Автореферат и диссертация по медицине (14.00.07) на тему:Морфологические показатели состояния системы мононуклеарных фагоцитов для гигиенической оценки действия химических соединений

академия медицинских наук СССР

ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ОБЩЕЙ И КОММУНАЛЬНОЙ ГИГИЕНЫ им. А.Н.СНСИНА

На правах рукописи

ГАСИМОВА Зульфира Масгутовна

УДК 576.2:614.7

МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ СОСТОЯНИЯ СИСТЕМЫ МОНОНУКЛЕАРНЫХ ФАГОЦИТОВ ДЛЯ ГИГИЕНИЧЕСКОЙ ОЦЕНКИ ДЕЙСТВИЯ ХИМИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ

14.00.07 - Гигиена

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва - 1990

Работа выполнена в ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательском институте обшей и коммунальной гигиены им.А.Н.Сы-сина АМН СССР.

Научные руководители:

доктор медицинских наук, профессор М.А.Пинигин доктор медицинских наук Т.И.Бонашевская

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук профессор Ю.И.Прокопенко доктор биологических наук Л.С.Строчкова

Ведущее учреждение: Московский научно-исследовательский институт гигиены ип.Ф.Ф.Эрис-мана МЗ РСФСР

Защита диссертации состоится ЯсЪЛ' 1990 г.

в (?0 часов на заседании Специализированного совета Д.001.09.01 при ордена Трудового Красного Знамени НИИ общей и коммунальной гигиены им. А.Н.Сысина АМН СССР (П9833, г.Москва, Погодинская ул., •д. 10).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ордена Трудового Красного Знамени НИИ общей и коммунальной гигиены им. А.Н.Сысина АНН СССР.

Аптореферат разослан "_"____ 1990 г.

Ученый секретарь Специализированного Совета доктор медицинских нрук

¡0. Н.Моль ков

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТА Актуальность исследования К основным задачам гигпе.чы окрукавдей зредц относится изучение механизмов я законоыерностел взаимодействия зргакизиа с неблагоприятными факторами 1Г.Н.Сизореняо,1938^Как иэвест-10, химические загрязнения малой интенсивности вызывают песлецп^лческие ¡зменения защитных систем организма н снижение его рззпстентностн к эазличнкм патогеннпм агентам 111.Н.Литвинов, 1978,1931; Н.К.Литвинов, З.И.Прокопенко,1978,1981; М.Г.Шандала и соавт.,198? и-др.;.

Ваяную роль в реализации клеточных механизмов обеспечения исспецн-Е>ическо11 резистентности играет система мононуклеарки): ..агоцлюв ^СМФу .Б.В.Кузник и соавт. ,1989).Поэтому оценка ее структурно-функционального ¡остоянип может способствовать определению уровня резистентности орга- | шзма и, следовательно, прогнозу вероятности развит.чя нгблагоприятних | »ффектов.Однако до настоящего времени не разраоотан комплекс акспернмеи-1 гально обоснованных показателей,характеризующих состояли^ С.'.!?,хотя по- , сазана высокая чувствительность еа отдельных популяций к действии |

токсических веществ ^Р.В.Меркурьева и соавт.,1983; к.иШег ,1984,). | Меяду тек, СМФ представляет собоЯ единую клеточную л:;пию в процесса! шфференцировкя от ионоцитарных предшественников костного могга (МПХ!1) (о тканевых макрофагов,при атом состояние МИКМ в значнтелшой мере оправляет функциональные возможности и потенциал э^екторных клеток -ткане-; 1Ы* макрофагов (,11.С.ФреПдлнн,1984;. Это обусловливает важность изучения I 1заимосвязи изменений состояния клеток различных звеньев С1Ф (централь- ; юго -МПка, транзиторного -моноцитов кроеи и периферического -тканевых : [акрофагов; в зависимости от уровня и длительности воздействия химичес- | ;их соединения. В периферической эвене СМФ наиоольшее значение представ-'| :яет изучение макрофагов печени в легких -самых многочисленных популяций! той систеиы,который отводится основная роль в обеспечении неспецифичес-1 03 резистентности органиаиа (Д.НЛаянский,1979; Л.Хорст,1982;.зто опра-! .еляет целесоооразнооть изучения изменений СМФ на ранни* сроках воздей- | твия химических соединений,вызывающих развитие патологических процессов

в псчзнл и легких.

К таким соединениям относится, например, нитрозодинотиламин (НДМА; п этанол -распространенный компоненты реальной химической нагрузки. Обладая гепатотропным действием и вызывая повреждение клеток легких, эти соединения характеризуются различными отдаленными эффектами: канцер генным (н1ш) и алкогольным (этанол)(А.С.мухин, 1985; П.А.Боговский, 198' Изучение их коспецитичсского и специфического действия на состояние СМФ позволило бы совершенствовать систему показателей раннего неблагоприятного действия химических соединений на организм.

Для обоснования показателей, отражающих начальные изменения в состоянии здоровья людей при воздействии неблагоприятных факторов, представляется важным установить возможность оценки функционального состояния СМФ по состоянию моноцитов крови, являющихся единственными клеткаш этоп системы, доступными для лабораторных исследования.

В связи с Еыпеизложенный целью настоящей работы явилось экспериментальное обоснование морфологических показателей функционального состояния Ш» для гигиенической оценки химических загрязнителей окружающей среды на примере перорального двпствия НДИА и этанола.

Для достижения поставленной цели определены следующие задачи:

1.Изучить динамику изменений структурно-функционального состояния СМф б зависимости от уровня и длительности воздействия НДМА.

2.Изучить динамику изменений структурно-функционального состояния СНч/ в зависимости от длительности воздействия этанола.

3.Установить общие и относительно специфические особенности изменения состояния СИ» в процессе развития канцерогенного и алкогольного эффекта и рекомендовать комплекс морфологических показателей для гигиенической оценки химических соединений,загрязняющих окружающую среду.

Научная новизна работы Установлено, что закономерным проявлением двЛстяин химических соединений с различными отдаленными биоэффектами (канцерогенным и алкогольным) на состояние СИ<Р является нарушение регуляторнов функции ШЖМ, повреждение структуры моноцитов крови и

тканевых макрофагов и компенсаторная активации их отдельных функции.

Показано, что зависимое от урозня и длительности воздействий Н1ь1А и этанола нарастание структур них изменений органов обусловлено как прямым неблагоприятный действием химических соединений, так и изменением структурно—функционального состоинин СМ^.

выявленная взаимосвязь изыанонии структурпо-гункциоиального иоито-пния 11ШШ,моноцитов кроьи и тканевых макрофагов о нарастанием патологических реакци:: печени и легких в процосое развития неблагопрплт.шх эффектов химических соединений свидетельствует о возможности оцаики функционального состояния СИФ и уровня резиетоптьости организма по состоянию цоноцитов крови.

