Автореферат и диссертация по медицине (14.00.16) на тему:Неспецифическая реактивность организма и морфофункциональные изменения печени экспериментальных животных в условиях перорального воздействия стимулятора роста растений (экспериментальное исследование)

На правах рукописи

\

ЮСОВ АЛЕКСАНДР АРИНАРИЕВИЧ и°ЗОе22 18

НЕСПЕЦИФИЧЕСКАЯ РЕАКТИВНОСТЬ ОРГАНИЗМА IIМОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПЕЧЕНИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ В УСЛОВИЯХ ПЕРОРАЛЬНОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ СТИМУЛЯТОРА РОСТА РАСТЕНИЙ

(экспериментальное исследование) 14 00 16 - патологическая физиология

Автореферат диссертации на соискание з'ченой степени кандидата медицинских наук

Саранск - 2007

003062218

Работа выполнена на кафедре патофизиологии ФГОУ ВПО «Чувашский государственный университет им И Н Ульянова»

Научный руководитель: заслуженный деятель науки ЧР,

доктор медицинских наук, профессор ЛII Иванов

Официальные оппоненты: заслуженный врач РМ, доктор

медицинских наук, профессор В К Константинов

доктор медицинских наук, профессор 3 Д Акугинова

Ведущее учреждение: Нижегородская государственная

медицинская академия

Защита диссертации состоится «_»_2007 г

в _ часов на заседании диссертационного совета Д

212 117 08 в ГОУВПО «Мордовский государственный университет им НП Огарева» (430000, г Саранск, ул Большевистская, 68)

С диссертацией можно ознакомится в научной библиотеке ГОУВПО «Мордовский государственный университет им Н П Огарева» (430000, г Саранск, ул Большевистская, 68)

Автореферат разослан « » 2007 г

Ученый секретарь диссертационного совета,

доктор мед наук, профессор С А Козлов

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования изменения неспецифической реактивности организма в условиях токсического поражения печени связана с неуклонным ростом заболеваний печеночно-билиарной системы и аллергических заболеваний В настоящее время признано, что иммунная система кроме защитной функции от генетически чужеродных субстанций, играет важнейшую роль в поддержании структурного и функционального гомеоста-за организма В условиях патологии клеточные и гуморальные факторы иммунной системы оказывают влияние не только на иммунокомпетентные. но и на неиммунокомпетентные органы (М Л Колотилова, Л Н Иванов, 2003, В М Рыжов с соавт , 2004, Е В Ферапонтова, 2005, В Г Подопригорова, ГМ Цыганкова, НФ Фаращук, 2006, Dmg Lei et al, 2004,Tajiri Takuma et al, 2005)

Известно, чго морфо-функциональные изменения печени возникают не только при повреждениях гепатоцитов в экспериментальных условиях, но и при систематическом кот акте с ге-патотропными веществами в профессиональной деятельности человека на производстве, а так же в быту Немаловажное значение при этом имеет уровень экологического загрязнения атмосферного воздуха выбросами промышленных предприятий, содержащих гепатотропные вещества, которые в некоторых районах превышают в 8-10 раз среднегодовые ПДК и обуславливают снижение антитоксической функции печени (Рыжов В М с соавт , 2004, И Ю Ищенко, С В Мичурина, 2005, Wong Chun Kwan et al, 2004)

Международный регистр токсических химических веществ включает в настоящее время сотни известных экологически вредных веществ, оказывающих раздражающее, сенсибилизирующее и иммунотоксическое действие, в результате че1 о часто имеют место "поломки" систем регуляции биохимических процессов, которые, достигая определенного уровня, способствуют формированию различных заболеваний человека, в частности токсических гепатитов и аллергических заболеваний (10 И Губ-ский, 1989, В М Фролов, НА Пересадин, 1994, С Д Подымова, 1995, 2005, НИ Торопова. OA Синявская, 1997. С Л Ялукова. Л Н Иванов, 2002. В С Ешану с соавт , 2006)

Недостаточность изучения влияния остаточных количеств биостимуляторов в продуктах питания на здоровье человека, а также возможность попадания их в человеческий организм при контакте с ними и при введении сельскохозяйственным животным этих препаратов, вызывают необходимость исследования влияния биологически активных веществ на организм животных и человека

Целью настоящего исследования явилось изучение реактивности организма у экспериментальных животных (морских свинок) в условиях адаптационной морфо-функциональной дисфункции печени на фоне длительного пероральною введения стимулятора роста растений (альфа-(2-хлорэтокси) поли [2 хло-рэтилфосфорилоксиэтиленоксил] - омега - (2 хлорэтокси - 2 — хлорэтифосфонада) в различных дозах

Для достижения данной цели поставлены следующие задачи:

1 Из\ чи!Ь биоамшшые обеспечения структур ткани печени у интактных и подопытных животных при пероральном введении стимулятора роста растений (СРР) в возрастающих дозах (2 мг/кг, 20 мг/кг, 100 мг/кг)

2 Изучить динамику изменения реактивности подопытных животных при пероральном введении СРР в дозе 2 мг/кг веса в течение 3-х месяцев гематологическими, фагоцитарными, биохимическими, гистоэнзимопатическими методами исследования

3 Изучить динамику изменения реактивности подопытных животных при пероральном введении СРР в дозе 20 мг/кг веса в течение 3-х месяцев гематологическими, фагоцитарными, биохимическими, гистоэнзимопатическими методами исследования

4 Изучить динамику изменения реактивности подопытных животных при пероральном введении СРР в дозе 100 мг/кг веса в течение 3-х месяцев гематологическими, фагоцитарными, биохимическими, гистоэнзимопатическими методами исследования

Научная новизна. Впервые изучен уровень биоаминов лю-минисцеш но-гистохимическими методами в структурах печени у подопытных живот ных при перорачьном введении стимулятора роста растений в различных дозах

На основании биохимических, фагоцитарных, гистологических методов исследований изучена адаптационная и пато-

логическая реактивность подопытных животных в условиях пе-рорального введения СРР в различных дозах

На фоне длительного перорального введения стимулятора роста растений установлено, что активность ферментов в сыворотке крови повышается, а в ткани печени понижается и носит дозозависимый характер

Научно-практическая значимость. Полученные результаты об адаптационных и патологических изменениях реактивности организма в условиях перорального введения СРР имеют чрезвычайно важное теоретическое значение в понимании патогенеза этих изменений и разработке их патогенетической коррекции

Полученные результаты свидетельствуют о дозозависимой токсичности исследуемого препарата на органы и системы организма, чго подводит к необходимости разработки способов и мер защиты при производстве и применении данного соединения

