Автореферат и диссертация по медицине (14.00.20) на тему:Кинетика эндогенного аммиака при отравлениях веществами седативно-гипнотического действия; роль ее нарушений в формировании летального исхода (экспериментальное исследование)

ДИССЕРТАЦИЯ
Кинетика эндогенного аммиака при отравлениях веществами седативно-гипнотического действия; роль ее нарушений в формировании летального исхода (экспериментальное исследование) - диссертация, тема по медицине
АВТОРЕФЕРАТ
Кинетика эндогенного аммиака при отравлениях веществами седативно-гипнотического действия; роль ее нарушений в формировании летального исхода (экспериментальное исследование) - тема автореферата по медицине
Рейнюк, Владимир Леонидович Санкт-Петербург 2008 г.
Ученая степень
доктора медицинских наук
ВАК РФ
14.00.20
 
 

Автореферат диссертации по медицине на тему Кинетика эндогенного аммиака при отравлениях веществами седативно-гипнотического действия; роль ее нарушений в формировании летального исхода (экспериментальное исследование)

На правах рукописи

РЕЙНКЖ Владимир Леонидович

КИНЕТИКА ЭНДОГЕННОГО АММИАКА ПРИ ОТРАВЛЕНИЯХ ВЕЩЕСТВАМИ СЕДАТИВНО-ГИПНОТИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ, РОЛЬ ЕЕ НАРУШЕНИЙ В ФОРМИРОВАНИИ ЛЕТАЛЬНОГО ИСХОДА

(экспериментальное исследование)

14 00 20 - юксикология 03 00 04 - биохимия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Санкт-Петербург 2008

003445068

Работа выполнена в Военно-медицинской академии имени С М Кирова

Научные консультанты

академик РАМН доктор медицинских наук профессор Генрих Александрович Софронов

доктор медицинских наук профессор Юрий Юрьевич Ивпицкий Официальные оппоненты

доктор медицинских наук профессор Владимир Александрович Баринов доктор медицинских наук доцент Михаил Всеволодович Александров доктор медицинских наук доценг Виктор Георгиевич Антонов

Ведущая организация

ФГУ Институт токсикологии ФМБА

Защита состоится октября 2008 г в «/0» часов на заседании диссертационного совета Д215002 11 в Военно-медицинской академии имени С М Кирова (194044, г Санкт-Петербург, ул Академика Лебедева, дом 6)

С диссертацией можно ознакомиться в фундаментальной библиотеке Военно-медицинской академии имени С М Кирова

Автореферат разослан «_» (¿¿ОсМХ 2008 г

Ученый секретарь диссертационного совета

доктор медицинских наук профессор Борис Ионович Ищенко

Актуальность Три четверти больных поступают в токсикологические центры России с острыми отравлениями веществами седативно-гипнотического действия (Лужников ЕА и соавт, 2001) Массовый характер такие отравления могут приобретать при применении химикатов несмертельного действия, не запрещенных Парижской «Конвенцией о запрещении применения, разработки и накопления химического оружия» 1993 г (Бадюгин И С, 2006), или, в чрезвычайных ситуациях, при передозировке седативных и обезболивающих средств В тяжелых случаях таких отравлений ведущим синдромом является кома -крайнее угнетение неврологических функций Предупреждение летального исхода токсической комы - проблема, актуальная как для гражданского, так и для военного здравоохранения

Непреложным принципом оказания медицинской помощи при токсической коме является раннее начало лечения (Указания по военной токсикологии, 2000, Сумин С А, 2000, Симоненко В Б и соавт, 2007, Шилов В В и соавт, 2007) Поздняя госпитализация ведет к увеличению летальности с 2-7% (Лужников Е А и соавт , 2001) до 8-41% (Александров М В, 2002) Подобная ситуация может складываться при массовых поражениях веществами, угнетающими центральную нервную систему, когда, в силу разных обстоятельств, медицинская помощь оказывается поздно (Ивницкий Ю Ю и соавт , Мельничук В П и соавт, 2004, Бадюгин И С, 2006) Однако механизмы снижения эффективности лечения токсической комы с увеличением срока интоксикации исследованы недостаточно, неизвестно, почему современные средства реанимации не всегда обеспечивают выживание больных, длительное время находившихся в коме Раскрытие причин этого явления имеет фундаментальное значение и, в то же время, чрезвычайно актуально для клинической токсикологии

Один из подходов к решению проблемы предлагает концепция эндотоксикоза Согласно ей, любое критическое состояние организма

сопровождается накоплением в крови эндогенных биологически активных веществ Такое накопление, называемое эндотоксемией (Лужников Е А и соавт , 2007), может влиять на исход комы Характер этого влияния зависит от конкретного метаболита, участвующего в формировании эндотоксемии Поэтому одни лишь интегральные ее показатели недостаточны для понимания сути происходящих метаболических нарушений

В качестве маркеров эндотоксемии в литературе упоминаются продукты перекисного окисления липидов (Глушков С И , 2006, Лужников Е А и соавт, 2007), ферменты (Усмакский М Я и соавт, 1979), «средние молекулы» (Батоциренов БВ, 1998, Карякина ЕВ и соавт., 2004, Лужников Е А и соавт, 2007, Ливанов ГА и соавт, 2007), цитокины (Черний В И и соавт, 2004) и другие Из азотистых метаболитов в этот перечень включены мочевина и креатинин, в то время как аммиак, обладающий значительно большей токсичностью, либо игнорируется, либо упоминается без указания методики оценки результатов его определения

Между тем, круг патологических состояний организма, в которых гипераммониемия является ведущим звеном патогенеза, чрезвычайно широк (Vogels В A et al, 1997, Косенко ЕА, Каминский ЮГ, 2008) Гипераммониемия - одно из опаснейших проявлений гепатотоксического действия веществ, многие из которых обладают, вместе с тем, нейротоксическими свойствами (Альберт Э , 1971, Куценко С А , 2004) Все это свидетельствует о возможной вовлеченности нарушений кинетики эндогенного аммиака в формирование эндотоксемии и летального исхода при острых отравлениях веществами седативно-гипоксического действия

В организме человека аммиак сосредоточен преимущественно в просвете пищеварительного тракта (Fürst Р , 1995) Перепад концентрации аммиака между просветом пищеварительного тракта и кровью достигает трех порядков (Koolman J et al, 1998) и поддерживается за счет гидролиза АТФ (Stevens СЕ et al, 1998) Поскольку для критических состояний

организма характерны централизация кровообращения и гипоксия смешанного типа (Сумин С А, 2000), тормозящие ресинтез АТФ в стенке пищеварительного тракта и в печени, в условиях комы возможно нарушение барьерной функции кишечной стенки и печепи в отношении аммиака, ведущее к гипераммониемии Кроме того, сопровождающие кому метаболические нарушения (ацидоз, гипоксия, восстановление внутриклеточного пула пиридиновых динуклеотидов) способствуют диффузии аммиака из плазмы крови в цитоплазму (Fehpo V et al, 2002)

С учетом нейротоксичности аммиака (Butterworth RF et al, 1987), можно допустить, что такие изменения его кинетики окажут отрицательное влияние на исход отравления Однако экспериментально эта гипотеза не проверялась Не изучена зависимость гипераммониемии от наркотической активности вещества, глубины наркотического эффекта и сроков интоксикации Не исследованы механизмы нарушения кинетики аммиака при острых отравлениях, ведущим синдромом которых является кома Не определена роль аммиака в формировании летального исхода таких интоксикаций, не проверялась и возможность влияния на этот исход путем вмешательства в кинетику аммиака или в эффекты, вызываемые этим веществом при накоплении в организме

Отсюда вытекает цель исследования раскрыть закономерности нарушений кинетики эндогенного аммиака при острых отравлениях веществами седативно-гипнотического действия, рочь этих нарушений в формировании летального исхода таких отравлений, экспериментально обосновать перспективные направления лечения пострадавших В рамках данной проблемы решались следующие задачи:

1 Разработать модель токсического процесса при остром отравлении веществами седативно-гипнотического действия

2 Отобрать и, при необходимости, модифицировать методы изучения кинетики эндогенного аммиака на экспериментальной модели

отравлений веществами седативно-гипнотического действия

3 Исследовать характер связи гипераммониемии с выраженностью седативно-гипнотических свойств экзогенного токсиканта и глубиной седативно-гипнотического эффекта

4 Выявить закономерности влияния веществ седативно-гипнотического действия на процессы образования аммиака в кишечнике, его поступления в кровь и в головной мозг, обезвреживания, экскреции с мочой и выдыхаемым воздухом

5 Оценить влияние изменений скорости поступления аммиака в общий кровоток и в головной мозг на летальность и состояние основных гомеостатических функций при отравлении веществами седативно-гипнотического действия

6 Экспериментально обосновать направления возможной коррекции нежелательных токсических эффектов эндогенного аммиака при отравлениях веществами седативно-гипнотического действия

Решение поставленных задач позволило сформулировать следующие основные положения, выносимые на защиту

1 Моделирование комы введением животным веществ седативно-гипнотическою действия сопровождается повышением уровня аммиака в крови, положительно зависящим от их седативно-гипнотических свойств и глубины седативно-гипнотического эффекта При барбитуратной коме ведущим механизмом этого явления служит отставание обезвреживания аммиака в печени от его возросшего поступления в портальную систему При алкогольной коме ведущим механизмом гипераммониемии является интенсификация поступления аммиака из пищеварительного тракта в бассейн нижней полой вены в обход печени, путем трансперитонеальной диффузии

2 Увеличение скорости поступления аммиака в головной мозг способствует, а ее уменьшение - препятствует летальному исходу острых отравлений с ведущим синдромом комы

3 Пополнение пула интермедиатов цикла Кребса в условиях, препятствующих развитию гипотермии, является перспективным подходом к устранению неблагоприятного влияния эндогенного аммиака на исход барбитуратной комы

Научная новизна и теоретическая значимость работы Впервые решена медико-биологическая проблема, заключающаяся в раскрытии закономерностей и значения изменений кинетики аммиака при острых отравлениях, ведущим синдромом которых является кома В рамках решения этой проблемы показано, что при интоксикациях, сопровождающихся формированием комы, закономерно возникает гипераммониемия, ее выраженность положительно зависит от седативно-гипнотических свойств токсиканта и глубины седативно-гипнотического эффекта

Установлено, что при моделировании токсической комы гипераммониемия обусловлена интенсификацией поступления в общий кровоток аммиака, образующегося в пищеварительном тракте При барбитуратной коме ведущим механизмом этого явления служит отставание обезвреживания аммиака в печзни от его возросшего поступления в портальную систему При алкогольной коме ведущим механизмом гипераммониемии является интенсификация поступления аммиака го пищеварительного тракта в бассейн нижней полой вены в обход печени Установлена существенная роль трансперитонеальной диффузии аммиака в формировании гипераммониемии при моделировании алкогольной комы

Выявлено потенцирование аммиаком летального действия токсиканта, вызвавшего кому, и, напротив, снижение летальности в

условиях, препятствующих диффузии аммиака из крови в головной мозг Обосновано представление о том, что при острых отравлениях веществами седативно-гипнотического действия, когда ведущим синдромом выступает кома, нарушение кинетики эндогенного аммиака способствует формированию летального исхода

Практическая значимость На основе оценки роли эндогенного аммиака в патогенезе острых отравлений веществами седативно-гипнотического действия предложены новые пути повышения эффективности патогенетической терапии токсической комы В их числе -избирательное снижение рН крови и коррекция истощающего влияния аммиака на пул интермедиатов цикла Кребса комбинированным применением изотермического режима и препарата янтарной кислоты

Апробация работы Основные положения диссертации были представлены на международной конференции Второй Санкт-Петербургский Международный экологический форум «Окружающая среда и здоровье человека» (Санкт-Петербург, 2008) На Российских научных конференциях «Медико-биологические проблемы противолучевой и противохимической защиты» (Санкт-Петербург, 2004), «Актуальные проблемы химической безопасности в Российской Федерации» (Санкт-Петербург, 2007), «Медико-биологические проблемы токсикологии и радиологии» (Санкт-Петербург, 2008) На совместном заседании секции № 4 Проблемной комиссии ФМБА России, Санкт-Петербургского отделения Всероссийского общества токсикологов и Ученого Совета ФГУП «НИИГПЭЧ» ФМБА России «Вопросы обеспечения химической безопасности в Российской Федерации» (Санкт-Петербург, 2007) На научно-практической конференции «Научно-технические аспекты обеспечения безопасности при уничтожении, хранении и транспортировке химического оружия» (Москва, 2006) Материалы исследования связаны с плановыми НИР Военно-медицинской

академии им С М Кирова «Электроэнцефалографические критерии оценки тяжести и прогноза исхода острых отравлений веществами с нейротоксическим действием» (2004), «Метаболическая коррекция летальных нарушений газообмена при острой интоксикации веществами снотворно-седативного действия» (2006), «Сравнительное экспериментальное исследование роли эндогенного аммиака в патогенезе алкогольной и барбитуратной комы» (2008)

Реализация результатов исследования Рекомендации, основанные на полученных в ходе диссертационного исследования данных, используются в научной работе и учебном процессе в Военно-медицинской академии имени С М Кирова на кафедрах военно-полевой терапии, рентгенологии и радиологии, НИЛ лекарственной и экологической токсикологии, а также во Всероссийском центре экстремальной и радиационной .медицины МЧС России, Научно-исследовательском испытательном центре (медико-биологической защиты) ГНИИ военной медицины МО РФ

Публикация результатов исследования По теме диссертационного исследования опубликовано 16 научных работ, в том числе 11 статей в изданиях, определенных перечнем ВАК

Объем и структура работы Диссертация изложена на 196 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, четырех глав собственных результатов, их обсуждения, заключения и списка литературы В диссертации приведено 49 таблиц и 16 рисунков Список литературы содержит 227 библиографических источников, из них 84 отечественных и 143 иностранных публикаций

*

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование проведено на 2350 самках крыс-альбиносов массой 150200 г, приобретенных в питомнике «Рапполово» АМН РФ Животных распределяли в экспериментальные группы случайно, все группы участвовали в эксперименте одновременно

Для моделирования интоксикации использовали лекарственные вещества, обладающие нейротоксичностью и растворители -неэлектролиты В табл 1 представлены сведения об условиях моделирования сопора или комы введением нейротоксикантов

Таблица 1

Условия моделирования сопора или комы химической этиологии

Токсикант Путь введения, концентрация Дозы, применявшиеся для моделирования

сопора комы

Лекарственные вещества

Мединал в/б, 3,4% - 340 мг/кг

Тиопентал-натрий в/б, 0,60 - 1,05% 60-70 мг/кг* 75 - 105мг/кг*

Седуксен в/б, 0,5% - 60 мг/кг

Циклофосфан в/б, 13% - 1300 мг/кг

Растворители-неэлектролиты

Н-бутиловый спирт в/ж, 100% - 83 ммоль/кг

Дихлорэтан в/ж, 100% - 83 ммоль/кг

Изобутиловый спирт в/ж, 100% - 83 ммоль/кг

Метиловый спирт в/ж, 100% - 83 ммоль/кг

о-ксилол в/ж, 100% - 83 ммоль/кг

Трет-амиловый спирт в/ж, 100% - 83 ммоль/кг

Этиловый спирт в/б, 40% (6,90 М) 70 ммоль/кг 83-111 ммоль/кг

в/ж, 96% (16 57М) 83 ммоль/кг 442 ммоль/кг

Эквивалентом комы у животных считали отсутствие всех рефлексов, исключая роговичный Состояние сопора констатировали при у грате оргостагического рефчекса (переходе в боковое положение) и аудио-моторного рефлекса с одновременным сохранением локализованной защитной реакции на болевые стимулы (табл 2)

Таблица 2

Критерии сопора или комы при моделировании на крысах

Рефлексы Сопор Кома

Ортостатический Нет Нет

Аудио-моторный Нет Нет

Болевой Есть Нет

Роговичный Есть Есть

Препараты, относящиеся к лекарственным веществам, вводили внутрибрюшинно (в/б), в виде водных растворов, в объеме 10 мл на 1 кг массы тела Этанол вводили в/б либо внутрижелудочно (в/ж) Другие токсиканты-неэлектролиты вводили в/ж металлическим зондом Объем (V, мл на килограмм массы тела) рассчитывали по формуле У=1000*№ц <1, где N - доза препарата, ммоль/кг, ц - молекулярная масса, сЗ - плотность при 20°С, г/мл Животные контрольной группы получали дистиллированную воду В качестве показателя способности вещества вызывать кому использовали отношение ЛД50/34 к средней -ффективнои дозе этого вещества, обеспечивавшей формирование комы не позднее чем через 3 ч после введения (ЭД5о/зч)

