Маркеры тромбофилии при цереброваскулярных нарушениях

Ломакина, Светлана Валерьевна

Диссертации по медицине → Клиническая лабораторная диагностика

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.46) на тему:Маркеры тромбофилии при цереброваскулярных нарушениях

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Ломакина, Светлана Валерьевна Санкт-Петербург 2009 г.

Ученая степень: кандидата биологических наук

ВАК РФ: 14.00.46

Автореферат диссертации по медицине на тему Маркеры тромбофилии при цереброваскулярных нарушениях

На правах рукописи 0034аа*

« ЛОМАКИНА

Светлана Валерьевна

МАРКЕРЫ ТРОМБОФИЛИИ ПРИ ЦЕРЕБРОВАСКУЛЯРНЫХ НАРУШЕНИЯХ

14.00.46 - клиническая лабораторная диагностика

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

1 О ДЕК 2009

Санкт-Петербург - 2009

003488101

Работа выполнена в ГОУ ВПО Санкт-Петербургском государственном медицинском университете имени академика И.П.Павлова Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию и ФГУЗ КБ № 122 им. Л.Г.Соколова ФМБА России, Санкт-Петербург

Научный руководитель: доктор медицинских наук профессор

ПЕТРИЩЕВ Николай Николаевич

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук профессор ПАПАЯН Людмила Петровна

Ведущая организация:

доктор биологических наук профессор КРАВЦОВ Вячеслав Юрьевич

ГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И.Мечникова Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Защита состоится « 24 » декабря 2009 г. в "то часов на заседании диссертационного совета Д 205.001.01 при Федеральном государственном учреждении здравоохранения «Всероссийский центр экстренной и радиационной медицины им. А.М.Никифорова» МЧС России по адресу: 194044, Санкт-Петербург, ул. Академика Лебедева, д. 4/2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Федерального государственного учреждения здравоохранения «Всероссийский центр экстренной и радиационной медицины им. A.M. Никифорова» МЧС России.

Автореферат разослан «Лв» ноября 2009 года

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат медицинских наук

М.В. Санников

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы

Сосудистые заболевания головного мозга являются одной из острейших медико-социальных проблем вследствие их большой распространенности, высокого риска развития опасных для жизни осложнений, трудной выявляемое™ на ранних этапах и малоэффективного лечения [Гусев Е. И., 2003; Воробьева О. В., 2007]. По количеству случаев смертности цереброваскулярные нарушения (ЦВН) занимают 2-е место и являются основной причиной инвалидности среди взрослого населения [Денисова Н.В. с соавт., 2006; Крылова В.Ю. с соавт., 2007]. Большую роль в развитии и течении цереброваскулярных нарушений играет наследственная и приобретенная склонность к тромбозам [Ельчанинов А.П., 2004; Khor В., 2009].

Тромбоз артерий головного мозга чаще всего возникает из-за аномалии сосудистой стенки на фоне атеросклероза и повышения активности тромбоцитов [Colman R., 2006]. Факторами риска венозного тромбоза являются повышенная свертываемость крови и стаз [Akhtar N. et al, 2006]. Нарушения мозгового кровообращения подразделяют на хронические (ХНМК) и острые (ОНМК).

В патогенезе ОНМК придается значение гемодинамическим факторам [Гусев Е. И. с соавт., 2001], морфологическим изменениям сосудов мозга [Скоромец А.А. с соавт., 2007, Folsom A.R., 1999], изменениям реологических свойств крови [Суслина З.А. с соавт., 2001]. Возникновение ХНМК связывают с церебральной микроангиопатией, вызываемой гипертонической болезнью и атеросклерозом [Крылова В.Ю. с соавт., 2007]. При этом обнаруживаются нарушения микроциркуляции, вплоть до развития микроциркуляторного блока [Гусев Е. И. с соавт., 2001], что обусловлено усилением внутрисосудистой агрегации тромбоцитов, повышением вязкости крови и дисфункцией эндотелия [Дамулин И.В., 2005, Ельчанинов А.П., 2004, Мчедлишвили Г.И., 2004].

Клетками-мишенями при артериальной гипертензии и атеросклерозе являются эндотелиоциты, участвующие в поддержании атромбогенности сосудистой стенки, регуляции адгезии и агрегации тромбоцитов и обладающие про-, антикоагулянтной и фибринолитической активностью. Дисфункция эндотелия играет важную роль в патогенезе тромбоза, внутрисосудистой активации тромбоцитов и т.д. [ Лутай М.И., 2004; Петрищев Н.Н.с соавт., 2007; Скоромец А.А. с соавт., 2007], и способствует развитию ЦВН. Особую актуальность в последнее время имеет изучение аннексина V, обладающего антикоагулянтными, противовоспалительными, антиапоптотическими свойствами и ингибирующего агрегацию тромбоцитов [Cederholm A. et al, 2007].

Вместе с тем, до сих пор остается проблемой лабораторная оценка дисфункции эндотелия при цереброваскулярных нарушениях у больных с ЦВН.

Цель исследования: установить роль изменений в системе гемостаза и функциональной активности эндотелия в механизмах развития острых и хронических нарушений мозгового кровообращения для оптимизации лабораторной диагностики степени тяжести и исхода заболевания.

Задачи исследования:

1. Исследовать функциональную активность тромбоцитов при цереброваскулярных нарушениях. Выявить взаимосвязь функционального состояния тромбоцитов с показателями коагуляционного звена гемостаза и маркерами дисфункции эндотелия.

2. Проанализировать состояние коагуляционного звена гемостаза при цереброваскулярных нарушениях.

3. Определить диагностическое значение тканевого активатора плазминогена, ингибитора тканевого активатора плазминогена и аннексина V при оценке функционального состояния эндотелия у пациентов с ЦВН.

4. Оценить влияние антифосфолипидных антител и гипергомоцистеинемии на состояние тромбоцитарного, коагуляционного звеньев гемостаза и функцию эндотелия у пациентов с ЦВН.

5. Выявить взаимосвязь лабораторных показателей тромбоцитарного, коагуляционного звеньев гемостаза и дисфункции эндотелия с клиническими проявлениями ЦВН.

Научная новизна работы

В данной работе впервые проведено комплексное сравнительное исследование системы гемостаза - тромбоцитарного и коагуляционного звеньев, и маркеров дисфункции эндотелия в остром и хроническом периоде нарушений мозгового кровообращения. Установлено, что уровень аннексина V является диагностически значимым показателем дисфункции эндотелия у пациентов с ЦВН.

Впервые показано, что у пациентов с ОНМК и ХНМК существует взаимосвязь между уровнем тканевого активатора плазминогена, ингибитора тканевого активатора плазминогена и аннексина V и тяжестью клинического течения заболевания, что повышает эффективность лабораторной оценки дисфункции эндотелия. Получены новые данные об однонаправленном изменении уровня гомоцистеина и содержания аннексина V, свидетельствующие об активации антикоагулянтных механизмов при повреждающем действии на эндотелий гомоцистеина у пациентов с ЦВН.

Научно-практическая значимость

В качестве прогностических лабораторных показателей исхода заболевания у пациентов с ОНМК в первые 24 часа острейшего периода показана целесообразность определения уровня аннексина V, тканевого активатора плазминогена и ингибитора тканевого активатора плазминогена.

У пациентов с ХНМК определение повышенного уровня аннексина V и концентрации D-димера позволяет дифференцировать степень тяжести дисциркуляторной энцефалопатии.

При ЦВН подтверждена низкая значимость скринингового теста активированного парциального тромбопластинового времени (АПТВ) для выявления гиперкоагуляционного состояния.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. При ОНМК (по ишемическому типу) и ХНМК (по типу дисциркуляторной энцефалопатии) отмечается усиление внутрпсосудистой активации тромбоцитов, увеличение концентрации D-димера и Ктркеров эндотелиальной дисфункции.

2. Значимые изменения в функциональном состоянии эндотелия у пациентов с ЦВН проявляются в повышении уровня тканевого активатора плазминогена, ингибитора тканевого активатора плазминогена 1 типа и, главным образом, аннексина V.

3. Повышенное содержание гомоцистеина в крови приводит к активации тромбоцитарного, коагуляционного звеньев гемостаза и дисфункции эндотелия.

Апробация работы

Результаты исследования были доложены на VI национальной конференции «Атеротромбоз и артериальная гипертензия» (Москва, 2001), научно-практической конференции молодых ученых «Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины» (Санкт-Петербург, 2005), XI межвузовской конференции молодых ученых «Актуальные проблемы патофизиологии» (Санкт-Петербург, 2005).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 8 научных работ, из них 2 статьи в изданиях, рекомендованных ВАК Минобразования и науки РФ, остальные - в научно-практических журналах, материалах конференций.

Внедрение результатов в практику

Результаты диссертационной работы внедрены в учебный процесс на кафедре патофизиологии с курсом клинической патофизиологии СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова, используются в работе клинико-диагностической лаборатории ФГУЗ Клинической больницы № 122 им. Л.Г. Соколова ФМБА России г. Санкт-Петербурга.

Личный вклад автора

Автором самостоятельно выполнены лабораторные исследования системы гемостаза и функциональной активности эндотелия у пациентов с ЦВН, обработка и анализ полученных данных, сформулированы основные положения диссертации.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 190 страницах машинописного текста, состоит из введения, 4 глав, выводов и практических рекомендаций. Работа иллюстрирована 15 рисунками и 11 таблицами. Список литературы содержит 303 источника (56 отечественных и 247 зарубежных авторов).

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материал и методы исследования

В ходе работы нами было обследовано 76 пациентов с цереброваскулярными нарушениями, находившихся на стационарном лечении в отделении неврологии ФГУЗ КБ N 122 им. Л.Г.Сокояова ФМБА России. Больные были разделены на две группы - 1 группу составили пациенты с острым нарушением мозгового кровообращения - ОНМК по типу ишемического инсульта (ИИ), во вторую группу вошли больные с хроническим нарушением мозгового кровообращения - ХНМК по типу дисциркуляторной энцефалопатии (ДЭ) с артериальной гипертензией или без неё. Возраст обследуемых больных составил от 17 до 68 лет. Критериями исключения были: возраст старше 70 лет, наличие сахарного диабета, легочно-сердечная недостаточность с клиникой вторичной венозной энцефалопатии, либо кардиоцеребралъной гипоксии. Диагноз основывался на данных клинического обследования, результатах компьютерной томографии и ультразвуковой допплерографии сосудов шеи и головного мозга в режиме дуплексного сканирования, лабораторных показателях. Лабораторное обследование больных с ОНМК проводили не позднее 24 часов после развития острой очаговой неврологической симптоматики.

Группа больных с ОНМК включала в себя 36 человек (24 мужчины и 12 женщин, средний возраст которых составил 55,3+10,6 лет) с атеротромботическим подтипом ИИ. Впервые ИИ перенесли 28 больных (77,7 %), а 8 пациентов (22,3 %) - повторный. Артериальная гипертензия на момент исследования выявлена у 20 пациентов (56%), церебральный атеросклероз - у 19 пациентов (53%). До госпитализации 25 пациентов (70%) принимали вазоактивные средства с ноотропным эффектом (кавинтон, инстенон, фезам и др.).

Группа пациентов с ХНМК составила 40 человек (18 мужчин и 22 женщины, средний возраст - 48,8+11,0 лет) с длительностью заболевания от 1 до 13 лет. Число больных с 1 стадией ДЭ составило 10 (25%) пациентов, 2 стадией - 30 (75%). Клиническая картина начальной стадии заболевания характеризовалась стойкой неврозоподобной симптоматикой, не исчезающей после полноценного отдыха, а для умеренно выраженной (2 стадии) -синдромом вертебро-базилярной недостаточности с цефалгиями, вертиго, мозжечковыми расстройствами, парестезиями в области лица, зрительными

нарушениями, преходящей дизартрией. Артериальная гипертензия наблюдалась у 11 больных (28%), последствия ишемического инсульта - у 7 пациентов (18%). На момент включения в исследование все пациенты со 2-й стадией ДЭ принимали вазоактивные средства с ноотропным эффектом (кавинтон, инстенон, винпотролил и т.д.).

В группу контроля вошло 25 человек без цереброваскулярных. нарушений, сопоставимых по возрасту и полу с обследуемыми больными. Для исключения структурного повреждения головного мозга у лиц контрольной группы была выполнена церебральная компьютерная томография.

Лабораторное обследование больных и пациентов контрольной группы проводили на базе ФГУЗ Клинической больницы N 122 им. Л.Г. Соколова ФМБА России г. Санкт-Петербурга. Объектом исследования явилась периферическая кровь, взятая из локтевой вены в утренние часы, натощак. У каждого пациента было получено информированное согласие на забор крови для исследования. Всего было проведено 1313 исследований, изучено 13 параметров.

Тромбоцитарное звено гемостаза оценивалось при помощи теста-агрескрин (экспресс-оценка с использованием универсального индуктора агрегации) и определения внутрисосудистой активации тромбоцитов (ВАТ) по методу А.С.Шитиковой (1992) - данная методика характеризует прижизненную морфологию тромбоцитов, определяемую с помощью фазово-контрастного микроскопа. При этом оценивается процент активных форм тромбоцитов -дискоэхиноцитов, сфероцитов и сфероэхиноцитов (референтные значения - до 18 % от общего числа тромбоцитов), количество тромбоцитов в агрегатах (до 7,4 %), число малых агрегатов (включающих 2-3 тромбоцита) и больших (по 4 и более тромбоцита) на 100 свободных тромбоцитов.

Для оценки коагуляционного звена гемостаза определялось активированное парциальное тромбопластиновое время (АПТВ), концентрация фибриногена - на коагулометре «Coag-A-Mate» фирмы «Organon Teknika», Голландия, использовали реактивы этой же фирмы. Количество D-димера исследовали иммуноферментным методом (набор «TECHNOZYM D-dimer ELISA», фирма «Technoclone») с помощью микропланшетного ридера ELx800, фирмы «ВЮ-ТЕК INSTRUMENTS», США; качественно определяли растворимые фибрин-мономерные комплексы («РФМК-тест», фирма «Технология-Стандарт», Барнаул).

Маркеры функционального состояния эндотелия (тканевой активатор плазминогена (t-PA) и аннексии V были исследованы при помощи иммуноферментного метода (тест-системы «Asserachrom t-PA» фирмы «Diagnostica Stago» и «human Annexin V» фирмы «Bender MedSystems», Австрия). Определение уровня ингибитора активатора плазминогена 1 типа -PAI-1 проводили колориметрическим методом с использованием хромогенных субстратов («PAI - Chromogen», фирма «Diagnostica Stago», Австрия).

