Автореферат и диссертация по медицине (14.00.27) на тему:Некоторые нарушения липидного метаболизма при аденоме предстательной железы до и после трансуретральной резекции

ПРК '

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ АРМЕНИЯ ЕРЕВАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ им. МХИТАРА ГЕРАЦИИ

На правах рукописи

ЭДИЛЯН МИКАЕЛ МАРАТОВИЧ

НЕКОТОРЫЕ НАРУШЕНИЯ ЛИПИДНОГО МЕТАБОЛИЗМА ПРИ АДЕНОМЕ ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ДО И ПОСЛЕ ТРАНСУРЕТРАЛЬНОЙ РЕЗЕКЦИИ

ЖД-00.15 Хирургия

АВТОРЕФЕРАТ диссертацмии на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

ЕРЕВАН -1996

■^ицшишшС^г ^шСршщЬшп1р]шС ШшгдошцшЬшвдшС Сш^шршрш^пШ ЪрЬ1шС{1 ЦЗДршр "<Ьршдщ шБ^шС 'ПЬшшЦшС рдгЦшЦшС Ьшйицишршй

рБшдрЬ {гршфиСеш!

ьаььзиъ 1тьйиы. иигизь ьь^ьаизьъ ФШиШЛ№ПДОЗиЪ |ииЪ<ШРПМГЪЬРС

сиаиъи^иаьо.аь иаьътгизь ъши - ьч ^ьвзри-оипьльврш. лъаь^аьизь сншчлъш*

(?1-00.15 ЧЬршрпиТпвдшС

ивъъшипип^зиъ иьигиаьр

р^гЦшЦшС д{1шп^шССЬр{1 рЬЦБшгтф ц|ипш1{щС ишифАшБ ЬицдЬип. 1иш1шр

ЬРЬЧиЪ - 1996

Работа выполнена на кафедре урологии Национального института здравоохранения МЗ РА и лаборатории липидов Института молекулярной биологии HAH РА.

Научные руководители:

доктор медицинских наук,

профессор АГАДЖАНЯН И. Г. академик HAH РА,

профессор КАРАГЕЗЯН К. Г.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук,

профессор САРУХАНЯН О. В. доктор биологических наук,

профессор АГАДЖАНОВ М. И.

Ведущая организация: Научно-исследовательский институт

онкологии им. В. А. Фанарджяна

Защита диссертации состоится "Х^ и У 1996г.

часов на заседании специализированного Ученого Совета по хирургии Ереванского Медицинского Университета по адресу: Ереван-25, ул. Корюна 2

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Ереванского Медицинского Университета (ул. Корюна 2).

Автореферат разослан "Ж" 1996г.

Ученый секретарь f

Специализированного Совета^ / к.м.н., доцент X )// , КУРГИНЯН Р. М.

Ц.21ишшшСрп ^шшшрфч t SS иъ ШищгшщшЬпц»] iuG UqqinjfiG ДОиифшпшф nununqfiuijfi mtlplinGnul bi SS ШцЬЦтцшр UbCumpmGnipjmC {Шиифишшф ijiui{uiCbpii impnpmianplimjnul: ОДшшЦиШ цЬЦшфирСЬр'

р<ЭДшЦшС qfiumipjndlGbpíi rçnlpnnp,

щрпфЬипр июаиъзиъ S. Оч

SS <ЫШ ailpiuibilfilinii,

щрпфЬипр аигиадшгзиъ ь.

'ЧшгишСшЦшй QGipitnlmlunuGbp' р^гЦшЦшС qtnanipjniGCbpli qntpnnp,

щрпфЬипр иарпыииъзиъ S. Ч. IlbCimipinfimlpaC qfimnipjniilGtqiJi ipilpcnp,

ицшфьиар иаиаиъпч и\ ï\

1Лпш£шшшр Ijmqilmlibpiqnipjniil' P. UL &uiGuip2JiuG{i mGiJuiG OGlininqfiuijfi ОДшшЬЬишщпшшЦшС fiGutnliinnun

л

^lu^inuiuiGnipjniGß ЦицшСицт t 1996p. "Л? " dmilp • - pG bpbuuGfi tlbinuilimG PtfjljuiliuiG SimîuuuuipuiGJi iJJipuipnufnipjuiG iIuiuGuiqtiuiuiliuiG iunphpiyiLiI. bpbuuG-25, ^mpjniGfi 2:

UUnbGm|ununipjmG[i limpb^i t tauGnpiuGuii bpbiuiGfi Pt^lpuljuiG SuiiIuiiuuipuiGti qpuuiuiptuGnuI (fcpbuiiG-25, knpjniGh 2)

UubCmJununipjniCß uinuißilui& t " ^_ 1996p.

UuraGuiqtiuiiuliuiG lunphpqji q{iinml|tiiG

дшришщшр, prf2UulUuiC q^umiBjniGGbpti

pbliGmtei, qngbGm / кПЬРОЬЪЗиЪ ft. U\

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Увеличение удельного веса аденомы предстательной железы (АПЖ) в урологической патологии привлекает пристальное внимание исследователей к проблеме углубленного и комплексного изучения патологических процессов, протекающих при них. Патогенетически аденома простаты может быть следствием атеросклероза, гормональных нарушений возрастного порядка, связанных с дисфункцией гормонов, в частности, с дефицитом тестостерона (Агинова, 1986). Известно, что эти факторы сами по себе вызывают интенсификацию процесса липидной пероксидации (Muracoshi, 1989; Lacort, 1995; Al-Bajati, 1988; Geller, 1989). Как известно, в нормально функционирующем организме существует умеренный фон свободнорадикального окисления (СРО) липидов, рассматриваемый в качестве одного из естественных путей обновления тканевых липидов.