Внедрение в практику. Результаты данной работы используются в учебном процессе на кафедрах патологической физиологии, профилактической медицины, аллергологии и иммунологии медицинского факультета Чувашского государственного университета им И Н Ульянова

Полученные результаты могут быть использованы аллергологами, терапевтами, гастроэнтерологами, гематологами, а также профпатологами при проведении профилактики профессиональных заболеваний

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на научно-практической конференции «Иммунодефицитные состояния в клинике внутренних болезней» (г Чебоксары, 1999), на заседаниях общества патофизиологов Чувашской Респубпики (г Чебоксары, 2000), на международной конференции, посвященной 75-летию А М Уголева «Механизмы функционирования висцеральных систем» (г С-Петербург, 200]), на 3-см Российском конгрессе по патофизиологии «Дисрегуляционная патология органов и систем» (г Москва, 2004), на конференции «Достижения и проблемы клинической медицины» (г Чебоксары, 2005), на совместном заседании общества патофизиологов и общества иммунологов и аллергологов Чувашской Республики (г Чебоксары, 2005)

Положения, выносимые на защиту.

1 Пероральное введение стимулятора роста растений подопытным морским свинкам в различных дозах (2 мг/кг, 20 мг/кг, 100 мг/кг) в течение 3-х месяцев вызывает различные адаптационные, патогенные изменения реактивности организма, в гом числе морфофункциональные изменения печени в зависимости от дозы вводимого вещества

2 Пероральное введение стимулятора роста растений подопытным морским свинкам в дозе 2 мг/кг сопровождается адаптационными изменениями в виде повышения фагоцитарной активности лейкоцитов, повышения катехоламинов в гепатоци-тах, макрофагах и патогенными изменениями в виде лейкоцитоза, эозинофилии, увеличением активности аланинаминотранфе-разы, аспартатаминотрансферазы, билирубина в сыворотке крови, снижением активности моноаминооксидазы, кислой и щелочной фосфат азы в гепатоцитах и очаговой гидропической дистрофией гепатоцитов

3 Пероральное введение стимулятора роста растений подопытным морским свинкам в дозе 20 мг/кг сопровождается адаптационными изменениями в виде повышения фагоцитарной активности лейкоцитов, повышения катехоламинов в гепатоцитах, макрофагах и более выраженными, чем в предыдущей дозе, патогенными изменениями в виде лейкоцитоза, эозинофилии, увеличением активности аланинаминотранферазы, аспартатаминотрансферазы, билирубина в сыворотке крови, снижением активности моноаминооксидазы, кислой и щелочной фосфатазы в гепатоцигах и субтотальной гидропической дистрофией гепатоцитов

4 Пероральное введение стимулятора роста растений подопытным животным в дозе 100 мг/кг сопровождается патогенными изменениями в виде понижения фагоцитарной активности лейкоцитов, лейкоцитоза, эозинофилии, снижения содержания катехоламинов в гепатоцитах, макрофагах, увеличением активности аланинаминотранферазы, аспартатаминотрансферазы, билирубина в сыворотке крови, снижением агтивности моноаминооксидазы, кислой и щелочной фосфотазы в гепатоцитах, тотальной гидропической дистрофией гепатоцитов и лимфоци-тарно-гистиоцитарной инфильтрацией портальных трактов печени

Публикации по теме диссертации.

Материалы диссертации отражены в 15 опубликованных научных работах, в том числе 2 в рецензируемом журнале

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В качестве экспериментальных животных использованы морские свинки (самцы) массой 500-700 граммов Основные экспериментальные опыты проводились в четырех сериях

Первая серия - интактная (контрольная) - 30 животных, для определения физиологического исходного (нормального) уровня исследуемых веществ Подопытным морским свинкам 2-й (30 животных), 3-й (30 животных) и 4-й (30 животных) серий ежедневно перорально вводился стимулятор роста растений (аль-фа-(2-хлорэтокси) поли [2 хлорэтилфосфорилоксиэтиленоксил] - омега - (2 хлорэтокси - 2 - хлорэтифосфонад) в течение трех месяцев из расчета 2 мг/кг. 20 мг/кг и 100 мг/кг массы тела животного Стимулятор роста растений синтезирован в Чувашском государственном университете им ИII Ульянова в 1990 году профессором В В Кормачевым и его учениками, имеет государственный регистрационный номер 9998590 от 18 10 90 г Авторское свидетельство №1792610, опубликовано в Бюллетене изобретений в 1993 г №5

Контрольные и подопытные животные были забиты до кормления под глубоким масочным эфирным наркозом в одно и тоже время суток Исследуемый материал подвергался различным общепринятым патоморфологическим, гистохимическим и биохимическим методам исследования Печень замораживалась в камере микротома криостата (МК-25) при температуре - 21°С с последующим изготовлением срезов толщиной 15 мкм, которые подвергались дальнейшим гистохимическим методам исследования

Люмшгесцеш по-гнсгохимические методы исследования.

Для избиратепьного выявления уровня катехоламинов и се-ротонина в структурах исследуемого органа применялся лгоми-несиентно-гистохимический метод Фалька - Хилларпа (В Falk, N Hilarp. 1962) в модификации ЕМ Крохиной (ЕМ Крохнна, ПН Александров, 1969)

С целью инденцификации гистаминосодержащих структур печени свежекриостатные срезы обрабатывались люминесценг-но-гистохимическим методом Кросса, Эвана, Роста (Cross et al, 1971)

Для определения активности моноаминоксидазы использовался тетразолиевый метод в прописи g Gleaner et al (1957) с последующим определением плотности поглощения в красном спекгре видимого диапазона диформазаном, выпадающим в осадок в срезах печеночной ткани, регистрировалась при помощи селективного красного светофильтра (624 мкм) насадки ФМЭЛ -1А (светофильтр №14) с последующим вычислением полученных значений по формуле - Lg=Ui/Uo, где - Lg является логарифмом оптической плотности фермента, Uo - фоновое свечение, Ui - уровень свечения структур исследованного препарата Методы выявления кислой и щелочной фосфатазы Уровень активности щелочной фосфатазы определялся с использованием фосфат нафтола AS - BI, прочного синего ВВ и трис - HCI - буфера в прописи Burrstone (1962) Последующее определение активности фермента проводилось вычислением логарифма оптической плотности по вышеизложенной методике (3 Лойда с соавт , 1982)

Активность кислой фосфотазы определялась с использованием фосфат нафтола AS - BI, прочною синего ВВ и 0,1М ацетатного буфера в прописи Burston (1962) Дальнейшее определение активности фермента проводилось вычислением логарифма оптическои плотности по вышеизложенной методике

Методы исследования фагоцитарной активности лейкоцитов и общего количества лейкоцитов и эозинофилов

