Автореферат и диссертация по медицине (14.04.01) на тему:РАЗРАБОТКА И БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ ГАТИФЛОКСАЦИНА НА ОСНОВЕ ПОЛИМЕРНЫХ НАНОЧАСТИЦ
- Ученая степень
- кандидата фармацевтических наук
- ВАК РФ
- 14.04.01
Автореферат диссертации по медицине на тему РАЗРАБОТКА И БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ ГАТИФЛОКСАЦИНА НА ОСНОВЕ ПОЛИМЕРНЫХ НАНОЧАСТИЦ
Блынская Евгения Викторовна
РАЗРАБОТКА И БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ ГАТИФЛОКСАЦИНА НА ОСНОВЕ ПОЛИМЕРНЫХ НАНОЧАСТИЦ
14.04.01. - технология получения лекарств 14.03.06. - фармакология и клиническая фармакология
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук
1 1 НОЯ 2010
Москва, 2010
004612244
Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Первый Московский Государственный Медицинский Университет имени И.М. Сеченова». Научные руководители:
доктор медицинских наук, Аляутдин Ренад Николаевич
профессор
доктор фармацевтических наук,
профессор Алексеев Константин Викторович
Официальные оппоненты:
Доктор фармацевтических наук,
профессор Демина Наталья Борисовна
Доктор фармацевтических наук,
профессор Бунятян Наталья Дмитриевна
Ведущая организация:
Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Российский Университет Дружбы Народов»
Защита состоится «22» ноября 2010 года в 14 часов на заседании Диссертационного Совета Д.208.040.09 в Первом Московском Государственном Медицинском Университете имени И.М. Сеченова по адресу 119019, Москва, Никитский бульвар, 13.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ПМГМУ им. И.М. Сеченова по адресу 117998, Москва, Нахимовский проспект, д.49.
Автореферат разослан 2010 года
Ученый секретарь Диссертационного совета, доктор фармацевтических наук,
профессор Садчикова Наталья Петровна
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность. Повышение избирательности действия всегда являлось одной из важнейших задач современной фармации. Помимо направленного действия, это привело бы еще к целому ряду терапевтически значимых эффектов, а именно: уменьшение токсичности, расширение спектра применения и т.д. Однако до сих пор этому препятствовала физиологичность, сопутствующая их приему, а также индивидуальные особенности лекарственных веществ.
В ходе развития фармацевтической технологии появилась возможность создания лекарственных средств направленного действия, причем не только на клеточном, но и на субклеточных уровнях. Сами по себе подходы и технологии были различны, объединяло их одно -векторность действия фармакологически активного вещества задавалась носителем, характеризующимся наноразмерностью. Именно вследствие наноразмерности, сопоставимой с диаметром капилляра, обеспечивалась направленность действия относительно хорошо кровоснобжаемых органах, а также быстрый захват иммунной системой (с чем удалось справиться рядом технологических приемов, таких как ПЭГ-илированием и др.). В дальнейшем появилась идея использовать свойство наноразмерных частиц захватываться клетками иммунной системы, в частности - макрофагами, для направленного лечения внутриклеточных инфекций, таких, например, как туберкулез. Известно, что внутри клеток способны размножаться микроорганизмы, такие как Mycobacteria, Legionella, Chlamidia, Toxoplasma, Listeria, Esherichia, способные сохранять патогенность во внутриклеточной среде Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Streptococcus В и другие возбудители. В отношении них активность на данный момент проявляет только небольшая группа противомикробных препаратов. В первую очередь - фторхинолопы последнего поколения. Они значительно отличаются друг от друга по
\
степени проникновения в ткани, но по данному показателю, а также по показателю эффективности первые позиции занимает гатифлоксацин.
В связи с вышеперечисленным, создание лекарственных форм наночастиц гатифлоксацина для терапии наиболее распространенных и трудно поддающихся лечению внутриклеточных инфекций, используя при этом биодеградируемый и биосовместимый полимер, минимизирующий его индивидуальное воздействие на организм, является актуальным.
Цель исследования: Провести экспериментальное и теоретическое обоснование составов наночастиц гатифлоксацина, изучить фармакодинамическую активность и фармакокинетические показатели разработанных лекарственных форм на их основе.
Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:
1. Изучить физико-химические свойства субстанции гатифлоксацина,
2. Исследовать технологические факторы, влияющие на показатели качества наночастиц гатифлоксацина.
3. Обосновать выбор вспомогательных веществ для получения наночастиц гатифлоксацина, разработать составы и технологию лекарственных форм гатифлоксацина на основе наночастиц.
4. Осуществить разработку методик анализа полученных лекарственных форм, исследовать стабильность разработанных лекарственных форм гатифлоксацина в процессе хранения.
5. Изучить фармакодинамическую активность разработанных лекарственных форм на основе наночастиц гатифлоксацина.
6. Исследовать фармакокинетические параметры полученных лекарственных форм гатифлоксацина.
7. Осуществить сравнительную биофармацевтичсскую оценку разработанных лекарственных форм гатифлоксацина и таблстированной лекарственной формой, выпускаемой промышленностью.
8. Разработать необходимую нормативную документацию - ФСП, лабораторные регламенты.
Научная новизна полученных результатов. В результате проведенных исследований с использованием физико-химических методов разработан и научно обоснован состав наночастиц, лиофилизата и капсул гатифлоксацина. Установлено, что субстанция гатифлоксацина обладает рН-зависимой растворимостью. Максимальное значение растворимости (60 мг/мл) наблюдается при рН 3-5.
Впервые на основе комплекса технологических исследований разработана технология изготовления стабильных наночастиц гатифлоксацина с применением метода двойного эмульгирования полимеров.
Методом электронной микроскопии, спектрофотометрии и фотонной корреляционной спектроскопии изучены технологические факторы, влияющие на показатели качества наночастиц гатифлоксацина, определяемые природой полимера, органического растворителя и их соотношением. Сравнительный анализ полученных показателей размера частиц, степени включения гатифлоксацина в частицы и морфологических особенностей системы позволил выбрать составы с оптимальным соотношением полимера и органического растворителя.
Изучение влияния типа ПАВ и его концентрации на характеристические параметры образования наночастиц гатифлоксацина показало преимущества применения плюроник Ф68 в концентрации от 1 до 1,5 %.
Спектрофотометрическим методом осуществлен анализ зависимости степени включения гатифлоксацина от концентрации полимера, свидетельствующий об оптимальности соотношении 1:1.
Методами потенциометрического и спектрофотометрического анализа определены оптимальные технологические параметры получения наночастиц гатифлоксацина: интервалы значений pH среды полимеризации и скорости перемешивания.
На модели стафилококкового сепсиса у мышей показано не только наличие фармакологической активности у лиофилизированной лекарственной формы, но и ее увеличение по сравнению с вводимой минимальной подавляющей концентрацией, что позволяет сделать вывод о сохранении и некоторой степени увеличения антибактериальной активности лиофилизированной формы гатифлоксацина на основе ПЛГА по сравнению со стандартной лекарственной формой гатифлоксацина сесквигидрата.
Биофармацевтические исследования разработанных капсул, содержащих наночастицы гатифлоксацина в сравнении с официнальной лекарственной формой, свидетельствуют об изменении
фармакокинетического профиля препарата в плазме крови: увеличивается период полувыведения (Т^) и среднее время удерживания лекарственного вещества в организме (MRT), площадь под фармакокинетической кривой «концентрация - время», что обеспечивает более длительное нахождение гатифлоксацина в кровеносном русле.
Практическая значимость работы. На основании проведенных исследований разработаны:
- Состав и методики стандартизации лиофилизата наночастиц гатифлоксацина (проект ФСП на «Гатифлоксацин, лиофилизат для приготовления инфузий 400 мг», апробированный ЗАО «Ф-Синтез»),
- Состав и методики стандартизации капсул гатифлоксацина (проект ФСП на «Гатифлоксацин, капсулы 200 мг», апробированный ЗАО «Ф-Синтез»).
- Технология получения «Гатифлоксацин, лиофилизат для приготовления инфузий 400 мг», «Гатифлоксацин, капсулы 200 мг». (Лабораторные регламенты на производство апробированные ЗАО «Ф-Синтез»).
Положения, выносимые на защиту:
- результаты теоретических и экспериментальных исследований по обоснованию состава и технологии получения наночастиц гатифлоксацина;
результаты практических разработок в области создания «Гатифлоксацин, лиофилизат для приготовления инфузий 400 мг», «Гатифлоксацин, капсулы 200 мг»;
результаты фармакотерапевтического и биофармацевтического изучения разработанных лекарственных форм.
Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на конференции «Физико-химические, биологические и медицинские аспекты нанотехнологии» (Астрахань, 2008 г.), на конференции «Кластерные подходы в современной фармации и фармацевтическом образовании» (Белгород, 2008 г.), I Международный форум по нанотехнологиям Яизпапо1есЬ 08, на межкафедральной конференции фармацевтического факультета ММА им. И.М. Сеченова (Москва, 2010 г.).
Публикации. По теме диссертационной работы опубликованы 14 работ, в т.ч. 9 статей в журналах, рекомендованных ВАК.
Связь исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научных исследований ММА им. И.М. Сеченова и является фрагментом
7
исследований кафедры фармакологии фармацевтического факультета по теме: «Разработка и изучение систем доставки направленного транспорта лекарственных веществ».
Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на 179 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части (материалы и методы, результаты исследований и их обсуждение), выводов, списка литературы, а также Приложения. Работа иллюстрирована 39 таблицами и 22 рисунками. Библиографический указатель включает 177 источников, из них 108 на иностранных языках.
Во введении обоснована актуальность темы, сформулированы цели и задачи исследования, обоснованы научная новизна и практическая значимость работы.
В первой главе (обзор литературы) рассмотрено современное состояние в области фармацевтической нанотехнологии.
