Автореферат и диссертация по медицине (14.00.03) на тему:Гуморальные факторы селезенки в регуляции гормонального баланса и процессов адаптации в организме

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ УКРАИНЫ УКРАИНСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭНДОКРИНОЛОГИИ И ОБМЕНА ВЕЩЕСТВ

На правах рукописи КОРПАЧЕВ Вадим Валерьевич

ГУМОРАЛЬНЫЕ ФАКТОРЫ СЕЛЕЗЕНКИ В РЕГУЛЯЦИИ ГОРМОНАЛЬНОГО БАЛАНСА И ПРОЦЕССОВ АДАПТАЦИИ В ОРГАНИЗМЕ

14.00.03 — эндокринология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

КИЕВ 1992

Работа выполнена в Украинском научно-исследовательском институте энд крпнологни и обмена веществ МЗ Украины

О ф и д п а л ь н ы с о п п о н с н т ы:

Доктор медицинских паук T. II. БЕЗВЕРХАЯ; Доктор медицинских наук, академик АН Украины, профессор В. В. ФРОЛЫСИС;

Доктор медицинских наук, профессор П. II. БОДНАР

Ведущее учреждение — Украинский научно-исследовательский институт фа макотсраппн эндокринных заболеваний МЗ Украины

- г, . /{j^î

Защита состоится •; ¿ffi-J* ? Ь-и. • 1992 г. в'.'. . часов на заседэш

специализированного совета Д 088.14.01 при Украинском научно-исследовагсл ском институте эндокринологии и обмена веществ МЗ Украины (254114, Кие 114, ул. Вышгородская, 69).

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке института.

у л" ' С ■

Автореферат разослан /'4 tyyL. 1992 г.

Ученый секретарь специализированного совета, кандидат медицинских наук

И. Н. ШОСТАК-ПАСЕЧНИК

Г»-' •»•"■'•"•••»> ' р—----- > _

ГОС'/Д!/.• 5 ..} 3

ОНоЯ^ллг-:.«;*- ■"•

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСтаКАТАБОТН

Актуальность проблемы. Селезенка не принадлежат в чясду ааэ~ яенпо важных органов, однако ее функции киогообраэнн и иэобходя-т для осуществления ряда фазяологичесвях процессов. Хорозо изучена рояь селезенка в кроветворения в кровообращения, а тагаш в развитая ишауяологяческях реакдяА. Установлено, что в осуздвствлэ-гпя этах функцяЭ прянжнаэт участие биояоптсха активные вещества, эырабатываешэ в этом органе / Агту, 19641 Н1Л1т:а1:г, 1955/.

Ограниченное количество работ, восващентх гуморальной фуна-зяп селезенка, т дает возможности составить единое клекао об ягой стороне ее деятельности. Дааа в фупд&однтадъних руководствах, зосвяцетшзс фязйояогим й патологлп селезенгя, этот вопрос освоен |рагкзнтарно Домахидзе Н.Э., 1971; Барта И., 1976; Аггу, 1964/. 3 литературе нет сведений об истинной числе я природе бяологичо- ■ :ка активных веществ селезенка. Очень мало известно о азаямоотмо-зеккн селезенка с органами в»гу тройной сеггрзцяя. Кесиотря № отсу~ ествпе у больгхииства совекэктокзфовашздх аивотгесс вирагеикшс эндокринных нарушений, анализ гшогочгтедекгшх ¡шнтачоскях а експэрл-.¡энтальних наблюдения позволил установить, что взапносвязь иэяду :елезенкоЯ я некоторым! гелозоип внутренней сокрзцза существуя*. Ьказаио, что факторы селезенка иогут оказывать шша на функ-иадпоадчннкоа» ситовидной, поджелудочной, половых яадез я ги-юфаза. В отдельных исследованиях продеионстрярояано, что обнару-10ННЫЙ эффект койвт осуществляться пря ПОКО!*!! бпОЛОГИЧЭСЕН октня-■мх веществ, внрабатываешх в этои органе /Гедлор Л.И., 1964; I лльапа81и, 1969/. Селезенка пря?еиает тагге участие в ре-

'уляцнв обкена сезеств, что иогэт бить частично обусловлено ее ■•унораяьтш влмяниеа на функциональной состояние печена /Гольбар 1.М., 1977/.

