Автореферат и диссертация по медицине (14.03.03) на тему:Патогенетические механизмы нарушений врожденного и адаптивного иммунитета, системы гемостаза и межклеточных взаимоотношений при респираторно-вирусных инфекциях у часто болеющих детей
- Ученая степень
- кандидата медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.03.03
Автореферат диссертации по медицине на тему Патогенетические механизмы нарушений врожденного и адаптивного иммунитета, системы гемостаза и межклеточных взаимоотношений при респираторно-вирусных инфекциях у часто болеющих детей
На правах рукописи
Карпова Наталья Игоревна
Патогенетические механизмы нарушений врожденного и адаптивного иммунитета, системы гемостаза и межклеточных взаимоотношений при респираторно-внрусных инфекциях у часто болеющих детей
14.03.03. - Патологическая физиология
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
-8 ДЕК 2011
Чита - 2011
005003801
Работа выполнена в ГБОУ ВПО "Читинская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения и социального развития РФ
Научный руководитель:
доктор медицинских наук,
профессор Малежик Лидия Павловна
Официальные оппоненты:
доктор медицинских наук,
профессор Бишарова Галина Ивановна
кандидат медицинских наук Фефелова Елена Викторовна
Ведущая организация:
ГБОУ ВПО "Алтайский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения и социального развития РФ
Защита состоится декабря 2011 года в 9.00 на заседании диссертационного совета Д 208.118.01 при ГБОУ ВПО "Читинская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения и социального развития РФ по адресу: 672090, г. Чита, ул. Горького, 39 а.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБОУ ВПО "Читинская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения и социального развития РФ (адрес: 672090, г. Чита, ул. Горького, 39 а).
Автореферат разослан " ££ " 2011г.
Ученый секретарь
диссертационного совета Д 208. 118.01, д.м.н., профессор
И.Н. Гаймоленко
Общая характеристика работы
Актуальность проблемы. К группе часто длительно болеющих относят детей с повторными респираторными вирусными инфекциями (ОРВИ), возникающими более 5-6 эпизодов в год (Беляков В.И. и др. 2001; Шерстобоев Е.Ю. и др. 2002; Самсыгина Г.А., Коваль Г.С. 2008; Аминова А.И. и др. 2009). Такие дети характеризуются повышенной восприимчивостью к инфекционным агентам. Ряд авторов (Железни-кова Г.Ф. 1995; Самсыгина Г.И., 2005, 2010; Харламова Ф.С. и др., 2009; Ярцев М.Н. и др., 2006) считает, что причиной тому является функциональная незрелость иммунной системы.
Патогенетические нарушения в системе иммунитета могут формироваться в любом звене иммунного ответа. Нас интересовало состояние первого звена - рецепторов, воспринимающих действие патогена. К таким рецепторам относятся Toll - рецепторы, присутствующие на всех иммунокомпетентных клетках и эпителиоцитах, контактирующих с инфекционными агентами.
Структурные изменения в ТоН-рецепторах возможны при полиморфизме генов, кодирующих эти рецепторы. В случае генетических аномалий осуществляется неполноценный контакт рецептора с патогеном, ограничивается внутриклеточная сигнализация и синтез медиаторов воспаления (Симбирцев A.C., Громов А.Ю., 2005).
В настоящее время известно 10 разновидностей То11-рецепторов у людей. Нас заинтересовал То11-4, лигандом для которого является ли-пополисахарид бактерий и ДНК вирусов и То11-6, реагирующий на ЛПС грамотрицательных бактерий.
Основываясь на инициирующей роли То11-рецепторов в противо-инфекционной защите, мы попытались связать их генетические дефекты с уровнем-врожденного и приобретенного иммунитета у часто болеющих детей, а также состоянием системы гемостаза и степенью адгезивной активности форменных элементов крови, определяющей реологические свойства крови и микроциркуляцию.
Цель исследования: изучить состояние систем иммунитета, гемостаза, коагрегации форменных элементов крови при респираторно-вирусных инфекциях у часто болеющих детей, и выявить роль генетических аномалий Toll-4(Asp299Gly) и То11-6(Ser249Pro) рецепторов в их функционировании.
Для достижения поставленной цели решались следующие задачи: 1. Выявить частоту встречаемости генетических дефектов То11-4 (Asp299Gly) и Toll-6(Ser249Pro) рецепторов среди здоровых и часто болеющих детей.
2. Исследовать уровень врожденного и адаптивного иммунитета при ОРВИ у часто болеющих детей и оценить роль полиморфизма То11-4 (Аяр29901у) и То И-6 (Бег249Рго) рецепторов в функциональной активности элементов иммунной защиты.
3. Изучить состояние сосудисто-тромбоцитарного гемостаза и коагу-ляционного потенциала при респираторно-вирусной инфекции, и выяснить влияние полиморфизма генов То\\-4(А8р299Ыу) и То 11-6 (Бег249Рго) рецепторов на функции тромбоцитов и уровень гемостаза у обследуемых детей.
4. Определить адгезивные свойства лимфоцитов, эритроцитов и тромбоцитов при ОРВИ у часто болеющих детей и влияние полиморфизма генов То\\-А(А$р299ау) и То11-6(Бег249Рго) рецепторов на образование клеточных ассоциаций.
Научная новизна. Установлено, что одной из причин дисфункции в системе иммунитета у детей часто болеющих ОРВИ является генетический дефект в То11-4(Аяр29901у) и То11-6 (8ег249Рго) рецепторах, воспринимающих действие патогена. Среди таких детей 55,6% являются носителями мутаций в То11-4 и 75% в То11-6 рецепторах.
Предрасположены к частым заболеваниям ОРВИ дети-носители ал-леля С гена ТоИ-4(Азр299в1у) рецептора и аллеля Р гена То11-6(Бег249Рго) рецептора.
Выявлено, что генетические дефекты в ТоИ-4(Авр29901у) и То11-6 (,Бег249Рго) рецепторах обусловливают снижение противоинфекцион-ной защиты за счет несостоятельности врожденного иммунитета, ограничения синтеза иммуноглобулинов (б^А, 1§А, ^М, ^ и его подклассов), уменьшения количества провоспалительных цитокинов (1Ь-1 р, ФНО-а, 1Ь-8) и увеличения иммуносупрессирующих факторов -1Ь-10 и 1Ь-111А.
Обнаружено, что гиперкоагуляция, развивающаяся при ОРВИ у часто болеющих детей более выражена при наличии аномалий в То11-рецепторах. Агрегационная функция тромбоцитов изменяется в зависимости от состояния То11-рецепторов. При мутациях в То11-4 (Азр29901у) рецепторах индукторы агрегации (адреналин, АДФ, коллаген) усиливают агрегационную активность тромбоцитов; при аномалиях в То11-6(Бег249Рго) рецепторах - уменьшают.
У детей часто болеющих ОРВИ при очередном заболевании индуцированы адгезивные свойства форменных элементов крови с увеличением числа лимфоцитарно-тромбоцитарных, эритроцитарно-тромбо-цитарных и эритроцитарно-лейкоцитарных коагрегатов в крови. При генетических дефектах в ТоИ-4 и То11-6 рецепторах клеточные ассоци-
ации выражены значительнее, чем у больных детей, не отягощенных мутациями в сигнальных рецепторах.
Теоретическая и практическая значимость работы. Полученные данные о состоянии систем врожденного и адаптивного иммунитета, гемостаза и адгезивных свойств форменных элементов крови у часто болеющих детей с полиморфными вариантами генов То11-4 и То11-6 рецепторов, позволят расширить представление о патогенетических особенностях течения ОРВИ при различной врожденной предрасположенности к респираторным заболеваниям.
Проведенный анализ частоты встречаемости полиморфных вариантов генов То11-4 и То11-6 рецепторов и выявление генетических маркеров ОРВИ позволит создать группу диспансерного наблюдения с индивидуальной профилактикой и лечением ОРВИ.
Внедрение в практику. Теоретические положения, раскрываемые в диссертации внедрены в учебный процесс кафедры патологической физиологии и кафедры детских инфекций ГБОУ ВПО Читинская государственная медицинская академия Министерства здравоохранения и социального развития РФ .
Апробация диссертации. Основные положения и результаты исследования доложены на: I Международной научно-практической интернет-конференции "Состояние здоровья: медицинские и психологические аспекты" (Чита-Славянск, 2009), II Международной научно-практической интернет-конференции "Состояние здоровья: медицинские и психологические аспекты" (Чита-Славянск, 2011), Всероссийской научно-практической конференции посвященной 55-летию Читинской государственной медицинской академии (Чита, 2008), VII международной конференции: гемореология и микроциркуляция (Ярославль, 2009), Всероссийской научно-практической конференции с международным участием "Итоги эпидемии гриппа А (НШ1)" (Чита, 2010), Научно-практической конференции с международным участием "Медицина - новое в теории и практике" (Шарджа, 2011).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 12 печатных работ, из которых 2 в ведущих рецензируемых научных журналах и изданиях, определенных ВАК Министерства образования и науки РФ.
Основные положения, выносимые на защиту
1. Среди детей с частыми заболеваниями ОРВИ выявлены генетические дефекты в То11 -4(АБр29901у) и То11 -6(5ег249Рго) рецепторах, регулирующих врожденный и адаптивный иммунитет. В 55,6% случаев отмечены мутации в генах кодирующих ТоИ-4 рецепторы и в
75% - в генах То11-6 рецепторов. Подобные дефекты встречаются и среди здоровых детей, эпизодически болеющих респираторными инфекциями. Из них 17,1% являются носителями генетических дефектов в То11-4 рецепторах и 65% в То11-6 рецепторах.
2. Выявленные аномалии в То11-4 и То11-6 рецепторах сказываются на несостоятельности врожденного и адаптивного иммунитета. Иммунодефицит у детей с частыми эпизодами ОРВИ проявляется низкой фагоцитарной активностью, снижением концентрации провоспали-тельных цитокинов (1Ь-1р, 1Ь-8, ФНО-а) и повышенным содержанием иммуносупрессирующих факторов 1Ь-10 и 1Ь-111А.
Респираторно-вирусная инфекция у часто болеющих детей увеличивает синтез 1§С, 1йМ и уменьшает содержание в^А и 1§А. Наличие генетических дефектов в То11-рецепторах сопряжено с уменьшением синтеза отмеченных иммуноглобулинов по сравнению с группой больных детей, не являющихся носителями генетических мутаций.
3. У детей в острый период при респираторных инфекциях в крови развивается гиперкоагуляция, степень которой увеличивается при генетических изменениях в То11-4 и То11-6 рецепторах за счет большей концентрации фибриногена, РФМК и ингибиции фибринолиза. Аг-регационная функция тромбоцитов зависит от состояния То11-рецеп-торов. При генетических дефектах в То11-4 (Аэр29901у) рецепторах индукторы агрегации (адреналин, АДФ, коллаген) увеличивают аг-регационные свойства тромбоцитов. При аномалиях в То11-6(Бег249Рго) рецепторах - уменьшают.
4. При ОРВИ у часто болеющих детей в крови индуцированы адгезивные свойства форменных элементов крови с увеличением числа лим-фоцитарно-тромбоцитарных, эритроцитарно-тромбоцитарных и лей-коцитарно-эритроцитарных коагрегатов. При замене аллелей в генах То11-4 и То11-6 рецепторах клеточные ассоциации выражены значительнее, чем у больных детей без генетических аномалий.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 138 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, главы собственных исследований, обсуждения полученных данных, выводов, практических рекомендаций, содержит 24 таблицы, иллюстрирована 7 рисунками. Указатель литературы включает 243 источника, из которых 156 отечественных и 87 зарубежных.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Материалы и методы исследования
В работе с обследуемыми лицами соблюдались этические принципы, предъявляемые Хельсинской Декларацией Всемирной Медицинской Ассоциации (World Medikal Association Declaraition of Helsinki 1964,2000 ред.).
Клиническое и лабораторное обследование проведено у 100 детей обоего пола в возрасте от 2 до 3 лет, поступивших в детскую инфекционную больницу г. Чита. Дети включались в группу часто болеющих детей на основании критериев, предложенных В.Ю. Альбицким и А.А. Барановым (1986г.).
Критерии включения: частота эпизодов ОРВИ более 6 раз в году. Наличие ОРВИ на момент обследования.
Критерии исключения: наличие хронических заболеваний бронхо-легочной системы, соматическая патология различных органов, аллергические заболевания.
Из числа обследуемых у 49 % был диагностирован грипп, у 26 % - парагрипп, у 5% - аденовирусная инфекция, у 4 % - респираторно-синцитиальный вирус. У 16 % этиология ОРВИ не определена.
Контрольную группу составили 35 детей с редкими эпизодами ОРВИ, сопоставимыми по возрасту и полу с группой часто болеющих.
На генетический полиморфизм То11-4 и То11-6 рецепторов обследовано 76 здоровых детей и 100 часто болеющих ОРВИ.
Методы исследования
Молекулярно-генетическое исследование для выявления генетических мутаций проводилось методом ПЦР с аллель-специфичными праймерами (НПФ "Литех", Россия, Москва). Выделение ДНК осуществлялось при помощи наборов "ДНК-экспресс кровь" (НПФ "Литех", Россия, Москва). Детекция продуктов амплификации проводилась электрофоретическим способом в 3 % агарозном геле.
Определение фагоцитарной активности нейтрофилов. Назальную (без продигиозана) и стимулированную (продигиозаном) фагоцитарную активность нейтрофилов исследовали по их способности поглощать частицы латекса (Меньшиков В.В., 1987).
