Разработка и клиническая значимость фармакокинетического теста с пропранололом

Носкова, Татьяна Сергеевна

Диссертации по медицине → Фармакология, клиническая фармакология

Автореферат и диссертация по медицине (14.03.06) на тему:Разработка и клиническая значимость фармакокинетического теста с пропранололом

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Носкова, Татьяна Сергеевна Пятигорск 2011 г.

Ученая степень: кандидата фармацевтических наук

ВАК РФ: 14.03.06

Автореферат диссертации по медицине на тему Разработка и клиническая значимость фармакокинетического теста с пропранололом

48563»/:

Носкова Татьяна Сергеевна

РАЗРАБОТКА И КЛИНИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ ФАРМАКОКИНЕТИЧЕСКОГО ТЕСТА С ПРОПРАНОЛОЛОМ

14.03.06 - фармакология, клиническая фармакология

Автореферат

диссертации на соискание учёной степени кандидата фармацевтических наук

Пятигорск 2011г.

О з [.:29:1

4856392

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Ярославская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения и социального развития Российской

Федерации»

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор кандидат фармацевтических наук, доцент

Хохлов Александр Леонидович

Колодийчук Елена Владимировна Кулешова Светлана Анатольевна

Ведущая организация: ГОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М.Сеченова Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации»

Защита состоится «_» _ 2011 г. в _на заседании

диссертационного совета Д 208.069.01 при ГОУ ВПО «Пятигорская государственная академия Росздрава» (357532, г. Пятигорск, пр. Калинина, 11)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Пятигорская государственная академия Росздрава»

Автореферат разослан «_»_2011г.

Учёный секретарь диссертационного совета Е.В. Компанцева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы

Несмотря на значительные успехи, достигнутые в терапии ишемической болезни сердца, гипертонической болезни и хронической сердечной недостаточности, патология сердечно-сосудистой системы занимает первое место среди причин смерти во всем мире (Ю.Н. Беленков, Р.Г. Оганов, 2009, R.Ragavendra et al., 2009, M.H.Crawford, 2009). Использование 0-адреноблокаторов (РАБ) рекомендовано на всех этапах лечения ИБС (уровень доказательности А, класс 1) (В.И.Маколкин, 2009, W.H.Frishman, 2008). Они применяются как антиаритмические препараты, а также используются в гастроэнтерологии, офтальмологии, психиатрии, периоперационной подготовке и других областях медицины (Ю.А.Карпов, Е.В.Сорокин, 2009, А.А.Тау1ог, 2010, Т. Serste et al., 2010).

Пропранолол (ПР) - первый рекомендованный к клиническому использованию Р-адреноблокатор (W.H.Frishman et al., 2008). Его назначение на 5-12-й день после острого инфаркта миокарда приводило к снижению общей смертности на 26%, внезапной смерти - на 28%, повторных фатальных и нефатальных инфарктов миокарда - на 23% (S.S.Andersen et al., 2009). Как «невиданные результаты» характеризуются данные о снижении на 83% риска смерти у больных, перенесших инфаркт миокарда, при добавлении рАБ к сочетанию статинов и ацетилсалициловой кислоты (при комбинации последних уменьшение риска на 61%) (Д.М.Аронов, 2007, J.Hippisley-Cox, C.Coupland, 2005).

ПР и поныне остается одним из самых востребованных препаратов в арсенале врачей самых разных специальностей (J.L.Straughan, 2007, F.Wong, 2010). Именно по ПР в настоящее время проводится наибольшее количество клинико-экспериментальных исследований. По клиническим и

фармакокинетическим свойствам (липофильность, относительная кардиоселективность, внутренняя симпатомиметичсская активность, биодоступность) ПР наиболее близок к рАБ третьего поколения карведилолу, за исключением отсутствия а1-блокирующего действия и различий в периодах полувыведения (2-3 и 5 часов) (В. Г. Кукес и соавт., 2009, Р-Мащиев, й а1., 2010).

Стёртая грань между необходимостью блокады р2-адренорецепторов и ее нежелательностью из-за повышенного риска неблагоприятных лекарственных реакций предъявляет особые требования к режиму тщательного индивидуального дозирования неселективных РАБ (СХ-Ваклэ й а1., 2004) с желательным лабораторным контролем концентрации их в крови. Осуществление лабораторного контроля за применением липофильных РАБ необходимо в клинической практике, так как наиболее частой врачебной ошибкой является назначение низких неэффективных доз (ВДЛупанов, 2006).

Биодоступность и биотрансформация ПР зависят от скорости микросомального окисления препарата в гепатоцитах. Пресистемный (80%) и системный (20%) метаболизм липофильного пропранолола осуществляется изоферментами цитохрома Р450 206, активность которых связана с генетическим полиморфизмом и органическими заболеваниями печени и сердечно-сосудистой системы (О.А.Манешина, М.В.Леонова, 2009).

Для широкой клинической практики определение генетического полиморфизма СУР2Б6 имеет ограниченное значение. Это связано с влиянием на биотрансформацию РАБ негенетических факторов, таких как возраст больных, наличие системной гипоксии и синдрома печеночно-клеточной недостаточности. На скорость биотрансформации в системе цитохрома Р450 могут также влиять скорость печеночного кровотока (в т.ч. при острой и хронической сердечной недостаточности и физической нагрузке) и прием ЛС, метаболизирующихся

одноименными изоферментами цитохрома или являющихся ингибиторами или индукторами соответствующих ферментов. В связи с этим разрабатываются методы определения функциональной емкости (косвенной оценки) изоферментов цитохрома; их примерами могут служить тесты с дебризохином (г. ВеЫа е! а1., 2004) и метопрололом (К.А.Горячкина, 2007).

Учитывая, что биодоступность ПР определяется феноменом «первого прохождения», проведение перорального фармакокинетического теста (исследование максимальной концентрации) теоретически может быть полезно для оценки функциональной ёмкости изоферментов СУР206 и, соответственно, для определения зоны безопасного приёма липофильных (ЗАБ, а также для дополнительной оценки тяжести органического поражения печени.

Контроль плазменных концентраций ПР, позволяющий избегать токсических реакций при приёме липофильных рАБ, является важной проблемой для научных исследований и практической кардиологии. Реализация ее возможна лишь при разработке доступного для клинических лабораторий и достаточно чувствительного способа определения пропранолола.

Цель работы

Разработать фармакокинетический тест с пероральным приемом пропранолола и обосновать его применение при заболеваниях сердечнососудистой системы и патологии печени.

Задачи исследования

1. Разработать методику количественного определения пропранолола в плазме крови с использованием капиллярного электрофореза, пригодную для целей клинического лабораторного анализа.

2. Определить условия проведения перорального теста с пропранололом, включая установление принимаемой дозы препарата и времени забора крови.

3. Изучить фармакокинетику пропранолола в пероральном тесте у здоровых людей с определением Стах, Тшах, АТО, С1ЛЖ

4. Исследовать фармакодинамику пропранолола в пероральном тесте у здоровых лиц, у больных гипертонической болезнью и ишемической болезнью сердца; доказать гемодинамическую безопасность теста.

5. Определить особенности первичной биотрансформации пропранолола при проведении перорального теста у лиц с различными формами хронической ишемической болезнью сердца, гипоацидным гастритом и циррозом печени в стадии компенсации и декомпенсации.

Научная новизна

Впервые для экспрессной косвенной оценки функциональных резервов системы изоферментов СУР 2Б6 печени предложен простой субстратный тест с пропранололом. Установлено, что при проведении фармакокинетического теста оптимальной дозой является 80 мг пропранолола при его пероральном приеме с последующим определением Стах через 55 - 65 минут.

Впервые разработан доступный для клинико-диагностических лабораторий технический регламент проведения фармакокинетического перорального теста с пропранололом; определена Стах пропранолола равная 200 нг/мл, позволяющая выявить порог безопасного приема лекарственных средств, биотрансформирующихся изоферментами СУР 2Б6 печени.

Выявлено отсутствие тендерной и возрастной зависимости результатов теста у здоровых людей, а также незначимость влияния гипоацидного состояния желудка на примере болеющих хроническим гастритом.

Установлено, что у больных с хронической ишемической болезнью сердца результаты перорального теста с пропранололом превышены по сравнению с нормой в 2,9 раза (р <0,05) преимущественно за счет лиц с клиническими

проявлениями хронической сердечной недостаточности. Длительный прием пациентами с ИБС липофильных Р-адреноблокаторов не снижает функциональные резервы СУР 2Б6.

Показано, что у больных циррозом печени результаты перорального теста больше нормальных значений в 8,3 раза (р<0,05) и максимальны при декомпенсированной стадии, что позволяет использовать тест в качестве дополнительного метода оценки печеночно-клеточной недостаточности.

Практическая значимость

1. Разработана экономичная, доступная и экспрессная в выполнении методика количественного анализа пропранолола в плазме крови, позволяющая проводить пероральный тест с 80 мг пропранолола.

2. Результаты перорального теста с пропранололом могут быть использованы в кардиологической практике при оптимизации режима дозирования липофильных Р-адреноблокаторов и в гепатологии для дополнительной оценки функционального состояния печени.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Разработанная методика количественного определения пропранолола с применением капиллярного электрофореза удовлетворяет метрологическим требованиям клинического лабораторного анализа.

2. Результаты изучения фармакодинамики пропранолола в пероральном тесте свидетельствует о его гемодинамической безопасности. Оптимальной дозой для проведения перорального теста является 80 мг пропранолола с забором венозной крови в интервале от 55 до 65 минут.

3. Биодоступность пропранолола в пероральном тесте не зависит от половой принадлежности и наличия гипоацидного состояния желудка. У больных ИБС

основным фактором, приводящим к замедлению биотрансформации, является степень выраженности хронической недостаточности кровообращения. 4. У больных циррозом печени величина Сшах пропранолола в пероральном тесте определяется фактором присутствия стадии декомпенсации (по системе Чайлда-Пьто).

Апробация материалов исследования

Основные положения диссертации доложены и обсуждены на IV съезде ревматологов России (Казань, 2005), на Российском национальном конгрессе кардиологов «От диспансеризации к высоким технологиям» (М., 2006), на VI Всероссийской конференции молодых ученых (Самара, 2007), на научно-практической конференции с международным участием «Достижения клинической фармакологии в России» (М., 2009), на Всероссийской конференции «Инновационные технологии в биологии и медицине" (М., 2009), на конференции Европейского научного фонда «Pharmacogenetics and Pharmacogenomics: Practical Applications in Routine Medical Practice» (Барселона, Испания, 2010).

