Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Разработка иммуноферментных тест-систем для выявления антител к вирусам простого герпеса и цитомегалии и их апробация на клиническом материале
- Ученая степень
- кандидата биологических наук
- ВАК РФ
- 14.00.36
Автореферат диссертации по медицине на тему Разработка иммуноферментных тест-систем для выявления антител к вирусам простого герпеса и цитомегалии и их апробация на клиническом материале
гз од
На правах рукописи
КУЗЕНКОВА Александра Владимировна
'АЗРАБОТКА ИММУНОФЕРМЕНТНЫХ ТЕСТ-СИСТЕМ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К ВИРУСАМ ПРОСТОГО ГЕРПЕСА И ЦИТОМЕГАЛИИ И ИХ АПРОБАЦИЯ НА КЛИНИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ
14.00.36 - АЛЛЕРГОЛОГ ИЯ И ИММУНОЛОГИЯ 03.00.06 - ВИРУСОЛОГИЯ
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук
Санкт-Петербург 1998
Работа выполнена в С а акт- П ст ер бург ск ом научно-исследовательском институте вакцин и сывороток Министерства Здравоохранения Российской Федерации.
Научные руководители: доктор медицинских наук В.Б.Климович доктор медицинских наук Л.А.Зазимко
Официальные оппоненты: доктор биолошческнх наук А.В.Полевщиков доктор медицинских наук М.А.Бичурина
Ведущее учреждение-. Научно-исследовательский инештут детских инфекции Министерства Здравоохранения Российской Федерации
Защита состоится «/*>» М&^и 1998 г. в /А . часов на заседаш Диссфтационного Совета Д 001.23.02 по защите днссфтащш на сонск 1ше ученоГг степени доктора наук при Научно-исследовательском инст туте эксифиментальной меддщнны РАМН (197376, г.Санкт-Петсрбург, у Академика Павлова, 12).
С диссфтацней мошю ознакомиться в научной библиотеке Научнс исследовательского ннстшута зкепфиментальной медицины РАМН.
Автореффат разослан « 1998 г.
Ученый секретарь Диссертационного Совета, доктор медицинских наук
Л.А.БУРОВА
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ
Вирус простого герпеса (ВПГ) и цитомегаловирус (ЦМВ) способны длительно персистировать в организме человека и реактивироваться при снижении иммунной защиты, что может приводить к развитию таких серьезных заболеваний как энцефалит, кератит, кератоконъюнктивит, гепатит, экзема, стоматит и других [Roizman В. et al., 1993]. Клинические формы герпетической и цитомега-ловирусной инфекций (ВПГИ и ЦМВИ) отличаются разнообразием как по симптоматике, так и по тяжести течения. ВПГ поражает слизистые оболочки, кожные покровы, глаза, печень, центральную нервную систему [Баринскнй И.Ф. и др., 1986]. Способность ВПГ и ЦМВ проникать через плацентарный барьер ведет к внутриутробной передаче инфекции, что часто приводит к невынашиванию беременности, врожденной патологии плода и высокой смертности новорожденных [Carmack М.Л. & Prober C.G., 1993; Raynor B.D., 1993]. ВПГИ и ЦМВИ часто являются причинами летально завершающихся пневмоний у реципиентов костного мозга и других органов и тканей, а также развития вторичной инфекции у лиц, больных СПИД [Ball C.L., 1992; Levin M.J., 1993; Boeckh M. & Bowden R., 1995; Dunn J. P. & Jabs D.A., 1995-6].
Распространенность ВПГИ и ЦМВИ различна в развивающихся и индустриально развитых странах [Roizman В. et al., 1993]. В России инфицированность населения в целом, а также лиц, относящихся к группам риска, изучена недостаточно [Баринскнй И.Ф. и др., 1986; Сухих Т.Т. и др., 1992; Долгих Т.И. и др., 1994; Исаков В.А., Сафронова М.М., 1997]. Тем не менее, подобные исследования весьма актуальны, так как ослабление иммунной защиты, связанное с ухудшением экологических и социально-экономических условий жизни, приводит к развитию различных инфекций, в том числе герпесвнрусных.
Одним из достоверных свидетельств острой инфекции является наличие в сыворотке вирусспецифических IgM-антител [Диодрица C.B., 1989; Drew L.W., 1988]. Рядом зарубежных фирм выпускаются иммуноферментные тест-системы для определения IgM-, IgG-, IgA-антител к ВПГ и ЦМВ, стоимость которых часто превышает покупательную способность российского здравоохранения. В то же время в связи с возросшей актуальностью герпетических инфекций необходим широкий выбор диагностических средств, количество которых должно быть достаточным для обеспечения вирусологических лабораторий. Указанные обстоятельства определяют актуальность создания тестов для выявления ВПГ- и
ЦМВ-специфических антител в сыворотке человека. К простым, быстрым и надежным методам, на основе которых могут быть разработаны подобные препараты, следует отнести иммунофермеитный анализ.
В настоящее время остается актуальным поиск дополнительных диагностических маркеров герпетической инфекции [Roizman В. et al., 1993; Weber В. et al., 1993]. В этой связи перспективным представляется изучение роли антител, относящихся к разным подклассам IgG, в гуморальном иммунитете против вируса простого герпеса.
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ
Цель настоящего исследования заключалась в разработке иммунофермент-ных тест-систем для выявления антител к вирусам простого герпеса и цитомега-лии и их апробации на клиническом материале.
Для достижения поставленной цели требовалось решить следующие задачи:
1. Получить вирусные антигены и оптимизировать условия проведения им-муноферментного анализа для выявления антител к вирусам простого герпеса и цитомегалии.
2. Апробировать разработанные тест-системы на клиническом материале, оценить их специфичность и чувствительность.
3. Изучить с помощью разработанных тест-систем и других диагностических методов распространенность вируса простого герпеса и определить частоту обострений герпетической и цитомегаловирусной инфекций среди людей, проходивших обследование в вирусологических лабораториях г.Санкт-Петербурга.
4. Изучить содержание антител разных подклассов IgG, специфичных к вирусу простого герпеса, и оценить их диагностическое значение.
ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ:
1. На основе препаратов очищенных вирусов и моноклональных антител против иммуноглобулинов человека разработана технология приготовления тест-сист ем для выявления в сыворотках крови людей антител классов IgG, IgM и подклассов IgGl, IgG3, IgG4 против вирусов простого герпеса и цитомегалии. Специфичность и чувствительность разработанных тест-систем доказаны сравнением с аттестованными диагностическими наборами и подтверждены результатами их апробации на клиническом материале.
2. При выявлении вирусспсцифических антител определена распространенность вируса простого герпеса и частота обострений герпетической и цитомега-
ловирусной инфекций среди людей, проходивших обследование в вирусологических лабораториях г.Санкт-Петербурга.
3. Среди подклассов (1цС1, 1цОЗ, специфичных к вирусу просто-
го герпеса, антитела 1цСЗ имели наибольший удельный вес. При острой герпетической инфекции, свидетельством которой является наличие а сыворотке ви-русспсцифических ^М-антител, отмечено увеличение содержания антител подкласса ^01, что может служить дополнительным диагностическим маркером инфекции.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ
Впервые на основе моноклональных антител к иммуноглобулинам человека разработаны отечественные иммуноферментные тест-системы для выявления антител классов ^М, 1уС и подклассов 1, ^вЗ, ¡804 к вирусам простого герпеса и цитомегалии.
Впервые определен удельный вес антител подклассов ^ОЗ, 1§04)
против вируса простого герпеса у гаодей разных групп (беременных женщин, новорожденных, детей, взрослых). Выявлено увеличение содержания антител подкласса ^01 в острой стадии герпетической инфекции.
Установлена распространенность вируса простого герпеса и определена частота обострений герпетической и цитомегаловирусной инфекций среди людей разных возрастных групп, проходивших обследование в вирусологических лабораториях г.Санкт-Петербурга в период 1994-1997 гг.
ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ РАБОТЫ
Разработанные иммуноферментные тест-системы для выявления антител класса ^М к вирусам простого герпеса и цитомегалии в сыворотках людей могут быть использованы для диагностики острых герпетической и цитомегаловирусной инфекций при урологической, акушерско-гинекологической, венерологической патологии, а также у больных, страдающих системными заболеваниями крови, СПИД и др.
Разработанные иммуноферментные тест-системы для выявления антител класса ^О к вирусам простого герпеса и цитомегалии можно применять для диагностики острых инфекций по 4-кратному и более нарастанию ^в-антител в парных сыворотках, оценки эффективности вакцинации, проведения сероэпиде-миологических исследований.
Разработаны проекты Научно-технической документации на "Тест-систему иммуноферментную для выявления антител класса М к вирусам простого герпеса 1 и 2 серотипов" и "Тест-систему иммуноферментную для выявления антител класса М к цитомегаловирусу человека". В отделе биологического контроля НИИ вакцин и сывороток проведен контроль 6 экспериментально-производственных серий каждой тест-систсмы.
АПРОБАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ
Результаты работы были представлены на национальных и международных конгрессах, конференциях и симпозиумах: Международной конференции "BIOTECHNOLOGY St.Petersburg'94" (С.-Петербург, 1994); Всероссийском симпозиуме "Биология клетки в культуре" (С.-Петербург, 1995); III Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство" (Москва, 1996); III Всероссийском конгрессе гематологов и трансфузиологов (С.-Петербург, 1996); International meeting of the Czech branch of the European Tissue Culture Society (Brno, Czech Republic, 1996); VII съезде Всероссийского общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов (Москва, 1997); V международной конференции "СПИД, рак и родственные проблемы" (С.-Петербург, 1997); Юбилейной международной конференции "Грипп - XXI век" (С.-Петербург, 1997); 42nd International Congress of the European Tissue CultuTe Society (Mainz, Germany, 1997).
ПУБЛИКАЦИИ
По материалам диссертации опубликовано 11 печатных работ.
ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ
Диссертация изложена на страницах машинописного текста, включая 22 таблицы и 26 рисунков. Работа состоит из введения, обзора литературы, глав, содержащих описание материалов и методов, результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и списка литературы (102 источника на русском и 380 на иностранных языках).
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Вирусные антигены. В работе использовали штаммы вирусов простого герпеса I антигенного типа (УС), II антигенного типа (ВН) и штамм AD 169 цито-мегаловируса человека, полученные из Государственной коллекции штаммов и вирусов Института вирусологии им.Д.И.Ивановского (Москва).
Репродукцию вирусов исследовали на первичной культуре клеток почки эмбриона человека, диплоидной культуре фибробластов легкого эмбриона человека (ЧЛ-385), диплоидной культуре клеток кожи эмбриона человека, культуре клеток почки зеленых мартышек Vero, культуре клеток почки макаки-резус (МА-104), культуре клеток фибробластов куриных эмбрионов. Культуры клеток были получены из лаборатории клеточных культур НИИ гриппа (С.-Петербург), а культура клеток куриных фибробластов готовили из куриных эмбрионов в НИИ вакцин и сывороток (С.-Петербург). Визуальное исследование вирусного материала проводили методом негативного контрастирования на электронном микроскопе JEM-100 СХ II ("JEOL", Япония) [Мейхи Б., 1988].
Вируссодержащую культуральную жидкость очищали от клеточного детрита центифугированием при 10000 g в течение 10-15 мин при 4°С. Вирусный материал инактивировали прогреванием при 56°С в течение 1 ч. Концентрирование вирусов осуществляли ультрацентрифугированием при 100000 g в течение 2 ч или ультрафильтрацией вируссодержащей культуральной жидкости на системе фильтрования в тангенциальном потоке "Minitan" ("Millipore", США). Для очистки вирусов применяли метод колоночной гель-хроматографии с использованием в качестве матрицы сефарозы CL-2B, 4В ("Pharmacia", Швеция) и центрифугирование в градиенте концентрации сахарозы (10-66 %) [Детерман Г., 1970; Коломиец А.Г. и др., 1986].
Обследуемый материал. В работе использовали сыворотки крови людей с различными клиническими диагнозами (герпетическая, цитомегаловирусная инфекции, пиелонефрит, пневмония, гипотрофия, внутриутробная инфекция, поражение глаз, конъюнктивит, поражение центральной нервной системы и т.д.). Эти люди проходили обследование в вирусологических лабораториях г.Санкт-Петербурга (табл. I). К группе условно здоровых людей можно отнести беременных женщин, обследуемых в вирусологической лаборатории Московского района (С.-Петербург). Антитела к ВПГ и ЦМВ определяли в сыворотках крови детей разного возраста, взрослых, беременных женщин и больных лейкозом по
Таблица
Обследуемый материал
Доноры обследуемого Выявляемые Число Метод ДЛ
материала антитела обследуемых
Новорожденные 75 1
Дети 1-14 лет IgM, IgG, 16 I
Взрослые 15-70 лет IgGl, IgG3, 172 ИФА I
Беременные женщины IgG4 к ВПГ 302 и
Всего 565 I, и
Взрослые с диагнозом гер- 45 i
петическая инфекция
Дети разного возраста и IgM к ВПГ 709 ИФА III, IV
взрослые старше 15 лет
Дети до 1 года 35
Дети 7-14 лет 22
Взрослые старше 15 лет IgM к ЦМВ 95 ИФА I, III,
Всего 152 IV
Лица с диагнозом ЦМВЙ 21
Дети до 1 месяца 539
Дети 1.1-3 месяца 102
Дети 3.1-12 месяцев 178
Дети 1.1-7 лет IgM к ЦМВ 222 ИФА* ш
Дети 7.1 -14 лет 171
Взрослые 15-50 лег 250
Всего 1462
Пара: мать - новорожден- IgM, IgG к ЦМВ 7 ИФА IV
ный ребенок
Больные лейкозом IgM, IgG, IgGl, И ИФА V
IgG3, lgG4 к ВПГ,
IrM К ЦМВ
ВПГ-1 ВПГ-2
Дети до 1 месяца 758 753
Дети 1.1-3 месяца 45 48
Дети 3.1-12 месяцев Комплемент- 98 106
Дети 1.1-3 года связывающие 100 100 РСК** III
Дети 3.1 -6 лет антитела 128 130
Дети 7-14 лет к ВПГ-1 и 198 200
Взрослые 15-30 лет ВПГ-2 245 248
Взрослые старше 31 года 68 69
Всего 1640 1654
ДЛ - диагностические лаборатории. 1 - больницы № 30 им.Боткина; II - Московскою района г.С.-Петербурга; III - Государственной педиатрической медицинской академии; IV - НИИ акушерства и гинекологии им.Д.О.Отта; V - НИИ гематологии и трансфу-зиологии. * - ЦМВ-специфические IgM-антитела выявляли в иммуноферментной тест-системе фирмы "Labsystems" ("Cytomegalovirus IgM Е1А KIT") (Финляндия). ** - Исследования в РСК и тесте фирмы "Labsystems" проводили на базе вирусологической лаборатории Государственной медицинской педиатрической академии.
разработанной методике, а также в иммуноферментнои тест-системе фирмы "Labsystems" и реакции связывания комплемента (РСК) (табл. 1).
Пммуноферментный анализ. Для иммобилизации вирусных антигенов применяли 96-луночные полистироловые планшеты производства "Медполимер". Разведение вирусного антигена осуществляли 0.01 М К-фосфатным буферным раствором. Блокировку остаточной активности полистирола проводили 0.01 М К-фосфатным буферным раствором, содержащим 1 % бычьего сывороточного альбумина и 0.05 % твина-20, в течение 1 ч при 37°С. Разведение сывороток, конъюгатов, отмывку планшетов от несвязавшихся реагентов на всех стадиях анализа осуществляли тем же буферным раствором.
Для определения вирусспецифических антител использовали непрямой метод твердофазного иммуноферментного анализа [Егоров A.M. и др., 1991]. Выявляющими реагентами служили моноклональные антитела против иммуноглобулинов М, G, Gl, G3, G4 человека, меченые пероксндазон (Рентгено-радиологический НИИ, С.-Петербург) [Грязева И.В. и др., 1994; Самонловнч М.П. и др., 1995]. Субстрат-хромо генная смесь содержала перекись водорода и о-фенилендиамин. Учет результатов проводили на фотометре "Multiskan" ("Flow", Великобритания) при длине волны 492 нм. За титр антител принимали то минимальное разведение, при котором оптическая плотность в лунках с исследуемой сывороткой превышала оптическую плотность в лунках с контролем конъюгата в 2 раза [Егоров A.M. и др., 1991].
Статистическую обработку результатов проводили стандартными методами [Рокицкий П.Ф., 1964]. Доверительные границы для относительного числа положительных сывороток определяли при уровне значимости (Р) менее 0.01, 0.05. Разницу между частотами выявления антител в различных возрастных группах считали достоверной при вероятности не менее 0.95.
Показатели диагностической эффективности испытуемых тест-систем рассчитывали на основе результатов сравнения разработанных тест-систем и рефе-ренс-тестов фирм "Labsystems" и "Д ИЛ плюс" с использованием четырехпольных таблиц сопряженности признаков [Buck A.A. & Gart J.J., 1966]. Достоверность совпадения результатов, полученных с помощью испытуемой тест-
л
системы, по отношению к референс-тесту оценивали с помощью теста % ■ Исходная нулевая гипотеза заключалась в том, что тест-системы различны.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
1. Оптимизация условий проведения иммуноферментного анализа для выявления антител к вирусам простого герпеса и цнтомегални.
При получении вирусных антигенов культуру клеток почки эмбриона человека использовали для приготовления маточного материала. Накопление вирусной биомассы проводили на основе фиброблаетов легких и кожи эмбриона человека для ЦМВ и куриных фиброблаетов, культур клеток Vero и МА-104 для ВПГ. Идентичность вирусов и типопринадлежность штаммов ВПГ была подтверждена методом полимеразной цепной реакции в лаборатории молекулярной генетики Центра передовых медицинских технологий (С.-Петербург). Исследование биомассы ВПГ методом электронной микроскопии показало, что получаемый вирус имеет характерную архитектуру зрелого вириона (икосаэдральный капсид, окруженный внешней оболочкой).
В результате проведенных исследований были выбраны условия проведения иммуноферментного анализа для выявления антител к ВПГ и ЦМВ:
1) иммобилизация вирусного антигена в концентрации 10 мкг/мл, разведенного до этой концентрации 0.01 М К-фосфатным буферным раствором с 0.15 М NaCl, рН 7.2, на полистироловом планшете в течение 2 ч при температуре 56°С с последующей блокировкой остаточной активности полистирола;
2) взаимодействие иммобилизованного вируса с исследуемой сывороткой в желаемом разведении в течении 1 ч при температуре 37°С;
3) взаимодействие соответствующего конъюгата в рабочем разведении с ви-русспецифическими антителами, связанными с иммобилизованным на планшете вирусным антигеном, в течение 1 ч при температуре 37"С.
Результаты сравнения различных серий иммуносорбентов свидетельствовали о воспроизводимости разработанной методики и возможности хранения планшетов с иммобилизованным вирусным антигеном в течение 2 лет.
Для качественной оценки данных иммуноферментного анализа необходимы два критерия: "критическое" значение оптической плотности и разведение сыворотки, в котором предпочтительно проводить анализ. Эти критерии выбирают либо эмпирически, либо с помощью стандартных панелей положительных и отрицательных на антитела сывороток, используемых также для определения чувствительности и специфичности диагностикумов [Канев А.Н. и др., 1992; Нто Т.Т., Ленхофф Г., 1988]. Поскольку стандартная панель к ВПГ сывороток в нашей стране еще не разработана, в настоящей работе пороговое значение опти-
ческой плотности и оптимальное разведение образца выбрали исходя из результатов анализа 709 сывороток, полученных от людей, проходивших обследование в вирусологических лабораториях г.Санкт-Петербурга. Установлено, что выявление IgM-антител к ВПГ предпочтительно проводить при разведении исследуемой сыворотки 1:100, а "критическое" значение оптической плотности для используемого фотометра равно 0.5 оптических единиц.
