Автореферат и диссертация по медицине (14.00.14) на тему:Исследование метаболизма фосфолипидов в опухолевых клетках при действии адриамицина и гидроперекиси третичного бутила

о в; я %

f»'-СНИСКАН АКАДКМИЯ МЮТ IUI КЖИХ 11АУК НЛУЧН1i псс^кдомтк/п.окии ИНСТИТУТ онкологии

ТОМСКОГО НАУЧНОГО ЦЫПТЛ

На правах рукописи •УДК Ь7в.;и4:в1Ь.>iV7.,5:в16 оов

КОНДАКОМ Ирина Викторовна

иссльжадлик МИТАКОПИНМА 'ФООЮ>ЛШ ШДОВ В 011УХ0Л15ШХ КЛИКАХ ЛГИ ДКЙОТШИ АДРИАМИЦИНА И ГИДРОНЕГККЙОИ ТГСТИЧНОГО БУТИЛА.

( M .Ш. 14 ■ ОНКОЛОГИЯ)

Автореферат

диссертация Hi) t-оискани^ ученой степени кандидата медицинских наук

Томск - 1УЖ

Работа шнолнена в Научно-исследовательском институте онкологии Томского научного центра РАМН.

Научные руководители: академик РАМН, про!«ссор

И.В. В'иСИЛЬОБ

.кандидат кед.наук Е.Б."орунов

Официальные оппонента: доктор медицинских наук

Л.Т. Адамян

доктор медицинских заук Н.П. Ларионов

Ведущая организация: Онкологический научный цеьтр ¡-¿№1

Зашита диссертации состоится "____"___1992 г.

на заседании специализированного соната К.001.34.01 по защите кандидатских диссертаций в НИИ онкологии ТНц РАМН (634001 г.Томск, пер. Кооперативный, 5).

. С диссертацией можно ознакомиться в библио-еке НИМ онкологии ТНЦ РАМН (пер. Кооперативный, 5).

• Автореферат разослан "__"____1992 г.

Учений секретарь специализированного совета

кандидат медицинских наук II.Л- Киселева

. я. ...\:п

Стдзл

Общая характеристика работы

Актуальность проблемы

Проблема возникновения и развития устойчивости популяция опухолевых клеток к химио- и иммунотерапии является одной из центральных проблем теоретической и практической онкологии. В настоящее время основное внимание исследователей.направлено на изучение механизмов лекарственной: устойчивости внутриклеточных структур и процессов, таких как синтез и структура ДШС (Блохин, 1935; Diblarco. 1975; Israel. 1987), РНК (Du Veimay et nl., 1980; Israel, 1987!. белка (Гаузе,. ДУДНИК, 1977), в то время как резистентность клеточных мембран остается практически не исследованной. Тем не менее именно от структурного и функционального состоягаш плазматической и внутриклеточных мембран во многом зависит нормальное Функционирование всей клетки.

•К нарушению структур! мембран опухолевых меток может приводить окислительное воздействие, инициируемое либо эф^кторппмв клетками системы естественно?; противоопухолевой резистентности, тйкшй как кгакрофаги и неятрофилы да*чм8н, 1934; Nathan et ai., 1901 ), либо хкмиотерапевтичесгати препаратами. Установлено, что в основе действия -широко применяемых противоопухолевых антрмшклиновшс антибиотиков даиит' с-ьооодно-радикапышй механизм (Афанасьев И.Б. 1983). Аит^ациклкноше антизиотика окисляются кислородом с образованием семихиионов и являются истовыми радикальными промоторйчз, генерирукадми суттероксиднкй анион-радикал. Исходя из этих д«тп л.тич'шм гтредполо:кить, что одним из

основных механизмов реализации противоопухолевого действия к:« антрацш^пшовш: антибиотиков, так и активных форм кислорода, продуцируемых иммунокомпетентными клетками, может являться процесс инициации перекиеного окисления липидов в клетках неоплазмы.

