Автореферат и диссертация по медицине (14.00.39) на тему:Клинико-диагностическое значение определения антител к церулоплазмину у больных системной красной волчанкой с использованием иммобилизированных гранулированных антигенных препаратов с магнитными свойс
- Ученая степень
- кандидата медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.00.39
Автореферат диссертации по медицине на тему Клинико-диагностическое значение определения антител к церулоплазмину у больных системной красной волчанкой с использованием иммобилизированных гранулированных антигенных препаратов с магнитными свойс
На правах рукописи
ргз од 11 т 2С02
С У Щ У К Евгений Александрович
КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К ЦЕРУЛОПЛАЗМИНУ У БОЛЬНЫХ СИСТЕМНОЙ КРАСНОЙ ВОЛЧАНКОЙ С
ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ИММОБИЛИЗИРОВАННЫХ ГРАНУЛИРОВАННЫХ АНТИГЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ С МАГНИТНЫМИ СВОЙСТВАМИ
14.00.39 - Ревматология
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
Волгоград - 2002
Работа выполнена в НИИ клинической и экспериментальной 'ревматологии РАМН и Волгоградской медицинской академии
Научный руководитель:
Научный консультант:
Официальные оппоненты:
академик РАМН, заслуженный деятель науки РСФСР, доктор медицинских наук, профессор А.Б. Зборовский.
кандидат медицинских наук И. П. Гонтарь.
доктор медицинских наук Б.А. Лемперт;
доктор медицинских наук, профессор В.Ф. Мартемьянов.
Ведущая организация: Ярославская государственная
медицинская академия.
Защита состоится «_»_2002 г. в_часов
на заседании Специализированного Совета Д 208.008.02 Волгоградской медицинской академии по адресу: 400066, г. Волгоград, пл. Павших борцов, 1.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Волгоградской медицинской академии.
Автореферат разослан «_»_2002 г.
Ученый секретарь Специализированного Совета
доктор медицинских наук А.Р. Бабаева
Р <//, /Г 0
Актуальность проблемы
- Системная красная волчанка (СКВ) является мультисистемным воспалительным заболеванием, клинические проявления которого варьируют в диапазоне от мягко протекающего недуга с преимущественным поражением кожи и суставов до тяжелого инвалидизирующего поражения с развитием почечной недостаточности и глубоких нарушений нервной системы.
Несмотря на то, что СКВ является относительно редким заболеванием с распространенностью около 1 на 1000 населения (Lawrence R.C. et al., 1998), эта патология имеет большое социальное и медицинское значение. Отмечен рост заболеваемости СКВ за последние четыре десятилетия почти в три раза (Uramoto K.M. et al., 1999). Высокая социально экономическая значимость СКВ обусловлена преимущественным поражением лиц трудоспособного периода жизни, преобладанием женщин детородного возраста, что ведет к большим прямым и косвенным затратам на лечение. (Clarke А.Е. et al., 1993, 1999, Sutclifie N. et al., 2001). Расходы на лечение больных СКВ возрастают с увеличением активности болезни и ухудшением общего состояния пациентов (Clarke А.Е. et al., 1994), следовательно адекватный контроль болезни и поддержание активности СКВ на минимальном уровне могут обеспечить значительный экономический эффект.
Несмотря на достигнутые успехи в диагностике и лечении СКВ, задача своевременной постановки диагноза, назначения адекватной терапии и контроля за ее эффективностью часто бывает осложнена. Вариабельность клинической картины, полиморфизм проявлений затрудняют диагностику, а недостаточные знания этиологии и патогенеза этого тяжелого страдания не позволяют выработать оптимальную терапевтическую тактику.
В последние годы пристальное внимание уделяют участию активных форм кислорода и антиоксидантной системы в физиологических и патологических процессах, в том числе и при СКВ (Зборовская И.А., 1995, Лисицина Т.А. и др., 1996, Knight J.A., 1995). Теоретическим обоснованием участия свободных радикалов в патогенезе СКВ является способность повреждать белки, липиды, ДНК, придавая им свойства аутоантигенов и провоцируя выработку аутоантител (Amara А. et al., 1995, Kubota Т. et al., 1996, Cooke M.S. et al., 1997). Церулоплазмин (КФ 1.16.3.1) (ЦП) является одним из основных внеклеточных ферментов-антиоксидантов, диагностическое значение которого при СКВ до настоящего времени четко не определено. Данные о содержании и активности ЦП в крови больных СКВ весьма противоречивы (Главинская Т.А. и др., 1973, 1989, Surrall К.Е. et al., 1987), что связано с различными подходами к отбору больных и разными методиками определения.
Учитывая гиперпродукцию активных форм кислорода (АФК) при СКВ (Полтырев А.С. и др., 1991, Папичев В.А., 1992, Зборовская И.А., 1995), можно ожидать компенсаторное увеличение синтеза антиоксидантов, в том числе и ЦП, что должно приводить к ингибированию свободных радикалов. Однако, при СКВ отмечено накопление вторичных токсичных продуктов свободно-радикальных реакций (Ames Р. et al., 1999, Svenungsson Е. et al, 2001), таким образом имеется дисбаланс между продукцией и утилизацией АФК. Причины подобного дисбаланса до сих пор не ясны. Одной из причин функциональной недостаточности энзимов, в том числе ферментов-антиоксидантов, считают образование антител к ним (Боброва Л.Н., 1995, Кукк Э.Л., Уйбо P.M., 1995).
Представляется актуальным исследовать иммунный ответ к внеклеточному ферментативному звену антиоксидантной защиты при СКВ, что будет способствовать выработке усовершенствованных способов диагностики СКВ и более точной оценке активности патологического процесса, позволит уяснить некоторые детали патогенеза данного заболевания. Результаты исследования могут дать дополнительные критерии эффективности проводимой терапии, что, в конечном итоге, поможет облегчить состояние больных СКВ и уменьшить затраты, связанные с этим страданием.
Цель работы
Целью исследования является усовершенствование диагностики, повышение точности оценки активности патологического процесса у больных СКВ и улучшение контроля эффективности проводимой терапии с помощью иммобилизированных гранулированных форм церулоплазмина с магнитными свойствами.
Основные задачи исследования
1. Получить иммобилизированные гранулированные препараты ЦП, изучить биохимические и антигенные свойства иммобилизированного фермента.
2. Применить иммобилизированную форму ЦП в иммуноферментном методе исследования для определения аутоантител к ЦП, определить границы нормы, оценить чувствительность и специфичность данного метода в диагностике СКВ.
3.. Исследовать содержание антител к ЦП, а также оксидазную активность и количество иммунореактивного ЦП у больных СКВ в зависимости от активности, характера течения, клинических особенностей заболевания. 4. . Оценить возможности определения антител к ЦП, оксидазиой активности и количества, иммунореактивного ЦП для объективизации контроля эффективности проводимой терапии у больных СКВ.
Научная новизна работы
Впервые для иммунодиагностики СКВ были созданы и применены в иммуноферментном методе исследования иммобилизированные гранулированные антигенные препараты ЦП с магнитными свойствами. Подобраны оптимальные условия иммобилизации фермента, позволяющие сохранять как его энзимные функции, так и антигенные свойства. Полученная иммобилизированная форма фермента отличается высокой устойчивостью и может быть использована как модель для изучения взаимодействия антиген-антитело.
Впервые для оценки активности патологического процесса при СКВ применено комплексное исследование с определением оксидазной активности ЦП, измерением количества ЦП в сыворотке крови иммуноферментным методом и расчетом удельной оксидазной активности фермента.
В ходе работы в сыворотках крови больных СКВ выявлены антитела к ЦП. Показано, что количество иммунореактивного ЦП, его оксидазная активность и уровень антител к ферменту коррелируют с активностью патологического процесса при СКВ. Выявлено, что аутоантитела к ЦП чаще обнаруживаются у больных СКВ с высокой активностью болезни, при наличии поражения сосудов. Показана возможность оценки активности СКВ с использованием лабораторных показателей активности, количества ЦП и наличия антител к нему. Установлена способность исследованных показателей к изменению под влиянием лечения, что обеспечивает возможность оценки эффективности проводимой терапии.
Практическая ценность
Разработана доступная для использования в клинических лабораториях методика иммуноферментного анализа антител к ЦП на основе иммобилизированных гранулированных препаратов с магнитными свойствами. Определение антител к ЦП в предложенной модификации иммуноферментного метода с одновременным исследованием оксидазной активности и количества иммунореактивного ЦП и расчетом удельной оксидазной активности фермента может быть использовано в качестве дополнительных тестов для диагностики СКВ, оценки активности патологического процесса и выделения клинических форм заболевания. Антитела к ЦП выявляются на ранних стадиях заболевания и могут быть использованы для своевременной диагностики заболевания. Показано, что динамика изученных показателей может быть использована для суждения об эффективности терапии.
Основные положения, выносимые на защиту
На защиту выносится положение о возможности определения антител к ЦП с помощью методов иммуноферментного анализа на основе иммобилизированных антигенных препаратов с магнитными свойствами у больных СКВ. Исследование антител к ЦП, оксидазной активности, количества, удельной оксидазной активности ЦП может быть использовано в качестве дополнительных тестов для диагностики СКВ, уточнения степени активности патологического процесса, выделения клинических вариантов СКВ. Динамика этих показателей может служить для оценки эффективности проводимой терапии.
Внедрение в практику
Методы определения оксидазной активности ЦП, количества иммунореактивного ЦП, удельной оксидазной активности ЦП и антител к ЦП с помощью иммобилизированных антигенных препаратов с магнитными свойствами внедрены в Муниципальном медицинском учреждении «Клиническая больница скорой медицинской помощи №25» г. Волгограда.
Публикации
По теме диссертации опубликовано 12 печатных работ, из которых 4 - в центральной и 1 - в зарубежной печати.
Апробация работы
Основные положения диссертации были представлены на итоговых научных конференциях студентов и молодых ученых Волгоградской медицинской академии (1998 - 2001 гг.), научно-практической конференции «Современные аспекты глюкокортикосгероидной терапии ревматических заболеваний» (Москва, 1999), юбилейной конференции, посвященной 15-летию НИИ клинической и экспериментальной ревматологии РАМН (Волгоград, 2000), Ш съезде ревматологов России (Рязань, 2001), ежегодном Европейском ревматологическом конгрессе ЕЪ'ЬАИ (Прага, 2001).
Объем и структура диссертации
Диссертация изложена на 237 страницах машинописного текста и состоит из введения, части I - обзора литературы, части II - собственных исследований, состоящей из 5 глав, обсуждения результатов, выводов, практических
рекомендаций и приложений. Работа иллюстрирована 40 рисунками, содержит 26 таблиц и 6 выписок из историй болезни. Библиографический указатель включает 494 источника, в том числе 71 на русском языке и 423 на иностранных языках.
Материалы и методы исследований
В качестве антигена был использован препарат «Церулоплазмин диагностический очищенный жидкий человеческий», изготовленный предприятием по производству бакпрепаратов Научно-исследовательского института эпидемиологии и микробиологии им. JI. Пастера (Санкт-Петербург, Россия). Антитела к ЦП определялись нммуноферментным методом при иммобилизации антигена на микротитрационных полистироловых планшетах Nunc MaxiSorp F96 (Nunc A/S, Roskilde, Дания) и с использованием иммобилизированных гранулированных антигенных препаратов (ИГАП) с магнитными свойствами. Иммобилизацию ЦП проводили методом эмульсионной полимеризации в потоке газообразного азота с включением магнитного материала в структуру полиакриламидного геля по методике И.П. Гонтаря с соавт. (1990). Результаты учитывали на многоканальном спектрофотометре АС-8К (Белоруссия) при длине волны 492 нм, полученные значения выражали в условных единицах оптической плотности. Наличие антител считалось положительным при превышении значений оптической плотности на 3 средних квадратических отклонения от значений контрольной группы.
Оксидазную активность ЦП определяли в реакции окисления парафенилендиамина (Ravin H., 1961) по методике Э.В. Тена (1981). Определение количества ЦП в сыворотке крови проводили методом иммуноферментного анализа с использованием «Тест-систем иммуноферментных для определения церулоплазмина ИФА-ЦП» производства НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова РАМН (Москва, Россия). После определения оксидазной активности и количества ЦП в сыворотке крови, выполняли расчет удельной оксидазной активности (оксидазной активности на единицу массы фермента) в каждом исследуемом образце.
Статистический анализ экспериментальных данных выполнялся с помощью пакета SPSS for Windows, Release 10.0.5 (Chicago, IL, США). Для сравнения независимых количественных признаков, имевших нормальное распределение, применялся дисперсионный анализ и критерий Стъюдента. Если распределение признака не соответствовало нормальному и для сравнения порядковых признаков применялись непараметрические критерии Манна-Уитни и Крускала-Усшлиса. При исследовании повторных наблюдений применялся дисперсионный анализ повторных измерений и парный критерий Стъюдента (для
нормально распределенных признаков) или их непараметрические эквиваленты. Связь признаков оценивалась с помощью коэффициента корреляции Пирсона и коэффициента ранговой корреляции Спирмена. Для исследования эффективности диагностических тестов выполнялось построение характеристических кривых с расчетом площади под кривой и выбором точки разделения.
Клиническая характеристика больных.
Под наблюдением находилось 68 больных СКВ, диагноз был верифицирован по модифицированным критериям американского общества ревматологов, пересмотренным в 1997 году (Hochberg М.С., 1997). В качестве контрольной группы служили 47 практически здоровых лиц - доноров станции переливания крови, прошедших обычное обследование. Среди обследованных больных СКВ было 5 мужчин (7,35%) и 63 женщины (92,65%) в возрасте от 15 до 69 лег. Все больные СКВ и лица контрольной группы принадлежали к белой расе. Демографические данные больных СКВ и группы сравнения представлены в таблице 1. В группе больных СКВ отмечено преобладание лиц трудоспособного возраста (91,2% больных в возрасте менее 55 лет). В исследуемой группе было 47 больных (69,12%), имевших инвалидность, причем среди них также преобладали лица наиболее социально-активного возраста (87,23% больных с наличием инвалидности были в возрасте до 55 лег). Статистически значимых различий демографических показателей (за исключением доли лиц, имевших инвалидность) между больными и группой сравнения выявлено не было.
Активность и течение СКВ определялась по критериям В.А. Насоновой (1972 г.) и рабочей классификацией клинических вариантов течения СКВ (табл. 2). Кроме того, для оценки активности СКВ применялась шкала Systemic Lupus Activity Measure (SLAM) (Liang M.H. et al., 1989) и Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index (SLEDAI) (Bombardier C. et al., 1992), оценка необратимого ущерба для здоровья проводилась соответственно индексу Systemic Lupus International Collaborating Clinics / American College of Rheumatology (SLICC/ACR) Damage Index (DI) (Gladman D. et al., 1996). Среднее значение индекса SLAM у больных исследуемой группы составило 14,24 баллов (95% доверительный интервал (ДИ) от 12,79 до 15,68 баллов), среднее значение индекса SLEDAI 8,99 баллов (95% ДИ от 7,58 до 10,39 баллов). При анализе связи между разными способами оценки активности была выявлена тесная корреляция между оценками, полученными при использовании шкал SLAM и SLEDAI (г=0,728, р<0,0005) и тесная корреляция между оценками активности по критериям
Таблица 1.
Основные демографические показатели больных СКВ и контрольной группы.
Показатель Больные СКВ п % Группа сравнения п % Р
Женщины 63 92,7 37 78,7 0,058
До 20 лет 14 20,6 8 17,0
21-30 лет 16 23,6 15 31,9
31-40 лет 12 17,6 14 29,8
41-50 лет 14 20,6 10 21,3 ■ идо {
51-60 лет 6 8,8 — -
Старше 60 лет 6 8,8 — -
Имеющие инвалидность 47 69,1 0 0 <0,0005
В.А. Насоновой и шкалами SLAM (г=0,596, р<0,0005) и SLEDAI (г=0,575, р<0,0005). Среднее значение индекса SLICC/ACR DI составило 1,91 баллов (95% ДИ от 1,49 до 2,33 баллов). При оценке течения СКВ по критериям В.А. Насоновой были получены следующие результаты: у 3 пациентов имело место острое течение СКВ, у 50 - подострое, у 15 - хроническое. Медиана продолжительности болезни составила 5,5 лет (диапазон от 0,5 до 27 лет). Медиана продолжительности госпитализации составила 27 дней (диапазон от 14 до 100 дней).
Из клинических проявлений часто (83,8%) встречался суставной синдром, проявлявшийся в большинстве случаев артралгиями, реже - в виде артритов. Деформация суставов наблюдалась редко. Кожные проявления имели место у 35 (51,5%) больных СКВ. Типичные изменения в виде "бабочки" были у 25% больных с кожными проявлениями, дискоидные очаги у 32,4% и сосудистые изменения (васкулиты, капилляриты, сетчатое ливедо) у 27,9%. Часто имело место сочетание различных кожных проявлений у одного и того же больного. Поражение сердца характеризовалось, в основном, явлениями экссудативного перикардита (35% больных), находившего подтверждение на ЭхоКГ в виде расслоения листков перикарда. Признаки поражения легких встречались достаточно редко, отмечалась, как правило, при выраженной активности процесса и проявлялись явлениями экссудативного плеврита и пневмонита (по 8 больных, 11,8%). Поражение почек отмечалось более чем у половины больных и проявлялось протеннурией (56% больных), цилиндрурией (10% больных), лейкоцитурией (31% больных), гематурией (6% больных), отеками и артериальной гипертензией. Гематологические нарушения были достаточно
Таблица 2.
Сравнение больных СКВ, имеющих различную активность заболевания.
Активность
Показатель Минимальная п=14 M (s) Умеренная 11=13 M (s) Высокая п=31 Mis) Р
Возраст 28,57 (14,93) 37,46 (14,62) 37,32(14,74) 0,104
Продолжительность болезни 7,179 (7,19) 9,308 (8,58) 7,561 (6,63) 0,749
Возраст начала болезни 21,71 (11,62) 28,62 (13,72) 29,90(12,95) 0,128
Количество эритроцитов (1012/л) 3,85 (0,61) 3,67 (0,50) 3,60 (0,63) 0,413
Количество тромбоцитов 257,74 (61,68) 219,3 (62,68) 203,47 (82,07) 0,188
Количество лейкощгтов (10%) 7,89 (3,54) 5,83 (2,29) 6,24 (2,24) 0,074
Количество лимфоцитов (103/мл) 1896,11 (882,98) 1634,63 (717,18) 1494,44 (536,0) 0,244
СОЭ (мм/ч) 21 (14,15) 26,92 (17,77) 23,93(14,57) 0,599
Протеинурня (г/л) 0,0044 (0,016) 0,0238 (0,035) 0,2812 (0,476) 0,090
Лейкошпурня (кл.в п/зрення) 4,43 (5,20) 11,31 (15,83) 9,03 (11,56) 0,094
(кл. в п/зрения) 0,071 (0,27) 4,23 (13,77) 2,88(10,15) 0,178
Креатинин сыворотки (ммоль/л) 81,31 (15,28) 83,73 (17,76) 221,16 (225,4) 0,026'
Антитела к натнвной ДНК, е.о.п. 0,101 (0,015) 0,103 (0,025) 0,104 (0,028) 0,068
ЦИК, усл.сд. 3,64(1,19) 3,82 (2,63) 4,19(2,49) 0,819
Суточная доза ГКС, мг (эквивалентно преднизолону) 15,71 (10,89) 17,69 (10,18) 31,34(39,26) 0,036*
Примечание: М -выборочное среднее, в - выборочное стандартное отклонение, - достоверные различия между группами.
типичными (анемия имела место у 29% больных, лейкопения — у 24%, лимфопения - у 41% и тромбоцитопения - у 12% больных). Среди 68 больных СКВ те или иные нейропсихиатрические проявления, документированные невропатологом и/или психиатром при осмотре и специальном обследовании, были отмечены у 46 (67,65%). Наиболее часто наблюдались головные боли (52,9%) и поражение вегетативной нервной системы (47%), также часто имели
место сосудистые поражения ЦНС (22%) и расстройства настроения (23,5%).
Инфекции диагностированы у 27 из 68 больных (39,7%), наиболее частой локализацией были мочевыделнтельная система (п=15; 55,6%), женские половые органы (п=5; 18,5%), отмечено 2 случая (2,9%) инфекции кожных покровов и по 1 эпизоду (1,5%) трахеобронхита и флегмоны забрюшинного пространства. Также у 3 больных (4,4%) были отмечены острые вирусные инфекции верхних дыхательных путей.
Все больные получали комплексную терапию, абсолютное большинство (95,6%) принимали кортикостероиды. Медиана дозы кортикостероидов (в эквиваленте преднизолона) составляла 20 мг/сут (диапазон - от 2,5 до 250 мг/ сут), только 25% больных получали менее 10 мг (в эквиваленте преднизолона) в сутки. Шесть больных (8,82%) требовали проведения пульс-терапии кортикостероидами. Цитостатические препараты были назначены 16 (23,5%) больным, аминохинолиновые производные (делагил, плаквенил) - 3 (4,4%) больным. Плазмаферез выполнялся у 29 (42,6%) пациентов. В результате проведенной стационарной терапии улучшение было достигнуто у большинства больных, что нашло свое отражение в изменениях значений индекса активности 8ИЮА1 - при поступлении медиана значений индекса составила 8,0 баллов (25 процентиль - 4,0 баллов, 75 ароцентиль - 14,0 баллов), при выписке - медиана значений 0 баллов, (25 процентиль 0 баллов, 75 процентиль - 2,0 балла) изменение составило 8 баллов (р<0,0005).
