Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Изучение сенсибилизирующих свойств дезинфекционных средств и разработка системы их гигиенической оценки

р.? . .

министерство здравоохранения рсфср второй московский ордена ленина государственный медицинский институт имени н.и.1шрогова

На правах рукописи

мурзич александр шдамироаи

УДК 515.28.065:616-056.43*614.484

изучение сенсибилизирующих свойств дезинфекционных средств и разработка системы их гигиенической оценки

14.00.36 - аллергология я иммунология 14.00.07 - гигиена

АВТОРЕФЕРАТ.

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Ыосква 1991

Работа выполнена во Всесоюзном научно-исследовательском институте профилактической токсикологии и дезинфекции Министерства здравоохранения СССР

Научные руководители: доктор биологических наук, профессор В.Н.Федосеева Заслуженный деятель науки РСФСР,

доктор медицинских наук, профессор Л.П.Лярский

.Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук Л.А.Дуева кандидат медицинских наук А. Д. Черноусо в

I

Ведущее учреждение - Центральный научно-исследовательский

институт вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова АМН СССР

Защита диссертации состоится "_и _1991 г.

в _ часов на заседании специализированного совета К 084.14.06

при 2-м Московском ордена Ле2ина государственном институте ии. Н.И.Лирогова по адресу: 1174$7, Москва, ул. Островитянова, I

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института Автореферат разослан "_" __ 1991 г.

Ученый секретарь " " специализированного совета, доцент

Т.Е.Куэнецова

ОБШАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. В современных условиях трудно найти

человека, который постоянно не сталкивался бы о химичесхиии препаратами на производстве и в быту. Среди этих средств химии значительный удельный вес занимает дезинфекционные средства (ДС), которые широко использувтся не только в целях кеспецифичесхой профилактики инфекционных заболеваний для уничтожения патогенных микроорганизмов, насекомых и грызунов, имевших эпидемиологическое значение, но и для улучшения санитарно-гигиенических условий труда и отдыха населения (инсектицидные, репеллентнье и др. препараты), для повдержания чистоты в жилишах (мосаие, чистящие, отбеливав-вив средства). Для получения высоких биоцмдных эффектов в состав рецептур ДС вводятся высокоактивные, в той иди иной степени токсичные вещества из различных групп химических соединений (?СС, ПАВ, ЧАС, альдегиды, фталаты и др.). Особо схедувт подчеркнуть, что наблюдающийся в ряде случаев интеркиттиружщиИ характер эазхв^-ствия ДС с разовым действием пиковых концентраций мотает оказывать неблагоприятное влияние на функции различных систем оргаяизка. Иммунная систеуа (ИС) занимает при этом одно из ведугаих мест. ЛЗсе вышеуказанное требует особого внимания при обосновании регламентов применения ДС не только лицами, имеющими с ними профессиональный контакт, но и используищими эти препараты для бытовых целей.

В больвинстве случаев использование ДС предполагает прямее нанесение препарата на кожу (кожные антисептические, репеалеятнае, инсектицидно-репеллентные и др. средства). При определенных условиях этики препаратами обрабатывается "о"Де*да людей (репеляеятнве и др.), что так же сопровождается попажнием актнвно-деЯствуяагих веществ (АДВ) применяемых композиций на важный похров. Злядоств-жения необходимого эпидемиологического -в санитарно-гигиенического

- 2 - . ; зффехта бывает необходима многократное (несколько раз в день) или длительное (несколько недел;>, лет) использование тех или иных ДС. Эти обстоятельства требуют особое внимания и настороженности, так как длительное воздействие химических веществ, особенно при кожном пути поступления, в организм, часто формирует развитее гиперчувст-внтельности замедленного типа (ГЗТ), проявляющейся в виде контактного дерматите^ Поэтому многократное, „яительное воздействие химически актиг'ых компонентой ДС может приводить к истощению адаптационных возможностей организма и, в результате этего - к развитию аллергических болезней, повышению общей заболеваемости.

Нееногря на определенные достижения теоретический и практической • медицины в области изучения влияния химических веществ на организм человека, решение многих задач как в научном, так и в прикладном направлекигас остается актуальным. В последние года накоплен большой фактический материал, свидетельствующий о ключевой роли ЙС в развитии патологических процессов. Установлено, что нарунение функции иммунологической гадаты организма клинически проявляйся в виде самых разных заболеваний (Р.В.Петров с соазт-., 1937, 1990; Я.В.Ковальчук с соавт., ,1988; В.Н.Федосеева, 1990 и

■ др.). В последние десятилетия в большинстве стран мира отмечается значительный рост аллергических заболеваний, что по данным ряда авторов (Г.И.Виноградов, 1985; 3.А.Фрадкин, 1990 и др.) во нноген ввязано с внедрение л химии в различные с^еры деятельности человека., вга»чая и быт. В связи е втии большой интерес представляет неумение иммунного статуса лиц, использующих ДС, ибо до яастонле-

• го времени иикукелогическив критерии, ь-вволявцие оценивать кеблаговррятнее действие ДС на организм не разработаны. Решение

■ ©той'проблема.позволит полноценно к своевременно выявлять сильные иммукетэксикангн на стадии доклинической апробации а, еледова-

тельно, предотвратить возможность проявления у. лиц, применяющих ДС, возникновение икмунодефицитных состояний, лежащих в основе онкологических, аллергических и других заболеваний - внести существенный вклад э проблему их профилактики.