Однако известно, что опухоли различного гистогенеза и степени дифференцированности чрезвычайно резистентны к инициации в них липопероксидации как при действии различных лрооксидантов (Ланкин В.З., Гуревич С.М., 1974; спэезетап а!.. 1986), так и антрациклиновых антибиотиков (ВеЬсЬекгоип ог а1., 1990). В этом контексте можно предположить существование другого механизма мембранотоксичности препаратов, продуцирующих свободные радикалы.

Поскольку одним из интегральных проявлений гибели клетки в результате действия различных токсических агентов является нарушение структурной и функциональной организации клеточных мембран, основным компонентом которых являются фосфолишды, возможно, именно нарушение фосфолипидного метаболизма опухолевых клеток будет являться причиной их гибели в процессе свободно-радикального повреждения. Однако, до настоящего времени роль процессов ферментативной деградации и репарации фосфолипидов в поддержании стабильности мембран опухолевых клеток при окислительном воздействии остается неясной. Учитывая защитную роль процессов восстановления фосфолипидов в плазматической мембране клеток, актуальней является изучение зависимости повреждения опухолевых клеток препаратами, генерирувдиг/л свободные радикалы, от скорости, гидролиза и рэацилированя фосфолипидов.

Цель исследования:

Целью настоящей работы являлось изучение to vivo и in vitro роли процессов деащшрования-реацилирования фоефо-лшшдов опухолевых клеток в реализации механизмов м&мбракотоксического действия* адриамщина к гидроперекиси ■третичного бутила. Задачи исследования:

1. Исследовать мембранотоксическое действие адриаьшшша и гидроперекиси третичного бутила по отношению к клеткам мастоцитомн кети P3I5,

2. Исследовать in vitro метаболизм фос-флипидов в опухолевых' клетках при действии гидроперекиси третичного бутила. • •

3. Исследовать in vitro влияние адриамицина на метаболизм фосфолипмдов опухолевих клеток.

4. Исследовать метаболизм фэсфолипидов в опухолевых клетках при . введении адриамицина in vivo животным опухоленоснтелям.

Научная новизна работы:

В результате проведенной работы впервые экспериментально исследовано влияние препаратов, продуцирующих свободные радикалы, на метаболизм фосфслипидов опухолевых клеток к оценена роль процессов гидролиза и реацилкровакия фосфолипидов в реализации мекбранотоксчческого действия адриамицина и гидроперекиси третичного бутила. Б качестве модели злокачественного роста использована перевивная опухоль ->М8СТОВДТОМ8 май

Показано, что действие in vitro адриамицкна и гидроперекиси третичного бутила на мотки мастоциточы F8I5 сопровождается уверением проницаемости плазматических мембран для высокомолекулярных веществ и нарушением структуры кж'точных мембран.

Впервые установлено, что гидроперекись третичного бутила значительно усиливает выход эравдонзта из мембранных фосфолшшдов и ингибирует процессы реацилирования. В результате происходит значительное накопление -дизсфосфати-дилхолина, что, возможно, является -критическим фактором стабильности мембраны, Адриамицин in vitro ингибирует включение арахидоновой кислоты в клеточные фосфолшиды не влияя при этом на выход жирной кислоты из опухолевых клеток.

Удалось впервые установить, что адриашцин при введении in vivo значительно ингибирует включение арахидоновой .кислоты в фосфолнпнда опухолевых клеток (главным образом в фосфатидилхолин и кардиолшкн), а такае в нейтральные линиды. Удаление адриамицина из клеток стимулировало включение арахидоновой кислоты в фосфолшшда. Практическая значимость работы:

Практическую значимость проведенной работы в первую очередь определяют новые данные о биотических механизмах мембранотоксической активности веществ, генерирующих свободные радикалы, а также о механизмах формирования резистентности' мембран опухолевых клеток к противоопухолевому препарату -адрйачищшу. Вывода, вытекающие из этих результатов могут служить,. основой для поиска препаратов,. ингибиторов реацилирования фосфолшшдов, применение которых в.