Икевтся ограниченные сведения о гукоралышх факторах селв-юнен, участвующих а ответной реакции организгза на экстремальны® зоэдейстгия. Вне работакн Д.Баркрофта било показано, что на ли-5не физиологические или психические воздействия селезенка отве-<ает резким сокращением. Согласно даенню некоторых исследователя, с плени нэк томи я ведет к снижении способности организма адаптироваться к физической и психической деятельности / Ргапо1вс1а, [961/. Удалось выделить также ряд гуыоральньгх факторов, обладаниях адаптогенныии свойствами.-

Опубликовали» ракее хосвотше д&шыэ едашгаж нседедова-т& о влиянии гуморальных фаг:горев селезенки на функщюнальнуэ акгавиосуь ондоггршшых *;елоз, процэссм адаптации и функциональное cocTosiüe пачаш не да»? возможное«! обоснованно сформулировать пологекио об нх $мэхояогичесхои эн&ченнн, зшшческоА природа к квханизш действия, что дакгуа? необходимость кошлоксно-ро изучений этах вопросов на современной кетодичсскоц уровне. Получение результата позволяя установить еще одам путь рэгу-лвцип гормонального баланса с органиэкэ, выявить прнтани ого нарушения, a ta юга- разработать штады создания новый фарцахоло-пгчаскЕХ препаратов на основе выделенных биологически аятивкш: веществ селезенки. Зуо определяем актуальность проведенных исследований, подтиорад&от новизну н парспоктмвность результатов рабой, которые, иися ир&кглческуэ ценность, иогут слугить основой для косого фундаментального направления в эндокринологии.

Цель а задачи исследования. Цолыэ настоящей работа било выделить биодогичоекк активные факторы селезенки в ыакемшлыю очжденнои юнда, исследовать нх ¿¡мзико-хиилческио особенности, зшшша на горнональшй баланс в оргашзнз, адаятогеннцз в геиа-топротакторшо свойства, a *авсе изучить возиогшо иеханизш обнаружениях оффэктов.

Ра&зшзЩ5Ш составленной цаги оеугцасгвляяась иугеы реиогош ейадзгзщш; задач;

1. Разработать способ хцдоинвя биологически актиышх со-цаегз селезенки я из годы раздзлегшя их на фраяццн{ просос tu нзу-адао ф^шю-ззшнчаеюис и бнояогачэекшс свойств выделенных факторов.

2. Изучить шшеше г^ыораяьз&з: fassopos сэдсзанкн на содэр-ааниа кортахостороидов, «естссюроиа, тирогеина, глвхоаи а инсулина» ¿ETF и ткрзо^ропного гормона в шезк®' крова, а таюаэ сош-тотросного гордона в гклофизо. Нсслсдовьгь кеяишзки обнаруяйп-

гшх эффактов.

3. Изучить едахтшшш своСства гуиоральшх факиров с@яа-аекш тж ютяше па работоспособность, разисгентность к пшж~ еии и облучзшш, игшунодохтсскув рашгташоеть к развитие воспалительной рз&кцшз.

• .'4.'.Втошчь■ ¡шшгаз'г^коракшаг факторов селезенки на фу-инцяоиадьпоз соегояине почзна.

Ёсследовагь жшш цзыбравоврошюго действия биологи-

поста акташшх факторов солезенга.

б. 1Ьучлть СЯЛЛНН9 аптавного участка иолокуди сгхленопэнтана на показателя, гарлатерлзупгсто рззпетэнизосгь срггипзка, а такжп фунвцяондоьноо состо.-ппе надоопачникоп п истаял.

Ну/чдап новизна работа эакдзчаотся в "гон, что пперсиэ на соорз;.тонпо:з цз?о$!чвскеиг уровиэ втроподэдго кокадаксиоо п даф^эрен-цяроввниоа нзучзняе свойств гуморальных фзггеорсв солезаята, к о горе-о позволило установить ноет н подтвердят» старка, мало кзйост-шэ-« $акты,зшсоиоюрности я кэхгшзш ах шшиая па аалвэы внутренней сокрзцкн и процессы адзотацйп а неблагоприятным псздэйст-а таккэ продеконетряровать загн&шость обнаружэшпа »ф$ак-vov ov хагачасхоЯ природа еадвдешпа бзологачвега актявках во-цзстз. Цровйдошпга лссгедоваяая ногу» езугягь основой дал нового павразяекпя в овдовргшолоппт, главной цм» которого валяется изучение фюяологаи и баохиша гуиораяышя факторов соявавнкя, пагояогзпоскйх состоя/иЗ, обусдоазвшш: кврупегоои ев гуйорааь-иой вопросов дялпюстокл а профмйктакя этазс востожгаЭ.

