Автореферат и диссертация по медицине (14.00.39) на тему:Нарушения в иммунной системе и цитокиновой сети при различных формах красной волчанки и склеродермии

РОМАНОВА Надежда Витальевна

НАРУШЕНИЯ В ИММУННОЙ СИСТЕМЕ И ЦИТОКИНОВОЙ СЕТИ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ФОРМАХ КРАСНОЙ ВОЛЧАНКИ И СКЛЕРОДЕРМИИ

14.00.39 - ревматология 14.00.36 - аллергология и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Ярославль - 2007

003068277

Работа выполнена в Государственном образовательном ук; профессионального образования «Ярославская государсти академия Федерального агентства по здравоохранению и

реждении высшего енная медицинская оциальному разви-

тию»

Научные консультанты:

доктор медицинских наук, профессор Шилкина Наталия Пел ровна доктор медицинских наук, профессор Ярилин Александр Александрович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Балабанова Римма Михайловна

доктор медицинских наук, профессор, член-корр. РАМН Гущин Игорь Сергеевич

доктор медицинских наук, профессор Баранов Андрей Анатольевич

Ведущая организация ГОУ ВПО «Московская медицинская академия им. И.М.Сеченова» Росздрава

Защита состоится 15 мая 2007 года в 13.00 на заседании ди вета Д 208.119.01 при ГОУ ВПО «Ярославская государств академия» Росздрава по адресу: 150000, гЛрославль, ул.Реве

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Ярослав ной медицинской академии

Автореферат разослан

Ученый секретарь диссертационного совета

гсертационного совиная медицинская люционная, д.5

жои государствен-

2007г.

Зотов А.А.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Развитие аутоиммунных ревматических заболеваний связано с нарушениями в иммунной системе и проявляется утратой толерантности Т- и В-лимфоцитов к аутоантигенам [Е.Л.Насонов, 2004; С.Н.Быковская и со-авт., 2005; A.Davidson et al., 2001], что приводит к активации аутореакгивных Т- и В-лимфоцитов с формированием воспалительной реакции и повреждением собственных тканей организма. Большинство Т-клеток, обладающих регуляторной активностью, принадлежат к субпопуляции CD4f лимфоцитов, хотя и другие типы Т-клеток могут проявлять подобные функции [J.Zhou et al., 2001; M.Gilliet et al., 2002].

Прогресс молекулярной биологии и биотехнологии послужил основа-нием для создания новых теорий и гипотез патогенеза аутоиммунных рев-матических заболеваний, в частности, теории микрохимеризма [Н.Г.Гусева, 2002; С.М. Artlett, 2000; I.C. Kremer Hovinga et al., 2006]. Доказана роль апоптоза в патогенезе ревматических заболеваний, включая СКВ и ССД [А.Н.Богданов и соавт., 2005, 2006; ОЛО.Варга и соавт, 2006; C.C.Mok, C.S.Lau, 2003; Y. Ren, et al., 2003; J.B.Jun et al., 2003; Sheriff A., et al, 2004]. Вывинута свободнорадикальная теория патогенеза СКВ [H.Ahsan et al., 2003; G.Waris, K.B.Alam, 2004]. Продолжают изучаться механизмы генетической предрасположенности человека к определенным заболеваниям [Е.Л.Насонов и соавт., 1999; А.А.Ярилин, 1999; Р.М.Хаитов, Л.П.Алексеев, 2001; С.В.Сучков и соавт., 2004], триггерной роли микроорганизмов в раз-витии иммунного воспаления при ревматических заболеваниях [Е.Л.Насонов и соавт., 1999; В.А.Насонова, 2000, 2003; Л.П.Ананьева и соавт., 2005; Р.М.Балабанова, Б.С.Белов, 2006; G.S.Firestein, 2003; J.F.Bach, 2005; G.Zandman-Goddard, Y.Shoenfeld,2005],

СКВ признана классическим примером аутоиммунного заболевания с утратой аутотолерантности, поликлональной активацией В-лимфоцитов, изменениями фенотипа лимфоцитов, продукцией широкого спектра аутоантител (прежде всего, к компонентам клеточного ядра), формированием иммунных комплексов, нарушениями в цитокиновой сети и развитием апоптоза [А.М.Лила, А.А.Новик, 2000; В.И.Мазуров, В.В Васильев., 2002; А.И.Сперанский с соавт., 2000,2004; Т.В. Глаза-нова с соавт. 2002; C.C.Mok, C.S.Lau, 2003; V.C.Kyttaris et al., 2004, 2005]. В то же время сведения об иммунопатогенезе интегументных (кожных) форм красной волчанки (ИКВ) немногочисленны и касаются описания преимущественно локальных комбинированных нарушений эффекторных и регуляторных звеньев иммунной системы, сочетающихся с развитием у больных аутоиммунного процесса и иммунодефицита [С.В.Сучков с соавт., 2000,2004,2005; Т.В.Глазанова с соавт. 2002].

Ряд авторов высказывает мнение, что ограниченная и системная склеродермия также являются аутоиммунными болезнями с выработкой различных аутоантител [Н.Г.Гусева с соавт, 1998; С.В.Сучков с соавт., 2005; M.P.Heffeman et al., 2001; S.Sato et al., 2004, 2005; K.Takehara, S.Sato, 2005], нарушениями иммунной системы

тового профиля при

вьшолнения настоя-

и цитокинового профиля [А.С.Дворников, 2005; ЕЛЭа1кШс й а]., 1999; 8.8а1о et а!., 2000, 2001]. Однако детальных сравнительных исследовани \ иммунопатогенеза ОСД и ССД не проводилось.

Таким образом, большинство исследований, касающихся иммунологических механизмов развития кожных и системных форм красной волчанки и склеродермии, связано с изучением отдельных вопросов функционирования иммунной системы. Систематических работ в этом направлении не выполнялось, многие исследования носят противоречивый характер. Практически отсутствуют сведения относительно регуляции метаболических функций фагоцитов и фенотипа лимфоцитов под влиянием ЦИК, цитокинов, аутоантител при разных формах красной волчанки и склеро дермии. С целью более полного понимания механизмов развития кожных и системных форм красной волчанки и склеродермии, разработки новы; с лабораторных подходов, дифференцирующих эти заболевания, эффективного лечебного воздействия необходимо изучение иммунологических нарушений и цитоки каждом из них отдельно, а также в сравнительном аспекте.

Изложенные обстоятельства послужили основанием для щей работы.

Цель работы - комплексное изучение иммунных нарушений с исследованием клеточного звена иммунитета и цитокинового профиля при южных и системных формах красной волчанки и склеродермии в зависимости от формы заболевания, клинических проявлений, активности и характера течения воспитательного процесса.

Задачи исследования:

Изучение уровня аДНК, ЦИК, провоспалительных и про"ивовоспалительных цитокинов у больных кожными и системными формами красной: волчанки и склеродермии.

Сравнительное исследование функций кислородзависим эго и кислороднеза-висимого метаболизма нейтрофилов и моноцитов, оценка влияния аДНК, ЦИК, цитокинов на функции фагоцитов у больных кожными и системными формами красной волчанки и склеродермии.

Исследование состояния лимфоцитарного звена иммунитета по данным им-муноцитофенотипирования лимфоцитов и выяснение влияния аДНК, ЦИК, цитокинов на фенотип лимфоцитов у больных кожными и системными формами красной волчанки и склеродермии,

Выяснение взаимосвязей формы, активности, характер^ течения, клинических проявлений при красной волчанке и склеродермии с особе}: нирования нейтрофилов, моноцитов, фенотипа лимфоцитов, аДНК, ЦИК.

Научная новизна. Впервые при кожных и системных формах красной волчанки и склеродермии проведено комплексное сравнительное исследование ряда

нностями функцио-уровня цитокинов,

иммунологических показателей (ЦИК, аДНК, цитокинов, функциональной активности циркулирующих фагоцитов, фенотипа лимфоцитов) и некоторых цитокинов, определены общие признаки и различия иммунопатогенеза кожных и системных форм красной волчанки и склеродермии.

Получены новые данные о закономерностях развития окислительного стресса циркулирующих фагоцитов при красной волчанке и склеродермии, свидетельствующие об увеличении при ИКВ, СКВ, ОСД и ССД продукции нейтрофилами мие-лопероксидазы и супероксид-аниона, дополняющихся при СКВ и ССД возрастанием продукции активных форм кислорода моноцитами. Впервые при красной волчанке и склеродермии исследованы кислороднезависимые функции циркулирующих фагоцитов, показывающие увеличение содержания в нейтрофилах и моноцитах кислой фосфатазы и катионных белков с мембранотоксическими свойствами исключительно при системных формах этих болезней. Полученные данные демонстрируют важную роль моноцита в развитии системности процесса при красной волчанке и склеродермии, значимость повышения метаболических функций циркулирующих фагоцитов в возникновении преимущественно сосудистых поражений, дополняя свободнорадикальную теорию патогенеза СКВ, постулаты которой могут быть использованы для обоснования патогенеза ИКВ, ОСД, ССД.

Впервые у больных СКВ и ИКВ установлено сходство фенотипических характеристик лимфоцитов (Т-лимфоцитопения с увеличением СБ19+ лимфоцитов, маркеров ранней - СО25+, поздней - НЬА-ОЯ+ активации и апоптоза -СБ95+), дополняющихся при ОСД и ССД снижением СЭ4+, СБ11Ь+ клеток с увеличением естественных киллеров - СБ16+; фенотип лимфоцитов при СКВ, в отличие от ИКВ, характеризуется снижением НЬА-ОИ* лимфоцитов на фоне увеличения С016+ и СБ25+ лимфоцитов, а при ССД, в отличие от ОСД, увеличением маркеров ранней активации - СБ25+.

Впервые при ИКВ, СКВ, ОСД, ССД проведена сравнительная оценка цито-кинового профиля, установлены закономерности ЦИК- и цитокин-опосредованной, а при системных формах - аДНК-зависимой активации окислительного стресса и кислороднезависимых функций нейтрофшюв и моноцитов. Впервые продемонстрирована гетерогенность фенотипа лимфоцитов и его зависимость у больных ИКВ, СКВ, ОСД, ССД от содержания ЦИК, аДНК и цитокинов, эффект которых заключается в переключении клеточного иммунного ответа на гуморальный.

Полученные данные раскрывают иммунопатогенетические механизмы развития кожных и системных форм красной волчанки, склеродермии, дают клиническую оценку определения аДНК, ЦИК, цитокинов, нарушений функций нейтрофи-лов и моноцитов, фенотипа лимфоцитов при различных формах этих болезней, обосновывая выбор иммунологических тестов, имеющих диагностическое значение и позволяющих судить о системности патологического процесса.

цир:

: ВЫ1

ЕЖ

[си]

014! 'еды

ости

Практическая значимость. Проведенные исследованш чие и патогенетическую значимость нарушений в иммунной с вом профиле у больных кожными и системными формами краен родермии. Показана высокая информативность определения ТЫ! стресса моноцитов, кислой фосфатазы и катионных белков цитов, СБ16+, СБ25+ лимфоцитов, ЦИК и аДНК в связи с их ми и частой встречаемостью при СКВ на фоне снижения НЬА-дифференциации кожных и системных форм красной волчанк высокое содержание 1Ь-4, ТОТ-а, показателей кислородзавго нейтрофилов, ЦИК, аДНК, и более низкое - СБЗ+, СБ8+ лимфо нированной красной волчанке, чем при дискоидной красной во. но исследование указанных показателей в качестве дополнил тестов дифференциации этих заболеваний. Для оценки актив» дополнительных тестов могут быть исследованы окислительнь}] лов, количество С04+, С08+ лимфоцитов. В комплексное 061 СКВ для выявления суставного синдрома следует включать о тельного стресса нейтрофилов и СБ16+ лимфоцитов, поражени{я тельного стресса нейтрофилов и выработки катионных белков

клеток, кожного синдрома - продукции катионных бел»)] С095+, АФС - окислительного стресса нейтрофилов, продукции нейтрофилами, СБ11Ь+ и НЬА-ВЯ+ лимфоцитов, нервной систе}) лимфоцитов. Установлена коррекция ряда иммунологических кинового профиля при СКВ под влиянием поддерживающей п костероидами, что подтверждает рациональность ее применения

Для дифференциации кожных и системных форм склеро/ -но в качестве дополнительных лабораторных маркеров исполь: окислительного стресса моноцитов, продукции нейтрофилами слой фосфатазы и катионных белков, количества СБ25+ лимфе: повышенных при системной склеродермии. Для оценки активно дополнительных тестов может быть применена оценка количесп тов, существенно увеличенного у больных с высокой степени процесса. Маркерами поражений легких и сердца при ССД СБ 11Ь+ и НЬА-ОЯ+ клеток, повышение окислительного стресса дов - увеличение СБЗ+ лимфоцитов, метаболизма фагоцитов; СБ4+ на фоне уменьшения СБ95+ лимфоцитов и увеличения О] са нейтрофилов; синдрома Шегрена - снижение СБЗ+ на фоне клеток.

Выявленные нарушения метаболических функций цирк) тов, фенотипа лимфоцитов и цитокинового профиля при кожны

установили нали-истеме и цитокино-ой волчанки и скле-'-а, окислительного купирующих фаго-сокими показ ателя-+ лимфоцитов для ¿и. Учитывая более мого метаболизма цитов при диссеми-анке, целесообразных лабораторных и СКВ в качестве й стресс нейтрофи-¿педование больных [феделение окисли-сосудов - окисли-моноцитами и НЬА-в нейтрофилами и катионных белков мы - СОЛ+ и СБ95+ показателей и цито-ерапии глюкокорти-при СКВ.

ермии целесообраз-зовать определение и моноцитами ки-цитов, значительно сти ССД в качестве ва СБ95+ лимфоцита активности (А2) является снижение нейтрофилов; сосу-почек - повышение кислительного стрес-повьнпения СБ25+

'лирующих фагоци-и системных фор-

к

мах красной волчанки и склеродермии обосновывают применение антиоксидантов и антицитокиновых препаратов для лечения этих заболеваний.

Основные положения, выносимые на защиту.

Иммунные нарушения при кожных и системных формах красной волчанки и склеродермии характеризуются повышением уровней ЦИК, аДНК, дисрегуляцией в системе цитокинов, повышением кислородзависимого и кислороднезависимого метаболизма циркулирующих фагоцитов, изменениями фенотипа лимфоцитов.

Системные и кожные формы красной волчанки проявляются как сходными нарушениями в иммунной системе и цитокиновом профиле (повышение уровней ЦИК, цитокинов IL-ip, IL-4, IL-6, кислородзависимого метаболизма нейтрофилов на фоне снижения их резервных функций, Т-лимфоцитопения с увеличением В-клеток - CD19+, маркеров активации - CD25+, HLA-DR+ и апоптоза -CD954), так и отличающимися изменениями (наличие при СКВ высоких титров аДНК, ЦИК, TNF-а, увеличение кислородзависимого метаболизма моноцитов, кислороднезависимого метаболизма - кислой фосфатазы и катионных белков нейтрофилов и моноцитов, содержания естественных киллеров - CD16+ на фоне снижения CD11Ь+ лимфоцитов - а-субъединицы р2-ингегринов, ICAM-1 при СКВ).

Системные и кожные формы склеродермии имеют как сходные иммунологические черты в виде повышения уровней ЦИК, цитокинов IL-lp, IL-4, TNF-a, кислородзависимого метаболизма нейтрофилов на фоне снижения их резервных функций, изменениями фенотипа лимфоцитов в виде Т-лимфоцитопекии, снижения CD4+ хелперов, CDllb+ лимфоцитов - a-субъединицы рг-интегринов, ICAM-1 с увеличением естественных киллеров - CD16+, В-клеток - CD19+, маркеров активации - CD25+, HLA-DR+ и апоптоза - CD95*), так и различные характеристики (высокие титры аДНК, TNF-a, увеличение кислородзависимого метаболизма моноцитов, кислороднезависимого метаболизма - кислой фосфатазы и катионных белков нейтрофилов и моноцитов, увеличение лимфоцитов с маркерами активации - CD25+ при ССД).

Маркерами активности воспалительного процесса при СКВ являются ЦИК, аДНК, IL-lp и TNF-a, спонтанная люминолзависимая хемилюминесценция нейтрофилов, CD4+, CD8+ лимфоциты, при ССД - CD95+.

Иммунопатологические нарушения при системных и кожных формах красной волчанки и склеродермии тесно взаимодействуют между собой и регулируются ЦИК, цитокинами, а при системных формах и аутоантителами.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на заседаниях 4 Конгресса Российской ассоциации аллергологов и клинических иммунологов (Москва, 2001), международной конференции «Естествознание на рубеже столетий» (Дагомыс, 2001), XVIII Юбилейной научно- практической конференции врачей медико-санитарной части НЯНПЗ, посвященной 45-летию МСЧ НЯНПЗ (Ярославль, 2001), Всероссийской конференции «Современные технологии лабора-

ародном конгрессе временные пробле-

торной диагностики нового столетия» (Москва, 2002), Междун «Практикующий врач» (Сочи, 2002), 5-м Конгрессе РААКИ «Со мы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии» (Москва, 2002), XXII Все' российской научно- практической конференции «Рахмановские чтения» (Москва, 2002), XIX научно-практической конференции (Ярославль, 2003), научно-практической конференции «Современное состояние Российской биотехнологии» (Москва, 2003), X съезде медицинских и фармацевтических работников Ярославской области (Ярославль, 2003), Втором съезде биотехнологов России (Москва, 2004), IV съезде ревматологов России (2005), Второй научно-практической конференции «Актуальные проблемы медицинской биотехнологии» (Анапа, 2005), Третьем съезде биотехнологов России (Москва, 2005), Российской ш учно-практической конференции «Современные технологии в иммунологии: иммунодиагностика и иммунотерапия (Курск, 2006), на кафедре клинической иммунологии и аллергологии ГОУ «Институт повышения квалификации Федерального медико- биологического агентства» (Москва, 2006), совместном заседании кафедр дерматовенерологии, пропедевтики внутренних болезней и кафедры терапии ФП1С и ППСЗ Ярославской Государственной медицинской академии (2006).

Внедрение в практику. Исследование цитокинов, фенотипа лимфоцитов, кислородзависимого и кислороднезависимого метаболизма нейт эофилов и моноцитов внедрено в работу лаборатории кафедры микробиологии с нирусологией и иммунологией Ярославской Государственной медицинской академии и клинико-иммунологической лаборатории медико-санитарной части Яросл: рабатывающего завода. Материалы диссертации используются сах кафедр терапевтического профиля, на практических занятия и венерических болезней Ярославской государственной медицин!