В патогенезе целого ряда заболеваний установлено важное значение интенсификации процессов перекисного окисления липидов в тканях, а также дефицита эндогенных антиоксидантов, премуще-ственно а-токоферола (Бурлакова, 1967; 1975; 1990; Геворкян, 1991; Донченко, 1995; Ланкин, 1981; Микаелян, 1985; Dillard etas 1978) приводящих -к деструктивным нарушениям в мембранах эритроцитов, митохондрий (Агаджанов и др. 1993; Аристархова и др. 1992; Голиков и др. 1987; Карагезян и др. 1980; Меерсон и др. 1988).

В настоящее время неизвестно, можно ли использовать показатели, характеризующие скорость реакций ПОЛ, активность анти-оксидантной системы в крови больных аденомой простаты для профилактики, диагностики, прогноза при оперативных вмешательствах и предупреждения осложнений.

Проблема механизма гипоксии почек при аденоме предстательной железы продолжает приковывать к себе внимание урологов во всех странах в связи с учащением ее у мужчин пожилого и старческого возраста (Портной, 1989; Dunn, 1987). Своевременная диагностика и соответствующее оперативное лечение аденомы

простаты предупреждают развитие гипоксии с последующим развитием гипоксического синдрома (ГС) и далее хронической почечной недостаточности (ХПН). Результаты оперативного лечения АПЖ зависят не только от выбора метода оперативного вмешательства, но, в значительной степени, и от правильности определения показаний к аденомэктомии на основании всестороннего обследования больного, рациональной предоперационной подготовки. Решение указанной задачи возможно с привлечением различных современных параклинических методов исследования, раскрывающих молекулярные аспекты патологических процессов при данном заболевании.

Цель и основные задачи исследования. С позиции клинической биохимии важным, на наш взгляд, представляется установление информативности некоторых биохимических тестов, обусловливающих характер хирургического вмешательства и терапевтического воздействия, тем более, что адекватность адаптативных процессов на клеточном уровне в экстремальной ситуации может быть выражена динамикой плазменного МОА (156), а различные нарушения функции почек характеризуются выраженным дисбалансом систем ПОЛ и антиоксидантной защиты как в плазме крови, так и в эритроцитах.

Учитывая возрастающий интерес к изучению роли мембранного транспорта в патогенезе ряда заболеваний, целью настоящей работы явилось изучение активности реакций ПОЛ, состояния защитных антиокислительных систем в плазме крови, а также метаболизма фосфолипидов в мембране эритроцитов больных аденомой простаты.

В соответствии с этим были поставлены следующие задачи:

1. Охарактеризовать функциональное состояние мембран эритроцитов при аденоме простаты путем изучения в них количественных и качественных изменений индивидуальных фосфолипидов, их суммарные сдвиги у больных до и после трансуретральной резекции.

2. Изучить активность реакций ПОЛ в плазме крови больных аденомой предстательной железы до и после трансуретральной ре-

зекции.

3. Выявить сопряженную с ПОЛ антиоксидантную активность плазмы крови больных аденомой предстательной железы по изменениям содержания эндогенного а-токоферола до и после операции.

4. Определить активность ферментов супероксиддисмутазы, глутатионпероксидазы, глутатионредуктазы как ферментных систем антирадикальной защиты клетки до и после трансуретральной резекции.

5. Дать сравнительную оценку биохимическим сдвигам в зависимости от тяжести заболевания, в частности, наличия гипоксиче-ского синдрома, влияния оперативного вмешательства на изученные показатели.

Научная новизна и практическое значение работы. Научная новизна предпринятого исследования состоит в том, что впервые проведено сравнительное комплексное исследование сдвигов в количественном содержании фосфолипидов на уровне эритроцитар-ной мембраны (МЭ), интенсификации течения процессов свободнорадикального окисления липидов в плазме крови, падения уровня эндогенного а-токоферола, угнетения активности ферментов антирадикальной защиты у больных АПЖ различных групп до операции и после трансуретральной резекции.

Установлены следующие закономерности:

1. Выявлены сдвиги в содержании структурно и функционально различных категорий фосфолипидов в мембранах эритроцитов больных АПЖ. Эти данные проливают свет на понимание значения нарушений в количественных соотношениях нейтральных и кислых фосфолипидов в патогенезе мембранных нарушений при изученной патологии, о чем свидетельствуют отклонения в величине коэффициента отношения указанных фосфолипидов, оказывающихся наиболее демонстративными при формах АПЖ, сопровождающихся пшоксическим синдромом.

2. Установлена интенсификация процессов ПОЛ, взаимосвязанная со стадией АПЖ.

3. Обнаружена обратно пропорциональная зависимость в сдвигах интенсивности течения реакций липидной пероксидации и ко-

личественного содержания эндогенного а-токоферола.

4. Угнетение ферментов антирадикальной защиты клетки - су-пероксидисмутазы, глутатионредуктазы, особенно выраженное в группе больных АПЖ, сопровождающейся гипоксическим синдромом.

Совокупность полученных данных, сформулированных положений и выводов, вытекающих непосредственно из фактического материала, позволила определить практическую значимость работы. Последняя заключается в обосновании на основе полученных результатов необходимости проведения антиоксидантотерапии у больных АПЖ как до, так и после оперативного вмешательства с целью предупреждения осложнений, связанных с гипоксией почки.

Одновременное определение в одной пробе плазмы крови ДК, ШО и а-Т как способ диагностики субклинических форм ХПН в уронефрологической практике признано рационализаторским.