Цель работы. Целью работн явилось изучение аллергоопасноети ДС и разработка критериев оценки сенсибилизирующих свойств ДС.

Задачи исследования:

1. Изу«чть возможность формирования сенсибилизации г ДС при котаом пути поступления их в организм.

2. Провести экспериментальное изучение аллергенных озойств ДС с учетом зедуцего типа сенсибилизации.

3. Изучить состояние показателей икнунного статуса практически здоровых лиц, применивших ДС и не имеояих контакта с ДС (контрольная группа).

4. Изучить возможность формирования сенсибилизации при разных условиях воздействия ДС на кожные позсровн.

5. Сопоставить клинические проявления амортизации организма со сдвигами показателей мкмуинрго статуса добровольцев з зависимости от рекомендованных режимов воздействия препаратов.

6. Разработать систему критериев для оценки сенсибилязкруа-аего действия ДС.

Научная новизна работы.

Разработаны и внедрены специальные аллергоасгячесхяе анкета для обсяе. .ования отдельных групп н&селеяия, применяющих ДС. Внедрение этих, анкет позволило, с одной стороны, выявить лнц с наруиени-ями функционирования ИС и сформулировать рекомендации по ограничении применения ими ДС, а с другой - снизить '¿лек развитая; или обострения аллергопатологии, получить максикальнуэ информацию о побочном действии 1С и, в совокупности с клиническими, иммунологи-

- * -

ческимк признаками, обосновать заключение о сенсибилизирующем их действии.

Впервые на клиническом и экспериментальном материале показано сенсибилизирующее действие ряда отечественных 1С с учетом направленности их воздействия на определенные звенья ИС. Выявлен ведущий тип сенсибилизации ДС - гиперчувствительность замедленного типа, сопровождающаяся формированием контактных дерматитов. Установлено, что развитие иммунотоксичесхих эффектов зависит от режимов применения ДС, Направленность действия изученных препаратов отмечена как на Т-, так и на 3-звенья иммунной системы.

Разработана система оценки аллергенных свойств ДС в эксперименте, позволяющая выявить сенсибилизирующие свойства новых композиций ДС а ингредиентов, их составляющих, на доклиническом этапе изучения. Рекомендована система тестов для оценки сенсибилизирующих свойств ДС в натурных условиях.

Практическая значимость. Показано, что изученные едкные антисептические средства (КАС) обладают сенсибилизирующими свойствами,

могу» стимулировать формирование контактных дерматитов. Выявлен-

<

иое влияние ДС на икиуннув систему добровольцев позволило рекомендовать включение анализа аллергоопасности ДС в комплекс клинико-лабораторных исследований новых перспективных дезинфекционных препаратов.

?азработаиа система тестов для оценки опасности применения ДС по аллергологическмм и иммунологическим параметрам, которая дает возможность проводить отбор ДС на доклиническом этапе изучения, сократить сроки и объем «тих исследований и материальных затрат на них.

Регламентирование применения ДС с учетом сенсибилизирующего

- 5 -

действия снижает риск развития иммунопатологии.

Разработанная схем$ изучения влияния ДС на КС вхлючена в инструктивно-методические рекомендации по гигиенической оценке аллергоопасности применения 1С в практике.

Внедрение результатов. Результаты исследований вклочены в методические рекомендации "Гигиеническая оценка сенсибилизирующих свойств химических загрязнителей окружаодзй среды", утвержденных Проблемной комиссией сосзниго значения "Научные основы гигиены окружающей среда". . о

Результаты исследований использованы в "Методических указаниях по применению ярсектидадно-репеллентного препарата в аэрозольной упаковке "Пергезоль", утвержденных Комиссией по регламентации применения дезинфекционных средств Минздрава СССР (март 19В7 г.).

Результаты исследований учтены при разработке методических рекомендаций по применению 1,0$ йодопироновой мази в качестве антисептического средства.

Проведенные исследования позволили вынести ка защиту следующие положения:

1. ДС обладает.иммуномодулирующим действием, способны вызывать состояние сенсибилизации, следствием которого может быть формирование контактного аллергического дерматита.

2. Характер и уровень развития аляерго- и иммунопатологии зависит от химического класса адв дезинфекционных средств.

3. Изучаемые показатели иммунного статуса и индексные показатели является критериями высокой чувствительности при оценке степени риска развития иммунопатологии.

Установлена прямая зависимость развита? аллергических состояний от режимов применения ДС. Многократное, длительное применение КАС вызывает формирование ГЗТ.

5. Влияние 1С на ИС 1.зобходимо обязательно учитывать при их гигиенической оценке и внедрении в практику.

Апробация работы. Основные положения работы доложены на

конференции "Актуальные проблемы фармакологии, фармации и фармакотерапии" (Москва, 1988), ка Всесоюзной конференции актуальные проблема гигиеничес-ксго регламентирования химических факторов окружающей среди" (Пермь, 1939), на конференции "Актуальные вопросы токсикологии, гигиены применения пестицидов и полимерных материалов в народном хозяйстве" (Киев, 1990), на Ученом Совете Всесоюзного КИИ профилактической токсикологии и дезинфекции МЗ СССР при апробации диссертационной работы'(июнь, 1990).