Публикации. Соискатель имеет 42 опубликованные работы по теме диссертации, в том числе в изданиях из Перечня ведущих рецензируем лх научных журналов и изданий, рекомендованных ВАК Минобразования России, - 10.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 294 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, А глав собственных исследований, обсуждения полученных данных, выводов, практических рекомендаций, указателя литературы, включающего 452 источника, из них 101 отечественная и 351 иностранные работы. Диссертация иллюстрирована 106 т аблицами и 20 ри сунками. Приведено 4 клинических примера.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материал и методы исследования Клиническая часть работы выполнялась на базах терапе ния муниципального учреждения здравоохранения клинической больницы № 8 г.Ярославля (главный врач - заслуженный врач Российской Федерации Ю.Н.Тихонов), ревматологического отделения Ярославской областной клинической

авского нефтепере-в лекционных кур-х кафедры кожных :кой академии.

втического отделе-

больницы (главный врач - заслуженный врач Российской Федерации О.П.Белокопытов) и отделения дерматологии Ярославского областного кожно-венерологического диспансера (главный врач - заслуженный врач Российской Федерации Н,В,Калинина).

Иммунологические исследования были проведены на базе межкафедральной иммунологической лаборатории Ярославской государственной медицинской академии (зав. лабораторией - проф, Э.В.Малафеева), а также в клинико-диагностической лаборатории ВИЧ-инфекции ГУ Центр СПИД (зав. лабораторией - Н.Ю.Ильяной).

Критерии включения в исследование для больных СКВ и ССД соответствие диагностическим критериям, отсутствие текущих интсркуррентнь!Х инфекций, ци-тостатической терапии; для пациентов с кожными формами (ИКВ, ОСД) - отсутствие сопутствующей патологии.

Было обследовано 235 человек в возрасте опт 20 до 60 лет, в том числе ИЗ больных СКВ, 34 - ИКВ, 24 -ССД, 34 -ОСД (рисунок 1).

ССД; 24;

ОСД;

СКВ; 143; 62%

Рисунок 1. Распределение обследованных больных по нозологическим формам

Средний возраст больных СКВ составил 51,4±10,9 года, длительность заболевания на момент исследования 95,2±14 месяцев; при ИКВ соответственно -54,9±18,1 года и 12,6±4,5 месяца. Мужчин среди больных СКВ было 3 (2,!%), женщин - 140 (97,9%), среди пациентов с ИКВ соответственно 7 и 16 (30,4% и 69,6%). Средний возраст больных ССД составлял 50?1±12,8 гада, давность болезни 15,3±9,2 лет, ОСД соответственно 41,8*18,4 года и 9,8±3,8 месяцев. Контрольная группа (33 здоровых донора) была представлена 2 (6,1%) мужчинами и 31 (93,9%) женщиной, средний возраст - 54,9*8,2 года.

Обследование больных включало сбор анамнестических данных, объективное обследование пациентов, комплекс общепринятых в ревматологии лабораторных методов, рентгенологическое и инструментальное обследование (ультразвуковое исследование внутренних органов, реовазо!-рафия, эндоскопические исследования, эхокардиоскопия, ультразвуковое дуплексное ангиосканирова-

ние) и иммунологические исследования. Пациенты обследовались при поступлении в стационар до начала активной терапии; часть больных, нахо, ищихся под активным диспансерным наблюдением, обследовалась амбулаторно.

Подострое течение СКВ имело место - у 70 пациентов (48,9%), хроническое - у 73 (51,1%). Минимальная степень активности воспалители диагностирована у 73 больного (51%), умеренная (АП) - у 70 (49%). Средний счет по шкале 81ЛЮА1 составил 9,1±1,8 балла, по шкале ЕСЬАМ 10/ ±1,0 балла.

Кожный синдром у больных СКВ был выявлен в 78,3% (112 больных), в виде фотосенсибилизации, поражения кожи по типу эритематозной или сосудистой

"бабочки", дискоидных очагов, сетчатого ливедо, трофических ляритов. Суставной синдром у больных СКВ был выявлен у 108 поражения нервной системы - у 101 (70,6%), лимфоаденопатия вана у 32 (22,4%) больных, сосудистые поражения (тромбозы, с* обнаружены соответственно у 25 (17,5%) и у 34 (23,8%) паци (26,6%), поражения сердца (миокардиодистрофия) - у 42 (29,4'

(плеврит, пневмоиит) - у 48 (33,6%), почек - у 56 (39,1%) в вид: смешанного варианта нефрита, изолированного мочевого синдрома, реже, нефрот

эасстройств, капил-пациентов (75,5%), была диагностиро-ндром Рейно) были ;нтов, АФС - у 38 i>) больных, легких

расчета на предни-апии.

етеского синдрома.

132 больных СКВ (92,3%) на момент исследования получали глюкокортико-стероидные препараты в поддерживающей дозе 5-10 мг/сутки из золон. 11 пациентов (7,7%) находились без поддерживающей тер

У большинства больных интегументными (кожными) формами красной волчанки (25 или 73,5%) была диагностирована дискоидная красна волчанка; диссе-минированная красная волчанка встречалась реже - у 9 (26,4%) пациентов. Эрите-матозная стадия заболевания наблюдалась у 9 (26,4%) пациента г, инфильтративно-гиперкератотическая- у 12 (35,2%), атрофическая - у 13 (38,2%). Поражение красной каймы губ было отмечено у 4 (11,7%) пациентов. ЬЕ-клеты были обнаружены у 16 пациентов (47%). При клинико-лабораторном и инструмен"альном обследовании больных ИКВ признаков системности не выявлялось. Пацигнты с ИКВ на момент обследования находились без системной терапии. 20 больных (58,8%) применяли наружно ппококортикостероидные мази.

При обследовании 24 больных ССД хроническое течение заболевания наблюдалось у 15 пациентов (62,5%), подострое - у 9 (37,5%). Умеренная активность воспалительного процесса (АП) отмечена у 16 (66,7%) пациентов -у 8 (33,3%). Акросклеротическая разновидность склеродермии 4 (16,7%) больных, диффузная - у 19 (79,1%), СЯЕЗТ-синдро^ - у 1 (4,2%). В 8 (33,3%) случаях были выявлены множественные телеангиэкгазяи, в 10 (41,7%) -капилляриты.

У всех больных ССД наблюдалось поражение кожи в виде уплотнения, атрофии, ливедо, у 10 (41,7%) больных наблюдались подкожные кальцинаты. В 10 (41,7%) случаях был констатирован миалгический синдром. Склеродактшгая выяв-

, минимальная (AI) 5ыла обнаружена у

лялась у 15 (62,5%) больных, у 10 из них (41,7%) был отмечен остеолиз. Синдром Рейно наблюдался у 17 (70,8%) больных. У 9 (37,5%) пациентов были обнаружены признаки дигитального артериита. В 9 случаях (37,5%) отмечены трофические язвы нижних конечностей, всегда сочетавшиеся с дигитальным артериитом.

Синдром Шегрена был выявлен у 5 больных (20,8%). Поражение клапанного аппарата было обнаружено у одного больного в виде стеноза устья аорты.

У 12 больных (50%) имел место миокардиосклероз, у 9 (37,5%) - адгезивный перикардит. Базальный пневмосклероз отмечался у 12 (50%) пациентов, сухой плеврит — у 5 (20,8%). Нефропатия была диагностирована у 6 (25%) больных, артериальная гипертензия - у 3 (12,5%). В 6 случаях (25%) был диагностирован эзофагит. Поражение ЦНС в виде энцефаломиелополирадикулоневрита, цефалгий и дисцир-куляторной энцефалопатии выявлено у 4 (16,7%) пациентов.

Среди пациентов с ССД 7 больных (29,1%) принимали ГКС в поддерживающей дозе (5-10 мг/сутки), 16 больных (66,6%) получали плаквенил (200-400 мг/ сутки), 3 (12,5%) - нестероидные противовоспалительные средства. Всем пациентам проводилась дезагрегантная терапия (трентал).

Среди 34 больных ОСД заболевание было диагностировано в стадии отека у 6 (17,6%) пациентов, в стадии уплотнения - у 10 (29,4%), в стадии атрофии - у 18 (52,9%). Бляшечная форма ОСД наблюдалась у 24 пациентов (70,6%), линейная - у 2 (5,9%), пятнистая - у 8 (23,5%). У двух больных (5,9%) была обнаружена алопеция. При клинико-лабораторном и инструментальном обследовании больных ОСД признаков системности не было выявлено.

Большинство больных ОСД - 21 (61,7%) обследовались до назначения терапии, 10 больным (20,4%) был назначен местно диметилсульфоксид, 3 (8,8%) - глю-кокортикостероидные мази.

Специальные методы исследования. Уровень циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) определяли методом преципитации сывороточных белков раствором полиэтиленгликоля, цитокинов (IL-ip, IL-4, IL-6, TNF-a) и аДНК - иммуно-ферментным методом.

Кислородзависимый метаболизм нейтрофилов оценивали по данным спонтанной и индуцированной взвесью убитого эпидермального стафилококка люми-нолзависимой и люцигенинзависимой хемипюминесценции нейтрофилов, выделенных центрифугированием в двойном градиенте фиколла-верографина по методике, описанной В.М. Земсковым с соавт. (1995), а также моноцитов, изолированных с помощью дополнительного центрифугирования фракции мононуклеарных клеток в градиенте перколла [M.Wong, RD.Wilson, 1975]. О кислороднезависимых функциях циркулирующих фагоцитов судили по данным определения активности кислой фосфатазы (маркер состояния лизосомальной мембраны) и катионных белков -мембранотоксического фактора [Б.В.Пинегин с соавт., 1995]. Функциональный резерв нейтрофилов и моноцитов оценивали по данным коэффициентов активации

(отношение индуцированных тестов к спонтанным).

Фенотип лимфоцитов (CD3+ — общие Т-лимфоциты, CD4+ - цитотоксические/супрессорные лимфоциты, CDIlb+ - а интегринов , CD16+ - NK-клетки, CD19+ - В-лимфоциты, CD25+ лимфоциты с рецептором к интерлейкину-2, CD95+ - лиганд, оп тоз, HLA-DR+ - активированные лимфоциты) определяли с помо! ресцентного метода с использованием моноклональных антит также иммунорегуляторный индекс (ИРИ - CD4+/CD8+), coi CD95+, HLA-DR+/CD95+, сумму T+B+NK,

Статистическую обработку данных проводили с помощь пакета Statistica 5,5 (StatSoft, Inc.). Сравнение непрерывных вел] распределением проводилось с помощью t-критерия Стьюдента-асимметричного распределения данных - с помощью теста Машф

.к л

- Т-хелперы, CD8+ субъединицы Рг-

- активированные чередующий апоп-щью иммунофлюо-ел. Подсчитывали

Отношения CD25V

ич

нения дискретных величин использовали критерии с с поправ] а метод Фишера. Для определения взаимосвязи явлений примеш:. корреляционный анализ, непараметрические корреляционные » Спирмена.

1ески достоверное гичными данными

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Циркулирующие иммунные комплексы, антитела к ДНК и цитокино-вый профиль у больных красной волчанкой и склеродермией

Содержание ЦИК и аДНК у больных ИКВ и СКВ (таблица 1) было существенно выше, чем у доноров (р<0,05). Констатировано статиста увеличение уровня ЦИК у больных СКВ по сравнению с анало больных ИКВ (р<0,05).

У больных ИКВ и СКВ показано достоверное увеличений (р<0,05) уровней сывороточных 1Ь-1р, а также 1Ь-4, по сравнению с данными группы контроля, а ТОТ-а только при СКВ. Уровни 1Ь-1р, 1Ь-4 и 1Ь-6 при ИКВ по сравнению с аналогичными данными у больных СКВ не имели существенных обличий (р>0,05), а ТОТ-а бьш статистически достоверно выше при СКВ, чем при ИК В (р<0,05).

При ДсмКВ установлено статистически достоверное пс уровней ЦИК, 1Ь-4 и ТОТ-а по сравнению с аналогичными данными у больных ДКВ. Концентрация 1Ь-6 при ДсмКВ была достоверно выше (р<0,05), чем в группе контроля.

С нарастанием активности СКВ (таблица 2) возрастали у{ овни ЦИК, аДНК, 1Ь-1Р и ЮТ-а. Констатировано снижение уровня ЦИК при хроническом течении СКВ по сравнению с аналогичными данными у пациентов с подострым течением процесса (р<0,05). Установлено достоверное повышение содержания ЦИК и аДНК у больных СКВ с поражениями сосудов и АФС (82,7±4,1и 78,6±; ,7 ед.; 350,8±150,8 и 381,4±20б,3 МЕ/мл;_р<0,05). Почечный синдром характеризовался снижением

10 статистического ин с нормальным Фишера, в случаях Уитни. Для сравни Йетса, точный лея канонический [етоды Пирсона и

вьппение (р<0,05)

Таблица 1

Содержание ЦИК, аДНК и цитокинов в сыворотке крови больных различными формами красной волчанки

Показатели Обследуемые группы ШЖ

Контроль ИКВ СКВ дкв ДсмКВ

(п=33) (п=34) (п=143) (п=25) (п=9)

ЦИК (ед.) 38,3±8,17 63,9±8,3''2 85,31±6,2и 54,1±3,1и 120,8±6,71'3

аДНКМЕ/мл 75,26±63,1 162,3*117,7' 436,4±263,6и 125,6±29,8' 147,7±36,7'

Содержание цитокинов в пкг/мл

1Ь-1р 9,4±11,7 58,8*28,3' 113,7±125,3' 45,4*31,9' 79,8±11,8'

1Ь4 3,6±6,1 43,7±54,9' 77,1±139,1' 23,7±28,91,3 1203±563и

1Ы5 2,8±2,9 3,9±2,3 15,8*24,3 3,3±2,2 5,9*0,9'

ЮТ-а 5,5±8,4 32,3±53,32 88,9±122,9и 9,7*35,2' 72,0±56,11;>

Обозначения: 1 - достоверное отличие (р<0,05) по сравнению с группой доноров, 2 - достоверное отличие между группами больных с ИКВ и СКВ,3- достоверное отличие между группами больных с ДКВ и ДсмКВ.

Таблица 2

Содержание ЦИК, аДНК и цитокинов в сыворотке крови больных СКВ в зависимости от активности и течения процесса

Показатели Обследуемые группы \ttSD

Активность СКВ Течение СКВ

А1(п=73) АН (п=70) подострое (п=70) хроническое (п=73)

ЦИК (ед.) 62,7±4,1 77,2*5,6* 95,8*7,3 71,4*3,4*

аДНКМЕ/мл 146,2*54,9 290,2*164,2» 193,3*149,5 243,0±162,8

Содержание цитокинов в пкг/мл

1Ь-1Р 67,3*72,3 165,2*150,7* 129,9*143,8 99,5±98,8

1Ь-4 74,8*121,6 79,7*158,4 98,8±171,1 51,3*81,9

1Ь-6 14,2*24,9 17,6*23,9 18,1±25,7 10,8*19,8

ЮТ-а 46,0*59,1 136,5± 155Д* 93,1* 140,3 94,1*101,8

Обозначения: * - достоверное отличие (р<0,05) между группами больных с различной степенью активности и характером течения СКВ.

содержания ЦИК (57,7±2,9 ед., р<0,05), кожный синдром, АФС и синдром Рейно -повышением 1Ь-1р (132,6±137,7 пкг/мл), легочный синдром - 1Ь-4 (119,9±155,4 пкг/

стоверно выше по

мл), АФС - ТЫБ-а (179,8±198,6 пкг/мл).

Уровень ЦИК у больных ОСД и ССД (таблица 3) был дс|с сравнению с аналогичными данными здоровых лиц (р<0,05), однако существенной разницы в этом показателе при ОСД и ССД не было отмечено. зДНК были достоверно увеличены по сравнению с контролем только при ССД.

Таблица 3

Содержание ЦИК, аДНК и цитокннов в сыворотке больных склеродермией

Показатели Обследуемые группы МШЗ

1. Кошроль (п=33) 2. ОСД (п=25) 3 (г

ЦИК (ед.) 38,3±8,17 66,4±35Д* 5. !,7±27,3*

аДНК МЕ/мл 75,26±63,1 65,9*25,6 1 ¡8,5±184,7*

Содержание цитокинов в пкг/мл

1Ь-1р 9,4±11,7 58,4±32,6* 9 ^,4±57,9*

ГЬ-4 3,6±6,1 32,2±35,9* 6 >,7±91,2*

И-6 2,8±2,9 3,7±23 6 3±19,2

ТЫР-а 5,5±8,4 46,9±45,1* 5 ,8±58,5*

крови

Обозначения: * - достоверное отличие (р<0,05) по сравне норов. Разница между данными в группах 2 (ОСД) и 3 (ССД) недо

яию с группой достоверна (р>0,05).

Установлено достоверное увеличение уровней сывороточных 1Ь-1(3, 1Ь-4 и

ТОТ-а у больных ССД и ОСД по сравнению с данными группы 3).

Поражения сосудов, желудочно-кишечного тракта и орган ных ССД характеризовались достоверным повышением (р<0,05)

контроля (таблица

эв дыхания у боль-содержания аДНК

(272,7±206,5; 290,0±224,8; 270,7±214,2 МЕ/мл), тогда как почечн лй синдром сопро вождался снижением уровня аутоантител (128,0±196,3 МЕ/мл, р<0,05). Синдром Шегрена, подкожные кальцинаты, синдром Рейно, поражения суставов и почек про текали на фоне достоверного снижения (р<0,05) концентрации ЦИК (29,6±22,6; 36,3±26,7; 47,0±28,2; 46,4±25,4; 43,2±32,0 ед.).

Синдром Рейно у больных ССД сопровождался достоверным повьнпением (р<0,05) содержания 1Ь-1р (109,9±54,3 пкг/мл), поражения желудочно-кишечного тракта, сосудов и склеродактилия - 11,-4 (114,2±102,4; 127,7±10( мл), поражений желудочно-кишечного тракта и сосудов -88,3±68,9 пкг/мл).

Кислородзависимые функции циркулирующих при красной волчанке и склеродермий У больных ИКВ по сравнению со здоровыми лицами устгновлено достовер-

,5; 90,1±101,5 пкг/ ТЫР-а (88,1±64,5;

фагоцитов

ное повышение (р<0,05) кислородзависимого метаболизма нейтрофилов в люциге-нинзависимом и в люминолзависимом тестах спонтанной хемилюминесценции (ХЛ) (табл.4).