Результаты исследования и их обсуждение
Уровень нормальных показателей при анализе антител к ЦП, составил по результатам ИФА с использованием ИГАП - до 0,471 е.о.п. При исследовании количества ЦП, оксидазной активности, удельной оксидазной активности фермента и уровня антител к нему в сыворотке крови лиц контрольной группы не было выявлено достоверных различий в изучаемых показателях в зависимости от пола и возраста (табл. 3).
В группе больных СКВ в целом отмечено статистически значимое повышение оксидазной активности ЦП (58,68 е.о.п., р<0,0005) и количества ЦП (2015,53 мг/л, р<0,0005), в то же время различия в удельной оксидазной активности были недостоверными (р=0,152).
Выявлено достоверное повышение уровня аутоантител к ЦП в группе больных СКВ (0,749 е.о.п. (95% ДИ от 0,612 до 0,887 е.о.п.), р<0,0005). Антитела к ЦП были обнаружены у 32 (47,06%) больных СКВ. Методика определения антител к ЦП с использованием ИГАП имела преимущества перед методикой, использующей в качестве твердой фазы полистироловый планшет, что проявлялось более высокими значениями экстинкции и меньшим временем
постановки реакции. Антитела, выявляемые в данных модификациях ИФА, направлены, по-видимому, к конформационно измененному ЦП, так как эндогенный нативный ЦП в исследуемых сыворотках не ингибировал реакцию антиген-антитело. При постановке ИФА на планшетах в результате взаимодействия поверхности с белком происходят конформационные изменения молекулы ЦП. Это приводит к экспрессии скрытых эпитопов, которые становятся доступными для взаимодействия с аутоантителами из исследуемых образцов. Процессы конформационных изменений имеют место и при иммобилизации части молекул ЦП в полиакриламидной грануле, при этом активный центр, содержащий атомы меди, остается интактным. Причинами изменения конформационной структуры молекулы ЦП при СКВ, по-видимому, являются реакции молекулы с активными формами кислорода и вторичными активными продуктами свободно-радикальных процессов. Описаны окислительно-измененные формы молекул С-реактивного белка (Motie М. et al., 1996), альбумина (Amara A. et al., 1995), экспрессирующие скрытые антигенные эпитопы, против которых и направлены аутоантитела. Несмотря на то, что
Таблица 3.
Уровень ЦП, его оксидазная и удельная оксидазная активность, уровень антител к ЦП в сыворотке крови лиц контрольной группы.
Контингент п Оксидазная активность ЦП, е.о.п. Mis) Количество ЦП, мг/л M(s) Удельная оксидазная активность ЦП, ЕД/мг М (s) Антитела к ЦП (ИГАП), е.о.п. Mis)
Вся группа 47 27,09 (6,82) 775,96 (229,29) 14,34 (1,82) 0,207 (0,132)
Женщины 37 27,23 (6,07) 785,31 (208,69) 14,17 (1,63) 0,201 (0,142)
До 20 лет 8 23,59 (3,99) 677,36 (186,38) 14,39 (2,03) 0,217 (0,127)
21-30 лет 15 28,03 (7,63) 814,40 (257,48) 14,27 (2,26) 0,173 (0,050)
31-40 лет 14 27,34 (7,04) 765,93 (189,60) 14,35 (1,27) 0,192 (0,158)
41-50 лет 10 28,15 (7,01) 811,20 (272,05) 14,39 (1,85) 0,276 (0,171)
Примечание: М - выборочное среднее, s - выборочное стандартное отклонение.
описания подобных устойчивых конформаций ЦП в литературе обнаружить не удалось, наличие именно такого механизма аутоантителообразования представляется наиболее вероятным. Возможным механизмом повреждения белка является реакция с вторичным продуктом перекисного окисления липидов - малоновым диальдегидом (МДА). Было показано, что МДА реагирует преимущественно с остатками лизина (Ез1егЬаиег Н. е1 а1., 1991, исЫс!а К. е1 а1., 1997), формируя внутри- и межмолекулярные перекрестные связи. Как известно, уровень МДА повышен при СКВ (Папичев В.А., 1992), таким образом вероятно, что реакция лизиновых остатков ЦП с МДА будет приводить к формированию внутримолекулярных сшивок и образованию аутоэпитопов и/или формированию агрегатов ЦП, которые приобретут свойства аутоантигена.
Исследование оксидазной активности и количества ЦП в группах больных СКВ с наличием антител к ферменту и без аугоантител показало, что имеются статистически значимые различия в удельной оксидазной активности ЦП по сравнению с контрольной группой (р<0,0005), причем в группе больных с наличием аутоантител удельная оксидазная активность ЦП была достоверно ниже, чем в контрольной группе (9,93±2,59 ЕД/мг (выборочное среднее ± выборочное стандартное отклонение), р<0,0005), а у больных без наличия аутоантител - достоверно выше (16,34±2,5 ЕД/мг, р<0,0005). Статистически значимые различия были выявлены в количестве ЦП между группами больных с наличием антител к ЦП и без наличия антител (2408,56±834,38 и 1608,59±700,10 мг/л, соответственно, р<0,0005), в то же время достоверных различий между этими группами в уровне оксидазной активности ЦП выявлено не было (р=0,217).
Корреляция оксидазной активности и количества ЦП между собой в группе больных СКВ была существенно ниже (г=0,581, р<0,0005) чем у доноров (г=0,937, р<0,0005). Для выяснения природы описанных различий был выполнен анализ данных показателей раздельно для групп больных с наличием антител к ЦП и без наличия антител (табл. 4).
Корреляции оксидазной активности, количества и удельной оксидазной активности со значениями индекса активности СКВ 8ЬЕВА1 у больных без наличия антител к ЦП статистически значимы, а в группе больных, имеющих антитела к ЦП корреляции этих показателей статистически не значимы. Корреляция оксидазной активности и количества ЦП между собой в группе больных СКВ без наличия антител к ЦП (г=0,964, р<0,0005) незначительно отличалась от контрольной группы (г=0,937, р<0,0005), но в группе больных, имевших аутоантитела к ЦП она была существенно ниже (г=0,764, р<0,0005) чем у доноров, что свидетельствует о нарушении оксидазной функции фермента у этой группы больных. Таким образом, можно сделать вывод, что аутоантитела к
Таблица 4.
Корреляции оксидазной активности, количества и удельной оксидазной активности ЦП со значениями индексов активности
СКВ.
Показатель Значение индекса SLEDAI
С наличием антител к ЦП Без наличия антител к ЦП
г Р г Р
Оксидазная активность ЦП 0,090 0,624 0,404 0,018
Количество ЦП 0,042 0,812 0,454 0,007
Удельная оксидазная активность ЦП -0,027 0,885 -0,548 0,001
ЦП способны ингибировать оксидазную активность энзима in vivo. Вероятно, в ответ на воспалительное повреждение при СКВ, сопровождающееся усиленной выработкой АФК, происходит усиление синтеза ЦП, а также повышение его удельной оксидазной активности. Однако, у значительной части больных в крови присутствует ингибитор ЦП - аутоантитела к нему. Если не учитывать наличие антител к ЦП, оценка оксидазной активности ЦП при СКВ может быть искажена, следовательно необходим комплексный подход: измерение оксидазной активности, количества ЦП и определение аутоантител к ЦП в сыворотке крови.
При сравнении групп больных СКВ с различной степенью активности патологического процесса и контрольной группы были выявлены статистически значимые различия в уровнях антител между группами (рис. 1).
Часто в клинической практике возникают затруднения в диагностике при минимальной активности СКВ. У больных с минимальной активностью СКВ (п=14) выявлено статистически значимое повышение оксидазной активности ЦП (50,09±19,88 е.о.п., р=0,005), и удельной оксидазной активности (16,92±3,62 ЕД/ мг, р=0,029) по сравнению с контрольной группой, повышение количества ЦП было статистически незначимым (1317,57±765,38 мг/л, р=0,107) (табл. 5). Всего у 2 больных (14,3%) с минимальной активностью СКВ были обнаружены антитела к ЦП. Использование изученных лабораторных показателей облегчает диагностику минимальной активности СКВ. У этих больных редко обнаруживаются антитела к ЦП, однако наблюдается повышение оксидазной активности и удельной оксидазной активности ЦП по сравнению со здоровыми лицами.
В группе больной с умеренной активностью СКВ (п=21) антитела к ЦП были выявлены у 10 (47,6%) больных. При анализе активности и количества ЦП выявлено статистически значимое повышение оксидазной активности ЦП
(61,26±16,65 е.о.п., р<0,0005), количества ЦП (1964,43±664,85 мг/л, р<0,0005) по сравнению с контрольной группой, а различия в удельной оксидазной активности были недостоверными (13,29±3,56 ЕД/мг, р=0,994). Оксидазная активность ЦП была достоверно ниже в группе больных, имевших антитела к ЦП (46,80±15,03 е. о.п.), чем у больных не имевших антитела (73,4±12,74 е.о.п., р=0,008). Статистически значимые различия были выявлены для удельной оксидазной активности ЦП (11,79±3,11 ЕД/мг и 15,61±2,12 ЕД/мг, р=0,022). В то же время достоверных различий в количестве ЦП отмечено не было (1768,33±899,89 мг/л и 1822,55±453,16 мг/л, р=0,836). Данные результаты свидетельствуют в пользу того, что антитела к ЦП способны ингибировать его оксидазную активность, приводя к снижению удельной оксидазной активности фермента.
Антитела к ЦП были обнаружены у 20 из 33 больных (60,6%) с высокой активностью патологического процесса, причем уровень антител к ЦП
,,пи^г1пп, I II III
контроль АКТИВНОСТЬ СКВ
Рисунок I. Уровень антител к ЦП у больных с различной активностью СКВ по сравнению с контрольной группой.
достоверно различался между больными с минимальной и высокой активностью (0,389±0,432 е.о.п. и 0,886±0,556 е.о.п., р=0,01), но недостоверно между группами больных с умеренной и высокой активностью СКВ (р=0,817). Статистически значимые различия выявлены в количестве ЦП между больными с минимальной и высокой активностью СКВ (р=0,002), в удельной оксидазной активности ЦП -между больными с минимальной и умеренной активностью СКВ (р=0,04), а также между больными с минимальной и высокой активностью болезни (р<0,0005) (табл. 5).
У больных с различной активностью СКВ, не имевших антител к ЦП, выявлены достоверные различия в оксидазной активности ЦП - между больными с минимальной и умеренной активностью СКВ (р=0,022), минимальной и
Таблица 5.
Значения активности и количества ЦП у больных с различной степенью активности СКВ,
Активность СКВ
Группа Показатель Минимальная Умеренная Высокая
М (s) М (s) M(s)
Оксидазная активность, 50,09" 61,26" 60,69"
е.о.п. (19,88) (16,65) (16,38)
Все больные СКВ (п=68) Количество ЦП, мг/л 1317,57*" (765,38) 1964,43" (664,85) 2344,15*'* (833,44)
Удельная оксидазная активность ЦП, ЕД/мг 16,92*"' (3,62) 13,29 (3,56) 11,32"'* (3,46)
Уровень антител к ЦП, е.о.п. 0,389'" (0,432) 0,705 (0,596) 0,886"-' (0,556)
Оксидазная активность, 59,35" 46,80* 56,61"
Больные СКВ с е.о.п. (3,04) (15,03) (9,92)
наличием антител к ЦП Количество ЦП, мг/л 2426,50" (454,67) 1768,33" (899,89) 2567,13* (787,47)
(п=32) Удельная оксидазная 9,91 11,79 9,47*
активность ЦП, ЕД/мг (1,36) (3,11) (2,39)
Оксидазная активность, 48,55»""- 73,4*'" 68,62"'*
Больные СКВ без антител к ЦП (п=36) е.о.п. (21,17) (12,74) (20,75)
Количество ЦП, мг/л 1132,75"'" (642,39) 1822,55"'" (453,16) 2005,10"'" (700,67)
Удельная оксидазная активность ЦП, ЕД/мг 18,08"'""* (2,22) 15,61* (2,12) 15,17' (2,28)
Примечание: М - выборочное среднее, в - выборочное стандартное отклонение, # - статистически значимые различия с контрольной группой, - статистически значимые различия с минимальной активностью СКВ, - статистически значимые различия с умеренной активностью СКВ, * - статистически значимые различия с высокой активностью СКВ.
высокой активностью болезни (р=0,05); в количестве ЦП - между больными с минимальной и умеренной активностью СКВ (р=0,021), минимальной и высокой активностью болезни (р=0,021); в удельной оксидазной активности ЦП - меяеду больными с минимальной и умеренной активностью СКВ (р=0,039), минимальной и высокой активностью болезни (р=0,004). Значения оксидазной активности, количества и удельной оксидазной активности ЦП у больных СКВ с различной активностью патологического процесса, имевших антитела к ЦП, достоверно не различались (табл. 5).
Учитывая, что показатели активности и количества ЦП, а также наличия антител к ЦП связаны с активностью СКВ, был модифицирован индекс оценки активности СКВ SLAM. В него были добавлены показатели количества, удельной оксидазной активности ЦП и наличия антител к ферменту. Полученный модифицированный индекс активности SLAM (mSLAM) был оценен методом корреляционного анализа с индексом SLEDAI и исходной версией индекса SLAM (рис. 2). Между индексом активности SLEDAI и модифицированным индексом SLAM выявлена тесная корреляция (г=0,728, р<0,0005) и практически линейная связь с исходной версией индекса SLAM (г=0,955, р<0,0005). Расширение индекса за счет включения дополнительных параметров может обеспечить более точную оценку тяжести СКВ, особенно при минимальной и умеренной активности заболевания. Таким образом, показатели количества ЦП, его удельной оксидазной активности и наличия антител к ЦП могут с успехом быть использованы как дополнительные индикаторы активности СКВ. Уровень ' аутоантител различен у больных с разной активностью болезни, но использование только одного этого показателя в дифференциации активности СКВ невозможно, так как различия достигают достоверного уровня только для больных с высокой активностью, в то время как различия между группами с минимальной и умеренной активностью были недостоверными.
При анализе показателей активности ЦП, его количества и уровня аутоантител к ЦП в зависимости от варианта течения СКВ и продолжительности болезни статистически значимых различий выявлено не было. У 4 из 6 больных СКВ (66,7%), имевших продолжительность заболевания менее 1 года, были обнаружены антитела к ЦП в сыворотке крови. Антитела к ЦП появляются при СКВ на начальных стадиях болезни и могут, таким образом, служить в качестве раннего диагностического признака.
При сравнении поражений тех или иных органов у больных СКВ, имевших и не имевших аутоантитела к ЦП отмечена достоверно большая доля больных с наличием васкулопатии среди пациентов с наличием антител к ЦП (р=0,025). Несколько чаще, но статистически незначимо, у больных с наличием антител к ЦП отмечались инфекционные осложнения (р=0,143), и поражение
Рисунок 2. Корреляция модифицированного индекса активности СКВ (mSLAM) с исходной версией индекса SLAM и индексом SLEDAI.
легких (р=0,174). Уровень антител к ЦП имел достоверные корреляционные связи с индикаторами поражения почек при СКВ - прогеинурией (г-0,272, р-0,026) и лейкоцитурией (г=0,354, р=0,003), что позволяет рассматривать антитела к ЦП как дополнительный индикатор волчаночной нефропатии.
Анализ литературных данных (Klebanoff S.J., 1992, Сенюк О.Ф. и др., 1994, Miller I. et al., 1999, Fox P.L. et al., 2000) позволил предположить, что количество ЦП у больных с наличием инфекционных осложнений, которые занимают одно из первых мест среди причин смерти больных СКВ (Petri М., 1998, Bouza Е. et al., 2001), может отличаться от такового у больных не имеющих инфекций. И действительно, в группе больных с наличием инфекционных осложнений были отмечены статистически значимые различия по сравнению с больными СКВ без инфекционной патологии в количестве ЦП (2373,17±842,33 и 1989,50±807,80 мг/л, соответственно, р=0,009). Различия в оксидазной активности, удельной оксидазной активности ЦП и уровне антител к ЦП не достигли статистической значимости. Учитывая, что типичные клинические проявления инфекции, такие как лихорадка, лейкоцитоз, ускоренная СОЭ и др. при СКВ могут быть стертыми как в результате собственно активности СКВ, так и из-за применяемых иммуносупрессивных препаратов, своевременная диагностика и лечение становятся особенно актуальными. В качестве диагностических маркеров инфекции при СКВ были предложены С-реактивный белок, ос-глобулины и комбинации лабораторных показателей (Petri М., 1998, Suh С.Н. et al., 2001). Данное исследование указывает на возможность использования
показателей количества ЦП как дополнительный маркер инфекции. Высокий уровень ЦП в сыворотке, особенно в сочетании с повышением С-реакгивного белка и при отсутствии других лабораторных признаков активации СКВ (снижение комплемента, повышение уровня антител к нативной ДНК и др.) позволяет заподозрить наличие инфекции и указывает на необходимость углубленного исследования, направленного на выявление возбудителя.
Поражение сосудов при СКВ - серьезная проблема, привлекающая пристальное внимание исследователей в последние годы (Насонов E.JI. и др., 1999, Manzi S., Wasko М., 2000, Manolova I. et al„ 2001). У больных СКВ с наличием васкулопатии по сравнению с больными, не имевшими признаков поражения сосудов, статистически значимые различия были получены для уровня антител к ЦП (0,953±0,545 против 0,638±0,556 е.о.п., р=0,028), частоты обнаружения антител к ЦП (69,6% против 37,2%, р=0,025), количества ЦП (2341,88±663,62 против 1837,52±914.20 мг/л, р=0,014) и удельной оксидазной активности ЦП (11,18±3,24 против 14,12±4,15 ЕД/мг, р=0,003). Достоверно более высокий уровень и достоверно большая частота обнаружения антител к ЦП у больных с поражением сосудов позволяют думать о том, что данный феномен может иметь не только диагностическое, но и патогенетическое значение. Механизмы связи аутознтител к ЦП с сосудистой патологией не ясны, но можно высказать некоторые предположения, основываясь на анализе литературных данных. Было показано (Segelmark М. et al., 1997, Griffin S.V. et al., 1999), что одной из функций ЦП может являться ингибирование миелопероксидазы, принимающей" непосредственное участие"вповреждении" сосудистой стенки за счет синтеза активных форм кислорода (гипохлорной кислоты и ее производных) (Carr А.С. et al., 1997, 2001). В то же время, антитела к миелопероксидазе, часто обнаруживаемые при ревматических заболеваниях, в том числе при СКВ, и входящие в группу так называемых антинейтрофильных цитоплазматических анггител (АНЦА) (Wiik A. et al., 1999, Weidner S. et аЦ 2001), взаимодействуя с ферментом не ингибируют его активность, но препятствуют образованию связи миелопероксидазы с ЦП. Как следствие, активная миелопероксидаза продолжает оказывать повреждающее действие на стенки сосудов. Антитела к ЦП могут оказывать сходное с анти-миелопероксидазными антителами действие, препятствуя взаимодействию двух ферментов. Другим фактором, приводящим к развитию сосудистой патологии при наличии антител к ЦП. может являться накопление АФК, оказывающих повреждающее действие на липиды, белки и другие компоненты сосудистой стенки, в результате чего они приобретают свойства аутоантигенов и стимулируют выработку аутоантител, имеющих вторичное повреждающее действие, таких как антитела к окисленным липопротеинам низкой плотности (Amengual О. et al., 1997). Косвенным
подтверждением роли такого механизма является обнаруженный нами факт, что именно снижение удельной оксидазной активности ЦП наиболее точно указывало на наличие сосудистой патологии. Поскольку оксидазный механизм необходим для осуществления ЦП антиоксидантной функции, ингибирование его приведет к функциональной несостоятельности ЦП и накоплению первичных и вторичных активных форм кислорода в экстрацеллюлярном пространстве.
Стационарное лечение привело к достоверному снижению оксидазной активности и количества ЦП, изменения удельной оксидазной активности ЦП были недостоверными.. Также достоверно снизился уровень антител к ЦП (табл. 6). В группе больных СКВ, получавших наряду с кортикостероидами и иммуносупрессивными препаратами процедуры плазмафереза, снижение аутоантител было более выраженным по сравнению с группой, получавшей кортикостероиды (включая пульс-терапию глюкокортикоидами) и цитостатические препараты (без последующих процедур плазмафереза). Количество ЦП и оксидазная активность фермента меняются пропорционально степени воспалительной активности и при уменьшении активности СКВ в результате проводимой терапии происходит снижение этих показателей. Тем не менее, их нормализации у большинства больных не наблюдалось, что говорит о сохранении повышенной продукции АФК и указывает на необходимость коррекции антиоксидантного статуса при СКВ. Длительное наблюдение за бальными показало, что при сохранении активности СКВ происходит повторное образование антител к ЦП и курс плазмафереза привод™ к относительно кратковременному снижению их уровня. В то же время контроль болезни с помощью кортикостероидов, иммуносупрессивных препаратов и поддержание активности СКВ на минимальном уровне ведет к значительному уменьшению выработки аутоантител.