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 233.

страницах мапинописи и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов к методов, 2 глав собственных исследований, заключения, выводов, указателя литературы, прилс .ения. Указатель литературы включает 351 источник (ЗДС отечественных и 109 зарубежных). Текст диссертации содержит 21 'таблицу и 17 рисунков.

содержание работы

Г. Материалы и методы исследования.

Исследования были проведены в условиях эксперимента и в натурных условиях.

. Экспериментальные исследования осуществляли на мышах-самцах линии СБА, массой тела 20-25 г (200 голов). В условиях эксперимента изучали реакцию ГЗТ. Животным вводил« изучаемые ДС в полном адъюванте Фрей^да (П№>. Для работы использовали ГМФ фирмы "Со1-ЬюсЬет? Вводимую дозу рассчитывали на основании рекомендованных норм расходе, препаратов, разреваяиуп - подбирали на интактных

животных. Сенсибилирировали б групп животных - по ТО голов в каждой группе -'Следующими препаратами: "Циклимид" (амфотервый ПАЗ); "Йодопироновой мазью" (йодофор); гмбитан Скатиокный ПАВ); иксек-тицидно-репеллентный состав (ИРС) "Оксазоль" (смесь синтетического .пиретроида, фталатов и алифатических эфироз); б-я группа - иктакт-ные животные. Интенсивность реакции ГВТ оценивали по разнице в весе лап опытных и контрольных животных (АЛ.Черноусоз с соавт., 1987), Полученные данные обрабатывали путем вычисления доверительного интервь.а по Стьюденту.

В натурных условиях изучали 4 КАС: жидкое мыло 'Циклимид", мази "Яодопироновая" и ХГ|?Г (хлоргидгат децилового эфира глицина)', спкртовый раствбр гибитана (хлоргексидина биглюконат), е также ИРС "Оксазоль". - "

Для участия в натук 1ых испытаниях по специально разработанной анкете отбирали практически здоровых лиц с отсутствием аллергических заболеваний в анамнезе, без реакций на мытьё рук горячей и холодной водой с применением и без использования синтетических моющих средств, без выраженного красного дермографизма и т.п. За время работы обсл"довали 250 человек, из них практически здоровых отобрали 125: 50 женщин, в возрасте 25-40 лет, жительниц Москвы (они принимали участие в натурных испытаниях КАС) и 75 мужчин -военнослужащих 1-го года службы (участники натурных испытаний препарата "Окгчзоль").

Для изучения опасности применения средства "Сксазоль" сформировали 5 . рупп (4 опытных и I контрольная) по 15 человек в каждой. Добровольцы опытных групп носили обработанное с наружной стороны обмунвирование (китель и брюки). Обработку одежды путем её импрегнации проводили в соответствии с рекомендованными норками расхода: 50-70 и 100-150 г/5м^ (табл. I). 3 процессе испытаний предусмотри-

Таблица I

Условия проведения натурных испытаний по оценке опасности применения и "Оксазоль"

Препарат, Число Время воздействия химичес- доброволь-кий класс цев

Сроки обследования (дни)

10

Ю

10

10

5

1. Спирт (контроль

для НАС)

2. Гибктан (катион-

нкй ПАВ)

3. хгдэг

(катион— ный ПАВ)

4. "Цикли-

мид". ' (вмфотерный ПАВ) "йодопк-роновая" 10 казь (йодофо-ры)

6. "Оксзоль"

. (синтети--10

ческий 15 пиретро-ид, Т5 . ■ - фталаты, . адифати-^ . ческие . эфиры)

7. Контроль 15 для ИРС • "Окса-

. золь"

2 глин, х 6 раз в день х 15 дней

2 мин.х 6 раз в день х 10 дней

I мин х б раз в день х 10 дней

1 мгац х 6 раз в день х 15 дней

I мин. х 5 раз в день х 10 дней

16 чао в день х « 15 дней

16 час в день х 15 дней

16 час в день х V 30 .дней

16 час в день х - 30 дней

16 час в день х ■• 45 дней .

фон, о, 10, 15

фон, 5, 10

фок, 10, восстановительный период (7 дней)

фон, 5, 10, 15, восстановительный период (7 дней)

фон, 5, 10

фон, 15, восстановительный период (15 дней)

фон, 15, восстановительный период (15 дней)

фон, 15, 30, восстановительный период (30 дней)

фок, 15, 30, восстановительный период (30 дней)

фон, 15, 30, 45

_ о _

вали у лиц 3 и Ч групп возможность повт'брн'оП импрегнации той же' одежды. • -

Схема проведения натурных испытаний ксжных-антииептически* средств и препарата "Оксазоль" приведена в таблице I.

Оценку местных проявлений неблагоприятного воздействия изучаемых ДС проводили путем ежедневного опроса и осмотра участников натурных испытаний с заполнением специально разработанных анкет, в которых отмечали локализпцию патологического процесса, время возникновения и исчезновения субъективных и объективных признаков воздействия, их характер и интенсивность. Осмотр добровольцев осуществляли врачи-специалисты: терапевт, отоларинголог, дерматолог при консультаций аллерголога. Выявление сенсибилизирует свойств "Оксазоля" проводили путем постановки е£л'лергологической диагностик ческой капельной пробы w помощью аппликации нативиого препарата на неповрежденную коку. Учет реакции осуществляли через 20 мику?, ¿4 и 48 часов в соответствии с общепринятыми критериями оценки кожной аллергической реакции (А.Д.Адо\,

Оценку функции КС проводили путем комплексного изучения Т-- и' В-звеньев.- Объех-зм исследования слутилз [Териферическяя кровь. >4ононуклеарные клетки выделяли путем' ямзкея. эритроцитов гемолити'-ческой жидкостью по методу, предпоженшяиз? F.В .Петровым с соавт. С198».