Выбранное для качественного анализа разведение сыворотки 1:100 удобно в практике. Кроме того, такое разведение позволяет исключить ложноположи-гельпые результаты, связанные с присутствием в исследуемых сыворотках ревматоидного фактора, представленного IgM-антителами против IgG человека [Ziegler Th. & Meurman О., 1989]. Следует отметить, что разведение 1:100 используют и в большинстве известных тест-систем (фирм "Labsystems", "Abbott").
Пороговая величина, выше которой исследуемую сыворотку относили к положительной, была выбрана иа основе полученного "критического" значения оптической плотности. Интерпретацию результатов анализа проводили после расчета отношения оптической плотности исследуемой сыворотки к оптической плотности положительного контрольного образца. Такой подход позволил учесть нестандартность планшетов и различную разрешающую способность фотометров, используемых в разных лабораториях.
При отнесении сыворотки к числу положительных желательно определять уровень содержащихся в ней вирусспецифических антител. Исходя из усредненных кривых титрования положительных сывороток в настоящей работе за пороговый титр антител классов IgM и подклассов IgGl, IgG3, IgG4 принимали 1:400, а сыворотки, имеющие этот титр, считали слабоположительными. Сыворотки с более высокими титрами противовирусных антител рассматривали как положительные. Пороговый титр антител класса IgG составил 1:6400.
2. Оценка специфичности и чувствительности тест-систем для выявления антител к вирусам простого герпеса я щггомегалив.
Специфичность твердофазного ИФА для выявления антител обусловлена свойствами иммобилизованного антигена и конътогата [Егоров A.M. и др., 1991]. Идентификация вирусов методом полимеразной цепной реакции позволила гарантировать подлинность полученных антигенов. Для выявления антивирусных антител применяли моноклональные антитела к IgM, IgG, подклассам IgG человека, высокая специфичность которых подтверждена авторами препаратов [Грязева И.В. и др., 1994; Самойлович М.П. и др., 1995].
Оценку специфичности тест-систем для выявления ВПГ-специфических ан тител проводили путем сравнения с иммуноферментными тестами фирмь "ДИАплюс" для выявления суммарных антител человека, специфичных к ВПГ-и ВПГ-2, антител к ЦМВ, вирусу краснухи и токсоплазме. Показатели диаг ностической эффективности испытуемых тест-систем рассчитывали с помощьн четырехпольных таблиц сопряженности признаков (табл. 2).
При сравнении испытуемой тест-системы для выявления к ВПГ с тесто\ для определения суммарных ВПГ-специфических антител чувствительность 1 показатель совпадений составляют 95 % и 90 % с высокой степенью достоверно сти. При сравнении разработанной тест-системы для выявления ЦМВ специфических IgM и аналогичной фирмы "ЬаЬзу51ет8" отмечено большее соот ветствие результатов, чем при сравнении испытуемого теста для выявления ВПГ-специфических ^С и диагностикума фирмы "ДИАплюс". Это можно объяснит! тем, что в тесте "ДИАплюс" определяли суммарные антитела к ВПГ, в то врем? как с помощью разработанной тест-системы - только 1цО-антитела. Тем не менее, так как удельный вес противовирусных 1цС-антител в сыворотке больного больше, чем ^М и lgA, то имела место высокая частота совпадений результатов.
Высокие показатели диагностической эффективности тест-системы для выявления 1цМ-антител к ЦМВ можно считать косвенным доказательством и специфичности теста для выявления ^М-антител к ВПГ, так как технология приготовления этих тест-систем абсолютно идентична, а подлинность антигенов подтверждена методом полимеразной цепной реакции.
Основные показатели диагностической эффективности испытуемой тест-системы при сравнении ее с тестами для выявления антител к неродственным антигенам имеют низкие значения, что свидетельствует об отсутствии перекрестной реакции. По тесту х2 велика вероятность того, что эти тест-системы различны. При выявлении ^М-антител к ВПГ в разработанной тест-системе и 1йМ-антител к ЦМВ, краснухе, токсоплазме в референс-тесте полученные показатели специфичности (78, 82, 87 %) не следует рассматривать как наличие перс-крестной реактивности, так как они являются следствием частых совпадений отрицательных результатов. При изучении 52 сывороток в параллельных опытах в испытуемых тест-системах для выявления ^М-антител к ВПГ и ЦМВ перекрестной реактивности также не наблюдали.
Таблица 2
Показатели диагностической эффективности разработанных тест-систем, полученные при сравнении их с иммуноферментными тест-системами фирм "ДИАплюс" и "ЬаЬх^^етя" и между собой
Антитела, выявляемые в испытуемой тест-системе Антитела, выявляемые в ре-ференс-тесте Референс-тест Четырехпольные таблицы сопряженности признаков Чув-стви-тель-ность, в% Спе-ци-фич-ность, в% Вероятность установления положительного Вероятность установления отрицательного диагноза, Совпадение, В°/о Вероятность, соответствующая
референс-тест испытуемый тест диагноза, в% в% X2 (X2)
+ -
да к ВПГ Антитела к ВПГ-1 и ВПГ-2 фирмы "Диаплюс" + 139 10 7 18 95 64 93 72 90 <0.001 (62.8)
ДО к ВПГ да к ЦМВ фирмы "Диаплюс" + 49 71 9 24 84 25 41 73 48 0.35 (1.5)
к ВПГ ^М к ЦМВ фирмы "Диаплюс" + 4 30 3 108 57 78 12 97 77 0.1 (2.8)
да к ВПГ ив к краснухе фирмы "Диаплюс" + 7 9 8 3 47 25 44 27 37 0.33 (1.2)
^М к ВПГ им к краснухе фирмы "Диаплюс" + 1 3 3 20 25 87 25 87 78 0.9 (0.02)
да к впг да к токсоплазме фирмы "Диаплюс" + 14 68 6 27 70 28 17 81 36 0.9 (0.02)
^М к ВПГ им к токсоплазме фирмы "Диаплюс" + 2 17 5 77 29 82 11 93 78 0.85 (0.03)
^М к ЦМВ им к ЦМВ фирмы "ЬаЬзуяепк" + 13 0 1 36 93 100 100 97 98 <0.001 (40.5)
1еМ к ВПГ им к ЦМВ испытуемая им к ЦМВ + 5 9 8 30 38 77 36 78 67 0.5 (0.52)
3. Апробация разработанных тест-систем на клиническом материале.
Апробацию разработанных иммунофермснтных тест-систем проводили на материале, полученном в диагностических лабораториях от лиц, направленных на обследование в связи с подозрением на инфекционную природу заболевания (табл. 1). В изученный контингент были включены новорожденные, дети разного возраста, взрослые. Особую группу составляли беременные женщины, которых можно отнести к числу условно здоровых, хотя в этой группе вероятны частые рецидивы герпетических инфекций, обусловленные возникновением иммуноде-фицитных состояний [Adler S.P., 1992; Baker D.A., 1992].
По данным литературы среди взрослых среднего возраста в развитых странах антитела к ВПГ выявляются менее, чем у 70 % (США, Япония, Франция, Швеция), в то время как среди взрослого населения развивающихся стран число серопозитивных возрастает до 95 % (Заир, Китай, Тайвань, Гаити и т.д.) [Roizman В. et al., 1993]. При обследовании 565 сывороток людей в разработанной тест-системе lgG-позитивными к ВПГ были 72 %, в том числе среди сывороток лиц старше 15 лет - 74-80 %. IgG-антитела в высоких титрах обнаружили у 44 % новорожденных.
Среди 565 сывороток людей (табл. 1) IgM-антитела к ВПГ обнаружили в высоких титрах у 13 % лиц. Слабоположительными по IgM являлись 11 % сывороток. В ipynne людей старше 15 лет ВПГ-специфические IgM-антитела выявили в 22 % случаев. Полученные данные соответствуют результатам аналогичных исследований в других странах [Christenson В. et al., 1992; Bassett 1. et al., 1994; Kinghorn K., 1994]. В сыворотках беременных и новорожденных IgM-антитела обнаружили с одинаковой частотой (9 %) (Р>0.05). Очевидно, что острая герпетическая инфекция во время беременности влечет за собой инфицирование плода, что приводит к появлению в крови детей первых месяцев жизни вирусспеци-фических IgM [Roizman В. et al., 1993].
Среди 45 больных, у которых была зарегистрирована герпетическая инфекция, 80 % имели в сыворотке IgM-антитела. Все пациенты с установленным диагнозом герпетической инфекции имели высокий титр ВПГ-специфических IgG-антител (не менее 1:6400), в том числе 87 % - титр не менее, чем 1:12800. При апробации разработанной тест-системы для выявления IgM-антител к ЦМВ на материале от 21 больного с диагнозом цитомегаловируспая инфекция, 86 % сывороток содержали противовирусные IgM-антитела. Эти результаты свидетельствуют о высокой чувствительности и специфичности испытуемых тестов.
При обследовании с помощью разработанной тест-системы 152 лиц с разными диагнозами, проходивших обследование в вирусологических лабораториях г.Санкт-Петербурга, IgM-антитела к ЦМВ выявили в сыворотках 7 % детей младшего и школьного возраста и 15 % лиц старше 15 лет. В сыворотках 35 детей до 1 года ЦМВ-специфических IgM-антител обнаружить не удалось.
В разработанной тест-систсмс для выявления антител к ЦМВ обследовали сыворотки 7 новорожденных (пуповшшая кровь) и их матерей (венозная кровь). Уровень ЦМВ-специфических IgG-антител был одинаковым у матери и ребенка, что обусловлено свойством иммуноглобулинов G проникать через плаценту. IgM к ЦМВ не выявили ни у одного новорожденного, несмотря на нх присутствие в крови матерей, что можно объяснить неспособностью IgM-антител преодолевать плацентарный барьер. Полученные данные также косвенно свидетельствуют о специфичности разработанной тест-системы. При изучении сывороток новорожденных, взятых сразу и через месяц после рождения, выявили случай появления ЦМВ-специфических IgM-антител у ребенка, родившегося от матери, перенесшей во время беременности цитомегаловируснуто инфекцию. Увеличение титра антител у ребенка в 32 раза в течение месяца свидетельствует либо о наличии врожденной ЦМВИ, либо об инфицировании после рождения при контакте с матерью.
Герпетическая и цитомегаловирусная инфекции представляют значительную опасность для больных лейкозом, особенно в случае необходимости трансплантации им костного мозга [Roizman В. et al., 1993; Weinberg Л. & Vilas Boas L.S., 1990]. В связи с этим с помощью разработанных тест-систем в сыворотках, периодически получаемых от 14 больных лейкозом, десяти из которых была проведена пересадка костного мозга, выявляли ВПГ-специфические антитела классов IgG, IgM и подклассов IgGI, IgG3, IgG4 и ЦМВ-специфические IgM-антитела. Полученные результаты были сопоставлены с клиническими и лабораторными данными НИИ гематологии и трансфузиологии.
В исследованных сыворотках были выявлены высокие титры IgG-антител к ВПГ (1:6400 и более). Во всех случаях обнаружения противовирусных IgM-антитсл наблюдали либо клинические, либо лабораторные признаки герпетической и цитомегаловирусной инфекций, что подтверждает диагностическую значимость разработанных тестов. Кроме того, наблюдение за уровнем IgM в динамике позволяло предсказывать герпетическую инфекцию до ее клинического проявления. Подъем титров антител подклассов IgGI, lgG3, lgG4 также характеризовал изменение иммунного статуса больного, однако изученного мате-
риала оказалось недостаточно, чтобы сделать окончательные выводы о роли подклассов ^О при герпетической инфекции у больных лейкозом. Во всех случаях выявления цитомегаловирусной или герпесвирусной ДНК методом поли-меразной цепной реакции наблюдали увеличение уровня вирусспецифических ^М-антител. Очевидно, что использование иммуноферментного анализа (особенно для выявления противовирусных ^М) и метода полимеразной цепной реакции в совокупности позволяет не только обнаружить вирусный геном, но и оценить реакцию организма на антиген.
4. Изучение распространенности вируса простого герпеса и определение частоты обострепий герпетической и цитомегаловирусной инфекций.
В настоящее время для диагностики острой герпетической инфекции в практических лабораториях используют реакцию связывания комплемента. В этой связи представлялось интересным изучить распространенность герпетической инфекции не только иммуноферментным методом, но и реакцией связывания комплемента.
В РСК обследовали парные сыворотки людей, обращавшихся в Государственную педиатрическую медицинскую академию (табл. 1). В соответствии с данными литературы положительными считали сыворотки, имеющие титр ком-плементсвязывающих антител 1:40 и более [Перадзе Т.В., Халонен П., 1985].
При изучении распространенности герпетической инфекции с помощью реакции связывания комплемента установлено, что антитела к вирусу простого герпеса 1 и 2 серотипов присутствуют в сыворотках 37 % и 33 % обследованных, соответственно. В младшей возрастной группе детей до 1 года треть обследованных имели значительный уровень комплементсвязывающих антител (1:40 и выше) к ВПГ-1 и ВПГ-2 (36.5 % и 33.1 %, соответственно). У детей от I года до 15 лет частота выявления антител к ВПГ-1 достоверно не изменилась (Р>0.05). У обследованных старше 15 лет (15-30 лет) комплемснтсвязывающие антитела к ВПГ-1 и В1ТГ-2 выявляли чаще, чем у детей (50.6 % и 47.6 %, соответственно) (Р<0.01). Улиц старше 30-летнего возраста антитела к ВПГ обнаружили у 40.6 % - 45.6 %. Полученные результаты соответствуют данным литературы [Яошпап В. е1 а1., 1993; Исаков В.А., Сафронова М.М., 1997].
Выявление частоты обострений герпетической инфекции, свидетельством которых является 4-кратный и более прирост комплементсвязывающих антител к ВПГ, показало, что в течение первого года жизни 4.4 % детей перенесли острую инфекцию, вызванную ВПГ-1, и 4.7 % - ВПГ-2. С 3-летнего возраста частота инфекции, связанной с ВПГ-2, снизилась до 3 % (Р<0.05), а затем увеличилась в
группе взрослых 15-30 лет до 10 % (Р<0.05). У лиц старше 30-лет частота обострений герпетической инфекции уменьшилась в 3 раза (Р<0.05), что, возможно, связано с переходом инфекции в хроническую форму. ВПГ-1 вызвал у 9 - 10 % детей I -3 и 7-14 лет и взрослых до 30 лет острую инфекцию.
Выявление комплементсвязывающих антител в течение 1994-1997 гг. позволило установить тенденцию к увеличению числа детей до 1 года с высоким уровнем антител к ВПГ-1 и ВПГ-2, 3-6 лет и взрослых с высоким титром антител к ВГ1Г-1 (Р<0.05). Одновременное нарастание антител к обоим типам ВПГ встречалось у 0.5 - 3.6 % обследованных, причем имело место достоверное увеличение частоты герпетической инфекции в период 1994-1997 гг. (Р<0.05).
Частоту обострений ЦМВИ определяли на основе результатов выявления вирусспецифическнх IgM-антител с помощью иммуноферментной тест-системы фирмы "Labsystems ". При этом IgM-антитела к ЦМВ выявили у 6 % из 1462 человек. Полученные результаты свидетельствовали об одинаковой частоте обострений цитомегаловирусной инфекции у детей как младшего, так и школьного возраста (3 - 6 %) (Р>0.05). Данный показатель существенно возрастал в группе взрослых 15-50 лет (Р<0.05), среди которых 15 % имели в сыворотке IgM-анти гела к ЦМВ, что согласуется с данными, приведенными в литературе [Weber В. etal., 1992; Kiyan М. et al., 1993; Bos P. et al., 1995.].
В крови детей до I месяца вирусспецифические IgM-антитела встречали реже (1.3 %), чем в последующие месяцы первого года жизни ребенка (5-10 %) (Р<0.05). Рядом авторов у новорожденных IgM-антитела к ЦМВ были выявлены с такой же низкой частотой [Adler S.P., 1992; Hirota К. et al., 1992; Liu P. et al., 1994]. Увеличение случаев обнаружения IgM к ЦМВ в течение первого года жизни ребенка можно объяснить повышенным риском инфицирования при контакте с матерью во время грудного вскармливания.
5. Изучение содержания антител разных подклассов IgG к ВПГ.
В настоящее время остается актуальным поиск дополнительных диагностических маркеров герпетической инфекции, и важным направлением исследований является изучение диагностического значения антител, относящихся к разным подклассам IgG [Roizman В. et al., 1993; Weber В. et al., 1993]. В связи с этим в разработанной тест-системе изучали содержание ВПГ-специфических антител подклассов IgG в 565 сыворотках людей с разными диагнозами, проходивших обследование в вирусологических лабораториях г.Санкт-Петербурга (табл. I).
Среди подклассов IgG преобладающими оказались IgG3-aHTiiTana, выявленные в высоких титрах у 50 % обследуемых. В группах детей и взрослых часто-
та определения высокого уровня 1цОЗ и общих ^в-антител была близка (49 % и 44 %, 71 % и 74 %) (Р>0.05), в то время как в группе беременных женщин высокие титры ВПГ-специфичсских ^ОЗ-антнтел обнаружили в 1.7 раз реже, чем (Р<0.05). Частоты выявления ^ОЗ и общих у новорожденных различались между собой в 3.4 раза (Р<0.05).
ВПГ-специфические антитела подклассов и ^04 обнаружили значительно реже но сравнению с ^йЗ: 18 % сывороток содержали к ВПГ, 11 % -1йС4-антитела (Р<0.05). В группах новорожденных и детей антитела этих подклассов выявили у 4 - 6 %, причем у новорожденных противовирусные 1ёС4 вообще отсутствовали.
В сыворотках с высоким уровнем ВПГ-специфических ^М-антител содержание противовирусных антител подклассов было выше, чем в сыворотках, не содержащих ^М к ВПГ. Антитела подкласса 1&03 имели наибольший удельный вес как в ^М-положительных (76 %), так и в ^М-отрицательных (44 %) сыворотках. Следует отметить значительное увеличение удельного веса 1£01-положительных проб (в 6.7 раз, с 9 % до 61 %) (Р<0.05) среди сывороток, содержащих ВПГ-специфические ^М-антитела.
В 1цО-отрицателы1ых сыворотках 1цС4 выявляли только в 3 % случаев, в то время как вирусспецифические антитела подкласса вообще не были обнаружены. В поддержании высокото уровня ВПГ-специфических принимают участие все изученные подклассы, хотя наибольшую роль играют ^ОЗ-антитела (60 %). Из 1цС-положительных сывороток только 15 % имели высокий уровень что подтверждает неинформативность выявления общих ^О для диагностики острой герпетической инфекции.
Удельный вес 1уМ-положительных к ВПГ сывороток среди 1цС I -положительных увеличился по сравнению с 1^01 -отрицательными в 8.6 раз (с 5 % до 43 %) (Р<0.05), что свидетельствует об интенсивном росте уровня в острой стадии герпетической инфекции. Среди 1цСЗ- и 1§С4-положительных наблюдали увеличение числа сывороток с высоким уровнем ^М-антител в 3.8 (с 5 % до 19 %) и 3 (с 9 % до 27 %) раза, соответственно (Р<0.05). Очевидно, что из подклассов ^С только антитела подкласса могут служить дополнительным маркером обострения герпетической инфекции.
Таким образом, в результате проведенных исследований были разработаны и апробированы на клиническом материале иммуноферментные тест-системы для выявления антител к ВПГ и ЦМВ. Высокая специфичность и чувствительность этих тест-сисгем позволяют рекомендовать их для диагностики острых
герпетической к цитомегаловирусной инфекций в совокупности с другими лабораторными методами и клиническими наблюдениями. С помощью разработанных иммуноферментных тест-систем, аналогичного теста фирмы "ЬаЬзу^етв" и классической реакции связывания комплемента были изучены распространенность вируса простого герпеса и частота обострений гсрпстичсской и цитомегаловирусной инфекций среди лиц с разными диагнозами, проходивших обследование в вирусологических лабораториях г.Санкт-Петербурга.