Таблица 4

Кислородзависимый метаболизм нейтрофилов и моноцитов у больных различными формами красной волчанкой

Показатели ХЛ х104имп/мин Обследуемые группы М±БО

Контроль (п=33) СКВ (п=143) ИКВ (п=34) ДКВ (п=25) ДсмКВ (п=9)

сХЛЛгНф 1,4±1,1 4,2±4,5и 2,6±2,3'-2 2,0±1,43 6,5±2,13

иХЛЛгНф 3,1±2,2 3,3±5,4 1,9±2,3 2,3*3,03 1,1±1,63

КА ХЛ Лг Нф 2,2±1,9 0,9±0,91,2 0,1±0,13

сХЛЛгМн 0,7±0,6 1,6*2,6й 0,6±0,42 0,7±0,6 0,4±0,2

иХЛЛгМн 1,0±0,8 1,2±2,2 0,6±0,8 0,9±1,33 0,2±0,23

КА ХЛ Лг Мн 1,4±0,8 0,9±1,1 1,3±1Д 1,3±1,33 0,8±1,03

сХЛ Лм Нф 1,9±0,8 6,8*6,6' 4,6±3,8' 3,6±3,СР

иХЛЛмНф 7,9±5,4 8,1±12,6 6,0±4,0 3,7±4,3 3,3±3,0

КА ХЛ Лм Нф 2,9±1,9 1,2±1,4' 1,3±1,1' 1,4±1,01 0,5±0,43

сХЛ Лм Мн 0,7±0,3 2Д±1,8^ ЬШ.О2 1,1±1,0 1,1±0,6

иХЛЛм Мн 1,8±1,5 1,3±и 1,4±2,5 1,8±2,53 0,1±0,13

КА ХЛ Лм Ми 2,5±1,8 0,8±0,81;г 2,1±4,12 2,5*4,8" 0,2±0,23

Обозначения: 1 - достоверное отличие (р<0,05) по сравнению с группой доноров, 2 - достоверное отличие между группами больных с ИКВ и СКВ,3- достоверное отличие между группами больных с ДКВ и ДсмКВ.

При СКВ отмечено существенное повышение (р<0,05) спонтанной люциге-нинзависимой и люминолзависимой ХЛ нейтрофилов и моноцитов. Индуцированная ХЛ циркулирующих фагоцитов при ИКВ и СКВ не отличалась достоверно от показателей группы контроля. КА нейтрофилов при ИКВ и СКВ были снижены. КА моноцитов в тесте люминолзависимой ХЛ при СКВ был ниже, чем при ИКВ.

При ДКВ по сравнению с данными группы контроля были достоверно увеличены (р<0,05) показатели спонтанной люминолзависимой ХЛ нейтрофилов на фоне снижения индуцированной, а у больных ДсмКВ повышены данные спонтанной лю-цигенин- и люминолзависимой ХЛ нейтрофилов, а также спонтанной люминолзависимой ХЛ моноцитов, сопровождающиеся уменьшением индуцированной ХЛ; КА нейтрофилов были снижены. При ДсмКВ, в отличие от ДКВ, были достоверно уве-

и люминолзависи-ндром - достовер-ХЛ моноцитов

офилов обнаруже-

личены (р<0,05) показатели спонтанной люцигенин- и люминолз »исимой ХЛ ней-трофилов, а КА - снижены.

С нарастанием активности СКВ увеличивалась спонтанная люминолзависи-мая хемилюминесценция нейтрофилов.

Суставной синдром при СКВ сопровождался снижением индуцированной люцигенинзависимой ХЛ нейтрофилов (2,0±2,9х104имп/мин, р<0,05), а поражения сосудов - более высокими показателями индуцированной люминолзависимой ХЛ нейтрофилов (7Д±11,1х104имп/мин, р<0,05). АФС характеризовался достоверным (р<0,05) увеличением спонтанной и индуцированной люминолз: шисимой ХЛ нейтрофилов (14,7±8,3 и 15,8±16,3х104имп/мин, р<0,05 ) и спонтанно мой ХЛ моноцитов (3,8±3,9 х104имп/мин, р<0,05), а кожный от ным повьппением (р<0,05) спонтанной люминолзависимой (2,5±2,1х104 имп/мин, р<0,05).

Более высокие показатели люцигенинзависимой ХЛ нейтр ны у больных ИКВ с повышенными значениями ЦИК (4,9±2,7х 104имп/мин), 1Ь-1р (4,1±1,8х104имп/мин) и 1Ь-6 (4,7±3,7х104имп/мин), а высокие показатели 1Ь-6 соответствовали повьппенным значениям люминолзависимой ХЛ нейтрофилов (7,9±5,6х104имп/мин) по сравнению с данными пациентов, у кото эых уровни ЦИК и цитокинов находились в пределах нормы (р<0,05).

При СКВ эффекты ЦИК, цитокинов, аДНК на кислород: ависимый метаболизм нейтрофилов и моноцитов были более выражены (таблица 51).

Так, высокие показатели ЦИК и аДНК статистически достоверно (р<0,05) определяли увеличение спонтанной и индуцированной люцигенинзависимой ХЛ как нейтрофилов, так и моноцитов, а также спонтанной люминолзависимой ХЛ нейтрофилов и моноцитов. Повышенное содержание 1Ь-1р сопровождалось увеличением спонтанной люминол- и люцигенинзависимой ХЛ нейтр офилов и моноцитов, индуцированной люцигенинзависимой ХЛ моноцитов и индуцированной люминолзависимой ХЛ нейтрофилов (р<0,05 во всех случаях), II-6 - возрастанием спонтанной люминол- и люцигенинзависимой ХЛ нейтрофилов и моноцитов, а также индуцированной люминолзависимой ХЛ моноцитов, ЮТ-а - усилением спонтанной люцигенинзависимой ХЛ нейтрофилов и индуцирование й люминолзависимой ХЛ нейтрофилов.

У больных ОСД кислородзависимый метаболизм был повышен только в ней-трофилах в люминолзависимом тесте спонтанной ХЛ (табл.6). При ССД существенное повышение кислородзависимого метаболизма затрагивало показатели спонтанной люцигенинзависимой и люминолзависимой ХЛ как нейтрофилов, так и моноцитов. Индуцированная ХЛ циркулирующих фагоцитов при ССД была достоверно снижена во всех тестах, исключая индуцированную люцигенинрависимую ХЛ мо ноцитов. КА нейтрофилов и моноцитов во всех тестах ХЛ были

снижены. Отличия

в кислородзависимом метаболизме циркулирующих фагоцитов при ОСД и ССД касались спонтанной люминолзависимой ХЛ моноцитов, достоверно повышенной у больных ССД.

Таблица 5

Кислородзависимый метаболизм нейтрофилов и моноцитов у больных СКВ в зависимости от содержания ЦИК, аДНК и цитокинов

Показатели ХЛ х104 имп/мин Иммунологические показатели

ЦИК п 46 аДНК п=т п 31 11.-1 р " 63 1Ь-4 " 108 11-6 " 96 ЮТ-а " 75

сХЛЛгНф зд±1.з* 1,4±1,3 3.4±2.1* 1,6±1,4 3.8±2.8* 1,8±1,3 3.9±2.7 2,8±2,3 4.8±2.6* 2,1±1,6 3.9±1Д* 2,1±1,6

иХЛЛгНф 32±1.6* 4.8±4.7* 1,4±1,5 3.2±2.6 1,8±2,9 3.5±1.4 2,7±2,5 4.8±4.1 2,7±2,5 3.0±3.3 1,6±2Д

КАХЛЛгНф 1.0±0.7 1,Ш,1 1,3±1.2 0,9±0,7 0.8±0.9 1,0+0,6 0.9±0.6 0,9±0,9 1,3±0,0 0.Ш.1 0,7±0,7

сХЛЛгМн 1.4±0.7* 0,4±0,3 1.6±1.2* 0,6±0,3 1.7±0.8* 0,7±0,3 1.7±1.0 1,6±0,4 1.8±0.3* 0,7±0,4 0.6±1.0 0,7±0,4

иХЛЛгМн 1М\Л* 0,6±0,2 1.8±2.0* 0,6±0,8 1.7±0.9* 0,8±0,5 1,4±03 1,6±0,9 1.5±0 2 1,0±1Д 0.4±0.2 0,9±1,4

КАХЛЛгМн 1.0±1.5 1,5±1,1 1.1±2.1 1,0±0,8 1.0*1.0 1,Ш,8 0,8±1.0 1,0±1,2 0.8±0.9 1,4±1Д 0.7±1.1 1,3±1,4

сХЛЛмНф 6.2±3.5* 3,1±2,3 6.3±2.8* 4,3±1,8 6.8±4.3* 2,9±2,8 5.8±5Д 5,5±1,9 8Д±4.5* 2,9±2Д 5.7±4.8 3,9*3,1

иХЛЛмНф 8,6±4,5 4,6±4,9 7.7±5.1* 3,1±2,6 7.1±4.3* 2,7±1,3 6.4±2,9 6,3±4Д 5.1±5.3 ЗД±2,8 4.9±3.4* 2,3*1,1

КАХЛЛмНф 1.5±1.0 1,5±1,1 Ц2±1.4 0,7±1,0 1,0±1Д 0,9±0,7 1.Ш.З 1,1 ±0,9 0.6±1.1 1,1±1,3 0.8±1.2 0,6±1,1

сХЛЛмМн 2.2±1.0* 0,7±0,6 2.8±0.5* 1,1±1,0 2.0±0.7* 0,9±1Д 1,8±0.4 1Д±1Д 2Д±0.6* 0,8±0,9 0.8±0.4 1,1±1,1

иХЛЛмМн 1.4±2.3 1,3±1Д 2.4±1.8 1,2±2,1 1.3±1.8 1,0*2,8 1.8±1,0 1,2±1,7 2.4±2.4* 1,1±1,1 1,4±2.3 1,4±2,3

КАХЛЛмМн 0.6±0.9 1,8±1,8 0.8±2,6 0.6±0.6 1,1±0,9 1.0±0,8 1,0±0,5 1,1±1Д 1,4±1,5 1.7±1Д 1,3±0,8

Обозначения: иммунологические показатели: числитель - повышенный показатель, знаменатель - нормальный; * - достоверная разница (р<0,05) между числителем и знаменателем.

Кислородзависимый метаболизм нейтрофилов и моноцитов у больных склеродермией

Показатели хЮ4 имп/мин Обследуемые группы М±8Б

Контроль (п = 33) ОСД (п=34) ССД (п=24)

сХЛЛгНф 1,4±1,1 2,3±3,4 1 ,9±2,8 *

иХЛЛгНф 3,1±2,2 3,4±5,3 ,5±2Д »

КАХЛЛгНф 2Д±1,9 1,5±2,16 С ,6±0,7 «

сХЛ Лг Мн 0,7±0,6 0,9±1,0 ,4±1,0 *

иХЛ Лг Мн 1,0±0,8 0,7±1,5 ,1±2,3

КА ХЛ Лг Мн 1,4±0,8 0,9±1,4 ( ,6 ±0,7*

сХЛЛмНф 1,£ь0,8 4,9±5,8 * А ,б±5,6 *

иХЛЛмНф 7,9±5,4 5Д±8,5 • ,0±4,0 *

КА ХЛ Лм Нф 2,9±1,9 2,8±8,8 ),7±0,8 *

сХЛ Лм Мн 0,7±0,3 1,1±1,1" ^,1±3,7 * •

иХЛЛмМн 1,8±1,5 1,8±2,7 №1,3 *

КА ХЛ Лм Мн 2,5±1,8 1,5±3,7 < ),3±0,7 *

Обозначения: * - достоверное отличие (р<0,05) по сравнен! ров, '-достоверное отличие (р<0,05) между группами больных с С

кю

с группой доно-СДиССД.

Не было обнаружено достоверной разницы (р>0,05) в показателях кислород-зависимого метаболизма циркулирующих фагоцитов и уровней ЦИК у больных ССД в зависимости от активности процесса.

У больных ОСД с высокими значениями ЦИК, 1Ь-1Р и 1Ь-о была достоверно увеличена спонтанная люцигенин- (3,4±3,2; 3,4±3,7; 5,3±4,4х10' нолзависимая (8,4±6,0; 8,7±6,5; 11,2±7,4х104имп/мин) ХЛ нейтр индуцированная реакция клеток и коэффициент их активации тесте люцигенинзависимой ХЛ нейтрофилов при наличии высс (4,8±5,4х104 имп/мин) по сравнению с данными пациентов, у которых уровни ЦИК и цитокинов находились в пределах нормы (р<0,05). Увеличен!« кислородзависи-мого метаболизма моноцитов при ОСД отмечалось только в тесге спонтанной люцигенинзависимой ХЛ у пациентов с повышенным содержанием 1Ь-6 (1,7±1,0х104 имп/мин, р>0,05).

При ССД ЦИК-, аДНК- и цитокин-опосредованная активация циркулирующих фагоцитов была выражена в большей степени. Так, у больных ССД, как и при

имп/мин) и люми-офилов, тогда как 5ыли повышены в ких уровней ЦИК

ОСД, высокие значения ЦИК, 1Ь-1Р и 1Ь-6 ассоциировались с достоверным (р<0,05) увеличением спонтанной люцигенин- (5,5±5,4; 5,2±4,2; 6,5±5,3х104 имп/мин, р<0,05) и люминолзависимой (10,2±6,5; 11,3±8,2; 12,8±7,7х104 имп/мин, р<0,05) ХЛ нейтрофилов по сравнению с данными пациентов, у которых уровни ЦИК и цитоки-нов находились в пределах нормы (р<0,05). В отличие от ОСД, у пациентов, страдавших ССД, повышенные уровни аДНК и обеспечивали существенное усиление кислородзависимого метаболизма нейтрофилов в тестах спонтанной люцигенин- (5,8±3,3; 6,5±5,8х104 имп/мин, р<0,05) и люминолзависимой (5,6±6,7; 4,6±5,7х104 имп/мин, р<0,05) ХЛ нейтрофилов по сравнению с данными пациентов, у которых уровни аутоантител и ЮТ-а находились в пределах нормы (р<0,05).. Достоверное увеличение окислительного стресса моноцитов при ССД (р<0,05) было установлено только в реакции люминолзависимой ХЛ у пациентов с высоким содержанием 11,-10 (3,8±2,6х104 имп/мин, р<0,05).

Кислороднезависимые функции циркулирующих фагоцитов при красной волчанке и склеродермии При ИКВ изменений киспороднезависимых функций циркулирующих фагоцитов по данным определения кислой фосфатазы (КФ) и катионных белков (КБ) в сравнении с данными группы контроля не было установлено (таблица 7).

Таблица 7

Кислороднезависимые функции нейтрофилов и моноцитов у больных ИКВ и СКВ

Показатели Обследуемые группы

М±50, ООхЮ-З

Контроль ИКВ СКВ

(п = 33) (п=34) (п=143)

КФ Мн 173,1*49,8 171*41,8* 227,7*89,9* •

192,8*46,6 195*85,1* 247,3*127,7* •

КАКФМн 1,1*0,4 1,1±0,3 1,1*0,4

КФНф 149,5*38,1 164,1* 58,2* 239,1*78,4* •

176,2±53,6 181,1±49,8" 269,4*128,8* •

КАКФНф 1,2*03 1,2±0,3 1,2*0,5

КБ Мн 61,7±18,0 65,3*20,5* 136,2*38,6* •

63,4±29,6 65,9±24Д* 167,3*112,5* *

КА КБ Мн 1,0±0,2 1,0*0,2 1,1*0,3

КБ Нф 62,2*17,6 65,9*18,5* 155,4*59,9* *

57,8±19,8 63,9*18,6* 185,5*96,8* *

КАКБНф 0,9*0,2 1,0±,1 1,1*0,2*

Обозначения: числитель — показатели спонтанных тестов, знаменатель- индуцированных. * - достоверное отличие (р<0,05) по сравнению с группой доноров, * - достоверное отличие (р<0,05) между группами больных ИКВ и СКВ.

<Ф и КБ. Не было гелей в зависимо-

У больных СКВ, в отличие от здоровых лиц и больных ИКВ, наблюдалось статистически достоверное увеличение (р<0,05) КФ и КБ как в нейтрофилах, так и в моноцитах. По сравнению с ИКВ, при СКВ в циркулирующих фигоцитах были су щественно повышены спонтанная и стимулированная продукция выявлено достоверной разницы (р>0,05) в исследованных показа сти от активности и характера течения СКВ, а также у больных Дс мКВ и ДКВ.

Кожный синдром, АФС и поражение нервной системы при СКВ характеризовались достоверным увеличением продукции КБ нейтрофилам! по данным инду цированного теста (соответственно 19,6±10,4; 25,5±21,8; 20,2±13,: ООхЮ"3, р<0,05), сосудистые поражения - повышением синтеза КБ моноцитами пс ного (13,8±4,1 00x10'3) и индуцированного (16,3±8,4 ООхЮ"3, больных ИКВ с высоким содержанием ЦИК и 1Ь-1 р продемонстр ное увеличение содержания КФ в нейтрофилах (174,0±60,4 и 217

данным спонтан-р<0,05) тестов. У ировано достовер-8±87,0 ODxlO3) и

моноцитах (164,8±3б,5 и 195,4±47,5 ODxlO"3) по сравнению с данными пациентов, у

ы (р<0,05). Повы-фагоцитами боль-

которых уровни ЦИК и цитокинов находились в пределах норм шенные уровни IL-4, IL-6 и TNF- а не влияли на продукцию КФ ных ИКВ. Не было отмечено при ИКВ влияния ЦИК и всех исслёдованных цитокинов на содержание катионных белков в нейтрофилах и моноцитах.

У больных СКВ ЦИК-, аДНК- и цитокин - опосредованная активация кисло-роднезависимого метаболизма фагоцитов была более выражена. Гак, у пациентов с повышенным уровнем ЦИК и аДНК были достоверно увеличены спонтанная (269,7±80,3 и 268,0±84,3 ODxlO"3) и индуцированная (298,5±1: ODxlO"3) продукция КФ моноцитами, а также спонтанная продукция КФ нейтрофи-лами (261,4±78,2 и 266,9±82,5 ODxlO"3) по сравнению с данными рых уровни ЦИК и аутоантител находились в пределах нормы (Ь<0,05). На другие показатели кислороднезависимого метаболизма циркулирующих фагоцитов (КБ нейтрофилов и моноцитов) ЦИК и аДНК влияния не оказывали.

Высокие уровни FL-lß при СКВ определяли достоверное жания КФ в моноцитах в спонтанном тесте (252,3±80,4 ODxlO фермента в моноцитах в спонтанном (319,7±52,1 ODxlO'3) i индуцированном (337,2±185,2 ODxlO"3) тестах, а в нейтрофилах - только в спонтанном (314,5±55,2 ODxlO"3) по сравнению с данными пациентов, у которых уровни дитокинов находи лись в пределах нормы (р<0,05). Повышенная концентрация IL-6 статистически значимо (р<0,05) сочеталась с высокими показателями КФ моноцитов в спонтанной реакции (299,6±86,6 ODxlO"3, р<0,05).

Наибольшее влияние на кислороднезависимый метаболизм фагоцитов при СКВ оказывали высокие уровни TNF-a - отмечено существенное увеличение (р<0,05) содержания КФ в спонтанных и индуцированных тестах как в моноцитах

повышение содер-3), IL-4 - того же

(спонтанный тест - 291,2±72,4, индуцированный тест - 3U

,7±149,5 ODxlO ,

р<0,05), так и в нейтрофилах (спонтанный тест -277,9±67,9, индуцированный тест -322,1±150,8 ОБхЮ"3, р<0,05) по сравнению с данными пациентов, у которых уровень цитокина находился в пределах нормы (р<0,05).

Анализ кислороднезависимых функций нейтрофилов и моноцитов при склеродермии не показал достоверных изменений у больных ОСД по сравнению с данными группы контроля (таблица 8).