Под наблюдением в течение 2 лет находилось 48 больных СКВ, которые обследовались ежегодно. Анализ данных оксидазной активности, количества, удельной оксидазной активности ЦП и уровня антител к ЦП не позволил установить закономерностей изменения этих показателей с течением времени под воздействием факторов, не связанных с активностью и характером патологического процесса. Основным определяющим фактором, приводящим к сдвигам исследуемых показателей является активность СКВ.
Дня оценки диагностического значения определения антител к ЦП в диагностике СКВ были рассчитаны чувствительность, специфичность и прогностическая ценность теста, исходя из данных, полученных для здоровых лиц и больных СКВ. Чувствительность теста составляет 47,06%, специфичность - 100%, прогностическая ценность положительного результата теста без учета распространенности СКВ - 100%, прогностическая ценность отрицательного результата теста - 56,1%. С учетом распространенности СКВ
Таблица 6.
Изменения активности, количества ЦГ1 и уровня антител к ЦП в ходе стационарного лечения
Группа Показатель При поступлении M (s) Через 2 неделн M (s) При выписке M (s) Р
Оксндазная активность ЦП, е.о.п. 58,68 (17,52) 55,14 (18,36) 46,51 (18,52) <0,0005
Все больные СКВ Количество ЦП, мг/л 2015,53 (856,25) 1669,84 (746,98) 1388,66 (647,10) <0,0005
(п=68) Удельная оксидазная активность ЦП, ЕД/мг 13,08 (4,09) 14,11 (2,83) 13,72 (1,82) 0,160
Уровень антител к ЦП, е.о.п. 0,749 (0,569) 0,631 (0,486) 0,520 (0,433) <0,0005
Оксидазная активность ЦП, е.о.п. 58,42 (18,86) 56,96 (19,73) 46,33 (17,87) <0,0005
Лечение кортико-сгероидами и Количество ЦП, мг/л 2123,63 (888,42) 1761,61 (779,48) 1402,13 (675,12) <0,0005
цитостатиками (п=38) Удельная оксидазная активность ЦП, ЕД/мг 12,26 (3,83) 13,76 (2,81) 13,68 (2,03) 0,202
Уровень антител к ЦП, е.о.п. 0,928 (0,553) 0,779 (0,479) 0,739 (0,457) <0,0005
Комплексная терапия с Оксидазная активность ЦП, е.о.п. 59,72 (15,32) 53,74 (16,59) 45,72 (20,40) 0,020
Количество ЦП, мг/л 1931,74 (796,26) 1597,78 (710,27) 1355,22 (641,69) 0,012
плазмафереза (п=27) Удельная оксидазная активность ЦП, ЕД/мг 13,87 (4,29) 14,42 (2,93) 13,62 (1,46) 0,431
Уровень антител к ЦП, е.о.п. 0,557 (0,529) 0,469 (0,447) 0,246 (0.158) <0,0005
(Johnson A.E. et al., 1995, McCarty D.J. et al., 1995, Lawrence R.C. et al., 1998), приняв ее за 1:1000, прогностическая ценность положительного результата теста составит 0,89%. Поскольку прогностическая ценность результата теста зависит от распространенности заболевания, одним из способов повышения прогностической ценности диагностического теста является применение его в группе больных с повышенной вероятностью заболевания. В случае СКВ диагностические трудности возникают при разграничении кожных и системных вариантов болезни. Используя литературные данные (Bell S.A et al, 1998) и результаты данного исследования, чувствительность обнаружения антител к ЦП в разграничении кожных и системных вариантов волчанки - 33,05%, специфичность, как и прогностическая ценность положительного результата теста - 100%. Прогностическая ценность отрицательного результата теста при разграничении системных и кожных форм - 50,31%. Таким образом, определение антител к ЦП у лиц с подозрением на СКВ имеет высокую специфичность и обнаружение таких аутоантител с большой вероятностью указывает на системный процесс.
Анализ характеристической кривой оксидазной активности ЦП в диагностике СКВ позволил выбрать точку разделения на уровне 49,6 е.о.п. При превышении этого значения возможно дифференцировать больных СКВ от здоровых лиц с чувствительностью 75% и специфичностью близкой к 100%. В литературе имеются лишь единичные сообщения, посвященные исследованию количества иммунореактивного ЦП у больных СКВ (Surrall К.Е. et al., 1987). Основываясь на результатах анализа характеристической кривой была выбрана точка разделения для значения количества иммунореактивного ЦП в диагностике СКВ, имеющего максимальную специфичность при удовлетворительной чувствительности, - она составила 1300 мг/л (при чувствительности 70,6% и специфичности 100%). Следует указать на то, что высокое содержание ЦП при СКВ может являться причиной повреждения - тканей, так как помимо антиоксидантных свойств, ЦП обладает и прооксидантным действием (Floris G. et al., 2000, Fox P.L. et al., 2000), особенно в отношении липидов, и, вероятно, повышенный уровень ЦП является независимым фактором риска развития атеросклероза. Возможно, что увеличение содержания ЦП, а не только воспаление играет роль в ускоренном атерогенезе при СКВ (Esdaile J.M. et al., 2001).
Таким образом, исследование антител к ЦП в иммуноферментном анализе с использованием иммобилизированных гранулированных антигенных препаратов с магнитными свойствами, а также оценка оксидазной активности, количества ЦП и удельной оксидазной активности фермента позволяет улучшить диагностику СКВ, способствует более точному определению активности
патологического процесса и указывает на наличие определенных клинических
форм болезни. Применение этих показателей для мониторинга проводимой
терапии позволяет более точно оценить ее эффективность.
Выводы
1. В сыворотке крови значительной части больных СКВ методом иммуноферментного анализа выявлены антитела к церулоплазмину (КФ 1.16.3.1). Иммуноферментный метод определения антител к ЦП с применением иммобилизированных гранулированных антигенных препаратов является более чувствительным по сравненню с гетерогенным иммуноферментным методом использующим в качестве твердой фазы полистироловые планшеты.
2. Антитела к ЦП способны ингибировать оксидазную активность фермента, приводя к снижению его удельной оксидазной активности.
3. Антитела к ЦП появляются на ранних стадиях СКВ и их обнаружение может быть использовано для своевременной диагностики системного заболевания.
4. Уровень антител к ЦП у больных СКВ зависит от активности заболевания что может быть использовано в качестве дополнительного индикатора активности СКВ. Высокие уровни антител к ЦП коррелируют с наличием у больных СКВ поражения сосудов.
5. У больных СКВ наблюдается повышение оксидазной активности ЦП и увеличение количества иммунореактивного ЦП по сравнению с контрольной группой. Уровень оксидазной активности ЦП, содержание иммунореактивного ЦП у больных СКВ зависит от активности заболевания, и эти показатели могут быть использованы в качестве дополнительных индикаторов активности СКВ.
6. Количество иммунореактивного ЦП в сыворотке крови больных СКВ повышается при наличии инфекционной патологии и достоверно превышает содержание ЦП у больных СКВ не имеющих инфекционных осложнений.
7. Динамика оксидазной активности, количества иммунореактивного ЦП, и уровня антител к ЦП, наблюдаемая на фоне проводимой терапии, позволяет рекомендовать использование этих показателей в качестве дополнительных критериев эффективности лечения больных СКВ.
8. Наиболее эффективно подавляет образование антител к ЦП иммуносупрессивная терапия кортикостероидами в сочетании с цитостатическими препаратами. При использовании в комплексном лечении больных СКВ плазмафереза наблюдается выраженное, но непродолжительное, снижение уровня антител к ЦП.
Практические рекомендации
1. Полученные иммобилизированные гранулированные антигенные препараты с магнитными свойствами на основе ЦП рекомендуется использовать для выявления антител к энзиму у больных СКВ в иммуноферментном методе анализа.
2. Следует применять одновременное определение оксидазной активности ЦП с использованием парафенилендиамина в качестве субстрата, измерение количества ЦП в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа с последующим расчетом удельной оксидазной активности ЦП и исследование антител к ЦП в иммуноферментном анализе с использованием полученных иммобилизированных гранулированных антигенных препаратов с магнитными свойствами.
3. При определении антител к ЦП иммуноферменгным методом за норму следует считать показатели здоровых лиц - менее 0,4 е.о.п., положительным следует считать значение превышающее 0,6 е.о.п.
4. При определении оксидазной активности ЦП нормальными значениями следует считать значения здоровых лиц - до 33,91 е.о.п., патологическим следует считать превышающее это значение. Оксидазная активность ЦП, превышающая 50,0 е.о.п. характерна для СКВ. Для минимальной активности СКВ характерна оксидазная активность ЦП от 40 до 60 е.о.п, для высокой активности СКВ характерны значения оксидазной активности ЦП выше 60 е. о.п.
5. При измерении количества ЦП в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа нормальными следует считать значения здоровых лиц - от 632 до 943 мг/л, патологическим следует считать превышающее это значение. Содержание ЦП в сыворотке более 1300 мг/л следует считать характерным для активной СКВ. При минимальной активности СКВ характерно содержание иммунореактивного ЦП в сыворотке крови до 1500 мг/л, при умеренной активности СКВ - от 1500 до 2500 мг/л и при высокой активности СКВ - выше 2500 мг/л.
6. В процессе" лечения рекомендуется использовать значения оксидазной активности ЦП, количества иммунореактивного ЦП и уровня антител к ЦП, рассматривая снижение этих показателей как признак эффективности проводимой терапии.
Список работ, опубликованных по теме диссертации.
1. Эффективность дексавена у больных ревматическими заболеваниями. / Тезисы научно-практической конференции «Современные аспекты глюкокортикостероидной терапии ревматических заболеваний» 26-30 октября 1999 г., - Москва / Российская ревматология, - 1999, - №5, - С.92 (соавт. Фофанова H.A., Деревянко Л.И., Гонтарь И.П., Зборовский А.Б.)
2. Необходимость проведения мониторинга иммунологических показателей у больных ревматическими заболеваниями. // Материалы юбилейной конференции, посвященной 15-летию НИИ клинической и экспериментальной ревматологии РАМН, - Волгоград, - 2000, - С.69 (соавт. Гонтарь И.П., Александров A.B., Сычева Г.Ф., Зотина М.В., Маслакова Л.А., Емельянова О.И., Петрова Н.В.)
3. Подбор оптимальных условий определения антител к церулоплазмину при системной красной волчанке и ревматоидном артрите. // Материалы юбилейной конференции, посвященной 15-летию НИИ клинической и экспериментальной ревматологии РАМН, - Волгоград, - 2000, - С. 126 - 127. (соавт. Гонтарь И.П, Петрова Н.В., Красильников А.Н., Сычева Г.Ф.)
4. Определение количества и ферментативной активности церулоплазмина в сыворотке крови здоровых лиц и больных системной красной волчанкой и ревматоидным артритом. // Материалы юбилейной конференции, посвященной 15-летию НИИ клинической и экспериментальной ревматологии РАМН, - Волгоград, - 2000, - С. 144 - 145. (соавт. Зборовская И.А., Филимонова Ю.К., Левкин C.B., Гонтарь И.П.)
5. Перспективы применения магнитосорбентов в методах иммуносорбции. // Тез. докл. VII Российского нац. конгр. "Человек и лекарство", 10-14 апреля 2000 г., - Москва, - С.488. (соавт. Гонтарь И.П., Александров A.B., Сычева Г. Ф., Зборовская И.А., Зотина М.В., Красильников А.Н., Емельянова О.И.)
6. Показатели иммунного ответа к церулоплазмину в диагностике ревматических заболеваний. // Научно-практическая ревматология, - 2000, -№4, - С.38 (соавт. Гонтарь И.П., Петрова Н.В., Зборовская И.А., Зборовский А.Б.)
7. Изучение взаимосвязи энзимологических и иммунных механизмов в развитии ревматоидного артрита, системной красной волчанки и системной склеродермии. // Матер, научно-практич. конф. «Актуальные проблемы внутренней патологии», посвященной 80-летию со дня рождения и 60-летию трудовой, творческой, научной и педагогической деятельности проф. ПД. Синицина, - 25 января 2001 г., - Челябинск, - С.154-158. (соавт. Гонтарь И.
П., Александров А.В., Зотина М.В., Петрова Н.В., Язид Аль Раави., Красильников А.Н., Зборовская И.А.)
8. Интегративная оценка иммунного ответа к церулоплазмину при ревматических болезнях. / Тезисы Ш съезда ревматологов России, 22-25 мая 2001 г., - Рязань / Научно-практическая ревматология, - 2001, - №3, - С.111 (соавт. Петрова Н.В., Гонтарь И.П., Зборовский А.Б.)
9. Определение ферментативно-активного, иммунореактивного церулоплазмина и антител к нему у больных ревматоидным артритом / Актуальные проблемы современной ревматологии / Под ред. АБ. Зборовского, - Волгоград, 2001, -Вып. 19, - С.51-53 (соавт. Гонтарь И.П., Петрова Н.В., Зборовская И.А., Красильников А.Н., Трубенко Ю.А., Мызгин В.Н)
10. Значение определения антител к церулоплазмину у больных системной красной волчанкой / Актуальные проблемы современной ревматологии / Под ред. А.Б. Зборовского, -Волгоград, 2001, -Вып. 19, - С.53-55 (соавт. Гонтарь И.П., Зборовский А.Б., Сычева Г.Ф., Петрова Н.В., Красильников А.Н.)
11. Особенности антиоксидантного статуса у больных системной красной волчанкой / Актуальные проблемы современной ревматологии / Под ред. А.Б. Зборовского, - Волгоград, 2001, - Вып. 19, - С.85-88 (соавт. Зборовский А.Б., Гонтарь И.П., Сычева Г.Ф., Петрова Н.В.)
12. Integrative approach to study of immune response to ceruloplasmin in rheumatic diseases / Annual European Congress of Rheumatology EULAR-2001, 13-16 June, 2001, - Prague, - Abstracts / Ann Rheum Dis, - 2001, - Vol.60, Suppl. I, - P. 100 (соавт. Петрова H.B., Гонтарь И.П., Зборовский А.Б.)
Научное издание
СУЩУК Евгений Александрович
КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К ЦЕРУЛОПЛАЗМИНУ У БОЛЬНЫХ СИСТЕМНОЙ КРАСНОЙ ВОЛЧАНКОЙ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ИММОБИЛИЗИРОВАННЫХ ГРАНУЛИРОВАННЫХ АНТИГЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ С МАГНИТНЫМИ СВОЙСТВАМИ
Автореферат
Подписано к печатп 5.01.2002 г. Формат 60x84/16. Печать офс. Бум офс. Гарнитура Times. Усл. печ. л. 1,4. Учю-изд. л. 1,5. Тираж 100 экз. Заказ j_
Волгоградская медицинская академия. 400066, г. Волгоград, пл. Павших борцов, 1.
Оглавление диссертации Сущук, Евгений Александрович :: 2002 :: Волгоград
ПЕРЕЧЕНЬ ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ.
ВВЕДЕНИЕ.
ЧАСТЬ I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
Глава 1 Современные аспекты патогенеза системной красной волчанки, роль активных форм кислорода и антиоксидантной системы
1 1 Современные представления об иммунопатогенезе системной красной волчанки
1 2 Физиологическая и патофизиологическая роль активных форм кислорода
1 3 Активные формы кислорода при системной красной волчанке
1 4 Церулоплазмин, его структура и функции
1 5 Исследования церулоплазмина при системной красной волчанке
ЧАСТЬ II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.
Глава 2 Материалы и методы
2 1 Получение образцов исследуемого материала 50 2 2 Характеристика антигена 50 2 3 Определение оксидазной активности церулоплазмина 51 2 4 Определение количества иммунореактивного церулоплазмина в сыворотке крови
2 5 Расчет удельной оксидазной активности церулоплазмина
2 6 Иммобилизация фермента
2 7 Определение антител к церулоплазмину иммуноферментным методом
2 7 I Определение антител к церулоплазмину при иммобилизации антигена в микротитрационных планшетах 59 2 7 2 Определение антител к церулоплазмину с использованием иммобилизированных гранулированных антигенных препаратов с магнитными свойствами 61 2 7 3 Сравнение методик определения антител к церулоплазмину и выбор предпочтительной методики
2 8 Иммунологические исследования
2 9 Общеклинические лабораторные исследования
2 10 Статистический анализ полученных результатов
Глава 3 Клиническая характе лстика больных
Глава 4 Уровень оксидазной активности, количества церулоплазмина и антител к нему у здоровых лиц
Глава 5 Показатели активности и количества церулоплазмина, уровень антител к ферменту у больных системной красной волчанкой
5 1 Церулоплазмин и антитела к нему у больных системной красной волчанкой с различной степенью активности патологического процесса
5 11 Активность, количество церулоплазмина и антитела к церулоплазмину у больных системной красной волчанкой с минимальной активностью болезни 105 5 12 Активность, количество церулоплазмина и антитела к церулоплазмину у больных системной красной волчанкой с умеренной активностью болезни 109 5 1 3 Активность, количество церулоплазмина и антитела к церулоплазмину у больных системной красной волчанкой с высокой активностью болезни
5 2 Церулоплазмин и антитела к нему у больных системной красной волчанкой с различным течением патологического процесса
5 3 Церулоплазмин и антитела к нему у больных системной красной волчанкой с различной продолжительностью болезни
5 4 Церулоплазмин и антитела к нему у различных клинических групп больных системной красной волчанкой
5 4 1 Церулоплазмин и антитела к нему у больных системной красной волчанкой с наличием инфекционных осложнений
5 4 2 Церулоплазмин и антитела к нему у больных системной красной волчанкой с наличием васкулопатии
5 5 Влияние терапии на активность, количество церулоплазмина и уровень антител к церулоплазмину у больных системной красной волчанкой
5 6 Изменения активности, количества церулоплазмина и уровня антител к церулоплазмину у больных системной красной волчанкой при длительном наблюдении
Введение диссертации по теме "Ревматология", Сущук, Евгений Александрович, автореферат
Системная красная волчанка является мультисистемным воспалительным заболеванием, характеризующимся вариабельными клиническими проявлениями в диапазоне от мягко протекающего недуга с преимущественным поражением кожи и суставов до тяжелого инвалидизирующего поражения с развитием почечной недостаточности и глубоких нарушений нервной системы.
Несмотря на то, что СКВ является относительно редким заболеванием с распространенностью около 1 случая на 1000 населения [282], эта патология имеет большое социальное и медицинское значение. Специально организованное популяционное исследование показало, что наблюдается рост заболеваемости СКВ за последние четыре десятилетия почти в три раза [459]. Высокая социально экономическая значимость СКВ обусловлена преимущественным поражением лиц трудоспособного периода жизни, преобладанием женщин детородного возраста, что ведет к большим прямым и косвенным затратам на лечение. По данным исследований в Москве больные СКВ занимают третью по численности нозологическую группу инвалидов с заболеваниями костно-мышечной системы, составила 11,5% [68]. Пациенты с СКВ заболевают в более раннем возрасте по сравнению с другими ревматическими болезнями и имеют малую длительность болезни до выхода на инвалидность [68]. Больные СКВ в 4 раза чаще госпитализируются, и, по меньшей мере, в два раза чаще обращаются за амбулаторной помощью, чем проживающие на той же территории лица [138]. Результаты проспективного исследования D.A. Isenberg и соавт. в Великобритании (2001) [440] свидетельствуют о том, что общие затраты на лечение 1 больного СКВ в год составляют около £8000, причем 2/3 расходов приходятся на непрямые затраты, связанные с временной и постоянной нетрудоспособностью. Расходы на лечение больного тяжелой формой СКВ с высокой активностью и полиорганными поражениями превышают £15000 в год, а общие экономические потери для таких больных приближаются к £50000 за год. Исследования, проведенные одновременно в трех странах - США, Канаде и Великобритании показали, чгго прямые затраты на лечение больных СКВ практически не отличались, составляя около $5000 на одного больного в год, несмотря на существенные различия в организации и финансировании систем здравоохранения этих стран [140]. Непрямые ежегодные затраты, связанные с СКВ, могут превышать $22000 на одного больного [141], однако непроизводственные потери, связанные со здоровьем женщин, социальными функциями в семье, уходом за детьми и т.п. с трудом поддаются измерению, что, вероятно, приводит к занижению оценок.
Затраты на лечение больных СКВ возрастают с увеличением активности болезни и ухудшением общего состояния пациентов [139], следовательно адекватный контроль болезни и поддержание активности СКВ на минимальном уровне могут обеспечить значительный экономический эффект. Яркий пример влияния достижений медицинской науки на снижение экономических потерь от СКВ приводит P.M. Mclnnes и соавт. (1994) [319]. Внедрение в медицинскую практику США комбинированного лечения тяжелого люпус-нефрита циклофосфамидом в сочетании с кортикостероидами по сравнению с лечением только кортикостероидами позволило сэкономить более $50 000 000 в год на прямых затратах на лечение больных СКВ с нефритом и предотвратить потерю более $42 000 000 за год, связанную с ограничением трудоспособности.
Несмотря на достигнутые успехи в диагностике и лечении СКВ, задача своевременной постановки диагноза, назначения адекватной терапии и контроля за ее эффективностью часто бывает осложнена. Вариабельность клинической картины, полиморфизм проявлений затрудняют диагностику, а недостаточные знания этиологии и патогенеза этого тяжелого страдания не позволяют выработать оптимальную терапевтическую тактику.
