Автореферат и диссертация по медицине (14.00.02) на тему:Морфофункциональное состояние сенсомоторной зоны коры головного мозга крыс после введения нового лекарственного вещества тиотриазолина

и и о Министерство здравоохранения Украины

»

КРЫМСКИЙ

ордена трудового красного знамени медицинский институт

На правах рукописи

Зидрашко Галина Анатольевна

морфофурчцйоналбное состояние сенсомоторног: зоны коры головного мозга КРЫС после введения нового лекарственного вещества тиотрмзолина

о Специальность 14.00.02 - "Анатомия человека*

Автореферат диссертации на соискание ученой степени -кандидата медицинских наук

симферополь - 1992

Работа выполнена в Запорокском медицинском институте

И а у ч н 1Рй руководит ель-доктор медкшнсстх наук, профессор Б.И.Решегилов.

Научный консулътант-докгор фармацевтических наук, профессор Е.Г.Кнш.

Официальные оппоненты: доктор мед шшнских наук, тгропассор А.А.Бабакин; доктор медицинских наук, профессор Р.П.Клещева.

Ведущая орган! защя-Хаевский медицинский институт.

Запита состоится 1992 г.

У

в /7 час на заседании специализированного совета К 088.24.01 в Крымском ордена Трудового фасного Знамени медицинской институте.

/ 333670. г. Симферополь, бульвар Ленина, 5/7 /.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Кршзкото ордена Трудрвого фасного Знагленн медишнского института.

Автореферат разослан " & " ^¿/Ш^ 1992 г.

Ученый секретарь специализтовак-ного созета, профессор

¡Ж .ОТЕйе.

.,» Актуальность проблемы. Современный уровень нейроморфологии

^ 2 1 Г ',! 1111

более глубокого знания функциональной значимости и чувст-рсти к нейротронным вещем ¿ам отдельных компонентов нейрона, глиальных элементов сосудов и ыежкейрональных связей, в первую очередь ответственных за нормальное или патологическое протекание нервных процессов/С.А.Саркисов, 1980; Б.Н«КвитницкиЯ-Рыжов, 19£Г7/. Знание этих изменений необходимо для понимания механизма действия психотропных препаратов, выбора адекватной дозы и времени их применения. В настоящее время арсенал лекарственных средств, воздействующих на кору головного мозга весьма незначительный и составляет всего сень препарата в/А.Д.МашковскиЙ,1986/. В связи с этим поиски ученых направлены на создание новых лекарственных веществ, влияющих на кору головного мозга/Т«А.Воронина,1989/. о

В последнее время показания к пркм-*«нив лекарственных препаратов, воэдействущих на мозг, значительна расширились. Нейротроп-ные в психотропные средства стали применяться в период беременности у женарш, страдающих различными ааболеватаями/1ЦЕ.Велков и «ь-авт„г19£Й/. Известно, .что не только гр^ы® товрйа^ёния» ■-не дате'у-;'" недоразвитие мозгавовремя^мбриональногатериода жизни, после рождения, как-пра-илв не компенсируется полкостыз. Поэтоиу возникает - необходимость решения вопроса; о возмоюгостистимуляции внутриутробных процессов развитая мозга, т.е. лечение внутриутробного плода в тех случаях, тогда вследсткяи заболевания беременной, пре-натальный онтогенез протекал в условиях» отклоняющихся .от нормы /З.А.Габолин,А.Й.Лукина,1975; ¿оттай ,1968/.

Так нак целсстнуп деятельность мозге, обеспечивают нейрон^-•глиальные комплекси/А.И.Ройтбак, 1982; Н-Ц^еа ,1960г ,

1965/, то изучение морфологических я гистохимичесянх изменения в , нервных и глиальных клетках при действии' нейротропик* вещей» отг- ;

рнвает большие возможности длй" понимания структурно-функциональной взаимосвязи в системе нейрон-глия/Е.А.СкороходоЕа,19ЙЗ/, т.к. в литературе нет единого представления о взаимоотношениях нервных и глиальных клеток при изменении функционального состояния нервной системы.

Данная работа является частьи общей «проблемы, разрабатываемой Запорожским мединститутом, по исследованию биологически зктиеных нешеств. Новый лекарственный препарат, обладающий антиоксиданткым, противогипоксическим, репаративным, умеренным анаболическим действием, а также, подобно пирацетаму, стимулирущий процессы извлечения эиграл; памяти, синтезирован на кафедре фармацевтической химии Запорожского мединотитута/Е.Г.Кныш, 1986/. Решением Фармакологического комитета СССР/протокол. £15 от II сентября 1907/ тиотриазолин разрешен к клиническому изучению.

Цель работы. Изучить морфофункциональные изменения нейронов и взаимоотношения в нейронно-глиальном комплексе сенсомоторной зоны коры головного мозга беременных крыс и потомства после воздействия тиотриазолина. .

Задачи исследования:

1, Дать ыорфофункциональную характеристику структурных эле-" ментов сенсомоторной зоны коры головного мозга беременных крыс в зависимости от вводимой дозы, продолжительности, способа воздействия и времени, прошедшем ¡:ос& введения тиотриазолина.