Для идентификации Т-лимфоцитов СТ-зпЛ' применяли тест спонтан--ного Е-розеткообразования. С целью. изучения; Е-реиепторной активности npv.меняли нагрузочный тест с теофйзогином,- определяя теофил"--лин-резистентные (ТРК) и теофиллинчувстВительний (ТЧК) клетки (В.Н.Федосеева с соавт., 1989). Использовали теофиллин фирмы "'Serva".

В-звено ИС оценивали по реакции М-РОК и содержания нммуногло-

- ГО -

булинов 1дМ, Iуф сычоротки крови, секреторного иммуноглобу-

лина и слюны сл.). Концентрацию иммуноглобулинов определяли методом радиальной иму/нодиффузии в агаре ( Marvca.nl et

лина

и

слюны

в

а1.. я модификации Х.Фрммеля, Т988) с использованием антксывороток и стандартов НИИВиС им. И.И.Мечникова.

Статистическую обработку полученных результатов проводили путем определения достоверности полученных результатов по методу Фишера-Стыодента, 2-х факторного дисперсионного и ковариационного анализов (П.Ф.Рохицкий, 1973), вычисления степени иммунологических нарушений по выбранным для изучения параметрам КС (А.К.Устиненко с соавт., 1°в8) и определения индексных показателей иммунного статуса добровольцев (А .М.Земсков, 1986; Р.В.Пе:л:ов с соавт., 1990): лейко-Т-клеточный индекс (ЛТИ) - отношение количества лейкоцитов к количеству Т-л.- в I мкл крови; лейко-В-клеточный индекс (ЛиИ); лейко-"нудь"~хлстоный индекс (ЯОй); отношение Т-л. к В-л. (Т/В); индекс супрессии (Т/ГЧК); отношение концентрации иммуноглобулинов отдельных классов к содержанию В-л. в Т мкл. крови (В/ТдА, В/ТоМ,

2. Результаты собственных исследований

Результаты экспериментальных исследований

Все изученные нами препараты прошли полнуп токсикологическую оценку и были разрешены Фармкомитетом N3 СССР и Комиссией по регламентации применения дезинфекционных средств МЗ СССР для ограниченных практических испытаний с привлечением добровольцев.

Особо следует подчеркнуть, что все изученные препараты по данным токсикологических исследований в рекомендованных режимах применения не вызывали в эксперименте реакций анафилактического типа, б связи с чем были нами проверены на способность вызывать 1У тип

повышенной чувствительности - гкперчувстзитсг.ьность замедленного типа (по Geil р.с-,н. » СоошЪз R.H.A, t ja?5). Такой подход мы считаем справедливым по той причине, что многие химические вещества при контакте с кожей могут вызывать аллергические реакции по типу ГЗТ.

При экспериментальном изучении кожных антисептиков и инсекти-цидно-репеллентного средства максимальная реакция в зиде увеличения веса лап была получена у животных, сенсибилизированных

лимидом

'одопироновой" мазью и гибитаком (рис.1).

Рис. Í Влияние дезинфекционных средств на развитие

реакции гиперчувствительности замедленного типа ( М + м )

И?

/3 16

Ti).. 12 -10 -8 6-2--

хх

X

íh

XX

Примечания:

хх ИР - индекс реакции,

животные сенсибилизированы: I - "Цикликидои", 2 - "Яодо-пироковой" мазью, 3 - гиби-таном, 4 - "Оксазолем" '(норка расхода 50-70 г/5м2), 5 - "Окоазолем" (норма рас- хода 100-750 г/5н2), б -контрольная группа х - p-í.0,05; хх - р<0,0Т

L

L

Индексы реакций по этим препаратам были соответственно равны: 15,0+2,Ц- 14,0+2,2%; 13,2+1,9^ (контрольная группа - 5,1+1,2?). Степень достоверности различий по всем группам животных при сравнении с контрольной группой - р<£С,01. Средние показатели ИР идя 'Тксазоля" в минимально рекомендованной дозе оставили 9,5+1,7? (р<0,05), а для максимальной - 6,6+1,5? (р>0,05).

Таким образом, сенсибилизация животных изучаемыми КАС и препаратом "Оксазоль1' (минимальная доза) дала возможность сделать заключение о развитии ТЗТ, Д&каде прпарагы при их использовании людьми и при наличии контакта с кожей могут способствовать развитию аналогичного типа чувствительности (ГЗТ), опосредованного ГЗТ-оф-фекторами яммункого ответа.

Результат» натурных испытаний дезинсекционных средств

На основании данных анкетирования нами из 230 обследованных человек было признано практически здоровыми 125 добровольцев, а у Г05 были найдены различные аллергические заболевания или склонность к их развитию. Таким образом, все участники натурных испытаний ДС отрицали наличие аллергозаболеваний в анамнезе, у них отсутствовали неадекватные реакции КС на кебактериальние Сбытовые), пищевые, химические и др. аллергены.