Во второй главе приведена характеристика субстанции гатифлоксацина, вспомогательных веществ, использованных в ходе исследования; методики качественного и количественного определения; методики определения физико-химических свойств, технологических характеристик и оценки качества лекарственных форм, методики фармакотерапевтической и биофармацевтической оценки разработанных лекарственных форм.
В главе третьей изложены результаты по изучению технологических свойств субстанции гатифлоксацина, изложены результаты экспериментальных исследований по выбору состава и технологии изготовления нанокапсул, лифилизата для приготовления инфузий и капсул гатифлоксацина.
В четвертой главе представлены результаты экспериментальных исследований по фармакотерапевтической и биофармацевтической оценке разработанных лекарственных форм.
В приложении приведены проекты ФСП и регламенты на разработанные лекарственные формы.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
В работе использовали субстанцию гатифлоксацина сесквигидрат (ГФС) НД 42-13523-05 производства KRKA, Словения. В качестве полимерных компонентов применяли Eudragit L100-55, Evonik, Германия, полибутилцианоакрилат (ПБЦА) Sichel Werke, Германия, полимолочную кислоту и сополимер DL-молочной и гликолевой кислот сополимера (ПЛГА) (50:50), Boehringer Ingelheim, Германия.
Спектрофотометргоо в УФ и видимой областях проводили на спектрофотометре Helios Alpha, Thermospectronics. Размер наночастиц определяли методом фотонной корреляционной спектроскопии (наносайзер Coulter N4MD, Coulter Electronics, U.K).
Оценку наночастиц методом сканирующей электронной микроскопии проводили на приборе «JEOL JSM-T330» (Япония) при напряжении 20 кВ с предварительным напылением слоя коллоидного золота (толщиной 70Ä) на приборе «JEOL JFS -1100» (Япония).
Количественное содержание гатифлоксацина в лекарственных формах и определение примесей осуществляли методом ВЭЖХ на хроматографе Waters 2695, колонка Inertsil С18,150 х 4,6 мм, 5 мкм.
Количественное содержание гатифлоксацина в биологических пробах проводили методом ВЭЖХ на хроматографе Series 200 фирмы Perkin Elmer (США), оснащенным градиентным насосом, спсктрофотометрическим детектором и компьютером Pentium 4 с программным обеспечением «MultiChrom».
Условия хроматографирования: стационарная фаза - колонка «X Terra MS» фирмы Waters с обращённо-фазным сорбентом С18 (3.0x50 мм; 5 мкм); подвижная фаза - смесь ацетонитрила и 0.025 М раствора Na2HP04 с рНЗ.О; (20 : 80; по объему); скорость подвижной фазы - 1,0 мл/мин; изократический режим работы насоса; детектирование на УФ-спектрофотометре при 1=293 нм, соответствующей максимуму поглощения вещества; объем петли хроматографа - 50 мкл.
Фармакокинетические параметры рассчитывались с использованием программы «M-IND», программы WinNonlin Professional v.5.2 (Pharsight Corp., USA.
С целью обоснования оптимального состава и технологии наночастиц нами изучены физико-технологические свойства ГФ, что позволило сделать предположение о перспективности выбора полимеризационных методов изготовления наночастиц, а также метода дисперсии готовых полимеров и испарения растворителя.
Ввиду поликомпонентности составов, исследуемых для получения наночастиц, в качестве определяющих параметров оптимизации состава наночастиц ГФ нами выбраны: размер частиц, степень включения ГФ в наночастицы, морфологические особенности наноразмерной системы.
Концентрация исходных растворов полимеров не является лимитирующим показателем при осуществлении получения наночастиц методом полимеризации, так как при проведении процесса концентрация полимера постепенно возрастает и доходит в своей фазе практически до 100 %. Однако данный параметр, так же как и порядок введения фаз, могут определять эффективность процесса, оказывая влияние на смачиваемость инкорпорируемого ГФ до испарения растворителя.
Таблица 1. - Влияние соотношения полимер: органический растворитель на структурно-технологические характеристики наночастиц гатифлоксацина___
Полимер: органический Размер частиц, нм Степень включения ГФ в
растворитель (мг/мл) наночастицы, %
ПБЦА: ацетон
10:1 391±2 1,41:0,2
50:1 448±3 5,6±0,7
100:1 546±3 15.8±0,9
150:1 589±6 37.1±1,3
200:1 606±2 38,9±1,7
Г1БЦА: дихлорметан
10:1 303±2 2,3±0,2
50:1 414±2 5,9±0,4
100:1 469±2 17,1 ±0,4
150:1 648±5 32,4±1,3
200:1 693±7 36,3±1,2
ПЛГА: ацетон
10:1 399±5 3,5±0,2
50:1 484±4 16,4±1,3
100:1 491 ±4 28,9±1,5
150:1 631±6 30,1±1,4
200:1 704±6 31,0±1,7
ПЛГА: дихлорметан
10:1 443±2 7,3±0,1
50:1 529±1 21,4±1,5
100:1 687±4 37,8±1,5
150:1 739±4 37,9±1,3
200:1 8№7 38,¡±1,8
При выборе органического растворителя нами принимались во внимание такие параметры, как растворимость в нем полимеров, легкость его отгонки и класс безопасности вещества. Большое значение имеют температура плавления, обуславливающая размер получаемых коацерватов, вязкость, гидрофильность/гидрофобность (определяемая, в частности по корреляции с кислотным индексом) и др. С учетом высокой значимости временного фактора и степени нагрузки ГФ полимера в процессе формирования характеристико-морфологических особенностей полимерных наночастиц предпочтение отдано таким растворителям, как дихлорметан и ацетон.
Сравнительный анализ полученных показателей размера частиц, степени включения ГФ и морфологических особенностей наночастиц позволил выбрать для дальнейшего исследования составы с соотношением полимера и органического растворителя: состав № 1 ПБЦА : ацетон 150 : 1; состав № 2 ПБЦА : дихлорметан 200 : 1; состав № 3 ПЛГА : ацетон 100: 1; состав № 4 ПЛГА : дихлорметан 100 : 1; состав №5 полимолочная кислота: дихлорметан 100:1.
Рисунок 1. - Электронная микроскопия наночастиц гатифлоксацина на основе ПЛГА
Основным направлением оптимизации технологического процесса создания наночастиц ГФ на основе полимерного носителя являются: уменьшение размеров частиц, повышение степени включения ГФ и стабильности образующейся суспензии. Для уменьшения агрегации наночастиц использовали введение в дисперсионную среду такие ПАВ, как плюроник Г 68 и твин 80, которые сочетают высокие значения ГЛБ и нерастворимость во взятых органических растворителях.
Нами осуществлена оценка влияния выбора ПАВ, а также его концентрации на характеристические параметры образования наноразмерных частиц ГФ, путем включения различных концентраций плюроника Ф68 и твина 80 во внешнюю воду.
а №1 ; а
| □ N84
Ппюроник Плюроник Теин 00
Ф68 1,0% Ф631.5% 0.5%
О
Плюроник Ф38 0.5%
Рисунок 2. - Зависимость размера наночастиц от состава и выбранного ПАВ
Полученные экспериментальные данные позволили сделать вывод о предпочтительности использования следующих составов: состав № 2 с концентрацией плюроника Ф68 1,5%, состав № 3 с концентрацией плюроника Ф68 1,5%, состав № 4 с концентрацией плюроника Ф68 1,0%.
Выбранные составы характеризуются оптимальным соотношением размеров частиц и их морфологических особенностей. Однако во всех составах увеличение концентрации ПАВ привело, вследствие создания гидрофильной оболочки на поверхности частиц, к снижению степени включения ГФ в полимерные наночастицы. Для повышения степени сорбции ГФ нами проведено сравнительное исследование по выявлению влияния на данный показатель, а также на размер частиц системы, такого параметра, как соотношение объема внешней воды к объему органического растворителя, особенно значимого в случае включения гидрофильного ГФ.
Сопоставление функциональных значений размера частиц и степени включения ГФ позволило обосновать выбор оптимального технологического состава, характеризующегося следующими
соотношениями: ПЛГА : дихлорметан 100 : 1; дихлорметан : внешняя вода 1 : 20; концентрация плюроника Ф68 во внешней воде 1%.
Таблица 2. - Влияние соотношения объема органического растворителя к объему внешней воды на размер и степень включения гатифлоксацина в наночастицы _
Соотношение объема органического растворителя к объему внешней воды 1:5 1:10 1:20 1:25
Состав № 2 с концентрацией плюроника Ф68 1,5% Степень включения ГФ,% 16,7±0,4 28,3±0,7 49,4±2,1 51,0±2,8
Размер частиц, нм 401±3 364±4 292±2 288±3
Состав № 3 с концентрацией плюроника Ф68 1,5% Степень включения ГФ,% 13,9±0,7 25,6±1,5 38,4±1,9 39,3±2,4
Размер частиц, нм 425±5 407±3 303±4 269±4
Состав № 4 с концентрацией плюроника Ф68 1,0% Степень включения ГФ,% 31,4±2,3 41,5±1,8 63,4±2,4 65,4±3,2
Размер частиц, нм 343±3 298±3 263±5 268±2
Для данной полимерной системы осуществлен анализ зависимости
степени включения ГФ от концентрации полимера.
При увеличении концентрации полимера по отношению к включаемому ГФ выше соотношения 1:1, дальнейшего возрастания степени включения не происходит.
Для оптимизации процесса образования наночастиц и включения в них ГФ нами проведена серия экспериментов по варьированию физико-технологических параметров образования наночастиц на основе исследуемых полимеров. В качестве определяющего показателя нами выбрана степень включения ГФ в наночастицы.
О 1:0.5 1:1 1:1,5 1:2
Соотношение гатифлоксацин: ПЛГА (ыгУмг)
Рисунок 3. - Зависимость степени включения гатифлоксацина в наночастицы от соотношения гатифлоксацин : ПЛГА
При подкислении среды растворимость ГФ увеличивается, и следовательно, увеличивается степень включения в водную фазу образующейся двойной эмульсии. При сдвиге рН в кислую сторону наблюдается быстрая коагуляция полимера, вследствие чего ГФ не успевает включиться в образующиеся наночастицы. В качестве оптимального показателя рН среды полимеризации нами выбрано значение 4,5.
