Автореферат и диссертация по медицине (14.00.52) на тему:Модулирующее влияние аминокислот на пролиферацию клеток в органотипической культуре тканей молодых и старых крыс
- Ученая степень
- кандидата медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.00.52
Оглавление диссертации Комашня, Артемий Владимирович :: 2006 :: Санкт-Петербург
Список сокращений.
Введение.
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1. Роль аминокислот в биологических процессах.
1.1.1. Тканеспецифическое действие олигопептидов в культуре тканей.
1.1.2. Влияние аминокислот на клеточную пролиферацию и апоптоз.
1.1.3. Структура аминокислот, свойства боковых радикалов.
1.1.4. Содержание и транспорт аминокислот в тканях и органах.
1.2. Возрастные особенности метаболизма аминокислот в организме.
1.2.1. Теории старения клеток и тканей.
1.2.2. Возрастные изменения метаболизма аминокислот.
1.3. Роль аминокислот в регуляции основных клеточных процессов: 41 пролиферации и апоптоза.
1.3.1. Молекулярные механизмы пролиферации клеток.
1.3.2. Молекулярные механизмы апоптоза.
1.3.2.1. Роль белка р53 в процессах апоптоза.
Глава 2. Материал и методы исследования.
2.1. Органотипическое культивирование тканей.
2.2. Подготовительные операции для культивирования тканей.
2.2.1. Состав и приготовление питательной среды.
2.2.2. Получение коллагена и коллагеновой подложки.
2.2.3 Выделение тканей для культивирования.
2.3. Морфологические и морфометрические методы исследования эксплантатов.,.
2.4. Иммуногистохимические методы исследования эксплантатов. 54 2.4.1. Компьютерный анализ микроскопических изображений.
Глава 3. Результаты исследования.
3.1. Определение эффективной концентрации аминокислот в культуре ткани.
3.2. Исследование модулирующего влияния аминокислот в органотипической культуре селезенки.
3.3. Исследование модулирующего влияния аминокислот в органотипической культуре печени.
3.4 Исследование модулирующего влияния аминокислот в органотипической культуре нервной ткани.
3.5. Исследование процессов апоптоза в эксплантатах селезенки крыс разного возраста.
Глава 4. Обсуждение результатов.
Выводы.
Введение диссертации по теме "Социология медицины", Комашня, Артемий Владимирович, автореферат
Актуальность исследования. Изучение действия на организм биологически активных веществ представляет собой весьма актуальное и перспективное направление современной- биологии и медицины. К группе биологически активных веществ, направленно применяемых для воздействия на функцию органов и систем, относятся по определению Ю.А. Спасокукоцкого и соавт. [1963] « . вещества органического (биологического) происхождения. Они представляют собой субстраты животной или растительной природы, обладающие способностью при парентеральном введении вступать во взаимодействие с тканями организма, обусловливая определенные биологические сдвиги, и влияют, таким образом, на его физиологические процессы. Эти особенности и свойства биологически активных веществ позволяют воздействовать на жизнедеятельность организма в целом и вызывать в нем, в ряде случаев, направленные изменения».
Проявление жизни — постоянный процесс обмена веществ и воспроизведения генетической информации с помощью различных регулирующих факторов. Исследование регуляторных механизмов многоклеточных систем дает возможность понять генез индивидуального развития организмов, механизмы дифференцировки и специализации клеток, принципы регуляции специализированных тканей и воспроизведения генетической информации. Считается, что регуляторные механизмы клеток возникли давно в процессе эволюции в результате ингибирующих биохимических реакций. Предполагают, что такой континуум существовал у донервных организмов. В последующем филогенезе совокупность гуморальных регуляторов вступала во взаимоотношения с нервной регуляцией. Эти механизмы, очевидно, были ведущими в управлении ростом и развитием клеток до становления специальных регуляторных систем [Хавинсон В.Х. и соавт., 1997; Хавинсон В.Х. и соавт., 1999; Шатаева JI.K. и соавт., 2003]. В процессе формирования многоклеточных систем регуляторные механизмы координировали соотношение клеток различных популяций, контролировали дифференцировку, пролиферацию [Ашмарин И.П., Обухова М.Ф., 1986]. Биорегуляторы, влияющие на процессы роста и развития, широко распространены в тканях многоклеточного организма. Таким образом, одним из наиболее приоритетных направлений в современной биологии и медицине является изучение механизмов регуляции многоклеточных систем. Уже сейчас результаты, полученные в этой области исследований, позволяют не только понять сложные процессы развития клеток, обмена и воспроизведения генетической информации, но и использовать эти принципы для создания новых подходов в профилактике и лечении заболеваний, к увеличению продолжительности жизни и замедлению процессов старения.
Поддержание биологической целостности организма на клеточном уровне регулируется сигналами, которые поддерживают сложное равновесное состояние между интегративными физиологическими процессами - пролиферацией, дифференцировкой и физиологической клеточной гибелью. Функцию медиаторных межклеточных сигналов на пара- и аутокринном уровнях выполняют секреторные белки - цитокинь1 [Пальцев М.А., 1996; Ярилин A.A., 1999]. В настоящее время особое значение придается исследованию действия биорегуляторных пептидов, как биологически активных веществ. На основании многочисленных экспериментальных данных стало известно, что биорегуляторные пептиды обладают такими свойствами, как полифункциональность и плеотропность, указывающих на важное значение этих молекул в координации функций организма [Софронов Б.Н. и соавт., 1984; Анисимов В.Н. и соавт., 1993;
Морозов В.Г.и соавт., 2000; Хавинсон В.Х. и соавт., 2002; Коркушко О-В. и соавт., 2002; Рыжак Г.А., Коновалов С.С., 2004].