Учктив&я необходимость длительного периода наблюдения за участниками практических испытаний препарат "Оксазоль" (45 дней), во время которого могли происходить естественные изменения показателей иммунного статуса, то для выявления размера этих колебаний' нами бпа сформирована контрольная труппа. За все время наблюдения за военнослужащими, включенными в эту группу, аллергических и инфекционных заболеваний у них зарегистрировано не было. Постановка аллергологическсй кожной пробы (в качестве "плацебо" использовали вазелиновое масло) показала отсутствие положительных результатов у всех добровольцев. В процессе динамического наблюдения было установлено достоверное увеличение средних значений числа лейкоцитов (с исходного 4,76+0,25 до 6.38+0,63 тыс. в I мкл крови на .45 день, р<0,05). При этом средние значения абсолютного содержания основных популяций лимфоцитов ОГ-,В-, 0-я.) за весь период наблюдения достоверно не отличались от фоновых значений.

Для определения размера колебаний показателей иммунного статуса в ограниченной группе людей за небольшой промежуток времени нами была сформирована контрольная для КАС группа.18 участницы применяли в качестве контрольного тест-средства 70° этиловый спирт, нанося его на кожу предплечий. Учитывая, что в данной концентрации спирт обладает бактерицидным действием, наличием дубящих свойств, то его накожное применение вызывало у добровольцев легкуп сухость кожи, проходивяув после применения косметических кремов. Проведенные изучения показателей иммунного статуса показали отсутствие о

статистически значимых изменений при сравнении с фоновыми значениями. При сравнении индексных показателей иммунной системы также отсутствовали статистически достоверные изменения как по сравнению с исходнйми, так и со значениями предыдущего дня обследования (табл. 2).

Таблица 2

Состояние индексных показателей иммунного статуса при динамическом обследовании лиц контрольной для КАС группа ( М + м; п - 10 5

Сроки обследования "(дни) Показатель -

фон 5 то 15

лти 5,5+0,5- 5,6+0,4 4,9+0,2 5,3+0,3

ЛТРИ 7,6+0,% 7,9+0,4 6,7+0,4 6,6+0,2

ЛТЧЙ 20,0+0,6 21,6+1,7 18,2+7,2 19,9+1,1

1ВИ 30,6+1,5 29,3+1',9 29,2+2,4 20,0+2,1

леи 16,1+0,9 15,6+1,2 14,5+0,9 14,0+7, Г.

Т/3 5,6+0,2 5,1+0,3 6,0+0,3 5,3+0,3

тдчк 3,6f0.it 3,6+0,3 З.'+О.З 3,6+0,3

ТРК/ГЧК 2,7+0,2 2."Я,2 2,6+0,3 2,7+0,4

В/Т^А 1,2+0,1 1,2+0,1. 1,3+0,2 1,3+0 ¿2.

В/ГдН 1,2+0,2 Г, 7+0,2 1,9+0,4 Т, 4+0,2

в/ЭД 0,2+0,01 0,1+0,02 0,2+0,02 0,1+0,02 .

Во всех случаях р> 0,05 . . Л •

- Ii» -

Данное обстоятельство и послужило, основой заключения, что в ограниченной, специально подобранной группе лодей в течение "3-х недельного периода наблюдения размах показателей иммунного статуса, не превыпает пределов случайных колебаний и проходит е границах физиологического гомелстаза. Именно поэтому мы сравнивали в дальнейшем полученные изменения показателей иммунного статуса у лиц опытных групп со средними значениями исходных показателей, а не со средними значениями контрольной группа. Зтот подход, с напей точки зрения, является более точным.

Проведенный анализ данных анкетного опроса и объективного осмотра участников натурных испытаний ДС показал, что:

- при практических испытаниях "Оксазоля" признаки неблагоприятного воздействия препарата у всех добровольцев отсутствовали. При постановке коЪтрессной аллергологической пробы у 2-х человек (норма расхода препарата 50-70 г/5м2) были отмечены легкий зуд л гиперемия кожи в месте постановки пробы (через 2*» часа). Данные признаки сохранялись в течение последующих 5 дней;

- применение» 0,5% спиртового раствора гиоитана у всех 10 добровольцев сопровождалось формированием аллергического контактного дерматита. Ухе в первый день испытаний все участники предъявляли яалобы на сухость кожи, четверо - на гиперемию, трое - на появление высыпаний и б - на сильный зуд. Все эти признаки аллерги-зации ф]эганизма возникали после 3-5-кратного нанесения средства

и имели четкую локализацию (место контакта препарата с кожей). В силу ярко выраженных клинических проявлений аллергического контактного дерматита (гиперемия, массивные отеки, высыпания,, зуд) к 5 дню от начала испытания пять добровольцев (из ТО) были отстЕанены от дальнейшего участия в оценке опасности применения гибитана, оставшиеся - применяли препарат весь период, однако, признаки

контактного дерматита (менее выраженные1) у них сохранялись до последнего дня применения средства;

- использование добровольцами "йодопироновой" мази у 4-х участниц испытаний сопровождалось ощущунием сухости кота. Других жалоб при этом отмечено не было. При направлении препарата на ограниченные практические испытания на клинических базах мы попросили обратить особое внимание на местные признаки воздействия гази на кожный покров. Б процессе испытаний у Г9 человек (из 94, применявших маг-ь) были выявлены признаки развивающегося аллергического

Ъ г

контактного дерматита чу всех этих лиц отсутствовали гиперреактивность на препараты йода), а у 2-х - развившийся дерматит удалось вылечить только после применения гормональных препаратов;

- нанесение на кожу мази ХГДЗГ привело к становлении признаков аллергического контактного дерматита у 7 (из 10) человаг'

- применение добровольцами средства "Циклимид" привело у 8 (из ТО) участниц.к развитию аллергического контактного дерматита.