Определение и результат общего количества лейкоцитов и эозинофилов осуществлялось по общепринятой методике (Л В Козловская, 1985. В В Меньшиков, 1987)

Для изучения статуса неспецифической реактивности организма определялась фагоцитарная активность нейтрофилов (фагоцитарный индекс) периферической крови с использованием латекса, входящим в набор реактивов «Фагоцитоз» (г Чита) (ДН Маянский, АН Маянский, 1982, И С Фрейдлин, 1984)

Биохимические методы исследования

Определение билирубина методом Ендрашика - Клегхорна - Грофа фотоэлектрокалометрей на ФЭК -2 (В Г Колб, В С Камышников, 1982)

Активность печеночных ферментов аланинаминотрансфера-зы (АлАТ) и аспартатаминотрансферазы (АсАТ) сыворотки крови определяли унифицированным динитрофенилгадразиновым методом Райтмана-Френкеля (В Г Колб, В С Камышников, 1982, А И Карнищенко, 1999)

Гистологические методы исследования ткани печени

Для подтверждения воспроизведенного токсического поражения печени и для оценки морфологических изменений печени в подопытных сериях окраску срезов тканей проводили по общепринятой методике гематоксилинэозином (ГА Меркулов, 1969)

Методы статистической обработки

Весь цифровой материал обрабатывался статистически с использованием компьютерных программ на базе процессора электронных таблиц QWATTRO PRO и Excel на компьютере IBM РС/386 с вычислением критерия Стьюдепта и достоверности различий между контрольными и опытными сериями Вычисляли среднюю арифметическую взвешенную (М), ошибку средней арифметической (ш) и коэффициент достоверности (t) Степень достоверности различий показателей определялась в каждой группе по отношению к исходному результату (Р) Результат считали достоверным при Р менее 0,05 (0,01, 0,001)

Результаты собственных исследований и их обсуждение

Выступая в качестве одного из путей поступления химических веществ в организм и в ряде случаев выделения, желудочно-кишечный тракт может подвергаться их непосредственному токсическом)' влиянию за счет местного действия Наличие сложных функциональных взаимосвязей между отдельными органами и звеньями пищеварения, а также вероятность токсического эффекта вследствие резорбтивного действия химических веществ предполагают возможность нарушения функции поджелудочной железы и гепатобилиарной системы (Здольник Т Д

и др. 2000, Подопригорова В Г. Цыганкова Г M, Фаращук H Ф.2006)

Исследование уровня биоаминов в структурах печени показало, что количественные изменения этих биоаминов (катехола-минов, серотонина и гистамина) зависят от дозы вводимого вещества Пероральное введение СРР в дозе 2 мг/кг приводит к статистически достоверному увеличению катехоламинов, серотонина и i истамина в гепатоцитах и клетках Купфера, к снижению моноаминооксидазы в гепатоцитах Уровень содержания катехоламинов. серотонина и гистамина и моноаминоксидазы в гепатоцитах 2-й серии увеличивается соответственно на 57,6% (КА), 54,7% (СТ), 13,4% (ГСТ, а моноаминооксидаза снижается на 10,6% (МАО), в макрофагах увеличивается на 15,7% (КА), 28,9% (СТ), 13% (ГСТ) по сравнению с интактной группой (табл 1)

В 3-й серии дозу вводимого вещества увеличили с 2 мг/кг до 20 мк/кг, что в 10 раз больше показателя 2-й серии

Уровень содержания катехоламинов, серотонина, гистамина в 3-й серии также имеет тенденцию к увеличению, а МАО к снижению по сравнению с интактной и 2-й серией Уровень люминесценции катехоламинов в гепатоцитах составил 75,20+0,22 уел ед, серотонина - 115,20+0,28 уел ед, гистамина -68,30±0,42 уел ед . моноаминоксидазы - 0,140+0,002 уел ед , что статистически достоверно выше на 88% (КА), 94,4% (СТ), 39,1% (ГСТ), МАО ниже на 26,3%, а в клетках Купфера увеличивается на 36,5% (КА), 49,5% (СТ) и 50,5% (ГСТ) по сравнению с контрольной группой (табл 1 ) Сравнивая результаты количественного соотношения биоаминов и моноаминоксидазы 3-й серии с 2-й серией обнаружено статистически достоверное увеличение в гепатоцитах катехоламинов fia 19,5%, серотонина на 25,6%, гистамина на 22,6%, МАО к снижению на 17,7%, а в клетках Купфера к увеличению катехоламинов на 18%, серотонина на 15,9%, гистамина на 33,3%

Таблица 1

Активность катехоламинов, серотонина, гистамина, моноачиноксидазы, кислой и щелочной фосфатазы у интактных морских свинок и животных 2-й (2 мг/кг), 3-й (20 мг/кг). 4-й (100 мг/кг) серии (пероральное введение СРР) в уел ед

Структуры Серии опытов

Контр серия (1-я серия) М±ш 2-я серия М±ш Р 3-я серия М±ш Pi 4-я серия М±гп Р2

КА Iепато-циты 39,9±0,18 62,9±0,18 Р<0,001 75,2±0,22 Р<0,001 Р,<0,001 67,1± 0,18 Р<0,001, Р,<0,001 Р2<0,001

кл Купфера 62,2±0,16 72,0±0,16 Р<0,001 84,9±0,15 Р<0,001 Р, <0,001 67,0± 0,14 Р<0,001,Р|<0 001 Р2<0,001

CT гепато-циты 59,2±0,39 91,6±0,34 Р<0,001 115,1 ±0,28 Р<0,001 Р,<0,001 107,5± 0,34 Р<0,001, Р,<0,001 Р2<0,001

кл Купфера 94,9±0,35 122,4±0,45 Р<0,001 141 9±0,46 Р<0,001 Р,<0,001 106,4± 0,4 Р<0,001, Р| <0,001 Р2<0,001

ГСТ гепато-циты 49,1 ±0,23 55,7±0,26 Р<0 001 68,3±0,42 Р<0,001 Р,<0,001 52,2± 0,25 Р<0,001, Р,<0,001 Р2<0,001

кл Купфера 52,4±0,34 59,2±0,25 Р<0,001 78,9±0,38 Р<0,001 Р,<0,001 64,2± 0,24 Р<0,001, Р,<0,001 Р2<0,001

МАО гепато-циты 0,19±0,002 0,17±0,002 Р<0,001 0,14±0,002 Р<0,001 Р,<0,001 0,12± 0,002 Р<0,001, Р,<0,001 Р2<0,001

КФ гепато-циты 0,23±0,002 0,20±0,002 Р<0,001 0,16±0,002 Р<0,001 Р,<0,001 0,14± 0,002 Р<0,001,Р,<0 001 Р2<0,001