Биорегуляторные пептиды, содержащиеся практически во всех тканях и органах низших и высших животных, выполняют не только сигнальную роль, но и непосредственно участвуют в регуляции физиологических процессов, начиная от отдельных функций специализированных клеток и заканчивая сложными поведенческими актами [Хавинсон В.Х., 1996; Кветной И.М. и соавт., 1999]. Одной из функций биорегуляторных пептидов является осуществление воздействия на репаративные процессы в тканях организма за счет стимуляции клеточной пролиферации или ее торможения в процессах апоптоза. Общебиологическое значение биорегуляторных пептидов заключается в объединении функции клеточных популяций на различных уровнях их организации [Хавинсон В.Х. и соавт., 1999]. Впервые пептидные биорегуляторы, осуществляющие контроль клеточных взаимодействий, и названные впоследствии цитомединами, были выделены В.Г.Морозовым и В.Х.Хавинсоном в 1971 г. из гипоталамической области мозга и эпифиза, а Б.И.Кузником и сотрудниками - из сосудистой стенки: [Кузник Б.И. и соавт., 1995]. В состав полипептидных медиаторов входят аминокислоты в различных сочетаниях. Регуляторные пептиды проникают в клетку с помощью мембранно-рецепторного или трансмембранного механизмов. В качестве посредника для передачи информационного сигнала в клетки и активации биосинтеза используются циклические нуклеотиды, но не для всех регуляторных пептидов цАМФ является посредником [Хавинсон В.Х. и соавт., 1996; Хавинсон В.Х. и соавт., 2002; Шатаева Л.К. и соавт., 2003]. Предполагают, что в качестве посредника может выступать сам регуляторный пептид или продукты его внутриклеточного преобразования, например, образующиеся в результате гидролиза аминокислоты.
Можно полагать, что аминокислоты, как структурные элементы пептидов, сами могут обладать некоторыми регуляторными свойствами в отношении основных физиологических процессов, происходящих в клетках. В настоящее время накапливаются данные о регулирующем влиянии не только пептидов, но и отдельных аминокислот на клетки нервной, лимфоидной и эндокринной систем [Белокрылов Г.А. и соавт, 1995; Barbul A. et al., 1981; Lansola M. et al., 2003; Chen et al., 2003; Kim K.Y. et al., 2002; Suschek C.V. et al., 2003]. Действительно, сами аминокислоты, каждую из которых можно рассматривать как олигопептид, состоящий из одной аминокислоты, могут оказывать влияние на основные процессы в клетках — пролиферацию и апоптоз [Чалисова Н.И. и соавт., 2002; Чалисова Н.И. и соавт., 2003]. Поэтому изучение на тканевом уровне регулирующего влияния всех 20-ти аминокислот, кодируемых генетическим кодом и составляющих основу биологических процессов, является актуальной задачей. Однако до сих пор не проводились систематические скрининговые исследования влияния на ткани- каждой* из 20 заменимых и незаменимых аминокислот. Для изучения непосредственного влияния биологически активных веществ на клетки одной из наиболее адекватных моделей является метод органотипической культуры ткани [Калюнов В.Н., 1986; Чалисова Н.И. и соавт., 1990; Levi-Montalchin,1968]. В культуре лимфоидной ткани было показано разнонаправленное действие синтетических дипептидов тимуса (тимогена и вилона) в зависимости от возраста: усиливающее апоптоз в ткани молодых животных и стимулирующее пролиферацию в тканях старых животных [Хавинсон В.Х. и соавт. 1999]. Поэтому необходимы исследования эффектов аминокислот в разные возрастные периоды. Сравнительное изучение в культуре ткани действия каждой из 20-ти заменимых и незаменимых аминокислот на ткани мезо-, энто- и эктодермального происхождения, как в молодом возрасте, так и при старении, позволит более глубоко понять механизмы регулирования основных клеточных процессов в организме. При этом создается база для синтеза новых биорегуляторных пептидов с учетом их влияния на ткани организмов в молодом и старом возрасте
Цель и задачи исследования. Сравнительное изучение действия 20-ти заменимых и незаменимых аминокислот на основные клеточные процессы - пролиферацию и апоптоз в культуре тканей, имеющих мезо-, энто- и эктодермальное происхождение, у животных молодого и старого возраста - 1-дневных, 21-дневных и 18-месячных крыс.
Для достижения указанной цели были поставлены, и последовательно решены следующие задачи:
1. Выявить эффективные концентрации аминокислот, действующие на основные клеточные процессы в органотипичекой культуре тканей.
2. Исследовать влияния аминокислот в органотипической культуре тканей селезенки крыс различного возраста.
3. Исследовать влияния аминокислот в органотипической культуре тканей печени крыс различного возраста.
4. Исследовать влияния аминокислот в' органотипической культуре тканей коры и подкорковых образований головного мозга крыс различного возраста.
5. Определить качественные и количественные параметры экспрессии белков р53 и РСИА в зоне роста эксплантатов ткани селезенки крыс разного возраста при действии аминокислот.
