Автореферат и диссертация по медицине (14.03.03) на тему:ПОИСК И ИЗУЧЕНИЕ НОВЫХ МЕДИКАМЕНТОЗНЫХ КОМПОЗИЦИЙ ДЛЯ МЕСТНОЙ АНЕСТЕЗИИ

На правах рукописи

Каде Мурат Азаматович

ПОИСК И ИЗУЧЕНИЕ НОВЫХ МЕДИКАМЕНТОЗНЫХ КОМПОЗИЦИЙ ДЛЯ МЕСТНОЙ АНЕСТЕЗИИ

14.03.03 - патологическая физиология 14.03.06 - фармакология, клиническая фармакология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

00460625У

Краснодар, 2010

004606259

На правах рукописи

Каде Мурат Азаматович

ПОИСК И ИЗУЧЕНИЕ НОВЫХ МЕДИКАМЕНТОЗНЫХ КОМПОЗИЦИЙДЛЯ МЕСТНОЙ АНЕСТЕЗИИ

14.03.03 - патологическая физиология 14.03.06 - фармакология, клиническая фармакология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидатамедицинских наук

Краснодар, 2010

Работа выполнена на кафедре общей и клинической патофизиологии государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования "Кубанский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (ГОУ ВПО КГМУ Росздрава)

Ведущая организация: государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Ростовский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (г. Ростов-на-Дону).

Защита состоится « й- Ъ> iyi-Ckjg-2010 г. вiX> часов на заседании диссертационного совета Д 208.038.02 при ГОУ ВПО КГМУ Росздрава(350063, г. Краснодар, ул. Седина, 4, тел. (861) 262-73-75.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО КГМУ Росздрава.

Автореферат разослан «'!£»■> UX^Up, 2010 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Научныеруководители:

кандидат медицинских наук, доцент Петровский Александр Николаевич;

Официальные оппоненты:

член-корреспондент РАМН, доктор медицинских наук, профессор Галенко-Ярошевский Павел Александрович доктор медицинских наук Мясиикова Виктория Владимировна;

доктор медицинских наук, профессор Чередник Ирина Леонидовна

Д 208.038.02 профессор

Скорикова Л.А.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы. Болевой синдром (БС) в настоящее время рассматривается как одна из наиболее значимых проблем, имеющих не только медицинское значение, но и неблагоприятные социально-экономические последствия. БС вынуждает людей обращаться за медицинской помощью, снижает трудоспособность, может привести к инвалидизации и даже явиться причиной летального исхода (М.Л.Ку-кушкин, Н.К. Хитров, 2004; В.А.Волчков и соавт., 2006; Ecleston, Crombez, 2005; Gheldofetal., 2005; VonKorffetal., 2005; Farouk, 2008; Fossetal., 2009).

Нередко имеют место клинические ситуации, требующие быстрого оказания патогенетически обоснованной противоболевой помощи при остром и хроническом БС. Лечение больных, страдающих интенсивными БС, становится прерогативой анестезиологов и реаниматологов с обязательным привлечением специалистов других направлений: клинических фармакологов, неврологов, хирургов, онкологов и т. д. (И.А.Ибатуллин и соавт., 2003; А.А.Бунятян, В.М.Мизиков, 2006;В.А.Волчков и соавт., 2006; Mulroy, 2003; Barashetal., 2004; Cateral, Mackie, 2006).

Основным методом предупреждения и купирования БС является применение болеутоляющих лекарственных средств (ЛС), в том числе местных анестетиков (MA) (Г.Я.Шварц, 2004; В.А.Волчков и соавт., 2006; Ю.Д.Игнатов и соавт., 2010; Fo-rastiereetal., 2008; Takshimaetal., 2009). MA, как известно, ограничивая вход ноцицеп-тивной импульсации в ЦНС, могут не только предотвращать сенситизацию ноцицеп-тивных нейронов, но и способствовать нормализации микроциркуляциив зоне повреждения, уменьшению воспалительной реакции и улучшению обмена веществ (Г.И.Степанюк, 1989; В.Л.Попков, 2006; А.П.Галенко-Ярошевский, 2009; Umbrai-netal., 2008, 2009; Yietal., 2009).

К настоящему времени, благодаря высоким темпам развития фармакологии, практическая медицина обогатилась высокоэффективными ЛС, предназначенными для местной анестезии [терминальной, инфильтрационной, проводниковой, спинномозговой (субарахноидальной) и эпидуральной] (М.Д.Машковский, 2006; А.А.Бунятян, В.М.Мизиков, 2006; Mulroy, 2003; Calvey, Williams, 2007). Однако как традиционные (новокаин, дикаин, лидокаини др.), так и современные (бупивакаин, мепива-каин, ропивакаин и др.) MA не всегда индуцируют достаточной глубины и продол-

жительности обезболивающее действие, нередко проявляют системную токсичность, вызывают побочные явления (В.Н.Цибуляк, Г.Н.Цибуляк, 1994; С.Ф.Грицук, 1998; В.В.Сергеев, 2007; Steinbrook, 1998; Huangetal., 1998; Cateral, Mackie, 2006; Takh-chidietal., 2010).

Для увеличения глубины и продолжительности специфического действия MA и снижения их системной токсичности преимущественно используют адреноагонисты - адреналин, норадреналин, мезатон, клонидин и другие (Н.Т.Прянишникова, Н.А.Шаров, 1967; И.В.Марусов, В.Е.Иванов, 1998; Н.Б.Перерва, 2003; О.В.Гуленко, 2005; З.Ш.Тлишева, 2007; Barashetal., 2004;Cateral, Mackie, 2006; Calvey, Williams, 2007). Однако, согласно исследованиям С.Ф.Грицук (1998), Mulroy (2003), Barash et al. (2004), отмеченные адъюванты могут индуцировать повышение артериального давления, нарушения сердечного ритма, гипергликемию и другие побочные явления, что вызывает сдержанность в их сочетанном использовании с MA.

Известно, что отечественный препарат мексиприм, или мексидол, является современным высокоэффективным антиоксидантом и антигипоксантом прямого действия (Т.А.Воронина и соавт., 1997; П.А.Галенко-Ярошевский и соавт., 2000, 2001, 2009; С.Б.Середенин и соавт., 2005; Р.И.Бгуашева, 2007; В.Л.Попков и соавт., 2007). Он ингибирует свободнорадикальные процессы и перекисное окисление липидов, изменяет физико-химические свойства клеточной мембраны, увеличивает ее текучесть, повышает содержание полярных фракций липидов (фосфотидилсерина, фос-фотидилинозита и др.), вязкость липидного слоя (В.И.Инчина и соавт., 1996, 2000; А.В.Зорькина, 1997; Н.А.Волкова, 2003).

Недавно установлено, что сочетание мексиприма с лидокаином влечет за собой снижение острой токсичности (в опытах на мышах) последнего. Композиции лидо-каина с мексипримом в условиях обезболивания поверхностным (кролики), инфиль-трационным (морские свинки), проводниковым (крысы) и, особенно, спинномозговым (крысы) методами по анестезирующей активности превосходят лидокаин, взятый отдельно (Т.Н.Футорянская и соавт., 2007).

Исходя из вышеизложенного, представлялось важным провести исследование местнообезболивающей (терминальной, инфильтрационной, проводниковой, спинномозговой и эпидуральной) активности и острой токсичности производных имида-

¡о[1,2-а]бензимидазола РУ-353, РУ-720, РУ-1203, обладающих высокой местноане-•.тезирующей активностью (В.В.Пономарев, 1998, 2004; Г.А.Голубдова, 2009; А.П. "аленко-Ярошевский, 2009), и бупивакаина в сочетании с мексипримом.

Цель работы. Повысить местноанестезирующее действие и снизить острую оксичность производных имидазо[1,2-а]бензимидазола РУ-353, РУ-720, РУ-1203 и ¡упивакаина путем сочетания их с мексипримом; провести углубленное доклиниче-кое изучение наиболее активных композиций.

Основные задачи исследования. В соответствии с заданной целью предусмат-ивалось решение следующих задач:

1. Провести скрининговые исследования соединений РУ-353, РУ-720, РУ-1203 и упивакаина в сочетании с мексипримом и физиологическим раствором (ФР) в усло-иях терминального, инфильтрационного и проводникового обезболивания.

2. Изучить в сравнительном аспекте местноанестезирующую (терминальную, нфильтрационную, проводниковую, спинномозговую и эпидуральную) активность

острую токсичность наиболее перспективных композиций (НПК) - местный ане-гетик + мексиприм.

3. Исследовать влияние НПК на трансмембранные ионные токи изолированных гйронов.

4. Изучить влияние субарахноидального введения НПК на морфофункциональ-эе состояние нейронов спинного мозга и спинальных ганглиев.

Научная новизна. Впервые показано, что сочетание РУ-353 + мексиприм по жсичности (ЛД50) сопоставимо с бупивакаин + мексиприм; оба сочетания менее 1ксичны, чем РУ-353 + ФР и бупивакаин + ФР.

В условиях инфильтрационной анестезии соединение РУ-353 в сочетании с мек-[примом и ФР по местнообезболивающей активности и широте терапевтического !Йствия (ШТД) более значимо, чем бупивакаин, взятый в аналогичных сочетаниях.