Натриевую соль янтарной кислоты (СН) применяли в качестве средства экспериментальной терапии и вводили в/б в виде водного раствора в дозе 5 ммоль/кг, через 30 мин после введения веществ седативно-гипнотического действия Контрольные животные получали хлорид натрия в эквивалентной дозе 10 ммоль/кг, в соответствующем объеме Подавление аммиакпродуцирующей микрофлоры пищеварительного тракта

обеспечивали применением гентамицина сульфата (АО «Микроген», Россия), который вводили в/ж (10 мл 0,4% раствора на кг) четырежды - за 48, 24, 3 ч и 5 мин до ТН или этанола, контрольные животные получали воду

Интенсификацию поступления аммиака в общий кровоток обеспечивали в/б введением ацетата аммония (АА) или ингаляционным введением газообразного аммиака АА в нелетальной дозе 6 ммоль/кг вводили 3-кратно - через 0,5, 1,5 и 2,5 ч после нейротоксикантов седативно-гипнотического действия Для ингаляционного введения аммиака, тотчас после введения токсиканта, с помощью которого моделировалась кома, камеры с крысами вентилировали в течение 3 ч раствором аммиака в воздухе с концентрацией от 1,07 мг/л (в начале) до 0,84 мг/л (в конце 3-часового интервала), что близко к 1/8 ЛК5о/зч

Торможение диффузии аммиака из крови в головной мозг обеспечивали избирательным снижением pH крови с помощью введения минеральной кислоты, не преодолевающей гематоэнцефалический барьер С этой целью сразу же после введения токсикантов (ТН, в/б или этанола, в/ж) в хвостовую вену вводили 125 мМ раствор соляной кислоты (3,25 ммоль/кг) Контрольным крысам вводили воду (10 мл/кг)

Аммиак определяли в смешанной крови, полученной из туловища при декапитации, и в ее плазме, в крови из v portae, v cava inf, в головном мозгу, в моче, в выдыхаемом воздухе, в содержимом слепой кишки и в растворе, применявшемся для проведения перитонеального лаважа Глутамин определяли в лаважном растворе, в головном мозгу и в крови, полученной при декапитации, мочевину и креатинин - в крови, полученной при декапитации, и в моче Диоксид углерода и ацетон определяли в выдыхаемом воздухе Маркеры цитолиза - аланинаминотрансферазу (АлАТ), аспартатаминотрансферазу (AcAT) и лактатдегидрогеназу (ЛДГ) -определяли в плазме крови, полученной при декапитации

Для сбора и отделения от фекалий мочи, животных помещали на 18 ч в метаболические камеры фирмы Nalgene (Италия) В пробирки для сбора мочи предварительно вносили 1 мл 20% трихлоруксусной кислоты для подавления уреазной активности Для химического исследования содержимого слепой кишки ее лигировали, содержимое взвешивали и суспендировали в четырехкратном объеме 0,9% раствора хлорида натрия, аммиак определяли титрометрически

Для оценки скорости диффузии аммиака из пищеварительного тракта в брюшинную полость, через 2,5 ч после введения животным испытуемого токсиканта, в/б вводили изотоническии раствор NaCl в объеме 50 мл/кг Еще через 30 мин, после лапаротомии, оставшийся неабсорбированным лаважный раствор количественно извлекали и центрифугировали, аммиак определяли в супернатанте, рассчитывали скорость накопления аммиака в лаважном растворе, мкмоль/(кг»мин)

Аммиак или ацетон определяли в выдыхаемом воздухе, пропуская его через поглотитель (0,01 N H2SO4 или 2% NaHS03, соответственно), рассчитывали их экскрецию в атмосферный воздух (мкмоль/кг'мин) Интенсивность потребления кислорода организмом (Q02) определяли закрытым камерным методом в аппарате Regnault (Ольнянская Р П и соавт, 1959) Для определения экскреции диоксида углерода с выдыхаемым воздухом (Осог) использовали поглотитель, применявшийся при определении Q02 Величины Q02 и QC02 выражали в ммоль/кг»мин Рассчитывали дыхательный коэффициент (/IK-'QcWQoi) Кислотно-основное состояние и газовый состав крови исследовали в ее пробах из а abdominahs и v cava inf каудальнее v hepatica, с помощью анализатора Radiometer ABL 500 (Дания)

Химические методы анализа, применявшиеся при выполнении настоящего исследования, перечислены в табл 3

Таблица 3

Химические методы анализа

Предмет анализа Название, автор метода Чувствительность, моль Коэффициент вариации, %

При исследовании азотистого обмена

Аммиак (сумма NH3 и NH4+) Микродиффузионный, с ацидометрическим титрованием (Conway EJ, 1951) 2 • 10 8 <5

Спектрофотометрически с реактивом Несслера (Barrett J F , 1935) ю-9 <10

Глутамин Метод кислотного гидролиза с последующим определением аммиака (WhiteheadTP etal, 1955) ю-9 < ю

Мочевина Колориметрический, на основе реакции с диацетилмонооксимом, набор Ольвекс Дшгпостикум (Россия) 2 • 109 <10

Креатинин Колориметрический, на основе реакции Яффе (Peters J Р et al, 1932) 5 • IQ"9 <10

При исследовании энергического обмена

Диоксид углерода Титрометрнческий (Winkler К et al, 1958) 25 • 10 6 <5

Ацетон Колориметрический, на основе реакции с салициловым ангидридом (Natelson S, 1961) 2- 10"5 <10

Лимонная кислота Колориметрическии, на основе реакции уксусным ангидридом и пиридином (Балаховский С Д и соавт, 1953) 2 • 10 5 <10

pH крови С помощью ионометра универсального ЭВ-74 (Рубин В И м соавт, 1980) 0,01 ед pH <10

Активность АлАТ, АсАТ и ЛДГ определяли с помощью наборов реактивов фирмы DiaSys GmbH & Со KG (Германия) Активность ацетилхолинэстеразы (АХЭ) в эритроцитах и гомогенате головного мозга определяли методом Эллмана (Камышников В С , 2001)

Моторику пищеварительного траста изучали рентгенологически, с помощью цифровой рентгенографической установки Siemens Iconos R200 (Германия) Поддержание нормальной температуры тела обеспечивали с помощью термостатирующей установки фирмы TSE GmbH (Германия) Ректальную и подкожную температуру измеряли ртутным термометром с ценой деления 0,1 °С

Значимость межгрупповых различий метаболических показателей оценивали с помощью t-критерия Стьюдента для средних арифметических (Рокицкий П Ф , 1961) гли U-критерия Вилкоксона-Манна-Уитни (Mann Н В , Whitney D R , 1947) Проверку «нулевой» гипотезы при сравнении величин средней продолжительности жизни осуществляли с помощью критерия Уайта (Рокицкий ПФ, 1961) Для оценки значимости межгрупповых различий выживаемости пользовались точным методом Фишера (Генес В С , 1964) Дтя выявления защитного действия препаратов при интоксикации ТН сравнивали среднюю продолжительности жизни в группах (Бесядовский РА и соавт, 1978) и скорость наступления гибели (Прозоровский В Б и соает, 2002) Для сравнениий пользовались t-критерием Стьюдента или критерием Уайта (Рокицкий ПФ, 1961) Среднюю смертельную дозу и ее ошибку рассчитывали пробит-методом (Беленький М Л, 1963) Параметры зависимости «доза токсиканта -эффект» рассчитывали с помощью программы «Статистика+ 2005», данные графически визуализировали с помощью программы «Origin 8»

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Уровень аммиака в крови при моделировании токсической комы

Все испытанные лекарственные вещества при введении крысам в дозах, близких к ЛД5о/з„ обнаруживали отчетливую нейротоксичность

Среди ее проявлений отмечены угнетение ЦНС (сопор, кома), атаксия, ступор и клонико-тонические судороги Наиболее выраженное угнетающее действие на ЦНС оказывали мединал и седуксен, после введения которых у животных быстро исчезали все сенсомоторные рефлексы, исключая роговичный Столь же сильное седативно-гипнотическое действие оказал циклофосфан, примененный в указанной дозе Состояние комы наблюдалось до момента гибели и сопровождалось трех- четырехкратным угнетением газообмена

Слабое угнетающее действие на ЦНС проявили аминазин и фторацизин, которые вызывали угасание реакции на звуковой стимул при сохранении локализованной защитной реакции на болевой раздражитель Это состояние - сопор - также сопровождалось угнетением газообмена (двух- трехкратным)

Для атропина и галоперидола угнетение ЦНС было не характерно после введения в дозе, близкой к ЛДдазч» атропина, отмечались атаксия либо обездвиженность (ступор), а галоперидола - клонико-тонические судороги Влияние этих препаратов на газообмен было наименьшим

Гипераммониемический эффект не был характерным для смертельного отравления галоперидолом или атропином - препаратами, не позволявшими моделировать кому и слабо влиявшими на газообмен При такой же летальности, действие на организм мединала, седуксена или циклофосфана сопровождалось значимым 2-3-кратным повышением уровня аммиака в смешанной или венозной крови через 3 ч после их введения Промежуточное положение по влиянию на уровень аммиака в крови и на <Зо2 заняли аминазин и фторацизин (табл 4)

Таблица 4

Уровень аммиака в крови, потребление кислорода организмом и летальность у крыс через 3 ч после введения нейротропных лекарственных средств в дозе, близкой к ЛД50/3 ч

Наличие комы Группа крыс Азот аммиака крови, мкмоль/л (М±т, п=6) Q02, % от исходного (М±т, п=6)

Нет Интактные 61± 12 99 ±5

Аминазин, 250 мг/кг 121 ± 19 56 ±7*

Галоперидол, 45 мг/кг 71 ± 10 68 ± 2*

Атропин, 240 мг/кг 84 ±19 67 ±8*

Фторацизин, 165 мг/кг 107 ±20 34 ± 1**

Есть Интактные 59 ±8 98 ±14

Мединал, 340 мг/кг 122 ±11* 25 ± V*

Седуксен, 60 мг/кг 108 ±14* 39 ±6**

Циклофосфан, 1300 мг/кг 189 ¿ 21* 29±3**

Значимое различие с интактной группой (*)Р < 0,05, (**) Р < 0,001

Состояние крыс после введения тиопентала натрия (ТН) в дозе 0,8 ЛДзо/48ч было сопорозным, летальных исходов не было Содержание аммиака в крови имело тенденцию к повышению, которая через 18ч была значимой (рис 1, слева) Введением ТН в дозе 1,0 ЛД50/484 моделировалась кома При этом содержание аммиака в крови за 3 часа возрастало втрое, а к 18 ч- пятикратно (рис 1, справа)

500 400 300 200 100 0

0 1

2.400.

! 300-

; 200-

§ 100-

тт.

4 17 18

Время после введения тиопентала, ч Время после введения тиопентала, ч

Рис.1. Уровень аммиака в крови крыс после введения тиопентала в дозе 0,1 ДЦ50/484 (слева) или 1,0 ЛДзс/,(8ч (справа), М ± т, п = 6 "О" время - данные для соответствующей группы интактных крыс Значимое различие с интактной группой: (*) Р < 0,05

В/ж введение крысам н-бутилового, изобутилового, амилового спирта, о-ксилола или дихлорэтана в эквивалентных дозах - 83 ммоль/кг -вызывало кому. Интенсивность газообмена, снижалась в 2-4 раза, а концентрация аммиака в крови выживших крыс через 3 ч была в 2-2,5 раза выше, чем в контроле (после введения о-ксилола это проявлялось в виде тенденции). Введение в такой же дозе метилового, пропилового, изолропилового спирта, ацетона или толуола не вызывало комы, слабо угнетало газообмен и не вело к гибели животных; концентрация аммиака в крови имела лишь слабую тенденцию к повышению.

В/ж введение предельных одноатомных спиртов гомологического ряда - метилового, этилового, пропилового, н-бутилового, изобутилового - в равных по летальному эффекту дозах (близких к ЛД50/34)? сопровождалось развитием комы у всех животных. Уровень аммиака в крови, полученной через 3 ч после введения спирта, был повышен в 1,3-2,3 раза, в то время как

концентрация глутамина быле, напротив, снижена в 1,3-2,8 раз Отмечалась гемояонцентрация (пропорциональная растворимости спирта в воде), о чем свидетельствовало повышение гематокрита на 9-28% Однако знак изменений концентрации аммиака и глутамина не зависел от эффекта дегидратации, поскольку они были разнонаправленными, соотношение содержания этих метаболитов в крови существенно возрастало (табт 5)

Таблица 5

Влияние спиртов гомологического ряда в дозе ЛД50/зч на концентрацию аммиака, глутамина в крови и гематокрит у крыс (М±т, п=6)

Группа крыс Содержание алота, мкмоть/л Азог аммиака Азот глутамина Гематокрит, %

Аммиака Глутамина

Интактные 104 ±5 157± 13 0,66 ±0,11 45 ± 1

Метиловый спирт 140±12* 55 ± 11* 2,55 ± 0,18** 73 ±6*

Этиловый сгшрт 238 ±4** 69 ± 15* 3,45 ±0,18** 65 ±2*

Пропиловый спирт 167±12* 120 ± 18 1,39 ±0,15* 63± 1*

н-бутиловый спирт 208 ±14** 84 ±5* 2,48 ±0,21** 56 ± 1*

Значимое различие с иитактной группой (-")Р < 0,05, (**)Р < 0,001

В/б введением этанола е дозе 0,8 ЛД50/484 У крыс моделировался сопор, а в дозе 1,0 или 1,3 ЛД^щч - коиа После введения этанола Оог дозозависимо снижалось Наблюдалась тенденция к дозозависимому повышению концентрации аммиака в -срови, значимая через 3 ч после введения этанола дозах 1,0 и 1,3 ЛД30/48ч Гипераммониемия была максимальной через 3 ч, а депрессия газообмена - через 0,5 ч после введения этанола (таблица 6)

Таблица 6

Концентрация аммиака в крови и потребление кислорода организмом после введения крысам этанола в различных дозах, М±ш, п=6

Срок после введения этанола, ч 0,5 Доза этанола, ДОЛИ ЛД5О/48ч Азот аммиака, мкмоль/л Q 02, % от исходного уровня

0 (интактные) 95 ±36 97 ±2

0,8 71 ±23 49 ±3**

1,0 70 ±26 39 ±4**

1,3 169 ±66 35 ±4**

3,0 0 (интактные) 100 ± 12 95 ±2

0,8 143 ± 29 54 ±5**

1,0 187 ±22* 42 ±4**

1,3 270 ± 66* 35 ±8**

18,0 0 (интактные) 98 ±41 99 ±6

0,8 130 ±42 75 ± 10

1,0 141 ±66 54 ±6*

Значимое различие с интактной группой (*)Р < 0,05, (**)Р < 0,001

Через 3 ч после в/б введения ТН или мединала (ЛД50/зч) активность АлАТ, АсАТ и ЛДГ в плазме крови существенно не изменялась, хотя уровень аммиака в этих же пробах плазмы повышался в 2-3 раза (значимо для ТН) После введения циклофосфана, на фоне 4-кратного повышения содержания аммиака, наблюдалось повышение активности маркеров цитолиза в плазме крови (при этом активность АлАТ оставалась в пределах интервала нормы для человека, активность АсАТ превысила верхний предел нормы вчетверо, а ЛДГ- всемеро)

Таким образом, обязательным условием развития гипераммониемии в течение 3 ч после введения крысам любого из нейротоксикантов, явилось формирование комы, сопряженной с более чем двукратным снижением потребления кислорода организмом Повышение уровня аммиака в крови положительно зависело от выраженности седативно-гипнотических свойств токсиканта и глубины седативно-гипнотического эффекта Гипераммониемия в первые 3 часа интоксикации не была обусловлена

повреждением паренхимы печени или почек (исключая интоксикацию циклофосфаном), а, следовательно, не была отражением синдрома полиорганной недостаточности, возможного на более поздних стадиях интоксикации (Лужников Е А и соавт, 2001)

Образование аммиака в пищеварительном тракте, его поступление в кровь, обезвреживание и экскреция при острой интоксикации веществами седатнвно-гипнотического действия

Моделирование токсической комы введением ТН или этанола (ЛД5о/48ч) сопровождалось резким угнетением эвакуаторной функции пищеварительного тракта Выведение крысами фекалий за 18 ч после введения ТН было в 4,5 раза, а после в/б введения этанола - в 6 раз меньше, чем в контрольных группах (Р < 0,05) Индекс массы всей толстой кишки (вместе с содержимым) за 3 ч после введения ТН возрастал на 20% в сравнении с контрольным значением - с 21,3 ± 1,3 до 25,8 ± 1,2 (Р < 0,05, п = 14) В течение 18,5 ч после в/б введения ТН или этанола у животных наблюдались рентгенмрафические признаки желудочно-кишечного стаза