Теоретическая значимость работы Структурно-.]-ункционалышй анализ состояния СМФ при действии химических соединений способствует дальней-шеиу углублению теоретических знании о взаимоотношении "организм - окру-, лающая среда" и соьервенствовашш систоии показателей, отрахаь-цих развитие неблагоприятных агентов в организме.

Практическая значимость Разрао'оташш:1 кокилеко иор'о;ушздоиалышх показателей состояния СМФ ыо:гст бить пспользоьан в экспераментальишс исследованиях для оценки биологического действия химических соединений и в отдельных случаях при изучении состояния здоровья населения.

Материалы работы вклычани в состав 3 методических рекомендаций, утвержденных Проблемной комиссией "Научные осноьи гигиены окру^аиуей среды": 1)"Систоыа биохимических,цитологических,цитохимических и олокт-ромноиикроскопических критериев оценки функционального состояния альвао лярних макрофагов челозока и экспериментальных кивотних при действии факторов окруяашей среди"(и.,1983); 2)"Методические рекомендации к иорфологичеснсн^ «учению влияния химических .гакторов окружающей среди на дыхательную Сйетеиу" (и.,1984); 3)"Методические рекомендации для структурно-функциональной оценки процессов адаптации при воздействии химических факторов окружающей среды"(М.,19В7)и используются в Киевской ;!ЛИ гигиены питания 113 УССР и Воронежской государственном пединститута.

Рекомендованный комплекс морфологических показателей состояния СМФ апробирован в экспериментальных исследованиях в НШЮКГ им.А.Н.Сысина АМН СССР при изучении роли перорального воздействия бензола и нитрата свинца в реализации эмбриотоксического эффекта хлористого кадмия.

По материалам работы внедрено 4 рационализаторских предложения.

Материалы диссертации доложены на X Всесоюзной конференции молодых ученых-гигиенистов (Тбилиси,1985), научных конференциях "Актуальные вопросы профилактической токсикологии'ЧЕреван,1987) и "Медико-экологические аспекты иорфологии легких"(Благовещенск,1989); У1 и УП Всесоюзных симпозиумах "Канцерогенные N -нитрозосоединения и их предшественники - образование и определение в окружающей среде"(Таллинн,1987, 1990).

Публикации По теме диссертации опубликовано 10 печатных работ.

Структура диссертации Работа состой* из введения, обзора литературы, 4 глав собственных исследований и обсуждения, выводов, материалов внедрения, списка литературы (90 работ отечественных и 104 зарубежных авторов),приложения; изложена на 220 страницах машинописи, содержит 69 микрофотографий, б рисунков, 36 таблиц (из них 16 в приложении).

Методы и объем исследования Для решения I и 2-й задач изучались изменения состояния ШШ1, моноцитов крови, альвеолярных макрофагов легких (АЫЛ) и макрофагов печени неинбредных крыс через 2; 5 и 10 месяцев изолированного перорального воздействия НДМА .в концентрациях Г и 10 мг/л и этанола в концентрации 100 г/л.

Изучение действия НДМА проведено на 9 группах крыс-самцов с началь ной массой 280-350 г (3 группы -контроль! 3 группы -воздействие канцерогена в концентрации I мг/л; 3 группы -его воздействие в концентрации 10 мг/л), а этанола - на 6 группах крыс-самок с начальной массой 180— 230 г (из них 3 группы -контроль). Каждая группа состояла из 12 крыс. Проведение экспериментов ка крысах разного пола обусловлено тем, что наиболее быстрое развитие неблагоприятнрго эффекта НДМА наблюдается у саццов (s.D.Veseelinovitch et al.,1961),а этанола -у самок (В.В.Серов K.JIan;:3,I9S9).

Воспроизведение указанных ыоделей действия НДМА и зтанола позволило изучить изменения СМФ на ранних.стадиях развития их отдаленных эффектов (Н.Н.Литвинов и соавт.,1987; Ю.М.Островский и соавт.,1987).

Для оценки состояния СМФ изучались структурно-функциональные показатели, характеризуюаие согласно А.И.Маннскоиу и соавт.(1983), Н.С. Фрейдлин (196''0 уровень неспецифической активации ее отдельных популяций: 1)количество клеток в популяциях; 2)уровень активности в йононук-леарных фагоцитах маркерного фермента (¿-нафтилаци-гатэстерззи (ИЗ) (Z.LoJ'la ,1979), а так.ко nepOKCiUa3u(R.Grahao, M.Karnovaky ,1966) Ц кислой фосфатазы (КФ)(A.Goldberg,т.Bar,196?) в моноцитах и макьо;нгах; 3)размеры,форма,поверхностная архитектоника, фагоц.иарнал и адгозиьная активность моноцитов крови и тканевых макрофагов ири их краткосрочной культивировании на стекло (В.А.Роьеиский,1979).

Оценку результатов цитохимических резкций в клетках проводили по методу L.s.Knplow (1955) с подсчетом среднего цитохимического коэффициента (СЦК) и использованием сладукаах градаций характера реакций: О -отсутствий окраски цитоплазмы; I -¿/.анлчнце гранулы реакции в цитоплазме (слабая активность); 2 -гранулы обильно заполняет цитоплазму, но видны просветы {умеренная активность); 3 -гранулы обильно заполняй! цитоплазму без просветов (сильная активность).

Идентификацию ЫШШ бедренной кости проводим способом f. Ha^hoe, (1980) по выявлению активности в них НЭ.

Для изучения состояния моноцитов выделяли фракцию иононуклеарних клеток периферической крови методом A.Boyua (I97A-). Зщеленнб макрофл-ГОЗ ИЗ ПачеШ! ПРОВОДИЛИ ЫОДИфИЦИрОЗеШШЦ МШОДОЦ P.Rous,J 193'0,

а из легких -методом Q.Myrwio вс al.(I96I). На полу тонких срезах клиток, вииытих лз легких й залитых в эпон-аралди ¿оы;е смолы, изучали гетерогенность А21Л не содержанию лизосои я лииидкык включений ь цитоилаг-ие для оценки функционального состояния ^нной хочной г^пуляцли (Л.К.Романова,И.С.Покровская,1980).

Интерпретация результатов исследования состоянии СН.Ф проводилась

с 5чехом данных анализа гпстоструктуры печени п легких, лейкоцитогра'к-«,ш крови и цитограмиы бронхо-альваолпрных сшеов.

Результаты исследований обработаны на ЗШ "Ш-142и".