В последние годы пристальное внимание уделяют участию активных форм кислорода и антиоксидантной системы в физиологических и патологических процессах [271], в том числе и при СКВ [23,34]. Теоретическим обоснованием участия свободных радикалов в патогенезе СКВ является способность повреждать белки, липиды, ДНК, придавая им свойства аутоантигенов и провоцируя выработку аутоантител [89, 146, 278]. Недостаточность антиоксидантной защиты при СКВ, выражающаяся в накоплении вторичных продуктов свободно-радикальных реакций [91,443] может быть связана с образованием антител к ферментам-антиоксидантам [31], в том числе к основному внеклеточному энзиму антиокислительной защиты, - церулоплазмину [104].
Представляется актуальным исследовать иммунньй ответ к внеклеточному ферментативному звену антиоксидантной защиты при СКВ, что позволит уяснить некоторые детали патогенеза данного заболевания, будет способствовать выработке усовершенствованных способов диагностики СКВ и более точной оценке активности патологического процесса. Результаты исследования могут дать дополнктельные критерии эффективности проводимой терапии, что, в конечном итоге, поможет облегчить состояние больных СКВ и уменьшить затраты, связанные с этим страданием.
ЦЕЛИ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ
Целью исследования является усовершенствование диагностики, повышение точности оценки активности патологического процесса у больных СКВ и улучшение контроля эффективности проводимой терапии с помощью иммобилизированных гранулированных форм церулоплазмина с магнитными свойствами.
Для достижения данной цели поставлены следующие задачи:
1. Получить иммобилизированные гранулированные препараты ЦП, изучить биохимические и антигенные свойства иммобилизированного фермента.
2. Применить иммобилизированную форму ЦП в иммуноферментном методе исследования для определения аутоантител к ЦП, определить границы нормы, оценить чувствительность и специфичность данного метода в диагностике СКВ.
3 Исследовать содержание антител к ЦП, а также оксидазную активность и количество иммун ореакти вн о го ЦП у больных СКВ в зависимости от активности, характера течения, клинических особенностей заболевания
4 Оценить возможности определения антител к ЦП, оксидазной активности и количества иммунореактивного ЦП для объективизации контроля эффективности проводимой терапии у больных СКВ
НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ
Впервые для иммунодиагностики СКВ были созданы и применены в иммунофер-ментном методе исследования иммобилизированные гранулированные антигенные препараты ЦП с магнитными свойствами Подобраны оптимальные условия иммобилизации фермента, позволяющие сохранять как его энзимные функции, так и антигенные свойства Полученная иммобилизированная форма фермента отличается высокой устойчивостью и может быть использована как модель для изучения взаимодействия антиген-антитело
Впервые для оценки активности патологического процесса при СКВ применено комплексное исследование с определением оксидазной активности ЦП, измерением количества ЦП в сыворотке крови иммунофермен'*ным методом и расчетом удельной оксидазной активности фермента
В ходе работы в сыворотках крови Сольных СКВ выявлены антитела к ЦП Показано, что количество иммунореактивного ЦП, его оксидазная активность и уровень антител к ферменту коррелируют с активностью патологического процесса при СКВ Выявлено, что аутоантитела к ЦП чаще обнаруживаются у больных СКВ с высокой активностью болезни, при наличии поражения сосудов Показана возможность оценки активности СКВ с использованием лабораторных показателей активности, количества ЦП и наличия антител к нему Установлена способность исследованных показателей к изменению под влиянием лечения, что обеспечивает возможность оценки эффективности проводимой терапии
ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ
Разработана доступная для использования в клинических лабораториях методика иммуноферментного анализа антител к ЦП на основе иммобипизированных гранулированных препаратов с магнитными свойствами. Определение антител к ЦП в предложенной модификации иммуноферментного метода с одновременным исследованием оксидазной активности и количества иммунореактивного ЦП и расчетом удельной оксидазной активности фермента может быть использовано в качестве дополнительных тестов для диагностики СКВ, оценки активности патологического процесса и выделения клинических форм заболевания. Антитела к ЦП выявляются на ранних стадиях заболевания и могут быть использованы для своевременной диагностики заболевания. Показано, что динамика изученных показателей может быть использована для суждения об эффективности терапии.
ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ
На защиту выносится положение о возможности определения антител к ЦП с помощью методов иммуноферментного анализа на основе иммобилизированных антигенных препаратов с магнитными свойствами у больных СКВ. Исследование антител к ЦП, оксидазной активности, количества, удельной оксидазной активности ЦП может быть использовано в качестве дополнительных тестов для диагностики СКВ, уточнения степени активности патологического процесса, выделения клинических вариантов СКВ. Динамика этих показателей может служить для оценки эффективности проводимой терапии.
ВНЕДРЕНИЕ В ПРАКТИКУ
Методы определения оксидазной активности ЦП, количества иммунореактивного ЦП, удельной оксидазной активности ЦП и антител к ЦП с помощью иммобилизированных антигенных препаратов с магнитными свойствами внедрены в Муниципальном медицинском учреждении «Клиническая больница скорой медицинской помощи №25» г Волгограда
ПУБЛИКАЦИИ
По теме диссертации опубликовано 12 печатных работ, из которых 4 - в центральной и 1 - в зарубежной печати АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ
Основные положения диссертации были представлены на итоговых научных конференциях студентов и молодых ученых Волгоградской медицинской академии (1998 2001 гг), научно-практической конференции «Современные аспекты глюкокортикостеро-идной терапии ревматических заболеваний» (Москва, 1999), юбилейной конференции, посвященной 15-летию НИИ клинической и экспериментальной ревматологии РАМН (Волгоград, 2000), III съезде ревматологов России (Рязань, 2001), ежегодном Европейском ревматологическом конгрессе EULAR (Прага, 2001) ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ
Диссертация изложена на 239 страницах машинописного текста и состоит из введения, части I - обзора литературы, части II - собственных исследований, состоящей из 5 глав, обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций и приложений Работа иллюстрирована 40 рисунками, содержит 26 таблиц и 6 выписок из историй болезни Библиографический указатель включает 494 источника, в том числе 71 на русском языке и 423 на иностранных языках
Заключение диссертационного исследования на тему "Клинико-диагностическое значение определения антител к церулоплазмину у больных системной красной волчанкой с использованием иммобилизированных гранулированных антигенных препаратов с магнитными свойс"
выводы
1. В сыворотке крови значительной части больных СКВ методом иммуноферментного анализа выявлены антитела к церулоплазмину (КФ 1.16.3.1). Иммуноферментный метод определения антител к ЦП с применением иммобилизированных гранулированных антигенных препаратов является более чувствительным по сравнению с гетерогенным иммуноферментным методом использующим в качестве твердой фазы полистироловых планшет.
2. Антитела к ЦП способны ингибировать оксидазную активность фермента, приводя к снижению удельной оксидазной активности ЦП.
3. Антитела к ЦП появляются на ранних стадиях СКВ и их обнаружение может быть использовано для своевременной диагностики системного заболевания.
4. Уровень антител к ЦП у больных СКВ зависит от активности заболевания что может быть использовано в качестве дополнительного индикатора активности СКВ. Высокие уровни антител к ЦП коррелируют с наличием у больных СКВ поражения сосудов.
5. У больных СКВ наблюдается повышение оксидазной активности ЦП и увеличение количества иммунореактивного ЦП по сравнению с контрольной группой. Уровень удельной оксидазной активности ЦП, содержание иммунореактивного ЦП у больных СКВ зависит от активности заболевания, и эти показатели могут быть использованы в качестве дополнительных индикаторов активности СКВ.
6. Количество иммунореактивного ЦП в сыворотке крови больных СКВ значительно повышается при наличии инфекционной патологии и достоверно превышает содержание ЦП у больных не имеющих инфекционных осложнений.
Динамика оксидазной активности, количества, удельной оксидазной активности ЦП, наблюдаемая на фоне проводимой терапии, позволяет использовать их в качестве критерия эффективности лечения больных СКВ
Наиболее эффективно подавляет образования антител к ЦП иммуносупрессивная терапия кортикостероидами в сочетании с цитостатическими препаратами При использовании в комплексном лечении больных СКВ плазмафереза наблюдается выраженное, но непродолжительное, снижение уровня антител к ЦП
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
1. Полученные иммобилизированные гранулированные антигенные препараты с маг» нитными свойствами на основе ЦП рекомендуется использовать для выявления антител к энзиму у больных СКВ в иммуноферментном методе анализа.
2. Следует применять одновременное определение оксидазной активности ЦП с использованием парафенилендиамина в качестве субстрата, измерение количества ЦП в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа с последующим расчетом удельной оксидазной активности ЦП и исследование антител к ЦП в иммуноферментном анализе с использованием полученных иммобилизированных гранулированных антигенных препаратов с магнитными свойствами.
3. При определении антител к ЦП иммуноферментным методом за норму следует считать показатели здоровых лиц - менее 0,4 е.о.п., положительным следует считать значение превышающее 0,6 е.о.п.
4. При определении оксидазной активности ЦП нормальными значениями следует считать значения здоровых лиц - до 33,91 е.о.п., патологическим следует считать превышающее это значение. Оксидазная активность ЦП, превышающая 50,0 е.о.п. характерна для СКВ. Для минимальной активности СКВ характерна оксидазная активность ЦП от 40 до 60 е.о.п, для высокой активности СКВ характерны значения оксидазной активности ЦП выше 60 е.о.п.
5. При измерении количества ЦП в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа нормальными следует считать SHaneHHH здоровых лиц - от 632 до 943 мг/л, патологическим следует считать превышающее это значение. Содержание ЦП в сыворотке более 1300 мг/л следует считать характерным для активной СКВ. При минимальной активности СКВ характерно содержание иммунореактивного ЦП в сыворотке крови до 1500 мг/л, при умеренной активности СКВ - от 1500 до 2500 мг/л и при высокой активности СКВ - выше 2500 мг/л
В процессе лечения рекомендуется использовать значения оксидазной активности ЦП, количества иммунореактивного ЦП и уровня антител к ЦП, рассматривая снижение этих показателей как признак эффективности проводимой терапии
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2002 года, Сущук, Евгений Александрович
1. Агишева К.Н., Салихов И.Г. Перекисное окисление липидов и состояние антиокси-дантной системы у больных системной красной волчанкой // Клин, медицина, -1990, - Т.68, №4, - С.99-102
2. Азизова О.А., Ройтман Е.В., Дементьева И.И., Никитина Н.А., Гагаева Е.В., Лопухин Ю.М. Влияние свободнорадикальных процессов на гемокоагуляцию и фибри-нолиз // Гематол. и трансфузиол., 1997, - Т.42, №6, - С.3-6
3. Александрова Е.Н., Насонов Е.Л., Ковалев В.Ю. Количественный иммунофермент-ный метод определения антител к кардиолипину в сыворотке крови // Клин, ревма-толгия, 1995, - №4, - С.35-39.
4. Антоненко С.Г., Берлинских Н.К., Савина О.Л., Король Д.Р., Яременко О.А., Каша-евский Ю.Ф. Влияние церулоплазмина на метаболические процессы в печени мышей при нейтронном воздействии // Радиобиология, 1990,-Т. 30, №1,- С. 80-83
5. Бияшева И.Р., Алдиярова М.А., Лоранская Т.И., Пусговойтов В.В., Васильев А.В. Система местного гуморального иммунитета у больных с синдромом нарушенного всасывания // Вопр. мед. химии, 1994, - Т.40, №2, - С.39-41
6. Боброва Л.Н. Клинико-диагностическое значение определения антител к суперок-сиддисмутазе, глутатионредуктазе у больных ревматоидным артритом // Дисс.канд. мед. наук, Волгоград 1995,-130 с.
7. Васильев В.Б., Качурин A.M. Рокко Дж.-П., Бельтрамини М., Сельвино Б., Гайцхо-ки В.С, Спектральные исследования активного центра церулоплазмина при удалении и возвращении в него ионов меди // Биохимия, 1996, - Т. 61, № 2, - С.296-307
8. Владимирская Е.Б., Масчан А.А., Румянцев А.Г. Апоптоз и его роль в развитии опухолевого роста // Гематол. и трасфузиол., -1997, Т.42, №5, - С.4-9
9. Главинская Т.А., Добротина Н.А. Церулоплазмин и гаптоглобин в оценке активности и системности красной волчанки // Вопр. ревматизма, 1973, - №1, - С.82-86
10. Главинская Т.А., Резайкина А.В., Комарова В.Д., Сидорова Т.И. Фенотипы HLA и церулоплазмина при красной волчанке и ограниченной склеродермии II Вестн. дерм, и венер.,- 1989, №6, - С.9-13
11. Гланц С. Медико-биологическая статистика. // Пер. с англ., М.: Практика,1998,-459 с.
12. Гомова Т.А. Варианты течения системной красной волчанки // Тер. архив, 1994,1. Т. 66, N»4,-с.54-57
13. Гонтарь И.П., Зборовский А.Б., Левкин С.В., Сычева Г.Ф. Способ получения магнитных полиакриламидных гранул // Авторское свидетельство на изобретение N 1582657,- 1990.
14. Горанчук В.В., Шустов Е.Б. Биохимические показатели при развитии экспериментальной гипертермии // Физиол. человека, 1997, - Т.23, №4, - С.98-105
15. Егорова О.Н., Балабанова P.M., Чувиров Г.Н. Значение определения антител к вирусам семейства Herpesviridae при ревматических заболеваниях И Тер. архив,1999, Т.71, №5, - С.57-61
16. Епинетов М.А. Клинико-диагностическое значение железо и медь-содержащих ме-таллопротеидов при злокачественных заболеваниях щитовидной железы и ревматоидном артрите // Автореф. дисс. канд. мед. наук, Волгоград, - 1994, - 20 с.
17. Заводовский Б.В. Иммобилизированные гранулированные антигенные препараты с магнитными свойствами как лечебные иммуносорбенты при системной красной волчанке (экспериментальное исследование) // Дисс. . канд. мед. наук, Волгоград, - 1995, - 148 с.
18. Закирова А.Н., Мингазетдинова JI.H., Камилов Ф.Х., Ланкин В.З., Лебедев А.В., Коновалова Г.Г. Антиоксидант церулоплазмин: влияние на перекисное окисление липидов, гемореологию и течение стенокардии // Тер. архив, 1994, - Т.66, №9, -С.24-28
19. Захарова Е.Т., Пучкова Л.В., Шавловский Л.В., Неуймина М.В., Руджий Б.Р., Гайц-хоки B.C. Анализ молекулярной микрогетерогенности некоторых гликопротеидов плазмы крови больного сиалидозом 1 // Вопр. мед. химии, 1998, -№1, - С.98-105
20. Зборовская И,А. Клинико-патогенетическое значение антиоксидантной системы крови при воспалительных ревматических заболеваниях. // Дисс. доктора мед. наук, Волгоград, - 1995, - 341 с.
21. Зборовская И.А., Банникова М.В. Антиоксидантная система организма, ее значение в метаболизме, клинические аспекты // Вестн. Росс. акад. мед. наук, 1995, - №6, -С.53-60
22. Зборовский А.Б., Гонтарь И.П. Иммобилизированные антигенные препараты с магнитными свойствами в диагностике и лечении ревматических заболеваний. // Вестн. Росс. акад. мед. наук, 1999, -№5, - С.45-49
23. Зборовский А.Б., Гонтарь И.П. Применение магнитосорбентов в иммунодиагностике и лечении системной красной волчанки и ревматоидного артрита // Клин, медицина, 2001, - Т.79, №2, - С.42-45
24. Иванов А.Ф., Ерошкнна Т.Д., Фомин С.А., Мусин И.И., Чиркин В.В. Влияние гемо-сорбции на концентрацию гликопротеидов сыворотки крови при воспалительных заболеваниях толстой кишки Н Тер. архив, -1995, Т.67, №2, - С.36-39
25. Иммунологические методы / Под ред. Г.Фримеля. / Пер. с англ., М.: Медицина, 1987,-472 с.
26. Иммунология. / В 3-х т., Под ред. У.Пола. / Пер. с англ., М.: Мир, 1987 - 1989.
27. Клиническая ревматология / Под ред. Х.Л.Ф.Каррея / Пер. с англ., М.: Медицина, 1990,-511 с.
28. Кузьмина Н.С., Османов С.К., Назаренко Н.А., Лымарь С.С., Волошук A.M., Яковлева С.А. Коммерческий иммуноферментный диагностикум для определения церу-лоплазмина // Лаб. дело, -1991,- №4, С.21 -23
29. Кукк Э.Л., Уйбо P.M. Аутоантитела к энзимам ключ к более специфической диагностике аутоиммунных заболеваний // Тер. архив, - 1995, - Т. 67, №4, - С.62-64
30. Лабораторные методы исследования в клинике / Под.ред. В.В. Меньшикова / М.: Медицина, 1987,-458 с.
31. Лемперт Б.А. Параметры определения циркулирующих иммунных комплексов и специфичности ПЭГ-теста с использованием в качестве модели агрегированного IgG И Лаб. дело, 1988, - №1, - С.28-29.
32. Лисицина Т.А., Иванова М.М., Дурнев А.Д. Активные формы кислорода и патогенез ревматоидного артрита и системной красной волчанки // Вестн. Росс. акад. мед. наук, 1996, -№12, -С.15-20.
33. Лисицина Т.А., Тронов В.А, Коноплянников М.А., Дурнев А.Д, Иванова М.М. Исследование поврежден ности ДНК мононуклеарных клеток крови больных системной красной волчанкой методом ДНК-комет // Бюл. эксперим. биол. мед., 1998, -Т.125,№1,-С.75-78
34. Лисицина Т.А., Дурнев А.Д., Иванова М.М., Сперанский А.И., Середенин С.В., Насонова В.А. Влияние беметила на продукцию антител к ДНК у больных системной красной волчанкой // Эксп. клин, фармакол, 1999, - Т. 62, №5, - С.38-41
35. Логинов А.С., Матюшин Б.Н., Якимчук Г.Н. Эффективность фармакотерапии у больных с хронической патологией печени и состояние ферментов антиоксидант-ной защиты И Тер. архив, -1995, Т. 67, №2, - С.З-б
36. Логинов А.С., Матюшин Б.Н., Чебанов С.М., Решетняк В.И. Оценка холестаза по активности антиоксидантных ферментов и составу липопротеидов плазмы крови больных с патологией печени // Тер. архив, 1998, - Т.70, №4, - С.40-42
37. Львовская Е.И., Гаврилюк Г.А., Мохова С.В. Влияние in vitro препарата БИТО, це-рулоплазмина, трансферрина, эссенциале на интенсивность процессов липидной пероксидации при термической травме // Вопр. мед. химии, 1996, - Т. 42, №2, -С.125-127
38. Мазорчук С.Г. Динамика содержания микроэлементов (Fe, Си, Zn) и металлопро-теидов при различных клинических проявлениях красной волчанки // Автореф. дисс. канд. мед. наук, Черновцы, - 1970, - 18 с.
39. Мазур М.В., Мошняга М.Г., Жук В.М., Штирбу А.А., Бумшам С.В. О распространенности системной красной волчанки в Молдове. // Тер. архив, 1992,- Т. 64, №11, - С.93-95
40. Матвейков Г.П., Калия Е.С., Левин В.И., Санько Н.И. Активность супероксиддис-мутазы и ее изоферментов в иммунокомпетентных клетках периферической крови при системной красной волчанке и ревматоидном артрите И Тер. архив, 1994, -Т. 66, №4, - С.57-61
41. Меграбян Т.Б., Меграбян З.Б., Сидорова Е.В., Налбандян P.M. Моноклональные антитела к церулоплазмину и их использование для иммуноферментного анализа этого белка // Биохимия, 1990, - Т.55, №2, - С.361-367
42. Мжельская Т.И. Биологические функции церулоплазмина и их дефицит при мутациях генов, регулирующих обмен меди и железа // Бюл. эксперим. биол. мед., -2000, Т. 130, №8, - С. 124-133
43. Морозов Ю.В. Основы высшей математики и статистики // М.: Медицина, 1998, -232 с.
44. Мякишев М.В. Клинико-диагностическое значение ферментов антиоксидантной системы при системной красной волчанке и системной склеродермии // Автореф. дисс. канд. мед. наук, Волгоград, - 1995, - 20 с.
45. Насонов Е.Л. Современные направления иммунологических исследований при хронических воспалительных и аутоиммунных заболеваниях человека // Тер. архив. 2001, - Т. 74, №8, - С .43-46
46. Насонов Е.Л., Баранов А.А., Шилкина Н.П. Васкулиты и васкулопатии // Ярославль, 1999, - 616 с.
47. Насонова В.А., Сигидин Я.А. Патогенетическая терапия ревматических заболеваний. // М.: Медицина, 1985, 325 с.