2, Изучить морфофункциональные изменения в нейронах, глиальных элементах и капиллярах сенсомоторной зоны коры головного мозга беременных крыс после введения тиотриазолина в эффективной, промежуточной и высшей дозах».

3, Выявить особенности, развитая нейроцитов сенсомоторной зоны коры-головного мозга красят 10 возрастов, весь антенатальный

период которых протекал при воздействии тиотриазолина в эффект.-гв-ной дозе через систему мать-плод.

Научная новизна:

I. Впервые изучены реактивные морфофункциональные изменения сенсомоторной зоны кора головного мозга беременных крыс после воздействия нового лекарственного вещества тиотриазолина.

Впервые показано развитие нейронов и взаиморасположение нервных и глиальных клеток в сенсомоторной зоне коры головного моэ-. га у потомства 10 возрастов, антенатальный период которых протекал при действии нового -лекарственного вещества.

Теоретическая и практическая ценность. Ценность исследований .определяется выраженными закономерностями в изменении нейронов, глиоцитов и капилляров, зависящие от дозы, продолжительности, способа воздействия, времени, прошедшем теле введёняя тиотриазолина. Эти данные являются морфологической основой для понимания механизма действия и лекарственного эффекта нового вещества, а такте могут служить одним из критериев при оценке клинического применения тиотриазолина.

Основные положения, выносимые на защиту.

I. Степень выраженности реактивных я деструктивных процессов в сенсомоторной зоне коры беременных крис зависит от вводимой дозы тиотриазолина, продолжительности воздействия и времени, прощедкеы после его введения.

. 2. Реактивные изменения в виде увеличения размеров тела а ядра нейронов, содержания в них нуклеиновых кислот, ударенной глпер-и гипохромии неппчых клеток, повышение численности гяиоцитоРя г.ен-• сомоторной зоне беременных крыс набладаюгея после воздействия"''*;-фективной и промежуточной дозы тиотриазолина.

3. Наряду с реактивными изменениями нейронов, глиоцигоь я на-

яилляров при действии тиотрйазолина в вьгсией дозе определяется интенсивное нарастание дистрофических и деструктивных процессов в виде резкого гиперхроматоза цитоплазмы и ядра, их сморщивания, цитолиза; гипертрофия и гиперплазия глиоцитов, повышенный сателлитов .

4. В ранний период постнатальнога онтогенеза тиотриазолин, введенный через систему мать-плод в эффективной дозе, способствует ускоренному созреванию нервных клеток и слоев сенсомоторной зоны, что проявляется ь статистически достоверном расширении всей коры или отдельных слоев, сохраняющееся до 5-дневного возраста; в снижении плотности расположения нейронов/до 7-го дня/; в увеличении ¡размеров тела и ядра/до 14-ти дневного возраста/; в повышении содержания нуклеиновых кислот в цитоплазме и ядре нейроцигов, приближающееся к контролю у 30-дневных крысят. Степень развития и морфофункциональная характеристика сенсомоторной зоны с 30-дневного возраста в эксперименте практически не отличается от нонтроля.

Реализация результатов исследования. Научные факты внедрены в учебный процесс кафедр анатомии Черновицкого и Минского мединс-татутов, кафедры гистологии Запорожского мединститута.

Апробация работы. Фрашенты диссертации были представлены на ТУ межинститутской областной конференции молодых ученых и спё-. ци2листов-медиков по актуальным вопросам теоретической и практической медицины/Запорожье,5590/; на Пленуме ВРИО АГЭ и Всероссийской научной конференции/Астрахань, 1991/; на научно-практической конференции "Структурно-функциональные единицы и их компоненты в органах висцеральных систем в норме я патологии"/Харьков, 1991/; на Ц-м Белорусском, съезде АГЭ/Минск, 1991/; на заседании Запорожского общества анатомов, гистологов и топографоанатомов/Запорожье, 1991/.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 6 работ.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, глав, посвященных материалу и методам исследования, результатам собственных исследований (2 глэеы), обсуждению полученных данных, выводов, указателя литературы и приложения. Работа изложена на 212 страницах машинописного текста. 3 работе приведено 6Э микрофотографий, 13 графиков, 3 диаграммы, 19 таблиц. Указатель литератур« включает 334 источника (242 отечественных а 92 иностранных).

Материал и методики исследования. Работа выполнена на III беременных крь.сах и 297 крысятах линии Вистар. Опыты ставились в один .сезонный период, в одно и тоже время суток, т.к. из литературы известно, что активность ЦКС и реакция на различные фармакологические вешества подвержена циркаднкм и сезонным колебаниям и зависят от зозраста животных®. С .Дмитриев, 1975; Н.Н.Бровина, А.К. Ситекко,1984; г.уГоЫгаЬ ,1972).