ЩФ гепат о-циты 0,29±0,002 0,26±0,002 Р<0,001 0,18±0 002 Р<0,001 Р,<0,001 0,14+ 0,002 Р<0,001, Р,<0,001 Р2<0,001

Примечание КА - катехоламины, СТ - серотонин, ГС7 - гистамин, МАО - моноаминоксидаза, КФ -кислая фосфатаза, ЩФ - щелочная фосфатаза, Р - по отношению к 1-ой (интактной) серии, Р] - по отношению ко 2-й серии, Р2 - по отношению к 3-й серии

В 4-й серии дозу вводимого СРР увеличили в 50 раз по сравнению со 2-й серией (с 2 мг/кг до 100 мг/кг) и в 5 раз по сравнению с 3-й серией (с 20 мг/кг до 100 мг/кг) Результаты микроцитоспектрофлуориметрии уровня катехоламинов, серо-тонина, гистамина и моноаминоксидазы в гепатоцитах и клетках Купфера представлены в табл 1

После перорального введения СРР в гепатоцитах печени животных 4-й серии количественное распределение катехоламинов составило 67Л0±0,18 уел ед, а в макрофагах - 67,00+0,14 уел ед , что статистически достоверно выше по сравнению с ин-тактной группой, в этой серии уровень содержания катехоламинов в гепатоцитах составил 39,90±0,18 уел ед , а в клетках Купфера - 62,20+0,16 уел ед Интенсивность люминесценции катехоламинов в гепатоцитах 2-й серии составила 62,90+0,18 "уел ед , а в макрофагах — 72,00±0,16 уел ед , что достоверно различима аналогичного показателя 4-й серии в гепатоцитах на 6,7% (Р1<0,001), а в макрофагах - 7,5% (р]<0,001) Уровень содержания катехоламинов в гепатоцитах 3-й серии составил 75,20±0,22 уел ед, в клетках Купфера - 84,90±0,15 уел ед , что статистически достоверно ниже исходной 4-й серии в гепатоцитах па 12,1% (р2<0,001), а в клетках Купфера - 26,7% (р2<0,001)

Уровень концентрации серотонина в гепатоцитах 4-й серии статистически достоверно выше по сравнению с контрольной группой на 81,6% (р<0,001), а в макрофагах на 12% (р<0,001) Во 2-й опытной серии отмечаем уменьшение этого моноамина на 17.3%) (в гепатоцитах), а в макрофагах увеличение на 13.1%. в 3-й серии также отмечаем увеличение серотонина во всех структурах печени в гепатоцитах на 7%, а в клетках Купфера на 26,1%, по сравнению с 4-й серией (табл 1 )

Изучая динамику нейромедиаторного обеспечения структур печени (табл 1 ) выявлено, что уровень содержания гистамина в 4-й серии статистически достоверно выше в гепатоцитах на 6,3% (р<0,001), в клетках Купфера на 22,5%, по сравнению с ин-тактной серией После воздействия СРР заметна некоторая волнообразное гь изменения концентрации гистамина в этих клетках

В 4-й серии уровень гистамина в гепатоцитах и клетках Купфера имеет статистически достоверные изменения (как в

сторону повышения в гепатоцитах на 6,3%, так и к понижению в макрофагах на 8,4%), по сравнению со 2-й серией Показатели биоаминов в 4-й серии по сравнению с 3-й серией статистически достоверно снижаются в гепатоцитах — на 23,6%, в клетках Куп-фера - на 18,7% (табл 1 )

Уровень активности МАО в гепатоцитах 2-й серии составил 0,170±0,002 уел ед, что на 10,6% меньше по сравнению с контрольной серией В 3-й серии уменьшается содержание МАО по сравнению с контрольной серией на 26,3%, со 2-й - на 17,7% В 4-й серии также отмечаем снижение активности этого фермента по сравнению с интактной серией на 36,9%, со 2-й серией - на 29,5%, с 3-й серией - на 14,3% соответственно

При гистоферментативном исследовании активности щелочной фосфатазы в гепатоцитах (табл 2 ) выявлено, что уровень этого фермента в 4-й опытной серии составил 0,140±0,002 уел ед , 3-й серии - 0,180±0,002 уел ед , 2-й серии - 0,260±0,002 уел ед , а в контрольной серии - 0,290±0,002 уел ед, что наглядно подтверждает уменьшение активности этого фермента но сравнению с контрольной серией в 2-й серии - на 10,4%, в 3-й серии - на 38% и в 4-й серии - на 51,8%

Гистохимическое исследование активности фермента кислой фосфатазы показало, что по мере увеличения дозы вводимого вещества, уровень активности этого фермента уменьшается (табл 2.) В контрольной серии активность этого фермента составила 0,230±0,002 уел ед, во 2-й подопытной серии -0,200+0,002 уел ед, в 3-й серии - 0,160+0,002 уел ед, и в 4-й серии - 0,140±0,002 уел ед Как видно из табл 6 2 уровень этого фермента в 2-й серии уменьшается на 13,1%, во 3-й серии - на 30,5% и в 4-й серии - на 39,2% по сравнению с интактной серией

Таблица 2

Биохимические, гематологические и фагоцитарные показатели интактных морских свинок и животных

Серии опытов

Контр серия (1-я серия) М±т 2-я серия М±т Р 3-я серия М±т Р, 4-я серия М±т Р2

Общий билирубин (мкмоль/л) 7,5±0,34 10,8± 0,39 Р<0,001 14,0± 0,26 Р<0,001 Р, <0,001 18,40± 0,34 Р<0,001, Р,<0,001 Р2<0,001

АлАТ (нмоль/с л) 215,6±2,69 264,4± 2,23 Р<0,001 309,4± 2,7 Р<0,001 Р,<0,001 347,30± 2,15 Р<0,001, Р,<0,001 Р2<0,001

АсАТ (нмоль/с л) 113,2±1,28 135,2± 1,53 Р<0,001 212,50± 2,54 Р<0,001 Р, <0,001 249,50d= 2,24 Р<0,001, Р,<0,001 Р2<0,001

Общее кол-во лейкоцитов х109 в 1 л 13,64±0,12 14,18± 0,09 Р<0,01 15,54± 0,11 Р<0,001 Р, <0,001 18,00± 0,14 Р<0,001, Р,<0,001 Р2<0,001

Эозинофилы 2,7±0,3 6,1± 0,2 Р<0,001 11,2± 0,3 Р<0,001 Р,<0,001 16,5± 0,3 Р<0,001, Р,<0,001 Р2<0,001

