Изучение экспрессии активационных маркеров лимфоцитов больных с опухолями желудочно-кишечного тракта

Шибаев, Михаил Игоревич

Диссертации по медицине → Аллергология и иммулология

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Изучение экспрессии активационных маркеров лимфоцитов больных с опухолями желудочно-кишечного тракта

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Шибаев, Михаил Игоревич Санкт-Петербург 2004 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.00.36

Автореферат диссертации по медицине на тему Изучение экспрессии активационных маркеров лимфоцитов больных с опухолями желудочно-кишечного тракта

На правах рукописи

ШИБАЕВ Михаил Игоревич

ИЗУЧЕНИЕ ЭКСПРЕССИИ АКТИВАЦИОННЫХ МАРКЕРОВ ЛИМФОЦИТОВ БОЛЬНЫХ С ОПУХОЛЯМИ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА

14.00.36 - Аллергология и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Санкт-Петербург 2004

Работа выполнена в Институте биологии Карельского научного центра РАН

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор,

Тотолян Арег Артемович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, Огурцов Роберт Петрович; доктор медицинских наук, Серебряная Наталья Борисовна

Ведущая организация: Научно-исследовательский институт

онкологии им. профессора Н.Н. Петрова МЗ РФ г. Санкт-Петербург

Защита состоится « /б » срвВрсШЯ 2004 г. в ш часов на заседании Диссертационного Совета Д001.022.01 при ГУ НИИ экспериментальной медицины РАМН (197376, Санкт-Петербург, ул. акад. Павлова, 12).

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ГУ НИИ экспериментальной медицины РАМН

Автореферат разослан « ¡5 » января 2004 г.

Ученый секретарь Диссертационного совета доктор медицинских наук

Бурова Л.А.

Актуальность проблемы. Согласно теории Бернета лимфоциты распознают и элиминируют все генетически чужеродные и в том числе измененные собственные клетки. В тех случаях, когда существует иммунологическая недостаточность, связанная с функцией распознавания антигена, трансформированные клетки, возникающие в организме, остаются нераспознанными. Это приводит к формированию клона опухолевых клеток и, соответственно, образованию и росту опухоли. Успехи современной медицины позволяют на клеточном и молекулярном уровне изучать функционирование иммунной системы при опухолевом росте. Это дает возможность более точно установить реальные процессы, лежащие в основе взаимоотношений между иммунной системой и опухолью. К примеру, описано несколько способов ускользания опухолевых клеток от распознавания [Seliger et al, 2000; Whiteside, Rabinowich, 1998]. В то же время нет однозначного представления о состоянии иммунной системы в условиях роста опухоли. Несмотря на данные, указывающие на формирование иммуносупрессии при канцерогенезе, не определены конкретные механизмы, приводящие к снижению иммунологической реактивности. Поэтому сегодня в клинической онкологии нет эффективных методов иммунотерапии. В связи с этим иммунологические исследования при онкологических заболеваниях актуальны и представляют теоретический и практический интерес.

Опухоли желудочно-кишечного тракта составляют значительную долю всех онкологических заболеваний. Рак желудка и рак толстой кишки относятся к числу злокачественных новообразований с наиболее высоким уровнем заболеваемости и смертности как во всем мире, так и в России [Пиманов и др., 2001; Чиссов и др., 2000; Markowitz, Winawer, 1999; Mu-noz, Franceschi, 1997]. Как правило, неблагоприятный прогноз клинического течения этих видов рака связан с тем, что нет ясного представления о механизмах возникновения и роста опухолей, о реакции иммунной системы на трансформированные клетки и поэтому своевременная диагностика злокачественных новообразований желудочно-кишечного тракта становится затруднительной (I-II стадии заболевания в 2001 году были выявлены только у 20% пациентов). Низкие показатели ранней диагностики онкологических заболеваний желудочно-кишечного тракта определяют высокую Летальность на первом году. Таким образом, раннее выявление рака желудка и рака толстой кишки является важнейшей задачей современной медицины. Для решения этой проблемы необходимо иметь более четкое представление о механизмах канцерогенеза, о взаимоотношениях, которые складываются между иммунной системой и развивающейся опухолью в желудочно-кишечном тракте. С нашей точки зрения

. БНЬЛИОГЕКЛ |

| GneiwfcW I

особого внимания заслуживает изучение иммунологической реактивности у лиц с предраковыми состояниями, когда возможно и происходит возникновение и формирование иммунного дефицита.

Известно, что у больных с опухолями желудочно-кишечного тракта существуют нарушения функций иммунной системы. Но до сих пор нет единого мнения о механизмах формирования иммунологической недостаточности при данных патологиях. Считается, что возникновение опухоли становится возможным на фоне снижения иммунного надзора. Поэтому одной из главных задач клинической иммунологии является изучение иммунологического состояния онкологических больных и поиск критериев иммунологической недостаточности на разных этапах опухолевого процесса. Для более ранней диагностики и последующего мониторинга лиц с предраковыми состояниями и раком желудка и толстой кишки необходимо изучить особенности иммунологической реактивности у данной группы больных. Дня решения этой задачи целесообразно исследовать динамику показателей функциональной активности иммунной системы онкологических пациентов на этапах активации, пролиферации и дифференцировки лимфоцитов.

Анализ литературы показал, что данных по раку желудка и колорек-тальному раку немного. Большинство работ посвящено изучению диффе-ренцировочных антигенов. Для разных групп онкологических больных, как правило, не выявляется существенных различий в уровне основных субпопуляций лимфоцитов по сравнению с

показателями здоровых доноров [Филатов, Суринов, 1987]. Подобная закономерность описана при различных стадиях рака желудка [Лыков с др., 2000; Koyama et al., 1988]. Однако в ряде работ показано снижение числа -лимфоцитов периферической крови уже при II

стадии рака желудка [Hong et al., 1995]. На поздних стадиях заболевания эти изменения, как правило, более выражены [Zaloudik et al., 1999; Hong et al., 1995]. Наряду со снижением уровня Т-лимфоцитов при раке толстой кишки и раке желудка отмечается уменьшение -клеток [Bent-dal et al., 1996; Zaloudik et al., 1999; Barbera-Guillem et al., 2000].

Особый интерес представляет изучение экспрессии активационных маркеров и молекул адгезии на Т-лимфоцитах периферической крови для оценки иммунологического состояния больных с онкологической патологией [Кадагидзе, 1999; Пинегин, Хаитов, 1997]. Есть сведения об изменениях уровня экспрессии некоторых мембранных антигенов лимфоцитов при лимфопролиферативных заболеваниях, раке тела матки, раке яичника и раке молочной железы [Кадагидзе, 1999; Baryshnikov et al., 1997; Schroder et al., 1997; Van den Hove et al., 1998]. В литературе немного исследований, в которых уделяется внимание особенностям экспрессии

поверхностных антигенов на лимфоцитах периферической крови больных с опухолями желудочно-кишечного тракта, и при этом они носят противоречивый характер [Лыков и др., 2000; Donina et al., 2000; Hong et al., 1995; Sasada et al., 2003; Wang et al., 2001]. В связи с этим нет четкого представления об изменениях функций иммунной системы в процессе опухолевого роста при раке желудка и раке толстой кишки.

Исследование функционального состояния иммунной системы по степени активации лимфоцитов, поиск общего критерия формирования иммунологической недостаточности у больных со злокачественными опухолями желудочно-кишечного тракта позволит более успешно решать вопросы диагностики и терапии при данных заболеваниях, что является одной из основных задач клинической иммунологии.

Цель исследования заключалась в изучении экспрессии активацион-ных маркеров (CD25, CD71, CD95, CD98 и HLA-DR) на лимфоцитах периферической крови больных со злокачественными опухолями желудочно-кишечного тракта и в изучении возможности использования этих показателей для прогноза и мониторинга опухолевого процесса.

Были поставлены следующие задачи:

1. Изучить особенности экспрессии некоторых дифференцировочных и активационных маркеров на лимфоцитах периферической крови у больных с опухолями желудочно-кишечного тракта.

2. Провести анализ экспрессии некоторых дифференцировочных и активационных маркеров на лимфоцитах при опухолях желудочно-кишечного тракта по сравнению со злокачественными новообразованиями других локализаций.

3. Оценить уровень экспрессии поверхностных маркеров лимфоцитов у больных раком желудка и колоректальным раком в зависимости от стадии заболевания, локализации, типа гистологического строения опухоли и исхода заболевания.

4. Установить влияние послеоперационной иммунотерапии препаратом Ронколейкин на экспрессию CD-маркеров лимфоцитов больных раком желудка.

Научная новизна работы:

1. Впервые применен комплексный подход к оценке поверхностных активационных маркеров лимфоцитов периферической крови при злокачественных новообразованиях.

2. Впервые установлено, что для злокачественных новообразований независимо от локализации характерным является повышенный уровень экспрессии CD25 и CD71, а при раке желудка - высокая экспрессия CD95 на лимфоцитах периферической крови.

3. Впервые показано, что высокий уровень экспрессии CD25 и CD71 при раке желудка и колоректальном раке свидетельствует о благоприятном прогнозе заболевания.

4. Впервые у больных раком желудка изучена динамика активацион-ных маркеров лимфоцитов периферической крови при иммунотерапии Ронколейкином.

Научно-практическая значимость. Полученные результаты позволяют рекомендовать включение в иммунологическое обследование онкологических больных тестов по определению активационных маркеров CD25, CD71 и CD95 для предварительной оценки характера течения и исхода заболевания.

Наши данные свидетельствуют о том, что высокий уровень экспрессии CD25 и CD71 на лимфоцитах крови выявлен у больных с опухолями желудочно-кишечного тракта с благоприятным прогнозом, что, вероятно, отражает более адекватное функционирование иммунной системы и может быть использовано как один из возможных критериев благоприятного течения заболевания. Следовательно, высокий уровень экспрессии CD25 и CD71 может служить прогностическим признаком.

По нашим результатам при иммунотерапии Ронколейкином также можно рекомендовать определение уровня экспрессии активационных маркеров (CD25 и CD95) при мониторинге больных раком желудка.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

1. Для всех злокачественных опухолей независимо от локализации и гистологического типа характерна повышенная экспрессия активацион-ных маркеров (CD25 и CD71) на лимфоцитах периферической крови, причем более высокая экспрессия указанных маркеров при колоректаль-ном раке и раке желудка свидетельствует о благоприятном прогнозе.

