Автореферат и диссертация по медицине (14.00.02) на тему:Регионарные лимфатические узлы печени и тонкой кишки при хронической интоксикации тетрахлорметаном и в условиях коррекции лазерным излучением и фитопрепаратами (экспериментальное исследование)

На правах рукописи

ЮРОВА Елена Геннадьевна

РЕГИОНАРНЫЕ ЛИМФАТИЧЕСКИЕ УЗЛЫ ПЕЧЕНИ И ТОНКОЙ КИШКИ ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ ИНТОКСИКАЦИИ ТЕТРАХЛОРМЕТАНОМ И В УСЛОВИЯХ КОРРЕКЦИИ ЛАЗЕРНЫМ ИЗЛУЧЕНИЕМ И ФИТОПРЕПАРАТАМИ (экспериментальное исследование)

14.00.02. - анатомия человека

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Новосибирск - 2004

Работа выполнена в лаборатории общей патологии и физиологии лимфатической системы НИИ клинической и экспериментальной

лимфологии СО РАМН (г. Новосибирск).

Научный консультант:

академик РАМН, доктор медицинских наук, профессор

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

доктор медицинских наук

Ведущая организация:

Алтайский государственный медицинский университет (г. Барнаул)

Защита состоится« » 2004 года в часов на заседании

диссертационного совета Д 208.062.05 при Новосибирской государственной медицинской академии МЗ РФ (630091, Новосибирск, Красный проспект, 52).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Новосибирской государственной медицинской академии (630091, Новосибирск, Красный проспект, 52)

Автореферат разослан« » 2004 года.

Бородин Юрий Иванович

Асташов Вадим Васильевич

Шмерлинг Михаил Давыдович Ларионов Петр Михайлович

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук, профессор

А. В. Волков

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования

В современной экологической медицине важная роль отводится экологической лимфологии, в рамках которой проводятся исследования экологически негативных или позитивных влияний на лимфатическую систему, а также изучаются возможности управляемой санации внутренней среды через воздействие на лимфатическую систему (Бородин Ю.И., 1996,1999). К экологически зависимой патологии в настоящее время относят хронические заболевания печени, обусловленные попаданием в организм токсикантов из окружающей среды, обладающих канцерогенной активностью (Колесников СИ., Мичурина СВ. с соавт, 1995: Ищенко И.Ю., 2003).

Данные исследований ВОЗ позволили отнести тетрахлорметан (четыреххлористый углерод) к наиболее приоритетным экотоксикантам окружающей среды и потенциально канцерогенным для человека веществам. Экспериментально доказано, что гепатит, вызываемый введением тетрахлорметана, по многим показателям сходен с клиническими формами гепатитов, а печень является органом, наиболее подверженным его воздействию (ШкурупийВ.А., 1973, 1989; Фактор В.М. с соавт., 1982; Скакун Н.П. с соавт., 1985, 1987, 1992; Султанова Л.И., 1989; Колпаков М.А., 2001 и др.). Исследования регионарных лимфатических узлов печени при хронической интоксикации тетрахлорметаном, проведенные Е. П. Шарайкиной (1976, 1978), свидетельствуют о выраженном угнетении их дренажной и лимфопролиферативной функции.

В соответствии с концепцией Ю. И. Бородина (1989), морфофункциональный статус лимфатических узлов может рассматриваться в качестве маркера средового прессинга на лимфатическую систему. В связи с этим, параллельное исследование брыжеечного и печеночного лимфатических узлов при хронической интоксикации тетрахлорметаном позволит выявить характерные особенности их структурной организации, зависящие от регионарной анатомической локализации. В литературе отсутствуют точные количественные данные о структуре брыжеечных лимфатических узлов, являющихся регионарными к месту всасывания тетрахлорметана, в сочетании со структурным анализом регионарных лимфатических узлов печени.

Высокая токсичность тетрахлорметана объясняется образованием свободных радикалов, повышением активности перекисного окисления липидов (ПОЛ) (Губский Ю.И., 1989; Осипов А.Н. с соавт., 1990 и др.). Информация о содержании и накоплении таких маркеров ПОЛ в лимфе и крови, как свободные жирные кислоты (СЖК), позволяет судить о глубине и степени выраженности патологического процесса (Бородин Ю.И. с соав. 2000). В литературе отсутствуют сведения о содержании и распределении СЖК в центральной лимфе и периферической крови при хронической интоксикации тетрахлорметаном и в условиях ее коррекции.

Развитием методов дренажа интерстиция явилось создание биологически активных добавок к пище (БАД), соединяющих свойства лимфостимулятора и стимулятора внешнего дренажа (Бородин Ю.И., 2000). БАД к пище, разработанные в НИИ клинической и экспериментальной

БИБЛИОТЕКА I

СЛстсрбург

ОЭ

растительные биофлавоноиды и сорбционную основу растительного происхождения (пищевые волокна), что позволяет использовать их для коррекции нарушений лимфатической системы (Асташова ТА, Савицкая И.В., 1999). Вопрос об использовании фитопрепаратов, содержащих растения с антиоксидантным, сорбционным и гепатопротекторным действием (БАД к пище «Лимфосан Г», «Оберег»), для коррекции структуры печени и лимфатических узлов при хронической интоксикации тетрахлорметаном нигде не освещался, хотя известно, что введение антиоксидантов резко уменьшает токсическое действие тетрахлорметана, предотвра-щается развитие некроза (Зыков А.А. с соавт., 1989; InderR.E.etal.,1999).

Низкоэнергетическое гелий-неоновое лазерное излучение обладает лимфокоррегирующим и лимфостимулирующим действием в условиях развития патологического процесса (Шкурат ГА, 2000, Казаков О.В., 2001), а чрезкожное низкоэнергетическое лазерное облучение проекции тимуса способствует восстановлению морфофункциональных изменений в лимфатических узлах в условиях циркуляторной гипоксии (Асташов В.В., 1998). Отсутствие научных данных об особенностях структурных преобразований печеночных и брыжеечных лимфатических узлов, структуре печени, содержании и распределении СЖК в центральной лимфе и периферической крови при хронической интоксикации тетрахлорметаном в условиях сочетанной фито- и лазерной коррекции явилось основанием для выполнения исследования и обусловливает актуальность работы с научной и практической точек зрения.

Цель исследования

Выявить особенности структурных преобразований в лимфатическом регионе печени и тонкой кишки при хронической интоксикации тетрахлорметаном и в условиях коррекции низкоэнергетическим лазерным излучением и фитопрепаратами.

Задачи исследования:

1. Изучить морфофункциональное состояние печеночных, брыжеечных лимфатическихузлов, печень, центральную лимфу при хронической интоксикации

CCI,

2. Исследовать морфофункциональное состояние печеночных, брыжеечных лимфатическихузлов, печень, центральную лимфу при хронической интоксикации

в условиях коррекции фитопрепаратами (биологически активные добавки к пище (БАД) «Лимфосан Г» и «Оберег»).

3. Изучить морфофункциональное состояние печеночных, брыжеечных лимфатическихузлов, печень, центральную лимфу при хронической интоксикации

в условиях чрезкожного воздействия низкоэнергетическим гелий-неоновым лазером на проекцию тимуса.

4. Выявить морфофункциональные преобразования в печеночных, брыжеечных лимфатических узлах и печени при хронической интоксикации

в условиях сочетанной коррекции фитопрепаратами (БАД к пище «Лимфосан Г» и «Оберег») и низкоэнергетическим гелий-неоновым лазерным облучением проекции тимуса.

Научная новизна

В работе впервые дана характеристика особенностей структурной организации брыжеечных лимфатических узлов при пероральном хроническом введении экотоксиканта тетрахлорметана, а также анализ содержания и распределения свободных жирных кислот (СЖК) в центральной лимфе и периферической крови.

Полученные данные расширяют представление о структурно-клеточной организации печеночных лимфатических узлов при моделировании хронического токсического гепатита (хроническая интоксикация СС14 в сочетании с алкогольной интоксикацией).

Впервые проведено структурное исследование печеночных и брыжеечных лимфатических узлов, печени, а также проанализировано содержание и распределение СЖК при хронической интоксикации организма в условиях чрезкожного гелий-неонового низкоэнергетического облучения проекции тимуса. Показано лимфостимулирующее действие облучения на структуру лимфатических узлов и нормализация процессов ПОЛ.