Несмотря на это, моделирование барбитуратной или алкогольной комы введением ТН (в/б) или этанола (в/ж) в дозе ЛД5о<48ч существенно не влияло на массу содержимого слепой кишки, на пул аммиака, а также на скорость накопления аммиака в этом содержимом при инкубации in vitro Этого влияния не было ни у животных с нормальным составом кишечной микрофлоры, ни на фоне энтерального применения гентамицина

На фоне в/б введения ТН (0,8ЛДз0узч) концентрация аммиака в крови из V portae была увеличена на 74%, в v cava inf каудальнее впадения v v renales - на 78% , краниальнее v v hepaticae - в 4 раза в сравнении с интактными крысами Полностью исчезал положительный порто-кавальный градиент концентрации аммиака (табл 7)

Таблица 7

Концентрация аммиака в крови воротной и нижней полой вены крыс через 3 ч после введения тиопентала натрия, М ± т, п = 11

Доза ТН Азот аммиака, мкмоль /л

V portae V cava inferior каудальнее V V renales V cava inferior краниальнее v v hepaticae

0 (интактные) 207± 27 199 ± 18 94 ± 15r

0,8 ЛДзо/зч 360 ±52* 355 ±48 ** 381± 32*

Значимое различие с интактной группой (*) Р < 0,05, (**) Р < 0,01, значимое различие с v portae i1) Р < 0,05

На фоне в/ж введения этанола (0,8 ЛД50/зч) концентрация аммиака в крови из V portae была увеличена на 42%, в v cava inf каудальнее впадения V V renales - в 2,2 раза, краниальнее v v hepaticae - в 2,5 раза в сравнении с контролем Полностью исчезал потожительный порто-кавальный градиент концентрации аммиака (табл 8)

Таблица 8

Концентрация аммиака в крови воротной и нижней полой вены у

крыс через 3 ч после введения этанола, М ± m, п = 12

Азот аммиака, мкмоль /л

Доза этанола V portae V cava inferior каудальнее V V renales v cava inferior краниальнее v v hepaticae

0 (интактные) 168 ± 16 141 ±17 110±6T

0,8 ЛД50/зч 238 ±20* 304 ±21 **f 276 ±17**

Значимое различие с интактной группой (*) Р < 0,05, (**) Р < 0,001, значимое различие с v portae (*) Р < 0,05

Моделирование комы в/б введением крысам мединала, ТН или циклофосфана сопровождалась увеличением скорости диффузии аммиака в

брюшинную полость в 1,5-4,0 раза Однако этот эффект не был специфичным для синдрома комы, поскольку вызывался также аминазином, галоперидолом, атропином или фторацизином, не вызывавшими кому Отношение концентраций аммиака и глутамина в лаважном растворе увеличивалось в 1,8-2,5 раза (после введения галоперидола, атропина, фторацизина, мединала и ТН - значимо)

В/ж введение крысам метилового, этилового, пропилового, н-бутилового, изобутилового спиртов в равноэффективных (ЛД50/34) дозах, вызывавших кому, в существенной мере стимулировало диффузию аммиака в изотонический солевой раствор, введенный животным в/б через 2,5 ч после спиртов Через 0,5 ч концентрация аммиака в лаважном растворе превышала контрольный уровень в 2-3 раза, а скорость накопления аммиака в брюшинной полости - в 1,7-2,3 раза Накопление глутамина в лаважном растворе претерпевало противоположное изменение, соответственно, резко (в 3-4 раза) увеличивалось соотношение содержания аммиака и глутамина в лаважном растворе (таблица 9)

Таблица 9

Влияние гомологичных спиртов (ЛДзо/зч) на диффузию аммиака и глутамина

в изотонический солевой раствор, введенный в/б крысам (М±т, п==6)

Группа крыс Азот аммиака Азот глутамина Азот аммиака Азот глутамина

Содержание, мкмоль/л Скорость диффузии, мкмоль (кг • мин) Содержание, мкмоль/л Скорость диффузии, мкмоль (кг • мин)

Интактные 360 ± 50 0,46 ± 0,06 1070±104 1,34 ±0,14 0,34 ± 0,09

Метиловым спирт 934 ±54 ** 1,08 ±0,04 ** 662 ± 56 * 0,76 ± 0,06 1,41 ±0,11 *

Этиловый спирт 842 ±64 * 0,86 ±0,10 * 828±118 0,86 ±0,14 1,02 ±0,18 *

Пропиловый спирт 1070±54 ** 1,08 ±0,08 ** 776 ± 64 0,88 ±0,10 ♦ 1,38 ± 0,15 *

н-бутиловый спирт 680 ±96 * 0,80 ±0,14 584 ± 28 * 0,68 ±0,12 * 1,16 ± 0,15 *

Значимое различие с интактной группой (*)Р < 0,05, (**)Р < 0,001

Таким образом, моделирование токсической комы сопровождалось интенсификацией диффузии аммиака, как в общий кровоток, так и в изотонический солевой раствор, введенный в/б Одним из механизмов этого было нарушение вовлечения аммиака в состав глутамина в стенке пищеварительного тракта При барбитуратной интоксикации диффузия аммиака в бассейн воротной и нижней полой вены увеличивалась примерно в равной мере При алкогольной коме преобладающим эффектом было ускорение трансперитонеальной диффузии аммиака в брюшинную полость и далее в бассейн нижней полой вены, в обход печени При интоксикации веществами, не позволявшими моделировать кому, возрастание диффузии аммиака в брюшинную полость не вело к развитию гипераммониемии Изложенные представления об изменениях кинетики аммиака желудочно-кишечного при острых отравлениях, ведущим синдромом которых выступает кома, иллюстрируются рис 2

Рисунок 2. Потоки аммиака желудочно-кишечного происхождения при острых отравлениях веществами седативно-гипно гического действия Чёрными стрелками обозначены потоки аммиака (сверху вниз): в головной мозг, в печёночные вены, в бассейн воротной вены (портальный поток) и в бассейн нижней полой вены (трансперитонеальный поток). Изменение потоков аммиака при моделировании токсической комы показано варьированием толщины стрелок.

Барбитуратная Алкогольная

[пернтоис I поток

гсперетоневдЕнь i j лоток WP:

Через 3 ч после введения ТН (0,8 ЛД50/3.1) концентрация мочевины возрастала на 62% в портальной крови, на 82% в крови из v. cava inf.

каудальнее v v renales и на 68% - краниальнее v v hepaticae Отношение содержания азота мочевины и аммиака в крови из краниального сегмента нижней полой вены снижалось в 2,4 раза 26,9 ± 10,9 - в опытной и 64,7 ± 7,0 - в контрольной группе (М ± m, Р < 0,01) На фоне алкогольной комы (3 ч после в/ж введения этанола, 0,8ЛД50/зч) концентрация мочевины возрастала на 42% в портальной крови при тенденции к повышению на 2326% в крови из V cava inf Отношение содержания азота мочевины и аммиака в крови из краниального сегмента нижней полой вены снижалось с 61,0 ± 11,8 в контроле до 29,8 ± 6,0 - в опыте (М ± m, Р < 0,05)

Таким образом, при моделировании барбитуратной или алкогольной комы концентрация аммиака в крови увеличивалась в большей мере, чем концентрация мочевины При барбитуратной коме это было обусловлено, преимущественно, отставанием синтеза мочевины в печени от возросшего потока аммиака в портальную систему При алкогольной коме ведущим механизмом опережающего роста концентрации аммиака в крови была его трансперитонеальная диффузия непосредственно в общий кровоток, в обход печени

При моделировании барбитуратной или алкогольной комы экскреция солей аммония с мочой имела тенденцию к увеличению, в то время как диурез и экскреция с мочой мочевины и креатинина проявляли тенденцию к снижению Крысы, отравленные ТН или этанолом (ЛД5о/48ч)> более интенсивно, чем интактные, выделяли аммиак в атмосферный воздух, это контрастировало с характерной для токсической комы депрессией внешнего дыхания и потребления кислорода организмом Иными словами, на фоне алкогольной или барбитуратной комы не отмечено абсолютного уменьшения экскреции аммиака с мочой или выдыхаемым воздухом, могущего быть причиной развития гипераммониемии Следовательно, гипераммониемия при моделировании токсической комы не носила ретенционный характер

Влияние изменений потока аммиака в кровь и головной мозг на проявления и исход интоксикации веществами седативно-гнпнотнческого действия

Через 0,5 ч после введения АА в нелетальной дозе (6 ммоль/кг, трехкратно, с интервалом 1 ч) уровень аммиака в крови крыс был повышен втрое, на фоне наркоза, вызванного ТН (ЛД50/48 ч), это повышение отмечалась в виде тенденции Введение АА сенсибилизировало крыс к летальному действию барбитуратов (ТН, мединала) или спиртов (эганола, бутанола) При алкогольной интоксикации этот эффект был выражен крайне резко на фоне введения АА (через 0,5, 1,5 и 2,5 ч после алкоголя) все животные погибали в течение 3 ч, а при изолированном действии спиртов летальные эффекты не отмечались вовсе (рис 3) На фоне интоксикации этанолом АА значимо снижал СПЖ - с 15,4±3,5 до 1,3±0,4 ч (Р < 0,01), на фоне введения барбитуратов снижение этого показателя прослеживалось как тенденция (рис 3)

Снижение концентрации аммиака в просвете пищеварительного тракта профилактическим пероральным применением гентамицина не вело к предупреждению гипераммониемии при последующем введении крысам летальных доз ТН либо этанола и не оказывало существенного влияния на летальность при острой барбитуратной или алкогольной интоксикации

При интоксикации ТН или этанолом (0,8ЛД5()/зч) содержание глутамина в ткани головного мозга крыс возрастало за 3 ч на 38 и 23%, соответственно На этом фоне введение в хвостовую вену соляной кислоты (1,25 ммоль/кг) снижало рН крови на 0,2 единицы, а содержание глутамина в мозгу - на 13% 48-часовая выживаемость значимо повышалась на 60% при барбитуратной и на 29% - при алкогольной интоксикации, улучшались показатели газообмена

V.

I - _

1___

О 3 6 9 12 15 18 21 24 27 30 Время после введения тиопентала натрия; ч

аа — - Эганэл Этанол Ма|

I

3 6 9 12 15 18 21 24 27 Зремя после введения этанола, ч

3 6 9 12 15 18 21 24 27 30 Время после введения медикалал

— М

— Бутагак -БушщтАА

3 6 9 12 15 18 21 24 27 Время 1юк введения буинога, ч

Рисунок 3. Влияние ацетата аммония на летальность крыс при моделировании тиопенталовой, мединаловой, этаноловой или бутаноловой комы.

Вертикальными стрелками показаны в/б инъекции АА (3x6 ммоль/кг). Во всех случаях различие между крысами, получавшими и не получавшими АА, по срокам летальных исходов значимо по критерию Уайта (Р< 0,01).

Вдыхание аммиака (=1 мг/л) повышало его уровень в крови крыс за Зч на 65% На фоне барбитуратного наркоза этот эффект наблюдался в виде тенденции При 48-часовои наблюдении, гибель животных, вдыхавших аммиак, не отмечалась вовсе В контрольной группе ЛД5о/зч ТН составила 83,9±2,1 (доверительный интервал 78,1-91,6 ммоль/кг), а при вдыхании аммиака - 63,6±1,5 мг/кг (доверитечьный интервал 58,1-69,1ммоль/кг), ФИД (ЛДзо/зч в опыте/ЛДзо,з ( в контроле) составил 0,76

На фоне интоксикации, вызванной этанолом (в/ж 0,8ЛД5о/зч), вдыхание аммиака вело к повышению его уровня в крови в 2,4 раза Величина ЛД50/зч этанола для крыс, не вдыхавших аммиак, составипа 536 ± 18 ммоль/кг (доверительный интервал 481-591ммочь/кг), а на фоне ингаляции аммиака - 432 ± 27 ммоль/кг (391-473), ФИД=0,81 В виде тенденции потенцирование аммиаком летального действия этанола сохранялась и после окончания ингалчции величины ЛД5о,48Ч этанола составили 322 ± 19 (285-360) и 284 ± 29 (247-322) ммоль/кг, ФИД = 0,88

Таким образом, как в/б, так и ингаляционное введение в организм экзогенного аммиака увеличивало гипераммониемию, потенцировало летальное действие ТН илд этанола на крыс и усугубляло расстройства газообмена, сопровождавшие барбитуратную или алкогольную интоксикацию При в/б введении экзогенного аммиака потенцирование им летального действия этанола было выражено больше, чем ТН, ■ при ингаляционном поступлении аммиака его сенсибилизирующий эффект в отношении летального действия алкоголя или барбитурата был приблизительно равным Уменьшение скорости поступления аммиака в головной мозг путем избирательного снижения рН крови препятствовачо летальному исходу острых отравлений барбитуратом или этанолом

Влияние метаболических и антихолинестеразиого эффектов аммиака на исход и течение острого отравления с ведущим синдромом комы

В качестве показателя состояния пула интермедиатов цикла Кребса при моделировании барбитуратной и алкогольной комы использовали содержание лимонной кислоты в ткани мозга крыс Этот показатель более чем вдвое снижался в период максимальной интенсивности судорог, вызванных в/б введением АА в абсолютно смертельной дозе 8 ммоль/кг (через 15-20 мин после инъекции), однонаправленная тенденция была отмечена и при определении концентрации цитрата в крови Через 3 ч после введения ТН в дозе, вызывавшей у животных кому, содержание цитрата в крови снижалось на четверть и в головном мозгу - на треть В это время после введения в равной по эффективности дозе этанола содержание цитрата в крови и головном мозгу существенно не изменялось (таблица 10)

Таблица 10

Содержание лимонной кислоты в крови и головном мозгу крыс при острой интоксикации тиопенталом натрия, этанолом или ацетатом аммония, М ± m

Токсикант Группы крыс Содержание цитрата, мкмоль/кг

Кровь Мозг

ТН, 0,8 ЛД50/зч (п = 9) Контроль 48 ±4 220 ±21

Опыт 36 ±3* 148 ±20*

Этанол, 0,8 ЛД50/зч (п = 7) Контроль 38 ± 13 203 ± 10

Опыт 40 ±6 201 ± 19

АА, ЛДюо/о.54 (п = б) Контроль 40 ±12 211 ±24

Опыт 25 ±8 98 ± 15*

Значимое различие с интактной группой (*)Р < 0,05

Таким образом, моделирование острой барбитуратной и острой аммиачной интоксикации сопровождалось снижением содержания лимонной кислоты в крови и головном мозгу животных, в то время на фойе острой алкогольной интоксикации существенных изменений этого показателя не отмечено Снижение содержания лимонной кислоты в крови и головном мозгу предполагало возможность влияния на проявления и исход барбитуратной комы пополнением пула интермедиатов цикла Кребса извне Поскольку характерная для барбитуратной комы гипотермия могла снизить биодоступность соли карбоновой кистоты, ее введение комбинировалось с искусственным поддержанием у отрав'хенных животных нормальной температуры тела

После введения ТН (ЛД50/484) У животных развивалась гипотермия за 3 ч температура тела снижалась на 9,4°С Введение СН уменьшало гипотермию не более чем на 1°С, а внешнее согревание полностью предотвращало ее, сукцинат на фоне изотермического режима не влиял на ректальную температуру

У всех выживших в течение 3 ч животных внешнее дыхание было ритмичным, за 10-30 мин до гибели оно становилось периодическим ЧДЦ у выживших крыс снижалась до 50% от исходного уровня к 0,5 ч после введения ТН и продолжала снижаться Введение СН умеренно тормозило это снижение и обеспечивало частичную нормализацию ЧДЦ после 2,5 ч Гораздо лучше нарушение внешнего дыхания корригировалось изотермическим режимом после получасовою снижения ЧДЦ стабилизировалась и далее проявляла тенденцию к частичной нормализации, несмотря на сохраняющиеся признаки комы После введения ТН потребление кислорода и экскреция диоксида углерода снижались в сопоставимой мере На фоне изотермического режима или его комбинации с СН <Зсо2 возрастало больше, чем возрастал ДК

При барбитуратиой коме у крыс, сохранявших ритмичное внешнее дыхание, оксигенация артериальной крови существенно не изменялась, но артериовенозный градиент р02 был снижен почти вдвое СО2 накапливался как в артериальной, так и в венозной крови - преимущественно, в свободном виде, щелочной резерв и рН крови снижались Введение сукцината повышало артериовенозный градиент рСЬ в 2,2 раза Содержание СО2 в крови увеличивалось - преимущественно, за счет повышения уровня бикарбоната, уменьшался дефицит буферных оснований На фоне изотермического режима повышалась оксигенация как артериальной, так и венозной крови, артериовенозный градиент рОг возрастал в 1,5 раза При изотермическом режиме С02 в крови не накапливался, рН и показатели щелочного резерва крови (НС03", SBC , ABE и SBE) повышались