Вклад автора в проведённое исследование

Автором непосредственно разработана методика капиллярно-электрофоретического определения пропранолола, проведены исследования по фармакокинетике пропранолола на кафедре фармацевтической химии (зав.кафедрой к.ф.н. А.Н.Фомин). Оценка фармакодинамики пропранолола у наблюдаемых больных проводилась совместно с доцентом кафедры госпитальной терапии Ярославской медицинской академии к.м.н. И.Г.Красквнной. Автором проведена обработка полученного материала, его систематизация, статистическая обработка, анализ полученных данных.

Реализация результатов работы

По материалам диссертации оформлено информационное письмо «Разработка и клиническая значимость фармакокинетического теста с пропранололом», которое внедрено в практику работы кардиологического и гастроэнтерологического отделений МУЗ КБ №9 г. Ярославля, терапевтического отделения МУЗ «МСЧ ЯЗДА» и в учебный процесс кафедры госпитальной терапии и кафедры факультетской терапии Ярославской государственной медицинской академии.

По теме диссертации опубликовано 8 работ, в том числе 3 в журналах, рекомендованных ВАК.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 138 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, четырех глав собственных наблюдений, обсуждения, выводов, практических рекомендаций, указателя литературы, включающего 58 отечественных и 155 зарубежных источников. Работа проиллюстрирована 23 таблицами и 23 рисунками.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материал и методы исследования

Работа выполнена на кафедрах клинической фармакологии (зав. каф. д.м.н., профессор А.Л.Хохлов и фармацевтической химии (зав. кафедрой к.ф.н., доцент А.Н.Фомин) ГОУ ВПО ЯГМА Минздравсоцразвития России (ректор д.м.н., профессор А.В.Павлов).

Общее количество включенных в исследование добровольцев было 83 человека. Протокол исследования прошел утверждение ЛЭК ГОУ ВПО ЯГМА Минздравсоцразвития России.

Пероральный тест с пропранололом представляет собой определение в плазме крови концентрации препарата через 55 - 65 минут после приёма 80 мг лекарственного средства. Использовался обзидан (пропранолол) табл. 40 мг фирмы Actavis Group hf. (Исландия); производитель Schwarz Pharma (Германия).

Методы фармакокинетнческого анализа Определялись следующие фармакокинетические параметры: максимальная концентрация лекарственного средства в плазме крови (Сшах), время достижения максимальной концентрации (Ттах). Дополнительно вычислялся показатель абсорбции препарата - площадь под кривой содержания ПР в плазме от 0 до 120-й минуты (AUCT), и показатель элиминации ПР - общий клиренс (CLT/F), рассчитываемый делением дозы ПР на AUCT.

Оценка фармакокинетики ПР у здоровых добровольцев Определение остаточных концентраций ПР в плазме крови проводилось у 10 здоровых доноров (6 мужчин и 4 женщины) в возрасте 22,4±1,2 лет в течение 120 минут после перорального приёма 80 мг препарата с интервалом в 10 минут. Остаточные концентрации ПР в данном разделе исследования определяли с использованием ВЭЖХ.

Определение CW при приёме различных доз ПР проводилось у трех физически здоровых без вредных привычек добровольцах-мужчинах. Они принимали один раз в неделю с недельным интервалом 40, 80, 120 и 160 мг препарата.

Клинические группы определения фармакокинетики (Стя) ПР

а) 20 здоровых доноров (10 мужчин и 10 женщин) в возрасте 22,7+1,2 года;

б) 10 больных (возраст 21,8±2,2 года) хроническим гастритом с пониженной секрецией;

в) 20 больных ИБС (возраст 67,8±10,7 лет) с нормальной и сниженной фракцией сердечного выброса с клиническими проявлениями хронической сердечной недостаточности I - IIФК по N¥114;

г) 20 больных циррозом печени (возраст 52,9±9,3 года) с незначительным и выраженным нарушением печеночной функции.

Среди больных ИБС постинфарктный кардиосклероз имели 9 человек (45%), стенокардию напряжения - 10 (50%), ХСНI ФК - 10 (50%), ХСН П ФК -10 (50%), мерцательную аритмию - 7 (35%). Артериальная гипертензия была выявлена у 6 (30%) пациентов. Все больные получали лечение кислотой ацетилсалициловой (100 мг/сутки) и ингибиторами АПФ (лизиноприл 10 мг/сутки, престариум 4 мг/сутки). Статины принимали трое больных. Мочегонные (гипотиазид по 25 - 50 мг/нед) препараты принимали 12 больных (60%). Пациенты с мерцательной аритмией получали дигоксин (0,00025 мг/сутки). Все больные ИБС, включённые в исследование, получали рАБ. Спектр применяемых рАБ и дозы представлены в таблице 1.

Таблица 1 - Характеристика проводимого лечения РАБ больных ИБС

Применяемый рАБ Число лиц Средняя доза Целевая доза при ХСН

Бисопролол 13 4,6 мг 10мг

Карведилол 3 12,5 мг 50 мг

Метопролол (т) 3 33,3 мг -

Атенолол 1 50 мг -

16 человек принимали рекомендованные при терапии ХСН бисопролол и карведилол. Средние дозы применяемых в терапии РАБ не достигали целевых значений для бисопролола в 2 раза, для карведилола - в 4 раза. Частота сердечных сокращений меньше 60 в минуту имелась только у одной больной.

Тахикардия с ЧСС больше 90 в минуту отмечена у 9 пациентов (45%). У 10 больных с ЧСС от 60 до 90 средние значения составили 75+7 в минуту.

Среди больных циррозом печени у 17 лиц (85%) была алкогольная (токсическая) этиология заболевания, у 3 (15%) - вирусная. У всех пациентов при эзофагогастродуоденоскопии было выявлено варикозное расширение вен пищевода (у 4 (20%) первой стадии, у 13 (65%) второй стадии, у 2 (10%) третьей стадии, у 1 (5%) четвёртой стадии. Асцит (по данным УЗИ) присутствовал у 13 (65%) больных. Стадия компенсации цирроза (по СЫЫ-Ри§Ь) диагностирована у 8 (40%) пациентов, субкомпенсации - у 5 (25%) больных, декомпенсации - у 7 (35%) больных.

У больных с пшоацидным состоянием желудка среднее значение рН в теле желудка соответствовало гипоацидности (4,5±0,7). Диагноз гастрита в 100% верифицирован эндоскопическим исследованием (ЭГДС). Дуоденит был выявлен у 3 (30%) пациентов, гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь - у 2 (20%), дискинезия желчевыводящих путей (УЗИ) - у 2 (20%), синдром раздражённой толстой кишки - у 2 (20%). При УЗИ органов брюшной полости патологии со стороны печени не выявлено.

Клинические группы оценки фармакодинамики ПР

Оценка фармакодинамики ПР проводилась у 30 испытуемых в следующих клинических группах:

а) 10 здоровых испытуемых в возрасте от 20 до 25 лет;

б) 10 женщин, больных гипертонической болезнью 2-ой достигнутой степени со средним риском сердечно-сосудистых осложнений, не получающих какую-либо лекарственную терапию;

в) 10 больных ИБС с ХСН II ФК по МУНА, принимающих в составе комбинированной терапии 5 - 7,5 мг бисопролола.

У испытуемых после приёма ПР на протяжении двух часов с интервалом в 10 минут регистрировались ЧСС, САД, ДАД. Кроме того, перед приёмом ПР и через один час после него проводили ЭХО-кардиографию на ультразвуковом сканере высокого разрешения «Nemio Toshiba XG» с линейным датчиком 7,5 МГц с определением показателей, отражающих сократительную способность миокарда левого желудочка: ударный объём, фракция выброса, степень укорочения передне-заднего размера в систолу.

Материальное обеспечение количественного анализа пропранолола Использовался прибор для капиллярного электрофореза «Капель-105» (научно-производственная фирма аналитического приборостроения «Люмэкс»). Размеры капилляра: общая длина составляет 60 см, внутренний диаметр - 0,075 мм. Регистрация компонентов осуществлялась с помощью встроенного фотометрического детектора с изменяемой длиной волны от 190 до 380 нм. Запись и обработка данных анализа производилась с использованием программного обеспечения «МультиХром для Windows» (ЗАО «Амперсенд», Россия).

Конфигурация системы для высокоэффективной жидкостной хроматографии Shimadzu LC-20 Prominence, использованная в данной работе, состояла из следующих элементов: последовательного двухмикроплунжерного насоса, термостата хроматографических колонок и спектрофотометрического детектора, поддерживающего диапазон длин волн 190-600 нм.

В качестве рабочего стандарта использовали обзидан (пропранолол) -раствор д/ин. 0,1 % фирмы Isis Pharma (Германия).

Статистические исследования Графическая (построение диаграмм, таблиц и графиков) и текстовая части работы проводились на персональном компьютере на базе процессора Intel Pentium IV при помощи прикладных программ "Excel", "Word" и "Power Point",

входящих в пакет Microsoft Office 2007, с использованием операционной системы Windows ХР SP2 производства компании Microsoft. Статистическая обработка результатов исследования выполнялась при помощи пакетов статистических программ Primer of Biostatistics (Version 4.03, Copyright 1998, McGraw Hill) и Statistica (Version 6.0, Copyright 2001, Stat Soft, Inc). Вычислялись средние значения, показатели медианы, 25% и 75% процентили и их различия по критерию Стыодента с поправкой Бонферрони. Из непараметрических методов использовался критерий Крускала-Уолиса и Уилкоксона. Корреляционный анализ проводился с вычислением коэффициентов линейной и ранговой корреляции Пирсена. Факторный анализ проводился методом одностороннего анализа вариаций (ANOVA). За уровень достоверности принималось значение р < 0,05.

Результаты исследования и их обсуждение Разработка методики количественного анализа ироиранолола методом капиллярного электрофореза

Для определения оптимального режима прямого «стекинга»

(концентрирования) электрофоретическое исследование ПР проводили с использованием в качестве растворителей проб (РП): а) воды; б) буферного раствора Бриггона-Робинсона (рН 2,3); в) буферного раствора Бриттона-Робинсона (рН 2,3), разбавленного в 10 раз водой.

Результаты показали, что применение «стекинга» на основе буферного раствора Бриггона-Робинсона (рН 2,3), разбавленного в 10 раз водой, позволило увеличить величину фотометрического сигнала детектируемого вещества и оптимизировать пик ПР на электрофореграмме (ЭФГ).

Использование в качестве рабочего электролита (РЭ) буферного раствора Бриггона-Робинсона (рН 2,3) позволяет эффективно разделить смесь на отдельные компоненты и осуществить идентификацию ПР по t^ в присутствии

других представителей группы рАБ, в частности: атенолол (16,20±0,59), метопролол (16,6710,61), небиволол (17,4410,53), пиндолол (17,6810,51), ПР (19,9210,35). ПР в смеси с иными РАБ характеризуется наибольшей электрофоретической подвижностью и минимальным коэффициентом вариации.