Исследование системы комплемента. Компоненты комплемента определяли методом твердофазного ИФА с применением набора реагентов ООО "Цитокин" (г. Санкт-Петербург).
Измерение уровня цитокинов (lL-ip, IL-4, TNFoc, IL-10, IL-8, IL-1RA) и иммуноглобулинов (IgA, slgA, IgM, IgG и его подклассов)
проводили методом твердофазного ИФА с использованием реагентов ЗАО "Вектор-Бест" (г. Новосибирск).
Оценку агрегационной функции тромбоцитов осуществляли турбо-диметрическим методом по G. Born (1962). Для исследования спонтанной, АДФ, адреналин и коллаген индуцированной агрегации использовали соответствующие реактивы ООО "Технология-стандарт" (г. Барнаул).
Исследование системы гемостаза (АЧТВ, МНО, концентрацию фибриногена и фибринмономерных комплексов - РФМК, эуглобулиновый фибринолиз, экспрессию тканевого фактора) проводили методами, изложенными в современных руководствах (Баркаган З.С., Момот А.П.).
Лимфоцитарно-тромбоцитарную адгезию (ЛТА и ЛТИ) определяли методом, предложенным Ю.А. Витковским (1999).
Исследование лейкоцитарно-эритроцитарных (ЛЭА) и эритро-цитарпо-тромбоцитарных агрегатов (ТЭА) осуществляли камерным методом в мазках крови.
Статистическая обработка материала: полученные данные обработаны методом вариационной статистики для связанных и не связанных между собой наблюдений с помощью пакетов программ Microsoft Excel 2007, STATISTICA 6,0 (StatSoft Inc., США), с определением значимости различий при достигнутом уровне значимости р<0,05. Перед началом анализа вариационные ряды тестировались на нормальность с использованием критерия Шапиро-Уилка W. При нормальном распределении использовались параметрические методы статистики - критерий Стьюдента (t-тест). Изучаемые показатели представлены в виде средних величин со стандартным отклонением (M±SD). При ненормальном распределении признака применялся критерий Манна - Уитни (U-тест). Для сравнения качественных показателей использовался критерий X2 (Пирсона), Для оценки ассоциаций рассчитывали относительный риск OR по формуле OR=ad/bc. Где а - число лиц с наличием анализируемого маркера среди больных, b - его отсутствие; с и d - число лиц соответственно с наличием и отсутствием маркера в контрольной группе. Величина OR=l указывает на отсутствие ассоциации, OR>l - имеет место при положительной ассоциации (фактор риска) и 0R<1 - отрицательная ассоциация аллеля с генотипом, расцениваемый как фактор устойчивости (Зайцев В.М., 2006).
РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
1. Распространенность полиморфных вариантов генов То11-4 (Asp299Gly) и Toll-б (Ser249Pro) рецепторов среди здоровых детей и часто болеющих ОРВИ, проживающих в г. Чите
Молекулярно-генетические исследования показали, что среди здоровых детей 82,9 % являются носителями нормальной гомозиготы (Asp/Asp) в гене lo\\-A(Asp299Gly) рецептора, 9,3 % - обладают гетерозиготным вариантом (Asp/Gly), в 7,8 % - обнаружена полная замена аллелей (Gly/Gly).
Таблица 1
Распределение частот аллелей и генотипов полиморфного маркера Asp299Giy гена То 11-4 рецептора у детей с острой вирусной инфекцией в сравнении с контрольной группой
Генетический маркер Контрольная группа (п=76) Больные ОРВИ (в=90) Р OR
Аллель А 0,875 0,423 р<0,05 0,5
Аллель О 0,125 0,577 р<0,05 4,6
Генотип АярШр 63(82,9 %) 40(44,4 %) р<0,05 0,5
Генотип А5рЮ\у 7(9,3 %) 18(20 %) р<0,05 2,1
Генотип САуЮ1у 6(7,8 %) 32(35,6 %) р<0,05 5,6
Примечание: у} - тест, р - значимость различий между показателями больных и здоровых детей
Таким образом, здоровые дети проживающие в г. Чите, в 17,1 % являются носителями генных мутаций в То11-4 рецепторе.
Среди детей, часто болеющих ОРВИ, 44,4 % обладают нормальной аллелью в гене То11-4 рецептора (генотип Asp/Asp), 20 % имеют гетерозиготный вариант гена (генотип Asp/Gly) и 35,6 % обладают му-тантной аллелью (генотип Gly/Gly). В общей сложности у этой группы детей генетические дефекты в То11-4 рецепторе встречаются в 55,6 %. Расчет отношения шансов (OR) выявил положительную ассоциацию аллеля G и генотипа Gly/Gly при респираторной инфекции, что указывает, на повышенный риск развития данной патологии у детей, имеющих полиморфизм (Asp299Gly) в гене То11-4 рецептора (табл. 1). Среди ЧБД процент мутаций в гене (Ser249Pro) Toll-6 рецептора увеличен до
75 %. Мутантных гомозигот 25 % (Pro/Pro), что в 1,5 раза больше, чем у здоровых (табл. 2).
Расчет отношения шансов (OR) выявил положительную ассоциацию аллеля Р с генотипом Pro/Pro. Это дает основание предполагать, что мутантная аллель Р маркирует повышенный риск высокой восприимчивости детей к ОРВИ.
Таблица 2
Распределение частот аллелей и генотипов полиморфного маркера Ser249Pro гена То11-6 рецептора у детей с респираторно-вирусной патологией в сравнении с группой контроля
Генетический маркер Контрольная группа (п=76) Больиые ОРВИ (п=90) Р OR
Аллель S 0,655 0,375 р<0,05 0,8
Аллель Р 0,345 0,625 р<0,05 1,4
Генотип Ser/Ser 35(35 %) 25(25 %) р<0,05 0,7
Генотип Ser/Pro 48(48 %) 50(50 %) р>0,05 1,2
Генотип Pro,'Pro 17(17%) 25(25 %) р<0,05 1,5
Примечание: у} - тест, р - значимость различий между показателями больных и здоровых детей.
Кроме того, среди больных детей выявлены 4 носителя сочетанных мутантных аллелей генов To\\-A(Asp299Gly) и То! 1-6(Ser249Pro) рецепторов.
2. Состояние врожденного и адаптивного иммунитета при ОРВИ у часто болеющих детей, имеющих полиморфизм генов То11-4 (Asp299Gly) и Toll-6 (Ser249Pro) рецепторов
Основную роль в противовирусной защите играют элементы врожденного иммунитета. У часто болеющих детей в период ОРВИ снижена фагоцитарная активность (фагоцитарный индекс и фагоцитарное число) по сравнению с показателями здоровых детей. После стимуляции продигио-заном в условиях in vitro фагоцитарная активность крови больных детей несколько увеличивается, до 34,4±3,9 %, но фагоциты реагируют в 2 раза слабее, чем аналогичные клетки здоровых детей - 61±4,2 %. Это говорит о дефиците резервных возможностей фагоцитов у часто болеющих детей.
Фагоциты детей, носителей генетических дефектов То11-4 рецепторов реагируют на стимуляцию продигиозаном очень слабо, особенно при гетерозиготном варианте (Asp/Gly) - 29,4±3,1 %, при контроле
61±4,2 %. Фагоцитарный индекс и фагоцитарное число при этом значительно ниже, чем у больных с нормальным генотипом (Asp/Asp).
Особенно ярко выражен фагоцитарный дефект при генетических мутациях в То11-6 рецепторах. Фагоцитарный индекс и поглотительная активность у мутантных генотипов Ser/Pro - 26,1 ±2,1 % и Pro/Pro -30±3,2 % ниже, чем у нормального генотипа Ser/Ser - 44,3±4,2 %. Фагоциты гетерозиготного варианта Ser/Pro и гомозиготного Pro/Pro практически не отвечают на стимуляцию.
Следовательно, при полиморфизме генов сигнальных рецепторов То11-4 и То11-6 снижается способность к распознаванию соответствующего лиган-да, что ограничивает активацию фагоцитов после встречи с патогеном.
Врожденный иммунитет обеспечивается не только фагоцитозом, но и системой комплемента, которая обладает выраженной цитотоксично-стью по отношению к патогену. Наши исследования показали, что система комплемента у больных ОРВИ активирована с увеличением концентрации С5аи С1-ингибитора.
У детей, имеющих полиморфные варианты генов То11-4 и То11-6 рецепторов содержание анафилотоксина С5а и С1-ингибитора значительно выше, чем в крови больных, не имеющих генетических изменений в То11-рецепторах. Для То11-4 рецепторов концентрация С5а с генотипом Asp/Gly - 58,6 нг/мл, Gly/Gly - 50,5 нг/мл, С1 ингибитора у полиморфных Gly/Gly - 1021,7 нг/мл. Для Toli-6 рецепторов концентрация С5а у носителей генотипа Ser/Pro - 30,4 нг/мл, Pro/Pro - 60,5 нг/мл; С1 ингибитора Pro/Pro ~ 947,5 нг/мл. В контроле содержание С5а -12,2 нг/мл, С1 ингибитора - 346,6 нг/мл.
Чрезмерная индукция анафилотоксина С5а у больных с полиморфными вариантами генов Toll - рецепторов может играть неблагоприятную роль в течении ОРВИ, так как С5а вызывает массивный отек слизистых, который определяет клинические особенности местных проявлений инфекции.
Функциональная несостоятельность сигнальных ТоИ-рецепторов при полиморфизме в кодирующих их генах отражается на внутриклеточных реакциях и продукции медиаторов воспаления. Нас интересовал уровень цитокиновых реакций при респираторно-вирусных инфекциях и особенно их продукция при наличии полиморфных вариантов в рецепторах To\\-4(Asp299Gly) и То\\-6(Ser249Pro).
Наши исследования показали, что в общей группе часто болеющих детей, включающих все генотипы, при ОРВИ повышалась концентрация провоспалительных цитокинов (IL-113, ФНО-а) и хемокина IL-8.
Рис. 1. Концентрация цитокинов IL-1 (3, IL-8 у больных ОРВИ-носителей полиморфного варианта генаТо11-6(Ser249Pro) рецепторов (U-тест) *- значимость различий от нормальных гомозигот Ser/Ser.
Это естественная реакция, направленная на борьбу с вирусами. Содержание противовоспалительного цитокина IL-4 не изменяется в первые дни заболевания, но увеличивается концентрация IL-10 и ИЛ-IRA (антагониста рецепторов к IL-1P). Эти цитокины оказывают иммуно-супрессорный эффект. Усиленная их экспрессия в первые дни заболевания способствует ингибированию Thl-клеточного пути иммунитета, свойственного противовирусной защите.
При генетических аномалиях в То11-4 рецепторах мы не отметили четкой разницы в концентрации цитокинов между генотипами. Замена аллелей отразилась лишь на синтезе IL-1RA. Его содержание у детей с генотипом Gly/Gly выше, чем при других полиморфных вариантах.
При генетических дефектах в То11-6 рецепторах у больных ОРВИ уменьшался синтез IL-lp, ФНО-а, IL-8, и увеличивался IL-1RA по сравнению с группой детей без аномальных нарушений в сигнальных рецепторах (рис.1). Такая реакция иммунокомпетентных клеток в первые дни заболевания неблагоприятно сказывается на организации противоинфек-ционной защиты, и местное воспаление слизистой может приобрести затяжной характер с возможными бактериальными осложнениями.
Цитокины, выделенные в месте локального воспаления при ОРВИ регулируют синтез иммуноглобулинов.
Рис. 2. Концентрация slgA, IgM в крови у больных ОРВИ-носителей полиморфных вариантов гена Toll-6(Ser249Pro) рецепторов (U-тест) *- значимость различий от нормальных гомозигот Ser/Ser.
Полиморфизм генов, кодирующих Toll-4 (Asp299Gly) и То11-6 (Ser249Pro) рецепторы ограничивает синтез всех иммуноглобулинов (IgA, slgA, IgM, IgG), поэтому их продукция у больных с аномальными аллелями оказалась ниже, чем у аналогичных больных без генетических мутаций (рис. 2). Следовательно, генетические ограничения выработки антител являются одной из возможных причин несостоятельности противоинфекционной защиты у ЧБД.
3. Состояние гемостаза и влияние полиморфизма генов Asp299Gly То!1-4 и <$ег249Рго ТоП-6 рецепторов на его уровень у детей при частых ОРВИ
Несмотря на то, что основная нагрузка при вирусной защите падает на систему иммунитета, гемостатические реакции обязательно сопровождают иммунное реагирование (Кузник Б.И., Васильев В.Н., Цыбиков H.H., 1989; Витковский Ю.А., 1997; Кузник Б.И., 2010).
В наших исследованиях показано, что агрегационная функция тромбоцитов зависит от наличия полиморфизма генов, кодирующих То11-4 (Asp299Gly) и Toll-6 (Ser249Pro) рецепторы.
При мутациях в гене То11-4 рецептора, индукция АДФ, адреналином и коллагеном увеличивает способность тромбоцитов к агрегации. При генетических дефектах Toll-6 рецепторов индукция теми же агонистами уменьшает агрегационные свойства стимулированных тромбоцитов.
Мы полагаем, что различные эффекты индуцированной агрегации связаны с количеством экспрессированных рецепторов для использу-
емых индукторов и состоянием белков трансмембранной передачи сигнала. Возможно, при генетических дефектах в То11-6 рецепторах срабатывает система ингибиции внутриклеточной сигнализации.