Температура среды подбиралась с учетом физико-химических свойств дихлорметана, испаряющегося при 38 °С, а также принималась во внимание термолабильность ПЛГА. Совокупный анализ факторов позволил остановиться на температуре полимеризационной среды 40 °С.
Таким образом, проведенные исследования позволили обосновать технологию наноразмерных частиц ГФ методом двойного эмульгирования. С этой целью навеску ГФ растворяли в воде очищенной, к полученному раствору по каплям, при непрерывном перемешивании на магнитной мешалке при 350 об/мин добавляли раствор ПЛГА в дихлорметане и перемешивали в течение 3-5 мин (эмульсия № 1).
Эмульсию № 1 прибавляли к 0,1% водному раствору плюроника Ф68 (внешняя вода), при непрерывном перемешивании на магнитной мешалке при 400 об/мин (эмульсия № 2). Перемешивание осуществляли в течение 3 ч до полного удаления дихлорметана из раствора. Затем полученную смесь фильтровали через стеклянный пористый фильтр 0,22 мкм, разливали по флаконам (объемом по 200 мл) и лиофилизировали (лиофильная сушка Alpha Christ 2-6, Германия) в течение 24 часов, после чего проводили оценку показателей качества.
Полученный в ходе производства лиофилизированнный порошок использовался нами при изготовлении капсул ГФ. С целью подбора вспомогательных веществ для получения капсульной массы изучены физико-химические и технологические свойства лиофилизата: сыпучесть, угол естественного откоса, насыпная плотность, форма и размер частиц, смачиваемость, влагосодержание, удельная поверхность, пористость. Принимая во внимание, что лиофилизат наночастиц обладает выраженными гидрофильными свойствами, хорошей прессуемостью и нулевой сыпучестью (0 г/с), для получения массы для капсулирования с необходимыми технологическими характеристиками применяли аэросил.
Таблица 3. - Состав «Гатифлоксацин, лиофилизат для приготовления инфузий 400 мг» и «Гатифлоксацин, капсулы 0,2 г» _
Вещества, входящие в состав лекарственной формы Лиофилизат для приготовления инфузий, 400 мг Капсулы, 200 мг
Гатифлоксацина сесквигидрата (НД 42-13523-05) 400 мг (428,76) 200 мг (214,38)
DL-молочной и гликолевой кислот сополимера (50:50) 400 мг 200 мг
Плюроник F 68 0,02 мг 0,01 мг
Аэросил А 380 - 12,43 мг
Кроме того, включенный в состав аэросил А 380 практически исключает негативное действие на лиофилизат влаги, препятствует слеживаемости, что приводит к повышению стабильности препарата.
Разработанные технологии легли в основу лабораторных технологических регламентов на производство лекарственных форм ГФ, подготовленных в соответствии с ОСТ «Продукция медицинской промышленности». На основании проведенных исследований составлены проекты ФСП на «Гатифлоксацин, лиофилизат для приготовления инфузий 400 мг» и «Гатифлоксацин, капсулы 0,2 г», спецификация на которые представлена в табл. 4.
Химиотерапевтическую эффективность препаратов изучали на модели стафилококкового сепсиса у мышей. Препараты вводили в хвостовую вену животных однократно через 1 час после заражения Staph, aureus. Разведения антибиотика готовили путем двукратных серийных разведений основного раствора антибиотика в мясо-петонном бульоне.
Анализ результатов, проведенных в ходе эксперимента показал не только наличие фармакологической активности у лиофилизированной лекарственной формы, но и ее увеличение по сравнению с вводимой минимальной подавляющей концентрацией, что позволяет сделать вывод о сохранении и некоторой степени увеличения антибактериальной активности лиофилизированной формы ГФ на основе ПЛГА по сравнению с субстанцией промышленного производства гатифлоксацина (KRKA, Словения).
Для сравнительного анализа биоэквивалентности разработанной лиофилизированной лекарственной формы ГФ после внутривенного введения в сравнении с субстанцией промышленного производства потребовалось изучение и сравнительный анализ особенностей фармакокинетики. В качестве объекта исследования нами использован
17
лиофилизат наночастиц гатифлоксацина на основе ПЛГА, а также субстанция ГФ сесквигидрата KRKA, Словения.
* 60
7 8 9 10 11 12 13 14 15 ЛВ, ЛВ-наночастицы
1 j " J®, субстанция гатифлоксацина сесквигидрата ■■ - J1B- лиофилизат наночастиц ПЛГА и ГФ Рисунок 4. - Влияние наночастиц на жизнеспособность внутриклеточно локализованных S. Aureus. Из значений основных фармакокинетических параметров ГФ,
следует, что ГФ значительно медленнее выводится и соответственно дольше находится в кровяном русле после введения тестовой субстанции (Т„2=17,32±1,05 ч), а не референсной (Т|/2=10,13±2,83 ч). Дополнительным подтверждением более интенсивной элиминации ГФ из системного кровотока животных после введения референсной субстанции также являются: низкая величина среднего времени удерживания ГФ в организме (MRT=9,44±1,25 ч); более высокий клиренс (С1 =122,67±13,27 мл/кг/ч) в сравнении с аналогичными фармакокинетическими параметрами, рассчитанными для тестовой субстанции (MRT=12,8±0,40 ч; С1=74,45±4,29мл/кг/ч).
Показатели Методы Гатифлоксацин, лиофилизат для приготовления инфузий 400 мг Гатифлоксацин, капсулы 200 мг
Описание Визуальный Лиофилизированный порошок или уплотненная пористая масса белого или белого со слабым желтоватым оттенком цвета. Капсулы синего цвета № 00. Содержимое капсул -порошок белого цвета.
Подлинность ВЭЖХ Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме PCO ГФ Время удерживания основного пика на хроматограмме раствора препарата должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме PCO ГФ
Растворение ВЭЖХ - Через 1 ч - не более 15 %,через 4 ч - не более 30 %, через 24 ч - не менее 70 %
Ресуспенди-руемость Визуально При добавлении воды образуется коллоидный опалесцирующий раствор без осадка и видимых агломератов
Распадаемость Время - Не более 15 минут
Средняя масса ГФ XI В соответствии с требованиями В соответствии с требованиями
РН ГФХП От 5,5 до 7,0 -
Посторонние примеси ВЭЖХ Содержание любой примеси не более 1,0%, суммарное содержание примесей не более 2,0%. Содержание любой примеси не более 1,0%, суммарное содержание примесей не более 2,0%.
Остаточные органические растворители ГФХП ГЖХ Дихлорметана — не более 1,5 % Дихлорметана - не более 1,5 %
Пирогенность Стерильность/ МБЧ ГФ XII, ОФС 420061-07 ГФ XII Метод прямого посева Препарат должен быть апирогенным Препарат должен быть стерильным Категория ЗА, изменение № 3
Количественно е определение ВЭЖХ От 392 - 408 мг/фл считая на среднюю массу От 196 до 204 мг, считая на среднюю массу одной капсулы.
Вода метод К. Фишера Не более 2,0 % -
Срок годности 2 года 2 года
Полученные данные свидетельствуют о более длительном нахождении препарата в кровяном русле в концентрациях достаточных для эффективного воздействия, что позволяет предположить пролонгацию действия ГФ в виде наночастиц ПЛГА.
---г----1---т-' —|----1---1---1---1 --г--1
О 4 8 12 16 20 24 26 32 36 40
Время, ч
Рисунок 5. - Фармакокинетические кривые усредненных концентраций гатифлоксацина в плазме крови кроликов после однократного внутривенного введения изучаемых субстанций кроликам в дозе 2,86 мг/кг (n=6, M±SD).
Анализ фармакокинетических особенностей показал, что разработанная
лекарственная форма в виде наночастиц ГФ в сравнении с официнальной
таблетированной лекарственной формой приводит к изменению
фармакокинетического профиля препарата в плазме крови: увеличивается
период полувыведения (Tt/2) и среднее время удерживания ГФ в организме
(MRT), площадь под фармакокинетической кривой «концентрация - время» и,
таким образом, обеспечивают более длительное в сравнении с препаратом
промышленного производства, нахождение ГФ в кровеносном русле.
Общие выводы:
1. Изучены физико-химические свойства субстанции гатифлоксацина. Установлено, что субстанция обладает pH-зависимой растворимостью в
достаточно узком интервале значений, причем на растворимость при варьировании рН оказывают влияние некоторые виды ПАВ, что использовалось нами при разработке состава и технологии наночастиц гатифлоксацина полимеризационным методом.
2. Анализ технологических факторов, влияющих на показатели размера наночастиц, степени включения гатифлоксацина и морфологическую структуру наночастиц позволил обосновать выбор оптимального состава, характеризующегося следующими соотношениями: ПЛГА : дихлорметан 100:1; дихлорметан : внешняя вода 1: 20; концентрация плюроника Ф68 во внешней воде 1%.
3. На основании проведенных исследований определены оптимальные технологические параметры получения наночастиц гатифлоксацина: соотношение гатифлоксацин - концентрация полимера 1:1; значения рН среды полимеризации 4,5; интенсивность вращения магнитной мешалки 1000 об/мин. Обоснованы параметры проведения лиофильной сушки. Разработан оптимальный состав капсул гатифлоксацина, включающий в себя аросил, что позволяет получать капсулы гатифлоксацина без предварительного гранулирования
4. Разработаны методики анализа разработанных лекарственных форм «Гатифлоксацин, лиофилизат для приготовления инфузий 400 мг», «Гатифлоксацин, капсулы 200 мг» и установлены нормы по показателям: «Подлинность», «Посторонние примеси», «Растворение» и «Количественное определение». Проведено исследование стабильности разработанных лекарственных форм ГФ в процессе хранения. Установлено, что все контролируемые показатели качества препаратов (внешний вид, подлинность, посторонние примеси и количественное определение) остаются в пределах норм допустимых отклонений в течение срока, эквивалентного 2 годам хранения в естественных условиях.