Научная новизна работы. Впервые проведено систематическое исследование влияния всех 20-ти заменимых и незаменимых аминокислот в органотипической культуре тканей мезо-, энто- и эктодермального генеза.
Обнаружено модулирующее действие ультрамалых доз аминокислот на основные клеточные процессы пролиферации и апоптоза, в зависимости от возраста животного.
Впервые показано, что в тканях старых крыс в- 4 раза ниже частота активного действия аминокислот на процессы клеточной пролиферации и апоптоза, по сравнению с тканями от молодых животных, что подчеркивает необходимость использования пептидных биорегуляторов в пожилом и старческом возрасте.
Впервые исследованы особенности концентрации проапоптозного белка р53 при действии 20-ти аминокислот в культуре лимфоидной ткани, что свидетельствует об участии аминокислот в регуляции экспрессии генов апоптоза.
Практическая значимость работы. Полученные результаты скринингового исследования аминокислот в органотипической культуре различных тканей могут быть использованы в терапевтических целях и в гериатрической практике. Стимулирующее апоптоз влияние ряда аминокислот создает базу для создания новых противоопухолевых препаратов. При синтезе новых регуляторных пептидов следует учитывать различное модулирующее действие аминокислот на ткани молодых и старых организмов.
Положения выносимые на защиту:
1 Ь-аминокислоты, кодируемые ДНК, оказывают в ультрамалых концентрациях в культуре мезо-, энто- и эктодермальных тканей от животных молодого и старого возраста различное влияние на клеточные процессы пролиферации и апоптоза, в зависимости от возраста животного. В тканях старых крыс в 4 раза ниже частота активного действия аминокислот на> клеточные процессы.
2 Четыре гидрофильные аминокислоты с заряженными боковыми группами - аспарагин, лизин, аргинин и глутаминовая кислота, - в незрелых тканях молодых крыс стимулируют апоптоз, а в зрелых тканях стимулируют клеточную пролиферацию.
3 Уменьшение процессов пролиферации в эксплантатах коррелирует с увеличением концентрации проапоптозного белка р53, что подтверждает участие аминокислот в процессах, регулирующих экспрессию генов апоптоза.
4 Обнаруженные свойства ряда аминокислот модулировать процессы клеточной пролиферации и апоптоза могут быть использованы как в терапевтических целях, так и при синтезе новых регуляторных пептидов.
Связь с научно - исследовательской работой Института.
Диссертационная работа является темой, выполняемой по основному плану НИР Санкт-Петербургского Института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН.
Заключение диссертационного исследования на тему "Модулирующее влияние аминокислот на пролиферацию клеток в органотипической культуре тканей молодых и старых крыс"
ВЫВОДЫ
1. Каждая из 20-ти Ь-аминокислот, кодируемых ДНК, оказывает в культуре экто-, мезо- и энтодермальных тканей от животных молодого и старого возраста различное влияние на клеточные процессы пролиферации и апоптоза в зависимости от возраста животного.
2. В тканях старых крыс в 4 раза ниже частота активного действия аминокислот на процессы клеточной пролиферации и апоптоза по сравнению с тканями от молодых животных, что подчеркивает отличие в аминокислотной регуляции метаболических процессов в пожилом и старческом возрасте.
3. Аспарагин, лизин, аргинин и глутаминовая кислота, которые являются полярными гидрофильными аминокислотами, стимулируют апоптоз в культуре незрелой ткани коры головного мозга, селезенки и печени новорожденных крыс, и таким образом участвуют в регуляции программированной клеточной гибели, характерной для данного периода онтогенеза.
4. В культуре ткани селезенки и печени зрелых крыс аспарагин, лизин, аргинин и глутаминовая кислота оказывают действие противоположное их действию в незрелой ткани, т.е. стимулируют клеточную зону роста эксплантатов.
5. При уменьшении процессов пролиферации в эксплантатах усиливается экспрессия проапоптозного белка р53, что свидетельствует об участии аминокислот в регуляции экспрессии генов апоптоза.
6. Обнаруженные свойства ряда аминокислот модулировать процессы клеточной пролиферации и апоптоза могут быть использованы в терапевтических целях и при синтезе новых регуляторных пептидов.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2006 года, Комашня, Артемий Владимирович
1. Аббасова С. Г, Липкин В. М., Трапезников Н. Н., Кушлинский Н. Е. Исследование аминокислотного состава крови при критических состояниях. // Вопр. биол. мед. и фарм. химии. — 1999. — № 3. — С. 3 — 17.
2. Акоев Г.Н., Чалисова Н.И. Нейро-трофическая регуляция нервной ткани. — СПб.: «Наука», 1997. — 140 с.
3. Анисимов В.Н., Соловьев М.В. Эволюция концепций в геронтологии. — СПб.: «Эскулап», 1999.— 130 с.
4. Анисимов В.Н. Средства профилактики ускоренного старения (геропротекторы). // Успехи геронтологии. 2000. — № 4. - С. 55— 75.
5. Анисимов В.Н. Молекулярные и физиологические механизмы старения. СПб.: «Наука», 2003. - 468 с.
6. Ашмарин И.П., Обухова М.Ф. Регуляторные пептиды, функцинально-непрерывная совокупность. // Биохимия. 1986: — т. 51, №4. - С. 531 — 544.