Таблица 8

Кислороднезависнмые функции нейтрофилов и моноцитов у больных ОСД и ССД

Кислороднезависнмые функции Обследуемые группы М±80, 00x10*

Контроль (п = 33) ОСД (п=34) ССД (п=24)

КФ Мн 173.1±49.8 192,8±46,6 175.3±59.5* 196,8±88,9* 249.7±98.3* * 263,8±158* *

КАКФМн 1,1±0,4 1,1±03 1,1±0,4

КФНф 149.5±38.1 176,2±53,6 155.1± 51.1* 155,7±51,8* 360.1±288.7* ' 313,2±240,5* *

КАКФНф 1,2±03 1,0±03 0,9±0,4

КБ Мн 61.7±18.0 63,4±29,6 76.1±41.7* 73,9±58,9* 106.8±80.2* * 115,14105,1»'

КА КБ Мн 1,0±0,2 0,9±02. 1,1±0,3

КБ Нф 62,2±17.б 57,8±19,8 74.6±47.9* 70,4±38,2* 95.5±73.3* * 107Д±82,6* *

КА КБ Нф 0,9±0,2 0,9±0,3* 1Д±0,4* *

Обозначения: числитель - показатели спонтанных тестов, знаменатель -индуцированных. * - достоверное отличие (р<0,05) по сравнению с группой доноров, * - достоверное отличие (р<0,05) между группами больных с ОСД и ССД.

У больных ССД, в отличие от здоровых лиц, выявлено достоверное увеличение содержания в моноцитах и нейтрофилах КФ и КБ по данным спонтанных и стимулированных тестов на фоне неизмененных коэффициентов активации клеток. При ССД по сравнению с ОСД, в циркулирующих фагоцитах были существенно повышены спонтанная и стимулированная продукция КФ и КБ. Содержание КФ и КБ в фагоцитах не зависело от активности и характера течения ССД. Поражения сосудов при ССД характеризовались увеличением содержания КФ нейтрофилов и моноцитов в спонтанных тестах (642,8±291,3 и 320,6±94,4 ОШЮ"3, р<0,05). Исследование зависимости показателей кислороднезависимого метаболизма фагоцитов от ЦИК и цитокинов позволило установить более высокую продукцию КФ в моноцитах больных ОСД у пациентов с высоким уровнем ЦИК, 1Ь-1Р, 1Ь-4,1Ь-6 и ЮТ-а по данным спонтанных (208,6±73,7; 230,8±61,1; 218,9±60,1;230,3±61,6 ООхЮ"3) и индуцированных (254,8±100,8; 263,6±110,1; 245,4±113,2; 268,8±103,0

ypi

00x10 ) тестов по сравнению с данными пациентов, у которых токинов находились в пределах нормы (р<0,05). На содержание КЕ моноцитах при ОСД ЦИК, 1Ь-ф, 1Ь-4,1Ь-6 и ТЫБ-а влияния не ок.

Диапазон эффектов ЦИК, аДНК и цитокинов на кислорода! болизм циркулирующих фагоцитов при ССД был шире. Так, при казатели ЦИК и аДНК ассоциировались с увеличением спонтаннб] как в нейтрофилах (552,1±341,3 и 703,7±244,7 ООхЮ"3), так (318,9±88,2 и 352,6±58,0 ООхЮ"3), а индуцированной КФ толь: (356,8±194,5 и 399,0±192,6 ООхЮ"3) по сравнению с данными пацщ уровни ЦИК и аутоантител находились в пределах нормы (р<0,05)

Повышенные концентрации 1Ь-1р, 1Ь-4,1Ь-6 и ТОТ-а при лись с высоким содержанием в моноцитах КФ, выявленно

овни ЦИК и ци-в нейтрофилах и йзывали.

: зависимый мета-ССД высокие по-|й продукции КФ и в моноцитах ко в моноцитах ентов, у которых

ССД;

(327,6±62,8; 342,3±61,7; 376,6±61,8; 317,4±52,7 ODxlO"3) и

(340,8± 190,2; 362,6±192,5; 375,2±199,4; 333,б±194,2 ООхЮ"3) тест; ни 1Ь-1р, 1Ь-6 и ЮТ-а обеспечивали также увеличение спонтанн в нейтрофилах больных ССД (552,3±315,3; 685,2±2б2,7; 546,1±2 сравнению с данными пациентов, у которых уровни цитокинов на лах нормы (р<0,05). Не было выявлено у больных ССД влияния следованных цитокинов на уровни КБ в нейтрофилах и моноцитах

ах.

ассоциирова-i в спонтанных индуцированных Высокие уров-)й продукции КФ 78,0 ODxlO3) по родились в преде-ДИК, аДНК и ис-

Фенотип лимфоцитов при красной волчанке и скл

У больных ИКВ и СКВ по сравнению со здоровыми лиц; статистически значимое (р<0,05) снижение содержания CD3+ ли повышения CD19+, CD25+, CD95+ и HLA-DR+ лимфоцитов (таб; шихся при СКВ уменьшением количества CD16+ клеток.

Сравнение результатов иммуноцитофенотипирования лим! и СКВ показало, что у больных СКВ количество HLA-DR* лимфе ниже, a CD16+ и CD25+ - выше по сравнению с аналогичными ИКВ (р<0,05). Количество CD4+ и CD16+ лимфоцитов было cyn^i больных с высокой степенью активности процесса (А2), a CD8 пациентов с низкой степенью активности (А1). ИРИ у пациентов с ИКВ не был нарушен по сравнению с показатЬ лиц и больных СКВ, тогда как при СКВ он был достоверно енщю бенно у больных с низкой активностью процесса, а также при о мере при хроническом течении болезни. Соотношение HLA-DR+, ственно снижено (р<0,05) у пациентов всех групп, свидетельству^ дукции апогггоза лимфоцитов у больных красной волчанкой. При тель был статистически достоверно ниже, чем при ИКВ.

еродермии

:ами установлено йфоцитов на фоне шица 9), дополняв-

фоцитов при ИКВ цитов достоверно Данными больных ;ественно выше у клеток - выше у

:лями у здоровых :ен (р<0,05), осо-ом и в меньшей /]С095 бьшо суще-об усилении ин-СКВ этот показа-

с rpi

Фенотип лимфоцитов у больных различными формами красной волчанки

Формы красной волчанки Фенотипы лимфоцитов (M±SD, %%)

CD3+ CD4+ CD8+ CDllb+ CD16+ CD19+ CD25+ CD95+ HLA-DR+

1. ИКВ (п=34) 61±5* 38±9 28±7 20±5 17±4 20±6* 17±9* 26±11* 32±9*

а. ДКВ (п=25) 6б±4*' 38±8 34±6" 21±5* 18±4* 21±6* 17±6* 27±б* 31±6*

б. ДсмКВ (п=9) 59±6** 38±7 27±6' 19±6* 16±2 19±5* 18±9* 25±11* 33±8*

2. СКВ (п=143) 55±11* 37±7 29±5 17±6* 21±5* 22±7* 24±9* 29±13* 26±9*

3. СКВ AI (п=73) 56±9* 33±8* 30±4 16±5* 19±4 24±8* 26±9* 28±14* 25±8*

4. СКВ А2 (п=70) 52±13* 40±6 27±5 16±5* 24±4* 21±6* 25±9* 30415* 27±6*

5. СКВ п/о (п=70) 58±9* 39±5 29±5 16±5* 22±6* 22±7* 24±9* 30±14* 25±8*

6. СКВ хр. (п=73) 51±12* 37±7 29±4 18±6 20±4* 21±6* 23±8* 30±13* 24±9*

7. Доноры (п=33) 73±6 41±4 26±5 22±4 14±2 7±2 7±2 15±4 10±1

Достоверность

р 1-2 р>0,05 р>0,05 р>0,05 р>0,05 р<0,05 р>0,05 р<0,05 р>0,05 р<0,05

3-4 р>0,05 р=0,02 р=0,03 р>0,05 р<0,05 р>0,05 р>0,05 р>0,05 р>0,05

5-6 р>0,05 р>0,05 Р>0,05 р>0,05 р>0,05 р>0,05 р>0,05 р>0,05 р>0,05

Обозначения: А1 и А2 - степени активности процесса; п/о, хр. - течение болезни (соответственно подострое и хроническое). * - достоверная разница по сравнению с донорами, • достоверная разница между ДКВ и ДсмКВ (р>0,05).

У больных ДКВ и ДсмКВ по сравнению со здоровыми лицами, как и в целом при ИКВ, наблюдалось статистически значимое (р<0,05) снижение содержания СБЗ+ лимфоцитов на фоне повьппения С019+, С025+, СБ95+ и ЖА-ОЯ* лимфоцитов. Разница фенотипов лимфоцитов при ДКВ и ДсмКВ состоял; в более низком содержании СБЗ+, СБ8+ клеток и более высоком показателе ПРИ при ДсмКВ (р<0,05).

Поражения суставов при СКВ ассоциировались с повышенным содержанием СБ16+ лимфоцитов (22±4%, р<0,05), сосудов - с НЬА-ОЯ+ (27:Ь8%, р<0,05), кожи - с СБ95+ (31±14%, р<0,05), нервной системы - с СБ4+ и С095" (39±5 и 31±13%, р<0,05), АФС - с СШ1Ь+ и НЬА-ЭЫ+ (12±5; 26±5%, р<0,05).

Повышенное содержание 1Ь-1Р у больных ИКВ ассоциир овалось с достоверным увеличением уровней СБ11Ь+ и НЬА-Б^ клеток (20±4 и 33±10%), высокие показатели ТЫБ-а со снижением СБЗ+ и повьппением СЭ95+ лш фоцитов (56±3 и 32±13%). У больных СКВ с увеличенным содержанием аДНК на5людалось повышение количества СЭ4+ и СБ95+ клеток (39±б и 32±10%, р<0,05]. Подъем уровня 1Ь-1р ассоциировался с нарастанием числа СБ95+ лимфоцитов (30 £4%, р<0,05), 1Ь-4 - с уменьшением количества СБ95+ (2б±9%, р<0,05) и увеличени ;м НЬА-ОЯ+ клеток (28±6%, р<0,05). У пациентов с повышенньш содержанием 1Ь- > отмечены более высокие показатели СБ95+ (32±9%, р<0,05), а с повышенным Т^Б-а -снижение СЭЗ+ клеток (52±Ю%, р<0,05).

Исследования фенотипа лимфоцитов у больных склерод что у больных ОСД и ССД по сравнению со здоровыми лицами на

¡рмией показали, элюдапось стати-

стически значимое (р<0,05) снижение содержания СОЗ+, СБ4+, СЕ 11Ь+ лимфоцитов на фоне достоверного повышения уровня С08+, СБ16+, С019+, СБ25+, СБ95+ и НЬА-БК+ лимфоцитов (таблица 10). У больных ССД выявлены более высокое количество СЭ25+ лимфоцитов, чем при ОСД.

У больных ССД с высокой степенью активности (А2) процесса обнаружено более высокое содержание СБ95+ клеток. ИРИ был снижен как у пациентов с ОСД, так и с ССД, по сравнению с данными здоровых лиц. В то же время индекс НЬА-БЯ+/СБ95+ был снижен исключительно у больных ССД, свидетельствуя об усилении у них индукции апоптоза лимфоцитов.

У больных ССД с поражениями легких и сердца выявлено достоверное снижение уровней СБ11Ь+ (11±4 и 12±5%), и НЬА-ОЫ+ клеток (26 Ь5%). Поражения сосудов сопровождались достоверным (р<0,05) увеличением количества СБЗ+ (62±8%, р<0,05), почечный синдром - повышением содержания СБ4+ (40±3%, р<0,05) на фоне уменьшения СБ25+ (15±7%, р<0,05), синдром Ш ¡грена - снижением содержания СЭЗ+ (51±12%, р<0,05) на фоне повышения С1р95+ лимфоцитов (32±7%, р<0,05).

Фенотип лимфоцитов у больных ОСД и ССД

Формы склеродермии Фенотип лимфоцитов (М±8с1, %%)

СОЗ+ СБ4+ СБ8+ СШ1Ь+ С016+ СБ19+ СБ25+ СБ95+ НЬА-Ш1+

1. ОСД (п=34) 60±9* 36±8* 29±6+ 19±6* 18±4* 21±6* 19±7* 22±9* 27±10*

2. ССД (п=24) 57±12* 37±5* 31±5* 19±5* 19±3** 20±6* 24±7* 25±10* 28±7*

3. ССД А1 (п=8) 63±11* 35±4* 32±7* 22±4 19±3* 19±8* 22±9* 17±9* 26±4*

4. ССД А2 (п=16) 55±11* 37±5* 30±4* 18±6* 19±4* 21±6* 23±9* 28±10* 30±8*

5. Доноры (п=33) 73±б 41±4 26±5 22±4 14±2 7±2 7±2 15±4 10±1

Достоверность, ^критерий Стьюдента-Фишера

р 1-2 р>0,05 р>0,05 р>0,05 р>0,05 р>0,05 р>0,05 р=0,02 р>0,05 р>0,05

3-4 р>0,05 р>0,02 р>0,03 р>0,05 р>0,05 р>0,05 р>0,05 р=0,04 р>0,05

Обозначения: А1 и А2 - соответственно низкая и высокая степени активности процесса; звездочка - достоверная разница по сравнению с донорами

У больных ОСД высокий уровень 1Ь-1р ассоциировался с держанием СБ11Ь+ (21±5%, р<0,05), СБ19+ (23±6%, р<0,05), СБ9! и НЬА-БК+ (29±9, р<0,05), ТОТ-а - с увеличением СБ11Ь+ клеток При ССД у пациентов с высокими значениями аДНК отм

повышенным со-(25±9%, р<0,05) 21±5%, р<0,05). зчено увеличение

количества CD8+ (33±5%, р<0,05), на фоне снижения CD25+ клеток (19±8%, р<0,05). Повьппенные уровни IL-4 ассоциировались со снижением CD31" клеток (50±9%, р<0,05), высокие концентрации TNF-a - со снижением количества CD3+ (51±9%, р<0,05), CD8+ (28±5%, р<0,05), CD19+ (16±5%, р<0,05), на фоне увеличения CD95+ лимфоцитов (30±11%, р<0,05).

Анализ иммунологических показателей у больных СКВ, [получавших и не получавших поддерживающую терапию глюкокортикостероидам и, показал, что в обеих группах больных концентрация ЦИК, аДНК, цитокинов метаболических функций фагоцитов по данным спонтанных тестов были достоверно выше, чем в группе контроля. В то же время у больных, не получавших глюкокортикостероид-ную терапию, указанные показатели были достоверно выше (р<0,05), чем у пациентов, находящихся на поддерживающей терапии. В обеих группах больных СКВ наблюдалось достоверное снижение (р<0,05) содержания CD3+ лимфоцитов на фоне повышения CD19+, CD25+, CD95+ и HLA-DR+ лимфоцитов по сравнению с данными группы контроля. В то же время количество CD19+, CD25+ и HLA-DR+ клеток у пациентов, не принимавших глюкокортикостероиды, было i остоверно выше (р<0,05), чем у пациентов, получавших поддерживающую терапик .

Были изучены также корреляционные связи при ИКВ и СКВ, их сходства и различия (таблица 11). У больных ИКВ установлены прямые cbj зи между ЦИК и провоспалительными цитокинами IL-ip и TNFa, а также между провоспалительны-ми цитокинами (IL-ip - IL-6 и IL-lp - TNF-a).

При СКВ корреляционные связи между ЦИК, аДНК и цитокинами были шире. Сходство между этими показателями при обоих заболеваниях закпочалось в существовании прямых связей между ЦИК и провоспалительными цитокинами IL -1р и TNF-a, а также между провоспалительными цитокинами IL-ip и IL-6. Разница в корреляционных связях ИКВ и СКВ состояла в наличии прямой вз при СКВ между аДНК и провоспалительным цитокином IL-ip, а воспалительного цитокина IL-4 с двумя провоспалительными цитЬкинами - IL-ip и TNF-a. Очевидно, ЦИК, определяя иммунокомплексный характеэ поражений при ИКВ и СКВ, способны активировать выработку провоспалительных цитокинов, обладающих синергидным действием, эффекты которых при СКЕ, вероятно, купируются противовоспалительным цитокином IL-4, что можно рассматривать как

аимозависимости также связи про-

компенсаторную попытку локализовать системный иммунопатс цесс.

логический про-

Корреляционные взаимосвязи при СКВ и ПК В

Иммунологические показатели ИКВ СКВ Сходство ИКВ и СКВ Различия

аДНК, ЦИК, 1Ь-1р, 11,-4, 11,-6, ЮТ-а Прямые связи: 11.10-ЦИК, 1ЫР-1Ь6 11,1 Р-ЮТ-а ТОРа-ЦИК Прямые связи: 1Ыр-аДНК НЛр-ЦИК 1Ир-1Ь-6, 1ЫР-ЮТ-а 1ЫР - 11А ЮТа-ЦИК ЮТа-1Ь-4 1Ь-1р-ЦИК 1Ь-1р-Ц.-6 ЮТ-а - ЦИК Прямые связи: Ц,-1Р-аДНК, 11,-4 - 1Ь-1р ЮТ-а - П,-4 (СКВ)

Кислородеави-симый метаболизм фагоцитов; аДНК, ЦИК, цитокины (1Ь-1Р, 11,-4, 11,-6, ТОТ-а) Прямые связи: ЦИК-сХЛлгНф ЦИК-сХЛлмНф 1Ыр-сХЛлгНф 1ЫР сХЛлмНф 11,6 - сХЛлгНф 11,6 - сХЛлмНф Юта сХЛлгНф ЮТа сХЛлмНф аДНК-сХЛлгНф аДНК-сХЛлмНф аДНК-иХЛмНф ЦИК-сХЛлгНф ЦИК-сХЛлмНф ПЛр-сХЛлгНф 11.6-сХЛлгНф ЮТа-сХЛлгНф ЮТа-иХЛпмНф ЦИК-сХЛлгНф ЦИК- сХЛлмНф 11,1Р-сХЛлгНф 1Ь6-сХЛлгНф ЮТа- сХЛлгНф ЮТ-а- ХЛлмНф Прямые связи: 11,-6 - сХЛлмНф ИКВ аДНК - сХЛлгНф аДНК-сХЛлмНф аДНК-иХЛлмНф СКВ

Кислороднеза-висимый метаболизм фагоцитов; аДНК, ЦИК, цитокины (П,-1Р, 11,-4, II,-6, ЮТ-а) Прямые связи: ЦИК-сКФМн ЦИК-иКФМн ЦИК-сКБНф Прямые связи: ЦИК-сКФМн ЦИК-иКФМн ЦИК-сКФНф П.-4-сКФНф 11,-4-сКБМн 11,-1 Р-сКБМн ЦИК-сКФМн ЦИК-иКФМн Прямые связи: ЦИК-сКБНф ИКВ ЦИК-сКФНф 1Ыр-сКБМн 11,-4-сКФНф 1Ь-4-сКБМн СКВ

Фенотип лимфоцитов; аДНК, ЦИК, цитокины (ТЬ-1р, П,-4, 1Ь-6, ЮТ-а) Прямые связи: СТО5+ и ЮТ-а, Ш,А-ОЯ+ ЦИК, НЬА-ОЯ+ - II,- 1Р Обратная связь: СОЗ*-ЮТ-а, Прямые связи: СШ+-аДНК, ньл-оямир, НЬА-ОЯ+- ТЬ-6, Обратная связь: СО!1Ь+-аДНК. Прямые связи: НЬА-ОГ - II,-1Р Прямые связи С1)95+-ЮТ-а Н1А-Ш+ - ЦИК (ИКВ) СШ+-аДНК Ш.А-БЯ+ - 1Ь-6 (СКВ) Обратные связи: СОЗ+ - ТОР-а (ИКВ) СЮИЬ+ - аДНК (СКВ)

Было установлено также наличие связей при разных формах красной волчанки кислородзависимого метаболизма циркулирующих фагоцитов с ЦИК, цитокина-ми, а при СКВ и аДНК. Сходство этих связей при ИКВ и СКВ состояло в связях ЦИК, провоспадительных цитокинов 1Ь-1р, 1Ь-6 и ЮТ-а со спонтанной люциге-нинзависимой ХЛ нейтрофилов, а также ЦИК со спонтанной люминолзависимой

ХЛ нейтрофилов. Особенностью ИКВ являлось наличие корреляции между П.-6 и спонтанной люминолзависимой ХЛ нейтрофилов, а СКВ — аДНК и спонтанной лю-минол- и люцигенинзависимой, а также индуцированной люми юлзависимой ХЛ нейтрофилов. Эти данные соответствуют результатам приведенн лх выше исследований об усилении окислительного стресса фагоцитов у больных ИКВ и СКВ с повышенным содержанием ЦИК и провоспалительных цитокино!, усиливающихся при системном процессе под влиянием аДНК.