Изменение в функциональной активности тромбоцитов сопряжено с реакциями коагуляционного гемостаза. У детей больных ОРВИ развивается гиперкоагуляция, которая выражается в укорочении времени рекальцификации, увеличении концентрации фибриногена и числа фибрин-мономерных комплексов (РФМК).
На фоне ускоренного образования фибрина угнетён фибринолиз. При генетических дефектах в То11-рецепторах степень гиперкоагуляции более выражена в трех показателях: концентрации фибриногена, числе фибрин-мономерных комплексов и скорости фибринолиза.
4. Особенности адгезивных свойств клеток крови у детей, больных ОРВИ при полиморфизме генов (Аяр299С1у) То11-4 и (Бег249Рго) ТоЦ-б рецепторов
Гиперкоагуляция, имеющаяся в крови детей при ОРВИ нарушает белковый состав крови, который отражается на адгезивных свойствах форменных элементов.
Нас интересовали три варианта розеток при ОРВИ: лимфоцитарно-тромбоцитарные, лейкоцитарно-эритроцитарные, тромбоцитарно- эрит-роцитарные коагрегаты.
Проведенные исследования показали, что при ОРВИ увеличивается лимфоцитарно-тромбоцитарная адгезия почти в два раза, что свидетельствует о напряженности клеточного иммунитета (Витковский Ю.А., и др. 2005-2010; Кузник Б.И., 2005-2010). Тромбоциты образуют клеточные кооперации не только с лимфоцитами, но и эритроцитами (ТЭА). У здоровых детей такие ассоциации составляют 5,0±0,4 %, у больных ОРВИ-32,1±2,8 % из 200 тромбоцитов, присоединивших к себе эритроциты.
Адгезивности подвержены эритроциты с пониженной резистентностью и деформированной мембраной. С ними ассоциируют наряду с тромбоцитами и лейкоциты, образуя лейкоцитарно-эритроцитарные коагрегаты (ЛЭА). У детей, страдающих ОРВИ, отмечено увеличение ЛЭА в 5 раз (24,9±2,9 %) по сравнению со здоровыми (5,3±0,б %).
Лейкоцитарно-эритроцитарные агрегаты представлены в основном нейтрофилами и моноцитами. Преобладают коагрегаты, образованные нейтрофилами (88,6±2,5 %), реже моноцитами (12,4±2,2 %).
Эритроциты, ассоциированные с тромбоцитами и лейкоцитами, подвержены экзоцитарному лизису, что обусловлено цитотоксичными свой-
ствами контактных клеток. При этом у эритроцитов выделяются прокоа-гулянтные факторы, поддерживающие гиперкоагуляцию. Экзоцитарный лизис приводит к уменьшению числа эритроцитов у больных.
Генетические дефекты в То11-4 и То11-6 не отражаются на степени тромбоцитарно-эритроцитарных ассоциаций. Однако количество образованных эритроцитарно-лейкоцитарных розеток (ЛЭА) увеличивается при мутациях в генах (Азр29901у) То11-4 и (Яег249Рго) То11-6 рецепторов (табл.3).
Патогенетическое значение образованных коагрегатов форменными элементами крови связано с нарушением микроциркуляции и увеличением прокоагулянтного потенциала крови.
Таблица 3
Содержание ауторозеток у пациентов носителей полиморфных аллелей Бег249Рю в гене То11-6 и Аэр299в1у в гене То11-4 (медиана, 25-75 перцентили)
Asp299Gly Ser249Pro
299Asp (п=40) Asp299Gly (4=18) 299Gfy (п=32) 249Ser (п=25) Ser249Pro (n=50) 249Pro (n~25)
ТЭА (%) 37,1 [34,5-42,3] 30,3 [20,8-31] р*<0,05 33,8 [29,5-40] 33,5 [23,3-45] 32,3 [31-40] 22,8 [11-32] р*<0,05
ЛЭА (%) 17,5 [11,8-18,8] 23,5 [17,5-25,8] р*<0,05 26,3 [17,8-33,5] р*<0,05 21,5 [20,5-42,3] 27 [24,5-42,3] р*<0,05 29,8 [22,5-42,3] р*<0,05
Примечание: U-тест, Р*-значимость различий по сравнению с группой носителей гомозиготного Asp/Asp генотипа для гена То11-4 и Ser/Ser генотипа для гена То11-6.
Таким образом, одной из причин высокой восприимчивости к ОРВИ является наследственная предрасположенность, обусловленная мутациями в генах 1о\\-А(А^р29901у) и То\\-6(Бег249Рго) рецепторов. Генетические дефекты в сигнальных рецепторах снижают функциональную активность иммунокомпетентных клеток, что определяет низкую противоинфекционную защиту.
выводы
1. Одним из патогенетических механизмов нарушений в системе иммунитета, гемостаза и адгезивных свойств форменных элементов крови у детей, часто болеющих ОРВИ, являются генетические дефекты в Toll-4(Asp299Gly) и Toll-6(Ser249Pro) рецепторах. Среди таких детей 55,6 % являются носителями мутации в То11-4 рецепторах и 75 % в генах То11-б рецепторов. Маркерами высокой восприимчивости детей к рес-пираторно-вирусным инфекциям являются аллель G гена Toll-4(Asp299Gly) рецептора и аллель Р гена Toll-6(Ser249Pro) рецептора.
2. У часто болеющих детей снижена фагоцитарная активность. Индуцирована система комплемента с увеличением уровня анафилаток-сина С5а и С1-ингибитора. У больных, носителей мутаций в генах ТоИ-4 и То11-6 рецепторов, несостоятельность врожденного иммунитета выражена более значительно.
3. При ОРВИ в первые дни заболевания увеличена концентрация провос-палительных цитокинов IL-lß, ФНОа, хемокина IL-8 и противовоспалительных цитокинов ILIO и IL-1RA. При аномалии в рецепторах Toll-4 и ТоН-6 синтез отмеченных цитокинов уменьшался у носителей гетерозиготных вариантов Asp/Gly в гене ТоИ-4 рецептора, а при мутациях в гене То11-6 снижался у гетерозигот Ser/Pro и гомозигот Pro/Pro.
4. В крови детей часто болеющих ОРВИ увеличено содержание IgM, IgG и его подклассов, уменьшена концентрация IgA и slgA. При генетических мутациях в То11-4 и То11-6 рецепторах синтез отмеченных иммуноглобулинов снижен, по сравнению с группой детей, не имеющих генетических дефектов в рассматриваемых рецепторах.
5. При ОРВИ, в первые дни заболевания спонтанная агрегация тромбоцитов не отличается от контроля. При индукции АДФ, адреналином и коллагеном агрегационная активность тромбоцитов больных детей увеличивается независимо от наличия или отсутствия генетических дефектов То11-4 и То11-6 рецепторов. Однако, аномальные аллели гена Toll-6 рецептора (Ser249Pro) ограничивают индуцированную активность.
6. В остром периоде у часто болеющих детей развивается гиперкоагуляция, которая сопровождается укорочением АЧТВ, увеличением концентрации фибриногена и фибрин-мономерных комплексов (РФМК), ин-гибицией фибринолиза. У больных с мутациями в генах ТоИ-4 и То11-6 рецепторов отмеченные изменения выражены в большей степени.
7. У детей при ОРВИ усилена лимфоцитарно-тромбоцитарная адгезия (JITA), увеличен лимфоцитарно-тромбоцитарный индекс (ЛТИ), повышено число лейкоцитарно-эритроцитарных и тромбоцитарно-эрит-
роцитарных ассоциаций. При наличии генотипов Gly/Gly Toll-4 рецептора и Pro/Pro Toll-6 рецептора число лейкоцитарно-эритроци-тарных коагрегатов увеличено в большей степени, чем у больных, не имеющих дефектов в соответствующих генах.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
Проведенный анализ частоты встречаемости полиморфных вариантов генов Toll-4 (Asp299Gly) и Toll-6 (Ser249Pro) рецепторов и выявление генетических маркеров ОРВИ позволит создать группу диспансерного наблюдения с индивидуальной профилактикой и лечением ОРВИ.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Карпова Н.И. Фагоцитарная активность, особенности гемостаза у детей часто болеющих ОРВИ / Н.И. Карпова, Л.П. Малежик // Актуальные проблемы клинической и экспериментальной медицины: тезисы докладов Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 55-летию ЧГМА. - Чита, 2008. - С. 183.
2. Карпова Н.И. Состояние гемостаза, неспецифической резистентности и ауторозеткообразования у детей с рецидивирующими обструк-тивными ларингитами / Н.И. Карпова, Л.П. Малежик, H.A. Мирома-нова // Медицинские аспекты состояния здоровья: материалы I Международной научно-практической интернет конференции "Состояние здоровья: медицинские и психолого-педагогические аспекты". - Чита - Славянск, 2009. - С. 139 - 140.
3. Карпова Н.И. Гемореологические нарушения у детей со стенозиру-ющими ларинготрахеитами вирусной этиологии / Н.И. Карпова, Л.П. Малежик // Клиническая гемостазиология и гемореология в сердечно-сосудистой хирургии: материалы четвертой Всероссийской конференции (с международным участием) - Москва, 2009. - С. 196.
4. Карпова Н.И. Некоторые патогенетические аспекты респираторных инфекций у часто болеющих детей / Н.И. Карпова и др. // Тезисы докладов Материалов I Ежегодного Всероссийского Конгресса по инфекционным болезням. - Москва, 2009. - С. 91 - 92.
5. Карпова Н.И. Эндогенное ауторозеткообразование и лимфоцитарно-тромбоцитарная адгезия у детей часто болеющих острыми респираторными вирусными инфекциями / Н.И. Карпова, H.A. Мироманова, Н.В. Епифанцева // "Современные аспекты инфекционной патологии" научно-практическая конференция студентов и молодых ученых (с международным участием) тезисы докладов. - Астрахань, 2009. - С. 50.
6. Карпова Н.И. Свертывание крови, врожденный иммунитет и ауто-
розеткообразование у детей, часто болеющих острыми респираторными вирусными инфекциями / Н.И. Карпова, Л.П. Малежик / / Тромбоз, гемостаз и реология. - 2005. - №3. - С. 43 - 48.
7. Кузник Б.И. Состояние системы гемостаза и взаимодействие форменных элементов крови у детей, часто болеющих острыми респираторными вирусными инфекциями / Б.И. Кузник, Л.П. Малежик, Н,И. Карпова // Кубанский научный медицинский вестник. -2010. -№8. - С, 110 - 115.
8. Карпова Н.И. Некоторые патогенетические особенности нарушения
микроциркуляции у детей с респираторно-вирусными инфекциями / Н.И. Карпова, Л.П. Малежик, Б.И. Кузник // Забайкальский медицинский вестник. - 2010. - №4. - С. 24 - 29.
9. Карпова Н.И. Роль гемостаза и межклеточных агрегаций у детей с острой респираторной вирусной инфекцией / Н.И. Карпова // Системное кровообращение, микроциркуляция и гемореология : тезисы докладов. - Ярославль, 2011. - С. 64.
10. Карпова Н.И. Иммунный статус у детей, часто болеющих острой респираторной вирусной инфекцией / Н.И. Карпова, Л.П. Малежик, Е.Е. Гергесова // Медицинские аспекты состояния здоровья: материалы I Международной научно-практической интернет конференции "Состояние здоровья: медицинские и психолого-педагогические аспекты". - Чита-Славянск, 2011г. - С. 22 - 23.
11. Solpov A. Lymphocyte-platelet adhesion in A H1N1 infected patients / A. Solpov, E. Gergesova, N. Strambovskaya, N. Karpova et al. // Abstracts from the XXXIII World Congress of the International Society of Hematology. - Jerusalem. - 2010. - P. 79.
12. Карпова Н.И. Врожденный и адаптивный иммунитет при острой респираторной вирусной патологии у часто болеющих детей [Электронный ресурс] / Н.И. Карпова // Забайкальский медицинский вестник. - 2011. - №2. - С. 66 - 69. - Режим доступа: http: // www.medacadem.chita.ru/zmv (10 октября 2011г.).
УСЛОВНЫЕ ОБОЗНАЧЕНИЯ
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
ЛТА - лимфоцитарно-тромбоцитарная адгезия
ЛТИ - лимфоцитарно -тромбоцитарный индекс
ЛЭА - лейкоцитарно-эритроцитарная адгезия
ОРВИ - острая респираторная вирусная инфекция
ПЦР - полимеразная цепная реакция
ТЭА - тром боцитарно-эритроцитарная адгезия
ЧБД - часто болеющие дети
ФИ - фагоцитарный индекс
ФЧ - фагоцитарное число
ЭДТА - этилендиаминтетраацетат
РИЛ - патоген распознающие рецепторы
Лицензия ИД №03077 от 23.10.00. Подписано в печать 16. II .2011. Бумага офсетная. Гарнитура Times NewRoman Формат 60 х 84 '/,„. Усл. печ. л. 1,0 Тираж 100. Заказ № 180/2011.
Отпечатано в информационно-издательском центре ЧГМА 672090, Чита, ул. Горького, 39а.
Оглавление диссертации Карпова, Наталья Игоревна :: 2011 :: Чита
Условные обозначения.
ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Морфофункциональная организация противоинфекционной защиты дыхательных путей от экзогенной инфекции.
1.2. Общие закономерности иммунных реакций при респираторной инфекции.
1.3. Особенности становления иммунной защиты у детей.