5. Изучение на модели стафилококкового сепсиса химиотерапевтической активности наночастиц ГФ показало у наночастиц ГФ увеличение фармакологической активности по сравнению с вводимой минимальной подавляющей концентрацией гатифлоксацина сесквигидрата (KRKA, Словения)
6. Исследование фармакокинстики разработанной лекарственной формы лиофилизированного порошка для приготовления инъекций на основе наночастиц гатифлоксацина показало, что введение ГФ в виде наночастиц приводит к изменению фармакокипетического профиля ГФ в плазме крови: увеличивается время нахождении ГФ в кровяном русле в концентрациях достаточных для эффективного воздействия, что позволяет говорить о пролонгации действия ГФ в виде полимерных наночастиц.
7. Сравнительная биофармацевтическая оценка показала, что разработанная капсульная форма гатифлоксацина на основе наночастиц в сравнении с официналыюй таблетированной лекарственной формой приводит к изменению фармакокипетического профиля препарата в плазме крови: увеличивается период полувыведения (Tía) и среднее время удерживания ГФ в организме (MRT), площадь под фармакокинетической кривой «концентрация - время» и, таким образом, обеспечивают более длительное относительно препарата сравнения нахождение ГФ в кровеносном русле.
8. Подготовлены проекты ФСП, лабораторные регламенты на разработанные лекарственные формы «Гатифлоксацин, лиофилизат для приготовления инфузий 400 мг», «Гатифлоксацин, капсулы 200 мг».
Список работ, опубликованных по теме диссертации: 1. Алексеев К.В., Блынская Е.В., Сульдин A.C. и др. Сравнительное изучение вспомогательных веществ, применяемых при капсулировании // Человек и лекарство: материалы конференции «Стратегия развития
российской фармации» в рамках XV Российского национального конгресса. -М, 2008.- С. 130-132.
2. Алексеев К.В., Блынская Е.В., Машутин А.Б. и др. Обоснование выбора пленочных покрытий для таблеток с модифицированным высвобождением // Человек и лекарство: материалы конференции «Стратегия развития российской фармации» в рамках XV Российского национального конгресса. - М., 2008. - С. 134-136.
3. Алексеев К.В., Блынская Е.В., Сульдин A.C. и др. Технологические аспекты разработки твердых лекарственных форм методом прямого прессования // Человек и лекарство: материалы конференции «Стратегия развития российской фармации» в рамках XV Российского национального конгресса. - М., 2008,- С. 132-134.
4. Блынская Е.В., Буй Т.З.К. Обоснование составов и технологических режимов создания наносомальных систем направленного транспорта лекарственных веществ на основе сополимеров молочной кислоты. //Международная научно-практическая конференция «Кластерные подходы в современной фармации и фармацевтическом образовании» Белгород, 2008. -С. 163 -165.
5. Блынская Е.В. Разработка наносомальных систем направленного транспорта лекарственных веществ на основе сополимеров молочной кислоты //Научная конференция «Физико-химические, биологические и медицинские аспекты нанотехнологии», Астрахань, 2008. - С.119 -121.
6. Алексеев К.В., Сизяков С.А., Блынская Е.В., Алексеева С.К., Дитковская А.Г. Современные пленочные покрытия в технологии таблеток // Фармация - 2009. - №8. - С. 45-49
7. Алексеев К.В., Блынская Е.В., Сульдин A.C. и др. Вспомогательные вещества в технологии твердых капсул // Фармация - 2009. - №5. - С. 31-36.
8. Алексеев К.В., Блынская Е.В., Сизяков С.А. Вспомогательные вещества в технологии таблеток с модифицированным высвобождением // Фармация -2009. -№6,- С. 49-55.
9. Алексеев К.В., Аляутдин Р.Н., Блынская Е.В. и др. Основные направления в технологии получения наноносителей лекарственных веществ. //Вестник новых медицинских технологий - 2009 - т. XVI, №2. - С. 142 -145.
Ю.Алексеев К.В., Е.В. Блынская, Литвин Е-А, Применение метода корреляции in vitro - in vivo при разработке и оптимизации лекарственных форм.// Вестник новых медицинских технологий - 2009 - т. XVI, №2. - с. 137 -139.
П.Кондаков С.Э., Мельников М.Я., Козаченко П.Н.. Блынская Е.В., Алексеев К.В. Применение неспецифических биосенсоров для контроля активности фармацевтических препаратов //Вестник МГУ. Сер. 2. Химия. -2009. - Т. 50, № 4. - С. 153-156.
12.. Алексеев К.В., Аляутдин Р.Н., Блынская Е.В. и др. Наноразмерные системы доставки лекарственных вещсств.//Вестник новых медицинских технологий - 2009 - т. XVI, №2. - С. 17 - 20.
13. Алексеев К.В., Блынская Е.В., Литвин Е.А. применение биофармацевтической классификационной системы для установления корреляции in vivo и in vitro. .//Вестник новых медицинских технологий -2009 - т. XVI, №3. - С. 136 - 13
14.Блынская Е.В.,Балабаньян В.Ю, Аляутдин Р.Н., Алексеев К.В. Получение наносомальной лиофилизированной формы гатифлоксацина И Фармация - 2010. - №5. - С. 35-40.
Подписано в печать:
08.10.2010
Заказ № 4250 Тираж - 100 экз. Печать трафаретная. Типография «11-й ФОРМАТ» ИНН 7726330900 115230, Москва, Варшавское ш., 36 (499) 788-78-56 www.autoreferat.ru
Оглавление диссертации Блынская, Евгения Викторовна :: 2010 :: Москва
Введение
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Фторхинолоны - новая группа антимикробных препаратов
1.2. Характеристика основных типов наноносителей
1.3 .Анализ основных направлений технологии получения наноносителей,
Введение диссертации по теме "Технология получения лекарств", Блынская, Евгения Викторовна, автореферат
Повышение избирательности действия всегда являлось одной из важнейших задач современной фармации. Помимо направленного действия, это привело бы еще к целому ряду терапевтически значимых эффектов, а именно: уменьшение токсичности, расширение спектра применения и т.д. Однако до сих пор этому препятствовала физиологичность, сопутствующая их приему, а также индивидуальные особенности лекарственных веществ.
В ходе развития фармацевтической технологии появилась возможность создания лекарственных средств направленного действия, причем не только на клеточном, но и на субклеточных уровнях. Сами по себе подходы и технологии были различны, объединяло их одно — векторность действия фармакологически активного вещества задавалась носителем, характеризующимся наноразмерностыо. Именно вследствие наноразмерности, сопоставимой с диаметром капилляра, обеспечивалась направленность действия относительно хорошо кровоснобжаемых органах, а также быстрый захват иммунной системой (с чем удалось справиться рядом технологических приемов, таких как ПЭГ-илированием и др.). В дальнейшем появилась идея использовать свойство наноразмерных частиц захватываться клетками иммунной системы, в частности - макрофагами, для направленного лечения внутриклеточных инфекций, таких, например, как туберкулез. Известно, что внутри клеток способны размножаться микроорганизмы, такие как Mycobacteria, Legionella, Chlamidia, Toxoplasma,
Listeria, Esherichia, способные сохранять патогенность во внутриклеточной среде Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Streptococcus В и другие возбудители. В отношении' них активность на данный момент проявляет только небольшая группа противомикробных препаратов. В первую очередь - фторхинолоны последнего поколения. Они значительно отличаются друг от друга по степени проникновения в ткани, но по данному показателю, а также по показателю эффективности первые позиции занимает гатифлоксацин. [31] о
В связи с вышеперечисленным, создание лекарственных форм гатифлоксацина на основе наноносителя для терапии наиболее распространенных и трудно поддающихся лечению внутриклеточных инфекций, используя при этом биодеградируемый и биосовместимый материал, минимизирующий его индивидуальное воздействие на организм, является актуальным.
Цель исследования: Провести экспериментальное и теоретическое обоснование составов наночастиц гатифлоксацина с позиций технологической и биофармацевтической оптимальности. Разработать составы и технологию лекарственных форм гатифлоксацина с полимерными наночастицами.
Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:
1. Изучить физико-химические свойства субстанции гатифлоксацина,
2. Исследовать технологические факторы, влияющие на показатели качества наночастиц гатифлоксацина.
3. Обосновать выбор вспомогательных веществ для получения наночастиц гатифлоксацина, разработать составы и технологию лекарственных форм гатифлоксацина на основе наночастиц. 4
4. Осуществить разработку методик анализа полученных лекарственных форм, исследовать стабильность разработанных лекарственных форм гатифлоксацина в процессе хранения.
5. Изучить фармакодинамическую активность разработанных лекарственных форм на основе наночастиц гатифлоксацина.
6. Исследовать фармакокинетические параметры полученных лекарственных форм гатифлоксацина.
7. Осуществить сравнительную биофармацевтическую оценку разработанных лекарственных форм гатифлоксацина и таблетированной лекарственной формой, выпускаемой промышленностью.
8. Разработать необходимую нормативную документацию - ФСП, лабораторные регламенты.
Научная новизна работы. В результате проведенных исследований: с использованием физико-химических методов разработан и научно обоснован состав наночастиц, лиофилизата и капсульных масс гатифлоксацина. Установлено, что субстанция гатифлоксацина обладает рН-зависимой растворимостью. Максимальное значение растворимости (60 мг/мл) наблюдается при рН 3-5.
Впервые на основе комплекса физико-химических, технологически^ и биофармацевтических исследований обоснован состав и. разработана, технология стабильных наночастиц гатифлоксацина с применением полимеризационных методов.
Изучены технологические факторы; влияющие на показатели качества наночастиц гатифлоксацина: природа полимера и органического растворителя и их соотношения.