ВЫВОДЫ
1. На основе препаратов очищенных вирусов и моноклональных антител против иммуноглобулинов человека разработана технология приготовления тест-систем для выявления в сыворотках крови людей антител классов 1яМ, ^О и подклассов !, 1яСЗ, против вирусов простого герпеса и цитомегални.
2. Подлинность вирусных антигенов подтверждена методом полимеразной цепной реакции. Специфичность и чувствительность разработанных тест-систем доказаны сравнением с аттестованными диагностическими наборами и подтверждены результатами их апробации на клиническом материале.
3. Вирусспецкфические ^М-антитела, свидетельствующие о наличии острой герпетической инфекции, обнаружены у 13 %, а ^О-антитела - у 72 % лиц с разными диагнозами, проходивших обследование в вирусологических лабораториях г.Санкт-Петербурга.
4. Среди подклассов 1йС, специфичных к вирусу простого герпеса, наибольший удельный вес в сыворотках обследованных имели антитела подкласса ^СЗ. При острой герпетической инфекции, свидетельством которой являлись противовирусные 1цМ-антитела, обнаружено увеличение содержания в сыворотке крови вирусспецифических -антител, что может служить дополнительным диагностическим маркером.
5. При изучении распространенности и частоты обострений 1ерпетической инфекции методом реакции связывания комплемента установлено:
• антитела к вирусу простого герпеса 1 и 2 серотипов присутствуют в сыворотках 37 % и 33 % обследованных, соответственно;
• частота острой герпетической инфекции у детей и взрослых составляет 2-10 %.
6. При апробации разработанной тест-системы ^М-антитела к цитомегало-вирусу выявлены в сыворотках 7 % детей и 15 % лиц старше 15 лет с разными диагнозами, проходивших обследование в вирусологических лабораториях
г.Санкг-Петербурга. С помощью иммуноферментной гест-системы фирмы "Labsystems" острая цитомегаловирусиая инфекция обнаружена у 6 % обследованных, в том числе у 3 - 6 % детей и 15 % лиц старше 15 лет.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Zazimko L.A., Kuzenkova A.V., Shitikova G.S. Developing of immunoenzyme test-system for detecting IgM against HCMV. Abstracts of International Conference "Biotechnology St.Petersburg'94", St.Petcrsburg, 1994. - P. 57.
2. Кузенкова A.B., Шитикова Г.С., Зазимко Л.А. Использование клеточных линий при конструировании иммуноферментного диагностикума, предназначенного для выявления цитомегаловирусной инфекции. Тезисы доклада на симпозиуме "Биология клетки е культуре". II Цитология. - 1996. - Т. 38, № 2. - С.214-215.
3. Кузенкова А.В., Зазимко Л.А. Иммуноферментный диагностикум для выявления острой цитомегаловирусной инфекции. Тезисы доклада на III Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство", Москва, 1996. - С. 145.
4. Зазимко Л.А., Кузенкова А.В. Выявление острой цитомегаловирусной инфекции у беременных женщин и новорожденных. Тезисы доклада на III Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство ", Москва, 1996. - С. 120.
5. Кузенкова А.В., Гудкова Т.М, Зазимко Л.А. Выявление цитомегаловирусной инфекции у больных с пересадкой костного мозга с помощью иммуноферментной тест-системы на IgM антитела к цитомегаловирусу человека. Тезисы доклада на III Российском конгрессе гематологов и траисфушологов. II Актуальные вопросы гематологии и трансфузиологии: Сб. науч. тр. - С.-Петербург, 1996. -С. 51.
6. Кузенкова А.В., Гудкова Т.М., Шитикова Г.С., Зазимко Л.А. Разработка и применение иммуноферментной тест-системы для диагностики острой цитомегаловирусной инфекции. // Вопр. вирусологии. - 1996. - С. 267-270.
7. Кузенкова А.В., Гудкова Т.М., Суменова Е.Ю., Зазимко Л.А. Отечественные иммуноферментные тест-системы для определения IgM антител к цитомегаловирусу человека и вирусам простого герпеса 1 и 2 серотипов. Тезисы доклада на VII съезде Всероссийского общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов, Москва, 1997. - С. 455-456.
8. Зазимко Л.А., Гудкова Т.М., Кузенкова А.В., Шитикова Г.С., Баринский И.Ф. Диагностика и лечение герпетической инфекции. Тезисы доклада на 5-ой международной конференции "СПИД, рак и родственные проблемы". II Русский журнал ВИЧ/СПИД и родственные проблемы. - 1997. - Т. 1, № 1. - С. 119.
9. Кузенкова А.В., Выдумкина С.П., Зазимко Л.А. Распространенность IgM антител к цитомегаловирусу человека в сыворотках людей разных возрастных групп. Тезисы доклада на 5-ой международной конференции "СПИД, рак и род-
Оглавление диссертации Кузенкова, Александра Владимировна :: 1998 :: Санкт-Петербург
Список сокращений.
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1. Характеристика вирусов простого герпеса и цитомегалии.
1.2. Патогенез герпетической и цитомегаловирусной инфекций.
1.3. Иммунитет против вирусов простого герпеса и цитомегалии.
1.3.1. Роль клеточного иммунитета.
1.3.2. Гуморальный иммунитет.
1.4. Эпидемиология герпетической и цитомегаловирусной инфекций.
1.5. Диагностика герпетической и цитомегаловирусной инфекций.
1.6. Иммуноферментный анализ в диагностике вирусных инфекций.
1.7. Обоснование направления собственных исследований.
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
2.1.1. Вирусные антигены.
2.1.2. Исследуемый материал
2.1.3. Иммуноферментный анализ.
2.1.4. Методы статистической обработки полученных результатов.
2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.
2.2.1. Разработка технологии приготовления иммуноферментных тест-систем для определения антител к вирусам простого герпеса и цитомегалии.
2.2.1.1. Культивирование вирусов простого герпеса и цитомегалии.
2.2.1.2. Приготовление вирусных антигенов для ИФА.
2.2.1.3. Оптимизация условий проведения иммуноферментного анализа для определения ^М-антител к ВПГ и ЦМВ.
2.2.1.4. Интерпретация результатов определения противовирусных антител.
2.2.1.5. Изучение специфичности и чувствительности тест-систем.
2.2.2. Антитела к вирусам простого герпеса и цитомегалии у людей, проходивших обследование в вирусологических лабораториях г.Санкт-Петербурга.
2.2.2.1. Уровень ВПГ-специфических ^М-антител.
2.2.2.2. Уровень ВПГ-специфических антител класса ^С и подклассов в сыворотках обследованных.
2.2.2.3. Содержание комплементсвязывающих антител к вирусу простого герпеса у людей разного возраста.
2.2.2.4.
§М-антитела к ЦМВ у людей разных возрастных групп.
2.2.2.5. Уровень антител к ВПГ и ЦМВ у больных лейкозом.
3. ОБСУЖДЕНИЕ.
ВЫВОДЫ.
Введение диссертации по теме "Аллергология и иммулология", Кузенкова, Александра Владимировна, автореферат
АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ.
Вирус простого герпеса (ВПГ) и цитомегаловирус (ЦМВ) способны длительно персистировать в организме человека и реактивироваться при снижении иммунной защиты, что может приводить к развитию таких серьезных заболеваний как энцефалит, кератит, кератоконъюнктивит, гепатит, экзема, стоматит и других [198, 328, 441, 446]. Клинические формы герпетической и цитомегалови-русной инфекций (ВПГИ и ЦМВИ) отличаются разнообразием как по симптоматике, так и по тяжести течения. ВПГ поражает слизистые оболочки, кожные покровы, глаза, печень, центральную нервную систему [8]. Способность ВПГ и ЦМВ проникать через плацентарный барьер ведет к внутриутробной передаче инфекции, что часто приводит к невынашиванию беременности, врожденной патологии плода и высокой смертности новорожденных [79, 150, 155, 214, 258, 380]. ВПГИ и ЦМВИ часто являются причинами летально завершающихся пневмоний у реципиентов костного мозга и других органов и тканей, а также развития вторичной инфекции улиц, больных СПИД [124, 135, 185, 300].
Распространенность ВПГИ и ЦМВИ различна в развивающихся и индустриально развитых странах [441]. В России инфицированность населения в целом, а также лиц, относящихся к группам риска, изучена недостаточно [8, 46]. Тем не менее, подобные исследования весьма актуальны, так как ослабление иммунной защиты, связанное с ухудшением экологических и социально-экономических условий жизни, приводит к развитию различных инфекций, в том числе герпес-вирусных.
Одним из достоверных свидетельств острой инфекции является наличие в сыворотке вирусспецифических IgM-антител [34, 459]. Рядом зарубежных фирм выпускаются иммуноферментные тест-системы для определения IgM-, IgG-, IgA-антител к ВПГ и ЦМВ, стоимость которых часто превышает покупательную способность российского здравоохранения. В то же время в связи с возросшей актуальностью герпетических инфекций необходим широкий выбор диагностических средств, количество которых должно быть достаточным для обеспечения вирусологических лабораторий. Указанные обстоятельства определяют актуальность создания тестов для выявления ВПГ- и ЦМВ-специфических антител в сыворотке человека. К простым, быстрым и надежным методам, на основе которых могут быть разработаны подобные препараты, следует отнести иммуно-ферментный анализ.
В настоящее время остается актуальным поиск дополнительных диагностических маркеров герпетической инфекции [441, 462]. В этой связи перспективным представляется изучение роли антител, относящихся к разным подклассам в гуморальном иммунитете против вируса простого герпеса.
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ.
Цель настоящего исследования заключалась в разработке иммунофермент-ных тест-систем для выявления антител к вирусам простого герпеса и цитомега-лии и их апробации на клиническом материале.
Для достижения поставленной цели требовалось решить следующие задачи:
1. Получить вирусные антигены и оптимизировать условия проведения им-муноферментного анализа для выявления антител к вирусам простого герпеса и цитомегалии.
2. Апробировать разработанные тест-системы на клиническом материале, оценить их специфичность и чувствительность.
3. Изучить с помощью разработанных тест-систем и других диагностических методов распространенность вируса простого герпеса и определить частоту обострений герпетической и цитомегаловирусной инфекций среди людей, проходивших обследование в вирусологических лабораториях г.Санкт-Петербурга.
4. Изучить содержание антител разных подклассов специфичных к вирусу простого герпеса, и оценить их диагностическое значение.
ПОЛОЖЕНИЯ. ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ:
1. На основе препаратов очищенных вирусов и моноклональных антител против иммуноглобулинов человека разработана технология приготовления тест-систем для выявления в сыворотках крови людей антител классов ^О, ^М и подклассов , ^ОЗ, ^04 против вирусов простого герпеса и цитомегалии. Специфичность и чувствительность разработанных тест-систем доказаны сравнением с аттестованными диагностическими наборами и подтверждены результатами их апробации на клиническом материале.
2. При выявлении вирусспецифических антител определена распространенность вируса простого герпеса и частота обострений герпетической и цитомега-ловирусной инфекций среди людей, проходивших обследование в вирусологических лабораториях г.Санкт-Петербурга.
3. Среди подклассов ^С (^01, ^ОЗ, ^С4), специфичных к вирусу простого герпеса, антитела ^СЗ имели наибольший удельный вес. При острой герпетической инфекции, свидетельством которой является наличие в сыворотке вирусспецифических ^М-антител, отмечено увеличение содержания антител подкласса ^01, что может служить дополнительным диагностическим маркером инфекции.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ.
Впервые на основе моноклональных антител к иммуноглобулинам человека разработаны отечественные иммуноферментные тест-системы для выявления антител классов ^М, и подклассов ^01, ^ОЗ, ^04 к вирусам простого герпеса и цитомегалии.
Впервые определен удельный вес антител подклассов ^С (^31, ^ОЗ, против вируса простого герпеса у людей разных групп (беременных женщин, новорожденных, детей, взрослых). Выявлено увеличение содержания антител подкласса в острой стадии герпетической инфекции.
Установлена распространенность вируса простого герпеса и определена частота обострений герпетической и цитомегаловирусной инфекций среди людей разных возрастных групп, проходивших обследование в вирусологических лабораториях г.Санкт-Петербурга в период 1994-1997 гг. ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ РАБОТЫ.
Разработанные иммуноферментные тест-системы для выявления антител класса к вирусам простого герпеса и цитомегалии в сыворотках людей могут быть использованы для диагностики острых герпетической и цитомегаловирусной инфекций при урологической, акушерско-гинекологической, венерологической патологии, а также у больных, страдающих системными заболеваниями крови, СПИД и др.
Разработанные иммуноферментные тест-системы для выявления антител класса ^О к вирусам простого герпеса и цитомегалии можно применять для диагностики острых инфекций по 4-кратному и более нарастанию IgG-антител в парных сыворотках, оценки эффективности вакцинации, проведения сероэпиде-миологических исследований.
Разработаны проекты Научно-технической документации на "Тест-систему иммуноферментную для выявления антител класса М к вирусам простого герпеса 1 и 2 серотипов" и "Тест-систему иммуноферментную для выявления антител класса М к цитомегаловирусу человека". В отделе биологического контроля НИИ вакцин и сывороток проведен контроль 6 экспериментально-производственных серий каждой тест-системы.
АПРОБАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.
Результаты работы были представлены на национальных и международных конгрессах, конференциях и симпозиумах: Международной конференции "BIOTECHNOLOGY St.Petersburg'94" (С.-Петербург, 1994); Всероссийском симпозиуме "Биология клетки в культуре" (С.-Петербург, 1995); III Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство" (Москва, 1996); III Всероссийском конгрессе гематологов и трансфузиологов (С.-Петербург, 1996); International meeting of the Czech branch of the European Tissue Culture Society (Brno, Czech Republic, 1996); VII съезде Всероссийского общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов (Москва, 1997); V международной конференции "СПИД, рак и родственные проблемы" (С.-Петербург, 1997); Юбилейной международной конференции "Ерипп - XXI век" (С.-Петербург, 1997); 42nd International Congress of the European Tissue Culture Society (Mainz, Germany, 1997). ПУБЛИКАЦИИ.
По материалам диссертации опубликовано 11 печатных работ. ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ.
Диссертация изложена на 150 страницах машинописного текста, включая 22 таблицы и 26 рисунков. Работа состоит из введения, обзора литературы, глав, содержащих описание материалов и методов, результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и списка литературы (102 источника на русском и 380 на иностранных языках).
Заключение диссертационного исследования на тему "Разработка иммуноферментных тест-систем для выявления антител к вирусам простого герпеса и цитомегалии и их апробация на клиническом материале"
ВЫВОДЫ
1. На основе препаратов очищенных вирусов и моноклональных антител против иммуноглобулинов человека разработана технология приготовления тест-систем для выявления в сыворотках крови людей антител классов ^М, ^С и подклассов ^01, ^ОЗ, против вирусов простого герпеса и цитомегалии.
2. Подлинность вирусных антигенов подтверждена методом полимеразной цепной реакции. Специфичность и чувствительность разработанных тест-систем доказаны сравнением с аттестованными диагностическими наборами и подтверждены результатами их апробации на клиническом материале.
3. Вирусспецифические ^М-антитела, свидетельствующие о наличии острой герпетической инфекции, обнаружены у 13 %, а ^С-антитела - у 72 % лиц с разными диагнозами, проходивших обследование в вирусологических лабораториях г. Санкт-Петербурга.
4. Среди подклассов ^С, специфичных к вирусу простого герпеса, наибольший удельный вес в сыворотках обследованных имели антитела подкласса ^вЗ. При острой герпетической инфекции, свидетельством которой являлись противовирусные ^М-антитела, обнаружено увеличение содержания в сыворотке крови вирусспецифических -антител, что может служить дополнительным диагностическим маркером.
5. При изучении распространенности и частоты обострений герпетической инфекции методом реакции связывания комплемента установлено:
• антитела к вирусу простого герпеса 1 и 2 серотипов присутствуют в сыворотках 37 % и 33 % обследованных, соответственно;
• частота острой герпетической инфекции у детей и взрослых составляет 2-10 %.
6. При апробации разработанной тест-системы ^М-антитела к цитомега-ловирусу выявлены в сыворотках 7 % детей и 15 % лиц старше 15 лет с разными диагнозами, проходивших обследование в вирусологических лабораториях г.Санкт-Петербурга. С помощью иммуноферментной тест-системы фирмы "ЬаЬ8у81еш8" острая цитомегаловирусная инфекция обнаружена у 6 % обследованных, в том числе у 3 - 6 % детей и 15 % лиц старше 15 лет.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Zazimko L.A., Kuzenkova A.V., Shitikova G.S. Developing of immunoenzyme test-system for detecting IgM against HCMY. Abstracts of International Conference "Biotechnology St.Petersburg' 94", St.Petersburg, 1994. - P. 57.
2. Кузенкова A.B., Шитикова Г.С., Зазимко JI.A. Использование клеточных линий при конструировании иммуноферментного диагностикума, предназначенного для выявления цитомегаловирусной инфекции. Тезисы доклада на симпозиуме "Биология клетки в культуре". // Цитология. - 1996. - Т. 38, № 2. -С. 214-215.
3. Кузенкова A.B., Зазимко Л.А. Иммуноферментный диагностикум для выявления острой цитомегаловирусной инфекции. Тезисы доклада на III Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство", Москва, 1996. - С. 145.
4. Зазимко Л.А., Кузенкова A.B. Выявление острой цитомегаловирусной инфекции у беременных женщин и новорожденных. Тезисы доклада на III Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство", Москва, 1996. - С. 120.
5. Кузенкова A.B., Гудкова Т.М, Зазимко Л.А. Выявление цитомегаловирусной инфекции у больных с пересадкой костного мозга с помощью иммунофер-ментной тест-системы на IgM антитела к цитомегаловирусу человека. Тезисы доклада на III Российском конгрессе гематологов и трансфузиологов. // Актуальные вопросы гематологии и трансфузиологии: Сб. науч. тр. - Санкт-Петербург, 1996. - С. 51.
6. Кузенкова A.B., Гудкова Т.М., Шитикова Г.С., Зазимко Л.А. Разработка и применение иммуноферментной тест-системы для диагностики острой цитомегаловирусной инфекции. // Вопр. вирусологии. - 1996. - С. 267-270.
7. Кузенкова A.B., Гудкова Т.М., Суменова Е.Ю., Зазимко Л.А. Отечественные иммуноферментные тест-системы для определения IgM антител к цитомегаловирусу человека и вирусам простого герпеса 1 и 2 серотипов. Тезисы доклада на VII съезде Всероссийского общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов, Москва, 1997. - С. 455-456.
8. Зазимко Л.А., Гудкова Т.М., Кузенкова A.B., Шитикова Г.С., Баринский И.Ф. Диагностика и лечение герпетической инфекции. Тезисы доклада на 5-ой международной конференции "СПИД, рак и родственные проблемы". // Русский журнал ВИЧ/СПИД и родственные проблемы. - 1997. -Т. 1,№ 1. -С. 119.
9. Кузенкова A.B., Выдумкина СП., Зазимко Л.А. Распространенность IgM антител к цитомегаловирусу человека в сыворотках людей разных возрастных групп. Тезисы доклада на 5-ой международной конференции "СПИД, рак и родственные проблемы". // Русский журнал ВИЧ/СПИД и родственные проблемы. - 1997. - Т. 1, № 1. - С. 120.
10.Кузенкова A.B., Зазимко Л.А. Принципы интерпретации результатов имму-но-ферментного определения антител класса IgM к вирусу простого герпеса в сыворотках больных. Тезисы доклада на Юбилейной международной конференции "Грипп - XXI век", 1997, С. 91-92.
11. Kuzenkova A.Y., Shitikova G.S., Gudkova Т.М., Zazimko L.A. The comparative characteristic of the different cell cultures used for the reproduction of the herpesviruses. Abstracts of 42nd International Congress of the European tissue culture society (ETCS). //European J. Cell Biology.- 1997. - Vol. 74, Suppl. 47. - P. 90.
