Морфофункциональная характеристика клеток крови при воспалительных заболеваниях пародонта

Серебрякова, Лариса Евгеньевна

Диссертации по медицине → Стоматология

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.21) на тему:Морфофункциональная характеристика клеток крови при воспалительных заболеваниях пародонта

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Серебрякова, Лариса Евгеньевна Москва 2004 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.00.21

Автореферат диссертации по медицине на тему Морфофункциональная характеристика клеток крови при воспалительных заболеваниях пародонта

На правах рукописи

Серебрякова Лариса Евгеньевна

Морфофункциональная характеристика клеток крови при воспалительных заболеваниях пародонта

14. 00.21- Стоматология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Москва - 2004

Работа выполнена в Центральном научно-исследовательском институте стоматологии МЗ РФ.

Научные руководители:

доктор медицинских наук, профессор Грудянов Александр Иванович, доктор медицинских наук, профессор Григорьян Алексей Суренович.

Официальные опоненты:

доктор медицинских наук, профессор доктор медицинских наук, профессор

Максимовская Людмила Николаевна, Шехтер Анатолий Борисович.

Институт повышения квалификации Ведущая организация: Федерального Управления медико-

биологических проблем при МЗ РФ.

Защита состоится «21» апреля 2004 г. в часов на заседании Диссертационного совета (Д. 208. 111.01) в Центральном научно-исследовательском институте стоматологии МЗ РФ по адресу: 119992, ГСП - 2, Москва, улица Тимура Фрунзе, д. 16 (конференц-зал).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Центрального научно-исследовательского института стоматологии МЗ РФ.

Автореферат разослан марта 2004 г.

Ученый секретарь Диссертационного совета

кандидат медицинских наук

'ЛуЦ..

Е.Л. Стрекалова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Проблема диагностики воспалительных заболева-ний пародонта в настоящее время продолжает оставаться одной из наиболее острых в стоматологии. Высокая степень распространенности и тяжесть течения указанных заболеваний, усугубляемые недооценкой лечащими врачами необходимости адекватной и объективной оценки состояния пародонта в динамике, определяют несомненную актуальность этой проблемы.

Современные лабораторные методы исследования, доступные обычным клиникам, оказываются недостаточно совершенными, дают смазанную картину и поэтому не позволяют решать не только исследовательские, но и практические задачи клинической пародонтологии. Особенно сложной оказывается дифференциальная диагностика глубины поражений пародонта при одних и тех же формах заболевания (гингивит и пародонтит). Именно поэтому совершенствование и внедрение в практику методов, которые позволят улучшить локальную дифференциальную диагностику, определяют в конечном счете адекватность проводимого лечения и до сих пор являются нерешенной задачей.

Анализ многообразия проявлений и особенностей возникновения заболеваний пародонта является предметом наиболее интенсивных исследований в течение последних двух десятилетий ( Т.П. Иванюшко, 1984; И.М. Жяконис, 1985; НА Горячев, 1992; А.П. Канканян, В.К. Леонтьев, 1996; М.Я. Левин, Л.Ю. Орехова с соавт., 1999; Л.Н. Макашовская, В.М. Щищенко, А.Б. Ермакова, 1999; S. Kimura с соавт., 1992; Т. С. Hart с соавт., 1994). Воспаление возникает как местная реакция на воздействие патогенного фактора. Возникший в ответ на местное повреждение ткани очаг воспаления является закономерной реакцией. При этом реакция организма как целого

очага (М.А. Пальцев, Н.К. Хитров, 1999; Д.С. Саркисов, 1999; Н.К. Хитров, 1999).

Изучение локальных проявлений в пародонте является важным с научной и практической сторон так как именно в очаге воспаления разыгрываются основные процессы, определяющие полиморфизм структурных и функциональных изменений в пародонтальном комплексе, следствием чего является нарушение гомеостаза.

Локальные микроциркуляторные расстройства приводят к гипоксии и ацидозу тканей, комплексу патологических изменений (диссоциации белкового гликозаминогликанового комплекса, накоплению уроновых кислот и т.д.). На этом фоне происходит непосредственное воздействие на кровь токсических веществ, образующихся в очаге воспаления, а также накопление метаболитов, которые вызывают изменения зрелых клеток, циркулирующих в крови. Нарушения морфо-функционального состояния клеток кроветворной системы (лейкоцитов), возникающие при протекающих местно патологических процессах, в определенной степени отражают системную ограниченность защитных возможностей организма в целом (И.А. Горбачева, А.И. Кирсанов, Л.Ю. Орехова, 2003).

При всем многообразии исследований, посвященных проблемам оценки воспалительно--деструктивных изменений в пародонте и эффективности проводимого лечения, практические врачи далеко не всегда могут получить четкие ориентиры, обеспечивающие объективную оценку конкретных клинических ситуаций. А между тем, в качестве стабильного и в то же время достаточно объективного параметра оценки патологических изменений в тканях пародонта могут служить морфофункциональные показатели клеток десневой крови. Работы, содержащие сведения об изменениях показателей десневой крови (эритроцитов, гранулоцитов и лимфоцитов), немногочисленны, а сама информация фрагментарна (И.М. Жяконис, 1985; П.А. Пайпалене, 1985;

А.А. Баяхметова, 1997; Т.П. Иванюшко, Г.Н. Емиленко, 1999; Т.С. Hart, L. Shapira, Т.Е. Van Dyke, 1994).

Практически неосвещенной до сего времени остается проблема соотношения локальных изменений и сдвигов на системном уровне по показателей периферической крови. Эта проблема имеет общий характер для любых заболеваний тканей ротовой полости, поскольку при наличии патологического очага в этом регионе формируется необычно высокий гисто-гематический барьер, защищающий организм от распространения инфекции и патологического влияния на гомеостаз тканевого детрита и метаболитов, образующихся в очаге воспаления (Л.Г. Комарова, О.П. Алексеева, 1994).

Все вышеизложенное определяет актуальность затронутых вопросов и позволяет обозначить цель и задачи настоящего исследования.

Цель исследования. Повышение уровня диагностики в пародонтологии путем совершенствования клинико-лабораторных методов, основанных на исследовании и сопоставлении морфологических и функциональных характеристик клеток периферической и десневой крови.

Задачи исследования.

1. Провести сравнительный анализ морфофункциональных характеристик клеточных элементов (лейкоцитов) периферической и десневой крови в норме и разработать на этой основе критерии для нормального состояния пародонта.

2. Оценить морфологическую характеристику эритроцитов периферической и десневой крови у пациентов с пародонтитом.

3. Сопоставить морфологические характеристики отдельных популяций лейкоцитов капиллярной крови десны и периферической крови при пародонтите по количественным и качественным показателям и на этой основе выявить зависимость этих показателей от тяжести патологического процесса.

4. Исследовать цитохимические характеристики лейкоцитов (гранулоцитов и лимфоцитов) крови при различных степенях поражения пародонта до и после лечения.

5. Оценить уровень корреляции между морфологическими и цитохимическими параметрами клеток десневой и периферической крови.

6. Разработать морфофункциональные критерии дифференциальной диагностики воспалительных заболеваний пародонта.

Научная новизна.

Впервые с помощью широкого спектра методов исследований проведено сопоставление морфологических и метаболических изменений клеток периферической и десневой крови у больных пародонтитом.

Впервые осуществлены наблюдения за динамикой показателей цитохимических реакций клеток десневой крови у пациентов с пародонтитом в зависимости от степени тяжести процесса до и после проведения комплексного лечения.

Сформулировано представление о динамическом гисто-гематическом барьере, определяющем соотношение между метаболическими и морфологическими характеристиками десневой и периферической крови у больных пародонтитом.

Практическая значимость работы.

Выявлены следующие критерии оценки степени тяжести воспаления и эффективности проводимого лечения при пародонтите:

1. при прогрессировании пародонтита от легкой до средней степени тяжести наблюдается повышение морфологических и цитохимических изменений в гранулоцитах и лимфоцитах десневой и периферической крови.

2. при тяжелой степени пародонтита происходит изменение соотношений морфологических и цитохимических различий в клетках периферической и десневой крови: уменьшаются различия в количестве лейкоцитов, возникает выраженный лимфоцитоз десневой крови, наблюдается относительное снижение активности щелочной фосфатазы гранулоцитов по-сравнению со средней степенью пародонтита при сохраняющемся высоком уровне кислой фосфатазы, а-нафтил-ацетатэстеразы и гликогена лимфоцитов.

3. развитие пародонтита характеризуется увеличением маркерного фермента фагоцитоза - щелочной фосфатазы - при снижении уровня гликогена и миелопероксидазы в десневой крови. Одновременно в десневой крови возрастает и число, и активность лимфоцитов (по гликогену, кислой фосфатазе и а-нафтилацетатэстеразе).

4. нормализация морфоцитохимических показателей гранулоцитов и лимфоцитов десневой и периферической крови больных пародонтитом является критерием эффективности проведенного лечения.

На защиту выносятся следующие положения:

1. Морфо-цитохимические изменения гранулоцитов и лимфоцитов десневой крови при пародонтите отражают функциональную неполноценность этих клеток.

2. Цитохимические исследования позволяют проследить в динамике влияние проводимого лечения на метаболизм гранулоцитарного и лимфоцитарного ряда клеток в десневой крови.

3. Морфо-цитохимическая характеристика исследуемых популяций является адекватной для динамической оценки ответа больных с пародонтитом на проводимое лечение.

Апробация работы

Основные материалы диссертации доложены на научной конференции ЦНИИС 19 декабря 2003 г.

Предзащитное обсуждение диссертационной работы проведено; на совместном заседании сотрудников отделений пародонтологии, кариесологии и эндодонтии, заболеваний слизистой оболочки полости рта, отделения общей патологии Центрального научно-исследовательского института стоматологии МЗ РФ 22 декабря 2003 г.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 4 печатных работы.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 150 страницах машинописи, состоит из разделов: введение; обзор; литературы; материал и методы; результаты собственных исследований; заключение; выводы; практические рекомендации. Работа иллюстрированна 17 таблицами и 38 рисунками. Указатель литературы содержит 159 отечественных и 106 иностранных авторов.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материал и методы исследования

Объектом морфофункционального исследования в работе явились эритроциты, нейтрофильные гранулоциты и лимфоциты периферической крови и капиллярной крови десны у больных пародонтитом. Проведено обследование 96 человек в возрасте от 20 до 65 лет. Из них 86 человек -пациенты с пародонтитом различной степени тяжести и 10 человек - с интактным пародонтом (контрольная группа). Исследования проводили в динамике: до лечения и после курса лечебных мероприятий, включая хирургические методы (лоскутные операции). Проведено 1572 исследования по цитохимии и 262 морфологических исследования. Больные проходили курс амбулаторного лечения в отделении пародонтологии (заведующий - д.м.н., проф. А.И. Грудянов) ЦНИИСтоматологии.

На основании классификации заболеваний пародонта, принятой в ноябре 1983 года Проблемной комиссией Научного совета по стоматологии АМН СССР в г. Ереване с учетом рекомендаций Ассоциации стоматологов России 2001 года, и согласно клинико-рентгенологическому обследованию все больные с пародонтитом были разделены на следующие группы: легкая степень-13 человек, средняя степень-46 человека, тяжелая степень пародонтита-27 человек.

Контрольную группу составили 10 практически здоровых человек с интактным пародонтом (добровольцы). При отборе лиц для исследования обращали внимание на отсутствие вредных привычек, особенно курения, которые могут отражаться на состоянии местных факторов иммунного ответа. Забор крови осуществляли натощак.

Таблица 1

Распределение больных по степени тяжести процесса

СТЕПЕНЬ МУЖЧИНЫ ЖЕНЩИНЫ ЧИСЛО

ТЯЖЕСТИ БОЛЬНЫХ

ПАРОДОНТИТА

Легкая 6 7 13

Средняя 26 20 46

Тяжелая 15 12 27

Всего 47 39 86-

При диагностике заболеваний пародонта мы пользовались консультацией старшего научного сотрудника отделения пародонтологии к.м.н. О.А.Фроловой.