Фагоцитарный индекс в % 37,4±0,37 39,9х 0,38 Р<0,001 43,40± 0,37 Р<0,001 Р,<0,001 39,9± 0,31 Р<0,001, Рг недосг Р2<0,001

Фагоцитарное число 3,5±0,45 4,09± 0,43 Р<0,05 7,00± 0,47 Р<0,001 Р, <0,001 4,10± 0,31 Р-недост , Р,-недост Р2<0,001,

Примечание Р - по отношению к 1-ой (интактной) серии, Р, - по отношению к 2-й серии, Р2 - по отношению ко 3-й серии

Исследование функционального состояния печени демонстрирует повышение общего билирубина по мере увеличения дозы вводимого вещества В контрольной серии содержание общего билирубина составило 7,50±0,34 мкмоль/л. у подопытных животных соответственно 10,80±0,39 мкмоль/л (р<0,001) (2-я серия), 14,00±0,26 мкмоль/л (р<0.001) (3-я серия), 18,40±0,34 мкмоль/л (р<0,001) (4-я серия) Как видно из табл 6 2 содержание общего билирубина во 2-й опытной серии больше на 44%, в 3-й серии - на 86,6% и в 4-й серии - на 145% по сравнению с интактной серией

Достоверно повышенный уровень аминотрансфераз (АлАТ, АсАТ) свидетельствует о выраженных воспалительных процессах не только печени, но и во всем организме опытных животных Увеличение активности аминотрансферазы (АлАТ) наблюдается уже в продромальном периоде, когда другие признаки не выражены (до гистологических изменений) Определяли активность (АлАТ), играющего важную роль в ранней диагностике токсических г епатоцеллюлярных поражений Определение ас-партатаминотрансферазы АсАТ является менее специфическим тестом, так как ее активность может увеличиваться после инфаркта миокарда и повреждения скелетных мышц Поэтому определение активности АлАТ, АсАТ является чувствительным тестом в динамике токсических поражений печени В ходе эксперимента было обнаружено увеличение активности ферментов АлАТ и АсАТ по мере увеличения дозы вводимого СРР Уровень активности АлАТ в сыворотке крови (табл 2 ) контрольной серии составил 215,60±2,69 нмоль/с л, а у опытных животных 2-й серии - 264,00±2,23 нмоль/с л (р<0,001), 3-й серии - 309,4+2,7 нмоль/с л (р<0 001), 4-й серии - 347,30+2.15 нмоль/с л (р<0 001) Во 2-й опытной серии отмечается увеличение активности АлАТ - на 22,4%, в 3-й серии - на 43,5% и в 4-й серии - на 61% по сравнению с интактной серией

Изменение содержания АсАТ в сыворотке крови аналогично изменению АлАТ По мере увеличения дозы вводимого вещества активность этого фермента также увеличилась (табл 2 ) В контрольной группе активность АсАТ в сыворотке крови составила 113.20+1,28 нмоль/с л. то у экспериментальных животных 2-й серии - 135,20+1,53 нмоль/с л (р<0,001), 3-й серии -

212,50±2.54 нмоль/сл (р<0 001). 4-й серии - 249.50+2,24 нмоль/с л, а в процентном соотношении увеличение этих показателей составляет во 2-й серии - на 19,4%, в 3-й серии - на 87,7% и в 4-й серии - на 120%

При воздействии СРР на организм экспериментальных животных отмечается как лейкоцитоз, так и эозинофилия (табл 2 )

Общее количество лейкоцитов контрольной серии составило 13,64±0,12х109/л, у опытных животных 2-й серии - 14,18+0,09 х 109/л (р<0,001), 3-й серии - 15,54+0,11х109/л (р<0,001), 4-й серии - 18,00±0,14х109/л (р<0,001) По мере увеличения дозы вводимого вещества отмечается статистически достоверное увеличение лейкоцитов и эозинофилов Содержание общего количества лейкоцитов увеличивается во 2-й подопыгной серии - на 4%, в 3-й серии - на 14% и в 4-й серии - на 32% по сравнению с интактной серией В контрольной серии процентное соотношение эозинофилов составило 2,7±0,3, а в серии после воздействия этого препарата б, 1 ±0,2 (2-я серия), 11,2±0,3 (3-я серия) и 16,5+0,3 (4-я серия) В опытных сериях процентное содержание эозинофилов в лейкоцитарной формуле увеличивалось во 2-й серии на 125%, в 3-й серии - на 315% и в 4-й серии - на 510% по сравнению с интактной серией Данные абсолютного и процентного содержания эозинофилов в лейкоцитгроной формуле подтверждают чю происходит усиление сенсибилизации организма экспериментальных животных под влиянием этого вещества

Введение морским свинкам стимулятора роста растений вызывает стимуляцию фагоцитарной активности нейтрофильных лейкоцитов Фагоцитарный индекс в контрольной серии составил 37,40±0,37%, а в опытных сериях увеличивается соответственно во 2-й серии на 6,7%, в 3-й серии на 16% и в 4-й серии на 6,7% Фаюцитарное число в интактной серии составило 3,50±0,45, а в сериях после воздействия этого вещества также отмечаем активацию нейтрофильных лейкоцитов Во 2-й опытной серии этот показатель составил 4,90±0,43 (р<0,С5), 3-й серии - 7,00±0,47 (р<0,001) и в 4-й серии - 4,10+0,31, что статистически недостоверно Фагоцитарное число увеличилось во 2-й серии на 40%, в 3-ей серии на 100% и в 4-й серии на 17% по сравнению с интактной серией

В гистологических препаратах печени животных 4-й серии, получавших наибольшую дозировку (100 мг/кг) отмечены следующие изменения Патология характеризовалась субтотальной I идропической дистрофией гепатоцитов, вплоть до «баллонной», синусоиды были сдавлены увеличенными гепатоцитами На этом фоне обнаруживались очаговые фокусы колликвиаци-онных некрозов с утратой ядер и разрушением клеточных мембран В большей степени патология была выражена в центральных отделах печеночных долек Портальные тракты большей частью без патологических изменений, однако, примерно в 1/3 описываемых структур выявлялось в разной степени выраженная лимфо-гисгиоцитарная инфильтрация, причем, инфильтрат разрушал пограничные пластинки и проникал в прилежащие отделы паренхимы

Выводы

1 При пероральном введении стимулятора роста растений в различных дозах (2 мг/кг, 20 мг/кг, 100 мг/кг) подопытным животным в течение 3-х месяцев происходят дозозависимые адаптационные и патогенные изменения реактивности организма и морфофункциональные изменения печени