Научтю-практкческая. ценность рабость Пэлу^ггпшз результат растеряют суцестаувЕЯЯ» предстаялонпя о мохвкумргок езхлгсгэи&х дойстаяя гушралымх фактороа селозеяв», «по ногз* иаЗга практз-пзскоз прямэнв'иа в эЕспзрякеитяльноа и акшячоскоЯ оидокршюло-r:*.:i гтрн нэучешт отнологш п патогенеза эидокраитве з&болеваняЯ, а тагго дяп более адекватного я целенаправленного использования препаратов селезенки о цз^цякскоб прахтохэ. Прозэдзнкне исследования позеоляпт создать на основа еэдэдзшшк пз сэлезеихя биологически активных пецестз нопне фзрканолопгсвекпв препараты дня использования их а качества адаятогеноз п дгя хорровцгт гормонального баланса в оргамлэке, з частности, вра лечз&ш гппшпфооза, пшеркоргкцнзиа, фуняцлонадьгшх наруззкиЗ йзчФШ» пострадиационных порахениЯ, аллергических реаяцпЯ, зоспаялтадышх процессов.

Полученные результата, распрывсгг^е изхшгази действия сменяна /препарата, подученного из селезенки/» позволит? расширять ого пр:шенвнме в практике, а разработшшне предлояашя по усовершенствовании методов определения активности я технологии изготовления иогут быть внедрены в производство.

На изобретение: "Способ получения вещества, обладающего ге-патопротеяторной актйвностьв" выдано авторское свидетельство № I46I960 и приоритетную справку на заявку Р 4873701 "Способ получения вещества, обладающего актопротекторными свойствами",.

Результаты провэдаикыг нсслэдоваияй ограаены в ькз'годачасках рз-кокшдаадях "Препараты селезенка в дечзшш забояеваггай.

Теорэтачвсиоо значение работ заадачазрся в *оы, чго проведенные исследования позволяют сфорвухировагь новое подоявше в аидокрйнолопщ о рагудяцин гормонального баланса н процессов адаптации с коыощкз гуыоральиык факторов селезоцкя к рассиа»р::в8.«ь значзнае ого оргала в о?бэрной рзавщи «а стрзсс наряду с деятельность© других сястои орг&низиа.

Осковныз подокенш, выносимые на Дакару:

1. Разработали способы выделения биологически антавиях ве-«зсгв селезенки, изучены вх биологические и фгаиЕО-хшдгческие свойства.

2. В селезенке вырабаживгажа гуиоралышэ факторы, рзгуга-рувн^е гормональный баланс в оргаказш в обдадшфш едалтегенго:-ш своИсизага. Но зшшчоской природе шлио сидела?ь две грушш бяодогически актавных низ Еомолекуязргслс согдшгешй. Вещества первой группы, прэ дставлеккиэ сепуадаш, овазиваля прешфцэстьен-ноо влияние па функции надрочзчтков, севенюгков, печена, а тише па шцуиологичасгаЭ е^ачус оргшшзиа. В?орая груша вецзста относится б вшит и обладав? адапгогекшш свойстваши Доказано, что некоторые кг об^аруазнтк еффзкуов иогуг овр«деяя?ься Ч?нпея*ндои, йбяйвдшся активной час?ьа иолекуш сплснопенкша.

3. Гуиоролыыэ факуоры селезенкй сшшвзг содзржаиие корги-ксс^эрондов в еидеогенов о шдоыз краса^угьеяал иг баосянтез» ушшшш чувстввталькосзд еоргйЕоцагав в АК1Г б иарувая уль?ра-струхтуру гоиадо-, гортзхо>в сош»о»ропоцв*ов сденогяпофззь. И? шшяшэ на 1ца®одидвоВ ваяева связано с адаа®отяшш-сввйстваш и рэагпзуэ«со путей еошззйия уровня тарзо<грогшога гориояа в таз ко срока. Гукоралкиго факгора селезенка сншш>@ толерантность в глюкозе в визвезе сшюашш концвнерацгя «нсуяа-на в плезие ерови,

" 4. Еиологачасш авшвшэ ев^стаа садезешш сбледшэг чедыы свектроы разнонаправленного едаз^огсшого дайсгвзн. Огш ношам* рабогоспособиосгь, ув©ян*ш»2эг разно теигноси» оргштат к облучению в гипоксия, обладав* юауыоаодударущшгщ» прогивоая-лергяческшяи противовоепшгаталыадэ свойствами.

: 5. Гуморальные факторы сеяеаенщ обладая? гапагопротактор-кыми свойств аш, оказывая сгиыузшруищэе вхкшшв на ацвяшгруа-щув, коныогирущаур, балоксиитетачэсЕу» в ексгреторно-аогяотп-

г

т-эльнуэ функции печени, а таюш нормализуя ультр&ьикроскоплческуо нартяну печени при экспериментальном токсическом г®патате. Продемонстрировано их непосредственное влияние на геаатоцята в культуре ткалл.

6. ^моральные фахтори селезенки обладсзт свойством пз пенять вязкость плазиатячэскнх гзембран» оказывая стабилизирующее действие.