Всем больным пародонтитом были проведены клинические, рентгенологические и лабораторные методы исследования. Клиническое обследование включало опрос и осмотр пациента, определение пародонтальных индексов. Гигиеническое состояние полости рта оценивали на основании индекса Силнесса-Лоэ (Silness, Loe,1962), для оценки кровоточивости использовали индекс Мюллемана (Muhlemann, 1971) в модификации Коуэлл (Cowell L, 1975), состояние десны у каждого зуба оценивали по индексу ПМА (Parma). Рентгенологическое обследование пациентов проводили в отделении рентгенологии ЦНИИС (руководитель отдела —д.м.н., проф. НАРабухина).

Лабораторные методы. Для решения поставленных задач на основе клинико-цитологического исследования забор крови проводили из периферии (палец) и области десны. Десневую кровь получали из области переходной складки: прокалывали десну стерильной иглой (у лиц с интактным пародонтом) или при проведении профессиональной гигиены (у пациентов с пародонтитом).

Изучали следующие показатели: 1. а). Состояние кроветворения обследуемых пациентов оценивали по гемограмме, полученной на автоматическом гематологическом

анализаторе "АВХ-60" фирмы Роше (Франция), по следующим параметрам: RBC - Red Blood Cells (количество эритроцитов), HGB -Hemoglobin (концентрация гемоглобина), MCV — Mean Cell Volume (средний объем эритроцитов), МСН - Mean Corpuscular Hemoglobin (среднее содержание гемоглобина в 1 эритроците), МСНС — Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration (средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах), RDVV - Red Distribution Width (ширина распределения эритроцитов по объему).

б). Морфологические исследования предполагали изучение клеточного состава и процентное соотношение разных видов лейкоцитов в мазках периферической крови и капиллярной крови десны, окрашенных азур-эозином по Романовскому. При этом определяли характер нейтрофильной зернистости, степень ее выраженности (нормальная, гипогрануляция, токсогенная), подсчитывали число ядерных сегментов в каждом нейтрофиле и вычисляли индекс ядерной сегментации, т.е. среднее число ядерных долей в одном нейтрофиле из 100 подсчитанных. Определяли процентное содержание признаков дисгранулоцитопоэза у пациентов в зависимости от степени тяжести воспалительного процесса,

в). В ходе морфологического исследования лимфоцитов определяли уровень дислимфоцитопоэза (появление широкоплазменных форм лимфоцитов), подсчитывали процентное содержание всех форм лимфоцитов.

2. Клеточный метаболизм изучали на основании цитохимического исследования. В качестве функциональных параметров нейтрофилов крови использовали активность миелопероксидазы (МПО), щелочной фосфатазы (ЩФ), содержание гликогена. Функциональную активность лимфоцитов оценивали по уровню активности кислой фосфатазы (КФ), неспецифической эстеразы (НЭ) с субстратом а-нафтилацетат, по содержанию гликогена.

Цитохимические методы выполняли в соответствии с принятыми требованиями (Г. И. Козинец, С.М. Дульцина, О А Дягилева, 1980), совместно с ведущим научным сотрудником лаборатории гемоцитологии ГНЦ РАМН к.б.н. О.АДягилевой, завлаб, проф. Г.И.Козинец.

При проведении цитохимических реакций использовали рекомендуемый гематологами для повседневной практики метод оценки ферментативной активности лейкоцитов; предложенный Kaplow (1955) и модифицированный Astaldi и Verga (1957), с вычислением среднего цитохимического коэффициента. Этот метод основан на определении степени интенсивности реакции по количеству окрашиваемого вещества в цитоплазме и является в настоящее время общепризнанным.

Микроскопию мазков проводили с помощью светового микроскопа МБИ-3, объектив 100, окуляр К 7х, в масляной иммерсии. . Последовательно в каждом мазке подсчитывали по 100 нейтрофильных гранулоцитов и лимфоцитов, в каждой клетке определяли степень интенсивности реакции. Затем по методу Astaldi и Verga рассчитывали средний цитохимический коэффициент (СЦК) отдельно для каждого из ферментов по формуле: (А 3 + В 2+С 1+Е 0): 100, где 0, 1,2, 3- степень выраженности цитохимической реакции; А, В, С, Е - количество клеток с соответствующей степенью интенсивности цитохимической реакции.

1.Наличие гликогена в клетке определяли с помощью "PAS''-реакции /Periodic acid Schilf/ no McManus /1946/.

2. Для выявления активности щелочной фосфатазы использовали метод М.Г.Шубича (с соавт.,1965).

3. Активность кислой фосфатазы определяли по методу Goldberg, Barka,( 1962).

4. Активность пероксидазы определяли по Loele (1927).

5. Активность неспецифической эстеразы определяли по Hayhoe с соавт.(1964, субстрат L-naphtylacetat).

Цитоморфометрический метод

С целью объективизации воспалительных и деструктивных процессов в тканях пародонта параллельно использовали новый цитоморфометрический метод (Григорьян А.С. и соавт., 1998).

В основе метода лежит изучение клеточных элементов цитограмм отпечатков с десны. Цитологические исследования проводили по 2-м направлениям: 1) оценивали состояние одного из компонентов клеточного пула цитограмм — эпителиальных клеток, образующих поверхностный слой слизистой оболочки десны; 2) изучали соединительнотканные клетки, в частности, лейкоциты, мононуклеары (макрофаги), фибробласты и т.д. Результаты исследования фиксировали с помощью 2 цитологических индексов: Индекса деструкции (ИД), отражающего относительное содержание в эпителиальной популяции клеток с признаками цитопатологии, и Воспалительно-деструктивного Индекса (ВДИ), который основывается на соотношении клеток, входящих в состав воспалительного инфильтрата.

Статистическая обработка полученных результатов.

Цифровые данные обрабатывали с помощью принятых методов математической статистики с использованием параметрического критерия Стьюдента /М, ст, m, ^ p/.

Обработку проводили на ПК IBM PC XT в лаборатории общей патологии ЦНИИС (совместно со старшим научным сотрудником к.х.н. М.Ю.Житковым).

СОБСТВЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ

Количественный анализ содержания лейкоцитов, исследование лейкограмм, комплексное исследование морфоцитохимических показателей нейтрофильных гранулоцитов и лимфоцитов в группе контроля выявили отсутствие каких-либо значимых различий и изменений характеристик в популяциях клеток периферической и десневой крови. Метаболическая активность клеток подчеркивает однотипность уровня их цитохимической зрелости, а также указывает на сохранность этих веществ в лейкоцитах десневой крови.

Результаты исследования гемограмм периферической и десневой крови не выявили достоверных различий (р>0,05) по количественному составу RBG и по величине гемоглобина HGB в популяции эритроцитов у больных с пародонтитом до лечения независимо от степени выраженности воспалительного процесса. Сравнительное изучение основных эритроцитарных индексов MCV, MCH, MCHC, КВУ, расчеты коэффициентов вариации для этих показателей также свидетельствовали о малой вариабельности признаков, типичности средних арифметических величин и однородности исследуемых проб. У отдельных пациентов отмечались явления гипохромии эритроцитов без достоверных (р>0,05) снижений уровня гемоглобина и изменения основных морфологических параметров клеток (МГУ, MCH, MCHC, RDV).

Морфологические изменения в лейкоцитах (гранулоцитах и лимфоцитах) у пациентов с пародонтитом характеризовались повышением частоты морфологического атипизма, изменением активности ферментов и содержания гликогена в этих клетках. Морфологические нарушения в нейтрофилах проявлялись в десневой крови (дисгранулоцитопоэзом в виде токсогенной зернистости и гипогрануляции) при средней степени пародонтита в 33% случаев, при тяжелой - в 68%, в то время как в периферической крови отмеченные изменения были выявлены лишь при тяжелой степени пародонтита в 37,5%. Выявлялись также - нейтрофильные

гранулоциты с цитоплазматической вакуолизацией, однако подобные аномалии встречались очень редко. Нарушения структуры клеточного ядра в виде увеличения числа сегментов до 4,11±0,25 (при норме 2,48±0,06) и как следствие - изменение размеров гранулоцитов (анизоцитоз) определялись только в гранулоцитах десневой крови.

Изменение морфологического состава лимфоцитов также наблюдались только в десневой крови. Отмечалось увеличение числа широкоплазменных лимфоцитов - до 10% (в норме 2-3%), что позволяет говорить о раздражении данного ростка клеток. Лимфоцитограмма периферической крови не изменялась.

Параметры периферической и десневой крови при пародонтите

Колонка А - до лечения: 1 -здоровые (контроль), 2- легкая степень, 3-сред-няя степень, 4- тяжелая степень пародонтита. Колонка Б — после лечения. А До лечения Б После лечения

□ периферия и десна | пис.1 Количество лейкоцитов

При изучении динамики общего содержания лейкоцитов установлено,

что и в десневой, и в периферической крови по мере нарастания тяжести процесса содержание лейкоцитов сначала увеличивается, затем падает. При этом параметры периферической крови хотя в различной степени, но достоверно (р<0,01) коррелируют с параметрами десневой крови (рис. 1 А).

Однако при средней степени тяжести заболевания уровень лейкоцитов в крови десны существенно выше, чем в системном кровотоке. Здесь ярко

выражен гисто-гематический барьер, величина которого сходит на нет при

тяжелой форме пародонтита, когда, по-видимому, происходит прорыв

барьера вслед-ствие ослабления реактивности организма.

В результате проведенного лечения при легкой и средней степенях

пародонтита существенно не меняется содержание лейкоцитов ни в общей,

ни в десневой крови, но уменьшается корреляция между уровнями

лейкоцитов в зависимости от места забора крови (рис. Б 1 ), то есть

показатели приближаются к таковым у здоровых людей (рис. А 1, точка 1).

При тяжелой степени пародонтита количество лейкоцитов остается

сниженным и после лечения.

При сопоставлении количества сегментоядерных нейтрофилов в

периферической и десневой крови до лечения отмечается разный

фракционный состав клеток, свидетельствующий о тяжести воспаления и о

наличии барьера-хемотаксиса (рис. А 2).

Колонка А — до лечения: 1-здоровые (контроль), 2- легкая степень, 3-сред-няя степень, 4- тяжелая степень пародонтита. Колонка Б - после лечения. А. До лечения Б. После лечения

12 3 4

□ периферия ■ десна | рис. 2 Процентное содержание сегментоядерных нейтрофилов

Причем пародонтит легкой степени характеризуется отсутствием корреляции

между компартментами (г=-0,211), тогда как при средней и тяжелой степенях

процесса индивидуальная корреляция наблюдалась на фоне существенных

количественных различий (г=0,616 и 0,774 соответственно). Это означает, что при средней и тяжелой степенях большим отклонениям в десневой крови соответствуют малые сдвиги в периферической крови. После лечения резко уменьшаются фракционные различия между анализируемыми пробами.

До лечения небольшим сдвигам в процентном содержании лимфоцитов периферической крови соответствуют (коэффициенты корреляции достоверны) резкие отклонения, в частности, прирост количества лимфоцитов в десневой крови (рис. 3 А).

Колонка А - до лечения: 1-здоровые (контроль), 2- легкая степень, 3-сред-няя степень, 4- тяжелая степень пародонтита. Колонка Б — после лечения.

Процентное содержание лимфоцитов

Чем тяжелее степень пародонтита, тем выше количество лимфоцитов в очаге. Обнаруженные различия свидетельствуют о том, что гисто-гематический барьер сформирован. Это совпадает с данными о количественном содержании лимфоцитов в десневой крови, проводимыми другими исследователями при пародонтите (И.М. Жяконис, 1985; А.А. Баяхметова, 1997; А.А. Баяхметова, С.С. Жолдыбаев, 1999). В результате лечения на фоне нормализации ликвидируются различия в содержании лимфоцитов между десневой и периферической кровью (рис. 3 Б).