онкологической практике монет потенцировать противоопухолевое действие квроко нрименяемнх аитроцкклшовнх антибиотиков. Апробация робота.

Диссертация била апробирована на меалабораторной конференции НИИ онкологии ТЩ РАМН в марте 1932 года.

Основние положения диссертации были доложены в докладах на Всесоюзном симпозиуме "Биохимия опухолевой клетки" (Минск, 19Э0 г.) и 10-ОЙ Отчетной сессии БИИ онкологии ТНЦ. РАМН (Томск. 1.990 г.).

Публикация результатов исследования:

Основные результаты диссертации изложены в четырех печатных работах. Объем и структура диссертации:

Диссертационная работа состоит, из вводония, обзора литературы, главы "Материалы и метода исследования", О глав раздела "Результаты и обсуждение", заключения и выводов. Материалы диссертации изложены на 120 страницах■машинописного текста, включают 5 таблиц и 22 рисунка. Библиография содержит 192 ссылки на отечественные и зарубежные работы.

Содераание работа

Глава I. Роль метаболизма фосфоляпидов в формировании резистентности опухолевых ктеток к свободно-радикальному воздействию В обзоре литературы рассматриваются следующие вопросы: - особенности структуры и метаболизма фосфолипидов в опухолевых клетках;

- а -

-'метаболизм фоефолипидов при окислительном воздействии на

кл0тки

- механизмы мембранотоксического действия адриашцина Глава 2. Материалы и метода исследования

В работе использовано 240 мышей линии вва/2, полученных из Сибирского отделения Научно-исследовательской лаборатории экспериментальных биологических моделей РАМН (г. Томск).

D качестве модели опухолевого роста использована мышиная маетоцитома F8I5, перевиваемая внутрибрдашшо на мышах *инии dba/p. Опухоль получена из банка опухолевых штаммов бс1щ РАМН. Тестирование шврездащего действия адриамщшз ("Farmitalia", Италия) и гидроперекиси третичного бутила CKerck", Германия) in vitro на плазматические избраны опухолевых меток проводили но изменению проницаемости опухолевых клеток для йК-езы (Рыкова с соавт., 1932). Морфологические исследования стабильности мембран опухолевых . клеток оценивали макроскопически с примененном фазовоконтрастного объектива.

Oiipe деление включения Е1-1^с]арахмдоновой кислоты ("Amcruhaa", Англия) в клетки. маетоцитома Р31Б и выхода (1 4с ]арахидояоьой 1шслотц из клеток осуществляли путем регистрам количества радионуклидов в -опухолевнх' клетках и внеклеточной среде инкубации на гзадкостко-сцинтилляционяом счетчике Mark-Ill (Тгаоог Analytic, Голландия).

Изучение скорости фос&огаайдаого реацилироваыш проводов носле- экстракции предварительно меченых [ 1 -14с ]арахидоновой кислотой фосфолипидов' клеток мастоцитомы P8I5. Фоефолишдн разделяли при помощи хроматографа' "Ультрахром о Ti" ("та", Швеция) с использованием колонки uitropao TSK-Si-150; 4,6x250

мм. Элюируемне фракции собирались в сцинтилляцадше флаконы каядые 60 сек. для измерения радиоактивности. Содержание Индивидуальных фосфоляпидннх классов определяли методом двумерной тонкослойной хроматографии в микроваряанге ííaskovsky, • Latyshov, 1975) на силшсагеле kiesegsl ^O.fg^ ("Merck", Германия). Определение содержаний нсюргашческого фосфора ' в фосфолипидяем экстракте проводили спектрофотояетрячески (Ynskovsky et al. 1975).

