов матери и потомства при физиологической и осложненной хронической интоксикацией CCL4 беременности в условиях фармако- и фитокоррекции.

Задачи:

1. Изучить морфофункциональное состояние печени и печеночных лимфатических узлов матери и> потомства (14 суток) при, физиологической и. осложненной хронической интоксикацией тетрахлорметаном беременности.

2. Исследовать морфофункциональное состояние печени и печеночных лимфатических узлов, матери и потомства (14 суток) при беременности, осложненной хронической интоксикацией тетрахлорметаном на фоне коррекции фармпрепаратом «Эссенциале».

3. Изучить морфофункциональное состояние печени и печеночных лимфатических узлов матери и потомства (14 суток) при беременности, осложненной хронической интоксикацией тетрахлорметаном на фоне коррекции фитопрепаратом «ПикСил».

4. Исследовать морфофункциональное состояние печени и печеночных лимфатических узлов матери и потомства (14 суток) при беременности, осложненной хронической интоксикацией тетрахлорметаном в условиях сочетанной коррекции фармпрепаратом «Эссенциале» и фитопрепаратом «ПикСил».

Новизна исследования.

В работе впервые представлены точные данные о строении печени и её регионарного лимфатического узла у потомства в раннем постнатальном онтогенезе (14-е сутки), проведен сравнительный структурный анализ печени матери и потомства, выявлены особенности строения печеночного лимфатического узла у потомства.

В работе впервые выявлены, особенности структурных преобразований в печени (изменения в паренхиме, интерстициальном и стромалыю-сосудистом компоненте) и печеночных лимфатических узлах (зональность, клеточный состав): при беременности; осложненной хронической интоксикацией СС14.

В работе показано, что/ при осложненной? хронической; интоксикацией ССЕ4 беременности'структурные преобразования в печеночных лимфатических узлах и печени у матери и потомства? (14 суток) однотипны и однонаправлены. Это позволяет прогнозировать патологические изменения5 в органах и обосновывает применение средств гепато- и лимфокоррекции при осложненной'беременности.

В работе впервые доказано, что; гепатопротекторный препарат «Эссенциале» усиливает крово- и лимфонаполнение печени (перипортальные пространства Малла), активирует лимфопролиферативные процессы в «печеночных лимфатических* узлах (зональность, клеточный состав) матери и потомства при-беременности; осложненной хроническо№интоксикацией (ЗС14.

Впервые показано, что фитопрепарат «ПикСил» обладает как гепатопро-текторпым действием; (восстановление', структуры печени), так; и лимфостиму-лирующим и лимфокорригирующим действиями, (зональность, клеточный состав) на печеночные лимфатические узлы-; матери и потомства при беременности; осложненной хронической интоксикацией CCli,.

В работе впервые представлены данные, свидетельствующие о• синергич-ностис действия, лекарственного препарата «Эссенциале» и фитопрепарата «Пиксил» по 1 восстановлению структурно-функциональных взаимоотношений в; печеночных лимфатических узлах и печени; матери и потомства при; осложненной хронической интоксикацией;СС14 беременности.

Теоретическая и практическая значимость.

Изучение особенностей морфофункциональных преобразований печени и печеночных лимфатических узлов матери при физиологической беременности расширяет и дополняет представления о течении беременности и функциональных изменениях в организме беременных.

Обнаруженные характерные структурные преобразования в печеночных лимфатических узлах, паренхиме и строме печени матери и потомства при беременности, осложненной хронической интоксикацией CCI4 позволят производить адекватный подбор лекарственных средств для коррекции функций^ лимфатической системы, профилактики повреждений тканевого микрорайона печени.

Полученные нами структурные данные об усилении крово- и лимфонапол-нения печени, активации Т-зависимого звена иммунного ответа в печеночных лимфатических узлах матери на 21 сутки беременности, осложненной хронической интоксикацией CCI4 в условиях введения препарата «Эссенциале» позволяют сделать заключение о ценности этого способа коррекции для практического здравоохранения и целесообразности его дальнейшего изучения.

