Автореферат и диссертация по медицине (14.00.14) на тему:Потеря гетерозиготности как маркер ранних генетических нарушений при канцерогенезе шейки матки
- Ученая степень
- кандидата медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.00.14
Оглавление диссертации Блиев, Александр Юрьевич :: 2005 :: Москва
ВВЕДЕНИЕ.
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ РАЗВИТИЯ ДИСПЛАЗИИ И РАКА ШЕЙКИ МАТКИ.
1.1. Эпидемиология и этиология рака шейки матки.
1.2. Этапы развития дисплазий и цервикальных карцином.
1.3. Нестабильность генома и явление потери гетерозиготности.
1.4. Генетическая гетерогенность в цервикальных дисплазиях и карциномах.
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
2.1. Клинические материалы.
2.2. Микродиссекция послойных срезов и выделение ДНК.
2.3. Тестирование клинических материалов на присутствие HPV16 и типов.
2.4. Определение потери гетерозиготности в ДНК из рака и дисплазий шейки матки при помощи ПЦР.
2.5. Электрофорез продуктов амплификации в денатурирующем полиакриламидном геле.
2.6. Выявление продуктов амплификации после электрофоретического
разделения методом серебрения.
2.7. Выявление продуктов амплификации после электрофоретического
разделения методом гибридизации с радиоактивно-меченным олигонуклеотидным зондом.
2.8. Определение инактивированных аллелей в гене андрогенового рецептора на Х-хромосоме.
2.9. Статистическая обработка данных.
Список использованных растворов.
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ.
3.1. Характеристика клинических материалов.
3.2. Определение и типирование папилломавируса в клинических материалах.
3.3. Определение потери гетерозиготности в микродиссецированных препаратах рака и дисплазий шейки матки.
A) Исследование потери гетерозиготности в препаратах ДНК, полученных в результате микродиссекции различных участков опухоли.
Б) Анализ потери гетерозиготности в ДНК из нормального эпителия шейки матки.
B) Сравнительный анализ потери гетерозиготности в ДНК из участков дисплазий, сопутствующих раку шейки матки. Изменение частоты LOH при прогрессии дисплазий и рака шейки матки.
Г) Анализ потери гетерозиготности в ДНК из дисплазий шейки матки.
Д) Сравнение результатов LOH в дисплазииях без рака и сопутствующих раку шейки матки.>.
Е) Изучение гетерогенности и клональности дисплазий и опухоли.
3.4. Исследование внутриопухолевой гетерогенности методом оценки х-хромосомной инактивации.
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
ВЫВОДЫ.
Введение диссертации по теме "Онкология", Блиев, Александр Юрьевич, автореферат
Злокачественные новообразования шейки матки представляют собой важную проблему здравоохранения. Среди онкологических заболеваний женщин рак шейки матки занимает второе место после рака молочной железы по заболеваемости и смертности. Так, ежегодно в мире диагностируется свыше полумиллиона случаев рака шейки матки, а более 300 ООО женщин от него погибают [WHO Press Release, 1996]. И, несмотря на устойчивую тенденцию по снижению смертности от рака шейки матки, которая особенно заметна в развитых странах Западной Европы и Северной Америки, проблема все еще стоит очень остро.
Успехов в борьбе с новообразованиями шейки матки удалось добиться благодаря значительному прорыву в понимании причин возникновения рака, основная часть которого пришлась на последнее десятилетие. В 1996 году эксперты Всемирной организации здравоохранения поставили точку в спорах о роли вирусов папиллом человека в канцерогенезе шейки матки: HPV признан этиологическим фактором рака шейки матки [WHO Press Release, 1996]. Впоследствии интенсивные исследования проблемы позволили ответить на многие вопросы. Изучены механизмы онкогенного действия вируса папиллом в эпителиальных клетках шейки матки, обнаружено явление нестабильности клеточного генома, индуцируемое вирусом, известны механизмы трансформирующего действия вирусных онкобелков. Новые факты незамедлительно получили практическое применение: благодаря введению современных методов скрининга рака шейки матки удалось уменьшить смертность и улучшить качество жизни больных. Вполне вероятно, что вскоре удастся снизить и заболеваемость путем вакцинации. Сегодня активно разрабатываются вакцины на основе вирусоподобных частиц-VLP (virus-like particles), а некоторые из них уже проходят клинические испытания.
На фоне явных успехов в изучении канцерогенеза шейки матки, многое до сих пор остается неясным. Главный нерешенный на сегодня вопрос - что кроме вируса папиллом человека играет критическую роль в возникновении заболевания? Очевидно, что вирусная инфекция сама по себе недостаточна для развития рака. Остаются малоизученными факторы, способствующие прогрессии рака.
Между тем, рак шейки матки - одно из немногих онкологических заболеваний, в котором удается четко провести границу между стадиями: дисплазиями и раком. Таким образом, рак шейки матки представляет уникальную модель изучения канцерогенеза в целом. А исследование взаимодействия вируса и клетки-хозяина представляет интерес с точки зрения биологии. Все вышеизложенное дает основания говорить об актуальности изучения канцерогенеза шейки матки, а саму проблему позволяет считать общебиологической.