Для решения 3-й задачи проведен сравнительный анализ динамики нзивнений состояния С115 в процессе развития канцерогенного а алкогольного эффектов химических соединений. Общие для обоих эффектов пэмопоеик СНФ рассматривались как неспецифические, а изменения, паблидаешдэ лизь при развитии определенного эффекта - специфические.

Эксперименты проведены на 180 кявотных. В работе использовано 15 морфологических петодов: проведено 180 гистологических и гистохимических, 450 цитологических, 810 цитохимических, 360 электронноцикрооко-ппческих (сканирующая электронная микроскопия) анализов.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕН!!«! ИССЛЕДОВАНИИ

Дкнзкика иячонониП структурнд-фунрау:ональногО| состояния

при воздействии НД?.ТА -

Н2ША я концепЕрашяп: I л 10 иг/л пэров 2 посяца воздействия визг-вал угнетенно процесса коиош!гогоппз,о чей свидвтол^сгвовало ашхонио числа ИШШ б 1,2 и 1,7 раза, гасро&гоз пачекп -2 и 3,5 раза(Р/0,01; 0,001) п «оиоцотойдккх ¡:путо!?1Шх фор:.; /1!д -2,5 я 1,С раз(Р/0,001;0,05) соожвехотвешю (рпсЛ).При эеси ? пополнили ДНЯ отмечалось умоиьвзпао относительного числа клагоя 'с бегакш,: яодориавпэу лязоссш и (Тагосом. в 1,2 раза (р/0,05), что отраяаго угадаеим? пх (гагощнарной активнее?;:.

Е пзкрофагах почет: виилгоко сш:гп:то СЦ'и активности КФ з оредн-ч на 10% (Р/0,05) на фона балочной даске1:кло^ашв:»слъхорашш в регенерации гепахоциюв. По-видамону, это связано с активацией в макрошагах функции,направленной на усиление рогенерацпп гэпаь'оцихов^ак как известна важная роль их яизосомалн'к: ферментов в регуляции репаратпвних процессов печени, причем усиления шгсотпизской аятивносги гепатоцитов сопровождается угнехешгси активности КФ в иакрофугох (Л.Е.Паиип и соавт.,1987).

Наряду о этии, воздействие !Щ!А в концентрации I мг/л вызывало

НДЦА - 1,0 иг/л

Этанол - ICO г/л

г uöik

5 ÜÖÜ.

10 нао.

а»»

12 3 4

Рис. I. Язивнаннв количественного содержания ионоиуклаарш-ß фагоцитов через 2, 5 и 10 нес. воздействия 11ДЦА в концантрациц 1,0 и 10,0 иг/а и этанола в концентрации IGO г/л.

По оси абсцисс - ¡юнонуйязарныа фагоциты: I - ионоцатарица предшественник:] костного аовга; 2 - ионоцнти крови; 3 - альвеолярные иакро^аги легких; 4 - иакрофзги печати

По осп ордтпт - авмианао абсолагного числа клеток в % от контроля.

я - Р/0,05; зле - Р/0,01; - Р/0,001.

изисненио направленности диффсронцировки предшественников грануло-мо-ноцитарного ряда в сторону нейтрофилов, о чем свидетельствовало угнетенно активности НЭ н МПКМ на 38% (Р/0,001) и увеличение числа вымывав-, мых из легких нейтрофилов в 3 раза (Р/0,05).При этом отмечалось достоверное сниконно об:цсго числа ^МЛ в 2 раза и уровней активности в них КФ, НЭ и пероксидазы на 15-18%, что объяснялось уменьшением в популяции числа ионоцитоидных клеток, проявляющих в основном высокую (3) степень активности ферментов. Отмечалось также усиление реакций взаимодействия моноцитов крови и АУЛ с лимфоцитами, выражающееся образованием агрегаций этих клеток. В макрофагах печени выявлялась активация перок-силазн на 1% (Р/0,001), • '

Воздействие НДМА в концентрации 10 иг/л усиливало миграцию моно-нуклеарных фагоцитов из костного мозга в кровь и угнетало их миграцию в органы. Об этой свидетельствовало появление в популяции моноцитов крови клеток с высокой (3) степенью активности НЭ, причем их относительное содержание имело сильную корреляционную связь с уровней активности НЭ в МГОШ (г= -0,832) и содержанием ионоцитоидных клеток в популяции МЛ (г = -0,893). При этом выявлены признаки усиления фагоцитарной и адгезивной активности моноцитов - образование большого количества филоподий и ланоллоподий, фагоцитоз частиц клеточного детрита».

В популяции АМЛ повышалось чиоло клеток о высокой (3) степенью активности КФ и пероксидазы в 3 и 16 раз (Р20,й5;0,01) соответственно, хотя изменения СЦК их активности были статистически незначимы. Вместо, с той отмечалось достоверное снижение активности.НЭ на 15% и среднего индекса адгезивной активности в 2,4 раза. Эти изменения функционального состояния АМЛ, очевидно, были обусловлены не только снижениеи числа ионоцитоидных клеток, но и развитием компенсаторных реакций на воздействие высокого уровня НДМА. В легких при этом выявлена клеточная инфильтрация, чередование участков гиперплазии и дескваиации бронхиального эпителия, усиление его секреюрнрй активности.

" Выявлено также изменение поверхностной архитектоники АЛЛ и макро-

фагов лечани, выражаюцеася скручиванием цитоплазиатических складок и формированием бугристых образовании, мезду которыми выделялись лирообразные углубления. Это свидетельствовало о повреждении структуры макрофагов (В.В.Фетисов и соавт.,1983).

Корреляционный и регрессионный анализ полученных результатов выявил на 2-месячном сроке воздействия НДДА линейные зависимости "концентрация-эффект" в отношении содержания макрофагов" печини, АИЛ с высокой степенью активности КФ и пероксидази и их адгезивной активности.

Через 5 месяцев воздействия НДМА в концентрациях I и 10 мг/л отмечалось угнетение миграции моноцитов из костного мо^га в кровь.Об этом свидетельствовало повышение числа Ш1КИ в 2-3 раза, тогда как количество моноцитов крови, АИЛ и макрофагов печени спила.'.ось или ьалодилось в нижних пределах контрольного уровня (рис.1).

В макрофагах печени активность НЗ повивалась в сродней на (Р/0,05),что,согласно .Т.0в1^в1 вt в1.(1985) усиливало лх цитотоксичас-кук активность к видоизмененным клеткам. При зтои винв/.еиа альтерация гипатоцптов на роне их незначительной регенерации.

Оба уровня НД11А (I и 10 иг/л) вызывали такха акти.вациа ИЗ в моноцитах крови ни '¡0,5 (Р/0,СШ) а 19% ц повишзние числа вымываймих из легких нойтрофилов в 3,7 н 9 раз (Р/0,01;0,001) соответственно. Это, вероятно, отражало компенсаторную активацию моноциюв и нойтрофилов крови, направленную соответственно на защиту поче¡Л1 и легких.