Публикащи п апробапля работа. По теме диссертация опубликовано 45 научних работ. Материалы диссертации дожладававясь и обсувдоигпсь на 1У съезде эндокринологов Украины /Йьвов, 1987/, на III ВсесовзноЯ научно-тззатческой вогфэрепцнн "Актуальные пробяа-ызз яронзЕодства кровез&тгатеяэй, консервантов кровя» гормоиаяь-пш! я органотерапэвтнческих препаратов" /Моема, 1987/, на I Бсэ-совзноЗ конференция Теохтяческое окрухенне я проблеин здоровье э зонах нового аконокячзского освоения" /Чата, 1383/, на III Всесоюзно я сьозде эндокрлнологов /Тгакепт, 1989/, па научно-прахти-«гзской конференции "Вопроси иедогршскоЯ окояопш я проблемы удгуч-пеняя здоровья населенна Забайкалья п Корейской Народной Дзпокра-ггсоскоП Республика" /Чята, 1989/, на У1 сьездэ ф^рнакологов УССР /Харьков, 1990/.

ОЗьам я структура работа. Дяссертащш аэлездиа на 375 стра-ияцазс кгетнопасного текста и состоит кэ авэдошя, одаоВ главы обзора литературы» 7 глав собственггшс псслодованяй, ааюаэчешш, ш-водов, указателя литературы, вклвчгадеро 285 оточзетвеитаое а 388 шострагашх псточггакоз, & тажзе врзлогакяя. Содержа* 85 таблиц я 52 рясуика.

натериады, обьекш и шода йссщования

Большинство исследований проведана на бежях крисаг-савдая яягега Etre тор нассой 100-220 р. Часть окспарашзптов выполнена m шяах-с&йцах линии СБА, касс о 3 18-20 г., корсяжс святах-сшгцаз нассоЯ 250-300 г. я ярояинах-саэд&х порода ПЬшяйяла кассой 33,5 кг. Животные содержались в стандартных услоЕйях.

В работе использовались следува^е экспэряггантазьныз модели,

Спленэктошт у крыс проводили под варким наркозом. у контрольных животных удаляли часть сальника, С цедьо профилактика развития бартонелеза часть животных получала кнарсенол /0,3 мг на 100 г массы тела/. Изучение различных показателей провожалось на 14-15 день после спленэктоюш.

Сшшноыегалмв вызывали у крыс путем внутрибрюаш иного введение 2,5 % раствора могияцедлюлозы /по 2 ил/ в течение 15 нед. /Ра&яег el aL, 1953/.

Эксперишнтадыш® гепатит вшызали путей пятикратного /через день/ внутракшечного введения четырехлористого углерода в дозе 0,6 ил на 100 г кассы тела, растворенного в абрикосовой или сливовой каслэ в пропорции I : I /Одейник Б.В., 1977/.

Гипотиреоз у крыс воспроизводили с помощью одновременного ввэ дения шркаэояила и перхлората калия в дозе 1,0 иг/100 г массы тел

О.бяучение ¡кйеотних проводили в специальной клетке по 3-4 особи одновременно рентгеновский аппаратом РУМ ЗУ /РУМ-200-20-2/ при слодувЕ^х условиях! напряжение на рентген-трубке - 180 кВ, сила тока - 15 ыА, фильтр - 0,5 ш меди п I ш адвыиния, конно-фокусноа расстояние - 50 см» мощность дозы - 0,096 мКя.кг-*' с"*, равномерность пучка лучей на поле - в пределах 6-8 %. Фязичаскуэ выносливость оценивали с понощыз "плавательной пробы". Еивоишх заставляли плавать в вода при телпературе 30-32°С и величине слоя воды, превышающем 60 си. Предварительно воду кипятили для удаления пузырьков воздуха. Наядоыу етвотноцу подвязывали груз, составлявший 5 % массы тела. Экспериментальное воспаление вызывали путей суб-пдангарного введения навестим* флогогенных агентов: каррагенина, овальбумпна, 5р;шсш&, форгшшна /2рииус S.D. о соавт., 1975/. Биологическую охтиеность гуморальных факторов селегенЕИ определяли разработанным ранее способов, в основу которого положено свойство предотвращать теплосуа докатурацяо альбумина /A.C. Р 619В57/.