Комбинация изотермического режима с введением СН сопровождалась увеличением артериовенозного градиента р02 в 1,9 раза, в сравнении с контролем Прирост значения рН крови, концентрации бикарбоната, избытка буферных оснований был больше суммы приростов, обусловленных изолированным применением сукцината или изотермического режима

В экспериментах, нацеленных на интегральную оценку функционального состояния цикла Кребса (т е , полноты утилизации в нем ацетил-КоА), определяли экскрецию животными ацетона с выдыхаемым воздухом Моделирование барбитуратной комы сопровождалось почти трехкратным снижением потребления кислорода организмом, но при этом экскреция с выдыхаемым воздухом ацетона практически не изменялась Поэтому в состоянии комы на каждый моль потребленного кислорода крысы выделяли втрое больше ацетона, чем интактные

Терапевтическое применение СН, изотермического режима или их комбинации частично нормализовало потребление кислорода без существенного влияния на экскрецию ацетона в абсолютном выражении В

расчете на 1 ммоль потребленного кислорода, экскреция ацетона с выдыхаемым воздухом частично нормализовалась При комбинированном применении СН и изотермического режима этот эффект был значимым (наблюдалось снижение на 20% отношения количеств экскретируемого ацетона и потребляемого организмом кислорода)

Введение СН или изотермический режим проявляли тенденцию повышать выживаемость крыс при моделировании барбитуратной комы (более выраженную при 3-часовом наблюдении, т е в период поддержания изотермического режима) Их комбинированное применение давало супрааддитивный эффект выживаемость повышалась на 40-50% Синергизм изотермического режима и СН был более отчетливым при 48-часовом наблюдении за животными (рис 4)

Контроль

* :

I сн I

.:-!---т—

| \ Изотермия 1

| : **+ СН+ П 1*+ _; ' ; изотермия __

О 20 40 60 80 100 120 0 20 40 60 80 100

Выживаемость в течение 3 ч, % Выживаемость в течение 48 ч, %

Рисунок 4 Влияние сукцината натрия и (или) изотермического режима на выживаемость крыс при тиопенталовой коме

Значимое различие с контрольной группой (*) Р<0,025, (■**) Р<0,01 Значимое различие с изотермической и с сукцинатной группой (+) Р< 0,05

Таким образом, пополнение пула интермедиатов цикла Кребса путем введения животным СН в комбинации с поддержанием нормальной температуры тела смягчало биоэнергетические нарушения, наблюдавшиеся па уровне организма при моделировании на крысах барбитуратной комы Частично нормализовались угнетение внешнего дыхания и потребления кислорода, показатели газового состава и кислотно-основного состояния крови, отношение экскреции организмом ацетона к потреблению кислорода, увеличивалась экскреция диоксида углерода с выдыхаемым воздухом Изотермический режим и СН повышали выживаемость крыс при острой интоксикации ТН, комбинированное применение обоих терапевтических факторов оказывало синергический эффект по данному показателю

После введения этанола (ЛД50/484) изолированное применение СН проявляло тенденцию умеренно стимулировать внешнее дыхание и газообмен Однако при комбинации СН с применением изотермического режима эта тенденция утрачивалась У крыс, сохранявших ритмичное внешнее дыхание, оксигенация артериальной крови возрастала в 1,5 раза, венозной - не изменялась Почти вдвое увеличивался (в противоположность изменению при барбитуратной коме) артериовенозный градиент напряжения кислорода Содержание свободного диоксида углерода мало изменялось в венозной крови, но вдвое снижалось в артериальной Резко уменьшалось также содержание в крови связанного (входящего в состав бикарбоната) СОг Щелочной резерв и рН крови снижались СН, изотермический режим и (в наибольшей мере) их комбинация приводили к еще большему увеличению оксигенации артериальной крови и артериовенозного различия в содержании кислорода

Комбинация СН и изотермического режима обеспечивала увеличение содержания диоксида углерода в венозной крови (в сравнении не только с отравленными, но и интактными крысами), и частичную нормализацию

содержания СОг в артериальной крови Сукцинат и, в еще большей мере, его комбинация с изотермиеи, приближали к норме содержание в крови бикарбоната, показатели щелочного резерва и величину рН Эффект СН и изотермического режима в отношении рН и показателей щелочного резерва крови был супрааддитивным

Несмотря на перечисленные благоприятные тенденции во влиянии СН, изотермического режима или их сочетания на энергетический обмен и кислотно-основное состояние крови, экспериментальная терапия с применением СН и (или) изотермического режима отрицательно влияла на исход алкогольной комы Увеличение летальности при изолированном применении СН или изотермического режима проявлялось лишь в виде тенденции, но при их комбинированном применении оно было значимым Таким образом, введение в организм натриевой соли янтарной кислоты -интермедиата цикла Кребса - не оказывало благоприятного влияния на течение и исход алкогольной комы, моделировавшейся на крысах

Через 3 ч после в/б введения крысам ТН (0,8 ЛД50/зч). наблюдалось снижение активности АХЭ мозга на 19% При моделировании алкогольной интоксикации в/ж введением этанола (0,8 ЛДзо/зч) отмечалось снижение активности АХЭ эритроцитов на 43% и головного мозга - на 20% Степень этого снижения была приблизительно такой же, как на 15-й минуте смертельного отравления ацетатом аммония, на фоне судорог

С учетом снижения активности АХЭ в организме на фоне моделирования барбитуратной и, в особенности, алкогольной комы, было изучено влияние антагонистов холинэргических рецепторов на проявления и исход интоксикации Кому моделировали в/б введением ТН или в/ж введением этанола, через 0,5 ч после этого в/б вводили атропин (10 мг/кг) или фторацизин (8 мг/кг)

Применение холинолитиков сопровождалось слабо выраженной тенденцией к улучшению показателей газообмена, регистрировавшихся

через 3 ч после ТН или этанола Влияние этих препаратов на выживаемость и сроки жизни при барбитуратной или алкогольной интоксикации было, в целом, положительным, однако прослеживалось лишь в виде тенденции

Таким образом, данные настоящего исследования демонстрируют значимость гипераммониемии как одного из факторов эндотоксикозк при острых отравлениях веществами седативно-гипнотического действия Показано, что гипераммониемия закономерно развивается при интоксикациях, сопровождающихся формированием комы, определены механизмы этого явления, продемонстрировано потенцирование аммиаком летального действия токсиканта, вызвавшего кому Экспериментально обоснованы перспективные подходы к повышению эффективности патогенетической терапии токсической комы путем устранения неблагоприятных последствий гипераммониемии В числе этих подходов -избирательное снижение рН крови и коррекция истощающего влияния аммиака на пул интермедиатов цикла Кребса в условиях, препятствующих развитию гипотермии

ВЫВОДЫ

1 Вещества нейротоксического действия в эксперименте на крысах вызывают развитие гипераммониемии, амплитуда которой положительно связана с седативно-гипнотическими свойствами этих веществ и глубиной наркотического эффекта

2 Моделирование токсической комы сопровождается интенсификацией диффузии аммиака, как в общий кровоток, так и в изотонический солевой раствор, введенный животным внутрибрюшинно, это не обусловлено увеличением концентрации, пула или скорости образования аммиака в пищеварительном тракте

3 Установлено, что одним из механизмов интенсификации диффузии аммиака из пищеварительного тракта при моделировании токсической комы является нарушение вовлечения аммиака в состав глутамина Данный эффект неспецифичен для веществ седативно-гипнотического действия

4 При острой барбитуратной интоксикации диффузия аммиака в бассейн воротной и нижней полой вены увеличивается примерно в равной мере При алкогольной коме преобладает увеличение диффузии аммиака в брюшинную полость и далее в бассейн нижней полой вены

5 Моделирование барбитуратной или алкогольной комы сопровождается отставанием вовлечения циркулирующего в крови аммиака в состав мочевины от потока аммиака в общий кровоток При алкогольной коме существенный вклад в этот эффект вносит интенсификация трансперитонеальной диффузии аммиака из пищеварительного тракта в бассейн нижней полой вены в обход печени

6 Гипераммониемия при моделировании барбитуратной или алкогольной комы не имеет ретенционного характера экскреция аммиака с мочой или выдыхаемым воздухом не снижается

7 На фоне барбитуратной или алкогольной комы искусственное повышение уровня аммиака в крови путем введения в организм экзогенного аммиака повышает летальность и усугубляет нарушения газообмена

8 Подавление образования аммиака в пищеварительном тракте энтеральным применением гентамицина не уменьшает гипераммониемию или вероятность летального исхода барбитуратной или алкогольной комы

9 Моделирование барбитуратной или алкогольной комы сопровождается увеличением содержания глутамина в ткани головного мозга, снижение рН крови путем внутривенного введения соляной кислоты

смягчает этот эффект, улучшает состояние газообмена и уменьшает летальность экспериментальных животных

10 Моделирование барбитуратной или алкогольной комы сопровождается умеренным снижением активности ацетилхолинэстеразы в эритроцитах и головном мозгу, которое, однако, не играет существенной роли в летальном действии токсикантов

11 Моделирование барбитуратной (но не алкогольной) комы сопровождается снижением пула интермедиатов цикла Кребса в головном мозгу На этом фоне введение сукцината натрия в условиях, предотвращающих снижение температуры тела, улучшает показатели гомеостазиса и существенно повышает выживаемость экспериментальных животных Данный эффект отсутствует в условиях моделирования алкогольной комы

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1 Рейнюк В Л Лимитирующие звенья метаболизма - новый фундаментальный аспект проблемы экстремальных состояний радиационной и химической этиологии / Ю Ю Ивницкий, В Л Рейнюк, Т В Шефер, А В Носов // Медико-биологические проблемы противолучевой и противохимической защиты - СПб ООО «Издательство Фолиант», 2004 -С 91-92

2 Рейнюк В Л Роль эндогенного аммиака в патогенезе барбитуратной комы / Ю Ю Ивницкий, Т В Шефер, В Л Рейнюк // Медико-биологические проблемы противолучевой и противохимической защиты -СПб ООО «Издательство Фолиант», 2004 - С 92-93

3 Рейнюк В Л Синергизм изотермического режима и сукцината натрия в экспериментальной терапии барбитуратной комы / В Л Рейнюк, Т В Шефер, Ю Ю Ивницкий // Бюл эксперим биологии и медицины -

2006 -Т 142,№7 -С 66-70

4 Рейшок В Л Летальность при моделировании токсической комы роль эндогенной гипераммониемии / Ю Ю Ивницкий, В Л Рейнюк // Научно-технические аспекты обеспечения безопасности при уничтожении, хранении и транспортировке химического оружия тр науч -пракг конф -М, 2006 - С 120-122

5 Рейнюк В Л Синергизм мексидола и изотермического режима в экспериментальной терапии барбитуратной комы / В Л Рейнюк, Т В Шефер, Ю Ю Ивницкий // Бюл эксперим биологии и медицины -2006, Прил 1 -С 218-223

6 Рейнюк В Л Гипераммониемия у крыс при барбитуратной коме / В Л Рейнюк, Т В Шефер, В Н Малаховский, Ю Ю Ивницкий // Бюл эксперим биологии и медицины -2007 -Т 143, №3 -С 308-312

7 Рейнюк В Л Влияние атмосферного аммиака на летальность крыс при барбитуратной интоксикации / В Л Рейнюк, Т В Шефер, Р В Овсепьян, Ю Ю Ивницкий // Бюл эксперим биологии и медицины - 2007 - Т 143, №6 - С 634-637

8 Рейнюк В Л Барбитуратная кома новые подходы к лечению / В Л Рейнюк, Ю Ю Ивницкий // Актуальные проблемы химической безопасности в Российской Федерации (Сб тр Всеросс науч -практ конф, посвящ 45-летию ФГУП «НИИГПЭЧ» ФМБА России) - СПб,

2007 -С 277-279

9 Рейнюк В Л Влияние атмосферного аммиака на летальный исход острого отравления этанолом / В Л Рейнюк // Вопросы обеспечения химической безопасности в Российской Федерации Сб тр совместного заседания секции № 4 Проблемной комиссии ФМБА России, Санкт-

Петербург отделения Всеросс о-ва токсикологов и Ученого Совета ФГУП «НИИГПЭЧ» ФМБА России, посвящ 90-летию со дня рождения С Д Заугольникова-СПб Изд-во «Фолиант», 2007 - С 163-166

10 Рейнюк В JI Интенсификация диффузии аммиака из пищеварительного тракта крыс при острой барбитуратной интоксикации / В Л Рейнюк, Т В Шефер, Ю Ю Ивницкий // Бюл эксперим биологии и медицины -2008 Т -145,№1 -С 15-20

11 Рейнюк В Л Механизм гипераммониемии у крыс при моделировании барбитуратной комы / В Л Рейнюк, Ю Ю Ивницкий // Вестн Рос Воен-мед акад -2008 -Т 23, №3 прил 1 -С 108-109

12 Рейнюк В Л Потенцирование аммиаком летального действия этанола на крыс / В Л Рейнюк, Т В Шефер, Ю Ю Ивницкий // Бюл эксперим биологии и медицины -2008 -Т 145, №6 - С 688-691

13 Рейнюк В Л Гипераммониемия потенцирует летальное действие этанола на крыс / В Л Рейнюк, Ю Ю Ивницкий, Т В Шефер // Вестн Рос Воен -мед акад - 2008 - Т 23, №3 прил 2 - С 52-53

3 Rejniuk V L Intermediates of Krebs cycle correct the depresssion of the whole body oxygen consumption and lethal cooling m barbiturate poisoning m rat / J J Ivnitsky, V L Rejniuk, T V Schafer, V N Malakhovsky // Toxicology - 2004.-Vol202 -P 165-172

4 Rejniuk VL Succinate and artificial maintenance of normal body temperature synergistically correct lethal disorders in thiopental coma rat / J J Ivnitsky, V L Rejniuk, T V Schafer, V N Malakhovsky // Toxicology -2006 - Vol 218 -P 22-29

6 Rejniuk V L Fulminant hyperammonaemia induced by thiopental coma in rats / J J Ivnitsky, V L Rejniuk, T V Schafer, V N Malakhovsky // Toxicology -2006 - Vol224 -P 184-190

Подписано в печать 04 07 08 Формат 60x84 '/,

Объем 2 пл_Тираж 100 экз_Заказ № 557

Типография ВМедА, 194044, СПб , ул Академика Лебедева, 6

 
 

Оглавление диссертации Рейнюк, Владимир Леонидович :: 2008 :: Санкт-Петербург

ОГЛАВЛЕНИЕ.

ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. РОЛЬ ЭНДОГЕННОГО АММИАКА В ПАТОГЕНЕЗЕ ОСТРЫХ \ <

ИНТОКСИКАЦИЙ ВЕЩЕСТВАМИ СЕДАТИВНО-ГИПНОТИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ: АНАЛИЗ СОСТОЯНИЯ ПРОБЛЕМЫ И ПОСТАНОВКА ЗАДАЧ ИССЛЕДОВАНИЯ.

1.1. Определение используемых терминов и предмета исследования.

1.2. Кинетика эндогенного аммиака в норме и при экстремальных воздействиях на организм.

1.2.1. Процессы образования аммиака в организме.

1.2.1.1. Образование аммиака в просвете пищеварительного тракта.

1.2.1.2. Образование аммиака в тканях организма.

1.2.2. Диффузия аммиака из пищеварительного тракта в кровь.

1.2.3. Диффузия аммиака из крови в ткани.

1.2.4. Процессы обезвреживания эндогенного аммиака.

1.2.5. Удаление аммиака из организма.

1.3. Влияние гипераммониемии на метаболизм и функции центральной нервной системы.

1.4. Средства и методы коррекции неврологических нарушений, обусловленных гипераммониемией.

1.5. Обоснование задач исследования.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Экспериментальные животные.

2.2. Фармакологические средства и токсиканты.

2.3. Моделирование токсической комы и сопора.

2.4. Оценка способности веществ вызывать кому.

2.5. Подавление образования аммиака в пищеварительном тракте.

2.6. Модификация интенсивности поступления аммиака в кровь и в головной мозг.

2.7. Химические и биохимические методы исследования.

2.8. Методы исследования газообмена, кислотно-основного состояния и газового состава крови.

2.9. Рентгенологические методы исследования.

2.10. Измерение температуры тела и управление температурой тела при моделировании токсической комы.

2.11. Методы статистического анализа полученных данных.

Глава 3. УРОВЕНЬ АММИАКА В КРОВИ ПРИ МОДЕЛИРОВАНИИ ТОКСИЧЕСКОЙ КОМЫ.

3.1. Уровень аммиака в крови при острой интоксикации лекарственными веществами, принадлежащими к различным фармакологическим группам

3.2. Уровень аммиака в крови при острой интоксикации веществаминеэлектролитами

Глава 4. ОБРАЗОВАНИЕ АММИАКА В ПИЩЕВАРИТЕЛЬНОМ ТРАКТЕ, ЕГО ПОСТУПЛЕНИЕ В КРОВЬ, ОБЕЗВРЕЖИВАНИЕ И ЭКСКРЕЦИЯ ПРИ ОСТРОЙ ИНТОКСИКАЦИИ ВЕЩЕСТВАМИ СЕДАТИВНО-ГИПНОТИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ.