48. Насонова В.А., Фоломеева О.М., Амирджанова В.Н Ревматические болезни в свете международной классификации болезней и проблем, связанных со здоровьем (десятый пересмотр) // Тер. архив, 1998, -Т. 70, №5, - С.5-8
49. Насонова В.А., Халтаев Н.Г. Международное десятилетие болезней костей и суставов (The Bone and Joint Decade 2000-2010) междисциплинарная акция // Тер архив, - 2001, - Т. 73, №5, - С.5-7
50. Новоселова Е.Г., Макар В.Р., Семилетова Н.В., Табилина И.В., Вакулова Л.А., Фе-сенко Е.Е. Участие антиоксидантов в регуляции клеточного иммунитета Н Иммунология, 1998, - №4, - С.33-37
51. Пириев В.А., Иванова М.М., Каинова А.С., Астахова Т.А. Гликозаминогликаны сыворотки крови в оценке степени активности процесса при системной красной волчанке И Ревматология, 1988, - № 2, - С.29-34
52. Пучкова Л.В., Сасина Л.К., Алейникова Т.Д., Гайцхоки B.C. Взаимодействие церу-лоплазмина с рецептором плазматических мембран клеток CV-1 и его регуляция по типу обратной связи // Бюл. эксперим. биол. и мед., 1995, - Т. 119, №4, - С.417420
53. Пучкова Л.В., Сасина Л.К., Алейникова Т.Д., Захарова Е.Т., Гайцхоки B.C. Реконструирование пути межклеточного переноса пептидной части молекул церуло-плазмина в организме млекопитающих // Биохимия, 1997, - Т.62, №7, - С.817-825
54. Ревматические болезни / Под ред. В.А. Насоновой, Н.В. Бунчука / М.: Медицина, -1997,-520 с.
55. Решетняк Т.М., Бойцеховская Б., Алекберова З.С., Калашникова Л.А., Мач Э.С., Забек Я. Антитела к различным фосфолипидам у больных СКВ с первичным анти-фосфолипидным синдромом // Клин, медицина, 1999, - Т. 77, №5, - С.32-37
56. Скулачев В.П. Возможная роль активных форм кислорода в защите от вирусных инфекций // Биохимия, 1998, - Т.63, №12, - С.1691-1694
57. Тарасов Н.И., Серегин С.П., Волчегорский И.А. О роли определения церулоплазмина в лаборторной диагностике хронического простатита // Клин. лаб. диагностика,- 1998,-№1,-С.19-21
58. Тареева И.Е., Шилов Е.М., Краснова Т.Н., Козловская Л.В., Швецов М.Ю., Янушкевич Т.Н., Самокишина Н.А. Волчаночный нефрит в середине XX века и в начале XXI века // Тер. архив, 2001, - Т.73, №6, - С.5-9
59. Тен Э.В. Экспресс-метод определения активности церулоплазмина в сыворотке крови // Лаб. дело, 1981, - №6, - С.334-335
60. Флетчер Р., Флетчер С., Вагнер Э. Клиническая эпидемиология. Основы доказательной медицины. / Пер. с англ. / М.: Медиа Сфера, 1998, 352 с.
61. Фоломеева О.М., Лобарева Л.С., Ушакова М.А., Коган К.М., Николаева М.Н., Затис Ю.Д. Инвалидность, обусловленная ревматическими заболеваниями, среди жителей Российской Федерации // Научно-практическая ревматология, 2001, - №1, -С.15-21
62. Шварцман А.Л., Воронина О.В., Гайцхоки B.C., Пашкин Е.А. Экспрессия гена церулоплазмина в органах млекопитающих по данным гибридизационного анализа с комплементарными ДНК-зондами // Молекуляр. биология, 1990, - Т. 24, №3, -С.657-662
63. ACR Ad Hoc Committee on neuropsychiatric lupus nomenclature. The American College of Rheumatology nomenclature and case definitions for neuropsychiatric lupus syndromes // Arthritis Rheum, 1999, - Vol.42, N.4, - pp.599-608
64. Ahmad J, Ashok ВТ, Ali R. Reactive oxygen species modified thymine and poly(dT) present unique epitope for human anti-DNA autoantibodies. // Immunol Lett, 1997, -Vol.58, N.2,-pp.69-74
65. Ahmad J, Ashok ВТ, Ali R. Detection of oxidative DNA damage by a monoclonal antibody: role of lysyl residues in antigen binding. // Immunol Lett, 1998, - Vol.62, N.2, -pp.87-92.
66. Ahmad R, Alam K, Ali R. Antigen binding characteristics of antibodies against hydroxyl radical modified thymidine monophosphate. // Immunol Lett, 2000, - Vol.71, N.2, -pp.111-115.
67. Ahmed MU, Frye EB, Thorpe SR, Baynes JW. N8 -(carboxymethyl)lysine, a product of the chemical modification of proteins by methylglyoxal, increases with age in human lens proteins. // Biochem J, 1997, - Vol.324, - pp.565-570
68. Ainiala H, Loukkola J, Peltola J, Korpela M, Hietahatju A. The prevalence of neuropsy-chiatric syndromes in systemic lupus erythematosus // Neurology, 2001, - Vol. 57, N.3, - pp.496-500
69. Ake Lemmark. Autoimmune diseases: are markers ready for prediction? // J Clin Invest, 2001, - Vol. 108, - pp. 1091-1096
70. Akimoto T, Akama T, Kono I, Sumida T. Relationship between clinical features and binding domains of anti-prothrombin autoantibodies in patients with systemic lupus erythematosus and antiphospholipid syndrome. // Lupus, 1999, - Vol.8, N.9, - pp.761-766
71. Alam К, AH R. Human anti-DNA autoantibodies and induced antibodies against ROS-modified-DNA show similar antigenic binding characteristics. // Biochem Mol Biol Int, -1999, Vol.47, N.5, - pp.881-890
72. Albert LJ, Inman RD. Molecular mimicry and autoimmunity. // N Engl J Med, 1999, -Vol.341, - pp.2068-2074.
73. Altman DG, Bland M. Diagnostic tests 1: sensitivity and specificity. // BMJ, 1994, -Vol.308,-p.l 552.
74. Altman DG, Bland M. Diagnostic tests 2: predictive values. // BMJ, -1994, Vol.309, -p. 102.
75. Altman DG, Bland M. Diagnostic tests 3: receiver operating characteristic plots. // BMJ, 1994, - Vol.309, - p. 188
76. Altman DG, Bland M. Comparing several groups using analysis of variance // BMJ, -1996, Vol.312, - pp.l472-1473
77. Altman DG, Bland M. Units of analysis // BMJ, 1997, - Vol.314, - p. 1874
78. Altman DG. ROC curves and confidence intervals: getting them right. // Br Heart J,2000, Vol.83, - p.236
79. Amengual 0., Atsumi Т., Khamashta MA., Tinahones F., Hughes GRV. Autoantibodies against oxidized low-density lipoprotein in antiphospholipid syndrome // Br J Rheum, -1997,- Vol.36, -pp.964-968
80. Ames PRJ, Alves J, Murat 1, Isenberg DA, Nourooz-Zadeh J. Oxidative stress in systemic lupus erythematosus and allied conditions with vascular involvment // Rheumatology (Oxford), 1999, - Vol.38, - pp.529-534.
81. Anderson CJ, Neas BR, Uchiumi T, Stafford HA. Autoantibodies to the 20-kDa ribo-somal proteins: identification, characterization, and new aspects on prevalence in systemic Lupus erythematosus. // Clin Immunol, 2001, - Vol.98, N.2, - pp.249-257
82. Andrade F, Casciola-Rosen L, Rosen A. Apoptosis in systemic lupus erythematosus: clinical implications. // Rheum Dis Clin North Am, 2000, - Vol.26, N.2, - pp.
83. Aouffen M, Paquin J, De Grandpre E, Nadeau R, Mateescu MA. Deglycosylated ceru-loplasmin maintains its enzymatic, antioxidant, cardioprotective, and neuronoprotective properties. // Biochem Cell Biol, 2001, - Vol.79, N.4, - pp.489-497.
84. Aruoma 01. Nutrition and health aspects of free radicals and antioxidants. // Food Chem Toxicol, 1994, - Vol.32, - pp.671-683
85. Atanasiu RL, Stea D, Mateescu MA, Vergely C, Dalloz F, Briot F, Maupoil V, Nadeau R, Rochette L. Direct evidence of caeruloplasmin antioxidant properties. // Mol Cell Bio-chem, 1998, - Vol. 189, N. 1-2, - pp. 127-135
86. Attieh ZK, Mukhopadhyay CK, Seshadri V, Tripoulas NA, Fox PL. Ceruloplasmin fer-roxidase activity stimulates cellular iron uptake by a trivalent cation-specific transport mechanism // J Biol Chem, 1999, - Vol.274, N.2, - pp.1116-1123.
87. Bae YS, Kang SW, Seo MS, Baines 1С, Tekle Б, Chock PB, Rhee SG. Epidermal growth factor (EGF)-induced generation of hydrogen peroxide. // J Biol Chem, 1997,-Vol.272, - pp.217-221.
88. Bashir S, Harris G, Denman MA, Blake DR, Winyard PG. Oxidative DNA damage and cellular sensitivity to oxidative stress in human autoimmune diseases. // Ann Rheum Dis, 1993, - Vol.52, N.9, - pp.659-666.
89. Belfiore N, Rossi S, Bobbio-Pallavicini F, Epis O, Caporali R, Montecucco C. Anti-Ro(SS-A) 52 kDa and 60 kDa specificities in undifferentiated connective tissue disease // Joint Bone Spine, 2000, - Vol.67, - pp. 183-187
90. Bell SA, Du Clos TW, Khureigara G, Picazo JJ, Rubin RL. Autoantibodies to cryptic epitopes of C-reactive protein and other acute phase proteins in the toxic oil syndrome. // J Autoimmun, 1995, - Vol.8, N.2, - pp.293-303
91. Bell SA, Faust H, Schmid A, Meurer M. Autoantibodies to C-reactive protein (CRP) and other acute-phase proteins in systemic autoimmune diseases. // Clin Exp Immunol, -1998, Vol.l 13, N.3, - pp.327-332
92. Belmont HM, Abramson SB, Lie JT. Pathology and pathogenesis of vascular injury in systemic lupus erythematosus: interactions of inflammatory cells and activated endothelium. // Arthritis Rheum, 1996, - Vol.39, N.l, - pp.9-22.
93. Berden JH, Licht R, van Bruggen MC, Tax WJ. Role of nucleosomes for induction and glomerular binding of autoantibodies in lupus nephritis. // Curr Opin Nephrol Hyper-tens, 1999, - Vol.8, N.3, - pp.299-306
94. Bianchini A, Musci G, Calabrese L. Inhibition of endothelial nitric-oxide synthase by ce-ruloplasmin. // J Biol Chem, 1999, - Vol.274, - pp.20265-20270
95. Biasiolo A, Rampazzo P, Brocco T, Barbero F, Rosato A, Pengo V. Anti-p2 glycoprotein I—P2 glycoprotein I. immune complexes in patients with antiphospholipid syndrome and other autoimmune diseases. // Lupus, 1999, - Vol.8, N.2, - pp. 121-126
96. Bielli P, Bellenchi GC, Calabrese L. Site-directed mutagenesis of human ceruloplasmin: production of a proteolytically stable protein and structure-activity relationships of type 1 sites II J Biol Chem, 2001, - Vol.276, N.4, - pp.2678-2685.
97. Boivin S, Aouffen M, Foumier A, Mateescu M-A. Molecular characterization of human and bovine ceruloplasmin using MALDI-TOF mass spectrometry // Biochem Biophys Res Comm, 2001, - Vol. 288, - pp.1006-1010
98. Bombardier С, Gladman DD, Urowitz MB, Caron D, Chang CH, and the Committee on Prognosis Studies in SLE. Derivation of the SLEDAI: a disease activity index for lupus patients. // Arthritis Rheum, -1992, Vol.35, - pp.630-640
99. Borda E, Sterin-Borda L. Autoantibodies against neonatal heart Ml muscarinic acetylcholine receptor in children with congenital heart block. // J Autoimmun, 2001, -Vol.16, N.2,-pp.143-150.
100. Bruce IN, Gladman D, Urowitz MB. Premature atherosclerosis in systemic lupus erythematosus // Rheum Dis Clin North Am, 2000, - Vol.26, N.2, - pp.345-412
101. Bruns A, Blass S, Hausdorf G, Burmester GR, Hiepe F. Nucleosomes are major T and В cell autoantigens in systemic lupus erythematosus. // Arthritis Rheum, 2000, - Vol.43, N. 10, - pp.2307-2315
102. Cameron JS. Lupus Nephritis // J Am Soc Nephrol, 1999, - Vol.10, N.2, - pp.413 - 424
103. Camilleri F, Mallia C. RNP positivity in Maltese SLE patients. // Adv Exp Med Biol, -1999,-Vol.455,-pp.161-166
104. Caponi L, Bombardieri S, Migliorini P. Anti-ribosomal antibodies bind the Sm proteins D and B/B\ // Clin Exp Immunol, 1998, - Vol.112, N.l, - pp.139-143.
105. Cappelli-Bigazzi M, Ambrosio G, Musci G, Battaglia C, Bonaccorsi di Patti MC, Golino P, Ragni M, Chiariello M, Calabrese L. Ceruloplasmin impairs endothelium-dependent relaxation of rabbit aorta. // Am J Physiol, 1997, - Vol.273, - H2843-H2849.
106. Carr AC, Winterboum CC. Oxidation of neutrophil glutathione and protein thiols by myeloperoxidase-derived hypochlorous acid // Biochem J, 1997, - Vol.327, - pp.275281
107. Carr AC, McCall MR, Frei B. Oxidation of LDL by myeloperoxidase and reactive nitrogen species reaction pathways and antioxidant protection // Atheroscler Thromb Vase Biol, - 2001, - Vol.20, - pp.1716-1723
108. Casiola-Rosen LA, Anhalt G, Rosen A. Autoantigens targeted in systemic lupus erytje-matosus are clustered in two populations on surface structures of apoptotic keratinocytes. // J Exp Med, 1994, - Vol. 179, - pp. 1317-1330.
109. Casiola-Rosen LA, Anhalt GJ, Rosen A. DNA-dependent protein kinase is one of a subset of autoantigens specifically cleaved early during apoptosis. // J Exp Med, 1995, -Vol. 182, - pp. 1625-1634.
110. Casiola-Rosen L, Andrade F, Ulanet D, Wong WB, Rosen A. Cleavage by Granzyme В is strongly predictive of autoantigen status: implications for initiation of autoimmunity. // J Exp Med, 1999, - Vol.190, - pp.815-825.
111. Chan ОТ, Madaio MP, Shlomchik MJ. The central and multiple roles of В cells in lupus pathogenesis. // Immunol Rev, 1999, - Vol.169, - pp.107-121
112. Chan TM, Cheng DC. Identification of endothelial cell membrane proteins that bind anti-DNA antibodies from patients with systemic lupus erythematosus by direct or indirect mechanisms. // J Autoimmun, 1997, - Vol.10, - pp.433-439
113. Chin HJ, Ahn C, Lim CS, Chung HK, Lee JG, Song YW, Lee HS, Han JS, Kim S, Lee JS. Clinical implications of antineutrophil cytoplasmic antibody test in lupus nephritis. // Am J Nephrol, 2000, - Vol.20, N.l, - pp.57-63.
114. Cimino F, Esposito F, Ammendola R, Russo T. Gene regulation by reactive oxygen species. // Curr Top Cell Regul, 1997, - Vol.35, - pp. 123-148.
115. Clancy R, Marder G, Martin V, Belmont HM, Abramson SB, Buyon J. Circulating activated endothelial cells in systemic lupus erythematosus: further evidence for diffuse vas-culopathy. // Arthritis Rheum, 2001, - Vol.44, N.5, - pp. 1203-1208.
116. Clarke AE, Esdaile JM, Bloch DA, Lacaille D, DanoffDS, Fries JF. A Canadian study of the total medical costs for patients with systemic lupus erythematosus and the predictors of costs. II Arthritis Rheum, 1993, - Vol.36, N.l 1, - pp.1548-1559.
117. Clarke AE, Bloch DA, Danoff DS, Esdaile JM. Decreasing costs and improving outcomes in systemic lupus erythematosus: using regression trees to develop health policy. // J Rheumatol, 1994,-Vol.21, №12, - pp.2246-2253.
118. Clarke AE, Petri MA, Manzi S, Isenberg DA, Gordon C, Senecal JL, St Pierre Y, Joseph L, Penrod J, Fortin PR, Sutcliffe N.Goulet JR, Choquette D, Grodzicky T, Danoff
119. DS, Но V, Esdaile JM. Ail international perspective on the well being and health care costs for patients with systemic lupus erythematosus. Tri-Nation Study Group. // J Rheumatol, 1999, - Vol.26, N.7, - pp. 1500-1511.
120. Clynes R, Dumitru C, Ravetch JV. Uncoupling of immune complex formation and kidney damage in autoimmune glomerulonephritis // Science, 1998, - Vol. 279, - pp.10521054
121. Cohen MR, Isenberg DA. Ultraviolet irradiation in systemic lupus erythematosus: Friend or foe? // Br J Rheumatol, 1996, - Vol.35, - pp.1002-1007
122. Colbum KK, Green LM, Wong AK. Circulating antibodies to guanosine in systemic lupus erythematosus: correlation with nephritis and polyserositis by acute and longitudinal analyses. // Lupus, -2001, Vol.10, N.6, -pp.410-417.
123. Cooke MS, Mistry N, Wood C, Herbert KE, Lunec J. Immunogenicity of DNA damaged by reactive oxygen species implications for anti-DNA antibodies in lupus. // Free Radic Biol Med, - 1997, - Vol.22, N. 1 -2, - pp. 151 -159
124. Cooper GS, Dooley MA, Treadwell EL, St. Clair EW, Parks CG, Gilkeson GS. Hormonal, environmental, and infectious risk factors for developing systemic lupus erythematosus. // Arthritis Rheum, 1998, - Vol.41, N.9 - pp.1714-1724
125. Craft J, Fatenejad S. Self antigens and epitope spreading in systemic autoimmunity. // Arthritis Rheum, 1997, - Vol.40, N.8, - pp. 1374-1382
126. Cuzzocrea S, Caputi AP, Zingarelli B. Peroxynitrite-mediated DNA strand breakage activates poly (ADP-ribose) synthetase and causes cellular energy depletion in carrageenan-induced pleurisy. // Immunology, 1998, - Vol.93, - pp.96-101.
127. Daffada AA, Young SP. Coordinated regulation of ceruloplasmin and metallothionein mRNA by interleukin-1 and copper in HepG2 cells // FEBS Lett, 1999,- Vol.457, N.2,-pp.214-218
128. Daimon M, Yamatani K, Igarashi M, Fukase N, Kawanami T, Kato T, Tominaga M, Sasaki H. Fine structure of the human ceruloplasmin gene // Biochem Biophys Res Com-mun, 1995, - Vol.208, N.3, - pp.1028-1035
129. Dandona P, Suri M, Hamouda W, Aljada A, Kumbkarni Y, Thusu K. Hydrocortisone-induced inhibition of reactive oxygen species by polymorphonuclear neutrophils // Crit Care Med, 1999, - Vol.27, N.11,- pp.2442-2444
130. Dang H, Ogawa N, Takei M et al. Induction of lupus-associated autoantibodies by immunization with native and recombinant Ig polypeptides expressing a cross-reactive idiotype 4B4. // J Immunol, 1993, - Vol.151, - pp.7260-7267.
131. Decker P, Isenberg D, Muller S. Inhibition of caspase-3-mediated poly(ADP-ribose) polymerase (PARP) apoptotic cleavage by human PARP autoantibodies and effect on cells undergoing apoptosis. // J Biol Chem, 2000, - Vol.275, N.12, - pp.9043-9046.
132. Dedon PC, Plastaras JP, Rouzer CA, Marnett LJ. Indirect mutagenesis by oxidative DNA damage: Formation of the pyrimidopurinone adduct of deoxyguanosine by base prope-nal H Proc Natl Acad Sci USA, -1998, Vol.95, - pp.11113-11116
133. DeGiorgio LA, Konstantinov KN, Lee SC, Hardin J A, Volpe ВТ, Diamond B. A subset of lupus anti-DNA antibodies cross-reacts with the NR2 glutamate receptor in systemic lupus erythematosus. // Nat Med, 2001, - Vol.7, N.11,- pp.l 189-1193
134. DeLeo FR, Quinn MT. Assembly of the phagocyte NADPH oxidase: molecular interaction of the oxidase proteins. // J Leukoc Biol, -1996, Vol.60, - pp.677-691.
135. Denko CW, Gabriel P. Serum proteins transferrin, ceruloplasmin, albumin, a 1-acid glycoprotein, al-antitrypsin - in rheumatic disorders. // J Rheumatol, - 1979, - Vol.6, N.6,-pp.664-672.
136. Deshmukh US, Lewis JE, Gaskin F, Dhakephalkar PK, Kannapell CC, Waters ST, Fu SM. Ro60 peptides induce antibodies to similar epitopes shared among lupus-related autoantigens. // J Immunol, 2000, - Vol.164, N.12, - pp.6655-6661
137. Di Valerio R, Bernstein KA, Varghese E, Lefkowith JB. Murine lupus glomerulotropic monoclonal antibodies exhibit differing specificities but bind via a common mechanism. // J Immunol, 1995, - Vol.l55, - pp.2258-2268
138. Diaz MN, Frei B, Vita JA, Keaney JF Jr. Antioxidants and atherosclerotic disease. IIN Engl J Med, 1997, - Vol,337, - pp.408-416.
139. Dixit К, Ali R. Antigen binding characteristics of antibodies induced against nitric oxide modified plasmid DNA. // Biochim Biophys Acta, 2001, - Vol.l528, N.l, - pp. 1-8.