При проводниковой анестезии композиции РУ-353 и бупивакаина с мексипри->м и ФР, в которых анестетики использованы в 0,25% концентрации, по продолжи-льности полной анестезии (1111 А) и общей длительности обезболивания (ОДО) со-ставимы. С увеличением концентрации РУ-353 и бупивакаина до 0,5% ППА под иянием композиции РУ-353 + мексиприм более значима, чем при использовании

сочетания бупивакаин + мексиприм; по этому показателю РУ-353 + ФР превосходит бупивакаин + ФР. По ОДО композиция РУ-353 + мексиприм более значима, чем бупивакаин + мексиприм; РУ-353 и бупивакаин в сочетании с ФР сопоставимы.

В условиях спинномозговой анестезии РУ-353, взятое в 0,25 и 0,5% концентрациях и дозе 5 мг/кг, в сочетании с мексипримом и ФР более значимо, чем аналогичные сочетания бупивакаина. Мексиприм, инъецированный субарахноидально (в сочетании с РУ-353 и бупивакаином) и внутривенно (на фоне спинномозговой анестезии, вызываемой бупивакаином), уменьшает продолжительность моторного паралича (МП) задних конечностей, вызываемого РУ-353 и, в большей мере, бупивакаином.

При эпидуральной анестезии РУ-353 в сочетании с мексипримом и ФР по ППА и ОДО превосходит бупивакаин + мексиприм и бупивакаин + ФР.

Мексиприм в условиях сочетания с соединением РУ-353 усиливает блокирование последним натриевых и кальциевых токов и ослабляет подавление калиевых медленных токов; при комбинировании с бупивакаином повышает блокирование им натриевых токов и уменьшает подавление кальциевых и калиевых медленных токов.

При субарахноидальном введении соединение РУ-353 (0,25%, 5 мг/кг) и бупивакаин^,25%, 5 мг/кг) в сочетании с мексипримом (1,25%, 25 мг/кг) не индуцируют значимых изменений показателей (количество ядрышек в ядре, объемная плотность субстанции Нисля и оптическая плотность хроматина) белоксинтезирующей системы нейронов спинного мозга и спинальных ганглиев.

Научно-практическая ценность работы. Материалы исследований обосновывают целесообразность использования в клинических условиях (после соответствующего разрешения Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения и социального развития) композиции бупивакаин + мексиприм при инфильтрацион-ной, проводниковой, спинномозговой и эпидуральной анестезии.

Композиция РУ-353+мексиприм может быть рекомендована для дальнейшего доклинического изученияс целью создания местноанестезирующего средства для инфильтрационной, проводниковой, спинномозговой и эпидуральной анестезии.

Результаты сравнительных исследований местноанестезирующей активности РУ-353 и бупивакаина в сочетании с мексипримом включены в программу обучения студентов на кафедрах патофизиологии и фармакологии Кубанского (КГМУ) и Рос-

"овского государственных медицинских университетов.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Композиции РУ-353 + мексиприм и бупивакаин +мексиприм при однократ-юм подкожном введении крысам менее токсичны, чем эти местноанестезирующие ющества в сочетании с ФР.

2. Соединение РУ-353 и бупивакаин в сочетании с мексипримом обладают бо-1ее значимой местноанестезирующей активностью и ШТД, чем эти местноанестези-ующие вещества в сочетании с ФР.

3. В оптимальных местноанестезирующих концентрациях РУ-353 и бупивакаин :ри комбинировании с мексипримом (1,25%) не оказывают раздражающего действия а ткани.

4. Мексиприм в условиях сочетания с РУ-353 усиливает блокирование последим натриевых и кальциевых токов и ослабляет подавление калиевых медленных оков изолированных нейронов; при комбинировании с бупивакаином повышает локирование им натриевых токов и уменьшает подавление кальциевых и калиевых едленных токов.

5. Соединение РУ-353 и бупивакаин в сочетании с мексипримом (1,25%, 25 г/кг) не вызывают значимых изменений показателей белоксинтезирующей системы ейронов спинного мозга и спинальных ганглиев.

Апробация работы. Материалы и положения диссертационной работы допоены и обсуждены на совместных заседаниях (14.10.2008, 22.09.2009 и 15.12.2009 \) Краснодарских краевых отделений Российских научных обществ патофизиоло->в и фармакологов с приглашением представителей кафедр общей и клинической дологической физиологии, фармакологии и общей хирургии КГМУ и Адыгейского илиала КГМУ; межкафедральной конференции (27.04.2010 г.), посвященной 90-:тию со дня основания КГМУ.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано бстатей в издании, ре->мендованном ВАК.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 176 страницах компью-рного текста и состоит из введения (7 стр.), обзора литературы (39 стр.), описания сериалов и методов исследований (10 стр.), 3 глав с изложением проведенных ис-

следований (70 стр.), обсуждения результатов исследования (9 стр.), выводов (; стр.), научно-практических рекомендаций (1 стр.) и списка литературы (28 стр.).

Библиография включает 270 литературных источников, из которых 193 отечест венных и 77 иностранных авторов. Работа проиллюстрирована 25 рисунками и li таблицами.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ I. Материалы и методы исследования

Изучение местнообезболивающих свойств сочетаний РУ-353 (дигидрохлорид 1-диэтиламиноэтил-2-фенилимидазо[1,2-а]бензимидазола), РУ-720 (дигидрохлорид 1-диэтиламинопропил-2-фенилимидазо[1,2-а]бензимидазола), РУ-1203 {дигидрохлорид 1 -(3-пирролидинопропил)-2-(4-фторфенил)имидазо[ 1,2-а]бензимидазола}, синтезированных в НИИ физической и органической химии Южного федерального университета кандидатом химических наук старшим научным сотрудником В.А.Аниси-мовой под руководством академика РАН В.И.Минкина, и бупивакаина[1-бутил-М-(2,6-диметилфенил)-2-пиперидинкарбоксамид, гидрохлорид, моногидрат; AstraS6-dertalor, Sweden] с мексипримом (3-окси-6-метил-2-этилпиридина сукцинат; ООО ФАРМАСОФТ, г. Москва) проводилось в сравнении с этими веществами, растворенными в ФР.

Опыты проведены на 265 нелинейных мышах-самцах, 216 крысах-самцах, 138 морских свинках и 76 кроликах обоего пола массой 0,018 - 0,022, 0,175 - 0,240, 0,345 - 0,360 и 2,5 - 3,2 кг соответственно, содержащихся в виварии согласно принятым требованиям (П.П.Гамбарян, Н.М.Дукельская, 1955; И.П.Западнюк и соавт., 1983; Н.Н.Каркищенко, 2004). Кроме того, выполнено 86 опытов (измерений) на изолированных нейронах окологлоточного кольца брюхоногого моллюска - прудовика большого (Lymnaea stagnalis).

Острую токсичность НПК исследовали в экспериментах на крысах при подкожном введении; наблюдение за животными вели в течение 2-х недель (Е.В.Арзамасцев и соавт., 2000); определяли среднюю летальную дозу - ЛД50, вызывающую 50% гибели животных.

Поверхностную анестезию композиций изучали в опытах на роговице глаза кролика по методу Ренье (Н.Т.Прянишникова, Н.А.Шаров, 1967; Л.Н.Сернов, В.В.

Гацура, 2ООО; В.В.Пономарев, 2004).

Меетнораздражающее действие композиций исследовали в экспериментах на глазах кроликов по методу Бейнсаг (1966).

Инфильтрационную анестезию композиций изучали в опытах на морских свинках-самцах (ВШЬпг^, \Vajda, 1945; Н.Т.Прянишникова, Н.А.Шаров, 1967; Л.Н.Сер-нов, В.В.Гацура, 2000;В.В.Пономарев, 2004), при этом определяли концентрации, вызывающие 50% уровень анестезии (ЭК50), а также ШТД (ЛД5<>/ЭК5о).

Проводниковую анестезию композиций исследовали в экспериментах на нервах хвостов мышей и крыс по тестам "клипсирование хвоста" и'ЧаН-ГПск"соответствс1шо (Ю.Д.Игнатов и соавт., 2005).

Спинномозговую (субарахноидальную) анестезию НПК изучали в опытах на крысах-самцах по тестуЧаП-Шск" (Ю.Д.Игнатов и соавт., 2005).

Эпидуральную анестезию НПК исследовали в экспериментах на кроликах-самцах (В.И.Сачков и соавт.,1986).

Влияние НПК и веществ, их составляющих, на трансмембранные ионные токи изучали1 по методу, описанному П.Г.Костюком, О.А.Крышталем (1981),С.С.Бутако-вой, Ю.Д.Игнатовым (1998) и А.И.Вислобоковым и соавт. (2010). При этом использовали неидентифицированные нейроны брюхоногого моллюска.

Влияние соединения НПКна морфометрические характеристики нейронов серого вещества спинного мозга и нейронов спинальных ганглиев исследовали в опытах на крысах по методам, описанным Б.Ромейсом (1954), В.В.Куприяновым (1965), Р. Лилли (1965), П.Гарсия, Р.Ирио (1969), Г.Г.Автандиловым (1990).

Статистическую обработку результатов исследований проводили по М.Л.Бе-ленькому (1963),Н.Н.Самойлову (1970) и Р.Х.Хафизьяновой и соавт. (2006). Определение ЛД50, ЭК50 и ШТД (ЛД50/ЭК50) осуществляли по В.Б.Прозоровскому (1962). При этом использовали программное обеспечение для ЭВМ 1ВМ РС ХТ, разработанное на кафедре фармакологии КГМУ.

'Эксперименты проведены в Институте фармакологии им. академика А.В.Вальдма-на(директор - академик РАМН Ю.Д.Игнатов) при Санкт-Петербургском государственном медицинском университете им. академика И.П.Павлова совместно с доктором биологических наук А.И.Вис-лобоковым, за что выражаем благодарность.