Восстановление структурно-функциональных взаимоотношений в печеночных лимфатических узлах и печени матери на 21 сутки беременности, выявленные нами* при коррекции хронической интоксикации CCI4 фитопрепаратом «ПикСил», является аргументом для использования этого препарата в качестве вспомогательного средства в лечении.гепатитов при беременности.

Результаты исследования сочетанного использования препаратов (лекарственный препарат «Эссенциале» и фитопрепарат «ПикСил») для коррекции хронической интоксикации при беременности показали перспективность применения данного метода в восстановительной медицине и профилактической лим-фологии, направленного на улучшение метаболизма клеток печени, восстановление структурно-функциональной организации регионарных лимфатических узлов и усиление дренажно-детоксикационного потенциала в лимфатическом регионе.

Результаты работы позволяют разработать, и расширить схемы вспомогательной терапии у женщин, страдающих токсическим гепатитом; в условиях реабилитационных отделений и санаторно-курортных учреждений.

Внедрение результатов работы в практику.

Фитопрепарат. «ПикСил» в качестве вспомогательного средства внедрен в комплекс лечебно-реабилитационных мероприятий; терапевтических отделений санатория «Парус» для пациенток,, страдающих заболеваниям печени (630510, НСО, пос. Кудряшовский,ул- Береговая 56, филиал ОАО НПО «Сибсельмаш», санаторий «Парус»). Результаты; исследования морфофункциональных; преобразований печени и печеночных лимфатических узлов матери и по томства при физиологической и осложненной беременности внедрены в практику научно-исследовательской; работы; лаборатории ультраструктурных исследований НИИКиЭЛ СО РАМН (630117, г. Новосибирск, ул. Академика Тимакова, 2). Данные об особенностях структурной; организации печени и печеночных лимфатических узлов матери и потомства при физиологической и осложненной беременности в условиях фармако- и фитокоррекции используются в учебном процессе на кафедре фундаментальной» медицины медицинского факультета НГУ по курсу топографической- анатомии и оперативной хирургии (630090, г. Новосибирск, ул. Пирогова 2).

Положения; выносимые на защиту:.

1. Печеночные лимфатические узлы матери (21-е сутки,беременности) и потомства (14 суток) различаются по своей структурно-функциональной специализации (компактный и промежуточный: тип строения соответственно); анатомической организацией коркового вещества; в печени матери на 21-е сутки физиологической беременности увеличиваются размеры перипортальных пространств Малла.

2. Хроническая^ интоксикация СС14 при беременности приводит к подавлению лимфопролиферативной функции (уменьшение размеров вторичных лимфоидных узелков, числа незрелых лимфоидных клеток) в печеночном лимфатическом узле и расширению перипортальных пространств Малла в печени матери, а у потомства (14 суток) изменяет тип структурно-функциональной специализации печеночного лимфатического узла.

3. Монокоррекция препаратами «Эссенциале» и «ПикСил» при осложненной хронической интоксикацией CCU беременности активирует лимфо-пролиферативную функцию печеночного лимфатического узла матери и потомства (увеличение размеров Т-и В зон, числа незрелых лимфоидных клеток), репаративные процессы в печени (увеличение доли диплокарио-цитов, ядерно-цитоплазматического соотношения, восстановление размеров синусоидов), вызывает изменение размеров перипортальных пространств Малла в печени матери.

4. Сочетанное применение препаратов «Эссенциале» и «ПикСил» при беременности, осложненной интоксикацией CCI4, способствует выраженному восстановлению структуры печеночного лимфатического узла (соотношение Т- и В-зависимых зон, клеточный состав, стромально-паренхиматозное соотношение), печени (уменьшение очагов дистрофии и некроза, расширенных синусоидов, восстановление размеров перипортальных пространств Малла) у матери и потомства.