Экспериментальное исследование проведено согласно "Мзтоднчес-с ким указаниям по изучению эмбриотоксического действия фармакологических веществ и влияния их на репродуктивную функцию**, разработанными Фармакологическим комитетом ИЗ СССРС1986) и включает з себя изучение лекарственных средств на 2-х этапах. На 1-м этапе исследовался головной мозг крыс-самок, которым,I раз в сутки вводился тиотриазолин в разных дезах энтеральным и парентеральным путями в различные сроки беременности. Исследуемое веаестэо применялось в 3 периода беременности, поэтому асе крысы-самки были разделены на 3 большие группы, вклвчаавив б себя несколько подгрупп /таб.1/. Доза тиотриазолина рассчитывалась исходя из массы тел? крысы-самки, а также 'в зависимости от способа введения вещества парентерального(гнутримыаечного) или элтеральногоСв полость теяуд-кя с помощью металлического зонда). Исаольэувмые долы ч экспериментальном исследования отряжеям т> табякие Т.

Таблща I

Количество опыпцпс и контрольных беременных крыс, применяемая доза тиотриазолина(Т).

дни введения^ в период бе-( ременности Группы и подгруппы животных ГКнзо 'живог- !ных доза тиотриазолина мг/кг

1-6 день \ Т, высшая доза, в/м , .9 500

" т Физраствор, в/м 7 -

« ? Г, высшая доза, в/ж 7 1000

7? ! Физраствор, в/ж 8 -

6-Т6 день Т, эффективная доза, в/м 7 50

П | Физраствор, в/м В -

П | Т, эффективная доза, в/ж 7 100

1 Физраствор, в/ж 8 -

г? { Т, промежуточная доза »в/м 7 100

» Т, промежуточная доза ,в/ж 5 - 250

? Т, высшая доза, в/м -6 500

Т, высшая доза, в/к 8 1000

16-15 день * Т, высшая доза» в/м 6 500

? Физраствор, в/м 7 -

? Т, высшая доза, в/ж 5 1000

и f Физраствор, в/ж ' 6 -

всего животных

ТТ

На П~м этапе исследовалось потомство, полученное от крыс-самок, которым в течение всей беременности( с 1-го по 21-й день вводился тиотриазолин в эффективной дозе знтеральным(50 мг/кг) и па-рентеральиым(100 мг/кг) путями. Контрольные животные получали, соответственно, физраствор.

Для стандартизации условий вскармливания л каждом помете ос-

тавляли по 8 крысятСА.П.Дыбан я ^оавт.,1986/.

Удаление головного мозга из черепной коробки приводилось по методу lí.Keael» baun (1988). Сенсомоторная зона, соответствующая области РА и РА по карте В.С.Светухиной(1962), латеральной области по И.М.Кокабадзе, Н.А.Костенко(1990), Par I по K.Tdlles(I985í извлекалась методом разделения мозга крысы на диски одинаковой толщины С H.Schierhoru ,1978). Учитывая наличие у. крыс межполушарной двигательной и эмоциональной ассиметрни(0.С.Андрианов, 1982; В.П. Вахов и соавт. ,1987; a.A.Dowliag ,Т9£2; В.Ко1Ъ ,1982), а также межполуиаоной фармакологической асигя/егрпи(Я.3.Максимович и соавт., 1985; ЗГЯаахг! ,1983), исследованию подлежала сенсомоторная зона только правого полушария.

При анализе клинических проявлений действия тистриазолина учи-Ü

тывались характер поведения, внешний ви ,, динамика массы тела подопытных животнкх. При количественных цитологических исследованиях соблюдали рзд методических условий, необходимых для получения сопоставимых данныхСМ.В.Войно-Ясенецкий, Ю.М.Жаботинский, 1970).

Кусоики мозга фиксировали в10? нейтральном формалине, жидкости Карнуа, обезволивали в спиртах-восходящей концентрации, просветлялись в кеилегз а заливали в парафин. Фронтальные срезы толщиной 5-7 шсг окрашивали метиленовш синим и тноннноу по Нисслю; гематоксилин-эозином; галоцианин-хромовымя кгасцами по Эй на рс сну для выявления нуклеиновых кислот с последующей цитофотометрлей на микроскопа ЛШАМ У2. с цитофотоиетричзской насадкой Ф'.ЗЛ-I и ФЗУ-ЗЭ с учетом рекомендация Л.ЗЛепэнера(1974), Л.С.Агроеклна и ссаг-т.,

1976. Содержание нуклеиновых кислот в расчете на одну клетку 9ч-

о

ражали в относительных единицах, умножая среднею оптич?гяу;; платность на объем цитоплазма или ядра ие;1рона(Ц.С.1енчева, Л.З.йерз-нер,1973). Данные содержания нуклеиновых кислот в клетках подспыт-

-10- у

ннх крыс выражались в процентах ло отношению к контролю, принятому за 100£» На препаратах, окрашенных по Нисслю определяли ширину коры к отдельные ее цитвархитектонические слои, процентное соотношение нейронов с различными тинкториальными свойствами, объем тела, ядра и ядрышка, показатели цитоплазменио-ядерных отношений СЦЯО) в нейронах У-го слоя- Во П-ы и Уги слоях исследовались плотность расположения нейронов и глиоцигов, глио-нейрональный иедекс, количество нейронов, не имеющих сателлитов; имеющих I сателлит; 2 и более сателлитов; количество ядрышек и их локализация, диаметр капилляров. Густота расположения нервных и глиальных клеток подс-читывалась с помощью окулярной сетки С.Б.Стефанова(Т974). Измерение линейных размеров осуществлялось с помощью винтового окуляр-микрометра М®-1-15х в двух взаимноперпендикулярных направлениях. Для выявления дендритных ветвлений замораживающие срезы импрегни-ровались азотнокислых серебром по Корогченкр(19'74) .