II. Результаты исследований и их обсуждение

Изучение местноанестезирующих и местнораздражающих свойств РУ-353, РУ-720, РУ-1203 и бупивакаина с мексипримом и физиологическим раствором. Скри-нинговые исследования избранных композиций в условиях терминального, ин-фильтрационного и проводникового обезболивания. При терминальной анестезии в опытах на роговице глаз кроликов композиции РУ-353 (1%), РУ-720 (1%), РУ-1203 (1%) и бупивакаина (0,5%) с мексипримом (1%) имеют в 2,9, 3,2, 2,8 и 3,9 раза менее значимые индексы Ренье, чем эти МА в сочетании с ФР (124,0, 386,0, 402,8 и 135,9 против 358,0, 1254,0, 1136,0 и 528,0 соответственно). Следует отметить, что ни одно из исследованных сочетаний не оказывает раздражающего действия на конъюнктиву и роговицу глаза.

В условиях инфильтрационной анестезии в экспериментах на коже морских свинок композиции РУ-353, РУ-720, РУ-1203 и бупивакаина (все МА в 0,0156% концентрациях) с мексипримом (1%) проявляют более выраженное обезболивающее действие, чем эти МА в сочетании с ФР, при этом индексы Бюльбринг и Уэйд для композиций МА+мексиприм равны 27,4, 18,4, 19,5 и 10,8, а для сочетаний МА + ФР-10,8, 7,2, 15,4 и 6,5, т. е. первые композиции в 2,5, 2,6, 1,3 и 1,7 раза соответственно превосходят вторые.

При проводниковой анестезии в опытах на нервах хвостов мышей композиции РУ-353, РУ-720, РУ-1203 и бупивакаина с мексипримом (1%) по обезболивающей активности в 1,6, 1,5, 1,4 и 1,5 раза более значимы, чем сочетания этих МА с ФР: ЭД50(в перерасчете на МА) первых композиций составляют 0,60, 0,81, 0,78 и 0,92 мг/мл, вторых-0,98, 1,18, 1,06 и 1,38 мг/мл соответственно.

Согласно данным В.В.Пономарева (1998, 2004), Г.А.Голубцовой (2009), А.П.Га-ленко-Ярошевского (2009), среди изученных производных имидазо[1,2-а]бензими-дазола (459 веществ), включая соединения РУ-353, РУ-720 и РУ-1203, наибольшего внимания в плане практического использования заслуживает РУ-353, которое по ме-стнообезболивающей активности при инфильтрационной, проводниковой, спинномозговой и эпидуральной анестезии превосходит бупивакаин.

Исходя из вышеизложенного, а также результатов проведенных нами скринин-говых исследований местноанестезирующих свойств РУ-353, РУ-720, РУ-1203 и бу-

пивакаина в сочетании с мексипримом, для углубленного доклинического изучения местноанестезирующей активности и острой токсичности были избраны композиции РУ-353 и бупивакаинас мексипримом.

Углубленные исследования местноанестезирующей (терминальной, инфильтра-ционной, проводниковой, спинномозговой и эпидуралыюй) активности и острой токсичности РУ-353 и бупивакаина в сочетании с мексипримом. Острая токсичность в экспериментах на крысах. ЛД50 сочетания РУ-353 (0,5%-ное на ФР в определенных дозах подкожно) + мексиприм (5%-ныйофицинальный раствор в дозе 50 мг/кг внутривенно) и РУ-353 (0,5%-ное на ФР в определенных дозах подкожно) + ФР равны 86,6 (83,6 + 90,0) и 58,9 (53,3 ^ 64,5) мг/кг соответственно, т. е. сочетание РУ-353 + мексиприм в 1,50 раза менее токсично, чем РУ-353, взятое отдельно.

При терминальной анестезии в опытах на роговице глаз кроликов индексы Ре-нье при использовании композиций РУ-353 (1%) + мексиприм (1,25, 2,5 и 5%) соответственно равны 208,0 ± 9,8, 74,0 + 5,8 и 32,0 ±1,6, а при применении РУ-353 (1%) + ФР - 326,0 ± 12,7, т. е. обезболивающее действие РУ-353 (1%) в сочетании с мексипримом, взятым в возрастающих концентрациях, прогрессивно снижается. Следует отметить, что композиции РУ-353 (1%) + мексиприм (2,5 и 5%) проявляют раздражающее действие, характеризующееся гиперемией конъюнктивы и края век в течение 10-15 мин; РУ-353 (1%) + ФР не оказывает раздражающего действия.

В условиях инфильтрационной анестезии в опытах на морских свинках минимальная эффективная концентрация (по РУ-353) для сочетания РУ-353 + мексиприм (1,25%) равна 0,0078%, а для РУ-353 + ФР - 0,0156%, при этом индексы Бюльбринг и Уэйд для первого сочетания составляют 8,7 ± 0,7, для второго - 11,4 ± 1,1.С повышением концентрации РУ-353 в сочетании с мексипримом (1,25%) до 0,0156 и 0,0312% индексы Бюльбринг и Уэйд составляют 26,6 ± 0,9 и 36,0, а в сочетании с ФР до 0,0312, 0,0625 и 0,0125% - 22,4 ± 0,9, 34,2 ± 0,5 и 36,0. Следует отметить, что первое сочетание индуцирует полный обезболивающий эффект (100%-ную анестезию в течение 30 мин, индекс которой равен 36,0) в значительно меньшей (в 4 раза) концентрации, чем второе. Соединение РУ-353 как в сочетании с мексипримом, так и ФР ни в одной из исследованных концентраций не вызывает гиперемии или отека кожи, т. е. не проявляет сколько-нибудь значимого раздражающего действия.

Для выяснения, во сколько раз композиция РУ-353 + мексиприм (1,25%) превосходит РУ-353 + ФР по активности, были рассчитаны (по РУ-353) их средние эффективные концентрации (ЭК50) и терапевтические индексы (ЛД50/ЭК50), или широта терапевтического действия (ШТД). Оказалось, что при сопоставлении ЭК50 первая композиция в 1,30 раза более активна, чем вторая. При этом ШТД РУ-353 + мексиприм (1,25%) в 1,90 раза больше РУ-353 + ФР.

При проводниковой анестезии в опытах на нервах хвостов крыс по времени наступления анестезии (НА) и началу полного обезболивания (НПО), которые составили 1 - 2 и 5 мин соответственно, сочетания РУ-353 (0,25%) + мексиприм (1,25%) и РУ-353 (0,25%) + ФР практически не различаются, тогда как по продолжительности полной анестезии (ППА) и общей длительности обезболивания (ОДО) первое сочетание (137,0 ± 10,7 и 175,0 ± 7,5 мин; р < 0,01 и р < 0,001) в 2,28 и 1,79 раза соответственно превосходит второе (60,0 +12,9 и 98,0 ± 11,8 мин).

С увеличением концентрации РУ-353 до 0,5% композиция РУ-353 + мексиприм (1,25%) по НА и НПО (как и в предыдущей серии опытов 1 - 2 и 5 мин соответственно) также практически не отличается от контрольного сочетания, а по ППА и ОДО первая композиция (171,0 + 8,6 и 211,0 ± 9,7 мин; р < 0,001 в обоих случаях) в 1,60 и 1,60 раза более значима, чем вторая (107,0 ± 6,4 и 132,0 ± 11,8 мин).

В условиях спинномозговой анестезии в экспериментах на крысахсочетание РУ-353 (0,25%, 5 мг/кг) + мексиприм (1,25%, 25 мг/кг), как и РУ-353 (0,25%, 5 мг/кг) + ФР, вызывает полное обезболивающее действие через 1 - 2 мин после субарахнои-дального введения. При использовании первой композиции ППА и ОДО равны 144,0 ± 1,6 (р < 0,001) и 182,0 + 1,5 (р < 0,001) мин, второй - 72,9 ± 3,78 и 106,4 + 2,27 мин, т. е. по этим показателям сочетание РУ-353 с мексипримом в 1,98 и 1,71 раза соответственно превосходит контрольную композицию.

Продолжительность МП задних конечностей, вызываемого сочетанием РУ-353 (0,25%, 5 мг/кг) + мексиприм (1,25%, 25 мг/кг), равна 23,2 ± 2,36 мин (р > 0,05), а индуцируемого РУ-353 (0,25%, 5 мг/кг) + ФР - 18,6 + 1,07 мин, т. е. практически сопоставима. Однако при использовании первой композиции длительность МП составляет 12,7% от ОДО, а второй - 17,5%, т. е. имеет место тенденция к уменьшению его продолжительности.

Увеличение в исследованных сочетаниях концентрации РУ-353 до 0,5% (при дозе 5 мг/кг) приводит к возрастанию анестезирующего эффекта (время наступления полного обезболивания, как и предыдущей серии опытов, составляет 1 - 2 мин). Так, ППА и ОДО при применении композиции РУ-353 (0,5 %, 5 мг/кг) + мексиприм (1,25%, 25 мг/кг) равны 185,0 ± 7,51 (р < 0,001) и 220,0 ± 4,30 (р < 0,001) мин, а в случаях использования РУ-353 (0,5 %, 5 мг/кг) + ФР - 89,0 ±2,15 и 123,0 ± 3,22 мин соответственно, т. е. в принятых условиях эксперимента первое сочетание также более значимо (в 2,08 и 1,79 раза соответственно), чем второе.