Применение КАС сопровождалось, в большинстве случаев, наличием ощущения сухости кожи, которое оставалось и после использования жирных косметических кремов, исчезая только после полного прекращения использования антисептика. Следует особо подчеркнуть, что клинические проявления аллергического контактного дерматита возникали спустя некоторое время после нанесения КАС на кожу, всегда имели четкую локализацию (место нанесения препарата на кожу) и исчезали после полного прекращения воздействия изучаемых средств.

"Развитие клинической картины аллергических поражений кожи сопровождалось наличием изменений в состоянии показателей иммунного статуса. При ятом в процеосе проведения натурных испытания,,1 ДС нами были получены различные типы ответного реагирования на них иммунной системы. '

-16-

При оценке влияния на КС препарата '.'Оксазоль"' в. первые 15 дней исследований у лиц опытных групп был выявлен иимуномодулирую-щий эффект (¿ис. 2). У добровольцев опытных групп было отмечено достоверное снижение средних значений абсолютного содержания Т-л. (1207,4+99,8 в контроле и 860,5+58,7 у лиц I и 3 групп; 934,0+60,9 у лиц 2 к 4 групп; во всех случаях р^0,05), ТРК (654,7+82,5 в контроле; 5Сб,1+43,3 - I и 3 групп; 462,0+27,0 - 2 и 4 групп; р<0,05) и ТЧК (352,8+33,2 - в контроле; '(68,3+11,2 - 2 и 4 групп; р<0,05). /остоверное увеличение абсолютного числа ТЧК у лии 2 и 4 групп свидетельствует об усилении реактивности этой фракции Т-л. и вызвано, по-видимому, большим количеством препарата,.нанесенного на одежду (100-150 г/5м2). По всем остальным параметрам иммунного статуса дозовой зависимости на 15 день выявлено не было. 3 восстановительный период (30 день, I и 2 группы) каких-либо отличных изменений в показателяхиммункого статуса не наблюдалось, за исключением сниженных средних значений абсолютного содерагания ТРК у лиц I группы (J42,3+58,I в контроле к 617,.3+4-7„7 - в- X гр.; р ¿0,05\

Обследование-, проведенное через Т5 дней1 после повторной обработки одежды, не выявило существенных расхождений по средним значениям показателей иммунного статуса как при сравнении 3 и 4 групп, так и по сравнению с контрольной. Через 15 дней восстановительного периода ('^5 день) средние значения изучаемых показателей ИС у добровольцев 4 группы были практически равны таког_м контрольной группы. У лиц, носивших обработанную одежду в рекомендованной

о

дозе 50-70 гАм'" - отмечено достоверное снижение средних значений абсолютного содержания Т-л. (т17б,7+71,4 в контроле и 876,Т+97,5 в 4 гр., p<i0,05), ТРК (860,5+61,5 в контроле и 65^,0+71,5 в опыте, рс0,С5) и ТЧК (316,0+18,4 и 217,0+31,5 в контроле и опыте, соответственно, р*.0,05) при некоторой тенденции к снижению общего

Рис. 3. Состояние показателей иммунного статуса добровольцев, принимавших участие в практических испытаниях инсекттшдно-репеллентного состава "Оксазоль" ■

(абсолютные значения) 15 день

I 4 3 гр.

2 4- 4 гр.

Лейкоииты

Лейкоциты

Примечание: О - показатели контрольной группы ; х - р*0,05 0- показатели опытных групп; хх - р-<0,01

-Хапуга лимфоцитов и В-л. По всей вероятности, средство "Рксазоль" в каксмкально-рекомендованной дозе применения обладает способностью вызывать с. гцифическую ареактивность МС, причем, ота способность проявляется только после повторной обработки одежды, во время восстановительного пе'-чода.

Многократное, длительное применение кожных антисептиков в ряде случаев вызывало сенсибилизирующее действие. Такое состояние мы наблюдали при натурных испытаниях "Зодопи^оновой" мази и спиртового раствора гибитана.