Цифррвой материал, полученный в исследованиях, обрабатывался по статистическим табявдаы Р.Б.Сгрелкоеа(19Ш) с вычислением сред-неквадратической ошибки в доверительных интервалов средних арафге-тичесиих величин. Построение графической зависимости полученных £> данных проведеяона персональном компьютере ИМ 37/E3L

; резкшмы собственных дасташАнш.

,'.. I» Исследование "беременных Kpic.

Изучение KpK5-caM0ft ?осле введения тиотриазолина с 6-го по 16-й день беременности показало, что направленность и выраженное^ морфофунншонадьных изменений зависит прежде всего от дозы, о чем свидетельствует проведенная комплексная оценка основных морфоыет-рическкх показателей в У-м цитоархнтектоничесяш слое(рис.1) .Пос-V яе приме»»»« эффективяой и промежуточной доз тиотриазолина у эксперимектадьншх крыс отмечалось умеренное повышение двигатель-

P::c!.I. Интегральная отсокка оеакгсн* ноЛзожго-глиаль.чоге

7-го слоя CßKfOMOTODHOfl ко su '5врс«ик!!кх кжсз тсгло s '-■ия тяотпиаяр.дииа и т13Н№с :;сззг(н ; "тнтполч.

- o-jj чг/тгг.

ной активности. Морфологически в сенсомоторной коре определяются реактивные изменения. На фоне общего снижения нормохромных нейронов, эффективная и промежуточная дозы приводят к нарастанию численности умеренно гипо- и гиперхромиых нервных клеток. Причем, эффективная доза способствует более интенсивному нарастании умеренно гиперхромных нейроцитов, имеющих увеличенные размеры и более насыщенную окраску цитоплазмы,и ядра, расширенный апикальный дендрит. Для промежуточной дозы наиболее характерно нарастание умеренно гипохромных нейронов, одни из которых имеют только гипохром-но окрашенную цитоплазму, а другие характеризуются увеличенным просветленным ядром; эктопией ядрышка; узким, четко отграниченным ободком интенсивно окрашенной цитоплазмы. Увеличение численности умеренно гиперхромшхО.Н.Попова и соавт.,1976; Г.Н.Кривицкая и соавт.,1980) и уверенно гипохромных нейронов(Э.Н.Попова, 1968; Ю.Я.Гейнисман, 1974; Х.ЕЬавгаоп, е.Кео$1,1955) рассматриваются этими авторами как повышение функциональной активности, что с морфологической стороны объясняет аналептическую направленность действия й преобладание частого ритма на ЭЭГ, возникающих после применения тиотриазолина в эффективной « промежуточной дозах(В.Р.Сте1£ 1988). Усиление функциональной активности нейронов сопровождается двумя типами изменений в клеточном теле: I)умеренным накоплением РНК и усилением окрашиваемости тела клетки; 2) умеренным расходованием РНК и гипохром^йЯПодобная гетерогенность изменений нейронов может быть объяснена различным функциональным состоянием этих клеток или различной чувствительностью их к действию вещества (В.Н.Клещинов,1981).

Действие эффективной дозы приводит к увеличению на 20,Зь объема тела, на 24,35? ядра и на 30,ядрышка нейронов У-го слоя, по сравнению с контролем. Промежуточная доза вызывает менее зна-

чительное нарастание объема тала (на 4,4£) и ядрышка(на 2а,н

о

более выраженное увеличение ядра(на 36,9%). При этом цитоплазкен-но-ядерное отношение снижается(рис.1) за счет преимущественного нарастания обтема ядра, что свидетельствует об активации процес-С02 внутриклеточного синтеза, посполняюлего расход цитоплазмати-чяского материала(А.А.А!акина,1976).

Гистохимическое и цитофотоыетрическое•исследование содержания нуклеиновых кислот в нейронах У-го слоя выявило увеличение этого показателя при действии эффективной дозы на 41,5+2.02? б цитоплазме и на 36,6+2,01? в ядре; после воздействия промежуточной, соответственно, на 9,4+1,3'? и 15,6+2,3®, что согласуется с исследованиями В_Р.Сгеца(1988) и В.С.Тшшдана(19910. Менее выраженное увеличение содержания нуклеиновых кислот в цитоплазме и ядре, . СБъема тема нейронов, значительное нарастая» объема ядра, интенсивное снижение цитоплазменно-ядерного отношения, сочетающееся с усилением дистрофических и деструктивных процессов(увеличение на 13,9% тела резко гиперхроишх нейронов) после воздействия промежуточной дозы указывает на признаки начинавшегося напряжения в белково-нуклеиновом обеспечении нервных клеток.