4.1. Эвакуаторная функция пищеварительного тракта и образование аммиака в кишечнике при моделировании токсической комы.

4.2. Проницаемость для аммиака кишечного барьера при моделировании токсической комы.

4.3. Обезвреживание аммиака в организме при моделировании токсической комы.

4.4. Экскреция аммиака с мочой и выдыхаемым воздухом при моделировании токсической комы.

Глава 5. ВЛИЯНИЕ ИЗМЕНЕНИЙ ПОТОКА АММИАКА В КРОВЬ И В ГОЛОВНОЙ МОЗГ НА ПРОЯВЛЕНИЯ И ИСХОД ИНТОКСИКАЦИИ ВЕЩЕСТВАМИ СЕДАТИВНО-ГИПНОТИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ.

5.1. Влияние экзогенного аммиака на проявления и исход острой барбитуратной или алкогольной интоксикации.

5.2. Влияние подавления образования аммиака в кишечнике на проявления и исход острой барбитуратной или алкогольной интоксикации.

5.3. Влияние искусственного снижения pH крови на проявления и исход острой барбитуратной или алкогольной интоксикации.

Глава 6. ВЛИЯНИЕ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ И АНТИХОЛИНЭСТЕРАЗНОГО ЭФФЕКТОВ АММИАКА НА ИСХОД И ТЕЧЕНИЕ ОСТРОГО ОТРАВЛЕНИЯ ВЕЩЕСТВАМИ СЕДАТИВНО-ГИПНОТИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ.

6.1. Содержание лимонной кислоты в крови и головном мозгу крыс при острой барбитуратной или алкогольной интоксикации.

6.2. Влияние изотермического режима и (или) сукцината натрия на показатели состояния энергетического обмена и летальность при острой барбитуратной интоксикации.

6.3. Влияние изотермического режима и (или) сукцината натрия на показатели состояния энергетического обмена и летальность при острой алкогольной интоксикации.

6.4. Активность ацетилхолинэстеразы крови и головного мозга при острой барбитуратной или алкогольной интоксикации.

6.5. Влияние антагонистов холинергических рецепторов на газообмен и летальность у крыс при острой барбитуратной или алкогольной интоксикации.

Глава 7. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.

7.1. Зависимость кинетики эндогенного аммиака от способности нейротоксикантов вызывать кому и от глубины наркотического эффекта.

7.2. Роль гипераммониемии в формировании летального исхода острой интоксикации веществами седативно-гипнотического действия.

7.3. Механизмы гипераммониемии при острой интоксикации веществами седативно-гипнотического действия.

7.4. Анализ результатов экспериментальной коррекции нарушений, патогенетически связанных с изменениями кинетики эндогенного аммиака при моделировании острой интоксикации веществами седативногипнотического действия.

 
 

Введение диссертации по теме "Токсикология", Рейнюк, Владимир Леонидович, автореферат

Три четверти больных поступают в токсикологические центры России с острыми отравлениями веществами седативно-гипнотического действия [44]. Массовый характер такие отравления могут приобретать при применении химикатов несмертельного действия, не запрещённых Парижской «Конвенцией о запрещении применения, разработки и накопления химического оружия» 1993 г. [5], или, в чрезвычайных ситуациях, при передозировке седативных и обезболивающих средств. Ведущим синдромом тяжёлых отравлений веществами седативно-гипнотического действия является кома - крайнее угнетение неврологических функций. Предупреждение летального исхода токсической комы - проблема, актуальная как для гражданского, так и для военного здравоохранения.

Непреложным принципом оказания медицинской помощи при токсической коме является раннее начало лечения [65, 69, 72, 82]. Поздняя госпитализация ведёт к увеличению летальности с 2-7% [44] до 8-41% [1]. Подобная ситуация может складываться при массовых поражениях веществами, угнетающими центральную нервную систему, когда, в силу разных обстоятельств, медицинская помощь оказывается поздно [5, 29, 49]. Механизмы снижения эффективности лечения токсической комы с увеличением срока начала его проведения исследованы недостаточно; неизвестно, почему современные средства реанимации не всегда обеспечивают выживание больных, длительное время находившихся в коме. Раскрытие причин этого явления имеет фундаментальное значение и, в то же время, чрезвычайно актуально для клинической токсикологии.

Один из подходов к решению проблемы предлагает концепция эндотоксикоза. Согласно ей, любое критическое состояние организма сопровождается нарушением метаболизма и накоплением в крови биологически активных веществ эндогенного происхождения. Такое накопление, называемое эндотоксемией [45], может влиять на исход комы. Характер этого влияния зависит от конкретного метаболита, участвующего в формировании эндотоксемии. Поэтому одни лишь интегральные её показатели недостаточны для понимания сути происходящих метаболических нарушений.

В качестве маркеров эндотоксемии в литературе упоминаются продукты перекисного окисления липидов [22, 45], ферменты [73], «средние молекулы» [7, 33, 42, 45], цитокины [77] и другие. Из азотистых метаболитов в этот перечень включены сравнительно безвредные вещества - мочевина и креатинин, в то время как аммиак, обладающий значительной токсичностью, либо игнорируется, либо упоминается без указания методики оценки результатов его определения.

Между тем, круг патологических состояний организма, в которых гипераммониемия является ведущим звеном патогенеза, чрезвычайно широк [16, 34, 35, 92, 97, 115, 129, 166, 207], что может отражать универсальное общебиологическое значение этого феномена. Гипераммониемия - одно из опаснейших проявлений гепатотоксического действия веществ, многие из которых обладают, вместе с тем, нейротоксическими свойствами [2, 19, 38]. Всё это свидетельствует о возможной вовлечённости нарушений кинетики эндогенного аммиака в формирование эндотоксемии и летального исхода при острых отравлениях веществами седативно-гипоксического действия.

В организме человека аммиак сосредоточен преимущественно в просвете пищеварительного тракта [116]. Перепад концентрации аммиака между просветом пищеварительного тракта и кровью достигает трёх порядков [138] и поддерживается за счёт гидролиза АТФ [191]. Известно, что для критических состояний организма, в том числе и для комы, характерны централизация кровообращения и гипоксия смешанного типа [69], тормозящие ресинтез АТФ в стенке пищеварительного тракта и в печени. Поэтому при коме вполне вероятно нарушение барьерной функции кишечной стенки и печени в отношении аммиака, ведущее к гипераммониемии. Кроме того, сопровождающие кому метаболические нарушения (ацидоз, гипоксия, восстановление внутриклеточного пула пиридиновых динуклеотидов) способствуют диффузии аммиака из плазмы крови в цитоплазму [112].

С учётом нейротоксичности аммиака [97], можно допустить, что такие изменения его кинетики окажут отрицательное влияние на исход отравления, о чём косвенно свидетельствует отрицательное влияние эндотоксемии на исход экзогенной интоксикации [44, 45]. Однако экспериментально эта гипотеза не проверялась. Не изучена зависимость гипераммониемии от наркотической активности вещества, глубины наркотического эффекта и сроков интоксикации. Не исследованы механизмы нарушения кинетики аммиака при острых отравлениях, ведущим синдромом которых является кома. Не определена роль аммиака в формировании летального исхода таких интоксикаций; не проверялась и возможность влияния на этот исход путём вмешательства в кинетику аммиака или в эффекты, вызываемые этим веществом при накоплении в организме.

Отсюда проистекает цель исследования: раскрыть закономерности нарушений кинетики эндогенного аммиака при острых отравлениях веществами седативно-гипнотического действия, роль этих нарушений в формировании летального исхода таких отравлений; экспериментально обосновать перспективные направления лечения пострадавших.

В рамках данной проблемы решались следующие задачи:

1. Разработать модель токсического процесса при остром отравлении веществами седативно-гипнотического действия.

2. Отобрать и, при необходимости, модифицировать методы изучения кинетики эндогенного аммиака на экспериментальной модели отравлений веществами седативно-гипнотического действия.

3. Исследовать характер связи гипераммониемии с выраженностью седативно-гипнотических свойств экзогенного токсиканта и глубиной седативно-гипнотического эффекта.

4. Выявить закономерности влияния веществ седативно-гипнотического действия на процессы образования аммиака в кишечнике, его поступления в кровь и в головной мозг, обезвреживания, экскреции с мочой и выдыхаемым воздухом.

5. Оценить влияние изменений скорости поступления аммиака в общий кровоток и в головной мозг на летальность и состояние основных гомеостатических функций при отравлении веществами седативно-гипнотического действия.

6. Экспериментально обосновать направления возможной коррекции нежелательных токсических эффектов эндогенного аммиака при отравлениях веществами седативно-гипнотического действия.

Решение поставленных задач позволило сформулировать следующие основные положения, выносимые на защиту:

1. Моделирование комы введением животным веществ седативно-гипнотического действия сопровождается повышением уровня аммиака в крови, положительно зависящим от их седативно-гипнотических свойств и глубины седативно-гипнотического эффекта. При барбитуратной коме ведущим механизмом этого явления служит отставание обезвреживания аммиака в печени от его возросшего поступления в портальную систему. При алкогольной коме ведущим механизмом гипераммониемии является интенсификация поступления аммиака из пищеварительного тракта в бассейн нижней полой вены в обход печени, путём трансперитонеальной диффузии.

2. Увеличение скорости поступления аммиака в головной мозг способствует, а её уменьшение - препятствует летальному исходу острых отравлений с ведущим синдромом комы.

3. Пополнение пула интермедиатов цикла Кребса в условиях, препятствующих развитию гипотермии, является перспективным подходом к устранению неблагоприятного влияния эндогенного аммиака на исход барбитуратной комы.

Научная новизна и теоретическая значимость работы. Впервые решена медико-биологическая проблема, заключающаяся в раскрытии закономерностей и значения изменений кинетики аммиака при острых отравлениях, ведущим синдромом которых является кома. В рамках решения этой проблемы показано, что при интоксикациях, сопровождающихся формированием комы, закономерно возникает гипераммониемия; её выраженность положительно зависит от седативно-гипнотических свойств токсиканта и глубины седативно-гипнотического эффекта.

Установлено, что при моделировании токсической комы гипераммониемия обусловлена интенсификацией поступления в общий кровоток аммиака, образующегося в пищеварительном тракте. При барбитуратной коме ведущим механизмом этого явления служит отставание обезвреживания аммиака в печени от его возросшего поступления в портальную систему. При алкогольной коме ведущим механизмом гипераммониемии является интенсификация поступления аммиака из пищеварительного тракта в бассейн нижней полой вены в обход печени. Установлена существенная роль трансперитонеальной диффузии аммиака в формировании гипераммониемии при моделировании алкогольной комы.

Выявлено потенцирование аммиаком летального действия токсиканта, вызвавшего кому, и, напротив, снижение летальности в условиях, препятствующих диффузии аммиака из крови в головной мозг. Обосновано представление о том, что при острых отравлениях веществами седативно-гипнотического действия, когда ведущим синдромом выступает кома, нарушение кинетики эндогенного аммиака способствует формированию летального исхода.

Практическая значимость. На основе оценки роли эндогенного аммиака в патогенезе острых отравлений веществами седативно-гипнотического действия предложены пути повышения эффективности патогенетической терапии токсической комы: избирательное снижение рН крови и коррекция истощающего влияния аммиака на пул интермедиатов цикла Кребса комбинированным применением изотермического режима и препарата янтарной кислоты.

Реализация результатов исследования. Рекомендации, разработанные на основе полученных в ходе диссертационного исследования данных, используются в научной работе и учебном процессе в Военно-медицинской академии имени С.М. Кирова: на кафедрах военно-полевой терапии, рентгенологии и радиологии, НИЛ лекарственной и экологической токсикологии, а также в ФГУ Институт токсикологии ФМБА РФ, Научно-исследовательском испытательном центре (медико-биологической защиты) Государственного научно-исследовательского института военной медицины МО РФ.

Апробация работы. Основные положения диссертации были представлены на международной конференции: Второй Санкт-Петербургский Международный экологический форум «Окружающая среда и здоровье человека» (Санкт-Петербург, 2008). На Российских научных конференциях:

Медико-биологические проблемы противолучевой и противохимической защиты» (Санкт-Петербург, 2004), «Актуальные проблемы химической безопасности в Российской Федерации» (Санкт-Петербург, 2007), «Медико-биологические проблемы токсикологии и радиологии» (Санкт-Петербург, 2008). На совместном заседании секции № 4 Проблемной комиссии ФМБА России, Санкт-Петербургского отделения Всеросийского общества токсикологов и Учёного Совета ФГУП «НИИГПЭЧ» ФМБА России: «Вопросы обеспечения химической безопасности в Российской Федерации» (Санкт-Петербург, 2007). На научно-практической конференции: «Научно-технические аспекты обеспечения безопасности при уничтожении, хранении и транспортировке химического оружия» (Москва, 2006). Материалы исследования связаны с плановыми НИР Военно-медицинской академии имени С.М. Кирова: «Электроэнцефалографические критерии оценки тяжести и прогноза исхода острых отравлений веществами с нейротоксическим действием» (2004); «Метаболическая коррекция летальных нарушений газообмена при острой интоксикации веществами снотворно-седативного действия» (2006); «Сравнительное экспериментальное исследование роли эндогенного аммиака в патогенезе алкогольной и барбитуратной комы» (2007).

Публикации. По теме диссертационного исследования опубликовано 16 научных работ, в том числе 11 статей в изданиях, определённых перечнем ВАК.

Объём и структура работы. Диссертация изложена на 196 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, пяти глав собственных результатов, их обсуждения, заключения и списка литературы. В диссертации приведено 49

 
 

Заключение диссертационного исследования на тему "Кинетика эндогенного аммиака при отравлениях веществами седативно-гипнотического действия; роль ее нарушений в формировании летального исхода (экспериментальное исследование)"

ВЫВОДЫ

1. Вещества нейротоксического действия в эксперименте на крысах вызывают развитие гипераммониемии, амплитуда которой положительно связана с седативно-гипнотическими свойствами этих веществ и глубиной наркотического эффекта.

2. Моделирование токсической комы сопровождается интенсификацией диффузии аммиака, как в общий кровоток, так и в изотонический солевой раствор, введённый животным внутрибрюшинно; это не обусловлено увеличением концентрации, пула или скорости образования аммиака в пищеварительном тракте.

3. Установлено, что одним из механизмов интенсификации диффузии аммиака из пищеварительного тракта при моделировании токсической комы является нарушение вовлечения аммиака в состав глутамина. Данный эффект неспецифичен для веществ седативно-гипнотического действия.

4. При острой барбитуратной интоксикации диффузия аммиака в бассейн воротной и нижней полой вены увеличивается примерно в равной мере. При алкогольной коме преобладает увеличение диффузии аммиака в брюшинную полость и далее в бассейн нижней полой вены.

5. Моделирование барбитуратной или алкогольной комы сопровождается отставанием вовлечения циркулирующего в крови аммиака в состав мочевины от потока аммиака в общий кровоток. При алкогольной коме существенный вклад в этот эффект вносит интенсификация трансперитонеальной диффузии аммиака из пищеварительного тракта в бассейн нижней полой вены в обход печени.

6. Гипераммониемия при моделировании барбитуратной или алкогольной комы не имеет ретенционного характера: экскреция аммиака с мочой или выдыхаемым воздухом не снижается.

7. На фоне барбитуратной или алкогольной комы искусственное повышение уровня аммиака в крови путём введения в организм экзогенного аммиака повышает летальность и усугубляет нарушения газообмена.

8. Подавление образования аммиака в пищеварительном тракте энтеральным применением гентамицина не уменьшает гипераммониемию или вероятность летального исхода барбитуратной или алкогольной комы.

9. Моделирование барбитуратной или алкогольной комы сопровождается увеличением содержания глутамина в ткани головного мозга; снижение рН крови путём внутривенного введения соляной кислоты смягчает этот эффект, улучшает состояние газообмена и уменьшает летальность экспериментальных животных.

10. Моделирование барбитуратной или алкогольной комы сопровождается умеренным снижением активности ацетилхолинэстеразы в эритроцитах и головном мозгу, которое, однако, не играет существенной роли в летальном действии токсикантов.

И. Моделирование барбитуратной (но не алкогольной) комы сопровождается снижением пула интермедиатов цикла Кребса в головном мозгу. На этом фоне введение сукцината натрия в условиях, предотвращающих снижение температуры тела, улучшает показатели гомеостазиса и существенно повышает выживаемость экспериментальных животных. Данный эффект отсутствует в условиях моделирования алкогольной комы.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Полученные данные свидетельствуют о том, что в состоянии токсической комы организм не способен поддерживать нормальные параметры обмена аммиака. На это указывает гипераммониемия, сопровождающая острую интоксикацию веществами седативно-гипнотического действия и положительно зависящая от глубины наркотического эффекта.