7. Ашмарин И.П. Биохимия мозга. СПб.: Издательство СПбГУ, 1995. — 325 с.
8. Белокрылов Г.А., Деревнина О.Н., Попова О.Я. Различия в иммунном ответе, фагоцитозе и детоксицирующих свойствах под влиянием пептидных и аминокислотных препаратов. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины — 1995. — Т.118, №2 — С. 509—512.
9. Богомолец A.A. Физиологическая система соединительной ткани и влияние ее на функции АЦС. // Сборник научных статей: «Физиологическая система соединительной ткани». Киев, 1941. — С. 23—30.
10. Григорьев Е.И. Тканеспецифическое действие пептидов в культуре тканей крыс разного возраста. // Успехи геронтологии.— 2002. — № 9.— С. 95— 100.
11. Григорьев М.Ю., Имянитов E.H., Хансон К.П. Апоптоз в норме и патологии. // Медицинский академический журнал. 2003. - Т. 3, № 3. — С. 3—11.
12. Гумерова A.A. Репаративная регенерация печени после повреждения нитратом свинца. // Автрореф. дис. канд. мед. наук.— Казань, 1999. — 21 с.
13. Дильман В.М. Четыре модели медицины. — М.: «Медицина», 1987. — 288 с.
14. Западнюк В.И., Купраж Л.П., Заика М.У., Безверхая И.С. Аминокислоты в медицине. — Киев: «Здоров'я», 1982. — 200 с.
15. Калюнов В.Н. Биология фактора роста нервной ткани. Минск: «Наука и техника», 1986. - 208 с.
16. Калюнов В.Н. Фактор роста нервной ткани. Минск: «Наука и техника», 1986. — 205 с.
17. Кветной И.М., Райхлин Н.Т., Южаков В.В., Ингель И.Э. Экстрапинеальный мелатонин: место и роль в нейроэндокринной регуляции гомеостаза. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1999. -Т. 127, №4.-С. 364-370.
18. Клименко А.И. Структурно-функциональные особенности хроматина в постнатальном онтогенезе животных. // Сборник научных трудов: «Механизмы онтогенеза и их регуляция». Киев: «Наукова думка», 1987. -С. 15—25.
19. Князькин И.В., Южаков В.В., Чалисова Н.И., Григорьев Е.И. Функциональная морфология органотипической культуры селезенки крыс различного возраста при действии вилона. // Успехи геронтологии. -2002.-№9.-С. 110—115.
20. Кольтовер В.К. Свободнорадикальная теория старения: современное состояние и перспективы //Успехи геронтологии. — 1998. — №. 2. — С. 37—42.
21. Коркушко О.В., Хавинсоп В.Х., Бутенко Г.М., Шатило В.Б. Пептидные препараты тимуса и эпифиза в профилактике ускоренного старения. — СПб.: «Наука», 2002. 202 с.
22. Крутько В.Н., Подколзин A.A., Донцов В.И. Общие причины, механизмы и типы старения. // Успехи геронтологии. — 1997. — № 1.— С. 34—40.
23. Кузник Б.И., Морозов В.Г., Хавинсон В.Х. Цитомедины и их роль в регуляции физиологических функций. // Успехи современной биологии. — 1995. -т.115. С. 353—367.
24. Мищенко В.П. Влияние возраста на транспорт аминокислот. // В кн. «Молекулярные и функциональные основы онтогенеза». М.: «Медицина», 1970.— С. 58 — 71.
25. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х., Малинин В.В. Пептидные тимомиметики. — СПб.: «Наука», 2000. 158 с.
26. Мукамбаров H.H., Кузнецов C.JT. Молекулярная биология (Учебное пособие для студентов медицинских вузов). — М.: «Медицинское информационное агенство», 2003. — 544 е.: ил
27. Нагорный A.B., Никитин В.Н., Буланкин И.Н. Проблемы старения и долголетия. — М.: «Медицина», 1963. 325 с.
28. Новиков B.C., Булавина Д.В., Цыган В.Н. Молекулярные механизмы инициации клеточной гибели. // В книге «Программированная клеточная гибель». — С-Пб.: «Наука», 1998.— С.ЗО—35.
29. Ноздрачев А.Д., Поляков E.JI. Анатомия крысы. Руководство для вузов. СПб.: «Лань», 2001— 464 с.
30. Обухова Л.К. Вклад академика Н.М. Эмануэля в развитие отечечетвенной геронтологии: свободнорадикальные механизмы в процессе старения.//Успехи геронтологии.— 1999.— №. 3.— С.27— 31.
31. Оловников A.M. Принцип маргинотомии в. матричном синтезе полинуклеотидов. // Доклады АН СССР. — 1971. — Т. 201. — С. 1496— 1499.
32. Пальцев М.А. Цитокины и их роль в межклеточных взаимодействиях. // Архив патологии. 1996. - т. 53, № 6. - С. 3 - 7.
33. Перская Е.Л. Внутриклеточный обмен аминокислот (анаболическая и катаболическая фазы).— Иваново, 1995.— 28 с.
34. Пол Дж. Культура клеток и тканей. — М.: «Мир». 1963. - 205 с.
35. Ракитянская И.А., Кучер А.Г., Абрамова Т.В. Оценка влияния некоторых аминокислот из соевого изолята на функциональное состояние клеток крови, лимфо- и гранулоцитопоэза in vitro. // Нефрология. 2000. - т.4, № 1. - С. 59— 62.