2. При раке желудка на ранних стадиях характерным является значительно повышенная экспрессия CD95, сочетающаяся на поздних стадиях с высокой экспрессией CD25 и CD71 на лимфоцитах периферической крови.

3. У онкологических больных показатели уровня экспрессии актива-ционных маркеров (CD25, CD71 и CD95) являются более информативными по сравнению с дифференцировочными антигенами.

4. Иммунотерапия рекомбинантным.интерлейкином-2, направленная на активацию лимфоцитов, повышает экспрессию CD25 и CD95 и способствует благоприятному течению рака желудка.

Апробация работы. Материалы диссертации были представлены на V и VI молодежных научных конференциях "Актуальные проблемы биологии" (Сыктывкар, 1998 и 1999), Международной конференции "Биоло-

гические основы изучения, освоения и охраны животного и растительного мира, почвенного покрова Восточной Фенноскандии" (Петрозаводск, 1999), IV, V, VI и VII Всероссийских научных конференциях с международным участием "Дни иммунологии в Санкт-Петербурге" (Санкт-Петербург, 2000, 2001, 2002 и 2003), IV Съезде иммунологов и аллергологов СНГ (Москва, 2001), XI, XII и XIII Национальных конгрессах по болезням органов дыхания (Москва, 2001, 2002 и 2003), Научной конференции "Карелия и РФФИ" (Петрозаводск, 2002) и Международной научно-практической школе-конференции "Цитокины. Воспаление. Иммунитет" (Санкт-Петербург, 2002).

Диссертационная работа была апробирована на заседании научной конференции отдела иммунологии ГУ НИИ экспериментальной медицины РАМН 11 ноября 2003 г.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 17 печатных работ (3 статьи, 14 тезисов).

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 139 страницах машинописного текста, содержит 29 таблиц, 14 рисунков и состоит из введения, трех глав, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, насчитывающего 199 источников (45 - на русском и 154 - на иностранных языках).

Работа поддержана РФФИ, проект № 98-04-03521 (1998г.), Санкт-Петербургским Конкурсным центром фундаментального естествознания (2000,2001 и 2002гг.).

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования. Под наблюдением находилось всего 118 больных. Из них 66 больных раком желудка, 4 пациента с опухолями пищевода, 15 больных раком толстой кишки, 33 пациента со злокачественными опухолями других локализаций в возрасте от 28 до 84 лет из различных районов Карелии, проходивших обследование и лечение в хирургическом отделении Карельского республиканского онкологического диспансера г. Петрозаводска в период с 1998 по 2002 гг. В качестве контроля обследовано 38 практически здоровых людей (мужчин - 18, женщин - 20) в возрасте от 17 до 68 лет.

Из 66 обследованных больных раком желудка было 46 мужчин и 20 женщин. Средний возраст составил 59.7 лет. Кардиоэзофагеаль-ный рак диагностирован у 25.4%, рак тела желудка - у 36.4% и выходного отдела - у 38.2%. В группе больных раком толстой кишки большинство составили мужчины - 10. Соотношение заболевших

мужчин и женщин составило 2:1. Средний возраст в этой группе -63.7 года. Рак ободочной кишки диагностирован у 8, а рак прямой кишки - у 7 пациентов. Обследованы 4 больных раком пищевода, все мужчины. Средний возраст - 50.2 лет. Среди лиц с опухолями других локализаций было 23 мужчины и 10 женщин. Средний возраст составил 54.9 года. В эту группу были включены лица с онкологическими заболеваниями органов дыхания, мочевыделительной, эндокринной, репродуктивной систем и кожи.

Основными методами диагностики были эндоскопическое, рентгенологическое и гистологическое исследования.

Основной гистологической структурой опухолей желудочно-кишечного тракта была аденокарцинома. В желудке встречались различные ее разновидности: папиллярная, тубулярная и перстневиднокле-точная. В толстой кишке у обследуемых лиц преобладала тубулярная аденокарцинома. В то же время плоскоклеточный рак был диагностирован во всех случаях опухоли пищевода.

Согласно классификации по Lauren рак кишечного типа был диагностирован в 57.7%, а диффузного типа - в 42.7% наблюдений.

Среди больных раком желудка I-II стадии заболевания были диагностированы в 27.6% случаев, III стадия - в 48.3% и IV стадия - в 24.1%. У лиц с опухолями толстой кишки I-II стадии заболевания выявлены в 46.7%, III стадия - в 53.3% наблюдений.

Стадия заболевания и тип строения опухоли окончательно устанавливались после оперативного вмешательства и гистологического исследования операционного материала.

Все обследованные нами пациенты с опухолями желудочно-кишечного тракта были оперированы. Радикальное хирургическое лечение было проведено 49 (74.2%) больным раком желудка и 14 (93.3%) ко-лоректальным раком. В остальных случаях операции носили симптоматический и паллиативный характер.

Наблюдение за больными с опухолями желудочно-кишечного тракта, выписанными из стационара по окончании лечения, осуществляли путем контрольных обследований в онкодиспансере в течение первого года через 3 месяца, второго-третьего - 1 раз в 6 месяцев. За время наблюдения стабилизация процесса отмечена у 25 больных раком желудка и 7 колоректальным раком, прогрессирование заболевания выявлено у 37 пациентов с опухолями желудка и у 7 раком толстой кишки.

Для иммунофенотипирования мононуклеарные клетки крови получали из гепаринизированной венозной крови на градиенте плотности фик-

кол-верографин (1.077 г/мл). Субпопуляционный состав лимфоцитов исследовали методом непрямой иммунофлюоресценции с использованием моноклональных антител ЛТ (Институт иммунологии Минздрава РФ) фирмы "Сорбент ТМ", Москва, соответственно к молекулам CD3, CD4, CD8, CD 16, CD 19, CD25, CD45, CD71, CD95, CD98 и HLA-DR. [Методические рекомендации по стандартизации методов иммунофенотипирова-ния клеток крови и костного мозга, 1999].

Была изучена динамика уровня экспрессии поверхностных маркеров лимфоцитов периферической крови больных раком желудка в ходе иммунотерапии Ронколейкином (рекомбинантный IL-2). Оценивали возможность использования этих показателей для мониторинга онкологических пациентов.

Материалом для исследования служила периферическая кровь 11 больных раком желудка, получавших терапию Ронколейкином. Препарат вводился, начиная с 5-х суток после операции, внутривенно капельно в дозе 1 млн. ЕД с интервалом 48 часов трехкратно. В ходе исследования проводилось фенотипирование лимфоцитов периферической крови методом непрямой иммунофлюоресценции с помощью моноклональных антител.

Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием t критерия Стьюдента.

Результаты исследования и их обсуждение. Проведен сравнительный анализ уровня экспрессии поверхностных маркеров лимфоцитов больных раком желудка, колоректальным раком и лиц с опухолями других органов на этапах диагностики и лечения.

Наши результаты показали, что закономерности экспрессии актива-ционных и дифференцировочных маркеров отличались.

При сравнительном анализе экспрессии дифференцировочных антигенов у онкологических больных установлено, что уровень экспрессии CD 16, у них заметно выше, чем у здоровых лиц. Значительных количественных изменений субпопуляций Т-лимфоцитов не отмечено, хотя количество CD19+-клеток у онкологических больных оказалось повышенным. Подобные изменения при злокачественных опухолях отмечает и ряд зарубежных исследователей [Murta et al., 2000].

Изучение экспрессии дифференцировочных антигенов у больных с опухолями желудочно-кишечного тракта показало увеличение количества CD16+- и С019+-лимфоцитов (табл. 1). На повышение уровня CD16+-клеток в крови при таких патологиях указывают и другие исследователи [Zaloudik et al., 1999; Melichar et al., 2002; Yamaguchi et al., 1994]. В то же время эти авторы отмечают незначительные

колебания числа Т- и В-лимфоцитов. По нашим данным у больных раком желудка выявлено повышение содержания В-лимфоцитов и NK-клеток при III стадии заболевания, при отсутствии существенных количественных изменений субпопуляций Т-клеток. Аналогичные закономерности в численности субпопуляций Т-лимфоцитов при данной патологии отмечают и другие авторы [Лыков и др., 2000; Коуаmа et al., 1988].

Таблица I

Уровень экспрессии дифференцировочных антигенов нрн опухолях различных локализаций (в %)

Поверхностные маркеры Контроль (п=38) Больные

Рак желудка (п=66) Колоректаль-ный рак (п=15) Опухоли др. локализаций (п=33)

CD3 57.55±3.77 62.57±2.35 61.8014.57 59.1813.49

CD4 29.78±3.23 34.50t2.00** 27.6014.43 30.6712.48.

CD8 28.83±4.37 31.9811.77 33.4714.44 31.3012.86

CD16 16.05+3.72 22.5712.14* 23.6013.88* 21.4812.32

CD19 12.1113.83 21.2612.08* 20.6015.49 18.0912.46

Примечание. *р<0.05 по сравнению с контролем, **р<0.05 по сравнению с коло-ректальным раком.

Изменения уровня экспрессии активационных маркеров у онкологических больных носят более выраженный характер. Так в общей группе онкологических больных выявлен повышенный уровень экспрессии CD25, CD71 и CD95 на лимфоцитах периферической крови. На более поздних стадиях заболевания отмечаются и более высокие показатели уровня экспрессии указанных активационных маркеров (рис. 1). На системную активацию лимфоцитов при различных онкологических заболеваниях указывают некоторые зарубежные исследователи [Van den Hove et al., 1998; Melichar et al., 2001].

Изучение зависимости экспрессии активационных маркеров на лимфоцитах периферической крови от локализации опухоли выявило, что во всех группах онкологических больных заметно выше оказался уровень экспрессии активационных антигенов CD25 и CD71. Вместе с тем у больных раком желудка был показан более высокий уровень экспрессии другого активационного маркера лимфоцитов -CD95 (рис. 2).