Стоит отметить, что большинство современных исследований ведутся на образцах рака шейки матки, то есть анализируются изменения уже свершившиеся; тогда как исследование предраковых состояний может дать представление о динамике процесса. На наш взгляд, именно на диспластические процессы в эпителии шейки матки, предшествующие инвазивному росту, стоит обратить особое внимание. Поэтому мы решили построить данную работу на изучении, в основном, образцов предрака и рака ранних стадий.
Метод анализа потери гетерозиготности является простым и эффективным средством поиска участков генома, потенциально содержащих гены-супрессоры опухолевого роста. Проведенные на образцах рака шейки матки исследования обнаружили высокую частоту потери гетерозиготности в ряде хромосомных локусов. Изучение частоты аллельных делеций на ранних этапах канцерогенеза позволит определить, насколько в действительности важны повреждения участков генома, локализованные ранее методом LOH. Сам же метод, являясь скрининговым, обеспечивает относительную простоту и удобство анализа, но, к сожалению, не дает возможности делать выводы о механизмах и причинно-следственных связях таких потерь.
В работе нами были использованы клинические материалы, полученные от 54 больных плоскоклеточным раком и 14 больных дисплазией шейки матки. В работе над биоптатами использовалась методика микродиссекции, позволяющая получать по возможности однородные образцы тканей (т. е. исключает контаминацию опухолевого образца нормальными клетками и наоборот).
Цель работы заключалась в анализе генетических нарушений хромосомы 6 в дисплазиях и карциномах шейки матки ранних стадий.
В соответствии с выбранной целью были поставлены следующие задачи:
1) собрать образцы биопсий дисплазий и карцином шейки матки ранних стадий;
2) провести множественную микродиссекцию со срезов биопсий и выделить ДНК из фокусов опухоли, дисплазий и морфологически нормальной ткани от каждой больной;
3) определить тип вируса папиллом человека в полученных образцах ДНК из дисплазий и рака шейки матки;
4) исследовать потерю гетерозиготности на хромосоме 6 в ДНК из микродиссецированных фокусов дисплазии и рака шейки матки, полученных от каждой больной;
5) провести анализ генетической гетерогенности в цервикальных дисплазиях и раке по характеру потери гетерозиготности, на основании которого методом оценки профиля X - хромосомной инактивации исследовать клональность дисплазии и опухоли шейки матки.
Изучение нестабильности генома на этапах предрака и рака шейки матки, исследование гетерогенности генетических нарушений между фокусами дисплазии и карциномы позволит лучше понять такие фундаментальные аспекты канцерогенеза как ранние этапы развития опухоли, клональность возникновения дисплазии и опухоли. Результаты таких исследований могут также иметь применение в клинической практике: выявленные генетические нарушения могут оказаться маркерами прогрессии и неблагоприятного развития заболевания на стадии предрака.
Заключение диссертационного исследования на тему "Потеря гетерозиготности как маркер ранних генетических нарушений при канцерогенезе шейки матки"
Выводы.
1. Впервые в результате микродиссекции биоптатов от каждой больной получены образцы всех имеющихся поражений шейки матки, в том числе дисплазии разной степени тяжести и плоскоклеточного рака шейки матки (87% - 1 стадии FIGO).
2. Анализ ДНК из этих образцов обнаружил геном HPV 16 и 18 типов у 71% и 14,3% больных с цервикальными дисплазиями (CIN I-III) и в 79,6% и 16,7% больных раком шейки матки, соответственно. В фокусах рака шейки матки и фокусах сопутствующих ему дисплазий выявлялся один и тот же тип HPV.
3. Анализ потери гетерозиготности с пятью микросателлитными маркерами (D6S344, D6S276, D6S273, D6S291, ESR) на хромосоме 6 обнаружил потерю гетерозиготности в 78,5% дисплазий шейки матки и у 73,8% больных раком шейки матки.
4. Показано, что высокая частота потери гетерозиготности (до 50%) в районе локализации генов главного комплекса гистосовместимости (МНС, 6р22-21.2) характерна для умеренных дисплазий (CIN II).
5. Аллельные делеции в локусе 6р22-21.2 в большей степени характерны для дисплазий, сопутствующих раку шейки матки. Обнаружение этих нарушений в дисплазиях может указывать на вероятность прогрессии, а маркеры D6S276 и D6S291 могут рассматриваться как молекулярные маркеры прогрессии.
6. Методами Х-хромосомной инактивации и потери гетерозиготности по маркеру D6S273 выявлена возможность существования двух независимых опухолевых клонов у больной раком шейки матки.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2005 года, Блиев, Александр Юрьевич
1. Заридзе Д. Г. Эпидемиология и этиология злокачественных новообразований. «Канцерогенез». Москва, изд-во «Научный мир», 2000.
2. Киселев Ф. Л. Гены стабилизации ДНК и канцерогенез. Молекулярная биология, 1998, том 32, № 2, с. 197 205.
3. Киселев Ф. Л., Мазуренко Н. Н., Волгарева Г. М., Киселева Н. П. Взаимодействие вирусных и клеточных генов в опухолях шейки матки. Молекулярная биология, 2004, том 38, № 2, с. 1 9.