БЛАГОДАРНОСТИ
Автор выражает глубокую признательность руководителю вирусологической лаборатории Государственной педиатрической медицинской академии С.П.Выдумкиной за участие в проведении исследований. Материал от больных был любезно предоставлен автору сотрудниками бактериологической лаборатории НИИ акушерства и гинекологии им.Д.О.Отта во главе с А.М.Новиковой и руководителем лаборатории иммунологии того же института С.А.Сельковым, сотрудниками бактериологической лаборатории НИИ гематологии и трансфу-зиологии во главе с В.Н.Чеботкевичем, сотрудниками центра вирусологических исследований больницы № 30 им.Боткина С.С.Вошуковой, Н.Г.Макаровой, руководителем вирусологической лаборатории Московского района г.С.-Петербурга В.П.Рыбаковым.
Автор благодарит сотрудника Центрального рентгено-радиологического научно-исследовательского института М.П.Самойлович за предоставление конъюгатов моноклональных антител к иммуноглобулинам человека.
За аттестацию используемых штаммов методом ПЦР автор благодарит Ю.Н.Александрову (Центр передовых медицинских технологий).
Автор признателен своим научным руководителям д.м.н. Л.А.Зазимко и д.м.н. В.Б.Климовичу, а также сотрудникам НИИ вакцин и сывороток Г.С.Шитиковой, Т.М.Гудковой, Ю.Ю.Абросимовой, Н.А.Коростелевой, Г.В.Астошенок, Н.Ю.Ветрову за оказание практической и консультативной помощи в проведении исследований.
Автор выражает глубокую признательность руководителю отдела вирусологии НИИЭМ РАМН профессору Г.И.Александровой за советы и помощь в работе над рукописью диссертации.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 1998 года, Кузенкова, Александра Владимировна
1. Аксенов М.Ю., Гннцбург А.Л. Диагностика инфекционных заболеваний с помощью метода полимеразно-цепной реакции. // Молекул, генетика, микробиол. и вирусол. 1993. - № 4. - С. 3-8.
2. Анализ генома. Методы. / Под ред. Дейвиса. М., 1990. - С. 176-189.
3. Анджапаридзе О.Г., Богомолова H.H., Борискин Ю.С. Персистенция вирусов. М., 1984. - 256 с.
4. Анджапаридзе О.Г., Мацевич Г.Р., Маренникова С.С. Иммуноферментный анализ для выявления антигенов ВИЧ (применение, возможности, ограничения). // Вопр. вирусол. 1991. - № 3. - С. 180.
5. Антитела. Методы. / Под ред. Кэтти. М:, 1991. - С. 105-108.
6. Аракелов С.А., Сонькина A.A., Мартынова В.Н. и др. Иммуноферментная тест-система для выявления антител к вирусу цитомегалии (ЦМВ). // Герпесвирусные инфекции. / Под ред. И.Ф. Баринского М., 1990. - С. 82-86.
7. Аракелов С.А., Михайлов М.И., Ананьев В.А. и др. Определение поверхностного антигена вируса гепатита (HBsAg) методом ИФА. // Вопр. вирусол. 1984. - № 3. - С. 319.
8. Баринский И.Ф., Шубладзе А. К., Каспаров A.A., Гребенюк В.Н. Герпес: этиология, диагностика, лечение. М., 1986. - 269 с.
9. Башкирцев В:Н., Иванов А.П., Деконенко Е.П. и др. Иммуноферментный метод в диагностике клешевого энцефалита. // Вопр. вирусол. 1986. - № 1. - С. 96.
10. Бейли Н. Статистические методы в биологии. М., 1962. - 260 с.
11. Ботвинкин А.Д., Селимов М.А., Згурская Т.Н. и др. Обнаружение антител к вирусу бешенства в сыворотке крови людей с помощью иммуноферментного метода. // Вопр. вирусол. 1986. - № 3. - С. 333.
12. Бочкова Н.Г., Башкирцев В.Н., Левина Л.С. и др. Опыт применения иммуноферментного метода для индикации вируса клещевого энцефалита в различных очагах. // Вопр. вирусол. 1990. - № 2. - С. 165.
13. Букринская А.Г., Рухадзе Г.Г., Селиванов Я.М. и др. Гетерологическая система иммуноферментного анализа для диагностики ротавирусной инфекции человека и ее сопоставление с электрофорезом РН . // Вопр. вирусол. 1988. - № 1. -С. 52.
14. Букринская А.Г., Тимина В.П., Кицак В.Я. и др. Разработка тест-системы иммуноферментной для быстрой диагностики ротавирусной инфекции. // Вопр. вирусол. 1988. - № 4. - С. 444.
15. Ведунова С.Д., Карих Л.П. Изучение корреляции титров антител к вирусу кори методом ИФА и в РТГА. // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. -1987. -№ 8. С. 88-91.
16. Ведунова С.Д., Мальцева H.H. Экспресс-диагностика кори с помощью иммуноферментного анализа на основе меченных пероксидазой вирусных антигенов. // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1990. - № 8. - С. 74-78.
17. Ведунова С.Д., Мальцева H.H., Решетникова В.И. Сравнительное изучение иммуноферментных тест-систем для быстрого выявления антител к вирусу кори. // Вопр. вирусол. 1986. - № 6. - С. 752.
18. Ведунова С.Л. Быстрый серологический скрининг сывороток людей на наличие антител к вирусу кори в твердофазном иммуноферментном анализе. // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1987. - № 9. - С. 81-85.
19. Виноградская Т.Р., Горышин И.Ю. Использование полимеразно-цепной реакции для выявления вируса цитомегалии в тканях человека. 7/ Мол. механизмы генет. процессов. М., 1990. - С. 203.
20. Винская А.И., Григорашкин Ю.Ю. Количественное выявление антител к ортопоксивирусам при исследовании сывороток в одном разведени в иммуноферментной тест-системе с конъюгатом белка А и пероксидазы. // Вопр. вирусол. -1992. -№ 2. С. 124.
21. Вирус простого герпеса и его роль в патологии человека. / Под ред. А.Г.Коломиец, Ю.К.Малевич, Н.Д.Коломиец и др. Минск, 1986. - 262 с.
22. Вирусология. Методы. / Под ред. Б. Мёйхи М., 1988. - 344 с.
23. Владыко A.C., Чепурнов A.A., Быстрова С.И. и др. Выявление антигена вируса Марбург методом твердофазного иммуноферментного анализа. // Вопр. вирусол. 1990. - № 5. - С. 419.
24. Власов П.А., Квачева Ю.Е. Патоморфологические исследования легочных инфекционных осложнений острой лучевой болезни у лиц, погибших в результате аварии на ЧАЭС. // Пульмонология. 1993. - № 4. - С. 23-27.
25. Воробьев A.A., Виха И.В. Современное состояние и перспективы совершенствования иммуноферментного анализа для решения задач клинической диагностики. //Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1987. - № 9 - С. 3-8.
26. Воробьева М.С. Оценка иммуноферментных тест-систем для выявления антител к ВИЧ в условиях международного испытания. // Вопр. вирусол. 1990. -№ 3. - С. 248.
27. Говоркова Е.А., Яхно М.А., Алексеенкова Л.И., Васильева В.И. Серодиагностика инфекции, обусловленной вирусом гриппа с использованием иммуно--ферментного анализа. // Вопр. вирусол. 1988. - № 4. - С. 411.
28. Горбачев E.H., Вербов В.Н., Галко Н.В. и др. Иммуноферментный анализ в диагностике ротавирусных гастроэнтеритов людей (Методич. аспекты). // Вопр. вирусол. 1986. - № 6. - С. 743.
29. Грязева И.В., Климович В.Б., Пашкова С.Ф. Моноклональные антитела к легким цепям иммуноглобулинов человека и их применение в иммуноанализе. // Иммунология. 1994. - Ns 3. - С. 31-37.
30. Дейл 3. Жидкостная колоночная хроматография. М., 1978. - Т. 2.
31. Демидова С.А., Семенова Е.И., Жданов В.М., Гаврилов В.И. Цитомега-ловирусная инфекция человека. М., 1976. - С. 22-47.
32. Детерман Г. Гель-хроматография. Гель-фильтрация, гель-проникающая хроматография. Молекулярные сита. М., 1970. - 252 с.
33. Диодрица C.B. Лабораторная иммунодиагностика цитомегаловирусной инфекции. // Иммуноферментный анализ в диагностике заболеваний. М., 1989. -С. 40-46.
34. Долгих Т.И., Каныгина Н.В., Боровских И.В. К вопросу распространенности цитомегаловируса на территории Омской области. / Патогенез, клиника и терапия экстремальных и терминальных состояний. 1994. - С. 135-139.
35. Жданов В.М., Карашов Э.В., Аракелов С.А. и др. Иммуноферментный метод индикации антигена и антител к вирусу иммунодефицита человека и егоиспользование для серологического обследования различных групп населения. // Вопр. вирусол. 1988. - № 3. -С. 294.
36. Жданов В.М. Эволюция вирусов. М:, 1990. - С. 287-297.
37. Звонарев А.Ю., Кличко В.И., Шаталин К.Ю. и др. Определение антигенной активности рекомбинантных вирусспецифических полипептидов вируса герпеса простого типов 1 и 2 и использование их в иммуноферментном анализе. // Вопр. вирусол. 1994. - № 2. - С. 59.
38. Иванов А.П., Ткаченко Е.А., Г. ван дер Гроен и др. Непрямой иммуно-ферментный метод для лабораторной диагностики геморраических лихорадок Ласса и Эбола. // Вопр. вирусол. 1986. - № 2. - С. 186.
39. Иванова Л.А., Кетиладзе Е.С., Крылов В.Ф. и др. Диагностическое значение специфических антител класса IgM при гриппе. // Вопр. вирусол. 1986. -№ 1. - С. 116.
40. Иммунологическая диагностика вирусных инфекций. / Под ред. Т.В.Перад-зе, П.Халонена. М.: Медицина., 1985. - 302 с.
41. Иммуноферментный анализ. / Под ред. Т.Т.Нто, Г.Ленхоффа. М., 1988. -444 с.
42. Исаева Е.И., Ровнова 3.И., Полякова Т.Г., Стаханова В.М. Применение иммуноферментного анализа для изучения этиологической структуры заболеваемости гриппом в 1985-1988 гг. // Вопр. вирусол. 1990. - № 2. - С. 119.
43. Исаков В.А., Сафронова М.М. Клиника и лечение генитального герпеса. Санкт-Петербург, 1997. -'33 с.
44. Караванов A.C., Пиванова Т.П., Баннова Г.Г. и др. Сопоставление чувствительности твердофазных иммуносорбентных методов диагностики клещевого энцефалита. //Вопр. вирусол. 1990. - № 2. - С. 162.
45. Караванов A.C., Пиванова Г.П., Баннова Г.Г. и др. Эффективность твердофазной иммуноферментной системы для диагностики клещевого энцефалита. // Вопр. вирусол. 1990. - № 5. - С. 429.
46. Каражас Н.В., Хаустов В.И. Выделение цитомегаловируса человека при первичной цитомегаловируеной инфекции. // Вопр. вирусол. 1994. - № 6. - С. 266.
47. Кешинян Е.С. Внутриутробная цитомегаловирусная и герпетическая инфекция. // Мед. помощь. 1994 - № 1. - С. 29-31.
48. Кожухов В.М., ЖиловаТ.П., Кашкин А.П. и др. Использование ИФА для изучения иммунного ответа у привитых гриппозными вакцинами и у реконваленцентов. //Вопр. вирусол. 1985. - № 6. - С. 745.
49. Леви М.И.> Смирнова Э.И. Теоретическая схема иммуноферментного анализа (вариант "сандвич"). // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. -1989.-№ 4.-С. 42-46.
50. Левина С.Т., Каражас Н.В., Минькова ВТ. Связь аутоимунных заболеаний у детей с врожденной цитомегаловируеной инфекцией. // Тез. докл. 1 Съезда иммунол. России. Нов-к, 1992. - С. 272.
51. Леонов C.B., Посевая Т.А., Закомырдин Ю.А. и др. Использование конъюгата белка А стафилококка с пероксидазой в иммуноферментной тест-системе для определения антител к вирусу протого герпеса. // Вопр. вирусол. 1986. - № 3. - С. 321.
52. Леонов C.B., Христова М.Л., Соколова М.В. и др. Иммуноферментная тест-система на основе Г(аЬ)-фрагментов антител для выявления белка NP вируса гриппа. // Вопр. вирусол. № 1. - С. 18.
53. Львов Н.Д., Дегтяров И.Л., Свешников П.Г. и др. Разработка иммуноферментного теста для определения вируса простого герпеса типа I с использованием моноклональных антител. // Вопр. вирусол. 1986. - № 6. - С. 709.
54. Мальцева H.H., Згурский A.A. Способ приготовления иммуносорбента для диагностики цитомегаловирусной инфекции. / Пат.2028156 Россия, М И6 А 61 39/245 -№ 4912446/14: Заявл. 15.02.95; Опубл. 09.02.95. Бюл. № 4.
55. Маренникова С.С., Мацевич Г.Р., Хабахпашева H.A. и др. Повышение специфичности иммуноферментного анализа за счет использования конъюгата на основе моноклональных антител. // Вопр. вирусол. 1986. - № 6. - С. 689.
56. Маренникова С.С., Шелухина Э.М., Чекунова Э.В. и др. О стабильности основных компонентов тест-системы ИФА для серодиагностики ВИЧ-инфекции. // Вопр. вирусол. 1990. - № 2. - С. 128.
57. Мацевич Г.Р., Старов А.И., Маренникова С.С., Анджапаридзе О.Г. Иммуноферментные тест-системы для выявления антигенов ВИЧ и попытка их использования при обследовании ВИЧ-инфицированных лиц. // Вопр. вирусол. -1991. -№ 6. С. 444.
58. Методы исследований в иммунологии. / Под ред. И. Лёфковитса, Б. Перниса. М., 1981. - С. 95-119.
59. Мешандцн А.Г., Миносян Б.О., Ванеева Л.И. и др. Оптимизация некоторых параметров, позволяющих улучшить сорбционную активность планшет для твердофазного иммуноферментного анализа. // Журн. микробиологии, эпидемиол. и иммунобиол. 1991. - № 3. - С. 60-61.
60. Мищенко В.А., Базаров М.А., Конюшкина Г.Б. и др. ИммунОферментный метод в диагностике ящура. // Вопр. вирусол. 1991. - № 4. - С. 341.
61. Моргунов К.В., Савицкий Г.И. Клеточный и гуморальный иммунитет у детей при ЦМВИ. // Вопр. вирусол. 1989 - т. 34, № 5. - С. 612-613.
62. Набор реагентов для иммуноферментного анализа иммуноглобулинов М, G, А человека. ВФС 42-352 ВС-92 утверждена МЗ РФ 7.07.92.
63. Нагиева Ф.Г., Краснова Н.И., Никулина В.Г. и др. Иммуноферментная тест-система на основе вируса кори, полученного при культивировании клеток на микроносителях цитолар-2. // Вопр. вирусол. 1991. - № 4. - С. 334.
64. Никитина A.A., Львов Н.Д., Свешников П.Г. и др. Усовершенствование иммуноферментной тест-системы на основе моноклональных антител ддя определения герпесвирусных антигенов. // Вопр.вирусол. 1990. - № L - С. 52.
65. Николаев В.П., Царькова В.А. Твердофазный иммуноферментный экспресс-анализ для обнаружения вирусных антигенов. // Вопр. вирусол. 1984. - № 6. - С. 720.
66. Новые методы иммуноанализа. / Под ред. У.П. Коллинза. М., 1991. - С. 116-138.
67. Обух Н.Б., Мартынова ВН., Сонькина Л.А. Проблемы диагностики цито-мегаловирусной инфекции у пациентов с трансплантированной почкой. // Терапевт, арх. -'1991: т. 63, № 6. - С. 79-81.
68. Орехов К.В. Цитомегаловирусная инфекция у детей раннего возраста.// Экол. человека и инфекц. заболев, детей Ставропольского края. / Ставроп. гос. мед. институт Ставрополь, 1994. - С. 26-36.
69. Остерман Л.А. Хроматография белков и нуклеиновых кислот. М., 1985. -536 с.
70. Пантелеев O.A., Ванеева Л.И. Непрямой твердофазный метод иммуноферментного анализа, его точность и источники погрешностей. // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1986. - № 3. - С. 95-99.
71. Парыгина М.М., Логинова Н.В. Идентификация флавовирусов с помощью высокоспецифичного иммуноферментного анализа.7/ Вопр. вирусол. 1991. - № 6. -С. 526.
72. Пауков С.В. О роли некоторых вирусных инфекций при синдроме задержки внутриутробного развития плода (ЗВРП). // Актуальные вопросы физиологии и патологии репродуктивной функции женщины. Л., 1991. - С. 127-130.
73. Подчерняева P.A., Хижнякова Т.М., Михайлова Г.Р. и др. Анализ варианта линии клеток Уеуо (В) для использования в вирусологии. // "Биология клетки в культуре", Тез. докл. Цитология. - 1996. - № 2. - С. 241-242.
74. Резапкин Г.В., Иванов А.П., Ткаченко Е.А., Г. ван дер Грун. Оценка результатов прямого твердофазного иммуноферментного метода для определения антигенов. // Вопр. вирусол. 1986. - № 5. - С. 573-577.
75. Рокицкий П.Ф. Биологическая статистика. Минск, 1964. - 328 с.
76. Селиванов Я.М., Гренкова Е.П., Николаева О.В. и др. Разработка тест-системы для диагностики ЦМВИ с помощью тИФА. // Герпесвирусные инфекции. / Под ред. И.Ф.Баринского. М., 1990. - С. 87-91.
77. Соколенко A.A., Славина М.Н., Шаханина К.Л. Иммуноферментный анализ для определения антител классов G и М к HBSA. // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1988. - № 2. - С. 99-109.
78. Сонькина A.A., Мартынова В Н., Иванова Л.А. и др. Сравнительная оценка специфических методов лабораторий диагностики цитомегаловирусной инфекции. // Герпесвирусные инфекции. / Под ред. И.Ф.Баринского. М., 1990. - С. 72-77.
79. Субботина Л.С., Навлокин О.В., Ботвинкин А.Д., Матюхина Л.В. Результаты использования метода ELISA при изучении клещевого энцефалита и бешенства. // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1985. - № 1. - С. 73-77.
80. Сухих Т.Т., Дадальян Л.Г., Ванько Л.В. Диагностическая и прогностическая ценность специфического иммунного ответа к цитомегаловирусу у беременных женщин с привычным невынашиванием беременности. // Акушерство и гинекология. 1992. - № 3-7. - С. 30-33.
81. Сухоруков A.M., Пономарева A.M. Изучение сорбционных свойств полистироловых планшетов, используемых в иммуноферментном анализе. // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1987. - № 9. - С. 18-22.
82. Тарасишин Л.А., Беренчи Д. Иммуноферментная тест-система для выявления антител к аденовирусам на основе антиидиотипических антител. // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1988. - № 5. - С. 52-55.
83. Теория и практика иммуноферментного анализа. / Под ред. А.М.Егорова, А.П.Осипова, Б.Б.Дзантиева, Е.М.Гавриловой М., 1991. - 288 с.
84. Фарбер H.A., Демидова С.А., Мартынова В.Н. и др. Цитомегаловирусная инфекция и иммунодефицит. // Вопр. вирусол. 1986. - № 3. - С. 326-329.
85. Физико-химические, химические, физические и иммунохимические методы контроля медицинских иммунобиологических препаратов. ФС № 42-344ВС-90.
86. Цетлин Е.М., Волкова P.A. Отработка оптимальной схемы учета результатов при применении иммуноферментной тест-системы для определения антигенной активности культуральной антирабической вакцины. //Вопр. вирусол. 1990.-№ 1.-С. 21-24.
87. Цинзерлинг В.А., Васильев Г.П О взамоотношении цитомегаловирусной инфекции и иммунодефицитов. // Арх. патол. 1990. - т. 52г № 7. - С. 16-20.