Определенно гормонов. Концентрация сушаргшх 11-оксикорш-костероидов /11-ОКС/ оврэдзлгшг в шазкз крови флуорикотричесшш методом /Moot, ei al., I960/. Содержание тестостерона, общего тироксина /Т4/, общзго 3,5, 3*-триЕодтярошша /Тз/, глцунор-зактив-ного инсулина /ИРИД трамгротиро гормона /ИГ/ и адрснокортаво-тропного гормона /А1СТГ/ определяли радиси12>уиояогцчесхимя метода-ш. используя набора "Стероц-ТРн4", прио-Т4-ПГ*, "рыо-Тз-ПГ", ряо-нне-ПГ125 I /läiceHsys бзооргашгееской даза АН ECCP/,"21a-«at SSH" (Eallin Kreit Diagnostics, <5РГ ), АК2ИК-РЕ" (Oris Indiiotrie Франция) соответственно.

Биосинтез кортикостероидов оценивали по увеяичатш количества суммарнщ: II-0KC в. гоиогонате надоочзчшков после инкубации в течение I ч. щт тешерагур® + 37 °С в срэдэ, содзр&адей прогестерон, MgClg t нивотинятд к HAJP'Hg. 03 иитенснвноств биоеин-

оэа вядрогеиов а сеизтгсшах судяхя по азшзвноста оя-дегидро-

еиази семештков, нспользуя в качестве субстрата дегядроэпаандро-тароп /Розннеоэ А.Г. я соавт., 1976/. йзтабояпзи 3Н-яортякосторо-а и 3Н-тостосторона в гоуогената печзнп крыс изучал? с помощьа этода тспжослоПноЯ хроыатогрефш /Резников А.Г., 1980/. Состояние глоподного обиэна оценяваля путей определения концентрации глэко-u а плазкэ гсровп посла "сахарной нагрузки", а такта по содерзанк» нсугша а плазиэ кропя. Содераагае сонатотропного горнона в гяпо-лзо определял:: при помог?! додецалсульфатэлоптрс^юрзза в поднакря-аиадпом голо /Шостаа И.И. п соазт., I960/.

ibynto катоды пселеловашш. Зуикцяональноо состояние пече-з оценивала с поиоцш бронсульфофталеннозоЯ пробы, а такге опрэ-бленнл ацэталиругцей и гянщнешхзггаагдап способности. ЛнгадниЯ о с таз плг-знатачзскнх г:з?;брэл пзчета кзучалп'с псиоцьэ нзтода тонхо-лоПноЯ хронатогр£ф;я /КзПгс II., 1975; Мзда Э.» 1975/. ля пзучогптя структурных презре^гнпЯ гппидоэ пл&знзетчзских кем-рел! прппзняля l-лтод ЗПР-сзоктроскоппя, Рзгастрацпэ спектров оеу-эстзлялп на радяоепоктроглтре Е-4 / Varían, США/. В' качества ютового зонда нспояьзовзлн сгпншочзнуэ о полярпоЯ часта аирнуа :t слогу. Соротонпн я гнетами п органах я тхаиях оарздаяядя флуо-яштрпчэсиш «этодои посла их разделения на колонках, зааолнен-их янтлрнокяслой цеялаяоэой Л'-э^ерякова С.А., 1971/. В качестве тандартов использовали основание гпсташна /wTñJS, Швейцария/ сэротоюш креатанянсульфат /Reanat, Венгрия/. Содеравдаэ каль-ая а сыворотка крова определяла холоряызтрячоепш кэтодоа /Поно-арева Е.Е. н соазт., 1973/. Поянашкы определяла по Raina /1963/, Tasse кэтодс.4 етдаостиой хрокатографяя бисойогодавления /хро-атограф фирмы "Иа1огз", США/. НицунологпчесЕйЯ статус организма цекиваля по ннтенснвноста антптелообразоваяяа ç покощьо метода овального гемолиза /Cunninghaa et al., IS66/. 0 функциональной эстоянян таыуса судлля по вшачэкшо екзея узчзинх аглшокяслот в s л пи и тяшдпна в ДНК тпыоцитов крыс, а tasse на основании еон-знтрацаи тикического сывороточного фактора /Backet at., 1973/.

Электронноникроскопяческов исследование гнпофпза было про-здено совместно со старшим научным сотрудником В.Г.Козырицкиы, печени - с профессором В.Н.Гордяенко.

Влияние гуморальных факторов селезенки на изолированные клаки коры надпочечников н печени в культуре ткани изучали совнвот-э с профессором Н.Д.Тронько, доктором ивд.наук ¡Г.С.Турчнкым и

iV

старины научный сотрудником Д.С.Онященко.

Статистическая обработка результатов исследования проведана с использованием критерия t Стьвденга /Бейли Н., 1962/.

РЕЗУЛЫМЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУВДШИБ

В исследованиях использовали препарат спленин, получаемый из селезенки крупного рогатого скота, а также препарат, полученный на базе его производства, который содержал большое количество низка-молекулярных пептидов и киел рабочее название "безбелковый экстракт селезенки" /БЭС/.