Действие адриамщкпа на фосфэляпщщое реаштлзревяшв in

vivo в клетках мастоцитомн P8I5 изучали, вводя препарат мышам-

носителям опухоли в дозе Б мг. на кг. веса. Противоопухолевый

сффект препарата оценивали по уменьшению объема клеток асцита

в опытной груше 'животных го отношению к контрольной груше, i

Определение содержания адряамицина в клетках P8I5 проводили флюориметрически по интенсивности флюоресценции гликозидной части молекулы препарата (Bachur et al. 1S70) на флуоресцентном спектрофотометре iutachi-850 (Япония).

Статистическую обработку результатов проводили по оценке -значимости отличий • вариационных рядов с использованием нелараметрического и-критерия Бнлкоксона-Манна-Уитни (Гублер, 1ЭГ"8). Корреляционный анализ осушествлялся с помощью статистической программ? "Statgraph" на персональном компьютере аш at.

Глава 3. Влияние гидроперекиси третичного бутила на проницаемость клеточных мембран и метаболизм

фзсфолнпидсв ir. vitro.

При исследовании цитотоксического действия гидроперекиси третичного бутила (ППБ) па популяцию клеток мастоштш' Р81Б

оказалось, что через 24 часа инкубация происходила гибель опухолевых клеток, сопровождаемая грубики нарушениями проницаемости клеточной мембргш вачшзя с концентрации ЗхЮ-9 М ГПТБ. Исследование динамики момбракотоксичоского повреждения клеток в присутствии I6xI0"3 М ГПТБ показало, что проницаемость мембраны для высокомолекулярных веществ увеличивается, начиная с 60 мин инкубации, и к 180 минутам процесс разрушения плазматических мембран клетки завершается (рис I.).

В противоположность этому выход арахидоковой кислотг .из мембранных фосфолипидов в водную--фазу, обеспечиваемый, главным образом, высокой активностью фосфолипаз, начинает увеличивать-

rr.in

Рисунок i.

Изменение проницаемости пяа-зматичсской мзао'раны клохчж мастоцитомы PdXb под действием 16 M..i глдпопорпкслда трет-бутияа. I - Г,iTij, 2 - контроль.

ся уке через 20 шн. токсического действия ГПТБ и к 60 минутам достигает максимума (ряс 2).

Инкубация клеток мастоцитка шли Р815 с ГПТБ в течение 60 мин. приводила к значительному ингибировалитэ включения в них арахидоновой кислоты, причем укв к 5 минутам инкубации включение 14С радиоактивной кеткв з опухолевые клетки составляло лишь 1,5%- от общего количества метки, добавленной в опытные пробы, в то время как захват арахидоновой кислоты контрольными клетками достигал 50%. Известно, что поступающие в клетки кирние кислота распределяются мевд белками, связывающими. жирные кислоты и лишдами, в .состав которых они входят. Поэтому для выяснения конкретной причины снижения

750 г

Ш1П

шсунок (-.

оаход зрохадоиовой кислоты из клеток мастоцатоиы Рв1Ь п:;;; действием 16 и..' глдроперокеида .третичного бутила.

- I .Л», '<- - контроль.

скорости включения арахидоновой кислота в клетки Ш15 было проведено исследование влияния ГОТО на включение жирной кислоты в клеточные лшида,

ГГЕГБ оказывал Еягибирущее влияние на процесс включения арахидоновой шслоты как в общие фосфолипиды (рис. 3), так и в фосфолипидны® фракции - фосфатидилхолин, фосфотидилэтаноламин и фзсфатидшшшзитол. После завершения инкубационного периода, с ГПТБ спецафиче-ская радиоактивность фосфэтидилхолина бшш в 15 раз ноте» чек активность- фосфатидилхолина контрольных клеток. Длл фоаХатидилэтаналамгна и фсю^атщцшшозитола наблюдалось соответственно 7- и 12- кратное уменьшение включения

¿ш

ГРГЬИСГ^/мг. Фн.

150 100

50

:

— /1

- г *

- / 0

- /' /

/

г/_ Г

-

—

О

Ш1П

Рисунок 3.