88. Шаханина К.Л., Соколенко A.A., Павлова И.П. и др. Выбор критериев пригодности твердофазных носителей на основе полистирола для проведения иммуноферментного анализа. // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. -1987. -№ 9. С. 8-11.
89. Шендерович С.Ф., Говоркова E.H., Иванова В.Г. и др. Использование иммуноферментного анализа для индикации и дифференциации вирусов гриппа А, В и С. //Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1985. - № 1. - С. 85-90.
90. Шендерович С.Ф., Закстельская Л.А., Иванова В.Т. и др. Тест-система дня индикации и дифференциации вируса гриппа иммуноферментным методом. // Вопр. вирусол. 1984. - № 4. - С. 459.
91. Шефер К.Ю., Христова М.Л., Буссе Г.Л. и др. Стандартизация условий выявления внутренних белков вируса гриппа при исследовании их антигенных свойств в твердофазном иммуноферментном анализе. // Вопр. вирусол. 1990. - № 2. -С. 105.
92. Щиголев Б.М. Математическая обработка наблюдений. М., 1969. - С. 311-312.
93. Adler S.P., McVoy М., Biro V.G. et al. Detection of cytomegalovirus antibodies with latex agglutination. // J. Clin. Microbiol. 1985. - Vol. 22, N. 1 - P. 68-70.
94. Adler S.P. Cytomegalovirus and child day care. Evidence for an increased infection rate among day-care workers. // N. Engl. J. Med. 1989. - Vol. 321, N. 16. - P. 1290-1296.
95. Adler S.P. Cytomegalovirus and pregnancy. // Curr. Opin. Obstet. Gynecol. -1992. Vol. 4, N. 5. - P. 670-675.
96. Adler S.P., Starr S.E., Plotkin S.A. et al. Immunity induced by primary human cytomegalovirus infection protects against secondary infection among women of child-bearing age. // J. Infec. Dis. 1995. - Vol. 171, N. 1. - P. 26-32.
97. Adler S.P. Hospital transmission of cytomegalovirus. // Infec. Agents Dis. -1992. Vol. 1, N. 1. - P. 43-49.
98. Albert S., Kuhn! P., Sibrowski W., Seidl S., Doerr H.W. Die Bedeutung des Zy-tomegalievirus im Blutspendewesen // Infusionstherapie. 1990. - Vol. 17, N. 1. - P. 48-56.
99. Alexander H., Harpprecht J., Podzuweit H.G. et al. Human monoclonal antibodies recognize early and late viral proteins of human cytomegalovirus. // Hum. Antibodies Hibridomas. 1994. - Vol. 5, N. 1-2. - P. 81-90.
100. Alford C.A., Britt W.J. Fields Virology Cytomegalovirus. / New York: Raven Press Ltd., 1990. - Ed. 2. - P. 1981-2010.
101. Andersson Ellstrom A., Svennerholm B., Forssman L. Prevalence of antibodies to herpes simplex virus types 1 and 2, Epstein-Barr virus and cytomegalovirus in teenage girls. // Scand. J. Infect. Dis. 1995. - Vol. 27, N. 4. - P. 315-318.
102. Antipa C., Copelovici Y. Investigate privind prezenti anticorpilor HCMVTa gravide si nou-nascuti. //Pediatria. 1994. - Vol. 43, N. 2. - P. 71-74.
103. Aochi H., Nagamine K., Hayashi S. et al. Evalution of IgM antihuman cytomegalovirus antibodies., II Rinsho-Byori. 1990. - Vol. 38, N. 7. - P. 789-793.
104. Arista S., Ferraro D., Cascio A. et al. Detection of IgM antibodies specific for measles virus by capture and indirect enzyme immunoassays. // Res. Virol. 1995. - Vol. 146, N. 3.-P. 225-232.
105. Arrizabalaga J., Iribarren J.A., Rodriguez-Arrohdo F. et al. Enfermedad por citomegalovirus en el sida. // Enferm. infec. microbiol. clin. 1994. - Vol. 12, N. 6. - P. 297-311.
106. Arthur J., Efstathion S., Simmons A. Intranuclear foci containing low abundance herpes simplex virus latency-associated transcripts visualised by non-isotopic in situ hybridization. //J. Gen. Virol. 1993. - Vol. 74, N. 7. - P. 1363-1370.
107. Asbell P.A., Torres M.A., Kamenar T., Bottone E.J. Rapid diagnosis of ocular herpes simplex infections. // Br. J. Ophthalmol. 1995. - Vol. 79, N. 5. - P. 473-475.
108. Ashley R., Peterson E., Abbo H. et al. Comparison of monoclonal antibodies for rapid detection of cytomegalovirus in spin-aplified plate cultures. // J. Clin. Microbiol. 1989. - Vol. 27, N. 12. - P. 2858-2860.
109. Ashley R.L., Corey L., Dalessio J. et al. Protein-specific cervical antibody responses to primary genital herpes simplex virus type 2 infections. // J. Infect. Dis. 1994. -Vol. 170, N. 1. - P. 20-26.
110. Ashley R.L., Dalessio J., Dragavon J. et al. Underestimation of HSV-2 sero-prevalence in a high-risk population by microneutralization assay. // Sex. Transm. Dis. -1993. Vol. 20, N. 4. - P. 230-235.
111. Aurelius E. Herpes simplex encephalitis. Early diagnosis arid immune activation in the acute stage and during long-term follow-up. // Scand. J. Infect. Dis. Suppl. -1993. -N.89.-P.3-62.
112. Baker D.A. Heipes simplex virus infections. // Curr. Opin. Obstet. Gynecol. -1992. Vol. 4, N. 5. - P. 676-681.
113. Ball C.L. Cytomegalovirus as a transfusion and transplant associated pathogen. // Can. J. Med. Technol. 1992. - Vol. 54, N. 2. - P. 98-104.
114. Baronciani D., Angelucci E,. Lucarelli G. et al. Cytomegalovirus infections in thalassemic patients after bone marrow transplantation. // Bone Marrow Transplant. -1990.-Vol. 5, N. 3.-P. 167-172.
115. Bartoszcze M., Roszkowski J. ELISA nowa metoda w diagnostyce wirusolo-gicznej. II Post. Microbiol. - 1979. - Vol. 18, N. 3-4. - P. 261-273.
116. Bassett I., Donovan B., Bodsworth N.J. et al. Herpes simplex virus type 2 infection of heterosexual men attending a sexual health centre. // Med. J. Aust. 1994. -Vol. 160, N. 11. - P. 697-700.
117. Beckwith D.G., Halstead D.C., Alpaugh K. et al. Comparison of latex agglutination test with five other methods for determining the presence of antibodies against cytomegalovirus. //J. Clin. Microbiol. 1985. - Vol. 21., N.3 - P. 328-331.
118. Bein J. The detection of human cytomegalovirus immediate early antigen in peripheral blood leucocytes. //J. Immunol. Meth. 1991. - Vol. 137, N. 2. - P. 175-180.
119. Beninga J., Kropff В., Mach M. Comparative analysis of fourteen individual human cytomegalovirus proteins for helper T cell response. // J. Gen. Virol. 1995. - Vol. 76, Pt. 1. - P. 153-160.
120. Benne C.A., Harmsen M., De Jong J.C. et al. Neutralization enzyme immunoassay for influenza virus. // J. Clin. Microbiol. 1994. - Vol. 32, N. 4. - P. 987-990.
121. Bennion D.W., Carlquist J., Wright L.J. et al. Specimen type as a source of variability in the reproducibility and timing of cytomegalovirus identification by cultture. // Diagn. Microbiol. Infec. Dis. 1995. - Vol. 21, N. 4. - P. 203-207.
122. Berge P., Stagns S., Federer W. et al. Impact of asymptomatic congenital cytomegalovirus infection on size at birth and gestational duration. // Pediat. Infec. Dis. J.1990. Vol. 9, N. 3.-P. 170-175.
123. Bevan I.S., Daw R.A., Day P.J. et al. Polymerase chain reaction for detection of human cytomegalovirus infection in a blood donor population. // Br. J. Haematol.1991.- Vol. 78, N.I. P. 94-99.
124. Boeckh M., Bowden R. Cytomegalovirus infection in marrow transplantation. // Cancer Treat. Res. 1995. - Vol. 76. - P. 97-136.
125. Boland G.J., Hene R.J., Ververs C. et al. Factors influencing the occurrence of active cytomegalovirus infection after organ transplantation. // Clin. Exp. Immunol. -1993. Vol. 94, N. 12. - P. 306-312.
126. Bornstein J., Ben Porath E., Nizri M. Abramovici H. Evaluation of a monoclonal antibody-based enzyme immunoassay for early detection of herpes simplex virus genital infection. // Isr. J. Med. Sci. 1993. - Vol. 29, N. 8. - P. 445-448.
127. Borque L., Maside C., Rus A. et al. IgG interference in second generation enzyme immunoassays for anti-hepatitis С virus antibodies. // J. Immunoassay. 1993. -Vol. 14, N. 3. - P. 183-189.
128. Borysiewicz L.K., Hickling J.K., Graham S. et al. Human cytomegalovirus specific cytotoxic T cells. //J. Exp. Med. 1988. - Vol. 168, N. 3. - P. 919-931.
129. Bos P., Steele D., Alexander J. Prevalence of antibodies to rubella, herpes simplex 2 and cytomegalovirus in pregnant women and in neonates at Ga-Rankuwa. // Cent. Afr. J. Med. 1995. - Vol. 41, N. 1. - P. 14-17.
130. Bosch F.H:, Hoitsma A.J., Janssen H.P. et al. Cytomegalovirus infection and disease in renal transplant patients treated with cyclosporin. // Transpl. Int. 1989. - Vol. 2, N. 2. - P. 92-95.
131. Botma H.J., Dekker H., van Amstel P. et al. Differential in situ hybridization for herpes simplex virus typing in routine skin biopsies. // J. Virol. Methods. 1995. - Vol. 53, N. 1. - P. 37-45.
132. Bourhis J.H. Cytomegalovirus interstitial pneumonia following bone marrow transplantation selective early treatment guided by bronchoalveolar lavage and blood viral isolation. // Br. J. Haematol. 1994. - Vol. 87, Suppl. 1. - P. 27.
133. Bowden R.A. Transmitted cytomegalovirus infection. // Immunol. Invest. -1995. Vol. 24, N. 1-2. - P. 117-128.
134. Brainard J.A., Greenson J.K., Vesy C.J. et al. Detection of cytomegalovirus n liver transplant biopsies. A comparison of light microscopy, imunochemistry, duplex PCR and nested PCR. // Transplantation. 1994. - Vol. 57, N. 12. - P. 1753-1757.
135. Brinker J.P., Herrmann J.E. Comparison of three monoclonal antibody-based enzyme immunoassays for detection of herpes simplex virus in clinical specimens. // Eur. J. Clin. Microbiol. Infec. Dis. 1995. - Vol. 14, N. 4. - P. 314-317.
136. Britt W.I. Neutralizing antibodies detect a disulfide-linked glycoprotein complex within the envelope of human cytomegalovirus. // Virology. 1984. - Vol. 135. - P. 369-378.
137. Britt W.I., Mach A.M., Wagner B., Kropff B. Antigenic analysis of the immunodominant antibody recognition site of human cytomegalovirus gp55-l 16 (gB). // J. Clin. Biochem: 1993. - Suppl. 17D. - P. 44.
138. Britt W.L, Vugler L. Induction of complement -dependent and -independent neutrolizing antibodies by recombinant-derived HCMV gp55/l 16. // J. Virology. 1988. -Vol. 62, N. 9. - P. 3309-3318.
139. Brown Z.A., Benedetti J., Selke S. et al. Asymptomatic maternal shedding of herpes simplex virus at the onset of labor: relationship to preterm labor. // Obstet. Gynecol. 1996. - Vol. 87, N. 4. - P. 483-488.
140. Brown Z.A., Benedetti J.K., Watts D.H. et al. A comparison between detailed and simple histories in the diagnosis of genital herpes complicating pregnancy. // Am. J. Obstet. Gynecol. 1995. - Vol. 172, N. 4, Pt. 1. - P. 1299-1303.
141. Bruggeman C.A. Cytomegalovirus and latency: an overview. // Virchows Arch. B Cell Pathol. Incl. Mol. Pathol. 1993. - Vol. 64, N. 6. - P. 325-333.
142. Buck A.A., Gart J.J. Comparison of a screening test and a reference test in epidemiologic studies. I. Indices of agreement and their relation to prevalence. // Am. J. Epi-dem. 1966. - Vol. 83. - P. 586.
143. Cappel D.F., McFaclone M.N. Inclusion bodies in the organ of infants. // J. Path. Bad. 1947. - Vol. 59. - P. 385.
144. Carmack M.A., Prober C.G. Neonatal herpes: vexing dilemmas and reasons for hope. // Curr. Opin. Pediatr. 1993. - Vol. 5, N. 1. - P. 21-28.
145. Carter I.W., Cloonon M.J. Comparison between three PCR methods for detection of human cytomegalovirus DNA. //Pathology. 1995. - Vol. 27, N. 2. - P. 161-164.
146. Cengiz A.T., Kendi O., Kiyan M. et al. Transseksuel ve homoseksuellerde herpes simplekes virus (HSV)-2 IgG ve IgM'nin ELISA ile gosterilmesi. // Mikrobiyol. Bui. -1993.-Vol. 27, N. l.-P. 46-51.
147. Champs^ur H., Fattal-German M., Arranhado R. Sensitivity and specifity of viral immunoglobulin M determination by indirect enzyme-linked immunosorbent assay. // J. Clin. Microbiol. 1988. - Vol. 26, N. 2. - P. 328-332.
148. Chaniotis G. Cytomegalovirus and atrophic gastritis. // World Congr. Gastroenterol. Abington, 1990. - P. 35.
149. Chaushi^ G., Chaushu S., Slavin S. et al. Salivary immunoglobulins in recipients of bone marrow grafts. III. A longitudinal follow-up of CMV specific antibodies. // Bone Marrow Transplant. 1996. - Vol. 17, N. 2. - P. 237-241.
150. Chou S., Merigan T.C. Rapid detection and quantitation of human cytomegalovirus in urine through DNA hybridization. // N. Engl. J. Med. 1983. - Vol. 308. - P. 921-925.
151. Chou S. Newer methods for diagnosis of cytomegalovirus infection. // Rev. In-fec. Dis. 1990. - Vol. 12, Suppl. 7. - P. 727-736.
152. Christenson B., Bottiger M., Svensson A., Jeansson S. A 15-year surveillance study of antibodies to herpes simplex virus types 1 and 2 in a cohort of young girls. // J. Infect. 1992. - Vol. 25, N. 2. - P. 147-54.
153. Cohen P.R. Tests for detecting herpes simplex virus and varicella-zoster virus infections. //Dermatol. Clin. 1994. - Vol. 12, N. 1. - P. 51-68.
154. Collier A.C., Handsfield H.H., Ashley R. et al. Cervical but not urinary excretion of cytomegalovirus is related to sexual activity and contraceptive practices in sexually active women. // J. Iilfec. Dis. 1995. - Vol. 171, N. 1. - P. 33-38.
155. Compton T. An immortalized human fibroblast cell line is permissive for human cytomegalovirus infection. // J. Virol. 1993. - Vol. 67, N. 6. - P. 3644-3648.
156. Condorelli F., Scalia G., Stivala A. et al. Seroprevalence to some TORCH agents in a Sicilian female population of fertile age. // Eur. J. Epidemiol. 1993. - Vol. 9, N. 3.-P. 341-343.
157. Cone R.W., Hobson A.C., Brown Z. et al. Frequent detection of genital herpes simplex virus DNA by polymerase chain reaction among pregnant women. // JAMA. -1994. Vol. 272, N. 10. - P. 792-796.
158. Cone R.W., Swenson P.D., Hobson A.C. et al. Herpes simplex virus detection from genital lesions: a comparative study using antigen detection (HerpChek) and culture. // J. Clin. Microbiol. 1993. - Vol. 31, N. 7. - P. 1774-1776.
159. Connelly B.L., Stanberry L.R. Herpes simplex virus infections in children. // Curr. Opin. Pediatr. 1995. - Vol. 7, N. 1. - P. 19-23.
160. Connor E., Wang Z., Stephens R. et al. Enzyme immunoassay for detection of human immunodeficiency virus specific immunoglobulin A antibodies. // J. Clin. Microbiol. 1993. - Vol. 31.N.3. - P. 681-684.
161. Costa S.C., Miranda S.R., Alves G. et al. Donated organs as a source of cytomegalovirus (CMV) in renal transplant patients. // Braz. J. Med. Biol. Res. 1994. -Vol. 27, N. 11. - P. 2573-2578.
162. Cowan F.M., Johnson A.M., Ashley R. et al. Antibody to herpes simplex virus type 2 as serological marker of sexual lifestyle in populations. // BMJ. 1994. - Vol. 309, N. 6965. - P. 1325-1329.
163. Damilano G., Juarez M.C., Carballal G., Arana R.A. Prevalence of anti-cytomegalovirus antibodies in a children population of Buenos Aires. // Medicina B.Aires. 1992. - Vol. 52, N. 2. - P. 116-118.
164. Dankner W.M., McCutchan J.A., Richman D.D. et al. Localization of human cytomegalovirus in peripheral blood leukocytes by in situ hybridization. // J. Infec. Dis. -1990. -Vol. 161, N. 1. P. 31-36.
165. Dobbins J.G., Adler S.P., Pass R.F. et al. The risks arid benefits of cytomegalovirus transmission in child day care. // Pediatrics. 1994. - Vol. 94, N. 6, Pt.2. - P.1016-18.
166. Doern G.V., Robbie L., Marrama L. Comparison of two enzyme immunoassays and two latex agglutination assays for detection of cytomegalovirus antibody. // Di-agn. Microbiol. Infec. Dis. 1994. - Vol. 20, N. 2. - P. 109-112.
167. Drago D., Catapano P., Marinangeli S. et al. Serological screening for herpes simplex virus during pregnancy. // Clin. Exp. Obstet. Gynecol. 1993. - Vol. 20, N. 1. - P. 27-31.
168. Drew L.W. Diagnosis of cytomegalovirus infection. // Rev. liifec. Dis. 1988. -Vol. 10, Suppl. 3. - P. 468-476.
169. Drew Winston J. Prevention of cytomegalovirus disease in transplant recipients. // Lancet. 1995. - Vol. 346, N. 8987. - P. 1380-1381.
170. Duban-Bedu. A comparative study of human cytomegalovirus by the PCR and conventional cell culture in samples from transplant recipients. // Biomed. Lett, 1994, -Vol. 49, N. 193. - P. 29-39.
171. Dunn J.P., Jabs D.A. Cytomegalovirus retinitis in AIDS: natural history, diagnosis and treatment. //AIDS Clin. Rev. 1995-96. - P. 99-129.
172. Dutko F.J., Oldstone M.B. Murine cytomegalovirus infects spermatogenic cells. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1979. - Vol. 76. - P. 2988-2991.
173. Duverlie G., Houbart L., Visse B. et al. A nylon membrane enzyme immunoassay for rapid diagnosis of influenza A infection. // J. Virol. Meth. 1992. - Vol. 40, N. 1. -P. 77-84.
174. Dwyer D.E., Cunningham A.L. Herpes simplex virus infection in pregnancy. // Baillieres Clin. Obstet. Gynaecol. 1993. - Vol. 7, N. 1. - P. 75-105.
175. Echaniz Aviles G., Tamayo Legorreta E., Cruz Valdez A., et al. Prevalencia de anticuerpos contra citomegalovirus en mujeres en edad reproductiva. // Salud Publica Mex. 1993. - Vol. 35, N. 1. - P. 20-26.
176. Einsele H., Vallbracht A., Jahri G. et al. Hybridization techniques provide improved sensitivity for HCMV detection and allow quantitation of the virus in clinical samples.//J. Virol. Meth. 1989. - Vol. 26, N. 1. - P. 91-104.