ВЫВОДЫ

1. Структурно-функциональная специализация печеночных лимфатических узлов матери при физиологической беременности соответствует компактному типу. На 21-е сутки физиологической беременности в регионарных лимфатических узлах печени выявлены характерные структурные преобразования, сопряженные с расширением перипортальных пространств Малла в-печени: угнетение лимфопролиферативной функции (уменьшение площади Т- и В-зависимых зон, вторичных лимфоидных узелков, числа иммунобластов-в» герминативном центре вторичных лимфоидных узелков, количества зрелых- плазматических клеток в мозговых тяжах) и лимфонаполнение печеночных лимфатических узлов (увеличение размеров мозговых и краевого синусов):

2. При беременности, осложненной хронической интоксикацией СС14, выявлены характерные структурные воспалительные преобразования в печени матери (изменения в стромально-сосудистом* компоненте: стаз крови, лейкоцитарная инфильтрация), на фоне' выраженного^ расширения4 перипортальных пространств Малла: В печеночных лимфатических узлах матери выявлено уменьшение относительной площади вторичных лимфоидных узелков, в герминативных центрах которых уменьшается* число незрелых лимфоидных клеток (иммунобласты, средние лимфоциты), на фоне расширения мозговых синусов.

3. Регионарный лимфатический узел печени потомства на 14-е сутки постнатального развития (физиологическая беременность) относится по* своей структурно-функциональной специализации к промежуточному типу, с выраженным преобладанием в корковом веществе первичных лимфоидных узелков. У потомства от матерей с осложненной хронической интоксикацией СС14* беременностью, выявлены изменения структурно-функциональной специализации регионарных лимфатических узлов печени (компактный тип) с выраженным преобладанием вторичных лимфоидных узелков и увеличением размеров паракортикальной зоны (Т-зависимой) в структуре коркового вещества. ч\

4. Введение препарата «Эссенциале» матери при беременности, осложненной хронической интоксикацией ССЦ, оказывает гепатопротекторное действие, вызывает усиление крово- и лимфонаполнения в печени матери и активацию лимфопролиферативных процессов в печеночных лимфатических узлах: увеличение размеров Т-зависимой зоны, вторичных лимфоидных узелков и числа незрелых лимфоидных клеток в них. В печени выявлено возрастание численной плотности неизменных гепатоцитов, уменьшение гепатоцитов в состоянии дистрофии и некроза, увеличение площади неизменных синусоидов и значительное расширение перипортальных пространств Малла.

5. У потомства (14 суток) от матерей с осложненной хронической интоксикацией ССЦ беременностью и коррекцией препаратом «Эссенциале» в регионарных лимфатических узлах печени выявлены характерные структурные преобразования, выражающиеся в расширении корковых промежуточных синусов, увеличении площади В-зависимой зоны за счет возрастания размеров первичных и вторичных лимфоидных узелков, числа, незрелых лимфоидных клеток в герминативных центрах последних. В печени обнаружены признаки-структурного восстановления и активации репаративных процессов — увеличение числанеизмененпых гепатоцитов и доли двуядерных гепатоцитов, уменьшение площади дистрофии и некроза, ядерно-цитоплазматического соотношения в сравнении с группой без коррекции.

6. Энтеральное введение фитопрепарата «ПикСил» матери при беременности, осложненной хронической интоксикацией ССЦ, оказывает гепатопротекторное и лимфокоррегирующее действия, способствует восстановлению структурно- функциональных взаимоотношений в печеночных лимфатических узлах и печени у матери: в регионарных лимфатических узлах печени выявлено увеличение размеров В-зависимой зоны, площади вторичных лимфоидных узелков, числа иммунобластов и средних лимфоцитов в герминативных центрах, уменьшение отека и склерозирования стромы лимфатического узла. В печени - восстановление структурной организации паренхимы и кровоснабжения органа (восстановление площади синусоидов, ядерно-цитоплазматического соотношения в гепатоцитах), уменьшение размеров ^перипортальных пространств-Малла.

7. Энтеральное введение фитопрепарата «ПикСил» матери при беременности, осложненной хронической интоксикацией CCI4, способствует сохранению структурной организации соименных органов у потомства (14 сут.), оказывая лимфокоррегирующее действие: в печеночном лимфатическом узле выявлены, структурные признаки активации лимфопролиферативной функции -увеличение площади вторичных лимфоидных узелков, площади В-зависимой зоны,лимфатического узла, числа незрелых лимфоидных» клеток, в структурно-функциональных зонах; в печени - сохранение структурной* организации/ (плотность гепатоцитов, количество и площадь синусоидных клеток, размеры синусоидов).