25%

20%

15%

10%

CD25

CD71

CD95

HLA-DR

| f контроль Dl стадия * II стадия Pill стадия ВIV стадия |

Рис. I. Уровень экспрессии активационных маркеров лимфоцитов на различных стадиях опухолей.

30% -|

CD25

CD71

CD95

■контроль D рях желудка Околоректальный рак Волухоли других локализаций

Рис. 2. Уровень экспрессии активационных маркеров при различных локализациях опухоли.

Более детальный анализ больных раком желудка показал, что на всех стадиях заболевания отмечается высокий уровень экспрессии CD25, CD71 и CD95. Учитывая широкий разброс индивидуальных показателей уровня экспрессии активационных маркеров, мы провели анализ частоты встречаемости больных раком желудка с различным содержанием лимфоцитов. Наибольшее число здоровых людей относится к группе с низким содержанием С095+-лимфоцитов. Совсем другая ситуация с больными раком желудка. Можно видеть, что большая часть больных относится к группе с повышенным содержанием С095+-лимфоцитов, особенно ярко это проявляется на IV стадии (рис. 3).

Весьма интересным представляется тот факт, что уровень экспрессии CD95 повышен уже на ранних стадиях рака желудка. В свя-

зи с этим проведен анализ индивидуальных показателей уровня экспрессии CD95 на ранних стадиях заболевания при различных локализациях опухоли. Подавляющее большинство больных раком желудка оказалось выше контрольного уровня, а больные колоректаль-ным раком большей частью уместились в пределах разброса в контроле, как и лица с опухолями других органов (рис. 4).

Была изучена зависимость экспрессии поверхностных антигенов на лимфоцитах периферической крови больных раком желудка от типа гистологического строения. Наиболее существенные изменения в уровне основных популяций лимфоцитов наблюдали у больных раком желудка диффузного типа, к которым относят низкодифференцированную адено-карциному и перстневидноклеточный рак. В этой группе онкологических больных отмечены повышенные показатели количества лимфоцитов, несущих маркеры CD4, CD 16 и CD 19 по сравнению с контролем. А у лиц с высокодифференцированной аденокарциномой выше оказался лишь уровень клеток, несущих маркер CD 19.

У больных раком желудка независимо от гистологического строения опухоли выявлен повышенный уровень экспрессии актива-ционных маркеров СБ25, СБ71 и СБ95 на лимфоцитах периферической крови. Однако, для СБ98 отмечен более высокий уровень экспрессии при аденокарциноме кишечного типа по сравнению с низко -дифференцированными формами рака желудка: 18.69+2.06 и 13.69+2.71, соответственно (р<0.05).

При анализе зависимости экспрессии активационных антигенов от локализации опухоли (пищевод, кардиоэзофагеальный отдел, тело желудка, выходной отдел, ободочная и прямая кишка) выявлены в равной мере повышенные уровни экспрессии СБ25 и СБ71 во всех отделах пищеварительного тракта, в то время как для СБ95 более высокие показатели отмечены в проксимальных отделах по сравнению с дистальными (рис. 5).

Изучение экспрессии поверхностных маркеров у больных с опухолями желудочно-кишечного тракта из различных регионов Карелии показало некоторые особенности фенотипа лимфоцитов. Наиболее выраженные изменения отмечены в уровне экспрессии CD95 у лиц, проживающих на севере республики (Костомукша, Сегежа, Медвежьегорск). Отмечена тенденция к росту экспрессии НЬА^Я у пациентов из северных территорий. Однако, в целом, существенных различий в экспрессии поверхностных маркеров лимфоцитов у больных из различных регионов Карелии не установлено.

Анализ корреляционных связей экспрессии активационных маркеров показал, что повышение количества лимфоцитов, несущих маркер CD95, сопровождается высоким уровнем экспрессии CD25 и CD71 (табл. 2). Аналогичные корреляции были выявлены другими авторами при туберкулезе легких и раке тела матки [Сибиряк и др., 1999; Ва^Ьшкоу й а1., 1997].

Таблица 2

Взаимосвязь экспрессии активационных антигенов от уровня экспрессии

CD95 (в %)

CD95 CD25 CD71 CD98 HLA-DR

S10% (п= 11 ) 14.72±3.25 12.86±3.64 11.61 ±3.92 15.54±3.34

>25%(n=13) 29.36+4.39* 24.38+3.64* 19.54±4.65* 19.00±4.75

Примечание. *р<0.05 по сравнению с уровнем экспрессии CD95<10%.

Высокий уровень экспрессии CD95 и CD25 на лимфоцитах периферической крови наших больных, видимо, указывает на усиление Т-клеточного апоптоза при раке желудка. В литературе имеются упоминания о том, что при раке желудка происходит активация каспаз Т-лимфоцитов крови, что является также свидетельством усиления апоп-тоза [Takahashi et al., 2001]. Кроме того, Wang и соавт. (2001) показали, что по мере опухолевого роста при раке желудка увеличивается число -лимфоцитов крови. Т-лимфоциты с фенотипом об-

ладают выраженной супрессивной активностью. Они слабо отвечают на стимуляцию митогенами и подавляют пролиферацию CD4+CD25~ лимфоцитов. Клетки, несущие а-цепь рецептора IL-2, секретируют низкий уровень IL-2 и интерферона-у и угнетают продукцию этих цитоки-нов другими Т-лимфоцитами. В то же время для клеток с фенотипом CD4+CD25+ характерна высокая продукция IL-4 и IL-10. [Stephens et al., 2001]. Таким образом, у больных раком желудка наблюдается сдвиг соотношения Thl/Th2 в сторону ^2-зависимого иммунного ответа [Nakayama et al., 2000; Zhang et al., 2002]. Усиление экспрессии CD25

Т-лимфоцитами на первом этапе приводит к синтезу IL-2 и усилению пролиферации клеток, а в последующем — к реализации усиливающего эффекта IL-2 в индуцировании процессов апоптоза в зрелых Т-лимфоцитах [Баева и др., 1999; Kishimoto et al., 1995; Lenardo, 1991; Zheng etal., 1998].

Проведен анализ экспрессии поверхностных маркеров лимфоцитов, в том числе ряда активационных маркеров, у больных с опухолями желудочно-кишечного тракта при различном течении заболеваний.

Больные находились иод нашим наблюдением в течение четырех лет после операции. В результате нами было выделено две группы больных: 1-я группа со стабилизацией процесса, которую мы оцениваем как благоприятное течение и 2-я группа с прогрессированием. Наиболее существенные различия отмечены в уровне экспрессии активационных маркеров лимфоцитов по сравнению с дифференцировочными. Наши результаты показали, что у больных раком желудка с благоприятным течением при первичном обращении выявляется более высокий уровень экспрессии CD25 и CD71 сравнению со 2-й группой пациентов. Уровень экспрессии этих маркеров, а также CD95 в обеих группах больных был. выше.

Подобная закономерность отмечалась и у больных колоректальным раком. Выявлен высокий уровень экспрессии CD25 и CD71 у больных колоректальным раком с благоприятным течением заболевания. Однако следует заметить, что при колоректальном раке усиление экспрессии CD95 было не столь значительным как при раке желудка. Существенных различий в уровне экспрессии HLA-DR между сравниваемыми группами не отмечено.

Можно предположить, что повышенный уровень экспрессии изученных нами активационных антигенов отражает реакцию иммунной системы на опухоль. Такие изменения уровня экспрессии, вероятно, свидетельствуют о более адекватном функционировании иммунной системы, что и повлияло на течение и исход заболевания.

Мы провели исследование динамики уровня экспрессии поверхностных маркеров лимфоцитов у онкологических больных в раннем послеоперационном периоде на фоне применения Ронколейкина. Отмечено незначительное увеличение числа Т-клеток, несущих маркер CD4. У этой группы больных после применения Ронколейкина наблюдается значительное усиление экспрессии активационных маркеров на лимфоцитах периферической крови. Причем изменение числа клеток, несущих а-цепь рецептора IL-2, зависит от исходного уровня экспрессии CD25. Отмеченная динамика экспрессии CD25 при применении Ронколейкина отражает регуляторную функцию данного препарата, которая проявлялась в том,

что при исходно высоких показателях экспрессии CD25 на фоне введения Ронколейкина происходит снижение CD25+-лимфоцитов, а при исходно низких - повышение.

Как видно из таблицы 3, наиболее существенные различия выявлены в уровне экспрессии активационных маркеров. В то время, как экспрессия дифференцировочных антигенов, входящих в панель для определения иммунного статуса (CD3, CD4, CD8, CD16, CD19 и HLA-DR) изменялась незначительно. Таким образом, целесообразно включить исследование уровня экспрессии CD25, CD71 и CD95 в обязательную программу оценки иммунного статуса у онкологических больных.

Результаты наших исследований отражают состояние больных в период активного роста опухоли. У пациентов с опухолями желудочно-кишечного тракта выявлен повышенный уровень экспрессии активационных маркеров (CD25, CD71 и CD95) на лимфоцитах периферической крови. По всей видимости, такие изменения экспрессии изученных нами активационных антигенов отражают противоречивый характер взаимоотношений между иммунной системой и опухолью. С одной стороны реакциия иммунной системы на опухоль присутствует (CD25 и CD71), но в то же время развитие опухоли ведет к иммуносупрессии и гибели Т-клеток (CD95).

Таблица 3

Особенности экспрессии поверхностных антигенов при различных онкологических заболеваниях по результатам исследования

Поверхностные маркеры Рак желудка Колорсктальнын рак Опухоли других локализаций

CD3 N N N

CD4 N N N

CD8 N N N

CD16 Т т N

CD19 Т N N

CD25 т t т

CD71 т Г т

CD95 т N N

CD98 N N N

HLA-DR N N N

Примечание. «Т» - повышенный уровень экспрессии, «Ы» - уровень экспрессии, сходный с контролем.

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что у онкологических больных независимо от локализации опухоли имеет место повышенный уровень экспрессии СБ25 и СБ71 на лимфоцитах периферической крови.

2. У больных раком желудка и колоректальным раком при благоприятном прогнозе количество С025+- и С071+-лимфоцитов существенно выше по сравнению с пациентами, у которых в последующем выявляется прогрессирование заболевания.