Впервые проведено структурное исследование печеночных и брыжеечных лимфатических узлов, печени, а также проанализировано содержание и распределение СЖК при хронической интоксикации организма в условиях применения фитопрепаратов (БАД к пище «Лимфосан Г» и «Оберег»). Показано восстанавливающее действие фитопрепаратов на морфофункциональное состояние исследуемых объектов при моделировании хронического токсического поражения печени.

Впервые показано на морфологическом уровне, что низкоэнергетическое гелий-неоновое лазерное облучение тимуса способствует повышению эффекта действия фитопрепаратов при хроническом токсическом гепатите.

Практическая значимость

Обнаруженные характерные структурные преобразования в брыжеечных и печеночных лимфатических узлах, особенности содержания и распределения СЖК в лимфе и крови при токсическом поражении печени позволят производить адекватный подбор лекарственных средств для коррекции функций лимфатической системы, восстановления про-антиоксидантного равновесия в тканях.

Полученные структурные данные об активации лимфотока, Т-зависимо-го звена иммунного ответа в лимфатических узлах и восстановлении распределения СЖК в лимфе и крови при хроническом токсическом гепатите в условиях чрезкожного гелий-неонового лазерного облучения проекции тимуса позволяют сделать заключение о ценности этого способа коррекции для практического здравоохранения и целесообразности его дальнейшего изучения.

Улучшение транспортной функции и стимуляция лимфопролиферативных процессов в лимфатических узлах, выявленные нами при коррекции токсического гепатита фитопрепаратами (БАД к пище «Лимфосан Г» и «Оберег»), является аргументом для использования этих препаратов в качестве вспомогательных средств при лечении гепатитов. Показано, что применение фитопрепаратов восстанавливает содержание и распределение СЖК в центральной лимфе и

периферической крови, что свидетельствует о повышении тканевой устойчивости к свободно-радикальному окислению, которую определяют биофлавоноиды, содержащиеся в лекарственных растениях.

Результаты исследования сочетанного использования фитопрепаратов (БАД к пище «Лимфосан Г» и «Оберег») и низкоэнергетического гелий-неонового лазерного облучения проекции тимуса для коррекции состояния хронического токсического гепатита показали перспективность применения данного метода в восстановительной медицине и профилактической лимфологии, направленного на улучшение метаболизма клеток печени, восстановление структурно-функциональной организации регионарных лимфатических узлов и усиление дренажно-детоксикационного потенциала в лимфа-тическом регионе.

Результаты работы позволяют разработать и расширить схемы вспомогательной терапии пациентов, страдающих токсическим гепатитом в условиях реабилитационных отделений стационаров и санаторно-курортных учреждений.

Положения, выносимые на защиту:

1. Хроническая интоксикация СС14 вызывает одновременные структурные преобразования в печеночном и "брыжеечном лимфатических узлах, выраженность которых зависит от их регионарной локализации и функциональной специализации, изменяет содержание и распределение свободных жирных кислот (СЖК) в центральной лимфе и периферической крови.

2. Низкоэнергетическое гелий-неоновое лазерное облучение проекции тимуса при хронической интоксикации СС14 активирует транспортную функцию печеночного лимфатического узла (увеличение площади мозгового вещества), увеличивает размеры Т-зависимой зоны брыжеечного и печеночного лимфатических узлов, способствует восстановлению кровообращения в печени и содержания СЖК в центральной лимфе и периферической крови.

3. Пероралвное введение фитопрепаратов (БАД к пище «Лимфосан Г» и «Оберег») при хронической интоксикации активирует транспортную функцию печеночных лимфатических узлов (увеличение размеров мозгового вещества) и лимфопролиферативную функцию брыжеечных лимфатических узлов (увеличение размеров коркового вещества), восстанавливает соотношение СЖК в центральной лимфе и периферической крови, структурные соотношения в печени.

4. Сочетанное применение облучения проекции тимуса и введения фитопрепаратов (БАД к пище «Лимфосан Г» и «Оберег») при хронической интоксикации способствует более выраженной активации транспортной функции печеночных лимфатических узлов (увеличение размеров мозговых синусов), восстановлению структуры печени, активации л имфопролиферативной функции и восстановлению структурных соотношений брыжеечных лимфатических узлов в сравнении с монокоррекцией.

Апробация результатов исследования.

Основные результаты исследования доложены и обсуждены на: Научной конференции «Проблемы экспериментальной, клинической и профилактической

лимфологии», Новосибирск, 2002; На I съезде лимфологов России, Москва, 2003; Региональной научно-практической конференции «Роль санаторно-курортного лечения в процессах реабилитации населения сибирского региона», Новосибирск, 2003.

Публикации по теме диссертации: По материалам диссертации опубликовано 4 работы.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 195 страницах

машинописного текста, содержит 50 рисунков, 8 таблиц, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, 4 глав собственных исследований с подглавами, обсуждения, выводов, списка литературы, содержащего 235 отечественных и иностранных источников. Весь материал, представленный в диссертации, получен, обработан и проанализирован лично автором.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

Для исследования в качестве экспериментальных животных были выбраны крысы-самцы линии Wistar с исходной массой тела 180-250 г. Работа выполнена на 210 животных. Их разделили наследующие группы: 1 - интактные животные; 2 - экспериментальная группа животных с хроническим токсическим гепатитом (хроническая экзогенная интоксикация СС14); 3 - экспериментальная группа животных с хроническим токсическим гепатитом в условиях коррекции

низкоэнергетическим гелий-неоновым лазерным излучением; 4 -экспериментальная группа животных с хроническим токсическим гепатитом в условиях фитокоррекции (БАД к пище «Лимфосан Г»); 5 - экспериментальная группа животных с хроническим токсическим гепатитом в условиях

фитокоррекции (БАД к пище «Оберег»); 6 - экспериментальная группа животных с хроническим токсическим гепатитом (СС14) в условиях сочетанной фитокоррекции (БАД к пище «Лимфосан Г») и низкоэнергетического гелий-неонового лазерного излучения; 7 - экспериментальная группа животных с хроническим токсическим гепатитом (СС14) в условиях сочетанной фитокоррекции (БАД к пище «Оберег») и низкоэнергетического гелий-неонового лазерного излучения.

Модель хронического токсического поражения печени создавали путем эндогастрального введения 25% масляного раствора четыреххлористого углерода с помощью металлического зонда в дозе 0,1 мл на 100 г массы животного два раза в неделю в течение четырех недель (Скакун Н.П., 1992). Для усиления токсического действия четыреххлористого углерода вместо воды (в качестве питья) животным давали 5% раствор этилового спирта ad libitum в течение всех четырех недель создания модели. Коррекция фитосорбционными комплексами и низкоэнергетическим лазерным излу-чением проводилась в течение двух недель после последнего введения СС14 Чрезкожное лазерное воздействие на область проекции тимуса производили гелий-неоновым лазерным излучением (длина волны 0,63 мкм, плотность потока мощности 25 мВт/см2, время экспозоции 10 минут) (Асташов В.В., 1998).

В качестве объектов морфофункциональных исследований были выбраны брыжеечный лимфатический узел, образцы печени, ее регионарные лимфатические узлы, располагающиеся в гепато-доуденальной связке, центральная лимфа, периферическая кровь.

Используя принцип морфометрии, в лимфатических узлах подсчитывали площадь всего среза и площади отдельных структур: капсулы, краевого синуса, первичных и вторичных лимфоидных узелков, коркового плато, паракортикальной зоны, мозговых тяжей и мозговых синусов. Расчитывали корково/мозговой индекс лимфатических узлов, по которому ориентировались при определении типа лимфоузла (Ю. И. Бородин, 1967).

В печени при помощи морфометрической сетки определяли удельные площади цитоплазмы и ядер гепатоцитов, синусоидов и синусоидных клеток, подсчитывали число гепатоцитов, количество двуядерных и синусоидных клеток в поле зрения. Из полученных данных вычисляли ядерно-цитоплазматическое отношение в гепатоцитах, коэффициент отношения площади синусоидов к площади гепатоцитов (Vizzotto Ь, 1989). Основополагающим количественным описанием состава структуры является плотность различных компонентов внутри данной структуры. «Плотность» определяется как «количество в единице объема, единице площади или единице длины» (Weibel E.R., 1979). Объемная плотность (V) - объем компонентов в единице объема структуры; поверхностная плотность

- площадь поверхности компонентов в единице объема структуры; численная плотность (^ - число компонентов в единице объема структуры. Согласно принципу М. Delesse, доля площади среза, содержащая изучаемый компонент, равна его доле в объеме исследуемого объекта (Автандилов Г.Г., 1990).