1.4. Состояние иммунитета у детей часто болеющих ОРВИ.
1.5. Состояние системы гемостаза при респираторно-вирусной инфекции.
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. Клиническая характеристика больных.
2.2. Молекулярно-генетическое исследование.
2.2.1. Выделение ДНК.
2.2.2. Постановка ПЦР.
2.2.3. Детекция продуктов амплификации.
2.3. Исследование врожденного и адаптивного иммунитета.
2.3.1. Определение фагоцитарной активности нейтрофилов.
2.3.2. Исследование системы комплемента.
2.3.3. Определение концентрации цитокинов.
2.3.4. Определение уровня иммуноглобулинов.
2.4. Изучение агрегационной функции тромбоцитов.
2.5. Методы исследования коагуляционного гемостаза.
2.6. Определение интенсивности ауторозеткообразования: ЛЭА, ТЭА, ЛТА.
2.7. Статистическая обработка.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Частота встречаемости полиморфных вариантов аллелей (А8р299С1у) гена То11-4 и (8ег249Рго) гена То11-6 рецептора у здоровых детей и часто болеющих ОРВИ в г.Чита.
3.2. Состояние врожденного иммунитета и влияние полиморфизма генов То11-4 и То11-6 рецепторов на его активность у детей, часто болеющих ОРВИ.
3.3. Состояние гуморального иммунитета и влияние полиморфизма генов То11-4 и То11-6 рецепторов на его активность у детей, часто болеющих ОРВИ.
3.4. Агрегационная функция тромбоцитов и влияние полиморфизма генов То11-4 и То11-6 рецепторов на её активность у детей, часто болеющих ОРВИ.
3.5. Состояние гемостаза и влияние полиморфизма генов То11-4 (Азр299С1у) и То11-6 (8ег249Рго) рецепторов на его уровень у детей с частыми ОРВИ.
3.6. Особенности эндогенного ауторозеткообразования в периферической крови у детей больных ОРВИ при полиморфизме генов То11-4 (Азр29901у) и То11-6 (8ег249Рго) рецепторов.
Введение диссертации по теме "Патологическая физиология", Карпова, Наталья Игоревна, автореферат
Часто болеющие дети (ЧБД) - это термин обозначающий группу детей с более высоким, чем у сверстников уровнем заболеваемости острой респираторной вирусной инфекцией (ОРВИ). Максимальная заболеваемость ОРЗ среди детей отмечается в возрасте от 6 месяцев до 6 лет и составляет от 4 до 6 эпизодов в год. [14, 52, 126, 117].
Среди этих детей часто,встречаются неоднородные клинические проявления заболевания. Это могут быть как инфекции верхних дыхательных путей (ринит, фарингит, отит), так и инфекции нижних дыхательных путей (бронхит, пневмония) [114].
У часто болеющих детей значительно чаще выявляются хронические заболевания носоглотки и легких, тяжелее протекает бронхиальная астма, аллергический ринит, выше частота ревматизма, гломерулонефрита и ряда других заболеваний. ЧБД в подростковом возрасте склонны к хроническим заболеваниям желудочно-кишечного тракта, сосудистым дистониям, невротическим реакциям. Дети быстро утомляются, хуже учатся [127, 114].
ЧБД создают не только медицинскую, но и социально-экономическую проблему, так как лечение требует значительных материальных затрат, и связано с потерей трудового времени родителей.
Причины частой заболеваемости детей респираторными инфекциями перечислены в научно-практической программе Союза педиатров России «Острые респираторные заболевания у детей: лечение и профилактика» (2002). Многочисленные причины частых эпизодов ОРВИ у детей согласно данной программе можно разделить на две большие группы. Первая группа связана с факторами риска в антенатальный и постнатальный период {патология течения беременности, неблагоприятная наследственность, пассивное курение, дистрофия в раннем возрасте). Вторая группа причин связана с изменениями иммунного реагирования.
В настоящее время считают, что высокая восприимчивость к респираторным возбудителям связана с дисфункциями в системе иммунитета, обусловленной её незрелостью, преобладанием фракции «наивных» лимфоцитов, снижением цитотоксичности и интерферон-продуцирующей активности, отсутствием иммунологической памяти. Это заставляет систему иммунитета работать с максимальной нагрузкой при очередном инфицировании, что истощает противоинфекционный потенциал ребенка [42, 126, 127 ,118].
Патогенетические нарушения в системе иммунитета могут формироваться в любом звене иммунного ответа. Нас интересовало состояние первого звена -рецепторов, воспринимающих действие патогена. К таким рецепторам относятся Toll - рецепторы, присутствующие на всех иммунокомпетентных клетках и эпителиоцитах, контактирующими с инфекционными агентами.
Структурные изменения в Toll-рецепторах возможны при полиморфизме генов, кодирующих эти рецепторы. В случае генетических аномалий осуществляется неполноценный контакт рецептора с патогеном, нарушается внутриклеточная сигнализация и синтез медиаторов воспаления, что нарушает иммунный ответ на внутриклеточный патоген [129].
В настоящее время известно 10 разновидностей То11-рецепторов у людей. Нас заинтересовал То11-4, лигандом для которого является липополисахарид бактерий и ДНК вирусов и То11-6, реагирующий на ЛПС грамотрицательных бактерий. Мы полагаем, что полиморфизм Toll-4(Asp299Gly) и Toll-6(Ser249Pro) рецепторов может быть связан с дисфункциями в системе врожденного и адаптивного иммунитета у часто, длительно болеющих детей.
Реакции иммунного ответа сопряжены с изменениями в системе гемостаза [73, 76, 80, 79] Мостов для взаимодействия двух систем достаточно много и одним их них являются То11-рецепторы, которые экспрессированы на форменных элементах крови [86]. Однако их роль в нарушении системы гемостаза вообще не исследовалась и тем более, неизвестно влияние полиморфизма То11-рецепторов на коагуляционный потенциал при острых респираторных вирусных инфекциях. Тем не менее, изменения в системе гемостаза имеют патогенетическое значение в развитии ОРВИ, так как они определяют состояние микроциркуляции, трофики и степень репарации пораженной ткани.
Гемостатические и иммунные реакции изменяют адгезивные свойства форменных элементов крови, и они образуют коагрегаты между собой -лимфоцитарно-тромбоцитарные, тромбоцитарно-эритроцитарные, эритроцитарно-лейкоцитарные [79]. Эндогенное ауторозеткообразование при различных патологических состояниях усугубляет нарушения микроциркуляции, иммунологические и гемостатические сдвиги [9, 39, 78, 79]. Однако при ОРВИ эти показатели не изучались. Неизвестно, насколько клеточные взаимоотношения изменяются у больных, имеющих генетические дефекты в То11-рецепторах. Подобные наблюдения помогли бы во многом пролить свет на механизм сдвигов, возникающих в иммунитете и гемостазе у детей, часто болеющих острыми респираторными вирусными инфекциями.
Все изложенное позволяет считать, что избранная тема кандидатской диссертации является актуальной. Полученные результаты позволят углубить представление о патогенезе частых респираторных вирусных инфекций, установить генетические маркеры предрасположенности детей к повторным респираторным заболеваниям, разработать новые подходы к профилактике и лечению ОРВИ у часто болеющих детей.
Цель и задачи исследования
Изучить состояние систем иммунитета, гемостаза, коагрегации форменных элементов крови при респираторно-вирусных инфекциях у часто болеющих детей и выявить роль генетических аномалий То11-4 (АБр299С1у) и То11-6 (8ег249Рго) рецепторов в их функционировании.
Для достижения поставленной цели решались следующие задачи: 1. Выявить частоту встречаемости генетических дефектов То11-4(АБр29901у) и То11-6(8ег249Рго) рецепторов среди здоровых и часто болеющих детей, проживающих в г. Чита. 2. Исследовать уровень врожденного и адаптивного иммунитета при ОРВИ у часто болеющих детей и оценить роль полиморфизма То11-4(АБр29901у) и То11-6 (8ег249Рго) рецепторов в функциональной активности элементов иммунной защиты.
3. Изучить состояние сосудисто-тромбоцитарного гемостаза и коагуляционного потенциала при респираторно-вирусной инфекции, и выяснить влияние полиморфизма генов То11-4(Азр29901у) и То11-6(8ег249Рго) рецепторов на функции тромбоцитов и уровень гемостаза у обследуемых детей.
4. Определить адгезивные свойства лимфоцитов, эритроцитов и тромбоцитов при ОРВИ у часто болеющих детей и влияние полиморфизма генов То11-4(Авр299С1у) и То11-6(8ег249Рго) рецепторов на образование клеточных ассоциаций.
Научная новизна
1. Установлено, что одной из причин дисфункции в системе иммунитета у детей часто болеющих ОРВИ является генетический дефект в То11-4 (АБр29901у) и ТоИ-6 (8ег249Рго) рецепторах, воспринимающих действие патогена. Среди таких детей 55,6% являются носителями мутаций в То11-4 и 75% в То11-6 рецепторах
Предрасположены к частым заболеваниям ОРВИ дети-носители генотипа Gly/Gly гена Toll-4(Asp299Gly) рецептора и генотипа Pro/Pro гена Toll-6(Ser249Pro) рецептора.
2. Выявлено, что генетические дефекты в Toll-4(Asp299Gly) и То11-6 (Ser249Pro) рецепторах обусловливают снижение противоинфекционной защиты за счет несостоятельности врожденного иммунитета, ограничения синтеза иммуноглобулинов (slgA, IgA, IgM, IgG и его подклассов), уменьшения количества провоспалительных цитокинов (IL-lf3, ФНО-а, IL-8), и увеличения иммуносупрессирующих факторов - IL-10 и I1-1RA.
3. Обнаружено, что гиперкоагуляция, развивающаяся при ОРВИ у часто болеющих детей более выражена при наличии аномалий в То11-рецепторах Агрегационная функция тромбоцитов изменяется в зависимости от состояния То11-рецепторов. При мутациях в Toll-4 (Asp299Gly) рецепторах индукторы агрегации (адреналин, АДФ, коллаген) усиливают агрегационную активность тромбоцитов; при аномалиях в Toll-6 (Ser249Pro) рецепторах - уменьшают.
4. У детей часто болеющих ОРВИ при очередном заболевании индуцированы адгезивные свойства форменных элементов крови с увеличением числа лимфоцитарно-тромбоцитарных, эритроцитарно-тромбоцитарных и эритроцитарно-лейкоцитарных коагрегатов в крови. При генетических дефектах в То11-4 и То11-6 рецепторах клеточные ассоциации выражены значительнее, чем у больных детей, не отягощенных генетическими мутациями в сигнальных рецепторах
Теоретическая и практическая значимость
Полученные нами данные о состоянии систем иммунитета, гемостаза и полиморфизма генов То11 - рецепторов вносят вклад в понимание механизмов несостоятельности противовирусной защиты у детей, часто болеющих ОРВИ и являются патогенетическим обоснованием для использования лечебно-профилактических комплексов и вакцинных препаратов.
Наличие полиморфизма генов То11-4 и То11-6 рецепторов является риском частых вирусных инфекций и развитием бактериальных осложнений.
Создание индивидуальных генетических карт с уточнением мутаций в генах То11-рецепторов необходимо в организации - профилактических мероприятий и разработке индивидуальных методов коррекции иммунитета у таких детей.
Внедрение в практику
Материалы диссертационной работы внедрены в учебный процесс кафедры патологической физиологии и кафедры детских инфекций ЧГМА.
Апробация диссертации
Основные положения и результаты исследования . доложены на: I Международной научно-практической интернет-конференции «Состояние здоровья: медицинские и психологические аспекты» (Чита-Славянск 2009), II Международной научно-практической интернет-конференции «Состояние здоровья: медицинские и психологические аспекты» (Чита-Славянск 2011), Всероссийской научно-практической конференции посвященной 55-летию Читинской государственной медицинской академии (Чита 2008), VII международной конференции: гемореология и микроциркуляция (Ярославль 2009), Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Итоги эпидемии гриппа A (HiN,)» (Чита 2010), XXXIII Мировом конгрессе Международного общества гематологии (Иерусалим, Израиль, 2010), Научно-практической конференции с международным участием «Медицина-новое в теории и практике» (Шарджа 2011).
Объем и структура работы
Диссертация изложена на 137 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, главы собственных исследований, обсуждения полученных данных, выводов, практических рекомендаций, иллюстрирована 24 таблицами, 7 рисунками. Указатель литературы включает 248 источника, из которых 158 отечественных и 91 зарубежных По теме диссертации опубликовано 12 печатных работ, из которых две в издании, определенных ВАКом
Заключение диссертационного исследования на тему "Патогенетические механизмы нарушений врожденного и адаптивного иммунитета, системы гемостаза и межклеточных взаимоотношений при респираторно-вирусных инфекциях у часто болеющих детей"
Выводы
1. Одним из патогенетических механизмов нарушений в системе иммунитета, гемостаза и адгезивных свойств форменных элементов крови у детей, часто болеющих ОРВИ, являются генетические дефекты в То11-4 (Asp299Gly) и То11-6 (Ser249Pro) рецепторах. Среди таких детей 55,6 % являются носителями мутации в То11-4 рецепторах и 75 % в генах То11-6 рецепторов. Маркерами высокой восприимчивости детей к респираторно-вирусным инфекциям являются генотип Gly/Gly гена Toll-4(Asp299Gly) рецептора и генотип Pro/Pro гена Toll-6(Ser249Pro) рецептора.