3. У больных раком желудка в отличие от других локализаций уже на ранних (1-11) стадиях выявлена повышенная экспрессия СБ95 на лимфоцитах периферической крови.

4. Уровень экспрессии активационных антигенов (СБ25, СБ71, СБ95) более четко отражает состояние иммунной системы при опухолях желудочно-кишечного тракта по сравнению с дифференцировочными антигенами (СБ3, СБ4, СБ8, СБ 16, СБ 19).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для иммунологического мониторинга у больных со злокачественными новообразованиями целесообразно использовать определение уровня экспрессии активационных маркеров (СБ25, СБ71 и СБ95) на лимфоцитах периферической крови.

2. Уровень экспрессии дифференцировочных антигенов (СБ3, СБ4, СБ8, СБ19) при злокачественных новообразованиях изменялся незначительно, в связи с чем определение этих показателей является нецелесообразным при иммунологическом обследовании больных раком желудка и колоректальным раком.

3. При раке желудка и колоректальном раке более высокая экспрессия СБ25 и СБ71 является критерием благоприятного прогноза заболевания.

4. При иммунотерапии Ронколейкином для мониторинга больных раком желудка рекомендовано определение уровня экспрессии СБ25 и СБ95 на лимфоцитах периферической крови.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1) Показатели пролиферативной активности лимфоцитов у онкологических больных // Молодежная научная конференция, 5-ая: «Актуальные проблемы биологии» (тезисы докладов). -Сыктывкар, 1998. - С. 215 (В соавт. с Толстогузовой Т.И.);

2) Функциональная активность иммунной системы в условиях опухолевого роста // Международная конференция и выездная научная сессия отделения общей биологии РАН, «Биологические основы изучения, освоения и охраны животного и растительного мира, почвенного покрова Восточной Фенноскандии» (тезисы докладов). - Петрозаводск, 1999. - С. 93-94 (В соавт. с Олейник Е.К., Бахлаевым И.Е., Беловым В.М., Толсто-гузовой Т.И.);

3) Функциональная активность иммунной системы студентов университета // Молодежная научная конференция, 6-ая: «Актуальные проблемы биологии и экологии» (тезисы докладов). - Сыктывкар, 1999. - С. 284-285;

4) Особенности экспрессии CD71 и CD95 на лимфоцитах периферической крови онкологических больных в Карелии // Медицинская иммунология. - 2000. - Т.2. - №2. - С. 184-185 (В соавт. с Олейник Е.К.);

5) Особенности экспрессии CD95 на лимфоцитах периферической крови при онкологической и аутоиммунной патологиях // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2000. - №9. - С. 324-326 (В .соавт. с Олейник Е.К.);

6) Экспрессия активационных маркеров на лимфоцитах периферической крови больных раком желудка в Карелии // Медицинская иммунология. - 2001. - Т.З. - №2. - С. 274-275 (В соавт. с Олейник Е.К., Олейник В.М.);

7) Сравнительный анализ активационных маркеров лимфоцитов крови при раке легкого и раке желудка //11-ый Национальный конгресс по болезням органов дыхания. // Пульмонология, приложение 1. - 2001. - С. 236 (В соавт. с Олейник Е.К., Бахлаевым И.Е., Олейник В.М.);

8) Изучение эффективности иммунологического распознавания при опухолевом росте. Мат-лы 4-го Съезда иммунологов и аллергологов стран СНГ, Москва, 9-14 сентября 2001 // Аллергология и иммунология. -2001. - Т.2. - №2. - С. 117-118 (В соавт. с Олейник Е.К., Бахлаевым И.Е., Олейник. В.М.);

9) Особенности изменения функциональной активности лимфоцитов периферической крови при различных иммунопатологиях у лиц, проживающих на территории Республики Карелия // 6-ая Санкт-Петербургская ассамблея

молодых ученых и специалистов. // Аннотация работ по грантам Санкт-Петербургского конкурса 2001 г. для студентов, аспирантов, молодых ученых и специалистов. - 2001. - С. 84.

10) Анализ взаимосвязи экспрессии СБ71, СБ95 и НЬЛ-БЯ на лимфоцитах периферической крови больных раком желудка в Карелии // Медицинская иммунология. - 2002. - Т.4. - №2. - С. 304 (В соавт. с Олейник Е.К., Олейник В.М., Толстогузовой Т.И.);

11) Особенности функционального состояния иммунной системы больных раком желудка // Медицинская иммунология. - 2002. - Т.4. - №45. - С. 655-660 (В соавт. с Олейник Е.К., Олейник В.М.);

12) Изучение эффективности иммунологического распознавания при опухолевом росте и аутоиммунных процессах // "Карелия и РФФИ" (тезисы докладов научной конференции). - Петрозаводск, 2002. - С. 37-38 (В соавт. с Олейник Е.К., Олейник В.М, Бахлаевым И.Е.);

13) Влияние Ронколейкина на экспрессию поверхностных маркеров лимфоцитов при мезотелиоме // 12-ый Национальный конгресс по болезням органов дыхания. // Пульмонология, приложение 2. - 2002. - С. 286 (В соавт. с Олейник Е.К., Бахлаезым И.Е., Олейник В.М.);

14) Влияние препарата Ронколейкин на экспрессию маркеров лимфоцитов больных со вторичными иммунодефицитами // Цитокины и воспаление. - 2002. - Т.1. - №2. - С. 36-37 (В соавт. с Олейник Е.К., Олейник В.М.);

15) Прогностическая значимость экспрессии активационных маркеров на лимфоцитах периферической крови больных с опухолями желудочно-кишечного тракта // Медицинская иммунология. - 2003. - Т.5. - №3-4. - С. 368 (В соавт. с Олейник Е.К., Олейник В.М., Толстогузовой Т.И.);

16) Молекулярные механизмы формирования иммунного дефицита при опухолевом росте // Материалы международной конференции посвященной 50-летию Института биологии Карельского научного центра РАН, 8-11 сентября 2003г. - С. 106-110 (В соавт. с Олейник Е.К., Олейник. В.М., Бахлаевым И.Е.);

17) Изучение экспрессии активационных маркеров лимфоцитов у больных раком легкого и раком желудка при использовании Ронколейки-на // 13-ый Национальный конгресс по болезням органов дыхания. // Пульмонология, приложение 3. - 2003. - С. 175 (В соавт. с Олейник Е.К., Бахлаевым И.Е., Олейник В.М.).

Изд. лиц. № 00041 от 30.08.99. Подписано в печать 08.01.04. Формат 60x84 1/16 Бумага офестная. Гарнитура «Times». Печать офестная. Уч.-изд. л. 1,4. Усл. печ. л. 1,3. Тираж 100 экз. Изд. № 2. Заказ № 388

Карельский научный центр РАН 185003, Петрозаводск, пр. А. Невского, 50 Редакционно-издательский отдел

РНБ Русский фонд

2004-4 21152

Оглавление диссертации Шибаев, Михаил Игоревич :: 2004 :: Санкт-Петербург

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Взаимоотношения иммунной системы и опухоли.

1.2. Эпидемиология опухолей желудочно-кишечного тракта.

1.3. Основные механизмы канцерогенеза в желудочно-кишечном тракте.

1.4. Иммунная система и опухоли желудочно-кишечного тракта.

1.5. Экспрессия поверхностных маркеров лимфоцитов периферической крови у онкологических больных.

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Общая характеристика обследованных больных.

2.2. Методы исследования.

2.3 Статистическая обработка материала.

ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Анализ экспрессии поверхностных маркеров лимфоцитов у здоровых лиц.

3.2. Сравнительная характеристика уровня экспрессии CD-маркеров лимфоцитов при различных онкологических заболеваниях.

3.3. Изменения экспрессии поверхностных маркеров лимфоцитов больных колоректальным раком.

3.4. Особенности экспрессии активационных маркеров лимфоцитов при раке желудка.

3.5. Сравнительная характеристика экспрессии поверхностных антигенов лимфоцитов больных с опухолями в различных отделах желудочно-кишечного тракта.

3.6. Влияние препарата Ронколейкин на уровень экспрессии активационных маркеров лимфоцитов онкологических больных.

Введение диссертации по теме "Аллергология и иммулология", Шибаев, Михаил Игоревич, автореферат

Актуальность проблемы. Согласно теории Бернета лимфоциты распознают и элиминируют все генетически чужеродные и в том числе измененные собственные клетки. В тех случаях, когда существует иммунологическая недостаточность, связанная с функцией распознавания антигена, трансформированные клетки, возникающие в организме, остаются нераспознанными. Это приводит к формированию клона опухолевых клеток и, соответственно, образованию и росту опухоли. Успехи современной медицины позволяют на клеточном и молекулярном уровне изучать функционирование иммунной системы при опухолевом росте. Это дает возможность более точно установить реальные процессы, лежащие в основе взаимоотношений между иммунной системой и опухолью. К примеру, описано несколько способов ускользания опухолевых клеток от распознавания [167, 190]. В то же время нет однозначного представления о состоянии иммунной системы в условиях роста опухоли. Несмотря на данные, указывающие на формирование иммуносупрессии при канцерогенезе, не определены конкретные механизмы, приводящие к снижению иммунологической реактивности. Поэтому сегодня в клинической онкологии нет эффективных методов иммунотерапии. В связи с этим иммунологические исследования при онкологических заболеваниях актуальны и представляют теоретический и практический интерес.

Опухоли желудочно-кишечного тракта составляют значительную долю всех онкологических заболеваний. Рак желудка и рак толстой кишки относятся к числу злокачественных новообразований с наиболее высоким уровнем заболеваемости и смертности как во всем мире, так и в России [13, 29, 124, 132]. Как правило, неблагоприятный прогноз клинического течения этих видов рака связан с тем, что нет ясного представления о механизмах возникновения и роста опухолей, о реакции иммунной системы на трансформированные клетки и поэтому своевременная диагностика злокачественных новообразований желудочно-кишечного тракта становится затруднительной (1-Й стадии заболевания в 2001 году были выявлены только у 20% пациентов). Низкие показатели ранней диагностики онкологических заболеваний желудочно-кишечного тракта определяют высокую летальность на первом году. Таким образом, раннее выявление рака желудка и рака толстой кишки является важнейшей задачей современной медицины. Для решения этой проблемы необходимо иметь более четкое представление о механизмах канцерогенеза, о взаимоотношениях, которые складываются между иммунной системой и развивающейся опухолью в желудочно-кишечном тракте. С нашей точки зрения особого внимания заслуживает изучение иммунологической реактивности у лиц с предраковыми состояниями, когда возможно и происходит возникновение и формирование иммунного дефицита.