Выделение структурных компонентов и дифференцировку клеточных форм в лимфатических узлах, крови и лимфе производили с учетом Международной гистологической номенклатуры (под ред. Ю. И. Афанасьева, 1987).

На базе сертифицированной аналитической лаборатории Новосибирского института органической химии СО РАН методом высокоэффективной капиллярной газожидкостной хроматографии на хроматографе HP 5890A фирмы «Хьюлетт-Паккард» исследовалось накопление и распределение свободных жирных кислот (СЖК) в пробах центральной лимфы и периферической крови, как критерия развития патологического процесса. В качестве основных выявлены: миристиновая, пальмитоолеиновая, пальмитиновая, линолевая, олеиновая, стеариновая и арахидоновые кислоты.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Морфофункциональное исследование брыжеечного, печеночного лимфатических узлов и печени при хронической интоксикации СС14

Исследование структурной организации брыжеечных лимфатических узлов при моделировании состояния токсического гепатита, вызванного введением четыреххлористого углерода, выявило изменение типа структурно-функциональной специализации с фрагментированного - у интактных животных (корково-мозговой индекс- 0,88) на промежуточный тип (к/м индекс- 1,21) (по

классификации Ю.И.Бородина, 1969). Увеличение площади коркового вещества происходит за счет вторичных лимфоидных узелков и коркового плато, а уменьшение мозгового - за счет мозговых синусов. Увеличение относительных размеров герминативных центров вторичных лимфоидных узелков, площади В-зависимой зоны, по-видимому, можно рассматривать как усиление интенсивности В-зависимых иммунных реакций. Транспорт лимфы через лимфатический узел снижен (уменьшаются относительные размеры мозговых синусов). Капсула значительно утолщена, что может свидетельствовать о склерозировании стромальных компонентов лимфатического узла.

Структурно-функциональная специализация печеночных лимфатических узлов в экспериментальной группе с хроническим токсическим гепатитом не изменяется, как и у интактных животных (к/м индекс - 1,5), соответствует компактному типу (к/м индекс - 2,1). В лимфатическом узле преобладает прямой путь транспорта лимфы (увеличены размеры краевого синуса). Относительные размеры паракортикальной зоны, мозговых тяжей уменьшаются, а вторичных лимфоидных узелков - увеличиваются, по сравнению с интактной группой, что, по-видимому, может свидетельствовать об угнетении клеточного и активации гуморального звеньев иммунитета.

Во всех структурно-функциональных зонах печеночных и брыжеечных лимфатических узлов увеличивается число незрелых форм клеток лимфоидного и плазматического рядов (лимфо- и плазмобластов, средних лимфоцитов и незрелых плазматических клеток), при уменьшении зрелых (малых лимфоцитов и зрелых плазматических клеток). По-видимому, происходит угнетение дифференцировки зрелых плазмоцитов. Это согласуются с данными Ю.И.Бородина, В.А. Труфакина, П.М. Трясучева (1985), которые связывали увеличение численности незрелых плазмоцитов с интенсивностью гуморальных иммунологических реакций в лимфатическом узле. Макрофагальная активность в структурных компонентах брыжеечных и печеночных лимфатических узлах снижена, что, по-видимому, объясняется большим токсическим прессингом тетрахлорметана и этилового спирта (Jennett R.B., et al., 1990; Daragan VA, 2000).

Хроническая интоксикация CC14 приводит к появлению участков некроза в паренхиме печени, вакуолярной дистрофии печени. Выявлены нарушения микроциркуляции, характерные для сосудистой дистонии - стаз, спазм синусоидных капилляров, центролобулярных и перипортальных сосудов. Выявленные изменения могут свидетельствовать о выраженной стрессорной реакции на хроническую экзогенную интоксикацию (Маянский Д.Н. с соавт., 1992). Увеличивается пул синусоидальных клеток, уменьшается клеточная плотность гепатоцитов. Одной из причин подобного рода изменений является нарушение процессов гемолимфоциркуляции, о чем свидетельствует уменьшение размеров синусоидных капилляров. Увеличение объемной плотности ядер паренхиматозных клеток, ядерно-цитоплазматичекого отношения является показателями адаптивной регенерации, протекающей в печени. Уменьшается клеточная плотность двуядерных гепатоцитов. Значительно увеличивается ядерно-цитоплазматическое соотношение, что может быть обусловлено внутриклеточным отеком гепатоцитов.

Исследование распределения свободных жирных кислот (СЖК) в пробах центральной лимфы и периферической крови, выявлено, что у интактной группы пул СЖК в центральной лимфе превышает пул СЖК в сыворотке крови, а при моделировании хронического токсического гепатита, наоборот, снижается. Это, вероятно, может свидетельствовать об усилении сброса лимфы в кровеносное русло, причем в кровь, в первую очередь, поступают насыщенные СЖК. Увеличение пула СЖК (по сравнению с интактной группой) в пробах центральной лимфы и сыворотки крови указывает на развитие в эксперименте токсиколимфии, активацию процессов перикисного окисления липидов (ПОЛ).

Таким образом, при экспериментальном токсическом гепатите комплекс изменений микроанатомической организации и клеточного состава брыжеечного и печеночного лимфатических узлов свидетельствует об активации иммунологических реакций гуморального типа. В печени на фоне хронической интоксикации развиваются дистрофические и воспалительные преобразования. Рост пула СЖК в крови и лимфе при хроническом гепатите указывает на развитие в эксперименте токсиколимфии, активацию процессов ПОЛ.

Морфофункциональное исследование брыжеечного, печеночного лимфатических узлов и печени в условиях коррекции хронической интоксикации СС14 низкоэнергетическим -гелий-неоновым лазерным излучением

Морфологические исследования структуры брыжеечных лимфатических узлов в условиях коррекции хронической интоксикации низкоэнергетическим гелий-неоновым лазерным излучением выявили изменение структурно-функциональной специализации лимфатического узла с фрагментированного типа (интактные животные) на компактный (к/м индекс -1,83). Увеличение площади коркового вещества происходит за счет паракортикальной зоны, вторичных лимфоидных узелков и коркового плато, ауменьшение мозгового - засчет мозговых тяжей и синусов. Увеличение размеров паракортикальной зоны брыжеечного лимфатического узла может свидетельствовать об активации лимфоцитопоэтической функции тимуса (Селятицкая В.Г., Обухова Л.А., 2001). Как и в группе без коррекции, транспорт лимфы через узел снижен (уменьшаются размеры мозговых синусов). Капсула значительно утолщена, что свидетельствует о склерозировании лимфатического узла. В цитоархитектонике всех структурно-функциональных зон брыжеечных лимфатических узлов, как и в экспериментальной группе с токсическим гепатитом без коррекции, выявлено увеличение числа лимфо- и плазмобластов, средних лимфоцитов и незрелых плазматических клеток и уменьшение - малых лимфоцитов и зрелых плазматических клеток. Макрофагальная активность в структурных компонентах брыжеечных лимфатических узлов возрастает, по сравнению с группой с токсическим гепатитом без коррекции.

Структурно-функциональная специализация печеночных лимфатических узлов в экспериментальной группе с коррекцией лазерным излучением изменяется с компактного типа (интактные животные) на промежуточный тип (к/м индекс -1,2). Увеличивается площадь мозгового вещества, по сравнению с группой

интактных животных и с хронической интоксикации СС14 без коррекции, за счет и мозговых синусов, и мозговых тяжей. Увеличиваются размеры Т-зависимой зоны, по сравнению с группой без коррекции. Отмечается уменьшение относительных размеров вторичных лимфоидных узелков, капсулы, краевого синуса, как по сравнению с интактной, так и с группой без коррекции.