Показано, что использование в качестве рабочего электролита буферного раствор Бритгона - Робинсона с рН 2,3 позволяет по сравнению с растворами с большими значениями рН получить наибольшие значения исправленного на электроосмос времени миграции пропранолола в процессе капиллярного элекгрофореза и лучшую воспроизводимость электрофоретической подвижности пропранолола.

Количественное определение пропранолола методом капиллярного электрофореза характеризуется хорошей воспроизводимостью результатов. Погрешность определения (коэффициент вариации) пропранолола составляет 1,45%.

Установлено, что максимальное количество пропранолола из водного раствора экстрагируется хлороформом при рН 9,0.

Выявлено, что граница определения ПР составила 10 нг, а граница обнаружения - 5 нг вещества в 1 мл мочи.

Проведена серия экспериментов с определением влияния осаждения белков различными способами на степень экстракции ПР. В качестве осадителей использовали 20% раствор трихлоруксусной кислоты, раствор соляной кислоты, рН 2,0 или буферный раствор Бриттена-Робинсона, рН 2,0. Также исследовалось прямое экстрагирование основания ПР хлороформом без добавления осадителя.

Наибольшая степень экстракции отмечалась при использовании в качестве осадителя буферного раствора Бриттона - Робинсона, рН 2,0. (98,85%).

Разработанная методика количественного определения ПР в плазме крови методом капиллярного электрофореза: 2,5 мл плазмы крови вносят в пробирку с 2,5 мл буферного раствора Бритгона-Робинсона (рН 2,3). После добавления 5 мл хлороформа пробы помещают в шейкер на 10 мин. Эмульсию разрушают центрифугированием при 6000 об/мин в течение 10 минут. Хлороформный экстракт отделяют с помощью делительной воронки через бумажный складчатый фильтр, предварительно смоченный хлороформом. Реэкстракцию проводят 1,0 мл РП. Реэкстракт отделяют, центрифугируют при 10000 об/мин в течение 5 мин. Проба вводится в капилляр прибора для электрофореза Капель-105 под давлением 30 мбар в течение 15 сек. Рабочий электролит - буферный раствор Бритгона-Робинсона с рН 2,3. Положительный электрод со стороны введения рабочего электролита имеет напряжение +20 кВ. Детектирование проводят при X 220 нм.

Фармакокинетика пропранолола в исследуемом тесте

У 10 здоровых лиц (6 мужчин и 4 женщины) в возрасте 22,4±1,2 года исследовалась фармакокинетика пропранолола после перорального приёма 80 мг препарата. Во всех случаях в кубитальную вену устанавливался катетер, через который забиралось И проб венозной крови (через каждые 10 минут, начиная с 20-й минуты после приёма пропранолола, в течение двух часов). Исследование проводилось на жидкостном хроматографе Shimadzu LC-20 Prominence. Значения исследуемых параметров составили: Сшах=. 81 ± 32 нг/мл, Ттах = 59 ± 6 мин, AUCt-152 ± 108 нг/час*мл, CLT/F = 26 ± 12 мл/мин*кг (рисунок 5).

Между остаточными концентрациями ПР в срок 50, 60 и 70 минут достоверные различия отсутствуют. Наиболее близки между собой значения концентрации ПР через 60 и 70 минут после приёма препарата (T5t7o-6o=0,29, р=0,69). Коэффициент ранговой корреляции Спирмана между Смах и AUCt ПР выявил тесную зависимость между этими показателями (R =0,81, р<0,0001).

Проведённый анализ указывает на возможность забора венозной крови при проведении теста с пероральным приёмом ПР в интервале от 55 до 65 минут и использования в качестве показателя биодоступности С^ ПР.

Оказалось, что при увеличении принимаемой однократной дозы ПР в 2 раза Смах возрастала в 2,3 раза. При увеличении дозы ПР в три раза отмечено нарастание Смахв 3,4 раза. При этом тренд повышения Смах при приёме здоровыми добровольцами ПР в дозах от 40 до 120 мг носил линейный характер.

При четырехкратном увеличении дозы ПР (до 160 мг) зарегистрировано возрастание Сшах в 36,5 раза, что указывало на превышение функциональной

ёмкости изоферментов цитохрома СУР450 206 (рисунок 6).

|--

С пропранолола(нг/мл)

Шин.

Рисунок 5 - Остаточные концентрации пропранолола в плазме крови после приема 80 мг препарата (п = 10)

Рисунок 6 - Максимальные концентрации пропранолола в плазме крови после приема различных доз препарата

Превышение концентрации ПР в плазме крови выше 200 нг/мл указывает на прекращение печеночного метаболизма всосавшегося из кишечника препарата пропорционально принятой дозе, что, в принципе, указывает на полную блокаду CYP 2D6 или, гипотетически, на 100%-ое нарушение окислительной функции печени. Для определения чувствительности теста (ЧТ) при приеме различных доз ПР применили формулу: ЧТ % = 100 - (Стах / 200) * 100. Соответственно, доза в 120 мг позволяет выявить 36%-е нарушение функции печени, доза в 80 мг - 57%-е, а доза в 40 мг - 82%-е нарушение. Из этих данных следует, что пероральный тест с дозой в 40 мг ПР не в состоянии обеспечить требуемую чувствительность метода. Применение ПР в дозах в 80 и 120 мг обладает сравнимой чувствительностью в выявлении печеночной патологии, но доза в 120 мг превышает официально разрешенный режим разового дозирования ПР (80 мг), что позволило отдать предпочтение при проведении теста дозе 80 мг.

Установлено, что остаточные концентрации ПР через час после его приёма составляли 81,7±37 нг/мл у мужчин и 84,0±42 нг/мл у женщин. Достоверные различия между значениями показателя отсутствовали.

Средние значения Сшах ПР у больных с лшоацидным состоянием желудка составили 83,2±46,2 нг/мл. Они не отличались от уровня здоровых лиц - 85±32 нг/мл (t = 0,13, р=0.69).

В целом в группе 20 больных ИБС С^ ПР (223,9±209,8 нг/мл) была вьппе, чем у здоровых лиц (t=2,9 р=0,005). Однако эти различия были связаны с более высокими значениями показателя у больных ХСН П ФК. У пациентов с ХСН1ФК значения пробы не отличались от уровня таковой у здоровых людей (t=0,9 р=0,39). Стах ПР бьша одинаковой у больных с постинфарктным кардиосклерозом и стенокардией различных функциональных классов.

Достоверная линейная корреляционная зависимость выявлена между Стах ПР и такими показателями, как УО (г=0,31, р < 0,05) и ФВ левого желудочка (г=0,36, р<0,05), ACT (1=0,35, р<0,05), ПТИ (r=0,46, р <0,05), общий белок (г=0,47, р<0,05), общий билирубин (г=0,51, р<0,05).

Статистическая обработка методом одностороннего анализа вариаций (ANOVA) выявил, что основными факторами, оказавшими достоверное воздействие на Стах ПР, были выраженность ХСН (F=10,59, р = 0,004) и наличие цирроза печени (F=28,5, р = 0,000).

Средние значения Сюах ПР у 20 больных циррозом печени превосходили нормальный уровень в 8,3 раза (р=0,004). Достоверные различия по сравнению со здоровыми людьми выявлены при всех стадиях цирроза печени. Сшах пропранолола у больных с компенсированным и субкомпенсированным циррозом печени не различались.

Фармакодииамика пропранолола у здоровых лиц, больных гипертонической болезнью и хронической сердечной недостаточностью

У здоровых людей ЧСС максимально урежалась к 50-й минуте (=20,5%, 1=3,23, р=0,004). На 60-й минуте ЧСС снижалась по отношению к исходному уровню на 15,3% (1=3,03, р= 0,001). Максимальные снижения показателей центральной гемодинамики при проведении теста с ПР у здоровых лиц составили 17,5% для САД, 10% для ДАД и 20,5% для ЧСС. Через час после приёма 80 мг ПР величина УО сердца достоверно не изменялась, ФВ снижалась незначительно (11,2%, 1=2,8, р = 0,011), средние значения степени укорочения передне-заднего размера в систолу соответствовали исходным показателям.

У больных ГБ, не получающих медикаментозную терапию, величина САД достоверно снижалась к 30 минуте после приёма ПР (-8,6%, 1=2,49, р=0,022). К 60-й минуте процент снижения составил 15% (1=4,79, р < 0,0001), к 120-й - 18% (1=5,56, р < 0,0001). Достоверных различий между величиной САД60 и САД120 не выявлено. ДАД максимально снижалось на 60-й и 120-й минуте после приёма пропранолола (-7% и -8%, соответственно). ЧСС максимально урежалась через 60 минут после приёма ПР (-21%, 1=3,54, р = 0,02). Сниженной (-16%, 1=3,07, р =0,07) она оставалась и через 120 минут.

У больных ИБС с клиническими проявлениями ХСН П ФК, принимающих по 5 - 7,5 мг бисопролола, к 60-й минуте после приёма 80 мг ПР достоверных изменений параметров центральной гемодинамики не было выявлено. Средний процент изменений САД, ДАД и ЧСС не превышал 4%. Через 120 минут после приёма ПР отмечено достоверное урежение ЧСС на 13,5% 0 = 3,35, р < 0,04) от исходного уровня. Значимых изменений показателей внутрисердечной гемодинамики у больных ИБС не отмечалось. Изменения УО через 60 минут составили +5,8%, ФВ левого желудочка +9,4%, степени укорочения передне-заднего размера в систолу +8,1%.

Ни у одного наблюдаемого не было отмечено нежелательных лекарственных реакций на приём 80 мг ПР.

ЧСС в сравниваемых группах при проведении перорального теста с ПР изменялась практически одинаково. Статистической разницы между ЧСС исходной, через 60 и 120 минут у здоровых лиц, больных ГБ и ИБС не выявлено (р > 0,05). Через 60 минут после приёма ПР реакции САД и ДАД были у больных с ИБС достоверно (р<0,05) меньше, чем у здоровых добровольцев.

Итак, пероральный тест с 80 мг ПР позволяет определить достижение верхней границы безопасного применения липофильных рАБ (200 нг/мл), что особенно важно при лечении больных с исходной тенденцией к брадикардии, а также уточнить тяжесть поражения печени у пациентов с проявлениями ХСН. Тест характеризуется удовлетворительной переносимостью и отсутствием значимых гемодинамических реакций.

Лабораторное оснащение проведения теста требует химико-аналитического оборудования и методов с границей определения ПР 10 нг/мл. Этой цели полностью удовлетворяет разработанный метод определения ПР в плазме крови на основе капиллярного электрофореза.