2. У часто болеющих детей снижена фагоцитарная активность. Индуцирована система комплемента с увеличением уровня анафилатоксина С5а и С1-ингибитора. У больных, носителей мутаций в генах То11-4 и То11-6 рецепторов несостоятельность врожденного иммунитета выражена более значительно.
3. При ОРВИ в первые дни заболевания увеличена концентрация провоспалительных цитокинов IL-lß, ФНОа, хемокина IL-8 и противовоспалительных цитокинов ILIO и IL-1RA. При аномалии в рецепторах То11-4 и То11-6 синтез отмеченных цитокинов уменьшался у гетерозиготных носителей мутаций Asp/Gly в гене То11-4 рецептора, а при мутациях в гене То11-6 снижался у гетерозигот Ser/Pro и гомозигот Pro/Pro.
4. В крови детей часто болеющих ОРВИ увеличено содержание IgM, IgG и его подклассов, уменьшена концентрация IgA и slgA. При генетических мутациях в То11-4 и То11-6 рецепторах синтез отмеченных иммуноглобулинов снижен, по сравнению с группой детей, не имеющих генетических дефектов в рассматриваемых рецепторах.
5. При ОРВИ, в первые дни заболевания спонтанная агрегация тромбоцитов не отличается от контроля. При индукции АДФ, адреналином и коллагеном агрегационная активность тромбоцитов больных детей увеличивается независимо от наличия или отсутствия генетических дефектов Toll-4 рецепторов. Однако, аномальные аллели гена То11-6 рецептора (Ser249Pro) ограничивают индуцированную активность.
6. В остроте периоде у часто болеющих детей развивается гиперкоагуляция, которая сопровождается укорочением АЧТВ, увеличивается концентрация фибриногена и фибрин-мономерных комплексов (РФМК), ингибируется фибринолиз. У больных с мутациями в генах То11-4 и То11-6 рецепторов они выражены в большей степени.
7. У детей при ОРВИ усилена лимфоцитарно-тромбоцитарная адгезия (J1TA), увеличен лимфоцитарно-тромбоцитарный индекс (ЛТИ), повышено число лейкоцитарно-эритроцитарных и тромбоцитарно-эритроцитарных ассоциаций. При наличии аномальных генотипов Gly/Gly Toll-4 рецептора и Pro/Pro Toll-6 рецептора число лейкоцитарно-эритроцитарных коагрегатов увеличено в большей степени, чем у больных, не имеющих дефектов в соответствующих генах.
Практические рекомендации
Создание генетических карт позволит выявить маркеры низкой противовирусной защиты.
При полиморфизме генов То11-4 и То11-6 рецепторов" маркерами частых респираторных инфекций являются аллель С в генах То11-4 и аллель Р в генах То1Г6 рецепторов.
Проведенный анализ частоты встречаемости полиморфных вариантов генов То11-4 (Ац)299С\у) и То11-6 (8ег249Рго) рецепторов и выявление генетических маркеров ОРВИ позволит создать группу диспансерного наблюдения с индивидуальной профилактикой и лечением ОРВИ.
Практическая и теоретическая значимость
Полученные данные о роли полиморфизма генов рецепторов То11-4 и То11-6 в состоянии врожденного и адаптивного иммунитета, функции тромбоцитов, уровне коагуляционного гемостаза, адгезивной активности форменных элементов крови при ОРВИ позволит расширить представление о патогенезе данной инфекции и выявить особенности её течения у часто болеющих детей.
Проведенный анализ частоты встречаемости полиморфных вариантов генов То11-4 (Азр29901у) и То11-6 (8ег249Рго) рецепторов и выявление генетических маркеров ОРВИ позволит создать группу диспансерного наблюдения с индивидуальной профилактикой и лечением ОРВИ.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2011 года, Карпова, Наталья Игоревна
1. Асайчев A.B. Механизм образования клеточных ассоциаций в кровотоке / A.B. Асайчев, O.A. Азизова, JI.B. Шуленина // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1999. - Т. 147, № 3. - С. 284-290.
2. Абатуров А.Е. Молекулярные механизмы неспецифической защиты респираторного тракта: распознавание молекулярных структур / А.Е. Абатуров // Здоровье ребенка. 2006. - № 2. - С. 100-118.
3. Алексеев Л.П. Регуляторная роль иммунной системы в организме / Л.П. Алексеев, P.M. Хаитов // Российский физиологический журнал им. И.М.Сеченова. -2010. № 8. - С. 787-805.
4. Алексеев H.A. Клинические аспекты лейкопений, нейтропений и функциональных нарушений нейтрофилов. СПб. : Фолиант, 2002. - 213с.
5. Базелюк Л.Т. Морфометрическая оценка мазков слизистой оболочки носа детей Караганды / Л.Т. Базелюк, С.А. Бекеева // Гигиена и санитария. 1997. - №5.-С. 9-10.
6. Баркаган З.С. Диагностика и контролируемая терапия нарушений гемостаза / З.С. Баркаган, А.П. Момот. М. : Ньюдиадем, 2002. - 296с.
7. Белоусов Ю.В. Клиническая фармакология болезней органов дыхания детей : руководство для врачей / Ю.В. Белоусов. М. , 1996. - 176с.
8. Бельченко Д.И. Активация межклеточных взаимодействий в циркулирующей крови и микроциркуляции / Д.И. Бельченко, A.B. Есипова, E.JI. Кривошеина // Региональное кровообращение и микроциркуляция. 2005. - Т. 4, № 2. - С. 5357.
9. Бельченко Д.И. Внутрисосудистое ауторозеткообразование при гемолитических анемиях / Д.И. Бельченко // Гематология и трансфузиология. -1992. -№ 4.-С. 23-25.
10. Бельченко Д.И. Исследование ауторозеткообразования в циркулирующей крови / Д.И. Бельченко // Клиническая лабораторная диагностика. 1993. - № 3. -С. 58-62.
11. Бельченко Д.И. Цитотоксическая активность клеток тромбоцитарной системы / Д.И. Бельченко // Иммунология. 2001. - № 1. - С. 55-56.
12. Беляков В.Д. Введение в эпидемиологию инфекционных и неинфекционных заболеваний человека / В.Д. Беляков. М. : Медицина, 2001. - 262с.
13. Булгакова В.И. Современное состояние проблемы часто болеющих детей / В.Н. Булгакова, И.И. Балаболкин, В.В. Волкова // Педиатрическая фармакология. -2007. Т. 4, № 5. - С. 48-52.
14. Богданова A.B. Рецидивирующий бронхит у детей : ( Истоки формирования, этиопатогенетические особенности, клиника, течение и лечение заболевания) : автореф. дис. .д-ра мед. наук/ А.В.Богданова. -М, 2000. -26с.
15. Бондаренко В.М. Микробный фактор и То11-подобные рецепторы в патогенезе атеросклероза / В.М. Бондаренко, В.Г. Лиходед // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2009. - № 6. - С. 107.
16. Бурячковская Л.И. Циркулирующие в крови лейкоцитарно-тромбоцитарные агрегаты у больных ИБС / Л.И. Бурячковская, Н.Л. Довлатова // Тромбоз, гемостаз, патология сосудов : международный конгресс. СПб., 2004. - С.72.
17. Вельтищев Ю.Е. Становление и развитие иммунной системы у детей / Ю.Е. Вельтищев // Иммунная недостаточность. Иммунные диатезы. М, 2003. - 305с
18. Витковский Ю.А. Взаимодействие лейкоцитов и тромбоцитов с эндотелием и ДВС-синдром /Ю.А. Витковский, Б.И. Кузник, A.B. Солпов // Тромбоз, гемостаз и реология. 2006. - № 1(25). - С. 15-28.
19. Витковский Ю.А. Влияние цитикинов на лимфоцитарно-тромбоцитарную адгезию / Ю.А. Витковский, Б.И. Кузник, A.B. Солпов // Медицинская иммунология. 2002. -Т.4, № 2. - С. 135-136.
20. Витковский Ю.А. Патогенетическое значение лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии / Ю.А. Витковский, Б.И. Кузник, A.B. Солпов // Медицинская иммунология. 2002. - Т.8, № 5-6. - С. 745-752.
21. Витковский Ю.А. Результаты 10-летнего исследования механизмов лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии / Ю.А. Витковский, A.B. Солпов, Б.И. Кузник // Клиническая гемостазиология и гемореология в сердечно-сосудистой хирургии. М. - 2001. - С. 95-97.
22. Витковский Ю.А. Феномен лимфоцитарно-тромбоцитарного розеткообразования / Ю.А. Витковский, Б.И. Кузник, A.B. Солпов // Иммунология. 1999. - № 4. - С. 35-37.
23. Витковский Ю.А. Цитокины в регуляции системы гемостаза : автореф. дис. . д-ра мед. наук / Ю.А. Витковский. Чита, 1997. - 32с.
24. Волков B.C. Динамика ауторозеткообразования в переферической крови у больных гипертонической болезнью на фоне лечения / В.С.Волков, Л.Н. Коричкина // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. 2007. - Т. 7. - С. 1012.
25. Волков B.C. О роли внутрисосудистого розеткообразования в формировании анемии у больных с хронической сердечной недостаточностью / B.C. Волков, Л.Н. Коричкина, A.B. Соловьев // Терапевтический архив. 2006. - № 11. - С. 5455.
26. Волков B.C. О феномене эндогенного ауторозеткообразования в крови и его роль в патогенезе токсической анемии / B.C. Волков, Л.Н. Коричкина // Медицина труда и промышленной экологии. 2006. - № 11. - С. 39-41.
27. Гаймоленко И.Н. Иммунная недостаточность и часто болеющие дети, подходы к иммуномодуляции / И.Н. Гаймоленко, С.А. Голобокова // Забайкальский медицинский вестник. 2007. - № 2. - С. 41-46.
28. Гаймоленко И.Н. Эффективность применения молочной смеси нового поколения у детей с лимфатико-гипопластическим диатезом / И.Н. Гаймоленко // Забайкальский медицинский вестник. 2008. - №1. - С. 52-55.
29. Галактионов В.Г. Иммунология. -М. : Akademia, 2004. 213с.
30. Гаращенко Т.И. Бактериальные лизаты для местного применения в профилактике и лечении хронических аденоидов у детей // Вопросы современной педиатрии. 2—7. - № 1. - С. 15-18.
31. Генцер Б.И. Оценка функционального состояния цилиарного аппарата дыхательных путей при патологии органов дыхания / Б.И. Генцер, A.A. Карпенко // Проблемы туберкулеза. 2000. - № 11. - С. 56.
32. Роль респираторных вирусов в развитии аллергии / В.Ф. Гервазиева и др. . //Цитокины и воспаление. 2003. - Т. 2, № 3. - С. 3-8.
33. Громова А.Ю. Полиморфизм генов семейства интерлейкина-1 человека // Цитокины и воспаление. 2005. - Т. 4, № 3. - С. 3-12.
34. Динамика морфологических структур тромбоцитов у больных ишемической болезнью сердца в зависимости от уровня жирных кислот крови / Е.И.Соколов и др. . //Кардиология,-2011. -№ 1.-С. 29-33.
35. Долина А.Б. Особенности иммунитета, перекисного окисления липидов и лейкоцитарно-тромбоцитарно-эритроцитарных взаимоотношений при вторичном инфекционном эндокардите у детей : автореф. дис. . канд. мед. / А.Б. Долина. -Чита, 2010.-21с.
36. Друцкая М.С. Врожденное распознавание вирусов / М.С. Друцкая, П.В. Белоусов, С.А. Недоспасов // Молекулярная биология. 2011. - Т. 45, № 1. - С. 719.
37. Емельянова А.И. Изменение лейкоцитарно-тромбоцитарной адгезии у больных рожей / А.И.Емельянова, Ю.А. Витковский // Забайкальский медицинский вестник. -2010,-№2.-С. 17-20.
38. Железникова Г.Ф. Иммунитет против респираторно-вирусной инфекции у детей / Г.Ф. Железникова // Педиатрия. 1995. - № 5. - С. 89-93.
39. Железникова Г.Ф. Иммунопатогенез осложненного, затяжного или хронического течения инфекций у детей и подходы к иммунокоррекции / Г.Ф. Железникова, В.В. Иванова // Детские инфекции. 2003. - № 3. - С. 58-61.
40. Железникова Г.Ф. Цитокины как предикторы течения и исходы инфекций / Г.Ф. Железникова//Цитокины и воспаление. -2009. № 8 (1). - С. 10-17.
41. Занкеева А.Г. Динамика электрофоретической подвижности назальных эпителиоцитов у детей с рецидивирующим обструктивным бронхитом / А.Г. Занкеева // Детские инфекции. 2009. - № 1. - С. 17-20.
42. Заплатников A.A. Клинико-патогенетическое обоснование иммунотерапии и иммунопрофилактики вирусных и бактериальных заболеваний у детей : автореф. дис. . д-ра мед. наук / A.A. Заплатников. М., 2003 .-21с.
43. Заплатников A.A. Принципы рациональной терапии острых респираторных вирусных инфекций у детей раннего возраста / A.A. Заплатников
44. Российский медицинский журнал. 2004. - № 12. - С. 790-795.
45. Заплатников A.A. Эффективность рибомунила у часто болеющих детей / A.A. Заплатников, A.B. Суздаленков, H.A. Коровина // Вопросы современной педиатрии. 2002. - № 6. - С. 23-30.