На 5 день применения "Г'одопироновой" мази было отмечено изменение функционирования ИС, затронувшее Т- и В-оеточнне : зенья. Произооло увеличение средних значений относительного содержания Т-л. (с исходного 63,3+0,5? до 67,2*0,9%, р<Ю,ОТ) и В-л. (с II,1+0,8? до 15,8+1,2?, р^0,01), при этом уменьшилось и абсолпное и относительное содержание 0-л. Проведенное вычисление индексных показателей иммунного статуса добровольцев позволило установить на ТО де..ь изменение средних значений ЗВИ (35,72+2,77 и 24,^6+1,57 на фоне и на 10 день, соответственно, р<с0,01), ЛОИ (исходное 14,93+1,16 и 24,64+2,49, р^0,01), Т/В (6,09+0,48 и 4,17+0,36 на 30 день, р^0,01), что свидетельствует о наличии существенных изменений в функционировании КС в целом, о нарушении функциональных связей между различными звеньями КС. На ТС день испытаний было отмечено достоверное увеличение содержания сыворот. чного 1^4 (до 1,15+0,06 г/л, против исходного 0,94+0,08); р<0,05). Концентрация при этом была достоверно ниже фоновых значений и составила 4,56+0,42 г/л (исходное содержание - 8,0Т^,8б г/л), что привело к изменение средних значений индексных показателей, характеризующих состояние В-звена КС: произошло увеличение В/Т^А, В/1<^, а соотношение 1^/ТоМ достоверно снизилось, т.е. имело

место к нарушение функционирования В-клеточного эвена 11С.

При изучении характера влияния на КС добровольцев С,55 спиртового раствора гибитана были получены данные, практически аналогичные тем, «то и при натурных испытаниях "Яодопирсновой" мази, Изучение индексных показателей ИС на 5 день "оказало, что было отмечено достоверное снижение средних значений ЛЕИ, Т/В, которые свидетельствовали о преобладании В-клеток в иммунном ответе.

Использовение НАС в ряде случаев вызывало развитие иммунопатологических процессов по типу формирования ккмунодефицитных состояний, что мы наблюдали при натурных испытаниях препаратов "Цихлимид" и ХГДЭГ. Мишеньг действия указанных средств были как Т-, так и В-звенья Иб.

При'практических испытаниях средства "Циклимид" к 10 дни применения было отмечено, практически, в 3 раза снижение среднк значений абсолютного числа Т-л., субпопуляиий Т-к., резистентных и чувствительных к.теофиллину, снизилась концентрация иммуноглобулинов изотипов А и Данное состояние носило длительный характер, оставаясь даже после полного прекращения контакта с препататон.

К 10 дню нанесения на кожу мази ХГДЭГ было выявлено количественное уменьшение средних значений Т-л., ТРК и ТЧК, изменения эти носили глубокий, стойкий характер, яе восстанавливались после полного прекращения контакта с препаратом.

При сравнении индексных показателей иммунного статуса добровольцев, приникавших участие в испытаниях Никлимида" и ХГДЗГа, (табл. 3), обращает на себя внимание увеличение таких показателей, как ЛТИ, ЛТРИ, 2ТЧИ и снижение средних значений показателя ЛСИ. В процессе применения изучаемого мыла "Циклимид" и мази ХГДЗГ у ' добровольцев было отмечено нарупение функционирования Т-звена КС, изменение взаимодействия нгжду Т- н В-системаму, что привело к .

Таблица 3

Состояние индексных показателей иммунного статуса добровольцев при практических и<..штаниях средств "Циклимид" и ХГДЗГ

Показа- _"Циклимид"_ХГДЗГ

тели фок 10 день Фон ТО лень

ЛТИ 5,72+0,23 16,86+Г,6Тхх 5,57+0,28 14,а?+т,бгхх

ЛТРИ 7,80+0,41 26,80+2,73хх 7,98+0,52 21,06+4,03хх

ЛТЧИ 22,87+0,89 64,82+14,88* 19,41+Г,42 67,00+21,52хх

ЛВИ 29,50+1,11 25,79+2,71х 3 ,75+2,00 ЗТ,ВД+3,60

ЛОИ 17,67+1,40 6,33+0,б4хх 14,70+1,31 б,50+0,61хх

Т/В 6,09+0,48 1,66+0,22хх 6,31+0,50 2,80+0,61х х

Примечание: х -- р <0,05; хх - р-«с0,01

снижении индексного показателя Т/3 у лиц обеих опытных групп. Данное состояние нарушенных межзвеньевых взаимодействий имело стойкий характер, не проходяиий во время восстановительного периода (через 7 дней после полного прекранения контакта с этими препаратами) (рис. ?).

Обобщая все вьгаеизложенное, мы расположили изученные ДС в порядке убывания интенсивности реакции ИС, следующим образом:

- по способности вызывать ГЗТ г эксперименте - "Циклимид", "йодопироновая" мазь, гибитан, "Оксазоль" (при норме расхода 50-70 г/5к2);

- по клиническому »Мекту - гибитан, "Циклимид", мази ХГДЗГ н "йодосцроновая", "Оксазоль";

- по иммуномодулируошему действию в натурных исследованиях -"Циклимид", мази ХГДЗГ и "Р.олопироновая", гибитан, "Оксазоль".

В этом ряду Пйргые места занимают ДС, принадлежащие к классу ПАВ, затем следуют средства, относящиеся к йодо^орам, последнее место занимает препарат "Оксазоль". В состав его рецептуры входит сильный аллерген - длметилфталат, однако, иммунопатологического

Рис. 3 Состояние индексных показателей лунного статуса добровольцев после прекращения контакта со средствами Никлииид" (а) „ ШЗГ (б)

а) Ш

дчк

ТРК/ТЧК

б)

этчи

Примечание: х - р*0,0(г хх - р-^0,01

- исходные значения значения после окончания восстановительного периода

B/fqN

действия к клинических неблагоприятных признаков воздействия всего состава,в большинстве случаев,нами обнаружено ив было.