Корреляционный анализ продемонстрировал также связи 1ислороднезависи-мого метаболизма фагоцитов с ЦИК и цитокинами у больных 14КВ и, особенно, СКВ. Сходство этих связей иллюстрируется прямой взаимозавис имостью ЦИК со спонтанной выработкой КФ моноцитами в спонтанном и индуцир ованном тестах, а различия, более выраженные при СКВ, — в прямой связи ЦИК ее» спонтанной продукцией КБ нейтрофилами при ИКВ, а также в прямой связи ЦИК и 1Ь-4 со спонтанной выработкой КФ нейтрофилами, 1Ь-1р и 1Ь-4 со спонташкй продукцией КБ моноцитами при СКВ. Эти исследования подтверждают приведен яые выше данные об активации кислороднезависимого метаболизма нейтрофило! и моноцитов у больных ИКВ и СКВ с повышенными значениями ЦИК, цитокшов (а при СКВ -аДНК), имеющего, вместе с тем, ряд отличий при обоих заболевай яях.

Отмечены также взаимосвязи фенотипа лимфоцитов при различных формах красной волчанки с ЦИК, цитокинами, а при СКВ - и с аДНК. Схс дство этих корреляций при ИКВ и СКВ отмечено только по одной связи - НЬА-ОК и 1Ь-1р, что объясняет выявление повышенного содержания НЬА-011+-лимфощ1Тов как маркера поздней активации при обоих заболеваниях эффектом 1Ь-1р. Отличия взаимосвязей при ИКВ и СКВ было намного шире. Так, при ИКВ, в отличие от СКВ, констатированы прямые корреляции между Т№-а и СЭ95+, ЦИК и НЬА-ОЯ* обратные - между ЮТ-а и СЭЗ+, а при СКВ - прямые связи между аДНК и С04+, 1Ь-6 и НЬА-Б^, обратные - между аДНК и СЭ11Ь+. Эти данные при ИКВ объясюют причины увеличения маркеров апоптоза и поздней активации эффектами соответственно ЮТ-а и ЦИК, следствием чего может быть усиление аутоиммунизации, а Т-лимфоцитопению - ЮТ-а. При СКВ увеличение Т-хелперов (вая ный элемент им-мунопатогенеза болезни) находилось в прямой зависимости от поздней активации (НЬА-011+-лимфоциты) - от провоспалительно аС011Ь+-отаДНК.

Выполненные исследования демонстрируют существование как общих для ИКВ и СКВ иммунопатологических нарушений, так и различающихся (таблица 12).

В частности, ЦИК и аДНК встречались как при ИКВ, так и чаще и в более высоких концентрациях при СКВ.

аДНК, маркеров го цитокина 1Ь-6,

при СКВ, однако

Таблица 12

Иммунопатологические нарушения при СКВ и ИКВ

Иммунологические показатели ИКВ СКВ Сходство ИКВиСКВ Различия

ЦИК 1 Г Т Т чаще и выше при СКВ

аДНК Т (низкая частота) | (высокая частота) Т Т чаще и выше при СКВ

Цитокиньг 1Ь-1р, 1Ь-4, 1Ь-6, ЮТ-а 11ИР, 1Ь-4, 0.-6 Т 1Ь-1р, 1Ь-4, 1Ь-6, Т№-а т 1Ь-1р, 1Ь-4, 1Ь-6 ТЮТ-а чаще и выше при СКВ

Кислородзависимый метаболизм фагоцитов ТсХЛлгНф ТсХЛлмНф | иХЛлмНф | КА ХЛлгНф |КА ХЛлмНф ТсХЛлгНф ТсХЛлмНф ТсХЛлгМн ТсХЛлмМн |КА (все тесты) ТсХЛлгНф ТсХЛ лм Нф 1КА ХЛ лг Нф ;КАХЛлм Нф ТсХЛлгМн ТсХЛлмМн |КА (все тесты) СКВ

Кислороднезависи- мый метаболизм фагоцитов Показатели в норме ТКФ, КБ все тесты Нет ТКФ, КБ все тесты СКВ

Фенотип лимфоцитов Т С019*, С025+, СШ5+, НЬА-Ш1+ |СОЗ+, НЬА-ЭЯ+/С095+ ТС016+, СШ9+, ст5+, С095+, НЬА-ОК* 1С03+, СШ1Ь+, НЬА-ШГ/ СГО5*, ИРИ ТСШ9+, С025+, С1Э95+, НЬА-1С03+, НЬА- т СШ6+, 1СШ1Ь+, 1 НЬА-ОЛ* 1ИРИ СКВ

Сходство цитокинового профиля при ИКВ и СКВ заключалось в повышении уровней не только провоспалительных цитокинов 1Ь-1р и 1Ь-6, но и противовоспалительного цитокина 1Ь-4, свидетельствуя об участии как ТЫ, так и ТЬ2 зависимых реакций в иммунопатогенезе обоих заболеваний, а различие - в более частом выявлении при СКВ высоких концентраций ТОТ-а, обладающего повреждающим действием на ткани. Повышение кислородзависимого метаболизма циркулирующих фагоцитов было констатировано как при СКВ, так и при ИКВ в виде увеличения лю-минол- и люцигенинзависимой ХЛ нейтрофилов, дополняясь при СКВ возрастанием аналогичных реакций моноцитов. Кислороднезависимые функции фагоцитов изменялись только при СКВ, проявляясь увеличением выработки КФ и КБ нейтро-филами и моноцитами. Повышенная выработка АФК, обладающих высокими цито-токсическими и гистодеструктивными свойствами, способных модифицировать ДНК клетки с усилением аутоиммунного процесса, а также включать процессы апоптоза являются ключевыми звеньями иммунопатогенеза красной волчанки..

С другой стороны, показатели индуцированной ХЛ фагоцитов при ИКВ и

ль не только ней-моноцита, ответ-развитие систем-

с единым измене-и маркеров акти-

СКВ либо соответствовали норме, либо были снижены, сопровождаясь падением соответствующих коэффициентов активации клеток и указывая на снижение их функциональной активности. Вероятно, глубокое снижение резервных функций циркулирующих фагоцитов может определять длительную перснстенцию иммунных комплексов в организме больных СКВ в результате нарушения элиминации иммунных комплексов фагоцитами с прогрессированием болезни.

Что касается кислороднезависимого метаболизма по данным определения в циркулирующих фагоцитах КФ- маркера состояния мембран лгсосом и КБ, обладающих мембранотоксическими эффектами, то он носил ЦИК и цитокин- опосредованный характер и был повышен исключительно при СКВ.

Выполненные исследования метаболических функций циркулирующих фагоцитов при ИКВ и СКВ значительно расширяют представления об иммунопатоге-незе различных форм красной волчанки, демонстрируя важную рс трофила как инициатора сосудистых и тканевых поражений, но и ственного как за возникновение аналогичных поражений, так и за ности процесса.

Нарушения иммунорегуляции приводили при ИКВ и СКВ ниям фенотипа лимфоцитов в виде увеличения В-клеток (CD19+) вации (CD25+, HLA-DR+, CD95+) на фоне снижения CD3+- лимфоцитов и индекса HLA-DR+/CD95+, что свидетельствовало о превалировании прсцессов апоптоза. Отличия фенотипа лимфоцитов при ИКВ и СКВ заключались i повышении при СКВ количества CD16+, уменьшении числа CD11Ь+ клеток, а такя е более выраженное по сравнению с ИКВ снижение количества HLA-DR+ лимфоцитов и индекса HLA-DR+/CD95+, указывая на усиление процессов апоптоза над троцессами поздней активации. Количество CD4+ и CD16+ клеток было существе! шо выше у больных СКВ с высокой степенью активности (А2) процесса, a CDклеток - выше у пациентов с низкой степенью активности (А1). Эти данные указ! тают на важную роль Т-хелперов и значимость снижения количества цитотоксичеа сих лимфоцитов в прогрессировании СКВ.

Полученные результаты свидетельствуют также о способности аДНК, про-воспалительных и противовоспалительного цитокинов модулировать фенотип лимфоцитов при СКВ в большей степени, чем при ИКВ, усиливая нед точного иммунитета, и в то же время активируя клетки иммунной способствовать усилению апоптоза лимфоцитов.

Таким образом, полученные данные указывают на существование выраженных изменений фенотипа лимфоцитов при ИКВ и СКВ, характер и степень выраженности которых зависят от системности, активности, характера • течения, клинических проявлений указанных заболеваний, а также содержания аДЩК, ЦИК, цитокинов.

Выполненные исследования указывают на существований выраженной Т-

зстаточность кле-системы, а также

лимфоцитопении как при СКВ, так и при ИКВ на фоне повышенной склонности лимфоцитов крови к апоптозу, что приводит к утрате контроля Т-лимфоцитов в отношении В-клеток с их последующей активацией и выраженным изменением количественного и качественного состава субпопуляций лимфоцитов. Чувствительность клеток иммунной системы к апоптозу может увеличиваться рядом провоспа-лительных цитокинов, продукция которых, как было показано выполненными исследованиями, увеличивается как при ИКВ, так и при СКВ. Нарушения иммуноре-гуляции, более выраженные при СКВ, чем при ИКВ, приводят к активации В-клеточного звена иммунитета с интенсивной продукцией широкого спектра аутоан-тител и формированием иммунных комплексов. В целом, иммунопатогеиез ИКВ и СКВ иллюстрирует рисунок 2, свидетельствующий о наличии общности и различий в механизмах возникновения этих заболеваний.

Предрасполагающие факторы ИКВ, СКВ

Триггерные факторы внешней среды, инфекция Различная генетическая предрасположенность Нарушения нейроэндокринной системы Различия в распределении больных по полу

( Нарушения иммунорегуляции (ИКВ, СКВ) )

Дефекты фагоцитоза (ИКВ, СКВ), | окислительного стресса Нф (ИКВ, СКВ) и Мн (СКВ), кислороднезависимых функций

Нф и Мн (СКВ)

Утрата супрессорной активности, активация лимфоцитов (СВ25+,НЬА-0Я+,С095^) при ИКВ и СКВ

Иммунные комплексы (выше и чаще при СКВ), активация комплемента

Поражения кожи при ИКВ, других тканей и сосудов тканей при СКВ

Дефекты фагоцитоза (ИКВ,СКВ), "Г окислительного стресса Нф (ИКВ, СКВ)и Мн (СКВ),кислороднезав исимых функций Нф и Мн (СКВ)

Рисунок 2. Иммунопатогеиез ИКВ и СКВ.

Таким образом, несмотря на существование некоторых единых иммунопато-генегических механизмов развития ИКВ и СКВ, имеются четкие различия в степени

аутоиммунизации, дитокиновом профиле, вовлеченности лимфоцитов, характеристиках метаболических функций нейтрофилов и моноцитов, активирующих ээфек-тах ЦИК, ауто антител и цитокинов, а также в клинических проявлениях при обоих заболеваниях. Многообразие клинических проявлений, связанное со сложным характером взаимосвязи различных патогенетических механизмов, обосновывают правомерность выделения кожных форм красной волчанки в самостоятельные заболевания. Корреляционные взаимосвязи при склеродермии (таблша 13) указывают на существование более обширных корреляционных связей при ССД по сравнению с ОСД. Сходство корреляционных взаимозависимостей при обоих заболеваниях заключается в связях провоспалительного цитокина ЮТ-а с другими провоспапи-тельными цитокинами -11,-1 р и 1Ь-6, что позволяет предположить их синергидное участие в иммунопатогенезе склеродермии.

Вместе с тем, при ОСД, в отличие от ССД, имелась связь между П.-1Р и 1Ь-6, а также между ЦИК и 1Ь-4, косвенно указывая на вовлеченность в иммунопатогенез ОСД не только указанных выше провоспалительных цитокинов, нр и противовоспалительного цитокина 1Ь-4, а также ЦИК. При ССД корреляционные связи носили более обширный характер, в том числе между ЦИК и аДНК, 1Ь-1 р и ЦИК, 1Ь-1р и аДНК, 1Ь-4 и аДНК, 1Ь-4 и Ш-1Р, 1Ь-б и ЦЖ, 1Ь-6 и аДНК, иллюстрируя сложный характер взаимоотношений цитокинов, ЦИК и аДНК при этом заболевании. Имелась также связь между 1Ь- 1р и 1Ь-4, что, по-видимому, ноет компенсаторный характер с целью подавления продукции провоспалительного вдтокина 1Ь-1р под влиянием противовоспалительного цитокина 1Ь-4.

При ССД обнаружены зависимости между аДНК и спонтг нной люминолза-висимой ХЛ моноцитов, между ЦИК и спонтанной люцигенин- и люминолзависи-мой ХЛ нейтрофилов, между 1Ь-1р и спонтанной люцигенин- и люминолзависимой ХЛ нейтрофилов, 1Ь-1р и спонтанной люминолзависимой ХЛ моноцитов. Констатирована также связь между 1Ь-4 и спонтанной люминолзависимой > Л моноцитов, 1Ь-6 и спонтанной люминолзависимой ХЛ моноцитов, ЮТ- и спонтг нной люцигенин-и люминолзависимой ХЛ нейтрофилов. Эти данные, как и при ОСД, показывают связь ЦИК и провоспалительных цитокинов с активацией кислородзависимого метаболизма циркулирующих фагоцитов при склеродермии, дополняющихся при ССД активацией окислительного взрыва моноцитов под влиянием аДНЬ

Корреляционный анализ связей аДНК, ЦИК и цитокинов с мыми функциями циркулирующих фагоцитов при ОСД и ССД продемонстрировал наличие зависимостей между ЦИК и окислительным стрессом нейтрофилов по данным спонтанной люминол- и люцигенинзависимой ХЛ при обо указывая на ЦИК-опосредованное увеличение кислородзависим этих клеток. Отмечена также связь 1Ь-1р со спонтанной люмиь моноцитов, отражая возможную роль этого цитокина в активации мых функций моноцита при ОСД и ССД.

кислородзависи-

их заболеваниях, ого метаболизма олзависимой ХЛ кислородзависи-

Корреляционные взаимосвязи при ОСД и ССД

Иммунологические показатели ОСД ССД Сходство ОСД и ССД Различия ОСД и ССД

аДНК, ЦИК, Прямые связи' Прямые связи- IL-ip- TNF-a Прямые связи

ципжины IL-lp - IL-6 ЦИК -аДНК IL-6 - TNF-a

(ПЛР, 11.-4, IL-ip-TNF-a т-1р-цик ЦИК-1Ь4 (ОСД)

1Ь-6, ТОР-а) IL-4-ЦИК ИЛр-аДНК ЦИК-аДНК

IL-6 - TNF-a 1Ыр-таР-а И.-4-аДНК 1Ь-4 - ГЬ-ф 1С-6 - ЦИК П,-6-аДНК П^б-ТОТ-а 1ЫР-ЦИК 1Ыр-аДНК 1Ь-4-1Ь-1Р 1Ь-6 - аДНК П,-6-ЦИК (ССД)

Кислородза- Прямые связи: Прямые связи: ЦИК-сХЛЛгНф Прямые связи.