4. Козаченко В. П. Рак шейки матки. Современная онкология, 2000, том 2, №2, с. 40-44.
5. Aaltonen LA, Peltomaki Р, Leach FS, Sistonen P, Pylkkanen L, Mecklin JP, Jen J, Hamilton SR, Peterson GM, Kinzler KW and Vogelstein B. Clues to the pathogenesis of familial colorectal cancer. Science 260: 812 816 (1993).
6. Anceschi MM, Falcinelli M, Pieretti M and Cosmi EV. Multiply primer pairs polymerase chain reaction for the detection of human papillomavirus types. J. Virol. Methods 28: 59 66 (1990).
7. Arends MJ, Buckley CH, Wells M. Aetiology, pathogenesis, and pathology of cervical neoplasia. J. Clin. Pathol. 51 (2): 96 103 (1998).
8. Ashrafi GH, Tsirimonaki E, Marchetti B, O'Brien PM, Sibett GJ, Andrew L, Campo MS. Down-regulation of MHC class I by papillomavirus E5 oncoproteins. Oncogene 21: 248 259 (2002).
9. Baisse B, Bouzourene H, Saraga EP, Bosman FT and Benhattar J. Intratumor genetic heterogeneity in advanced human colorectal adenocarcinoma. Int. J. Cancer 93; 346 352 (2001).
10. Bescow AH, Josefsson AM, Gyllenstein UB. HLA class II alleles associated with infection by HPV 16 in cervical cancer in situ. Int. J. Cancer 93: 817 822 (2001).
11. Bethwaite PB, Koreth J, Herrington CS, McGee JO. Loss of heterozygosity occurs at the D11S29 locus on chromosome 11q23 in invasive cervical carcinoma. Br. J. Carncer 71 (4): 814 818 (1995).
12. Bosch FX, Manos MM, Munoz N, Sherman M, Jansen AM, Peto J, Schiffman MH, Moreno V, Kurman R, Shah KV. Prevalence of human papillomavirus in cervical cancer: a worldwide perspective. J. Natl. Cancer Inst. 87 (11): 796 802 (1995).
13. Boyuer S, Wazer D, Band V. E7 protein papillomavirus-16 induces degradation of retinoblastoma protein through the ubiquitin-proteasome pathway. Cancer Res. 56: 4620 4624 (1996).
14. Brehm A, Nielsen SJ, Miska EA, McCance DJ, Reid JL, Bannister AJ, Kouzarides T. The E7 oncoprotein associates with Mi2 and histone deacetylase activity to promote cell growth. EMBO J. 18: 2449 2458 (1999).
15. Browning MJ, Krausa P, Rowan A, Hill AB, Bicknell DC, Bodmer JG and Bodmer WF. Loss of human leukocyte antigen expression on colorectal tumor cell lines: implications for anti-tumor immunity and immunotherapy. J. Immunother. 14: 163-8 (1993).
16. Carmody MW, Jones M, Tarraza H, Vary CP. Use of the polymerase chain reaction to specifically amplify integrated HPV-16 DNA by virtue of its linkage to interspersed repetitive DNA. Mol. Cell. Probes 10: 107 -16(1996).
17. Castellsague X, Bosch FX, Munoz N. Environmental co-factors in HPV carcinogenesis. Virus Res. 89 (2): 191 -9 (2002).
18. Cavenee WK, Dryja TP, Phillips RA, Benedict WF, Godbout R, Gallie BL, Murphree AL, Strong LC, White RL. Expression of recessive alleles by chromosomal mechanisms in retinoblastoma. Nature. 305 (5937): 779-84 (1983).
19. Cheung TH, Hung Chung TK, Poon CS, Hampton GM, Wang VW,
20. Wong YF. Allelic loss on chromosome 1 is associated with tumor progression of cervical carcinoma. Cancer 86 (7): 1294 1298 (1999).
21. Chuaqui R, Silva M, Emmert-Buck M. Allelic deletion mapping on chromosome 6q and X chromosome inactivation clonality patterns in cervical intraepithelial neoplasia and invasive carcinoma. Gynecol. Oncol. 80: 364-371 (2001).
22. Clifford GM, Smith JS, Plummer M, Munoz N, Franceschi S. Human papillomavirus types in invasive cervical cancer worldwide: a metaanalysis. Br. J. Cancer. 88(1): 63 73 (2003).
23. Corden SA, Sant-Cassia LJ, Easton AJ and Morris AG. The integration of HPV 18 DNA in cervical carcinoma. Mol. Pathol. 52 (5): 275-282(1999).
24. Desaintes C, Demeret C. Controll of papillomavirus DNA replication and transcription. Seminars Cancer Biol. 7 (6): 339 347 (1996).
25. Dillner J, Geijersstam K, Elfgren J, Konya J, Sanjeevi CB, Wng Z, Wllin KL. Natural history of cervical cancer. EACR XV Proceedings Book, 75(1998).
26. Dyson N, Howley PM, Miinger К and Harlow E. The human papiIlomavirus-16 E7 oncoprotein is able to bind to the retinoblastomagene product. Science 243: 34 937 (1989).