140. Donohoe S, Mackie IJ, Isenberg D, Machin SJ. Anti-prothrombin antibodies: assay conditions and clinical associations in the anti-phospholipid syndrome // Br J Haemot, -2001, Vol. 113, N.2, - pp.544-549.
141. Eberini I, Miller I, Zancan V, Bolego C, Puglisi L, Gemeiner M, Gianazza E. Proteins of rat serum IV. Time-course of acute-phase protein expression and its modulation by in-domethacine // Electrophoresis, -1999, Vol.20, N.4-5, - pp.846-853
142. Edworthy S, Fritzler M, Whitehead C, Martin L, Rattner JB. ASE-1: an autoantigen in systemic lupus erythematosus. // Lupus, 2000, - Vol.9, N.9, - pp.681-687
143. Eggleton P, Llewellyn DH. Pathophysiological roles of calreticulin in autoimmune disease. // Scand J Immunol, 1999, - Vol.49, N.5, - pp.466-473
144. Ehrenwald E, Chisolm GM, Fox PL. Intact human ceruloplasmin oxidatively modifies low density lipoprotein. // J Clin Invest, -1994, Vol.93 - pp. 1493-1501.
145. Ehrenwald E, Fox PL. Role of endogenous ceruloplasmin in LDL oxidation by human U937 monocytic cells. // J Clin Invest, 1996, - Vol.97, - pp.884-890.
146. Eivazova ER, McDonnell JM, Sutton BJ, Staines NA. Cross-reactivity of anti-idiotypic antibodies with DNA in systemic lupus erythematosus. // Arthritis Rheum, -2000, -Vol.43,-pp.429-439.
147. Elkon K. Autoantibodies in systemic lupus erythematosus. // Curr Opin Rheumatol, -1995,-Vol.7,-pp.384-396
148. Esser P. Principles in Adsorption to Polystyrene // Nunc Technical Bulletin, 1997, -N.6, Second edition, - pp. 1-5
149. Esterbauer H, Shaur RJ, Zollner H. Chemistry and biochemistry of 4-hydroxynonenal, malondialdehyde and related aldehydes II Free Radic Biol Med, 1991,- Vol.11, -pp.81-128.
150. Evans MD, Cooke MS, Akil M, Samanta A, Lunec J. Aberrant processing of oxidative DNA damage in systemic lupus erythematosus. // Biochem Biophys Res Commun, -2000, Vol.273, N.3, - pp.894-898.
151. Farver O, Bendahl L, Skov LK, Pechti I. Human ceruloplasmin: intramolecular electron transfer kinetics and equilibration h J Biol Chem, 1999, - Vol.274, N.37, - pp.2613526140
152. Fatenejad S, Bennett M, Moslehi J, Craft J. Influence of antigen organization on the development of lupus autoantibodies // Arthritis Rheum, 1998, - Vol.41, - pp.603-612
153. Feichtenhofer S, Fabjan JS, Abuja PM. Ceruloplasmin as low-density lipoprotein oxidase: activation by ascorbate and dehydroascorbate. // FEBS Lett, 2001, - Vol.501,1. N.l,-pp.42-46.
154. Finkel T. Oxygen radicals and signaling // Current Opinion in Cell Biology, 1998, -Vol.10,-pp.248-253.
155. Floris G, Medda R, Padiglia A, Musci G. The physiopathological significance of ceruloplasmin: a possible therapeutic approach // Biochemical Pharmacology, 2000, -Vol.60, — pp. 1735—1741.
156. Fortna RR, Watson HA, Nyquist SE. Glycosyl phosphaiidylinositol-anchored ceruloplasmin is expressed by rat Sertoli cells and is concentrated in detergent-insoluble membrane fractions. // Biol Reprod, 1999, - Vol.61, - pp.1042-1049.
157. Fox PL, Mazumder B, Ehrenwald E, Mukhopadhyay CK. Ceruloplasmin and cardiovascular disease // Free Radical Biol Med, 2000, - Vol.28, N. 12, - pp. 1735-1744
158. Fu MX, Requena JR, Jenkins AJ, Lyons TJ, Baynes JW, Thoipe SR. The advanced gly-cation end products, N8 -(carboxymethyl) lysine, is a product of lipid peroxidation and glycoxidation reactions. // J Biol Chem, 1996, - Vol.271, - pp.9982-9986
159. Gambhir JK, Lali P, Jain AK. Correlation between blood antioxidant levels and lipid peroxidation in rheumatoid arthritis. И Clin Biochem, -1997, Vol.30, N.4, - pp.351-355
160. Gao CL, Li В A, Chen CZ, Yu YT, Yuan P, Song JC. Clinical trials of immunoadsorbent in systemic lupus erythematosus therapy. // Artif Organs, 1995, - Vol.19, N.5, -pp.468-469
161. Gitlin 3D. Aceruioplasminemia. // Pediatr Res, 1998, - Vol.44, N.3, - pp.271-276
162. Gladman DD. Prognosis and treatment of systemic lupus erythematosus. // Curr Opin Rheumatol, 1996, - Vol.8, - pp.430-446.
163. Gomez-Pacheco L, Villa AR, Drenkard C, Cabiedes J, Cabral AR, Alarcon-Segovia D Serum anti-p2-glycoprotein-I and anticardiolipin antibodies during thrombosis in systemic lupus erythematosus patients. //Am J Med, 1999, - Vol.106, N.4, -pp.417-423
164. Tween 20 and relationship with antibodies to p2-glycoprotein I. // J Clin Lab Anal, -1999, Vol. 13, N.2, - pp.59-64
165. Gonzalez-Crespo MR, Navarro JA., Arenas J, Martin Mola E., De La Cruz J, Gomez-Reino JJ. Prospective study of serum and urinary nitrate levels in patients with systemic lupus erythematosus // Br J Rheumatol, 1998, - Vol.37, - pp.972-977
166. Gordon C, Salmon M. Update on systemic lupus erythematosus: autoantibodies and apoptosis. // Clin Med JRCPL, 2001, - Vol.1, N.l, - pp.10-14
167. Green D. Spontaneous inhibitors to coagulation factors. // Clin Lab Haematol, 2000, -Vol.22, Suppl.l, -pp.21-25; discussion30-32.
168. Greidinger EL. Apoptosis in lupus pathogenesis // Frontiers in Bioscience 6, -2001, -November l,-dl392-1325
169. Griendling KK, Minien CA, Ollerenshaw JD, Alexander RW. Angiotensin II stimulates NADH and NADPH oxidase activity in cultured vascular smooth muscle cells. // Circulation, 1994, - Vol.74, - pp.1141-1148.
170. Griffin SV, Chapman PT, Lianos EA, Lockwood CM. The inhibition of myeloperoxidase by ceruloplasmin can be reversed by anti-myeloperoxidase antibodies // Kidney tat, -1999, Vol.55, N.3, - pp.917-925
171. Griffin SV, Lockwood CM. Serum measurement of myeloperoxidase (MPO), caeru-loplasmin (CP) and MPO-CP complexes Abstract. // Kidney bit, 1999, - Vol.55, N.5,-p.2102
172. Gudmundsson S, Steinsson K. Systemic lupus erythematosus in Iceland 1975 through 1985. A nationwide epidemiological study in an unselected population. // J Rheumatol, -1990, Vol. 17, - pp.1162-1167.
173. Gulbins E, Brenner B, Schlottmann K, Welsch J, Heinle H, Koppenhoefer U, Linder-kamp O, Coggeshall M, Lang F. Fas-induced programmed cell death is mediated by a ras-regulated O2* synthesis. // Immunology, 1996, - Vol.89, - pp.205-212.
174. Gussin HA, Ignat GP, Varga J, Teodorescu M. Anti-topoisomerase I (anti-Scl-70) antibodies in patients with systemic lupus erythematosus. // Arthritis Rheum, 2001, -Vol.44, N.2,-376-383.
175. Haddad JJE, Olver RE, Land SC. Antioxidant/pro-oxidant equilibrium regulates HIF-la and NF-кВ redox sensitivity: evidence for inhibition by glutathione oxidation in alveolar epithelial cells//J Biol Chem, -2000, -Vol.275, N.28,- pp.21130-21139
176. Hahn ВН. Pathogenesis of Systemic Lupus Erythematosus / S. Ruddy, E.D. Harris Jr., C.B. Sledge (Eds.) / Kelley's Textbook of Rheumatology, 6th Ed., 2001, - pp.10891103.
177. Halliwell B, Gutteridge JM. The antioxidants of human extracellular fluids. Arch Bio-chem Biophys, 1990, - Vol.280, - pp.1-8.
178. Halliway B, Gutteridge JMC, Cross CE. Free radicals, antioxidants, and human disease: Where are we now? // J Lab Clin Med, 1992, - Vol. 114, - 598-620
179. Hantzschel H, Bird HA, Seidel W, Kruger W, Neumann G, Schneider G, Wright V. Polymyalgia rheumatica and rheumatoid arthritis of the elderly, a clinical, laboratory, and scintigraphic comparison. // Ann Rheum Dis, 1991, - Vol.50, N.9, - pp.619-622
180. Harley J.B. Autoantibodies in systemic lupus erythematosus / In W.J. Koopman (Ed.) / Arthritis and Allied Conditions, 13th ed., 1997, - pp.1347-1360
181. Harper R, Reeves B. Reporting of precision of estimates for diagnostic accuracy: a review // BMJ, 1999, - Vol.318, - pp. 1322-1323
182. Hayem G, Nicaise-Roland P, Palazzo E, de Bandt M, Tubach F, Weber M, Meyer 0. Anti-oxidized low-density-lipoprotein (OxLDL) antibodies in systemic lupus erythematosus with and without antiphospholipid syndrome. // Lupus, 2001, - Vol.10, N.5, -346-351.
183. Hepburn AL. The LE cell // Rheumatology (Oxford), 2001, - Vol.40, - pp.826-827.
184. Hilton M, Spenser DC, Ross P, Ramsey A, McArdle HJ. Characterisation of the copper uptake mechanism and isolation of the ceruloplasmin receptor/copper transporter in human placental vesicles. // Biochim Biophys Acta, 1995, - Vol.1245, - pp. 153-160.
185. Hippeli S, Elstner EF. Transition metal ion-catalyzed oxygen activation during pathogenic processes. // FEBS Lett, 1999, - Vol.443, - pp.1-7
186. Hiraoka W, Vazquez N, Nieves-Neira W, Chanock SJ, Pommier Y. Role of oxygen radicals generated by NADPH oxidase in apoptosis induced in human leukemia cells // J Clin Invest, 1998, - Vol. 102, - pp. 1961 -1968
187. Hiyamuta S, Ito K. Monoclonal antibody against the active site of caeruloplasmin and the ELISA system detecting active caeruloplasmin. // Hybndoma, 1994, - Vol.13, N.2, -139-141
188. Hiyamuta S, ShimizuK, Kadota A. US Patent 6010903, 1995
189. Hochberg MC. Systemic lupus erythematosus. // Rheum Dis Clin North Am, 1990, -Vol.16,-pp.617-639.
190. Hochberg MC. Updating the American College of Rheumatology revised criteria for the classification of systemic lupus erythematosus (letter) see comments. U Arthritis Rheum, 1997, - Vol.40, - p.1725
191. Hoet RM, De Weerd P, Gunnewiek JK, Koornneef I, van Venrooij WJ. Epitope regions on U1 small nuclear RNA recognized by anti-UlRNA-specific autoantibodies. // J Clin Invest, 1992, - Vol.90, - 1753-1762
192. Hoffman RW. T cells in the pathogenesis of systemic lupus erythematosus // Frontiers in Bioscience 6, 2001, - October 1, -dl369-1378
193. Holm RH, Kennepohl P, Solomon EI. Structural and functional aspect of metal sites in biology. // Chem Rev, 1996, - Vol.96, - 2239-2314.
194. Hopkinson N, Doherty K, Powell RJ. The prevalence and incidence of systemic lupus erythematosus. // Br J Rheumatol, -1993, Vol.32, - pp. 1-10.
195. Huang LE, Arany Z, Livingston DM, Bunn HF. Activation of hypoxia-inducible transcription factors depends primarily upon redox-sensitive stabilization of its alpha sub-unit. // J Biol Chem, 1996, - Vol.271, - pp.32253-32259.
196. Hunt JE, Simpson RJ, Krilis SA. Identification of a region of beta^ -glycoprotein I critical for lipid binding and anti-cardiolipin cofactor activity. // Proc Natl Acad Sci USA, -1993, Vol.90, - pp.2141 -2145
197. Ilzecka J. The protective role of ceruloplasmin against the activity of free radicals in brain ischaemia. // Ann Univ Mariae Curie Sklodowska Med., -1996, Vol.51, -pp.97-101
198. Imbert V, Rupee RA, Livolsi A, Pahl HL, Traenckner BM, Mueller-Dieckmann C, Fara-hifar D, Rossi B, Auberger P, Baeuerle PA, Peyron JF. Tyrosine phosphorylation of IkB-a. // Cell, 1996, - Vol.86, - 787-798.
199. Inagaki J, Matsuura E, Nomizu M, Sugiura-Ogasawara M, Katano K, Kaihara K, Koba-yashi K, Yasuda T, Aoki K. IgG anti-laminin-1 autoantibody and recurrent miscarriages. // Am J Reprod Immunol, 2001, - Vol.45, N.4, - pp.232-238.
200. Irani K, Xia Y, Zweier JL, Scollott SJ, Der CJ, Fearon ER, Sundaresan M, Finkel T, Goldschmidt-Clermont PJ. Mitogenic signaling mediated by oxidants in Ras-transformed fibroblasts. // Science, -1997, Vol.275, - pp. 1649-1652.
201. Isenberg D. Comparison of lupus activity indices. 11 Clin Exp Rheumatol, 1990, -Vol.8, Suppl. 5, -p.37.
202. Isenberg D, Gladman D. Assessing lupus (Letter) // Arthritis Rheum, 1998, - Vol.41, N.12,-p.2276
203. Isenberg D, Ramsey-Goldman R. Assessing patients with lupus: towards a drug responer index // Rheumatology (Oxford), -1999, Vol.38, -pp. 1045-1049
204. Iuliano L, Pratico D, Ferro D, Pittoni V, Valesini G, Lawson J, FitzGerald GA, Violi F. Enhanced lipid peroxidation in patients positive for antiphospholipid antibodies И Blood, 1997, - Vol.90, N. 10, - pp.3931 -3935
205. Jakab L, Feher J. Serum glycoproteids in connective-tissue diseases and other pathologic conditions. U Acta Med Acad Sci Hung, 1973, - Vol.30, N.3, - pp.219-225
206. Jakab L, Pozsonyi T, Feher J. Serum glycoproteins in autoimmune diseases. // Acta Med Acad Sci Hung, 1976, - Vol.33, N.2, - pp.161-169
207. James JA, McClain MT, Koelsch G, Williams DG, Harley JB. Side-chain specificities and molecular modelling of peptide determinants for two anti-Sm B/B1 autoantibodies. // J Autoimmun, 1999, - Vol. 12, N. 1, - pp.43-49
208. Johnson AE, Gordon C, Palmer RG, Bacon PA. The prevalence and incidence of systemic lupus erythematosus in Birmingham, England. Relationship to Ethnicity and Country of Birth // Arthritis Rheum, 1995, - Vol.38, N.4, - pp.551-558
209. Johnson TM, Yu ZX, Ferrans VJ, Lowenstein RA, Finkel T. Reactive oxygen species are downstream mediators of p53-dependent apoptosis. // Proc Natl Acad Sci USA, 1996, -Vol.93, -pp.l 1848-11852.
210. Jones JV, James H, Tan MH, Mansour M. Antiphospholipid antibodies require beta2 -glycoprotein I (apolipoprotein H) as cofactor. // J Rheumatol, 1992, - Vol.19, -pp.l 397-1402
211. Juan SH, Aust SD. Studies on the interaction between ferritin and ceruloplasmin. H Arch Biochem Biophys, 1998, - Vol.355, N.l, - pp.56-62
212. Karrar A, Sequeira W, Block JA. Coronary artery disease in systemic lupus erythematosus: A review of the literature. II Semin Arthritis Rheum, 2001, - Vol.30, N.6, -pp.436-443.
213. Kazatchkine MD, Lacroix-Desmazes S, Moreau A, Kaveri SV. Idiotypic regulation of anti-factor VIII antibodies. // Haematologica, 2000, - Vol.85, (10 Suppl), - pp.97-99.
214. Kelekar A, Saitta MR, Keene JD. Molecular composition of Ro small ribonucleoprotein complexes in human cells. Intracellular localization of the 60- and 52-kD proteins. // J Clin Invest, 1994, - Vol.93, N.4, - pp. 1637-1644.
215. Kemp EH, Ridgway JN, Smith KA, Watson PF, Weetman AP. Autoantibodies to the flavoprotein subunit of succinate dehydrogenase: analysis of specificity in autoimmune thyroid disease. // Clin Endocrinol (Oxf), 2000, - Vol.53, N.3, - pp.291-299.
216. Kettritz R, Falk RJ, Jennette JC, Gaido ML. Neutrophil superoxide release is required for spontaneous and FMLP-mediated but not for TNFa-mediated apoptosis // J Am Soc Nephrol, 1997, - Vol.8, N.7, - pp.1091-1100
217. Keyer K, Imlay JA. Superoxide accelerates DNA damage by elevating free-iron levels // Proc Natl Acad Sci USA, 1996, - Vol. 93, - pp. 13635-13640
218. Khan MF, Wu X, Ansari GA. Anti-malondialdehyde antibodies in MRL+/+ mice treated with trichloroethene and dichloroacetyl chloride: possible role of lipid peroxidation in autoimmunity. // Toxicol Appl Pharmacol, 2001, - Vol.170, N.2, - pp.88-92
219. Kim JG, Sabbagh F, Santanam N, Wilcox JN, Medford RM, Parthasarathy S. Generation of a polyclonal antibody against lipid peroxide-modified proteins. // Free Radic Biol Med, 1997, - Vol.23, N.2, - pp.251-259
220. Kim RH, Park JE, Park JW. Ceruloplasmin enhances DNA damage induced by hydrogen peroxide in vitro. // Free Radic Res, 2000, - Vol.33, N.l, - pp.81-89
221. Kim RH, Kwon OJ, Park J. Ceruloplasmin enhances DNA damage induced by cys-teine/iron in vitro. // Biochimie, 2001, - Vol.83, N.6, - pp.487-495.
222. Klebanoff SJ. Bactericidal effect of Fe2+, ceruloplasmin, and phosphate. // Arch Biochem Biophys, 1992, - Vol.295, - pp.302-308
223. Klipstein-Grobusch K, Grobbee DE, Koster JF, Lindemans J, Boeing H, Hofman A, Wit-teman JC. Serum caeruloplasmin as a coronary risk factor in the elderly: the Rotterdam Study. // Br J Nutr, 1999, - Vol.81, N.2, - pp.139-144
224. Klonowski KD, Primiano LL, Monestier M. Atypical VH-D-JH rearrangements in new-bom autoimmune MRL mice. // J Immunol, 1999, - Vol.162, N.3, - pp.566-572
225. Knight JA. Diseases related to oxygen-derived free radicals. // Ann Clin Lab Sci, -1995,-Vol.25,-pp.111-124
226. Knobl P, Lechner K. Acquired factor V inhibitors. II Baillieres Clin Haematol, 1998, -Vol. 11, N.2, - pp.305-318.
227. Konishi H, Tanaka M, Takemura Y, Matsuzaki H, Ono Y, Kikkawa U, Nishizuka Y. Activation of protein kinase С by tyrosine phosphorylation in response to НгОг- II Proc Natl Acad Sci USA, 1997, - Vol.94, - pp.11233-11237
228. Koren E, Koscec M, Wolfson-Reichlin M, et al. Murine and human antibodies to native DNA that cross-react with the A and D SnRNP polypeptides cause direct injury of cultured kidney cells. J Immunol 1995; 154:4857-4864
229. Koschinsky ML, Funk WD, van Oost BA, MacGillivray RT. Complete cDNA sequence of human preceruloplasmin // Proc Natl Acad Sci USA, 1986, - Vol.83, N.14, pp.5086-5090
230. Kotzin BL. Systemic lupus erythematosus. // Cell, 1996, - Vol.85, - pp.303-306
231. Kotzin BL, K070ra E. Anti-DNA meets NMDA in neuropsychiatry lupus. // Nat Med, -2001, Vol.7, N. 11, - pp. 1175-1176
232. Kouoh Elombo F, Radosevich M, Poulle M, Descamps J, Chtourou S, Burnouf T, Cat-teau JP, Bernier JL, Cotelle N. Purification of human ceruloplasmin as a by-product of Cl-inhibitor. // Biol Pharm Bull, 2000, - Vol.23, N.12, - pp.1406-1409.
233. Kubota T, Watanabe N, Kanai Y, Stollar BD. Enhancement of oxidative cleavage 0f DNA by the binding sites of two anti-double-stranded DNA antibodies. // J Biol Client, -1996, Voi.271, N.11,- pp.6555-6561
234. Kuhn HM, Kromminga A, Flammann HT, Frey M, Layer P, Arndt R. p53 autoantibodies in patients with autoimmune diseases: a quantitative approach. // Autoimmunity, 1999, Vol.31, N.4, - pp.229-235.