Известно, что у больных с опухолями желудочно-кишечного тракта существуют нарушения функций иммунной системы. Но до сих пор нет единого мнения о механизмах формирования иммунологической недостаточности при данных патологиях. Считается, что возникновение опухоли становится возможным на фоне снижения иммунного надзора. Поэтому одной из главных задач клинической иммунологии является изучение иммунологического состояния онкологических больных и поиск критериев иммунологической недостаточности на разных этапах опухолевого процесса. Для более ранней диагностики и последующего мониторинга лиц с предраковыми состояниями и раком желудка и толстой кишки необходимо изучить особенности иммунологической реактивности у данной группы больных. Для решения этой задачи целесообразно исследовать динамику показателей функциональной активности иммунной системы онкологических пациентов на этапах активации, пролиферации и дифференцировки лимфоцитов.

Анализ литературы показал, что данных по раку желудка и колоректальному раку немного. Большинство работ посвящено изучению дифференцировочных антигенов. Для разных групп онкологических больных, как правило, не выявляется существенных различий в уровне основных субпопуляций лимфоцитов (CD3+, CD4+, CD8+, CD19+) по сравнению с показателями здоровых доноров [39]. Подобная закономерность описана при различных стадиях рака желудка [21, 109]. Однако в ряде работ показано снижение числа CD3+, CD4+, CD8+-лимфоцитов периферической крови уже при II стадии рака желудка [86]. На поздних стадиях заболевания эти изменения, как правило, более выражены [86, 196]. Наряду со снижением уровня Т-лимфоцитов при раке толстой кишки и раке желудка отмечается уменьшение CD 19+-клеток [49, 55, 196].

Особый интерес представляет изучение экспрессии активационных маркеров и молекул адгезии на Т-лимфоцитах периферической крови для оценки иммунологического состояния больных с онкологической патологией [15, 31]. Есть сведения об изменениях уровня экспрессии некоторых мембранных антигенов лимфоцитов при лимфопролиферативных заболеваниях, раке тела матки, раке яичника и раке молочной железы [15, 50, 164, 181]. В литературе немного исследований, в которых уделяется внимание особенностям экспрессии поверхностных антигенов на лимфоцитах периферической крови больных с опухолями желудочно-кишечного тракта, и при этом они носят противоречивый характер [21, 69, 86, 161, 186]. В связи с этим нет четкого представления об изменениях функций иммунной системы в процессе опухолевого роста при раке желудка и раке толстой кишки.

Цель исследования заключалась в изучении экспрессии активационных маркеров (CD25, CD71, CD95, CD98 и HLA-DR) на лимфоцитах периферической крови больных со злокачественными опухолями желудочно-кишечного тракта и в изучении возможности использования этих показателей для прогноза и мониторинга опухолевого процесса.

Были поставлены следующие задачи:

Научная новизна работы:

4. Впервые у больных раком желудка изучена динамика активационных маркеров лимфоцитов периферической крови при иммунотерапии Ронколейкином.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

1. Для всех злокачественных опухолей независимо от локализации и гистологического типа характерна повышенная экспрессия активационных маркеров (CD25 и CD71) на лимфоцитах периферической крови, причем более высокая экспрессия указанных маркеров при колоректальном раке и раке желудка свидетельствует о благоприятном прогнозе.

3. У онкологических больных показатели уровня экспрессии активационных маркеров (CD25, CD71 и CD95) являются более информативными по сравнению с дифференцировочными антигенами.

4. Иммунотерапия рекомбинантным интерлейкином-2, направленная на активацию лимфоцитов, повышает экспрессию CD25 и CD95 и способствует благоприятному течению рака желудка.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на V и VI молодежных научных конференциях "Актуальные проблемы биологии" (Сыктывкар, 1998 и 1999), Международной конференции "Биологические основы изучения, освоения и охраны животного и растительного мира, почвенного покрова Восточной Фенноскандии" (Петрозаводск, 1999), IV, V, VI и VII Всероссийских научных конференциях с международным участием "Дни иммунологии в Санкт-Петербурге" (Санкт-Петербург, 2000, 2001, 2002 и 2003), IV Съезде иммунологов и аллергологов СНГ (Москва, 2001), XI, XII и XIII Национальных конгрессах по болезням органов дыхания (Москва, 2001, 2002 и 2003), Научной конференции "Карелия и РФФИ" (Петрозаводск,

2002) и Международной научно-практической школе-конференции "Цитокины. Воспаление. Иммунитет" (Санкт-Петербург, 2002).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 17 печатных работ (3 статьи).

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 139 страницах машинописного текста, содержит 29 таблиц, 14 рисунков и состоит из введения, трех глав, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, насчитывающего 199 источников (45 -на русском и 154 - на иностранных языках).

Заключение диссертационного исследования на тему "Изучение экспрессии активационных маркеров лимфоцитов больных с опухолями желудочно-кишечного тракта"

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что у онкологических больных независимо от локализации опухоли имеет место повышенный уровень экспрессии CD25 и CD71 на лимфоцитах периферической крови.

2. У больных раком желудка и колоректальным раком при благоприятном прогнозе количество CD25+- и CD71+-лимфоцитов существенно выше по сравнению с пациентами, у которых в последующем выявляется прогрессирование заболевания.

3. У больных раком желудка в отличие от других локализаций уже на ранних (I-II) стадиях выявлена повышенная экспрессия CD95 на лимфоцитах периферической крови.

4. Уровень экспрессии активационных антигенов (CD25, CD71, CD95) более четко отражает состояние иммунной системы при опухолях желудочно-кишечного тракта по сравнению с дифференцировочными антигенами (CD3, CD4, CD8, CD16, CD 19).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для иммунологического мониторинга у больных со злокачественными новообразованиями целесообразно использовать определение уровня экспрессии активационных маркеров (CD25, CD71 и CD95) на лимфоцитах периферической крови.

2. Уровень экспрессии дифференцировочных антигенов (CD3, CD4, CD8, CD 19) при злокачественных новообразованиях изменялся незначительно, в связи с чем определение этих показателей является нецелесообразным при иммунологическом обследовании больных раком желудка и колоректальным раком.

3. При раке желудка и колоректальном раке более высокая экспрессия CD25 и CD71 является критерием благоприятного прогноза заболевания.

4. При иммунотерапии Ронколейкином для мониторинга больных раком желудка рекомендовано определение уровня экспрессии CD25 и CD95 на лимфоцитах периферической крови.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2004 года, Шибаев, Михаил Игоревич

1. Баева Е.В., Соколенко В.Л., Базыка Д.А. Модификации экспрессии Т-клеточных активационных маркеров лимфоцитами периферической крови лиц, проживающих на загрязненных радионуклидами территориях // Иммунология. 1999. - №1. - С. 54-57.

2. Белохвостов А.С., Новик А.А. Роль молекулярно-генетических исследований в диагностике солидных опухолей // Вопр. онкол. 1999. -Т.45. - №6. - С. 599-606.

3. Василенко И.В., Садчиков В.Д., Галахин К.А., Сургай Н.Н., Сидорова Ю.Д., Садчикова М.В., Фоменко П.Г., Курик Е.Г. Предрак и ракжелудка: этиология, патогенез, морфология, лечебный патоморфоз. К.: Книга плюс, 2001. - 232 с.

4. Вашакмадзе JI.A., Бутенко А.В., Пикин О.В. Результаты паллиативных операций при раке желудка // Рос. онкол. журн. 2000. - №5. - С. 32-35.

5. Виноградская Г.Р., Маринец О.В. ПЦР-технологии в диагностике, прогнозе и контроле терапии онкологических заболеваний // Вопр. онкол. 2001. - Т.47. - №1. - С. 7-17.

6. Вишняков А.А. Современные аспекты клиники, диагностики и лечения рака желудка // Русский медицинский журнал. 1998. - Т.6. - №10.

7. Ю.Ганина К.П., Зиневич А.К., Жеро С.В. Специальные методы исследования при предопухолевых и опухолевых процессах желудка // Вопр. онкол. 1987. - Т.39. - №1. - С. 17-23.

8. П.Герасимова Н.М., Кузовкова Т.В., Левчик Н.К. Влияние ридостина на показатели иммунной системы больных рецидивирующим генитальным герпесом // Мед. иммунология. 2001. - Т.З. - № 2. - С. 312-313.

9. Головизнин М.В. Вмешательство раковых клеток в процессы созревания и селекции Т-лимфоцитов как фактор опухолевой прогрессии // Иммунология. 2001. - №6. - С. 4-10.

10. Н.Жаворонков А.А., Кудрин А.В. Иммунные функции трансферрина // Гематол. и трансфузиол. 1999. - Т.44. - №2. - С. 40-43.

11. Кадагидзе З.Г. Иммунодиагностика и иммунотерапия опухолей // Вестн. РАМН. 1999. - №5. - С. 19-22.

12. Кныш В.И., Черкес B.J1., Ананьев B.C. Пути улучшения результатов лечения колоректального рака // Рос. онкол. журн. 2001. - №5. - С. 2527.

13. Крылова Р.И. Спонтанные опухоли у обезьян // Гематол. и трансфузиол. 2000.-Т.45.-№3.-С. 21-24.

14. Кузьмина Е.Г., Дорошенко Л.Н., Пантелеева Е.С., Неприна Г.С., Сироткина Н.П., Ватин О.Е., Крикунова Л.И. Иммунный статус больных раком шейки матки I-III стадий при сочетанной лучевой терапии // Мед. иммунология. 1999. - Т. 1. - №3-4. - С. 99-100.

15. Лыков А.П., Басс А.А., Ложкин И.Д., Егоров Д.Н., Вардосанидзе К.В., Абрамов В.В., Козлов В.А. Цитотоксическая активность клеток крови у больных раком желудка с различной активностью нервной системы // Иммунология. 2000. - №6. - С. 43-46.