Со стороны глиоцитов„наблюдается увеличение их плотности т 10,6% в У-м слое и на 4,3^ во Д-м при эффективной Дозе, и соответственно, на 8,3% м 4,3^ после введения промежуточной. В связи с чем гто-нейрональиый индекс повышается. Деринечрональный индекс в опыте, по сравнения с контролем, меняется незначительно. Изменений со стороны микроциркуляторного русла не определялось.

Таким образом, эффективная и промежуточная дозы не оказывают токсического воздействия на сенсомсторную зону коры мозга.

Высшая доза тиотриазолина при введении с 6-го по Ть-й день беременности вызывает понижение двигательной активности кшс. пз-

ояду с реактивными изменениями отдельных компонентов нейронов, в структуре сенсомоторной коры нарастают дистрофические и деструктивные посцессы, что проявляется образованием клеток-теней, оча-,-зп -.-'¿точного опустои-екия. увеличением процента резко гаперхрсм-г'.-оо'пеиных не^ооног- с интенсивно окрашенной цитоплазмой и яд-ссм. длинным апикальным дэнлритсм. Число таких нейроцитов б У-м :лсе составило паи в/'м введении контроле-3,оч0.1Ю,

эти Г|/т-13,1+0,4Гь(б коктроле-4,8+Э, 18ъ). Вокруг резко"гиперхром-

■гых нейронов определяется расширение перицеллалярных пространств,

е

увеличивается пешнейрональная ггия. Численность нейронов, имеющих 2 и солее сателлитов возрастает во й-м слое на 2.6,з У-м-Лри этом величина перинейронального индекса во 11-м слое лсвьЕаетсг на 2,с% и на 5,9% в У-м(рясЛ). Нарастает плотность расположения глйоцитов, отмечается их гипертрофия и гиперплазия.

3 нейронах У-го слоя объем тела уменьшается на 14,й?, объем ядра увеличивается на 14,2^. При этом щтоплазменно-ядерное отношение значительно снижается за счет уменьшения цитоплазмы. Уменьшение объема тела нейронов на 14,8? обусловлено'по данным В.А.Брум-' 5ерга(1969);Ю.А.Даринского.Т.Е.Норневой(1373);Ю.Н.Гейнисмана(1974). длительней и интенсивной стимуляцией. Й.С.ПерсинаС1972) связывает 1'меньпенир объема нейронов с развитием торможения. Это согласуется с гистохимическими данными по уменьшению на 10,7+2,4% содержа-нуклеиновых кислот в цитоплазме и на 17,2»_3,4Й в ядре у экспе-■::::.«:;'.та.:ьных --.инотннх после воздействия тиотюиазолина с 6-го по --■-•*' г;епоме.нмости в яыешей дозе, что характеризует снижение н1---:?. проча с со*:, а следовательно, и (Глнкцилнальксй актирноети ,-лсгду ><ейронно-глиальннаи комплексами претерпевают изме-омикроциркулятосюго русла, что определяется статис-'•"5 дсстссаспьм сасотданием капишифоэ вс Ц-м и У-м слоях.

Сосуда имеют неровные стенки, перициты неплотно прилегаю*-друг к ДРУГУ'» образуя щели в капиллярной стенке^. Отмечается периваскуляр-ный отек нервной ткани.

Более выраженные структурные изменения наблюдаются б сенсо-моторной коре при действии высше« дозы тиогриазолиха с 16-го по 12-й день беременности у животных, забитых на следующий день после окончания эксперимента. Б опыте определяется снижение двигате-'льяой активности. Выявляется расширение коры на 1,4«. У значите-тельной части нейроцитов отмечается изменение размеров, формы тела и ядра, частичный или полный хроматолиз цитоплазмы и ядра, неравномерное распределение тигроидного вещества, двухядрьпшсовость и эктопия ядрышка. Сред* крупных нейронов У слоя наблюдается признаки набухания. У экспериментальных ярке увеличивается численность резко гипохромных нейронов, что составляет при в/в введении 9,2+ 0,Шв контроле-^,при в/ж-ГЭ,8+0,,2+0,2%) и указывает на состояние тяжелого функционального истощения. Нарастание резко гиперяромных нейроцитов свидетельствует о состоянии активного торможения нервных клеток( Ь^Е±пагзоп, ВлКго^Д955).

При морфометрии нейронов Усяоя ннявлены разнонаправленные изменения объемных отношений отдельных компонентов нервных клеток: объем тела нейронов уменьшаемся ка 10,а размеры ядрышка и ядра увеличиваются, соответственно, на 12,62 и 26,4^, ЦЯО снижается. Содержшше нуклеиновых кислот в цитоплазме уменьшается на . 30,5+3.45а, в ядре-на 20,1+1,В&, что отражает понижение обменных процессов, а следовательно, и функциональной активности при действии высшей дозы.