В АЛЛ активность КФ синилась в средней на 20;- (Р/0,05) и усиливалась их способность к агрегации. Последнее рассматривается Н.С.Фрейдлиа (198ч) как один из признаков активации под влиянизм лимфокинои, вовло-*а«шдх их в качества клеток-эффекторов в иммунные реакции. В легких три этом выявлена гииорсакрецзя бронхиального эпителии, клеточная инфильтрация преимущественно перабронхиальицх отделов и нарушение цело-зтиости слепок кровеносных сосудое.

Наряду с этим воздействие НДМА в концентрации I ыг/л вызывало в ¡анрорагах печени снижение активности КФ на Ид (Р/0,001), причем

процессы регенерации гопатоцитов при данной уровне воздействия канцерогена были более выраженными, чем при воздействии его 10-кратного уровня.

Воздействие НДМА в концентрации 10 мг/л вызывало изменение направленности дифференцировки предшественников грануло-моноцитарного ряда в сторону нейтрофилов, о чем свидетельствовало наличие сильной обратной связи содержания моноцитов крови с содержанием палочкоядерных нейтрофилов ( -0,827) и нейтрофилов легких ( г= -0,973).При этом отмечалась поляризация клеточной формы моноцитов крови, что отражало усиление их направленного движения в органы. Причем миграция в печень моноцитов с высокой (3) степенью активности НЭ, вероятно, усиливалось, о чем свидетельствовало снижение числа этих клеток в крови и увеличение в популяции макрофагов печени в среднем в б раз (Р/0,001).В последних выявлено также снижение активности пероксидазы на 27$ (Р/0,01), коррелирующее с активацией в них НЭ (г = -0,889).Вместе с тем в АМЛ активность пероксидазы увеличивалась на 22$ (Р/0,01) на фона повышения в популяции числа "пенистых1! клеток более чем в 4 раза, что отражало усиление в них процесса перекисного окисления липидов.Кроме того,выявлялось поЕрекдсние структуры не только тканевых макрофагов, но и моноцитов крови.

Регрессионный анализ результатов исследования выявил на 5-месячноы сроке воздействия НДМА линейные зависимости "кснцзнтрация-зффзкт" в отношении активности пероксидазы в макрофагах печени и ЛШ1, относительного содержания в популяции ЛМЛ "пенистых" клеток и абсолютного числа вымываемых из легких нейтрофилов.

Через 10 месяцев воздействия НДМА в концентрациях I и 10 иг/л от-■ мечалось сншкокие миграции моноцитов кроля в органы. Об этом свидетельствовало повышение числа моноцитов крови в 2,8 и 3,8 раза (Р^0,01;0,001) соответственно, тогда как содержание ¡тканевых макрофагов снижалось или находилось кя контрольно« уровне (рис.I).При стоя усиливалась спосоо'-пость нэяоцпток крови и АМЛ к агрегации ? вияммяпзд признака их фаго-

цитарной и адгезивной активации. Кроив того, в популяции АШ снижалось в 2-3 раза (Р/0,05) относительное число клеток с небольшим содержанием лизосом и фагосом, т.е. клеток, находящихся в состоянии функционального покоя и обладающих высокий резервный потенциалоц. В легких наряду с клеточной инфильтрацией и гиперплазией Орокхиальною эпителия отдача. шсь реакции фибросклерозирования бронхов.

В макрофагах почини активность НЭ увеличивалась в средней на 20¿¿ (Р/0,05) на фоне значительной альтерации гепатоцитов.

Воздействие НДМА в концентрации 10 ur/л визииало тате усиление процессов ионо- и гранулоцитопоэза, что выражалось достоверный (Р/0,05-0,001) повышением числа ЫШСМ, нейтрофилов крови и бронхо-альвеолнрных cuubo.3 в 1,8; 1,9 и 9 раз соответственно на фона ионоцитоза крови. В моноцитах крови при этом СЦК активности НЭ был саиззн на 18;;'(Р/0,001) за счет уменьшения в 9 раз числа клеток с ее высокой (3) степенью активности, что, очевидно, связано с их ускоренной миграцией ь печень, В макрофагах печени выявлена также активация КФ на Г5;{ (Р/0,05) на фоне угнетения их фагоцитарной и адгезивной активности.Это отражало усиление на только цитотоксической, но и цитолитической активности макросов, что играет важную роль в противоопухолевой заздте органа (М.Ы. Вядро,1980).

В популяции АМЛ достоверно увеличивались относительное число кла-гок с признаками вираханной аировой дистрофии в ? раз и активность ' 1ероксндази на 51,?. При этом в популяции моноцитов крови, АИЛ и макрофагов иеченн нередко выявлялись деструктурировашша клетки.

Линейные регрессионные зависимости "концентрация-эффект" на 10-1есячном сроке воздействия НДМА выявлены в отношении абсолютного чиснь ÍHKU, моноцитов крови, нейтрофилов крови и бронхо-альв8олнрних сыывов, ктивно фагоцитирующих АЫЛ и АМЛ о признаками выраженной жировой игтрофиа, активности КФ и пвроксидази в АМЛ и макрофагах печени и В в моноцитах крова.

Таким образом, ранним проявлением действия il/Ш на состоянии СМ®

являлось угнетенно процесса ионоцитопоэза и изменение направленности диМоренцировки предшественников грануло-моноцитарного ряда в сторону иойтрофилов, снижение числа моноцитов крови и макрофагов, угнетение фагоцитарной активности АУЛ, уровней активности в них НЭ, КФ и перок-сидазы и КФ в макрофагах печени на фоне балочной дискомплексации, апьтерации и регенерации гепатоцитов.

С увеличением уровня и длительности воздействия НДМА отмечалось усиление процессов моно- и гранулоцитопоэза, повышение числа МГПШ и моноцитов крови и угнетение их миграции в ткани, активация фагоцитарной и адгезивной активности моноцитов крови и МЛ и их угнетение у макрофагов печени, усиление процессов перекисного окисления липидов в МЛ, индукция в макрофагах печени НЭ и КФ, усиление направленного движения моноцитов крови с высокой степенью активности НЭ в печень, а нейтрофн-лов -в легкие.При этом в отношении адгезивной активности АШ1,содеркания в их популяции "пенистых" клеток, клеток с признаками выраженной ниро-вой дистрофии и клеток, не проявляющих активности пероксидазы,выявлены зависимости "концентрация-время-эффект".Линейные зависимости "время-эффект" выявлены такав в отношении содержания макрофагов печени и уровня активности НЭ в моноцитах крови й КФ в АШ1 при воздействии ЩЩ в концентрации I мг/л и числа вымываемых из легких нейтрофилов и уровня активности КФ в макрофагах печени при воздействии НДМА в концентрации 10 мг/л (рис.2). ■ •

Сравнительный анализ полученных результатов позволил заключить, что повреждение структуры иоиоиуклеарных фагоцитов обусловлено токси- • ческим действием метаболитов НДМА, аккумуляция которых, согласно . Н.Н.Литвинову и соавт.(1987,1988), выявлялась в организме уже на 2-месячном сроке воздействия канцерогена в концентрации 10 мг/л и усиливалась с увеличением длительности воздействия в связи с нарушением механизма их метаболического обезвреживания в гепатоцитах.Прц воздействии НДМА в концентрации I мг/л значительной аккумуляции метаболитов 1 на изученных сроках эксперимента на отмечалось.При этом компенсаторная

10 г*п.