Для определения антифосфолипидных антител (АФА) волчаночного типа (ВА) применяли реагенты фирмы "Органон Техника" (Голландия): для

скрининга ВА применяли тест «Viperquik LA-Test» с разведенным ядом гадюки Рассела (dRVVT), в качестве подтверждающего теста - «Viperquik LA-Check». Антитела к кардиолипину (АКЛ) и аннексину V выявляли при помощи тест-систем для ИФА («Anti-Cardiolipin Screen» и «Anti-Annexin V>> соответственно), фирма «Orgentec», Германия. Данные исследования проводили с помощью микропланшетного ридера ELx800, фирмы «ВЮ-ТЕК INSTRUMENTS», США.

Для определения уровня гомоцистеина в крови использовали метод иммунохемилюминесценции («Homocysteine», фирма «Bayer») и автоанализатор ACS 180, фирмы «Bayer», Германия.

Статистический анализ

Статистическая обработка результатов проведена с применением компьютерной программы Statistica 6.0 for Windows. Выявление связей между различными параметрами осуществляли на основе линейного корреляционного анализа - коэффициент корреляции Пирсона (г). Статистическая достоверность полученных результатов оценивалась с использованием непараметрического критерия Вилкоксона и Манна-Уитни. Характеристики выборок были представлены в виде среднего значения М ± стандартная ошибка ш. Критический уровень достоверности нулевой статистической гипотезы р (об отсутствии значимых различий) принимали равным 0,05.

Результаты исследования и их обсуждение

Функциональная активность тромбоцитов v больных с иереброваскулярными нарушениями

Активация тромбоцитов, возникающая при контакте с поврежденной стенкой сосуда, при высоком напряжении сдвига циркулирующей крови, под влиянием биологически активных веществ, является одним из факторов риска тромбоза сосудов. Проявлением активации тромбоцитов является изменение их формы и повышение агрегации в циркулирующей крови [Davi G. et. al., 2007]. При использовании метода морфологической оценки внутрисосудистой активации тромбоцитов у больных с ЦВН обнаружено достоверное увеличение суммы активных форм тромбоцитов, числа тромбоцитов в агрегатах и самих агрегатов (табл. 1).

Учитывая однонаправленные изменения внутрисосудистой активации тромбоцитов, можно предположить, что активация кровяных пластинок является характерным изменением в системе гемостаза как при острой, так и при и хронической форме нарушений мозгового кровообращения.

Между показателями активных форм тромбоцитов и уровнем гомоцистеина выявлена прямая корреляционная связь как при ОНМК (г=0,55, р<0,05), так и при ХНМК (г=0,47, р<0,05). Эти данные подтверждают влияние гипергомоцистеинемии (концентрация гомоцистеина выше 15 мкмоль/л) на активацию тромбоцитарного звена системы гемостаза у пациентов с ЦВН. Усиление внутрисосудистой активации тромбоцитов при ОНМК

сопровождалось повышением уровня В-димера (г=0,40, р<0,05), что указывает на тромбин-зависимый механизм активации тромбоцитов у данных пациентов.

Таблица 1

Показатели внутрисосудистой активности тромбоцитов в контроле и исследуемых группах, (М±ш)

Показатель Контроль п=25 ОНМК п=36 ХНМК п=40

Сумма активных форм тромбоцитов, (%) 14,8±0,5 21,2 ±1,2* 23,8 ± 1,8 *

Число тромбоцитов в агрегатах, (%) 6,1 ±0,3 8,1 ±0,3* 10,8 ±0,9*

Число малых агрегатов На 100 свободных тромбоцитов 2,5 ±0,2 3,9 ±0,2* 4,9 ± 0,3*

Число больших агрегатов 0,14 ±0,03 0,30 ±0,05* 0,50 ±0,14*

достоверные различия по сравнению с контролем: * - р<0,05

Таким образом, частота выявления патологических результатов ВАТ при острой и хронической формах нарушения мозгового кровообращения (в 75% и в 63% случаев соответственно) и абсолютные значения сумм активных форм тромбоцитов свидетельствуют о гиперактивации тромбоцитарного звена гемостаза у данных пациентов. Возможно, повышенная активность тромбоцитов являлась фоном, на котором развились нарушения мозгового кровообращения. В то же время нельзя отрицать и вероятность активации тромбоцитов при прохождении крови через ишемизированные участки мозга.

Состояние коагулянионного звена системы гемостаза у больных <; нереброваскулярными нарушениями

Определение АПТВ позволяет оценить участие факторов внутреннего пути свёртывания крови в образовании теназного и протромбиназного комплексов. По нашим данным, уровень АПТВ не имел достоверных различий как между группами больных с ОНМК и ХНМК, так и между пациентами с ЦВН и лицами контрольной группы (р>0,05). Таким образом, мы подтвердили низкую значимость данного теста при цереброваскулярных нарушениях.

Гиперфибриногенемия (увеличение концентрации фибриногена свыше 4 г/л) является одним из неспецифических проявлений реакции системы

гемостаза при стрессе и, по многочисленным данным, тесно коррелирует с риском развития многих сосудистых заболеваний, в том числе атеросклероза [Зубаиров Д.М., 2000, Dong Q.L. et al., 2004]. Фибриноген является белком острой фазы и повышение его концентрации может отражать степень гиперкоагуляции.

Результаты нашего исследования подтверждают зависимость уровня фибриногена от остроты процесса, так как при ОНМК содержание фибриногена в плазме было достоверно выше (4,0+0,19 г/л), чем при ХНМК (3,2±0,14 г/л, р<0,01), что, по-видимому, связано с активацией симпато-адреналовой системы при остром нарушении мозгового кровообращения и увеличением образования провоспалительных цитокинов. Причиной общего невысокого уровня фибриногена и отсутствия статистически значимых отличий у пациентов с ЦВН от контрольного уровня (3,8±0,1 г/л, р>0,05) может быть усиление внутрисосудистого свертывания крови при данном заболевании, что подтверждается повышением в обеих исследуемых группах концентрации D-димера.

Одним из маркеров активации системы гемостаза является D-димер -специфический продукт образования и лизиса фибрина. Концентрация D-димера в плазме крови более 250 нг/мл (при количественном определении иммуноферментным методом) свидетельствует об активации фибринолиза, которому предшествует усиление коагуляционного каскада с избыточным образованием нерастворимого фибрина [Баркаган З.С., Момот А.П., 2001, Папаян Л.П. с соавт., 2002].

По нашим данным, при острой форме нарушений мозгового кровообращения содержание D-димера (600,7±23,7 нг/мл) более чем в два раза превышало уровень, зарегистрированный в контрольной группе (265,2+81,6 нг/мл). Несколько меньший подъем уровня D-димера зафиксирован при ХНМК, однако, и в этом случае его показатели достоверно отличались от контрольных значений (525,9±31,9 нг/мл, р<0,05). Частота выявления повышенной концентрации D-димера составила 100% при ОНМК, и 85% - при ХНМК. Уровень D-димера между исследуемыми группами статистически значимо различался (р<0,05), что свидетельствует о более активном фибринолизе и предшествующей активации коагуляционного каскада при ОНМК по сравнению с ХНМК. Данные различия могут быть связаны с наличием выраженной стресс-реакции при ОНМК и атеротромбозе.

Наличие в плазме растворимых фибрин-мономерных комплексов (РФМК) также рассматривается как показатель тромбинемии. Растворимые фибрин-мономерные комплексы были выявлены у 83% пациентов с ОНМК и у 76% - с ХНМК. В контрольной группе РФМК обнаружены у 2 (8%) пациентов.

Таким образом, наши данные о содержании D-димера и РФМК свидетельствуют об активации свертывания крови у больных с ЦВН, более выраженной при острой форме нарушений мозгового кровообращения, чем при хронической.

Оненка функционального состояния эндотелия

Об изменении функциональной активности эндотелия свидетельствует содержание в крови факторов, образующихся в эндотелии - t-PA, PAI-1 (оба фактора влияют на фибринолиз) и аннексина V [Петрищев H.H. с соавт., 2007]. Угнетение фибринолиза рассматривается как независимый фактор риска инсульта [Tanne D., et al, 2006]. В немногочисленных исследованиях также подчеркивается патогенетическая: роль нарушения фибринолитической активности и при хронической ишемии мозга [Ельчанинов А.П., 2004].

Основным физиологическим активатором плазминогена является тканевой активатор плазминогена, часть которого находится в свободном (активном) состоянии, а основное количество связано с ингибитором активатора плазминогена и находится в виде неактивного циркулирующего ; комплекса. В ходе проведенного исследования антигена t-PA значимых отличий его уровней между больными обследуемых групп не выявлено (р>0,05). При этом, повышение уровня антигена t-PA у пациентов с ЦВН отражало степень повреждения эндотелия, достоверно отличаясь от содержания антигена t-PA в плазме крови контрольной группы (р<0,05). (табл. 2). При острой форме ЦВН повышенные значения антигена t-PA (>12 нг/мл) встречались несколько чаще (в 67% случаев), нежели при ХНМК (в 60% случаев). Полученные результаты могут говорить о компенсаторном повышении антигена t-PA в ответ на активацию свертывания крови. В то же время, повышение его уровня свидетельствует об ускоренном внутрисосудистом образовании фибрина из-за тромбинемии, так как t-PA специфически связывается с фибрином [Зубаиров Д.М., 2000].

Так, установленная прямая корреляционная связь между уровнем антигена t-PA и D-димера у пациентов с ОНМК (г=0,45, р<0,05) и с ХНМК (г=0,50, р<0,05) может свидетельствовать о неблагоприятном прогнозе течения ЦВН из-за одновременно происходящих активации свертывания и дисфункции эндотелия. Выявленная прямая корреляционная зависимость между уровнем антигена t-PA и концентрацией гомоцистеина у пациентов с ОНМК (г=0,61, р<0,05) отражает значительные изменения функциональной активности эндотелия в условиях гипергомоцистеинемии.

Наиболее физиологически значимым ингибитором тканевого активатора плазминогена является PAI-1, синтезируемый преимущественно в клетках эндотелия. Увеличение его синтеза и секреции способствует подавлению фибринолитической активности крови и увеличивает риск тромбоза. Повышение данного показателя отмечалось нами у 50% больных при ОНМК и у 55% - при ХНМК. При сравнении показателей ингибитора активатора плазминогена в группах обследуемых больных статистически значимых отличий нами не выявлено - при ОНМК уровень PAI-1 составил 11,0±0,6 Ед/мл; при ХНМК - 10,6+0,5 Ед/мл (р>0,05). Полученные средние значения находятся выше верхней границы референтных показателей (до 10 Ед/мл) и достоверно выше уровня PAI-1 в контрольной группе (6,9+0,3, р<0,05)(табл.2).

Таблица 2

Уровень антигена t-PA и PAI-1 у пациентов с ЦВН и контрольной группе, М±ш

Показатель Контрольная ОНМК ХНМК

! группа п=36 п=40

; n=25

антиген t-PA, 7,3±0,3 12,7 + 0,6* 12,5 ±0,5*

нг/мл j i

PAI-1 i Ед/мл i 6,9±0,3 11,0 + 0,6* 10,6 + 0,4*

достоверные различия по сравнению с контролем: * - р<0,05

Таким образом, при ЦВН нами обнаружено повышение уровня антигена t-PA и PAI-1, что указывает на дисфункцию эндотелия, причем этот процесс в равной степени происходит при ОНМК и ХНМК. Вместе с тем известно, что РАН способен ингибировать апоптоз [Макацария А.Д. и соавт., 2006], поэтому его повышение может также являться защитным механизмом, предотвращающим дальнейшее тромбообразование за счет снижения прокоагулянтной активности эндотелия.

Для оценки функционального состояния эндотелия мы также определяли в плазме крови содержание аннексина V. При повреждении эндотелия и апоптозе происходит высвобождение в кровь внеклеточной формы аннексина V, обладающего антикоагулянтными свойствами [Петрищев Н.Н. с соавт., 2007]. По нашим данным, ни у одного пациента с ОНМК не было выявлено показателей аннексина V, укладывающихся в референтные значения (0,5-1,0 нг/мл), при хронической форме патологии - у 95% пациентов отмечалось повышение уровня аннексина V. При том, что у пациентов с ЦВН выявлено значимое повышение концентрации аннексина V по сравнению с данными контрольной группы (0,84±0,10 нг/мл, р<0,05), нами не обнаружено достоверных различий в его уровне между группами больных - при ОНМК уровень аннексина V в крови составил 3,43±0,10 нг/мл, при ХНМК - 3,24+0,12 нг/мл (р>0,05). Наши результаты определения уровня аннексина V согласуются с данными литературы, свидетельствующими об увеличении его содержания при цереброваскулярных нарушениях [Kaneko N. et al., 2003, Cederholm A. et al., 2007]. Отсутствие статистически значимых отличий в уровне аннексина V при острой и хронической формах нарушения мозгового кровообращения, может говорить об универсальной защитной реакции организма на повреждение эндотелия.

Выявленная прямая корреляционная зависимость между уровнем аннексина V и антигеном t-PA у пациентов с ОНМК (г=0,51, р<0,05) отражает значительное изменение функционального состояния эндотелия у данной группы больных. Прямая корреляция между уровнем аннексина V и

содержанием D-димера у пациентов с ОНМК (г=0,42, р<0,05) свидетельствует о связи процессов повреждения эндотелия с активацией свертывания крови.

Следует подчеркнуть, что степень увеличения аннексина V (в среднем, в 3 раза выше верхней границы референтных значений) и то, что увеличение наблюдалось практически у всех больных, в отличие от контрольной группы, свидетельствует о ярко выраженной системной дисфункции эндотелия, проявившейся в равной степени как при острой, так и при хронической форме. При этом значительный подъем уровня аннексина V у пациентов с ЦВН может носить компенсаторный характер, так как аннексии V снижает тромбогенность клеток эндотелия за счет связывания фосфатидилсерина и ингибирования апоптоза.