Увеличение численности глиоцигов при снижении плотности расположения нейронов приводит к нарастанию гото-нейронального индекса, который составил 0,69+р,03(в контролв-0,61+0,02) во Я слое; в

у_м_1,24+0,04(0,9&»р,01). Статистически достоверно увеличивается количество нейронов, имеющих I сателлит, 2 сателлита. Возрастает леринейрональный индекс, который во П-м и У-м сдоях составил, соответственно, 1,16+0,01(в контроле-!,13+0,007) и 1,25+0,009(1,20+ ■>.007). Наряду с извинениями клеточного состава, выявляются значительные нарушения со стороны элементов микроциркуляторного русла. Определяется расширенный просвет артериол, капилляров, венул. Зн-дотелиошты нередко увеличены в размерах, набухшие, *"часть из них

выступает в просвет сосудов, образуя щели. Отмечается выраженный

о

периваскудярный отек ткани мозга, проявляющийся расширением пери-зазального пространства.

Таким образом, даже 4-х дневное введение тиотриазолина в высшей дозе(в Ю раз превышающей эффективную) приводит к значительному падению чйсла норыохромных нейронов и нарастьиГ'а обратимых, дистрофических и3деструктивных изменений в сенсомоторной коре.

Спустя 14 суток после введения высшей дозы тиотриазолина с 1-го по 6-й день беременности в изучаемой зоне отмечаются морфологические преобразования, направленные на нормализацию элементов • нервной клетки, ее структуры и морфометрических показателей. Нарастает численность норюцитарных и нормохромных нейронов. Выраженный юдиморфизм в структуре нервных клеток опытных животных связан с восстановлением первоначального морфологического строения аункпионально измененных нейронов и "созреванием" имеющихся дистрофических я деструктивных процессов. Измерение объемных от-нопзений в нейгпцйтах У слоя показало отсутствие значимых различий аегду объеиси тела н ядра контрольных и .опытных крыс. Гистохимическое определение нуклеиновых кислот свидетельствует о выраженной нормализации метаболических птюцессов, в результате чего со---ргадкя гтих везтст» в цитоплазме составило 95,5+1,9%, в ядре-

-17116,7+2,2/5, относительно контроля, принятого за 100%. Вс П-м и У~м слоях нарастает численность 2х ядрышковых нейронов и нервных клеток-с периферическим расположением ядрышка. Не выявляется знь-чимых различий в плотности расположения нейронов, в значении глио-нейрональняго индекса между опытом я контролем. Со стороны глиоцитов отмечено увеличение густоты их расположения на 8,92 во П-м и на 8,5% в У-м слоях. Перикейрональный индекс составил во П-м слое Г-Лб+0,008(в контроле-1,14+0,009), в У-м-1,22+0,009(1,17+0,007). Сохраняется статистически достоверное увеличение численности нейронов, имеющих I сателлит и снижение количества нейронов, не имеющих сателлитов.

Таким образом, нарастание нормохромных я нормоцитарных нейро-цитов, увеличение числа глиоцитов, повыпение сателлитоза, приближение к контрольному уровню ширины коры, показателей объема и нуклеинового обмена, восстановление структуры эле^нтов микроциркуля-торного русла, повышение количества двухядрызноенх нейронов и ней-роцитов с периферическим расположением ядрышка свидетельствует об активации репаративно-восстановительных процессов в сенсомоториой зоне корыО.Н.Попова и соавт.,1976;Г.Н.Кривицкаи,М.В.Ромасенхе, 1986; М.В.Виноградов и соавт. ,1907).

Морфологические изменение, возникающие в изучаемой зоне коры при в/м и в/ж способах введения тиотриазолина у экспериментальных кшс имеют однотипный характер, однако, несколько более выражены при парентеральном воздействии, что, по-видимому, связано с-инактивацией части биологически активного вещества ферментами желудочно-кишечного тракта.

П. Исследование потомства, самки которого всю беременность получали гиотриазолин в эффективней дозе.

Анализ физического развития животных показал, что эксперимент

-Летально а и контрольное потомство практически не отличается между собой. Однако морфометрические к гистохимические исследования показали, что антенатальное воздействие тиотряазолина в эффективной лозе с.тособстзует ускоренному созреванию нервных клеток и слоев ;екммогорной коры, особенно выраженное в первую неделю посгната-1ьчого оаззятал. Признаки ускоренного созревания корковой пластик-ки у опытных крысят проявляются у новорожденных в расширении на 4,7% всей толщины сенсомоторной коры, в связи с чем снижается плот- ■

ность тасположекия нейронов на 6,1% во П-м и на 8,9? в У-м слоях.

©

Увеличивается численность крупных нейронов с узким ободком цитоплазмы и округлой формой ядра, снижается численность двухядрышко-зых нейронов, которая составила во П-м слое 9,2+1,08?(в контроле-13Д+1,29Х); в У-м слое-2,8+0.76(в контроле-5,2+0,97^). Несколько чаще з эксперименте определяются клетки-тени и очаги клеточного опустошения.