Получали его следующим образом /A.C. # I48I960/: обезжиренную дихлорэтаном измельченную ткань селезенки экстрагировали 70° этанолом, экстракт упаривали под вакуумом, очищали от липидов хлороформом, после отгонки которого под вакуумом добавляли НаС1 из расчета 0,5 г/л и готовили рабочие разведения на физиологическом растворе. Путем дробного осаждения охлажденным ацетоном из полученного экстракта были выделены три фракции. Кроме того, разработан способ разделения спленина на две фракции с помощью экстракции бутанолоы. Сравнительное изучение биологической активности показало, что активность БЭС в 100-200 раз вше, чем спленина.

Изучение спленина н ESC методом У&-, ИК-, ШР-спектроскошш показало, что они неоднородны по своему качественному и количественному составу. Путем проведения качественных реакций установлено, что в состав первой фракция БЭС входят вторичные и третичные ашкы» а вторая фракция содераит преимущественно пептида. В третьей фракции обнаружены вторнчнне ашшы. В бутшюльноА фракции спленина /фракдеш Б/ такка обнаружены вторичные я третичные иш, а в водном QCïûïira Дракцаа В/ - шхшды в аминокислота. Ус«аиовдеио, что Б&С и qimeHHH да содержа? гасэашна и серотонина. В исследуемых препаратах обнаружены в различных количествах полиананн - спар-инн, спаршдян, нугреыщн я кадаверин. Езтодом тонкослойной хроматографии, гельэлекзрофореза в шшткриламвдюа геле и колоночной гельхроматографш на сефадэкс© 6-25 установлено, чпо в состав ЕЭС входят насколько групп газкоюлекулярных пептадов, шлакукярнЕЛ игл са которых не более 5000.

Прз: изучении аминокислотного состава различных серий сплоннна установлено, что общей закономерность» является относительно высо-кее'содерЕаняе в препарате глюташшовой кислоты и лизина. В относительно больших количествах определяется также аланин, глицин,

аспарагиновая кислота.

Гуморальные факторы селезенки и функция эндокринных желез. Для комплексной оценки гуморального влияния селезенки на гормональный баланс в организме научали функциональное состояние желез внутренней секреции при введения выделенных гуморальных факторов селезенки, экспериментальной спленомегалии и сплензктомяи.

Исследование содержания суммарных П-ОКС в плазме крови после введения БЭС и спленина показало, что низкие дозы препаратов /табл. I/ вызывает достоверное снижение концентрации кортикосте-роидов. Было также установлено, что обнаруженный эффект обусловлен второй фракцией БЭС, содержащей преимущественно пептиды /контроль*- 789,0+86,67} опы*^ 455,б±72,23 нмоль/л,Р/0,001/.

Таблица I

Влияние БЭС и сплекина н£ концентрацию П-ОКС ахазмы крови, нмоль/л

Нееледу-IФизиологи- > Разведение препарата

препарат 1 ?контроль^ ¡концентрат. 1:10 I Ш00 I

БЭС 719,5±19,27 675,1133,40 575,0*29,17 400,0*79,17 41,39*80,66

/8/ *у>,г р^о,оо1 р/0,001 р/о.оо1

Спленин 719,54.19,17 66б,7ч61,95 497,^51,67 544,5*18,61 /10/ . ~ Рл0,5~ P¿0,0I Р/0,001

Примечание. Р - достоверность различий по отношении к контролю.

Здесь и далее в скобках указано количество животных.

При исследовании содержания П-ОКС в плазме крови животных с экспериментальной спленомегалией обнаружено значительное снижение концентрации исследуемых гормонов /рис.1/. Это свидетельствует о том, что при гиперплазии селезенки, вероятно, происходит повшенное выделение факторов, оказывавших угнетающее влияние на продукция гормонов коры надпочечников.

Исходя из предположения, что механизм угнетенного влияния гуморальных факторов селезенки на продукция кортякостероидов может быть связан с непосредственный их влиянием на функцию жорти-коцитов, изучено изменение биосинтеза П-ОКС клетками коры надпочечников новорожденных поросят в культуре ткани в период ста-

нмоль/я 800 г

600

400.