Принимая во внимание повреждающее воздействие на эндотелий повышенного уровня гомоцистеина, мы исследовали концентрацию аннексина V при гипергомоцистеинемии, и обнаружили значимую прямую связь этих показателей при остром и хроническом нарушении мозгового кровообращения (г=0,59 и г=0,73 соответственно, р<0,05), что подтверждает роль гипергомоцистеинемии в усилении повреждения эндотелия при ЦВН.;

Одним из факторов риска ишемических нарушений мозгового кровообращения, связанных с повреждением эндотелия, является наличие в крови антител к отрицательно заряженным мембранным фосфолипидам [Amoux D. et al., 2000]. Нами было проведено определение! наличия волчаночного антикоагулянта (ВА), антител к кардиолипину и аннексину V. По нашим данным, наличие ВА (по результатам скринингового и подтверждающего тестов) отмечалось в 42% случаев при ОНМК и в 38% - при ХНМК. Показатели скринингового теста определения ВА при ОНМК (43,5±1,2 сек.) и ХНМК (42,1+1,1 сек.) были практически одинаковы, при этом достоверно отличались от показателей контрольной группы (40±0,99 сек., р<0,05) (табл. 3). Кроме того, время образования сгустка в скрининговом тесте определения ВА у обследованных пациентов было взаимосвязано с концентрацией D-димера (г=0,44 при ОНМК и г=0,45, р<0,05 при ХНМК), что свидетельствует о влиянии ВА на активацию свертывания.

Как известно, аутоантитела к кардиолипину присутствуют и в крови здоровых людей (в концентрации до 10 МЕ/мл), однако повышение их уровня влечет за собой изменения в системе гемостаза, вызывая повреждение эндотелиальных клеток сосудов и способствуя возникновению тромбозов и тромбоэмболий. [

Повышенное содержание AKJI отмечалось у 17% пациентов с ОНМК и у 15% - с ХНМК, при этом уровень АКЛ у пациентов с ОНМК (6,8± 0,4; МЕ/мл) и ХНМК (7,0±0,5 МЕ/мл) был достоверно выше, чем в контроле (4,7±0,2 МЕ/мл, р<0,05) (табл.3), однако не выходил за верхнюю границу референтных значений. Наши результаты совпадают с данными литературы об отсутствии связи повышенного уровня АКЛ с риском возникновения ишемического инсульта [Ahmed Е. et al, 2000, Van Goor M.P. et al., 2004]. В то же время, повышение уровня АКЛ напрямую связано с гипергомоцистеинемией при

ОНМК (г=0,54, р<0,05), что говорит о сочетанном повреждении эндотелия данными факторами у больных с ЦВН.

Увеличение концентрации антител к аннексину V может способствовать возникновению тромбоза за счет разрушения «защитного поля» аннексина V на поверхности фосфолипидов [Сазрегею N. е1 а1., 2003]. Частота выявления данного вида антител составила 39% при ОНМК и 55% - при ХНМК. У лиц контрольной группы уровень антител к аннексину V в нашем исследовании составил 7,5±0,4 Ед/мл, что достоверно не отличалось от содержания антител к аннексину V у пациентов с ОНМК и ХНМК (табл.3) и укладывалось в диапазон референтных значений (до 8 Ед/мл).

Таблица 3

Сравнительная характеристика антифосфолипидных антител у пациентов с ЦВН и лиц контрольной группы, М±ш

Показатель Контроль ОНМК ХНМК

п=25 п=36 п=40

Волчаночный 40+1,0 43,5 +1,2* 42,1 + 1,1*

антикоагулянт, сек.

Антикардиолипиновые антитела, МЕ/мл 4,7 ± 0,2 6,8 ±0,4* 7,0 ±0,5*

Антитела к аннексину 7,5 + 0,4 7,7 ±0,6 8,1+0,3

V, Ед/мл

достоверные различия по сравнению с контролем: * - р<0,05

Таким образом, результаты определения AKJI и ВА позволяют предположить их роль в патогенезе ЦВН, как дополнительных факторов риска. Отсутствие статистически значимых отличий в уровне антител к аннексину V между обследованными пациентами и контрольной группой свидетельствует о том, что изменение функционального состояния эндотелия не связано с синтезом данного вида антител.

Одним из факторов, повреждающих эндотелий, является гипергомоцистеинемия [Петрищев H.H. с соавт., 2007, Скворцова В.И., 2003, Ridker P.M. et al., 2002]. В то же время, в литературе подчеркивается, что не всегда существует связь повышенного уровня гомоцистеина с инсультом и хроническим нарушением мозгового кровообращения [Ельчанинов А.П., 2004, Хунтеев Г.А. и соавт, 2001].

В ходе определения концентрации гомоцистеина у 25% пациентов с ОНМК и у 13% - с ХНМК обнаружены показатели, превышающие верхнюю границу референтных значений (5-15 мкмоль/л). Уровень гомоцистеина у пациентов обеих групп статистически значимо не различался (составив 13,6+0,6 мкмоль/л при ОНМК и 12,5+0,5 мкмоль/л при ХНМК), но был достоверно выше по сравнению с контрольными значениями (9,1±0,3 мкмоль/л, р<0,05). Максимальная концентрация гомоцистеина у пациентов с ОНМК достигала 19

мкмоль/л, а у пациентов с ХНМК - 19,6 мкмолъ/л. При этом, у пациентов с ОНМК, имевших уровень гомоцистеина выше 15 мкмоль/л, была выявлена прямая корреляционная взаимосвязь между гипергомоцистеинемией и содержанием О-димера (г=0,68, р<0,05), аннексина V (г=0,59, р<0,05), ВАТ (г=0,59, р<0,05) и 1РА (г=0,61, р<0,05), что свидетельствует о влиянии гомоцистеина на продукцию эндотелием данных факторов. У больных с ХНМК данные корреляционные зависимости были выражены слабее.

Был осуществлен мониторинг состояния пациентов по окончании лечения в стационаре. У 8 (22 %) пациентов с ОНМК на 21 сутки после начала заболевания клинические проявления не исчезли (неврологический дефицит регрессировал не полностью), в связи с чем они были направлены на длительное (до 1 месяца) долечивание в специализированные санатории. Уровень аннексина V (3,78+0,12 нг/мл), 1-РА (14,2±0,7 нг/мл) и РАН (12,8±0,8 Ед/мл) у таких больных, имевших неблагоприятное течение заболевания, на момент обследования был достоверно повышен (р<0,05) по сравнению с аналогичными параметрами у пациентов, выписанных на амбулаторное лечение (3,33±0,10 нг/мл, 12,3±0,7 нг/мл и 10,0+0,7 Ед/мл соответственно). Полученные данные уровня аннексина V могут быть связаны с его поступлением из очага ишемического поражения, определяющего тяжесть состояния пациентов. Кроме того, при самых высоких уровнях аннексина V (от 4,03 до 4,10 нг/мл) у пациентов с ОНМК отмечалось наиболее длительное пребывание в стационаре (от 23 до 47 койко-дней). Также, у пациентов с неблагоприятным течением ИИ выявлена сильная корреляционная взаимосвязь уровня ^РА и О-димера - 0,65 (р<0,05), что свидетельствует об одновременном изменении функционального состояния эндотелия и активации свертывания.

При ХНМК выявлена сопряженность степени повышения уровня аннексина V и В-димера с тяжестью клинического течения заболевания. При 1 стадии ДЭ уровень аннексина V и О-димера составил 2,81 ±0,20 нг/мл и 404,5±49,1 нг/мл соответсвенно, тогда как при 2 стадии ДЭ наблюдалось повышение уровня аннексина V до 3,39±0,12 нг/мл и концентрации О-димера до 566,3±36,4 нг/мл.

Также, у пациентов со 2 стадией ДЭ о нарушении функционального состояния эндотелия говорит прямая корреляционная взаимосвязь между содержанием антигена 1-РА и уровнем РА1-1 (г=0,42, р<0,05). У пациентов с 1 стадией подобной закономерности не обнаружено.

Выявленные клинико-лабораторные связи у обследованных пациентов могут свидетельствовать о патогенетической роли дисфункции эндотелия как провоцирующего и отягчающего фактора в возникновении и прогрессировании цереброваскулярных нарушений.

ВЫВОДЫ

1. У пациентов с ЦВН повышение внутрисосудистой активности тромбоцитов свидетельствует о гиперактивации тромбоцитарного звена

системы гемостаза, наиболее выраженной при гипергомоцистеинемии. Активация тромбоцитов положительно коррелирует с уровнем Э-димера у пациентов с ОНМК, что говорит о более выраженной генерации тромбина у данных больных.

2. Существует связь между патологическими значениями маркеров активации свертывания и нарушениями мозгового кровообращения, при этом выраженность тромбинемии ассоциирована с остротой заболевания. Наличие корреляционной взаимосвязи между концентрацией Б-димера и уровнем гомоцистеина отражает участие данного фактора повреждения эндотелия в активации свертывания крови.

3. Проведенные лабораторные методы показали достоверное увеличение уровня антигена ьРА и РА1-1 у больных с ЦВН, что свидетельствует об изменении функционального состояния эндотелия. При ОНМК содержание данных факторов на момент исследования было достоверно повышено у пациентов с последующим неблагоприятным течением болезни.

4. Достоверное повышение уровня аннексина V, отмеченное в обеих группах пациентов с ЦВН, указывает на значительное повреждение эндотелия. Как при ОНМК, так и при ХНМК установлена сопряженность степени повышения уровня аннексина V с тяжестью клинического течения заболевания. Выявленная корреляционная связь между уровнем аннексина V и содержанием 1РА у пациентов с ОНМК подтверждает роль аннексина V как маркера дисфункции эндотелия у данных больных.

5. При ЦВН антифосфолипидные антитела являются дополнительным фактором повреждения эндотелия. Роль волчаночного антикоагулянта в механизме активации свертывания подтверждается положительной корреляцией его уровня с содержанием Б-димера.

6. Сравнительный анализ проведенных лабораторных тестов свидетельствует о более выраженной активации системы гемостаза и дисфункции эндотелия у пациентов с ОНМК, по сравнению с больными с ХНМК.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Результаты исследования предназначены для использования специалистами в области клинической лабораторной диагностики, врачами неврологами в медицинских учреждениях.

1. У пациентов с ОНМК в первые 24 часа в качестве прогностических лабораторных показателей необходимо определение уровня аннексина V, {-РА и РАН, являющихся ранними биохимическими маркерами дисфункции эндотелия.

2. При хроническом нарушении мозгового кровообращения в качестве лабораторного критерия степени тяжести дисциркуляторной энцефалопатии целесообразно определение уровня аннексина V и Б-димера.

3. Полученные данные о содержании D-димера у пациентов с острыми и хроническими нарушениями мозгового кровообращения позволяют считать его тестом первой линии для оценки активации свертывания у данных больных.

4. Определение АФА и уровня гомоцистеина можно использовать в качестве дополнительного диагностического показателя для прогнозирования риска возникновения цереброваскулярных нарушений.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ Статьи в периодических научных изданиях, рекомендованных ВАК

1. Ломакина C.B. Механизмы тромбофилии при цереброваскулярной недостаточности / C.B. Ломакина, А.П. Ельчанинов // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. - 2006. - № 2. - С. 12 -15.

2. Ельчанинов А.П. Сцинтиграфическая картина гепатолиенальной системы у нейрососудистых больных с антифосфолипидной активностью гемостаза / А.П. Ельчанинов, C.B. Ломакина, A.B. Артюшкин // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. - 2009. - № 2(30). - С.34-39.

Другие публикации

3. Ельчанинов А.П. К вопросу тромбогенного эффекта волчаночного антикоагулянта при церебральных проявлениях первичного антифосфолипидного синдрома / А.П. Ельчанинов, C.B. Ломакина // Современные подходы к диагностике и лечению нервных и психических заболеваний: Материалы междунар. конф. - СПб., 2000. - С.291 - 292.

4. Ельчанинов А.П. Генетические полиморфизмы и волчаночный антикоагулянт как факторы риска дисциркуляторной энцефалопатии в молодом возрасте / А.П. Ельчанинов, С.И. Капустин, О.В. Сироткина, C.B. Ломакина, М.Н. Блинов, Е.И. Шварц // Инсульт. - 2002. - №5. - С.37 - 42.

5. Ломакина C.B. Показатели системы гемостаза при дисциркуляторной энцефалопатии / C.B. Ломакина П Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины: Сб. тез. к науч. - практ. конф. молодых ученых. -СПб., 2005.-С.420-421.

6. Ломакина C.B. Аннексии V как маркер сосудистой тромбофилии / C.B. Ломакина // Материалы XI межвуз. конф. молодых ученых. - СПб., 2005. -С.31 -33.

7. Ломакина C.B. Место волчаночных антикоагулянтов в диагностике антифосфолипидного синдрома / C.B. Ломакина // Вестн. Рос. Воен.-мед. акад. -2005. - Прил. № 1(13).-С.110-111.

8. Ломакина C.B. Эффективность морфофункциональной оценки внутрисосудистой активации тромбоцитов (ВАТ) в диагностике тромбозов и эмболий / C.B. Ломакина // Вестн. Рос. Воен.-мед. акад. - 2005. - Прил.№ 1(13).-С. 111.

Подписано в печать «20» ноября 2009 г. Формат 60x84/16 Бумага офсетная. Печать офсетная. Усл. печ. л. 1,3- Тираж 100 экз. Заказ № 412

Типография «Восстания -1» 191036, Санкт-Петербург, Восстания, 1.