Сравнительный анализ полученных показателей размера частиц, степени включения гатифлоксацина в частицы и морфологических особенностей системы позволил выбрать составы с оптимальным соотношением полимера и органического растворителя.
Изучение влияния типа ПАВ и его концентрации на характеристические параметры образования наночастиц гатифлоксацина показало преимущества применения плюроник Ф68 в концентрации от 1 до 1,5%.
Анализ зависимости степени включения гатифлоксацина- от концентрации полимера свидетельствовал об оптимальности соотношении 1:1. На основании проведенных исследований определены оптимальные технологические параметры получения наночастиц гатифлоксацина: интервалы значений рН среды полимеризации; интенсивности перемешивания.
Подобраны вспомогательные вещества; обеспечивающие весь комплекс необходимых медико-биологических свойств лекарственных форм гатифлоксацина.
Биофармацевтические исследования разработанных лекарственных форм гатифлоксацина показали, что разработанные лекарственные формы гатифлоксацина в виде наночастиц в сравнении с таблетированной и инфузионной лекарственными формами, выпускаемыми промышленностью, изменяютфармакокинетический профил препарата в плазме крови: увеличивается период полувыведения (Туг) и- среднее время удерживания лекарственного вещества в организме (MRT), площадь под фармакокинетической кривой «концентрация — время» и, таким4 образом, обеспечивают более длительное в сравнении с препаратом промышленного производства, нахождение гатифлоксацина в кровеносном русле.
Практическая значимость работы.
На основании проведенных исследований разработаны:
- Состав и методики стандартизации лифилизата наночастиц гатифлоксацина (проект ФСП.на «Наночастицы гатифлоксацина на основе ПЛГА, лиофилизированные для приготовления инфузии, 4001 мг» апробированныйЗАО «Ф-Синтез»).
- Состав и- методики стандартизации капсул гатифлоксацина (проект ФСП на «Капсулы лиофилизата ПЛГА и гатифлоксацина 200 мг» апробированный ЗАО «Ф-Синтез»).
- Технология получения «Наночастицы гатифлоксацина на основе ПЛГА, лиофилизированные для приготовления инфузии 400 мг», «Капсулы лиофилизата ПЖА и гатифлоксацина 200 мг». (Лабораторные регламенты на производство ЗАО «Ф-Синтез»).
Положения, выносимые на защиту: - результаты теоретических и экспериментальных исследований по обоснованию состава и технологии получения наночастиц гатифлоксацина;
- результаты» исследований по разработке и теоретическому обоснованию составам и технологии^ лекарственных форм с. наночастицами гатифлоксацина; результаты фармакологического и биофармацевтического изучения разработанных лекарственных форм.
Апробация* работы. Основные положения диссертационной работы доложены на конференции «Физико-химические, биологические и медицинские аспекты нанотехнологии» (Астрахань, 2008 г.), на конференции «Кластерные подходы, в современной фармации и фармацевтическом образовании» (Белгород, 2008 г.). R.USNANOTECH 08, 09 IV Всероссийская конференция-школа "Высокореакционные интермедиаты химических реакций" ^ Московская область, Россия; 2009) на межкафедральной конференции- фармацевтического факультета ММА им. И.М. Сеченова (Москва, 2010*г.),
Публикации. По* теме диссертационной работы опубликованы 14 работ, в т.ч. 9 статей в журналах рекомендованных ВАК.
Связь» исследования» с. проблемным- планом фармацевтических наук. Диссертационная, работа выполнена в- соответствии с планом научных исследований-ИМГМУ им. И:М. Сеченова-появляется фрагментом-исследований кафедры фармакологии фармацевтического факультета.
Объём и структура' диссертации. Диссертация изложена на 1-74 страницах машинописного текста и- состоит из, введения, обзора литературы, экспериментальной части« (материалы и методы, результаты исследований и их обсуждение), выводов, списка литературы, а также Приложения. Работа иллюстрирована- 32 таблицами и 23 рисунками. Библиографический указатель включает 177 источников, из них 108 на иностранных языках.
Во введении обоснована актуальность темы, сформулированы цели и задачи исследования, представлены научная новизна и практическая значимость работы.
Заключение диссертационного исследования на тему "РАЗРАБОТКА И БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ ГАТИФЛОКСАЦИНА НА ОСНОВЕ ПОЛИМЕРНЫХ НАНОЧАСТИЦ"
Общие выводы:
1. Изучены физико-химические свойства субстанции гатифлоксацина. Установлено, что субстанция обладает рН-зависимой растворимостью в достаточно узком интервале значений, причем на растворимость при варьировании рН оказывают влияние некоторые виды ПАВ, что использовалось нами при разработке состава и технологии наночастиц гатифлоксацина полимеризационным методом.
2. Анализ технологических факторов, влияющих на показатели размера наночастиц, степени включения гатифлоксацина и морфологическую структуру наночастиц позволил обосновать выбор оптимального^ состава, характеризующегося следующими соотношениями: ПЛГА : дихлорметан 100:1; дихлорметан : внешняя вода 1: 20; концентрация плюроника Ф68 во. внешнейводе 1%. г >
3. На основании проведенных исследований определены,оптимальные технологические параметры получения наночастиц гатифлоксацина: соотношение гатифлоксацин - концентрация полимера 1:1; значения* рН среды полимеризации 4,5; интенсивность вращения магнитной мешалки 1000 об/мин. Обоснованы параметры проведения лиофильной сушки;; Разработан оптимальный состав капсул гатифлоксацина, включающий в себя аросил, что позволяет • получать капсулы гатифлоксацина без предварительного гранулирования®
4. Разработаны методики анализа разработанных лекарственных форм «Гатифлоксацин, лиофилизат для приготовления- инфузий 400 мг», «Гатифлоксацин, капсулы 200 мг» и установлены нормы по показателям: «Подлинность», «Посторонние примеси», «Растворение» т «Количественное определение». Проведено исследование стабильности разработанных лекарственных форм ГФ в процессе хранения. Установлено, что все контролируемые показатели качества препаратов (внешний вид, подлинность, посторонние примеси и количественное определение) остаются в пределах норм допустимых отклонений: в течение срока, эквивалентного 2 годам хранения в естественных условиях.
5. Изучение на модели стафилококкового5 . сепсиса химиотерапевтической активности наночастиц ГФ показало у наночастиц ГФ увеличение фармакологической; активности по сравнению, с вводимой минимальной подавляющей концентрацией гатифлоксацина сесквигидрата (К11КА, Словения)
6. Исследование, фармакокинетики разработанной лекарственной формы лиофилизированного порошка для приготовления инъекций- на основе наночастиц: гатифлоксацина показало, что введение ГФ в . виде наночастиц приводит к изменению? фармакокинетического; профиля ГФ в плазме крови: • увеличивается* время, нахождении; ГФ в кровяном русле в концентрациях достаточных для эффективного воздействия, что. позволяет говорить о пролонгации действия ГФ в виде полимерных наночастиц.
7. Сравнительная биофармацевтическая ' оценка показала^. что разработанная, кансульная форма: гатифлоксацина, на основе наночастиц в сравнении с официнальной таблетированной лекарственной формой приводит к изменению фармакокинетического профиля» препарата в плазме крови: увеличивается: период: полу выведения, (Т1/2) и среднее время удерживания: ГФ в организме (МЯТ), площадь; под фармакокшютическоп кривой «концентрация - время» и, таким образом, обеспечивают более длительное относительно препарата сравнения нахождение ; ГФ в кровеносном русле.
8. Подготовлены проекты ФСП, лабораторные регламенты» на разработанные' лекарственные формы. «Гатифлоксацин, лиофилизат для приготовления инфузий 400 мг», «Гатифлоксацин, капсулы 200 мг». .
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2010 года, Блынская, Евгения Викторовна
1. Абдрахманов, С.А. Биодеградирующие и биосовместимые: полимерные наночастицы как лекарственная форма антибиотиков: дис. канд. биол. наук;-Mi,,2000'.'.-125:с. .
2. Александров, С. Е. Методы и приборы для анализа и диагностики наночастиц .и»; наноматериалов : сканирующая зондовая микроскопия : учеб. пособие / С. Е. Александров, А. Б. Спешилова. СПб гос. политех, ун-т:,- СПб : Издтво-Политехш ун-та, 2005. - 83 с.
3. Алексеев; К.В. Вспомогательные вещества в технологии, таблеток с, модифицированным высвобождением /К.В. Алексеев' и др;// Фармация — 2009. -№6.-С. 49-55; :
4. Алексеев, К.В. Применение, метода корреляции in vitro in vivo при; разработке и; оптимизации лекарственных форм. /Алексеев:. К.В., Е.В. Блынская, Литвин Е;А.//Вестник новых медицинских технологий — 2009 — т. XVIj №2: - с: 137 - 139;'
5. Алексеев, К.В. Сравнительное: изучение вспомогательных веществ, применяемых при капсулировании. / К.В. Алексеев и др.// Материалы конференции «Стратегия развития российской фармации». М. 2008.: —с.130-132. . '••• ,;;'/■ .
6. Алексеев, К.В. Технологические аспекты производства, современныхг твердых лекарственных форм. / К.В. Алексеев и др. // Производстволекарств по GMP; Москва: «Медицинский бизнес», 2005. - С. 165-176.
7. Алымов M. И: Методы получения нанопорошков : учеб. пособие / М.1 И. Алымов ; Моск. инж.-физ. ин-т (Гос. ун-т). М. : МИФИ, 2004. - 21 с.
8. Аляутдин, Р.Н. Доставка лоперамида в мозг с помощью полибутилцианоакрилатных наночастиц/ Р.Н. аляутдин, В.Е. петров, A.C. Бертхольд//Эксперим. и клинич. фармакология. — 1998. — Т.61. №1. — С. 17-20.
9. Аманбаева, А.К. Фармакокинетика и цитотоксичность алюминиевого комплекса фталоцианина ассоциированного с наночастицами: автореф. дис. канд. мед. наук. — Караганда, 2000. — 24 с.