27. Elhamidi A, Hamoudi RA, Kocjan G, Du MQ. Cervical intraepithelial neoplasia: prognosis by combined LOH analysis of multiple loci. Gynecol Oncol. 94 (3): 671 9 (2004).
28. Enomoto T, Fujita M, Inoue M, Tanizawa O, Nomura T, Shroyer KR. Analysis of clonality by amplification of short tandem repeats. Carcinomas of the female reproductive tract. Daign. Mol. Pathol. 3 (4): 292-297 (1994).
29. Enomoto T, Haba T, Fujita M, Hamada T, Yoshino K, Nakashima R, Wada H, Kurachi H, Wakasa K, Sakurai M, Murata Y and Shroyer KR. Clonal analysys of high-grade squamous intra-epithelial lesions of the uterine cervix. Int. J. Cancer 74: 339 344 (1997).
30. Evans MF, Koreth J, Bakkenist CJ, Herrington CS, McGee JO. Allelic deletion at 11q23.3-q25 is an early event in cervical neoplasia. Oncogene. 16 (19): 2557 64 (1998).
31. Ferrera A, Velema JP, Figueroa M, Bulnes R, Того LA, Claros JM, De Barahona O, Melchers WJ. Human papillomavirus infection, cervical dysplasia and invasive cervical cancer in Honduras: a case-control study. Int. J. Cancer. 82 (6): 799 803 (1999).
32. Gallo G, Bibbo M, Bagella L, Zamparelli A, Sanseverino F, Giovagnoli MR, Vecchione A, Giordano A. Study of viral integration of HPV-16 in young patients with LSIL. J. Clin. Pathol. 56: 532 536 (2003).
33. Garrido F, Ruiz-Cabello F, Cabrera T, Perez-Villar JJ, Lopez-Botet M, Duggan-Keen M et al. Implications for immunosurveillance of altered HLA class I phenotypes in human tumors. Immunol. Today. 18: 89 -95 (1997).
34. Griep AE, Nguyen MN, Rivera C. The interaction of HPV 16 E6 with PDZ domain containing proteins disrupts cell growth, junctional complexes and differentiation in vivo. 2003 "IGGEB DNA Tumor Virus Meetings" Proceedings book: 88.
35. Gross G, Pfister H. Role of human papillomavirus in penile cancer, penile intraepithelial squamous cell neoplasias and in genital warts. Med. Microbiol. Immunol. (Berl). Jun 28: Epub ahead of print (2003).
36. Guo Z, Wilander E, Sallstrom J and Ponten J. Deletion of chromosome 3p is an early event in malignant progression of cervical cancer. Anticancer Res. 18: 707 712 (1998).
37. Guo Z, Wu F, Asplund А, Ни X, Mazurenko N, Kisseljov F, Ponten J, Wilander E. Analysis of intratumoral heterogeneity of chromosome 3p deletions and genetic evidence of polyclonal origin of cervical squamous carcinoma. Mod. Pathol. 14: 54-61 (2001).
38. Gyapay G, Morissette J, Vignal A, Dib C, Fizames C, Millasseau P, Marc S, Bernardi G, Lathrop M and Weissenbach J. The 1993-94 Genethon human genetic linkage map. Nat. Genet. 7 (2 Spec. No.): 246-339 (1994).
39. Haber JE. DNA recombination: the replication connection. Trends Biochem. Sci. 24: 271-275 (1999).
40. Hadzopoulou-Cladaras M, Lavrentiadou SN, Zannis VI, Kardassis D. Transactivation of the ApoCIII promoter by ATF-2 and repression by members of the Jun family. Biochemistry 37 (40): 14078 87 (1998).
41. Harima Y, Harima K, Sawada S, Tanaka Y, Arita S and Ohnishi T. Loss of heterozygosity on chromosome 6p21.2 as a potential marker for reccurence after radiotherapy of human cervical cancer. Clin. Cancer Res. 6: 1079 1085 (2000).
42. Helland A, Borresen-Dale AL, Peltomaki P, Hektoen M, Kristensen GB, Nesland JM, de la Chapelle A and Lothe RA. Microsatelliteinstability in cervical and endometrial carcinomas. Int. J. Cancer 70: 499-501 (1997).
43. Hicklin DJ, Wang Z, Arienti F, Rivoltini L, Parmiani G, Ferrone S. p2-micrpglobulin mutations, HLA class I antigen loss, and tumor progression in melanoma. J. Clin. Invest. 101: 2720-2729 (1998).
44. Hidalgo A, Schewe C, Petersen S, Salcedo M, Gariglio P, Schluns K, Dietel M, Petersen I. Human papilloma virus status and chromosomal imbalances in primary cervical carcinomas and tumor cell lines. Eur. J. Cancer 36: 542 548 (2000).
45. Hilders CG, Morgano Munoz IM, Nooyen Y, Fleuren GJ. Altered HLA expression by metastatic cervical carcinoma cells as a factor in impaired immune surveillance. Gynceol. Oncol. 57: 366 375 (1995).
46. Ни X, Pang T, Mazurenko N, Kisseljov F, Ponten J and Nister M. HPV 16 E6 variations in invasive cervical squamous cell carcinoma and cancer in situ from Russian patients. Br. J. Cancer 84 (6): 791 795 (2001).