36. Рыжак Г.А., Коновалов С.С. Геропротекторы в профилактике возрасной патологии. — СПб.: «прайм-ЕВРОЗНАК», 2004. 160 с.
37. Софронов Б.Н., Морозов В.Г., Хавинсон В.Х., Белокрылов Г.А. Полипептидный фактор тимуса тималин в эксперименте и клинике. // Физиология человека. - 1984. - №2. - С. 229 - 233.
38. Спасокукоцкий Ю. А., Барченко Л.И.,. Генис Е.Д. Долголетие и физиологическая старость. — Киев: «Государственное медицинское издательство», 1963. — 220 с.
39. Сидельников Ю.Н., Обухова Г.Г. // Вопросы медицинской химии. -1994. -т.40. С. 44-47.
40. Фролькис В.В. Старение. Нейрогуморальные механизмы. Киев, «Наукова думка», 1981. - 220 с.
41. Хавинсон В.Х., Морозов В.Г., Кузник Б.И. Влияние полипептидов из предстательной железы на систему гемостаза. // Фармакология и токсикология. — 1985. — № 5. — С. 69— 71.
42. Хавинсон В.Х., Морозов В.Г., Кузник Б.И. Цитомедины и их роль в регуляции физиологических функций. // Успехи современной биологии.1985.— Т.115, N 3. — С. 353—367.
43. Хавинсон В.Х. Итоги изучения и применения пептидных биорегуляторов в геронтологии. // В книге: «Геронтологические аспекты пептидной регуляции функций организма». — СПб: «Наука», 1996. — С. 84—85.
44. Хавинсон В.Х, Морозов В.Г., Чалисова Н.И., Окулов В.Б. Влияние пептидов головного мозга на клетки нервной ткани in vitro. // Цитология.1997,— Т. 39, №7,— С. 571—578.
45. Хавинсон В.Х., Чалисова Н.И., Окулов В.Б. Исследование натуральных и синтетических цитомединов в культуре нервной ткани. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1998. — Т. 125, №3.— С. 332—336.
46. Хавинсон В.Х., Чалисова Н.И., Морозов В.Г., Малинин В.В. Роль пептидов тимуса в регуляции роста лимфоидной ткани у крыс разного возраста. // Доклады АН СССР. — 1999. — Т. 369, № 5. — С.701— 703.
47. Хавинсон В.Х., Малинин В.В., Чалисова Н.И, Григорьев Е.И. Тканеспецифическое действие пептидов в культуре тканей крыс разного возраста. // Успехи геронтологии. 2002. — №.9. — С.95— 100.
48. Хавинсон В.Х., Кветной И.М., Южаков В.В., Попучиев В.В., Коновалов С.С. Пептидная регуляция гомеостаза. — СПб.,: «Наука», 2003.- 194 с.
49. Чалисова Н.И., Славнова Г.И. Использование модифицированного микроскопа МБС-2 в физиологическом эксперименте. // Физиол. ж. СССР им. И.М. Сеченова. 1977. - т. 63, № 3. - с. 471 - 472.
50. Чалисова Н.И., Мелькишев В.Ф., Акоев Г.Н., Людыно М.И., Куренкова Т.К. Стимулирующее влияние пролактина на рост нейритов чувствительных нейронов в органотипической культуре. // Цитология. — 1991.— Т.ЗЗ, № 2. — С. 29—31.
51. Чалисова Н.И., Хавинсон В.Х. Исследование цитокинов в культуре нервной ткани. // Российский Физиологический журнал. 1999. — Т. 85, №1,— С. 29—36.
52. Чалисова Н.И., Хавинсон В.Х., Пеннияйнен В.А., Григорьев Е.И. Влияние полипептидных фракций тимуса на развитие органотипической культуры тканей вилочковой железы и селезенки крысы. // Цитология. — 1999.— Т. 41, №10.— С.889— 894.
53. Чалисова Н.И., Пеннияйнен В.А., Харитонова Н.В., Ноздрачев А.Д. Динамика стимулирующих и ингибирующих эффектов в органотипической культуре нервной и лимфоидной ткани. // Доклады Академии наук. 2001. — Т.380, № 3. - С.418— 421.
54. Чалисова Н.И., Хавинсон В.Х., Ноздрачев А.Д. Модулирующий и прожекторный эффект пептидов тимуса в культуре лимфоидной ткани. // Доклады Академии наук.-2001,— Т.379, №3.— С.411—413.
55. Чалисова Н.И., Пеннияйнен В.А., академик Ноздрачев А.Д. Взаимодействие цитокинов и их компонентов в культуре нервной и лимфоидной ткани. // Доклады Академии наук. — 2002. — Т. 384, № 5.1. С. 1—4.
56. Чалисова Н.И., Пеннияйнен В.А., Хаазе Г. Регулирующая роль некоторых аминокислот при развитии апоптоза в культуре нервной и лимфоидной ткани. // Российский Физиологический журнал им. Сеченова. 2002. — Т. 88, № 5. — С. 627— 633.
57. Чалисова Н.И., Пеннияйнен В.А., академик Ноздрачев А.Д. Регулирующее действие аминокислот в органотипической культуре лимфоидных тканей с различной степенью иммунологической зрелости. // Доклады Академии наук. 2003. — Т.З89, № 5. — С.714— 717.