Ингибирсзаше включения арахидоиозоЯ кислоты в ойцнв фсс-фолипида клеток мастоцитомы Р<315 под действием гидроперекиси третичного бутила.(I) по отношению к контроля (2).

жирной кислоты. В противоположность этому, содержание арахидоновой кислоты в кардиолшшне оштных клеток было несколько

t

выше по сравнению с контролем.

В результате усиления процессов гидролиза фосфолипядов с одной стороны и значительного ингибирования реацилирсшания с другой возможно накопление в мембранах опухолевых клеток продуктов фосфолипазного гидролиза - лизофосфолишиов со свойствами детергентов, обладающих способностью солюби-лизировать биологические мембраны.. Действительно, наш зарегистрировано увеличение содержания лизофосфатидилхолияа в течение всего времени инкубации клеток P8I5 с 16 мМ ГПТБ, и к 60 мин. наблюдалось семикратное увеличение его количества по сравнению с контролем. Таким образом, к началу лизиса клеток P8I5 (GO мин.) в их мембранах накапливается около 1556 лизо-фосфатидилхолина, что,"возможно, является критическим фактором ■стабильности мембраны, и дальше в интервале времени 60-90 мин. происходит лизис 80% клеток. Следовательно, стабильность клеточной мембраны может определяться соотношением скоростей ферментативного гидролиза и реацилировэния фосфолипядов. Глава 4. Влияние адриамицина на состояние мембран опухолевых клеток и метаболизм фосфолипядов in vitro.

Одним из частных случаев свободно-радикального воздействия нэ. опухолевые клетки является химиотерапия опухолей лекарственными препаратами, в частности антрациклииовыми антибиотиками, генерирующими супероксидшй анион-радикал. Наш проведено исследование повреждаемости плазматической мембраны опухолевых клеток адриамицином, выявляемое в тесте мембранотоксичности, и исследование устойчивости мембран к гипотоническому всздейст-

- l<t -

вию при совместном действии с адриамицином.

Оказалось, что адриамшшн обладает значительным мемсрано-токсическим действием в концентрациях Оольие I2xIC М, что выражается в увеличении проницаемости для высокомолекулярного вещества - РНК-азы. Присутствие адриамишша в среде инкубации приводило к лизису опухолевых клеток в по сравнению с контролем.

Исследование устойчивости плазматических мембран клеток мзстоцитомы P8I5 к гипотоническому "шоку" показало, что адриамицин резко потенцировал увеличение числа видоизмененных клеток и к 60 минутам инкубации поврежденными оказывались 89% клеток от их обцего количества' (рис.4), -морфологические

100

75

50

25 3

О .......

0 10 20 30 40 5Q 60

(ИГ!

Рисунок 4.

Влияние адриамицина на рсзистоитность клоток ыастэчяти-мы Ptílü к гяпоосмотическоцу воздействии. i - ьдольмждо + 2 - яяр%птц.т, И- -

/аС1.

изменения клоток, наблюдаемые в Фазово-контрастккй микроскоп, последовательно выражались в увеличении их объема, дефэрмашш • плазматической мембраны с появлением пузыреобрззных выпячиваний и в заключительной стадии - разрыве клеточной мембраны с выходом содержимого клетки в среду иакубации.

Для выяснения возможного механизма мембрзнотскеического д*Яствяя адршаящина проведено исследование процессов гидролиза и реацилирования фосфодипидов в метках кастоцитомы F8I5. Оказалось, что гдриамшдан в концентрациях 3 мкМ, 120 и 5 кЧ не влиял на процесс выхода [1 -1*С1арахадоновой кислоты на протяжении 120 минут из предварительно меченых клеток. Гем ж> мене*« была зарегестру.рована значительная активность фосфэлипазиого гидролиза как в опытных, гак и контрольных клетках.-

Исследование процессов репарации фосфолипидов по оценки скорости включения в' ¡nix жирной кислоты показало, что в : концентрации адриомицина 120' нМ янгибирование фосфолитщгого реяцилировагош является максимальным (таб. I).