Что же касается продолжительности МП, то она под влиянием сочетания РУ-353 (0,5 %, 5 мг/кг) + мексиприм (1,25%, 25 мг/кг) составляет 58,2 ± 4,94 (р < 0,01) мин, а при использовании контрольной композиции - 37,0 ± 3,43 мин, т. е. в этом отношении первое сочетание в 1,60 раза превосходит второе. Однако РУ-353 (0,5 %, 5 мг/кг) + мексиприм (1,25%, 25 мг/кг) вызывает МП, продолжительность которого по отношению к ОДО равна 26,5%, а РУ-353 (0,5 %, 5 мг/кг) + ФР - 30,1%, т. е., как и в предыдущей серии опытов, первая композиция уменьшает длительность МП.

Важно отметить, что РУ-353 (0,25 и 0,5%; 5 мг/кг) как в сочетании с мексипри-мом (1,25%, 25 мг/кг), так и ФР через 1 - 2 мин после субарахноидалыюго введения вызывает в течение 5-7 мин угнетение дыхания.

Субарахноидальное введение мексиприма (1,25%, 25 мг/кг) вызывает спинномозговую анестезию через 1 - 2 мин. ППА и ОДО составляют 24,0 ± 2,65 и 42,0 ± 3,54 мин соответственно, при этом существенных изменений со стороны дыхания не отмечается; МП отсутствует.

При эпидуральной анестезии в опытах на кроликахсочетания РУ-353 (0,5 %, 1 мг/кг) + мексиприм (1,25%, 2,5 мг/кг) и РУ-353 (0,5 %, 1 мг/кг) + ФР вызывают НА и наступление полной анестезии через практически сопоставимые временные интервалы - 1,5 ± 0,2 и 1,4 ± 0,2 мин, 2,6 ± 0,2 и 2,5 ± 0,2 мин соответственно. ППА и ОДО под воздействием композиции РУ-353 (0,5 %, 1 мг/кг) + мексиприм (1,25%, 2,5 мг/кг) равны 145,0 + 4,3 и 278,0 ± 6,4 мин, тогда как при использовании РУ-353 (0,5%, 1 мг/кг) + ФР - 110,0 ± 3,2 и 215,0 ± 5,4 мин (р < 0,001 в обоих случаях), т. е . по этим показателям первая композиция в 1,32 и 1,29 раза более значима, чем вторая (рис. 1).

мин

Рис. 1. Временные параметры начала анестезии, наступления и окончания полного обезболивания, общей длительности анестезии при использовании сочетаний РУ-353 (0,5%, 1 мг/кг) с ФР (1) и мексипримом (1,25%, 2,5 мг/кг) (2) в условиях эпи-дурального обезболивания в опытах на кроликах.

Углубленное изучение местноанестезирующей (инфильтрационной, проводниковой, спинномозговой и эпидуральной) активности1 и острой токсичности бупива-каина в сочетании с мексипримом. При исследовании острой токсичности в экспериментах на крысах ЛД50 композиции бупивакаин (0,5%-ный официнальный раствор в определенных дозах подкожно) + мексиприм (5%-ный официнальный раствор в дозе 50 мг/кг внутривенно) равна 89,7 (83,6 96,3) мг/кг, а бупивакаина (0,5%-ный официнальный раствор в определенных дозах подкожно) - 62,8 (59,3 ■*■ 65,6) мг/кг, т. е. сочетание бупивакаин + мексиприм в 1,44 раза менее токсично, чем бупивакаин, взятый отдельно

В условиях инфильтрационной анестезии в опытах на коже морских свинок индексы Бюльбринг и Уэйд при концентрации бупивакаина, равной 0,0156%, в сочетании с мексипримом (1,25%) и ФР практически сопоставимы (8,7 ± 0,5 и 8,1 ± 0,9 соответственно; р > 0,05). При увеличении концентрации анестетика до 0,0312, 0,0625 и 0,125% индексы Бюльбринг и Уйэд для первого сочетания составляют 19,6 + 1,4 (р < 0,02), 34,7 ±0,5 (р< 0,001) и 36,0, тогда как для второго - 14,6 ± 1,1, 25,0 + 0,9 и 36,0 соответственно, т. е. предпоследние две концентрации бупивакаина в сочетании с мексипримом (1,25%), по сравнению с таковыми этого анестетика, приготовленного на ФР, приводят к повышению его местнообезболивающего действия. Обращает на себя внимание то, что бупивакаин, взятый в 0,25% концентрации, как в

'Изучение бупивакаина в сочетании с мексипримом в условиях терминальной анестезии не проводилось, так как для этого вида обезболивания он не предназначен (М.Д.Машковский, 2010).

сочетании с мексипримом, так и ФР вызывает полную (100%-ную) анестезию в течение всего периода исследования (30 мин), индекс Бюльбринг и Уэйд которой равен 36,0.

Бупивакаин в сочетании с мексипримом ни в одной из исследованных концентраций не вызывает покраснения или отека кожи, т. е. не оказывает раздражающего действия.

Сопоставление ЭК50 и ШТД исследованных композиций (по бупивакаину) показало, что сочетание бупивакаин + мексиприм (1,25%) как по первому, так и, особенно, второму показателю более значимо (в 1,4 и 2,0 раза соответственно), чем бупивакаин + ФР.

При проводниковой анестезии в экспериментах на нервах хвостов крыс композиции бупивакаин (0,25%) + мексиприм (1,25%) и бупивакаин (0,25%) + ФР вызывают НА и НПО через равнозначные временные интервалы, составляющие! - 2 и 5 мин соответственно. По ППА и ОДО первая композиция (129,0 ± 24,7 и 165,0 + 12,9 мин; р < 0,05 и р < 0,01) в 1,90 и 1,50 раза соответственно более значима, чем вторая (68,0 + 8,58 и 110,0 ±5,36 мин).

При повышении концентрации бупивакаина до 0,5% сочетание его с мексипримом (1,25%) по времени НА и НПО, составляющем, как и в предыдущей серии опытов, 1 - 2 и 5 мин соответственно, не отличается от такового бупивакаин (0,5%) + ФР, тогда как по ППА и ОДО первое сочетание (140,0 ±7,51 и 173,0 + 4,29 мин; р < 0,001 в обоих случаях) в 2,19 и 1,47 раза соответственно превосходит второе (64,0 + 10,7 и 118,0+ 4,30 мин).

В условиях исследования спинномозговой анестезии в опытах на крысах сочетание бупивакаин (0,25%, 5 мг/кг) + мексиприм (1,25%, 25 мг/кг) вызывает обезболивающий эффект спустя 1 - 2 мин после субарахноидального инъецирования. В случаях использования первой композиции ППА и ОДО составляют 62,0 ± 5,36 (р < 0,001) и 106,0 + 4,29 мин (р < 0,001), тогда как второй - 27,0 ± 3,22 и 69,0 ± 4,29 мин соответственно, т. е. по этим показателям бупивакаин в сочетании с мексипримом в 2,30 и 1,54 раза более значим, чем бупивакаин + ФР.

МП задних конечностей, возникающий вследствие спинномозговой анестезии, вызываемой композицией бупивакаин (0,25%, 5 мг/кг) + мексиприм (1,25, 25 мг/кг),

имеет место в течение 24,8 ± 3,22 мин (р < 0,05), а при использовании бупивакаина, приготовленного на ФР, - 15,2 ± 1,93 мин, т. е. продолжительность МП под влиянием первой композиции в 1,63 раза больше, чем второй. Однако при использовании бупивакаина в сочетании с мексипримом длительность МП составляет 23,4% от ОДО, а в случаях применения бупивакаин + ФР - 22,0%, т. е. наблюдается существенное нивелирование его продолжительности. Исходя га этого, представляло интерес исследовать (в отдельных сериях опытов) влияние внутривенного введения мек-сиприма (5% официнальный раствор, 50 мг/кг) на длительность МП и спинномозговой анестезии, индуцируемых сочетанием бупивакаин (0,25%, 5 мг/кг) + ФР. Оказалось, что в принятых условиях эксперимента (п = 7) мексиприм в 2,70 раза уменьшает продолжительность МП [5,6 ± 0,3 мин (р < 0,001) против 15,1 ± 1,36 мин в контроле], не проявляет существенного влияния на время (1-2 мин) НА, в 1,65 и 1,13 раза (тенденция) соответственно увеличивает ППА [47,1 ±1,51 мин (р < 0,001) против 28,6 ± 2,27 мин в контроле] и ОДО [81,4 ± 3,78 мин (р > 0,05) против 72,1 ± 3,02 мин в контроле]. Следует отметить, что продолжительность МП, вызванного бупи-вакаином (0,25%, 5 мг/кг), приготовленным на ФР, в сочетании с внутривенным введением мексиприма по отношению к ОДО составляет 6,9%, а при использовании отдельно взятого сочетания бупивакаин (0,25%, 5 мг/кг) + ФР - 20,9%, т. е. мексиприм в принятых условиях эксперимента существенно уменьшает длительность МП.