Результаты цитохимического исследования клеток крови при пародонтите значительно расширили понятие о характере патологического процесса, протекающего в тканях пародонта. Описанная выше морфология клеток гранулоцитарного и лимфоцитарного рядов расценена как свидетельство дисгранулоцитопоэза и дислимфопоэза, что подтверждено с помощью цитохимических параметров.

При сравнительном анализе содержания гликогена в популяциях нейтрофильных гранулоцитов в периферической и десневой крови было отмечено, что уровень насыщения клеток этим ингредиентом неоднороден.

Колонка А - до лечения: 1-здоровые (контроль), 2- легкая степень, 3-сред-няя степень, 4- тяжелая степень пародонтита. Колонка Б - после лечения. А До лечения Б После лечения

□ периферия ■ десна ¡рис:. 4 Гликоген нейтрофильных гранулоцитов (СЦК ед. активности)

В области воспалительного очага гранулоциты истощены. Значимое снижение содержания гликогена по сравнению с группой контроля отмечается уже при средней степени пародонтита (р<0,01). В гранулоцитах периферической крови выраженных снижений гликогена не происходит (р>0,05). Такие различия отражают вышеописанное фракционирование нейтрофилов между периферической и десневой кровью. Эти изменения в клетках, очевидно, обусловлены их стимуляцией и напряжением основной функции фагоцитоза: во время резкого увеличения энергетических затрат,

когда наступает усиление гликолиза и происходит реализация цитоплазматических запасов гликогена (рис. 4). Уровень корреляции по содержанию гликогена в гранулоцитах между периферической и десневой кровью невелик и полностью отсутствует при средней степени тяжести пародонтита (рис. 4 А) г = 0,193. После лечения количество выявляемого гликогена в гранулоцитах десневой и периферической крови одинаково (рис. 4 Б). По-видимому, энерготраты гранулоцитов в воспалительном очаге после лечения существенно снизились.

Об увеличении энерготрат в результате фагоцитоза свидетельствует и динамика щелочной фосфатазы гранулоцитов.

А. До лечения

Б. После лечения

Активность щелочной фосфатазы гранулоцитов (СЦК ед. активности)

Изменение данного фермента оказалось наиболее выраженным по сравнению с другими изучаемыми ферментами. Отмечается значительное повышение активности щелочной фосфатазы в гранулоцитах десневой крови.

Так, при легкой степени пародонтита активность увеличилась в 1,5 раза, при средней - в 2,3 раза, при тяжелой степени - в 2,0 раза в сравнении с группой контроля (рис.5 А). Такого значительного повышения активности щелочной фосфатазы в периферической крови не наблюдается. Повышение активности гидролитического фермента щелочной фосфатазы необходимо для разрушения тканевых и клеточных обломков внутри цитофагосом. Относительное снижение активности щелочной фосфатазы при тяжелой степени пародонтита сопровождается и уменьшением количества клеток с активным ферментом (рис 6 А). На основании этих данных можно предположить, что нейтрофильные гранулоциты по мере нарастания тяжести воспаления истощаются энергетически, и в конце концов происходит развитие функциональной недостаточности.

Колонка А - до лечения: 1-здоровые (контроль), 2- легкая степень, 3-сред-няя степень, 4- тяжелая степень пародонтита. Колонка Б - после лечения. А. До лечения Б. После лечения

ИН1НИ ■

, г .........

я ■ V ■

щ 1 ■ё д 1 а В

1 1 В 1 ■ Е

1 1 с 1 ■ ■

■ 1 < * 1 1 ■

щ 1 щ ■ » V ■ Е

Легкая Средняя Тяжелая

90 80 70 60 50 40 30 20 10 а

□ периферия ■десна ( рис. 6

Доля (%) гранулоцитов с активной щелочной фосфатазон

О такой динамике событий свидетельствует одновременное резкое снижение активности миелопероксидазы, являющейся одним из важных

факторов микробицидной системы нейтрофилов. Все это свидетельствует о функциональной неполноценности гранулоцитов при пародонтите.

Сравнительный анализ показателей миелопероксидазы выявил более низкие значения этого фермента в клетках десневой крови. Снижение миелопероксидазы происходило по мере нарастания тяжести пародонтита. Причем дефицит проявляется не только в снижении активности фермента, но и в появлении клеток, вовсе не содержащих данный фермент ( при 100% активности его в норме) (рис. 7 А).

В результате проведенного лечения активность ферментов в популяции гранулоцитов приближалась, но не достигала уровня контроля. Главным признаком эффективности лечения оказалось уменьшение различий между показателями десневой и периферической крови.

Легкая Средняя Тяжелая

□ периферия мдесна | рис. 7

Миелопероксидаза гранулоцитов (СЦК ед. активности)

В связи с этим обращает на себя внимание сохранение большого различия в

активности и количестве клеток с активной щелочной фосфатазой в десневой

крови после лечения пародонтита средней и особенно - тяжелой степени. По

всей вероятности, это отражает незавершенность восстановления после проведенного курса лечения.

В популяции лимфоцитов наблюдается обратная "реакция". Происходит стимуляция метаболической активности лимфоцитов, сопровождающаяся увеличением содержания гликогена в клетке и повышением активности ферментов кислой фосфатазы и а-нафтилацетатэстеразы. Аналогичные данные по изменению метаболизма в лимфоцитах периферической крови при пародонтите, а именно - увеличению активности кислой фосфатазы - были отмечены рядом исследователей (И.Б. Иконникова, 1985; А.Б. Ермакова, 1997). Максимально этот процесс выражен в крови десны: происходит увеличение количества клеток, содержащих гликоген, и увеличение их активности.

Колонка А —до лечения: 1-здоровые (контроль), 2- легкая степень, 3-сред-няя степень, 4- тяжелая степень пародонтита. Колонка Б — после лечения. А. До лечения Б. После лечения

□ периферия И десна | рис. 8

Гликоген лимфоцитов (СЦК ед. активности)

Накопление энергетического материала означает, что клетка находится в фазе подготовки к выполнению своих специфических функций. Повышение гликогена в клетках периферической крови также отмечается уже при средней активности процесса, но процент и степень активности лимфоцитов

ниже, чем в десневой крови (рис.8 А). Следует отметить, что активность гликогена в лимфоцитах десневой и периферической крови у здоровых людей и при легкой степени пародонтита совершенно не коррелирует при индивидуальном сопоставлении (г = -0,092), тогда как при более выраженном воспалении показатели периферической и десневой крови хорошо соответствуют друг другу, несмотря на меньший диапазон сдвигов в периферической крови (е = 0,759 и г = 0,796 соответственно).

Колонка А - до лечения: 1-здоровые (контроль), 2- легкая степень, 3-сред-няя степень. 4- тяжелая степень пародонтита. Колонка Б — после лечения.

рис. 9

Альфа-нафтилацетат эстераза (СЦК ед. активности) В результате лечения во всех обследуемых группах наблюдалось уменьшение содержания гликогена в лимфоцитах в обеих пробах, что согласуется с уменьшением активности лимфоцитов, четко обнаруженной и по другим показателям: точно такая же динамика до лечения и в результате лечения обнаружена по уровням активности а-нафтилацетат эстеразы и кислой фосфатазы лимфоцитов (рис. 8 Б; 9 А,Б; 10 А,Б). Обращает на себя внимание наличие на фоне повышенной активности значительного расхождения в приросте активности этих ферментов при средней и тяжелой степенях пародонтита между клетками периферической и десневой крови.

Очевидно, в очаге воспаления концентрируются более активные клетки. В

этой ситуации анализ лимфоцитов периферической крови маскирует

реальную тяжесть процесса, особенно при пародонтите тяжелой степени.

п периферия ■десна | рис. 10

Активность кислой фосфатазы (СЦК ед. активности)

Таким образом, проведенное исследование дает основание для следующего заключения: при развитии пародонтита параметры белой крови являются существенно более чувствительными показателями степени воспаления и эффективности проведенного лечения, чем параметры красной крови. По всем измеряемым морфологическим и цитохимическим показателям лейкоцитов в целом, а также гранулоцитов и лимфоцитов по отдельности сдвиги, определяемые в десневой крови, до лечения существенно более выражены, чем в периферической крови. Корреляция между сдвигами измеряемых морфологических и цитохимических параметров в клетках десневой и периферической крови меняется по мере развития заболевания и при выздоровлении, после лечения, таким образом, что направления изменений в периферической крови далеко

не всегда соответствуют направлению и величине изменений в десневой крови. Это свидетельствует о формировании при пародонтите гисто-гематического барьера, обусловленного специфическим таксисом лейкоцитов, фракционированием клеток в зависимости от их функциональной активности. Различия во фракциях клеточного состава обеспечивают, с одной стороны, защиту организма от распространения инфекционно-воспалительного процесса, а с другой — изоляцию и более эффективное уничтожение микроорганизмов в очаге воспаления и, наконец, концентрацию (локализацию) усилий организма на подавление воспаления и на стимуляцию восстановительных процессов.

В результате проведенного лечения, как правило, происходит уменьшение морфологических и цитохимических различий между клетками десневой и периферической крови, что можно использовать как критерий оценки полноты выздоровления. В результате лечения, как уже указывалось, большая часть этих сдвигов ликвидировалась тем полнее, чем эффективнее было лечение. В частности, более полная нормализация наблюдалась после лечения легкой степени пародонтита.

Результаты цитоморфометрических исследований показали, что индексы воспаления (ВИ) и воспалительной деструкции (ВДИ) также достаточно плотно коррелируют со степенью воспалительных и деструктивных изменений в пародонте. В ходе лечения наблюдается снижение этих индексов, причем степень этого снижения соответствует эффективности лечебных результатов.

Выявленный параллелизм изменений клеточного состава десневой крови, функциональной активности форменных элементов и цитоморфо-метрических показателей с клиническими проявлениями воспалительных заболеваний пародонта позволяет рекомендовать перечисленные лабораторные параметры в целях ранней диагностики поражений пародонта, объективизации результатов лечения, а также для прогнозирования стабильности достигнутых результатов.

26 Выводы

1. Представлены морфологические и цитохимические характеристики форменных элементов крови здоровых людей с интактным пародонтом и при различных степенях тяжести воспалительных заболеваний пародонта. Полученные данные продемонстрировали идентичность изученных показателей в группе контроля. У больных пародонтитом разной степени тяжести морфоцитохимические показатели изменялись по-разному.

2. В эритроцитах периферической и десневой крови у больных с пародонтитом не выявлено статистически значимых изменений их количества, содержания гемоглобина и морфологических характеристик ДО^, MCH, MCHC, RDV).

3. У больных с пародонтитом выявлены качественные и количественные различия в популяциях лейкоцитов периферической и десневой крови: эти изменения характеризуются наличием токсической зернистости, гипогрануляцией, гиперсегментацией, снижением активности миелопероксидазы и полисахаридов, повышением активности щелочной фосфатазы в гранулоцитах. Увеличено количество широкоплазменных форм лимфоцитов, повышена активность кислой фосфатазы, альфанафтилацетатэстеразы и гликогена в них.

4. По мере развития пародонтита формируется гисто-гематический барьер. В результате этого в периферической крови изменения менее выражены, чем в десневой крови.

5. Для оценки степени тяжести пародонтита могут быть использованы: изменения в десневой крови — содержание лейкоцитов, уменьшение доли сегментоядерных нейтрофилов, лимфоцитоз; повышение уровня щелочной фосфатазы при снижении активности миелопероксидазы и падение содержания гликогена в гранулоцитах; повышение содержания гликогена в лимфоцитах на фоне активации кислой фосфатазы и альфанафтилацетатэстеразы.