Продшжубация клеток мастоцитомы с адриамицшюм в концентрации 120 нм в течение одного часа приводила к снижению включения арахкдоновой кислоты. главным образом в надиолияин (ингибирование 45%) и ФооЕатидилхолкя (35%). Для фосфэтидил-инозитола и фосфагадалотоноламика ингибирукцее . действие одриакицина было выражено в меньшей степени (24% и 15% соответственно). Таким образом, ингибирование <1©с<Голилидного реицилировзгшя может Сыть одним из механизмов мембрано-октивного действия здриамицина.

- Id

Таблица I. '

Действие адриамшшна на включение [1-14с)арахидоновой кислоты в фосфолшшда клеток мастоцитомы P8I5

Радиоактивность (dpm/мг. Фа.)

Адриамицин (нШ

Фосфолипкды Контроль 120 4

Общие фосфолипиды I028I9-I2754 7ИЗЗ±8994 87645^1098

фосфатадйлхоляш ' 35242-432Q 22793±2674* 33250-4789

Кардиолитш 67750^6468 37045-4261* 41637-4632

Фосфатадилйнозитол 59I9-S36 4527-794 4255-934

Фосфатидилэтанол- 8088^965 6772-1014 7902±892

амин

Примечание: * - достоверное отличие по сравнению с контролем (р<0,01)

- число наблюдений в каздой группе равно б

Глава 5. Исследование метаболизма фосфолшидов в клетках мастоцитомы P8I5 при действии адриающина in vivo Исследование включелия И -14с ] арахидовоьой кислоты в опухолевые клетки и мембранные фосфолшшг яри введении адриа-кицина ir» vivo проводилось в течешь* 5 минут сразу ж* после выделения клеток кб оршной волости мышей, леченных адркакжцинсм и контрольных «зевотных. Противоопухолевый аффект при . этом составил 502. Внутриклеточная концентрация адриамицинь непосредственно после извлечения опухолевых клеток из брюшной полости составляла 18 irrv'IO6 клеток мастоцитомы P8I5. Оказалось, что препарат оказывает выроненное инткоирувдее действие на захват жирной ккслоты клерка®

P8I5 и значительно угнетает процессы включения .арахвдоновой кислоты в ' нейтральше (липиды, общие фосфолипиды и шадивидузльше фоефолипиднке классы клеток мастоцитомы F8I5 (тпб. 2), причем наиболее выракенный эффект наблюдался по* отлоаепюо к нейтральным липидем, кардаолгапшу и фос-фатидилхолпну.

Таблица 2.

Влняшо , введения адркамищша in % ivo' на включение [1--14о]йралидо11овой кислоты в нейтральше липида, общие фосфолипиды и индивидуальные фосфэлшидкые классы клетск мастоцитомы P8I5.

Радиоактивность (DPM)