В герминативных центрах вторичных лимфоидных узелков печеночных лимфатических узлов, по сравнению с интактной группой, уменьшается число малых лимфоцитов (на 14,8%) при увеличении числа лимфобластов (на37,1%) и средних лимфоцитов (на 55,1%). При этом, в мозговых синусах увеличивается количество средних лимфоцитов и плазмобластов в 2 раза. Количество малых лимфоцитов возрастает, по сравнению с группой с токсическим гепатитом без коррекции, и более приближено к значениям интактной группы. В мозговых тяжах снижается, по сравнению с экспериментальной группой с гепатитом без коррекции, число зрелых плазматических клеток, на фоне увеличения числа незрелых. Увеличение числа незрелых клеточных форм лимфоидного ряда в тимусзависимой зоне, по сравнению с интактной группой и группой без коррекции, может свидетельствовать (наряду с увеличением размеров паракортекса) об усилении интенсивности Т-зависимых иммунных реакций.

При хронической экзогенной интоксикации СС14 в условиях воздействия гелий-неонового лазерного излучения выявлено, что в структуре печени происходит достоверное увеличение объемной плотности синусоидов, свидетельствующее об увеличении кровенаполнения, и, следовательно, улучшению гемотканевых взаимоотношений и трофики тканевого микрорайона.

Исследование распределения СЖК в пробах центральной лимфы и периферической крови при коррекции хронического токсического гепатита лазерным излучением показало восстановление пула СЖК в центральной лимфе практически до значений интактной группы. Снижение пула СЖК в группе с коррекцией лазерным излучением, по сравнению с группой с хроническим гепатитом без коррекции, свидетельствует о снижении развития процессов ПОЛ. В условиях лазерной коррекции пул СЖК сыворотки крови, как и в группе с хроническим гепатитом без коррекции, превышает таковой в центральной лимфе.

Морфофункционалыюе исследование брыжеечного и печеночного лимфатических узлов и печени при хронической интоксикации СС14 фитопрепаратом (БАД к пище) «Лимфосан Г» Морфологическое исследование использования для коррекции экспериментального хронического токсического гепатита только БАД к пище «Лимфосан Г» выявило изменение структурно-функциональной специализации брыжеечных лимфатических узлов с фрагментированного типа у интактных животных на промежуточный (к/м индекс - 1,33). Относительные размеры вторичных лимфоидных узелков, мозговых тяжей соответствуют значениям интактной группы. Увеличение размеров тимусзависимой зоны свидетельствует об активации клеточного звена иммунитета. Транспортные возможности брыжеечного лимфатического узла в данной экспериментальной группе, как и в группе без коррекции, снижены (относительные размеры мозговых и краевого

синусов уменьшаются) по сравнению с интактной группой животных. Исследование цитоархитектоники структурно-функ-циональных зон брыжеечных лимфатических узлов при коррекции экспериментального хронического токсического гепатита только фитопрепаратом «Лимфосан Г», как и в экспериментальных группах без и с коррекцией только лазерным излучением, выявило увеличение количества незрелых форм клеток лимфоидного и плазматического рядов. При этом в герминативных центрах, по сравнению с интактной группой, уменьшается количество малых лимфоцитов (на 29,6%) и увеличивается - лимфобластов (в 2,7 раза) и средних лимфоцитов (на 50,2%). В мозговых тяжах, по сравнению с другими экспериментальными группами, увеличивается количество незрелых плазматических клеток и макрофагов. В мозговых синусах и паракортикальной зоне, по сравнению с интактной группой, увеличивается число незрелых форм клеток лимфоидного и плазматического рядов (лимфо- и плазмобласты, средние лимфоциты и незрелые плазматические клетки).

Морфологическое исследование печеночных лимфатических узлов при коррекции только БАД к пище «Лимфосан Г» выявило изменение структурно-функциональной специализации с компактного типа у интактных животных на промежуточный (к/м индекс-1,12). Увеличиваются размеры мозговых синусов. Относительные размеры многих структурных (зональность) компонентов лимфатического узла (первичные лимфоидные узелки, корковое плато, пара кортикальная зона, мозговые тяжи, краевой синус) печени не имеют достоверных отличий от интактной группы животных. Выявленные изменения свидетельствуют, что в условиях коррекции фитопрепаратом наблюдается тенденция к восстановлению структурных соотношений в печеночном лимфатическом узле. В структурно-функцио-нальных зонах печеночных лимфатических узлов увеличивается количество незрелых форм клеток лимфоидного и плазматического рядов, изменения которых более выражены в данной экспериментальной группе, по сравнению с группой без коррекции.

Применение БАД к пище «Лимфосан-Г» для коррекции хронической интоксикации способствует восстановлению численной плотности клеток печени. Отношение двуядерных гепатоцитов к общему числу гепатоцитов в данной группе достоверно превышает показатель в группе без коррекции, что позволяет сделать заключение об активации репаративных процессов в печени.

Исследование распределения свободных жирных кислот (СЖК) в пробах центральной лимфы при применении БАД к пище «Лимфосан Г» в условиях хронического токсического гепатита показало увеличение пула свободных жирных кислот по сравнению с интактной группой. Пул СЖК в пробах центральной лимфы и крови в группе с коррекцией БАД к пище «Лимфосан Г» ниже, чем в группе с токсическим гепатитом без коррекции. Снижение пула СЖК и увеличение вклада не активирующих ПОЛ насыщенных СЖК отмечено в пробах крови для указанной коррекции. Соотношение суммы СЖК в центральной лимфе и крови приближается к норме: пул СЖК в центральной лимфе превышает таковой в крови, что указывает на некоторое уменьшение сброса лимфы в кровь.

Морфофункционалыюе исследование брыжеечного, печеночного лимфатических узлов и печени при хронической интоксикации СС14в условиях коррекции фитопрепаратом (Б АД к пище) «Оберег»

Морфологические исследования брыжеечных лимфатических узлов в экспериментальной группе с коррекцией экспериментального хронического токсического гепатита только фитопрепаратом (БАД к пище) «Оберег» выявили изменение структурно-функциональной специализации брыжеечный лимфатических узлов с фрагментированного типа к промежуточный (к/м индекс -1,08). Относительные размеры вторичных лимфоиднык узелков, мозговвк тяжей, мозговвк синусов, паракортикальной зоны не имеют достоверный отличий от значений интактной группы животных. Это может свидетельствовать о протективном действии фитосорбционного комплекса «Оберег» при хронической экзогенной интоксикации организма.

В экспериментальной группе с коррекцией только фитопрепаратом «Оберег» структурно-функциональная специализация регионарных лимфатических узлов печени соответствует промежуточному типу (к/м индекс-1,08). Относительные размеры паракортикальной зоны, вторичнвк: лимфоиднвк узелков уменьшаются, по сравнению с интактной группой животных, а увеличенные размеры мозговых синусов свидетельствуют об усилении транспорта лимфы через лимфатический узел. Морфометрические исследования выявили, что мозговые тяжи, первичные лимфоидные узелки, корковое плато, капсула, трабекулы и краевой синус регионарного лимфатического узла печени не имеют достоверных отличий от интактной группы животных.

В структурно-функциональных зонах брыжеечного и печеночного лимфатических узлов увеличивается число незрелых форм клеток л имфондного и плазматического рядов по сравнению с интактной группой. При этом в отличие от брыжеечного лимфатического узла, в печеночном лимфатическом узле увеличение незрелых форм клеток (лимфобласты, средние лимфоциты и незрелые плазматические клетки), по сравнению с группой с токсическим гепатитом без коррекции, более выражено.

В печени вывленно увеличение объемной плотности синусоидных капилляров, снижение соотношения синусоидальных клеток к общему числу гепатоцитов.

Исследование распределения свободный жирныи кислот (СЖК) в пробах центральной лимфы при применении БАД к пище «Оберег» в условиях хронического токсического гепатита в пробах центральной лимфы выявлено увеличение на 3,3% пула СЖК (в группе с хроническим гепатитом без коррекции это составляло 9,7%) по сравнению с интактной группой. Применение БАД к пище «Оберег» вызывает уменьшение пула СЖК, приближая его к значениям интактной группы. При коррекции фитосорбционным комплексом «Оберег» резко уменьшается вклад ненасыщенный и увеличивается насыщенный СЖК. В пробах сыворотки крови отмечено увеличение, но в меньшей степени выраженное, чем в группе с хроническим гепатитом без коррекции, пула СЖК по сравнению с интактной группой. Пул СЖК в центральной лимфе превышает таковой в сыворотке крови.