висимый ЦИК-сХЛЛгНф ЦИК-сХЛЛгНф ЦИК-сХЛЛмНф ЦИК-сХЛЛгМн

метаболизм ЦИК- ЦИК-сХЛЛмНф IL-1B- 1Ь-6-сХЛЛгНф

фагоцитов; сХЛЛмНф аДНК- сХЛЛмМн Ш-6-сХЛЛмНф

аДНК, ЦИК, ЦИК- сХЛЛмМн 1Ъ-6-сХЛЛмМн

ципжины сХЛЛгМн 1Ь-1В-сХЛЛгНф 1Ь-4 - сХЛЛгМн

0ЫР, 1Ь-4, IL-lp- Ц,-1В-сХЛЛмНф (ОСД)

П,-6, ТИР-а) сХЛЛмМн Ш-1В-сХЛЛмМн аДНК-сХЛЛмМн

IL-4 1Ь-4-сХЛЛмМн НЛр-сХЛЛгНф

сХЛЛгМн ТОРа- 1Ир-сХЛЛмНф

IL-6-сХЛЛмНф сХЛЛгНф ^-4-сХЛЛмМн

lL-6-сХЛЛмМн ■ШРа-сХЛЛмНф ТЫР-а-сХЛЛгНф

IL-6-сХЛЛгНф ТОТ-а-сХЛЛмНф (ССД)

Кислородне- Прямые связи: Прямые связи: сКФМн-ЦИК Прямые связи:

зависимые сКФМн-ЦИК сКФМн-ЦИК сКФМн-IL-ip иКФМн-ЦИК

функции сКФМн-IL-ip сКФМн-и.-1Р сКФМн-1Ь-4 иКФМн-1Ь-1р

фагоцитов; сКФМн-1Ь-4, сКФМн и Л.-4 сКФМн-TNF-a иКФМн-ТОР-а

аДНК, ЦИК, сКФМн-THF-a сКФМн-Ш-6 иКБМн-т-6

цитокины иКФМн-ЦИК, сКФМн-'П^-а (ОСД)

(1Ь-1р, 11-4, иКФМн-IL-ip, сКФМн-аДНК сКФМн-0,-6

1Ь-6, ТЭТ-а) иКФМн-TNF-a иКБМн-1Ь-6 иКФМн-аДНК сКФМн-аДНК иКФМн-аДНК (ССД)

Фенотип прямые связи' прямая связь: обратная связь прямые связи

лимфоцитов; IL-ip - CD95+ ТХ¥-а-С095+ IL-4 - CD8* Ц,1-Р-С1595*

аДНК, ЦИК, IL-6 - CD19+ обратные связи: 11,-6 - С019+

цитокины IL-6 - HLA-DR+ Ш-4-С08+, П,-6-ША-011+

(11,-1 р, 1Ь-4, TNF-a - HLA- 11^-6 - СШ9+ ТОТ-а - ША-ОЯ*

1Ь-6, ТОТ-а) DR+ 1Ь-б - СИ8+ ОСД

обратные свя- ТЫР-а - СБЗ+ ТМР-а-С095+ССД)

зи- Ш-« - СИ8+ обратные связи'

ЦИК - CD8+ ЦИК - Сй8+(ОСД)

ЦИК - CD95+ ЦИК-СБ95+ (ОСД)

IL-4 - CD8* Ш-6-С019+(ССД) 1Ь-6 - С08+ (ССД) ЮТ-а - СБЗ+ (ССД) ТОТ-а - СП8+ (ССД)

Различия исследованных корреляционных связей показателей окислительного стресса циркулирующих фагоцитов при ОСД и ССД были ринообразны; при ОСД выявлены связи между ЦИК и спонтанной люцигенинзависимой ХЛ моноцитов, 1Ь-б и кислородзависимыми функциями циркулирующих фагоцитов, а также 1Ь-4 и спонтанной люцигенинзависимой ХЛ моноцитов. Иной характер носили раз личия корреляционных связей при ССД - имелась зависимость кислородзависимых функций моноцитов от аДНК и 1Ь-4, а нейтрофилов - от 1Ь-1р и ные демонстрируют существование при ССД более обширных

только провоспалительных цитокинов, но и аДНК, с окислительным стрессом цир-

данные относи-оноцитов у боль-

кулирующих фагоцитов, чем при ОСД, подтверждая полученны тельно активации кислородзависимых функций нейтрофилов и м ных ССД под влиянием аДНК и провоспалительных цитокинои. Существование связи между 1Ь-4 и спонтанной люминолзависимой хемшпоминес ценцией моноцитов при ССД, вероятно, отражает компенсаторные механизмы взаимодействия цитокинов, направленных на ограничение кислородзависимых реакций при ССД.

ТЫБ-а . Эти дан-взаимосвязей не

ЭСД и ССД меж) частности, меж-ТЫР-а. Различия индуцированной

Установлена также общность корреляционных связей при ду кислороднезависимыми функциями моноцитов и цитокинами, ду спонтанной кислой фосфатазой моноцитов и ЦИК, 1Ь-1р, 1Ь-4, корреляционных зависимостей при ССД заключались в связях кислой фосфатазы моноцитами с ЦИК и провоспалительными ци'гокинами 1Ь-1В и ЮТ-а, а индуцированных катионных белков с 1Ь-6. При ССД отличительными особенностями корреляционных связей являлись взаимосвязи аДНК индуцированной выработкой кислой фосфатазы моноцитами, а И. продукцией кислой фосфатазы моноцитами. Эти данные подтверждают важную роль как кислородзависимых, так и кислороднезависимых функщ й нейтрофилов и моноцитов в иммунопатогенезе ОСД и ССД, при этом результаты анализа свидетельствуют о различных путях активации фагоцитов ваниях.

Анализ корреляционных взаимосвязей аДНК, ЦИК и цитокинов с фенотипом лимфоцитов при ОСД и ССД показал сходство взаимосвязей при э по наличию обратной связи между 1Ь-4 и С08+ лимфоцитами, чтс вает на снижение числа цитотоксических клеток под влиянием тельного цитокина. Различия корреляционных связей затрагивали связи провоспалительных цитокинов (1Ь-1Р, 1Ь-6,ТЫР-а) с марк]ерами активации лимфоцитов (соответственно С095+, СЭ19+ и НЬА-ОЯ+), а при ССД - ЮТ-а с экспрессией индукторного фактора апо птоза лимфоцитов (СВ95*), что также представляется важным с точки зрения иммунопатогенеза ОСД. Обратные связи при ОСД

со спонтанной и -6 со спонтанной

корреляционного при этих заболе-

гих заболеваниях косвенно указы-противовоспали-при ОСД прямые

отмечены между ЦИК и CD8+, ЦИК и CD95+ лимфоцитами, а при ССД - IL-6 с CD8+ и CD19+, a TNF-a с CD3+ и CD8+. Эти данные объясняют возможные причины нарушений фенотипа лимфоцитов при ОСД и ССД, в частности, Т-лимфоцитопении, нарушений в регуляторных клетках, увеличения экспрессии акти-вационных молекул регулирующими эффектами ЦИК и цитокинов.

Сравнительная характеристика иммунопатологических нарушений при ОСД и ССД представлена в таблице 14, а обобщеннная схема их иммунопатогенеза на рис. 3.

Установлено увеличение уровня ЦИК при ОСД и ССД, однако существенной разницы в этом показателе при обеих формах склеродермии не было выявлено. При ССД, в отличие от ОСД, титры аДНК увеличены, ассоциируясь с капилляритами, телеангиэктазиями, поражениями желудочно-кишечного тракта и легких, в то время как почечный синдром сопровождается снижением уровня аутоантител. Эти данные указывают на важную роль аутоиммунизации в развитии клинических проявлений ССД.

Таблица 14

Иммунопатологические нарушения при ОСД и ССД

Иммунологические показатели ОСД ССД Сходство ОСД и ССД Различия ОСД и ССД

ЦИК т T t нет

аДНК нет T ПриССД

Цитокины: 1Ь-1р, 1Ь-4, 1Ы5, ТЫР-а Т IL-lp, IL-4, TNF-a t IL-ip, IL-4, TNF-a т IL-ip, IL-4, TNF-a нет

Кислородза-висимые функции фагоцитов t сХЛ Лм Нф t сХЛЛгЛм Нф и Мн |иХЛ Лг Лм НфиМн |КА ХЛ Лг Лм Нф и Мн |сХЛ Лм Нф t сХЛ Лм Мн ПриССД

Кислороднезави-симые функции фагоцитов Норма ТсКФМниНф ТиКФ Мн и Нф ТсКБМниНф ТиКБ Мн и Нф Нет ТсКФМн и Нф ТиКФМниНф ТсКБМниНф ТиКБМниНф При ССД

Фенотип лимфоцитов 1CD3+, CD4+, CDllb+, TCD8+,CD16*, CD19+,CD25+, CD95+, HLA- DR+ |CD3+,CD4+, CD1 lb*,HLA- DR+/ CD95+, ИРИ |CD8+, CD16+,CD19+, CD25+, CD95+, HLA-DR+ 1CD3+, CD4+, CDllb+ fCD8+,CD16+ ,CD19+, CD25+, CD95+, HLA-DR+ Т CD25+ (выше при ССД) HLA-DRV CD95+

Отмечено также повышение содержания сывороточных 1Ь-1(3,1Ъ-4 и ЮТ-а при ССД и ОСД, однако достоверных отличий в концентрации указанных цитоки-нов в этих группах больных не было отмечено, как и зависимост 1 от активности и характера течения ССД.

Выполненные исследования показали усиление окислительного стресса циркулирующих фагоцитов при склеродермии, зависящее от формы и активности заболевания. Так, при ОСД наблюдалась избирательная стимуляция ктелородзависимо-го метаболизма нейгрофилов в системе миелопероксидазы (люм»нолзависимая хе-милюминесценция), тогда как при ССД окислительный стресс затрагивал не только систему миелопероксидазы, но и систему НАДФ-Н оксидазы - ключевой реакции в развитии окислительного стресса фагоцитов с выработкой широкого спектра высокодеструктивных АФК. В то же время индуцированная ХЛ циркулирующих фагоцитов при ССД была снижена во всех тестах. Эти данные, а такжг снижение коэффициентов активации нейтрофилов и моноцитов во всех тестах > Л свидетельствовали о существенном уменьшении функционального резерва фагоцитов при склеродермии, что может приводить к нарушениям механизмов элиминации антигенов и иммунных комплексов при этом заболевании.

Установленные закономерности развития окислительного стресса циркулирующих фагоцитов при склеродермии расширяют представления об иммунопатоге-незе кожных и системных форм не только красной волчанки, но и склеродермии, демонстрируя высокую значимость повышения кислородзависимах функций циркулирующих фагоцитов в возникновении преимущественно сосудистых поражений, а также дополняют свободнорадикальную теорию патогенеза ревматических заболеваний, постулаты которой могут бьггь использованы для обоснования патогенеза не только красной волчанки, но и склеродермии, в том числе ее южных и системных форм.

Не было выявлено изменений функций циркулирующих фагоцитов по данным определения КФ и КБ у больных ОСД, тогда как у больных ОСД имело место увеличение в клетках обоих показателей кислороднезависимого метаболизма в ней-трофилах и моноцитах по данным спонтанных и стимулированных тестов.

Таким образом, у больных ССД по сравнению со здоровыми лицами и больными ОСД наблюдается активация ряда функций моноцитов и нейтрофилов, в частности, по данным определения КФ - маркера состояния мембран лизосом и КБ -важного фактора антибактериальной защиты и мембранотокси1 геского фактора.

Активация кислороднезависимых метаболических функций цирк}

лирующих фаго-

цитов при ССД вносит существенный вклад в развитие серьезных повреждений

клеток, что расширяет представления о механизмах развития разл* родермии. Увеличение кислороднезависимых функций фагоцитов развитием у больных ССД поражений сосудов и находится как при ОСД, так и при ССД, под регулирующим влиянием ЦИК, цитокинов, а при ССД и аДНК.

чных форм скле-ассоциируется с

Выполненные исследования показали снижение у больных ОСД содержания Т-лимфоцитов (CD3+), Т-хелперов (CD4+), CDllb+ клеток на фоне достоверного повышения уровня цитотоксических лимфоцитов (CD8+), естественных киллеров (CD16+), В-клеток (CD19+) и маркеров активации (CD25+, CD95+ и HLA-DR+). Сходные результаты были получены при обследованиии больных ССД, у которых, в отличие от ОСД, было увеличено содержание только CD25+ лимфоцитов. У пациентов с высокой степенью активности было повышено количество CD95+ клеток, а у больных с минимальной степенью активности процесса был более низкий ИРИ, что отражает углубление процессов активации и апоптоза при ССД, нарастающих по мере увеличения активности болезни.

Полученные данные свидетельствуют о сходных изменениях фенотипа лимфоцитов у больных кожными и системными формами склеродермии, проявлявшихся Т-лимфоцитопенией со снижением количества хелперов (CD4+) на фоне увеличения цитотоксических/супрессорных клеток (CD8+), естественных киллеров (CD16+), В-клеток и лимфоцитов, несущих маркеры ранней (CD25+) и поздней (HLA-DR+, CD95+) активации.

В целом, выполненные исследования свидетельствуют о выраженных изменениях фенотипа лимфоцитов при склеродермии и о связи этих изменений с клиническими проявлениями болезни, а также уровнем аДНК и некоторых цитокинов. Наличие выраженной Т-лимоцитопении с дисбалансом субпопуляций лимфоцитов при различных формах склеродермии на фоне развития процессов активации и повышенной склонности лимфоцитов крови к апопгозу, очевидно, приводит к утрате контроля Т-лимфоцитов в отношении В-клеток с последующей активацией последних. Вместе с тем, имелись отличия в количественном содержании отдельных фенотипов лимфоцитов и индексных показателей у больных ОСД и ССД, в частности, увеличение при ССД содержания CD25+ лимфоцитов (маркеры ранней активации) и низкое соотношение HLA-DR+/CD95+. У пациентов с высокой степенью активности повышено количество клеток, опосредующих апоптоз лимфоцитов (CD95), а у больных с минимальной степенью активности процесса более низкий ИРИ. Эти данные отражают углубление процессов активации и апоптоза при ССД, нарастающих по мере увеличения активности болезни.

Обобщая результаты исследований иммунопатогенеза ОСД и ССД (рисунок 3), следует подчеркнуть существование при этих заболеваниях как общих механизмов иммунопатогенеза, так и существенно отличающихся, что дает основание рассматривать ОСД в качестве самостоятельной нозологической формы.

Подводя итоги выполненной работы, следует отметить широкий спектр иммунологических нарушений при кожных и системных формах красной волчанки и склеродермии, характер и степень выраженности которых зависят от формы болезни, ее активности, характера течения, клинических проявлений и прочих обстоятельств. Важную роль в развертывании патологического процесса при красной вол-

чанке и склеродермии играют аутоиммунные процессы, иммунны менения цитокиновой сети, фенотипа лимфоцитов, сопровождают: активацией ряда иммунологических показателей. Одним из важк иммунопатогенезе этих заболеваний является дефект элиминаци: тигенов и иммунных комплексов фагоцитами, сопровождающий слородзависимого и кислороднезависимого метаболизма нейтроф что определяет гистодеструктивные эффекты этих клеток с разв: ных процессов и апоптоза клеток - ключевых элементов патогене: стые поражения при красной волчанке и склеродермии.

,1е комплексы, из-иеся вьфаженной ейших событий в И чужеродных ан-ся всплеском ки-шов и моноцитов, :ггием аутоиммун-а, а также сосуди-

Предрасполагающие факторы ОСД, ССД

Триггерные факторы внешней среды, инфекция Различная генетическая предрасположенность Нарушения нейроэндокринной системы рг б01 Различия в определении [ьных по полу

( Нарушения иммунорегуляции (ОСД ССД) )

Дефекты фагоцитоза (ОСД ССД), | окислительного стресса Нф (ОСД, ССД) и Мн (ССД), кислороднезависимых функций Нф и Мн (ССД)

Утрата супрессорной а] активация лимфоците; > С025+,ЬП,А-0Я+,СБ95+) щ«

хгивности, (СШ6+, и ОСД и ССД

Иммунные комплексы (ОСД ССД), активация комплемента

Поражения кожи при ОСД других тканей и сосудов тканей при ОСД

.1 фагоцитоза СДССД), [слительного :са Нф (ОСД СД)иМн кислороднезав ,|х функций Нф Мн (ССД)

Рисунок 3. Иммунопатогенез ОСД и ССД

Патогенетический вклад нейтрофилов и моноцитов в развитие кожных и системных форм красной волчанки и склеродермии представляется весьма существенным, однако различным и выполненные исследования свидетельствуют о важной роли моноцитов в иммунопатогенезе СКВ и ССД. Активация моноцитов, возможно, приводит к усилению продукции коллагена фибробластами при склеродермии, особенно при системной. Показано также, что метаболические функции фагоцитов и фенотип лимфоцитов регулируются ЦИК, цитокинами, а при СКВ и ССД также антителами к ДНК.

ВЫВОДЫ

1. У больных интегументной и системной красной волчанкой увеличены уровни и частота выявления ЦИК и аДНК, более выраженные при СКВ, а также большее их увеличение при ДсмКВ, чем при ДКВ. Содержание ЦИК и аДНК отражало активность СКВ, отмечен их низкий уровень при хроническом течении, установлена ассоциация повышенного их содержания с поражениями сосудов и АФС, сниженного — с почечным синдромом.

2. В крови больных интегументной и системной красной волчанкой увеличены уровни 1Ь-1Р и 1Ь-4, а ТОТ-а при СКВ; содержание 1Ь-1р и ЮТ-а отражает активность СКВ. При ДсмКВ выше 1Ь-4 и ЮТ-а, чем при ДКВ. Повышение 1Ь-1р ассоциируется при системной красной волчанкой с кожным синдромом, АФС и синдромом Рейно, 1Ь-4 - с легочным синдромом, Т№-а - с АФС.

3. При интегументной и системной красной волчанке выявлено увеличение окислительного стресса нейтрофилов, а при системной красной волчанке - моноцитов крови. Увеличение миелопероксидазы нейтрофилов отражает активность системной красной волчанки, а супероксид-аниона в моноцитах - хроническое течение. Окислительный стресс нейтрофилов ассоциируется при системной красной волчанке с сосудистыми поражениями и АФС, моноцитов - с кожным синдромом и АФС. ЦИК, аДНК и провоспалительные цитокины активируют окислительный стресс фагоцитов у больных интегументной красной волчанкой и, в большей мере, при системной красной волчанке.

4. Кислороднезависимые функции (кислая фосфатаза, катионные белки) циркулирующих фагоцитов при интегументной красной волчанке не нарушены, а при системной красной волчанке увеличены. Повышение катионных белков в ней-трофилах ассоциируется у больных системной красной волчанкой с кожным синдромом и АФС, в моноцитах - с сосудистыми поражениями. У больных интегументной красной волчанкой высокое содержание ЦИК и 1Ир определяет увеличение кислой фосфатазы в нейтрофилах и моноцитах, а при системной красной волчанке высокие уровни 1Ь-1Р и 1Ь-б связаны с повышением кислой фосфатазы в мо-

ноцитах, 1Ь-4 и ТОБ-а - того же фермента в моноцитах и в нейтро

филах.

5. При интегументной и системной красной волчанке имеются как одно-

типные изменения фенотипа лимфоцитов, так и отличающиеся ОЯ+, повышение С016+ и СЭ25+ лимфоцитов у больных системно кой). Количество СЦ4+ и СБ16+ клеток выше при высокой степен

(снижение НЬА-й красной волчан-и активности сис-

темной красной волчанки, а С08+ клеток - при низкой. Поражения суставов при системной красной волчанке ассоциируются с повышением СБ16+, сердечнососудистой системы - НЬА-ОЯ+, кожи - С095+, нервной системы - СБ4+ и СЭ95+, АФС — СОИЬ+ и НЬА-ОЯ+ лимфоцитов. Повышение 1Ь-ф при интегументной красной волчанке определяет увеличение СЭ11Ь+ и НЬА-ОЫ+ клеток, ЮТ-а - снижение СБЗ+ и повьппение СБ95+ лимфоцитов. При системной красной волчанке высокие уровни аДНК ассоциируются с повышением СБ4+ и СБ? 5+ клеток, 1Ь-1р — с увеличением СО-95+ лимфоцитов, 1Ь-4 - СБ95+ и НЬА-Б^ клеток, 1Ь-6 - СБ95+, ЮТ-а - СБЗ+ клеток.

6. При системной склеродермии увеличен уровень ЦИК, низкие их концентрации ассоциируются с синдромом Шегрена и Рейно, подкож шми кальцината-ми, поражением суставов. Титры аДНК при системной склеродермии, в отличие от ограниченной, увеличены, ассоциируясь с поражениями сосудов, желудочно-кишечного тракта и легких; поражения почек сопровождаются снижением уровня аутоантител.

7. У больных ограниченной и системной склеродерми ей повышено содержание в крови 1Ь-1р, 1Ь-4 и ЮТ-а. Повышение 1Ь-1р ассоциируется при ССД с синдромом Рейно, 1Ь-4 с поражениями сосудов, склеродактшше} и поражениями желудочно-кишечного тракта, ТЫР-а - с поражениями сосудов и желудочно-кишечного тракта.