Оглавление диссертации Ломакина, Светлана Валерьевна :: 2009 :: Санкт-Петербург

СПИСОК СОХРАНЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Цереброваскулярные нарушения: распространенность, классификация

1.1.1. Ишемический инсульт

1.1.2. Хроническое нарушение мозгового кровообращения

1.2. Функциональная активность тромбоцитов при цереброваскулярных нарушениях

1.2.1. Агрегационная активность тромбоцитов

1.2.2. Секреторная активность тромбоцитов

1.3. Коагуляционное звено гемостаза при цереброваскулярных нарушениях

1.3.1. Причины активации коагуляционного звена гемостаза

1.3.2. Уровень фибриногена в плазме

1.3.3. Уровень протромбина в плазме

1.3.4. Тромбиногенез

1.3.5. Естественные антикоагулянты

1.4. Фибринолитическая система при цереброваскулярных нарушениях

1.4.1. Причины возникновения нарушений в фибринолитической системе

1.4.2. Тканевой активатор плазминогена 0>-РА)

1.4.3. Ингибитор тканевого активатора плазминогена (РА1-1)

1.5. Содержание и роль аннексина V при цереброваскулярных нарушениях

1.6. Роль антифосфолипидных антител при цереброваскулярных нарушениях

3 1.7. Роль гипергомоцистеинемии при цереброваскулярных нарушениях

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Характеристика обследованных пациентов

2.2. Характеристика группы контроля

2.3. Методы исследования

2.3.1. Количественное определение О-димера методом ИФА

2.3.2. Определение растворимых фибрин-мономерных комплексов (РФМК) в плазме крови

2.3.3. Определение активированного парциального тромбопластинового времени (АИ'1'В) в плазме крови

2.3.4. Определение концентрации фибриногена в плазме крови

2.3.5. Экспресс-оценка тромбоцитарного гемостаза

2.3.6. Морфологическая оценка внутрисосудистой активации тромбоцитов

2.3.7. Количественное определение аннексина V в биологических жидкостях

2.3.8. Количественное определение антигена тканевого активатора плазминогена в плазме крови методом ИФА

2.3.9. Колориметрическое определение ингибитора активатора плазминогена в плазме крови

2.3.10. Определение волчаночного антикоагулянта

2.3.11. Количественное определение суммарных антител к кардиолипину классов 1%, О, ^ М и А методом ИФА

2.3.12. Количественное определение антител к аннексину V классов в и М методом ИФА

2.3.13. Количественное определение содержания гомоцистеина

2.4. Методы статистической обработки

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ВЫПОЛНЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Функциональная активность тромбоцитов у больных с цереброваскулярными нарушениями

3.2. Состояние коа1уляционного звена системы гемостаза у больных с цереброваскулярными нарушениями

3.3. Гемостатические реакции эндотелия у больных с цереброваскулярными нарушениями

3.4. Изменение уровня антифосфолипидных антител у больных с цереброваскулярными нарушениями

3.5. Уровень гомоцистеина в крови больных с цереброваскулярными нарушениями

3.6. Уровень показателей функционального состояния эндотелия в зависимости от исхода заболевания -

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ - 100 ВЫВОДЫ -114 ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ - 116 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ АКЛ - антитела к кардиолипину

АГГГВ - активированное парциальное тромбопластиновое время

АТ Ш - антитромбин III

АФА - антифосфолипидные антитела

АФС - антифосфолипидный синдром

ВА - волчаночный антикоагулянт

ВАТ - внутрисосудистая активация тромбоцитов

ГГЦ - гипергомоцистеинемия

ДЭ - дисциркуляторная энцефалопатия

ИИ - ишемический инсульт

ОНМК - острое нарушение мозгового кровообращения РФМК - растворимые фибрин-мономерные комплексы ТИА - транзиторная ишемическая атака ТМ - тромбомодулин

УИА - универсальный индуктор агрегации

ХНМК - хроническое нарушение мозгового кровообращения

ЦВЗ - цереброваскулярные заболевания

ЦВН - цереброваскулярные нарушения

ЦНС - центральная нервная система р- ТО - р-тромбоглобулин

БУ - фактор V

МРУ- средний объем тромбоцита

МТНРЯ - метилентетрагидрофолатредуктаза

РА1-1 - ингибитор активатора плазминогена 1 типа

ТАБ! - тромбин-активированный ингибитор фибринолиза

1-РА - тканевой активатор плазминогена

ТхА2 - тромбоксан А

Введение диссертации по теме "Клиническая лабораторная диагностика", Ломакина, Светлана Валерьевна, автореферат

На современном этапе сосудистые заболевания головного мозга являются одной из острейших медико-социальных проблем вследствии их большой распространенности, высокого риска развития опасных для жизни осложнений и высокого процента первичной инвалидизации [11,15]. По количеству случаев смертности цереброваскулярные нарушения (ЦВН) занимают 2-е место после сердечно-сосудистых заболеваний, и являются основной причиной инвалидности среди взрослого населения [18,29]. В последнее время отмечена тенденция к увеличению встречаемости ЦВН не только в пожилом возрасте, но и среди лиц среднего и молодого возраста [15,16].

В патогенезе цереброваскулярных нарушений выделяют две составляющие: системное и локальное нарушение гемодинамики. Локальные гемодинамические факторы играют важную роль в регуляции регионального кровообращения и микроциркуляции как модуляторы вазомоторной [19,73,78,153,201] и гемостатической функции эндотелия [22,38]. Особенность функции эндотелия в ЦНС определяется его участием в многоуровневой системе регуляции мозгового кровообращения — в регуляции сосудистого тонуса, агрегатного состояния крови в мозговых сосудах, пролиферации, иммунного ответа, миграции клеток крови в сосудистую стенку, синтеза медиаторов воспаления, процессов репарации и неоангиогенеза [43]. Большое значение в развитии и течении цереброваскулярных нарушений имеют изменения в системе гемостаза, которые могут определять ранний дебют недостаточности кровоснабжения головного мозга [22]. Поэтому для успешного лечения пациентов с таким диагнозом очень важен лабораторный контроль состояния гемостаза.

Склонность к тромбозам, наследственная и приобретенная, играет большую роль в развитии и течении цереброваскулярных нарушений. Артериальный тромбоз возникает из-за аномалии сосудистой стенки (в результате атеросклероза, инфекционного поражения эндотелия и т.д.) и повышения активации тромбоцитов [100,159]. Причинами венозного тромбоза являются повышенная свертываемость крови и стаз [58,159].

Особую актуальность для выяснения причин изменения системы гемостза при различных заболеваниях в последнее время имеет изучение семейства белков-аннексинов. Эти белки связаны с мембранными фосфолипидами и/или цитоскелетом Са2+ зависимым способом [72], имеют антикоагулянтное свойство [270] и участвуют во многих биологических процессах, таких как трансдукция кальциевого сигнала в клетке, экзо — и эндоцитоз, рециклизация рецепторов, репарация плазматической мембраны в ходе эндоцитоза, мембранно — цитоскелетные взаимодействия [155,245].

Наиболее ярким представителем этого семейства является аннексии V, который представлен в высоких концентрациях (свыше 2% от клеточных протеинов) во многих тканях и клетках и в большом количестве определяется в эндотелии [176]. Он ингибирует прокоагулянтную, провоспалительную активность клеток и тромбоцитарную агрегацию - при апоптозе [91,92]. Также, в настоящее время известно, что образование антител к аннексину V способствует патогенетическому нарушению продукции аннексина V [23,232].

Дисфункция эндотелия играет важную роль в патогенезе тромбоза, неоангиогенеза, ремоделировании сосудов, внутрисосудистой активации тромбоцитов и т.д. [31,38,43], что способствует развитию ЦВН. К сожалению, в литературе недостаточно освещен вопрос лабораторного определения функциональной активности эндотелия при цереброваскулярных нарушениях, взаимодействия эндотелия и системы гемостаза при острых и хронических нарушениях мозгового кровообращения, а также - участие в этих процессах аннексина V, поэтому нам представляется крайне интересным и актуальным исследование показателей дисфункции эндотелия и системы гемостаза у таких больных.

Задачи исследования.

2. Проанализировать состояние коагуляционного звена гемостаза при цереброваскулярных нарушениях.

Диссертация выполнена в соответствии с планом научного исследования СПб ГМУ имени акад. И.П. Павлова по теме кафедры клиническая лабораторная диагностика «Молекулярные основы социально-значимых заболеваний», № Гос. Регистрации 012009 50361.

Научная новизна. В данной работе впервые проведено комплексное сравнительное исследование системы гемостаза - тромбоцитарного и коагуляционного звеньев, и маркеров дисфункции эндотелия в остром и хроническом периоде нарушений мозгового кровообращения. Установлено, что уровень аннексина V является диагностически значимым показателем дисфункции эндотелия у пациентов с ЦВН.

Научно-праЕсгическая значимость.

У пациентов с ХНМК определение повышенного уровня аннексина V и концентрации Б-димера позволяет дифференцировать степень тяжести дисциркуляторной энцефалопатии.

Положения, выносимые на защиту.

1. При ОНМК (по ишемическому типу) и ХНМК (по типу дисциркуляторной энцефалопатии) отмечается усиление внутрисосудистой активации тромбоцитов, увеличение концентрации Б-димера и маркеров эндотелиальной дисфункции.

Апробация работы и публикации материалов исследования. Результаты исследования были доложены на VI национальной конференции «Атеротромбоз и артериальная гипертензия» (Москва, 2001), научно-практической конференции молодых ученых «Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины» (Санкт-Петербург, 2005), XI межвузовской конференции молодых ученых «Актуальные проблемы патофизиологии» (Санкт-Петербург, 2005).

Внедрение результатов в практику.

Личный вклад автора. Автором самостоятельно выполнены лабораторные исследования системы гемостаза и функциональной активности эндотелия у пациентов с ЦВН, обработка и анализ полученных данных, сформулированы основные положения диссертации.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 146 страницах машинописного текста, состоит из введения, 4 глав, выводов и практических рекомендаций. Работа иллюстрирована 15 рисунками и 11 таблицами. Список литературы содержит 303 источника (56 отечественных и 247 зарубежных авторов).

Заключение диссертационного исследования на тему "Маркеры тромбофилии при цереброваскулярных нарушениях"

1. У пациентов с ОНМК в первые 24 часа в качестве прогностических лабораторных показателей необходимо определение уровня аннексина V, 1:-РА и РА1-1, являющихся ранними биохимическими маркерами дисфункции эндотелия.

3. Полученные данные о содержании О-димера у пациентов с острыми и хроническими нарушениями мозгового кровообращения позволяют считать его тестом первой линии для оценки активации свертывания у данных больных.

117

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2009 года, Ломакина, Светлана Валерьевна

1. Агрескрин тест. Каталог инструкций. — Барнаул: Техн. станд., 2002. - С.114 - 118.

2. Арсеньева К. Е. Цереброваскулярные заболевания // Рус. мед. журн. — 2007. — Т. 15,№4.-С. 225-230.

3. Баркаган З.С., Момот А.П. Диагностика и контролируемая терапия нарушений гемостаза. М.: Ньюдиамед, 2001. — С.36 - 38.

4. Бурцев Е.М., Сергиевский С.Б., Асратян С.А. Варианты церебральной и венозной ангиоархитектоники при дисциркуляторной энцефалопатии // Журн. неврологии и психиатрии им. С. С. Корсакова. — 1999. — Т. 99, № 4. — С. 45^47.

5. Вавилова Т.В., Добровольский А.Б. Рекомендации по лабораторным методам исследования системы гемостаза // Тромбы, кровоточивость и болезни сосудов. 2007. - №6. - С. 49 - 52.

6. Ваизова O.E., Венгеровский В.М., Алифирова В.М. Влияние кавинтона на функцию эндотелия у больных с хронической ишемией головного мозга // Инсульт. 2006. - №16. - С. 46-50

7. Верещагин Н.В., Пирадов М.А., Суслина З.А. Инсульт. Принципы диагностики, лечения и профилактики. — М.: Интермедика, 2002. — 208 с.

8. Верещагин Н.В., Моргунов В.А., Гулевская Т.С. Патология головного мозга при атеросклерозе и артериальной гипертонии. М: Медицина, 1997. - 288 с.

9. Верещагин Н.В., Суслина З.А., Пирадов М.А. Принципы диагностики и лечения больных с острыми нарушениями мозгового кровообращения // Нервные болезни. 2002. - №1. - С. 8 - 14.

10. П.Воробьева О. В. Депрессия как фактор, сопутствующий цереброваскулярной болезни // Consilium Medicum. 2007 - Т. 9, № 2. - С. 129132.

11. Гомжина Е.А. Особенности головной боли при ишемическом инсульте // Головная боль. — 2003. №6. - http://www.golovnaya-bol.ru/headache/archive/no6/04.htm

12. Гудкова В.В., Стаховская JI.B. Хроническая недостаточность мозгового кровообращения // Справ, поликлин, врача. 2004 - Т.З, №5. — С. 47-49

13. Гусев Е. И., Скворцова В.И. Ишемия головного мозга. — М.: Медицина, 2001.-328 с.

14. Гусев Е. И. Проблема инсульта в России // Инсульт. 2003. - №9. - С.З - 7.

15. Гусев Е. И., Скворцова В. И., Стаховская JI. В. Эпидемиология инсульта в России // Журн. неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 2003. - Т. 103, №8. - С. 4 - 9.

16. Дамулин И.В. Дисциркуляторная энцефалопатия: патогенетические, клинические и терапевтические аспекты // Трудный пациент. 2005. - №6. — С. 34-36.

17. Денисова Н.В., Мовшович Б.Л., Топчий Н.В. Возможности врача общей практики в профилактике и лечении цереброваскулярных расстройств // Рус. мед. журн. 2006 - Т.14, №29. - С. 2069-2074.

18. Ельчанинов А.П., Капустин С.И., Ломакина С.В. и др. Генетические полиморфизмы и волчаночный антикоагулянт как факторы риска дисциркуляторной энцефалопатии в молодом возрасте // Инсульт. — 2002. № 5. -С. 37-42.

19. Ельчанинов А.П. Наследственные и приобретенные факторы тромбофилиии терапия хронической ишемии мозга у молодых лиц: Автореф. дисд-ра мед.наук: 14.00.13 СПб., 2002. - 35 с.

20. Ельчанинов А.П. Тромбофилический фактор и пути его избирательной коррекции при ранней дисциркуляторной энцефалопатии: Метод, рекомендации для практического здравоохранения. СПб., 2004. - 64 с.

21. Зубаиров Д.М. Молекулярные основы свертывания крови и тромбообразования. — Казань: Фэн, 2000. — 272 с.

22. Инсульт в молодом возрасте: Метод, рекомендации / Ред. М. М. Одинак и др. М.: ГВКГ им. Н. Н. Бурденко, 2001. - 63 с.

23. Инсульт: Принципы диагностики, лечения и профилактики / Под ред. Н.В. Верещагина, М.А. Пирадова, З.А. Суслиной. — СПб.: Интермедика, 2002. — 208 с.

24. Калашникова JI.A., Насонов E.JL, Александрова E.H., и др. Антитела к фосфолипидам и ишемические нарушения мозгового кровообращения в молодом возрасте // Журн.неврологии и психиатрии им. С.С.Корсакова. 1997.- Т.97, №6. С.59 - 65.

25. Комаров A.JL, Панченко Е.П. Роль воспаления в развитии атеротромбоза : «провоспалительные» эффекты клопидогрела // Кардиология и общая терапия.- 2007. № 8/9. - С. 23-29.

26. Котов С.И., Исакова Е.В., Рябцева A.A. и др. Комплексная терапия хронической ишемии мозга / Под ред. В.Я.Неретина. М., 2001. - С.5 - 32.

27. Крылова В.Ю., Насонова Т.И., Турчина Н.С. Хроническая ишемия мозга. // Киев, междунар. неврол. журн. — 2007. № 3. — С. 118-120.