Морфофункциональное исследование брыжеечного, печеночного лимфатических узлов и печени при хронической интоксикации СС14 в условиях сочетанной коррекции низкоэнергетическим гелий-неоновым лазерным излучением и фитопрепаратом (БАД к пище) «Лимфосан Г» В экспериментальной группе с сочетанной коррекцией хронической интоксикации СС14 лазерным излучением и БАД к пище «Лимфосан Г» морфологические исследования брыжеечных лимфатических узлов выявили изменение их структурно-функциональной специализации с фрагментированного типа (интактные животные) на компактный (к/м индекс -1,55). Увеличение площади коркового вещества происходит, в основном, за счет достоверного увеличения относительных размеров вторичных лимфоидных узелков и коркового плато. Разрыхление паракортекса, расширенные промежуточные корковые синусы, суженые мозговые и неизменный в размерах краевой синусы, свидетельствуют, что внутри лимфатических узлов преобладает непрямой путь транспорта лимфы (Поликар А., 1965). Транспорт лимфы через брыжеечный лимфатический узел усиливается по сравнению с экспериментальной группой без коррекции и с коррекцией только лазерным излучением. Капсула значительно утолщена. В цитоархитектонике герминативных центров, на фоне увеличения их относительных размеров и размеров мантийной зоны, уменьшается (по сравнению с интактной группой) количество малых лимфоцитов при увеличении числа лимфобластов (в

2.4 раза) и средних лимфоцитов (на 36,8%). В мозговых тяжах уменьшается количество зрелых плазматических клеток и увеличивается - плазмобластов - в

2.5 раза, незрелых плазмоцитов - на 33,8%. В мозговых синусах увеличивается число средних лимфоцитов и плазмобластов, уменьшается - незрелых и зрелых плазматических клеток, макрофагов. Отмечается усиление макрофагальной реакции.

Морфологическое исследование печеночных лимфатических узлов в группе с сочетанной коррекцией выявило изменение их структурно-функциональной специализации с компактного типа (интактные животные) на промежуточный (к/ м индекс - 1,1). Увеличиваются размеры мозговых и краевого синусов. Относительные размеры вторичных лимфоидных узелков, мозговых тяжей не имеют достоверных отличий от значений интактной группы животных. В цитоархитектонике всех структурно-функциональных зон печеночных лимфатических узлов данной экспериментальной группы, по сравнению с интактной группой, выявлено увеличение числа незрелых и уменьшение зрелых форм клеток лимфоидного и плазматического рядов. По сравнению с экспериментальными группами с хроническим токсическим гепатитом без и коррекцией только лазерным излучением, увеличивается количество ретикулярных клеток.

Использование БАД к пище «Лимфосан-Г» в сочетании с низкоэнергетическим гелий-неоновым лазерным излучением при хронической экзогенной интоксикации приводит к максимальному увеличению отношения диплокариоцитов к общему числу гепатоцитов, среди всех экспериментальных групп. Это свидетельствует о том, что лазерное излучение действует в синергизме с фитопрепаратами, усиливая его репаративное действие.

Морфофункциональное исследование брыжеечного, печеночного лимфатических узлов и печени при хронической интоксикации СС14 в условиях сочетанной коррекции низкоэнергетическим гелий-неоновым

лазерным излучением и фитопрепаратом (БАД к пище) «Оберег» Морфологические исследования брыжеечных лимфатических узлов в экспериментальной группе с сочетанной коррекцией лазерным излучением и фитопрепаратом «Оберег» хронической интоксикации выявили, что по своей структурно-функциональной специализации брыжеечный лимфатический узел находится на границе между фрагментированным и промежуточным, корково-мозговой индекс равен 1,03. Увеличение относительных размеров вторичных лимфоидных узелков за счет как центров размножения, так и мантийной зоны, по сравнению с экспериментальной группой без коррекции и интактной группой животных, может свидетельствовать об активации иммунного ответа по гуморальному типу (Петров Р.В., 1987). Большинство структурных компонентов (паракортикальная зона, мозговые тяжи и синусы, первичные лимфоидные узелки и капсула) брыжеечного лимфатического узла не имеют достоверных отличий от интактной группы. Выявленные изменения свидетельствуют, что в условиях коррекции наблюдается тенденция к восстановлению структурных соотношений в лимфатическом узле. В цитоархитектонике всех структурно-функциональных зон брыжеечных лимфатических узлов (экспериментальная группа -фитопрепарат «Оберег» + лазерное излучение), по сравнению с интактной группой, выявлено увеличение количества незрелых форм клеток лимфоидного и плазматического рядов и снижение зрелых форм. Макрофагальная реакция в структурно-функциональных зонах брыжеечных лимфатических узлов данной экспериментальной группы более выражена, чем в группе с токсическим гепатитом без коррекции.

Морфологические исследования структурной организации печеночных лимфатических узлов при сочетанной коррекции экспериментального токсического гепатита низкоэнергетическим гелий-неоновым лазерным излучением и фитопрепаратом «Оберег» выявило изменения структурно-функциональной специализации с компактного типа - интактных животных (к/м индекс - 1,5) на промежуточный тип (к/м индекс - 1,1). В структуре лимфатического узла отмечается увеличение площади мозгового вещества, по сравнению с группой интактных животных и с экспериментальным токсическим гепатитом без коррекции, за счет как мозговых синусов, так и мозговых тяжей. Увеличиваются размеры мозговых синусов и паракортикальной зоны (активация клеточного звена иммунитета). Как и в брыжеечных лимфатических узлах, большинство структурных компонентов (паракортикальная зона, мозговые тяжи, первичные лимфоидные узелки, корковое плато, трабекулы и краевой синус) регионарного лимфатического узла печени не имеют достоверных отличий от интактной группы, что свидетельствует о тенденции к восстановлению структурных соотношений в лимфатическом узле.

В цитоархитектонике структурно-функциональных зон регионарного лимфатического узла печени данной группы отмечается увеличение числа незрелых форм клеток лимфоидного и плазматического рядов при снижении -

зрелых как по сравнению с интактной, так и группой без коррекции. При этом наблюдается уменьшение числа малых лимфоцитов и зрелых плазматических клеток в мозговых синусах. Особенно сильно увеличивается количество ретикулярных клеток (в 2,3 раза). По-видимому, это увеличение вызвано уменьшением доли лимфоидных клеток при возрастании числа ретикулярных, что может быть связано с миграцией лимфоидных клеток из лимфатического узла.

Использование БАД к пище «Оберег» в сочетании с низкоэнергетическим гелий-неоновым лазерным излучением при хронической экзогенной интоксикации способствует максимальному снижению соотношения синусоидальных клеток печени к общему числу гепатоцитов, по сравнению с группой без коррекции. Выявлено максимальное и достоверное увеличение объемной плотности синусоидных капилляров, что свидельствует об активации гемолимфоциркуляции и трофики пораженной ткани.

Результаты анализа гистологических препаратов печени крыс, у которых производили коррекцию хронической экзогенной интоксикации с помощью гелий-неонового низкоэнергетического лазерного излучения и фитопрепаратов, показали, что выбранные факторы коррекции полностью не способны защитить орган от поражения токсикантом. Необходимо отметить, что участки некроза с пикнозом и цитолизом практически не встречались, не обнаружен кариорексис и карио лизис. Морфологические параметры, характеризующие гепатоциты и состояние тканевого микрорайона печени (объемная плотность ядер, ядерно-цитоплазматическое отношение, численная плотность, отношение численной плотности диплокариоцитов к численной плотности всех гепатоцитов), имели тенденцию к снижению по сравнению с группой, где коррекцию хронической интоксикации СС14 не производили. Эти результаты, на наш взгляд, свидетельствуют об активации репаративных процессов, протекающих в печени (Ищенко И.Ю., 2003).

Таким образом, на основании выполненных исследований можно заключить, что использованные нами фитопрепараты (БАД к пище «Лимфосан Г» и «Оберег») обладают лимфостимулирующим, лимфокорригирующим и гепатопротекторным действием. БАД к пище «Лимфосан-Г» в большей степени, по нашему мнению, активирует репаративные процессы в печени и лимфатических узлах, а БАД к пище «Оберег» обладает противоспалительным действием в отношении выбранных объектов исследования. Важным результатом нашей работы является доказательство синергичности действия низкоэнергетического гелий-неонового лазерного излучения с фитопрепаратами, а в частности, усиления структурно-восстановительных процессов в печени лимфатических узлов при токсическом гепатите. При применении фитопрепаратов и низкоэнергетического лазерного излучения нами выявлено восстановление соотношения пулов СЖК в центральной лимфе и сыворотке крови, что свидетельствует об активности снижения процессов перикисного окисления липидов.