2 Пероралыюе введение стимулятора роста растений в дозе 2 мг/кг подопытным морским свиггкам в течение 3-х месяцев сопровождается статистически достоверным увеличением уровггя катехоламинов, серотонина, гистамина, общего билирубина, аминотрансфераз (АлАТ, АсАТ), лейкоцитозом, эозино-филией. повышением фагоцитарной активности нейтрофильных лейкоцитов, снижением активности моноаминооксидазы, кислой и щелочной фосфатаз в гепатоцитах и очаговой гидропической дистрофией гепатоцитов

3 Пероральное введение стимулятора роста растетгий в дозе 20 мг/кг подопытным животным в течение 3-х месяцев сопровождается более выраженным, чем в предыдущей дозе статистически достоверггьгм увеличением уровня катехоламинов, серотонина, гистамина, общего билирубина, аминотрансфераз (АлАТ, АсАТ), лейкоцитозом, эозинофилией, повышением фагоцитарной активности ггейтрофилов, снижением активг гости моноаминооксидазы, кислой и щелочной фосфатаз в гепатоцитах и субтотальной гидропической дистрофией гепатоцитов

4 Пероральное введение стим>лятора роста растений в дозе 100 мг/кг морским свинкам в течение 3-х месяцев сопровождается более выраженным, чем в дозе 20 мг/кг статистически достоверным увеличением уровня общего билирубина, ами-нотрансфераз (АлАТ, АсАТ). лейкоцитозом, эозинофилией, уменьшением фагоцитарной активности нейтрофильных лейкоцитов, а таюке снижением уровня катехоламинов, серотонина. гистамина, активности моноаминооксидазы, кислой и щелочной фосфатаз в гспатоцитах, тотальной гидропической дистрофией гепатоцшов и лимфоцитарно-гистиоцитарной инфильтрацией печени

Практические рекомендации.

1 Результаты данных экспериментальных исследований расширяют представление о роли реактивности организма к воздействиям различных доз стимулятора роста растений попадающим в организм через пищеварительный тракт

2 Количественные и качественные изменения показателей лабораторных исследований служат критериями тяжести течения и прогнозирования исходов патогенных повреждений при воздействии различных доз химических соединений, прежде всего стимуляторов роста растений

Наши данные учитываются врачами при проведении профилактики профессиональных заболеваний у работников сельскохозяйственного производства

3 Результаты нашдх исследований, которые показали дозо зависимую токсичность данного стимулятора роста растений, позволяют задуматься о поиске других стимуляторов роста растений с еще меньшей отрицательной биологической активностью и токсичностью

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1 Юсов А А Влияние стимулятора роста растений на реактивность организма в эксперименте / А А Юсов. Л Н Иванов, В В Кормачев // В мат «Высшая шкош - народному хозяйству Чувашию, (Мед ) - Чебоксары, 1992 - С 77

2 Юсов А А Адренергическая и серотонинергическая реакция в печени животных в условиях парентерального введения стимулятора роста растений / А А Юсов, Л Н Иванов, В В Кормачев // Тез докл науч -практич конф - Чебоксары, 1993 - С 237-239

3. Юсов А А Влияние вещества-стимулятора роста растений на реактивность организма в эксперименте / А А Юсов, Л Н Иванов, В Е Сергеева, В В Кормачев // Тезисы доклада научно-практич конф - Чебоксары, 1993 -С 234-236

4. Юсов А А Влияние стимулятора роста растений на реактивность организма в эксперименте / А А Юсов, Л Н Иванов // Гигиена, ветсанитария и экология животноводства Мат Всерос научно-практич конф - Чебоксары, 1994 - С 497-498

5 Юсов А А Иммунореактивность организма в условиях экспериментального токсического гепатита / А А Юсов, Л Н Иванов, С Л Ялукова // Тезисы докл 1 Росс науч конгр по патофиз - Москва, 1996 - С 143

6 Юсов А А Влияние стимуля юра роста растений на реактивность организма в эксперименте / А А Юсов, Л Н Иванов // Экологический вестник Чувашии Вып 14 - Чебоксары, 1996 -С 24-26

7. Юсов А А Влияние стимулятора роста растений на реактивность в эксперименте / А А Юсов, Л Н Иванов, Л М Яковлева // 3 Съезд физиологов Сибири и Дальнего Востока -Новосибирск, 1997, - С 268-269

8 Юсов А А Влияние стимулятора роста растений на реактивность организма в эксперименте / А А Юсов, Л Н Иванов, И В Басова, Л М Яковлева // Современные тенденции развития гастроэнтерологии Тезисы докл научно-практич конф Ижевск, 1998 - С 294-295

9. Юсов А А Реакции ретикулоэндо гелиальных клеток печени на пероральное введение стимулятора роста растений (СРР) / А А Юсов, Л Н Иванов, Ю Н Митрасов // Имунодефи-цитные состояния в клинике внутренних болезней Тезисы докл научно-практич конф - Чебоксары, 1999 - С 51-53

10 Юсов А А Роль различных экологических факторов в генезе патологических процессов и состояний в эксперименте на животных / А А Юсов, Л Н Иванов, Л М Яковлева // В мат

Второго Российского Конгресса по патофизиологии - Москва, 2000 - С 52-53

11 Юсов А А Влияние стимулятора роста растений на реактивность организма в эксперименте / А А Юсов, Л Н Иванов // Механизмы функционирования висцеральных систем Матер междунар конф, посвящ 75-летию А М Уголева - Санкт-Петербург 2001 - С 425

12 Юсов А А Процессы повреждения печени подопытных животных под влиянием стимулятора роста растений / А А Юсов, Л Н Иванов, Л М Яковлева, И М Ергунов // Медицинский академический журнал Приложение 4 - №3, ТЗ -Санкт-Пегербург, 2003 - С 196

13 Юсов А А Некоторые морфофункциональные проявления реактивности печени у подопытных животных при воздействии стимулятора роста растений / А А Юсов, Л Н Иванов, Л М Яковлева, И М Ергунов // Дисрегуляционная патология органов и систем Тезисы докл 3-го Рос кошр по патофиз -Москва, 2004 - С 95

14 Юсов А А Процессы повреждения печени подопытных животных под влиянием стимулятора роста растений // Достижение и проблемы клинической медицины Сб тр №11 - Чебоксары, 2005 -С 260-261

15 Юсов А А Реактивность организма подопытных животных в условиях перорального воздействия стимулятора роста растений // Журнал Вестник Чувашского университета - Чебоксары, 2006 -№2 - С 15'-155