235. Kumar A, Gupta R, Varghese T, Pande RM, Singal VK, Garg OP. Anti-Clq antibody as a marker of disease activity in systemic lupus erythematosus. // Indian J Med Res)1999,-Vol.110,-pp.190-193.
236. Leanos-Miranda A, Pascoe-Lira D, Chavez-Rueda KA, Blanco-Favela F. Antiprolactin autoantibodies in systemic lupus erythematosus: frequency and correlation with prolactinemia and disease activity. // J Rheumatology, 2001, - Vol.28, N.7, -pp.1546-1553
237. Levine JS, Koh JS, Subang R, Rauch J. Apoptotic cells as immunogen and antigen in the antiphospholipid syndrome. // Exp Mol Pathol, 1999, - Vol.66, N.l, - pp.82-98
238. Lewis EJ, Bishop J, Aspinall SJ. A simple inflammation model that distinguishes between the actions of anti-inflammatory and anti-rheumatic drugs. // Inflamm Res, -1998,-Vol.47, N.l,-pp.26-35
239. Liang MH, Socher SA, Larson MG, Schur PH. Reliability and validity of six systems for the clinical assessment of disease activity in systemic lupus erythematosus. // Arthritis Rheum, 1989, - Vol.32, - pp.1107-1118
240. Lidar M, Braf A, Givol N, Langevitz P, Pauzner R, Many A, Livneh A. Anti-insulin antibodies and the natural autoimmune response in systemic lupus erythematosus. // Lupus, -2001, Vol.10, N.2, - pp.81-86.
241. Linder MC, Wooten L, Cerveza P, Cotton S, Shulze R, Lomeli N. Copper transport. // Am J Clin Nutr,- 1998,-Vol.67, -pp.965S-971S
242. Linder MC. Copper and genomic stability in mammals // Mutation Research / Fundamental and Molecular Mechanisms of Mutagenesis, 2001, - Vol.475, - pp. 141-152
243. Liochev SI, Fridovich I. The role of superoxide in the production of hydroxyl radical: In vitro and in vivo. // Free Radical Biol Med, 1994, - Vol.16, - pp.29-33
244. Lo YYC, Cruz TF. Involvement of reactive oxygen species in cytokine and growth factor induction of c-fos expression in chondrocytes. // J Biol Chem, 1995, - Vol.270, -pp.l 1727—11730
245. Louro MO, Cocho JA, Mera A, Tutor JC. Immunochemical and enzymatic study of ceru-loplasmin in rheumatoid arthritis. // J Trace Elem Med Biol, 2000, - Vol.14, N.3, -pp.l 74-178
246. Macanovic M, Hogarth MB, Lachmann PJ. Anti-DNA antibodies in the urine of lupus nephritis patients. // Nephrol Dial Transplant, 1999, - Vol.14, N.6, - pp.1418-1424
247. Machonkin ТЕ, Zhang HH, Hedman B, Hodgson КО, Solomon EI. Spectroscopic and magnetic studies of human ceruloplasmin: identification of a redox-inactive reduced Type I copper site. // Biochemistry, 1998, - Vol.37, N.26, - pp.9570-9578
248. Madaio MP. The role of autoantibodies in the pathogenesis of lupus nephritis. // Semin Nephrol, 1999, - Vol.19, N.l, - pp.48-56
249. Maddison PJ. Autoantibodies in SLE. Disease associations. // Adv Exp Med Biol, -1999, Vol.455, - pp.141-145
250. Maeno N, Takei S, Imanaka H, Oda H, Yanagi K, Hayashi Y, Miyata K. Anti-alpha-fodrin antibodies in Sjogren's syndrome in children. // J Rheumatol, 2001, - Vol.28, N.4, - pp.860-864.
251. Makino Y, Yoshikawa N, Okamoto K, Hirota K, Yodoi J, Makino I, Tanaka H. Direct association with thioredoxin allows redox regulation of glucocorticoid receptor function // J Biol Chem, 1999, - Vol.274, N.5,-pp.3182-3188
252. Malide D, Londono I, Russo P, Bendayan M. Ultrastructural localization of DNA in immune deposits of human lupus nephritis. // Am J Pathol, 1993,- Vol.143,- pp.304-3U
253. Mamoune A, Kerdreux S, Durand V, Saraux A, GofF PL, Youinou P, Corre RL. CD45 autoantibodies mediate neutralization of activated T cells from lupus patients through an-ergy or apoptosis. // Lupus, 2000, - Vol.9, N.8, - pp.622-631
254. Mamula MJ, Craft J. The expression of self antigenic determinants: implications for tolerance and autoimmunity. // Curr Opin Immunol, -1994, Vol.6, - pp.882-886
255. Mamula MJ, Fatenejad S, Craft J. В cells process and present lupus autoantigens that initiate autoimmune T cell responses. // J Immunol, 1994, - Vol.152, -pp.1453-1461
256. Manfredi A, Rovere P, Heltai S, Galati G, Nebbia G, Tincani A, Balestrieri G, Sabbadini MG. Apoptotic cell clearance in systemic lupus erythematosus: П. Role of beta2 -Glycoprotein 1 // Arthritis Rheum, 1998, - Vol.41, N.2, - pp.215-223.
257. Mannik M, Merrill CE, Wener MH. Antibodies to human myeloperoxidase in glomerular immune deposits of systemic lupus erythematosus. H Lupus, 2000, - Vol.9, N.8, -pp.607-613.
258. Manntari M, Manninen V, Huttunen JK, Palosuo T, Ehnholm C, Heinonen OP, Frick MH. Serum ferritin and ceruloplasmin as coronary risk factors. // Eur Heart J, 1994, -Vol.15,-pp.1599-1603
259. Manolova 1, Dancheva M, Halacheva K. Antineutrophil cytoplasmic antibodies in patients with systemic lupus erythematosus: prevalence, antigen specificity, and clinical associations // Rheumatology Int, 2001, - Vol.20, N.5 , - pp.197-204
260. Manzi S, Wasko MCM. Inflammation-mediated rheumatic diseases and atherosclerosis // Ann Rheum Dis, 2000, - Vol.59, -pp.321-325
261. Manzi S. Systemic lupus erythematosus: a model for atherogenesis? H Rheumatology (Oxford), 2000, - Vol.39, - pp.353-359
262. Marnett LJ, Burcham PC. Endogenous DNA addicts: Potential and paradox. // Chem Res Toxicol, 1993, - Vol.6, - pp.771-785
263. Mazumder B, Fox PL. Delayed translation^ silencing of ceruloplasmin transcript in gamma interferon-activated U937 monocytic cells: role of 39 untranslated region. // Mol Cell Biol, 1999, - Vol.19, - pp.6898-6905
264. Mazumder B, Mukhopadhyay CK, Prok A, Cathcart MK, Fox PL. Induction of ceruloplasmin synthesis by IFN-y in human monocytic cells. // J Immunol, 1997, -Vol.159,-pp.1938-1944
265. McCarty DJ, Manzi S, Medsger ТА Jr, Ramsey-Goldman R, LaPorte RE, Kwoh CK. Incidence of systemic lupus erythematosus: race and gender differences. H Arthritis Rheum, 1995, - Vol.38, - pp. 1260-1270
266. McClain MT, Hariey JB, James JA. The role of Epstein-Barr virus in systemic lupus erythematosus. //Frontiers in Bioscience 6,-2001, October 1, - el37-147
267. Mchrnes PM, Schuttinga J, Sanslone WR, Stark SP, Klippel JH. The economic impact of treatment of severe lupus nephritis with prednisone and intravenous cyclophosphamide. // Arthritis Rheum, -1994, Vol.37, N.7, - pp.1000-1006.
268. Medda R, Calabrese L, Musci G, Padiglia A, Floris G. Effect of ceruloplasmin on 6-hydroxydopamine oxidation. // Biochem Mol Biol Int, -1996, Vol.38,-pp.721-728
269. Mendonca LL, Khamashta MA, Cuadrado MJ, Bertolaccini ML, Hughes GR. Natural immune response involving anti-endothelial cell antibodies in normal and lupus pregnancy. // Arthritis Rheum, 2000, - Vol.43, N.7, -pp.1511-1515
270. Mevorach D, Zhou JL, Song X, Elkon KB. Systemic exposure to irradiated apoptotic cells induces autoantibody production // J Exp Med, 1998, - Vol.188, N.2, - pp.387392
271. Michel P, Eggert W, Albrecht-Nebe H, Grune T. Increased lipid peroxidation in children with autoimmune diseases // Acta Paediatr, 1997, - Vol.86, - pp.609-612
272. Middleton RB, Linder MC. Synthesis and turnover of ceruloplasmin in rats treated with 17p-estradiol // Arch Biochem Biophys, 1993, - Vol.302, - pp.545-549
273. Miyajima H, Takahashi Y, Serizawa M, Kaneko E, Gitlin JD. Increased plasma lipid peroxidation in patients with aceruloplasminemia. // Free Radic Biol Med, 1996, -Vol.20,-pp.757-760
274. Miyata T, van Ypersete de Strihou C, Kurokawa K, Baynes JW. Alterations in nonenzy-matic biochemistry in uremia: Origin and significance of "carbonyl stress" in long-term uremic complications. // Kidney bit, 1999, - Vol.55, - pp.389-399
275. Mohan C, Adams S, Stanik V, Datta SK. Nucleosome: a major immunogen for pathogenic autoantibody-inducing T cells of lupus. // J Exp Med, 1993, - Vol.177, -pp.13671381
276. Mohan C, Morel L, Yang P, Watanabe H, Croker B, Gilkeson G, Wakeland EK. Genetic dissection of lupus pathogenesis: a recipe for nephrophilic autoantibodies. // J Clin Invest, 1999, - Vol.103, N.12, - pp.1685-1695
277. Mohan C, Liu F, Xie C, Williams RC Jr. Anti-subnucleosome reactivities in systemic lupus erythematosus (SLE) patients and their first-degree relatives. // Clin Exp Immunol, -2001,-Vol.123, N.1,-pp. 119-126
278. Mohan DC, Das UN. Oxidant stress, anti-oxidants and essential fatty acids in systemic lupus erythematosus. // Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids, 1997, - Vol.56, N.3, -pp.193-198.
279. Мок CC, Lau CS, Wong RW. Neuropsychiatric manifestations and their clinical associations in southern Chinese patients with systemic lupus erythematosus // J Rheumatol, -2001, Vol.28, N.4,- pp.766-771
280. Monestier M, Kotzin BL. Antibodies to histones in systemic lupus erythematosus and drug-induced lupus syndromes. // Rheum Dis Clin North Am, 1992, - Vol.18, N.2, -pp.415-436.
281. Monneaux F, Muller S. Key sequences involved in the spreading of the systemic autoimmune response to spliceosomal proteins. // Scand J Immunol, 2001, - Vol.54, -pp.45-54
282. Morel Y, Barouki R. Repression of gene expression by oxidative stress // Biochem J, -1999, Vol.342,-pp.481-496
283. Mori T, Sasaki J, Kawaguchi H, Handa K, Takada Y, Matsunaga A, Komo S, Arakawa K. Serum glycoproteins and severity of coronary atherosclerosis. // Am Heart J, 1995, -Vol.129, -pp.234-238
284. Mosca M, Ruiz-Irastorza G, Khamashta MA, Hughes GRV. Treatment of systemic lupus erythematosus // International Immunopharmacology, 2001, - Vol.1, - pp. 1065-1075
285. Motie M, Brockmeier S, Potempa LA. Binding of mode! soluble immune complexes to modified C-reactive protein. //J Immunol, 1996,-Vol.156,-pp.4435-4441
286. Mukhopadhyay CK, Mazumder B, Lindley PF, Fox PL. Identification of the prooxidant site of human ceruloplasmin: A model for oxidative damage by copper bound to protein surfaces. // Proc Natl Acad Sci USA, 1997, - Vol.94, - pp. 11546-11551
287. Mukhopadhyay CK, Fcx PL. Ceruloplasmin copper induces oxidant damage by a redox process utilizing cell-derived superoxide as reductant, // Biochemistry, 1998, -Vol.37,-pp.14222-14229
288. Mukhopadhyay CK, Attieh ZK, Fox PL. Role of ceruloplasmin in cellular iron uptake. // Science,- 1998,-Vol.279, N.5351, pp.714-717
289. Murphy ME, Lindley PF, Adman ET. Structural comparison of cupredoxin domains: domain recycling to construct proteins with novel functions. // Protein Sci, 1997, - Vol.6, N.4,-pp.761-770
290. Musci G, Bonaccorsi di Patti MC, Fagiolo U, Calabrese L. Age-related changes in human ceruloplasmin. Evidence for oxidative modifications // J Biol Chem, 1993, - Vol.268, N.18,-pp. 13388-13395.
291. Musci G, Bellenchi GC, Calabrese L. The multifunctional oxidase activity of ceruloplasmin as revealed by anion binding studies. // Eur J Biochem, 1999, - Vol.265, N.2, -pp.589-597
292. Musci G, Fraterrigo TZ, Calabrese L, McMillin DR. On the liability and functional significance of the type 1 copper pool in ceruloplasmin // J Biol Inorg Chem, 1999, -Vol.4, N.4,-pp.441-446
293. Musci G, Polticelli F, Calabrese L. Structure/function relationships in ceruloplasmin // Adv Exp Med Biol, 1999, - Vol.448, -175-182
294. Nagy G, Horvath A, Fust G, Romics L, Gergely P, Karadi I. Anticholesterol antibody levels in patients with systemic lupus erythematosus. // Ann Rheum Dis, 2001, -Vol.60, N.7,-pp.722-723.
295. Nakano M, Ohuchi Y, Hasegawa H, Kuroda T, Ito S, Gejyo F. Clinical significance of anticentromere antibodies in patients with systemic lupus erythematosus. // J Rheumatol, 2000, - Vol.27, N.6, - pp.l403-1407.
296. Natesha RK, Natesha R, Victory D, Barnwell SP. A prognostic role for ceruloplasmin in the diagnosis of indolent and reccurent inflammation // J Natl Med Assoc, 1992, -Vol.84, N.9,-pp.781-784
297. Navratil JS, Aheam JM. Apoptosis, clearance mechanisms, and the development of systemic lupus erythematosus. //Cur Rheum Reports, 2001, - Vol.3,-pp. 191-198.
298. Nesher G, Margalit R, Ashkenazi YJ. Anti-nuclear envelope antibodies: Clinical associations. // Semin Arthritis Rheum, 2001, - Vol.30, N.5, - pp.313-320.
299. Neugebauer KM, Merrill JT, Wener MH, Lahita RG, Roth MB. SR proteins are autoanti-gens in patients with systemic lupus erythematosus. Importance of phosphoepitopes. // Arthritis Rheum, 2000, - Vol.43, N.8, - pp.1768-1778
300. Nossent HC. Systemic lupus erythematosus in the Arctic region of Norway. H J Rheumatol, 2001, - Vol.28, N.3, - pp.539-546.
301. Oates JC, Ruiz P, Alexander A, Pippen AM, Gilkeson GS. Effect of late modulation of nitric oxide production on murine lupus. // Clin Immunol Immunopathol, 1997, -Vol.83, -pp.86-92.
302. Ohba M, Shibanuma M, Kuroki T, Nose K. Production of hydrogen peroxide by transforming growth factor-p 1 and its involvement in induction of egr-1 in mouse osteoblastic cells. // J Cell Biol, 1994, - Vol.126, - pp. 1079-1088.
303. Okamoto N, Wada S, Oga T, Kawabata Y, Baba Y, Habu D, Takeda Z, Wada Y. Hereditary ceruloplasmin deficiency with hemosiderosis. // Hum Genet, 1996, - Vol.97, N.6, -pp.755-758
304. Omdal R, Waterloo K, Koldingsnes W, Husby G, Mellgren SI. Somatic and psychological features of headache in systemic lapus erythematosus // J Rheumatol, -2001, -Vol.28, N.4, pp.772-779
305. Oosting JD, Derksen RHWM, Blokzijl L, Sixma JJ, De Groot PG. Antiphospholipid antibody positive sera enhance endothelial cell procoagulant activity-studies in a thrombosis model. // Thromb Haemost, 1992, - Vol.68, - pp.278-284
306. Pan Y, Katula K, Fallia ML. Expression of ceruloplasmin gene in human and rat lymphocytes II Biochim Biophys Acta, 1996, - Vol.1307, N.2, - pp.233-238
307. Pan Y, Fallia ML. Differential up-regulation of ceruloplasmin gene expression in rat immune tissues during experimental inflammation // Nutr Res, 1998, - Vol.18, N.2, -pp.273-282
308. Pani G, Kozlowski M, Cambier JC, Mills GB, Siminovitch KA. Identification of the tyrosine phosphatase PTP1C as а В cell antigen receptor-associated protein involved in the regulation of В cell signaling. // J Exp Med, 1995, - Vol. 181, - 2077-2084
309. Park YS, Suzuki K, Taniguchi N, Gutteridge JM. Glutathione peroxidase-like activity of caeruloplasmin as an important lung antioxidant. // FEBS Lett, 1999, - Vol.458, N.2, -pp. 133-136.
310. Patel BN, David S. A novel glycosylphosphatidylinositolanchored form of ceruloplasmin is expressed by mammalian astrocytes. // J Biol Chem, 1997, - Vol.272, - pp.2018520190
311. Patel BN, Dunn RJ, David S. Alternative RNA splicing generates a glycosylphosphatidy-linositol-anchored form of ceruloplasmin in mammalian brain. // J Biol Chem, 2000, -Vol.275, N.6,-pp.4305-4310
312. Patel T, Gores G. Inhibition of bile-salt-induced hepatocyte apoptosis by the antioxidant lazaroid U83836E. H Tox Appl Pharm, 1997, - Vol.142, - pp.116-118
313. Pemberton S, Lindley P, Zaitsev V, Card G, Tuddenham EG, Kemball-Cook G. A molecular model for the triplicated A domains of human factor VIII based on the crystal structure of human ceruloplasmin. // Blood, 1997, - Vol.89, N.7, -pp.2413-2421
314. Permpikul P, Rao LVM, Rapaport SI. Functional and binding studies of the roles of prothrombin and beta2 -glycoprotein I in the expression of lupus anticoagulant activity. // Blood, 1994, - Vol.83, - pp.2878-2892
315. Petri M. Diagnosis of antiphospholipid antibodies. // Rheum Dis Clin North Am, -1994,-Vol.20,-pp.443-469
316. Petri M. Infection in systemic lupus erythematosus. // Rheum Dis Clin North Am, -1998, Vol.24, N2, - pp.423-456
317. Phelps DT, Ferro TJ, Higgins PJ, Shankar R, Parker DM, Johnson M. TNF-ainduces per-oxynitrite-mediated depletion of lung endothelial glutathione via protein kinase C. // Am J Physiol, 1995, - Vol.269, - pp.L551-L559.
318. Pierangeli SS, Harris EN, Davis SA, DeLorenzo G. p2 -glycoprotein 1 (p2 GP1) enhances cardiolipin binding activity but is not the antigen for antiphospholipid antibodies. // Br J Haematol, 1992, - Vol.82, - pp.565-570
319. Pisetsky DS, Gilkeson G, St. Clair EW. Systemic lupus erythematosus. Diagnosis and treatment И Medical Clinics of North America, -1997, Vol.81, N.l, -pp.113-128
320. Pisetsky DS. Anti-DNA and autoantibodies. // Curr Opin Rheumatol, 2000, - Vol.12, N.5,-pp.364-368
321. Polyak K, Xia Y, Zweier JL, Kinzler KW, Vogelstein B. A model for p53-induced apop-tosis. // Nature, 1997, - Vol.389, - pp.300-305.
322. Pratesi F, Moscato S, Sabbatini A, Chimenti D, Bombardieri S, Migliorini P. Autoantibodies specific for alpha-enolase in systemic autoimmune disorders. // J Rheumatol, -2000, Vol.27, N Л, - pp. 109-115
323. Pratico D, Ferro D, Iuliano L, Rokach J, Conti F, Valesmi G, FitzGerald GA, Violi F. Ongoing prothrombotic state in patients with antiphospholipid antibodies: a role for increased lipid peroxidation // Blood, 1999, - Vol.93, N.10, - pp.3401-3407
324. Racila DM, Sontheimer RD. Clq inhibits autoantibody binding to calreticulin. H Lupus, -1999, Vol.8, N.4, - pp.300-304
325. Ravin HA. An improved colorimetric enzymatic assay of ceruloplasmin. // J Lab Clin Med, -1961,- Vol.58, pp.61-68.
326. Ray SK, Putterman C, Diamond B. Pathogenic autoantibodies are routinely generated during the response to foreign antigen: A paradigm for autoimmune disease. // Proc Natl Acad Sci USA, 1996, - Vol.93, - pp.2019-2024
327. Rayno K, Reichlin M. Evaluation of assays for the detection of autoantibodies to the ribosomal P proteins. // Clin Immunol, 2000, - Vol.95, N.2, - pp.99-103.