47. Huettner PC, Gerhard DS, Li L, Gersell DJ, Dunnigan K, Kamarasova T, Rader JS. Loss of heterozygosity in clinical stage IB cervical carcinoma: relationship with clinical and histopathologic features. Hum. Pathol. 29 (4): 364 70 (1998).
48. Hwang ES, Nottoli T and Dimaio D. The HPV 16 E5 protein: expression, detection, and stable complex formation with transmembrane protein in COS cells. Virology 211: 227-233 (1995).
49. Ikeda H, Lethe B, Lehmann F, van Baren N, Baurain JF, de Smet C, Chambost H, Vitalle M, Moretta A, Boon T, Coulie PG.
50. Jackson S, Harwood C, Thomas M, Banks L and Storey A. Role of Bak in UV-induced apoptosis in skin cancer and abrogation by HPV E6 proteins. Genes Dev. 14: 3065 3073 (2000).
51. Kaelbling M, Burk RD, Atkin NB, Johnson AB, Klinger HP. Loss of heterozygosity on chromosome 17p and mutant p53 in HPV-negative cervical carcinomas. Lancet. 340 (8812): 140 2 (1992).
52. Karayianni E, Magnanini C, Orphanos V, Negrini M, Maniatis GM, Spathas GH, Barbanti-Brodano G, Morelli C. Transcriptional map of chromosome region 6q12-21. Cytogenet. Cell Genet. 86: 263 2661999).
53. Kataja V, Syrjanen S, Mantyjarvi R, Yliskoski M, Saarikoski S, Syrjanen K. Prognostic factors in cervical human papillomavirus infections. Sex. Transm. Dis. 19 (3): 154-60 (1992).
54. Kersemaekers AM, van de Vijver MJ, Fleuren GJ. Comparison of the genetic alterations in two epithelial collision tumors of the uterine cervix. A report of two cases. Int. J. Gynecol. Pathol. 19 (3): 225-2302000).
55. Kersemaekers AMF, Hermans J, Fleuren GJ, van de Vijver MJ. Loss of heterozygosity for defined regions on chromosomes 3, 11 and 17 in carcinomas of the uterine cervix. Br. J. Cancer. 77 (2): 192 -200 (1998b).
56. Kersemaekers AMF, Kenter G, Hermans J, Fleuren GJ and van de Vijver MJ. Allelic loss and prognosis in carcinoma of the uterinecervix. Int. J. Cancer 79: 411 -417 (1998a).
57. Kersemaekers AMF, van de Vijver MJ, Kenter GG and Fleuren GJ. Genetic alterations during the progression of squamous cell carcinomas of the uterine cervix. Genes Chromosom. Cancer 26: 346 -354 (1999).
58. Khare S, Pater MM, Tang SC, Pater A. Effect of glucocorticoid hormones on viral genes expression, growth, and dysplastic differentiation in HPV 16 immortalized ectocervical cells. Exp. Cell Res. 232: 353-60 (1997).
59. Kiviat N. Natural history of cervical neoplasia: overview and update. Am. J. Obstet. Gynecol. 175: 1099-1104 (1996).
60. Kiyono T, Foster SA, Koop Jl, McDougall JK, Galloway DA and Klingelhutz AJ. Both Rb/p16INK4a inactivation and telomerase activity are required to immortalize human epithelial cells. Nature 396: 84 -88 (1998).
61. Klimov E, Vinokourova S, Moisjak E, Rakhmanaliev E, Kobseva V, Laimins L, Kisseljov F and Sulimova G. Human papilloma viruses and cervical tumours: mapping of integration sites and analysis of adjacent cellular sequences. BMC Cancer 2: 24 (2002).
62. Knudson AG. Genetics of human cancer. Annu. Rev. Genet. 20: 231-251 (1986).
63. Kobayashi A, Miaskowski C, Wallhagen M, Smith-McCune K. Recent developments in understanding the immune response to human papilloma virus infection and cervical neoplasia. Oncol. Nurs. Forum 27:643-51 (2000).
64. Koopman LA, Corver WE, van der Slik AR, Cornelisse CJ, Fleuren GJ. Multiple genetic alterations cause frequent and heterogenous human histocompatability leukocyte antigen class I loss in cervical cancer. J. Exp. Med. 191 (6): 961 -76 (2000).
65. Koopman LA, Mulder A, Corver WE, Anholts JD, Giphart MJ, Claas FH et al. HLA class I phenotype and genotype alterations in cervical carcinomas and derivative cell lines. Tissue Antigens 51: 623 36 (1998).
66. Koopman LA, van der Slik AR, Giphart MJ, Fleuren GJ. Human leukocyte antigen class I gene mutations in cervical cancer. J. Natl. Cancer Inst. 91 (19): 1669-77 (1999).
67. Krul EJT, Kersemaekers AMF, Zomerdijk-Nooyen YA, Cornelisse CJ, Peters LAW, Fleuren GJ. Different profiles of allelic losses in cervical carcinoma cases in Surinam and the Netherlands. Cancer. 86 (6): 997 1003 (1999).