16. Маркус Д.М. Генетические системы ABO, Hh, секреторная и Льюис // в кн. "Иммуногенетика человека" (под ред. С. Литвина). Т.2. - М.: Мир, 1994.-С. 215-230.

17. Медик В.А., Токмачев М.С., Фишман Б.Б. Статистика в медицине и биологии: Руководство. В 2-х томах. / Под ред. Ю.М. Комарова. Т. 1. Теоретическая статистика. - М.: Медицина, 2000. - 412с.

18. Москалева Е.Ю., Северин С.Е. Перспективы создания противоопухолевых вакцин с использованием дендритных клеток // Иммунология. 2002. - №1. - С. 8-15.

19. Никонова М.Ф., Литвина М.М., Варфоломеева М.И., Ярилина А.А., Ярилин А.А. Апоптоз и пролиферация как альтернативные формы ответа Т-лимфоцитов на стимуляцию // Иммунология. 1999. - №2. - С. 20-23.

20. Новик А.А., Камилова Т.А., Цыган В.Н. Генетика в клинической медицине (Руководство для врачей). СПб.: ВмедА, 2001. - 219 с.

21. Пивень Н.В., Новиков В.В., Лухверчик Л.Н., Кузьменкова Е.И. Иммуноферментный анализ Fas-рецептора (CD95) у лиц с патологией щитовидной железы // Иммунопатология аллергол. инфектол. 2001. -№3. - С. 15-20.

22. Пиманов С.И., Лемешко З.А., Вергасова Е.В. Скрининговая диагностика рака ободочной кишки // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. 2001. - Т.П. - №6. - С. 15-23.

23. Пинегин Б.В. Методы иммунодиагностики при иммунологических обследованиях населения // Гематол. и трансфузиол. 1993. - Т.38. - №4. -С. 41-44.

24. Пинегин Б.В., Хаитов P.M. Иммунодиагностика заболеваний, связанных с нарушением иммунитета // Гематол. и трансфузиол. 1997. - Т.42. -№2. - С. 40-43.

25. Порядин Г.В., Салмаси Ж.М., Макарков А.И. К вопросу о снижении числа СБ8+-лимфоцитов при атопии: поиск компромисса // Иммунология. 1997. - №3. - С. 35-38.

26. Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология. М.: Мир, 2000. - 592с.

27. Стандартизация методов иммунофенотипирования клеток крови и костного мозга (методические рекомендации) // Мед. иммунология. -1999. Т.1. - №5. - С. 21-43.

28. Симбирцев А.С. Интерлейкин-2 и рецепторный комплекс интерлейкина-2 в регуляции иммунитета // Иммунология. 1998. - №6. -С. 3-8.

29. Тотолян А.А. Иммунологические эффекты ронколейкина in vitro и in vivo // Иммунология. 1998. - №6. - С. 45.

30. Филатов П.П., Суринов Б.П. Вторичные иммунодефицита и их коррекция у онкологических больных после лучевой и комбинированной терапии // Мед. радиол. 1987. - №9. - С. 73-77.

31. Хадден Д. Иммуностимуляторы: новые препараты и подходы // 2-й Национальный конгресс РААКИ "Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофармакологии", 2124 сентября 1998г., Москва. сб. трудов. - С. 29-33.

32. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Иммунная система желудочно-кишечного тракта: особенности строения и функционирования в норме и при патологии // Иммунология. 1997. - №5. - С. 4-7.

33. Ярилин А.А. Взаимодействие эпителиальных и лимфоидных барьерных тканей в норме и при патологии // 4-й Конгресс РААКИ "Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии", 29-31 мая 2001г., Москва. сб. трудов. - Т. 1. - С. 261-298.

34. Ярилин А.А. Основы иммунологии: Учебник. М.: Медицина, 1999. -608 с.

35. Adachi Y., Kitano S., Sugimachi К. Surgery for gastric cancer: 10-year experience worldwide // Gastric Cancer. 2001. - Vol. 4. - P. 166-174.

36. Ahlgren J.D. Gastrointestinal malignancies // Prim. Care. 2001. - Vol. 28. -№3. - P. 647-660.

37. Armstrong T.D., Pulaski B.A., Ostrand-Rosenberg S. Tumor antigen presentation: changing the rules // Cancer Immunol. Immunother. 1998. -Vol. 46. - P. 70-74.

38. Baryshnikov A.Yu., Polosukhina E.R., Zabotina T.N., Lazareva N.I., Lukashina M.I., Shishkin Yu.V., Chinaijova I.V., Tenuta M.R., Metelitsa

39. S., Kadagidze Z.G. Fas (APO-1/CD95) antigen: new activation marker for evaluation of the immune status // Russian Journal of Immunology. 1997. -Vol. 2.-№2.-P. 115-120.

40. Beck C., Slocombe R.F., O'Neill Т., Holloway S.A. The use of ultrasound in the investigation of gastric carcinoma in a dog // Aust. Vet. J. 2001. - Vol. 79.-№5.-P. 332-334.

41. Beckman L., Angqvist K.A. On the mechanism behind the association between ABO blood groups and gastric carcinoma // Hum. Hered. 1987. -Vol. 37. - №3. - P. 140-143.

42. Belluco C., Esposito G., Bertorelle R., Alaggio R., Giacomelli L., Bianchi L.C., Nitti D., Lise M. Fas ligand is up-regulated during the colorectal adenoma-carcinoma sequence // Eur. J. Surg. Oncol. 2002. - Vol. 28. - №2. -P. 120-125

43. Bentdal O.H., Froland S.S., Bosnes V., Bergan A., Soreide O., Flatmark A. Alterations in lymphocyte subsets in blood may predict resectability in carcinoma of cardia or oesophagus // Cancer Lett. 1996. - Vol.100. - №1-2. -P. 133-138.

44. Blaker H.} von Herbay A., Penzel R., Gross S., Otto H.F. Genetics of adenocarcinomas of the small intestine: frequent deletions at chromosome 18q and mutations of the SMAD4 gene // Oncogene. 2002. - Vol. 21. - №1. -P. 158-164.

45. Botti C.} Seregni E.} Ferrari L.} Martinetti A., Bombardieri E. Immunosuppresive factors: role in cancer development and progression // Int. J. Biol. Markers. 1998. - Vol. 13. - Issue 2. - P. 51-69.

46. Boyum A. Separation of leucocytes from blood and bone marrow // Scand. J. Clin. Lab. Invest. 1968. - Vol. 21. - P. 31-50.

47. Cardi G., Heany J.A., Schned A.R., Ernstoff M.S. Expression of Fas (APO-1/CD95) in tumor-infiltrating and peripheral blood lymphocytes in patients with renal cell carcinoma // Cancer Res. 1998. - Vol. 58. - №10. - P. 20782080.

48. Carosella E.D., Rouas-Freiss N., Paul P., Dausset J. HLA-G: a tolerance molecule from the major histocompatibility complex // Immunol. Today. -1999. Vol. 20. - № 2. - P. 60-62.

49. Chakraborty N.G., Twardzik D.R., Sivanandham M., Ergin M.T., Hellstrom K.E., Mukheiji B. Autologous melanoma-induced activation of regulatory T cells that suppress cytotoxic response // J. Immunol. 1990. - Vol. 145. - №7. - P. 2359-2364.

50. Davies В., Hiby S.} Gardner L.} Loke Y.W., King A. HLA-G expression by tumors // Am. J. Reprod. Immunol. 2001. - Vol. 45. - № 2. - P. 103-107.

51. Davis P.A., Sano T. The difference in gastric cancer between Japan, USA and Europe: what are the facts? What are the suggestions? // Crit. Rev. Oncol. Hematol. 2001. - Vol. 40. - №1. - P. 77-94.

52. Donina S., Engele L., Jaunalksne I., Zakenfelds G. TNF-a and CD95+cells in peripheral blood in colorectal cancer and benign large bowel patients // Annals of Oncology. 2000. - Vol. 11. - Suppl. 4. - P. 47.

53. Eckert M.W., McKnight C.A., Lee J.A., Araya J., Correa P., Cohn I., Levine E.A. Early gastric cancer and Helicobacter pylori: 34 years of experience at Charity Hospital in New Orleans // Am. Surg. 1998. - Vol. 64. - №6. - P. 545-551.

54. E1-Rifai W., Powell S.M. Molecular biology of gastric cancer // Semin. Radiat. Oncol. 2002. - Vol. 12. - №2. - P. 128-140.

55. Ferrone S., Finerty J.F., Jaffee E.M., Nabel G.J. How much longer will tumour cells fool the immune system? // Immunol. Today. 2000. - Vol. 21. -№ 2. - P. 70-72.

56. Finke J., Ferrone S., Frey A., Mufson A., Ochoa A. Where have all the T cells gone? Mechanisms of immune evasion by tumors // Immunol. Today. -1999. Vol. 20. - № 4. - P. 158-160.

57. Franceschi S. Nutrients and food groups and large bowel cancer in Europe // Eur. J. Cancer Prev. 1999. - Vol. 8. - Suppl. 1. - P. S49-S52.

58. Fukushima Т., Takenoshita S. Colorectal carcinogenesis // Fukushima J. Med. Sci. 2001. - Vol. 47. - №1. - P. 1-11.

59. Garrido F., Ruiz-Cabello F., Cabrera Т., Perez-Villar J.J., Lopez-Botet M., Duggan-Keen M., Stern P.L. Implications for immunosurveillance of altered HLA class I phenotypes in human tumours // Immunol. Today. 1997. - Vol. 18.-№2.-P. 89-95.

60. Glaspy J.A. Therapeutic options in the management of renal cell carcinoma // Semin. Oncol. 2002. - Vol. 29. - №3. - Suppl. 7. - P. 41-46.

61. Griffith T.S., Ferguson T.A. The role of FasL-induced apoptosis in immune privilege // Immunol. Today. 1997. - Vol. 18. - № 5. - P. 240-244.

62. Gulley M.L. Molecular diagnosis of Epstein-Barr virus-related diseases // J. Mol. Diagn. 2001. - Vol. 3. - №1. - P. 1-10.