У I- и 3-дневных, опытных крысят ширина изучаемой зоны кеокор- ■ текса увеличивается, по сравнению с контролем, соответственно, на 5,4% и 5,3%. Плотность нейронов во Б-м и У-м слоях снизилась у I-днавных, соответственно, -на 9,7% и б, 155; у 3-дневных-на 6,7% и ■ 14,Наряду с укрупнением ддрцяек, уменьшается в нейронах численность дополнительных ядрышек, что является положительным моментом в процессах созревания нервных клеток коры мозга(Е.Н.Коемарс-кал, 1974). У опытного потомства четче ыу^-га граница между неокор-тек.сон и подлежащим.белым взшествоы. Лучше выражена стратификация нео.чортекса.

Дсотоверное р?.свирение комплекса слоев П^й и У сохраняется и у Г>-яневных животных. На 7,7? до'П-м и на 14,5% а У-м слоях снижь-ется платность расположения нервнвгх клртсгк. Начиная с 5-днеьного зозрчста, 5 эксперименте определяется увеличение количества умерен-

но гиперхромных нейронов, находящихся на более высокой стадии раг,-витня, по сравнению с другим нервнымиоклетками(S.c .Oliirieri,IS69).

У "7-дневного потомства морфометрия ширины коьы и отдельных слоев уже не выявляет достоверных различий по этим показателям мегду экспериментальными и к нтрольными крысятами.0 Однако, снижение плотности расположения нейроцктов составило во П-м слое II,5г, а в У-м-4,9^, приобретая з последнем слое статистически недостоверный характер. В нейронах У слоя выявлено увеличение на 24% объема тела; на 23,1% ядра и на 8,1% ядрышка. В свою очередь, да}-ференцировка нервных клеток и их размер тесно связан с синтезом белка и нуклеиновых кислот в raix(2.ñerschen, a.Xajtha,I979). Определение содержания нуклеиновых кислот в нейронах У слоя выявило значительное их повышение в ядре на 40,4+0,9!? и цитоплазме-51,5* 4,Zfo у 7-дневных животных. Наряду с этим, тенденция к увеличению числа глиоцитод, сочетающееся с повышением количества нейронов с периферическим расположением ядрышка, наблюдаемое у новорожденных, 3-,5- и 7-дневных крысят свидетельствует о повышении функциональной активности нервных клеток, что наряду с активацией биосинтеза нуклеиновых кислот в нейронах может объяснить более раннюю диффе-реяцировку сенсомоторной коры у потомства опытных крыс.

Признаки ускоренного созревания неокортексе у 14- и 21-дневных: экспериментальных крысят значительно менее выражены, чем у животных первой недели постнатальной жизни. Не. определяется различия между контролем и опытом по таким морфометрическим показателям как ширина коры и отдельных слгэв, плотность расположения нейронов и глиоцитов. У опытного 14-дневного потомства отметаете г, увеличение на 13,8? об-ьема тела, на 13,3% ядра и на I4t ядркэтка нейронов У слоя. У 21-дневных крысят эти показатели возрастав?. соответственно, на 4,2%; 6,0? и на 3,5?, к приобрстапт етгтисти-

чески недостоверный характер. В эксперименте, помимо повышения численности умеренна пшерхрамных нейронов, с 14 дня повышаеся количество резко гиперхрсмных нейроцитов в У-м слое, число которых нарастает с возрастом(Н.й.Артюхина,1979). Преобладание резко ги-¡ерхромных нейронов л период постнатального онтогенеза у опытных крыс, видимо, можно рассматривать как один из признаков более ранней зрелости коры. Наряду с увеличением размеров отдельных компо-

v

нентов нейронов отмечается повышение содержания нуклеиновых кислот

у 14-дкевных животных на 41,9% в цитоплазме и на 28,8$ в ядре, у

©

21-дневных, соответственно, на 20,9« и 12,0?; у 30-дневных крысят-на 13.,Ы, и 9,9"?, максимально приближаясь к контрольному уровню.

Таким образом, с возрастом разница в содержании нуклеиновых кислот между контролем и опытом снижается. Повышение метаболизма этих веществ'в эксперименте связано; по-видимому, с анаболическим эффектом тистриазолита(В.Р.Стец,19в8).

У экспериментального потомства отмечается тенденция я увеличению численности глиоцитов(З.Н.Цопова,1976) и перинейрональных сателлитов(Р.А.Чиженкова,1986), что может являться признаком ком-пенсагорно-приспособите-ьнвх реакций, возникавших в ответ на вве-; дение биологически активного вещества.

Мс^фометрические показатели и структура сенсомоторной коры у 30-, 60- и 90-дневных опытных крысят не отличается от контроля, хотя в У-м слое сохраняется некоторое увеличение числа умеренно гиперхронных нервных клеток.

Из вышеизложенного следует, что антенатальное введение тии-риа:;олина не оказывает токсического воздействия на сенсомоторную зону коры головного мозга.

В ы С О д ы

I. Направленность и выраженность структурных изменений нейр|

нов, глиоцитов и капилляров в сенсомоторной зоне коры голодного мозга беременных крьтс зависит от вводимой0дозы, продолжительности воздействия и времени, прошедшем после введения тиотриазолина.