68. Lacorte JM, Beigneux A, Parant M, Chambaz J. Repression of apoC-III gene expression by TNFalpha involves C/EBPdelta/NF-IL6beta via an IL-1 independent pathway. FEBS Lett. 415 (2): 217-20 (1997).
69. Larson AA, Kern S, Sommers RL, Yokota J, Cavenee WK and Hampton GM. Analysis of replication error (RER+) phenotypes incervical carcinoma. Cancer Res. 56: 1426- 1431 (1996).
70. Larson AA, Liao SY, Stanbridge EJ, Cavenee WK and Hampton GM. Genetic alterations accumulate during cervical tumorogenesis and indicate a common origin for multifocal lesions. Cancer Res. 57: 4171 -4176 (1997).
71. Lee JH, Kang YS, Koh JW, Park SY, Kim BG, Lee ED, Lee KH, Park KB, Seo YL. p53 gene mutation is rare in human cervical carcinomas with positive HPV sequences. Int. J. Gynecol. Cancer 4 (6): 371 378 (1994).
72. Levine AJ. p53, the cellular gatekeeper for growth and division. Cell. 88 (3): 323-31 (1997).
73. Liu J, Zabarovska VI, Braga E, Alimov A, Klein G, Zabarovsky ER. Loss of heterozygosity in tumor cells requires re-evaluation: the data arebiased by the size-dependent dijerential sensitivity of allele detection. FEBS Letters 462: 121 -128 (1999).
74. Lowy DR and Howley PM: Papillomaviruses. In: Virology. Eds: Knipe DM and Howley PM, Lippincott Williams & Wilkins: Philadelphia 2, 2231 -2264 (2001).
75. Luxton J, Mant C, Greenwood B, Derias N, Nath R, Shepherd P and Cason J. HPV 16 E6 oncogene variants in women with cervical intraepithelial neoplasia. J. Med. Virol. 60: 337 341 (2000).
76. Magnusson PK, Sparen P and Gyllenstein UB. Genetic link to cervical tumours. Nature 400: 29 30 (1999).
77. Marincola FM, Shamamian P, Alexander RB, Gnarra JR, Turetskaya RL. Nedospasov SA, Simonis ТВ, Taubenberger JK, Yannelli J, Mixon A et al. Loss of HLA haplotype and В locus down-regulation in melanoma cell lines. J. Immunol. 153: 1225 1237 (1994).
78. Mazurenko N, Attaleb M, Gritsko T, Semjonova L, Pavlova L, Sakharova O, Kisseljov F. High resolution mapping of chromosome 6 deletions in cervical cancer. Oncol. Rep. 6 (4): 859 63 (1999).
79. Mitra AB, Rao PH and Pratap M. I(5p) and del(6q) are nonrandom abnoramalities in carcinoma cervix uteri. Cancer Genet. Cytogenet. 76:56-58 (1994).
80. Mitra AB. Genetic deletion and human papillomavirus infection in cervical cancer: loss of heterozygosity sites at 3p and 5p are important genetic events. Int. J. Cancer 72: 322 324 (1999).
81. Mittal R, Pater A, Pater MM. Multiplehuman papillomaviruses type 16 glucocorticoid response elements functional for transformation, transient expression and DNA protein interactions. J. Virol. 67: 5656-9 (1999).
82. Moodley M, Moodley J, Chetty R, Herrington CS. The role of steroid contraceptive hormones in the pathogenesis of invasive cervical cancer: a review. Int. J. Gynecol. Cancer. 13 (2): 103-10 (2003).
83. Moretta A, Biassoni R, Bottino C, Pende D, Vitale M, Poggi A, Mingari MC, Moretta L. Major histocompatability complex class I specific receptors on human natural killer and T lymphocytes. Immunol. Rev. 155: 105-117 (1997).
84. Mugica-Van Herckenrode C, Rodriguez JA, Iriarte-Campo V,
85. Carracedo A, Barros F. Definition of a region of loss of heterozygosity at chromosome 11 q in cervical carcinoma. Diagn. Mol. Pathol. 8 (2): 92-96 (1999).
86. Mullokandov MR, Kholodilov NG, Atkin NB, Burk RD, Johnson AB and Klinger HP. Genomic alterations in cervical carcinoma: losses of chromosome heterozygosity and human papilloma virus tumor status. Cancer Res. 56: 197 205 (1996).
87. Munoz N, Bosch FX, de Sanjose S, Herrero R, Castellsague X, Shah KV, Snijders PJ, Meijer CJ. Epidemiologic classification of human papillomavirus types associated with cervical cancer. N. Engl. J. Med. 348 (6): 518-27 (2003).
88. Nishimura M, Furumoto H, Kato T, Kamada M, Aono T. Microsatellite instability is a late event in the cancerogenesis of uterine cervical cancer. Gynecol. Oncol. 79 (2): 201 -206 (2000).
89. Nonogaki H, Fujii S, Konishi I, Nanby Y, Ozaki Y, Ishikawa Y, Mori T. Estrogen receptor localization in normal and neoplastic epithelium of the uterine cervix. Cancer. 66: 2620 2627 (1990).
90. Oda H, Kumar S and Howley PM. Regulation of the Src family tyrosine kinase Blk through E6AP mediated ubiquitination. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96: 9557 - 9562 (1999).