46. Иллариошкин С.Н. ДНК диагностика и медико-генетическое консультирование / С.Н. Иллариошкин. - М. : Мед. информ. агентство, 2004. -207с.
47. Иммунная недостаточность и часто болеющие дети / М.Н. Ярцев и др. . // Сборник тематических статей по проблеме «Часто болеющие дети». М. Materia medica, 2006. - С. 3 - 28.
48. Интерфероны и другие цитокины при хроническом пиелонефрите / И.П. Кудряшова и др. . // Вестник Российской АМН. 2010. - № 10. - С. 18-23.
49. Иммунотропные эффекты потенцированных антител к интерферону -гамма человека / Е.Ю. Шерстобаев и др. . // Бюллетень экспериментальной биологии. 2002. - Приложение 4. - № 4. - С. 79-82.
50. Караулов A.B. Иммунотерапия респираторных заболеваний : руководство для врачей / A.B. Караулов, В.Ф. Ликов. М. : изд-во отделения РАЕН «Лекарства и пищевые добавки». - 2004. - 32с.
51. Караулов A.B. Препарат пидотимод новое эффективное средство в иммунопрофилактике и иммунотерапии респираторный инфекций у детей / A.B. Караулов // Вопросы современной педиатрии. - 2008. - Т. 7. - С. 45-100.
52. Караулов A.B. Эффективность иммунотерапии с использованием ИРС 19 у больных хроническим бронхитом / A.B. Караулов, Д.В. Кокушков // Атмосфера. Пульмонология и аллергология. 2005. - С. 61-62.
53. Карпович В.А. Характер изменений гемостаза у больных с гриппом : автореф. дис. . канд. мед. наук/В.А. Карпович. -М. , 1987. -20с.
54. Кашкин К.П. Белки системы комплемента : свойства и биологическая активность / К.П. Кашкин, JI.H. Дмитриева // Клиническая лабораторная диагностика. 2000. - № 7. - С. 25-32.
55. Кашутин C.JI. Адгезия и фагоцитоз агрегатов тромбоцитов нейтрофилами и моноцитами у больных псориазом / C.JI. Кашутин, Ю.С. Дегтяр // Цитокины и воспаление. 2008. -№ 7. - С. 54-57.
56. Кетлинский С.А. Цитокины / С.А. Кетлинский, A.C. Симбирцев СПб. : ООО Изд-во «Фолиант», 2008. - 156с.
57. Кладова О.В. Бактериальные лизаты у часто болеющих детей / О.В. Кладова, B.JI. Фомина // Детские инфекции. 2009. - № 3. - С. 48-53.
58. Кладова О.В. Иммунопатогенез, клиника и лечение рецидивирующего крупа у детей : автореф. дис. .д-ра мед. наук / О.В. Кладова. -М. ,2003. 21с.
59. Климович В.Б. Иммуноглобулин А и его рецепторы / В.Б. Климович, М.П. Самойлович // Медицинская иммунология. 2006. - № 4. - С. 483-550.
60. Кобылянский В.И. Очистительная функция бронхиального эпителия // В.И. Кобылянский//Цитология. 1995. - Т. 37, №3. - С. 179.
61. Ковальчук JI.B. Врожденные компоненты иммунитета : Toll- подобные рецепторы в норме и при иммунопатологии / JI.B. Ковальчук, М.В. Хорева, A.C. Варивода // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2005. - № 4.-С. 96-109.
62. Козлов И.Г. Сигнальные рецепторы врожденного иммунитета : новая молекулярная мишень для диагностики и терапии воспалительных заболеваний / И.Г. Козлов // Вестник Российской АМН. 2011. - № 1. - С. 42-50.
63. Козлов Л.В. Метод определения общей гемолитической активности классического пути активации системы комплемента / Л В. Козлов // Биоорганическая химия. 1994. - Т.20, № 3. - С. 229-241.
64. Количественная оценка in vitro нейтрализующей активности секреторных факторов легких крыс в отношении вируса гриппа / В.А. Жуков и др. . // Вестник Российской АМН. 2009. - № 11. - С. 46-48.
65. Коричкина JI.H. Особенности розеткообразования в периферической крови у больных острым инфарктом миокарда / Л.Н. Коричкина // Российский кардиологический журнал. 2004. - № 6. - С. 71-73.
66. Коричкина Л.Н. Особенности эндогенного ауторозеткообразования в переферической крови у больных пневмонией / Л.Н. Коричкина, Л.В. Лавриненко // Терапевтический архив. 2011. - № 3. - С. 37-40.
67. Коричкина Л.Н. Феномен эндогенного ауторозеткообразования в переферической крови у больных стенокардией и его клиническое значение / Л.Н. Коричкина // Российский кардиологический журнал. 2003. - № 1. - С. 1518.
68. Косенко И.М. Иммуномоделирующая терапия заболеваний ротоглотки у детей / И.М. Косенко // Детские инфекции. 2010. - № 1. - С. 56-61.
69. Кудрявцев И.В. Эволюция каскада комплемента / И.В. Кудрявцев, A.B. Полевщиков//Цитокины и воспаление. -2005. Т. 4, № 1. - С. 11-21.
70. Кузник Б.И. Взаимосвязь между иммуногенезом и системой гемостаза : единая система защиты организма / Б.И. Кузник, H.H. Цыбиков. // Успехи современной биологии. 1981. - № 2. - С. 243-260.
71. Кузник Б.И. Иммуногенез, гемостаз и неспецифическая резистентность организма / Б.И. Кузник, В.Н. Васильев, H.H. Цыбиков. М. : Медицина, 1989. -320с.
72. Кузник Б.И. Иммунологический ответ и система гемостаза / Б.И. Кузник, Ю.А. Витковский // Проблемы физиологии и патологии системы гемостаза. -Барнаул.-2000.-С. 119-127.
73. Кузник Б.И. Единая клеточно-гуморальная система защиты организма / Б.И. Кузник, H.H. Цыбиков, Ю.А. Витковский // Тромбоз, гемостаз и реология. -2005. -№ 2. С. 3-16.
74. Кузник Б.И. Клеточные и гуморальные механизмы регуляции системы гемостаза в норме и патологии / Б.И. Кузник. Чита, 2010. - 827с.
75. Кузник Б.И. Лейкоцитарно-тромбоцитарно-эритроцитарные взаимоотношения у детей, страдающих инфекционном эндокардитом / Б.И.
76. Кузник, А.Б. Долина, Т.М. Вишнякова // Тромбоз, гемостаз и реология. 2008. -№ 3. - С. 31-38.
77. Кузник Б.И. Нетрадиционные представления о механизмах развития тромбогеморрагического синдрома и диссеминированного внутрисосудистого свертывания / Б.И. Кузник // Тромбоз, гемостаз и реология. 2010. - № 1. - С. 22-44.
78. Кузник Б.И. Особенности фагоцитоза у плода и ребенка / Б.И. Кузник, О.Г. Максимова // Гематология детского возраста. Чита, 2007. - С. 301-302.
79. Кузник Б.И. ТГС, ДВС или гипер- гипокоагуляционный синдром / Б.И. Кузник // Проблемы клинической медицины. 2009. - № 2. - С. 74-91.
80. Кузник Б.И. Физиология и патология системы крови / Б.И. Кузник. М. : Вузовская книга, 2004. - 286с.
81. Кузник Б.И. Форменные элементы крови, сосудистая стенка, гемостаз и тромбоз. М. : Медицина, 1974. - 320с.
82. Кудрявцев И.В. Эволюция каскада комплемента / И.В. Кудрявцев, А.В. Полевщиков // Цитокины и воспаление. 2005. - Т. 4, № 1. - С. 11-21.
83. Кузьменко Л.Г. Иммунокоррекция Тактивином в комплексном лечении часто болеющих детей : пособие для врачей / Л.Г. Кузьменко, Ю.М. Лопухин, В.Я. Арион. -М. , 2005. -38с.
84. Лебедев К.А. Иммунология образ распознающих рецепторов / К.А. Лебедев, И.Д. Понякина // Интегральная иммунология. М. : Либриком, 2009. - 256с.
85. Литвитский П.Ф. Врожденный иммунитет : механизмы реализации и патогенетические синдромы / П.Ф. Литвитский, Т.Г. Синельникова // Вопросы современной педиатрии. 2009. - Т. 8. - С. 95-101.
86. Лечебно-профилактическая эффективность бактериальных лизатов при респираторных заболеваниях у часто болеющих детей / М.С. Савенкова и др. . // Детские инфекции. 2010. - № 1. - С. 44-49.
87. Макарова З.С. Оздоровление и реабилитация часто болеющих детей в дошкольных учреждениях / З.С. Макарова, Л.С. Голубева // Пособие для педагогов дошкольных учреждений. М. : Владос. - 2004. - 270с.
88. Малахинова H.A. Клинико-генетические ассоциации полиморфизма генов иммунорецепторного аппарата и воспалительных заболеваний кишечника у детей: автореф. дис. канд. мед. наук /H.A. Малахинова. М, 2010. - С. 156.
89. Миллер И. Иммунитет человеческого плода и новорожденного. Прага : Авиценум. - 1983. - 250с.
90. Мироманова H.A. Лимфоцитарно-тромбоцитарная адгезия у детей при некоторой соматической и инфекционной патологии / H.A. Мироманова, A.C. Богданова, Ю.В. Витковский // Забайкальский медицинский вестник. 2005. - № 2.-С. 63-65.
91. Мироманова H.A. Особенности иммунитета и гемостаза у детей при некоторых соматических и инфекционных заболеваниях, отягощенных и неотягощенных тромбофилией : автореф. дис. . канд. мед. наук / H.A. Мироманова. Чита, 2006. - 121с.
92. Мироманова H.A. Состояние иммунитета и гемостаза у детей при гриппе А Н1 №1 / Калифорния /04/09 / H.A. Мироманова, Т.В. Брум, Т.С. Баранчугова // Итоги эпидемии гриппа А Н1 /№1 : материалы Всерос. науч. -практ. конф. -Чита, 2010. С. 130-131.
93. Мкртчян Г.М. Дисфункция системы комплемента при семейной средне-земноморской лихорадке / Г.М. Мкртчян // Медицинская иммунология. 2009. -Т. 11, № 1. - С. 85-90.
94. Молекулярные механизмы индукции врожденного иммунитета / С.С.Афанасьев и др. . // Вестник Российской АМН. 2009. - № 4. - С. 42-49.
95. Момот А.П. Роль гемостатических и воспалительных реакций в формировании очагов гнойной деструкции органов и тканей / А.П. Момот, Я.Н. Шойхет // Тромбоз, гемостаз и реология. 2009. - № 1. - С. 23-39.
96. Нарушения в тромбоцитарном звене гемостаза при эндотоксинемии и коррекции их ингибитором биосинтеза простагландинов / С.А. Пак и др. . // Биологические науки. 1997. - № 1. - С. 68-72.
97. Недоспасов С.А. Молекулярная иммунология на стыке веков, на стыке дисциплин / С.А. Недоспасов // Молекулярная иммунология. - 2011. - Т. 45, № 1. -С. 3-6.
98. Новицкий В.В. Патофизиология / В.В. Новицкий, Е.Д. Гольдберг. Томск : Изд-во Томского университета, 2005. - 536с.
99. Новые возможности применения антипиретиков у детей с острыми респираторными заболеваниями / Э.Э. Локшина и др. // Российской вестник перинатологии. 2010. - № 6. - С. 109-114.
100. Образцова Е.В. Препараты интерферона и его индукторов при гриппе и ОРВИ у детей / Е.В. Образцова, Л.В. Осидак, Е.Г. Головачева // Детские инфекции. -2010. -№ 1. С. 35-40.
101. Образцова Е.В. Препараты интерферона и его индукторов при лечении гриппа и острых респираторных вирусных инфекций у детей / Е.В. Образцова: автореф. дис. . канд. мед. наук. СПб., 2007. - 23с.
102. Общие сведения о системе комплемента / В.А. Алешкин и др. // Учебное пособие по иммунологии. Чита, 2003. - 185с.
103. Орозаев Н.Г. Динамика изменений уровня циркулирующих иммунных комплексов при гриппе // Клиническая лабораторная диагностика. 2010. - № 10. -С. 2.
104. Оценка функции адгезии к эндотелиальным клеткам различных субпопуляций мононуклеаров периферической крови / Д.И.; Соколов и др. // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. 2009. - № 4. - С. 34-41.
105. Перспективы фармакологической регуляции активности макрофагов путем модуляции внутриклеточного сигнального каскада / Ю.П. Вельский и др. // Вестник Российской АМН. 2009. - № 11. - С. 21-24.
106. Пинегин Б.В. Алармины эндогенные активаторы воспаления и врожденного иммунитета / Б.Е. Пинегин, М.И. Кирсанова // Иммунология. - 2010. -№ 5. - С. 246-255.
107. Пинегин Б.В. Роль IL-6 и TNF-L в организации неспецифической защиты / Б.В. Пинегин, М.И. Карсанова // Детские инфекции. 2010. - № 2. - С. 52-56.
108. Плеханова Н.Г. Роль моноцито-макрофагов в патогенезе вирусных инфекций / Н.Г. Плеханова, JIM. Сомова // Тихоокеанский медицинский журнал. 2010. -№ 3. - С. 5-10.
109. Подходы к оценке рецепторов врожденного иммунитета / М.В. Хорева и др. // Российский иммунологический журнал. 2008. - Т. 2(11), № 2-3. - С. 151.