200

I II

Рис. I. Изменение конценхращи П-ОКС в плазма крови крыс с экспериментальной слленомегалиеЯ /I - контроль; II - епденошгаяия/

билизации роста на 5-й день культивирования при внесении в инкубационную среду биологически активных факторов селезенки. Установлено, что БЭС вызывает угнетение биосинтеза П-ОКС в культура ткани надпочечников /табл. 2/. Наиболее выраженные различия по сравнении с хоитролем наблвдаяись через 48 ч.культивирования. Внесение в культуральнув среду АКТГ вызывало ездшуляци» кортико-стероидогеиеза к повышаю уровня П-ОКС. В то ш время пря культивировании клеток надаочэчнйвов в среде," содержащей БЗС, отмечалась блокада стнмулирувцего действия АКТГ. Таким обрезом, результаты проведанных исследований дают право заключить, что в селезенке содержатся вацества пептидной природа» оквзывяадю непосредственное иигнбирущее вдаяше ка стеро^диродуцгфусщиа клетки кора надоочачнаков,

Изучение {¿зыенегая концентраерш нортжостероидов в плазме; крови после удаления селезенки показало, что содержание П-ОКС снижается, а биосинтез кортшостерсидов в ваддочечншеах угнетается уже на Б-й день после операции, йа 10-й день наблюдается тенденция к; нормазиэвэдш стероядогенево^ а на 15-й день - опять наступает угнетегав. Нарушение биссянтааа еортикестероадов коррелирует с динамикой изменения концентрации П-ОКС в плазме крови после еплвяэкхомии. При введении епденэктомироваиныи хшвотида .гуморальных факторов селезенки набладаяось повышение бмосиитеаа П-0ИС в надпочечниках.

Таблица 2

Влияние БЭС на биосинтез Н-оксикортикостерондов в шнослойной культуре клеток коры надпочечников поросят

Условия опыта

Л о/

Содержание П-ОКС в культуральной среде через: 24 ч культивирования •> 48 ч культивирования

I имоль/л

1ыкыохь/кг (белка_

имоль/л

! ыкмоль/кг

белка

Контроль , АКТГ

БЭС /1:100/

БЭС /1:1000/

БЭС/1:10000/

АКТГ ♦ ЕЭС /1:100/

АКТГ ♦ БЭС /1:1000/

АКТГ + БЭС /1:10000/

481,5|+Зб,б1

1932,0+99,52 Р^О.ОО!

309,5^71,81

241,7^40,74 Р^О.001

249,5*96,52 Р^О.Об

171,1*15,41

Р^О.Ш

Рз^0,001

555,4±56,7

Р^0,001

564,8^26,7 :

Р^О.5

Рд/О.ОО!

14,60±1,14

30,7*1,54 Р^0,001

10,3*1,06

7,3+0,90 Р^О.001

7,9*0,54 Р^0,001

5,1*0,62 Р^0,001 Р^0,001

15,4*1,67

Р^О.5

Р2/0,001

16,1*1,34

Р^О.5

Р.^0,001

620,0+23,0

2244,6*58,I Р/0,001

85,4+12,72 Р^О.ООГ .

225,4+24,35 ^¿0,001

296,5+62,24 ^¿0,001

160,0+22,31

Р^О.001

Р^0,001

734,8*21,52 Р1Л0,5 Р^0,001

722,9*83,24

РцО.5

Р^О.ОО!

18,2*1.30

32,4±1,8| Р^0,001

3,8*1,11 Р^О.ОО!

6,3*0,64 Рх/0,001

8,9+0,93 Рх^0,001

5,3*0,42 Р^О.001 Р^0,001

20,4+1,73

Р!10,5

Р-^0,001

19,1±1,53 Р^О.ОО!

Примечания: Р^ - достоверность различий по отношешш к контроле;

?2 - достоверность различий по отноаению к показателям, получении* «осле введения АКТГ.

Учитывая, что изменение концентрации кортикостероидов в крови может зависеть от нарушения их метаболизма в печени, изучено влияние спленэктоюш на этот процесс. При этом установлено, что удаление селезенки не вызывает нарушения образования исследуемых метаболитов 3Н-кортикостерона связанных как с активностью 5с£-редух-таэы, так и 5^-редухтазы. Введение спленэктомированнын животным БЭС также не оказывало достоверного влияния на образование метаболитов кортикостерона.

Удалось также выявить особенности влияния гуморальных факторов селезенки на содержание кортикостероидов в плазме крови при стрессе. Установлено, что динамика изменения концентрации П-ОКС в плазме крови сплензктомироваиных крыс во время плавания отличается тем, что цифровые значения содержания исследуемого гормона почти в два раза ниже, чем у кооперированных животных /рис.2/.

кмодъ/л

х Ю3 2,0»

Рис. 2. Динамика изменения содержания П-ОКС в плазме крови интактных /I/ и спленэктомированных /II/ крыс при стрессе.

После стресса у. сплеиэктомироваиных животных наблюдается достоверное снижение интенсивности сигнала ЗПР цитохрома Р-450 в надпочечниках. Предварительное введение БЭС повышало исследуемый показатель.