91. Pang T, Ни X, Mazurenko N, Kisseljov F and Ponten J. Multiple variants of HPV 16 E6 gene in cervical invasive squamous cell carcinoma. Anticancer Res. 22: 1011 1016 (2002).
92. Park SY, Kang YS, Kim BG, Lee SH, Lee ED, Lee KH, Park KB, Lee JH. Loss of heterozygosity on the short arm of chromosome 17 in uterine cervical carcinomas. Cancer Genet. Cytogenet. 79 (1): 74 78 (1995).
93. Park TW, Richart RM, Sun XW, Wright TC Jr. Association between human papillomavirus type and clonal status of cervical squamous intraepithelial lesions. J. Natl. Cancer Inst. 88 (6): 317-318 (1996).
94. Peitsaro P, Johanson В and Syrjanen S. Integrated human papillomavirus type 16 is frequently found in cervical cancer precursors as demonstrated by a novel quantitative real-time PCR technique. J. Clin. Microbiol. 40 (3): 886 891 (2002).
95. Pfister H. Chapter 8: Human papillomavirus and skin cancer.
96. J. Natl. Cancer Inst. Monogr. 31: 52 6 (2003).
97. Pinto AP, Crum CP. Natural history of cervical neoplasia: defining progression and its consequence. Clin. Obstet. Gynecol. 43: 352 362 (2000).
98. Pirisi L, Yasumoto S, Fellery M, Doninger JK and Funk JO et al.1.hibition of CDK activity and PCNA dependent DNA replication by p21 is blocked by interaction with the HPV-16 E7 protein. Genes Dev. 11: 2090-2100 (1997).
99. Poigne'e M, Backsch C, Beer K, Jansen L, Wagenbach N, Stanbridge EJ, Kirchmayr R, Schneider A and Durst M. Evidence for a putative senescence gene locus within the chromosomal region 10p14-p151. Cancer Res. 61: 7118 7121 (2001).
100. Rader JS, Gerhard DS, O'Sullivan MJ, Li Y, Li L, Liapis H and Huettner PC. Cervical intraepithelial neoplasia III shows frequent allelic loss in 3p and 6p. Genes Chromosom. Cancer 22: 57 65 (1998).
101. Rader JS, Kamarasova T, Huettner PC, Li L, Li Y and Gerhard DS. Allelotyping of all chromosomal arms in invasive cervical cancer. Oncogene 13: 2737 2741 (1996).
102. Rader JS, Li Y, Huettner PC, Xu Z and Gerhard DS. Cervical cancer suppressor gene is within I cM on 6p23. Genes Chromosom. Cancer 27: 373 379 (2000).
103. Reddy VG, Khanna N, Jain SK, Das ВС, Singh N. Telomerase-A molecular marker for cervical cancer screening. Int. J. Gynecol. Cancer. 11: 100- 106 (2001).
104. Rha SH, Dong SM, Jen J, Nicol T and Sidransky D. Molecular detection of cervical intraepithelial neoplasia and cervical carcinoma by microsatellite analysis of Papanicolaou smears. Int. J. Cancer 93: 424-429 (2001).
105. Ritchie JM, Smith EM, Summersgill KF, Hoffman HT, Wang D, Klussmann JP, Turek LP, Haugen TH. Human papillomavirus infection as a prognostic factor in carcinomas of the oral cavity and oropharynx. Int. J. Cancer 104 (3): 336 44 (2003).
106. Rodriguez JA, Barros F, Carracedo A, Mugica-van Herckenrode A. Low incidence of microsatellite instability in patients with cervicalcarcinomas. Diagn Mol Pathol. 7 (5): 276-282 (1998).
107. Roman A, Toussaint-Smith E. Expression of Human Papillomavirus type 16 E6 and E7 oncoproteins affects the profile of angiogenic factors secreted from human foreskin kerationcytes. 2003 "IGGEB DNA Tumor Virus Meetings" Proceedings book: 50.
108. Roman A, Zhang B. Activation of E2F-responsive promoters by E7 is significally augmented in certain growth conditions. 2003 "IGGEB DNA Tumor Virus Meetings" Proceedings book: 72.
109. Samoylova EV, Shaikhaiev GO, Petrov SV, Kisseljova NP, Kisseljov FL. HPV infection in cervical-cancer cases in Russia. Int. J. Cancer. 61 (3): 337-341 (1995).
110. Scheffner M, Werness B, Huibregste J, Levine AJ, Howley PM. The E6 oncoprotein encoded by human papillomavirus types 16 and 18 promotes the degradation of p53. Cell 63: 1129-1136 (1990).
111. Schwarz E, Freese UK, Gissmann L, Mayer W, Roeggenbuck В and zur Hausen H. Structure and transcription of human papillomavirus type 18 and 16 sequences in cervical carcinoma cells. Nature 314: 111 -114(1985).
112. Shevach EM, Korty PE. Ly-6: a multigene family in search of a function. Immunol. Today. 10: 196 (1989).
113. Smith Dl, Huang H, Wang L. Common fragile sites and cancer. Inter. J. Oncol. 12: 187-196 (1998).
114. Srivastan ES, Misra ВС, Venugoplan M and Wylczynski SP. Loss of heterozygosity for alleles on chromosome 11 in cervical carcinoma. Amer. J. Genet. 49: 868 877 (1991).