177. Erice A., Holm M.A. Cytomegalovirus (CMV) antigenaemia assay is more sensitiverhan shell vial cultures for rapid detection of CMY in polymorphonuclear blood leukocytes. //J. Clin. Microbiol. 1992. - Vol. 30, N. 11. - P. 2822-2825.
178. Eriksson B.M., Brytting M., Zweygberg-Wirgart B. et al. Diagnosis of cytomegalovirus in bronchoalveolar lavage by PCR in comparison with virus isolation and detection of viral antigen. // Scand. J. Infec. Dis. 1993. - Vol. 25, N. 4. - P. 421-427.
179. Falsey A.R., McCann R.M., Hall W.J., Criddle M.M. Evaluation of four methods for the diagnosis of respiratory syncytial virus infection in older adults. // J. Am. Geriatr. Soc. 1996. - Vol. 44, N. 1. - P. 71-73.
180. Farber S., Wolbach S.B. Intranuclear and cytoplasmic inclusions ("protozoon like bodies") in salivary glands and other organs of infants. //Am. J. Pathol. 1932. - Vol. 8.-P. 123.
181. Farkkila M., Koskiniemi M., Vaheri A. Clinical spectrum of neurological herpes simplex infection. // Acta Neurol. Scand. 1993. - Vol. 87, N. 4. - P. 325-328.
182. Favorov M.O., Khudyakov Y.E., Fields H.A. et al. Enzyme immunoassay for the detection of antibody to hepatitis E virus based on synthetic peptides. // J. Virol. Meth. 1994. - Vol. 46, N. 2. - P. 237-250.
183. Fiebze E. Evidence for chronic cytomegalovirus infection in the majority of patients with common yariable immunodeficiency. // Histochem. J. 1992. - Vol. 24, N. 8. -P. 518.
184. Field P.R., Ho D.W., Cunningham A.L. The diagnosis of recent herpes simplex virus type 2 genital infections by the simplex-2 test. 7/ Pathology. 1992. - Vol. 24, N. 4. -P. 302-306.
185. Field P.R., Ho D.W., Irving W.L. et al. The reliability of serological tests for the diagnosis of genital herpes: a critique. // Pathology. 1993. - Vol. 25, N. 2. - P. 175-9.
186. Flint A., Frank Th.S. Cytomegalovirus detection in lyng transplant biopsy samples by polymerase chain reaction. // J. Heart and Lung Transplant. 1994. - Vol. 13, N. 1, Pt. 1. - P. 38-42.
187. Forfason E.G., Diderhohm H. False RIA IgM titer to herpes simplex virus and cytomegalovirus: factors causing them and their absorbtion by protein A-Sepharose-IgG protein A Sepharose. //J. Med. Virol. 1982. - Vol. 10. - P. 157-170.
188. Forsgen A., Sjoquist J. Protein A from S. aureus. I. Pseudoimmune reaction with human gamma globulin. // J. Immunol. 1986. - Vol. 97. - P. 822-827.
189. Forsgren M., Skoog E., Jeansson S. et al. Prevalence of antibodies to herpes simplex virus in pregnant women in Stockholm in 1969, 1983 and 1989: implications for STD epidemiology. // Int. J. STD AIDS. 1994. - Vol. 5, N. 2. - P. 113-116.
190. Francisci D., Tosti A., Preziosi R. et al. Role of antigenemia assay in the early diagnosis and prediction of human cytomegalovirus organ involvement in AIDS patients. // Eur. J. Clin. Microbiol. Infec. Dis. 1995. - Vol. 14, N. 6. - P. 498-503.
191. Frenkel L.M., Garratty E.M., Shen J.P. et al. Clinical reactivation of herpes simplex virus type 2 infection in seropositive pregnant women with no history of genital herpes. //Ann. Intern. Med. 1993. - Vol. 118, N. 6. - P. 414-418.
192. Furukawa J., Gonczol E., Slarr S. et al. HCMV-envelope antigens induce both humoral and cellular immunity in guinea pigs. // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1984. - Vol. 175. - P. 243-250.
193. Gonczol E., Hundecz F., Janacona J. et al. Immune responses to isolated human cytomegalovirus envelope proteins. // J. Virology. 1986. - Vol. 58, N. 2. - P. 661 -664.
194. Gabriel F.G. Peptide based enzyme immunoassays for detecting hepatitis C antibodies in sera of people at high risk. //J.Clin. Pathol. 1994. - Vol. 47, N. 4. - P. 357-9.
195. Garcia F. Jr., Garcia F., Bernal M.C. et al. Evaluation of enzyme immunoassay for hepatitis B virus DNA based on anti-double-stranded DNA. // J. Clin. Microbiol. -1995. Vol. 33, N. 2. - P. 413-415.
196. Garea M.T., Lopez J.M., Perez del Molino M.L. et al. Comparison of a new commercial enzyme immunoassay for rapid detection of respiratory synsytial virus. // Eur. J. Clin. Microbiol. Infec. Dis. 1992. - Vol. 11, N. 2. - P. 175-177.
197. Garland S.M. Neonatal herpes simplex: Royal Women's Hospital 10-year experience with management guidelines for herpes in pregnancy. // Aust. N. Z. J. Obstet. Gynaecol. 1992. - Vol. 32, N. 4. - P. 331-334.
198. Gelven P.L., Gruber K.K., Swiger F.K. et al. Fatal disseminated herpes simplex in pregnancy with maternal and neonatal death. // South. Med. J. 1996. - Vol.89, N.7. -P.732-734.
199. George J.R. Detection of HIV-1 IgA by an IgA capture enzyme immunoassay for early diagnosis in infants. NYC Perinatal HIV Transmission Collaborative Study Group. // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1993. - N. 693. - P. 272-274.
200. Germenis A., Politis C. Latent cytomegalovirus infections affect Ig levels of patients with thalassemia major.// Haematologia. 1990. - Vol. 75, N. 1. - P. 42-45.
201. Germeris A., Politis C. Thalassemic patients are at high risk for transfusion -transmitted cytomegalovirus infections. //Acta haematol. 1989. - Vol. 82, N.2. - P.57-60.
202. Gerna G>> Revello M.G., Percivalle E. et al. Quantifucation of human cytomegalovirus viremia by using monoclonal antibodies to different viral proteins. // J. Clin. Microbiol. 1990. - Vol. 28, N. 12. - P. 2681-2688.
203. Gibson W., Irmiere A. Selection of particles and proteins for use as human cytomegalovirus subunit vaccines. // Pathogenesis and Prevention of Human Infection. / Ed. by S.A. Plotkin. 1984. - Vol. 20. - P. 305-324.
204. Gilljam G., Wahren B. Properties of IgG subclasses to human cytomegalovirus. // J. Virol. Meth. 1989. - Vol. 25, N. 2. - P. 139-151.
205. Gilstrap L.C., Sebastian F. Cytomegalic virus infection in pregnancy. // Infections in Pregnancy. / Ed. by Alan R. Liss. 1990. - P. 151-163.
206. Gleaves C.A., Militoni J., Ashley R.L. An enzyme immunoassay for the direct detection of adenovirus in clinical specimens. // Diagn. Microbiol. Infec. Dis. 1993. -Vol. 17, N. 1. - P. 57-59.
207. Gleaves C.A., Myerson D., Bowden R.A. Direct detection of cytomegalovirus from bronchoalveolar lavage samples by using a redid in situ DNA hybridization assay. // j. Clin. Microbiol. 1989. - Vol. 27, N. 11. - P. 2429-2432.
208. Goade D.E., Bell R., Yamada T. et al. Locations of herpes simplex virus type 2 glycoprotein B epitopes recognized by human serum immunoglobulin G antibodies. // J. Virol. 1996. - Vol. 70, N. 5. - P. 2950-2956.
209. Gondo H., Minematsu T., Harada M. et al. CMV antigenaemia for rapid diagnosis and monitoring of CMV-associated disease after bone marrow transplantation. // Br. J. Haematol. 1994. - Vol. 86, N. 1. - P. 430-437.
210. Goral S., Helderman J.H. Cytomegalovirus and rejection. // Transplant. Proc. -1994. Vol. 26, N. 5, Suppl. 1. - P. 5-6.
211. Granberg C., MeurmanO. Performance of two new enzyme immunoassays for the detction of IgM and IgG antibodies to rubella. // Eur. J. Clin. Microbiol. Infec. Dis. -1994. Vol. 13, N. 6. - P. 512-515.
212. Grangeot-Keros L., Pustowoit B., Hobman T. Evaluation of Cobas Core Rubella IgG EIA recomb., a new enzyme immunoassay based on recombinant rubella-like particles. // J. Clin. Microbiol. 1995. - Vol. 33, N. 9. - P. 2392-2394.
213. Green M.S., Cohen D., Slepon R. et al. Ethnic and gender differences in the prevalence of anti-cytomegalovirus antibodies among young adults in Israel. // Int. J. Epidemiol. 1993. - Vol. 22, N. 4. - P. 720-723.
214. Gretch D,R., Kari B., Rasmussen L., Gehrz R.C., Stinski M.F. Identification and characterization of three distinct families of glycoprotein complexes in the envelope of human cytomegalovirus. // J. Virology. 1988. - Vol. 62. - P. 875-881.
215. Griffith B.P., Booss J. Neurologic infections of the fetus and newborn. // Neurol. Clin. 1994. - Vol. 12, N. 3. - P. 541-564.
216. Grillner L., Brundih M. Evaluation of the Abbott IMX automated analyser for determination of cytomegalovirus IgG and IgM antibodies. // 5th Eur. Cong. Clin. Microbiol. and Infec. Diseases. Oslo, 1991. - P. 14.
217. Grimes D.J. Low incidence of cytomegalovirus interstitual pneumonitis in allogeneic bone marrow transplant patients given CMV matched blood products, // Austral, and N. Z. J. Med. 1993. - Vol. 23, N. 1. - P. 119.
218. Gunter K.C. Transfusion-transmitted CMV: the part-time pathogen. // Pediatr. Pathol. Lab. Med. Vol. 15, N. 3. - P. 515-534.
219. Guo T. Study of primary CMV infection in pregnant women. // Chung. Hua. Liu. Hsing. Ping. Hsueh. Tsa. Chin. 1992. - Vol. 13, N. 2. - P. 76-78.
220. Haarr L., Skulstad S. The herpes simplex virus type 1 particle: structure and molecular functions.//APMIS. 1994. - Vol. 102, N. 5. - P. 321-346.
221. Hagay Z.J., Biran G., Ornoy A., Reece E.A. Congenital cytomegalovirus infection: a long-standing problem still seeking a solution. //Am. J. Obstet. Gynecol. 1996. -Vol. 174, N. 1, Pt. 1. - P. 241-245.
222. Hammouda N.A., Gebaly W.M., Sadaka S.M. Seroprevalence of Toxoplasma and cytomegalovirus in complicated pregnancies. // J. Egypt. Soc. Parasitol. 1993. - Vol. 23, N. 3. - P. 865-870.
223. Hasegawa A., Mukoyama A., Akatani K. et al. Serotyping of human rotavirus by enzyme immunoassay with monoclonal antibodies. // Jpn. J. Med. Sci. Biol. 1993. -Vol. 46, N. 5-6. - P. 221-226.
224. Hashido M., Inouye S., Kawana T. Type-specificity of serum antibodies from genital herpes patients as determined by an enzyme-linked immunosorbent assay using HSV-infected cells as antigens. //Kansenshogaku Zasshi. 1995. - Vol. 69, N. 7. - P.785-9.
225. He H. Rinaldo Ch.R., Morel P.A. T cell proliferative responses to five human cytomegalovirus proteins in healthy seropositive individuals: implications for vaccine development. //J. Gen. Virol. 1995. - Vol. 76, N. 7. - P. 1603-1610.
226. Heggie A.D., Huana Y.T. Rapid detection of herpes simplex virus in culture by in situ hybridization. //J. Virol. Methods. 1993. - Vol. 41, N. 1. - P. 1-7.
227. Hess G., Faarz E., Melchior W, Bayer H. Analysis of immunoassays to detect antibodies to hepatitis A virus (anti-HAV) and anti-HAV immunoglobulin M. // J. Virol. Meth. 1995. - Vol. 51, N. 2-3. - P. 221-228.
228. Hess G., Avillez F., Lourenco M:H. et al. Diagnosis of human immunodeficiency virus (HIV) infection: multicenter evaluation of a newly developed anti-HIV 1 and 2 enzyme immunoassay. // J. Clin. Microbiol. 1994. - Vol. 32, N. 2. - P. 403-406.
229. Hirota K., Muraguchi K., Watabe N. et al. Prospective study on maternal, intrauterine, and perinatal infections with cytomegalovirus in Japan during 1976-1990. // J. Med. Virol. 1992. - Vol. 37, N. 4. - P. 303-306.
230. Ho M. Advances in understanding cytomegalovirus infection after transplantation. // Transplant. Proc. 1994. - Vol. 26, N. 5, Suppl. 1. - P. 7-11.
231. Hogge W.A., Buffone G.J., Hogge J.S. Prenatal diagnosis of cytomegalovirus infection: a preliminary report. // Prenat. Diagn. 1993. - Vol. 13, N. 2. - P. 131-136.
232. Hotsubo T., Nagata N., Shimada M. et al. Detection of human cytomegalovirus DNA in breast milk by means of polymerase chain reaction. // Microbiol. Immunol. -1994. Vol. 38, N. 10. - P. 809-811.
233. Hou X., Breese P.L., Douglas J.M.Jr. Utility of quantitative enzyme immunoassay reactivity for predicting human immunodeficiency virus seropositivity in low- and high-prevalence populations. //J. Clin. Microbiol. 1994. - Vol. 32, N. 1. - P. 220-223.
234. Hursh D.A., Abbot A.D., Sun R. et al. Evaluation of a latex particle agglutination assay for the detection of cytomegalovirus antibody in patient serum. // J. Clin. Microbiol. 1989. - Vol. 27, N. 12. - P. 2878-2879.
235. Irmiere A., Gibson W. Isolation and characterization of a noninfectious virion-like particle released from cells infected with human strains of cytomegalovirus. // Virology. 1983. - Vol. 130, N. 1. - P. 118-133.
236. Isacsohn M., Bar On E., Yaeger Y. et al. A seroprevälence study of herpes virus type 2 infection in Israeli women: implications for routine screening. // Isr, J. Med. Sei. -1994. Vol. 30, N. 5.6. - P. 379-383.
237. Ivanova L. Studies on cytomegaloviral infections in newborn children. // Ser. Sei. Med. 1991. - Vol. 28, Suppl. 1. - P. 151-152.
238. Jakob R. A multiple center clinical study of third-generation enzyme immunoassays for hepatitis B surface antigen and hepatits B core IgM class antibody. // Eur. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1993. - Vol. 31, N. 4. - P. 259-266.
239. Jeffries D.J. The spectrum of cytomegalovirus infection and its management. // J. Antimicrob. Chemother. 1989. - Vol. 23, Suppl. E. - P. 1-10.
240. Jiwa NM., van Gemert G.W., Räap A.R. et al. Rapid detection of human cytomegalovirus DNA in peripheral blood leukocytes of viremic transplant recipients by the polymerase chain reaction. // Transplantation. 1989. - Vol. 48, N. 1. - P. 72-76.
241. Joassin L., Reginster M. Elimination of nonspecific cytomegalovirus immunoglobulin M activities in the enzyme-linked immunosorbent assay by using anti-human IgG. // J. Clin. Microbiol. 1986. - Vol. 23, N. 3. - P. 576-581.
242. Johnston S.L., Bloy H. Evaluation óf a rapid enzyme immunoassay for detection of influenza A virus. //J. Clin. Microbiol. 1993. - Vol. 31, N. 1. - P. 142-143.
243. Jonji'c S., del Val M., Keil G.M. et al. A nonstructural viral protein expressed by a recombinant vaccinia virus protects against lethal cytomegalovirus infection. // J. Virol. 1988. - Vol. 62, N. 5. - P. 1653-1658.
244. Kaden J., Schonemann C. Zuverlässige und schnelle organ- and blutspenderunter-suchung auf cytomegalievirus-antikorper mittels latexagglutinations test. // ZKM: Z. Klin. Med. 1991. - Vol. 46, N. 8. - P. 589-590.
245. Kalayci D., Eryilmaz T. Rapid diagnosis of herpetic keratitus using direct im-muno-peroxidase technique. // Acta Ophthalmol. (Copenh). 1994. - Vol. 72, N. 1. - P. 49-52.
246. Karas Z., Blok R., Zabel J., Zabä C. Seroepidemiologiczne badania w kierunku cytomegalii i rozyczki u kobiet ciezarnych i trudniacych sie nierzadem. // Przegl. Epidemiol. 1992. - Vol. 46, N. 4. - P. 303-307.
247. Katlama C. Cytomegalovirus infection in acquired immunedeficiency syndrome.//J. Med. Virol. 1993.-Suppl. l.-P. 128-133.
248. Kazuhiro K., Hideto K., Mocarski E.S. Human cytomegalovirus latent infection of granulocytes-macrophage progenitors. // Proc. Nat. Acad. Sei. USA. 1994. - Vol. 91, N. 25. - P. 11879-11883.
249. Kinghorn G.R. Epidemiology of genital herpes. // J. Int. Med. Res. 1994. -Vol. 22, Suppl. l.-P. 14A-23A.
250. Kino Y., Minamishima Y. Passive hemagglutination assays for the detection of antibodies to herpes viruses. // Microbiol. Immunol. 1993. - Vol. 37, N. 5. - P. 365-368.
251. Kirklin J.K., Naftel D.C., Levine T.B. et al. Cytomegalovirus after heart transplantation. Risk factors for infection and death: a multiinstitutional study. // J. Heart and Lung Transplant. 1994. - Vol. 13, N. 3. - P. 394-404.1. 13.1
252. Kiyan M„ Cengiz A.T., Kendl O. et al. Homoseksuel ve transseksuellerde cytomegalovirus (CMY) IgG ve IgM'nin ELISA ile gosterilmesi. // Mikrobiyol, Bui. 1993, -Vol. 27, N. 2.-P. 119-126.
253. Knockaert D.C., van der Bruel A.A., Goubau P.B. et al. Cytomegalovirus infection in immunocompetent adults. // Eur. J. Med. 1992. - N. 7. - P. 434-436.
254. Kock W.C. A synthetic parvovirus B19 capsid protein can replace viral antigen in antibody-capture enzyme immunoassay. // J. Virol. Meth. 1995. - Vol. 55, N. 1. - P. 67-82.
255. Koeda T., Inagäki M., Kawahara H. et al. Progressive encephalopathy associated with cytomegalovirus infection without immune deficiency. // J. Child. Neurol. -1993. N. 4. - P. 373.-377.
256. Korcakova L. Protilatky proti cytomegaloviru: prehled vysledku z opakova-neho vysetreni 208 hemodialyzovanych nemocnych.// Vnitr.Lek. 1995. - Vol. 41, N.7. -P.454-457.
257. Kowalik T.F., Yurochka A.D., Rinehart C.A. et al. Productive infection of human endometrial stromal cells by human cytomegalovirus. // Virology. 1994. - Vol. 202, N. 1.-P. 247-257.
258. Kraat Y.I., Hendrix R.M.G., Landini M.P. Comparison of four techniques for detection of antibodies to cytomegalovirus. // J. Clin. Microbiol. 1992. - Vol. 30, N. 2. -P. 522-524.
259. Kraat Y.J., Stals F.S., Landini M.P. et al. Cytomegalovirus IgM antibody detection: comparison of five assaya. // Microbiologica. 1993. - Vol. 16, N. 4. - P. 297-307.
260. Kroger M. Medizinche Anwendungen der PCR und deren methodische Grundlagen. Teil. II. Medizinische Anwendungen der PCR. // Lab. Med. 1993. - Vol. 16, N. 9. - P. 254-261.