8. Сочетанное введение лекарственного1 препарата «Эссенциале»- и фитопрепарата «ПикСил» матери при беременности, осложненной хронической интоксикацией ССЦ, в большей степени, чем при монокоррекции; способствует восстановлению цитоархитектоники и микроциркуляциигв печени.и вшече-ночных лимфатических узлах: соотношение площадей структурно-функциональных зон в лимфатических узлах приближается к значениям, характерным для физиологической беременности: выявлено увеличение площади Т-зависимой зоны, числа иммунобластовг в герминативном центре вторичных лимфоидных узелков. В. печени - уменьшение выраженности воспалительных изменений в паренхиме, проявлений сосудистой дистонии и стаза крови, уменьшение количества расширенных синусоидов и восстановление размеров перипортальных пространств Малла.

9. Выявлено, что сочетанное введение лекарственного препарата «Эссенциале» и фитопрепарата «ПикСил» матери при беременности; осложненной хронической интоксикацией ССЦ, приводит к снижению общей' эмбриональной смертности, способствует восстановлению структурно-функциональной организации печеночных лимфатических узлов и- печени у потомства (14 сут.) в большей степени, чем при монокоррекции: в печеночных лимфатических узлах увеличена площадь вторичных лимфоидных узелков, количество иммунобластов в герминативных центрах возрастает. В печени — увеличены площади цитоплазмы и площади ядер гепатоцитов, на фоне восстановления размеров синусоидов. Л

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Результаты проведенных нами исследований показали, что при физиологической беременности имеет место подавление лимфопролиферативной и активация дренажной функций регионарного лимфатического узла печени материнского организма. При физиологической беременности морфологическая структура печени у матери сохраняется, однако имеются характерные особенности строения, обусловленные, по-видимому, активизацией обменных процессов и изменением гемодинамики при беременности.

Регионарный лимфатический узел печени 14-ти суточного потомства при физиологической беременности отличается отсутствием вторичных лимфоидных узелков, что может свидетельствовать о незрелости гуморального звена иммунного ответа. В печени потомства при физиологической беременности определяются; очаги кроветворения, выявлено уменьшение размеров гепатоцитов^ и.увеличение ядерно-цитоплазматического соотношения в них.

Выявлена взаимосвязь структурных преобразований соименных органов матери и потомства-при беременности, осложненной, хронической интоксикацией ССЦ. что можно предположительно объяснить наличием внегенетиче-ских механизмов; передачи «родительского эффекта» на - потомство, обусловленных условиями жизни матери. В печени 14-ти суточного потомства при осложненной хронической интоксикацией ССЦ. беременности происходят характерные деструктивные изменения паренхимы, аналогичные материнским, в лимфатическом узле печени потомства, выявлены структурные признаки^более раннего созревания Т-клеточного и гуморального звена иммунногоютветаг

На основании выполненных, нами; исследований» можно заключить,, что использованные, нами лекарственный препарат «Эссенциале»' и фитопрепарат «ПикСил» обладают лимфостимулирующими, лимфокоррегирующими и гепа-топротективными эффектами при беременности, осложненной хронической интоксикацией ССЦ. Фитопрепарат «ПикСил» активирует репаративные процессы в печени и способствует, выраженному восстановлению морфологической структуры печени матери и потомства^ а также обладает лимфостимули-рующим и лимфокоррегирующим действием, что" выражается; в морфофунк-циональных преобразованиях лимфатических узловшечени;матери.ишотомства. Результаты работы свидетельствуют о синергичности действия'лекарственного препарата «Эссенциале» и фитопрепарата «ПикСил», так как при сочетанной коррекции этими препаратами выявлено наиболее интенсивное восстановление морфологической структуры печени и уменьшение выраженности воспалительного процесса. Сочетанное применение «Эссенциале» и фитопрепарата «ПикСил» наиболее благоприятно и для потомства, что отражается на снижении общей эмбриональной смертности, восстановлении структуры печени и печеночных лимфатических узлов потомства.