58. Чалисова Н.И., Пеннияйнен В.А. Модулирующая роль незаменимых и заменимых аминокислот в органотипической культуре тканей у крыс разного возраста // Российский Физиологический журнал им. Сеченова.2003. — Т.89, № 5. С. 591— 597.
59. Шатаева JI.K., Хавинсон В.Х., Ряднова И.Ю. Пептидная саморегуляция живых систем (факты и гипотезы). СПб.: «Наука».— 2003.-222 с.
60. Ярилин A.A. Основы иммунологии. — М.: «Медицина», 1999. 608 с.
61. Arai T., Hiromatsu К., Nishimura H., Hamid G. Endogenous interleukin 10 prevents apoptosis in macrophages during Salmonella infection. // Biochem. Biophys. Res. Communs. 1995. - Vol. 213, № 2. - P. 600— 607.
62. Arends M.J., Morris R. G., Wyllie A. N. Apoptosis. The role of the endonuclease. // Amer. J. Path.— 1990. — Vol. 136. — P. 593— 608.
63. Arends M.J., Wyllie A.H. Apoptosis: mechanisms and roles in pathology. // Int. Revol. Exp. Pathol. — 1991. — Vol. 32. — P. 223 — 254.
64. Amat M., Felipe A., Casado J., Pastor-Anglada M. Ontogeny of L-alanine uptake in plasma membrane vesicles from rat liver. // Pediatr. Res. 1995. — Vol. 38, № l.-P. 81—85.
65. Atwood C. S., Ikeda M., Vonderhaar B. E. Involution of mouse mammary glands in whole organ culture: a model for studying programmed cell death. // Biochem. Biophys. Res. Commun. — 1995. — Vol. 207. — P. 860 — 867.
66. Barbul A., Lazarou S.A., Efron D.T. et al. Arginine enhances wound healing end lymphocge immune responses in humans. // Surgery. — 1990. — Vol. 108, №2. — P. 331 —337.
67. Barbul A., Sisto D.A., Wasserkrug H.L. Arginine stimulates lymphocyte immune response in healthy human beings. // Surgery. —'1981. — Vol. 90, № 2. —P. 244—251.
68. Bernhardt T.G., de Boer P.A. The Escherichia coli amidase AmiC is a periplasmic septal ring component exported via the twin-arginine transport pathway. //Mol. Microbiol. 2003 — Vol. 48, № 5. - P. 1171—1182.
69. Bing W., Junbao D., Jianguang Q., Jian L., Chaoshu T. L -arginine impacts . pulmonary vascular structure in rats with an aortocaval shunt. // J. Surg. Res. — 2002.-Vol. 108, № l.-P. 20—31.
70. Bjorksten J. A common molecular basis for the aging syndrome. // J. Amer. Geriatr. Soc. 1958.— Vol. 6, №10. — P. 740— 748.
71. Branton B.L., Clarke O. Apoptosis in primary cultures of E14 rat ventral mesencephala: time course of dopaminergic cell death and imlications for neural transplantation. // ExP. Neurol. 1999 - Vol. 160, №1. - P. 88— 98.
72. Bowie J.U., Pakula A.P., Simon M. The Three-Dimensional Structure of the Aspartate Receptor from Escherichia coli. // Acta Crystallogr. D. Biol. Crystallogr. 1995. - Vol. 51. - P. 145— 154.
73. Cell Death in Biology and Pathology. / Eds I. D. Bowen, R. A. Lockshin. — London, 1981.— P. 301.
74. Cid C., Alvarez-Cermeno J.C., Regidor I., Salinas M., Alcazar A. Low concentrations of glutamate induce apoptosis in cultured neurons: implications for amyotrophic lateral sclerosis. // J. Neurol. Sci.— 2003. — Vol. 206, № 1. -P. 91— 95
75. Cutler R. Human longevity and aging: possible role of reactive oxygen species.//Ann. N. Y. Acad. Sci. — 1991,— Vol.621. — P. 1—28.
76. Curran P.F. Active transport of amino acids and sugars. // Arch. Intern. Med. — 1972.— Vol. 129.-P. 258—269.
77. Dragovich T., Rudin C.M., Thompson C.B. Signal transduction pathways that regulate cell survival and cell death. // Oncogene. 1998. - Vol. 17, № 25.-P. 3207—3213.
78. Demoly P., Simony-Lafontaine J., Chanez P., Pujol J.L., Lequeux N., Michel F.B., Bousquet J. Cell proliferation in the bronchial mucosa of asthmatics and chronic bronchitics. // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1994 -Vol. 50, № l.-P. 214—217.
79. Dutta A., Ruppert J.M., Aster JC., Winchester E. Inhibition of DNA replication factor RPA by p53. //Nature. — 1993. — Vol. 365. — P. 79 — 82.
80. Evan G., Littewood T. A matter of life and cell death. // Science. — 1998. — Vol. 281,—P. 1317 — 1322.
81. Fratelli M., Gagliardini V., Galli G., Gnocchi P., Ghiara P., Ghezzi P. Autocrine interleukin-1 beta regulates both proliferation and apoptosis in EL4-6.1 thymoma cells.//Blood.— 1995, —Vol. 85.—P. 3532 — 3537.
82. Frommel C. The apolar surface area of amino acids and its empirical correlation with hydrophobic free energy. // J. Theor. Biol. — 1984. -Vol.111-P. 247—260.