Результаты исследований, полученные в нашей работе, свидетельствуют, что фитопрепараты БАД к пище «Лимфосан Г» и «Оберег», использованные нами

для коррекции токсического гепатита, предотвращают развитие генерализованного эндотоксикоза в организме и обладают лимфопротекторныш действием. Их действие, по-видимому, реализуется в компенсации и торможении II стадии интоксикации - лимфотоксикоза (Буянов В. М., Алексеев А. А., 1990).

ВЫВОДЫ

1. Хроническая интоксикация СС14 вызывает в абдоминальный висцеральный лимфатических узлах характерные для их функциональной специализации структурные преобразования. В печеночный лимфатических узлах, являющихся регионарными к печени, они выражены в большей степени, чем в брыжеечный лимфатических узлах, регионарных по отношению к месту поступления токсиканта. В периферической крови при хронической интоксикация вышвлено увеличение пула свободный жирнык кислот (СЖК), по сравнению с центральной лимфой, свидетельствующее об активации процессов перикисного окисления липидов (ПОЛ) и развитии токсиколимфии.

2. При хронической интоксикация СС14 структурно-функциональная организация регионарных лимфатических узлов печени соответствует выраженному компактному типу: корковое вещество преобладает над мозговым, изменяется лимфопоэтическая функция - уменьшаются размеры Т- и В-зависимык зон в лимфатических узлах на фоне увеличения количества незрелык лимфоиднык клеток в структурно-функциональнык зонах, нарушается транспорт лимфы через лимфатический узел (расширение краевого синуса) и увеличиваются размеры его капсулы, что указывает на деструктивные и склеротические изменения в лимфатических узлах в резулытате токсиколимфии.

3. Хроническая интоксикация СС14 вызывает характерные морфофункциональные преобразования в брыжеечных лимфатических узлах, являющиеся структурным ответом на регионарную интоксикацию: размеры В-зависимой зоны лимфатических узлов увеличиваются за счет возрастания площади коркового плата, мозговых тяжей и вторичных лимфоидных узелков, нарушается прямой транспорт лимфы через лимфатические узлы, что подтверждается изменением функциональной специализации лимфатических узлов (компактный тип) и уменьшением размеров мозговык синусов.

4. Низкоэнергетическое гелий-неоновое лазерное облучение тимуса при хронической интоксикации СС14 обладает лимфокорригирующим и лимфостимулирующим действием: в печеночный лимфатических узлах вышвлено увеличение размеров Т- и В-зависимык зон, числа незрелый лимфоиднык клеток в его структурно-функциональных зонах, усиление транспортной функции; в брыжеечнык лимфатических узлах обнаружено увеличение размеров Т- зависимой зоны; в центральной лимфе определено приближение величины пула СЖК к контрольным значениям, соотношение долевык вкладов кислот приближается к условиям физиологической жизнедеятельности; в печени - увеличение размеров синусоиднык капилляров.

5. Применение фитопрепарата (БДД к пище «Лимфосан-Г») при хронической интоксикации обладает лимфокорригирующим действием и способствует восстановлению структурно-функциональных взаимоотношений в

лимфатических узлах и печени: в печеночных и брыжеечных лимфатических узлах выявлено увеличение размеров Т- зависимой зоны, усиление транспортной функции; в центральной лимфе пул СЖК превышает таковой в периферической крови, обнаружено перераспределение СЖК с увеличением доли насыщенных кислот; в печени выявлено увеличение численной плотности гепатоцитов и синусоидальных клеток, по сравнению с группой без коррекции.

6. При хронической интоксикации в условиях применения фитопрепарата (БАД к пище «Оберег») в печеночных и брыжеечных лимфатических узлах выявлена активация транспортной (увеличение размеров мозгового вещества, мозговых синусов) и лимфопоэтической функций (увеличение числа незрелых лимфоидных клеток, размеров В-зависимой зоны), в центральной лимфе пул СЖК превышает таковой в периферической крови, при уменьшении вклада ненасыщенных СЖК, в печени достоверно увеличиваются размеры синусоидных капилляров по сравнению с группой без фитокоррекции.

7. Сочетанное применение фитопрепарата (БАД к пище «Лимфосан-Г») и гелий-неонового лазерного облучения тимуса при хронической интоксикации СС14 оказывает выраженное лимфокорригирующее действие на лимфатические узлы, способствует восстановлению цитоархитектоники печени: в печеночных лимфатических узлах выявлена активация транспортной и лимфопролиферативной функций (увеличение размеров Т-зависимой зоны); в брыжеечных лимфатических узлах увеличиваются размеры наружных и глубоких отделов (Т-зависимая зона) коркового вещества, что указывает на активацию их барьерно-фильтрационной функции; в печени усиливается регенераторный потенциал -увеличивается численная плотность гепатоцитов и диплокариоцитов.

8. Сочетанное применение фитопрепарата (БАД к пище «Оберег») и низкоэнергетического гелий-неонового лазерного облучения тимуса при хронической интоксикации СС14 обладает лимфостимулирующим эффектом, способствует восстановлению структурно-функциональной организации лимфатических узлов и печени в большей степени, чем при монокоррекции фитопрепаратом: в лимфатических узлах активируется транспортная функция, в печеночных лимфатических узлах в большей степени увеличиваются размеры Т-зависимой зоны; а в брыжеечных - размеры В- зависимой зоны; в печени обнаружено значительное увеличение размеров синусоидов и максимальное восстановление соотношения синусоидальных клеток к общему числу гепатоцитов.

Внедрение результатов в практику

Результаты исследований внедрены в комплекс лечебно-реабилита-ционных мероприятий санатория детского санатория «Белокуриха» - у детей страдающих хроническими воспалительно-дегенеративными заболеваниями печени, в комплекс лечебно-реабилитационных мероприятий ЗАО санаторий «Россия» -у пациентов страдающих токсическим гепатитом, в практику научно-исследовательской работы лаборатории функциональной морфологии лимфатической системы НИИКиЭЛ СО РАМН.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Юрова Е.Г., Асташов В.В., Казаков О.В. Структура брыжеечных лимфатических

узлов у крыс с хроническим токсическим гепатитом и в условиях его коррекции лазерным излучением и фитосорбционными комплексами. // Проблемы экспериментальной, клинической и профилактической лимфологии: Материалы научной конференции. - Новосибирск.- 2002.- С. 389-391.

2. Юрова Е.Г., Асташов В.В., Казаков О.В. Регионарный лимфатический узел

печени при экспериментальной хронической экзогенной интоксикации и в условиях фитосорбционной коррекции. // Сердечно-сосудистые заболевания: Тез. докл. и сообщ. I съезда лимфологов 22-23 мая 2003г.- 2003.- Т.4, № 5.- С. 42.

3. Асташова ТА, Юрова Е.Г., Гельфонд Н.Е. Свободные жирные кислоты как

маркеры процессов лимфодетоксикации при экспериментальном хроническом гепатиите и его коррекции. // Сердечно-сосудистые заболевания: Тез. докл. и сообщ. I съезда лимфологов 22-23 мая 2003 г.- 2003.- Т.4, № 5.- С.76.

4. Юрова Е.Г., Асташов В.В. Регионарные лимфатические узлы печени и тонкой кишки в условиях фитосорбционной коррекции экспериментального хронического токсического гепатита // Роль санаторно-курортного лечения в процессах реабилитации населения сибирского региона: Материалы научно-практической конференции. - Новосибирск. - 2003. - С. 279-281.

Фомат 60484 '/,<.. Тираж 100. Усл. печ.л. 1,0. Заказ №8.

Отпечатано в тип. СО РАМН 630117, г. Новосибирск, ул. Академика Тимакова, 2/12

»-2326

РНБ Русский фонд

2004-4 27885

Актуальность исследования.

В современной экологической медицине важная роль отводится экологической лимфологии, в рамках которой проводятся исследования экологически негативных или позитивных влияний на лимфатическую систему, а также изучаются возможности управляемой санации внутренней среды через воздействие на лимфатическую систему (Бородин Ю.И., 1996, 1999). К экологически зависимой патологии в настоящее время относят хронические заболевания печени, обусловленные попаданием в организм токсикантов из окружающей среды, обладающих канцерогенной активностью (Колесников С.И., Мичурина C.B. с соавт., 1995: Ищенко И.Ю., 2003).