Апробация работы. Основные положения работы, изложенные в дисертации, доложены на Ученом Совете Института Хирургии МЗ РА (1994), Ученом Совете Института молекулярной биологии НАНРЩ1994), на съезде физиологов Республики Армения (1994г), на кафедре урологии Национального института здравоохранения МЗ РА(1995г).

Публикации. По теме дисертации опубликовано 5 научных работ.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на страницах русского машинописного текста построена в традиционном стиле. Работа состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, четырех разделов результатов собственных исследований и их обсуждения; заключения, общих выводов и библиографического указателя, состоящего из названий источников отечественной (97) и зарубежной (122) литературы. Диссертация иллюстрирована 16 таблицами и 10 рисунками.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. КЛИНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА БОЛЬНЫХ

Клинические наблюдения над больными проводились в урологическом отделении Института хирургии МЗ им. А. Л. Микаеляна. Под наблюдением находилось 54 больных АПЖ. В конторльную группу вошли 20 мужчин в возрасте 49-75лет. В исследуемой популяции больных - мужчины пожилого и старческого возраста, которые в зависимости от возраста разделены на 2 группы: 1- от 50 до 65 лет; 2- 65 лет и старше. Кроме этого в каждой группе больные отличаются по длительности заболнвания.

Процент больных с длительностью заболевания свыше трех и пяти лет преобладает в возрастной группе 65 лет и выше. Согласно нашим данным преобладание больных с сопутствующим ГС также наблюдается в возрастной группе 65 лет и выше (35% против 17% в I группе). В основу дифференциации больных АПЖ по группам больных с сопутствующим ГС и без него были положены критерии, определяющие степень нарушения функции мочевыводящих путей для чего проводилось клиническое и инструментальное обследование больных, а именно: УЗИ мочеполовых органов, пальцевое ректальное исследование простаты, уретрацистокопия, урофлоу-метрия с цисто и профилометрией. В случае необходимости производились дополнительные исследования. При расширении верхних путей при подозрении на почечную гипоксию производилась внутренняя урография, при сопутствующей гипертонической болезни обследование глазного дна и др.

Клиническое и инструментальное обследование дополнялось рядом лабораторных исследований, которые свидетельствуют о том, что по сравнению с нормой у больных АПЖ уровень мочевины в крови повышен на 23%, а у больных с сопутствующим ГС на 62% выше нормы, однако данные статистически недостоверны. Уровень креатинина в крови больных АПЖ I и II групп в пределах нормы (80 мкмоль), а при сопутствующем ГС повышается и в среднем составляет 160,0 мкмоль/л, хотя у отдельных больных в этой группе его количество достигает 250-300 мкмоль/мл у других почти не отли-

чается от нормы, эти данные тоже оказались статистически недостоверными. Содержание ß - липопротеинов в крови повышено в обеих группах и по сравнению с нормой соответственно выше на 46 % и 56 %. Высокий фонß - липопротеинов во всех группах может быть связан с возрастом нашего контингента больных, с имеющимся возрастным атеросклерозом. Содержание белка в моче увеличено в группе больных АПЖ с сопутствующим ГС на 66% и составляет0,66±0,08%. В группе больных с сопуствующим ГС изучены показатели КЩС, которые демонстрируют имеющиеся в третьей группе явления метаболического ацидоза, в некоторых случаях - частично компенсированного.

В обследованных группах больных из сопутствующих заболеваний преобладают атеросклероз и хронический пиелонефрит, причем более половины всех заболеваний приходятся на больных АПЖ сочетающийся с ГС.

Всем обследованным больным произведена трансуретральная резекция простаты (ТУР), после которой спустя 3-5 дней вновь произведенны лабораторные исследования. При сопоставлении результатов лабораторного обследования больных до н после операции обнаруживается заметная нормализация изученных показателей в I и II группах, некоторое улучшение в III группе.

Опираясь на полученные результаты трудно прогнозировать течение заболевания и правильные подходы к лечению больных, т. к. такие показатели, как уровень креатинина у больных до и после операции мало отличается от нормы особенно у больных первой и второй групп, а имеющиеся изменения в третьей группе больных статистически не достоверны.

Целью настоящего исследования явилось изучение состояния ПОЛ и антиоксидантной защиты у больных АПЖ, тем более, что в настоящее время известно, что мембранодеструктивные процессы являются одним из ведущих звеньев в патогенезе ряда заболеваний, в том числе нефрологических, таких, как хронический гломеруло-нефрит (Никифорова и др. 1993; Тугушева и др. 1993), нефриты (Сейсембеков и др. 1993).

Описание методов. Об интенсивности течения процессов ПОЛ

судили по выходу МДА в цветной реакции с ТБК (Владимиров и др. 1972), протекающей при высокой температуре в кислой среде. Инкубационная смесь содержала 2,5 мл 20% ТХУ, 0,5 мл плазмы крови и 1 мл ТБК. Количество липидных перекисей плазмы выражали в нмоль/мл с учетом коэффициента молярной экстинкции - МбМСЛкГ 1 см'1. Оптическую плотность окраски измеряли при 535 нм.

а - токсферол, диеновые конъюгаты и шиффовые основания определяли в плазме крови флуориметрическим методом по Duggan (1959), на флуоресцентном спектрофотометре фирмы Hitachi при максимуме возбуждения 295 нм и максимуме флуоресценции 330 нм.