10. Андреев, П.В. Применение отечественных модифицированных крахмалов в химико-фармацевтической промышленности / П.В. Андреев // Хим.фармац. журн. 2004. - Т. 38, № 8. - С. 37-41.i
11. Альтшулер, Г. Н. Избранные главы физической химии наноматериалов Эл. ресурс. : конспект лекций / Г.Н. Альтшулер, О.Г. Альтшулер. -Кемерово : КемГУ,2007.- 123 с. ,
12. Н.Андриевский, Р. А. Наноструктурные материалы : учеб. пособие / P.A. Андриевский, A.B. Рагуля. М. : Academia, 2005. - 187 с.i
13. Аржанцев, В.И. Белая книга по нанотехнологиям : исследования в области наночастиц; наноструктур и нанокомпозитов в Российской Федерации/В.И. Аржанцев. M.: URSS, 2007. - 237 с.
14. Арзамасцев, А.П. Сравнительная оценка уровня требований к испытанию «растворение»/ А.П. Арзамасцев, Н.П. Садчикова, Т.Ю. Лутцева // Хим.-фарм. журн. 2003. - № 1. - С. 39 - 45.
15. Беденов, Е.О. Направленная модификация фармакокинетики наночастицизшоли-н-бутилцианоакрилата:;автореф. дис. канд. мед: наук. Астана* 2004V — 30 с.
16. Бобрускин А.И. Синтез и исследование транспортных форм противоопухолевых . лекарственных веществ на> основе- альфа-фетопротеина и полимерных наночастиц: автореф. дис. канд. биол. наук —м, 2000-28 с. . ; ■.'■'■-"!■:.:•':■ ■'
17. Вальтер, М.Б. Основы дозирования и таблетирования лекарственных порошков. / М:Б. Вальтер, В.А. Белоусов //— М.: Медицина, 1980. — О. 216
18. Васильев, А.Е. Макромолекулярные терапевтические системы: проблемы и перспективы / А.Е. Васильев, А.Б. Давыдов // Жури. Всесоюз. хим. обвалим; Д.И; Менделеева.- 1985. Т. 30; № 4 - С. 395 - 402.
19. Васильев, А.Е. Макромолекулярные терапевтические' системы /А.Е. Васильев, М.М. Фельдштейн //Новые' материалы и новые технологии.— Вып. 5. М.: ВНТИЦентр. 2, 1988.- 177 с.148
20. Введение; в нанотехнологию: проблемы материаловедения, экономики и экологии-: учеб; пособие7 П.А. Арсеньев; А. А. Евдокимов, А. Г. Матвеева^ Н.А. Яштулов. -. М. : Изд. дом МЭИ, 2006. 47 с.
21. Гсльперина С.Э. Кинетика и химиотерапевтическая ак тивность некоторых антибиотиков,, ассоциированных с наночастицами/С.Э. Гельперина//Астана медициналык журналы. — 1999. -№4;. С." 84-88.
22. Голиков, С:Н{. Пути и;;спосо.бы пролонгирования/действияслекарственных веществ (состояние вопроса и перспективы) /С.Н. Голиков, Г.А. Гурьянов, В.К. Козлов //Фармакология и токсикология. — 1989. Т.52, N2.- С.5-15.
23. Гуляев, А.Е. Наночастицы как вектор направленного транспорта антибиотиков/А.Е. Гуляев, Е.А. Ермекбаев; Г.Я. Кивман//Хим.-фарм. журнал. 1998 г. - №3. - С. 3-6
24. Демина, Н.Б. Использование современных технологий в. создании пероральных пролонгированных препаратов изосорбида динитрата иацилпроизводных фенотиазина / H.Б. Демина и др. // Хим.-фармац. журн. 2003. - Т. 37, № 5. - С. 13-19.
25. Емшанова, С. В. Промышленный контроль формы, m размера частиц лекарственных субстанций /C.B. Емшанова // Фармацевтические технологии и упаковка. 2007. - N 10.* - С. 48 - 57.
26. Емшанова, C.B. Разработка таблетированной< формы противотуберкулезного препарата / C.B. Емшанова и др. // Фармация. —г 2005.-№2.-С. 173-178.
27. Зимина, И А. Разработка состава и технологии^ препарата ноотропного и нейропротективного действия. / И.А. Зимина и др. // Биомедицинские технологии. 2004. № 24. - С. 83-87.
28. Зыкова, М.Г. Антиревматоидная активность метотрексата, включенного в фосфолипидные наночастицы (фосфоглив)/ М.Г. Зыкова, В.Н.s
29. Прозоровский, O.Mi. Ипатова//Биомедицинская химия. — 2007. Т. 53, вып. 4.-С. 435-441.ч '
30. Измеров, Н.Ф. Нанотехнологии и наночастицы состояние проблемы иIзадачи медицины труда/Н.Ф. Измеров//Медицина труда и промышленная экология. -2007. № 8. - С. 1 -4.
31. Исаева, Е. И. Фотохимический синтез, исследование структуры и свойств ^ самоорганизованных систем на основе латексов и наночастиц меди,серебра и золота: дис. канд. хим. наук. СПб., 2005 — 135 с.
32. Каркищенко, H.H., Хоронько В.В, Сергеева С.А., Каркищенко В.Н. Фармакокинетика./Н.Н. Каркищенко, В.В. Хоронько,С.А.Сергеева, В.Н. Каркищенко Ростов-на-Дону: Феникс, 2001. - 384 с.
33. Киселева, Г.С. Приборы и методы по оценке фармацевтической доступности лекарственных форм /Г.С. Киселева, А.И. Тенцова // Фармация.- 1992.- Т. 41, № 4.- С. 58-62.
34. Кобаяси, Н. Введение в нанотехнологию : для студентов, изучающих дисциплины, связанные с применением нанотехнологии / Н: Кобаяси. М. : БИНОМ; Лаб. знаний, 2005. - 134 с.
35. Ковшов, А. Н. Основы нанотехнологии в технике : учеб. пособие / А. Hl Ковшов, Ю.Ф. Назаров, И. М. Ибрагимов. М. : Изд-во МГОУ, 2006. - 241 с.
36. Минько, Н.И. Методы получения и свойства нанообъектов : учебное пособие./Н.И. Минько,- В.М. Нарцев. Белгород: БГТУ, 2007. - 104 с.
37. Мирошниченко, И.И. Основы фармакокинетики. Москва: ГЭОТАР-МЕД, 2002.-192 с.
38. Наночастицы в природе. Нанотехнологии в приложении к биологическим системам. Новосибирск: ИПП Манускрипт, 2004 - 84 с.
39. Наночастицы в природе. Нанотехнологии в приложении к биологическим системам. Новосибирск: ИПП Манускрипт, 2003 - 76 с.
40. От наноструктур, наноматериалов и нанотехнологии к наноиндустрии: Всероссийская конференция с международным интернет-участием. — Ижевск : ИПМ УрО РАН, 2007 112 с.
41. Падейская, E.H. Фторхинолоны: значение, развитие исследований, новые препараты, дискуссионные- вопросы. /E.H. Падейская// Антибиотики ихимиотерапия. 1998. - Вып. 11. - С. 38-44.151
42. Плятт, X. Композиты — вчера и сегодня. Ч. 2. Нанотехнология — инновацияв конкретном приложении/Х. Плятт//Новое в стоматологии. — 2008. — № 6.- С. 20-22.
43. Полимеры в фармации, под ред. Тенцовой А.И. и Алюшина М.Т. // Москва, «Медицина». 1985. - 207 С.
44. Промышленная, технология лекарств, под ред. проф. Чуешова. Харьков: НФАУ МТК книга. - 2002. - Т.2 - С.394-415.
45. Пул, Ч. П. Нанотехнологии : учебник / Ч. Пул мл., Ф. Оуэне ; пер. с англ. - 3-е изд., доп. - М. : Техносфера, 2007. - 375 с.
46. Радченко, Т. Г., Наночастицы как вектор направленного транспорта антибиотиков/Т.Г. Радченко// Хим.-фармац. журн. 1998. — Т.32. №3. - С. 3-6.
47. Разживина, В.А. Изучение эффектов феназепама, сорбированного на* наночастицах/ В.А. Разживина и др.//Фармация. — 2008. — № 3. — С. 44-46
48. Сдобняков, Н.Ю. Размерная зависимость поверхностного! натяжения наночастиц и проблема их термодинамической устойчивости: дис. кандидата физико-математических наук. — Тверь, 2003 — 217 с.
49. Торчилин, В.П. Трубецкой B.C. Полимеры на поверхности наночастиц: регулирование свойств носителей и их биораспределение/ В.П. Торчилин, B.C. Трубецкой//Высокомолекулярные соединения. 1994. - Т.36 - С. 1880-1893.
50. Тузиков, Ф.В. Анализ биологических наноструктур в- системах метаболизма белков и липидов: строение, дисперсный состав и механизмы равновесных взаимодействий макромолекул: автореф. дис. д-ра биол. наук. М., 2005-44 с.
51. Фельдман, Н.Б. Полимерные мицеллы на- основе поли-N-винилпирролидона как эффективные средства доставки противоопухолевых антиангиогенных препаратов/Н.Б. Фельдман// Молекулярная медицина. 2006. — № 4. - С. 33-37
52. Цощ А.Н.Спарфлоксацин в терапии инфекционных заболеваний. /А.Н. Цой, В.В. Архипов// Лечащий врач. 2006. - Вып. 8. - С.2-11.
53. Шмелев, Е.И. Применение фторхинолонов при туберкулезе./Е.И. Шмелев, В.И. Чуканов// Пульмонология и фтизиатрия. 2000. - Vol.2(10): - Р. 429431.
54. Шварц, И.М. Биодеградирующие цианакрилатные нанокапсулы и наночастицы корпускулярные носители лекарственных веществ /И.М. Шварц и др.//Биотехнология - медицине и народному хозяйству. — 19901991 - Т. 1.-С. 52-56.