Данные исследований ВОЗ позволили отнести тетрахлорметан (четыреххлористый углерод) к наиболее приоритетным экотоксикантам окружающей среды и потенциально канцерогенным для человека веществам. Экспериментально доказано, что гепатит, вызываемый введением тетрахлорметана, по многим показателям сходен с клиническими формами гепатитов, а печень является органом, наиболее подверженным его воздействию (Шкурупий В.А., 1973, 1989; Фактор В.М. с соавт., 1982; Скакун Н.П. с соавт., 1985, 1987, 1992; Султанова JI.И., 1989; Колпаков М.А., 2001 и др.). Исследования регионарных лимфатических узлов печени при хронической интоксикации тетрахлорметаном, проведенные Е. П. Шарайкиной (1976, 1978), свидетельствуют о выраженном угнетении их дренажной и лимфопролиферативной функции.

В соответствии с концепцией Ю. И. Бородина (1989), морфофункциональный статус лимфатических узлов может рассматриваться в качестве маркера средового прессинга на лимфатическую систему. В связи с этим, параллельное исследование брыжеечного и печеночного лимфатических узлов при хронической интоксикации тетрахлорметаном позволит выявить характерные особенности их структурной организации, зависящие от регионарной анатомической локализации. В литературе отсутствуют точные количественные данные о структуре брыжеечных лимфатических узлов, являющихся регионарными к месту всасывания тетрахлорметана, в сочетании со структурным анализом регионарных лимфатических узлов печени.

Высокая токсичность тетрахлорметана объясняется образованием свободных радикалов, повышением активности перекисного окисления липидов (ПОЛ) (Губский Ю.И., 1989; Осипов А.Н. с соавт., 1990 и др.). Информация о содержании и накоплении таких маркеров ПОЛ в лимфе и крови, как свободные жирные кислоты (СЖК), позволяет судить о глубине и степени выраженности патологического процесса (Бородин Ю.И. с соав. 2000). В литературе отсутствуют сведения о содержании и распределении СЖК в центральной лимфе и периферической крови при хронической интоксикации тетрахлорметаном и в условиях ее коррекции.

Развитием методов дренажа интерстиция явилось создание биологически активных добавок к пище (БАД), соединяющих свойства лимфостимулятора и стимулятора внешнего дренажа (Бородин Ю.И., 2000). БАД к пище, разработанные в НИИ клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН, содержат растительные биофлавоноиды и сорбционную основу растительного происхождения (пищевые волокна), что позволяет использовать их для коррекции нарушений лимфатической системы (Асташова Т.А., Савицкая И.В., 1999). Вопрос об использовании фитопрепаратов, содержащих растения с антиоксидантным, сорбционным и гепатопротекторным действием ( БАД к пище «Лимфосан Г», «Оберег»), для коррекции структуры печени и лимфатических узлов при хронической интоксикации тетрахлорметаном нигде не освещался, хотя известно, что введение антиоксидантов резко уменьшает токсическое действие тетрахлорметана, предотвращается развитие некроза (Зыков A.A. с соавт., 1989; Inder R.E. et al.,1999).

Низкоэнергетическое гелий-неоновое лазерное излучение обладает лимфокоррегирующим и лимфостимулирующим действием в условиях развития патологического процесса (Шкурат Г.А., 2000, Казаков О.В., 2001), а чрезкожное низкоэнергетическое лазерное облучение проекции тимуса способствует восстановлению морфофункциональных изменений в лимфатических узлах в условиях циркуляторной гипоксии (Асташов В.В., 1998). Отсутствие научных данных об особенностях структурных преобразований печеночных и брыжеечных лимфатических узлов, структуре печени, содержании и распределении СЖК в центральной лимфе и периферической крови при хронической интоксикации тетрахлорметаном в условиях сочетанной фито- и лазерной коррекции явилось основанием для выполнения исследования и обусловливает актуальность работы с научной и практической точек зрения.

Цель исследования.

Выявить особенности структурных преобразований в лимфатическом регионе печени и тонкой кишки при хронической интоксикации тетрахлорметаном (ССЦ) и в условиях коррекции низкоэнергетическим лазерным излучением и фитопрепаратами.

Задачи исследования:

1. Изучить морфофункциональное состояние печеночных, брыжеечных лимфатических узлов, печень, центральную лимфу при хронической интоксикации ССЛ4.

2. Исследовать морфофункциональное состояние печеночных, брыжеечных лимфатических узлов, печень, центральную лимфу при хронической интоксикации ССЦ в условиях коррекции фитопрепаратами (биологически активные добавки к пище (БАД) «Лимфосан Г» и «Оберег»).

3. Изучить морфофункциональное состояние печеночных, брыжеечных лимфатических узлов, печень, центральную лимфу при хронической интоксикации ССЦ в условиях чрезкожного воздействия низкоэнергетическим гелий-неоновым лазером на проекцию тимуса.

4. Выявить морфофункциональные преобразования в печеночных, брыжеечных лимфатических узлах и печени при хронической интоксикации ССЦ в условиях сочетанной коррекции фитопрепаратами (БАД к пище «Лимфосан Г» и «Оберег») и низкоэнергетическим гелий-неоновым лазерным облучением проекции тимуса.

Научная новизна.

В работе впервые дана характеристика особенностей структурной организации брыжеечных лимфатических узлов при пероральном хроническом введении экотоксиканта тетрахлорметана, а также анализ содержания и распределения свободных жирных кислот (СЖК) в центральной лимфе и периферической крови.

Полученные данные расширяют представление о структурно-клеточной организации печеночных лимфатических узлов при моделировании хронического токсического гепатита (хроническая интоксикация ССЦ в сочетании с алкогольной интоксикацией).

Впервые проведено структурное исследование печеночных и брыжеечных лимфатических узлов, печени, а также проанализировано содержание и распределение СЖК при хронической интоксикации организма ССЦ в условиях чрезкожного гелий-неонового низкоэнергетического облучения проекции тимуса. Показано лимфостимулирующее действие облучения на структуру лимфатических узлов и нормализация процессов ПОЛ.

Впервые проведено структурное исследование печеночных и брыжеечных лимфатических узлов, печени, а также проанализировано содержание и распределение СЖК при хронической интоксикации организма ССЦ в условиях применения фитопрепаратов (БАД к пище «Лимфосан Г» и «Оберег»). Показано восстанавливающее действие фитопрепаратов на морфофункциональное состояние исследуемых объектов при моделировании хронического токсического поражения печени.

Впервые показано на морфологическом уровне, что низкоэнергетическое гелий-неоновое лазерное облучение тимуса способствует повышению эффекта действия фитопрепаратов при хроническом токсическом гепатите.

Практическая значимость.

Обнаруженные характерные структурные преобразования в брыжеечных и печеночных лимфатических узлах, особенности содержания и распределения СЖК в лимфе и крови при токсическом поражении печени позволят производить адекватный подбор лекарственных средств для коррекции функций лимфатической системы, восстановления про-антиоксидантного равновесия в тканях.

Полученные структурные данные об активации лимфотока, Т-зависимого звена иммунного ответа в лимфатических узлах и восстановлении распределения СЖК в лимфе и крови при хроническом токсическом гепатите в условиях чрезкожного гелий-неонового лазерного облучения проекции тимуса позволяют сделать заключение о ценности этого способа коррекции для практического здравоохранения и целесообразности его дальнейшего изучения.

Улучшение транспортной функции и стимуляция лимфопролиферативных процессов в лимфатических узлах, выявленные нами при коррекции токсического гепатита фитопрепаратами (БАД к пище «Лимфосан Г» и «Оберег»), является аргументом для использования этих препаратов в качестве вспомогательных средств при лечении гепатитов. Показано, что применение фитопрепаратов восстанавливает содержание и распределение СЖК в центральной лимфе и периферической крови, что свидетельствует о повышении тканевой устойчивости к свободно-радикальному окислению, которую определяют биофлавоноиды, содержащиеся в лекарственных растениях.

Результаты исследования сочетанного использования фитопрепаратов (БАД к пище «Лимфосан Г» и «Оберег») и низкоэнергетического гелийнеонового лазерного облучения проекции тимуса для коррекции состояния хронического токсического гепатита показали перспективность применения данного метода в восстановительной медицине и профилактической лимфологии, направленного на улучшение метаболизма клеток печени, восстановление структурно-функциональной организации регионарных лимфатических узлов и усиление дренажно-детоксикационного потенциала в лимфатическом регионе.