Гипераммониемия возникает в ближайшие часы острого отравления веществами седативно-гипнотического действия; она не обусловлена повреждением паренхимы печени или почек, а, следовательно, не является отражением синдрома полиорганной недостаточности, возможного на более поздних стадиях интоксикации. Механизмы гипераммониемии включают в себя нарушение барьерной функции стенки пищеварительного тракта, интенсификацию диффузии аммиака в бассейн воротной и нижней полой вены, отставание процессов обезвреживания и' выведения аммиака из организма от скорости его поступления в общий кровоток.

Нарушение барьерной функции кишечной стенки в отношении аммиака неспецифично для интоксикации веществами седативно-гипнотического действия. Однако только при моделировании токсической комы (но не сопора и не иных нейротоксических эффектов) возникают условия для интенсификации поступления аммиака желудочно-кишечного происхождения в общий кровоток. При барбитуратной коме ведущим механизмом этого явления служит отставание обезвреживания аммиака в печени от его возросшего поступления в портальную систему. При алкогольной коме ведущим механизмом гипераммониемии является интенсификация поступления аммиака из пищеварительного тракта в бассейн нижней полой вены в обход печени. Впервые продемонстрирована существенная роль трансперитонеальной диффузии аммиака в формировании гипераммониемии при моделировании алкогольной комы.

Гипераммониемия увеличивает вероятность летального исхода токсической комы: искусственное повышение уровня аммиака в крови путём введения в организм экзогенного аммиака резко сенсибилизирует животных к летальному действию веществ седативно-гипнотического действия. Напротив, уменьшение скорости поступления аммиака в головной мозг путём избирательного снижения рН крови уменьшает летальность при моделировании алкогольной или барбитуратной комы.

Моделирование алкогольной или барбитуратной комы, так же как и смертельное отравление солью аммония, сопровождается угнетением ацетилхолинэстеразы крови и головного мозга. Однако этот эффект не играет существенной роли в механизмах влияния аммиака на исход токсической комы. В то же время коррекция одного из метаболических эффектов гипераммониемии - истощения пула интермедиатов цикла Кребса в ткани мозга — даёт терапевтический эффект при моделировании барбитуратной комы. Экспериментально обосновано применение натриевой соли янтарной кислоты в качестве средства, корригирующего неблагоприятное влияние гипераммониемии на исход барбитуратной комы.

Полученные данные позволяют пересмотреть существующее представление о гипераммониемии как относительно позднем проявлении полиорганной недостаточности при тяжёлых отравлениях, сопровождающихся комой. Они демонстрируют возникновение при таких отравлениях ранних нарушений кинетики эндогенного аммиака, причинно связанных с комой и ведущих к гипераммониемии. Они свидетельствуют об участии гипераммониемии в формировании исхода интоксикации уже в период, когда ещё отсутствуют признаки гибели паренхимы печени и почек (даже при поражениях веществами, обладающими свойствами гепатотоксикантов). Из этих данных следует, что нарушение кинетики аммиака — одно из ранних проявлений и, вместе с тем, обязательных звеньев патогенеза острого отравления в коматозной форме.

Таким образом, настоящим исследованием впервые решена медико-биологическая проблема, заключающаяся в раскрытии закономерностей и значения изменений кинетики аммиака при острых отравлениях, ведущим синдромом которых является кома. В рамках решения этой проблемы показано, что в ранние сроки интоксикаций, сопровождающихся формированием комы, возникает гипераммониемия; её выраженность положительно зависит от седативно-гипнотических свойств токсиканта и глубины седативно-гипнотического эффекта.

Установлено, что при моделировании токсической комы гипераммониемия обусловлена интенсификацией поступления в общий кровоток аммиака, образующегося в пищеварительном тракте. При барбитуратной коме ведущим механизмом этого явления служит отставание обезвреживания аммиака в печени от его возросшего поступления в портальную систему. При алкогольной коме ведущим механизмом гипераммониемии является интенсификация поступления аммиака из пищеварительного тракта в бассейн нижней полой вены в обход печени. Впервые продемонстрирована существенная роль трансперитонеальной диффузии аммиака в формировании гипераммониемии при моделировании алкогольной комы.

На основе оценки роли эндогенного аммиака в патогенезе острых отравлений веществами седативно-гипнотического действия предложены новые пути повышения эффективности патогенетической терапии токсической комы. В их числе - избирательное снижение рН крови и коррекция истощающего влияния аммиака на пул интермедиатов цикла Кребса.

 
 

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2008 года, Рейнюк, Владимир Леонидович

1. Александров М.В. Состояние биоэлектрической активности головного мозга и психические расстройства при тяжёлых отравлениях веществами депримирующего действия: автореф. дис. . д-ра. мед. наук / М.В. Александров. СПб., 2002. - 38 с.

2. Альберт Э. Избирательная токсичность: пер. с англ. / Э. Альберт. М.: Мир, 1971.-431 с.

3. Анохин П.К. Узловые вопросы теории функциональных систем / П.К. Анохин. М.: Наука, 1980. - 197 с.

4. Арнольд из Виллановы. Салернский кодекс здоровья: Пер. с лат. / Арнольд из Виллановы. М.: Интербук, 1992. - 224 с.

5. Бадюгин И.С. Экстремальная токсикология / И.С. Бадюгин. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006. - 416 с.

6. Балаховский С.Д. Методы химического анализа крови / С.Д. Балаховский, И.С. Балаховский: 3-е изд. - М.: Медгиз, 1953. - 523 с.

7. Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта / М.Л. Беленький. Л.: Медгиз, 1963.- 152 с.

8. Бесядовский P.A. Справочное руководство для радиобиологов / P.A. Бесядовский, К.В. Иванов, А.К. Козюра. -М.: Атомиздат, 1978 125 с.

9. Биохимические методы исследования / Под ред. A.A. Покровского. М.: Медицина, 1969. - 652 с.

10. Браунштейн А.Е. Процессы и ферменты клеточного метаболизма / А.Е. Браунштейн. М.: Наука, 1987. - 548 с.

11. Буеверов А.О. Трудные вопросы диагностики и лечения печеночной энцефалопатии / А.О. Буеверов, М.В. Маевская // Клинич. перспективы гастроэнтерологии и гепатологии. 2005.- №1. - С.25-30.

12. Вернадский В.И. Труды по истории науки в России / В.И. Вернадский. -М.: Наука, 1988. -411с.

13. Виноградов A.B. Дифференциальный диагноз внутренних болезней / A.B.

14. Виноградов. 14-е изд., перераб. и доп.-М.: Медицина, 1988. - 590 с.

15. Владимирова Е.А. Аммиак головного мозга как специфический биохимический показатель функционального состояния центральной нервной системы / Е.А. Владимирова // Биохимия нервной системы. -Киев: Изд-во АН УССР, 1954. С.47-60.

16. Владимиров Г.Е. Функциональная биохимия / Г.Е. Владимиров, Н. Пантелеева. Л.: ЛГУ, 1965.-241 с.

17. Военная токсикология, радиобиология и медицинская защита / Под ред. С.А.Куценко. СПб: Фолиант, 2004. - 528 с.

18. Врба Р. К вопросу образования аммиака в срезах головного мозга / Р. Врба, Я. Фолбергер, В. Кантурку // Вопросы биохимии нервной системы / Под ред. A.B. Палладина. Киев: Изд-во АН УССР, 1957. - С. 154-163.

19. Вредные вещества в промышленности / Под ред. Н.В. Лазарева. 7-е изд., перераб., соединениядоп. - Л.: Химия, 1977. - Т.З: Неорганические и элементорганические. — 90 с.

20. Ганн М. Экковский свищ вен нижней полой и воротной и его последствия для организма / М. Ганн, В.М. Массен, М. Ненцкий // Арх. биол. Наук. 1892. - Т.1, №4. - С.400 - 444.

21. Генес B.C. Таблицы достоверных различий между группами наблюдений по качественным показателям / B.C. Генес. М.: Медицина, 1964 - 80 с.

22. Глушков С.И. Нарушения системы глутатиона и их роль в патогенезе острых интоксикаций ксенобиотиками с различными механизмами токсического действия: автореф. дис. д-ра. мед. наук / С.И. Глушков. -СПб., 2006. 46 с.

23. Голиков С.Н. Общие механизмы токсического действия /С.Н. Голиков, И.В. Саноцкий, JT.A. Тиунов. JI.: Медицина, 1986. - 279 с.

24. Гороновский И.Т. Краткий справочник по химии / И.Т. Гороновский, Ю.П. Назаренко, Е.Ф. Некряч. Киев: Наукова думка, 1974. - 991 с.

25. Ещенко Н.Д. Специфические черты энергетического обмена головного мозга: автореф. дис. . д-ра биол. наук / Н.Д. Ещенко. Д.: 1985. - 34 с.

26. Зайчик А.Ш. Основы патохимии / А.Ш. Зайчик, Л.П. Чурилов. СПб.: Элби-СПб, 2000. - 687 с.

27. Зеленин К.Н. Химия общая и биоорганическая / К.Н. Зеленин, В.В. Алексеев. СПб.: Элби-Спб, 2003. - 712 с.

28. Ивницкий Ю.Ю. Интенсивность клеточного дыхания и радиорезистентность организма: автореф. дис. . доктора мед. наук / Ю.Ю. Ивницкий. СПб., 1994. - 45 с.

29. Ивницкий Ю.Ю. Уроки «Норд-Оста»: научно-медицинские аспекты / Ю.Ю. Ивницкий, В.П. Мельничук // Медико-биологические проблемы противолучевой и противохимической защиты. СПб., 2004. - С. 9-10.

30. Исаков П.К. Теория и практика авиационной медицины / П.К. Исаков, Д.И. Иванов, И.Г. Попов. М.: Медицина, 1971. - С.55.

31. Калоус В. Биофизическая химия: пер. с чешек. / В. Калоус, 3. Павличек. — М.: Мир, 1985.-396 с.

32. Камышников B.C. Справочник по клинико-биохимической лабораторной диагностике: в 2 т. / B.C. Камышников. Минск: Беларусь, 2001г. - 958 с.

33. Карякина Е.В. Молекулы средней массы как интегральный показатель метаболических нарушений (обзор литературы) / Е.В. Карякина, C.B. Белова // Клинич. лаб. диагностика. 2004. - № 3. - С. 4-8.(

34. Козлов Н.Б. Аммиак, его обмен и роль в патологии / Н.Б. Козлов. — М.: Медицина, 1971.-127 с.

35. Косенко Е.А. Клеточные механизмы токсичности аммиака / Е.А. Косенко, Ю.Г. Каминский. М.: изд-во ЖИ, 2008. - 287 с.

36. Косяков К.С. О влиянии медикаментозного сна на токсичность аммонийной соли для мышей / К.С. Косяков // Фармакология и токсикология. 1956. - Т. 19, №4. - С. 17-20.

37. Кравчинский Б.Д. Физиология водно-солевого обмена жидкостей тела / Б.Д. Кравчинский. Л.: МедГиз, 1963. - 311 с.

38. Куценко С.А. Основы токсикологии / С.А. Куценко. СПб.: Фолиант, 2004. - 720 с.

39. Лабораторные методы исследования в клинике / Под ред. В.В. Меньшикова. М.: Медицина, 1987. - 364 с.

40. Ленинджер А. Основы биохимии: в 3-х т. / Пер с англ.; Под ред. В.А. Энгельгардта, Я.М. Варшавского. М.: Мир, 1985. - Т. 2. - 731 е.

41. Лечение болезней внутренних органов,/- Под ред. А.Н. Окорокова. М.: Медицинская литература, 2001. - Т. 1. - 560 с.

42. Ливанов Г.А. Коррекция транспорта кислорода и метаболических нарушений при острых отравлениях веществами нейротропного действия / Г.А. Ливанов, Б.В. Батоцыренов, А.Н. Лодягин // Общая реаниматология, 2007. -Т.З, №5/6. — С. 55-60.

43. Ложкин С.Н. Глутамин и его роль в интенсивной терапии. / С.Н. Ложкин, А.Д. Тиканадзе, М.И. Тюрюмина. // Вестн. интенсив, терапии. 2003, - № 4.-С. 64-69.

44. Лужников Е.А. Неотложные состояния при острых отравлениях / Е.А. Лужников, Ю.Н. Остапенко, Г.Н. Суходолова. М.: Медпрактика-М, 2001. - 220 с.

45. Лужников Е.А., Гольдфарб Ю.С., Ильяшенко К.К. Эндотоксикоз как содержание постреанимационной болезни при острых отравлениях / Е.А.

46. Лужников, Ю.С. Гольдфарб, К.К. Ильяшенко // Общая реаниматология. -2007. Т.З, №5/6. - С.48-54.

47. Мак-Ильвейн Г. Биохимия и центральная нервная система: пер. с англ. / Г. Мак-Ильвейн. -М.: Изд-во иностр. лит., 1962. 420 е.

48. Мартинсон Э.Э. Об отношении аммиака к процессам возбуждения и торможения / Э.Э. Мартинсон, Л.Я. Тяхепыльд // Вопросы биохимии нервной систеы. Киев: Изд-во АН УССР, 1957. - С.176-183.

49. Машковский М.Д. Лекарственные средства / М.Д. Машковский. 13-е изд. - М.: ООО «Издательство новая Волна», 2000. - Т. 1. - 540 с.

50. Мельничук В.П. Уроки «Норд-Оста»: организационно-медицинские аспекты / В.П. Мельничук, Ю.Ю. Ивницкий // Медико-биологические проблемы противолучевой и противохимической защиты.- СПб.: ВМедА, 2004. С.15-16.

51. Методы биохимических исследований / Под ред. М.И. Прохоровой. Л.: Изд-во ЛГУ, 1982.-272 с.

52. Мечников И.И. Этюды оптимизма / И.И. Мечников. М.: Наука, 1988. -328 с.

53. Ноздрачёв А.Д. Анатомия крысы / А.Д. Ноздрачёв, Е.Л. Поляков. СПб.: Лань, 2001.-464 с.

54. Ольнянская Р.П. Методы исследования газового обмена человека и животных / Р.П. Ольнянская, Л.А. Исаакян. М.: Медгиз, 1959 - 180 с.

55. Павлов И.П. Полное собрание сочинений / И.П. Павлов. М.: Изд-во АН СССР, 1951.-Т. 2.-336 с.

56. Пашутин В.В. Избранные произведения / В.В. Пашутин. М.: Изд-во АМН СССР, 1952.-348 с.

57. Покровский A.A. Метаболические аспекты фармакологии и токсикологии пищи / A.A. Покровский. М.: Медицина, 1979. - 184 с.

58. Покровский Ю.А. Клиническая значимость синдрома эндогенной интоксикации у пациентов с бактериальной и небактериальной природойзаболевания: автореф. дисс. . канд. мед. наук / Ю.А. Покровский. М., 2001.-26 с.

59. Прозоровский В.Б. Скорость наступления эффекта токсикометрический критерий воздействия яда в малых дозах / В.Б. Прозоровский, В.П. Козяков // Токсикол. вестн. - 2002 - № 2 - С. 18-20.

60. Прозоровский В.Б. Практическое пособие по ускоренному определению средних эффективных доз и концентраций биологически активных веществ / В.Б. Прозоровский. Байкальск: Институт экологической токсикологии, 1994. - 46 с.

61. Пятак O.A. Международная система единиц в клинической медицине / O.A. Пятак. Киев: Здоров'я, 1982. - 88 с.

62. Рокицкий П.Ф. Основы вариационной статистики для биологов / П.Ф. Рокицкий. Минск: Изд-во БГУ, 1961- 223 с.

63. Рубин В.И. Биохимические методы исследования в клинике / В.И. Рубин, Э.Г. Ларский, Л.С. Орлова. Саратов: Изд-во Саратов, ун-та, 1980. - 316 с.

64. Руководство к практическим занятиям по авиационной медицине / Под ред. В.И. Копанева. Л.: ВМедА, 1978. - 204 с.

65. Руководство по судебно-медицинской экспертизе отравлений / Под ред. Р.В.Бережного, Я.С.Смусина, В.В.Томилина, П.П.Ширинского. — М.: Медицина, 1980.-415 с.

66. Симоненко В.Б. Неотложная помощь при острых лекарственных, бытовых и производственных отравлениях / В.Б. Симоненко, О.Ю. Урюпов. 4-е изд., испр. и доп. - М.: ЦВКГ им. П.В.Мандрыка, 2007. - 223 с.