110. Полевщиков A.B. Преимущество местной иммунотерапии в лечении и профилактике ринофарингитов / A.B. Полевщиков, С.В.Рязанцев // Новости оториноларингологии и логопатологии. 2000. - № 3. - С. 16-20.
111. Полиморфизм генов интерлейкина 1 и фактора некроза опухоли в патогенезе острой легочной патологии у детей / Ф.Ф. Рязанова и др. // Казанский медицинский журнал. 2010. - Т.91, № 5. - С. 594-598.
112. Почивалов A.B. Часто болеющие дети и новые возможности иммуномодулирующей терапии / A.B. Почивалов, Е.И. Погорелова // Детские инфекции. 2010. - № 1. - С. 50-53.
113. Праздникова Т.В. Течение и отдаленный прогноз респираторных расстройств неонатального периода у детей : автореф. дис. . канд. мед. наук / Т.В. Праздникова. М., 2009. - 21с.
114. Применение препарата пидотимод при острой респираторнойинфекции у часто болеющих детей / Ф.С. Харламова и др. // Вопросы современной педиатрии. 2009. - Т. 8., № 2. - С.25-29.
115. Профилактика госпитальной и повторной заболеваемости ОРВИ и ЧБД, проживающих в условиях экологического неблагополучия / А.И. Аминова и др. // Детские инфекции. 2009. - № 4. - С. 54-57.
116. Профилактическая эффективность кагоцела при острых респираторный заболеваниях у детей / Ф.С. Харламова и др. // Детские инфекции. 2009. - № 4. -С. 34.
117. Рациональная фармакотерапия часто болеющих детей : пособие для врачей -педиатров, семейных врачей, студентов педиатров факультетов медицинских ВУЗов / под ред. М.Г. Романова. СПб. : ООО «Так тик - Студио», 2000. - 96с.
118. Рецепторы семейства PRR связующее звено процессов свертывания крови и воспаления / Т.Н.Дугина и др. //Биохимия. - 2002. - № 1. -С. 77-87.
119. Ройт А. Иммунология / А. Ройт, Дж. Бростофф, Д. Мейл ; пер. с англ. М. : Мир, 2001,- 150с.
120. Роль респираторных вирусов в развитии аллергии / В.Б. Гервазиева и др. // Цитология и воспаление. 2003. - Т. 2, № 3. - С. 3-8.
121. Романцов М.Г. Противовирусные препараты при респираторных заболеваниях у детей / М.Г. Романцов, Ф.И. Ершов, Т.В. Сологуб // Российский педиатрический журнал. 2010. - № 6. - С. 32-38.
122. Романцов М.Г. Эффективность циклоферона у детей в период повышенной заболеваемости ОРВИ и гриппом / М.Г. Романцов и др. // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 2006. - № 6. - С. 105-108.
123. Руднов В.А. От локального воспаления к системному : выход на новые представления патогенеза критических состояний и перспективы терапии / В.А. Руднов // Интенсивная терапия. 2006. - № 1. - С. 4-8.
124. Самсыгина Г.А. Проблемы диагностики и лечения часто болеющих детей на современном этапе / Г.А. Самсыгина, Г.А. Коваль // Педиатрия. 2009. - № 2. - С. 137-145.
125. Самсыгина Г.А. Часто болеющие дети : проблемы патогенеза, диагностики и терапии / Г.А. Самсыгина // Педиатрия. 2005. - № 1. - С. 66-73.
126. Симбирцев A.C. Toll-белки : специфические рецепторы неспецифического иммунитета / A.C. Симбирцев //Иммунология. 2005. - № 6. - Р. 368-377.
127. Симбирцев A.C. Функциональный полиморфизм генов регуляторных молекул воспаления / A.C. Симбирцев, А.Ю. Громова // Цитокины и воспаление. 2005. - Т. 4, № 1. - С. 3-11.
128. Серебренникова С.Н. Роль цитокинов в воспалительном процессе ( сообщение 2) / С.Н. Серебренникова, И.Ж. Семинский // Сибирский медицинский журнал. 2008. - № 8. - С. 5-8.
129. Система гемостаза, лейкоцитарно-тромбоцитарные взаимоотношения, белки острой фазы, воспалительные цитокины у больных с различными формами ИБС / Ю.А. Витковский и др. // Тромбоз, гемостаз и реология. № 1 - 2009- С. 49-63.
130. Соколов Е.И. Динамика морфологических структур тромбоцитов у больных ишемической болезнью сердца в зависимости от уровня жирных кислот крови / Е.И. Соколов и др. // Кардиология. 2011. - № 1. - С. 29-33.
131. Солпов А.В. Влияние цитокинов на лимфоцитарно-тромбоцитарную адгезию / А.В. Солпов // Тромбоз, гемостаз и реология. 2002. - № 1. - С. 126129.
132. Солпов А.В. Механизмы лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии : автореф. дис. . канд мед. наук / А.В. Солпов. Чита, 2005. - 22с.
133. Состояние гемостаза при гриппе и острых респираторных вирусных инфекциях в пожилом и старческом возрасте / Б.П. Богомолов и др. // Клиническая медицина. 1989. - № 4. - С. 41-45.
134. Состояние иммунитета и лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии при пневмонии / Ю.А. Витковский // Терапевтический архив, 2009. № 3. - С. 40-43.
135. Струкова С. М. Роль тромбоцитов и сериновых протеиназ в сопряжении свертывания крови и воспаления / С. М. Струкова // Биохимия. 2004. - Т.69, вып. 10. -С. 1314-1331.
136. Струкова С.М. Тромбин регулятор воспаления и репарации тканей / С. М. Струкова // Биохимия. - 2001. - Т. 66. - С. 14-27.
137. Сульская Ю.В. Генетический полиморфизм toll-kike рецепторов 4 типа у больных сахарным диабетом 2 типа/Ю.В. Сульская // Таврический медико-биологический вестник. 2009. - №3(47). -С.72-74.
138. Тепаев Р.Ф. Синдром диссеминированного внутрисосудистого свертывания у детей. Диагностика и лечение / Р.Ф. Тепаев // Неотложные состояния у детей. -М. : 2010. -С. 27-31.
139. Тихомирова И.А. Физиологическая роль и механизмы объединения эритроцитов в агрегаты / И.А. Тихомирова, A.B. Муравьев // Российский физиологический журнал. 2007. - № 12. - С. 1382-1393.
140. Тихоненко O.A. Часто и длительно болеющие дети причины, иммунологические нарушения и реабилитация / O.A. Тихоненко, А.С.Панченко // Забайкальский медицинский вестник. 2007. - № 1. -С. 30-38.
141. Функциональное состояние Т и В -клеточного звеньев иммунитета у часто болеющих ОРЗ детей / О.В. Кладова и др. // Детские инфекции. 2009. - № 2. -С. 15-19.
142. Хаитов P.M. Роль паттерн-распознающих рецепторов во врожденном и адаптивном иммунитете / P.M. Хаитов, М.В. Пащенков, Б.В. Пинегин // Иммунология. 2003. - № 1. - С. 66-76.
143. Хаитов P.M. Физиология врожденного иммунитета / P.M. Хаитов // Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. 2006. - № 6. - С. 649661.
144. Хлыстова З.С. Становление системы иммуногенеза плода человека. М. : Медицина. - 1987. -295с.
145. Хорошилова Н.В. Иммунопатогенетические особенности респираторных вирусов и новые возможности иммунокоррекции / Н.В. Хорошилова // Детские инфекции. 2009. - № 4 . - С. 22-26.
146. Часто болеющие дети мегаполисов: лечение и профилактика острых респираторных инфекций / Л.С. Намазова и др. // Педиатрическая фармакология. 2005. - Т. 2. - № 1. - С. 3-7.
147. Часто и длительно болеющие дети: современные возможности иммунореабилитации. Руководство для врачей / H.A. Коровина и др. М. Контимед. - 2001. - 68с.
148. Шитикова A.C. Тромбоцитарный гемостаз / A.C. Шитикова A.C. . СПб. 2000.-224с.
149. Шитикова A.C. Тромбоцитопатии, врожденные и приобретенные. СПб. -2008 -383с.
150. Шойхет Я.Н. Дефиниция в учении о синдроме диссеминированного свертывания крови / Я.Н. Шойхет, А.П. Момот // Проблемы клинической медицины. 2009. - № 1. - С. 104-109.
151. Шойхет Я.Н. О роли и взаимосвязи гемостатических и воспалительных реакций в формировании очагов гнойной деструкции органов и тканей / Я.Н. Шойхет, А.П. Момот // Проблемы клинической медицины. 2008. - № 4. - С. 102-117.
152. Шубич М.Г. Взаимосвязь цитохимической активности лейкоцитов с феноменом ауторозеткообразования и его клиническое значение у больных лептоспирозом / М.Г. Шубич, М.Г. Авдеева, Д.Л. Мойсова // Клиническая лабораторная диагностика. 1997. - Л. -С. 13-14.
153. Щербакова Л.А. Клинико-патогенетическое значение системы мононуклеарных фагоцитов при рецидивирующем круге у детей : автореф. дис. . канд. мед. наук. М. , 2003. - 20с.
154. Эрдес С.И. Возможности применения иммуномодулирующего препарата на основе смеси лизатов бактерий в педиатрической практике / С.И. Эрдес, С.А. Ревякина // Вопросы современной педиатрии. 2010. - Т. 9, № 6. - 63-68.
155. Activation of airway epithelial cells by Toll-like receptor agonists / Q. Sha et al. // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 2004. - Vol. 31. - P. 358-364.
156. Alarmins link neutrophils and dendritic cells / D. Yang et al. // Trends Immugol. -2009. Vol. 30. - P. 531-537.
157. Analysis of nasal secretions during experimental rhinovirus upper respiratory infections / Y. Sgarashi et al. // J. Allergy clin. Immunol. 1998. - Vol. 92. - P. 722731.
158. Barnes P.J. Airway epithelial receptors / P.J. Barnes // Eur. Rep. Rev. № 4 - P. 371-379.
159. Bianchi M.E. DAMPs. PAMPs and alarmins: all we need to know about dang / M.E. Bianchi // J. Leukocyte Biol. 2007. - Vol. 81. - P. 1-5.
160. Brightbill H. Toll-like receptors: molecular mechanisms of the mammalian immune response / H. Brightbill, R. Modlin // Immunology. 2000. - Vol. 101. - P. 110.
161. Caamano J. NF-kb family of transcription factor central regulators of innate and adaptive immune function / J. Caamano, C.A. Hunger // Clin. Microbiol. Rev. 2002. -Vol. 15(3). - P. 414-429.
162. C5a negatively regulates toll-like receptors-4 induced immune responses / H. Hawlich et al. // Immunology. 2005. - Vol. 22, № 4. - P. 415.
163. Card9 controls a non-TLR signaling pathway for innate anti-fungal immunity // Nature. 2006. - Vol. 442. - P. 651-656.
164. Charo I.F. The many rols of chemokins and chemokine receptors in inflammation / I.F. Charo, R.M. Ransohoff//NEJM. 2005. - Vol. 354, № 6. -P. 610-621.
165. Chaturvedi U.C. Macrophage dengnevirus : friend or foe? / U.C. Chaturvedi, R. Nagar, R. Chrivastava // Snd. J. Med. Res. 2006. - Vol. 124. - P. 23-40.
166. Christman J.W. The role of nuclear factor-kB in pulmonary diseases / J. W. Christman, R.T. Sadikot, T.S. Blackwell // Chest. 2000. - Vol. 117. - P.1482-1487.
167. Cooperative effects of rhinovirus and TNF-a on airway epithelia cell chemokine expression / D.C. Newcomb et al. // Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 2007. -Vol. 293. - P. 1021. - 1028.
168. Copley A.L. Roles of platelets in physiological defence mechanisms and pathological conditions //Folia. Haematol. 1979. - Vol. 106, № 5-6. - P. 732-764.
169. Cytokine levels during symptomatic viral upper respiratory tract infection / D.A. Gentile et al. // Ann. Allergy Ashma Immunol. 2003. - Vol 91(4). - P. 362-367.
170. Dinarello Ch. A. Interleukin-lbeta and the autoinflammary diseases / Ch. A. Dinarello //N. Engl. J. Med. 2009. - Vol. 360(23). - P. 2467-2470.
171. Effects of parainfluenza type 3 virus on guinea pig pulmonaly alveolar macrophage functions in vitro / P.A.J. Henricks et al. // Inflammation. 1998. - Vol. 17. - P. 663-675.
172. Endothelial cell specific adhesion molecule (ESAM) localizes to platelet- platelet contacts and regulates thrombus formation in vitro / T.G. Stalker et al. // J. Thromb. Haemost. 2009. - Vol. 7, № 11.-P. 18886-1896.
173. Engelmann B.E. Intravascular tissue factor pathway a model for rapid initiation of coagulation within the blood vessel / B.E. Engelmann, T. Luther, J. Miller // Thromb. Haemost. - 2003. - Vol. 89, № 1. - P. 3-9.
174. ESAM supports neutrophil extravasation, activation of RHO, and VEGF-induced vascular permeability / F. Wegman et al. // J. Exp. Med. 2006. - Vol. 203. - P. 16711777.
175. Expression of respiratory syncytial virus induced chemokinegene networks in lower airway epithelial cells revealed by c. DNA Microaways / Y. Zhang et al. // J. Virol. - 2001. - Vol. 75, № 19. - P. 9044-9058.
176. Expression of Toll-like receptors on human platelets / R. Shiraki et al. // Thromb. Res. 2004. - Vol. 113. - P. 379-385.