Формат 60x84/16 Бумага офсетная Печать оперативная Тираж 10Оэкз Заказ №

$$

Отпечатано в типографии Чувашского госуниверситета

428015 Чебоксары, Московский проспект, 15

*

Актуальность исследования. Изменения неспецифической реактивности организма в условиях токсического поражения печени связана с неуклонным ростом заболеваний печеночно-билиарной системы и аллергических заболеваний. В настоящее время признано, что иммунная система кроме защитной функции от генетически чужеродных субстанций, играет важнейшую роль в поддержании структурного и функционального гомеостаза организма. В условиях патологии клеточные и гуморальные факторы иммунной системы оказывают влияние не только на иммунокомпетентные. но и на неиммуно-компетентные органы (А.Г. Бабаева. H.A. Краскина, Н.В. Юдин 1980; Д.Н. Маянский, 1981; A.C. Логинов; Ю.Е. Блок, 1987; Б.И. Кузник, Н.В. Васильев, H.H. Цыбиков, 1989; МЛ. Колотилова. J1.H. Иванов, 2003; Е.В.Ферапонтова, 2005; В.Г. Подопригорова, Г.М. Цыганкова. Н.Ф. Фаращук, 2006; Ding Lei et al., 2004; Tajiri Takuma et al., 2005).

Известно, что морфо-функциональные изменения в печени возникают не только при повреждениях гепатоцитов в экспериментальных условиях, но и при систематическом контакте с гепатотропными веществами в профессиональной деятельности человека на производстве, а также в быту. Немаловажное значение при этом имеет уровень экологического загрязнения атмосферного воздуха выбросами промышленных предприятий, содержащих гепато-тропные вещества, которые в некоторых районах превышают в 8-10 раз среднегодовые предельно допустимые концентрации и обусловливают снижение антитоксической функции печени (В.М. Фролов с соавт., 1994; В.М. Рыжов с соавт., 2004; И.Ю. Ищенко, C.B. Мичурина. 2005; Wong Chun Kwan et al., 2004).

В разных странах предпринимаются попытки увеличения продуктивности растений не только за счет применения традиционных средств (удобрений, полива и т.д.), но и воздействия на семена различными химическими и физическими факторами. За последние десятилетия количество разнообразных факторов (химических и физических) резко увеличилось, при этом для каждого нового средства воздействия указываются преимущества, которыми не обладал предыдущий фактор. Каждый из факторов физической или химической природы обладает специфичностью взаимодействия с веществами клетки, которая четко прослеживается при изменении дозы препарата. Использование опыта предпосевной обработки семян и внесения различных биологически активных веществ в разные сроки вегетации растений с целью стимуляции их роста позволяет предсказать без постановки специальных экспериментов развитие биологической реакции при использовании того или иного фактора воздействия (H.A. Кириллов, 1996; 2001; Г.Н. Красовский, H.A. Егорова, И.И. Быков 2006).

Международный регистр токсических химических веществ включает в настоящее время сотни известных экологических вредных веществ, оказывающих раздражающее, сенсибилизирующее и иммунотоксическое действие, в результате чего часто имеют место "поломки" систем регуляции биохимических процессов, которые, достигая определенного уровня, способствуют формированию различных заболеваний человека, в частности токсических гепатитов и аллергических заболеваний (Ю.И. Губский. 1989; В.М. Фролов. H.A. Пересадин, 1994; Н.П. Торопова, O.A. Синявская, A.M. Градинаров, 1997; С.Л. Ялукова, Л.Н. Иванов, 2000; С.Д. Подымова. 2005; B.C. Ешану с соавт. 2006). Многие авторы отмечают, что среди больных с поражением печени значительно чаще встречаются сопутствующие заболевания, имеющие преимущественно аллергический или инфекционно-аллергический характер (бронхиальная астма, пищевая и лекарственная аллергия, атопический дерматит) и оказывающие неблагоприятное влияние на течение и исходы гепатитов (В.Е. Сергеева, P.M. Ярадова. М.В. Будылина, 1991; A.C. Логинов, 1997; О.И. Боева, 2003).

В условиях различных видов патологии печени на первый план выступают те или иные механизмы влияния этого органа на неиммунногенную реактивность. что обусловливает различный характер изменений неспецифической реактивности. Ряд авторов отмечают особенности изменения специфической и неспецифической реактивности организма в зависимости от природы. степени, длительности воздействия этиологического агента (И.Н. Алексеева. Т.М. Брызгина. 1993; Л.Ч. Самерханова с соавт. 2004; М. Petkovic et al. 2005). Недостаточность изучения влияния остаточных количеств биостимуляторов в продуктах питания на здоровье человека, а также возможность попадания их в человеческий организм при контакте с ними и при введении сельскохозяйственным животным этих препаратов, вызывают необходимость исследования влияния биологически активных веществ на животные организмы и человека.

Целью настоящего исследования явилось изучение реактивности организма у экспериментальных животных (морских свинок) в условиях адаптационной морфо-функциональной дисфункции печени на фоне длительного перорапьного введения стимулятора роста растений (альфа-(2-хлорэтокси) поли [2 хлорэтилфосфорилоксиэтиленоксил] - омега - (2 хлорэтокси 2 хлорэтилфосфонада) в различных дозах.

Для достижения данной цели поставлены следующие задачи:

1. Изучить биоаминные обеспечения структур ткани печени у интакт-ных и подопытных животных при пероральном введении стимулятора роста растений (СРР) в возрастающих дозах (2 мг/кг. 20 мг/кг. 100 мг/кг).

2. Изучить динамику изменения реактивности подопытных животных при пероральном введении СРР в дозе 2 мг/кг веса в течение 3-х месяцев гематологическими, фагоцитарными, биохимическими, гистоэнзимопатиче-скими методами исследования.

3. Изучить динамику изменения реактивности подопытных животных при пероральном введении СРР в дозе 20 мг/кг веса в течение 3-х месяцев гематологическими, фагоцитарными, биохимическими, гнсгоэнзимопатичс-скими методами исследования.

4. Изучить динамику изменения реактивности подопытных животных при пероральном введении СРР в дозе 100 мг/кг веса в течение 3-х месяцев гематологическими, фагоцитарными, биохимическими, гистоэнзимопатиче-скими методами исследования.

Научная новизна. Впервые изучен уровень биоаминов люминисцент-но-гистохимическими методами в структурах печени у подопытных животных при пероральном введении СРР в различных дозах.

На основании биохимических, фагоцитарных, гистологических методов исследований изучена адаптационная и патологическая реактивность подопытных животных в условиях перорального введения СРР в различных

На фоне длительного перорального введения стимулятора роста растений установлено, что активность ферментов в сыворотке крови повышается, а в ткани печени понижается и носит дозозависимый характер.

Научно-практическая значимость. Полученные результаты об адаптационных и патологических изменениях реактивности организма в условиях перорального введения СРР имеют чрезвычайно важное теоретическое значение в понимании патогенеза этих изменений и разработке их патогенетической коррекции.