8. При ограниченной склеродермии констатирована стимуляция миело-пероксидазы нейтрофилов и супероксид-аниона в моноцитах; пр» системной склеродермии окислительный стресс затрагивает оба механизма в ней-рофилах и моноцитах. Увеличение активности миелопероксидазы нейтрофилов ассоциируется при системной склеродермии с поражениями легких и почек, а миелопероксидазы и НАДФ-Н оксидазы в моноцитах - с телеангиэктазиями и капилляритами. Показана активация окислительного стресса циркулирующих нейтрофилов у больных ограниченной склеродермией под влиянием ЦИК и провоспалительных питокинов 1Ь-1 р, 1Ь-6, а при ССД также аДНК и ТОТ-а.

9. Кислороднезависимые функции (кислая фосфатаза, ¿атионные белки) циркулирующих фагоцитов у больных ограниченной склеродерм* < а при системной склеродермии оба показателя увеличены в нейтрс с

тах, ассоциируясь с поражениями сосудов. Установлена связь пэи ограниченной склеродермии высоких концентраций ЦИК, 1Ь-1р, 1Ь-4,11,-6 и ТОТ

кислой фосфатазы в нейтрофилах, а при системной склеродермией также и аДНК с

ей не нарушены, филах и моноци-

а с повышением

увеличением фермента как в нейтрофилах, так и в моноцитах.

10. При ограниченной и системной склеродермии показаны как однотипные изменения фенотипа лимфоцитов, так и различающиеся в виде увеличения у больных ССД CD25+ лимфоцитов. Количество CD95+ лимфоцитов при системной склеродермии отражает активность процесса. Снижение CD3+ на фоне повышения CD95+ клеток ассоциируется с синдромом Шегрена, повышение CD4+ и уменьшение CD95+ - с почечным синдромом, увеличение CD3+ - с поражениями сосудов, снижение CDllb+ и HLA-DR+ - с поражениями легких и сердечно-сосудистой системы. Высокий уровень Il-ip при ограниченной склеродермии определяет повышение CDllb+, CD19+, CD95+ и HLA-DR+, TNF-a - CDllb+ клеток. Повышение аДНК при системной склеродермии характеризуется увеличением CD8+ лимфоцитов на фоне снижения CD25+ клеток, 1L-4 - снижением CD3+ клеток, TNF-a - снижением CD3+, CD8+ и CD19+ на фоне увеличения CD95+ лимфоцитов.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для дифференциации СКВ и ИКВ в качестве дополнительных лабораторных тестов рекомендуется использовать определение спонтанной хемшпоминес-ценции, кислой фосфатазы и катионных белков в моноцитах, сывороточного TNF-a, избирательно повышенных при системной красной волчанке. Целесообразно также исследование фенотипа лимфоцитов, характеризующееся при СКВ, в отличие от ИКВ, снижением у больных СКВ HLA-DR+ лимфоцитов на фоне повышения CD16+ и CD25+клеток.

2. Оценку активности СКВ целесообразно проводить по данным определения хемилюминесценции нейтрофилов, CD4+ и CD16+ лимфоцитов, увеличивающихся по мере ее нарастания, а CD8+клеток - снижающихся.

3. В качестве дополнительных лабораторных тестов, дифференцирующих ОСД и ССД, рекомендуется использовать определение достоверно повышенных при ССД люминолзависимой хемилюминесценции моноцитов, кислой фосфатазы и катионных белков нейтрофилов и моноцитов, количества CD25+ лимфоцитов.

4. Целесообразно определение при ССД количества CD95+ лимфоцитов, отражающих активность процесса.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Романова, Н.В. Клинико-иммунологическая характеристика кожного синдрома при системной красной волчанке. / Романова Н.В., Завадский В.Н., Шилкина Н.П. // Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии. Сборник трудов 4 Конгресса Российской ассоциации аллергологов и клинических иммунологов. - М., 2001.- Т.2. - С.204

2. Шилкина, Н.П Сравнительная клинико-иммунологическая характеристика кож-

и система антиок-асной волчанки. /

ных и системных форм некоторых диффузных болезней соединительной ткани (ДБСТ). / Шилкина Н.П., Романова Н.В. // Материалы международной конференции «Естествознание на рубеже столетий». Том 2. «Медицинские науки». - Дагомыс, 2001. -С. 116

3. Функциональное состояние нейтрофилов и его особенности у больных системной красной волчанкой и системными васкулитами с кожным синдромом. / Романова Н.В., Крылов В.Л., Макарушин A.A., Дульчевский А.Ю. // XVIII Юбилейная научно- практическая конференция врачей медико-санитарной части НЯ НПЗ, посвященная 45-летию МСЧ НЯ НПЗ. Тезисы докладов. - Ярославль, 2301. - С.34-36

4. Романова, Н. В. Кислородзависимый метаболизм нейтрофилов сидантноЙ защиты крови у больных различными формами кр Романова Н. В., Романов В. А., Шилкина Н. П. ¿'Российский журнал кожных и венерических болезней. - 2001. - №4. - С.31

5. Романова, Н.В. Результаты иммуноцитофенотипирования лимфоцитов у больных различными формами красной волчанки и склеродермии. / Романова Н.В., Шилкина Н.П., Романов В. А. // Тезисы докладов IX Всероссийского национального конгресса «Человек и лекарство». - М., 2002. - С.379-380

6. Романова, Н.В. Современные иммунологические методы и их клиническая значимость при некоторых диффузных болезнях соединительной ' кани. / Романова Н.В. // Труды Всероссийской конференции «Современные технологии лабораторной диагностики нового столетия».- М., 2002. - С. 176-177

7. Романова, Н.В. Патогенетическая и диагностическая значимость реакций кисло-родзависимого и кислороднезависимого метаболизма фагоцитов и защиты у больных различными формами красной волчанки и скле нова Н.В. // Международный конгресс «Практикующий врач». Т:зисы докладов. -Сочи, 2002. - С. 102

8. Романова, Н.В. Клиническая значимость иммунологических тгстов при различных формах красной волчанки и склеродермии. / Романова Н.В. // 5-й конгресс РААКИ «Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иимунофармаколо-гии». Сборник трудов. - М., 2002. - Т. 2.- С.213

9. Романова, Н.В. Клиническая значимость определения фенотипа лимфоцитов при красной волчанке. / Романова Н.В., Шилкина Н.П., Семичева М Н. // Актуальные проблемы аллергологии и иммунологии. Материалы 19 научно-лрактической конференции. - Ярославль, 2003. - С.62-64

10. Романова, Н.В. Фенотип лимфоцитов и склеродермия. / Рома* ова Н.В., Шилкина Н.П., Семичева М.Н. // Актуальные проблемы аллергологии и иммунологии. Ма-

антиоксидантной родермии. / Рома-

териалы 19 научно-практической конференции. - Ярославль, 2003.

11. Романова, Н.В. Клинико-иммунологическая характеристика кожных и систем-

- С. 67-69

ных форм красной волчанки и склеродермии. / Романова Н.В., Материалы XIII Всероссийской конференции дерматовенерологов

Завадский В.Н. II - Екатеринбург,

2002.-С.67

12. Романова, H.B. Клиническое значение иммунологических показателей в оценке системности красной волчанки. / Романова Н.В. //1 Российский конгресс дерматовенерологов. Тезисы научных работ. - Санкт-Петербург, 2003. -Т.1 - С.100

13. Романова, Н.В. Особенности кислородзависимого метаболизма нейтрофилов и моноцитов у больных различными формами красной волчанки (СКВ) и склеродермии. / Романова Н.В. // Материалы научно-практической конференции «Современное состояние Российской биотехнологии». - М, 2003. - С.30-31

14. Романова, Н.В. Цитокиновый профиль у больных системными и кожными формами красной волчанки. / Романова Н.В., Шилкина Н.П., Романов В.А. // Материалы научно-практической конференции «Современное состояние Российской биотехнологии». - М., 2003. - С.31-32

15. Сравнительная характеристика реакций кислородзависимого метаболизма моноцитов и нейтрофилов у больных различными формами красной волчанки и склеродермии. / Романова Н.В., Шилкина Н.П., Семичева М.Н., Романов В.А. // Успехи современного естествознания. - 2003. - №8. - С.70

16. Романова, Н.В. Лизосомальный тест в оценке функций циркулирующих фагоцитов у больных различными формами красной волчанки и склеродермии. / Романова Н.В., Шилкина Н.П., Семичева М.Н. // Материалы X съезда медицинских и фармацевтических работников Ярославской области. Часть И. - Ярославль, 2003. -С. 76-80

17. Романова, Н.В. Лизосомальная активность циркулирующих фагоцитов у больных некоторыми диффузными болезнями соединительной ткани и ее коррекция глюкокортикостероидами. / Романова Н.В., Шилкина Н.П., Семичева М.Н. // Тезисы докладов XI Российского национального конгресса «Человек и лекарство». - М., 2004. - С.320

18. Фенотип лимфоцитов при различных формах склеродермии. / Романова Н.В., Шилкина Н.П., Семичева М.Н., Романов В.А. // Иммунология. - 2004. - Т.25, №2. -С.111-112

19. Фенотип лимфоцитов и различные формы красной волчанки: связи с системностью, активностью и течением. / Романова Н.В., Шилкина Н.П., Семичева М.Н., Романов В.АЛ Иммунология - 2004. - №3. - С.168-170

20. Романова, Н.В. Особенности кислородзависимого метаболизма нейтрофилов и моноцитов при некоторых диффузных болезнях соединительной ткани. / Романова Н.В., Семичева М.Н. // Современные наукоемкие технологии. - 2004. - №3.-С.89-90

21. Романова, Н.В. Функции циркулирующих фагоцитов по данным определения доступности ДНК к связыванию акридиновым оранжевым у больных кожными и системными формами красной волчанки. / Романова Н.В., Семичева М.Н. // Фундаментальные исследования. — 2004. - №4. - С.82

22. Романова, Н.В. Полисиндромность красной волчанки и фенотип лимфоцитов. /

м.

Романова Н.В. // Фундаментальные исследования. - 2004. - №2. -

23. Романова, Н.В. Фенотип лимфоцитов и кожный синдром у ми формами красной волчанки. / Романова Н.В. // Фундаментал^] — 2004. - №2. - С. 153

24. Романова, Н.В. Метаболический статус циркулирующих ф|] новый профиль у больных некоторыми диффузными болез1ш ткани. / Романова Н.В., Семичева М.Н., Романов В.А. // Russian ogy. - 2004. - Т.9, №1. - С.142

25. Романова, Н.В. Функциональное состояние циркулирующих ных различными формами красной волчанки и склеродермии по ния доступности ДНК в дезоксирибонуклеопротеиде клеток. / Ро чева М.Н. // Материалы второго съезда биотехнологов России. -

26. Романова, Н.В. Оксидативный стресс фагоцитов и склеро^ Н.В., Шилкина Н.П., Семичева М.Н. // Иммунология. - 2004. -221

27. Романова, Н.В. Продукция активных форм кислорода цирк^. цитами и суставной синдром при системной красной волчанке Успехи современного естествознания. — 2004. - №3. - С. 116-117

28. Романова, Н.В. Осложнения системной красной волчанки i ных форм кислорода циркулирующими фагоцитами. / Романов; ные наукоемкие технологии. - 2005. - №2. - С.44-45

29. Романова, Н.В. Окислительный стресс циркулирующих фаго органов и систем при системной красной волчанке. / Романова тальные исследования. - 2005. - №2. - С.34

30. Романова, Н.В. Иммунологическая характеристика кожного коидной и системной красной волчанке. / Романова Н.В., Шилк: Н.Ю. // Тезисы докладов XII Российского национального конгре! карство». - М., 2005. - С.225

31. Модуляция продукции активных форм кислорода циркулируй и клиническая эффективность глюкокортикостероидной терапии ной красной волчанкой. / Романова Н.В., Шилкина Н.П., Бор^>, B.JI. // Научно-практическая ревматология. - 2005. - №1. - С.40-

32. Романова, Н.В. Кислороднезависимые функции циркуляр при различных формах склеродермии. / Романова Н.В., М.Н.Семичева. // Иммунология. - 2005. - Т.26, № 2. - С. 108-110

33. Романова, Н.В. Кислороднезависимые функции циркулир больных различными формами красной волчанки. / Романо! М.Н. // Научно-практическая ревматология. - 2005. - №3. - С.107

34. Романова, Н.В. Влияние антител к ДНК, циркулирующих и сов и цитокинов на метаболические функции нейтрофилов у 6ojíi

С.92-93

вольных различны-,ные исследования.

гоцитов и цитоки-ги соединительной Journal of Immunol-

фагоцитов у боль-данным определе-ианова Н.В., Семи., 2004. - С. 47 ;ермия. / Романова Г. 25, №4. - Со-

лирующими фаго-/ Романова Н.В.//

продукция актив-Н.В. // Современ-

цитов и поражения Н.В. // Фундамен-

синдрома при дис-ина Н.П., Ильяной сса «Человек и ле-

щими фагоцитами у больных систем-|дин А.Г., Крылов

43

ующих фагоцитов Шилкина Н.П.,

iyio:

щих фагоцитов у а Н.В., Семичева

имунных комплек-ьных красной вол-

чанкой. / Романова Н.В. // Материалы Второй научно-практической конференции «Актуальные проблемы медицинской биотехнологии». - Анапа, 2005. - С.20-21

35. Романова, Н.В. Окислительный стресс лейкоцитов и его регуляция у больных склеродермией. / Романова Н.В. // Материалы Третьего съезда биотехнологов России. - М., 2005. - С.73-74

36. Романова, Н.В. Особенности окислительного стресса циркулирующих фагоцитов у больных кожной и системной красной волчанкой. / Романова Н.В. // Научно-практическая ревматология. - 2005. - №3. - С.107

37. Романова, Н.В. Функциональные свойства циркулирующих фагоцитов при различных формах красной волчанки. / Романова Н.В., Шилкина Н.П., Семичева М.Н. // Иммунология. - 2005. - Т.26, №3. - С.172-175

38. Романова, Н.В. Клинико-иммунологическая характеристика кожного синдрома у больных красной волчанкой. / Романова Н.В., Шилкина Н.П. // Российский журнал кожных и венерических болезней. - 2005. - №4. - С.45-48

39. Романова, Н.В. Особенности фенотипа лимфоцитов у больных кожными и системными формами красной волчанки в зависимости от содержания в крови циркулирующих иммунных комплексов, антител к ДНК и цитокинов. / Романова Н.В. // Успехи современного естествознания. - 2005. - №12. - С.50-51

40. Романова, Н.В. Зависимость фенотипа лимфоцитов у больных ограниченной и системной склеродермией от сывороточных иммунных комплексов, антител к ДНК и цитокинов. / Романова Н.В. // Успехи современного естествознания. - 2005. -№12.-С.51-52

41. Романов, В.А. Кислороднезависимый метаболизм циркулирующих фагоцитов и некоторые иммунологические механизмы его регуляции у больных склеродермией. / Романов В. А., Романова Н.В., Семичева М.Н. // Russian Journal of Immunology. - 2006. - T.9, №3. - C.92

42. Романова, Н.В. Окислительный стресс циркулирующих фагоцитов и некоторые иммунологические механизмы его регуляции у больных красной волчанкой. / Романова Н.В. // Russian Journal of Immunology. - 2006. - T.9, №3. - C.93

аДНК

АФК

АФС

ГКС

ДБСТ

ДКВ

ДсмКВ

ИКВ

ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ

- антитела к ДНК

- активные формы кислорода

- антифосфолипидный синдром

- глюкокортикоидные средства

- диффузные болезни соединительной ткани

- дискоидная красная волчанка -диссеминированная красная волчанка

- интегументные (кожные) формы красной волчанки

ИРИ

ИФА

иХЛ

КА

КБ

КФ

Лг

Лм

Мн

МПО

НАДФ

НПВС

Нф

ОСД

СКВ

СРВ

сед

сХЛ

хл

ЦИК

CD

IL

TNF

- иммунорегуляторный индекс (CD4+/CD8+)

- иммуноферментный анализ

- индуцированная хемшпоминесценция фаго|цитов

- коэффициент активации

- катионные белки

- кислая фосфатаза

- люцигенин

- люминол

- моноцит

- миелопероксидаза

- никотинамидадениндинуклеотидфосфат

- нестероидные противовоспалительные средства

- нейтрофилы

- ограниченная склеродермия

- системная красная волчанка

- С-реактивный белок

- системная склеродермия

- спонтанная хемшпоминесценция фагоцито^

- хемшпоминесценция

- циркулирующие иммунные комплексы

- cluster differentiation (кластер дифференцирэвки клеток)

- интерлейкины

- фактор некроза опухоли

Отпечатано в Типографии ИП Лобановой И.П., ул. Республиканская, д. 36, тел. 25-31-72 Заказ №54789 Тир. 100 экз. Подписано в печать 22.03.2007г.