55. Шипуло, Е.В. Получение и> исследование наносомальнои формы моксифлоксацина на основе полибутилцианоакрилата/Е.В. Шипуло др.*.//Химико-фармацевтический,журнал. 2008: - Т. 42, №3. — С. 43-47.
56. Ширинский, В. Г. Направленный транспорт гентамицина на наночастицахсполи-н-бутилцианоакрилата в очаг микробного воспаления: дис., канд. мед. наук. -М., 1997. 137 с.
57. Штайнигер, С.А. Оптимизация- фармакокинетики препарата* "Фотосенс" с помощью биодеградируемых наночастиц/С.А. Штайнигер и< др.//Антибиотики и химиотерапия. 2001. - Т.46. №4. - С. 6-10.
58. Якимович, Н. О. Синтез и свойства- полимерных нанокомпозитов на основе метакрилатов и хитозана, содержащих наночастицы золота, и органо-неорганических композитов на основе полититаноксида: дис. канд. хим. Наук. Нижний Новгород, 2008. - 145 с.
59. Al-Dgither S., Development- and- validation of an HPLC methodi for the determination« of gatifloxacin stability in human plasma./ Al-Dgither S // J. Pharm. Biomed. Anal. 2006, Vol. 41(1).-P: 251-255".
60. Alivisatos, AP. Understanding Nanotechnology.// New York, NY,. USA: Warner Book; 2002. Less is more in medicine. - P . 56-69:
61. Arnold M.M., Gorman E.M., Shieber L.J., Munson E.J., Berklad G. NanoCipro encapsulation in monodispaerse large porous PLGA microparticles. // J Control
62. Release. 2007. - Vol.121 (1-2)/ - P. 100-109.
63. Behan, N. Poly n-butyl cyanoacrylate nanoparticles: a mechanistic study of polymerisation and particle formation/ Behan N, Birlcinshaw C, Clarke N // Biomaterials.- 2001 Jun.- Vol.22(ll).- P. 1335 -1344.
64. Ben-Dov I. Drug-resistant tuberculosis in a Southern California Hospital. Trends from 1969to 1984. //Am. Rev. Respir. Dis. 1994.- Vol.35.-P.1307-1310.
65. Bodmeier R. Solvent selection in the preparation of poly(D,L-Lactide) microspheres prepared by the solvent evaporation method. // Int. J. Pharm.-1998.-Vol.43.-P.179-186.
66. Borner, K. Determination of sparfloxacin in serum and urine by highperformance liquid chromatography./ Borner K., Borner E., and Lode H // J. Chromatogr. 1992, Vol.579(2).- P. 285-289.
67. Braydich-Stolle, L, In vitro cytotoxicity of nanoparticles in mammalian germline stem cells./ Braydich-Stolle, L, Hussain S, Schlager JJ, Hofmann // Toxicological Sciences.- 2005. V88(2). -P.412-419.
68. Brigger, I. Negative preclinical results with stealth nanospheres-encapsulated Doxorubicin in an orthotopic murine brain tumor model/I Brigger et al.//J Control Release. 2004. 100 (1).- P. 29-40.
69. Bummer, PM. Physical chemical considerations of lipid-based oral drug delivery: solid lipid nanoparticles. / P.M. Bummer et al.// Crit Rev Ther Drug Carrier System. 2004.- Vol.21.- P.3-20.
70. Sl.Canetti, G.Advances in techniques of testing mycobacterial drug sensitivity, and the use of sensitivity tests in tuberculosis control programmes. /Canetti G. et al.// Bull. W.H.O. -Vol.41.- P.21-43.
71. Cao, S.X. Quantitative analysis of sparfloxacin injection by high performance liquid chromatography. /S.X. Cao et al.// Se Pu 2001. - Vol. 19(5). - P.454-456.
72. Chawla, J.S. Biodegradable poly(s-caprolactone) nanoparticlesfor tumor targeted delivery of tamoxifen. / J.S. Chawla et al.//Int. J. of Pharm., 2002.- v. 249.-P. 127-138.
73. Chen, HWTitanium dioxide nanoparticles induce emphysema-like lung injury in mice. / H.W.T. Chen et al.//The FASEB Journal. 2006. - V20(13). -P.2393-2395.
74. Choi S.H., Park T.G. G-CSF loadedbiodegradable PLGA nanoparticles prepared by single oil-in-water emulsion method. //Int J Pharm. 2006. - Vol. 311(1-2).-P.223-228.
75. Chung, Y-C The surface modification of silver nanoparticles by phosphoryl disulfides for improved biocompatibility and intracellular uptake./ Chung, Y-C, Chen I-H, Chen C-J. // Biomaterials.- 2008. -V 29(12). P. 1807-1816.
76. Cohen, S. Microparticulate Systems for the Delivery of Proteins and Vaccines. /New York: Marcel Dekker. 1996. - P. 1-49.
77. Curtis ,J. Nanotechnology and nanotoxicology: a primer for clinicians/ Curtis J et al. //. Toxicological Reviews. 2006. - V25(4). - P.245-260.
78. Damge, C. Nanocapsules as carriers for oral peptide delivery. /C. Damage et al.//J. Controlled Release.- I990.-Vol. 13(2-3).-P.233-239.
79. Dembri A. Targeting of 3-azido 3-deoxythymidine (AZT)-loaded poly(isohexylcyanoacrylate) nanospheres to the gastrointestinal mucosa and associated lymphoid tissues./A. Dembri et al. //Pharm. Res.- 2001.- Vol. 18(4). -P. 467-473.
80. Deng M. Effects of in vitro degradation on properties of poly(D,L-lactide-co-glycolide) pertinent to its biological performance/M. Deng, K.E. Uhrich// J. Mater. Sei.—Mater. Med.-2002.-Vol. 13.-P. 1091-1096.
81. Donaldson, K. Nanotoxicology./ Donaldson, K. et al. // Occupational and Environmental Medicine. 2004. - Vol.61(9). - P.727-728.
82. Duchene D. Cyclodextrin-coated nanoparticles. /Duchene d//Adv Drug Delivery Rev. 2000-V.47. - P.58-81.
83. Dutt, M. Sustained release of isoniazid from a single injectable dose of poly (DL-lactide-co-glycolide) microparticles as a therapeutic approach towards tuberculosis./M.Dutt, D.Khuller// Int J Antimicrob Agents. 2001.- V.17(2). -P. 115-22.
84. Fuminori I. Factor affecting the loading efficiency of water-soluble drugs in PLGA microspheres./ I.Fuminori et al. // Colloids and Surfaces B> 2008«. -Vol 61. — P.25-29.
85. Bravo-Osuna, I. Mucoadhesion mechanism of chitosan and thiolatedchitosan-poly(isobutyl cyanoacrylate) core-shell nanoparticles/ I. Bravo-Osina* et al:.// Biomaterials. 2007. - P. 2233-2243.
86. Ito, A. Medical application of fimctionalized magnetic nanoparticles./ Ito,' Av Shinkai M, Honda H, Kobayashi T. // Journal of Bioscience and Bioengineering. -2005. -V100(l). P. 1-11.
87. Garnett, MC Nanomedicines and nanotoxicology: some physiological principles/ Garnett MC, Kallinteri P//. Occupational Medicine/ 2006. -V56(5). -P.307-311.
88. Gaspar, M.M. Therapeutic efficacy of liposomal rifabutin in a Mycobacterium avium model of infection. Antimicrob Agents Chemother. 2000.- V.44(9). -P.2424-30.
89. Gelperina S. The potential adventages of nanoparticle drug delivery systems in chemotherapy of tuberculosis. /S. Gelperina et al.// American journal of respiratory and critical care medicine. — 2005. Vol. 172. - P.1487-1490.
90. Hussain, SM, The interaction of manganese nanoparticles with PC-12 cells induces dopamine depletion./ Hussain SM et al. // Toxicological Sciences. -2006.-V92(2). -pp.456—463.
91. Kabanov, A.V. Pluronic® block, copolymers: novel functional molecules for gene therapy./ A.V. Kabanov et: al.// Advanced Drug Delivery Reviews; — V.54. 2002. -P.223-233. .
92. Krishnadas, A. Interactions: of: VIP,; secretin; and: PAGAP(jl^38)^ with-phospholipids: a biological paradox revisited/ Krishnadas A, Onyuksel H, Rubinstein I//. Curr Pharm Des; -2003; V9(12); - P. 1005-12.
93. Labana, S. Chemolherapeutic activity against murine tuberculosis of once weekly administered drugs (isoniazid and rifampicin) encapsulated im liposomes- / Si.,Labana- et al.// Int. J Antimicrob Agents. 2002. - V.20. -P.301-4.
94. Langer, K. Preparation of avidin-labeled protein nanoparticles as carriers for biotynilated peptide nucleic acid (PNA)./K. Langer et al:.// Eur J Pharm Biopharm. -2000^ V.49. -P.303-307.
95. Lee; H.,Polymericnanoparticle composed of fatty acids and poly(ethylene glycol)as a drug carrier./ H. Lee et al.// Int. J. Pharm. 2003. - P.23-32.
96. Leemans, JG. Depletion of alveolar macrophages exerts protective effects in pulmonary tuberculosis in mice./ J.C. Leemans et al.//J Immunol. 2001.-V.166. — P.4604-11.
97. Li, YP . Stealth polycyanoacrylate nanoparticles as tumor necrosis factor-alpha carriers: pharmacokinetics and anti-tumor effects./Y.P. Li et ah.// Biol Pharm Bull. 2001V.24. - P.662-665.
98. Liang, H-D,. The role of ultrasound in molecular imaging/ Liang H-D, Blomley MJK//. British Journal of Radiology. 2003. -76(supplement 2). - P. 140-150.
99. Limbach LK,. Exposure of engineered nanoparticles, to human lung epithelial cells: influence of chemical composition and catalytic activity on oxidative stress./ Limbach LK et al. Environmental Science & Technology. -2007.-V41(l 1). -P.4T58-4163.