ТО нес.

Рис. 2. Зависимости изменения функционального состояния АМЛ от ."гор ня СА,Б,В) и длительности (Г.Д.Е) воздействия ВДМА (Р / 0,05). А,Б ) Г - 5-месячное воздействие, 2 - Ю-месячно» воздействие; В - 10-месячное воздействие ЩЩА; Г,Д,Е).1 - воздействие НЕМА г концентрации I мг/л, 2 - воздействие ИДМА в концентрации 10 сг/л.

и...тиьцция исшомуклеарних фагоцитов при воздействии НДОА ииела направленность на усилении ропаративной регенерации и противоопухолевой зщиин печени и злииннацив о азро-эпителиальной поверхности легких 1У..:аруктурировашшх клеток и липиднцх частиц,

Дшииияа изменения структурно-функционального состояния

СМФ при воздействии этанола

Этанол в концентрации 100 г/л вызывал через 2 иесяца воздействии угнитонне процесса ионоцитопозза, о чаи свидетельствовало достоверное (£¿0,05) снижение числа ШШ11 в 1,8, моноцитов крови -в 2, АИЛ - в 2,5 и микрофагов печени - в 1,6 раза.

В популяции АЫЛ оточено достоверное снижение числа ионоцитоидшхх к лоток о неболъшш содержанием в цитоплазые лизосоы и фагосоц в 4 раза м уьоличение относительного содержания клеток с лризнакаии выраженной ¡»провой дистрофии, чти "отражало снижение функциональных возиомюстей популяции. Выявлялись признаки угнетения фагоцитарной активности АкЛ, а средний шпеке их идгезивной активности снижался и 2 раза (Р/0,05). Иоиоцнш крови, напротив, характеризовались активацией этих функций. При атом отмечалось усиленна реакций взаимодействия ионоцигов крови и с лимфоцитами, а в легких наблюдалась гииерсскрециа клетск альвеолярного эпигелия.

В моноцитах крови и макрофагах печени наблюдалось увеличении числа складок иа клеточной поверхности и повышение активности НЭ в средяви на Г"1 (Р^0,05)„Это, вероятно, отражало активацию в иононуклаарнцх фагоцитах функций, направленных на астери£икацию парных кислот в печени, что является одной из ранних реакций организма на алкогольное воздействие (В.В.Саров,К.Лаии1а,1Э69).В печени при зтои патологических процессов выявлено на Сило, хотя у ннтактних крыс в ходе всего ¿кснориыента на Фоне нормальной гистоструктуры органа выделялась участки о лнзировашш-иа и деструктурироынньши геиатоцитами и прианакаии жировой дистрофии. Улучшение морфологической картины печени при воздействии зтанола,возможно, в некоторой степени связано с выявленной акгиваииеО ыонинуклеар-¡шх фагоцитов.

Через 5 месяцев воздействия этанола отмечалось усиленно пропоем ноноцитопозза,выражающееся восстановлением содержания МПКМ до контренного уровня и достоверным (Р/0,05) увеличением числа моноцитов крови, АМЛ и макрофагов печени в среднем в 2 раза.При этом выявлены признаки угнетения фагоцитарной и адгезивной активности моноцитов крови,полщл'" ция их клеточной формы и появление в популяции моноцитов клеток с риской (3) степенью активности НЭ на фоне их снижения в 28 раз(Р/0,05) т популяции МПКМ.Это свидетельствовало об усилении миграционной активности МПКМ и моноцитов крови.

Кроме того отмечалось повреждение структуры АШ1 и макрофагов печени и достоверное (Р/0,05) повышение активности в них пероксилазн ir-i 34 и 10% соответственно. При этом в печени и в легких впявлено нарушь -иие липидного обмена, выражающееся развитием жировой дистрофии гепато цитов и увеличением в популяции АМЛ относительного числа "пенистых" клеток и клеток с признаками выраженной жировой дистрофии в 1,5 и раза(Р/0,05) соответственно, В легких отмечены клеточная инфильтрации преимущественно септальных отделов и чередование процессов леоквач-ч-ции и гиперплазии бронхиального эпителия.

Через 10 месяцев воздействия этанола количество МПКМ,моноцитов itpoBii и АМЛ находилось в пределах контрольного уровня,а число макрофл-гоз печени снижалось з !,-'(- раза(Р/0,001) на фоне увеличения числа нзйг рофплоз крови и бронхо-альзеоляркых счнеоз в 1,7 и 10 раз(Р/0,05)соот-ветствешю.Это отражало изиененио направленности дифференцлрозки предшественников грануло-моноцптарпого ряда в сторону пейтрофилов.

В моноцитах крови а МЛ отмечалась снижение активности НЭ я средне« на 10%(Р/0,05), сопровождающееся выраженной агрегацг.?» Л-.5Л ч увели-чепкои числа складок но их поверхности.При этом усиливалась фагоцит?р-пап активность ¿'/¡Л,что выражалось посыпанной в ?-3 рага(Г/0,05) в популяции числа клеток с высоко» содерязниеи лизссст и firoco« (т.о. актнвнофагоцитируидих клзхок) и сродного индекса их ад^кг.рчоЯ ности. Возможно, но усиление функциональной икх:п!'-•<•?'• : л;"1 ><

¿¡¡ли I,ii.iiuj.iiDU активности НЭ, так как известна способность этого фермен-х'гд ротировать эффекты лшафокинов, активирующих их функциональное Олимпии и повышающих миграцию моноцитов в ткани (Ь.аоПпеоп еЬ а1., I; 1 .¡1,1.! за о и усиление способности АМЛ к агрегации свидетельствовало об !1:;тивацш1 под действии лимфокинов (И.С.ФреАдлин,1984).

ь цалрофагах печени активность пероксидазы была увеличена на 10% т. 1- л-.а повреждения их структуры. В печена и легких,наряду с изменения-ии. заиленными на предыдущей сроке воздействия, отмечались процессы Фп.'^исклирозирования тканей и сосудов.