261. Kunder S.C., Wu L., Morahan P.S. Role of NK cells in immunomodulator-mediated resistance to herpesvirus infection. // Antiviral. Res. 1993. - Vol. 21, N. 2. - P. 103-118.
262. Laemmli U.K. // Nature (London). 1970. - Vol. 277. - P. 680.
263. Lakeman F.D., Whitley R.J. Diagnosis of herpes simplex encephalitis: application of polymerase chain reaction to cerebrospinal fluid from brain-biopsied patients and correlation with disease. // J. Infect. Dis. 1995. - Vol. 171, N. 4. - P. 857-863.
264. Lakshmi N., Kumar A.G., A'nand'T., Réddy B.K. Sero-prevalence of herpes simplex virus type-2 among cancer cervix patients. // Indian. J. Cancer. 1993. - Vol. 30, N. 4-P. 189-191.
265. Landers D.V., Smith J.P., Walker C.K. et al. Human fetal antibody-dependent cellu-lar cytotoxicity to herpes simplex virus-infected cells. // Pediatr. Res. 1994. - Vol. 35, N. 3. - P. 289-292.
266. Landini M.P., Lazzarotto T., Maine G.T. et al. Recombinant mono- and poly-antigens to detect cytomegalovirus-specific immunoglobulin M in human sera by enzyme immunoassay. //J. Clin. Microbiol. 1995. - Vol. 33, N. 10. - P. 2535-2542.
267. Landini M.P. New approaches and perspectives in cytomegalovirus diagnosis. // Prog. Med. Virol. 1993. - Vol. 40. - P. 157-177.
268. Landini M.P., La Placa M. Humoral immune response to human cytomegalovirus proteins: a breif review. //Compar. Immunol. Microbiol, and Infec. Dis. 1991. - Vol. 14, N. 2. - P. 97-105.
269. Landini M.P., Michelson S. Human cytomegalovirus proteins. // Progress Med. Virology. 1988. - Vol. 35. - P. 152-185.
270. Landini M.P., Re M.C., Mirolo G. et al. Human immune response to cytomegalovirus structural polypeptides studied by immunoblotting. // J. Med. Virology. -1985. Vol. 17, N. 4. - P. 303-311.
271. Landini M.P., Rossier E., Schmitz H. Antibodies to human cytomegalovirus structural polypeptides during primary infection. // J. Virol. Meth. 1988. - Vol. 22. - P. 309-317.
272. Landry M.L., Ferguson D. Comparison of quantitative CMV antigenaemia assay with culture methods and correlation with clinical disease. // J. Clin, Microbiol, -1993. Vol. 31, N. 11. - P. 2851-2856.
273. Le Hoang P., Cochereau-Massin J. Les retinites a CMV. If Cah. techn. biol. -1993. Vol. 8, N. 30. - P. 21-23.
274. Leogrande G. The epidemiology of childhood cytomegalovirus infections in a large city of southern Italy. // Int. J. Clin. Lab. Res. 1993. - Vol. 23, N. 2. - P. 109-112.
275. Levin M.J. Impact of herpesvirus infections in the future. // J. Med. Virol.1993. -Suppl 1. P. 158-164.301. van Lierde M., Gaudy V., Mulongo B., Lamy M. Cytomegalovirus et foetus. // Pathol. Biol. 1992. - Vol. 40, N. 7. - P. 701-705.
276. Liesnard C., De Wit L., Motte S. et al. Rapid diagnosis of cytomegalovirus lung infection by DNA amplification in bronchoalveolar lavages. // Mol. Cell Probes.1994. Vol. 8, N. 4. - P, 273-283.
277. Lin T.M., Halbert S.P. Rapid dot enzyme immunoassay for the detection of antibodies to cytomegalovirus. // J. Clin. Microbiol. 1986. - Vol. 24. - P. 7-11.
278. Link H., BattmerK., Stumme C. Cytomegalovirus infection in leucocytes after bone marrow transplantation demonstrated by mRNA in situ hybridization. // Br. J. Haematol. 1993. - Vol. 85, N. 3. - P. 573-577.
279. Lipson S:M: Use of the CMV antigenaemia (CMV-Ag) assay for the detection of CMV in the blood of AIDs patients. // Can. J. Microbiol. 1993. - N. 11. - P. 1059-65.
280. Liu P., Lu J., Jiang F. Study on risk factors of 292 pregnant women infected with HCMV. // Chung. Hua. Liu. Hsing. Ping. Hsueh. Tsa. Chih. 1994. - Vol. 15, N. 2. -P. 83-86.
281. Liu Y.N.C., Klaus A., Kary B. et al. The N-terminal 513 amino acids of the envelope glicoprotein gB of human cytomegalovirys stimulates both B- and T-cell immune responses in human. //J: Virol. 1991. - Vol. 65, N. 3. - P. 1644-1648.
282. Lolli F., Sunqvist V.A., Castagna A. et al. T and B cell responses to cytomegalovirus antigens in healthy blood donors and bone marrow transplant recipients. // FEMS Immunol. Med. Microbiol. 1993. - Vol. 7, N. 1. - P. 55-62.
283. Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A.L., Randall R.J. //J. Biol. Chem. 1951. -Vol. 193. - P. 265-275.
284. Mach M., Stamminger T., Jahn G. Human cytomegalovirus: recent aspects from molecular biology. // J. Gen. Virol. 1989. - Vol. 70. - P. 3117-3146.
285. Malm G., Berg U., Forsgren M. Neonatal herpes simplex: clinical findings and outcome in relation to type of maternal infection. // Acta Pediatr. 1995. - Vol. 84, N. 3. -P. 256-260.
286. Manickan E., Rouse BT. Roles of different T-cell subsets in control of herpes simplex virus infection determined by using T-cell-deficient mouse-models, // J. Virol. -1995. Vol. 69, N. 12. - P. 8178-8179.
287. Margall N., Rabella N., Montesinos E., Parts G. Déteccon de antigeno temprano de citomegalovirus en cultivo celular, // Med. Clin. Bare. 1989. - Vol. 93, N. 10. -P. 365-367.
288. Marshall G.S., Rabalais G.P., Stewart J.A., Dobbins J.G. Cytomegalovirus se-roprevalence in women bearing children in Jefferson County, Kentucky. // Am. J, Med. Sci. 1993. - Vol. 305, N. 5. - P. 292-296.
289. Matter k.,' Gorgievski-hrisoho M., Germann D. Comparison of four enzyme immunoassays for detection of immunoglobulin M antibodies against rubella virus. // J. Clin. Microbiol. 1994. - Vol. 32, N. 9. - P. 2134-2139.
290. Mazeroi)-MC; Alain-Albertini-S. L'infection a cytomegalovirus humain: methodes nouvelles du diagnostic virologique. // Pathol. Biol. (Paris). 1993. - Vol. 41, N. 5. -P. 487-494.
291. McAlpine L., Gandy J., Parry J.V., Mortimer P.P. Thirteen current anti-HIV-l/HIV-2 enzyme immunoassays: how accurate are they? // J. Med. Virol. 1994. - Vol. 42, N. 2. - P. 115-118.
292. McCarrey J.R., Kaufman J.C., Churchell M.A., Zaia J.A. Differential detection of viral DNA and RNA in situ in cells infected with HCMY. // J. Virol. Meth. 1989. -Vol. 25, N. 3. - P. 301-314.
293. McCutchan j.A. Cytomegalovirus infections of the nervous system in patients with AIDs. // Clin. Infec. Dis. 1995. - Vol. 20, N. 4. - P. 747-754.
294. McDonald K., Rector T.S., Braulin E.A. et al. Association of caronary artery disease in cardiac transplant recipients with cytomegaloviruses infection. // Amer. J. Cardiol. 1989. -Vol. 64, N. 5. - P. 359-362.
295. McLaughlin-Taylor E., Pande H., Forman S.J. et al. Identification of the major late human cytomegalovirus matrix protein hh65 as a target antigen for CD8+ virus-specific cytotoxic T lymphocytes. // J. Med. Virol. 1994. - Vol. 43, N. 1. - P. 103-110.
296. McMillan J.A., Weiner L.B., Higgins A.M., Lamparella V.J. Pharyngitis associated with herpes simplex virus in College students. // Pediatr. Infect. Dis. J. 1993. - Vol. 12, N. 4.-P. 280-284.
297. McVoy M.A., Adler S.P. Immunologic evidence for frequent age-related cytomegalovirus reactivation in seropositive immunocompetent individuals. // J. Infec. Dis. 1989. - Vol. 160, N. 1. - P. 1-10.
298. Mendoza Montero J., Navarro Mari J.M., de la Rosa M. Utilización de la técnica de centrifugacion-cultivo para el diagnostico rápido de citomegalovirus. // Enferm. Infecc. Microbiol. Clin. 1989. - Vol. 7, N. 8. - P. 403-407.
299. Merigan T.C., Restra S. CMV: where have we been and where are we going. // Rev. Infec. Dis. 1990. - Vol. 12, Suppl. 7. - P. 693-700.
300. Merlino C. Controllo sierologico delle infezioni da citomegalovirus, herpes simplex e varicella-zoster virus nei portatori di trapianto renale. // G. Batteriol. Virol. Immunol. 1991. - Vol. 84, N. 1-12. - P. 41-52.
301. Mertz G.J. Epidemiology of genital herpes infections. // Infect. Dis. Clin. North. Am. 1993. Vol. 7, N. 4. - P. 825-839.
302. Meyer H., Masuho J., Mach M. The gpl l6 of the gp58/l 16 complex of HCMV reprsents the amino-terminal part of the precursos molecule and contains a neutrolizing epitope. // J: Gen. Virol. 1990. - Vol. 71. - P. 2443-2450.
303. Meyer-König U., Serr A., von Larr D. et al. Human cytomegalovirus immediate early and late transcripts in peripheral blood leukocytes: diagnostic value in renal transplant recipients. // J. liifec. Dis. 1995. - Vol. 171, N. 3. - P. 705-709.
304. Meyers J.D. Cytomegalovirus infection following marrow transplantation: risk, treatment, and prevention. // Birth Defects Orig. Artie. Ser. 1984. - Vol. 20. - P. 101-117.
305. Micali C., Sama D. Transmissione di citomegalovirus in seguito ad emotrans-fusione. // Minerva med. 1989. - Vol. 80, N. 12. - P. 1305-1308.
306. Middeldorp J.M., Jongsma J., Haar A., Schirm J., The T.H. Detection of Immunglobulin M and G antibodies against cytomegalovirus early and late antigens by enzyme-linked immunosorbent assay. // J. Clin; Microbiol. 1984. - Vol. 20, N.4. - P.763-71.
307. Miller M.J., Bovey S., Pado K. et al. Application of PCR to multiple specimen types for diagnosis of cytomegalovirus infectioN Comparison with cell culture and shell vial assay. // J. Clin. Microbiol. 1994. - N. 1. - P. 5-10.
308. Milligan G.N., Bernstein D.I. Generation of humoral immune responses against herpes simplex virus type 2 in the murine female genital tract. // Virology. 1995. -Vol. 206, N. 1. - P. 234-241.
309. Milpied N. Greife de moelle ossuese, rejet et CMV. // Pathol. Biol. 1993. -Vol. 41, N. 10. - P. 971.
310. Minamishima I., Ueda K., Minemätsu T. et al. Role of breast milk in acquisition of cytomegalovirus infection. // Microbiol. Immunol. 1994. - VoL 38, N. 7. - P. 549552.
311. Mlinari'c-Galinovi'c G., Chonmaintree T., Abraham R. et al. Preparation of respiratory synsytial virus subgroup A and B antigens for enzyme immunoassay antibody detection. //Acta Med. Croatica. 1994. - Vol. 48, N. 3. - P. 99-103.
312. Moller B.R. Herpes simplex-infektion hos gravide og nyfodte. // Ugeskr. Lae-ger. 1994. - Vol. 156, N. 48. - P. 7189-7192.
313. Musiani M:, Zerbini M.L., Muscari A. et al. Antibody patterns against cytomegalovirus and Epstein-Barr virus in human atherosclerosis. // Microbiologica. 1990. -Vol. 13, N. 1. - P. 35-41.
314. Musiani M., Zerbini M., Venturoli S. et al. Rapid diagnosis of cytomegalovirus encephalitis in patients with AIDS using in situ hybridization. // J. Clin. Pathol, 1994. -Vol. 47, N. 10. - P. 886-891.
315. Mustafq M.M. Cytomegalovirus infection and disease in the immunocompromised host. // Pediat. Infec. Dis. J. 1994. - Vol. 13, N. 4. - P. 249-257.
316. Myerson D., Hackman R.C., Nelson J.A. et al. Widespread presence of histologically occult cytomegalovirys. // Human Pathol. 1984. - Vol. 15. - P.430-439.
317. Nageswaran A., Kinghorri G.R. Sexually transmitted diseases in children: herpes simplex virus infection, cytomegalovirus infection, hepatitis B virus infection and molluscum contagiosum. // Genitourin Med. 1993. - Vol. 69, N. 4. - P. 303-311.
318. Nair B.C., Ford G., Kalyanaraman V.S. et al. Enzyme immunoassay using native envelope glycoprotein (gp 160) for detection of human immunodeficiency virus type 1 antibodies. //J. Clin. Microbiol. 1994. - Vol. 32, N. 6. - P. 1449-1456.
319. Navarro D., Paz P., Tugizov S. et al. Glycoprotein B of human cytomegalovirus promotes virion penetration into cells, transmission of infection from cell to cell, and fusion of infected cells. //Virology. 1993. - Vol. 197. - P. 143-158.
320. Nelson C.T., Istas A.S., Wilkerson M.K., Demmler G.J. PCR detection of cytomegalovirus DNA in serum as a diagnostic test for congenital cytomegalovirus infection. //J. Clin. Microbiol. 1995. - Vol. 33, N. 12. - P. 3317-3318.
321. Nigro G., MattiaS., Midulla M. Simultaneous detection of specific serum IgM and IgA antibodies for rapid serodiagnosis of congenital or acquried cytomegalovirus infection. II Serodiagn. and Immunother. Infec. Dis. 1989. - Vol. 3, N. 5. - P. 355-361.
322. Nugent C.T., Wolcott R.M., Chervenak R., Jennings S.R. Analysis of the cytolytic T-lymphocyte response to herpes simplex virus type 1 glycoprotein B during primary and secondary infection. // J. Virol. 1994. - Vol. 68, N. 11. - P. 7644-7648.
323. Ohlin M., Plachter B., Sundqvist V.A. et al. Human antibody reactivity against the lower matrix protein (pp65) produced by cytomegalovirus. // Clin. Diagn. Lab. Immunol. 1995. - Vol. 2, N. 3. - P. 325-329.
324. Olive D.M.,'A'l Mufti S., Simsek M. et al. Direct detection of human cytomegalovirus in urine speicmens from renal transplant patients following PCR amplification. // J. Med. Virol. 1989. - Vol. 29, N. 4. - P. 232-237.
325. Oliver L., Wald A., Kim M. et al. Seroprevalence of herpes simplex virus infections in a family medicine clinic. // Arch. Fam. Med. 1995. - Vol. 4, N. 3. - P. 228-232.
326. Osuga T., Morishima T., Hanada N. et al. Transfer of specific IgG and IgG subclasses to herpes simplex virus across the blood-brain barrier and placenta in preterm and term newborns. //Acta Pediatr. 1992. - Vol. 81, N. 10. - P. 792-796
327. Pérez J.L., De Ona M., Niubo J. et al. Comparison of several fixation methods for cytomegalovirus antigen em i a assay. // J. Clin. Microbiol. 1995. - Vol. 33, N. 6. - P. 1646-1649.
328. Pérez J.L., Maziscal D., Tubau F. et al. Evaluation of the CMV-vue antigene-mia assay for rapid detection of cytomegalovirus in peripheral blood leukocytes. // Diagn. Microbiol. Infec. Dis. 1994. - Vol. 19, N. 1. - P. 15-18.
329. Pérol Y., Caro V., Mazeron M.C. Cytomegalovirus antigenemia assay: therapeutic usefulness and biological significance. // Nouv. Rev. Fr. Hematol, 1993, - Vol. 35, N. 1. - P. 95-98.
330. Paoletti R. Screening per il citomegalevirus: dati preliminari. // G. Hal. Ostet. E Ginecol. 1993. - Vol. 15, N. 11. - P. 861 -863.
331. Pass R.F., Kinney J.S. Child care workers and children with protean clinical manifections. // N. Engl. J. Med. 1985. - Vol. 75. - P. 971-973.
332. Pattyn S.R. Cytomegalovirus en bloedtransfusie. // Rev. Assoc. Belg. Technol. lab. 1990. - Vol. 17, N, 1. - P. 45-46.
333. Paya C.K. Opportunistic infections: risk factor or virus-associated complication? // Transplant. Proc. 1994. - Vol. 26, N. 5, Suppl. 1. - P. 12-15.
334. Paya C.V., Hermans P.E., Wiesner R:H. et al. Cytomegalovirus hepatitis in liver transplantation Prospective analysis of 93 consecuive orthopic liver transplantatio. // J. Infec. Dis. 1989. - Vol. 160, N. 5. - P. 752-758.
335. Peckhman C.S. Cytomegalovirus in the neonate. // J. Antimicrob. Chemother. -1989. Vol. 23, Suppl. E. - P. 17-21.
336. Perot K., Walker C.M., Spaete R.R. Primary chimpanzee skin fibroblast cells are fully permissive for human cytomegalovirus replication. // J. Gen. Virol. 1992. - Vol. 73, Pt. 12. - P. 3281-3284.
337. Pillay D., Griffiths P.D. Diagnosis of cytomegalovirus infection: a review. // Genitourin Med. 1992. - Vol. 68, N. 3. - P. 183-188.
338. Posavad C.M., Newton J.J., Rosenthal K.L. Infection and inhibition of human cytotoxic T lymphocytes by herpes simplex virus. // J. Virol. 1994. - Vol. 68, N. 6. - P. 4072-4074.
339. Prabhakar P., Bailey A., Smikle MF., Ashley D. Seroprevalence of cytomegalovirus infection in a selected population in Jamaica. // West-Indian. Med, J, 1992. - Vol. 41, N. 4. - P. 133-135.
340. Prattichizzo F.A. Cytomegalovirus infection in previously healthy adults. // Eur. J. Med. 1993. - Vol. 2, N. 3. - P. 186.
341. Preece P:M. Cytomegalovirus screening in pregnancy. // Lancet. 1989. - Vol: 2, N. 8671. - P. 1101.
342. Preston C.M., Russell J., Harris R.A., Jamieson D.R. Herpes simplex virus latency in tissue culture cells. // Gene Ther. 1994. - Vol. 1, Suppl. 1. - P. S49-50.
343. Pujol F.H:, Bertolotti A., Fields H.A. et al. A monoclonal inhibition enzyme immunoassay for detection of antibodies against hepatits B core antigen: confirmation of an immunodominant epitope. //J. Immunoassay. 1994. - Vol. 15, N. 3. - P. 239-249.
344. Rabalais G.P., Waldeyer S., Cost K., Marshall G.S. Enzyme-linked immunosorbent assay for rapid measurement of serum-neutralizing activity against human cytomegalovirus. // Diagn. Microbiol. Infec. Dis. 1993. - Vol. 16, N. 1. - P. 75-77.
345. Rasmussen L., Matkin C., Spaete R. et al. Antibody response to human cytomegalovirus gB and gH after natural infection in humans. //, J. Infec. Dis. 1991. - Vol. 164, N. 5. - P. 835-842.
346. Ratman S., Gadag V., West R. et al. Comparison of commercial enzyme immunoassay kits with plaque reduction neutrolization test for detection of measles virus antibody. //J. Clin. Microbiol. 1995. - Vol. 33, N. 4. - P. 811-815.