ВЫВОДЫ

1. Найдены оптимальные условия определения пропранолола методом капиллярного электрофореза: использование в качестве рабочего электролита буферного раствора Бритгона-Робинсона, рН 2,3; напряжение +20 кВ; детектирование при длине волны 220 нм. Границы определения пропранолола методом капиллярного электрофореза составляют 10 нг/мл, граница обнаружения - 5 нг/мл плазмы крови. Наибольшее количество пропранолола (> 95%) извлекается из крови при использовании в качестве осадителя белков буферного раствора Бритгона-Робинсона (рН 2,0).

2. Оптимальной дозой при проведении перорального теста, обладающей достаточной чувствительностью для выявления нарушений окислительного метаболизма в печени, является 80 мг пропранолола с забором венозной крови через 60 минут.

3. Пероральный приём 80 мг пропранолола здоровыми людьми и больными гипертонической болезнью хорошо переносится. К 60-й минуте максимальное снижение величин показателей центральной и внутрисердечной гемодинамики составило: ЧСС - 21%, САД - 15,7%, ДАД - 7%, ФВ - 11,2%. У больных ИБС с ХСН проведение пробы с пропранололом не сопровождается существенными изменениями центральной гемодинамики.

4. Параметры фармакокинетики пропранолола у здоровых лиц: Спих 81 ± 32 нг/мл, Тщах 59 ± 6 мин, AUCt 152 ± 108 нг/час*мл, CLT/F 26 ± 12 мл/мин*кг. Существует линейная зависимость при проведении перорального теста у здоровых лиц с дозами от 40 до 120 мг. Ствх пропранолола не имеет тендерной зависимости и не изменяется у лиц с гипоацидным состоянием желудка. Достижение Сшах пропранолола больше 200 нг/мл в ходе проведения перорального теста указывает на замедление биотрансформации липофильных Р-адреноблокаторов.

5. Среди больных ИБС факторы возраста, пола, наличия постинфарктного кардиосклероза и артериальной гипертензии не оказывают достоверного влияния на величину С^* пропранолола в пероральном тесте. На Стах пропранолола оказывают воздействие фактор наличия хронической сердечной недостаточности (F=10,59, р = 0,004) и цирроза печени (F=28,5, р = 0,001). У больных с циррозом печени величина Стах пропранолола в пероральном тесте определяется фактором присутствия стадии декомпенсации (по системе Чайлда-Пью) (F=36,2, р = 0,001).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Разработанная на основе капиллярного электрофореза методика количественного определения пропранолола в биологических жидкостях может применяться в практике клинико-диагностических и химико-токсикологических лабораторий.

2. Пероральный тест с пропранолом рекомендуется для повышения качества лечения посредством улучшения процедуры дозирования лекарственного средства.

3. Пероральный тест с пропранололом можно использовать в качестве дополнительного показателя оценки тяжести органного поражения у больных циррозом печени.

4. Достижение Стах пропранолола больше 200 нм/мл в ходе проведения перорального теста указывает на увеличенный риск развития нежелательных лекарственных реакций; показатель может быть применен для прогнозирования индивидуальной непереносимости р-адреноблокаторов.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Нагорнова, Э.Ю. Гемодинамические факторы неэффективности р-адреноблокаторов в терапии хронической сердечной недостаточности при ревматических пороках сердца / Э.Ю Нагорнова, Т.С. Носкова // Научно-практ. ревматология. - 2005. - №3. - С.89.

2. Носкова, Т.С. Количественный анализ липофильных Р-адреноблокаторов методом капиллярного электрофореза в кардиологической практике / Т.С. Носкова, А.Н. Фомин // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. - 2006. -№5.-С. 264.

3. Носкова, Т.С. Возможности капиллярного электрофореза в оценке функциональной ёмкости изоферментов цитохрома Р450 СУР2Б6 и СУРЗА4. /

Т.С. Носкова, Ю.А. Джурко // Современные вопросы теории и практики лекарствоведения. - 2007. - С. 92-95.

4. Носкова, Т.С. Экспресс- метод оценки функциональных резервов изоферментов цитохрома Р450 CYP 2D6 и CYP ЗА4. / Т.С. Носкова, Ю.А. Джурко // Известия Самарского научного центра Российской академии наук. - 2007. - № 2. - С. 74 -76.

5. Носкова, Т.С. Клиническое значение системы изоферментов цитохрома Р450. / Т.С. Носкова, Ю.А. Джурко // Новости здравоохранения. - 2007. - №2. - С. 70 -73.

6. Носкова, Т.С. Возможности капиллярного электрофореза и ВЭЖХ в изучении фармакокинетики пропранолола. / Т.С. Носкова, A.JI. Хохлов, А.Н. Фомин // Клиническая фармакология и терапия. - 2009. - №6. - С. 16 -17.

7. Носкова, Т.С. Условия проведения и клиническое значение теста с пропранололом. / Т.С. Носкова, А.Н. Фомин, Т.Ю. Широкова и др. // Вестник Российского университета дружбы народов: серия «Медицина». - 2009. - № 4. - С. 659-660.

8. Noskova, Т. Development and clinical significance of oral test with propranolol / T. Noskova // Materials of ESF-UB Conference on Pharmacogenetics and Pharmacogenomics: Practical Applications in Routine Medical Practice (06-11 June, Spain).-2010.-P. 139-141.

Список сокращений, принятых в автореферате

АД - артериальное давление

АЛТ, ACT - аланиновая, аспаргиновая

трансаминазы

РАБ - блокаторы Р-адренергических рецепторов

ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография

ДАД - диастолическое артериальное давление

ИБС - ишемическая болезнь сердца

КЭ - капиллярный электрофорез

ОИМ - острый инфаркт миокарда

ПИКС - постинфарктный кардиосклероз

ПР -пропранолол

РП - растворитель пробы

РЭ - рабочий электролит

САД - систолическое артериальное

давление

УЗИ - ультразвуковое исследование ХСН - хроническая сердечная недостаточность

ЧСС - частота сердечных сокращений

ФВ - фракция выброса левого желудочка

ФК - функциональный класс

ЭГДС - эзофагогастродуоденоскопия

ЭФГ - элекгрофореграмма

ЭФС - электрофоретический спектр

АиСт - площадь под кривой "концентрация - время" СЬТ/Р - клиренс

Оаах~ максимальная концентрация

СУР - цитохром Р450

ОТНА - Нью-Йоркская кардиологическая

ассоциация

Тщах - время достижения максимальной

концентрации

Т 'А - период полураспада

^МНН - электрофоретическую подвижность

(время миграции)

^ - исправленное на электроосмос время

миграции вещества

У% - коэффициент вариации

НОСКОВА ТАТЬЯНА СЕРГЕЕВНА

РАЗРАБОТКА И КЛИНИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ ФАРМАКОКИНЕТИЧЕСКОГО ТЕСТА С ПРОПРАНОЛОЛОМ

14.03.06 - фармакология, клиническая фармакология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

Подписано к печати_Формат бумаги 60*84 1/16

Бумага книжно-журнальная. Печать ротапринтная. Усл. печ. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ №_

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Пятигорская государственная фармацевтическая академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (357532, г. Пятигорск, пр. Калинина, 11).

Оглавление диссертации Носкова, Татьяна Сергеевна :: 2011 :: Пятигорск

Раздел Стр.

Список сокращений, принятых в тексте диссертации

Введение

1 Обзор литературы

1.1 Клиническое значение Р-адреноблокаторов

1.1.1 Применение р-адреноблокаторов при нарушениях ритма сердца

1.1.2 Применение Р-адреноблокаторов при ишемической болезни сердца

1.1.3 Применение Р-адреноблокаторов при артериальной гипертонии

1.1.4 Применение Р-адреноблокаторов при сердечной недостаточности

1.1.5 Перспективы применения пропранолола при некардиальной патологии

1.2 Особенности фармакокинетики Р-адреноблокаторов

1.2.1 Липофильность Р-адреноблокаторов

1.2.2 Кардиоселективность Р-адреноблокаторов

1.2.3 Генетический контроль метаболизма р-адреноблокаторов

1.2.4 Нежелательные лекарственные реакции на липофильные Р-адреноблокаторы

1.2.5 Особенности фармакокинетики пропранолола

1.2.6 Показатели оценки фармакокинетики пропранолола

1.3 Способы определения р-адреноблокаторов, перспективы применения капиллярного электрофореза

2 Материалы и методы исследования

2.1 Методология применения капиллярного электрофореза

2.1.1 Общие принципы работы системы капиллярного электрофореза «Капель-105»

2.1.2 Выбор рабочего стандарта

2.1.3 Подготовка капилляра для электрофореза

2.2 Методология применения высокоэффективной жидкостной хроматографии

2.3 Условия взятия крови для исследования и подготовки проб к количественному исследованию пропранолола

2.3.1 Методика получения плазмы крови

2.3.2 Методы подготовки проб к количественному исследованию пропранолола

2.4 Структура клинического исследования

2.4.1 Группы изучения остаточных концентраций пропранолола

2.4.2 Группы изучения гемодинамических последствий перорального теста с пропранололом

2.5 Статистическая обработка

3 Идентификация пропранолола методом капиллярного электрофореза

3.1 Изучение УФ-спектра пропранолола

3.2 Выбор оптимального растворителя пробы

3.3 Единые условия проведения капиллярного электрофореза пропранолола

3.4 Определение времени удержания пропранолола при электрофоретическом исследовании в сравнении с другими адреноблокаторами

3.5 Идентификация пропранолола по электрофоретическим спектрам

3.6 Построение калибровочного графика для количественного определения пропранолола

3.7 Погрешность количественного определения пропранолола методом капиллярного электрофореза

4 Разработка методов количественного определения пропранолола для клинико-диагностических лабораторий

4.1 Определение пропранолола в биологических объектах методом капиллярного электрофореза

4.1.1 Влияние рН среды и природы органического растворителя на степень экстракции пропранолола

4.1.2 Количественное определение пропранолола в моче методом капиллярного электрофореза

4.1.3 Количественное определение пропранолола в крови методом капиллярного электрофореза

5 Фармакодинамика пропранолола при проведении пероральной пробы

5.1 Противопоказания к проведению пробы с пропранололом

5.2 Динамика артериального давления, ЧСС и эхокардиографических параметров у здоровых лиц после проведения пробы с пропранололом

5.3 Динамика артериального давления и ЧСС у больных гипертонической болезнью после проведения пробы с пропранололом

5.4 Динамика центральной и внутрисердечной гемодинамики после проведения пробы с пропранололом у больных с хронической ишемической боленью сердца

6 Фармакокинетика пропранолола у здоровых лиц и клиническое значение теста с пероральным приемом пропранолола

6.1 Фармакокинетика пропранолола при пероральном приеме лекарственного средства

6.2 Определение дозы пропранолола для проведения перорального теста

6.3 Определение влияния пола и гипоацидности на результаты проведения перорального теста с пропранололом

6.4 Количественные значения теста с пропранолом у больных ишемической болезнью сердца и циррозом печени

Введение диссертации по теме "Фармакология, клиническая фармакология", Носкова, Татьяна Сергеевна, автореферат

Несмотря на значительные успехи, достигнутые в терапии ишемической болезни сердца, гипертонической болезни и хронической сердечной недостаточности, патология сердечно-сосудистой системы занимает первое место среди причин смерти во всем мире [3, 12]. Смерть больных ИБС наступает чаще всего в результате острого инфаркта миокарда или нарушения мозгового кровообращения, 50% больных умирают внезапно. Использование (3-адреноблокаторов рекомендовано на всех этапах лечения ИБС (уровень доказательности А, класс 1). Они применяются как антиаритмические препараты, а также используются в гастроэнтерологии, офтальмологии, психиатрии, периоперационной подготовке и других областях медицины.