Для определения а -Т пробу флуориметрировали на волне 295/330 нм. Количество рассчитывали по стандартной калибровочной кривой и выражали в мг/дл. Конечные продукты ПОЛ ШО регистрировали по спектарам флуоресценции раствора липидов гексановой фазы с максимумом флуоресценции 345 нм и максимумом возбуждения 450 нм. Количество ШО выражали в относительных единицах на 1 мл плазмы (Владимиров, 1972; Голиков и др. 1987). ДК плазмы крови определяли в гексановой фазе спектрофо-тометрически на волне 233 нм, рассчитывали используя коэффициент экстинкции 2,2 • 10~5 см'1 М'1 и выражали в нмоль/мл плазмы (Владимиров, 1972; Голиков и др. 1987).

Выделение мембран эритроцитов. К 4,5 мл крови прибавляли 0,5 мл 1,43% раствора оксалата натрия, смесь перемешивали на центрифуге К-23 при 1000g или об/мин. в течение 15 минут. Надосадоч-ную жидкость сливали, эритроциты дважды промывали изотоническим раствором. Полученную эритроцитарную массу суспендировали в буферном растворе (0,01М NaNC03; 0,03М NaCL с ЭДТА в соотношении 1:5). Смесь центрифугировали на К-24 при 12000g в течение 40 мин. Надосадочную ждкость сливали и осадок дважды промывали буфером без ЭДТА с повторным центрифугированием при 12000g. Процедуру повторяли еще раз с использованием трис-HCL буфера (рН7,2).

Определение ФЛ проводили по методу (Marinetti et al., 1956) в модификации К. Г. Карагезян (1969) и Смирнова А. А. и сотр. (1961).

Принцип метода определения активности глутатионредуктазы (ГР) в крови основан на определили скорости убыли NADPH вследствие восстановления окисленногоглутадиона в модельной системе, содержащей ГР (Pinto а. Bartley, 1969). Спектрофотометрирование производили при 25°С на СФ-46 в течение 1 -3 мин при длине волны 340 нм. Активность ГР опредляли по убыли NADP.H и выражали в мкмоль NADP /мин/мл с учетом коэффициента молярной экстнн-кции NADP.H-2,07.

Метод определения активности глутатионпероксидазы (ГП) в крови основан на определении восстановленного в глутадионперок-сидазной реакции глутатиона в модельной системе (Pintoa. Bartley, 1969). Активность фермета рассчитывали по разнице в количестве SH-групп в контрольной и опытной пробах, рассчитываемых с учетом коэффицента молярной эхстинкции 13100: активность ГП эритроцитов выражали в мкмоль глутатиона в мин/мл эритроцитарной взвеси.

Все полученные результаты подвергнуты общепринятой статистической обработке.

С целью установления степени взаимосвязи рассматриваемых параметров в МЭ н плазме крови для каждой пары показателей, используя их средние значения по группам наблюдения, вычислены парные коэффициенты корреляции. В работе учитываются значение R20,6.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Актуальными проблемами в урологии остаются профилактика ухудшения функции почек при обструкции различной этиологии (Лопаткин, 1995; Пытель, 1982).

С точки зрения представления о мочевых путях как о единой системе, развитие АПЖ не только приводит к локальным изменениям в области пузырно-уретрального сегмента, но и как следствие обструкции к функциональным изменениям в почке. В связи с этим оценка функции почек и мочевыводящих путей остается наиболее актуальной проблемой в решении вопросов, связанных с оперативным лечением больных АПЖ. Патогенез почечных изменений у

больных АПЖ сложный, включает ряд факторов, среди которых немаловажное значение имеет развитие гипоксии почек, что вызывает сложную перестройку в функционировании не только почки, но и различных систем организма, направленных на сохранение оптимального уровня снабжения тканей кислородом (Меерсон, Пшенная, 1988; 8№пе а. Этги, 1980; Пытель, 1982), призванных к осуществлению стабилизации и поддержания гомеосгаза кислорода в тканях.

Учитывая всевозрастающий интерес к выявлению и изучению новых показателей реакций трансмембранного переноса веществ в патогенезе ряда заболеваний, нами были предприняты исследования по изучению особенностей количественных изменений рада показателей липидного метаболизма, продуктов перекисеобразования в плазме крови, состояния антиоксидантной системы, динамики качественных и количественных изменений индивидуальных и суммарных фосфо-липидов в МЭ у больных АПЖ до и после трансуретральной резекции.

Полученные качественные и количественные изменения различных представителей индивидуальных ФЛ в МЭ больных АПЖ (рис. 1) свидетельствуют об имеющих место при изученной патологии деструктивных и функциональных изменениях клеточных мембран.

Рис. I Содержание фосфолипидов в мембранах эритроцитов у больных АПЖ Ш-ей группы

Уровень ЛФХ в МЭ больных третьей группы оказывается приблизительно в два раза выше по сравнению с величиной указанного показателя в контрольной группе. Следует заметить, что тенденция к возрастанию содержания ЛФХ в МЭ в меньшей степени проявлялась и в двух других группах больных. Эти изменения свидетельствуют об имеющем место повышении активности фосфо-липазы А2, катализирующей реакции деацилирования ФЛ-глице-ридов с интенсивным выходом как ЛФХ, так и незстерифи-цированных жирных кислот, частично вовлекающихся в реакции СРО липидов в качестве субстратов окисления (Sato et al., 1982; Spaeth et al., 1989). Увеличение содержания ЛФХ равно как и сфин-гомиелинов в МЭ больных всех трех исследованных категорий мы склонны объяснить как проявление имеющих место процессов деструкции клеточных мембран с выраженным повышением их ригидности, присутствием высоких концентраций остатков насыщенных жирных кислот. Не менее решающим в повышении жесткостности клеточных мембран является и изменение в них ФЛ-ФЛ соотношений, их кооперативного функционирования (Тадевосян и др. 1996), фосфатидилхолинов, фосфати-дилэтаноламинов и фосфатидилсеринов как основных носителей полиеновых жирных кислот, обеспечивающих жидкостность или текучесть мембранных образований всех уровней клеточной организации, а следовательно и нормальное функционирование нонтранспортирующих каналов, в частности Са2+- транспортирующих систем (Weinberg, 1988), а также активность липид-зависнмых дыхательных ферментов, ответственных за бесперебойное течение окислительных реакций (Vittorio et al., 1988). Одним из показателей повышения микровязкости мембран в условиях патологии считается повышение соотношений ФЭ/ФХ, которое нами обнаружено у больных АПЖ второй и третьей групп.