Практические рекомендации.

1. Легкая степень пародонтита характеризуется достоверным повышением активности щелочной фосфатазы в гранулоцитах десневой крови, активацией лимфоцитарного звена клеток по кислой фосфатазе, альфа-нафтилацетатэстеразе и гликогену по сравнению с нормальными данными в периферической крови.

2. При прогрессировании пародонтита от легкой к средней степени пародонтита наблюдается относительный лимфоцитоз капиллярной крови десны, появление признаков ДГЦП в гранулоцитах (токсогенная зернистость) и ДГЛП в лимфоцитах (широкоплазменные формы лимфоцитов) десневой крови, а также изменение метаболизма клеток как в периферической , так и в десневой крови в виде : снижения гликогена, дефицита миелопероксидазы, повышения активности щелочной фосфатазы гранулоцитов и активации лимфоцитарного звена - повышения гликогена, кислой фосфатазы а-нафтилацетатэстеразы.

3. Тяжелая степень пародонтита характеризуется наиболее выраженными изменениями клинико-лабораторных показателей десневой крови (лимфоцитозом, ДГЦП и ДЛЦП), а также более глубокими изменениями метаболизма гранулоцитов и лимфоцитов как десневой, так и периферической крови (снижение миелопероксидазы и гликогена, снижениие по сравнению со средней степенью пародонтита щелочной фосфатазы в гранулоцитах десневой крови - при повышенной активности кислой фосфатазы, а-нафтилацетатэстеразы и гликогена в лимфоцитах соответственно).

4. В случае отсутствия активации лимфоцитарного звена по а-нафтилацетатэстеразе можно косвенно судить о состоянии местного иммуннодефицита и как следствие - о возможности утяжеления процесса, его генерализации, хронизации.

5. Нормализация морфоцитохимических показателей гранулоцитов и лимфоцитов в десневой и периферической крови, снижение разницы между двумя компартментами являются критерием эффективности лечения.

ОПУБЛИКОВАННЫЕ РАБОТЫ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Зависимость показателей перекисного окисления в слюне от тактики локального применения диклоран-желе при пародонтите // Стоматология. — 2002. - № 4. — С. 31 -34 ( в соавт. с Грудяновым А.И., Овчинниковой В.В.).

2. Морфофункциональная характеристика клеток крови при пародонтите // Материалы 10 и 11 Всерос. Науч.-практ. конф. и Труды 8 съезда Стоматол. ассоциации России. М., 2003. - С. 239-240.

3. Предварительные клинико-лабораторные результаты использования гомеопатического препарата "Траумель С" в комплексном лечении воспалительных заболеваний пародонта// Материалы 10 и 11 Всерос. Науч.-практ. конф. и Труды 8 съезда Стоматол. ассоциации России. М., 2003. - С. 49-50 (в соавт. с Безруковой И.В., Александровской И.Ю.).

4. Биохимические методы оценки эффективности озонотерапии в комплексном лечении воспалительных заболеваний пародонта // Современные аспекты реабилитации в медицине. — Ереван-Москва, 2003. - С. 34-35 ( в соавт. с Безруковой И.В., Петрухиной Н.Б.).

Подписано в печать 12.03.2004 г. Формат 60x90,1/16. Объем 1,75 п.л. Тираж 100 экз. Заказ №68

Отпечатано в ООО "Фирма Блок" 107140, г. Москва, ул. Русаковская, д. 1. т. 264-30-73 www.blokO1centre.narod.ru Изготовление брошюр, авторефератов, переплет диссертаций.

р- 5642

Оглавление диссертации Серебрякова, Лариса Евгеньевна :: 2004 :: Москва

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

ГЛАВА 3. РЕУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 49 3.1 .Морфофункциональная характеристика клеток периферической и десневой крови у практически здоровых людей

3.2.0сновные параметры эритроцитов десневой крови у больных пародонтитом

3.3.Морфологическая характеристика лейкоцитов при пародонтите до лечения

3.4.Цитохимическая характеристика лейкоцитов при пародонтите до лечения

3.5.Результаты морфоцитохимического исследования лейкоцитов после лечения

3.6. Результаты цитоморфометрического метода исследования

ГЛАВА 4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ 104 ВЫВОДЫ 120 ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ 122 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ И УСЛОВНЫЕ ОБОЗНАЧЕНИЯ

СЦК - средний цитохимический коэффициент

ЦП - цитохимический показатель

МПО - миелопероксидаза

ЩФ - щелочная фосфатаза

КФ - кислая фосфатаза

НЭЛ - нафтилацетат эстераза лимфоцитов

П/я -палочкоядерные нейтрофилы

С/я - сегментоядерные нейтрофилы

НвЬ - концентрация гемоглобина

ИБС - количество эритроцитов

МСУ- средний объем эритроцитов

МСН - среднее содержание гемоглобина в 1 эритроците

МСНС - средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах

- ширина распределения эритроцитов по объему ДГЦП - дисгранулоцитопоэз

ДЛЦП - дислимфоцитопоэз

Введение диссертации по теме "Стоматология", Серебрякова, Лариса Евгеньевна, автореферат

Проблема диагностики воспалительных заболеваний пародонта в настоящее время продолжает оставаться одной из наиболее острых в стоматологии. Высокая степень распространенности и тяжесть течения указанных заболеваний, усугубляемые недооценкой лечащими врачами необходимости адекватной и объективной оценки состояния пародонта в динамике, определяют несомненную актуальность этой проблемы.

Анализ многообразия проявлений и особенностей возникновения заболеваний пародонта является предметом наиболее интенсивных исследований в течение последних двух десятилетий (42, 62, 72, 79, 98, 101, 203, 214). Воспаление возникает как местная реакция на воздействие патогенного фактора. Местное повреждение ткани и возникший в ответ очаг воспаления являются закономерной реакцией. При этом реакция организма как целого направлена на локализацию этого очага ( 122, 134, 145).

В этой связи изучение локальных проявлений в пародонте должно явиться одним из важных направлений в решении проблемы этиологии и патогенеза патологического процесса, лежащего в основе заболеваний пародонта, так как именно в очаге воспаления разыгрываются основные процессы, определяющие полиморфизм структурных и функциональных изменений в пародонтальном комплексе.

Изменения, происходящие в тканях при пародонтите, сопровождаются дисбалансом регуляторных механизмов и как следствие - нарушением гомеостаза. Локальные микроциркулятор-ные расстройства приводят к гипоксии и ацидозу тканей, комплексу патологических изменений (диссоциации белкового гликозаминогликанового комплекса, накоплению уроновых кислот и т.д.). На этом фоне происходит непосредственное воздействие на кровь токсических веществ, образующихся в очаге воспаления, а также накопление метаболитов, которые вызывают изменения зрелых клеток, циркулирующих в крови. Нарушения морфо-функционального состояния клеток кроветворной системы (лейкоцитов), возникающие при протекающих местно патологических процессах, в определенной степени отражают системную ограниченность защитных возможностей организма в целом (40, 145).

При всем многообразии исследований, посвященных проблемам оценки воспалительно-деструктивных изменений в пародонте и эффективности проводимого лечения, практические врачи далеко не всегда могут получить четкие ориентиры, обеспечивающие объективную оценку конкретных клинических ситуаций. А между тем, в качестве стабильного и в то же время достаточно объективного параметра оценки патологических изменений в тканях пародонта могут служить морфофункциональные показатели клеток десневой крови. Работы, содержащие сведения об изменениях показателей десневой крови (эритроцитов, гранулоцитов и лимфоцитов), немногочисленны, а сама информация фрагментарна (13, 62, 72, 124, 203).

Практически неосвещенной до сего времени остается проблема соотношения локальных изменений и сдвигов, проявляющихся на системном уровне, показателей периферической крови, исследуемых в обычных клинических лабораториях. Эта проблема имеет общий характер для любых заболеваний тканей ротовой полости, поскольку при наличии патологического очага в этом регионе формируется необычно высокий гисто-гематический барьер, защищающий организм от распространения инфекции и патологического влияния на гомеостаз тканевого детрита и метаболитов, образующихся в очаге воспаления (7).

Существующий пробел информации о метаболическом и морфологическом состоянии клеток, взятых при пародонтите из десневой крови и из общего кровотока, предполагается восполнить в настоящем исследовании с помощью методов клинической гематологии и цитохимии.

Цель исследования

Повышение уровня диагностики в пародонтологии путем совершенствования клинико-лабораторных методов, основанных на исследовании и сопоставлении морфологических и функциональных характеристик клеток периферической и десневой крови.

Задачи исследования.

3. Сопоставить морфологические характеристики отдельных популяций лейкоцитов капиллярной крови десны и периферической при пародонтите по количественным и качественным показателям и на этой основе выявить зависимость этих показателей от тяжести патологического процесса.

Научная новизна.

Обнаружено, что при воспалительно-деструктивных изменениях в пародонте и в условиях эндогенной интоксикации в наименьшей степени изменяются показатели, характеризующие эритроциты десневой крови.

Получены достоверные различия количественного и качественного состава гранулоцитов и лимфоцитов в десневой крови больных пародонтитом по сравнению с таковыми в периферической крови этих же больных.

Впервые осуществлены наблюдения за динамикой показателей цитохимических реакций клеток десневой крови у пациентов с пародонтитом в зависимости от степени тяжести процесса до лечения и после проведения комплексного лечения, включая хирургический метод (лоскутная операция).

Показано, что десневая кровь является наиболее адекватным источником информации при диагностическом исследовании и установлении диагноза пародонтита, оценке о степени тяжести воспалительного процесса и эффективности проводимого лечения.

Практическая значимость работы.

2. при тяжелой степени пародонтита происходит изменение соотношений морфологических и цитохимических различий в клетках периферической и десневой крови: уменьшаются различия в количестве лейкоцитов, возникает выраженный лимфоцитоз десневой крови, наблюдается относительное снижение активности щелочной фосфатазы гранулоцитов по-сравнению со средней степенью пародонтита при сохраняющемся высоком уровне кислой фосфатазы, а-нафтилацетат эстеразы и гликогена лимфоцитов.

3. развитие пародонтита характеризуется увеличением маркерного фермента фагоцитоза - щелочной фосфатазы -при снижении уровня гликогена и миелопероксидазы в десневой крови. Одновременно в десневой крови возрастает и число, и активность лимфоцитов (по гликогену, кислой фосфатазе и а-нафтилацетат эстеразе).

На защиту выносятся следующие положения

2. Цитохимические исследования позволяют проследить в динамике влияние проводимого лечения на метаболизм гранулоцитарного и лимфоцитарного ряда клеток в десне-вой крови.

Заключение диссертационного исследования на тему "Морфофункциональная характеристика клеток крови при воспалительных заболеваниях пародонта"

ВЫВОДЫ

5. Для оценки степени тяжести пародонтита могут быть использованы: изменения в десневой крови - содержание лейкоцитов, уменьшение доли сегментоядерных нейтрофилов, лимфоцитоз; повышение уровня щелочной фосфатазы при снижении активности миелопероксидазы и падение содержания гликогена в гранулоцитах; повышение содержания гликогена в лимфоцитах на фоне активации кислой фосфатазы и альфанафтил ацетат эстеразы.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Легкая степень пародонтита характеризуется достоверным повышением активности щелочной фосфатазы в гранулоцитах десневой крови, активацией лимфоцитарного звена клеток по кислой фосфатазе, альфа-нафтилацетат эстеразе и гликогену по сравнению с нормальными данными в периферической крови.

2. При прогрессировании пародонтита от легкой к средней степени пародонтита наблюдается относительный лимфоцитоз капиллярной крови десны, появление признаков ДГЦП в гранулоцитах (токсогенная зернистость) и ДГЛП в лимфоцитах (широкоплазменные формы лимфоцитов) десневой крови, а также изменение метаболизма клеток как в периферической , так и в десневой крови в виде : снижения гликогена, дефицита миелопероксидазы, повышения активности щелочной фосфатазы гранулоцитов и активации лимфоцитарного звена — повышения гликогена, кислой фосфатазы а-нафтилацетат эстеразы.