28. Левин О.С. Дисциркуляторная энцефалопатия: современные представления о механизмах развития и лечении. http://www.tri rnm.ru/php/content.php?group=2&id=5126

29. Лутай М.И. Атеросклероз: современный взгляд на патогенез. // Укр. кардюл. журн. 2004. - №1. - С. 22-34.

30. Макацария А.Д., Передеряева Е.Б., Пшеничникова Т.Б. Метаболический синдром и низкомолекулярные гепарины // Consilium medicum. 2006. - Т.8, №6. - C.l - 8.

31. Мчедлшпвили Г.И. Гемореология в системе микроциркуляции: ее специфика и практическое значение // Тромбоз, гемостаз и реология. — 2004. -№4.-С. 18-24.

32. Назаренко Г.И., Киппсун A.A., Миколаускас В.П., Арсенин C.JI. Диагностика антифосфолипидного синдрома // Лаб. медицина. 2003. - №6. — С. 33-35.

33. Новиков B.C., Шанин В.Ю., Козлов K.JL Общая патофизиология. СПб.: Профессора мед. академий, 2000. — С.114.

34. Панченко Е.П. Тромболитические средства. Часть 3. // Клин, фармакология и терапия. 1998. - №7. - С. 84 - 88.

35. Папаян Л.П., Князева Е.С. Д-димер в клинической практике: Пособие для врачей // Под ред. H.H. Петрищева. — М.: ООО «Инсайт полиграфик», 2002.-С.20.

36. Петрищев H.H., Власов Т.Д. Типовые формы дисфункции эндотелия // Дисфункция эндотелия. Патогенетическое значение и методы коррекции / Под ред. Н.Н.Петрищева. СПб.: ИИЦ BMA, 2007. - С. 4 - 48.

37. Петрищев H.H., Власов Т.Д. Физиология и патофизиология эндотелия // Дисфункция эндотелия. Причины, механизмы, фармакологическая коррекция /Под ред. H.H. Петрищева. СПб.: Изд-во СПбГМУ, 2003. - С. 4 - 38.

38. Принципы диагностики и лечения больных с острыми нарушениями мозгового кровообращения: Метод, рекомендации / Под ред. Н. В. Верещагина и др. — М., 2000.-28 с.

39. Скворцова В.И., Боцина А.Ю., Кольцова К.В. и др. Артериальная гипертония и головной мозг // Журн. неврологии и психиатрии им. С. С. Корсакова. 2006. - Т. 106, № 10. - С. 68 - 78.

40. Скворцова В.И. Механизмы повреждающего действия церебральной ишемии и новые терапевтические стратегии // Журн. неврологии и психиатрии им. С. С. Корсакова. 2003. - Т. 103, №9. - С. 20-22.

41. Скоромец А.А., Скоромец Т.А., Скоромец А.П. и др. Дисфункция эндотелия при ишемическом повреждении головного мозга. // Дисфункция эндотелия. Патогенетическое значение и методы коррекции / Под ред. Н.Н.Петрищева. — СПб.: ИИЦВМА, 2007. С. 139 - 147.

42. Соболева Е.В., Лебедев П.А. Гомоцистеинемия в патогенезе ишемической болезни сердца. Плеотропные эффекты статинов // Вестник Самар. гос. ун-та. -2007.-№2.-С. 242-255.

43. Суслина З.А., Верещагин Н.В., Пирадов М.А. Подтипы ишемических нарушений мозгового кровообращения: диагностика и лечение // СошШит тесИсит. 2001. - Т.З, №5. - С. 218-221.

44. Танашян М.М. Реперфузионная терапия при ишемических нарушениях мозгового кровообращения // Атмосфера. Нервные болезни. 2004.- №1. - С. 26 -32.

45. Трошин В. Д., Густов А. В., Трошин О. В. Острые нарушения мозгового кровообращения: Руководство. 2-е изд. - Н. Новгород: Изд-во Нижегород. гос. мед. акад., 1999. - 440 с.

46. Федин А.И., Румянцева С.А. Избранные вопросы базисной интенсивной терапии нарушений мозгового кровообращения: Метод, указания. М.: Интермедика, 2002. - 256 с.

47. Хасанова Д.Е. Рахматуллина Э.Ф. Опыт применения Галидора в лечении больных с хронической ишемией мозга на фоне стеноза магистральных сосудов головы // Клин, фармакология и терапия. 2005. - № 14. — С. 6-20.

48. Хунтеев Г.А., Заволоков И.Г., Черкас Ю.В., Дамбинова С.А. Практическое значение определения уровня аутоантител к NMDA типу глутаматных рецепторов в диагностике хронических расстройств мозгового кровообращения

49. Журн. невропатологии и психиатрии им.С.С.Корсакова. — 2001. — Т. 101, № 11.-С. 44-47.

50. Шитикова А.С. и соавт. Метод определения внутрисосудистой активности тромбоцитов и его значение в клинической практике. // Клин. лаб. диагностика.1997. №2. — С.23 - 35.

51. Шитикова А.С. Механизмы нарушения гемостаза при антифосфолипидном синдроме // Учен, записки С.-Петерб. Гос. мед. ун-та им. И. П. Павлова. — 2004. -Т. 11,№3.-С. 47-59.

52. Шитикова А.С. Тромбоцитарный гемостаз. СПб., 2000. - 227 с.

53. Шиффман Ф.Дж. Патофизиология крови / Пер. с англ. — М.; СПб.: Невский диалект, БИНОМ, 2000. 448 с.

54. Шмидт Е.В. Классификация сосудистых поражений головного и спинного мозга // Журн. невропатологии и психиатрии им. С.С.Корсакова. — 1985. — Т. 85, №9.-С. 1281 1288.

55. Яворская В.А., Фломин Ю.В., Дьолог Н.В., Гребенюк А.В. Тромболитическая терапия при инсульте // Лжи УкраТни. — 2004. № 11.-С. 112.

56. Akhtar N., Deleu D., Kamran S. Haematologic disorders and cerebral venous thrombosis // J. Pak. Med. Assoc. 2006. - Vol. 56, N 11. - P. 498 - 501.

57. Albers G.W., Alexandrov A.V., Alger J.L et al. Acute stroke imaging research roadmap // Stroke. 2008. - Vol. 36, N 5. - P. 1621 - 1628.

58. Alexandrov A.V., Grotta J.C., Sagg R.M. et al. Argatroban tPA stroke study: study design and results in the first treated cohort // Arch Neurol. — 2006. — Vol. 63, N8.-P. 1057-1062.

59. Alfthan G., Pekkanen J., Jauhiainen M. et al. Relation of serum homocysteine andlipoproteina concentrations to atherosclerotic disease in a prospective Finnish population based study I I Atherosclerosis. — 1994. — Vol. 106, N 1. P. 9-19.

60. Altaian R., Scazziota A.S., Herrera M.L., Gonzalez C. Thrombin generation by activated factor VII on platelet activated by different agonists. Extending the cell -based model of hemostasis // Thromb. J. — 2006. — N 4. — P. 5.

61. Amarenco P., Cohen A., Tzourio C. et al. Classification of stroke subtypes // Cerebrovasc Dis. 2009. - Vol.27, N 5. - P. 493 - 501.

62. American Heart Association. 2001 Heart and stroke statistical update. Dallas, Texas: American Heart Association, 2001.

63. Arkel Y.S., Ku D.H., Gibson D., Lam X. Ischemic stroke in a young patient with protein C deficiency and prothrombin gene mutation G20211A // Blood Coagul. Fibrinolysis. 1998. - Vol. 9, N 8. - P. 757 - 760.

64. Arnoux D., Boutiere B., Sanmarco M. Antiphospholipid antibodies: clinical significance and biological diagnosis // Ann. Biol. Clin. (Paris). 2000. — Vol. 58, N 5. —P.557 - 574.

65. Aznar J., Mira Y., Vaya A, et al. Factor V Leiden and prothrombin G20210A mutation in young adults with cryptogenic ischemic stroke // Thromb. Haemost. . -2004.-Vol. 91, N5.-P. 1031 1034.

66. Badimon L., Vilahur G. Platelets, arterial thrombosis and cerebral ischemia // Cerebrovasc. Dis. 2007. - Vol. 24, Suppl 1. - P. 30 - 39.

67. Balthazar E.J., Birnbaum B.A., Megibow A.J. et al. Closed loop and strangulating intenstinal obstructions: CT signs // Radiology. - 1992. - Vol. 185, N 3. — P.769 - 775.

68. Benchoua A., Guegan C., Couriaud C. et al. Specific caspase pathways are activated in two stages of cerebral infarction // J. Neurosci. — 2001. Vol. 21, N 18. — P. 7127-7134.

69. Bhatt D.I., Topol E.J. Scientific and therapeutic advances in antiplatelet therapy // Nat. Rev. Drug Discov. 2003. - Vol. 2, N 1. - P. 15 - 28.

70. Blankenberg F.G., Kalinyak J., Liu L. et al. 99mTc HYNIC - annexin V SPECTimaging of acute stroke and its response to neuroprotective therapy with anti Fas ligand antibody // Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. - 2006. - Vol. 33, N 5. - P. 56 -74.

71. Blann A.D., Boos C.J. et al. Assessment of endothelial damage/dysfunction: a focus on circulating endothelial cells // Methods Mol Med. — 2007. Vol. 139. - P. 211-224.

72. Blann A.D., Lip G.Y.H., Shantsila T. Circulating endothelial cells: from bench to clinical practice // J Thromb Haemost. 2008. - Vol. 6, N 5. - P. 865 - 868.

73. Blann A.D., Ridker P.M., Lip G.Y.H. Endothelium and fibrinolysis in hypertension: important facets of a prothrombotic state? // Hypertension. — 2008. — Vol. 52,N2.-P. 314-321.

74. Blann A.D., Lip G.Y.H., Beevers D.G. et al. Soluble P-selectin in atherosclerosis: a comparison with endothelial cell and platelet markers // Thromb. Haemost. — 1997.- Vol. 77, N 6. P. 1077 - 1080.

75. Bonetti PO, Lerman LO, Lerman A. Endothelial dysfunction. A marker of atherosclerotic risk // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. — 2003. Vol. 23, N 2. — P. 168-175.

76. Bonita R., Beaglehole R. Stroke prevention in poor countries: time for action // Stroke. 2007. - Vol. 38, N 11. - P. 2871-2872.

77. Bonita R. Stroke prevention: a global perspective // Stroke Prevention / Norris J.W., Hachinsky V., eds. N.York: Oxford Univ. Press, 2001. - P. 259 - 274.

78. Boushey C.J., Beresford S.A.A., Omenn G.S., Motulsky A.G. Quantitive Assessment of Plasma Homocysteine as a Risk Factor for Vascular Disease // JAMA.- 1995. Vol. 274, N 13. -P. 1049 - 1057.

79. Boysen G., Brander T., Christensen H. et al. Homocysteine and risk of recurrentstroke // Stroke. 2003. - Vol. 34, N 5. - P. 1258 - 1261.

80. Brandt J.T, Triplett D.A., Alving B., Scharrer I. Criteria for the diagnosis of lupus anticoagulants: An update // Thromb. Haemost. 1995. - Vol. 74, N 4. - P. 1185 -1190.

81. Brey R., Stallworth C., McGlasson D. et al. Antiphospholipid antibodies and stroke in young women // Stroke. 2002. - Vol. 33, N 10. - P. 2396-2401.

82. Brey R.L., Roldan J.F. Neurologic manifestations of the antiphospholipid syndrome// Curr Rheumatol Rep. 2007. - Vol. 9, N 2. - P. 109 - 115.

83. Brey RL., Muscal E. Neurologic manifestations of the antiphospholipid syndrome: integrating molecular and clinical lessons // Curr Rheumatol Rep. — 2008. Vol. 10, Suppl 1. - P. 67 - 73.

84. Brown A.S., Hong Y., de Belder A. et al. Megakaryocyte ploidy and platelet changes in human diabetes and atherosclerosis // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. — 1997.-Vol. 17, N4.-P. 802-807.

85. Bushnell C.D., Datta S.K., Goldstein L.B. Cost implications of specialized coagulation testing for acute ischemic stroke // J. Stroke Cerebrovasc. Dis. — 2001. — Vol. 10, N6.-P. 279-283.

86. Butterworth R.J., Bath P.M. The relationship between mean platelet volume, stroke subtype and clinical outcome // Platelets. 1998. - Vol. 9, N 6. - P. 359 - 364.

87. Cattaneo M. Hyperhomocysteinemia and venous thromboembolism// Semin Thromb Hemost. 2006. - Vol. 32, N 7. - P. 716-723.

88. Cederholm A., Frostegard J. Annexin V as a novel player in prevention of atherothrombosis in SLE and in the general population // Ann. N Y Acad. Sci. — 2007. Vol. 1108, N 1. - P. 96 - 103.

89. Cederholm A., Frostegard J. Annexin V multitasking: a potentially novel antiatherothrombotic agent? // Drug News Perspect. 2007. - Vol. 20, N 5. - P. 321 -326.

90. Cervera R., Bucciarelli S., Espinosa G., et al. Catastrophic antiphospholipid syndrome: lessons from the "CAPS Registry"~a tribute to the late Josep Font // Ann

91. N Y Acad Sci. 2007. - Vol. 1108. - P. 448-456.

92. Chamorro A., Hallenbeck J. The harms and benefits of inflammatory and immune responses in vascular disease // Stroke. 2006. - Vol. 37, N 2. - P. 291-293.

93. Chancellor A.M., Glasgow G.L., Ockelford P.A. et al. Etiology, prognosis, and hemostatic function after infarction in young adults // Stroke. — 1989. — Vol. 20, N 4. -P. 477-482.

94. Chandler W. L., Trimble S.L., Loo S.C., Mornin D. Effect of PAI-1 level on the molar concentration of active tissue plasminogen activator (t PA) and t - PA/PAI - 1 complex in plasma // Blood. - 1990. - Vol. 76, N 5. - P. 930 - 937.

95. Cherian P., Hankey G.J., Eilcelboom J.W. et al. Endothelial and platelet activation in acute ischemic stroke and its etiological subtypes // Stroke. 2003. - Vol. 34, N 9. -P. 2132-2137.

96. Collet J.P., Allali Y, Lesty C, et al. Altered fibrin architecture is associated with hypofibrinolysis and premature coronary atherothrombosis // Circulation. — 2006. — Vol. 26, N 11. P. 2567-2573.