Отмеченные нарушения в картине мембранных ФЛ-ФЛ соотношений, наиболее отчетливо проявляющиеся в МЭ больных третьей группы, проявляются в виде увеличения соотношения суммы нейтральных

ФЛ к сумме кислых ФЛ (К СНФЛ/СКФЛ) от 2,33 до 3,0 т.е. более, чем на 28%. Наблюдающиеся сдвиги в содержании индивидуальных и суммарных ФЛ могут найти различные объяснения. Они могут произойти во-первых, в результате распада липидпротеид-ных комплексов с освобождением ФЛ, в частности, из липидпроте-идов высокой плотности (Alessio, 1993), вследствие развивающихся процессов модификации, совершающихся на фоне интенсификации реакций СРО липидов, (Wills, 1971) равно как и в ответ на понижение антиокислительной активности плазмы крови (Акала-ев, Абидов, 1993).

Во-вторых, наблюдающиеся сдвиги в филогенетически стабилизированном постоянстве ФЛ-ФЛ соотношений (Unemura et al., 1992) в МЭ могут быть следствием активно совершающихся межфракционных взаимопревращений одних ФЛ в другие, как это, например, происходит при декарбоксилировании ФС с образованием ФЭ и последующего метилирования последнего в ФХ. По всей вероятности, в данном случае имеет место активация обратно направленной реакции, в результате которой деацилирование ФХ приводит к значительному выходу ЛФХ, обусловливающих высокий пул НФЛ. В результате соверщающихся качественных и количественных изменений мембранных ФЛ и развивающихся на этой основ г конформационных нарушений мембранных протеинов в результате глубоких изменений степени их липидного окружения и гидрофобности мембран имеют место существенные отклонения в активности мембраносвязанных ферментов и рецепторных белков, утрачивающих свою эффективность в отношении раздражителей и расстраивающих таким образом существующие в норме стандарты лиганд-рецепторных взаимоотношений.

Нарушение функции почек характеризуется выраженным дисбалансом систем ПОЛ и антиоксидантной защиты как в плазме крови, так и в эритроцитах. Косвенным фактором реализации мембраноли-тических процессов в почечной ткани может быть стимуляция свобод-норадикального окисления липидов в мембранах с одновременной активацией эндогенных фосфолипаз и несоответствием функциональной активности антиоксидантной системы. Усугубляющим фак-

тором является наличие у бальных глубоких нарушений липвдного обмена. Подтверждением роли мембраны в регуляции клеточного метаболизма в условиях патологии является обнаруженный нами факт интенсификации реакций перекисного окисления липидов в плазме крови, отличающийся некоторыми особенностями.

■ Контрольная группа □ Больные АПЖ до операции s Больные АПЖ после операции

Липидные перекиси

Шиф^ю!

>вые основания

Диен о бью конъюгаты

Рис. 2 Содержание лидных перекисей, шиффовых оснований, диеновых котюго-тов в плазме крови больных АПЖ Ш-ей группы

Как показано на рис.2, во всех изученных группах больных наблюдается активирование процессов ПОЛ в плазме крови, особенно выраженное у больных третьей группы, у которой наблюдались явления выраженного ГС и возрастало содержание ЛП, ШО, ДК, которые и после операции ТУР оставались на довольно высоких цифрах. Повидимому, присоединение ГС усугубляет деструктивные процессы в мембранах, в том, числе и почечной ткани. Наличие ГС вызывает серьезные осложнения и перестройку в функционировании всех систем организма. Обнаружено, что острая гипоксия влияет, на состав ЖК и лшщдную пероксвдацию плазмы крови (Sharapov et al., 1993). Результатом гипоксического состояния является ишемия почки, показанная в опытах in vivo с временным хирургическим ухудшением кровообращения (Dunn, 1987). Почка является одним из органов, регулирующих постоянство внутренней

среды организма и общее потребление кислорода ею значительно. Показано, что при ГС ухудшается барьерная функция мембран почечных клеток (Вейсман, 1971). Увеличение образования свободных радикалов у уремических бальных проявляется оксидатив-ным стрессом, что считается возможным фактором в патогенезе почечной анемии и атеросклероза (McGrath et al., 1995). При не-фротоксическом сывороточном нефрите инфильтрация гломеру-лярных макрофагов пероксидированными плазменными ЛПНП может привести к гломерулярному повреждению (Rie et al., 1995). В условиях кислородной недостаточности в организме вступают в действие различные адаптационные механизмы, одним из которых является удержание рН крови (Диккер и др., 1988). При ГС и тем более при ХПН развивается ацидоз, который сопровождается интенсификацией реакций ПОЛ, а, как известно, источником поли-еновых ЖК, которые подвергаются пероксидированию, являются мембранные ФЛ, из которых при активировании фосфолипазы А2 у больных АПЖ при сопровождении ГС возрастает содержание ЛФХ. Что же происходит с образующимися при распаде ФЛ НЭЖК? Они могут в нормальных условиях метаболизироваться по нескольким основным направлениям, включающим их участие в окислительных процессах в роли источников энергии, биосинтезе простагладинов и других физиологически активных соединений (Nishimiya et al., 1988), а также могут вовлекаться в реакции СРО. Как показали результаты наших исследований, при АПЖ НЭЖК активно подвергаются реакциям переокисления.