Учитывая данные экспериментальных исследований, клинических проявлений неблагоприятного действия 1С на организм человека и ивучеиних показателей иммунного статуса мы пришли к заклвченив, что наиболее опасным для резвития аллергенных и иммунопатологических действий ДС является непосредственное нанесение средств на кожу. Возможно, что отсутствие клинических проявлений неблагоприятного действия "Оксазоля" объясняется постепенный, растянутым во времени поступление* компонентов состава в организм, что, по-видимому, может рассматриваться как один из вариантов гипосенсибилизации.

Сдерет особо подчеркнуть, что в развитии хличичесхих псо.аяле-

нвй аллергического контактного дерматита имеют значение не сами нарушения в иммунном статусе организма, а наличие рассогласований в системных взаимодействиях. Мы имеем ввиду тот факт, что в ряде случаев изменения средних значений показателей иммунного статуса были минимальны ("йо; «пирэновая" иазь, гибитан), а изменения в состоянии индексных показателей - очевидны. 2ти последние изменения, скорее всего, и послужили основоР развития аллергического контактного дерматита.

ВЫВОДЫ

Т. Дезинфекционные средства из различных классов химических соединений в рекомендованных режимах применения обладают сенсибилизирующими свойствами.

2. Сенсибилизируосее действие ДС в эксперименте формируется по типу гиперчувствительности замедленного типа.

3. При клинической оценке воздействия на иммунную систему кожных антисептических средств (гибитан, "Циклимид", мази "йодопи-роновая" и ХГДЭГ) и.препарата "Оксазоль" выявлено их иммуномоду-хируюдее действие. Чишекью воздействия ДС являются как Т-, так и В-звенья иммунной системы. При контакте добровольцев с ДС развивается сенсибилизация по типу ГЭТ-отвяга, в Сольиинстве случаев заканчиваете я формированием аллергического контактного дерматита.

4..При непосредственном нанесении ДС на кожу риск развития клинических проявлений аллергик выие, чем при попадании препарата на кожу через обработаннуг ткань.

5. Развитие клинической картины аллергического контактного дерматита сопровождается наличием рассогласований во взаимодействиях различных звеньев КС. Инволюция клинических проявлений дермо-тита сочетается с сохранением измененных показателей иммунного

статуса и после- прекращения воздействия ДС.

6. Значимыми показателями ИС при оценке опасности применения ДС является возникновение иммунодефицитного состояния и формирование ГЗТ.

7. Полученные в натурных условиях измеь.ния показателей ИС согласуются с экспериментальными данными по Формированию повышенной чувствительности замедленного типа и в совокупности с другими методами могут использоваться для отбора и экспертной оценки перспективных 1С. Рекомендовано проводить обязательную оценку

ДС по аллергоопасности и иммунотоксичности.

8. Разработана система тестоз для доклинической сценки ДС

I

по аллергенным.параметрам. »

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. При оценке опасности применения новых дезинфекционных средств необходимо обязательно учитывать иммуномодулирующие

эффекты.

2. Оценку сенсибилизирующих свойств дезинфекционных средств и других новых химических соединений целесообразно проводить поэтапно, что значительно экономит сроки, объем и материальные затраты на проведение этих работ.

3. Раннее выявление икмуномодулирующих свойств дезсредств на стадии доклинической апробпиии дает возможность предотвратить возникновение иммунодефииитных состояний у лиц, использующих , дезинфектанты, внести тем самым вклад в профилактику ряда заболеваний.

Список работ, опубликованных по материалам диссертации:

I. Методические подхода к комплексной гигиенической оценке педикулицидов, репеллентов л кожных антисептиков (в соавт.)! - '

В сб.: Актуальные вопросы лезиН'^ёкцйи и стерилизации. Москва, Т966* - С. 144-147.

2. Гигиеническая реглйУ4ейт'&\Ш применения инсектицидно-ре-пел^ектных препаратов Ь ¿'зрозол^ыХ Йёллонах (в соавт.). - В сб.: Актуальные вопросы дезинсекции и стерилизации. - Москва, Т967. - С. 12Т-Т25.

3. Изменение состояния иммунокомпетгнтных клеток как показатель неблагоприятного воздействия дезинфекционных средств на организм человека. - В сб.: Актуальные проблемы фагмакологии, ¿армации и й-апхакстерапии. - Москва, 1988. - С. 46 -47.

Уедико-биологические критерии оценки воздействия дезинфекционных ссепстз не организм человека (в соавт.). - В сб.: Актуальные пгоблем^ гигиенического регламентирования химических факторов окружагаей среды." - Пермь, Т9Б9Ч - С. Т53-154.

5. 'Иммунологическое состояние организма лабораторных животных при воздействии хлорактиендго соединения Св соавт.). - Там же. - С. Т4Т-Т42.

6. Оценка состояния иммунной системы людей, применявших кожные антисептики Сб со&бт.)-. - В сб.: Современные методы и средства дезинфекции 1л стерилизации. - Москва, Т989. - С. 67-70.

7. Гигиеническая оценка средств дезинсекции и обоснование критериев безопасности их применения (в соавт.). - В сб.: Актуальные вопросы токсикологии, гигиены применения пестицидов и полимерных материалов в народной хозяйстве. - Киев, Т990. -С. 53.