Корреляционный и регрессионный анализ результатов исследования ъими.и линейные ¡зависимости "вреия-зффикт" в отношении увеличения ао'с;олшыого числа нейтрофилов бронхо-альвеоляриых смывов, относитель-иига содержании в популяции АН Л активнофагоцитирувцих клеток и клеток и высокой степенью адгезивной активности.

Таким образом, на ранней сроке воздействия этанола отмечалось угшшиша процесса ионицитопоэза,снивеш!0 числа моноцитов крови и ткани ъ их макрофагов,повышенна фагоцитарной и адгезивной активности моноцитов крови и их угнетение у АМЛ, усиление реакций хзаииодоЦсмшя иэмоци-тов крови i' АМЛ с лимфоцитами,индукция На в ионоцитах крови и шкрофа-1ак печени и увеличение количества складок па их поверхности на фоне 1 шшреекрицин клнток альвеолярного впителил и улучшения морфологический картины печени.

С увнличениеи длительности воздействия этанола отметалось повреь-структуры иакрофагов 1ШЧеии,повииеиие активности в них пероксада-ли, активации фагоцитарной п адгививиой функции АЦЛ, повышение числа ноигрофллов ь кциви и на аиро-зиитвлиакьиой поверхности легких и волно-ооразный характер 'иаиининий количественного содвргшшн во-юнуклеарнше •Ыгоиитоь.урошш активности в них фарцонтов,адгвааышй активности ионо-цитов и ииврелсдалиЯ структуры АЫА на фоне развития мировой дишрофни нечаян и процессов фиброекдйрозированип тканей и сосудов печени и лших.

Анализ взаииоивнзи изцеийниЙ соитоянаи иокмуп'ов крова и тканевых

макрофагов позволил предположить, что воздействие этанола вызывало в ходе эксперимента чередование процессов преимущественной трансформации ■ моноцитов в определенный тип макрофагов: через 2 месяца - в макрофаги — печени, 5 месяцев - макрофаги печени и АМЛ, 10 месяцев - АМЛ. Это, по-видимому, приводило к относительному увеличению числа определенного типа макрофагов на фоно угнетения моноцитопоэза и снижения общего числа тканевых макрофагов, что способствовало усилению макрофагальноП защиты одних органов и ослаблению других. В некоторой степени это позволило объяснить значительную полиморфность клинического проявления алкогольной болезни на ранней'стадии развития, характеризующейся сменой симптомов поражения разных органов (А.С.Мухин и соавт.,1985).

Сравнительный анализ результатов электронномикроскопического и цитохимического исследования'выявил взаимосвязь повреждения структуры макрофагов с повышением в них активности пёроксидазы на фоне нарушения липидного обмена оргайов. Вероятно, повреждение тканевых макрофагов при воздействии этанола во многом связано с активацией в них процессов перекисного окисления липидов.

Обобщение полученных результатов также показало, что компенсаторная активация мононуклеарных фагоцитов при воздействии этанола имела направленность на восстановление липидного обмена печени и элиминацию с аэро-эпитолиальной поверхности легких деструктурироваиных клеток и липидных частиц.

Общие и относительно специфические особенности действия

НДМА и этанола на состояние СМФ

Сравнительный анализ результатов исследования выявил неспепифи-ческие и специфические особенности изменения состояния СМФ в процессе развития канцерогенного и алкогольного эффектов химических соединений. При этом, как отмечалось выше, в качестве неопецифических реакций рассматривались общие для обоих эффектов изменения состояния СМФ, а специфических - наблюдаемые лишь при развинти определенного эффекта.

Ранним неспецифическим проявлением действия ЩЩ и этанола на

|;,и:хи1шие СЫФ являлось угнетение ионоцитопоэза, снижение числа ыоноцн-юь крови и тканевых макрофагов, угнетенна фагоцитарной и адгезивной ичгиыюсги АМЛ, усиление реакций взаимодействия ионоцитоь крови и А11Л „• лимфоцитами. Угнетение функциональной активности АШ1 было обусловлэ-нп опиаинисм числа ыоноц;:юидных клеток и сопровождалось гиперсокреци-ей зниталиальных клеток легких. Последнео, вероятно, обеспечивало эли-и.шации с аэро-зпителиалыюй поверхности органа раздракаадах факторов ч и некоторой степени компенсировало угнетение фагоцитарной активности ¿ПЛ. Усиление реакции взаимодействия «оиоцитов и АИЛ с лимфоцитами огракаяо процесс их вовлечения в реакции иммунитета (И.С.Фрейдлш1,1984)

С увеличением уровня и длительности воздействия НДШ1 и этанола отиочадись нарушение регудяторной фугкции Ш1КН, усиление гранулоцитогсв-за, повреждение структуры моноцитов крови и тканевых макросов, уси-латш фагоцитарной и адгезивной активности АМЛ, перокисного окисления ь них длнидов и способности к агрегации.

Наруцаниа ригулятораой функции ШИШ вмрападось в их неспособности обеспечить количественной содержание аканевых иакрофагев на уровнях, необходимых дня поддержания гоивостиаа органов.При мои иоьрагдениа структуры макрофагов и увеличение в их популяции числа клеток е низкий резервным потенциалом несомненно вызывало сшшонис функциональных возможностей и обусловливало их компенсаторную активации и усилении процесса гранулонитопозза» Последнее приводило ¿: персиотьнции легких неПтрофилаш!, которые совместно с активированными АУЛ, вероятно,обзсие~ :'Еа;ш восстановление липидного обмена органа и элиминацию с их аэро-•-...-¡ио/шльной поверхности деструктурированних клеток. В легких при

»•>'« ».и>:£аойи пшерсекрвцня ашгмлиальиых. клеток, лиифоадьо-шетиоцн-1''>1 ''-»я ¡ш;,;д: ¡оедин, чередований участков дискваиации и гиаерияазаа браькц.ица.ого итпе.'шя, фибоозирошпие тканей. Нричв.и воздеР.с-гвиа НД1АА вызывало Йронтльиого эпвтвлмн в развитие пориброцхи-

ального фиброза, а юадойстзис оганояи -гшюриекрецив альвеолярного •:)ш1тнлия П юшгочцуп И1:;ь1Ш.,!р:Щ11;.) Я Р,'ШКВ1т1Ш фиброзировааня прайму-

цественно в сапталышх отделах легких.