97. Colman RW. Are hemostasis and thrombosis two sides of the same coin? // J. Exp. Med. 2006. - Vol. 203, N 3. - P. 493-495.

98. Cushman M. Haemostatic risk factors for cardiovascular disease // Hematology. 1999. - Vol. 4, N 3. - P. 236 - 242.

99. Cushman M., Rosendaal F.R., Psaty B.M. et al. Factor V Leiden is not a risk factor for arterial vascular disease in the elderly: results from the Cardiovascular

100. Health Study I I Thromb. Haemost. 1998. - Vol. 79, N 5. - P. 912 - 915.

101. D'Andrea G., Cananzi A.R., Perini F. et al. Platelet function in acute ischemic stroke: relevance of granule secretion // Cerebrovasc. Dis. — 1994. — Vol. 14, N 5. — P. 163 169.

102. D'Erasmo E., Aliberti G., Celi F.S. et al. Platelet count, mean platelet volume and their relation to prognosis in cerebral infarction // J. Intern. Med. — 1990. — Vol. 227,N1.-P. 11-14.

103. Davi G., Patrono C. Platelet activation and atherothrombosis // N. Engl. J. Med. 2007. - Vol. 357, N 24. - P. 2482 - 2494.

104. Dawes J., Smith R.C., Pepper D.S. The release, distribution, and clearance of human |3 thromboglobulin and platelet factor 4 // Thromb. Res. - 1978. — Vol. 12, N 5.-P. 851 -861.

105. De Bono D. Significance of raised plasma concentrations of tissue type plasminogen activator and plasminogen activator inhibitor in patients at risk from ischemic heart disease // Br. Heart J. - 1994. - Vol. 71, N 6. - P. 504 - 507.

106. De Jong C., Stehouwer C.D., van-den-Berg M. et al. Endothelial marker proteins in hyperhomocysteinemia // Thromb. Haemost. — 1997. Vol. 78, N 5. — P. 5:1332 -1337.

107. Di Napoli M., Singh P. Is plasma fibrinogen useful in evaluating ischemic stroke patients?: why, how, and when // Stroke. 2009. - Vol. 40, N 5. - P. 1549-1552.

108. Dong Q.L., Zhang C. Association between the polymorphism of beta -fibrinogen gene 455G/A and ischemic stroke // Stroke. - 2004. - Vol. 21, N 3. - P.274 276.

109. Doshi S.N., Goodfellow J., Lewis M.J., McDowell I.W. Homocysteine and endothelial function // Cardiovasc. Res. 1999. - Vol. 42, N 3. - P. 578 - 582.

110. Dumont E.A., Reutelingsperger C.P., Smits J.F. Real time imaging of apoptotic cell - membrane changes at the single - cell level in the beating murine heart // Nat. Med. -2001. - Vol. 7, N 12. - P. 1352 - 1355.

111. Eikelboom J.W., Hankey G.J., Wong C.R. et al. Methylenetetrahydrofolate reductase polymorphisms and homocysteine-lowering effect of vitamin therapy in Singaporean stroke patients // Stroke. 2006. - Vol. 37, N 2. - P. 456-460.

112. Fallon U.B., Elwood P., Ben-Shlomo Y. et al. Homocysteine and ischemic stroke in men: the Caerphilly study // J. Epidemiol, community Health. 2001. — Vol. 55, N2.-P. 91 -96.

113. Faraci F.M. Hyperhomocysteinemia: a million ways to lose control // Arterioscler. Thromb. Vasc.Biol. -2003. Vol. 23, N 3. - P. 371 - 373.

114. Fassbender K., Herrmann W. .et al. Biomarkers of folate and vitamin B12 are related in blood and cerebrospinal fluid // Clin Chem. — 2007. — Vol. 53, N 2. — P. 326-333.

115. Feinberg W.M., Bruck D.C., Jeter M.A., Corrigan J.J. Fibrinolysis after acute ischemic stroke // Thromb Res. 1991. - Vol. 64, N 1. - P. 117 - 127.

116. Feinberg W.M., Bruck D.C., Ring M.E., Corrigan J.J. Hemostatic markers in acute stroke // Stroke. 1989. - Vol. 20, N 5. - P. 592 - 597.

117. Finazzi G., Galli M., Borrelli G., et al. Clinical significance of different antiphospholipid antibodies in the WAPS (warfarin in the antiphospholipid syndrome) study // Blood. 2007. - Vol. 110, N 4. - P. 1178-1183.

118. Fisher M. Injuries to the vascular endothelium: vascular wall and endothelial dysfunction // Rev Neurol Dis. 2008. - Vol.5, N 1. - P. 4-11.

119. Fisher M., Zipser R. Increased excretion of immunoreactive thromboxane B2 in cerebral ischemia // Stroke. 1985. - Vol.16, N 1. - P. 10 - 13

120. Fisher M., Cheung K., Howard G., et al. New pathways for evaluating potentialacute stroke therapies // Int J Stroke. 2006. - Vol. 1, N 2. - P. 52-58.

121. Flaherty M.J., West S., Heimark R.L. et al. Placental anticoagulant protein I: measurement in extracellular fluids and cells of the hemostatic system // J. Lab. Clin. Med.-1990.-Vol. 115, N2.-P. 174-181.

122. Flossman E., Rothwell P.M., Giles M.F. Patient behavior immediately after transient ischemic attack according to clinical characteristics, perception of the event, and predicted risk of stroke// Stroke. 2006. - Vol. 37, N 5. - P. 1254-1260.

123. Folsom A.R. Addendum to "Prospective study of the G20210A polymorphism in the prothrombin gene, plasma prothrombin concentration, and incidence of venous thromboembolism // Am J Hematol. 2007. - Vol. 82, N 7. - P. 698.

124. Folsom A.R., Qamhieh H.T., Wing R.R. et al. Impact of weight loss on plasminogen activator inhibitor (PAI 1), factor VH, and other hemostatic factors in moderately overweight adults // Arterioscler Thromb. — 1993. — Vol. 13, N 2. — P. 162 - 169.

125. Folsom A.R., Rosamond W.D., Shahar E. et al. Prospective study of markers of hemostatic function with risk of ischemic stroke: the Atherosclerosis Risk in Communities (ARIC) Study Investigators // Circulation. 1999. - Vol. 100, N 7. - P. 736 - 742.

126. Folsom A. R., Eckfeldt J. H., Weiterman Sh. et al. Relation of carotid artery wall thickness to diabetes mellitus, fasting glucosae and body size and physical activity // Stroke. 1994. - Vol. 25, N 1. - P. 66 - 73.

127. Freyburger G., Janvier G., Dief S., Boisseau M.R. Fibrinolytic and hemorheologic alterations during and after elective aortic graft surgery: implications for postoperative management // Anest. Analg. 1993. - Vol. 76, N 3. - P. 504 - 512.

128. Frijns C.J.M., Kappelle LJ. Inflammatory cell adhesion molecules in ischemic cerebrovascular disease // Stroke. -2002. Vol. 33. N 8. -P. 2115 - 2122.

129. Fujii Y., Tanaka R., Takeuchi S. et al. Serial changes in haemostasis after intracranial surgery // Neurosurgery. — 1994. — Vol. 35, N 1. — P. 26 33.

130. Fuster V. Chronic multívessel disease: past, present and future. // Rev Esp Cardiol. 2008. - Vol. 61, N 2.- P. 2- 9.

131. Gaspersic N., Rot U., Cucnik S. et al. Anti annexin V antibodies in patients with cerebrovascular disease // Ann. Rheum. Dis. — 2003. — Vol. 62, N 2. — P. 188 -189.

132. Gaur S.P., Gard R.K., Agarwal S. et al. Platelet functions and lipid profile within 24 hours following an attack of TIA, thrombotic and haemorrhagic stroke // Indian J. Med. Res. -1994. -N 99. -P. 259 63.

133. Ginsburg K.S., Liang M.H., Newcomer 1. et al. Anticardiolipin antibodies and the risk for ischemic stroke and venous thrombosis // Ann. Intern. Med. — 1992. — Vol. 117,N12.-P. 997- 1002.

134. Gladwin A.M., Carrier M.J., Beesley JJE.et al. Identification of mRNA for PDGF b chain in human megakaryocytes isolated using a novel immunomagnetic separation method // Br. J. Haematol. - 1990. - Vol. 76, N 3. - P. 333 - 339.

135. Gorelick P.B. The burden and management of TIA and stroke in government-funded healthcare programs // Am J Manag Care. 2009. - Vol. 15, N 6. - P. 177184.

136. Gorelic P.B. Challenges of designing trials for the primary prevention of stroke // Stroke. 2009. - Vol. 40, N 3. - P. 82 - 84.

137. Goulding, NJ., Godolphin, J.L., Sharland, P.R. et al. Anti inflammatory lipocortin 1 production by peripheral blood leucocytes in response to hydrocortisone //Lancet.-1990.-Vol. 335, N 8703.-P. 1416-1418.

138. Grau A J., Sigmund R., Hacke W. Modification of platelet aggregation by leukocytes in ischemic stroke // Stroke. -1994. Vol. 25, N 11. - P. 2149 - 2152.

139. Greaves M. Pathogenesis and management of antiphospholipid syndrome //

140. Thromb Res. 2009. - Vol. 123, Suppl. 2. - P. 4-9.

141. Greisenegger S., Endler G., Hsieh K. et al. Is elevated mean platelet volume associated with a worse outcome in patients with acute ischemic cerebrovascular events? // Stroke. -2004. Vol. 35, N 7. -P. 1688 - 1691.

142. Haapaniemi E., Tatlisumak T., Soinne L. et al. Natural anticoagulants (antithrombin III, ptotein C., and protein S) in patients with mild to moderate ischemic stroke // Acta Neurol. Scand. 2002. - Vol. 105, N 2. - P. 107 - 114.

143. Haapaniemi F., Soinne L., Syijala M. et al. Serial changes in fibrinolysis and coagulation activation markers in acute and convalescent phase of ischemic stroke // Acta Neurol. Scand. 2004. - Vol. 110, N 4. - P. 242 - 247.

144. Handa K., Kone S., Saku K. et al. Plasma fibrinogen level as an indépendant indicator of severity of coronary atherosclerosis // Atherosclerosis. — 1989. — Vol. 77, N2-3.-P. 209-213.

145. Hankey G.J. Is homocysteine a causal and treatable risk factor for stroke?// Lancet Neurol. 2007. - Vol. 6, N 9. - P. 751-752.

146. Hankey G.J., Warlow C. Treatment and secondary prevention of stroke: evidence, costs, and effects on individuals and populations // Lancet. 1999. - Vol. 354, N 9188. - P. 1457 - 1463.

147. Hankey G.J. Clinical update: management of stroke // Lancet. — 2007. — Vol. 369, N 9570. -P. 1330-1332.

148. Harrison D.G., Widder J., Grumbach I. et al. Endothelial mechanotransduction, nitric oxide and vascular inflammation // J Intern Med. — 2006. Vol. 259, N 4. - P. 351-363.

149. Hassan A., Hunt B J., CT Sullivan M. et al. Markers of endothelial dysfunction in lacunar infarction and ischemic leukoaraiosis // Brain. 2003. - Vol. 126, N 2. - P. 424 - 432.

150. Heerde W.L. van, Groot P.G. de, Reutelingsperger C.P. The complexity of the phospholipid binding protein Annexin V. // Thromb. Haemost. — 1995. — Vol. 73, N2.-P. 172- 179.

151. Hemker H.C., Béguin S. Thrombin generation in plasma: its assessment via the endogenous thrombin potential // Thromb. Haemost. — 1995. — Vol. 74, N 2. — P. 134-138.

152. Hoffman M., Whinna H.C., Monroe D.M. Circulating tissue factor accumulates in thrombi, but not in hemostatic plugs // J. Thromb. Haemost. 2006. — Vol. 4, N 9. -P. 2092-2093.

153. Homocysteine and risk of ischemic heart disease and stroke: a meta-analysis. The Homocysteine Studies Collaboration // JAMA. 2002. - Vol. 288, N 16. - P. 2015-2022.

154. Huisman M., Rosendaal F. Thrombophilia // Curr. Opin. Hematol. — 1999. — Vol. 6, N5.-P. 291-297.

155. Imaizumi M., Ashida K., Isalca Y. et al. Electron microscopic study of blood platelets in ischemic cerebrovascular disease // Jpn. J. Stroke. — 1990. — Vol. 12, N 3. -P. 279-287.

156. Iskra T., Turaj W., Slowilc A. et al. Hemostatyczne wskazniki uszkodzenia srodblonka w udarze niedokrwiennym spowodowanym choroba duzych lub malych naczyn // Pol Merkur Lekarski. 2006. - Vol. 21, N 125. - P. 429 - 433.

157. Iso H., Moriyama Y., Sato S. et al. Serum total homocysteine concentrations and risk of stroke and its subtypes in Japanese // Circulation. — 2004. — Vol. 109, N 22. — P. 2766 2772.

158. Itzecka J., Stelmasiak Z., Dobosz B. Aktywnosc procesu trombinogenezy u chorych z udarem niedokrwiennym mozgu // Neurol. Neurochir. Pol. 2001. — Vol. 35,N5.-P. 793-801.

159. Iwamoto T., Uno M., Kiuchi A. et al. Plasma P thromboglobulin gradientbetween the internal jugular and antecubital veins in cerebrovascular disease // J. Jpn. Coll. Angiol. 1991. - Vol. 31, N 12. - P. 1269 - 1273.

160. Iwamoto T., Kubo H., Talcasaki M. Platelet activation in the cerebral circulation in different subtypes of ischemic stroke and Binswanger's disease // Stroke. — 1995. — Vol. 26, N1.-P. 52-56.

161. Jafar J J., Menoni R., Feinberg H. et al. Selective platelet deposition during focal cerebral ischemia in cats // Stroke. 1989. - Vol. 20, N 5. - P. 664 - 667.

162. Janardhan V., Wolf P.A., Kase C.S. et al. Anticardiolipin antibodies and risk of ischemic stroke and transient ischemic attack: the Framingham cohort and off -spring study // Stroke. 2004. - Vol. 35, N 6. - P. 736 - 741.

163. Hoover-Plow J., Shchurin A., Hart E. et al. ' Genetic background determines response to hemostasis and thrombosis // BMC Blood Disord. — 2006. — N 6. — P. 6.