2. Реактирные изменения в вьде увеличения объема тела, ядра и яцрышка нейронов, их умереннП гилер- и гипохромииопри сохрани нии структуры ядрышка и ядра, повышении численности глиоцитов на фон^ повышенного метаболизма нуклеиновых кислот в цитоплазме и ядре нейронов свидетельствует о повышении функциональной активности исследуемого отдела неокортекса после воздействия тиотриазолина е эффективной и промежуточной дозах.

3. Увеличение на 13,9?, по сравнению с контролем, численности сморщенных нейронов с интенсивным гиперхроматозом цитоплазмы

и ядра, а также гистохимически выявленные признаки начинающегося напряжения в белиоао-нуклеиновом обеспечении нейронов определяются при воздействии промежуточной дозы тиотриазолина.

4. Наряду с реактивными изменениями нейронов, глиоцитов и капилляров, высшая доза тиотрмзолина приводит к интенсивному нарастанию дистрофических и деструктивных процессов-,в виде резкого ги-перхроматоза цитоплазмы и ядра нейронов, их смо'ршивания, цитолиза; гипертрофии и гиперплазии глиоцитов, повышенному сателлитозу. Редкая гиперхромия, уменьшение объема нервных клеток и снижение содержания нуклеиновых кислот в их цитоплазме и ядре свидетельствует с понижении функциональной активности и усилении тормозных процессов в сенсомоторной зоне.

5. В ранний пешод постнатальнсо онтогенеза эффективная дез.-, тиотриазолина, введенная через систему мать-плод, спосойстзле:" ускоренному созреванию нервных клеток и'слозр сенсоисторяс," зокк. что проявляется в статистически достоверном расширении все" кош

у новорожденных, 1- и 3-дневных крысят, комплексь слоев 11/1.у

5-дневного потомства; в снижении плотности расположения нейронов, имеющих крупное ядро, лучше выраженную цитоплазму и меньшее число ядрышек.

"б. Ыорфометрические и гистохимические данные выявляют у 7-

-.невных экспериментальных животных, по сравнению с контролем,

достоверное увеличение объема те .а и ядра нейронов У-го слоя, а

также повышение метаболизма нуклеиновых кислот в них. У 14- и 21-

О

дневных крысят разница между контролем и опытом по этим показателям тшеньшается, приближаясь у 30-дневных животных к контре.льне-му уровню.

7. Степень развития и морфо-функциональная характеристика сенсомоторной зоны коры головного мозга 30,60 и 90-дневшх экспериментальных крысят практически не отличается от контрольного потомства.

СПИСОК работ, опубликованных до теме диссертации

1. Авраменно Н.А.,Черковская1.Г,, Наткевич Р.Й., Зидраш-ко Г.А. Синтез и биологическая активность некоторых производи« : 5-тио-1,2,4-триазояов//Пути повышения эффективности фармацевтической науки и практики:Сб.тауч.тр.Заотрож.ыед.шкта.-Запорожье, 1991,- С.255-257. "

2. Зидрашсо Г Д. Морфология сенсомоторной зоны кори головного мозга взрослых кшс//Тез.ддал.1У межинстттутской обл.науч.конф. молодых ученых и специалистов мадикот по актуальным вопросам теоретической и практической медицины.-Запорожье,1990.-С.26-27.

3. Зидрашко Г.А. Морфология сенсомоторной коры головного мозга у потомства при введения беременным* крысам биологически активного еекестза "£"//Гез.догкл-конф."Актуальные вопросы теоретической и практической медицины!.'-£1олтава,1991.-С.119-120,

,4. Ьвдраско Г.А. «орфеметричеекие и гистохимические исслздо-

вания сенсомоторной коры беременных крис в эксперименте/Дпээбл^-мы современной дермато-венерологии и пути-оптимизации ^е лрэпс— давания в вузах:Тез.докл.меннуз.конф.-Запорожье,Ifc9I.-C.49.

о. Зидрашко Г.А. Результаты исследования антенатального воздействия вещества "Е" на сенсомотсрную кору головного мозга крыс /проблемы современной деркато-венерологии и пути оптимизации се преподавания в вузах:Тез.докл.межвуз.конф.-Запорожье, 15Э1.-С.-1Г.

6. Зидрашко Г.А.,Книг Е.Г. Развитие сенсомоторной зоны корк головного мозга потомстьа крыс после введения нового биологически активного вещества "Е"//Л-й съезд анатомов, гистологов и эмбриологов Белоруссии: Тез. докл.-«Зинск, 1991.~С.68.

7. Реиетилов В.И., Зидраско Г.А. Морфогенез сенсомоторной зоны коры головного мозга после введения биологически активного вещества ЯЕ"//Влияние антропогенных факторов, на морфогенез и структурные преобразования органов:"материалы Всерос.яонф.- Астрахань, I99I.-C.I32.

8. Решетилов В.И., Зидрашсо Г.А.•йорфогекез сенсомоторной зоны коры мозга в эксперш/енто//Структурно-функциональные единицы и их компоненты в органах висцеральных систем в норме и патологии: Тез .докл. науч.-практ . конф..-Харьков , 1991.-С. 213.