Выявлзнная специфичность структурных изменений легких,вероятно, определялась особенностями метаболизма и токсического действия ЯДМА i этанола на эпителиальные клетки органа, а их ивспоцифачность -поврвл•• нипми, обусловленными активацией защитных клеточных систем и, в частности, А!Ш и нейтрофилов. Последнее предположение основывается на результатах исследований Д.Н.Иаппского и соавт.(1989), показавших,что я-тизация А!.!Л л персистепцип легких нейтрофиламц способна привести к рл-; зитизэ деструктивно-воспалительных процессов. При этом известно, '¡то •$кбросклероз бронхов нередко сопровождается плоскоклеточной метлш;апци\ покровного эпителия (Л.И.Непоупяцпх и соавт.,1985).

Специфическими особенностями действия НДУА па состояние СМФ явилось угкзтзняе апгпгносхл КФ с последуацоИ активацией НЭ и КФ и сняте--иван ¿ктягяоого пзроксгщазп п гакртг^тт. печени, взапкосзязь по вр е-допил структур!? яопонуклзартя фагоцитоз с яарузонаон пзтаболпческпх хапиз?'ов гпводеияя п обззЕраяпвапая гепахопигаки активных аетаболптог, одновременная а;;-:лгац;?я процессов :«шо-'ч гранулоцитопозза, повышение чкет UÜKÍI я !«0::0ЦЯ20в направленная миграция активчрозяппнх

ноноцптов з печень.

Одно'зро.меппая акт^зцкл процессов ?jono— и грапулоцатопоэза ирод-сталллло ccefoft нарушение•закона перенсяасцейоя функциональной актпвноо • хл првдкоокюйздагав грапуло-моноцигарного ряда, способного привести и пх дакошшепротшшиу повргвдсиип п нерегулируемой миграции в органы леПкоцахарпнх яле ток (3.3.ПагарэвскпИ»1935; Г.Н.КрыаановскиЯ,1985). Последнее является однии из взянвйшгх моментов в развитии злокачествен-них процессов в организме ( л.Р.Мапкепз ,1987).При этой следует отметят?, т.го через 19 месяцев воздействия НД?1Л з концентрации 10 иг/л у 60¡S крнс вняглялиеь злокачествогаше новообразования (гепатоциллялярннЯ part лече-нп,саркома поче.':,адекокорцш1Сма и плоскоклаточный ороговелапгитй part легких)(Б.И.Казачкоз,1933).

Специфическими особенностями действия этанола на состояние СМ-?

О

явились активация НЭ в иакрофагах печени с последующей индукцией в них пероксидази, взаимосвязь повреждения структуры цононуклеарных фагоцитов с усилением в них процессов перекисного окисления липидов, чередование процессов дифференцироьки предшественников грануло-ионоцитарного ряда в сторону моно- или гранулоцитопозза и про имущественной трансформации активированных моноцитов в опредеяешшйтш макрофагов, снижение функциональных возможностей их отдельных популяций на фоне относительного усиления других, ъопиоооразьий характер изменений 'количественного содержания мононуклеарниг фагоцитов и повреждения структуры АМЛ.

Таким образом, в основе изменений структурно-функционального состояния СМФ при воздействии НДМА л этанола лакат как специфические,так и неспецифическио процессы, При этом в .МПКМ и АУЛ выявлены в основном несиецифические изменения, в макрофагах печени -специфические, а в моноцитах крови -как специфические, так и неспецифическио,

Результаты исследования позволили такье заключить,что зависимое от уровня и длительности ьоздействия НД11А и этанола нарастание патологи» ческих процессов в органах обусловлено как прямым неблагоприятным действием химических соединении или их метаболитов, так и опосредованным через изменение структурно-функционального состояния СУф действием.

Выявленная взаимосвязь изменений структуры и функции Ш1Ка,ио1юци- -то'в крови и тканевых макрофагов с нарастанием патологических реакций в органах в процессе развитии 0иоа-ффактов хлиичсеких соединений свидетельствует о возможности оценки функционального состояния СИ® и уровня резистентности организма по состоянии моноцитов ироьн.Так, выявленное аа раннем сроке (2 иеонца) ьоздийстзии ЩВД и этанола снижение числа иоио-цитов крови сопровождалось уванм-авиои количества тканевых макрофагов и предшествовало развитию патологических процессов б органах.

Отмеченное с ув.-.-.ачгнийы длительности /воздействия химических-соединений повышение числа моноцитов иц фоне усилашл их фагоцитарно!'., и' адх»-8ивной активности сспровоз:сшшь сниашшем.ц ьа фоне угнетения данных функций и поляризации плиточной формы, •гпбвыаани'ом или восстановлением

до контрольного урозня содержания тканевых макрофагов.

Появление в кровеносном русло моноцитов с высокой степенью активности НЭ или КФ свидетельствовало об усилении миграции иононуклелрных фагоцитов из костного мозга в крозь. При этом увеличение числа моноцитов крови выявлялось в сочетании с повреждениями структуры печени и легких. Нарушение поверхностной архитектоники моноцитов и увеличение в крови числа нейтрофилов и лимфоцитов свидетельствовало об усилении степени выраженности повреждения структуры органов и тканевых макрофагов.

Таким образом, изменения количественного содерглния и структурно-функционального состояния моноцитов крови отражали функциональное состояние клеток эффекторного звена СМФ -тканевых макрофагов и позволяли прогнозировать вероятность развития патологических процессов в органах.

Кроме того, изменение активности ферментов в моноцитах,в частности НЭ и КФ, в основном, были обусловлены активацией различных эффекторннх функций определенных типов тканевых макрофагов, направленной на адаптивную защиту того или иного органа от повреждающего действия зйшичесик соединений.Однако определение биологической значимости для организма изменений цитохимической активности ферментов б моноцитах без структурно-функционального анализа органов и тканевых макрофагов представляется довольно сложным и не всегда возможным.Тем не менее,анализ изменений количественного содержания моноцитов крови человека, активности в них фе}>-ыентов,их поверхностной архитектоники в комплексе с клинико-лабораторш-ии методами исследования состояния организма позволит в значительной мэре выявить уровень его резистентности к действию неблагоприятных факторов.

Для оценки биологического действия химических соединений в экспериментальных исследованиях рекомендуется комплексное изучение клеточных популяций различных звеньев СМФ на фоне анализа изменений структуры основных органов детоксикации организма. Этот комплекс может быть использован в качестве одного из чувствительных тестов для гигиеническоЛ регламентации химических загрязнений окружающей среды.

В и В О Д и

1. Риниец реакцией СЫФ на действие НДМА является угнетенно процесса ионоцитопоэаа, изменение направленности дифференцировки предиест-.. пенников грануло-цоноцнтарного ряда в сторону нейтрофилов, снижение числа ыовоцитов крови и макрофагов, угнетение фагоцитарной и адгезивной активности амл и снимание в них активности ферментов, усиление реакций вачимодойствия моноцитов и АУЛ с лимфоцитами, снижение активности КФ

и повышение иктивности пероксидазц в макрофагах печени.