100. Luna-Herrera J., and Gangadharam P. Treatment of intracellular Mycobacterium avium complex infection by free and liposome-encapsulated Sparfloxacin./ J. Luna-Herrera et al.// Antimicrob Agents Chemother. 1996. - Vol.40(11). - P.2618-2621.■*
101. Mandal, U.,. A study to determine the pharmacokinetics of gatifloxacimfollowing a single oral dose. /Mandal; U.// J». Indian Med. Assoc. 2004.- Vol.f»102(9). P. 488-493.
102. Manin, OI',. Comparative toxicological evaluation of domestic golden alloys for soldering. / Manin, OIet al. // Stomatologiia: 2007. V86(l). -pp.64-67.
103. Mirsattari, SM Myoclonic status epilepticus following repeated" oral ingestion of colloidal' silver. / Mirsattari SM //Neurology.- 2004- V62(8). -pp-1408-1410.
104. Mishima K., Matsuyama K., Tanabe D., Yamauchi S. Microencapsulation of proteins by rapid expansion of super-critical solution with a nonsolvent.// AlChE J. 46. 2000. - P. 857-865.
105. Nanoparticles, nanostructures .& nanocomposites : topical meet, of the Europ. ceramic soc. St. Petersburg, 2004. - 216 pp;
106. NanbsystemGharacterization Tools in the Life Sciences. Weinheim: Wiley -VCH Verlag GmbH- & Co.KGaA/ -2006. -- (Nanotechnologies for the Life Scienccs; Vol.3). - 347 pp. . .
107. Neal Jonathan, C. Modification of the Copolymirs Poloxainer 407 and Poloxamine 908 can Affect the'Physical and Biological Properties of Surface Modified Nanospheres/ Nealr Jonathan* C' et al.//. Phamaceutical Research. -Vol l 5,N. 2. 2008. -P. 96-115.
108. Pandey, R Nanoparticle encapsulated antitubercular drugs as a potential oral drug delivery system against murine tuberculosis Tuberculosis/R. Pandey , A. Zahoor A, S. Sharma, GK Khuller //(Edinb).- 2003.- V.83(6). -P.373-378.
109. Pandey, R,. Subcutaneous nanoparticle-based antitubercular chemotherapy in an experimental model./ R. Pandey, GK Khuller //J Antimicrob Chemother. -2004.-V.54. P.266-268.
110. Paddle-Ledinek, JE,. Effect of different wound dressings on cell viability and proliferation./ Paddle-Ledinek JE, Nasa Z, Cleland HJ// Plastic and Reconstructive Surgery. -2006. -VI 17(supplement 7). -P. 110-118.
111. Peracchia, M.T. Stealth® PEGylated polycyanoacrylate nanoparticles for intravenous administration and splenic targeting./ M.T. Peracchia et al.// Journal of Controlled Release. -2008. -V.60. -P.121-128.
112. Peters, K. Preparation of a clofazimine nanosuspension for intravenous use and evaluation of its therapeutic efficacy in murine Mycobacterium avium infection./ K. Peters et al.// J. Antimicrobial Chemotherary.- 2000. V.45, P.77-83.
113. Pankhurst, QA. Applications of magnetic nanoparticles in biomedicine./ Pankhurst QA, Connolly J, Jones SK, Dobson J// Journal of Physics D.- 2003.-V36(13). -pp.167—181.
114. Phoenix C. Design of a Primitive Nanofactory/C. Phoenix// Journal, of Evolution and Technology. V. 13 - 2003.-P.45-53.
115. Pinto-Alphandary, H. Targeted delivery of antibiotics using liposomes and nanoparticles: research and applications./ H. Pinto-Alphandary, A. Andremont, P. Couvreur.// International Journal of Antimicrobial Agents. -2000. V. 13. -P. 155-168.
116. Pisanic, TR,. Nanotoxicity of iron oxide nanoparticle internalization in growing neurons. / Pisanic, TR //Biomaterials. -2007. V28(16). -P.-2572-2581.
117. Pistner, H. Poly(L-lactide) — a long-term degradation study invivo. Analytical characterization./ Pistner H., Bendix D.R., Muhling J., Reuther, J.F // Biomaterials. 2003. - Vol. 14. - P.291-298.
118. Quenelle, D.C. Treatment of tuberculosis using a combination of sustained-release rifampin-loaded" microspheres and oral dosing with isoniazid./ D.C. Quenelle et al.// Antimicrobial Agents and Chemoterapy.- 2001. V. 45. - P. 1637-1644.
119. Randolph, T.W. Submicron-sized biodegradable particles of poly(L-lacti<acid) via the gas antisolvent spray precipitation process./ Randolph T.W. Randolph A.D., Mebes M., Yeung S.// Biotech-nol. Prog. 9. 2003. - C. 429435.
120. Rodrigues J.S Novel core (polyester)-shell(polysaccharide) ~ nanoparticles: protein loading and surface modification with lectins./ Rodrigues J.S et al.// J.Controll. Rel. -2005. -V. 92. -P.103-112.
121. Rabinow,BE. Nanosuspensions- in drug delivery./ Rabinow,BE // Rev Drix; Discov. 2004. - V.3. - P. 785-796
122. Satish K. Nachaegari. Coprocessed Excipients for Solid Dosage Forms Satish K. Nachaegari, Arvind K. Bansal // Pharm. Technol. 2004. - P. 52-64.
123. Skidan, IN, Enhanced activity of rifampicin loaded with , polybut3^=--ZIL cyanoacrylate nanoparticles in relation to intracellularly localized bacteria
124. Skidan IN, Gel'perina SE, Severin SE, Guliaev AE //Antibiot Khimioter. -2003.- V.48(l). -P.23-26.
125. Seaton,A,. Nanoscience, nanotoxicology, and the need' to think small/
126. Seaton,A,. //ncet. 2005.-923-924.
127. Sham, JO. Formulation and characterization of spray-dried powdetzn rs containing nanoparticles for aerosol delivery to the lung./ J.O. Sham et al.// Iir^t J Pharm.- 2004. -V.-269.-P.457-467.
128. The Chemistry of nanomateriäls : synthesis, properties and? applications : in 2*volûmes / C. N. R. Rao, A. Müller, A. K. Cheetham Weinheim : Wiley-VCH, 2006. -25 p.
129. Tom J.W., Debenedetti P.G., Particle formation with super-critical fluids — a review.// J. Aerosol Sei. 22. 1991. - C. 555-584
130. Torchilin V.Pi,Drug targeting. European Journal of Pharmaceutical Sciences 11 Suppl. 2000.- P. 181 - 191. !
131. Uchegbu I. Polymers in Drug Delivery. CRC Taylor & Francis Group,1632006.- P. 70-78.
132. Vasir, JK. Targeted drug delivery in cancer therapy./ Vasir JK, Labhasetwar V// Technology in Cancer Research and Treatment. 2005.- V4(4). - P.363-374.
133. Verdun, C. Tissue distribution of doxorubicin associated with polyisohexylcyanoacrylate nanoparticles./C. Verdun et al.// Cancer Chemother. Pharmacol.- 1990. Vol.26(l).-P. 13-18.
134. Vinogradov S.V. Nanosized cationic hydrogels for drug delivery: preparation, properties and interactions with cells./ Vinogradov S.V. et al.// Advanced Drug Delivery Reviews. 2002. -Vol. 54. - P. 135-147.
135. Von Burkersroda F. Why degradable polymers undergo surface erosion or bulk erosion. / Von Burkersroda F., Schedl L., and Gopferich A. // Biomaterials. — 2002. -Vol. 23.-P. 4221-4231.
136. Warheit, DB Comparative pulmonary toxicity assessment of single-wall carbon nanotubes in rats/ Warheit, DB//. Toxicological Sciences.- 2004.-77(1).-pp. 117-125.
137. Watnasirichaikul, S. Effects of formulation variables on characteristics of poly(ethylcyanoacrylate) nanocapsules prepared prom w/o microemulsions./ Watnasirichaikul, S. et al.// International Journal of Pharmaceutics. 2002. — V.235. -P.237-244.
138. Wehrle, P.The influence of process parameters on the PLA nanoparticle size distribution evaluated by means of factorial design./ Wehrle P., Magenheim B., Benita S //J. Pharm. Biopharm. 2005. - V.41. - P. 19-26.
139. Williams, A. Evaluation of vaccines in the EU TB Vaccine Cluster using a guinea pig aerosol infection model of tuberculosis./ A. Williams et al.// Tuberculosis. -2005. Vol.85. -P.29-3 8.
140. Wright, JB,. Early healing events in a porcine model of contaminated wounds: effects of nanocrystalline silver on matrix metalloproteinases, cellapoptosis, and healing./ Wright, JB,. // Wound Repair and Regeneration. — 2002.-V. 10(3).-P. 141-151.
141. Winter, P.M. Endothelial alpha(v)beta3 integrin-targeted fumagillin nanoparticles inhibit angiogenesis in atherosclerosis./ P.M. Winter et al..// Arterioscler. Thromb. Vase. Biol.-2006. V 26. -P.2103-2109.
142. Williams, L. Nanotechnology Demystified/L. Williams, W. Adams// The McGraw-Hill Companies.- 2007. 343 p.
143. Wissing, S.A. Solid lipid nanoparticles for parenteral drug delivery./ Wissing S.A., Kayser O., Muller R.H. // Adv Drug Deliv Rev. 2004. -Vol.56.-P.1257-1272.
144. Zahoor, A Pharmacokinetic and pharmacodynamic behaviour of antitubercular drugs encapsulated in alginate nanoparticles at two doses./A Zahoot et al..//Int J Antimicrob Agents. 2006. - P.402-416.
145. Zambaux M.F. Influence of experimental parameters on the characteristics of poly(lactic acid) nanoparticles prepared by double emulsion method.// J. Control. Rel. -2008. V.50. - C. 31-40.