Существенным подтверждением выдвигаемой точки зрения явилось повышение затрат а - токоферола, который выступает в комплексе с фосфолипидами, как активный и обязательный компонент биомембран. Известно, что примерно 60% антирадикальной активности липидов обеспечивается за счет а - токоферола (Szezelik, 1987). Результаты исследований подтвердили наше предположение о глубоких нарушениях в ПОЛ - антиоксидантной системе. Истощение запасов а - токоферола связано с интенсивным использованием его в реакциях ПОЛ. Обнаружена обратная корреля-

тивная связь между степенью интенсификации реакций перекисно-го окисления липидов и содержанием а - токоферола. Как показали результаты исследований уровня а - токоферола у бальных АПЖ, во всех исследованных группах наблюдается убыль а - токоферола в плазме крови, особенно выраженная в крови больных с сопутствующим ГС (50%), сохраняющаяся и спустя 3-5 дней после операции по поводу АПЖ (рис. 3).

1-ая группа 11-ая группа 111-я группа

Рис. 3 Уровень (X - токоферола в плазме крови больных АЛ Ж первой, второй и третьей групп до и после опреации ТУР

В антиокислительный статус биомембраны значительный вклад вносят ферменты антирадикальной защиты клетки, поэтому представляло немалый интерес выявление специфики сдвигов активности их в крови больных АПЖ. Это главным образом обнаруженные нами отклонения активности ключевых ферментов: обезвреживающего супероксидный анион - СОД, утилизирующего гидроперекиси - ГП и катализирующего восстановление окисленного глутатиона -ГР.

Полученные результаты по изучению активности СОД у больных АПЖ до и после оперативного вмешательства показали, что у больных выраженность изменений различается в зависимости от

группы больных. Несмотря на то, что активность фермента подавлена во всех группах, однако наибольшая - наблюдается у третьей группы больных (рис. 4).

%

1-ая группа 11-ая группа Ш-й группа

Рис. 4 Активность СОД в плазме крови больных АЛЖ первой, второй и третьей групп до и после опреации ТУР

Будучи регуляторным ферментом СОД чутко реагирует на накопление агрессивных продуктов ПОЛ и повышение затрат а - токоферола, вследствие чего может быть нарушена активация предшественника СОД, а также синтез ее de novo (Taniguchi et al., 1988). Об этом же свидетельствуют данные о воздействии продуктов СРО на белковые компоненты ДНК (Tan et al., 1987), о роли убыли а - токоферола в контролировании реакций биосинтеза РНК (Tien, Aust, 1992). Немаловажное значение имеет микроэлементный состав в тканях, в частности убыль ионов цинка в плазме крови (Clegg et al., 1987, Del Rio, 1986). Известно, что СОД ингибирует ПОЛ на стадии активации кислорода (Fridovich, 1978; Hilton et al., 1980). Образующиеся при этом липоперекиси могут восстанавливаться ГП до соответствующих окисей. Исходя из вышеизложенного, последующие исследования велись в направлении выяснения

активности ГП в плазме крови больных АПЖ до и после оперативного вмешательства. Нами установлено, что подавление активности СОД сопровождается одновременным повышением активности ГП, особенно во второй и третьей группах больных как до, так и после операции. По-видимому, повышение активности ГП является или проявлением компенсаторной реакции, направленной на понижение уровня липидных перекисей или результатом происходящего его перераспределения в тканях при патологии (рис. 5)

Рис. 5 Активность ГП в плазме крови больных АПЖ первой, второй и третьей групп до и после операции ТУР

К защитным механизмам мембраны, предотвращающим повреждающее влияние на нее продуктов липидной пероксидации относится ГР, катализирующая реакцию восстановления глутатио-на, ответственного за интактность структуры мембран в условиях интенсификации реакций перекисеобразования путем поддержания внутри клетки высокого уровня глутатиона. Во всех исследованных группах больных активность ГР в крови оказывается подавленней. Примечательна максимальная подавленность ее у группы больных АПЖ с сопровождающим ГС. После операционного вмешательства активность фермента приближается к контроль-

ным цифрам во всех группах больных (рис.6).

Рис. 6 Активность ГР в плазме крови больных АПЖ первой, второй и третьей групп до и после операции ТУР

На основании полученного фактического материала мы вычислили количественные соотношения между восстановленным и окисленным глутатионом. Стационарное состояние редокс-пары окисленный-восстановленный глутатион СЗБС/СБН обеспечивается системой ГП-ГР. Оказалось, что при АПЖ в крови больных второй и третьей группы существенно изменяется соотношение ОББС/вБИ в сторону его повышения.

Наблюдающаяся неоднозначность изменения активности ферментов антирадикальной защиты клетки, по всей вероятности, обусловлена многими факторами, среди которых первостепенными являются специфические различия самих ферментов, различная степень имеющихся изменений в системе ПОЛ-антиоксиданты у различных групп больных, наличие гипоксических изменений тканей, лежащих в основе качественно неоднородных проявлений адаптационно-метаболической перестройки организма на клеточном и мембранном уровнях.