2. С увеличенной уровня и длительности воздействия НД!ЗА отиечается усиление процессов моно- и гранулоцитопоэза, повреждение структура моноцитов и микрофагов, повышение числа ионоцитарных предшественников

и моноцитов крови и угнетенно их миграции в ткани, активация фагоцитарной и адгизнвноИ активности моноцитов крови и А^Л и их угнетение у макрофагов печгни, усиление процессов перекисиого окисления липидов в АМЛ и их способное'!и к агрогацин, повышение в макрофагах печени активности НЭ и КФ и снижение активности пероксидазц, усиление направленного движении моноцитов крови с высокой активностью НЭ в ночонь, а нейтрофилов - в легкие.

3. Раннел реакцией ШФ на действие этанола является угнетение процесса моноцитонээза, сшиенио числа моноцитов крови и макрофагов,повышение фаюцатарной и. адгезивной активности моноцитов крови и их угнетение у АМЛ, усиление реакций взаимодействия моноцитов, и АН Л с лимфоцитами, повышение активности НЭ в моноцитах крови и макрофагах печени и увеличение количества складок на их поверхности.

4. С увеличением длительности воздействия этанола отиечается повреждение структуры макрофагов печени, повышение активности в них пероксидазц, активации фагоцитарной и адгезивной функций АИД,усиленно их способности к агрегации, фааовость изменений количественного содержания иононуклеарнык фагоцитов, повреждения структуры АМЛ н активации в них. процессов переписного окисления липидов,чередовании процессов активации ионо- и гран}лсиитонооза ц направленности миграции активированных моноцитов крови в печень или легкие.

5. Компенсаторная активация АИЛ при воздействии НДМА и зтлпслп имеет направленность на элиминацию с азро-эпителиальной поверхности легких деструктурированных клеток и липидннх частиц, а макрофпгов печени - на усиление репаративной регенерации и противоопухолевой зациты органа при воздействии НДМА и на восстановление его липилпон1 обмена при воздействии этанола.

6. Неспецифические изменения СМФ при воздействии НДМА и этппр-п выражаются угнетением процесса моноцитопозза,снижением числа монпр^т и макрофагов, фагоцитарной и адгезивной активности АМЛ и усилением реакций взаимодействия моноцитов и АМЛ с лимфоцитами с последующим повреждением структуры моноцитов и макрофагов, усилением фагоцитарна и адгезивной активности АМЛ, процессов перекисного окисления в лйпидов и их способности к агрегации.

7. Специфическими особенностями действия НДМА и этанола на егор' ^ -ние СМФ являются изменения функционального состояния макрофагов п<?т-.;,.-. а также одновременная активация процессов моно- и гранулоцитопоэз-ч ,мгч-рация активированных моноцитов крови в печень, взаимосвязь повре^лппт клеток с нарушением метаболических механизмов выведения гепатоцита»п активных метаболитов при воздействии НДМА и чередование процессов мор

и гранулоцитопоэза.и миграции активированных моноцитов в органы, фап^ вость изменений количества ыононуклоарных фагоцитов,повреждения струк-турн АМЛ и взаимосвязь повреждения структуры макрофагов с усилением л них процессов перекисного окисления липидов при воздействии этанола.

8. Для гигиенической оценки биологического действия химических соединений в экспериментальных исследованиях рекомендуется комплексный подход к изучений морфофункционалыюго состояния СМФ, вклпчаюший определение количественного содержания клеток в центральном, транзиториом и периферическом звеньях данной системы; уровня активности в них с(,-нафтйлацетатэстеразы, а также кислой фосфатази, пероксидазн и содержания липидов в моноцитах крови и макрофагах; структуры поверхностен архитектоники моноцитов крови и макрофагов на фоне аналичя гнотэстру т-'-рн органов и лейкоцитограммы крови.'

Спис'о:; работ, опубликоизнных по теме диссертации

1. Архитектоника поверхности альвеолярных макрофагов.// Архив анатоц.,гис?ол.,эмбр:юл. - 1965. - в.З. - с. 84-89 (в соавторстве).

2. Электронная микроскопия гопатоцитоз при нероральном воздействии НДМА.//С5.: Структурно-функциональные и биохимические механизмы влияния факторов окру:.-.аы.дей сред,л на организм человека и экспериментальных животных. - 1.1., I9W5. - с. 6I-G3 (в соавторство).

3. Уитохочдрил ¡слеток печени при различии:: уровнях воздействия НДОА. Ультраструктурно-Сиохимическио параллели.// Сб.:Канцерогспные

К -нитрозососдииешы и их предшественники - образованно и определение в окруьаыдей среде: Тез.докл. У1 Всесоюзн.симп. - Таллин, 1967. -с. II2-II4 (в соавторстве).

4. Цитологическое и цитохимическое исследование альвеолярных мак- . рофагов легких при пероральноц воздействий НДМА.//С6.: Актуальные вопросы профилактической токсикологии: Тез.докл. -Ереван, IS87.- с.ВО-о2. |

I

5. Удь^раструктура альвеолярных макрофагов легких при пероральноц ! воздэйзтвии НД'М.//Билл.зкспер.биол. и мед.- 1987.-','; I.-C.II4-I17 (в ! соавторстве).

6. Цитохимическое и злектронномикрозкопнчсскоо исследование А.МЛ и моноцитов кропи экспериментальных животных при комплексном воздействии факторов окружающей среды.//Сб.:Гигиена окружающей среди.-1.1., 1987.-

с. 85-86.

7. Цшограмиа бронхо-ильвоолярного смыва у крыс.//Сб.¡Актуальные вопроси стандартизация лаборатории.-: жиьотних для иеднко-бмологичеоких иселедованпП: Тез.докл. -ü.t 1988. - с.159-161 (в соавторстве).

8." Морфологические изменения альвеолярных макроЬагов легких при действии алкоголя и НДМА.//Бюлл,экспер.биол. и мед.-1988,- fe I. -

с. 97-100 (в соавторстве). !

• 9. Изменения количественного содержания мононуклеарних фагоцитов i у крыс npj длительном воздействии НДНА.// Сб.¡Канцерогенные К -нитпозо-соединения и их предшественники - образованно и опроделоние в окружающей среде: Тез.докл. УН Воосоюзн.сисмп.-Таллинн, 1990. -с, 81-82 (в соавторстве).

10. Структурно-функциональные показатели состояния макрофагов печени и легких у крыс при длительном воздействии НДМА.// Tau же.-Таллинн, 1990. -с. 82-83 (в соавторстве). .

Отпечатано во ЫШИметмаше, j

Л-12Х47 от 5.07,90p, Ьак,3224-100.