177. Fang F.C. Nitric oxide production by human macrophages : there NO doubt about it / F.C. Fang, A. Vazquez-Torres // Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. -2002. Vol. 282, № 5. - P. 941-943.
178. Garrand O. Platelet Toll-like receptor expression ; the link between danger ligands and inflammation / O. Garrand, F. Cognasse // The international J. of Medicine. 2010. - Vol. 99, № 2. - P. 125-129.
179. Genetics and epidemiology : asthma and infection / N.W. Bartlett et al. // Curr. Opin. Allergy Clin. Immunol. 2009. - Vol. 9(5). - P. 395-400.
180. Gp91 Phos-dependent expression of platelet CD40 ligand / P. Pignatelli et al. // Circulation. 2004. - Vol. 110. - P. 1326-1329.
181. Hayashi Sh. Latent adenovirus infection in COPD / Sh. Hayashi // Chest. 2002. -Vol. 121. - P. 183-187.
182. Haller O. The interferon response circuit : Indaction and suppression by pathogenic viruses / O. Haller, G. Kochs, F. Weber // Virology. 2006. - Vol. 344. - P. 113-119.
183. Hamid Q.A. Molecular pathology of allergic disease / Q.A. Hamid, E.M. Minshall // J. Allergy Clin. Immunol. 2000. - Vol. 105. - P. 20-36.
184. Human beta-defensins and Toll-like receptors in the upper airway / S. Claeys et al . // Allergy. 2003. - P. 748-753.
185. Identification of NF-kB-dependent gene networks in respiratory syrcytial virus-infected cells / B. Tian et al. // J. Virol. 2002. - Vol. 76- P. 6800-6814.
186. IL-10 and RANTES are elevated in nasopharyngeal secret-ion of children with respiratory syncytial virus infection / H. Murai et al. // Allergology International. -2007. Vol. 56. -P. 157-163.
187. The interaction between the ER membrane protein UNC93B and TLR3,7 and 9 is crucial for TLR signaling / M.M. Brinkmann et al. // J. Cell Biol. 2007. - Vol. 177, №2.-P. 265-275.
188. Interleukin -11: stimulation in vivo and in vitro by respiratory viruses and induction of airway hyperresponsiveness / O. Einarsson et al. // J. Clin. Invest. -1996. Vol. 97. - P. 915-924.
189. Interleukin 4 causes delayed virus cleared in influenza virus-infected mice / T.M. Moran et al . // J. Virol. 2006. - Vol. 70 - P. 52-5235.
190. Janeway C.A. Jr. Approaching the asymptote? Evolution and revolution in immunology / C.A. Jr. Janeway // Cold Spring Harb. Symp. Quant. Biol. 1089. -Vol. 54, Pt. 1. - 1989-P. 1-13.
191. Tantisira K., Klimecki W., Lazarus R. Toll-like receptor 6 gene (TLR6): single-nucleotide polymorphism frequencies and preliminary association with the diagnosis of astma // Genes Immun. 2004. Vol. 5. - P. 343-346.
192. The functional adhesion molecule 3 (JAM-3) on human platelets is a conterreceptor for the leukocyte integrin MAC-1 / S. Santoso et al. // J. Exp. Med. -2002.-Vol. 196, №5. -P. 679-691.
193. The functional impairment of natural killer cells during influenza vorus infection / H. Guo et al. // Immunol. Cell. Biol. 2009. - Sep.l (published on line).
194. Kawai T. The role of pattern-recognition receptors in innate immunity : uplate on Toll-like receptors / T. Kawai, S. Akira // Nat. Immunol. 2010. - № 11. - P. 373384.
195. Kinger M.H. Role of blood platelets in infection and inflammation / M.H. Kinger, W. Jelkmann // J. Interferon Cytokine Res. 2002. - Vol. 22, № 9. - P. 913-922.
196. Kupatt C. // Arteriosclerosis, Tliromb. Vascular Biology. 2000. - Vol. 20. - P 2226-2232.
197. Lacoste J.Y. Eosinophilic and neutrophilic inflammation in asthma, chronic bronchitis and chronic abstructive pulmonary disease / J.Y. Lacoste, J. Bousguet, P. Chanes // J. Allergy Clin. Immunol. 1998. - Vol. 92. - P. 537-548.
198. Lactoferrin acts as an alarmin to promote the recruitment and activation of APCs and antigenspecific immune responses / G. De la Rossa et. al. // Immunology. -2008. Vol. 180. - P. 6868-6876.
199. Ma A.C. Platelets, neutrophilis and neutrophil extracellular traps ( NETs ) in sepsis / A.C. Ma, P. Kubes // J. Thromb. Haemost. 2008. Vol. 6, № 3. - P. 415-420.
200. Macrophage activation on polarization / O. Martinez et. al. // Front. Biosci. -2008. Vol. 13. - P. 453-461.
201. Measurement of tissue factor activity in whole blood / R.A. Santucci et al. // Thromb. Haemost. 2000. Vol 83. - P. 445-454.
202. Medzhitov R. Recognition of microorganisms and activation of the immune response // Nature. 2007. - Vol. 449. - P. 819-826.
203. Modulation of expression and function of Toll-like receptors 3 in A549 and H292 cells by histamine / Y.F. Hou et. al. // Mol. Immunol. 2006. - Vol. 43, № 2. - P. 1982-1992.
204. Modulation of leukocyte reerutment and il-8 expression by the membrane attact complex of complement (c5b-9) in rabbit model of antigen-unduced arthritis // Inflammation. -2002. Vol. 26(6). - P. 311-319.
205. Molekular cloning of the b subunit of complement component eight of rainbow trout / A. Razantzia et al. // Dev. Comp. Immunol. 2003. - Vol. 27. - P. 167-174.
206. Nitric oxide synthesis enhances human immunodeficiency virus replication in primary human macrophages / D. Blond et. al. // Virology. 2000. - Vol. 74, № 19. -P. 8904-8912.
207. A novel polymorphism in the Toll-like receptor 2 gene and its potential association with staphylococcal infection / E. Lorena et al. // Infect. And Immun -2000. Vol. 68. - P. 6398-6401.
208. Nurden A.T. Inherited disorders of platelet function / A.T. Nurden, P. Nurden // Platelets. Second Edition. Amsterdam. 2007. - P. 1029-1050.
209. Olszewska-Pazdrak B. Cell specific expression of RANIES, MCP-1 and MIP-1 by lower airway epithelial cells and eosinophils infected with respiratory syncytial virus / B. Olszewska-Pazdrak // J. of Virology. - 1998. - Vol. 72, № 6. - P. 4756-4764.
210. Oppenheim J.J. Alarmins : chemotactic activators of immune responses / J.J. Oppenheim, D. Yang // Curr. Opm. Immunol. 2005. - Vol. 17. - P. 359-366.
211. Partial reversibility of airflowlimition and increased exhaled N0 and sputum eosinophilia in chronic obstructive pulmonary disease / A. Papi et al. // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2000. - Vol. 162. - P. 1773-1777.
212. Pattern recognition receptors TLR4 and CD 14 mediate response to respiratory suncytial virus / E. Kurt-Jones et al. // Nature Immunology. 2000. - Vol. 1. - P. 398-401.
213. Platelets express functional Toll-like receptors-4 / G. Andonegui et al. // Blood 2005. - Vol. 106, № 7. - P. 2417-2423.
214. Platelets roll on stimulated endothelialium in vivo : an interaction mediated by endothelial P-selection / P.S. Frenette et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1995. -Vol. 92, № 16. - P. 7450-7454.
215. Platelet Toll-like receptor expression modulaters lipopolysaccharide-induced thrombocytopenia and tumor necrosis factor-a prodaction in vivo / R. Aslam et al. // Blood. 2006. - Vol. 107,№ 2. - P. 637-641.
216. Poltorak A., He X., Smirnova I. et al. Defektive LPS signaling in C3H/HeJ and C57BL / lOSCr mise: mutations in TLR4 gene // Sciense. 1998. - V.282. - P. 20852088.
217. Potential role of high mobility group box 1 in viral infectious diseases / H. Wang et al. // Viral. Immunol. 2006. - Vol. 19, № 1. - P. 3-9.
218. Pro-coagulant state resulting from high levels of soluble P-selectin in blood / P. Andre et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000. - Vol. 97, № 25. - P. 1383513840.
219. P-selection interacts with a s2- integrin to enhance phagocytosis / D. Cooper et al. // J. Immunology. -1994. Vol. 153, № 7. - P. 3199-3209.
220. P-selection mediates the adhesion of sickle erythrocytes to the endothelium / N.M. Matsui et al. //Blood. 2001. - Vol. 98. - P. 1955-1962.
221. Quershi S.T., Lariviere L., Leveque G. et al. Endotoxin-tolerant mise have mutations in Toll-like receptor 4 (Tlr4) // J. Exp. Med. 1999. - V. -189. - P. 616-625.
222. Red cell ICAM-4 a novel ligand for platelet-activated Ills, integrin / P. Herman et al. // J. Biol. Chem. 2—3. - Vol. 278, № 7. - P. 4892-4898.
223. Regulation by complement C3a and C5a anaphylatoxins of cytokine production / T. Monsijon et al. // FASEB. 2003. - Vol. 17 (9). - P. 1003-10014.
224. Regulatory T-cells selective express Toll-like receptors and are activated by lipopolysaccharide / J. Caramalho et al. // J. Exp. Med. 2003. - Vol. 197. - P. 403411.
225. Regulatory syncytial virus induced prostaglandin E2, IL-10 and IL-11 generation in antigen presenting cells / H. Bartz et al. // Clin. Exp. Immunology. 2002. - P. 129. - P. 438-450.
226. Respiratory syncytial virus ( RSV) infection induced cyclooxygenase 2 a potential target for RSV therapy / J.Y. Richardson et al. // The Journal of Immunology. 2005. - Vol. 174. -P. 4356-4364.
227. Role of adapter TRI 1 in the My D88- independent Toll-like receptor signaling pathway / M. Yamamoto et al. // Science. 2003. - Vol. 301. - P. 640-643.
228. Role of NF-kB in cytokine prodaction induction induced from human airway epithelial cells by rhinovirus infection / J. Kim et al. // The Journal of Immunology. -2000. Vol. 165. - P.3384-3392.
229. Sancher T.A. Tumor necrosis factor-a activation by adenovirus El/ 135CR3 occurs in a cell-dependent and cell-independent manner / T.A. Sancher, J. Leland Booth, J.P. Metcalf //Am. J. Lung. Cell Mol. Physiol. 2002. - Vol. 283. - P. 619-627.
230. Sandset P.M. Tissue factor pathway inhibitor revisited / P.M. Sandset. U. Abildhaard // Thromb. Haemost. 2004. - Vol. 2, № 12. - P. 2242-2243.
231. Saravar S.R. Conçurent production il-2, il-10 and gamma interferon in the regional lumph nodes of mice with influenza pneumonia / S.R. Saravar, P.C. Doherty // J. Virol. -2004. Vol. 68. - P. 3112-3119.
232. Stimulation of P-selection glycoprotein ligand-1 on mouse neutrophils activates s-2- integrin mediated cell attachment to ICAM-1 / J.E. Blanks et al. // The Journal of Immunology. 1998. - Vol. 28, № 2. - P. 433-443.
233. Studies on the interactions between C-reactive proteins / A. Biro et al. // Immunology. 2007. - Vol. 121, № 1. - P. 40-50.
234. Targeted Expression of is-11 in the murine airway causes lymphocytic inflammation, bronchial remodeling and airway obstruction / W. Tang et al. // J. Clin. Invest. 1996. - Vol. 98. - P. 2845-2853.
235. Teramoto S. The Role of nuclear factor-kb activation in airway in flammation following adenovirus infection and COPD / S. Teramoto, H. Kume // Chest. 2001. -Vol. 119. - P. 1294-1295.
236. Thrombin induced the release of angiopoetin-1 from platelets / J.J. Li et al. // Thromb. Haemost. 2001. Vol. 85. - P. 204-206.
237. Toll-like receptor 3 is induced by and mediates antiviral active aganst rhinovirus infection of human bronchial epithelial cells / C.A. Hewson et al. // J. of virol. -2005. Vol. 79, № 19. - P. 12273-12279.
238. Toll-like receptor 4 ligand can differencialy modulate the release of cytokines by humen platelets / F. Cognasse et al. // Brit. J. of Haemost. 2008. - №4. - P. 84-91.
239. Toll-like receptor 2 mediates cellular activation by the B subunits of type II heat-labile enterotoxins / G. Hajishengallis et al. // Infest. Immun. 2005. - Vol. 73, № 3. -P. 1343-1349.
240. Tumouz necrosis factor-alpha and leukotrience E4 production in wheezy infants / J.M. Balfour-Lynn et al. //Clin. Exp. Allergy. 1998. - Vol. 24. - P. 121-126.
241. Turner R.B. The role of neutrophyls in the pathogenesis of rhinovirus infections / R.B. Turner // Pediatr. Infect. 1990. - Vol. 2. - P. 832-835.
242. Type 1 interferon gene induction by the interferon regulatory factor family of transcription factors / K. Honda et al. // Immunity. 2006. - № 25. - P. 349-360.
243. Wang X., Moser C., Louboutin J. et al. Toll-like receptor 4 mediates innat immune response to Haemophilus influenza infection in mous lung // J. Immunol. -2002. Vol. 168. - P. 810-915.