3. Тяжелая степень пародонтита характеризуется наиболее выраженными изменениями клинико-лабораторных показателей десневой крови (лимфоцитозом, ДГЦП и ДЛЦП), а также более глубокими изменениями метаболизма гранулоцитов и лимфоцитов как десневой, так и периферической крови (снижение миелопероксидазы и гликогена, снижениие по-сравнению со средней степенью пародонтита щелочной фосфатазы в гранулоцитах десневой крови - при повышенной активности кислой фосфатазы, а-нафтилацетат эстеразы и гликогена в лимфоцитах соответственно).

4. В случае отсутствия активации лимфоцитарного звена по а-нафтилацетат эстеразе можно косвенно судить о состоянии местного иммуннодефицита и как следствие - о возможности утяжеления процесса, его генерализации, хронизации.

5. Нормализация морфоцитохимических показателей гранулоци-тов и лимфоцитов в десневой и периферической крови, снижение разницы между двумя компартментами являются критерием эффективности лечения.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2004 года, Серебрякова, Лариса Евгеньевна

1. Агеев А.К. Гистохимия щелочной и кислой фосфатаз человека в норме и патологии. JL, "Медицина", 1969, с. 129-130.

2. Абрамов М.Г. Гематологический атлас. М.,: Медицина, 1985. -334с.

3. Алмазов В.А., Рябов С.И. Методы функционального исследования системы крови. М., "Медгиз", 1963, с.15-19.

4. Алов И.А., Брауде А.И., Аспиз М.Е. Основы функциональной морфологии клетки. М., "Медицина", 1969, С.317-318.

5. Аровийский P.A. Цитохимия фагоцитарных клеток у сенсибилизированных животных. Арх. пат., 1975, №9, с. 16-22.

6. Акопов С.Э., Тороманян Э.Н., Канканян А.П., Клинико-цитохимическая характеристика заболеваний пародонта у лиц, находящихся в условиях постоянного перманентного стресса. //Стоматология. 1996. - т.75, №1. - С.30-32.

7. Алексеева О.П. Состояние гемато-саливарного барьера у больных с прогрессирующей стенокардией и инфарктом миокарда. Диссертация докт. мед.наук Нижний Новгород, 1994 с. 35.

8. Акулович A.B. Патология пародонта: часть 2. Диагностика заболеваний пародонта // Мир медицины. 1999. - №5 - 6. - С.8-10.

9. Бахов Н.И., Александрова JI.3. и др. Нейтрофилы и их роль в регуляции метаболизма тканей // Успехи современной биологии. — 1987. т. 104, вып. 2, №5. - С.281-296.

10. Баяхметова A.A. Показатели местного иммунного статуса у больных с патологией пародонта // Экспериментальная и клиническая стоматология. Алматы, 1997. - С.57-61.

11. Баяхметова A.A. Изменение лейкограммы капиллярной крови десны у больных пародонтитом. // Экспериментальная и клиническая стоматология. Алматы, 1997, - С.62-66.

12. Баяхметова A.A. Иммунологические показатели капиллярной крови десны при различных типах адаптационных реакций больных пародонтитом. // Экспериментальная и клиническая стоматология. Алматы, 1988. - С.51-55.

13. Баяхметова A.A., Жолдыбаев С.С., Лимфоцитоз капиллярной крови десны в качестве дифференциально-диагностического теста при воспалительных заболеваниях пародонта // Экспериментальная и клиническая стоматология. Алматы, 1999. - С.51-53.

14. Безруков В.М. Справочник по стоматологии / М.: Медицина, 1998, С. 120-122.

15. Белоклицкая Г.Ф., Пахомова Л.В. Биохимические исследования ротовой и десневой жидкости у больных пародонтитом различной тяжести // Новые методы диагностики и результаты их внедрения в стоматологическую практику. Труды ЦНИИС. — М., 1991. С.57-63.

16. Бережная М.Н. Нейтрофилы и иммунный гомеостаз. -Киев: Наукова думка, 192 с.

17. Белоклицкая Г.Ф., Поздякова Л.М. Иммунологические показатели как прогностические и диагностические тесты при воспалительных заболеваниях пародонта //Вестн. стоматологии. -1996. - №2. - С.30-35.

18. Борзова Л.В., Залецкий JI.JI. Морфофункциональные свойства клеток крови и реологические параметры крови после плазмофереза у больных с нестабильной стенокардией // Гематология и трансфузиология 1991.- 9.С. 11-15.

19. Борисенко А.В., Осинская Л.Ф., Несин А.Ф. Антиокислительная активность слюны при генерализованном пародонтите // BicH. Стоматол. 1995. - №4. - С.253-255.

20. Боровский Е.В., Иванов B.C., Максимовский Ю.М., Максимовская JI.H. Терапевтическая стоматология / М.: Медицина, 1998. С. 404416.

21. Блохин В.П. Клинико-морфологические критерии прогнозирования течения и результат лечения генерализованного пародонтита. Автореф. дисс. к.м.н. Д., 1985.

22. Бисешвили Н.И. Морфо-цитохимические изменения форменных элементов крови больных пародонтитом при хроническом алкоголизме: Автореф. дис. канд. мед. наук — Тбилиси, 1990. 18 с.

23. Бутенко З.А., Глузман Д.Ф. с соавт. Цитохимия и электронная микроскопия клеток крови и кроветворных органов. Киев: Наукова думка, 1974, 247 с.

24. Быкова И.А. Морфологические особенности эритроцитов периферической крови в норме и патологии // Гематология и трансфузиология.- 1991.- 6.-С.28-30.

25. Валиева P.M. Обмен воды и содержание минеральных веществ в жидкостях организма при пародонтите. Дисс. .канд. мед. Наук, М., 1987.

26. Валиева P.M., Мысляева Т.Г., Ли Е.Е. Энергетическая функция нейтрофилов и лимфоцитов у больных хроническим пародонтитом // Рос. стоматол. журн. 2000. - №1. - С.26-27.

27. Василенко В.Х. Пропедевтика внутренних болезней, М., 1974.

28. Венглинская Е.А., Шубич М.Г. О значении щелочной фосфатазы нейтрофилов для их фагоцитарной функции // Бюл. эксперим. биологии и медицины, 1972, №11, С.61-62.

29. Воложин А.И., Филатова Е.С., Петрович Ю.А. Оценка состояния пародонта по химическому составу сред полости рта.//Стоматология. 2000. - №1. — С. 13-16.

30. Габрилович Д.И., Шепелева Г.К., Середровская JI.B. Нейтрофилы как модуляторы активности лимфоцитов при ВИЧ-инфекции // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. — 1994. — 6.- С. 18-21.

31. Гаврилов O.K., Козинец Г.И., Черняк Н.Б. Клетки костного мозга и периферической крови (структура, биохимия, функция). М.: Медицина, 1985.- 286 с.

32. Галанкин В.Н., Токмаков A.M., Юнусходжаев Э.Х. Ультраструктурные проявления мембранной активности нейтрофильных гранулоцитов // Арх.Патологии. 1988.-Вып.7.-С.23-30.

33. Годес Ю.З. Щелочная фосфатаза лейкоцитов как критерий активности туберкулеза легких. Клин, мед., 1966, №12, С.59-61.

34. Гольдберг Е.Д., Степанова Е.И., Титов С.П., Федорович Т.К. Цитохимическое изучение гидролитических ферментов вгемопоэтических клетках // Журн. Пробл. гематол., 1976, №11, С.39-43.

35. Гольдберг Е.Д., Дыгай A.M., Удут В.В. Закономерности структурной организации систем жизнеобеспечения в норме и при развитии патологического процесса. Томск: изд-во Томского унта, 1996.-282 с.

36. Горбачева И.А., Кирсанов А.И., Орехова Л.Ю. Единство системных патогенетических механизмов при заболеваниях внутренних органов, ассоциированных с генерализованным пародонтитом // Стоматология, 2003, № 4, С. 14-17.

37. Горбунова H.A. Эритродиерез при экстремальных воздействиях и его роль в регенерации крови // Гематология и трансфузиология. -1985.-2.-С. 23-27.

38. Горячев H.A. Состояние местного иммунитета при болезнях пародонта // Материалы конф., посвящ. 70-летию общества стоматологов и 100-летию со дня рожд. проф. Домрычевой Е.А.: (тез.) Казань, 1992. - С.37-38.

39. Гребенюк А.Н., Антушевич А.Е., Беженарь В.Ф. Нейтрофил и экстремальные воздействия — СПб.: 1998. 216 с.

40. Григорьян A.C., Грудянов А.И., Антипова З.П. и др. Возможности и роль нового цитоморфометрического метода в диагностике заболеваний пародонта // Пародонтология. 1999. - №4(14). - С.З-7.

41. Григорьян A.C., Грудянов А.И., Ключевые звенья патогенеза заболеваний пародонта в свете данных цитоморфометрического метода исследования // Стоматология. 2001. - т.80, №1. - С.5-8.

42. Грудянов А.И., Биохимические методы исследования различных сред и тканей при воспалительных заболеваниях пародонта // Пародонтология. 1977. - №4. - С.3-13.

43. Грудянов А.И., Безрукова И.В. Иммунологические показатели крови при быстропрогрессирующем пародонтите // Стоматология. 2000. - №3. - С. 15-17.

44. Гублер Е.В., Генкен A.A. Применение непараметрических критериев статистике в медико-биологических исследованиях. JL, "Медицина", 1973, 140с.

45. Данилова М.А. Электронно-микроскопическая и цитохимическая характеристика антимикробной активности нейтрофильных гранулоцитов: Автореф. дисс. . канд. биол. Наук / НИИЭМ АМН СССР-Л., 1986.-20с.

46. Долгих В.Т. Патофизиология обмена веществ. М., 2002.

47. Долгушин И.И., Бухарин О.В. Нейтрофилы и гомеостаз. Екатеринбург: УрО РАН, 2001, С. 29-56.

48. Дунязина Т.М., Калинина Н.М. Новые технологии на современном пародонтологическом приеме // Институт стоматологии. 1999. -№4.-31с.

49. Дунязина Т.М. Концепция перекисно-лизосомальных механизмов в развитии заболеваний пародонта // Новое в стоматологии. — 1993. -С.8-12.

50. Ермакова А.Б. Клинико-цитохимические основы прогнозирования воспалительных заболеваний пародонта: Автореф. дисс. . к.м.н., М., 1997.

51. Ермакова А.Б. Особенности цитохимического статуса больных пародонтитом // Здоровье населения и окружающая среда: Материалы межинститутской научн. конф. — М., 1997. с.82-83.

52. Ерина C.B., Дьячкова С.Я. Цитологические исследования десневой жидкости при воспалительных заболеваниях пародонта. Лабор. дело 1989. №6 - с.14-15.

53. Журавлева П.П. Некоторые аспекты гомеостаза у людей молодого возраста с патологией пародонта. Акт.вопр.стоматол., Алма-Ата, 1989, с. 142 - 146.

54. Жяконис И.М. Изменения содержания лейкоцитов в капиллярной крови десны у больных гингивитом и пародонтитом // Стоматология. 1982. - т.61, №1. - с.26-28.

55. Жяконис И.М., Пайпалине П.А. Состав иммуноглобулинов в сыворотке венозной капиллярной крови десны и в смешанной слюне у больных гингивитом и пародонтитом // Стоматология. -1983. т.62, №2. - с.33-35.

56. Жяконис И.М. Иммунологические аспекты гингивита и пародонтита: Дис. д-ра мед. наук: Каунас, 1986.