Установлено, что с увеличением концентрации бупивакаина до 0,5% (5 мг/кг) в сочетаниях с мексипримом (1,25%, 25 мг/кг) и ФР время НА (1-2 мин) при использовании как первого, так и второго сочетаний не претерпевает значимых изменений, тогда как ППА [107,0 + 7,51 мин (р < 0,001) против 54,0 ± 6,44 мин в контроле] и ОДО [147,0 ± 3,22 мин (р < 0,001) против 104,0 + 5,36 мин в контроле] существенно (в 1,98 и 1,41 раза соответственно) возрастают. При этом продолжительность МП задних конечностей в случаях использования сочетания бупивакаин (0,5%, 5 мг/кг) + мексиприм (1,25%, 25 мг/кг) составляет 37,5 ± 1,72 мин (р< 0,01), а в условиях применения бупивакаин (0,5%, 5 мг/кг) + ФР - 29,8 ± 1,29 мин, т. е. в отмеченном плане первое сочетание в 1,30 раза превосходит второе. По отношению к ОДО продолжительность МП под влиянием бупивакаин (0,5%, 5 мг/кг) + мексиприм(1,25%, 25 мг/кг) составляет 25,5%, а под воздействием бупивакаин (05%, 5 мг/кг) + ФР -

28,6%, т. е. имеет место тенденция к уменьшению продолжительности МП. Внутривенное введение мексиприма (5% официнальный раствор, 50 мг/кг) на фоне спинномозговой анестезии, вызванной сочетанием бупивакаин (0,5%, 5 мг/кг) + ФР, индуцирует статистически достоверное уменьшение (в 1,41 раза) продолжительности МП [22,4 ± 0,60 мин (р < 0,001) против 31,6 ± 0,91 мин в случаях использования только бупивакаин (0,5%, 5 мг/кг) + ФР]. При этом время НПА под влиянием как первого, так и второго сочетаний практически не изменяется (1-2 мин), а ЮТА [78,0 ± 1,51 мин (р< 0,001) против 56,0 ± 0,76 мин в контроле] и ОДО [114,0 ± 3,02 мин (р <0,01) против 102,0 ± 2,27 мин в контроле] в 1,39 и 1,12 раза соответственно увеличиваются. Обращает на себя внимание и то, что, как и в предыдущей серии опытов, продолжительность МП, индуцируемого бупивакаином (0,5%, 5 мг/кг), приготовленным на ФР, в сочетании с внутривенным введением мексиприма (5%, 50 мг/кг) по отношению к ОДО равна 19,6%, а при использовании только сочетания бупивакаин (0,5%, 5 мг/кг) + ФР - 31,0%, т. е. мексиприм и в этом случае значимо снижает длительность МП. Следует отметить, что бупивакаин (0,25 и 0,5%; 5 мг/кг) как в сочетании с мексипримом (1,25%, 25 мг/кг), так и с ФР спустя 1 - 2 мин после субарахнои-дального инъецирования вызывает кратковременное (5-7 мин) угнетение дыхания.

Представляло интерес исследовать центральное болеутоляющее действие отдельно взятого мексиприма (5%-ный официнальный раствор, 50 мг/кг) при внутривенном введении крысам. Оказалось, что в принятых условиях эксперимента (п = 5) препарат через 3-5 мин вызывает наступление полного обезболивающего эффекта (в тесте tail-flick), продолжительность которого составляет 50,0 ± 0,0 мин, а ОДО равна 78,0 ± 4,29 мин.

При эпидуральной анестезии в экспериментах на кроликах композиции бупивакаин (0,5%, 1 мг/кг) + мексиприм (1,25%, 2,5 мг/кг) и бупивакаин (0,5%, 1 мг/кг) + ФР вызывают НА и НПА через 1,6 ±0,2 и 1,5 ±0,2, 2,5 ± 0,2 и 2,4 ± 0,3 мин соответственно, т. е. по этим показателям существенных различий между первой и второй композициями не имеется. Время окончания полной анестезии и ОДО при использовании первого сочетания составляет 95,0 ± 3,2 (р< 0,001) и 185,0 ± 5,4 мин (р < 0,001), а под воздействием второго - 70,0 ± 2,1 и 140,0 + 4,3 мин, т. е. по этим параметрам сочетание бупивакаин (0,5%, 1 мг/кг) + мексиприм (1,25%, 2,5 мг/кг) в 1,36 и 1,32 раза соответственно превосходит бупивакаин (0,5%, 1 мг/кг) + ФР (рис.2).

мим

Рис. 2. Временные параметры начала анестезии, наступления и окончания полного обезболивания, общей длительности анестезии при использовании сочетаний бупивакаина (0,5%, 1 мг/кг) с ФР (7) и мексипримом (1,25%, 2,5 мг/кг) (2) в условиях эпидурального обезболивания в опытах на кроликах.

Сопоставление показателей острой токсичности иместноанестезирующей активности РУ-353 и бупивакаинав сочетании с мексипримом и ФР при анализе:

1) острой токсичностив опытах на крысах. Соединение РУ-353 и бупивакаин в сочетании с мексипримом по ЛД50 (в мг/кг) практически сопоставимы. Композиции РУ-353 + мексиприм и бупивакаин + мексиприм в 1,5 и 1,4 раза соответственно превосходят (менее токсичны) РУ-353 + ФР и бупивакаин + ФР;

2) инфильтрационной анестезии в экспериментах на коже морских свинок. Композиция РУ-353 + мексиприм (1,25%) по местноанестезирующей активности и ШТД соответственно в 2,1 и 2,0 раза превосходит бупивакаин + мексиприм (1,25%), РУ-353 + ФР в 2,2 и 2,0 раза более значимо, чем бупивакаин + ФР;

3) проводниковой анестезии в опытах на нервах хвостов крыс. Композиции РУ-353 и бупивакаина с мексипримом (1,25%) и ФР, в которых МА взяты в 0,25% концентрации, по ППА и ОДО практически сопоставимы. При повышении концентрации МА в исследованных композициях до 0,5% композиция РУ-353 + мексиприм (1,25%) по ППА существенно не отличается от таковой бупивакаин + мексиприм (1,25%), тогда как сочетание РУ-353 + ФР в 1,7 раза превосходит бупивакаин + ФР; по ОДО складываются обратные взаимоотношения - РУ-353 + мексиприм (1,25%) в 1,2 раза более значимо, чем бупивакаин + мексиприм (1,25%), а РУ-353 + ФР и бупивакаин + ФР практически не отличаются между собой;

4) спинномозговой анестезии в экспериментах на крысах. Соединение РУ-353

(0,25%, 5 мг/кг) в сочетании с мексипримом (1,25%, 25 мг/кг) и ФР по ППА и ОДО в 2,3 и 1,7, 2,7 и 1,5 раза превосходит бупивакаин (0,25%, 5 мг/кг) + мексиприм (1,25%, 25 мг/кг) и бупивакаин (0,25%, 5 мг/кг) + ФР соответственно.

В случаях увеличения концентрации МА в избранных композициях до 0,5% при их неизменной дозе РУ-353 в сочетании с мексипримом (1,25%, 25 мг/кг) и ФР по ППА и ОДО в 1,7 и 1,5, 1,6 и 1,2 раза более значимо, чем композиции бупивакаин + мексиприм (1,25%, 25 мг/кг) и бупивакаин + ФР соответственно. При сопоставлении показателей, характеризующих влияние мексиприма на продолжительность МП задних конечностей, вызываемого РУ-353 и бупивакаином в условиях спинномозговой анестезии, выявлено, что бупивакаин (0,25 и 0,5%, 5 мг/кг) в сочетании с мексипримом (1,25%, 25 мг/кг) индуцирует менее продолжительный МП, чем РУ-353 (0,25 и 0,5%, 5 мг/кг) + мексиприм (1,25%, 25 мг/кг). Внутривенное введение мексиприма (5% официнальный раствор, 50 мг/кг) на фоне субарахноидального инъецирования-бупивакаина (0,25 и 0,5%, 5 мг/кг) существенно снижает длительность МП, вызываемого последним, особенно в 0,25% концентрации;

5) эпидуральной анестезиив опытах на кроликах. Соединение РУ-353 (0,5%, 1 мг/кг) в сочетании с мексипримом (1,25%, 2,5 мг/кг) и ФР по ППА и ОДО в 1,5 и 1,5, 1,6 и 1,5 раза превосходит бупивакаин (0,5%, 1 мг/кг) + мексиприм (1,25%, 2,5 мг/кг) и бупивакаин (0,5%, 1 мг/кг) + ФР соответственно.

Исследование влияния соединения РУ-353 и бупивакаинав сочетании с мексипримом на ионные токи изолированных нейронов.В опытах на изолированных нейронах брюхоногого моллюска мексиприм в условиях сочетания с соединением РУ-353 усиливает блокирование последним натриевых и кальциевых токов и ослабляет подавление калиевых медленных токов; при комбинировании с бупивакаином повышает блокирование им натриевых токов и уменьшает подавление кальциевых и калиевых медленных токов.

Влияние соединения РУ-353, бупивакаина и их сочетаний с мексипримом на нейроны спинного мозга и спинальных ганглиев.В экспериментах на крысах при субарахкоидальном введении соединение РУ-353 и бупивакаин, взятые в 0,25% концентрации и дозе 5 мг/кг, а также мексиприм (1,25%, 25 мг/кг) вызывают разнонаправленные изменения показателей (количество ядрышек в ядре, объемная плот-

ность субстанции Нисля и оптическая плотность хроматина) белоксиктезирующей системы нейронов спинного мозга и спинальных ганглиев.

Соединение РУ-353 и бупивакаин (в избранных концентрации и дозе) в сочетании с мексипримом (1,25%, 25 мг/кг) не индуцируют значимых изменений отмеченных показателей по сравнению с контрольными.

ВЫВОДЫ

1. В скрининговых исследованиях при терминальной анестезии в опытах на роговице глаз кроликов соединения РУ-353, РУ-720, РУ-1203 и бупивакаин в сочетании с мексипримом (1%) обладают менее выраженным обезболивающим действием, чем сочетания этих местноанестезирующих веществ с физиологическим раствором.