164. Jansson J.H., Nilsson T.K., Olofsson B.O. Tissue plasminogen activator and other risk factors as predictors of cardiovascular events in patients with severe angina pectoris//Eur. Heart J. -1991. -Vol. 12, N2.-P. 157-161.

165. Jeppesen L.L., Jorgensen H.S., Nakayama H. et al. Tissue plasminogen activator is elevated in women with stroke // J. Stroke Cerebrovasc. Dis. — 1998. — Vol. 7, N 3. -P. 187-191.

166. Johansson L., Jansson J.H., Boman K. et al. Prospective study on soluble thrombomodulin and von Willebrand factor and the risk of ischemic and hemorragic stroke // Thromb. Haemost. 2002. - Vol. 87, N 2. - P. 211 - 217.

167. Jood K., Danielson J., Ladenvall C. et al. Fibrinogen gene variation and ischemic stroke // J. Thromb. Haemost. 2008. - Vol. 7, N 6. - P. 897-904 .

168. Joseph R., D'Andrea G., Oster S.B., Welch IC.M.A. Whale blood platelet function in acute ischemic stroke // Stroke. 1989. - Vol. 20, N 1. - P. 38 - 44.

169. Kaneko N., Matsuda R., Chiwaki F. et al. Clinical significance of measurement of plasma annexin V concentration of patients in the emergency room // Resuscitation. 2003. - Vol. 57, N 2. - P. 171 - 177.

170. Kaneko N., Matsuda R., Hosoda S, et al. Measurement of plasma annexin V by ELISA in the early detection of acute myocardial infarction // Clin. Chem. Acta. — 1996. Vol. 251, N 1. -P.65 - 80.

171. Kaneko N., Matsuda R., Chiwaki F., Hosoda S. Purification of cardiac annexin V from the beagle dog heart and changes in its localization in the ischemic rat heart // Heart Vessels. 1994. - Vol. 9, N 3. - P.148 - 154.

172. Kenis H., Hofstra L, Reutelingsperger CP. Annexin A5: shifting from a diagnostic towards a therapeutic realm // Cell Mol Life Sci. 2007. - Vol. 64, N 22. -P. 2859-2862.

173. Khor B., Van Cott E.M. Laboratory evaluation of hypercoagulability // Clin Lab Med. 2009. - Vol. 29, N 2. - P. 339-366.

174. Kirino T. Delayed neuronal death in the gerbil hippocampus following ischemia // Brain Research. 1982. - Vol. 239, N 1. - P. 57 - 69.

175. Kittner S.J., Stern B.J., Wozniak M. et al. Cerebral infarction in young adults : the Baltmore Washington Cooperative Young Stroke Study // Neurology. — 1998. -Vol. 50,N4.-P. 890-894.

176. Knuiman M.W., Folsom A.R., Chambless L.E. et al. Association of hemostatic variables with MRI detected cerebral abnormalities: the Atherosclerosis Risk in Communities Study // Neuroepidemiology. - 2001. - Vol. 20, N 2. - P. 96 - 104.

177. Koh S.C., Yuen R., Viegas O.A. et al. Plasminogen activators t-PA, u-PA and its inhibitor (PAI) in normal males and females // Thromb. Haemost. — 1991. — Vol. 66, N5.-P. 581 -585.

178. Lee I, Lee H, Kim JM, Chae EH, Kim SJ, Chang N. Short-term hyperhomocysteinemia-induced oxidative stress activates retinal glial cells and increases vascular endothelial growth factor expression in rat retina

179. Biosci Biotechnol Biochem. 2007. - Vol. 71, N 5. - P. 1203-1210.

180. Lentz S.R. Mechanisms of homocysteine-induced atherothrombosis // J. Thromb. Haemost. -2005. Vol. 3, N 8. -P. 1646 - 1654.

181. Levine S.R., Brey R.L., Tilley B.C. et al. Antiphospholipid antibodies and subsequent thrombo occlusive events in patients with ischemic stroke // JAMA. — 2004. - Vol. 291, N 5. - P. 576 - 584.

182. Li Y.H., Gong PL. Neuroprotective effects of dauricine against apoptosis induced by transient focal cerebral ischaemia in rats via a mitochondrial pathway // Clin Exp Pharmacol Physiol. 2007. - Vol. 346, N 3. - P. 117 - 184.

183. Lim W., Crowther M.A. Antiphospholipid antibodies: critical review of the literature // Curr. Opin. Hematol. 2007. - Vol. 14, N 5. - P. 494 - 499.

184. Lindemann S., Tolley N.D., Dixon D.A. et al. Activated platelets mediate inflammatory signaling by regulated interleukin lb-synthesis // J. Cell Biol. — 2001. — Vol. 154, N3.-P. 485-490.

185. Lindgren A., Brattstrom L., Norrving B. et al. Plasma homocysteine in the acuteiand convalescent phases after stroke // Stroke. 1995. - Vol. 26, N 5. - P. 795 - 800.

186. Lindgren A., Lindoff C., Norrving B. et al. Tissue plasminogen activator and plasminogen activator inhibitor in stroke patients // Stroke. 1996. - Vol. 27, N 6. — P. 1066- 1071.

187. Lipton P. Ischemic cell death in brain neurons // Physiol. Rev. 1999. - Vol. 79, N4.-P. 1431 -1568.

188. Lorberboum M., Blankenberg F.G., Sadeh M., Lampl Y. In vivo imaging of apoptosis in patients with acute stroke: correlation with blood brain barrier permeability //Brain Res.-2006.-Vol. 1103,N 1.-P. 13 - 19.

189. Ludlam C.A. Evidence for the platelet specificity of p thromboglobulin and studies on its plasma concentration in healthy individuals // Br. J. Haematol. - 1979.-Vol. 41, N2.-P. 271 -278.

190. Lui L., Lin Z., Zheshuang S., Guangsen Z., Shenyong L., Ping C. Platelet hyperfimction exists in both acute non haemorrhagic stroke // Thromb. Res. — 1994. - Vol. 75, N 4. - P. 485 - 490.

191. Luscher T.F., Tschudi M.R., Wenzel R.R., Noll G. Endotheliale Dysfunktion und Stickstoffinonoxid (NO; Nitric Oxide). // Internist. 1997. - Bd. 38, N 5. - S. 411-419.

192. Macko R.F., Kittner S.J., Epstein A. et al. Elevated tissue plasminogen activator antigen and stroke risk: the Stroke Prevention In Young Women Study // Stroke. — 1999. Vol. 30, N 1. - P. 7 - 11.

193. Malinow M.R. Plasma homocysteine and arterial occlusive diseases: a mini-review.// Clin. Chem. 1995. - Vol. 41, N 1. - P. 173 - 176.

194. Mann K.G., Whelihan MF, Butenas S, Orfeo T. Citrate anticoagulation and the dynamics of thrombin generation // J Thromb Haemost — 2007. — Vol. 5, N 10. — P. 2055-2061.

195. Marcus H.S., Nadira A., Swaminathan R. et al. A common polymorphism in the methylenetetrahydrofolate reductase gene, homocysteine, and ischemic cerebrovascular disease // Stroke. 1997. - Vol. 28, N 9. - P. 1739 - 1743.

196. Marenberg ME, Risch N, Berman LF, Floderus B, de Faire U. Genetic susceptibility to death from coronary heart disease in a study of twins // N. Engl. J. Med. 1994. - Vol. 330, N 15. - P. 1041-1046.

197. Markus H.S., Ali N., Swaminathan R. et al. A common polymorphism in the methylenetetrahydrofolate reductase gene, homocysteine, and ischemic cerebrovascular disease // Stroke. 1997. - Vol. 28, N 9. - P. 1739 - 1743.

198. Martin J.F. The relationship between platelet and megakaryocyte volumes // Blood Cells. 1989. - Vol. 15, N 1. - P. 108 - 117.

199. Martinelli I., Battaglioli T., Pedotti P. et al. Hyperhomocysteinemia in cerebral vein thrombosis // Blood. 2003. - Vol. 102, N 4. - P. 1363 - 1366.

200. Matsuda R., Kaneko N., ICikuchi M., Chiwaki F. Clinical significance of measurement of plasma annexin V concentration of patients in the emergency room // Resuscitation. 2003. - Vol. 57, N 2. - P. 171 - 177.

201. Meade T.W., Ruddock V., Stirling Y., Chakrabarti R., Miller G.J. Fibrinolytic activity, clotting factors, and long term incidence of ischemic heart disease in the Northwick Heart Study // Lancet. - 1993. - Vol. 342, N 8879. - P. 1076 - 1079.

202. Meiklejohn D.J., Vickers M.A., Dijkhuisen R. et al. Plasma homocysteine concentrations in the acute and convalescent periods of atherothrombotic stroke // Stroke. 2001. - Vol. 32, N 1. - P. 57 - 62.

203. Metcalf B., Warren C.W., Slater D.N. et al. Changes in megakaryocyte and platelets in simulated high altitude rats // Clin. Sci. 1984. - Vol. 67, Suppl. 9. - P. 76a.

204. Mettinger K.L., Egberg N. A study of hemostasis in ischemic cerebrovascular disease, III: abnormalities in vascular plasminogen activators, antiactivators and a — antiplasmin // Thromb. Res. 1982. - Vol. 26, N 3. - P. 203 - 210.

205. Mohanty S., Behar M., Saxena R. Activated protein C resistance in young stroke patients // Thromb. Haemost. 1999. - Vol. 81, N 3. - P. 465 - 466.

206. Moller J., Nielsen G.M., Tvedegaard K.C. et al. A meta-analysis of cerebrovascular disease and hyperhomocysteinaemia // Scand. J. Clin. Lab. Invest. — 2000. Vol. 60, N 6. - P. 491 - 499.

207. Moncada S., Higgs E.A. Nitric oxide and the vascular endothelium // Handb Exp Pharmacol. 2006. - Vol. 176, N 1. - P. 213-254.

208. Moreno P.R., Purushothaman K.R., Purushothaman M. et al. Haptoglobin genotype is a major determinant of the amount of iron in the human atherosclerotic plaque // J Am Coll Cardiol -2008. Vol. 52, N 13. -P. 1049-1051.

209. Morita H., Kurihara H., Tsubaki S. et al. Methylenetetrahydrofolate reductase gene polymorphism and ischemic stroke in Japanese // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 1998. - Vol. 18, N 9. - P. 1465 - 1469.

210. Mosnier L.O., Bouma B.N. Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor (TAFI)— how does thrombin regulate fibrinolysis? // Ann Med. 2006. - Vol. 38, N 6.- P. 378-388.

211. Moster M.L. Coagulopathies and arterial stroke // J. Neuroophthal. — 2003. — Vol. 23, N 1. — P. 63 71.

212. Mudd S.H., Brosnan J.T., Brosnan M.E., et al. Methyl balance and transmethylation fluxes in humans // Am J Clin Nutr.- 2007.- Vol. 85, N 1. -P. 19 -25.

213. Nappo F., De Rosa N., Marfella R. et al. Impairment of endothelial functions by acute hyperhomocysteinemia and reversal by antioxidant vitamins // JAMA. 1999.-Vol. 281, N22.-P. 2113-2118.

214. Nencini P., Baruffi M.C., Abbate R. et al. Lupus anticoagulant and anticardiolipin antibodies in young adults with cerebral ischemia // Stroke. — 1992. — Vol. 23,N2.-P. 189-193.

215. Nilson T.K., Sondell K.M., Norberg B.O., Back O. Plasma levels of endothelial derived haemostatic factors in autoimmune thrombocytopenia and haemolytic anaemia // J. Intern. Med. - 1990. - Vol. 228, N 3. - P. 249 - 252.

216. Nygard O., Nordrehaug J.E., Refsum H. et al. Plasma homocysteine levels and mortality in patients with coronary artery disease. // N. Engl. J. Med. 1997. — Vol. 337, N 4. — P.230 - 236.

217. CTMalley T., Langhorne P., Elton R.A., Stewart C. Platelet size in stroke patients // Stroke. 1995. - Vol. 26, N 6. - P. 995 - 999.

218. Olah L., Csepany T., Bereczky Z., Kerenui A., Misz M., Kappelmayer J., Csiba L. Termeszetes antikoagulans feheijek aktivitasanak vizsgalata akut ischaemias stroke-ban // Ideggyogy Sz. 2005. - Vol. 58, N 1 - 2. - P. 33 - 39.

219. Olivot J.M., Labreuche J., De Broucker T. et al. Thrombomodulin gene polymorphisms in brain infarction and mortality after stroke // J Neurol. — 2008. -Vol. 255, N4. -P. 514-519.

220. Parmar D.N., Sofat A., Bowman R. et al. Visual prognostic value of the pattern electroretinogram in chiasmal compression // Br. J. Ophthalmol. — 2000. — Vol. 84, N 9.-P. 1024-1026.

221. Parsons M.W. Perfusion CT: is it clinically useful? // Int J Stroke. 2008. - Vol. 3,N 1. —P. 41-50.

222. Potter Van Loon B.J., Kluft C., Adder J. et al. The cardiovascular risk factor plasminogen activator inhibitor type 1 is related to insulin resistance // Metabolism. -1993. Vol. 42, N 8. - P. 945 - 949.

223. Potti A., Rabadi K.M., Willardsen D.D. et al. Thrombophilia in ischemic stroke// West. J. Med. 1998. - Vol. 169, N 6. - P. 385 - 386.

224. Rahemtullah A., Van Cott E.M. Hypercoagulation testing in ischemic stroke //

225. Arch. Pathol. Lab. Med. 2007. - Vol. 131, N 6. - P. 890 - 901.

226. Ranby M., Bergsdorf N., Nillson T. et al. Age dependence of tissue plasminogen activator concentrations in plasma, as studied by an improved enzyme-linked immunosorbent assay // Clin. Chem. 1986. - Vol. 32, N 12. - P. 2160 - 2165.

227. Rand J.H., Wu X.X., Quinn A.S., et al. Resistance to annexin A5 anticoagulant activity: a thrombogenic mechanism for the antiphospholipid syndrome // Lupus. -2008. Vol. 17, N 10. - P. 922-930.

228. Rand J.H., Wu X.X., Ham A. et al. Antiphospholipid antibodies accelerate plasma coagulation by inhibiting annexin V binding to phospholipids: a "lupus procoagulant" phenomenon // Blood. - 1998. - Vol. 92, N 5. - P. 1652 - 1660.

229. Relton J.K., Sloan K.E., Frew E.M., et al. Inhibition of alpha4 integrin protects against transient focal cerebral ischemia in normotensive and hypertensive rats // Stroke. 2001. - Vol. 32, N 1. - P. 199-205.