115. Stanley MA. Human papillomavirus vaccines. Curr. Opin. Mol. Ther. 4 (1): 15-22 (2002).
116. Stoler MH, Rhodes CR, Whitbeck A, Wolinsky SM, Chow LT, Broker TR. Human papillomavirus type 16 and 18 gene expression in cervical neoplasias. Hum. Pathol. 23: 117 128 (1992).
117. Takahashi T, Habuchi T, Kakehi Y, Mitsumori К, Akao T, Terachi T and Yoshida O. Clonal and chronological genetic analysis of multifocal cancers of the bladder and upper urinary tract. Cancer Res. 58: 5835-5841 (1998).
118. Takata M, Morita R and Takehara K. Clonal heterogeneity in sporadic melanomas as revealed by loss-of-heterozygosity analysis. Int. J. Cancer 85: 492 497 (2000).
119. Thiagalingam S, Laken S, Willson JK, Markowitz SD, Kinzler KW, Vogelstein B, Lengauer C. Mechanisms underlying losses of heterozygosity in human colorectal cancers. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98 (5): 2698 2702 (2001).
120. Thibodeau SN, Bren G and Schaid D. Microsatellite instability in cancer of the proximal colon. Science 260: 816-819 (1993).
121. Thierry F, Yaniv M. The BPV1-E2 trans acting protein can be either an activator or a repressor of the HPV 18 regulatory regio,n. EMBO J. 611.: 3391 -3397 (1987).
122. Thorland EC, Myers SL, Persing DH, et al. Human papillomavirus type 16 integrations in cervical tumors frequently occur in common fragile sites. Cancer Res. 60: 5916 5921 (2000).
123. Torres MJ, Ruiz-Cabello F, Skoudy A, Berrozpe G, Jimenez P, Serrano A, Real FX, Garrido F. Loss of an HLA haplotype in pancreas cancer tissue and its corresponding tumor derived cell line. Tissue Antigens. 47: 372 381 (1996).
124. Trowsdale J. "Both man & bird & beast": comparative organization of MHC genes. Immunogenetics 41: 1 17 (1995).
125. Veldman T, Horikawa I, Barrett JC and Schlegel R. Transcriptional activation of the telomerase hTERT gene by human papillomavirus type 16 E6 oncoprotein. J. Virol. 75: 4467-4472 (2001).
126. Veldman T, Liu x, Yan h, Schlegel R. The HPV E6 and Мус proteins form a complex in vivo and cooperatively activate the hTERT promoter. 2003 "IGGEB DNA Tumor Virus Meetings" Proceedings book: 91.
127. Wang Z, Seliger B, Mike N, Momburg F, Knuth A, Ferrone S. Molecular analysis of the HLA-A2 antigen loss by melanoma cells SK
128. MEL-29.1.22 and SK-MEL-29.1.29. Cancer Res. 58: 2149 2157 (1998).
129. WHO Press Release "Cervical cancer: experts confirmed virus a major cause, new detection technologies available". WHO/47, July 3, 1996.
130. Wisman GB, de Jong S, Meersma GJ, Helder MN, Hollema H, de Vries EG, Keith WN, van der Zee AG. Telomerase in (pre)neoplastic cervical disease. Hum. Pathol. 31: 1304-1312 (2000).
131. Xi LF, Koutsky LA, Galloway DA, Kuypers J, Hughes JP, Wheeler CM, Holmes KK, Kiviat NB. Genomic variation of human papillomavirus type 16 and risk for high grade cervical intraepithelial neoplasia. J. Nat. Cancer Inst. 89: 796 802 (1997).
132. Xi LF, Koutsky LA, Galloway DA, Kuypers J, Hughes JP, Wheeler CM, Holmes KK, Kiviat NB. Genomic variation of human papillomavirus type 16 and risk for high grade cervical intraepithelial neoplasia. Natl. Cancer Inst. 89 (11): 796-802 (1997).
133. Young LS, Bevan IS, Johnson MA, Blomfied PI, Bromidge T, Maitland NJ and Woodman CBJ. The polymerase chain reaction: a new epidemiological tool for investigating cervical human papillomavirus infection. Br. J. Med. 298: 14-18 (1988).
134. Zerfass-Thome K, Zwuschke W, Mannhardt B, Tindle R, Botz J and Jansen-Durr P. Inactivation of the CDK inhibitor p27KIP1 by the human papillomavirus type 16 E7 oncoprotein. Oncogene 13: 2323 -2330 (1996).
135. Zhang B, Spandau DF and Roman AS. E5 protein of human papillomavirus type 16 protects human foreskin keratinocytes from UV B-irradiation-induced apoptosis. J. Virol. 76: 220 231 (2002).
136. Zhou Y, Kato H, Asanoma K, Kondo H, Arima T, Kato K, Matsuda T, Wake N. Identification of FOXC1 as a TGF-beta 1 responsive gene and its involvement in negative regulation of cell growth. Genomics 80 (5): 465 472 (2002).