В условиях инфильтрационной и проводниковой анестезии в экспериментах на морских свинках и мышах соответственно соединения РУ-353 (наиболее значимо), РУ-720, РУ-1203 и бупивакаин в сочетании с мексипримом (1%) по обезболивающему действию и активности (ЭД50) превосходят сочетания этих местноанестезирующих веществ с физиологическим раствором; РУ-353 и бупивакаин в сочетании с мексипримом могут быть рекомендованы для углубленного доклинического изучения в отмеченных направлениях.

2. Сочетание РУ-353 (подкожно) + мексиприм (внутривенно) по острой токсичности (ЛД5о) в опытах на крысах сопоставимо с таковым бупивакаин (подкожно) + мексиприм (внутривенно); обе композиции менее токсичны, чем сочетания РУ-353 и бупивакаина с физиологическим раствором.

3. В условиях инфильтрационной анестезии в экспериментах на морских свинках РУ-353 в сочетании с мексипримом (1,25%) и физиологическим раствором по местнообезболивающей активности и широте терапевтического действия более значимо, чем бупивакаин, взятый в аналогичных сочетаниях.

4. При проводниковой анестезии в опытах на крысах композиции РУ-353 и бупивакаина с мексипримом (1,25%) и физиологическим раствором, в которых мест-ноанестезирующие вещества использованы в 0,25% концентрации, по продолжительности полной анестезии и общей длительности обезболивания практически сопоставимы. С увеличением концентрации РУ-353 и бупивакаина до 0,5% продолжи-

тельность полной анестезии под влиянием композиции РУ-353 + мексиприм (1,25%) более значима, чем при использовании сочетания бупивакаин + мексиприм (1,25%); по этому показателю РУ-353 в сочетании с физиологическим раствором превосходит аналогичное сочетание бупивакаина. По общей длительности обезболивания композиция РУ-353 + мексиприм (1,25%) более значима, чем бупивакаин + мексиприм (1,25%); РУ-353 и бупивакаин в сочетании с физиологическим раствором практически сопоставимы.

5. В условиях спинномозговой анестезии в экспериментах на крысах РУ-353, взятое в 0,25 и 0,5% концентрациях и дозе 5 мг/кг, в сочетании с мексипримом (1,25%, 25 мг/кг) и физиологическим раствором по продолжительности полной анестезии и общей длительности обезболивания более значимо, чем аналогичные сочетания бупивакаина. Мексиприм (1,25%, 25 мг/кг), инъецированный субарахноидаль-но (в сочетании с РУ-353 и бупивакаином) и внутривенно (5% официнальный раствор, 50 мг/кг на фоне спинномозговой анестезии, вызываемой бупивакаином), уменьшает продолжительность моторного паралича задних конечностей, вызванного РУ-353 и, в большей мере, бупивакаином.

6. При эпидуральной анестезии в опытах на кроликах РУ-353 (0,5%, 1 мг/кг) в сочетании с мексипримом (1,25%, 2,5 мг/кг) и физиологическим раствором по продолжительности полной анестезии и общей длительности обезболивания превосходит бупивакаин (0,5%, 1 мг/кг) + мексиприм (1,25%, 2,5 мг/кг) и бупивакаин (0,5%, 1 мг/кг) + физиологический раствор.

7. В экспериментах на изолированных нейронах брюхоногого моллюска (Ыт-лаеа^а^ла/йОмексиприм в условиях сочетания с РУ-353 усиливает блокирование последним натриевых и кальциевых токов и ослабляет подавление калиевых медленных токов; при комбинировании с бупивакаином повышает блокирование им натриевых токов и уменьшает подавление кальциевых и калиевых медленных токов.

8. В опытах на крысах при субарахноидалыюм введении соединение РУ-353 (0,25%, 5 мг/кг) и бупивакаин (0,25%, 5 мг/кг) в сочетании с мексипримом (1,25%, 25 мг/кг) не вызывают значимых изменений показателей (количество ядрышек в ядре, объемная плотность субстанции Нисля и оптическая плотность хроматина) белок-синтезирующей системы нейронов спинного мозга и спинальных ганглиев.

НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Композициюбупивакаин(0,25 и 0,5%) + мексиприм рекомендуется использовать (после соответствующего разрешения Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения и социального развития) в клинических условиях при проводниковой, спинномозговой и эпидуральной анестезии.

2. Соединение РУ-353 (0,25 и 0,5%) в сочетании с мексипримом (1,25%) рекомендуется для дальнейшего доклинического изучения с целью практического использования в качестве местноанестезирующего средства при проводниковой, спинномозговой и эпидуральной анестезии.

ПУБЛИКАЦИИ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

*1. Каде М.А., Игнатов Ю.Д., Вислобоков А.И., Галенко-Ярошевский П.А., Борисова В.А., Мельников К.Н. Взаимная модуляция действия на ионные каналы моллюсков мексидола и бупивакаина при их совместном применении //Кубанский научный медицинский вестник. - 2009, № 7 (112). - С. 72 - 75.

*2. Каде М.А., Игнатов Ю.Д., Вислобоков А.И., Богус С.К., Галенко-Яро-шевский П.А., Мельников К.Н. Изучение раздельного и совместного влияния мексидола и производного имидазобензимидазола РУ-353, обладающего местноанестези-рующими свойствами, на ионные каналы нейронов прудовика //Кубанский научный медицинский вестник. - 2009, № 7 (112). - С. 76 - 79.

*3. Каде М.А., Галенко-Ярошевский П.А., Петровский А.Н. Активность и острая токсичность бупивакаина в сочетании с мексидолом при инфильтрационной, проводниковой, спинномозговой и эпидуральной анестезии //Кубанский научный медицинский вестник. - 2009, № 8 (113). - С. 37 - 40.

*4. Каде М.А., Галенко-Ярошевский П.А. Местноанестезирующая активность и острая токсичность производного имидазо[1,2-а]бензимидазола РУ-353 в сочетании с мексидолом //Кубанский научный медицинский вестник. - 2009, № 8 (113). - С. 40 -43.

*5. Каде М.А., Евглевский A.A., Галенко-Ярошевский П.А. Морфометрическая характеристика нейронов спинного мозга и спинальных ганглиев при субарахнои-

дальном введении бупивакаина, мекеидола и их сочетания //Кубанский научный медицинский вестник. - 2009, № 8 (113). - С. 44 - 48.

*6. Каде М.А., Евглевский A.A., Галенко-Ярошевский П.А. Морфофункциональное состояние нейронов спинного мозга и спинальных ганглиев в условиях субарахноидального введения производного имидазобензимидазола РУ-353 в сочетании с мексидолом //Кубанский научный медицинский вестник. - 2009, № 8 (113). - С. 48 - 53.

* Статьи, опубликованные в журнале, рекомендованном ВАК РФ.

СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ

БС - болевой синдром

ЛДИ - летальная доза, вызывающая 50% гибели животных

Л С - лекарственное средство

МА - местный анестетик

МП - моторный паралич задних конечностей

НА - наступление анестезии

НПК - наиболее перспективная композиция

НПО - начало полного обезболивания

ОДО - общая длительность обезболивания

ППА - продолжительность полной анестезии

ФР - физиологический раствор

ШТД - широта терапевтического действия

ЭК50 - концентрация, вызывающая 50% местноанестезирующий эффект

Отпечатано в типографии ООО «Издательство Екатеринодар», г. Краснодар, Восточная промзона, ул. им. Е. Бершанской, 353/2. Печать офсетная. Бумага 80 г/кв.м. Тираж 200 экз. Зак. № 131.

Формат 60x84/16. Дата выхода 15.05.2010 г.

Актуальность темы. Болевой синдром (БС) в настоящее время рассматривается как одна из наиболее значимых проблем, имеющих не только медицинское значение, но и неблагоприятные социально-экономические последствия. БС вынуждает людей обращаться за медицинской помощью, снижает трудоспособность, может привести к инвалидизации и даже явиться причиной летального исхода (М.Л.Кукушкин, Н.К.Хитров, 2004; В.А.Волч-ков и соавт., 2006; Ecleston, Crombez, 2005; Gheldof et al., 2005; Von Korff et al., 2005; Farouk, 2008; Foss et al., 2009).

Нередко имеют место клинические ситуации, требующие быстрого оказания патогенетически обоснованной противоболевой помощи при остром и хроническом БС. Лечение больных, страдающих интенсивными БС, становится прерогативой анестезиологов и реаниматологов с обязательным привлечением специалистов других направлений: клинических фармакологов, неврологов, хирургов, онкологов и т. д. (И.А.Ибатуллин и соавт., 2003; А.А. Бунятян, В.М.Мизиков, 2006; В.А.Волчков и соавт., 2006; Mulroy, 2003; Ва-rash et al., 2004; Cateral, Mackie, 2006).

В последнее десятилетие значительно расширились сведения о путях формирования БС и антиноцицептивной системы защиты организма (В.А. Волчков и соавт., 2006). Появились новые данные по нейрофизиологии и нейрофармакологии БС, позволяющие проводить патогенетическую терапию. Повышение эффективности и безопасности фармакотерапии БС является одним из важных направлений современной медицины (В.А.Волчков и соавт., 2006; А.П.Галенко-Ярошевский, 2009; А.И. Вислобоков и соавт., 2010).

Основным методом предупреждения и купирования БС является применение болеутоляющих лекарственных средств (ЛС), в том числе местных анестетиков (МА) (Г.Я.Шварц, 2004; В.А.Волчков и соавт., 2006; Ю.Д.Игнатов и соавт., 2010; Forastiere et al., 2008; Takshima et al., 2009). MA, как известно, ограничивая вход ноцицептивной импульсации в ЦНС, могут не только предотвращать сенситизацию ноцицептивных нейронов, но и способствовать нормализации микроциркуляции в зоне повреждения, уменьшению воспалительной реакции и улучшению обмена веществ (Г.И.Степанюк, 1989; В.Л.Попков, 2006; А.П.Галенко-Ярошевский, 2009; Umbrain et al., 2008, 2009; Yi et al., 2009).