57. Жяконис И.М. Гистологическая структура десны у больных гингивитом и пародонтозом // Научные пер. высш. учебн. завед. Литовск. ССР. ТГУ Вильнюс, 1985. с. 10-17.

58. Жяконис И.М. Кинетика лейкоцитов в капиллярной крови десны у больных гингивитом и пародонтитом и её диагностическое значение // Научн. тр. высш. уч. завед. Лит. ССР т.24. Вильнюс, 1985.-с. 18-28.

59. Жяконис И.М. О цитоморфологических особенностях нейтрофилов десневого кармана больных пародонтитом. В кн. Клиническая патология ишемич. б-ни сердца. Тез. докл. Каунас, 1984. с.39-40.

60. Жяконис И.М. Фагоцитарная активность нейтрофилов больных гингивитом и пародонтитом // Тез. I съезда научн. общ. Эстонии. Таллинн, 1988. -с.189-190.

61. Иванов B.C. Заболевания пародонта / М.: Медицинское информационное агентство, 2001. С. 89-109.

62. Иванюшко Т.П., Крымкина Т.Н. Циркулирующие Т- и В-лимфоциты у больных с патологией пародонта // Стоматология -1985. -т.64, №1. -с.15-17.

63. Иванюшко Т.П. Оценка количественных и функциональных сдвигов в иммунной системе у больных пародонтитом. Дис. к.м.н., М., 1984.

64. Иванюшко Т.П., Емиленко Г.Н. Локальная цитоклетотерапия в лечении хронического пародонтита // Междунар. научно-практич. конф."Достижения и перспективы в стоматологии. — М., 1999. т.1. -С.201-203.

65. Ивериели М.В. Цитохимические и ультраструктурные особенности лейкоцитов и эритроцитов при пародонтозе: Автореф. дисс. . канд. Мед. Наук / Тбилиси, 1986. -23с.

66. Ивенский В.Н. Современные диагностические методы в изучении механизмов развития воспалительных процессов пародонта // Новое в теории и практики стоматологии. — Ставрополь, 2002.- С. 93-97.

67. Иконникова И.Б. Показатель клинического течения и эффективности лечения пародонтита по данным энзиматическойактивности лейкоцитов периферической крови:

68. Автореф. дис. . канд. мед. Наук / М., 1985. 18с.

69. Иулдошхонова А.С., Маматкулова З.М. Кпинико-иммунологические параллели при лечении болезней пародонта у детей препаратом ИПС 19 // Труды VI съезда. Стоматол. Асс. России. - М., 2000. - с.209-211.

70. Ипполитов Ю.А., Лепехин Л.И., Куклина Е.А. Морфофункциональная оценка многослойного плоского эпителия десны на этапах развития патологического процесса в тканях пародонта // Труды VI съезда Стоматол. Асс. России. М., 2000. -с.207-207.

71. Каплан Е.С. Значение активности ферментов лейкоцитов периферической крови в диагностике острых деструктивных процессов брюшной полости: Автореф. дисс. . канд. наук / Москва, 1972, 14с.

72. Канканян А.П., Леонтьев В.К. Болезни пародонта. Новые подходы в этиологии, патогенезе, диагностике, профилактике и лечении Ереван, 1998, с.551.

73. Карупу В.Я. Электронная микроскопия. -Киев: Вища школа, 1984. -208 с.

74. Катюхин Л.Н. Реологические свойства эритроцитов. Современные методы исследования // Физиол. журн. им. И.М. Сеченова 1995. -6.-С. 122-129.

75. Кейзер Л.С. Физиологические колебания некоторых цитохимических показателей нейтрофилов периферической крови. Лабор. дело, 1977, №8, с.467-469.

76. Кирсанов А.И., Горбачева И. А. Кровь. Клетки периферической крови, их функции и оценка диагностической значимости // Пародонтология. 1999, №2, С. 53-56.

77. Козинец Г.И. Исследование системы крови в клинической практике. — М.: Медицина, 1997. 380с.

78. Козинец Г.И., Высоцкий В.В., Погорелов В.М. Кровь и инфекция. -М.: Триада-фарм, 2001. С.197 - 202.

79. Козинец Г. И., Дульцина С.М., Герасимова H.A., Дягилева O.A. Цитохимическая характеристика гемопоэтических клеток здоровых людей. Москва, 1980.

80. Кокряков В.Н., Пигаревский В.Е., Алешина Г.М., Шамова О.В. Синергическое антимикробное действие катионных белков при фагоцитозе // Моделирование и клиническая характеристика фагоцитарных реакций: Сб. науч.тр. — Горький 1989. - С. 98-103.

81. Кокряков В.Н. Биохимические основы антимикробной активности нейтрофильных гранулоцитов // Клиническая морфология нейтрофильных гранулоцитов: Сб. науч. тр. Д., - 1989. - С. 12-51.

82. Коровина В.И. Метод определения неспецифических эстераз в клетках гемопоэза Лабор. дело, 1978, №9, с.523-525.

83. Кочубей JI.H. Особенности метаболизма лейкоцитов периферической крови в динамике течения хронического гломерулонефрита: Автореф. дисс. . канд. наук/ Москва, 1977, 15с.

84. Лаврентьева H.A. Динамика ферментативного профиля лейкоцитов крови как критерий функционального состояния организма. Ж. и сан., 1973, №10, с.42-45.

85. Лецкий В.Б. Цитохимические исследования лейкоцитов. — Л., 1973, 32с.

86. Люлякина Е.Г. Оценка эффективности лечения воспаления пульпы и периодонта по состоянию ферментной активности лейкоцитовпериферической крови у лиц молодого возраста: Автореф. дисс. . канд.мед.наук/М. 1995.

87. Леонтьев В.К., Канканян А.П. Локальная активация лейкоцитов и тромбоцитов при заболеваниях пародонта // Стоматология. — 1996. №1. - с.26.

88. Лебедев К.А., Понякина И.Д. Ускоренные методы иммунологической диагностики в стоматологии // Профилактика стоматологических заболеваний. — Воронеж, 1989. — С. 53-55.

89. Лёвин М.Я., Орехова Л.Ю., Антонова И.Н., Сафронов Б.Н. Иммунологические показатели слюны и крови при воспалительных заболеваниях тканей пародонта // Пародонтология. 1999. - №2(12) -с.10-13.

90. Лемецкая Т.И. Клиническая оценка показателей специфической и неспецифической местного иммунитета полости рта при воспалительных заболеваниях пародонта // Метод рекомендации, М., 1984.

91. Луговская С.А., Морозова В.Т., Почтарь М.Е., Долгов В.В. Лабораторная гематология. Москва: Юнимед-пресс, 2002, С. 11-43.

92. Максимовская Л.Н., Щищенко В.М., Ермакова А.Б. Прогнозирование характера течения пародонтита по данным клинико-цитохимических показателей // Труды V съезда стоматол. Ассоц. России.-М., 1999.-с. 155-156.

93. Максимовский Ю.М., Робустова Т.Г., Чукаева H.A. Оценка иммунного статуса больных острым и обострившимся хроническим пародонтитом // Стоматология, 1991, №2. - С. 26-29.

94. ЮЗ.Маринова Е.Б. Общие и местные факторы специфической и неспецифической резистентности у больных пародонтитом // Автореф. дисс. . канд.мед.наук/М., 1985.

95. Мащенко И.С. Значение иммунологических и нейрогуморальных расстройств в патогенезе пародонтита. Казань, 1990. - с. 11-12.

96. Мащенко И.С., Хмара А.Ю. Клинико-диагностическое значение лизосомальных факторов нейтрофилов и Р- белков у больных с воспалительным заболеванием пародонта // BicH. стоматол. 2002. - №2. - с. 10-12.

97. Маянский А.Н. Актуальные проблемы фагоцитоза // Моделирование и клиническая характеристика фагоцитарных реакций: Сб.науч.тр. -Горький, 1989. -С. 5-15.

98. Маянский А.Н., Галиуллин А.Н. Реактивность нейтрофила // Успехи соврем. Биологии. -1990. -1. -С. 90-105.

99. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге. Новосибирск: Наука. Сиб. Отд-ние, 1989. - 334 с.

100. Медицинские лабораторные технологии и диагностика: Справочник. Медицинские лабораторные технологии / под ред. проф. А.И. Карпищенко. СПб.: Интермедика, 1998. —408 с.

101. Миронов A.A., Комиссарчик Я.Ю., Миронов В.А. Методы электронной микроскопии в биологии и медицине: Методическое руководство. СПб.: Наука, 1994. —400 с.

102. Ш.Михеева А.И., Кадров B.C., Клионская А.Г. и др. О нормах ферментативной активности лейкоцитов. Лабор. дело, 1970, №1, с.5-7.

103. Морозова В.Т. Лабораторная диагностика лейкозов. М., 1977., С. 17-34.

104. ПЗ.Нагоев Б.С. Ферментативная и фагоцитарная активность лейкоцитов у больных пневмонией. Лабор. дело, 1978, №7, с.394-398.

105. Нагоев Б.С. Очерки о нейтрофильном гранулоците. Нальчик: Эльбрус, 1986. - 144 с.

106. Никуличева В.И., Хусаинова Ф.С., Хасанов Р.Я., Смирнова Л.И. Диагностическое значение цитохимических исследований лейкоцитов крови при инфаркте миокарда. Лабор. дело. 1997, №3, С. 148-150.

107. Некрасова С.П. Прогнозирование исхода генерализованных болезней пародонта // Заболевания пародонта и иммунная система. — Казань, 1990, С. 14-15.

108. Новикова М.А. Клинико-биохимическое обоснование использования комплекса биоантиоксидантов в комплексном лечении генерализованного пародонтита // BicH. стоматол. — 2000. -№4. с.27-28.

109. Оглоблина О.Г. Биохимические механизмы участия нейтрофилов в реакциях острого воспаления (обзор) // Вопр.мед.химии. — 1988. -5.-С. 2-9.

110. Орехова Л.Ю., Левин М.Я., Софронов Б.Н. Соотношение гуморальных и клеточных аутоиммунных процессов при воспалительных заболевания пародонта // Пародонтология. — 1997. №4. - с.14-15.

111. Орехова Л.Ю., Бубкова Л.Н., Глазанов Т.В., Розанов H.H. Роль изменений в системе иммунитета при заболевания тканей пародонта // Пародонтология. 1999. - №1. - С. 27-28.

112. Орехова Л.Ю., Левин М.Я., Калинин В.И. Сравнительная оценка аутоиммунных процессов при воспалительных заболеваниях пародонта // Стоматология. Спец. вып. Материалы III съезда Стоматол. Ассоц. (Москва, 9-13 сентября 1996г). 1996. - С.71-72.

113. Пальцев М.А., Хитров Н.К. Патология клетки. Дистрофия, атрофия и некроз // Руководство по общей патологии человека. М.: " Медицина", 1999, С. 42-67.

114. Пауков B.C., Кауфман О .Я. Структурно-функциональная характеристика нейтрофилов и их роль в формировании воспалительных и иммунных процессов // Арх. патологии. — 1983. т.45., вып. 5. С.3-13.

115. Пайпалене П.А. Оценка комплексного лечения гингивита и пародонтита по клинико-иммунологическим показателям: Автореф. дис. . канд. мед. наук/ М., 1985. 19с.

116. Плескановская Н.В., Майборода Ю.Н. Оценка эффективности лечения пародонтита по состоянию ферментативной активности нейтрофилов периферической крови // Новое в теории и практике стоматологии. Ставрополь, 2002. -С. 156-160.

117. Петрович Ю.А., Мароко И.Н. Биохимические аспекты патологии пародонтита // Международная научно-практическая конференция "Достижения и перспективы в стоматологии". — М., 1999. — т.1. -С.270-272

118. Пигаревский В.Е. Зернистые лейкоциты и их свойства. М.: Медицина, 1978. -128 с.