83. Fu Y.M., Yu Z.X., Li Y.Q., Ge X., Sanchez P.J., Fu X., Meadows G.G. Specific amino acid dependency regulates invasiveness and viability of androgen-independent prostate cancer cells. // Nutr. Cancer. — 2003. — Vol. 45, № 1.-P.60—73.
84. Galao A.O., Pinheiro da Costa B.E., d'Avila D.O., Poli de Figueiredo C.E. L-arginine erythrocyte transport increases during pregnancy and immediately postpartum. // Obstet. Gynecol. 2004. - Vol. 191, № 2. — P. 572— 575.
85. Goel M.M., Goel R., Mehrotra A., Nath P., Agarwal P.K., Singh K., Mehrotra R. Immunohistochemical localization and correlation of p53 and PCNA expression in breast carcinoma. // Indian J. ExP. Biol. 2000. - Vol. 38, №3.-P. 225— 230.
86. Gonzalez E., Vinardell M.P. Ontogenetic development of proline intestinal transport in the domestic fowl. // Br. Poult. Sci. 1996. - Vol. 37, № 2. - P. 383—394.
87. Gu S., Villegas C.J., Jiang J.X. Differential regulation of amino acid transporter SNAT3 by insulin in hepatocytes. // J. Biol. Chem. 2005. — Vol. 280, № 28. — P. 26055— 26062.
88. Hatzoglou M., Fernandez J., Yaman I. Regulation of cationic amino acid transport: the story of the CAT-1 transporter. // Annu. Re Vol. Nutr. 2004. -Vol.24.— P. 377—399.
89. Harman D. Free-radical theory of aging. Increasing the functional life span. // Ann. N. Y. Acad. Sci. — 1994. — Vol. 717.— P. 1— 15.
90. Hayflick L. How and why we age. // Exp. Gerontol. — 1998. — Vol. 33.1. P. 639—653.
91. Hsueh A. J., Billig H., Tsafriri A. // Endocr. ReVol.— 1992. — Vol. 15. — P. 707 — 723.
92. Janas T., Yarus M. A membrane transporter for tryptophan composed of RNA.//RNA.- 2004. -Vol. 10, № 10.-P.1541— 1549.
93. Jacobson M. D. // Curr. Biol. — 1996. — Vol. 7. — P. R277 — R281
94. Jacobson M.D. Reactive oxygen species and programmed cell death. // Trends Biochem Sci. 1996. - Vol. 21, № 3. - P.83— 86.
95. Itoh N., Yonehara S., Ishii A., Yonehara M., Mizushima S., Sameshima M., Hase A., Seto Y., Nagata S. The polypeptide encoded by the cDNA for human cell surface antigen Fas can mediate apoptosis. // Cell. 1991. - Vol. 66, № 2. -P. 233— 243.
96. Kawano M.M., Mihara K, Fluang N., Tsujimoto T., Kuramoto A. Differentiation of early plasma cells on bone marrow stromal cells requires interleukin-6 for escaping from apoptosis. // Blood.— 1995. — Vol. 85, № 2.1. P. 487 — 494.
97. Kerr J.F, Wyllie A.H, Currie A.R. Apoptosis: a basic biological phenomenon with wide-ranging implications in tissue kinetics. // Brit. J. Cancer. —1972. —Vol. 26, №4.—P. 239 — 257.
98. Kilberg M.S, Handlogten M.E, Christensen H.N. Characteristics of an amino acid transport system in rat liver for glutamine, asparagine, histidine, and closely related analogs. // J. Biol. Chem. 1980. — Vol. 255, № 9. - P. 4011—4019.
99. Kim K.Y., Moon J.I., Lee E.J., Lee Y.J., ICim I.B., Park C.K., Oh S.J., Chun M.H. The effect of L-arginine, a nitric oxide synthase substrate, on retinal cell proliferation in the postnatal rat. // Dev. Neurosci. 2002. — Vol. 24, №4.-P. 313—321.
100. Kirkwood T. B. L. The evolution of aging and longevity. // Phil. Trans. Roy. Soc. London. — 1997. — Vol. B352. — P. 1765— 1772.
101. Kirkwood T. B. L. Evolution of aging. // Mech. Agening DeVol. — 2002. — Vol.123.— P.737—745.
102. Kroemer G. The proto-oncogene Bcl-2 and its role in regulating apoptosis. // Nature Med. — 1997. — Vol. 3, № 6. — P. 614 — 620.
103. Leonardi M.G., Comolli R. Alanine transport in rat liver plasma membrane vesicles during the acute-phase response in young and old rats. // Mech. Ageing Devol. 1995 - Vol. 77, № 3. - P. 159— 168.
104. Leoni S., Spagnuolo S., Massimi M., Terenzi F., Conti Devirgiliis L. Amino acid uptake regulation by cell growth in cultured hepatocytes isolated from fetal and adult rats. // Biosci. ReP. 1992. -Vol. 12, № 2. - P. 135— 141.
105. Lansola M., Bosca L., Felipo V., Hortelano S. Ammonia prevents glutamate-induced but not low K(+)-induced apoptosis in cerebellar neurons in culture. // Neuroscience. 2003. - Vol. 117, № 4. - P. 899— 907.
106. Mendes Ribeiro A.C., Brunini T.M. L-Arginine transport in disease.// Chem. Cardiovasc. Hematol. Agents. 2004. -Vol. 2, № 2. - P. 123— 131.