63. Gunji Y., Hon S., Aoe Т., Asano Т., Ochiai Т., Isono K., Saito T. High frequency of cancer patients with abnormal assembly of the T cell receptor

64. CD3 complex in peripheral blood T lymphocytes // Jpn. J. Cancer Res. -1994. Vol. 85. - Issue 12. - P. 1189-1192.

65. Hara K., Kudoh H., Enomoto Т., Hashimoto Y., Masuko T. Malignant transformation of NIH3T3 cells by overexpression of early lymphocyte activation antigen CD98 // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1999. - Vol. 262. -№3. -p. 720-725.

66. Hong W.S., Min Y.I., Son Y.S., Hong S.I. Peripheral blood lymphocyte subsets in patients with stomach cancer // J. Korean Med. Sci. 1995. -Vol.10.-Issue3.-P. 164-168.

67. Jacob S., Praz F. DNA mismatch repair defects: role in colorectal carcinogenesis // Biochimie. 2002. - Vol. 84. - №1. - P. 27-47.

68. Janeway C.A., Travers P. Immunobiology: the immune system in health and disease. Current Biology Ltd. / Garland Publishing Inc. - 1994.

69. Jarvinen R., Knekt P., Hakulinen Т., Aromaa A. Prospective study on milk products, calcium and cancers of the colon and rectum // Eur. J. Clin. Nutr. -2001. Vol. 55. - №11. - P. 1000-1007.

70. Jeal W., Goa K.L. Aldesleukin (recombinant interleukin-2) // Biodrugs. -1997. Vol. 7. - №4. - P. 285-317.

71. Jonasch E., Haluska F.G. Interferon in oncological practice: review of interferon biology, clinical applications, and toxicities // Oncologist. 2001. -Vol. 6. - №1. - P. 34-55.

72. Kang J.K., Yoon S.J., Kim N.K., Heo D.S. The expression of MHC class I, TAP 1/2, and LMP 2/7 gene in human gastric cancer cell lines // Int. J. Oncol. 2000. - Vol. 16. -№6.-P. 1159-1163.

73. Kawa K. Epstein-Barr virus-associated diseases in humans // Int. J. Hematol. 2000. - Vol. 71. - №2. - P. 108-117.

74. Kiessling R., Wasserman K., Horiguchi S., Kono K., Sjoberg J., Pisa P., Petersson M. Tumor-induced immune dysfunction // Cancer Immunol. Immunother. 1999. - Vol. 48. - №7. - P. 353-362.

75. Kijima Y., Hokita S., Takao S., Baba M., Natsugoe S., Yoshinaka H., Aridome K., Otsuji Т., Itoh Т., Tokunaga M., Eizuru Y., Aikou T. Epstein

76. Barr virus involvement is mainly restricted to lymphoepithelial type of gastric carcinoma among various epithelial neoplasms // J. Med. Virol. -2001. Vol. 64. - №4. - P. 513-518.

77. Kim Y.S., Kim K.H., Choi J.A., Lee J.H., Kim H.K., Won N.H., Kim I. Fas (APO-1/CD95) ligand and Fas expression in renal cell carcinomas: correlation with the prognostic factors // Arch. Pathol. Lab. Med. 2000. -Vol. 124.-№5.-P. 687-693.

78. Kishimoto H., Surh C.D., Sprent J. Upregulation of surface markers on dying thymocytes // J. Exp. Med. 1995. - Vol. 181. - №2. - P. 649-655.

79. Kohne C.H., Wils J.A., Wilke H.J. Developments in the treatment of gastric cancer in Europe // Oncology. 2000. - Vol. 14. - №12. - P. 22-25.

80. Kokkola A., Sipponen P. Gastric cancer in young adults // Hepatogastroenterology. 2001. - Vol. 48. - №42. - P. 1552-1555.

81. Koyama S., Ebihara Т., Fukao K., Osuga T. Two-color flow cytometry analyses of peripheral blood lymphocytes (PBL) and lymphokine-activated PBL in gastric cancer patients // Gan No Rinsho. 1988. - Vol.34. - №4. - P. 435-441.

82. Koyama S., Koike N., Adachi S. Fas receptor counterattack against tumor-infiltrating lymphocytes in vivo as a mechanism of immune escape in gastrc carcinoma // J. Cancer Res. Clin. Oncol. 2001. - Vol. 127. - № 1. - P. 20-26.

83. Koyama S., Maruyama Т., Adachi S., Nozue M. Expression of costimulatory molecules B7-1 and B7-2 on human gastric carcinoma. 1998. -Vol. 124. - №7.-P. 383-388.

84. Kuo S.H., Chang D.B., Lee Y.C., Lee Y.T., Luh K.T. Tumour-infiltrating lymphocytes in non-small cell lung cancer are activated T lymphocytes // Respirology. 1998. - Vol. 3. - Issue 1. - P. 55-59.

85. Lang S., Atarashi Y., Nishioka Y., Stanson J., Meidenbauer N., Whiteside T.L. B7.1 on human carcinomas: costimulation of T cells and enhanced tumor-induced T-cell death // Cell. Immunol. 2000. - Vol. 201. - №2. - P. 132-143.

86. Lauren P. The two histological main types of gastric carcinoma: diffuse and so-called intestinal types carcinoma // Acta Path. Microbiol. Scand. -1965.-Vol. 64.-№1.-P. 31-49.

87. Lee T.B., Min Y.D., Lim S.C., Kim K.J., Jeon H.J., Choi S.M., Choi C.H. Fas (APO-1/CD95) and Fas ligand interaction between gastric cancer cells and immune cells // J. Gastroenterol. Hepatol. 2002. - Vol. 17. - №1. - P. 32-38.

88. Lenardo M.J. Interleukin-2 programs mouse alpha beta T lymphocytes for apoptosis //Nature. -1991. Vol. 353. - P. 858-861.

89. Levey D.L., Srivastava P.K. Alterations in T cells of cancer-bearers: whence specificity? // Immunol. Today. 1996. - Vol. 17. - №8. - P. 365368.

90. Lim S.C. Expression of Fas ligand and sFas ligand in human gastric adenocarcinomas // Oncol. Rep. 2002. - Vol. 9. - №1. - P. 103-107.

91. Maeda A., Aragane Y., Tezuka T. Expression of CD95 ligand in melanocytic lesions as a diagnostic marker // Br. J. Dermatol. 1998. - Vol. 139. -№2. -P. 198-206.

92. Markowitz A.J., Winawer S.J. Screening and surveillance for colorectal cancer// Semin. Oncol. 1999. - Vol. 26. - №5. - P. 485-498.

93. Mauad E.G., Nogueira J.L., Pachecode Souza J.M., Wohnrath D.R., Torres de Oliveira A.T., Colli G., de Mendon9a Costa A. Gastric cancer in young adults // Revista Brasileira De Cancerologia. 2000. - Vol. 46. - №3.

94. McMillan D.C., Fyffe G.D., Wotherspoon H.A., Cooke T.G., McArdle C.S. Prospective study of circulating T-lymphocyte subpopulations and disease progression in colorectal cancer // Dis. Colon Rectum. 1997. - Vol. 40.-№9.-P. 1068-1071.

95. Melichar В., Touskova M., Solichova D., Kralickova P., Kopecke G. CD4+ T-lymphocytopenia and systemic immune activation in patients with primary and secondary liver tumours // Scand. J. Clin. Lab. Invest. 2001. -Vol. 61.-№5.-P. 363-370.

96. Melichar В., Touskova M., Vesely P. Effect of irinotecan on the phenotype of peripheral blood leukocyte populations in patients with metastatic colorectal cancer // Hepatogastroenterology. 2002. - Vol. 49. -№46. - P. 967-970.

97. Ming S.C. Cellular and molecular pathology of gastric carcinoma and precursor lesions: A critical review // Gastric cancer. 1998. - Vol. 1. - Issue 1.-P. 31-50.

98. Munoz. N., Franceschi S. Epidemiology of gastric cancer and perspectives for prevention // Salud. Publica Мех. 1997. - Vol. 39. - №3. -P. 318-330.

99. Murta E.F., de Andrade J.M., Falcco R.P., Bighetti S. Lymphocyte subpopulations in patients with advanced breast cancer submitted to neoadjuvant chemotherapy // Tumori. 2000. - Vol. 86. - №5. - P. 403-407.

100. Miischen M., Moers C., Warskulat U. Even J., Niederacher D., Beckmann M.W. CD95 ligand expression as a mechanism of immune escape in breast cancer // Immunology. 2000. - Vol. 99. - №1. - P. 69-77.

101. Nagashima H., Mori M., Sadanaga N., Mashino K., Yoshikawa Y., Sugimachi K. Expression of Fas ligand in gastric carcinoma relates to lymph node metastasis // Int. J. Oncol. 2001. - Vol. 18. - №6. - P. 1157-1162.

102. Nawashiro H., Otani N., Shinomiya N., Fukui S., Nomura N., Yano A., Shima K., Matsuo H., Kanai Y. The role of CD98 in astrocytic neoplasms // Hum. Cell. 2002. - Vol. 15. - №1. - P. 25-31.

103. Ngoi S.S., Moochhala S.M., Chhatwal V.J., Loh Y.S. The human leucocyte antigen complex: its role in colorectal cancer // Ann. Acad. Med. Singapore. 1996. - Vol. 25. - №1. - P. 11-16.

104. Nishiyama Ki K., Yao Т., Yonemasu H., Yamaguchi К., Tanaka M., Tsuneyoshi M. Overexpression of p53 protein and point mutation of K-ras genes in primary carcinoma of the small intestine // Oncol. Rep. 2002. -Vol. 9.-№2.-P. 293-300.

105. Ochoa A.C., Longo D.L. Alteration of signal transduction in T cells from cancer patients // Important Adv. Oncol. 1995. - P. 43-54.

106. Ockert D., Schmitz M., Hampl M., Rieber E.P. Advances in cancer immunotherapy // Immunol. Today. 1999. - Vol. 20. - №2. - P. 63-65.

107. O'Connell J., Bennett M.W., O'Sullivan G.C., Collins J.K., Shanahan F. Resistance to Fas (APO-l/CD95)-mediated apoptosis and expression of Fasligand in esophageal cancer: the Fas counterattack I I Dis. Esophagus. 1999. -Vol. 12.-№2.-P. 83-89.