Полученные результаты свидетельствуют о дозозависимой токсичности исследуемого препарата на органы и системы организма, что подводит к необходимости разработки способов и мер защиты при производстве и применении данного соединения.

Внедрение в практику. Результаты данной работы используются в учебном процессе на кафедре патологической физиологии, профилактической медицины, аллергологии и иммунологии медицинского факультета Чувашского государственного университета им. И.Н. Ульянова.

Полученные результаты могут быть использованы аллергологами, терапевтами, гастроэнтерологами, гематологами, а также профпатолсгами при проведении профилактики профессиональных заболеваний.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на научно-практической конференции «Иммунодефицитные состояния в клинике виутренних болезней» (г. Чебоксары. 1999). заседаниях общества патофизиологов Чувашской Республики (г. Чебоксары. 2000), международной конференции посвященной 75-летию A.M. Уголева «Механизмы функционирования висцеральных систем» (г. С-Петербург, 2001). 3-ем Российском конгрессе по патофизиологии «Дисрегуляционная патология органов и систем» (г. Москва,

2004), конференции «Достижения и проблемы клинической медицины» (г. Чебоксары. 2005), совместном заседании общества патофизиологов и общества иммунологов и аллергологов Чувашской Республики (г. Чебоксары.

2005).

Положения, выносимые на защиту.

1. Пероральное введение СРР подопытным морским свинкам в различных дозах (2 мг/кг. 20 мг/кг, 100 мг/кг) в течение 3-х месяцев вызывает различные адаптационные и патогенные изменения реактивности организма, в том числе морфофункциональные изменения печени в зависимости от дозы вводимого вещества.

2. Пероральное введение СРР подопытным морским свинкам в дозе 2 мг/кг сопровождается адаптационными изменениями в виде повышения фагоцитарной активности лейкоцитов, повышения катехоламинов в гепатоци-тах. макрофагах и патогенными изменениями в виде лейкоцитоза, эозинофи-лии. увеличением активности аланинаминотранферазы. аспартатами-нотрансферазы. билирубина в сыворотке крови, снижением активности мо-ноаминоксидазы. кислой и щелочной фосфатазы в гепатоцитах и очаговой гидропической дистрофией гепатоцитов.

3. Пероральное введение СРР подопытным морским свинкам в дозе 20 мг/кг сопровождается адаптационными изменениями в виде повышения фагоцитарной активности лейкоцитов, повышения катехоламинов в гепатоцитах. макрофагах и более выраженными, чем в предыдущей дозе, патогенными изменениями в виде лейкоцитоза, эозинофилии, увеличением активности аланинаминотранферазы. аспартатаминотрансферазы. билирубина в сыворотке крови, снижением активности моноаминоксидазы. кислой и щелочной фосфатазы в гепатоцитах и субтотальной гидропической дистрофией гепато-цитов.

4. Пероральное введение СРР подопытным животным в дозе 100 мг/кг сопровождается патогенными изменениями в виде понижения фагоцитарной активности лейкоцитов, лейкоцитоза, эозинофилии, снижения содержания катехоламинов в гепатоцитах. макрофагах, увеличением активности алани-наминотранферазы. аспартатаминотрансферазы. содержание билирубина в сыворотке крови, снижением активности моноаминоксидазы. кислой и щелочной фосфатазы в гепатоцитах. тотальной гидропической дистрофией ге-патоцитов и лимфоцитарно-гистиоцитарной инфильтрацией портальных трактов печени.

Публикации по теме диссертации.

Материалы диссертации отражены в 15 опубликованных научных работах. в том числе 2 в рецензируемом журнале.

Объем и структура диссертации.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы. 4 глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, содержащего 174 отечественных и 62 иностранного автора. Диссертация изложена на 131 страницах компьютерного набора, иллюстрирована 12 таблицами. 13 рисунками.

Выводы

1. При пероральном введении стимулятора роста растений (СРР) в различных дозах (2 мг/кг. 20 мг/кг. 100 мг/кг) подопытным животным в течение 3-х месяцев происходят дозозависимые адаптационные, патогенные изменения реактивности организма и морфофункциональные изменения печени.

2. Пероральное введение СРР в дозе 2 мг/кг подопытным морским свинкам в течение 3-х месяцев сопровождается статистически достоверным увеличением уровня катехоламинов, серотонина, гистамина, общего билирубина, ами-нотрансфераз (АлАТ. АсАТ). лейкоцитозом, эозинофилией. повышением фагоцитарной активности нейтрофильных лейкоцитов, снижением активности моно-аминоксидазы. кислой и щелочной фосфатаз в гепатоцитах и очаговой гидропи-ческой дистрофией гепатоцитов.

3. Пероральное введение СРР в дозе 20 мг/кг подопытным животным в течение 3-х месяцев сопровождается более выраженным, чем в предыдущей дозе статистически достоверным увеличением уровня катехоламинов, серотонина, гистамина. общего билирубина, аминотрансфераз (АлАТ. АсАТ). лейкоцитозом, эозинофилией. повышением фагоцитарной активности нейгрофилов. снижением активности моноаминоксидазы. кислой и щелочной фосфатаз в гепатоцитах и субтотальной гидропической дистрофией гепатоцитов.

4. Пероральное введение СРР в дозе 100 мг/кг морским свинкам в течение 3-х месяцев сопровождается более выраженным, чем в дозе 20 мг/кг статистически достоверным увеличением уровня общего билирубина, аминотрансфераз (АлАТ. АсАТ). лейкоцитозом, эозинофилией. уменьшением фагоцитарной активности нейтрофильных лейкоцитов, а также снижением уровня катехолами-нов, серотонина. гистамина. активности моноаминоксидазы. кислой и щелочной фосфатаз в гепатоцитах. тотальной гидропической дистрофией гепатоцитов и лимфоцитарно-гистиоцитарной инфильтрацией печени.

Практические рекомендации.

1. Результаты данных экспериментальных исследований расширяют представление о роли реактивности организма к воздействиям различных доз стимулятора роста растений попадающим в организм через пищеварительный тракт.

2. Количественные и качественные изменения показателей лабораторных исследований служат критериями тяжести течения и прогнозирования исходов патогенных повреждений при воздействии различных доз химических соединений, прежде всего стимуляторов роста растений.

Наши данные учитываются врачами при проведении профилактики профессиональных заболеваний у работников сельскохозяйственного производства.

3. Результаты наших исследований, которые показали дозозависимую токсичность данного стимулятора роста растений, позволяют задуматься о поиске других стимуляторов роста растений с еще меньшей отрицательной биологической активностью и токсичностью.

108