Таким образом, в результате совершающихся качественных и

количественных изменений мембранных фосфолипидов, интенсификации ПОЛ, накопление мембранотоксических продуктов и ан-тиоксидантная недостаточность реализуются в организме больных АПЖ в виде симптомокомплекса СРО патологии. Дефицит а - токоферола снижает резистентность организма, повышается восприимчивость к инфекциям, так как известна роль антииоксидантов в контролировании функции иммунных систем (Садовникова, 1986).

В этом аспекте результаты наших исследований имеют практическое значение, т.к. обосновывают использование показателей, характеризующих скорость реакций ПОЛ и активность антиокси-дантной системы в крови больных АПЖ для профилактики, диагностики, прогноза при оперативных вмешательствах и предупреждении осложнений.

Результаты наших исследований обосновывают необходимость проведения антиоксидантотерапии для профилактики и лечения АПЖ.

ВЫВОДЫ

1. Аденома предстательной железы сопровождается расстройствами стабилизированных фосфолипид-фосфолипидных соотношений в мембране эритроцитов, изменениями качественного и количественного состава фосфолипидов, выражающимися понижением их суммы, возрастанием соотношения НФЛ/КФЛ, повышением уровня фракций лизофосфатидилхолинов, сфингомиелинов, изменением соотношения фосфатидилэтаноламин/фосфатидилхо-лин.

2. У больных всех групп изученной патологии отмечается активация реакций перекисного окисления липидов в плазме крови, остающаяся на высоком уровне по сравнению с показателями контрольной группы после оперативного лечения.

3. Отмеченные сдвиги сопровождаются одновременным статистически достоверным снижением уровня а -токоферола, особенно в случаях с гипоксическим синдромом, остающимся ниже нормального уровня и после трансуретральной резекции.

4. Предоперационная дисферментемия в плазме крови обуслов-

лена подавлением активности ферментов антирадикальной защиты клетки, подтверждая имеющие место структурно-функциональные нарушения клеточных мембран.

5. Приведенные положения позволяют расценить изученную патологию как результат дисадаптации функциональных регуля-торных систем организма, формирующейся вследствие воздействия вредных факторов эндогенной и экзогенной природы.

6. Применение корреляционного анализа для изучения взаимосвязи между сдвигами в содержании отдельных показателей у больных аденомой предстательной железы как в до, так и в послеоперационном периоде позволило выявить принципиально новые закономерности, проливающие свет на молекулярные механизмы патогенеза изученной патологии.

7. Полученный клинический материал представляет определенный научный интерес и имеет важное прикладное значение для клиники и профилактики аденомы предстательной железы.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Учитывая нарушения антиоксидантной системы при аденоме предстательной железы следует рекомендовать применение а- токоферола как с целью профилактики в группах риска, так и при лечении, применяя до и после операционного вмешательства.

2. Нарушения в ПОЛ/АОА системе побуждают к поиску путей коррекции нарушенных сторон метаболизма почечной ткани в зависимости от степени тяжести и особенностей течения заболевания.

3. Оценка состояния ПОЛ/АОА в плазме крови позволяет судить об эффективности хирургической коррекции.

4. В целях оптимизации мер по прогностической терапии рекомендуется ввести в практику нефрологической и урологической клиник определение содержания а - токоферола, шиффовых оснований и диеновых коньюгатов водной пробе плазмы крови.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Изучение эффектов препаратов антиоксидантного действия на метаболизм фосфолипидов в биологических мембранах. //Пятый съезд Армянского физиол. общества (тез. докл.) - Ереван,-1994, - стр. 15-16 (соавт. Адонц К. Г., Карагез ян К. Г. и др.).

2. Гипокснческий синдром в патогенезе расстройств резистентности эритроцитов к перекисному гемолизу в клинике. //Мед. наука Армении. - Ереван, - 1995, №1-2, - стр. 80-86 (соавт. К. Г. Карагезян, А. В. Мелкумян и др.).

3. Перекисное окисление липидов и антноксидантная активность при аденоме предстательной железы до и после трансуретральной резекции. //Вестник Хирургии Армении. - Ереван, - 1995, №4, - стр. 67-72 (соавт. И. Г. Агаджанян, К. Г. Карагезян).

4. Повышение интенсивности течения реакций в сободноради-кального окисления липидов как одного из патогенетических факторов в развитии аденомы предстательной железы. //Депонир. научн. работы. - Ереван, - 1995, №2, - стр. 10-11.

5. Гипоксическое состояние почки и липидная пероксидация. //Депонир. научн. работы. - Ереван, - 1997, №1 - в печати.

taM-зиъ ir. ir.

ЦЬ'ЧЬ'ШЗКЬ Фшииъикпыа-зиъ 1ииЪ0ШЧ1МГЪЬРС &ао-иъикио.ъааь иаьъпи"и.зь ъшии - ьч SbSSPUXjUnWl-bSPUL ftbflbkôbU3b d-UlTU"bUk

ШГФПФПЫГ

PuiqüuipGnijp îmjqnul niGbgnq JuguiGnuIGbpli duiiiuiGuili bptilpuiiGbpti $niGl]g}imj[i tuuiGquipüuiG IpuGtuuipqbiniÜQ nuzn|nq|iuijti шЦшпищ hpiîGuifuGiitipG t:

bpfiljunlGbpli h[iu|Oßutiuij|i übfuiuGJiqilfi upupquipuiGduiG tuGqlipQ 2uiquiCuil}mqbq&ti uiqbGniluijnil шишширщ ЬшишЦшЦпр bi шшрЬд innuiiîuipqljiuGg ilnin huiÄuifuuil]fi quinGuipii iquiinóumnil Gbpliuijnulu qmGUtml t nqz ui2luiuphp ntnninqGbpti ni2Uiqpni]»jmG IjbGuipnGnuI:

ЪЦшиф niGbGuiinil ш&щ hbinuißpßpnipjniGQ ilji 2uipß h)ii[mGrpi43jniGGbpti ujuipnqbGbqnuI Gjnipbpti inpuiGu-puiiiuiGpuijtiG puiifiuiGgbLfrnipjuiG huiGqbu], Gbpljiiijiugilnii pbUGuibnuulpuG pbqniil numuIGmutipUbi bG jJiuiJiipujliG ilbpuipnifiqilti ii[i 2ШРЁ gmguiGtoGbpti ßuiGuiliuiliiuü ifiniJinfunipjniGGbpQ, huiljuioßufiiiuijtiG huiiliuliuipqfi ilpáuiljQ uipjiuG ujiuiqüuijnul, фпифпфщ^йЬр^ guiGuilpuliuiG bi пршЦшЦшй iJunlinfunipjniGGbpQ tpfippngfiuiGbpfi puiquiGpnuI 2uiquiGmlimqbq&ti uiqbGniliujml шишшщпд hJiiluiGq-Gbpfi ünin Guiluui- bi hbininpuiGuninbinpuii nbqbljgJiiujti duiiIuiGuili: SliiluiGqGbpQ puiduiGilbi bG bpbß tuilpfi' b]Gbinil hJiiluiGqnipjuiG îmiGpnipjniG}ig bi GpiuGg huiuuilitig (iIpG^bi 65 inuipblpuG bi 65 mmpbljmGiig ршрйр):

Sbiaiuqnuiiluifr bpbß |uilp(i hfiiliuGqGbpfi йпш

huijinGuipbpilbi t qbpoßutupugüuiG fiGinbGut^tiUuignuI, npp bi hbiniUipuihuunuilpuG 2Р2шБпи* uiuihupuGilniil t puip&p iluiljuipipuliti ilpui* ИшшЦшщЬи h|iujoßu}ili huiiîuituimuGfi2n4 шитшщпц htu]uiGqGbp}i йпш:

SfiiluiGivGbpJi uipjuiG tphppngJimGbpti puiqiuGpGbpnui qfitauipljilbi bG фпифп1рщ}ири|рС l|mqüti qqmip фпфп^адшССЬр' ^пфпифпфщ^щСЬрЬ uiá, фпифшш^Ьйип^С^ fauGiuljli figbgnuJ,

sz

:dmpmq iulqg6m£iirbbmnjmg fldqggiuf«hulidmd jQmjitnmt) trtqq i{fmi(n3ohiiJq i]pmt]i{dq ,piugm3iJZ gmf]imnmqmdi[îmiqq iq - mnjtng ijfmjiugqiim iftliqtomtimgmbmZ OgiufehumZqpmdqgm gmppiud gi]fmmgmtjiIntfomf]mq

niflmm 5 ßfiuß ügiutehudijnmgpiumu diflmpmq ijbdmtimpmq gijfmmgmiiijntfomlimq iq gmpßmtiijnflodqb iJdqgiiillmJi :dmpmq gmplqbdmnjgml] iq xjrmtiijgiflil i]fmjmgqüm i|?liqbmt)ingintimZ giufehuIjmgmZg gmt)mumdi]ti drnqdml] gqgiu iq giufchudÖdcJmmqq gmtimmi]b i]f]mZuüu gq piug6mfmtidqg CdqgïJgiuflidm i{dqggiufehumubmmqq dummiludml-niliijgiflfi xjmji6mmß :DdqgpbiJgmri|qp

dmniufjqlup gmfchuiigmtiilq jjmJidiJnmgpiumu gq piugmdmbdmhi Ügudu 'dqggiufehuifiirrtmgildo dug Iqdqdmgmrmq 6qjim Ifiud Dpiunmdijfi gmtehuçiuldqli gui]6mflqnubi :jnuflhiqü gmfthufmiinm i]dqgl]mtibm i]«Jhugd gqbublj} iq gqbuügq q р-шдтЗтпт Ddu 'flgtmqmqq ijfrnijßmmhimiimnijli ijbdml|mpmq }i]du]unbdml] ifpbijgmbdo nqhidu

gmpugqlim ifoliqbmtimgmbmZ Iqmijti niflmm gq Ifiud iq gijnmp ijdqgpiudmbgmnl Чтди^б^дшф-та^пфбшшп!] liußqgiu ifbqui jnudqgdgmlimd i]33d gq jnufmfïti Qdqgügiuriidm jQtn]i6mmn фиршр^дО gmlihnjiijmtim i]fmbmmliiuiiqn-gux|dinunulb 'ilfmbmüijnäodqftiguijdmimulb 'i|rmbmmiupnxJütii|nJJodqhnun llJdqgшgqpdqф gmfihugmhimZmhi gijfmlmtii{ürrinmfjmq iJ33d q xjm]idulimgmprmhi fldu 'mi|jiqmgqpdq$ni|ii jnugm3dZ gmfimtntnqmdiffimnjmr) q jnuJimmljg 'flfimtidmlimp ifludq<^ui]um q ршдЗЦ iflmbb ,jiupiuyligfl ijbdmtimpmq gilfmmgminJntJomfimq gq piu^iBljqlnu Qdqggiu№un]ui{iui{i lmfZiJqudqf.

:mup iidqgtigmtii|q liuhimamm JtuZiJgmmnlmpmq t|iin3oim{q nqhnnfjinmq