К настоящему времени, благодаря высоким темпам развития фармакологии, практическая медицина обогатилась высокоэффективными JIC, предназначенными для местной анестезии [терминальной, инфильтрационной, проводниковой, спинномозговой (субарахноидальной) и эпидуральной] (М.Д. Машковский, 2006; А.А.Бунятян, В.М.Мизиков, 2006; Mulroy, 2003; Calvey, Williams, 2007). Однако как традиционные (новокаин, дикаин, лидокаин и др.), так и современные (бупивакаин, мепивакаин, ропивакаин и др.) MA не всегда индуцируют достаточной глубины и продолжительности обезболивающее действие, нередко проявляют системную токсичность, вызывают побочные явления (В.Н.Цибуляк, Г.Н.Цибуляк, 1994; С.Ф.Грицук, 1998; В.В. Сергеев, 2007; Steinbrook, 1998; Huang et al., 1998; Cateral, Mackie, 2006; Takhchidi et al., 2010).

Принято считать, что с увеличением анестезирующей активности MA (при химической модификации) их острая токсичность также увеличивается или в редких случаях не претерпевает существенных изменений (М.Д. Машковский, 2000; А.П.Галенко-Ярошевский и соавт., 2000, 2007; Mulroy, 2003; Barash et al., 2004).

Для увеличения глубины и продолжительности специфического действия MA и снижения их системной токсичности преимущественно используют адреноагонисты - адреналин, норадреналин, мезатон, клонидин и другие (Н.Т.Прянишникова, Н.А.Шаров, 1967; И.В.Марусов, В.Е.Иванов, 1998; Н.Б. Перерва, 2003; О.В.Гуленко, 2005; З.Ш.Тлишева, 2007; Barash et al., 2004; Cateral, Mackie, 2006; Calvey, Williams, 2007). Однако, согласно исследованиям С.Ф.Грицук (1998), Mulroy (2003), Barash et al. (2004), отмеченные адъю-ванты могут индуцировать повышение артериального давления, нарушения сердечного ритма, гипергликемию и другие побочные явления, что вызывает сдержанность в их сочетанном использовании с МА.

Известно, что отечественный препарат мексиприм, или мексидол, является современным высокоэффективным антиоксидантом и антигипоксантом прямого действия (Т.А.Воронина и соавт., 1997; П.А.Галенко-Ярошевский и соавт., 2000, 2001, 2009; С.Б.Середенин и соавт., 2005; Р.И.Бгуашева, 2007; В.Л.Попков и соавт., 2007). Он ингибирует свободнорадикальные процессы и перекисное окисление липидов, изменяет физико-химические свойства клеточной мембраны, увеличивает ее текучесть, повышает содержание полярных фракций липидов (фосфотидилсерина, фосфотидилинозита и др.), вязкость липидного слоя (В.И.Инчина и соавт., 1996, 2000; А.В.Зорькина, 1997; Н.А.Волкова, 2003), оказывает блокирующее действие на натриевые, кальциевые и калиевые ионные токи (А.И.Вислобоков и соавт., 2010). Препарат улучшает энергосинтезирующую функцию митохондрий и энергетический обмен в клетке, стимулируя прямое окисление глюкозы по пентозофосфат-ному шунту, повышая уровень восстановленных нуклеотидов, и тем самым усиливает антиоксидантную защиту клетки, стабилизируя уровень эндогенных антиоксидантов (Е.Н.Багметова, 2005; В.Л.Попков, 2006). Мексиприм вызывает конформационные изменения белковых макромолекул синаптиче-ских мембран, вследствие чего оказывает модулирующее влияние на активность мембраносвязанных ферментов (например, аденилатциклазы и гуани-латциклазы, КЖа-АТФазы) ионных каналов, рецепторных комплексов мембран мозга (в частности, бензодиазепинового, ГАМК-ергического, ацетилхо-линового), усиливая их способность к связыванию с лигандами, и тем самым повышает активность нейромедиаторов и активацию синаптических процессов (В.В.Яснецов и соавт., 1999; Н.Н.Андреева, И.В.Мухина, 2005; А.И.Вислобоков и соавт., 2006; Л.В.Васильева и соавт., 2007).

Показано, что мексиприм проявляет выраженное гепато- и нефропротек-торное действие при интоксикациях различными ядовитыми веществами -тетрахлорметаном, алкоголем, динитрозоамином и другими (К.М.Дюмаев и соавт., 1995; О.В.Ширшикова, 1997; Т.А.Воронина и соавт., 1997; Т.Т.Келейникова, 1998). Препарат обладает противовоспалительным и бактерицидным действием, а также стимулирует репаративно-регенеративные процессы (Е.Н.Багметова, 2005; Л.В.Васильева и соавт., 2007; В.Л.Ковалева и соавт., 2007).

Недавно установлено, что сочетание мексиприма с лидокаином влечет за собой снижение острой токсичности (в опытах на мышах) последнего. Композиции лидокаина с мексипримом в условиях обезболивания поверхностным (кролики), инфильтрационным (морские свинки), проводниковым (крысы) и, особенно, спинномозговым (крысы) методами по анестезирующей активности превосходят лидокаин, взятый отдельно (Т.Н.Футорянская и соавт., 2007).

Исходя из вышеизложенного, представлялось важным провести исследование местнообезболивающей (терминальной, инфильтрационной, проводниковой, спинномозговой и эпидуральной) активности и острой токсичности производных имидазо[1,2-а]бензимидазола РУ-353, РУ-720, РУ-1203, обладающих высокой местноанестезирующей активностью (В.В.Пономарев, 1998, 2004; Г.А.Голубцова, 2009; А.П. Галенко-Ярошевский, 2009), и бупива-каина в сочетании с мексипримом.

Цель работы. Повысить местноанестезирующее действие и снизить острую токсичность производных имидазо[1,2-а]бензимидазола РУ-353, РУ-720, РУ-1203 и бупивакаина путем сочетания их с мексипримом; провести углубленное доклиническое изучение наиболее активных композиций.

Основные задачи исследования. В соответствии с заданной целью предусматривалось решение следующих задач:

1. Провести скрининговые исследования соединений РУ-353, РУ-720, РУ-1203 и бупивакаина в сочетании с мексипримом и физиологическим раствором (ФР) в условиях терминального, инфильтрационного и проводникового обезболивания.

2. Изучить в сравнительном аспекте местноанестезирующую (терминальную, инфильтрацинную, проводниковую, спинномозговую и эпидуральную) активность и острую токсичность наиболее перспективных композиций (НГЖ) - местный анестетик + мексиприм.

3. Исследовать влияние НПК на трансмембранные ионные токи изолированных нейронов.

4. Изучить влияние субарахноидального введения НПК на морфофунк-циональное состояние нейронов спинного мозга и спинальных ганглиев.

Научная новизна. Впервые показано, что сочетание РУ-353 (0,5%-ное на ФР в определенных дозах подкожно) + мексиприм (5%-ный официналь-ный раствор в дозе 50 мг/кг внутривенно) проявляет меньшую острую токсичность, чем РУ-353 (0,5%-ное на ФР в определенных дозах подкожно), взятое отдельно.

Композиция РУ-353 + мексиприм (1,25%) по анестезирующей активности при инфильтрационном, проводниковом, спинномозговом и эпидураль-ном методах обезболивания превосходит РУ-353 + ФР; в условиях терминальной анестезии первое сочетание значительно уступает второму. Соединение РУ-353 в сочетании с мексипримом (1,25%) и ФР не оказывает раздражающего или повреждающего действия.

Сочетание бупивакаин (0,5%-ный официнальный раствор в возрастающих дозах подкожно) + мексиприм (5%-ный официнальный раствор в дозе 50 мг/кг внутривенно) проявляет меньшую острую токсичность, чем бупивакаин (0,5%-ный официнальный раствор в возрастающих дозах подкожно), взятый отдельно.

По активности при инфильтрационном, проводниковом, спинномозговом и эпидуральном методах анестезии бупивакаин в сочетании с мексипримом (1,25%>) превосходит бупивакаин + ФР. Композиции бупивакаина с мексипримом (1,25%) и ФР не проявляют раздражающего или повреждающего действия.

Мексиприм (5% официнальный раствор, 50 мг/кг), введенный внутривенно вслед за субарахноидальным инъецированием бупивакаина (0,25 и 0,5% официнальные растворы, 5 мг/кг), пролонгирует вызываемую последним спинномозговую анестезию и уменьшает (в большей мере в первой концентрации) продолжительность МП задних конечностей.

При сопоставлении показателей острой токсичности и местноанесте-зирующей активности исследованных композиций сочетание РУ-353 + мек-сиприм по токсичности (ЛД50) сопоставимо с бупивакаин + мексиприм; оба сочетания менее токсичны, чем РУ-353 + ФР и бупивакаин + ФР.

В условиях инфильтрационной анестезии соединение РУ-353 в сочетании с мексипримом и ФР по местнообезболивающей активности и широте терапевтического действия (ШТД) более значимо, чем бупивакаин, взятый в аналогичных сочетаниях.