Пропранолол - первый рекомендованный к клиническому использованию Р-адреноблокатор. Его назначение на 5-12-й день после ОИМ приводило к снижению общей смертности на 26%, внезапной смерти - на 28%, повторных фатальных и нефатальных инфарктов миокарда - на 23% [155]. Как «невиданные результаты» характеризуются данные о снижении на 83% риска смерти у больных, перенесших инфаркт миокарда, при добавлении БАБ к сочетанию статинов и ацетилсалициловой кислоты (при комбинации последних уменьшение риска на 61%). [2].

Пропранолол и поныне остается одним из самых востребованных препаратов в арсенале врачей самых разных специальностей [21]. Пропранолол ежегодно лидирует среди других Р-адреноблокаторов по количеству публикаций (медицинские базы данных MEDLINE, PUBMED). Именно по пропранололу в настоящее время проводится наибольшее количество клинико-экспериментальных исследований. По фармакокинетическим свойствам (липофильность, относительная кардиоселективность, внутренняя симпатомиметическая активность, биодоступность) пропранолол наиболее близок к Р-адреноблокатору третьего поколения карведилолу, за исключением отсутствия а1-блокирующего действия и различий в периодах полувыведения (2-3 и 5 часов).

Следует подчеркнуть, что липофильность р-адреноблокаторов определяет их профилактическое (ваготропное) воздействие в отношении внезапной смерти [164], а совместная блокада Р1- и периферических Р2-адренорецепторов определяет снижение смертности при остром коронарном синдроме и летальности при хронической сердечной недостаточности [62]. Стертая грань между необходимостью блокады р2-адренорецепторов и ее нежелательностью из-за повышенного риска нежелательных лекарственных реакций предъявляет особые требования к режиму тщательного индивидуального дозирования неселективных Р-адреноблокаторов [150] с желательным лабораторным контролем концентрации их в крови. В практике необходимо осуществление лабораторного контроля за применением липофильных Р-адреноблокаторов, так как наиболее частой врачебной ошибкой является назначение низких неэффективных доз.

Пресистемный (80%) и системный (20%) метаболизм липофильного пропранолола обусловлен активностью изоферментов цитохрома Р450 206, которая может определяться как генетическим полиморфизмом, так и органическими заболеваниями печени и сердечно-сосудистой системы [37]. Из этого следует, что и биодоступность, и биотрансформация пропранолола определяются скоростью микросомального окисления препарата в гепатоцитах. Учитывая, что биодоступность пропранолола в первую очередь определяется феноменом «первого прохождения», проведение перорального теста (исследование максимальной концентрации пропранолола в плазме крови после перорального приема препарата) теоретически может быть полезно в плане оценки функциональной емкости изоферментов СУР2Б6 и, соответственно, определения зоны безопасного приема липофильных Р-адреноблокаторов, а также дополнительного показателя тяжести органического поражения печени.

В целом контроль плазменных концентраций пропранолола, позволяющий избегать токсических реакций при приеме липофильных р-адреноблокаторов, является важной проблемой для научных исследований и практической кардиологии. Реализация ее возможна лишь при разработке доступного для клинических лабораторий и достаточно чувствительного способа определения пропранолола.

Одним из современных и перспективных аналитических методов, отвечающих поставленным требованиям, является капиллярный электрофорез, характеризующийся сочетанием разделения веществ ионогенной и нейтральной природы с последующей их детекцией в УФ-области светового спектра непосредственно в кварцевом капилляре. Метод отличается простым аппаратурным оформлением и доступными расходными материалами. Метод капиллярного электрофореза обладает достаточной чувствительностью для проведения исследований в области фармакокинетики липофильных бета-адреноблокаторов.

Цель работы

Задачи исследования

3. Изучить фармакокинетику пропранолола впероральном тесте у здоровых людей с определением Сшах, Тшах, АЦО, СЬТЖ

Научная новизна

Впервые для экспрессной косвенной оценки функциональных резервов системы изоферментов СУР 2И6 печени предложен простой субстратный тест с пропранололом. Установлено, что при проведении фармакокинетического теста оптимальной дозой является 80 мг пропранолола при его пероральном приеме с последующим определением Смах через 55 - 65 минут.

Впервые разработан доступный для клинико-диагностических лабораторий технический регламент проведения фармакокинетического перорального теста с пропранололом; определена Сшах пропранолола равная 200 нг/мл, позволяющая выявить порог безопасного приема лекарственных средств, биотрансформируюншхся изоферментами СУР 206 печени.

Установлено, что у больных с хронической ишемической болезнью сердца значения перорального теста с пропранололом превышены по сравнению с нормой в 2,9 раза (р <0,05) преимущественно за счет лиц с клиническими проявлениями хронической сердечной недостаточности.

Длительный прием пациентами с ИБС липофильных Р-адреноблокаторов не снижает функциональные резервы СУР 206.

Показано, что у больных циррозом печени средние величины перорального теста больше нормальных значений в 8,3 раза (р<0,05) и максимальны при декомпенсированной стадии, что позволяет использовать тест в качестве дополнительного метода оценки печеночно-клеточной недостаточности.

Практическая значимость

Основные положения, выносимые на защиту

3. Биодоступность пропранолола в пероральном тесте не зависит от половой принадлежности и наличия гипоацидного состояния желудка. У больных ИБС основным фактором, приводящим к замедлению биотрансформации, является степень выраженности хронической недостаточности кровообращения.

4. У больных циррозом печени величина Сшах пропранолола в пероральном тесте определяется фактором присутствия стадии декомпенсации (по системе Чайлда-Пью).

Апробация материалов исследования

Основные материалы диссертации доложены и обсуждены на IV съезде ревматологов России (Казань, 2005), на Российском национальном конгрессе кардиологов «От диспансеризации к высоким технологиям» (М., 2006), на VI Всероссийской конференции молодых ученых (Самара, 2007), на научно-практической конференции с международным участием «Достижения клинической фармакологии в России» (М., 2009), на Всероссийской конференции «Инновационные технологии в биологии и медицине" (М., 2009), на конференции Европейского научного фонда «Pharmacogenetics and Pharmacogenomics: Practical Applications in Routine Medical Practice» (Барселона, Испания, 2010).

Реализация результатов работы

По теме диссертации опубликовано 8 печатных работ, в том числе 3 в журналах, рекомендованных ВАК.

Заключение диссертационного исследования на тему "Разработка и клиническая значимость фармакокинетического теста с пропранололом"

ВЫВОДЫ

1. Найдены оптимальные условия определения пропранолола методом капиллярного электрофореза: использование в качестве рабочего электролита буферного раствора Бриттона-Робинсона, рН 2,3; напряжение +20 кВ; детектирование при длине волны 220 нм. Границы определения пропранолола методом капиллярного электрофореза составляют 10 нг/мл, граница обнаружения — 5 нг/мл плазмы крови.

Наибольшее количество пропранолола (> 95%) извлекается из крови при использовании в качестве осадителя белков буферного раствора Бриттона-Робинсона (рН 2,0).

3. Пероральный приём 80 мг пропранолола здоровыми людьми и больными гипертонической болезнью хорошо переносится. К 60-й минуте максимальное снижение величин показателей центральной и внутрисердечной гемодинамики составило: ЧСС-21%, САД-15,7%, ДАД-7%, ФВ-11,2%. У больных ИБС с ХСН проведение пробы с пропранололом не сопровождается существенными изменениями центральной гемодинамики.

4. Параметры фармакокинетики пропранолола у здоровых лиц: Стах 81 ± 32 нг/мл, Ттах 59 + 6 мин, АИСТ 152+ 108 нг/час*мл, СЬТЯ7 26 ± 12 мл/мин*кг. Существует линейная зависимость при проведении перорального теста у здоровых лиц с дозами от 40 до 120 мг. Сгаах пропранолола не имеет тендерной зависимости и не изменяется у лиц с гипоацидным состоянием желудка. Достижение Стах пропранолола больше 200 нг/мл в ходе проведения перорального теста указывает на замедление биотрансформации липофильных Р-адреноблокаторов.

5. Среди больных ИБС факторы возраста, пола, наличия постинфарктного кардиосклероза и артериальной гипертензии не оказывают достоверного влияния на величину Стах пропранолола в пероральном тесте. На Стах пропранолола оказывают воздействие фактор наличия хронической сердечной недостаточности (Р=10,59, р = 0,004) и цирроза печени (Б=28,5, р = 0,001). У больных с циррозом печени величина Стах пропранолола в пероральном тесте определяется фактором присутствия стадии декомпенсации (по системе Чайлда-Пью) (¥=36,2, р = 0,001).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2011 года, Носкова, Татьяна Сергеевна

1. Белоусов, Ю.Б. Основы клинической фармакологии и рациональной фармакотерапии: руководство для практикующих врачей / Ю.Б. Белоусов, М.В. Леонова -М.: Бионика, 2002. 368 с.

2. Войцеховский, Д. Бета-адреноблокаторы в лечении артериальной гипертензии: акцент на небиволол / Д. Войцеховский, В. Пападеметрио // Рос. кардиол. журн. 2008. - № 4. - С. 43-52.

3. Зависимость дозы и фармакодинамики метопролола от генотипа CYP2D6 у пациентов с ишемической болезнью сердца / К.А. Горячкина и др. //

4. Человек и лекарство: материалы 14 Рос. нац. Конгр. 11-15 апр. 2007г. М., 2007. - С. 279.