Результаты работы позволяют разработать и расширить схемы вспомогательной терапии пациентов, страдающих токсическим гепатитом в условиях реабилитационных отделений стационаров и санаторно-курортных учреждений.

Положения, выносимые на защиту:

1. Хроническая интоксикация ССЦ вызывает одновременные структурные преобразования в печеночном и брыжеечном лимфатических узлах, выраженность которых зависит от их регионарной локализации и функциональной специализации, изменяет содержание и распределение свободных жирных кислот (СЖК) в центральной лимфе и периферической крови.

2. Низкоэнергетическое гелий-неоновое лазерное облучение проекции тимуса при хронической интоксикации ССЦ активирует транспортную функцию печеночного лимфатического узла (увеличение площади мозгового вещества), увеличивает размеры Т-зависимой зоны брыжеечного и печеночного лимфатических узлов, способствует восстановлению кровообращения в печени и содержания СЖК в центральной лимфе и периферической крови.

3. Пероральное введение фитопрепаратов (БАД к пище "Лимфосан Г» и «Оберег») при хронической интоксикации ССЦ активирует транспортную функцию печеночных лимфатических узлов (увеличение размеров мозгового вещества) и лимфопролиферативную функцию брыжеечных лимфатических узлов (увеличение размеров коркового вещества), восстанавливает соотношение СЖК в центральной лимфе и периферической крови, структурные соотношения в печени.

4. Сочетанное применение облучения проекции тимуса и введения фитопрепаратов (БАД к пище "Лимфосан Г» и «Оберег») при хронической интоксикации ССЦ способствует более выраженной активации транспортной функции печеночных лимфатических узлов (увеличение размеров мозговых синусов), восстановлению структуры печени, активации лимфопролиферативной функции и восстановлению структурных соотношений брыжеечных лимфатических узлов в сравнении с монокоррекцией.

ВЫВОДЫ

1. Хроническая интоксикация СС14 вызывает в абдоминальных висцеральных лимфатических узлах характерные для их функциональной специализации структурные преобразования. В печеночных лимфатических узлах, являющихся регионарными к печени, они выражены в большей степени, чем в брыжеечных лимфатических узлах, регионарных по отношению к месту поступления токсиканта. В периферической крови при хронической интоксикация СС14 выявлено увеличение пула свободных жирных кислот (СЖК), по сравнению с центральной лимфой, свидетельствующее об активации процессов перикисного окисления липидов (ПОЛ) и развитии токсиколимфии.

2. При хронической интоксикация СС14 структурно-функциональная организация регионарных лимфатических узлов печени соответствует выраженному компактному типу: корковое вещество преобладает над мозговым, изменяется лимфопоэтическая функция - уменьшаются размеры Т- и В-зависимых зон в лимфатических узлах на фоне увеличения количества незрелых лимфоидных клеток в структурно-функциональных зонах, нарушается транспорт лимфы через лимфатический узел (расширение краевого синуса) и увеличиваются размеры его капсулы, что указывает на деструктивные и склеротические изменения в лимфатических узлах в результате токсиколимфии.

3. Хроническая интоксикация СС14 вызывает характерные морфофункциональные преобразования в брыжеечных лимфатических узлах, являющиеся структурным ответом на регионарную интоксикацию: размеры В-зависимой зоны лимфатических узлов увеличиваются за счет возрастания площади коркового плата, мозговых тяжей и вторичных лимфоидных узелков, нарушается прямой транспорт лимфы через лимфатические узлы, что подтверждается изменением функциональной специализации лимфатических узлов (компактный тип) и уменьшением размеров мозговых синусов.

4. Низкоэнергетическое гелий-неоновое лазерное облучение тимуса при хронической интоксикации ССЦ обладает лимфокорригирующим и лимфостимулирующим действием : в печеночных лимфатических узлах выявлено увеличение размеров Т- и В-зависимых зон, числа незрелых лимфоидных клеток в его структурно-функциональных зонах, усиление транспортной функции; в брыжеечных лимфатических узлах обнаружено увеличение размеров Т- зависимой зоны; в центральной лимфе определено приближение величины пула СЖК к контрольным значениям, соотношение долевых вкладов кислот приближается к условиям физиологической жизнедеятельности; в печени - увеличение размеров синусоидных капилляров.

5. Применение фитопрепарата (БАД к пище "Лимфосан-Г") при хронической интоксикации ССЦ обладает лимфокорригирующим действием и способствует восстановлению структурно-функциональных взаимоотношений в лимфатических узлах и печени: в печеночных и брыжеечных лимфатических узлах выявлено увеличение размеров Т-зависимой зоны, усиление транспортной функции; в центральной лимфе пул СЖК превышает таковой в периферической крови, обнаружено перераспределение СЖК с увеличением доли насыщенных кислот; в печени выявлено увеличение численной плотности гепатоцитов и синусоидальных клеток, по сравнению с группой без коррекции.

6. При хронической интоксикации ССЦ в условиях применения фитопрепарата (БАД к пище "Оберег") в печеночных и брыжеечных лимфатических узлах выявлена активация транспортной (увеличение размеров мозгового вещества, мозговых синусов) и лимфопоэтической функций (увеличение числа незрелых лимфоидных клеток, размеров В-зависимой зоны), в центральной лимфе пул СЖК превышает таковой в периферической крови, при уменьшении вклада ненасыщенных СЖК, в печени достоверно увеличиваются размеры синусоидных капилляров по сравнению с группой без фитокоррекции.

7. Сочетанное применение фитопрепарата (БАД к пище "Лимфосан-Г") и гелий-неонового лазерного облучения тимуса при хронической интоксикации СС14 оказывает выраженное лимфокорригирующее действие на лимфатические узлы, способствует восстановлению цитоархитектоники печени: в печеночных лимфатических узлах выявлена активация транспортной и лимфопролиферативной функций (увеличение размеров Т-зависимой зоны); в брыжеечных лимфатических узлах увеличиваются размеры наружных и глубоких отделов (Т-зависимая зона) коркового вещества, что указывает на активацию их барьерно-фильтрационной функции; в печени усиливается регенераторный потенциал - увеличивается численная плотность гепатоцитов и диплокариоцитов.

8. Сочетанное применение фитопрепарата (БАД к пище "Оберег") и низкоэнергетического гелий-неонового лазерного облучения тимуса при хронической интоксикации СС14 обладает лимфостимулирующим эффектом, способствует восстановлению структурно-функциональной организации лимфатических узлов и печени в большей степени, чем при монокоррекции фитопрепаратом: в лимфатических узлах активируется транспортная функция, в печеночных лимфатических узлах в большей степени увеличиваются размеры Т- зависимой зоны; а в брыжеечных - размеры В-зависимой зоны; в печени обнаружено значительное увеличение размеров синусоидов и максимальное восстановление соотношения синусоидальных клеток к общему числу гепатоцитов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, на основании выполненных исследований можно заключить, что использованные нами фитопрепараты (БАД к пище

Лимфосан Г" и "Оберег") обладают лимфостимулирующим, лимфокоррегирующим и гепатопротекторным действием. Б АД к пище «Лимфосан-Г» в большей степени, по нашему мнению, активирует репаративные процессы в печени и лимфатических узлах, а БАД к пище «Оберег» обладает противоспалительным действием в отношении выбранных объектов исследования. Важным результатом нашей работы является доказательство синергичности действия низкоэнергетического гелий-неонового лазерного излучения с фитопрепаратами, а в частности усиления структурно-восстановительных процессов в печени лимфатических узлов при токсическом гепатите.

При пременении фитопрепаратов и низкоэнергетического лазерного излучения нами выявленно восстановление соотношения пулов СЖК в центральной лимфе и сыворотке крови, что свидетельствует об активности снижения процессов перикисного окисления липидов.

Результаты исследований, полученные в нашей работе свидетельствуют, что фитопрепараты БАД к пище "Лимфосан Г" и "Оберег" использованные нами для коррекции токсического гепатита предотвращают развитие генерализованного эндотоксикоза в организме и обладают лимфопротекторным действием. Их действие, по-видимому, реализуется в компенсации и торможении II стадии интоксикации - лимфотоксикоза (Буянов В. М., Алексеев А. А., 1990).

171