328. Raz E, Brezis M, Rosenmann E, Eilat D. Anti-DNA antibodies bind directly to renal antigens and induce kidney dysfunction in the isolated perfused rat kidney. // J Immunol, -1989, Vol.142, - pp.3076-3082
329. Reeves WH, Satoh M, Wang J, Chou CH, Ajmani K. Antibodies to DNA, DNA-binding proteins, and histones. // Rheum Dis Clin North Am, -1994, Vol.20, - pp.1-17
330. Reichlin M. Cellular dysfunction induced by penetration of autoantibodies into living cells: cellular damage and dysfunction mediated by antibodies to dsDNA and ribosomal P proteins. // J Autoimmun, 1998, - Vol.11, - pp.557-561
331. Reilly CA, Aust SD. Peroxidase substrates stimulate the oxidation of hydralazine to metabolites which cause single-strand breaks in DNA. // Chem Res Toxicol, 1997, -Vol.10, N.3,-pp.328-334.
332. Reiter RJ, Tan D, Osuna C, Gitto E. Actions of Melatonin in the Reduction of Oxidative Stress // J Biomed Sci, 2000, - Vol.7, - pp.444-458
333. Rensch MJ, Szyjkowski R, Shaffer RT, Fink S, Kopecky C, Grissmer L, Enzenhauer R, Kadakia S. The prevalence of celiac disease autoantibodies in patients with systemic lupus erythematosus. // Am J Gastroenterol, 2001, - Vol.96, N.4, - pp.l 113-1115.
334. Riley PA. Free radicals in biology: oxidative stress and the effects of ionizing radiation. // Int J Radiat Biol, 1994, - Vol.65, - p.27
335. Ring GH, Lakkis FG. Breakdown of self-tolerance and the pathogenesis of autoimmunity. // Semin Nephrol, 1999, - Vol.19, N.l, - pp.25-33
336. Rombach E, Stetler DA, Brown JC. Rabbits produce SLE-like anti-RNA polymerase I and anti-DNA autoantibodies in responses to immunization with human or murine SLE anti-DNA antibodies. // Autoimmunity, 1992, - Vol.13, - pp.291-302.
337. Rombach E, Stetler DA, Brown JC. Induction of an anti-Fab, anti-DNA and anti-RNA polymerase I autoantibody response network in rabbits immunized with SLE and anti-DNA antibody. // Clin Exp Immunol, -1993, Vol.94, - pp.466-472.
338. Romero FI, Atsumi T, Tinahones FJ, Gomez-Zumaquero JM, Amengual 0, Khamashta MA, Hughes GR. Autoantibodies against malondialdehyde-modified lipoprotein(a) in an-tiphospholipid syndrome. // Arthritis Rheum, 1999, - Vol.42, N.12, - pp.2606-2611
339. Romero FI, Khamashta MA, Hughes GR. Lipoprotein(a) oxidation and autoantibodies: a new path in atherothrombosis. // Lupus, 2000, - Vol.9, N.3, - pp.206-209
340. Rosei MA, Foppoli C, Wang XT, Coccia R, Mateescu MA. Production of melanins by ceruloplasmin. // Pigment Cell Res, 1998, - Vol.11, N.2, - pp.98-102
341. Rosen A, Casiola-Rosen L. Autoantigens as substrates for apoptotic proteases: implication for the pathogenesis of systemic autoimmune disease. // Cell Death Differ, 1999, -Vol.6,-pp.6-12.
342. Roubey RAS. Autoantibodies to phospholipid-binding plasma proteins: a new view of lupus anticoagulants and other "antiphospholipid" autoantibodies. // Blood, 1994, -Vol.84, -pp.2854-2867
343. Roxborough HE, Millar CA, Young IS. Carbamylation inhibits the ferroxidase activity of caeruloplasmin // Biochem Biophys Res Commun, 1995, - Vol.214, N.3, - pp. 10731078
344. Rubin RL, Kretz-Rommel A. Initiation of autoimmunity by a reactive metabolite of a lupus-inducing drug in the thymus. // Environ Health Perspect, 1999, - Vol.107, Suppl 5,-pp.803-806
345. Saenko EL, Skorobogat'ko OV, Yaropolov AI. Immunoenzyme determination of total serum ceruloplasmin. Application to Wilson disease. // Biochem Int, 1991, - Vol.23, N.5,-pp.819-824
346. Sahud MA. Factor VIII inhibitors. Laboratory diagnosis of inhibitors. // Semin Thromb Hemost, 2000, - Vol.26, N.2, - pp.l95-203.
347. Salgo MG, Bermudez E, Squadrito G, Pryor W. DNA damage and oxidation of thiols peroxynitrite causes in rat thymocytes. // Arch Biochem Biophys, 1995, - Vol.322, -pp.500-505.
348. Salonen JT, Salonen R, Korpela H, Suntioinen S, Tuomilehto J. Serum copper and the risk of acute myocardial infarction: a prospective population study in men in Eastern Finland. // Am J Epidemiol, 1991, - Vol. 134, - pp.268-276
349. Salonen JT, Salonen R, Seppanen K, Kantola M, Suntioinen S, Korpela H. Interactions of serum copper, selenium, and low density lipoprotein cholesterol in atherogenesis. // BMJ, 1991, - Vol.302, -pp.756-760
350. Sammaritano LR, Lockshin MD, Gharavi AE. Antiphospho lipid antibodies differ in aPL cofactor requirement. //Lupus, 1992, - Vol.1, -pp.83-90
351. Sanchez-Guerrero J, Liang MH, Karlson EW, Hunter DJ, Colditz GA. Postmenopausal estrogen therapy and the risk of de\ eloping systemic lupus erythematosus (SLE) // Ann Intern Med, 1995, - Vol.122, - pp.430-433.
352. Satake F, Watanabe N, Miyasaka N, Kanai Y, Kubota T. Induction of anti-DNA antibodies by immunization with anti-DNA: mechanism and characterization. // Lupus, -2000, -Vol.9,-pp.489-497
353. Schmidt KN, Amstad P, Cerutti P, Baeuerle PA. Identification of hydrogen peroxide as the relevant messenger in the activation pathway of transcription factor NF-кВ. // Adv Exp Med Biol, 1996, - Vol.387, - pp.63-68,
354. Schulze-Osthof K, Bauerle PA. Redox signalling by transcription factors NF-кВ and AP-1 in lymphocytes. // Biochem Pharmacol, 1995, - Vol.50, - pp.735-741.
355. Schur PH Systemic lupus erythematosus / In: L. Goldman, JC Bennett (Eds) / Cecil Textbook of Medicine, 21 st Ed., 2000, - pp. 1509-1517
356. Scofield RH, Farris AD, Horsfall AC, Harley JB. Fine specificity of the autoimmune response to the Ro/SSA and La/SSB ribonucleoproteins. // Arthritis Rheum, 1999, -Vol.42, N.2,-pp. 199-209
357. Seedhouse CH, Margison GP, Hendry JH, Hajeer A, Embleton MJ. Anti-8-oxo-2-deoxyguanosine phage antibodies: isolation, characterization, and relationship to disease states. // Biochem Biophys Res Commun, 2001, - Vol.280, N.3, - pp.595-604.
358. Segal AW, Abo A. The biochemical basis of the NADPH oxidase of phagocytes. // Trends Biochem Sci, 1993, - Vol. 18, - pp.43-47.
359. Segelmark M, Persson B, Hellmark T, Wieslander J. Binding and inhibition of myeloperoxidase (MPO): a major function of ceruloplasmin? // Clin Exp Immunol, 1997, -Vol.108,N.l,-pp.l67-174
360. Sergeev AG, Pavlov AR, Revina AA, Yaropolov AI. The mechanism of interaction of ceruloplasmin with ceruloplasmin with superoxide radicals // Int J Biochem, 1993, -Vol.25,N.ll,-pp.l549-1554
361. Sharonov BP, Govorova NJu, Lyzlova SN. Serum protein degradation by hypochlorite. // Biochem Int, 1989, - Vol. 19, N. 1, - pp.27-35
362. Sherer Y, Shoenfeld Y. Antiphospholipid syndrome, antiphospholipid antibodies, and atherosclerosis. // Curr Atheroscler Rep, 2001, - Vol.3, N.4, - pp.328-333.
363. Shibata S, Harpel PC, Gharavi A, Rand J, Fillit H. Autoantibodies to heparin from patients with antiphospholipid antibody syndrome inhibit formation of antithrombin Ш-thrombin complexes. // Blood, 1994, - Vol.83, - pp.2532-2540
364. Silverman LM, Chnstenson RH. Amino acids and proteins. / In: CA Burtis and ER Ash-wood, (Eds.) / Tietz textbook of clinical chemistry, 2nd ed., 1994, - pp.710-711.
365. Solid phase guide / Ed. V.Rowell, Nunc A/S, Denmark, - 1999,-49 p.
366. Soszynski M, Bartosz G. Effect of peroxynttnte on erythrocytes. // Biochim Biophys Acta, 1996,-Vol.1291,- 107-114.
367. Squez-Vivar JV, Santos AM, Junqueira VBC, Augusto O. Peroxynitrite-mediated formation of free radicals in human plasma: EPR detection of ascorbyl, albumin-thiy! and uric acid-derived free radicals II Biochem J, 1996, - Vol.314, - 869-876
368. Stevens SY, Glick GD. Evidence for sequence-specific recognition of DNA by anti-single-stranded DNA autoantibodies. // Biochemistry, 1999, - Vol.38, N.2, - pp.560568
369. Sthoeger ZM, Mozws E, Tartakovsky B. Anti-cardiolipin antibodies induce pregnancy failure by impairing embryonic implantation // Proc Natl Acad Sci USA, 1993, -Vol.90, -pp.6464-6467
370. Stoll T, Seifert B, Isenberg DA. SLICC/ACR Damage Index is valid, and renal and pulmonary organ scores are predictors of severe outcome in patients with systemic lupus erythematosus. // Br J Rheumatol, 1996, - Vol.35, - pp.248
371. Suh CH, Jeong YS, Park HC, Lee CH, Lee J, Song CH, Lee WK, Park YB, Song J, Lee SK. Risk factors for infection and role of C-reactive protein in Korean patients with systemic lupus erythematosus // Clin Exp Rheum, 2001, - Vol.19, - pp.191-194
372. Sundaresan M, Yu ZX, Ferrans VJ, Irani K, Finkel T. Requirement for generation of H2O2 for platelet-derived growth factor signal transduction. // Science, 1995, -Vol.270,-pp.296-299.
373. Surrall KE, Bird HA, Dixon JS. Caeruloplasmin, prealbumin and a2-macroglobulin as potential indices of disease activity in different arthritides. // Clin Rheumatol, 1987, -Vol.6, N.l,-pp.64-69
374. Sutcliffe N, Clarke AE, Taylor R, Frost C, Isenberg DA. Total costs and predictors of costs in patients with systemic lupus erythematosus. // Rheumatology (Oxford), 2001, -Vol.40,N.l,-pp.37-47.
375. Suwannaroj S, Lagoo A, Keisler D, McMurray RW. Antioxidants suppress mortality in the female NZB x NZW F1 mouse model of systemic lupus erythematosus (SLE). // Lupus, 2001,- Vol.10, N.4, - pp.258-265
376. Swain JA, Darley-Usmar V, Gutteridge JM. Peroxynitrite releases copper from caera-loplasmin: implications for atherosclerosis // FEBS Lett, -1994, Vol.342, N.l, - pp.4952
377. Swinscow TDV. Statistics at Square One. // 9th ed., 1997, BMJ Publishing Group.
378. Tajima K, Kawanami T, Nagai R, Horiuchi S, Kato T. Hereditary ceruloplasmin deficiency increases advanced glycation end products in the brain. // Neurology, 1999, -Vol.53,N.3,-pp.619-622.
379. Takahashi N, Ortel TL, Putnam FW. Single-chain structure of human ceruloplasmin: the complete amino acid sequence of the whole molecule. // Proc Nat Acad Sci USA, -1984,-Vol.8 l,-pp.390-394
380. Takahashi H, Moroi M. Antibody against platelet membrane glycoprotein VI in a patient with systemic lupus erythematosus. // Am J Hematol, 2001, - Vol.67, N.4, - pp.262267.
381. Tan EM, Cohen AS, Fries JF, Masi AT, McShane DJ, Rothfield NF, et al. The 1982 revised criteria for the classification of systemic lupus erythematosus. // Arthritis Rheum, -1982, Vol.25, N.11,- pp.1271-1277.
382. Thannickal VJ, Fanburg BL. Reactive oxygen species in cell signaling. // Am J Physiol, -2000, Vol.279, - pp. 1005-1028
383. Tincani A, Balestrieri G, Allegri F et al, Induction of experimental SLE in naive mice by immunization with human polyclonal anti-DNA antibody carrying the 16/6 idiotype. Clin Exp Rheumatol 1993; 11:129-134.
384. Toyokuni S. Reactive oxygen species induced molecukar damage and its application in pathology. //Pathology Int, - 1999, -Vol.49, N.2, - pp.91-102
385. Turi S, Nemeth 1, Torkos A, Saghy L, Varga I, Matkovics B, Nagy J. Oxidative stress and antioxidant defense mechanism in glomerular diseases. // Free Radic Biol Med, 1997, -Vol.22, N.l-2, -pp.161-168.
386. Uchida K, Sakai K, Itakura K, Osawa T, Toyokuni S. Protein modification by lipid peroxidation products: formation of malondialdehyde-derived N-(2-propenal)Lysine in proteins // Arch Biochem Biophys, 1997, - Vol.346, - pp.45-52.
387. Uchida K, Kanematsu M, Sakai K, Matsuda T, Hattori N, Suzuki D, Miyata T, Noguchi N, Niki E, Osawa T. Protein-bound acrolein: Potential markers for oxidative stress. // Proc Natl Acad Sci USA, 1998, - Vol.95, - pp.4882-4887
388. Uramoto KM, Michet CJJ, Thumboo J, Sunku J, O'Fallon WM, Gabriel SE. Trends in the incidence and mortality of systemic lupus erythematosus (SLE) 1950-1992 // Arthritis Rheum, - 1999, - Vol.42, - pp.46-50
389. Urowitz M, Gladman D, Bruce I. Atherosclerosis and Systemic Lupus Erythematosus. // Curr Rheumatol Rep, 2000, - Vol.2, N.l, - pp. 19-23
390. Utz PJ, Anderson P. Posttranslational protein modifications, apoptosis, and the bypass of tolerance to autoantigens. // Arthritis Rheum, 1998, - Vol.41, N.7, - pp. 1152-1160.454.455.456.457.
391. Vay D, Parodi M, Rolla R, Mottaran E, Vidali M, Bellomo G, Albano E. Circulating antibodies recognizing malondialdehyde-modified proteins in healthy subjects // Free Radic Biol Med, 2001, - Vol.30, N.3, - pp.277-286.
392. Villoutreix BO, Dahlback B. Structural investigation of the A domains of human blood coagulation factor V by molecular modeling. // Protein Sci, 1998, - Vol.7, N.6, -pp.1317-1325
393. Voulgarelis M, Kokori SIG, Ioannidis JPA, Tzioufas AG, Kyriaki D, M Moutsopoulos HM. Anaemia in systemic lupus erythematosus: aetiological profile and the role of erythropoietin U Ann Rheum Dis, 2000, - Vol.59, - pp.217-222
394. Wakeland EK, Liu K, Graham RR, Behrens TW. Delineating the genetic basis of systemic lupus erythematosus. // Immunity, 2001, - Vol.15, N.3, - pp.397-408
395. Walker FJ, Fay PJ. Characterization of an interaction between protein С and ceruloplas-min // J Biol Chem, 1990, - Vol.265, N.4, - pp. 1834-1836.
396. Wallace DJ, Metzger AL. Systemic lupus erythematosus: clinical aspects and therapy / In W.J. Koopman (Ed.) / Arthritis and Allied Conditions, 13th ed., 1997, - pp. 1325-1347
397. Wallace DJ, Salonen EM, Avaniss-Aghajani E, Morris R, Metzger AL, Pashinian N. Anti-telomere antibodies in systemic lupus erythematosus: a new ELISA test for anti-DNA with potential pathogenetic implications. H Lupus, 2000, - Vol.9, N.5, - pp.328332.
398. Wang GL, Jiang BH, Rue EA, Semenza GL. Hypoxia-inducible factor 1 is a basic-helix-loop-helix-PAS heterodimer regulated by cellular O2 tension. // Proc Natl Acad Sci USA, 1995, - Vol.92, - pp.5510-5514.
399. Ward MM, Pyun E, Studenski S. Long-term survival in systemic lupus erythematosus: Patient characteristics associated with poorer outcomes. // Arthritis Rheum, 1995, -Vol.38, -pp.274-281
400. Washington Manual of Medical Therapeutics / S.N. Ahya, К Flood, S Paranjothi (Eds.) / 30th ed.,-2001,-630 p.
401. Weidner S, Neupert W, Goppelt-Struebe M, Rupprecht HD. Antineutrophil cytoplasmic antibodies induce human monocytes to produce oxygen radical ;n vitro // Arthritis Rheum, 2001, - Vol.44, N.7, -pp.1698-1706
402. Weijer C, Dickens B, Meslin EM. Bioethics for clinicians: 10. Research ethics. // CMAJ,-1997,-Vol.156,-pp.1153-1157
403. Weiner SM, Klein R, Berg PA. A longitudinal study of autoantibodies against central nervous system tissue and gangliosides in connective tissue diseases. // Rheumatol Int, -2000, Vol.19, N.3,- pp.83-88.
404. Wichmann I, Respaldiza N, Garcia-Lozano JR, Montes M, Sanchez-Roman J, Nunez-Roldan A. Autoantibodies to DEK oncoprotein in systemic lupus erythematosus (SLE). // Clin Exp Immunol, 2000, - Vol.119, N.3, - pp.530-532.
405. Wiik A, Brimnes J, Heegaard NH. Distinct differences in autoantigen specificity of antineutrophil cytoplasm antibodies in systemic vasculitides and other inflammatory diseases. И Isr Med Assoc J, 1999, - Vol, 1, N. 1, - pp.4-7.
406. Williams RC Jr, Malone C, Blood B, Silvestns F. Anti-DNA and anti-nucleosome antibody affinity a mirror image of lupus nephritis? // J Rheumatol, - 1999, - Vol.26, N.2,-pp.331-346
407. Williams WW, Isenberg DA. Naturally occuring anti-idiotypic antibodies reactive with anti-DNA antibodies in sustemic lupus erythematosus // Lupus, 1998, - Vol.7, -pp.164-175.
408. Winchester RJ, Peterson KS. Systemic Lupus Erythematosus: Pathogenesis / In W.J. Koopman (Ed.) / Arthritis and Allied Conditions, 14th ed., 2001, - pp.1360-1376
409. Winrow VR, Winyard PG,Morris CJ, Blake DR. Free radicals in inflammation: second messengers and mediators of tissue destruction. // Br Med Bull, 1993, - Vol.49, -pp.506-522.
410. Winyard PG, Hider RC, Brailsford S, Drake AF, Lunec J, Blake DR. Effects of oxidative stress on some physiochemical properties of caeruloplasmin. // Biochem J, 1989, -Vol.258, N.2,-pp.435-445
411. Wiseman H, Halliwell B. Damage to DNA by reactive oxygen and nitrogen species: role in inflammatory disease and progression to cancer. // Biochem J, 1996, - Vol.313, -pp.17-29
412. Woods JR Jr., Plessinger MA, Fantel A. An introduction to reactive oxygen species and their possible roles in substance abuse // Ob Gyn Clin, 1998, - Vol.25, N.l, - pp.219236
413. Woolf AD. The Bone and Joint Decade 2000-2010 // Ann Rheum Dis, 2000, -Vol.59,-pp.81-82
414. Wu R, Svenungsson E, Gunnarsson I, Andersson B, Lundberg I, Schafer Elinder L, Frostegard J Antibodies against lysophosphatidylcholine and oxidized LDL in patients with SLE. // Lupus, 1999, - Vol.8, №2, - pp. 142-150
415. Yakes FM, Houten BV. Mitochondrial DNA damage is more extensive and persists longer than nuclear DNA damage in human cells following oxidative stress // Proc Natl Acad Sci USA, 1997, - Vol.94, - pp.514-519
416. Yoshida К, Kaneko K, Miyajima H, Tokuda T, Nakamura A, Kato M, Ikeda S. Increased lipid peroxidation in the brains of aceruloplasminemia patients. // J Neurol Sci, 2000, -Vol .175, N.2, - pp.91-95.
417. Zaitsev VN, Zaitseva I, Papiz M, Lindley PF. An X-ray crystallographic study of the binding sites of the azide inhibitor and organic substrates to ceruloplasmin, a multi-copper oxidase in the plasma. // J Biol Inorg Chem, 1999, - Vol.4, N.5, - 579-587
418. Zaitseva I, Zaitsev V, Card G, Moshkov К, Bax B, Ralph A, Lindley P. The X-ray structure of human ceruloplasmin at 3.1 A: nature of the copper centres. // J Biol Inorg Chem, 1996, - Vol. 1, N. 1, - pp. 15-23
419. Zhang W, Winkler T, Kalden JR, Reichlin M Isolation of human anti-idiotypes broadly cross reactive with anti-dsDNA antibodies from patients with systemic lupus erythematosus // Scand J Immunol, 2001, - Vol.53, - pp. 192-197.
420. Zweig MH, Campbell G. Receiver-operating characteristic (ROC) plots: a fundamental evaluation tool in clinical medicine published erratum appears in Clin Chem 1993 Aug;39(8):1589. // Clin Chem, 1993, - Vol.39, -pp.561-577