5. Эффективность метопролола у пациентов с инфарктом миокарда — генетические аспекты / К.А. Горячкина и др. // Вестн. СПбГМА им. И.И.Мечникова. СПб, 2007. - №5. - С. 25.

6. Гриффин, Б. Кардиология / Б. Гриффин, Э. Тополь. М.: Практика., 2009. -1248 с.

7. Гуревич, М.А. Бета-адреноблокаторы в терапии сердечной недостаточности / М.А. Гуревич // Рос. кардиол. Журн. 2009. - №1. -С.77—86.

8. Кардиоселективный p-адреноблокатор Конкор в лечении кардиологических больных / В.С.Задионченко и др. // Рус. мед. журн. — 2010. Т. 18,№10, - С. 702 - 708.

9. Ивлева, А.Я. Различия фармакологических свойств Р-адреноблокаторов и их клиническое значение / А .Я. Ивлева // Consilium Medicum. 2003. - Т.5,11. С.58-63.

10. Каверина, H.B. Значение вагусного контроля в действии пропранолола на хронотропную функцию сердца / Н.В. Каверина, В.В. Лысковцев, Е.П. Попова // Эксперим. и клинич. фармакология. 2008. - №1. - С. 36-38.

11. Карпов, Ю.А. Бета-адреноблокаторы: более 50 лет в научной и клинической практике / Ю.А. Карпов, Е.В. Сорокин // Рус. мед. журн. — 2009. №18. - С. 1081-1086.

12. Карпов, Ю.А. Новые возможности в лечении стабильной стенокардии: рекомендации Европейского общества кардиологов 2006 г / Ю.А. Карпов // Consilium-Medicum. 2006. - №12. - С. 35-37.

13. Твердотельные ионоселективные электроды, обратимые к анаприлину / С. В. Картамышев и др. // Хим.-фармац. журн. 2005.-Т.39, №1.— С.42-44.

14. Клиническая фармакокинетика / под ред. В. Г. Кукеса. М: ГЭОТАР-Медиа, 2009. - 434 с.

15. Кольчурина, А. Влияние бисопролола на физическую активность при фибрилляции предсердий / А. Кольчурина, Д. Андреев, А. Долецкий // Врач. 2009. - №9. - С. 67-69.

16. Конкор (бисопролол): монография по продукту М.: РКИ Соверо пресс, 2002. - 112 с.

17. Курылева, О.М. Исследование фармакокинетики трансдермальной терапевтической системы неселективного ß-блокатора пропранолола / О.М. Курылева, Е.О. Лавренева, Д.А. Сычев // Клинич. фармакология и терапия. 2005. - №4. - С. 80-82.

18. Леонова, М.В. Анализ врачебной практики проведения антигипертензивной терапии в России (по данным исследования ПИФАГОР III) / M.B. Леонова, Д.Ю. Белоусов, Л.Л. Штейнберг //

19. Фарматека. 2009. - №12. - С. 114-119.

20. Лопатин, Ю.М. Антиангинальная терапия больных стабильной стенокардией: фокус па снижение частоты сердечных сокращений / Ю.М. Лопатин // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. 2006. - №7. - С. 86-90.

21. Маколкин, В.И. Несмотря на критику, бета-адреноблокаторы остаются препаратом выбора при лечении сердечно-сосудистых заболеваний / В.И. Маколкин // Фарматека. 2009. - №6. - С.74-78.

22. Маколкин, В.И. Какие p-адреноблокаторы следует назначать для лечения артериальной гипертонии (в свете 2007 Guidlines for the Management of Arterial Hypertension) / В.И. Маколкин // Кардиология. 2008. - №7. - С. 62-63.

23. Маколкин, В.И. Лечение стабильной ишемической болезни сердца: фокус на Р-адреноблокаторы / В.И. Маколкин // Кардиоваскулярная терапия и профлактика. 2008. - №6. - С. 89-93.

24. Манешина, О.А. Фармакогенетика b-адреноблокаторов у пациентов сартериальной гипертензией и хронической сердечной недостаточностью / O.A. Манешина, М.В. Леонова // Лечеб. дело. 2009. - № 1. - С. 19-26.

25. Мареев, В.Ю. Изменение стратегии лечения хронической сердечной недостаточности / В.Ю. Мареев // Журн. серд. недостаточность. 2002.-№ 1.-С. 28-30.

26. Марцевич, С.Ю. И вновь о бета-адреноблокаторах при артериальной гипертонии. Что же рекомендовать практическому врачу? / С.Ю. Марцевич // Рац. фармакотерапия в кардиологии. 2009. - №1. — С. 83-86.

27. Марцевич, С.Ю. Роль бета-адреноблокаторов в лечении артериальной гипертонии. О чем свидетельствуют данные доказательной медицины? / С.Ю. Марцевич // Рац. фармакотерапия в кардиологии. 2008. - № 3. — С. 101-104.

28. Метелица, В.И. Справочник по клинической фармакологии сердечнососудистых лекарственных средств / В.И. Метелица 2 изд. - М.: Изд-во БИНОМ. - СПб: Невск. диалект, 2002. - 926 с.

29. Осадчий, К.К. ß-Адреноблокаторы при артериальной гипертензии: фокус на бисопролол / К.К. Осадчий // Кардиология. 2010. - №1. - С. 84-89

30. Применение MEGX-теста для оценки активности изофермента цитохрома Р-450 ЗА4. / Кукес В.Г. и др. // Пособие для врачей и научных работников.- М., 2004. 22 с.

31. Рациональная фармакотерапия сердечно-сосудистых заболеваний / Под. ред. Чазова Е.И., Беленкова Ю.Н. М: Литтера, 2005. - 977с.

32. Савенков, М.П. Уродинамические эффекты бета-адреноблокаторов: преимущества небиволола / М.П. Савенков, A.C. Волкова, A.B. Кириенко // Рац. фармакотерапия в кардиологии. 2008. - № 3. - С. 65-69.

33. Сычев, Д.А. Современные представления о системе биотрансформации и транспортеров лекарственных средств / Д.А. Сычев, В.Г. Кукес, Г.В. Раменская // Ведомости Науч. центра экспертизы средств мед. применения — 2006.-№1.- С. 42-50.

34. Терещенко, С.Н. Бета-адреноблокаторы: возможности расширения показаний к применению / С.Н. Терещенко // Consilium Medicum. 2005. -Т.7, №5. - С.22-30.

35. Фомин, В.В. Бета-адреноблокаторы нового поколения в лечении артериальной гипертензии / В.В. Фомин // Врач. 2009. - №2. - С. 18-21.

36. Фролов, В.А. Патофизиологические аспекты модулирования функциональных свойств нейтрофилов периферической крови человека пропранололом / В.А. Фролов, Е.Г. Моисеева, А.В. Пасечник // Бюл.эксперим.биологии и медицины. 2006. - №6. - С. 622-624.

37. Хохлов, A.JI. Сердечно-сосудистые средства: рук. для врачей / A.JI. Хохлов, В.Н. Федоров, А.А. Раков. Ярославль: Ремдер, 2001. - 198 с.

38. Чазов, Е.И. Ишемическая болезнь сердца и возможности повышения эффективности ее лечения / Е.И. Чазов // Клинич. исслед. лек. средств в России. -2001. -№ 1. С. 2-4.

39. A randomized trial of propranolol in patients with acute myocardial infarction. II. Morbiditi results // J. of the American Medical Association. 1983. - Vol. 250.-P. 2814-9.

40. A Randomized Trial Oral Propranolol versus Metroprolol in Treatment of Neurally Medicated Cyncope / M. Haghjoo et al. // Indian Heart J. 2006. -Vol. 58, №6.-P. 426-31.

41. A systematic review of selective and non-selective beta blockers for prevention of vascular events in patients with acute coronary syndrome or heart failure / O.R. de Peuter et al. // Neth. J. Med.- 2009. Vol. 67, №9. - P. 284-94.

42. ACC/AHA 2006 guideline update on perioperative cardiovascular evaluation for noncardiac surgery: focused update on perioperative beta-blocker therapy / L.A. Fleisher et al. // Circulation. 2006. - Vol.113. - P. 2662-74.

43. Amin, A.S. Colorimetric determination of beta-blockers in pharmaceutical formulations / A.S. Amin, G.H. Ragab, H. Saleh // J. Pharm. Biomed. Anal. -2002. Vol.30, № 4. - P. 1347-53.

44. Aronow, W.S. Treatment of ventricular arrhythmias in the elderly / W.S.

45. Aronow // Cardiol. Rev.- 2009. Vol.17, № 3. p. 136-46.

46. Thyrotoxic periodic paralysis: a case report and literature review / M.J.

47. Barahona et al. // Clin. Med. Res. 2009. - Vol. 7, №3. - P. 96-8.

48. Bell, J. Propranolol, post-traumatic stress disorder and narrative identity / J. Bell

49. J. Med. Ethics. 2008. - Vol. 34, №11. - P. 23.

50. Beta-blockers and health-related quality of life in patients with peripheral arterial disease and COPD / Y.R. van Gestel et al. // Int. J. Chron. Obstruct. Pulmon. Dis. 2009. - Vol.4, №1. - P. 177-83.

51. Beta-blockers for hypertension / C.S. Wiysonge et al. // Cochrane Database Syst. Rev. 2007. - CD002003.

52. Beta-Blockers in sepsis: reexamining the evidence / N.M. Novotny et al. // Shock.-2009.-Vol. 31, №2.-P. 113-9.

53. Beta-Blockers protect against spontaneous bacterial peritonitis in cirrhotic patients: a meta-analysis / M. Senzolo M. et al. //Liver Int. 2009. - Vol. 29, №8.-P. 1189-93.

54. Beta-receptor blockade decreases elevated plasma levels of factor VIII:C in patients with deep vein thrombosis / M.R. Hoppener et al. // J. Thromb. Haemost. -2004. Vol. 12, №8. -P.1316-20.

55. Bhushan, R. Direct enantiomeric resolution of (+/-)-atenolol, (+/-)-metoprolol, and (+/-)-propranolol by impregnated TLC using L-aspartic acid as chiral selector / R. Bhushan, M. Arora // Biomed. Chromatogr. 2003. - Vol.17, №4. -P. 226-30.

56. Buckmiller, L.M. Propranolol treatment for infantile hemangiomas. L.M. Buckmiller // Curr. Opin. Otolaryngol. Head. Neck. Surg. 2009. - Vol. 17, №6.-P. 458-9.

57. Capillary electrochromatography with a neutral monolithic column for classification of analytes and determination of basic drugs in human serum / J. Dong et al. // Electrophoresis. 2005. - Vol.26, №18. - P. 3452-9.

58. Cardio-selective and Non-selective beta-blockers in COPD / C.L. Chang et al. // Intern. Med. J. 2009. - Vol. 38, №124. - P. 126-128.