108. O'Connell J., Bennett M.W., O'Sullivan G.C., Collins J.K., Shanahan F. The Fas counterattack: cancer as a site of immune privilege // Immunol. Today. 1999. - Vol. 20. - № 1. - P. 46-52.

109. Ohashi H., Ogawa N. Analysis of Fas and bcl-2 expression on peripheral blood lymphocytes from primary Sjogren's syndrome // Nippon Rinsho. -1995. Vol. 53. - №10. - P.2451-2455.

110. Ohmori M., Yasunaga S., Maehara Y., Sugimachi K., Sasazuki T. DNA typing of HLA class I (HLA-A) and class II genes (HLA-DR, -DQ and -DP) in Japanese patients with gastric cancer // Tissue Antigenes. 1997. - Vol. 50.-№3.-P. 277-282.

111. Ohoshi K., Tajima Т., Mitomi Т., Tsuji K. HLA antigenes are candidate markers for prediction of lymph node metastasis in gastric cancer // Clin. Exp. Metastasis. 1996. - Vol. 14. - №3. - P. 277-342.

112. Ohtani H., Naito Y., Saito K., Nagura H. Expression of costimulatory molecules B7-1 and B7-2 by macrophages along invasive margin of colon cancer: a possible antitumor immunity? // Lab. Invest. 1997. - Vol. 77. -№3.-P. 231-241.

113. Osaki M., Kase S., Kodani I., Watanabe M., Adachi H., Ito H. Expression of Fas and Fas ligand in human gastric adenomas and intestinal-type carcinomas: correlation with proliferation and apoptosis // Gastric Cancer. -2001.-Vol. 4.-P. 198-205.

114. Panduro Cerda A., Lima Gonzalez G., Villalobos J.J. Molecular genetics of colorectal cancer and carcinogenesis // Rev. Invest. Clin. 1993. - Vol. 45.- №5. P. 493-504.

115. Parramore J.B., Wei J.P., Yeh K.A. Colorectal cancer in patients under forty: presentation and outcome // Am. Surg. 1998. - Vol. 64. - №6. - P. 563-567.

116. Potestio M., Pawelec G., Di Lorenzo G., Candore G., D'Anna C., Gervasi F., Lio D., Tranchida G., Caruso C., Romano G.C. Age-related changes in the expression of CD95 (APOl/FAS) on blood lymphocytes // Exp. Gerontol.- 1999.-Vol. 34.-P. 659-673.

117. Potter J.D. Nutrition and colorectal cancer // Cancer Causes Control. -1996. Vol. 7. - №1. - P. 127-146.

118. Rossi M.C., Zetter B.R. Selective stimulation of prostatic carcinoma cell proliferation by transferrin // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1992. - Vol. 89. -№13.-P. 6197-6201.

119. Saito Т., Kuss I., Dworacki G., Gooding W., Johnson J.T., Whiteside T.L. Spontaneous ex vivo apoptosis of peripheral blood mononuclear cells inpatients with head and neck cancer // Clin. Cancer Res. 1999. - Vol. 5. -№6. -P. 1263-1273.

120. Sanda M.G., Restifo N.P., Walsh J.C., Kawakami Y., Nelson W.G., Pardoll D.M., Simons J.W. Molecular characterization of defective antigen processing in human prostate cancer // J. Natl. Cancer Inst. 1995. - Vol. 87. - Issue 4. - P. 280-285.

121. Sasada Т., Kimura M., Yoshida Y., Kanai M., Takabayashi A. CD4+CD25+ regulatory T cells in patients with gastrointestinal malignancies: possible involvement of regulatory T cells in disease progression // Cancer. -2003. Vol. 98, - №5. - P. 1089-1099.

122. Schindowski K., Leutner S., Miiller W.E., Eckert A. Age-related changes of apoptotic cell death in human lymphocytes // Neurobiol. Aging. 2000. -Vol. 21.-№5. -P. 661-670.

123. Schmielau J., Nalesnik M.A., Finn O.J. Suppressed T-cell receptor zeta chain expression and cytokine production in pancreatic cancer patients // Clin. Cancer Res. 2001. - Vol. 7. - Suppl. 3. - P. 933s-939s.

124. Schroder W., Vering A., Stegmuller M., Strohmeier R. Lymphocyte subsets in patients with ovarian and breast cancer // Eur. J. Gynaecol. Oncol. 1997. Vol. 18. - №6. - P. 474-477.

125. Segal I., Ally R., Mitchell H. Gastric cancer in sub-Saharan Africa // Eur. J. Cancer Prev. 2001. - Vol. 10. - №6. - P. 479-482.

126. Seliger В., Maeurer M.J., Ferrone S. Antigen-processing machinery breakdown and tumor growth // Immunol. Today. 2000. - Vol. 21. - № 9. -P. 455-464.

127. Seymour К., Pettit S., O'Flaherty E., Charnley R.M., Kirby J.A. Selection of metastatic tumour phenotypes by host immune systems // Lancet 1999. -Vol. 354. - Issue 9194. - P. 1989-1991.

128. Shimoyama M., Kanda Т., Liu L., Koyama Y., Suda Т., Sakai Y., Hatakeyama K. Expression of Fas ligand is an early event in colorectal carcinogenesis // J. Surg. Oncol. 2001. - Vol. 76. - №1. - P. 63-69.

129. Si L., Si H., Chen Y., Sun Y., Wing Y. B7-1 antigen expression in tumor cells from cancerous human tissues // Anal. Quant. Cytol. Histol. 1999. -Vol. 21.-№6.-P. 521-526.

130. Sibiryak S.V., Risberg V.U., Yusupova R.Sh., Kurchatova N.N. The immune status and lymphocyte apoptosis in the opioid addicts // Russ. J. Immunol. 2001. - Vol. 6. - №3. - P. 282-290.

131. Singal D.P., Ye M., Ni J., Snider D.P. Markedly decreased expression of TAP 1 and LMP 2 genes in HLA class I-deficient human tumor cell lines // Immunol. Lett. 1996. - Vol. 50. - Issue 3. - P. 149-154.

132. Stephens L.A., Mottet C., Mason D., Powrie F. Human CD4(+)CD25(+) thymocytes and peripheral T cells have immune suppressive activity in vitro // Eur. J. Immunol. 2001. - Vol. 31. - №4. - P. 1247-1254.

133. Sunami Т., Yashiro M., Chung K.H. ICAM-1 (intercellular adhesion molecule-1) gene transfection inhibits lymph node metastasis by human gastric cancer cells // Jpn. J. Cancer Res. 2000. - Vol. 91. - №9. - P. 925933.

134. Takada K. Epstein-Barr virus and gastric carcinoma // Mol. Pathol. -2000. Vol. 53. - №5. - P. 255-261.

135. Ungefroren H., Voss M., Bernstorff W.V., Schmid A., Kremer В., Kalthoff H. Immunological escape mechanisms in pancreatic carcinoma // Ann. N.Y. Acad Sci. 1999. - Vol. 880. - P. 243-251.

136. Walczak H., Krammer P.H. The CD95 (APO-l/Fas) and the TRAIL (APO-2L) apoptosis systems // Exp. Cell Res. 2000. - Vol. 256. - P. 58-66.

137. Wang X., Xu S., Lti G., Feng J., Zhou X., Zhu C. Clinical significance of examining IL-2R in peripheral blood lymphocytes of patients with gastric cancer// Chin. Med. J. 2001. - Vol. 114. - №12. - P. 1320-1322.

138. Wheeler J.M., Warren B.F., Mortensen N.J., Kim H.C., Biddolph S.C., Elia G., Beck N.E., Williams G.T. An insight into the genetic pathway of adenocarcinoma of the small intestine // Gut. 2002. - Vol. 50. - №2. - P. 218-223.

139. Whiteside T.L Immune cells in the tumor microenvironment. Mechanisms responsible for functional and signaling defects // Adv. Exp. Med. Biol. -1998.-Vol. 451.-P. 167-171.

140. Whiteside T.L Signaling defects in T lymphocytes of patients with malignancy // Cancer Immunol. Immunother. 1999. - Vol. 48. - Issue 7. - P. 346-352.

141. Whiteside T.L., Rabinowich H. The role of Fas/FasL in immunosuppression induced by human tumors // Cancer Immunol. Immunother. 1998. - Vol. 46. - P. 175-184.

142. Wolf A.M., Wolf D., Steurer M., Gastl G., Gunsilus E., Grubeck-Loebenstein B. Increase of regulatory T cells in the peripheral blood of cancer patients // Clin. Cancer Res. 2003. - Vol. 9. - №2. - P. 606-612.

143. Yamaguchi Y., Takashima I., Funakoshi M., Kawami H., Toge T. Defective natural killer activity in gastric cancer patients: possible involvement of suppressor factor receptor // In Vivo. 1994. - Vol. 8. - №3. -P. 279-283.

144. Yan J., Ma В., Guo X., Sun Y., Zhang J., Zhang H. CD80 (B7-1) expression on human tumor cell lines and its costimulatory signals for T cell proliferation and cytokine production // Chin. Med. J. (Engl.). 1998. - Vol. 111. - №3. - P. 269-271.

145. Yuan P.X., Si L.S. Study of the infiltrating lymphocyte subsets and transferrin receptor in gastric and colorectal carcinomas // Zhonghua Bing Li Xue Za Zhi. 1992. - Vol. 21. - №2. - P. 88-91.

146. Zamoyska R. CD4 and CD8: modulators of T-cell receptor recognition of antigen and of immune responses? // Curr. Opin. Immunol. 1998. - Vol. 10. - P. 82-87.

147. Zhang X., Chen Y., Liu Y., Zhou X., Fan D. Local cytokines profile in gastric cancer lesions // Zhonghua Zhong Liu Za Zhi. 2002. - Vol. 24. - №1. -P. 14-16.

148. Zheng L., Trageser C.L., Willerford D.M., Lenardo M.J. T cell growth cytokines cause the superinduction of molecules mediating antigen-induced T lymphocyte death // J. Immunol. 1998. - Vol. 160. - №2. - P. 763-769.