Липида Контроль Адриамицин % от контроля

Нейтральные ;ашида I478I-2T.43 0572-1032* 583

Обшле фосфолшмды С8737±4572 33992-3787 Q7Z

Фосфатидилхолин 15033-1665 10477-1963* 70%

Кардиолшпш 29439-3208 18904-2365** ' 64%

Фосфатидил отаноламин 2483^828 278Э-745 II2%

ФОСфаТПДИЛ инозитол 1722-547 1622-348 IC5S

Примечание: * - достоверность роз япиЯ с контролем , Р<0,С5

АА- - достоверность различи с контролем ,'psO.OI

- яшкдаа результат является средам ве- ста

экспериментов.•

- Id -

Для выяснения характара ингибированкя адриамящшом включения-экзогенной арахидоновой кислоты в клеточные фосфолипида представлялось необходимым исследование фосфолипидного реацилирования после удаления адриамицина из клеток мастоци-томы P8I5. После отмывки опухолевых клеток культуральной средой, не содержащей адриамицина и их инкубации в течение 3 чэсов. внутриклеточная концентрация адриаш?цинз - составляла 0,2 нг./Ю6 клеток мастоцитош P8I5. Б этих условиях включение И-14с] арахидоновой кислоты в опухолевые клетки, выделенные из брюшной ролости'мышей, получавших адриамвдкн, в 1,4 раза превышало таковое по сравнению с .клетками P8I5, выделенными из бршйой полости мышей контрольной группы. В то же время наблюдалась либо стимуляция включения арахидоновой кислоты в клеточные фосфолипида: в фосфзтадилхолин на 150%, фосфатидалинозитол на 160%. и фосфатидаштаноламив на 270%, либо выравнивание с контрольными значениями (кардиолшин). Приведенные данные однозначно указывают на непосредственное и специфическое действие адриамицина на процессы фосфолипидного реацилирования и позволяют исключить иигибирование синтеза ферментов фосфолипидного реацилирования de novo, который требует значительных временных затрат.

Таким образом способность адриадацияа интабироватъ фосфо-липидное реацилирование и, следовательно, угнетать мембранную репарацию в опухолевых клетках весьма существенна для противоопухолевого действия этого соединения.

Вывода:

1. Окислительное воздействие на клетки асцитной мастоцитомы

t

мыши P3I5 приводит к выраженным изменениям плазматических мембран, результатом которых является лизис опухолевых клеток.

2. Действие гидроперекиси третичного бутила на опухолевые клетки сопровождается значительной активацией выхода [1-14с]арахидоновой кислоты яз клеток во внеклеточное пространство, ингибированием фосфолгавцщого реацилирования и накоплением лкзофосфатидилхолина.

3. Адриамицин нарушает стабильность мембран опухолевых клеток in vitro, увеличивая проницаемость плазматической мембраны для высокомолекулярных веществ и сникая резистентность мембраны к гшгаосмотическому воздействию..

4. Инкубация опухолевых'клеток с адриамищшом in vitro приводит к угнетению фосфолипидного реацилирования, что выражается в снижении включения [1-14с]арахидоновой кислоты в кардио-липин, фосфэтидошшш, фосфатидшвшозитол и фосфатидилэтанол-амин.

5. Противоопухолевое действие адриэкгашнэ при введении in ■ vitro сопровождается ингибированием включения [1-14с]арахидо-новой кислоты в клетки мастоцитомы P3I5 я угнетением влечения кирной кислоты в нейтральные липидц и фосфолипиды клеточных Met фан, в частности, в кардиолшшн и фосфатидилхолин.

6. Удаление адриамицина из опухолевых клеток приводит как к стимуляции включения в них [1-14С]арэхидоновой кислоты, так и к увеличению включения аряхлдонэтз в мембранные фосфолипиды ■

Список работ, опубликовании/, по теме диссертации:

1. И.В. Кондакова. Е.В. Борунов. Е.В. Антипова. Роль метаболизма фосфолипидов в прцессе окислительного швревденкя опухолевых клеток. - Тезисы докладов Всесоюзного симпозиума "Биохимия опухолевой клетки".- Ух не к, 1990. - С. 50.

2. И.В. Кондакова, Е.В. Борунов. S.B. Антипова. Активация фосфолилазного гидролиза в процоссе окислительного повреждения клетки. // Ешл. экспэр. биол. мед. - 1931.- N 9.- С.285-287.

3. И.В. Кондакова, Е.В. Борунов, Е.И. Бондаренко. Ингибирование реацилирования фосфолипидов-при окислительном поррек-дении опухолевых клеток. // Билл. эксп. биол. мед-. - 19Э2. - в печати.

4. "I.Y. Kondakova, S.V. Veroschagina, E.V. Borunov. Adrianycin induced Inhibition о I arachidonate incorporation „ into phospholipids oi mastocytoma P.315 cells. // Cancer Chemotherapy and Riarcaoclogy. - 1992.- in prer.s.