347. Raynor B.D. Cytomegalovirus infection in pregnancy. // Semin. Perinatol. -1993. -N. 6. P. 394-402.
348. Reynolds D.W., Stagno S., Stubbs K.G. et al. Inapparent congenital cytomegalovirus infection with elevated cord IgM levels causal relation with auditory and mental deficiency. //N. Engl. J. Med. 1974. - Vol. 290, N. 6. - P. 291.
349. Rinaldo C.R. Jr., Torpey D.J. 3d. Cell-mediated immunity and immunosuppression in herpes simplex virus infection. // Immunodeficiency. 1993. - Vol. 5, N. 1. - P. 33-90.
350. Robbins D., Wright T., Coleman C. et al. Serological detection of HBeAg and anti-HBe using automated microparticle enzyme immunoassays. //J. Virol. Meth. 1992. -Vol. 38, N. 3. - P. 267-281.
351. Robinson P.A., High A.S., Hume W.J. Rapid detection of human herpes simplex virus type 1 in saliva. // Arch. Oral. Biol. 1992. - Vol. 37, N. 10. - P. 797-806.
352. Roby G., Gibson W. Characterization of phosphoproteins and protein kinase activity of virions, noninfectious enveloped particles, and dense bodies of human cytomegalovirus. //J. Virology. 1986. - Vol. 59. - P. 714-727.
353. Roizman B., Baines J. The diversity and unity of herpesviridae. // Compar. Immunol., Microbiol, and Infec. Dis. 1991. - Vol. 14, N. 2. - P. 63-79.
354. Roizman B., Sears A.E. Herpes simplex viruses and their replication. // Virology. / Ed. by B.N.Fields, D.M.Knipe, et al., New York. 1990. - P. 1796-1828.
355. Rosiu N., Moldovan R., Pop O. et al. Sondaje serologice privind infectia cy-tomegalica in sudTvestul tarii. Nota I. Prezenta IgG-CMV la un lot de populatie sana-toasa. // Bacteriol. Virusol. Parazitol. Epidemiol. 1992. - Vol. 37, N. 3-4. - P. 61-62.
356. Ross J.D., Smith I.W., Elton R.A. The epidemiology of herpes simplex types 1 and 2 infection of the genital tract in Edinburgh 1978-1991. // Genitourin. Med. 1993. -Vol. 69, N. 5. - P. 381-3.
357. Rouse R.J., Nair S.K., Lydy S.L., Bowen J.C., Rouse B.T. Induction in vitro of primary cytotoxic T-lymphocyte responses with DNA encoding herpes simplex virus proteins. // J. Virol. 1994. - Vol. 68, N. 9. - P. 5685-5689.
358. Rowe W.P., Hartley J.W., Waterman S. et al: Cytopathogenic agent resembling human salivary gland virus recovered from tissue cultures of human adenoids. //Proc. soc. exp. biol. med. 1956. - Vol. 92, N. 2. - P. 418-424.
359. Rubie H., Attal M., Campardou A.M. et al. Risk factors for cytomegalovirus infection in BMT recipients transfused exclusively with seronegative blood products. // Bone Marrow Transplant. 1993. - Vol. 11, N. 3. - P. 209-214.
360. Rubin R:H. Impact of cytomegalovirus infection on organ transplant recipients. //Rev. Infec. Dis. 1990. - Vol. 12, Suppl.7. - P. 754-766.
361. Ruiz Feliu B., Alcobilla Ferrara E., Codina Cazador A. et al. Enteritis y colitis por citomegalovirus en pacientes no inmunodeprimidos, afectacion primaria o sobrein-feccion? // Rev. Esp. Enferm. Dig. 1994. - Vol. 86, N. 4. - P. 727-731.
362. Rusmussen L., Resta S., Merigan T.C. Human cytomegalovirus glycoprotein-receptor interactions. // Transplant. Proc. 1991. - Vol. 23, Suppl. 3. - P. 60-63.
363. Ryan M., Miller E., Waight P. Cytomegalovirus infection in England and Wales: 1992 and 1993: // Commun. Dis. Rep. CDR Rev. 1995. - Vol. 5, N. 5. - P. 74-76.
364. Saimali Fernando, Booth J., Boriskin Y. et al. Association of cytomegalovirus infection with post-transplantation cardiac rejection asstudied using the PCR. // J. Med. Virol. 1994. - Vol. 42, N. 4. - P. 396-404.
365. Samuelson A., Glimaker M., Skoog E. et al. Diagnosis of enteroviral meningitis with IgG-EIA using heart-treated virions and synthetic peptides as antigens. // J. Med. Virol. 1993. - Vol. 40, N. 4. - P. 271-277.
366. Schonian V., Maisch B. Zutomegalievirus assoziierte erkrarikungen des hep-zens. II Herz. 1992. - Vol. 17, N. 2. - P. 85-90.
367. Schrier R.D., Nelson I.A., Oldstone M. Detection of human cytomegalovirus in peripheral blood lymphocytes in a~ natural infection. // Science. 1984. - Vol. 230. - P. 1048-1051.
368. Schweiger B., Lange I., Heckler R. et al. Rapid detection of influenza A neuraminidase subtypes by cDNA amplification coupled to a simple DNA enzyme immunoassay. // Arch. Virol. 1994. - Vol. 139, N. 3-4. - P. 439-444.
369. Segodny M. CMV et immunodepression.// Rev. fr. lab. 1993. - Vol. 21, N. 250. - P. 19-25.
370. Sevall J.S., Patnaik M. Comparison of immediate-early cytomegalovirus detection by the PCR and antigen detection. // Clin. Chim. 1993. - Vol. 39, N. 6. - P. 1185.
371. Shen C.Y., Chang S.F., Lin H.J. et al. Cervical cytomegalovirus infection in prostitutes and in women attending a sexually transmitted disease clinic. // J. Med. Virol. 1994. - Vol. 43, N. 4. - P. 362-366.
372. Shen C.Y., Chang S.F., Yang S.L. et al. Humoral immune responses and cytomegalovirus excretion in children with asymptomatic infection. // J. Med. Virol. 1994. -Vol. 44, N. 1.-P. 37-42.
373. Shen C.Y., Chang S.F., Yang S.L. et al. Maternal cytomegalovirus infection and maternal age. // J. Infec. Dis. 1994. - N. 4. - P. 936-937.
374. Shian W.J;, Chi C.S. Herpes simplex encephalitis in infants and children. // Chung. Hua. I. Hsuek. Tsa. Chili. Taipei. 1994. - Vol. 53, N. 1. - P. 19-26.
375. Sibrowski W., Kuhnl P., Kalmar G. et al. Cytomegalievirus-Diagnostik bei Blutspendern und Risikppatienten. // Beitr. Infusionsther. 1990. - Vol. 26 - P. 37-39.
376. Sinzger CM Plachter B., Grette A. et al. Tissue macrophages are infected by human cytomegalovirus in vivo. //J. Infec. Dis. 1996. - Vol. 173, N. 1. - P. 240-245.
377. Sinzger C., Grette A. Fibroblasts epithelial cells, endothelial cells and smooth muscle cells are major targets of human cytomegalovirus infection in lung and gastroin-festinal tissues. // J. Gen. Virol. 1995. - Vol. 76, N. 4. - P. 741-750.
378. Siritantikorn S., Nantharukchaikul S., Chavalidthamrong P. et al. Detection of human cytomegalovirus in urine of infants by polymerase chain reaction. // J. Med. Assoc. Thai. 1994. - Vol. 77, N. 8. - P. 414-420.
379. Slomka M.J., Ashley R.L., Cowan F.M. et al. Monoclonal antibody blocking tests for the detection of HSV-1- and HSV-2-specific humoral responses: comparison with western blot assay. //J. Virol. Methods. 1995. - Vol. 55, N. 1. - P. 27-35.
380. Smetana Z., Dulitzky M., Movshovitz M. et al. Selected epidemiological features of herpes genitalis in Israel based on laboratory data. // Isr. J. Med. Sci. 1994. -Vol. 30, N. 5-6. - P. 375-379.
381. Smith K.L., Dunstan R.A. PCR detection of cytomegalovirus: a review. // Br. J. Haematol. 1993. - Vol. 84, N. 2. - P. 187-190.
382. Spaete R.R., Gehrz R.C., Landini M.P. Human cytomegalovirus structural proteins. // J. Gen. Virol. 1994. - Vol. 75, Pt. 12. - P. 3287-3308.
383. Spindler J., Kerowgan M., Goldmann S.F. Development of a batch-processed passive latex agglutination test for cytomegalovirus. // Transfusion. 1994. - Vol. 34, N. 11. - P. 995-998.
384. Stagno S., Pass R.F., Cloud G. et al. Primary cytomegalovirus infection in pregnancy: incidence, transmission to fetus and Clinical outcome. // JAMA, 1986. - Vol. 256, N. 14. -P. 1904-L908.
385. Stagno S-, Cloud G.A. Working parents: The impact of day care and breast-beeding on cytomegalovirus infection in offspring. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1994. -Vol. 91, N. 7. - P. 2384-2389.
386. Steinmarpi J., Weigel T. Comparison of two Cobas Core enzyme immunoassays with other test systems for the detection of cytomegalovirus-specific IgG and IgM antibodies. //J. Clin. Lab. Anal. 1994. - Vol. 8, N. 4. - P. 191-199.
387. Stevens J.G. Human herpesviruses: a consideration of the latent state. // Microbiol. Rev. 1989. - Vol. 53, N. 3. - P. 318-332.
388. Stewart I.A., Ruf S.E., Pellett Ph.E. et al. Herpesvirus infections in persons infected with human immunodeficiency virus. // Clin. Infec. Dis. 1995. - Vol. 21, Suppl. 1. -P. 114-120.
389. Stinski M. Fields Virology New York, Raven press, 1990. - Ed. 2.
390. Stivala A., Guglielmino S.P., Scalia G. et al. Anti-HCMV serologic response in patients with acute viral hepatitis. //New Microbiol. 1995. - Vol. 18, N. 4. - P. 423-426.
391. Stroffolini T., Ngatchu T., Chiaramonte M. et al. Prevalence of cytomegalovirus seropositivity in an urban childhood population in Cameroon. // Microbiologica.1993. Vol. 16, N. 1. - P. 83-85.
392. Studahl M., Ricksten A., Sandberg T. et al. Cytomegalovirus encephalitis in four immunocompetent patients. // Lancet. 1992. - Vol. 340, N. 8826. - P. 1045-1046.
393. Studahl M., BergstrOm T., Ekeland Sjoberg K., Rucksten A. Detection of cytomegalovirus DNA in cerebrospinal fluid in immunocompetent patients as a sign of active infection. // J. Med. Virol. 1995. - Vol. 46, N. 3. - P. 274-280.
394. Su S.J., Wu H.H., Lin Y.H., Lin H.Y. Comparative studies of types 1 and 2 herpes simplex virus infection of cultured normal keratinocytes. // J. Clin. Pathol. 1995. -Vol. 48, N. 1. - P. 75-79.
395. Suassuna J.H., Léite L.L., Villela L.H. Prevalence of cytomegalovirus infection in different patient groups of an urban university in Brazil. // Rev. Soc. Bras. Med. Trop.- 1995. Vol. 28, N. 2. - P. 105-108.
396. Tang S.B., Shemiffarth O.F., Lund O.E. Direct identification of herpes simplex virus type-1 in human corneal tissue. Methodology and application of in situ hybridization technique.//Chin. Mëd. J. Engl. 1993. - Vol. 106, N. 2. - P. 122-126.
397. Tayal S.C., Pattman R.S. High prevalence of herpes simplex virus type 1 in female anogenital herpes simplex in Newcastle upon Tyne 1983-92. // Int. J. STD AIDS.1994. Vol. 5, N. 5. - P. 359-361.
398. Telerin W., Czieschnec R. Erste ergebniesse zur erfassung von zytomegalievirus antigenen mittels monoclonaler antikorper Wiss. Z. Humboldt. // Univ. Berlin. R. Med.- 1988. Vol. 37, N. 9. - P. 50-53.
399. Terasaki P.I., Yuge J., Cecka J.M., Gjertson D.W. Cytomegalovirus antibody status and kidney transplantation. // Clin. Transpl. 1994. - P. 509-518.
400. The human herpesvirus. / Ed. Roizman B,, Sc. D. et al. New York: Raven Press. - 1993. - 433 p.
401. Thomas C.A., Smith S.E., Morgan T.M. et al. Clinical application of polymerase chain reaction amplification to diagnosis of herpes virus infection. // Am. J. Dermatopathol. 1994. - Vol. 16, N. 3. - P. 268-274.
402. Tielju G., Zeyuak T. Diagnosis of congenital cytomegalovirus infection by specific CMV IgM antibody in cord serum with ELISA. // J. West China Univ. Med. Sci. -1989. Vol. 20, N. 4. - P. 422-425.
403. Tookey P., Logan St. Occupational risk of cytomegalovirus. // Rev. Med. Microbiol. 1994. - Vol. 5, JM, L - P. 33-38.
404. Toorkey C.B., Carrigan D.K. Immunogistochemical detection of an immediate early antigen of HCMV in normal tissues. // J. Infec. Dis. 1989. - Vol. 160, N. 5. - P. 741-751.
405. Toyoda M., Zhang X.M., Sun Z. et al. Use of polymerase chain reaction to rapidly detect cytomegalovirus DNA in peripheral blood leukocytes of transplant recipients. // Transplant. Proc. 1995. - Vol. 27, N. 1. - P. 1272-1273.
406. Tsuchiya N., Murayama T., Yoshinoya S. et al. Antibodies to human cytomegalovirus 65 JlD Fc binding protein in rheumatoid factor production. // Autoimmunity. 1993. - Vol. 15, N. 1. - P. 39-48.
407. Tsutsul Y., Kumagai T. Miura K. Analysis of exretion of cytomegalovirus in brain disordered infants by tissue culture isolation and PCR. // Tratology. - 1992. - Vol. 46, N. 6. - P. 24B.
408. Tuokko H. Detection of acute measles infections by indirect and mu-capture enzyme immunoassays for immunoglobulin M antibodies and measles immunoglobulin G antibody avidity enzyme immunoassay. //J.Med. Virol. 1995. - Vol.45, N.3. - P.306-311.
409. Tyms A.S., Taylor D.L., Packin J.M. Cytomegalovirus and acquired immunodeficiency syndrome. //J. Antimicrob. Chemother. 1989. - Vol. 23, Suppl.A. - P. 89-105.
410. Urban M., Winkler T., Landini M.P. et al. Epitope-specific distribution of IgG subclasses against antigenic domains of human cytomegalovirus. // J. Infec. Dis. 1994. -Vol. 169, N. 1. - P. 83-90.
411. Uren E.C., Johnson P.D., Montanaro J., Gilbert G.L. Herpes simplex virus encephalitis in pediatrics: diagnosis by detection of antibodies and DNA in cerebrospinal fluid. // Pediatr. Infect. Dis. J. 1993. - Vol. 12, N. 12. - P. 1001-1006.
412. Venema H., van der Berg A.P., van Zanten J. et al. Natural killer cell responses in renal transplant patients with cytomegalovirus infection. //J. Med. Virol. 1994. - Vol. 42, N. 2.-P. 188-192.
413. Verano L., Michalski F.J. Comarison of a direct antigen enzyme immunoassay, Herpchek, with cell culture for detection of herpes simplex virus from Clinical specimens. //J. Clin. Microbiol. 1995. - Vol. 33, N. 5. - P. 1378-1379.
414. Vornhagen R., Hinderer W., Sonneborn H.H. et al. The DNA-binding protein pUL57 of human CMV is a major target antigen for the immunoglobulin M antibody response during acute infection. //J. Clin. Microbiol. 1995. - Vol. 33, N. 7. - P. 1927-1930.
415. Wang H.S., Huang S.C, Value of serum anti-herpes simplex viral IgM antibody testing in empirical antiviral treatment of herpes simplex encephalitis. // J. Child Neurol. -1993. Vol. 8, N. 4. - P. 378-382.
416. Weber B., Braun W., Tyralla B. et al. Human cytomegalovirus (HCMV)-specific immunoglobulin E as a serological marker for HCMV infection in immunocompromised patients. //Clin. Investig. 1992. - Vol. 70, N. 6. - P. 497-502.
417. Weber B., Hamann A., Ritt B. et al. Comparison of shell viral culture and serology for the diagnosis of human cytomegalovirus infection in neonates and immunocompromised subjects. // Clin. Investig. 1992, - Vol. 70, N. 6. - P. 503-507.
418. Weinberg A., Vilas Boas L.S. Cytomegalovirus and other herpesviruses transplant recipients. // Rev. Inst. med. trop. Sao Paulo. 1990. - Vol. 32, N. 5. - P. 338-345.
419. White N.H., Yow M.D., Demmler G.J. et al. Prevalence of cytomegalovirus antibody in subjects between the ages of 6 and 22 years. // J; Infec. Dis. 1959. - Vol. 159, N. 6. - P. 1013-1017.
420. Whitley R.J. Herpes simplex virus infections of women and their offspring: implica-tions for a developed society. // Proc. Nat. Acad. Sci, USA. 1994. - Vol. 91, N. 7. - P. 2441-2447.
421. Whitley R.J., Lakeman F. Herpes simplex virus infections of the central nervous system: therapeutic and diagnostic considerations. // Clin. Infect. Dis. 1995. - Vol. 20, N. 2.-P. 414-420.
422. Wiedbrauk D.L., Bassin S. Evaluation of five enzyme immunoassays for detection of immunoglobulin M antibodies to Epstein-Barr virus viral c#psid antigens. // J. Clin. Microbiol. 1993. - Vol. 31, N. 5. - P. 1339-1341.
423. Wingard J.R. Viral infections in leukemia and bone marrow transplant patients. //Leuk. Lymphoma. 1993. - Vol. 11, Suppl. 2. - P. 115-125.
424. Wood S.R., Sharp I.R., de Jong J.C. et al. Development and preliminary evaluation of an enzyme immunosorbent assay for the detection of adenovirus type 8.7/ J. Med. Virol. 1994. - Vol. 44, N. 4. - P. 348-352.
425. Xu D., Yonetani M., Uetani Y., Nakamura H. Acquired cytomegalovirus infection and blood transfusion in preterm infants. // Acta Pediatr. Jpn. 1995. - Vol. 37, N. 4. . p. 444-449.
426. Xu W., Suiidqvist V.A., Bryttirig Mihinde A. et al. Diagnosis of cytomegalovirus infection using PCR, virus isolation and serology. //Scand. J. Jnfec. Dis. 1993. - Vol. 25, N. 3. - P. 311-316.
427. Xu Bin, Murayama Tsugiya, Keiko Ishida, Furykawa Toru. Characterization of IgG Fc receptors induced by human cytomegalovirus. // J. Gen. Virol. 1989. - Vol. 70, N. 4. - P. 893-900.
428. Yang Y.S., Ho H.N., Chen E.K. et al. Cytomegalovirus infection and viral shedding in the genital tract of intertile couples. // J. Med. Virol. 1995. - Vol. 45, N. 2.-P. 179-182.
429. Yuen K.Y., Lo S.K., Chiu E.K. et al. Monitoring of leukocyte cytomegalovirus DNA in bone marrow transplant recipients by nested PCR. // J. Clin. Microbiol. 1995. -Vol. 33, N. 10.-P. 2530-2534.150
430. Zhang Z.Q. An assay method for herpes simplex virus type 1 seroprevaience survey-detection of antibody in saliva by avidin-biotin complex enzyme-linked immunosorbent assay (ABC-ELISA). // Microbiol. Immunol. 1993. - Vol. 37, N. 10. - P. 773777.
431. Ziegler Th., Meurman O. Cases of false-possitive reactions in herpesvirus IgM assays. // Serodiagn. and Iinmunother. Infec. Dis. 1989. - Vol. 3, N. 2. - P. 101-109.
432. Zweygberg-Wirgart B., Landqvist M., Hokeberg I. et al. Early detection of cytomegalovirus in cell culture by a new monoclonal antibodies CCH2. // J. Virol. Meth. -1990. -Vol. 27, N. 2. P. 211-219.