67. Скопичев В.Г. Дистантные эффекты ацетилхолина звено в птогенезе отравлений ингибиторами холинэстеразы / В.Г. Скопичев, В.Б. Прозоровский // Эксперим. клинич. Фармакология. - 1999. - Т.62, № 2. -С. 10-11.

68. Спортивная медицина / Под ред. A.B. Чоговадзе, JI.A. Бутченко. М.: Медицина, 1984.-383 с.

69. Справочник по диетологии / Под ред. A.A. Покровского, М.А.Самсонова.- М. : Медицина, 1981. 701 с.

70. Сумин С.А. Неотложные состояния / С.А. Сумин. 2-е изд. - М.: Фармацевтический мир, 2000. - 459с.

71. Тарьян И. Физика для врачей и биологов / И. Тарьян. Будапешт: Akademiai kiado, 1969. - 600 с.

72. Уголев A.M. Теория адекватного питания и трофология / A.M. Уголев. — СПб.: Наука, 1991.-272 с.

73. Указания по военной токсикологии: инструктив. метод, док. / В.Г. Белых, Н.В. Бутомо, Ю.И. Горбадей; М-во обороны РФ, Гл. воен.-мед. упр.- 2-е изд., перераб. и доп. М.: Гл. воен. клинич. госпиталь им. Н.Н.Бурденко, 2000. - 298 с.

74. Усмакский М.Я., Пинчук Л.Б. и ПинчукВ.Г. Синдром эндогенной интоксикации / М.Я. Усмакский, Л.Б. Пинчук, В.Г. Пинчук. Киев: Здоров'я, 1979.-179 с.

75. Хочачка П. Биохимическая адаптация: Пер. с англ. / П. Хочачка, Дж. Сомеро. М.: Мир, 1988.- 568 с.

76. Цыганенко А.Я. Клиническая биохимия / А.Я. Цыганенко, В.И. Жуков, В.В. Мясоедов. М.: Триада-Х, 2002. - 498 с.

77. Чепур C.B. Морфофункциональная характеристика структур нервной системы в норме и закономерности их изменений при печёночной энцефалопатии: дис. . д-ра мед. наук / C.B. Чепур. СПб., 2002. - 389 с.

78. Шанин В.Ю. Патофизиология критических состояний / В.Ю. Шанин. — СПб.: ЭЛБИ-СПб, 2003.-436 с.

79. Шендеров Б.А. Микрофлора человека и животных и её функции / Б.А. Шендеров. М.: Грангь, 1998. - Т. 1. - 287 с.

80. Шефер Т.В. Влияние сукцината натрия на газообмен крыс при барбитуратной коме / Т.В. Шефер, Ю.Ю. Ивницкий, В.Н. Малаховский // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2003. - Т.135, №4. - С. 419-422.

81. Шефер Т.В. Экспериментальное исследование механизмов снижения потребления кислорода организмом при барбитуратной коме: автореф. дис. .канд. мед. наук / Т.В. Шефер. СПб., 2005. - 24 с.

82. Шилов В.В. Токсическая энцефалопатия: определение, классификация / В.В. Шилов, М.В. Александров, С.А. Васильев // Вестн. Рос. Воен.-мед. акад. 2008. - Т.21, №1. - С.22-27.

83. Янтарная кислота в медицине, пищевой промышленности, сельском хозяйстве / Под ред. М.Н. Кондрашовой, Ю.Г. Каминского, Е.И.Маевского. -Пущино: Институт эксперим. биофизики РАН, 1996 300 с.

84. Aagaard N.K. Alcohol acutely down-regulates urea synthesis in normal men / N.K. Aagaard, T. Thogersen, T. Grofte // Alcohol Clin Exp Res. 2004. - Vol. 28, №5.-P. 697-701.

85. Akman M. The effects of sucralfate and selective intestinal decontamination on bacterial translocation / M. Akman, H. Akbal, H. Emir // Pediatr. Surg. Int. -2000. Vol. 16, № 1/2. - P.91-93.

86. Albrecht J. Cerebral oxygen consumption in experimental hepatic encephalopathy: different responses in astrocytes, neurons, and synaptosomes / J. Albrecht, U. Wysmyk-Cybula, U. Rafaelowska // Exp. Neurol. 1987. - Vol. 97, №2.-P. 418-422.

87. Ament W. Respiratory ammonia output and blood ammonia concentration during incremental exercise / W. Ament, J.R. Huirenga, E. Kort // Int. J. Sports. Med. 1999.-Vol. 20. - P. 71-77.

88. Barrett J.F. A modified Nessler's reagent for the micro-determination of urea in tungstic acid blood filtrate / J.F. Barrett // Biochem J. 1935. - Vol. 29. - P. 2442-2445.

89. Barrow C.S. NH3 concentrations in the expired air of the rat: importance to inhalation toxicology / C.S. Barrow, W.H. Steinhagen // Toxicol. Appl. Pharmacol. 1980.-Vol. 53.-P. 116-121.

90. Batshaw M.L. Hyperammonemia / M.L. Batshaw // Curr. Probl. Pediatr. -1984.-Vol. 14,№ 11.-P. 1-69.

91. Bencsath P. Renal excretion of sodium after bilateral renal sympathectomy in the anaesthetized and conscious rat / P. Bencsath, M.I. Fekete, B. Kanyicska // J. Physiol. 1982.-Vol.331.-P.443-450.

92. Bessman S.P. The cerebral and peripheral uptake of ammonia in liver disease with an hypothesis for the mechanism of hepatic coma / S.P. Bessman, A.N. Bessman // J. Clin. Invest. 1955. -Vol.34. -P 622-631.

93. Bessman S.P. Ammonia inhibits insulin stimulation of the Krebs cycle: further insight into mechanism of hepatic coma / S.P. Bessman, W. Wang, C. Mohan // Neurochem. Res. 1991. - Vol.16, №7. - P.805-811.

94. Bongaerts G. Effect of antibiotics, prebiotics and probiotics in treatment for hepatic encephalopathy / G. Bongaerts, R. Severijnen, H. Timmerman // Med. Hypotheses. 2005. - Vol. 64, № 1. - P. 64-68.

95. Butterworth R.F. Ammonia: key factor in the pathogenesis of hepatic encephalopathy / R.F. Butterworth, J.F. Giguliere, J. Michaud // Neurochem. Pathol. 1987. - Vol.6. - P. 1-12.

96. Censullo J.L. Pentobarbital sodium coma for refractory intracranial hypertension / J.L. Censullo, S. Sebastian // J. Neurosci. Nurs. 2003. - Vol.35, № 5. -P.252-262.

97. Chance B. Respiratory enzymes in oxidative phosphorylation / B. Chance, G.R. Williams // J. Biol. Chem. 1955. - Vol.217, № 1. - P. 383-438.

98. Chodobski A. Intracranial pressure, cerebral blood flow, and cerebrospinal fluid formation during hyperammonemia in cat / A. Chodobski, J. Szmydynger-Chodobska, A. Urbariska // J. Neurosurg. 1986. - Vol. 65, № 1. - P. 86-91.

99. Clemmessen C. Therapeutic trends in the treatment of barbiturate poisoning / C. Clemmessen, E. Nilsson // Clin. Pharmacol. Therap. 1961. - Vol. 8, Is. 2. - P. 220-229.

100. Conway E.J. Microdiffiasion analysis and volumetric error / EJ. Conway. -3rd ed. London: Crosby Lockwood & Son, 1951. - 359 p.

101. Cooper A.J. Role of glutamine in cerebral nitrogen metabolism and ammonia neurotoxicity / A.J. Cooper // Ment. Retard. Dev. Disabil. Res. Rev. -2001. -Vol. 7, №4. P. 280-286.

102. Denis J. Respective roles of ammonia, amino acids, and medium-sized molecules in the pathogenesis of experimentally induced acute hepatic encephalopathy / J. Denis, M.L. Delorme, M. Boschat // J. Neurochem. 1983. -Vol. 40,№1.-P.10-19.

103. Dobson G.P. In vivo portal-hepatic venous gradients of glycogenic precursors and incorporation of 3-3H. glucose into liver glycogen in the awakerat / G.P. Dobson, R.L. Veech, J.V. Passoneau // J. Biol. Chem. 1990. -Vol.265-P. 16350-16357.

104. Domínguez de Villota E. Abnormal temperature control after intoxication with short-acting barbiturates / E. Domínguez de Villota, J. Mosquera, H. Shubin// Crit. Care Med. 1981.- Vol.9 - P. 662-665.

105. Done A.K. Clinical pharmacology of systemic antidotes / A.K. Done // Clin. Pharmacol. Therap 1961.- Vol. 2, Is. 6 - P. 750-753.

106. Ducati A. Respiratory complications during artificial barbiturate coma / A. Ducati, G. Signoroni, M. Meli // J. Neurosurg 1981.- Vol. 25, Is. 1- P. 27-34.

107. Edson N.L. Ketogenesis antiketogenesis. 1. The influence of ammonium chloride on ketone-body formation in liver / N.L. Edson // Biochem. J. - 1935. -Vol. 29, № 9 - P. 2082-2094.

108. Elmér O. Acute portal hypertension after gastric administration of ethanol in the pig / O. Elmér, S. Bengmark, G. Gôransson // Eur. Surg. Res. 1982. - Vol. 14.-P. 298-308.

109. Felipo V. Neurobiology of ammonia / V. Felipo, R.F. Butterworth // Progr. Neurobiol. 2002. - Vol. 67, №4. - P. 259-279.

110. Felipo V. Neurotoxicity of ammonia and glutamate: molecular mechanisms and prevention / V. Felipo, C. Hermenegildo, C. Montoliu // Neurotoxicology. -1998.-Vol. 19, №4/5. -P. 675-681.

111. Ferrier L. Impairment of the intestinal barrier by ethanol involves enteric microflora and mast cell activation in rodents / L. Ferrier, F. Berard, L. Debrauwer // Am. J. Pathol. 2006. - Vol. 168. - P. 1148-1154.

112. Frank S.M. Core hypothermia and skin-surface temperature gradients. Epidural versus general anesthesia and the effects of age / S.M. Frank, Y. Shir, S.N. Raja // Anesthesiology. 1994.- Vol. 80. - P.502-508.

113. Fujiwara M. Role of ammonia in the pathogenesis of brain edema / M. Fujiwara//Acta Med. Okayama. 1986. - Vol. 40, № 6. - P. 313-320.

114. Fürst P. Proteine / P. Fürst // Ernärungsmedizin. Stuttgart: Georg Thieme Verlag, 1995. - S. 90-91.

115. Goldberg N.D. Effects of changes of brain metabolism on the levels of citric acid cycle intermediates / N.D. Goldberg, J.V. Passonneau, O. Lpwry // J. Biol. Chem. 1966. -Vol.241, № 17. - P. 3997-4003.

116. Graham T.E. Ammonia and amino acid metabolism in human skeletal muscle during exercise / T.E. Graham, D.A. MacLean // Can. J. Physiol. Pharmacol. 1992.-Vol. 70, № 1.-P.132-141.

117. Grandison A.S. Effects of wide variations in portal pressure on mesenteric blood flow and absorption from the canine colon / A.S. Grandison, I.D. Harrison, R. Shields // Gut. 1980. - Vol.21, № 6. - P. 475-479.

118. Gözsy B. Über den Mechanismus der Hauptatmung der Taubenbrustmuskels / B. Gözsy, A. Szent-Gyorgyi // Physiol. Chemie. 1934. - Bd 224. - S. 1-10.

119. Ha J.H. Modulation of ligand binding to components of the GABAA receptor complex by ammonia: implications for the pathogenesis of hyperammonemic syndromes / J.H. Ha, A.S. Basile // Brain Res. 1996. - Vol. 720. - P. 35-44.

120. Haghighat N. Effect of ammonia chloride on energy metabolism of astrocytes and C6 glioma cells in vitro / N. Haghighat, D.W. McCandless // Metab. Brain Dis. 1997. - Vol.12, № 4. - P. 287-298.

121. Hawkins R.A., Jessy J., Mans A.M. Effect of reducing brain glutamine synthesis on metabolic symptoms of hepatic encephalopathy / R.A. Hawkins, J. Jessy, A.M. Mans // J. Neurochem. 1993. - Vol. 60, № 3 - P.1000-1006.

122. Häussinger D. Glutamine and Cell Signaling in Liver / D. Häussinger, D. Graf, O.H. Weiergräber // J. Nutrit. 2001. -Vol. 131.- P.2509S-2514 S.

123. Herbert M.K. Thio- and oxybarbiturates inhibit peristalsis in the Guinea-pig ileum in vitro / M.K. Herbert, W. Berg, A. Kublik // Anasthesiol. Intensivmed. Notfallmed. Schmerzther. 2002. - Bd 37. - S. 721 -726.

124. Hindfelt B. Effect of acute ammonia intoxication on cerebral metabolism in rats with portacaval shunts / B. Hindfelt, F. Plum, T.E. Duffy // J. Clin. Invest. -1977. Vol.59, №3. - P. 386-396.

125. Holzer P. Barbiturate poisoning and gastrointestinal propulsion / P. Holzer, E. Beubler, R. Dirnhofer // Arch. Toxicol. 1987. - Vol. 60. - P. 394-396.

126. Hoyer S. Ammonia is endogenously generated in the brain in the presence of presumed and verified dementia of Alzheimer type / S. Hoyer, R. Nitsch, K. Oesterreich //Neurosci. Lett. 1990. - Vol. 117, № 3. - P. 358-362.

127. Imler M. Hepatic origin of yperammonaemia induced by shock in normal rats / M. Imler, J.L. Schlienger // Arch. Int. Physiol. Biochim. 1977. - Vol. 85, №1. -P.101-115,

128. Jayakumar A.R. Glutamine in the mechanism of ammonia-induced astrocyte swelling / A.R. Jayakumar, K.V. Rao, Ch.R. Murthy // Neurochem. Int. 2006. - Vol. 48, № 6/7. - P. 623-628.

129. Jalan R. The molecular pathogenesis of hepatic encephalopathy / R. Jalan, D. Shawcross, N. Davies // Int. J. Biochem. Cell Biol. 2003. - Vol. 35, № 8. - P. 1175-1181.

130. Kapit W. Physiologie-Malatlas / W. Kapit, R. Macey, E. Meisami. -Miinchen: Arcis Verlag GmbH, 1992. 153 s.

131. Karasawa Y. Ammoniqa absorption from the intestine in adult cockerets / Y. Karasawa // Comp. Biochem., Physiol. A. 1984. - Vol. 77, №1. - P. 139-141.

132. Kase C. Diagnosis and treatment of intracerebral hemorrhage / C. Kase // Rev. Neurol. 1999. -Vol.29, №12. -P. 1330-1337.

133. Kaye H. Is inhaled ammonia neurotoxic? / H. Kaye, H. Kilburn // Environmental Management Health. 2000. - Vol. 11, №3. - P. 239-250.

134. Kim K. Feeding diets containing high levels of milk products or cellulose decrease urease activity and ammonia production in rat intestine / K. Kim, W. Lee, N.J. Benevenga//J.Nutr. 1998.-Vol.128.-P. 1186-1191.

135. King L.J. Carbohydrate metabolism in brain during convulsions and its modification by phenobarbitone / L.J. King, J.L. Carl, L. Lao // J. Neurochem. -1973. Vol. 20. - P. 477-485.

136. Koolman J. Tashenatlas der Biochemie / J. Koolman, K.H. Rohm. -Stuttgart: Georg Thieme Verlag, 1998. 459 s.

137. Kosenko E. High ammonia levels decrease brain acetylcholinesterase activity both in vivo and in vitro / E. Kosenko, Y. Kaminsky, M. Minana // Mol. Chem. Neuropathol. 1994. - Vol. 22. - P. 177-184.

138. Krebs H.A. The intermediary stages in the biological oxidation of carbohydrate / H.A. Krebs // Adv. Enzymol. 1943. - Vol.3. - P. 191-200.

139. Krebs H.A. Accumulation of amino acids by the perfused rat liver in the presence of ethanol / H.A. Krebs, R. Hems, P. Lund // Biochem. J. 1973. -Vol. 134, №3.-P. 697-705.

140. Lai J.S. Neurotoxicity of ammonia and fatty acids: differential inhibition of mitochondrial dehydrogenases by ammonia and fatty acyl coenzyme A derivates /J.S. Lai, A.J. Cooper // Neurochem. Res. 1991. - Vol.16, № 7-P. 795-803.

141. Lang W. Solubility of NH3 and apparent pK of NH4+ in human plasma, isotonic salt solutions and water at 37 degrees C / W. Lang, T.M. Block, R. Zander// Clin. Chim. Acta. 1998. - Vol. 273, №1. - P. 43-58.

142. Larsen F.S. Cerebral hyperemia and nitric oxide synthase in rats with ammonia-induced brain edema / F.S. Larsen, J. Gottstein, A.T. Blei // J. Hepatol. 2001. - Vol. 34, № 4. - P. 548-554.