119. Пигаревский В.Е. Полиморфноядерный лейкоцит и макрофаг в реакциях воспаления и гиперчувствительности // Арх. Патологии. -1983. Т. 45,N 11.-С. 14-22.

120. Пигаревский В.Е. Лизосомально-катионный тест // Клиническая морфология нейтрофильных гранулоцитов: Сб.науч.тр. Л., 1988. -С. 87-101.

121. Робустова Е.Г., Лебедев К.А. Иммунологические исследования в профилактике и прогнозировании течения одонтогенныхвоспалительных заболеваний // Профилактикастоматологических заболеваний. М., 1986. - С. 93-95.

122. Самойлович В.А., Данилова А.Е. Использование показателей иммунологической реактивности для оценки эффективности лечения пародонтита // Стоматология . — 1990. — т.69, №6. С. 2628.

123. Саркисов Д.С. Общая патология человека, ее основные положения и значение для практической медицины // Руководство по общей патологии человека. М.: "Медицина", 1999, С. 34-42.

124. Сафаров Т.Х. Иммуноморфологические изменения в десне у больных пародонтитом // Морфо-функциональные и клинические аспекты проблем стоматологии: Матер, научн. практ. конф. — Донецк, 1993. - 4.1. - 95 с.

125. Серебрянская М.В. Лимфоциты крови и их цитохимическая активность у больных язвенной болезнью в различные сезоны года. Клин.мед. 1992. - №2. - С. 73-75.

126. Сивовол С.И. Клинические аспекты пародонтологии // М.: "Триада-Х", 2001, С. 49-65.

127. Соколов В.В., Иванов Л. А. Значение цитохимического исследования ферментов в лейкоцитах крови для диагностики некоторых метаболических состояний организма. // Тер. архив. — 1975. т.47, №6. - С. 106-111.

128. Соловьева A.M., Котюрова О.Л. Клинико-иммунологические параллели в течении начальных форм воспалительных заболеваний тканей пародонта у лиц юношеского возраста. // Актуальные проблемы стоматологии. СПб., 1998. - С. 56-57.

129. Струков А.И. Пауков B.C., Кауфман О.Я. Клеточный скелет лейкоцитов в норме и патологии // Арх.патологии. 1983. - Т. 45, N6.-С. 81-87.

130. Трезубов В.Н., Мишнев Л.М., Соловьев М.М., Краснослободцева O.A. Диагностика в амбулаторной стоматологии // С.-Пб. СпецЛит, 2000, С. 68-72.

131. Фрадкин В.А. Диагностика аллергии реакциями нейтрофилов крови. - М.: Медицина, 1984. - 272 с.

132. Франклин Т., Сноу Дж. Биохимия антимикробного действия: Пер. с англ. М.: Мир, 1984. - 238 с.

133. Хейхоу Ф.Г., Кваглино Д. Гематологическая цитохимия: Пер. с англ. М., 1983.-320 с.

134. Хитров Н.К. Воспаление // Руководство по общей патологии человека. М.: "Медицина", 1999, С. 264-297.

135. Цепов Л.М. Сравнительная информативность клинико-лабораторных показателей при пародонтите // Стоматол. 1985, т. 64, №3-С. 31-33.

136. Цепов Л.М., Морозова В.Г., Николаев А.И. Комплексный подход к диагностике и лечению хронического генерализованного пародонтита // Стоматология. 2001. - т.80, №1. - С. 35-37.

137. Цепов A.M., Николаев А.И. Межсистемные связи при болезнях пародонта // Пародонтология. 2003. - N2. - С. 19-23.

138. Черницкий E.A., Воробей Е.А., Воробей A.B. Структура и функции эритроцитарных мембран. Минск: Наука и техника, 1981.-215 с.

139. Шидлаускас А.Й. Морфофункциональные особенности нейтрофильный лейкоцитов у больных гингивитом и пародонтитом: Автореф. канд.мед.наук/ Каунас, 1985. 214 с.

140. Шмаров Д. А., Рябенков В.В., Перший В.Н. Изучение распределения эритроцитов по размерам // Лаб.дело. 1987. - N4. -С. 271-273.

141. Шубич М.Г., Нагоев Б.С. Щелочная фосфатаза лейкоцитов в норме и патологии. М.: Медицина, 1980. - 224 с.

142. Эмануэль B.JI. По мере развития клинической лабораторной диагностики медицина все больше из области искусства избранных становится наукой одаренных // Лабораторная медицина. 1999, № 2, С. 5-13.

143. Adams A.M., Soames J.V., Searle R.F. Cultural and morphological characteristics of human periodontal ligament cells in vitro // arch. Oral Biol. 1993.- Vol. 38, №8. - P. 657-662.

144. Astaldi G., Verga L. The glycogen content of the cell of lymphatic leukemia // Acta Haemat. 1957. -Vol. 17. - P. 129.

145. Astemborski J.A., Boughmann J.A., Myric P.O., Goodman S.B., Wooten R.K., Agarwal S., Vincent J.W., Suzuki J.B. Clinical and laboratory characterization of early onset periodontitis // J. Periodontol. 1989; 60: 557-563.

146. Axelral A.A. Some haemopoetik negative regulators // Exp. Haematol. 1990.-Vol. 18.-P. 143-150.

147. Babior B.M. Oxidants from phagocytes: Agents of defense and destructions // Blood. 1993. - Vol. 64, N5. - P. 959-966.

148. Bainton D.F. The Cells of information: A General Viev // Cell Biology of Information / Ed. By G. Weissmann. New York: Elsevier-North Holland Publ. Co., 1980.-P. 101-163.

149. Baker J.J., Iondreau S.P. The stimulation of human peripheral blood lymphocytes by solubilized dental plague: Macrophage and T-cell dependence //J. Periodontol, 1985, Vol. 56, №7. P. 410-421.

150. Barrington E.P., Nevins M. Diagnosing periodontal diseases // J. Am Dent Assoc. 1990; 121 : 460-464.

151. Baynes J., Dominiczak M.N. Medical Biochemistry. L.: Mosby, 1999.

152. Becker E.L., Ward P.A. Biochemical characterization of the activated esterase required in the complement-dependent chemotaxis of rabbit polymorphonuclear leukocytes // J. Exp. Med. 1967. Vol. 125, N6. -P. 1021-1030.

153. Berlin N.J., Berk P.D. The Red Blood Cell / Ed. Sungenor D.M.N.Y.,1975. P. 958-1020.

154. Berkov R.L., Dodson R.W. Functional analysis of the marginating pool of human polymorphonuclear leukocytes // Am. J. Haematol. -1987.-Vol. 24.-P. 47-54.

155. Brom J., Raulf M., Konig W. Generation, metabolism and binding of leukotrienes by prestimulated human neutrophils // Immunobiol. 1988. - Vol. 147, N 12. - P. 4271-4277.

156. Buchmann R., Hasilik A., Van Dyke T.E., Lange D.E. Amplified Crevikular Leukocyte Activity in Aggressive Periodontal Disease // J Dent Res 81 (10): 716-721, 2002.

157. Buckleu L.A. The diagnosis of periodontal disease: a review // J.Ir dent Assoc. 1988; 34: 103-106.

158. Campbell P.A. The neutrophil, a professional killer of bacteria, may be controlled by T-cells // Clin. And Exp. Immunol.- 1990. Vol. 79, N2. -P. 141-143.

159. Carranza F.A., Newman M.G. Clinical Periodontology. Philadelphia: W.B. Saunders Co., 1996, 782 p.

160. Caton J.G., Quinones C.R. Etiology of periodontal diseases // Curr OpinDent. 1991; 1: 17-28.

161. Cieciura L., Rydzynski K., Pieta P. The ultrastructure of the mitochondrial membrane revealed by freeze-fracturing // Folia histochem. Cytohem. 1984. Vol. 22. - P. 234-235.

162. Clare R.A. Perspective: The human neutrophil's respiratory burst oxidase // J. Infect. Diseases. 1990. - Vol. 161. - P. 1140-1147.

163. Charon J.A., Joachim F., Sandele P.J. Paradontic dinigue moderne: de la literature a la realite. Paris: Ed. CLP, 1995. - 150 p.

164. Christgau M., Caffesse R. G., Newland J. R., Schmalz G., and R.N. D'Souza Characterization of Immunocompetent Cells in the Diseased Canine Periodontium // J. Histochem. Cytochem., Desember 1, 1998; 46(12): 1443-1454.

165. Del Fabbrio M., Francetti L., Pizzoni L. Fisiologia dei neutrofi: ruolo e meccanismi di azone nella risposta immune a livello dei tissuti gengivali // Minerva stomatol. 2000. - Vol. 49, № 5. - P.227-248.

166. Del Fabbrio M., Francetti L., Pizzoni L., Weinstein R.L. Difetti conceniti dei neutrofili e malattia parodontale // Minerva stomatol. 2000. -Vol. 49, № 6.- P. 293-311.

167. De Nardin E. The molecular basis for neutrophil disfunction in early-onset periodontitis // J. Periodontal. 1996; 67: 345-54.

168. Dreyer W.P. Technological advances in the clinical diagnosis of periodontal diseases. Int Dent J. 1993; 43: 557-566.

169. Erslev A.J., Gabuzda T.G. Pathophisiology of blood. N.Y., 1975. -346 p.

170. Eleu B.M., Cox S.W. A biochemical study of serine proteinase activities at local gingivae tissue sites in human chronic periodontitis // Arch. Oral Biol. 1990. - Vol. 35, №1. - P. 23-27.

171. Evant B.L., Gibos W.N., Lewis S.M., McArthur I.R. Fundamental Diagnostic Hematology. Anemia. Second Edition / World Health Organization. 1992. — 136 p.

172. Feldher C. Strukture and Funktion of the Nuklear Envelope. In: the Strukture and Function of Cyromosomes. Ciba Foundation Symposium 28 (New Series), New-York, American Elsevier, 1975. -P. 447-451.

173. Fishbach F. A manual of laboratory and diagnostic test. 6 th ed. -Philadelphia etc: Rippincott, 2000. - 13, 1295 p.

174. Forman H.J., Thomas M.J. Oxidant Production and bactericidal activity of phagocytes // Ann. Phisiol. (Palo Alto, Calif.). 1986. - Vol. 48.-P. 669-680.

175. Friend D.S. Freeze-facture // J. Electron microsc. Techn. — 1986. -Vol. 4.- P. 87-95.

176. Fujita T., Tokunara J., Inouse H. Atlas of Scanning Electron Microscopy in Medicine. Amsterdam, 1971. - 382 p.

177. Gabay J.E., Scott R.W., Campanelli D.S. Antibacterial proteins of human polymorphonuclear leukocytes // Proc. Nat. Acad. Sei. Usa 1989.- Vol. 86, № 14. - P. 5610-5614.

178. Gartner L.P., Hyatt J.L. Color Atlas of Histology. Baltimore ect.: Williams and Wilkins, 1992. -682 p.

179. Geddes A.N., Kirchen M.E., Marsehall G.Y. Localisation of leukocyte alkaline phosphatase in human neutrophils // Acta haematol., 1975, Vol. 53, № 3. P. 145-151.

180. Gemmell E., Seymour G.J. Cytokine profiles of cell extracted from humans with periodontal diseases // Journal of Dental Research, Vol. 77, P. 16-26, 1998.

181. Gemmell E., Yamazaki K., Seymour G.J. Destructive Periodontitis Lesions Are Determined by the nature of the lymphocytic Response // Crit. Rev. Oral. Biol. Med., January 1, 2002; 13 (1): P. 17-34.

182. Genco R.G., Goldman H.M., Coben D.W. Contemporary periodontics. Philadelphia: Mosby, 1990. - 730 p.

183. Gillett I.R., Johnson N.W., Curtis M.A., Griffiths G.S., Sterne J.A., Carman R.J., Bampton J.L., Wilton J.M. The role of histopathology in the diagnosis and prognosis of periodontal diseases // J. Clin Periodontal. 1990; 17: 673-684.