При проводниковой анестезии композиции РУ-353 и бупивакаина с мексипримом и ФР, в которых анестетики использованы в 0,25% концентрации, по продолжительности полной анестезии (1111А) и общей длительности обезболивания (ОДО) сопоставимы. С увеличением концентрации РУ-353 и бупивакаина до 0,5% 1ИIА под влиянием композиции РУ-353 + мексиприм более значима, чем при использовании сочетания бупивакаин + мексиприм; по этому показателю РУ-353 + ФР превосходит бупивакаин + ФР. По ОДО композиция РУ-353 + мексиприм более значима, чем бупивакаин + мексиприм; РУ-353 и бупивакаин в сочетании с ФР сопоставимы.

В условиях спинномозговой анестезии РУ-353, взятое в 0,25 и 0,5% концентрациях и дозе 5 мг/кг, в сочетании с мексипримом и ФР более значимо, чем аналогичные сочетания бупивакаина. Мексиприм, инъецированный суб-арахноидально (в сочетании с РУ-353 и бупивакаином) и внутривенно (на фоне спинномозговой анестезии, вызываемой бупивакаином), уменьшает продолжительность моторного паралича (МП) задних конечностей, вызываемого РУ-353 и, в большей мере, бупивакаином.

При эпидуральной анестезии РУ-353 в сочетании с мексипримом и ФР по ППА и ОДО превосходит бупивакаин + мексиприм и бупивакаин + ФР.

Мексиприм в условиях сочетания с соединением РУ-353 усиливает блокирование последним натриевых и кальциевых токов и ослабляет подавление калиевых медленных токов; при комбинировании с бупивакаином повышает блокирование им натриевых токов и уменьшает подавление кальциевых и калиевых медленных токов.

При субарахноидальном введении соединение РУ-353 (0,25%, 5 мг/кг) и бупивакаин (0,25%, 5 мг/кг) в сочетании с мексипримом (1,25%, 25 мг/кг) не индуцируют значимых изменений показателей (количество ядрышек в ядре, объемная плотность субстанции Нисля и оптическая плотность хроматина) белоксинтезирующей системы нейронов спинного мозга и спинальных ганглиев.

Научно-практическая ценность работы. Материалы исследований обосновывают целесообразность использования в клинических условиях (после соответствующего разрешения Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения и социального развития) композиции бупивакаин + мекси-прим при инфильтрационной, проводниковой, спинномозговой и эпидураль-ной анестезии.

Композиция РУ-353 + мексиприм может быть рекомендована для дальнейшего доклинического изучения с целью создания местноанестезирующе-го средства для инфильтрационной, проводниковой, спинномозговой и эпи-дуральной анестезии.

Результаты сравнительных исследований местноанестезирующей активности РУ-353 и бупивакаина в сочетании с мексипримом включены в программу обучения студентов на кафедрах патофизиологии и фармакологии Кубанского (КГМУ) и Ростовского государственных медицинских университетов.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Композиции РУ-353 + мексиприм и бупивакаин + мексиприм при однократном подкожном введении крысам менее токсичны, чем эти местноане-стезирующие вещества в сочетании с ФР.

2. Соединение РУ-353 и бупивакаин в сочетании с мексипримом обладают более значимыми местноанестезирующей активностью и ШТД, чем эти местноанестезирующие вещества в сочетании с ФР.

3. В оптимальных местноанестезирующих концентрациях РУ-353 и бу-пивакаин при комбинировании с мексипримом (1,25%) не оказывают раздражающего действия на ткани.

4. Мексиприм в условиях сочетания с РУ-353 усиливает блокирование последним натриевых и кальциевых токов и ослабляет подавление калиевых медленных токов изолированных нейронов; при комбинировании с бупива-каином повышает блокирование им натриевых токов и уменьшает подавление кальциевых и калиевых медленных токов.

5. Соединение РУ-353 и бупивакаин в сочетании с мексипримом (1,25%, 25 мг/кг) не вызывают значимых изменений показателей белоксинтезирую-щей системы нейронов спинного мозга и спинальных ганглиев.

Апробация работы. Материалы и положения диссертационной работы доложены и обсуждены на совместных заседаниях (14.10.2008, 22.09.2009 и 15.12.2009 гг.) Краснодарских краевых отделений Российских научных обществ патофизиологов и фармакологов с приглашением представителей кафедр общей и клинической патологической физиологии, фармакологии и общей хирургии КГМУ и Адыгейского филиала КГМУ; межкафедральной конференции (27.04.2010 г.), посвященной 90-летию со дня основания КГМУ.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 6 статей в издании, рекомендованном ВАК.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 176 страницах компьютерного текста и состоит из введения (7 стр.), обзора литературы (39 стр.), описания материалов и методов исследований (10 стр.), 3 глав с изложением проведенных исследований (70 стр.), обсуждения результатов исследования (9 стр.), выводов (3 стр.), научно-практических рекомендаций (1 стр.) и списка литературы (28 стр.).

ВЫВОДЫ

1. В скрининговых исследованиях при терминальной анестезии в опытах на роговице глаз кроликов соединения РУ-353, РУ-720, РУ-1203 и бупивакаин в сочетании с мексипримом (1%) обладают менее выраженным обезболивающим действием, чем сочетания этих местноанестезирующих веществ с физиологическим раствором.

В условиях инфильтрационной и проводниковой анестезии в экспериментах на морских свинках и мышах соответственно соединения РУ-353 (наиболее значимо), РУ-720, РУ-1203 и бупивакаин в сочетании с мексипримом (1%) по обезболивающему действию и активности (ЭД50) превосходят сочетания этих местноанестезирующих веществ с физиологическим раствором; РУ-353 и бупивакаин в сочетании с мексипримом могут быть рекомендованы для углубленного доклинического изучения в отмеченных направлениях.

2. Сочетание РУ-353 (подкожно) + мексиприм (внутривенно) по острой токсичности (ЛД50) в опытах на крысах сопоставимо с таковым бупивакаин (подкожно) + мексиприм (внутривенно); обе композиции менее токсичны, чем сочетания РУ-353 и бупивакаина с физиологическим раствором.

3. В условиях инфильтрационной анестезии в экспериментах на морских свинках РУ-353 в сочетании с мексипримом (1,25%) и физиологическим раствором по местнообезболивающей активности и широте терапевтического действия более значимо, чем бупивакаин, взятый в аналогичных сочетаниях.

4. При проводниковой анестезии в опытах на крысах композиции РУ-353 и бупивакаина с мексипримом (1,25%) и физиологическим раствором, в которых местноанестезирующие вещества использованы в 0,25% концентрации, по продолжительности полной анестезии и общей длительности обезболивания практически сопоставимы. С увеличением концентрации РУ-353 и бупивакаина до 0,5% продолжительность полной анестезии под влиянием композиции РУ-353 + мексиприм (1,25%) более значима, чем при использовании сочетания бупивакаин + мексиприм (1,25%); по этому показателю РУ-353 в сочетании с физиологическим раствором превосходит аналогичное сочетание бупивакаина. По общей длительности обезболивания композиция РУ-353 + мексиприм (1,25%) более значима, чем бупивакаин + мексиприм (1,25%); РУ-353 и бупивакаин в сочетании с физиологическим раствором практически сопоставимы.

5. В условиях спинномозговой анестезии в экспериментах на крысах РУ-353, взятое в 0,25 и 0,5% концентрациях и дозе 5 мг/кг, в сочетании с мексипримом (1,25%, 25 мг/кг) и физиологическим раствором по продолжительности полной анестезии и общей длительности обезболивания более значимо, чем аналогичные сочетания бупивакаина. Мексиприм (1,25%, 25 мг/кг), инъецированный субарахноидально (в сочетании с РУ-353 и бупивакаином) и внутривенно (5% официнальный раствор, 50 мг/кг на фоне спинномозговой анестезии, вызываемой бупивакаином), уменьшает продолжительность моторного паралича задних конечностей, вызванного РУ-353 и, в большей мере, бупивакаином.

6. При эпидуральной анестезии в опытах на кроликах РУ-353 (0,5%, 1 мг/кг) в сочетании с мексипримом (1,25%, 2,5 мг/кг) и физиологическим раствором по продолжительности полной анестезии и общей длительности обезболивания превосходит бупивакаин (0,5%, 1 мг/кг) + мексиприм (1,25%, 2,5 мг/кг) и бупивакаин (0,5%, 1 мг/кг) + физиологический раствор.

7. В экспериментах на изолированных нейронах брюхоногого моллюска {Ытпаеа stagnalis) мексиприм в условиях сочетания с РУ-353 усиливает блокирование последним натриевых и кальциевых токов и ослабляет подавление калиевых медленных токов; при комбинировании с бупивакаином повышает блокирование им натриевых токов и уменьшает подавление кальциевых и калиевых медленных токов.

8. В опытах на крысах при субарахноидальном введении соединение РУ-353 (0,25%, 5 мг/кг) и бупивакаин (0,25%, 5 мг/кг) в сочетании с мексипримом (1,25%, 25 мг/кг) не вызывают значимых изменений показателей (количество ядрышек в ядре, объемная плотность субстанции Нисля и оптическая плотность хроматина) белок-синтезирующей системы нейронов спинного мозга и спинальных ганглиев.

НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Композицию бупивакаин (0,25 и 0,5%) + мексиприм рекомендуется использовать (после соответствующего разрешения Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения и социального развития) в клинических условиях при проводниковой, спинномозговой и эпидуральной анестезии.

2. Соединение РУ-353 (0,25 и 0,5%) в сочетании с мексипримом (1,25%) рекомендуется для дальнейшего доклинического изучения с целью практического использования в качестве местноанестезирующего средства при проводниковой, спинномозговой и эпидуральной анестезии.

149