143. Larsen F.S. Brain edema in liver failure: Basic physiologic principles and management / F.S. Larsen, J. Wendon // Liver Transpl. 2002. - Vol. 8, № 11.-P. 983-989.

144. Lester G.D. Effects of general anesthesia on myoelectric activity of the intestine in horses / G.D. Lester, J.R. Bolton, L.K. Cullen // Am. J. Vet. Res.1992.-Vol. 53.-P. 1553-1557.

145. Levenson S.M. The metabolism of carbon-labelled urea in the germfree rat / S.M. Levenson, L.V. Crowley, R.E. Horowitz // J. Biol. Chem. 1959. - Vol. 234, №8.-P. 201-202.

146. Leypoldt J.K. Solute transport across the peritoneal membrane / J.K. Leypoldt // J. Am. Soc. Nephrol. 2002. - Vol. 13. - P. S84-91.

147. Lie T.S. Successful treatment of hepatic coma by a new artificial liver device in the pig / T.S. Lie, V. Jung, F. Kachel // Res. Exp. Med. (Berl), 1985. -Vol.185.-P. 483-494.

148. Lockwood A.H. Cerebral glucose metabolism after portacaval shunting in the rat / A.H. Lockwood, M.D. Ginsberg, H.M. Roades //. J.Clin. Invest. 1986. -Vol.78.-P. 86-95.

149. Lockwood A.H. The dynamics of ammonia metabolism in man. Effects of Liver disease and hyperammonaemia / A.H. Lockwood, J.M. McDonald, R.E. Reiman // J.Clin. Invest. 1979. - Vol.63. - P. 449-460.

150. Mann H.B. On a test of whether one of two random variables is stochastically larger then the other / H.B. Mann, D.R. Whitney // Ann. Math. Stat 1947. - Vol.18. - P. 50-60.

151. Martin W. Deep hypothermia with barbiturate intoxication / W. Martin // Med. Klin. 1970.- Vol. 65.- P.24-29.

152. Master S. Cerebral blood flow and the development of ammonia-induced brain edema in rats after portacaval anastomosis / S. Master, J. Gottstein, A.T. Blei // Hepatology. 1999. - Vol. 30, №4. - P. 876-880.

153. Miller A. Therapeutic considerations of L-glutamine: a review of the literature / A. Miller // Altern. Med. Rev. 1999. - Vol.4, №4. - P. 239-248.

154. Modlin I.M. Evolution of the Diffuse Neuroendocrine System Clear Cells and Cloudy Origins / I.M. Modlin, M.C. Champaneria, J. Bornschein // Neuroendocrinology. - 2006. - Vol. 83. - P. 394-404.

155. Mohanachari V. Metabolic fate of ammonia in the rat after ethanol loading / V. Mohanachari, K.S. Reddy, IC. Indira // Toxicol Lett. 1984. - Vol. 20, № 2. -P.225-228.

156. Mohanachari V. Ethanol-induced alterations in rat hepatic ammonia metabolism / V. Mohanachari, K. Satyavelu, K. Reddy // Biochem Pharmacol. -1983.-Vol. 32, №18. -P. 2825-2827.

157. Mossberg S. Ammonia movement in the small intestine: preferential transport by the ileum / S. Mossberg, G. Ross // J. Clin. Invest. 1967. - Vol. 46, № 4. - P. 490-497.

158. Mutch B.J. Ammonia metabolism in exercise and fatigue: a review / B.J. Mutch, E.W. Banister// Med. Sci. Sports Exerc. 1983. - Vol. 15, № 1. - P. 4150.

159. Narasimhan L.R. Correation of breath ammonia with blood urea nitrogen and creatinine during hemodialysis / L.R. Narasimhan, W. Goodman, K.N. Patel // PNAS. 2001. - Vol.98. - P.4617-4621.

160. Natelson S. Microtechniques of Clinical Chemistry / S. Natelson. 2nd ed. -Springfield: Thomas, 1961. - 685 p.

161. Ogino K. Ammonia response to constant exercise: differences to the lactate response / K. Ogino, T. Kinugawa, S. Osaki // Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. -2000. Vol. 27, № 8. - P. 612-617.

162. Olde Damink S.W. Interorgan ammonia metabolism in liver failure / S.W. Olde Damink, N.E. Deutz, C.H. Dejong // Neurochem. Int. 1999. - Vol. 41, № 2/3.-P. 177-188.

163. Ott P. Cerebral metabolic disturbances in the brain during acute liver failure: From hyperammonemia to energy failure and proteolysis / P. Ott, O. Clemmesen, F.S. Larssen // Neurochem. Internat. 2005. - Vol. 47, № 1/2 . -P. 13-18.

164. Palmer B.F. Effectiveness of hemodialysis in the extracorporeal therapy of phénobarbital overdose / B.F. Palmer // Am. J. Kidney. Dis. 2000. - Vol. 36, № 3. - P. 640-643.

165. Paraíso V. Portosystemic encephalopathy in a patient treated with peritoneal dialysis / V. Paraíso, M. Francos, F. Rodríguez-Berzosa // Am. J. Kidney Dis. -2007. Vol. 49, №6. - P. 854-858.

166. Pamas J. Die physiologische und klinische Bedeutung des Blutammoniaks / J. Parnas, A. Klisiecki // Bioch.Z. 1926. -Bd 173. - S.224-234.

167. Peters J.P., Van Slyke D.D. Quantitative clinical chemistry. II. Methods / J.P. Peters, D.D. Van Slyke. Baltimore: Williams and Wilkins Co., 1932. - 1264 p.

168. Pichili V.B. Inhibition of glutamine transport into mitochondria protects astrocytes from ammonia toxicity / V.B. Pichili, K.V. Rao, A.R. Jayakumar // Glia. 2007. - Vol.55, № 8. - P. 801-809.

169. Plauth M. Lactulose or paromonomycin do not affect ammonia generation in the isolated perfused rat small intestine / M. Plauth, A. Raíble, T.A. Graser // Z. Gastroenterol. 1994. - Bd 32, № 3. - S. 141-145.

170. Plonka A.J. Effects of enteral and intravenous antimicrobial treatment on survival following intestinal ischemia in rats / A.J. Plonka, J.J. Schentag, S. Messinger // J. Surg. Res. 1989. - Vol. 46, № 3. - P. 216-220.

171. Puppo F. Effect of single oral dose of phenobarbiton on lymphocyte blastogenic response in man / F. Puppo, G.F. Adami, G. Corsini // Br. J. Anaesth. 1980.-Vol. 52.-P. 1205-1207.

172. Remke H. Krankheits-prävention durch Ernährung / H. Remke. Stuttgart: Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft mbH, 1998. - 365 s.

173. Richter D. The ammonia and glutamine content of the brain / D. Richter, R.M.C. Dawson//J. Biol. Chem. 1948. - Vol. 176.-P. 1199-1210.

174. Sacco S. Medical treatment of intracerebral hemorrhage / S. Sacco, C. Marini, A. Carolei // Neurol. Sei. 2004. - Vol. 25. - P. 6-9.

175. Salah K.M. The effects of general anaesthetics on glucose and phosphate transport across the membrane of the human erythrocyte / K.M. Salah, K.K. Hampton, J.B. Findlay // Biochim. Biophys. Acta. 1982. - Vol. 688. - P. 163168.

176. Schenker S. Studies on the intracerebral toxicity of ammonia / S. Schenker, D. McCandless, E. Brophy // J.Clin. Invest. 1967. - Vol.46, № 5. - P. 838-848.

177. Schwab S. Barbiturate coma in severe hemispheric stroke: useful or obsolete? / S. Schwab, M. Spranger, S. Schwarz//Neurology. 1997. - Vol.48, № 6. -P.1608-1613.

178. Schwarz S. Fulminant progression of hyperammonaemic encephalopathy after treatment with valproate in a patient with uterosigmostomy / S. Schwarz, D. Georgiadis, S. Schwab // J.Neurosurg. Psychiatry. 2002. - Vol.73 - P. 86 — 95.

179. Shimamoto C. Breath and blood ammonia in liver cirrhosis / C. Shimamoto, I. Hirata, K. Katsu // Hepatogastroenterology. 2000. - Vol.47, № 32. - 443445.11

180. Sibson N. R. In vivo C NMR measurements of cerebral glutamine synthesisas evidence for glutamate-glutamine cycling / N.R. Sibson, A. Dhankhar, G.F.

181. Mason // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997. -Vol. 94. - P. 2699-2704.1 1

182. Sibson N. R. In vivo C NMR measurement of neurotransmitter glutamate cycling, anaplerosis and TCA cycle flux in rat brain during 2- C. glucose infusion / N.R. Sibson, G.F. Mason // J. Neurochem. 2001. - Vol. 76, № 4. - P. 975-989.

183. Singh S.K. An apical permeability barrier to NH3/NH44" in isolated, perfused colonic crypts / S.K. Singh, H.J. Binder, J.P. Geibel // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1995. - Vol. 92. - P. 11573-11577.

184. Soeters, P.B. Ammonia and glutamine metabolism of the intestine. The effect of lactulose and neomycin / P.B. Soeters, P.A. van Leeuwen // Infusionster. Klin. Ernahr. 1986. -Bd 13. - S. 186-190.

185. Solga S.F. Probiotics can treat hepatic encephalopathy / S.F. Solga // Med. Hypotheses. 2003. - Vol.61, № 2. - P.307-313.

186. Stevens C.E. Contributions of Microbes in Vertebrate Gastrointestinal Tract to Production and Conservation of Nutrients / C.E. Stevens, I.D. Hume // Physiol. Rev. 1998. - Vol.78. - P. 393-427.

187. Sugarbaker S.P. The role of the small intestine in ammonia production after gastric blood administration / S.P. Sugarbaker, A. Revhaug, D.W. Wilmore // Ann. Surg. 1987. - Vol.206, №1. - P. 5-17.

188. Szerb J.C. Effect of ammonium ions on synaptic transmittion in the mammalian central nervous system / J.C. Szerb, R.F. Butterworth // Progr. Neurobiol. 1992.-Vol. 39, №2-P. 135-153.

189. Thielscher H.H. Blood gases and pH value in swine anesthetized with barbiturate / H.H. Thielscher, M. Steinhardt, N. Schwarze // Dtsch. Tierarztl. Wochenschr. 1994. - Vol. 101, Is. 5. - P. 199-201.

190. Tigerman H. Glutamine, glutamic acid, ammonia administration, and tissue glutamine / H. Tigerman, R. MacVicar // J. Biol. Chem. 1951. - Vol. 189. -P. 793-799.

191. Topping D. Studies on lipid and carbohydrate metabolism, substrate cycling, and perfusate amino acids / D. Topping, D.G. Clark, G.B. Storer // Biochem. J. -1979.-Vol. 184.-P. 97-106.

192. Toxicological profile for ammonia. — Syracuse: Syracuse Research Corporation, 1990. 125 s.

193. Tygstrup N. The mechanism of the fructose effect on the ethanol metabolism of the human liver / N. Tygstrup, K. Winkler, F. Ludquist // J. Clin. Invest. -1965.-Vol. 44, №5.-P. 817-830.

194. Van de Poll M. Renal metabolism of amino acids: its role in interorgan amino acid exchange / M. Van de Poll, P.B. Soeters, M. Deutz // Am. J. Clin. -Nutr. 2004. - Vol.79. - P. 185-197.

195. Van Leeuwen P.A. Hepatic failure and coma after liver resection is reversed by manipulation of gut contents: the role of endotoxin / P.A. Van Leeuwen, R.W. Hong, J.D. Rounds//Surgery. 1991.-Vol. 110, №2.-P. 174-175.

196. Van Slyke D. The effect of urine volume on urine excretion / D. Van Slyke //J. Clin. Invest. 1947. - Vol.26. - P. 1159-1167.

197. Velioglu S.K. Non-convulsive status epilepticus secondary to valproic acid-induced hyperammonemic encephalopathy / S.K. Velioglu, S. Gazioglu // Acta Neurol. Scand. 2007. - Vol.116, №2. - P. 128-132.

198. Vemuri M.C. Intestinal ammonia metabolism in ethanolic rats / M.C. Vemuri, K. Indira // Biochem Med Metab Biol. 1986. - Vol.36, №1. - P.8-13.

199. Vince A. Generation of ammonia from non-urea sources in a faecal incubation system / A. Vince, P.F. Down, J. Murison // Clin. Sci. Mol. Med. -1976.-Vol. 51.-P. 313-322.

200. Vince A. Effect of lactulose on ammonia production in a fecal incubation system / A. Vince, M. Killingley, O.M. Wrong // Gastroenterology. 1978. -Vol. 74. - P. 544 - 549.

201. Walsh P.J. Piscine insights into comparisons of anoxia tolerance, ammonia toxicity, stroke and hepatic encephalopathy / P.J. Walsh, C.M. Veauvy, M.D. McDonald // Comp. Biochem. Physiol. A. Mol. Integr. Physiol. 2007. - Vol. 147, №2.-P. 332-342.

202. Warren K.S. Differential effect of fixed acid and carbon dioxide on ammonia toxicity / K.S. Warren, S. Schenker // Am. J. Physiol. 1962. - Vol. 203. - P. 903-906.

203. Warren K.S. Hypoxia and ammonia toxicity / K.S. Warren, S. Schenker // Am. J. Physiol. 1960. - Vol. 199. - P. 1105-1108.

204. Watanabe A. Hyperammonemia induced in rats by inhalation anesthesia with ether / A. Watanabe, Y. Kuwabara // Res. Exp. Med. (Berl). 1994. - Vol.194, № 3. - P. 157-164.

205. Weber F.L., Friedman D.W., Fresard K.M. Ammonia production from intraluminal amino acids in canine jejunum / F.L. Weber, D.W. Friedman, K.M. Fresard // Am. J. Physiol. 1988. - Vol. 254, № 2. - P. 264-268.

206. Weissenborn K. Neurological and neuropsychiatric syndromes associated with liver disease // AIDS. 2005. - Vol.19, Suppl 3. - P. 93-98.

207. WilmoreD.W. Final Summary: Symposium on Glutamine / D.W. Wilmore // J. Nutrition. 2001. - Vol.131. - P. 2596S-2602S.

208. Wilson E. Severe hypotension and hypothermia caused by acute ethanol toxicity / E. Wilson, W.S. Waring // Emerg. Med. J. 2007. - Vol. 24. - P. - 7.

209. Windmueller G. Respiratory fuels and nitrogen metabolism in vivo in small intestine of fed rats / G. Windmueller, A. Spaeth // J. Biol. Chem. 1980. - Vol. 255, №1-P. 107-112.

210. Witte M.H. Alcohol, hepatic sinusoidal microcirculation, and chronic liver disease / M.H. Witte, P. Borgs, D.L. Way // Alcohol. 1992. - Vol. 9. - P.473-480.

211. Whitehead T.P. A method for the determination of glutamine in cerebrospinal fluid and the results in hepatic coma / T.P. Whitehead, S.R.F. Whittaker // J. Clin. Path. 1955. - Vol. 8. - P. 81-84.

212. Winkler K. Determination of respiratory gases by paramagnetic oxygen analyzer and carbon dioxide catharometer / K. Winkler, N. Tygstrup // Scand. J. Clin. Lab. Invest. 1958. - Vol.10. - P. 221 - 223.

213. Wu R.S. Hypoxia: from molecular responses to ecosystem responses / R.S. Wu // Mar. Pollut. Bull. 2002. - Vol.45. - P. 35-45.

214. Yang D. Integrative physiology of splanchnic glutamine and ammonium metabolism / D. Yang, J.W. Hazey, F. David // Am. J. Endocrinol. Metab. -2000. Vol.278. - P. E469-E476.

215. Yoshida S. Effect of glutamine supplement and hepatectomy on DNA and protein synthesis in the remain liver / S. Yoshida // J. Surg. Res. 1995. - Vol. 59.-P. 475-489.

216. Zeneroli M.L. Hepatic encephalopathy. Experimental studies in a rat model of fulminant hepatic failure / M.L. Zeneroli // J. Hepatol. 1985. - Vol.1, №3. -P. 301-311.

217. Zieve L. Brain methanethiol and ammonia concentrations in experimental hepatic coma and coma induced by injections of various combinations of these substances / L. Zieve, W.M. Doizaki, C. Lyftogt // J. Lab. Clin. Med. 1984. -Vol. 104.-P. 655-664.

218. Zieve L. Valproic acid induction of coma in rats: synergism with NHV1" and pentobarbital / L. Zieve, C. Lyftogt // Metab. Brain. Dis. 1989. - Vol.4, № 2. -P. 105-111.

219. Zwingmann C. Selective alteration of brain osmolytes in acute liver failure: protective effect of mild hypothermia / C. Zwingmann, N. Chatauret, C. Rosr // Brain. Res. 2004. - Vol. 999, №1. - P. 118-123.