Актуальность проблемы. Развитие аутоиммунных ревматических заболеваний связано с нарушениями в иммунной системе и проявляется утратой толерантности Т- и В-лимфоцитов к аутоантигенам [17. 64. 176]. что приводит к активации аутореактивных Т- и В-лимфоцитов с формированием воспалительной реакции и повреждением собственных тканей организма. Большинство Тклеток, обладающих рвгуляторной активностью, принадлежат к субпопуляции CD4" лимфоцитов, хотя и другие типы Т-клеток могут проявлять подобные функции [230,348].Прогресс молекулярной биологии и биотехнологии послужил основанием для создания новых теорий и гипотез патогенеза аутоиммунных ревматических заболеваний, в частности, теории мнкрохимеризма [26. 128. 161]. Доказана роль апоптоза в патогенезе ревматических заболеваний, включая СКВ и ССД [1, 76.77, 125. 224. 269. 330]. Вывинута свободнорадикальная теория патогенеза СКВ [109. 441]. Продолжают изучаться механизмы генетической предрасположенности человека к определенным заболеваниям [24. 63. 92. 100]. триггерной роли микроорганизмов в развитии иммунного воспаления при ревматических заболеваниях [5, 12,63,65,66,138. 225.450].СКВ признана классическим примером аутоиммунного заболевания с утратой аутотолерантности. поликлональной активацией В-лимфоцитов. изменениями фенотипа лимфоцитов, продукцией широкого спектра аутоантител (прежде всего, к компонентам клеточного ядра), формированием иммунных комплексов, нарушениями в цитокиновой сети и развитием апоптоза [10. 22. 56. 58, 84. 297. 330. 341]. В то же время сведения об иммунопатогенезе интегументных (кожных) форм красной волчанки (ИКВ) немногочисленны и касаются описания преимущественно локальных комбинированных нарушений эффекториых и регуляторных звеньев иммунной системы, сочетающихся с развитием у больных аутоиммунного процесса и иммунодефицита [22. 24, 78. 79]. s Ряд авторов высказывает мнение, что ограниченная и системная склеродермия также являются аутоиммунными болезнями с выработкой различных аутоантител. нарушениями иммунной системы и цитокинового профиля [6. 24.28,78, 112, 121,243,316,387. 388, 420]. Однако детальных сравнительных исследований и мму но патогенеза ОСД и ССД не проводилось.Таким образом, большинство исследований, касающихся иммунологических механизмов развития кожных и системных форм красной волчанки и склеродермии, связано с изучением отдельных вопросов функционирования иммунной системы. Систематических работ в этом направлении не выполнялось, многие исследования носят противоречивый характер. Практически отсутствуют сведения относительно регуляции метаболических функций фагоцитов и фенотипа лимфоцитов под влиянием ЦИК. цитокинов, аутоантител при разных формах красной волчанки и склеродермии С целью более полного понимания механизмов развития кожных и системных форм красной волчанки и склеродермии, разработки новых лабораторных подходов, дифференцирующих эти заболевания, эффективного лечебного воздействия необходимо изучение иммунологических нарушений и цитокинового профиля при каждом из них отдельно, а также в сравнительном аспекте.Изложенные обстоятельства послужили основанием для выполнения настоящей работы.Цель работы - комплексное изучение иммунных нарушений с исследованием клеточного звена иммунитета и цитокинового профиля при кожных и системных формах красной волчанки и склеродермии в зависимости от формы заболевания, клинических проявлений, активности и характера течения воспалительного процесса Задачи исследования: 1. Изучение уровня аДНК. ЦИК. провоспалительных и противовоспалительных цитокинов у больных кожными и системными формами красной волчанки и склеродермии.2. Сравнительное исследование функций кислородзависимого и кислороднезависимого метаболизма нейтрофилов и моноцитов, оценка влияния аДНК, ЦИК, цитокинов на функции фагоцитов у больных кожными и системными формами красной волчанки и склеродермии.3. Исследование состояния лимфоцитарного звена иммунитета по данным иммуноцито фенотип и роаания лимфоцитов и выяснение влияния аДНК, ЦИК, цитокинов на фенотип лимфоцитов у больных кожными и системными формами красной волчанки и склеродермии.4. Выяснение взаимосвязей формы, активности, характера течения, клинических проявлений при красной волчанке и склеродермии с особенностями функционирования нейтрофилов, моноцитов, фенотипа лимфоцитов, уровня цитокинов, аДНК. ЦИК. Научная новизна. Впервые при кожных и системных формах красной волчанки и склеродермии проведено комплексное сравнительное исследование ряда иммунологических показателей (ЦИК. аДНК. цитокинов, функциональной активности циркулирующих фагоцитов, фенотипа лимфоцитов) и некоторых цитокинов. определены fioiiiife признаки и различия иммунопатогенеза кожных и системных форм красной волчанки и склеродермии.Получены новые данные о закономерностях развития окислительного стресса циркулирующих фагоцитов при красной волчанке и склеродермии, свидетельствующие об увеличении при ИКВ. СКВ. ОСД и ССД продукции нейтрофилами миелопероксидазы и супе роке ид-аниона, дополняющихся при СКВ и ССД возрастанием продукции активных форм кислорода моноцитами. Впервые при красной волчанке и склеродермии исследованы кислороднезависимые функции циркулирующих фагоцитов, показывающие увеличение содержания в нейтрофилах и моноцитах кислой фосфатазы и катионных белков с мембранотоксическими свойствами исключительно при системных формах этих болезней. Полученные данные демонстрируют важную роль моноцита а развитии системности процесса при красной волчанке и склеродермии значимость повышения метаболических функций циркулирующих фагоцитов Б возникновении преимущественно сосудистых поражений, дополняя свободнорадикальную теорию патогенеза СКВ. постулаты которой могут быть использованы для обоснования патогенеза ИКВ. ОСД, ССД. Впервые у больных СКВ и ИКВ установлено сходство фенотипических характеристик лимфоцитов (Т-лимфоцитопения с увеличением CD19* лимфоцитов, маркеров ранней - CD25*. поздней - HLA-DR' активации и апоптоза CD95"), дополняющихся при ОСД н ССД снижением CD4", CDDb* клеток с увеличением естественных киллеров - CD!6"; фенотип лимфоцитов при СКВ, в отличие от ИКВ. характеризуется снижением HLA-DR' лимфоцитов на фоне увеличения CD16" и CD25" лимфоцитов, а при ССД, в отличие от ОСД, увеличением маркеров ранней активации - CD25*.Впервые при ИКВ, СКВ, ОСД. ССД проведена сравнительная оценка цитоки нового профиля, установлены закономерности ЦИК- и цитокинопосредованной, а при системных формах - аДНК-зависимой активации окислительного стресса и кислороднезависимых функций нейтрофилов и моноцитов. Впервые продемонстрирована гетерогенность фенотипа лимфоцитов и его зависимость у больных ИКВ. СКВ, ОСД, ССД от содержания ЦИК. аДНК и цитокинов, эффект которых заключается в переключении клеточного иммунного ответа на гуморальный.Полученные данные раскрывают им му но патогенетические механизмы развития кожных и системных форм красной волчанки, склеродермии, дают клиническую оценку определения аДНК. ЦИК. цитокинов, нарушений функций нейтрофилов и моноцитов, фенотипа лимфоцитов при различных формах этих болезней, обосновывая выбор иммунологических тестов, имеющих диагностическое значение и позволяющих судить о системности патологического процесПрактнческая значимость. Проведенные исследования установили наличие и патогенетическую значимость нарушений в иммунной системе и цитокиi новом профиле у больных кожными и системными формами красной волчанки и склеродермии. Показана высокая информативность определения TNF-a. окислительного стресса моноцитов, кислой фосфатазы и катионных белков циркулирующих фагоцитов, CD16", CD25' лимфоцитов. ЦИК и аДНК в связи с их высокими показателями и Частой встречаемостью при СКВ па фоне снижения HLA-DR" лимфоцитов для дифференциации кожных и системных форм красной волчанки. Учитывая более высокое содержание 1L-4. TNF-a, показателей кислородзависимого метаболизма нейтрофилов. ЦИК. аДНК. и более низкое - CD3", CD8' лимфоцитов при диссеминированной красной волчанке, чем при дискоидной красной волчанке, целесообразно исследование указанных показателей в качестве дополнительных лабораторных тестов дифференциации этих заболеваний. Для оценки активности СКВ в качестве дополнительных тестов могут быть исследованы окислительный стресс нейтрофилов, количество CD4". CD8' лимфоцитов. В комплексное обследование больных СКВ для выявления суставного синдрома следует включать определение окислительного стресса нейтрофилов и CD16" лимфоцитов, поражения сосудов - окислительного стресса нейтрофилов и выработки катионных белков моноцитами и HLADR' клеток, кожного синдрома - продукции катионных белков нейтрофилами и CD95\ АФС - окислительного стресса нейтрофилов. продукции катионных белков нейтрофилами. CDllb* и HLA-DR' лимфоцитов, нервной системы CD4' и CD95* лимфоцитов, кожного синдрома - продукции катионных белков нейтрофилами и CD95' лимфоцитов. Установлена коррекция ряда иммунологических показателей и цитокинового профиля при СКВ под влиянием поддерживающей терапии глюкокортикостероидами, что подтверждает рациональность ее применения при СКВ. Для дифференциации кожных и системных форм склеродермии целесообразно в качестве дополнительных лабораторных маркеров использовать определение окислительного стресса моноцитов, продукции нейтрофилами и моноцитами кислой фосфатазы и катионных белков, количества CD25' лимфоцитов. i значительно повышенных при системной склеродермии. Для оценки активности ССД в качестве дополнительных тестов может быть применена оценка количества CD95' лимфоцитов, существенно увеличенного у больных с высокой степенью активности (А2) процесса. Маркерами поражений легких и сердца при ССД является снижение CD1 lb и HLA-DR клеток, повышение окислительного стресса нейтрофилов; сосудов - увеличение CD3" лимфоцитов, метаболизма фагоцитов; почек - повышение CD4 на фоне уменьшения CD9S лимфоцитов и увеличения окислительного стресса нейтрофилов: синдрома Шегрена - снижение CD3' на фоне повышения CD25' клеток.Выявленные нарушения метаболических функций циркулирующих фагоцитов, фенотипа лимфоцитов и цитокипового профиля при кожных и системных формах красной волчанки в склеродермии обосновывают применение антиоксидантов и антицитокиновых препаратов для лечения этих заболеваний.Основные положения, выносимые на защиту.1. Иммунные нарушения при кожных и системных формах красной волчанки и склеродермии характеризуются повышением уровней ЦИК. аДНК, диерегуляцией в системе цитокинов. повышением кислородзависимого и кислороднезависимого метаболизма циркулирующих фагоцитов, изменениями фенотипа лимфоцитов.2. Системные и кожные формы красной волчанки проявляются как сходными нарушениями в иммунной системе и цитокиновом профиле (повышение уровней ЦИК. цитокинов IL-lp\ IL-4, IL-6. кислородзависимого метаболизма нейтрофилов на фоне снижения их резервных функций. Т-лимфоцитопения с увеличением В-клеток - CD19*. маркеров активации - CD25\ HLA-DR* и апоптоза -CD95"). так и отличающимися изменениями (наличие при СКВ высоких титров аДНК. ЦИК. TNF-a. увеличение кислородзависимого метаболизма моноцитов, кислороднезависимого метаболизма - кислой фосфатазы и катионных белков нейтрофилов и моноцитов, содержания естественных киллеров - CD16* на фоне снижения CD1 lb" лимфоцитов - а-субъединицы [}:-интегринов. ICAM1 при СКВ).3. Системные и кожные формы склеродермии имеют как сходные иммунологические черты в виде повышения уровней ЦИК. цитокинов IL-lp\ IL-4. TNF-a, кислородзависимого метаболизма нейтрофилов на фоне снижения их резервных функций, изменениями фенотипа лимфоцитов в виде Тлимфоцитопении. снижения CD4' хелперов. CDllb" лимфоцитов - асубъединицы р;-интегринов. ICAM-1 с увеличением естественных киллеров CD16", В-клеток - CD19". маркеров активации • CD25'. HLA-DR" и апоптоза CD954"). так и различные характеристики (высокие титры аДНК, TNF-a, увеличение кислородзависимого метаболизма моноцитов, кислороднезависимого метаболизма - кислой фосфатазы и катионных белков нейтрофилов и моноцитов, увеличение лимфоцитов с маркерами активации - CD25* при ССД).4. Маркерами активности воспалительного процесса при СКВ являются ЦИК, аДНК, IL-IJ3 и TNF-a, спонтанная л юм и но л за вис и мая хем и люминесценция нейтрофилов. CD4'.CD8' лимфоциты, приССД-СЕ)95\ 5. Иммунопатологические нарушения при системных и кожных формах красной волчанки и склеродермии тесно взаимодействуют между собой и регулируются ЦИК. цитокинами. а при системных формах и аутоантителами.Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на заседаниях 4 Конгресса Российской ассоциации аллергологов и клинических иммунологов (Москва. 2001). международной конференции -Естествознание на рубеже столетий» (Дагомыс. 2001). XVIII Юбилейной научно- практической конференции врачей медико-санитарной части НЯНПЗ. посвященной 45-летию МСЧ НЯНПЗ (Ярославль, 2001), Всероссийской конференции '«Современные технологии лабораторной диагностики нового столетия» (Москва, 2002). Международном конгрессе «Практикующий врач» (Сочи, 2002), 5-м Конгрессе РААКИ «Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии» (Москва. 2002), XXII Всероссийской научно- практической конференции «Рахмановские чтения» (Москва, 2002). XIX научно-практической конференции (Ярославль, 2003). научно-практической конференции «Современное состояние Российской биотехнологии» (Москва. 2003). X съезде медицинских и фармацевтических работников Ярославской области (Ярославль, 2003), Втором съезде биотехнологов России (Москва, 2004), IV съезде ревматологов России (2005), Второй научно-практической конференции «Актуальные проблемы медицинской биотехнологии» (Анапа, 2005). Третьем съезде биотехнологов России (Москва, 2005). Российской научно-практической конференции «Современные технологии в иммунологии: иммунодиагностика и иммунотерапия (Курск. 2006). на кафедре клинической иммунологии и аллергологии ГОУ «Институт повышения квалификации Федерального медико- биологического агенства» (Москва, 2006), совместном заседании кафедр дерматовенерологии, пропедевтики внутренних болезней и кафедры терапии ФПК и ППСЗ Ярославской Государствен мои медицинской академии (2006).Внедрение в практику. Исследование цитокинов. фенотипа лимфоцитов, кислородзависимого и кислороднезависимого метаболизма нейтрофилов и моноцитов внедрено в работу лаборатории кафедры микробиологии с вирусологией и иммунологией Ярославской Государственной медицинской академии и клин и ко-иммунологической лаборатории медико-санитарной части Ярославского нефтеперерабатывающего завода Материалы диссертации используются в лекционных курсах кафедр терапевтического профиля, на практических занятиях кафедры кожных и венерических болезней Ярославской государственной медицинской академии.Публикации. По теме диссертации опубликовано 42 научные работы, в том числе в изданиях из Перечня ведущих рецензируемых научных журналов и изданий, рекомендованных ВАК Минобразования России, - 10.Структура и объем работы. Диссертация изложена на 294 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, 4 глав собственных исследовании обсуждения полученных данных, выводов, практических рекомендаций, указателя литературы, включающего 452 источника, из них 101 отечественных и 351 иностранных работ. Диссертация иллюстрирована 106 таблицами и 20 рисунками. Приведено 4 клинических примера.

Результаты исследования феиопгпа лимфоцитов п зависимости от кяи-нических проявлений ССД отражены в таблице 86.

Из таблицы видно, что фенотип лимфоцитов у больных с поражениями легких и сердца был однотипен, проявляясь статистически достоверным (р<0405) снижением ypomta CDUb' н HLA-DR" клеток. Наличие у больиых поражений сосудов сопровождалось статистически значимым (р<0,05) увеличением количества CD3' лимфоцитов Почечный синдром при ССД характеризовался повышением содержания CD4~ лимфоцитов на фоне уменьшения CD95* клеток, а синдром Шсгреиа - снижением содержания CD3* лнм-фощпов на фоне повышения CD25" клеток. Наличие синдрома Рейно. подкожных хлльцнназов, суставного синдрома, склсродоктилни. поражений нервной системы и желулочно-кншечиою тракта у больных ССД не сопровождалось статистически достоверными изменениями фенотипа лимфоцитов

Фенотип лимфоцитов у бальных ССД а тависммостн от клинических проявлений

Клвмичкяис л Фенотип raw (M*SD, %%> в1 CD4' CD8" CDItbl CTH6* CD 19* CD25' CD95" HLA-DR' >

Синдром 1/ 17*5 S9*t iStf 19» 4 19*7 22*10 22*11 2M7

Pcftiro 1 52*16 3615 34(7 20t4 18i3 2tl6 2415 29*11 29i6 суепшнпй IV 57*10 2515 iW (9*6 Wl 26*? 24 Я1 Ш синдром Ь 60» 14 39*5 ЗЗлб 2016 18*4 20*6 1919 24*12 27*8

Полке жиме 1" 57*9 37*5 29*4 20*6 19*4 1**7 22*10 24*10 3M

ПЯЫЩПЯт 14 60*16 35*4 36*4 (9*4 1**3 25*2 24*5 24*14 28*5 J

Склсрояктили 15 61*11 31*5 ?l*6 IS*G 2Ш 2itft 24*.? 22*S ?7*7 ;

Ч 55*12 36*? 31*5 21*6 17*3 191» 21*10 27±14 30*7

1 l.ipu*t'ti ня орга- ■J <■0*1? 34*5 21*5 17*3 21*7 21*? 21*13 28±3 ь шш^ю^елин И 37*4. 2**4 1**6 I 2-t**J

Поражения Opta 13 M>iU 37*7 20*2 !1*4P 20*5 22*5 18±K 29*13 нов дыхшв II 55il t 37*6 2S*5 18*6 2014 21*6 2414 28*13 35*9

Порожских сердца 14 54*9 37*7 30*3 12*5* 3i*4 22*5 !S+ft 29*13 I

10 55*11 37*6 2St5 18*6 2Q±4 21*6 24lK 28*13 35*9

Поражения сосу- IP 62*»* 36*5 30±5 20*6 16*3 20*7 20*9 22*11 61*11 1

Л гш 14 ЯЫ4 3*±6 33*7 18*5 1^*4 2t*6 27** 30*10 55*12 |

Поражения неуш 4 54»? Ш 2Ш (2i5 224 22*5 1?±« 29*13 №5 вой еис1емм JU 55*11 3716 2SJ.5 I8l6 20*4 2U6 24l8 28113 35*9

I Ыражсп ня почсх f> 63*» 4ft* 3* 30*4 23*2 17*4 I**6 15*7* 20*7 28*9 lit 5Л*12 35*5 31*6 19*5 19*3 2t*7 26*7 26*11 2?rg I

Слпдроч 51*12' 36*7 32*5

LLIetpciia 19 62* 8 37*4 30*4 20*6 1**3 20*7 20*< 20*10 ™ |

Обо1начеиия: числитель ■ данные пациентов с наличием клинических проявлений, тнпменатсль - с отсутствием. * - достоверное отличие (р<0,05) между числителем и знаменателем

Акал in иммунологических индексов у батьиых ССД в зависимости от клинических проявлений (таблица 87) продемонстрировал изменение только одного индекса - HLA-DR-/CD95+, который был снижен при наличии у больных синдрома Шягрена, синдрома Рейно, поражений сосудов н потек Не было выявлено изменений иммунологических индексов у больных ССД с подкожными кальцина-ими, суставным синдромом, схлеродиктилией. поражениями нервной системы, легких, желудочно-кишечного тракта, сердечно-сосудистой системы.

Практические рекомендации t. Для дифференциации СКВ и ИКВ в качестве дополнительных лабораторных тестов рекомендуется использовать определение спонтанной хе-мнлюмннссценцнн, кислой фосфатазы н котионных белков в моноцитах, сывороточного TNF-o. избирательно повышенных при системной красной волчанке. Целесообразно также исследование фенотипа лимфоцитов, характеризующееся прн СКВ, в отличие от ИКВ, снижением у больных СКВ HLA-DR* лимфоцитов на фоне иолынкиия CDt6" и CD25* клеток,

2. Оценку активности СКВ целесообразно проводить по данным определена хемкшомииеецеиаин нейтрофнлов. CD4* и CD 16* лимфоцитов, увеличивающихся по мере ее иорастаиня, a CDS' клеток - снижающихся.

3. В качестве дополнительных лабораторных тестов, дифференцирующих ОСД и ССД, рекомендуется использовать определение достоверно повышенных при ССД люмино.тзавнеимон хемклюминесиенцин моиоцктоя, кислой фосфатазы и kothqhhux бел ко» нейтрофнлов и моноцитов, количества CD25* лимфоцитов.

4, Целесообразно определение при ССД количества CD95* лимфоцитов, отражающих активность промесса.

MS