59. Carlberg, B. Atenolol in hypertension: is it a wise choice? / B.Carlberg, O. Samuelsson, L.H. Lindholm // Lancet. 2004. - Vol.364. - P. 1684-1689.

60. Carvedilol exerts more potent antiadrenergic effect than metoprolol in heart failure / T. Kohno et al. // Cardiovasc. Drugs Ther. 2005. - Vol. 19, №5. - P. 347-55.

61. Clinical experiences of patients with catecholaminergic polymorphic ventricular tachycardia / A. Celiker et al. // Cardiol. Young. 2009. - Vol. 19, №1. - P. 45-52.

62. Chrysant, S.G. Current and future status of beta blockers in the treatment of hypertension / S.G. Chrysant, G.S. Chrysant, B. Dimas // Clin. Cardiol. 2008. -Vol. 31.-P. 249-252.

63. Comparative effectiveness of beta-blockers in elderly patients with heart failure / J.M. Kramer et al. // Arch. Intern. Med. 2008. - Vol. 168, №22. - P. 2422

64. Deleterious effects of beta-blockers on survival in patients with cirrhosis and refractory ascites / T. Serste et al. // Hepatology. 2010. - Vol.52, №3. - P. 1017-22.

65. Development and application of a new on-line SPE system combined with LC-MS/MS detection for high throughput direct analysis of pharmaceutical compounds in plasma / Y. Alnouti et al. // J. Chromatogr. A. 2005. -Vol.1080, №2. -P.99-106.

66. Effect of propranolol on verbal problem solving in autism spectrum disorder / D.Q. Beversdorf et al. // Neurocase. 2008. - Vol. 14, №4. - P. 378-83.

67. Effects of metoprolol and Carvedilol on cause-specific mortality and morbidity in patients with chronic heart failure-COMET / C. Torp-Pedersen et al. // Am. Heart. J. 2005. - Vol. 149, №2. - P. 370-6.

68. Effects of polymorphism of the beta(l) adrenoreceptor and CYP2D6 on the therapeutic effects of metoprolol/ H. Yuan et al. // J. Int .Med. Res. 2008. -Vol. 36, №6. - P. 1354-62.

69. Efficacy and safety of Sotalol for refractory tachyarrhythmias in congenital heart disease / A. Miyazaki et al. // Circ. J. 2008. - Vol. 72, №12. - P. 1998-2003.

70. Eichelbaum, M. Pharmacogenomics and individualized drug therapy / M. Eichelbaum, M. Ingelman-Sundberg, W.E. Evans // Annu. Rev. Med. 2006, Vol.57.-P. 119-37.

71. El-Didamony, A.M. A sensitive spectrophotometric method for the determination of propranolol HCl based on oxidation bromination reactions / A.M. El-Didamony // Drug Test Anal. 2010. - Vol.2, №3. - P. 122-9

72. El-Ries, M.A. AAS and spectrophotometric determination of propranolol HCl and metoprolol tartrate / M.A. El-Ries, F.M. Abou Attia, S.A. Ibrahim // J. Pharm. Biomed. Anal. 2000. - Vol.24, №2. - P. 179-87.

73. Evers, S. Alternatives to beta blockers in preventive migraine treatment / S. Evers // Nervenarzt. 2008. - Vol. 79, №10. - P. 1135-6.

74. Expert consensus document on beta-adrenergic blockers. // Eur. Heart. J. -2004. Vol. 25. - P. 1341-1362.

75. A sensitive fluorescence optosensor for analysing propranolol in pharmaceutical preparations and a test for its control in urine in sport / J.F. Fernandez-Sanchez et al. // J. Pharm. Biomed. Anal. 2003. - Vol.31, №5. - P. 859-65.

76. Frieden, I.J. Propranolol for infantile hemangiomas: promise, peril, pathogenesis / I.J. Frieden, B.A. Drolet // Pediatr. Dermatol. 2009. - Vol. 26, №5. - P. 6424.

77. Frishman, W.H. Cardiovascular Pharmacotherapeutics / W.H. Frishman, E.H. Sonnenblick, D.A. Sica- 2nd ed. NewYork. : McGraw Hill, 2003. - P. 67-97.

78. H7 Frishman, W.H. Beta-adrenergic blockers: a 50-year historical perspective /

79. Beneficial effect of the central nervous system beta-adrenoceptor blockade on the failing heart / A. Gourine et al. // Circ. Res. 2008. - Vol. 102, №6. - P. 633-6.

80. Guideline Subcommittee of the Taiwan Headache Society. Treatment guidelinesfor preventive treatment of migraine. // Acta. Neurol. Taiwan. 2008. — Vol.17, №2.-P. 132-48.

81. Guidelines for pre-operative cardiac risk assessment and perioperative cardiac management in non-cardiac surgery / D. Poldermans et al. // Eur. Heart J. -2009. Vol.30, №22. - P. 2769 - 2812.

82. Guidelines for the diagnosis and treatment of non-ST segment elevation acute coronary syndromes / J.P. Bassand et al. // Eur. Heart J. 2007. - Vol. 28, №13. -P.1598-1660.

83. Guidelines for the management of arterial hypertension / G.Mancia et al. // Eur. Heart J. 2007. - Vol.28. - P. 1462-1536.

84. Guidelines on the management of stable angina pectoris: executive summary: the Task Force on the Management of Stable Angina Pectoris of the European Society of Cardiology / K. Fox et al. // Eur. Heart J. 2006. - Vol. 27. - P. 1341-58.

85. Polymeric matrix membrane sensors for sensitive potentiometric determination of some beta-blockers in pharmaceutical preparations / S.S. Hassan et al. // J. Pharm. Biomed. Anal. 2003. - Vol.32, №1. - P. 175-80.

86. Heart rate and blood pressure in mitral valve prolapse patients: divergent effects of long-term propranolol therapy and correlations with catecholamines / E.P. da Silva et al. // Anadolu. Kardiyol. Derg.- 2007. Vol.7, № 1. - P. 107-9.

87. Hemodynamic effects of the early and long-term administration of propranolol in rats with intrahepatic portal hypertension / L. Fizanne et al. // Hepatol. Int. -2008. Vol.2, №4. - P. 457-64.

88. HPLC quantification of metoprolol with solid-phase extraction for the drug monitoring of pediatric patients / S. Albers et al. // Biomed. Chromatogr. -2005. Vol.19, №3. - P. 202-7.

89. Hypermetabolism following moderate to severe traumatic acute brain injury: asystematic review / N. Foley et al. // J. Neurotrauma. 2008. - Vol. 25, №12. -P.1415-31.

90. Impact of cardioselective beta-blockers on mortality in patients with chronic obstructive pulmonary disease and atherosclerosis / Y.R. van Gestel et al. // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2008. - Vol.178, №7. - P. 695-700.

91. Improved bone status by the beta-blocker propranolol in an animal model of nutritional growth retardation / C.E. Lezon et al. // Br. J Nutr.- 2009. -Vol.101, №11.-P.1616-20.

92. Interaction between amlodipine and simvastatin in patients with hypercholesterolemia and hypertension / S. Nishio et al. // Hypertens. Res. -2005. Vol.28, №3. - P.223-7.

93. Irbesartan plus low-dose propranolol versus low-dose propranolol alone in cirrhosis: a placebo-controlled, double-blind study / M. Schepke et al. // Am. J. Gastroenterol. 2008. - Vol.103, №5. - P. 1152-8

94. Isohanni, M.H. Effect of fluvoxamine and erythromycin on the pharmacokinetics of oral lidocaine / M.H. Isohanni, P .J. Neuvonen, K.T. Olkkola // Basic. Clin. Pharmacol. Toxicol. 2006. - Vol. 99, №2. - P. 168-72.

95. Javed, U. Beta-adrenergic blockers for chronic heart failure / U. Javed, P.C. Deedwania // Cardiol. Rev. 2009. - Vol. 17, №6. - P. 287-92.

96. Johnson, R.D. Quantitation of atenolol, metoprolol, and propranolol in postmortem human fluid and tissue specimens via LC/APCI-MS / R.D. Johnson, R.J. Lewis //Forensic Sci. Int. -2006. Vol.156, № 2-3. - P. 106-17.

97. Kapoor, J.R. Predicting the effectiveness of beta-blocker therapy in vasovagalsyncope / J.R. Kapoor // J. Am. Coll. Cardiol. 2008. - Vol.51, №24. - P. 2372-3.

98. Kapoor, J.R. Survival among patients with left ventricular systolic dysfunction treated with atenolol / J.R. Kapoor, P.A. Heidenreich // Congest. Heart Fail. -2009. Vol.15, №5. - P. 213-7.

99. Kiriyama, A. Analysis of hepatic metabolism affecting pharmacokinetics of propranolol in humans / A. Kiriyama, A. Honbo, K. Iga // Int. J. Pharm. 2008. -Vol. 349, № 1-2. - P. 53-60.

100. Koplan, B.A. Ventricular tachycardia and sudden cardiac death / B.A. Koplan, W.G. Stevenson // Mayo Clin Proc. 2009. - Vol.84, №3. - P. 289-97.

101. Kornischka, J. 40 years beta-adrenoceptor blockers in psychiatry / J. Kornischka, J. Cordes, M.W. Agelink // Fortschr. Neurol. Psychiatr. 2007. -Vol.75, №4.-P. 199-210.

102. Lawley, L.P. Propranolol treatment for hemangioma of infancy: risks and recommendations / L.P. Lawley, E. Siegfried, J.L. Todd // Pediatr. Dermatol. -2009. Vol. 26, № 5. - P. 610-4.

103. Leaute-Labreze, C. Efficacy of beta-blockers in infantile capillary haemangiomas: the physiopathological significance and therapeutic consequences / C. Leaute-Labreze, A. TaTeb // Ann. Dermatol. Venereol. -2008. Vol. 135, №12. - P. 860-2.

104. Liver disease selectively modulates cytochrome P450- mediated metabolism / R.F. Frye et al. // Clin Pharmacol Ther. 2006. - Vol.80, №3. - P. 235-45.

105. Lyons, K.E. Pharmacotherapy of essential tremor : an overview of existing and upcoming agents / K.E. Lyons, R. Pahwa // CNS Drugs. 2008. - Vol. 22, №12. - P. 1037-45.

106. Medi, C. Supraventricular tachycardia / C. Medi, J.M. Kalman, S.B. Freedman // Med. J. Aust. 2009. - Vol. 190, №5. - P. 255-60.

107. Meta-analysis: beta-blocker dose, heart rate reduction, and death in patients with heart failure / F.A. McAlister et al. // Ann. Intern. Med. 2009. - Vol. 150, №11.-P. 784-94.