184. Grant D.A., Stern I.B., Listgarten M.A. Periodontics. St. Louis: The Mosby Company, 1988, 1154 p.

185. Greenwell H., Bissada N.F., Wittwer J.W. Periodontics in general practice: perspectives on periodontal diagnosis // J. Am Dent Assoc. 1989; 119: 537-541.

186. Gunz T. Extra cellular release of antimicrobal defensing by human polymorphonuclear leukocytes // Infec. And Immunol. 1987.- Vol. 55, № 3. - P. 568-571.

187. Hart T.C., Shapira L., Van Dyke T.E. Neutrophil defects as risk Factors for periodontal diseases // J. Periodontal. 1994; 65 (5 suppl): 521-9.

188. Henry J.B. // Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods. Twentieth Ed., W.B. Saunders Company, 2001.

189. Hibbs M.L., Hogarth P.M., Collins P.R., McKenzie J.F. The cell surface phenotype of mouse neutrophils // J. Immunogenet. 1985. -Vol. 12, №4-5.- P. 247-257.

190. Hitzig C. Infection bacterienne et parodontites actuelle // Chir. Dent. Er. 1981. - Vol. 55, № 28. - P. 59-63.

191. Hoffbarnd A.V., Lewis S.M. Postgraduate Haematology // Butterworth-Heinmann. 1989. - 715 p.

192. Irade M., Ropars C., Vooren C., Chassaigne M. Technical Aspects of Human Red blood Cell Carriers Methodology // Red blood cells as carriers for drugs: Potential therapeutic Application, Oxford, New York: Pergumon, 1987. - P. 223-231.

193. Iranil L., Nowman H.N. Periodontal diseases // Immunological aspects of oral diseases. Lancaster etc. - 1986. - P. 85 - 100.

194. Jamalik N., Caglayan F., Kilinc K. The importance of data presentation regarding gingival crevicular fluid myeloperoxidase and elastase-like activity in periodontal disease and health status // J. Periodontol. 2000. - Vol. 71, № 3. - P. 460-467.

195. Johanneseenet I.V. Electron microscopy in diagnostis pathology / Lisbon: Portuguese soc. of patology . 1984. 224 p.

196. Kaplow L.S. Leukocyte alkaline phosphatase cytochemistri: application and methods // Ann. N. Y. Acad. Sci. 1968. - Vol. 155. -P. 911-928.

197. Karchuvaara L., Tenovuo J., Sievers G. Crevicular fluid myeloperoxidase an indicator of acute gingival inflammation. Proc Finn Dent Soc. 1990; 86: 3-8.

198. Kimura S., Yonemura T., Hirada T., Okada H. Flow cytometric evaluation of phagocytosis by peripheral blood polymorphonuclear leukocytes in human periodontal disease // Arch Oral Biol. 1992; 37: 495-501.

199. Klebanoff S.G., Clark R.A. The Neutrophil: Function and Clinical Disorders. Amsterdam: North Holland Publ. Co., 1978. - 313 P

200. Klebanoff S.J. Myeloperoxidase-mediated cytotoxis system // The Reticuloendothelial system. New York: Plenum Press, 1980. - Vol. 2. -P. 279-308.

201. Kowolik M.J., Dowsett S.A., Rodriguez Systemic neutrophil response resulting from dental plaque accumulation // J. Periodontal. 2001.-Vol. 72, №3. - P. 146-151.

202. Kuroiwa A., Igisu K., Yano T. Fibronectin exchanges respiratory burst of phagocytes stimulated by zimosan and immune complexes // Immunol. 1988. - Vol. 65, № 2. -P. 177-180.

203. Lacelle P.L., Evans E.A., Hochmuth R.M. Erythrocyte membrane elasticity, fragmentation and lyses // Blood Cells. 1977. - Vol. 3. -P. 335-347.

204. Lamster I.B., Karabin S.D. Periodontal disease progression. Curr. Opin. Dent. 1992; 2: 39-52.

205. Lantz M.S. New insights into mechanisms of bacterial pathogenesis in periodontitis // Curr Opin Periodontal. 1996; 3: 10-18.

206. Lekrer R.J., Hambin J., Cline M.J. Defective bactericidal activity in myeloperoxidase deficient human neutrophils. - Nature 1969, Vol. 223, P. 78-79.

207. Long N.P., Karring Th., Stream C. Proceeding of the 1st European Workshop on periodontology. Quintessenz, 1994.- 478 p.

208. Lojda Z., Gossrau R., Schiebler T.H. Enzyme Histochemistry: A Laboratory Manual. Berlin, Heidelberg, New York: Springer-Verlag, 1979.-278 p.

209. Lindhe J. Textbook of clinical periodontology 2 nd edition Munksgaard. 1989. - 648 p.

210. Liu R.K., Cao C.F., Meng H.X., Gao Y. // Polymorphonuclear neutrophils and their mediators in gingival tissues from generalizedaggressive periodontitis // J. Periodontal. 2001. - Vol. 72, № 11.-P. 1545-1553.

211. Manakil J.F., Sugerman P.B., Li H., Seymour G.J., Bartold P.M. Cell-surface proteoglycan expression by lymphocytes from peripheral blood and gingiva in health and periodontal disease // Journal of Dental Research, Vol. 80, 1704-1710, 2001.

212. Manson J.D., Eley B.M. Outline of periodontics. Second edition. -London, Boston, Sidney, Singapore, Toronto: Wellington, 1989. - 2781. P

213. Manson J.D., Eley B.M. outline of periodontics. Oxford: Butterman-Heineman Ltd., 1995, p. 303.

214. Morenz J. Sauerstoffapgangigs Microbizidiemen der neutrophilen Granulozyten // Wiss. Z. Humboldt-Univ. Berlin Math. Naturwiss. R.-1986.-Bd. 35, № l.-S. 23-27.

215. Merte K. Parodontologie fur die Praxis. Leipzig. - Berlin, Heidelberg: Barth, 1992. - 272 s.

216. Murphi C.J. The Neutrophil. Oxford: Plenum Med. Press, 1976. -217 p.

217. Nakamura H., Numabe Y., Kamoi K. Changes in intracellular elastase activity in peripherae blood and salivary neutrophils // Abstr. Jap. Conserv. Dent. 2001. - Vol. 44. - P. 45-46.

218. Nogueira N. Intracellular mechanisms of killing / Immunobiol. Parasitsc. Infec. New-York-London. - 1984. - P. 53-69.

219. Offenbacher S. Neutrophils frorri localized juvenile periodontitis subject have depressed leucotriene B4 synthesis // J. Dent. Res.- 1987. -Vol. 66, Spec. Jas.- 171 p.

220. Over C., Yamalik N., Ersoy F., Eratalay K. Myeloperoxidase activity in peripheral blood, neutrophili crevicular fluid and whole saliva of patients with periodontal disease // J. Nicon Univ. Sch. Dent. 1993 -Vol. 35, №4. - P. 235-240.

221. Page R.G. Host response test for diagnosing periodontal diseases //J. Periodontol. 1992; 63: 356-366.

222. Petit M.D., Wassenaar A., U. van der Velden, W. van Eden, Loos B.G. Depressed responsiveness of peripheral blood mononuclear cells to heat-shock proteins in periodontitis patients // Journal of Dental Research, Vol. 78, 1393-1400, 1999.

223. Rateitschak K.N., Rateitschak E.M., Wolf H.F., Hassell T.M. Periodontology. 2nd edition, revised and expanded. Color Atlas of Dental Medicine. - 1989. -411 p.

224. Repo H. Defects in phagocytic function // Ann. Clin. Res. 1987. -Vol. 19, №4.-P. 263-279.

225. Roitt I., Brostoff J., Male D. // Immunology, Mosby, 1996.

226. Rhodin J.A.G. Histology, A Text and Atlas. New York, Oxford University Press, 1974. -227 p.

227. Seguier S., Godeau G., Reborgne M. Immunohistologic and morphometric analysis of cytotoxic T lymphocytes in gingivitis // J. Periodontol. 1999.- Vol. 70, № 11. - P. 1383-1391.

228. Schludger S., Yudelis R., Page R. G., Johnson R.H. Periodontal disease. Philadelphia. Lea&Febiger, 1990, 759 p.

229. Schwartz M., Lamster I.B., Fine J.B. Clinical Guide to periodontics. Philadelphia: W.B.Sounders Company, 1995, 214 p.

230. Shibata K., Warbington M.L., Gordon B.J. Nitrie oxide synthase activity in neutrophils from patients with localized aggressive periodontitis // J. Periodontol.- 2001. Vol. 72, № 8. - P. 1052-1058.

231. Shibata K., Warbington M.L., Gordon B.J. Defective calcium influx factor activity in neutrophils from patients with localized juvenile periodontitis // J. Periodontol. 2000. - Vol. 77, № 5. - P. 797-802.

232. Straka M. Parodontitis a atherosclerosis //Medicinsky monitor, 2000, № 5. P. 3-7.

233. Sun T. Color Atlas-Text of Flow Cytometry Analysis of Heamatologic Neoplasms, New-York -1993. 221 p.

234. Takeichi O., Haber J., Kawai T., Smith D.J., Moro I., Taubman M.A. Cytokine profiles of T-lymphocytes from gingival tissues with pathological pocketing // Journal of Dental Research, Vol 79,1548-1555, 2000.

235. Tonetti M.S., Imboden M.A., Lang N.P. Neutrophil migration into the gingival sulcus is associated with transepithelial gradients of interleukin-8 and JCAM-1 // J. Periodontal 1998.- Vol. 69, №10.- P. 1139-1147.

236. Van der Valk P., Herman Ch. J. Biology of disease. Leukocyte functions // Lab. Invest. 1987. - Vol. 56, № 2. - P. 127-137.

237. Van Dyke T.E., Serhan C.N. Resolution of Inflammation: A New Paradigm for the Pathogenesis of Periodontal Diseases // Journal of Dental Research, 82(2): 82-90, 2003.

238. Van Dyke T.E., Levine M. J., Tabak L.A., Gengo R.J. Juvenile periodontitis as a model for neutrophil function: reduced binding of the complement chemotactic fragment, C5a // Journall of Dental Research, Vol. 62, 870-872, 1983.

239. Van Dyke T.E., Vaikuntam J. Neutrophil function and dysfunction in periodontal disease // Curr Opin Periodontol. 1994; 2: 19-27.

240. Watanable K., Lambert L.A., Niederman L.G., Punwani I., Andersen B.R. Analysis of neutrophil chemotaxis and CDllb expression in prepubertal periodontitis // Journal of Dental Research, Vol. 70, 102-106, 1991.

241. Warnes T.W. Alkaline phosphatase. Gut. - 1972. - Vol. 13. - P. 926-937.

242. White G.J., Gallin J.D—' ^PTiagocyte defects // Clin. Immunol, and Immunopathol. 1986. - Vol. 40, № 1. - P. 50-61.

243. Wintrobe'S. Clinical Hematology // Lea and Febiger, Philadelphia -London. Ninth Edition. 1993. Vol. 1. -P. 1297-1304.

244. Williams D.A. The stem cell model of hematopoeses / Hematology. Baltimore: Williams & Wilkins. 1995. - P. 92-180.

245. Williams J.J. Hematology. Forth Ed., 1992. 180 p.

246. Wilson T.G., Kornman K.S. Fundamentals or periodontics // Tokyo: Quintessence Publishing Co., 1996, 564 p.

247. Wilson T.G., Kornman K.S., Newman M.G. Advances in periodontics. Singapore: Quintessense Publ. Co., 1992, 383 p.

248. Zucker-Franklin D. Physiological and Pathological variations in the Ultrastructure of neutrophils and monocytes. Clin. Haematol., 1975, Vol. 4, №3, P. 485-508.