107. Nelson W.G., Kastan M.B. DNA strand breaks: the DNA template alterations that trigger p53-dependent DNA damage response pathways. // Mol. Cell. Biol. 1994.-Vol.14.-P. 1815— 1823.
108. Oehler R., Roth E. Regulative capacity of glutamine. // Curr. Opin. Clin. Nutr. Metab. Care. 2003. -Vol. 6, № 3. - P. 277— 282.
109. Pacitti A.J., Inoue Y., Plumley D.A., Copeland E.M., Souba W.W. Growth hormone regulates amino acid transport in human and rat liver. // Ann. Surg. — 1992. Vol. 216. № 3. - P. 353—361.
110. Pan M., Choudry H.A., Epler M.J., Meng Q., Karinch A., Lin C., Souba W. Arginine transport in catabolic disease states. // Nutr. 2004. - Vol. 134. № 10.-P. 2826S— 2829S
111. Redzic Z.B., Segal M.B. The structure of the choroid plexus and the physiology of the choroid plexus epithelium. // Adv. Drug Deliv. Rev. 2004. - Vol. 56. № 12. - P. 1695— 1716.
112. Redox-active aminoacids in biology. / Ed. by Judith P. Klinman. — San Diego, 1995.-230 p.
113. Schwartzman R.A., Cidlowski J.A. Glucocorticoid-induced apoptosis of lymphoid cells. // Int. Arch. Allergy Immunol. — 1994. — Vol. 105. № 4. — P. 347 — 354.
114. Seeburg P.H. Excitatory aminoacids: from genes to therapy. Berlin etc: Springer, 1998.-210 p.
115. Sweet R.M., Eisenberg D. Correlation of sequence hydrophobicities measures similarity in three-dimensional protein structure. // J. Mol. Biol. — 1983.-Vol. 171 — P. 479—488.
116. Soh H., Wasa M., Wang H.S., Fukuzawa M. Glutamine regulates amino acid transport and glutathione levels in a human neuroblastoma cell line. // Pediatr. Surg. Int. 2005 -Vol. 21, № 1. - P.29— 33.
117. Suschek C.V., Schnjrr O., Hemmrich K. Critical role of L-arginine in endothelial cell survival during oxidative stress. // Circulation. 2003. - Vol. 107, №20.-P. 2607-2014.
118. Trotta P.P. The clinical potential of recombinant human interleukin 4 and alfa-2b interferon. // Am. J. Reprod. Immunol. — 1991.— Vol. 25, №3. — P. 124— 128.
119. Van Slyke D.D., Meyer G. M. Цит. по Мищенко В.П., 1970.
120. Vinardell M.P. Age influences on amino acid intestinal transport. // Biochem. Physiol. Сотр. Physiol. 1992. — Vol. 103. № 1. - P. 169— 171.
121. Wang X.W., Yeh H., Schaeffer L., Roy R., Moncollin V., Egly J.M., Wang Z., Freidberg E.C., Evans M.K., Taffe B.G. p53 modulation of TFIIH-associated nucleotide excision repair activity. // Nature Genet. — 1995. — Vol. 10.№ 2. — P. 188 — 195.
122. Wyllie A.H. Glucocorticoid-induced thymocyte apoptosis is associated with endogenous endonuclease activation. // Nature. — 1980. — Vol. 284.— P. 555—556
123. Wu X., Fan Z., Masui H. et al. Role for Bcl-XL in the regulation of apoptosis by EGF and TGF-1 in c-myc overexpressing mammary epithelial cells. // J. Clin. Invest. 1995. - Vol. 95. - P. 1897— 1905.
124. Xie W., Wong YC., Tsao SW. Correlation of increased apoptosis and proliferation with development of prostatic intraepithelial neoplasia in ventral prostate of the Noble rat. // Prostate. 2000. — Vol. 44. - P. 31— 39.
125. Zafra F., Gimenez C. Characteristics and adaptive regulation of glycine transport in cultured glial cells. // Biochem. J. 1989. — Vol. 258. - P. 403—408.
126. Zhou R., Ao S.Z. A Novel cDNA Encoding Ubiquitin-conjugating Enzyme of Homo sapiens. // Sheng Wu Hua Xue Yu Sheng Wu Wu Li Xue Bao (Shanghai) 1998.-Vol. 30, №2-P. 125— 131.
127. Zou H., Henzel W.J., Liu X., Lutschg A., Wang X. Apaf-1, a human protein homologous to C. elegans CED-4, participates in cytochrome c-dependent activation of caspase-3. // Cell. — 1997.— Vol. 90, №3 — P. 405 — 413.
128. Выражаю благодарность коллективу Института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН, возглавляемому член-корреспондентом РАМН, профессором Хавинсоном Владимиром Хацкелевичем.
129. Выражаю искреннюю признательность руководителю научной работы доктору биологических наук Чалисовой Наталье Иосифовне за предоставленную тему исследования и неоценимую помощь в работе.
130. Приношу благодарность профессору Кветному Игорю Моисеевичу, руководителю лаборатории патоморфологии НИИ акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта РАМН, за ценную консультативную помощь в научной работе.
131. Выражаю благодарность сотрудникам лаборатории возбудимых мембран Института физиологии им. И.П. Павлова РАН, с которыми опубликован ряд научных работ.