108. Metabolic effects of carvedilol vs metoprolol in patients with type 2 diabetes mellitus and hypertension: a randomized controlled trial / G.L. Bakris et al. // // J. of the American Medical Association. 2004. - Vol. 292. - P. 2227-2236.

109. MicroRNA-1 downregulation by propranolol in a rat model of myocardial infarction: a new mechanism for ischaemic cardioprotection / Y. Lu et al. // Cardiovasc. Res. 2009. - Vol. 143, №12. - P. 356-358.

110. Mio, Y. New ultra-short-acting beta-blockers: landiolol and esmolol—the effects on cardiovascular system / Y. Mio // Masui. 2006. - Vol. 55, №7. - P. 841-8.

111. Mfidler, S. The heart and the liver / S. Moller, C.W. Dumcke, A. Krag // Expert Rev. Gastroenterol. Hepatol. 2009. - Vol. 3, №1. - P. 51-64.

112. Mortality and reinfarction among patients using different beta-blockers for secondary prevention after a myocardial infarction / M.L. Hansen et al. // Cardiology. 2009.-Vol. 112.-P. 144-150.

113. Nebert, D.W. Can personalized drug therapy be achieved? A closer look at pharmaco-metabonomics / D.W. Nebert, E.S. Vesell // Trends Pharmacol. Sci. -2006. Vol. 27, №11.- P. 580-586.

114. Neideen, T. Preinjury beta blockers are associated with increased mortality in geriatric trauma patients / T. Neideen, M. Lam, K J. Brasel // J. Trauma. 2008. -Vol. 65, №5.-P. 1016-20.

115. Norbury, W.B. Metabolism modulators in sepsis: propranolol / W.B. Norbury, M.G. Jeschke, D.N. Herndon // Crit. Care Med. 2007. - Vol. 35, №9. - P. 616-20.

116. O'Rourke, S.T. Antianginal actions of beta-adrenoceptor antagonists / S.T. O'Rourke // Am. J. Pharm. Educ. 2007. - Vol. 71, №5. - P. 95 -97.

117. Paravastu, S.C. Beta blockers for peripheral arterial disease / S.C. Paravastu, D.A. Mendonca, A. da Silva // Eur. J. Vase. Endovasc. Surg. 2009.- Vol.38, №1. - P. 66-70.

118. Pérez-Castrillôn, J.L. Are beta-blockers useful in the prevention of osteoporotic fractures? / J.L. Pérez-Castrillôn, D.A. De Luis, A. Duenas-Laita // Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci. 2009. - Vol.13, №3. - P. 157-62.

119. Perioperative beta blockers in patients having non-cardiac surgery: a metaanalysis / S .Bangalore et al. // Lancet. 2008. - Vol. 372. - P. 1962-76.

120. Prostacyclin synthesis in relation to sympathoadrenal activation. Effects of betablockade / K. Pettersson et al. // Circulation. -1991. Vol. 84. - P. 138-43.

121. Pharmacokinetics and pharmacodynamics of propranolol in hypertensive patients after sublingual administration: systemic availability / A.P. Mansur et al. // Braz. J. Med. Biol. Res. 1998. - Vol. 31, №5. - P. 691-696

122. Polymorphisms of drug"metabolizing enzymes CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6, CYP1A1, NAT2 and of P-glycoprotein in a Russian population / E.A. Gaikovitch et al. // Eur.J.Clin.Pharmacol. 2003. - Vol. 59, № 4. - P. 303312.

123. Postoperative administration of landiolol hydrochloride for patients withsupraventricular arrhythmia: the efficacy of sustained intravenous infusion at a low dose / S. Wariishi et al. // Interact. Cardiovasc .Thorac. Surg. 2009. -Vol. 9, №5.-P. 811-3.

124. Prognostic value of acute hemodynamic response to i.v. propranolol in patients with cirrhosis and portal hypertension / V. La Mura et al. // J. Hepatol. 2009.-Vol. 51, №2. - P. 279-87.

125. Propranolol does not increase inflammation, sepsis, or infectious episodes in severely burned children / M.G. Jeschke et al. // J. Trauma. 2007. - Vol. 62, №3. - P. 676-81.

126. Propranolol hydrochloride osmotic capsule with controlled onset of release / M. Barzegar-Jalali et al. // Drug. Deliv. 2007. - Vol.14, №7. - P. 461-8.

127. Propranolol metabolism in normal subjects: association with sex steroid hormones / T. Walle et al. // Clin. Pharmacol. Ther. 1994. - Vol.56, №2. - P. 127-32.

128. Quivalence revisited: influence of age and sex on CYP enzymes / Z. Bebia et al. // Clin. Pharmacol. Ther. 2004. - Vol.76, №6. - P.618-27.

129. Rahman, N. Validated kinetic spectrophotometric method for the determination of metoprolol tartrate in pharmaceutical formulations / N. Rahman, H. Rahman, S.N. Azmi // Chem. Pharm. Bull (Tokyo). 2005. - Vol.53, №8. - P. 942-8.

130. Replacement of Carvedilol for propranolol in patients with heart failure / F. Marques et al.// Arq. Bras. Cardiol. 2010. - Vol.95, №1. - P. 107-14.

131. Ripoll, C. Treatment of gastropathy and gastric antral vascular ectasia in patients with portal hypertension / C. Ripoll, G. Garcia-Tsao // Curr. Treat

132. Options Gastroenterol. 2007. - Vol. 10, №6. - P. 483-94.

133. Role of central beta-adrenergic receptors in regulating proinflammatory cytokine responses to a peripheral bacterial challenge / J.D. Johnson et al. // Brain Behav. Immun. 2008. - Vol. 22, №7. - P. 1078-86.

134. Romana-Souza, B. Propranolol improves cutaneous wound healing in streptozotocin-induced diabetic rats / B. Romana-Souza, A.P. Nascimento, A. Monte-Alto-Costa // Eur. J. Pharmacol. 2009. - Vol. 611, №1-3. - P.77-84.

135. Simultaneous determination of thirteen beta-blockers and one metabolite by gradient high-performance liquid chromatography with photodiode-array UVdetection / M. Delamoye et al. // Forensic Sci. Int. 2004. - Vol.141, №1. - P. 23-31.

136. Skalidis, E.I. Guidelines on the management of stable angina / E.I.Skalidis, P.E. Vardas // Eur. Heart J. 2006. - Vol. 27. - P. 1341-1381.

137. Suie, S.S. Nebivolol. New therapy update / S.S. Suie, W. Frishman // Cardiol. Rev. 2006. - Vol. 14. - P. 259-264.

138. Tanaka, E. In vivo function tests of hepatic drug-oxidizing capacity in patients with liver disease / E. Tanaka, D.D. Breimer // J. Clin. Pharm. Ther. 1997. -Vol. 22, №4.-P. 237-49.

139. Taylor, A.A. The role of vasodilating beta-blockers in patients with hypertension and the cardiometabolic syndrome / A.A. Taylor, G.L. Bakris // Am. J. Med. 2010. - Vol.123, №7. - P. 21-6.

140. The beta-adrenoceptor antagonist propranolol counteracts anti-inflammatory effects of isoflurane in rat endotoxemia / K.A. Boost et al. // Acta. Anaesthesiol. Scand. 2007. - Vol. 51, №7. - P. 900-8.

141. The in vivo effect of propranolol on cerebral perfusion and hypoxia after traumatic brain injury / E.J. Ley et al. // J. Trauma. 2009. -Vol. 66, №1. - P. 154-9.

142. The Karolinska cocktail for phenotyping of five human cytochrome P450 enzymes / M.Christensen et al. // Clin. Pharmacol. Ther. 2003. Vol.73, №6.1. P.517-528.

143. The potential mechanisms of reduced incidence of ventricular fibrillation as the presenting rhythm in sudden cardiac arrest / H. Wang et al. // Crit. Care Med.- 2009. Vol.37, №1. - P. 26-31.

144. A systematic review of the prothrombotic effects of an acute change in posture: a possible mechanism underlying the morning excess in cardiovascular events? / G. Thrall et al. // Chest. 2007. - Vol. 132, №4. - P. 1337-47.

145. Atenolol or metoprolol as beta-blocker in the treatment of hypertension / B.J. van den Born et al. // Ned. Tijdschr. Geneeskd. 2005. - Vol. 149, №32. - P. 1808-9.

146. Wachowiak, RToxicologic analysis of some adrenergic-beta blockers in the diagnosis of intoxications / R. Wachowiak, A. Tezyk // Arch Med Sadowej Kryminol. 2003 . - Vol.53, №4. - P. 289-99.

147. Beta-blockers in the treatment of hypertension: new data, new directions / M.A. Weber et al. // J. Clin. Hypertens. 2008. - Vol.10. - P. 234-238.

148. Weir, M.R. Beta-blockers in the treatment of hypertension: are there clinically relevant differences? / M.R. Weir // Postgrad. Med. 2009. - Vol. 121, №3. -P. 90-8.

149. Witek, A. Thin-layer chromatographic analysis of some beta-blocking drugs in plasma / A. Witek, L. Przyborowski // Acta. Pol. Pharm. 1997. - Vol.54, №3. -P. 183-6.

150. Wong, F. Beta-blockers in cirrhosis: friend and foe?/ F. Wong, F.Salerno // Hepatology. 2010. - Vol.52, №3. - P.811-3.

151. Wright, J.M. First-line drugs for hypertension / J.M. Wright, V.M. Musini // Cochrane Database Syst. Rev. 2009. - № 3. - Art. No.: CD001841.

152. Wyller, V.B. Treatment of chronic fatigue and orthostatic intolerance with propranolol / V.B. Wyller, E. Thaulow, J.P. Amlie // J. Pediatr. 2007. - Vol. 150, №6.-P. 654-5.

153. Wyse, D.G. Pharmacotherapy for rhythm management in elderly patients with atrial fibrillation/ D.G. Wyse // J. Interv. Card. Electrophysiol. 2009. - Vol. 25, №1.-P. 25-9.

154. Zhang, Z.X. On-line cation-exchange preconcentration and capillary electrophoresis coupled by tee joint interface / Z.X. Zhang, Y.Z. He // J. Chromatogr. A. 2005 . - Vol.1066, №1-2. - P. 211-8.

155. Zhou, S.F. Polymorphism of human cytochrome P450 2D6 and its clinical significance: Part I. / S.F. Zhou // Clin. Pharmacokinet. 2009. - Vol. 48, №11. -P. 689-723.

156. Zienciuk, A. Atrial fibrillation in the long QT syndrome/ A. Zienciuk, M. Szwoch, G. Raczak // Kardiol. Pol. 2009. - Vol. 67, №6. - P. 681-4.