230. Reuner K.H., Ruf A., Grav A. et al. Prothrombin gene G20211A transition is a risk factor for cerebral venous thrombosis // Stroke. — 1998. — Vol. 29, N 9. — P. 1765 1769.

231. Ridker P.M., Hennekens C.H., Lindpaintner K. et al. Mutation in the gene coding for coagulation factor V and risk of myocardial infarction, stroke, and venous thrombosis in apparently men // N. Engl. J. Med. 1995. - Vol. 332, N 14. - P. 912 -917.

232. Ridker P.M., Shih J., Cook T.J. et al. Plasma Homocysteine Concentration, Statin Therapy, and the Risk of First Acute Coronary Events // Circulation. 2002. -Vol. 105, N 15. —P. 1776-1779.

233. Ridker P.M., Hennekens C.H., Stampfer MJ. et al. Prospective study of endogenous tissue plasminogen activator and risk of stroke // Lancet. — 1994. Vol. 343,N8903.-P. 940-943.

234. Rojas E., Arispe N., Haigler H.T. et al. Identification of annexin as calcium channels in biological membranes // Bone Miner. 1992. — Vol. 17, N 2. — P. 214 -218.

235. Romisch J., Schuler E., Bastian et al. Annexins I to VI: quantitative determination in different human cell types and in plasma after myocardial infarction // Blood Coagulat. Fibrinol. 1992. - Vol. 3, N 1. - P. 11 - 17.

236. Ross R. Atherosclerosis: an inflammatory disease // N. Engl. J. Med. 1999. — Vol. 340, N2.-P. 115-126.

237. Rothwell P.M. Atherothrombosis and ischemic stroke // BMJ. 2007. - Vol. 334,N7590.-P. 379-380.

238. Rudic R.D., Sessa W.C. Nitric oxide in endothelial dysfunction and vascular remodeling : clinical correlates and experimental links // Am. J. Hum. Genet. 1999.- Vol. 64, N 3. P. 673 - 677.

239. Sacco R.L., Anand IC., Lee H.S. et al. Homocysteine and the risk of ischemic stroke in a triethnic cohort: the Northern Manhattan Study // Stroke. — 2004. — Vol. 35,N10.-P. 2263 2269.

240. Sakata T., Kario IC., Katayama Y. et al. Studies on congenital protein C deficiency in Japanese: prevalence, genetic analysis, and relevance to the onset of arterial occlusive disease // Semin. Thromb. Hemost. — 2002. — Vol. 26, N 1. — P. 11- 16.

241. Santamaría A., Oliver A., Borrell M. et al. Risk of ischemic stroke associated with functional thrombin activatable fibrinolysis inhibitor plasma levels // Stroke. — 2003. - Vol. 34, N 10. - P. 2387 - 2391.

242. Satom K., Imaizumi T., Yoshida H et al. Plasma 11-dehydrothromboxane B2; a reliable indicator of platelet hyperfunction in patients with ischemic stroke // Acta Neurol. Scand. 1991. - Vol. 83, N 1. - P. 99 - 102.

243. Schafer A., Bauersachs J. Endothelial dysfunction, impaired endogenous platelet inhibition and platelet activation in diabetes and atherosclerosis // Curr. Vase. Pharmacol. 2008. - Vol. 6, N 1. - P. 52 - 60.

244. Selhub J. Public health significance of elevated homocysteine // Food Nutr Bull. -2008.-Vol. 29, N2.-P. 116-125.

245. Shah A.B., Beamer N., Coull B.M. Enhanced in vivo platelet activation in subtypes of ischemic stroke // Stroke. 1985. - Vol. 16, N 4. - P. 643 - 647.

246. Sharma S.C., Vijayan G.P., Seth H.N., Suri M.L. Platelet adhesiveness, plasma fibrinogen, and fibrinolytic activity in young patients with ischemic stroke // J. Neurol. Neurosurg. Psychiatry. 1978. - Vol. 41, N 2. - P. 118 - 121.

247. Siesjo B.K. Pathophysiology and treatment of focal cerebral ischemia. Part I: Pathophysiology. (1992) // J Neurosurg. 2008. - Vol. 108, N 3. - P. 616-631.

248. Singh V.P., Singh M.K., Kumar V. et al. Antithrombin Til activity in cerebrovascular accidents // J. Assoc. Physicians India. — 2003. — N 51. — P. 268 -271.

249. Slooter A.J., Rosendaal F.R., Tanis B.C. et al. Prothrombotic conditions, oral contraceptives, and the risk of ischemic stroke // J. Thromb. Haemost. 2005. - Vol. 3, N 6. — P. 1213-1217.

250. Smith N.M., Pathansali R., Bath P. M. PI Al/PI A2 polymorphism of platelet glycoprotein Ilia and risk of cardiovascular disease letter. // Lancet. — 1997. — Vol. 349, N9058.-P. 1099.

251. Smith N.M., Pathansali R., Bath P. M. Platelets and stroke // Vase. Med. 1999. -Vol. 4, N3.-P. 165-172.

252. Smith N. M., Butterworth R.J., Bath P.M.V. von Willebrand factor, P-selectin and fibrinogen in acute stroke // Eur. J. Clin. Invest. — 1997. Vol. 27, Suppl. 1. - P. 119.

253. Spence J.D. Homocysteine and stroke prevention: have the trials settled the issue? // Int J Stroke. 2006. - Vol. 1, N 4. - P. 242-244.

254. Stanger O., Fowler B., Piertzik K. et al. Homocysteine, folate and vitamin B12 in neuropsychiatric diseases: review and treatment recommendations // Expert Rev Neurother. 2009. - Vol. 9, N 9. - P. 1393 - 1412.

255. Stehouwer C.D., Weijenberg M.P., van den Berg M. et al. Serum homocysteineand risk of coronary heart disease and cerebrovascular disease in elderly men: a 10-year follow-up // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 1998. - Vol. 18, N 12. - P. 1895 - 1901.

256. Sundall I.B., Nilsson T.IC., Randy M. et al. Fibrinolytic variables are related to age, sex, blood pressure and body build measurements: a cross sectional study in Norsji, Sweden // J. Clin. Epidemiol. 1989. - Vol. 42, N 8. - P. 719 - 727.

257. Suo Z., Citron B.A., Festoff B.W. Thrombin: a potential proinflammatory mediator in neurotrauma and neurodegenerative disordes // Curr. Drug. Targets Inflamm. Allergy. 2004. - Vol. 3, N 1. - P. 105 - 114.

258. Szegedi N., May Z., Ovary C., et al. Molecular markers of endothelial dysfunction in acute ischemic stroke // Ideggyogy Sz. — 2002. — Vol. 55, N 3 4. - P. 102- 108.

259. Tait J.F., Gibson D. Phospholipid binding of annexin V: effects of calcium and membrane phosphatidylserine content // Arch Biochem Biophys. — 1992. — Vol. 298, Nl.-P. 187-191.

260. Tanne D., Macko R.F., Lin Y. et al. Hemostatic activation and outcome after recombinant tissue plasminogen activator therapy for acute ischemic stroke // Stroke. 2006. - Vol. 37, N 7. - P. 1798 - 1804.

261. Tengborn L., Larsson S.A., Hedner U., Nilsson I.M. Coagulation studies in children and young adults with cerebral ischemic episodes // Acta Neurol. Scand. — 1981. Vol. 63, N 6. - P. 351 - 361.

262. Teraoka K. Thrombosis of coronary veins. // Nippon Rinsho. 2007. — Vol. 5, N2.-P. 29-31.

263. Thiagarajan P., Shapiro S. Lupus anticoagulants and antiphospholipid antibodies //Hematol. Oncol. Clin. North Am.- 1998.-Vol. 12,N6.-P. 1167- 1183.

264. Tissue plasminogen activator for acute ischemic stroke. The National Institute of Neurological Disorders and Stroke rt-PA Stroke Study Group // N. Engl. J. Med. -1995.-Vol. 333,N24.-P. 1581 -1588.

265. Toghi H., Kawashima M., Tamura K., Suzuki H. Coagulation-fibrinolysisabnormalities in acute and chronic phases of cerebral thrombosis and embolism // Stroke. 1990. - Vol. 21, N 12. -P. 1663 - 1667.

266. Tohgi H., Suzuki H., Tamura K., Kamura B. Platelet volume, aggregation, and adenosine triphosphate release in cerebral thrombosis // Stroke. — 1991. — Vol. 22, N l.-P. 17-21.

267. Trowbridge E.A., Warren C.W., Martin J.F. Platelet volume heterogeneity in acute thrombocytopenia // Clin. Phys. Physiol. Meas. 1986. - Vol. 7, N 3. - P. 203 -210.

268. Tsukahara S., Tizuka T., Suzuki N., Sakai F. Cerebrovascular accidents with familial antithrombin III deficiency gene analysis study. // Rinsho Shinkeigaku. — 2002. - Vol. 42, N 3. - P. 207 - 211.

269. Uchiyama S., Yamazaki M., Maruyama S. et al. Shear-induced platelet aggregation in cerebral ischemia // Stroke. 1994. - Vol. 25, N 8. - P. 1547 - 1551.

270. Uemura K., Inagaki H., Wada Y. et al. Identification of immuno reactive lipocortin 1-like molecules in serum and plasma by an enzyme immunoassay for lipocortin 1 // Biochim. Biophys. Acta. - 1992. - Vol. 1119, N 3. - P. 250 - 255.

271. Van Cott E.M., Laposata M. Laboratory evaluation of hypercoagulable states // Hematol. Oncol. Clin. North Am. 1998. - Vol. 12, N 6. - P.l 141 - 1166.

272. Van Goor M.L., Heerde W.L., Schoormans S. et al. The annexin A5-1C/T polymorphism in ischemic stroke: a case-control study // J. Thromb. Haemost. — 2005. Vol. 3, N 1. - P. 173 - 175.

273. Van Goor M.P., Alblas C.L., Leebeek F.W. et al. Do antiphospholipid antibodies increase the long term risk of thrombotic complications in young patients with a recent HA or ischemic stroke? // Acta Neurol. Scand. - 2004. - Vol. 109, N 6. -P. 410-415.

274. Van Heerde W.L., de Groot P.G., Reutelingsperger C.P.M. The complexity of the phospholipid binding protein annexin V // Thromb. Haemost. — 1995. — Vol. 73, N2.-P. 172-179.

275. Verhoef P., Hennekens C.H., Malinow M.R. et al. A prospective study ofplasma homocysteine and risk of ischemic stroke // Stroke. — 1994. — Vol. 25, N 10. — P.1924- 1930.

276. Virmani R., Finn A.V., Kolodgie F.D. Carotid plaque stabilization and progression after stroke or TIA // Arterioscler Thromb Vase Biol. 2009. — Vol. 29, Nl.-P.3-6.

277. Voetsch B., Loscalzo J. Genetic determinants of arterial thrombosis // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2004. - Vol. 24, N 2. - P. 216-229. (64.)

278. Vorchheimer D.A., Becker R. Platelets and atherothrombosis // Mayo Clin. Proc. 2006. - Vol. 81, N 1. - P. 59 - 68.

279. Wald R., Okada Y., Tashiro M. et al. The plasma level of ß-thromboglobulin in the acute phase of cerebral infarction // Jpn. J. Stroke. 1987. - Vol. 9, N 4. — P. 433 -439.

280. Wang Q., Tang X. N., Yenari M. A. The inflammatory response in stroke // J. Neuroimmunol. 2007. - Vol. 184, N 1-2. - P. 53 - 68.

281. Whitlock G., MacMahon S., Anderson C. et al. Blood pressure lowering for the prevention of cognitive decline in patients with cerebrovascular disease. PROGRESS Management Committee // Clin. Exp. Hypertens. 1997. - Vol. 19, N 5-6. - P. 843 -55.

282. Wilmink H.W., Srtoes E.S., Erkelens W.D. et al. Influence of folic acid on postprandial endothelial dysfunction // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. — 2000. — Vol. 20, N 1. — P. 185- 188.

283. Wityk R.J., Lehman D., Klag M. et al. Race and sex differences in the distribution of cerebral atherosclerosis // Stroke. 1996. - Vol. 27, N 11. - P. 1974 -1980.

284. Woo E., Huang C.Y., Chan V. et al. Beta-thromboglobulin in cerebral infarction // J. Neurol. Neurosurg. Psychiatry. -1988. Vol. 51, N 4. - P. 557 - 562.

285. World Health Organization (WHO). The World Health Report, 1999. Geneva: WHO, 1999.

286. Yang J., Klaidman L.K., Chang M.L. et al. Nicotinamide therapy protects against both necrosis and apoptosis in a stroke model // Pharmacol. Biochem. Behav. 2002. - yol. 73, N 4. - P. 901 - 910.

287. Yeh E.T., Khan B.V. The potential role of antiplatelet agents in modulating inflammatory markers in atherothrombosis // Thromb. Haemost. — 2006. — Vol. 4, N 11.-P. 2308-2316.

288. Zahavi M., Zahavi J. Concomitant in vitro platelet hypofunction and increased thromboxane B2 (TXB2) generation and enhanced in vivo platelet activation. A distinct syndrome in thrombosis ? // Eur J Haematol. — 1997. — Vol. 59, N 4. — P. 266-267.

289. Zeller J.A., Eschenfelder Ch.C., Stingele R. Gerinnungsstorungen und Schlaganfall // Hamostaseologie. 2006. - Bd. 26, N 4. - S. 309 - 315.

290. Zeng Y.S., Xu Z.C. Co-existence of necrosis and apoptosis in rat hippocampus following transient forebrain ischemia // Neurosci. Res. — 2000. Vol. 37, N 2. — P. 113-125.

291. Zwaal RF., Schroit A J. Pathophysiologic implications of membrane phospholipid asymmetry in blood cells // Blood. 1997. - Vol. 89, N 4. - P. 1121 -1132.

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.46) на тему:Маркеры тромбофилии при цереброваскулярных нарушениях

Автореферат диссертации по медицине на тему Маркеры тромбофилии при цереброваскулярных нарушениях

Оглавление диссертации Ломакина, Светлана Валерьевна :: 2009 :: Санкт-Петербург

Введение диссертации по теме "Клиническая лабораторная диагностика", Ломакина, Светлана Валерьевна, автореферат

Заключение диссертационного исследования на тему "Маркеры тромбофилии при цереброваскулярных нарушениях"

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2009 года, Ломакина, Светлана Валерьевна

Похожие научные работы

Каталог диссертаций