Установлено, что введение БЭС и спленина интактным животным до стресса нормализовало повышенные показатели содержания П-ОКС

Ввшша ЮС и сплекака на аонцэатргцаэ II-OKC плазш крова яра страсса, звюдь/л

Таблица 3

Исследу-!0ре»*я екый |плава' препарат1НИЯ»4

йнтакткые !®нзнааогачз1 ___Развагегаа препарата__

животные |скийраство| аокцан?рау } I;IQ , i;IQQ f I;5QQ } I; 1000

БЗС . 2 322,2+28,05 НЮ, 1+70,28 1066,8+33,34 985,5+54,28 492,3+38,13

/10/ - Pj/0,001 PjdO.ö P^0,5 Pg/0,001

БЭС 5 419,5+21,94 255,5+17,77 -469,5+11,94 558,4+72,78 550,1+47,78 427,8+35,11 425,0+33,69

/9/ ~ Pp/0,001 Pg/O.ÖOI Pg/0,001 P2/0,00I Pg/O.OQI Pg/0,001

Спленин 5 419,5+21,94 255,6+17,78 169,5+15,00 202,%I6,II 247,2+17,50

/Ю/ Pj/0,001 P^0,Ö0I P^O.ÖI Р2Л0,5

Примечания: Pj - достоверность различай изаду значешшз, получении^ з контрольной груше я прз стресса;

Р2 - достоверность различай шаду значзняяьа, лолученньыи пра страсса к посла введения препаратов.

в мазка крови жрио в период "фазы тревоги". В то же время, в период "фазы истощения"/ плавание 5 «./когда концентрация кортикостероидов снижена, нормализующий аффект наблюдался только после введения ЮС и фракции 1, содержащей преимущественно амины /табл. 3/.

Полученные данные свидетельствуют о том, что в селезенке кроне веществ пептидной природа, оказывающих угнетающее влияние на стероидогенез, содержатся вещества, обладающие адавтогенными свойствами, которые способны нормализовать концентрацию кортако-отероидов как при ее повышения, так и при снижении.

Известны результаты клинических наблюдений, когда у больных -саленомегалней происходило угнетение деятельности половых желез /Геллер 1.И., 1964; Ргапо1оо1в, 1961/. После удаления селезенки отмечалось нивелирование патологических нарушений. Механизм описанного явления до настоящего времени не исследовался. Нет также сведений о влиянии сшшнэктошш на функцию половых желез.

В результате проведенных исследований установлено, что введение гуморальных факторов селезенки вызывает в определенном диапазоне доз достоверное снижение концентрации тестостерона в плазме крови крыс /табл.4/.

Таблица 4

Влияние БЭС в сплекина на жонцентравд® тестостерона в плазме крови крыс, кмоль/л

Исследуе-1Физиологн-1 Разведения препаратов

^пре- 1ческий р-р|конценарау, 1;10 } цщ ] "Щро

БЭС 18,4^0,83 16,7^1,00- 12,%1,49 12,1+1,25 12,8*0,90

/ю/ РЛ0,5 Р/0,001. Р/0,001 Р/0,001

Спяенин 18,4+0,83 12,5*0,79 15,б±0»35 Ю,%0,87

/9/ Р/0,00? Р^О.О! Р/0,001

Примечание. Р - достоверность различий по окнсвеюш к контроля

Обнаруженный эффэня обусловлен веществами пептидной природа, входящими во вторуо фракции БЭС я ¡$равцшэ £ сшшшяа. .

Сйя&еннэ концентрации тестостерона наблюдалось и после вос-крокэведгнкк окспериментальной спяеиоюгаяга /контроль - 12,7± 1,72; спленошгвдая - 2,9+1,11 даоль/я, Р/0,001/. После сплш-эк?оздаз также наблюдалось достоверно® стттв концентрация

тестостерона в плазш крова уже на 5-й день после операции а сохранялось до ГО-го дня исследований /янтаятные - 16,3+0,69; спяен-9КТ0ШЯ - 13,5^0,69 иноль/я, Р/0,02/. Введение БЭС посла удаления селезеийй пело к еще более выракедаому достоверно^ снижашга яе-слодуеного показателя /6,7+0,34 каоль/л, Р/0,001/.

В результате пэученяя язкеиения активности клэчевого фермента стеромдогеиэзa /¡p-3jv -ол-дегадрогвназы секеттакоз установлено, что посла сяленэктокия наблэдается достоверное ее снижение /контроль - 6,4+0,4; -опыт - 4,6+0,6 од; Р^0,001/. Введение БЭС вос-стакавяавало нсследуэшЯ показатель.

Обнаруаег'.о, что снжгекна концентрация тестостерона в пл&эиа кровя при введения гуморальных факторов селезенка на зависит от нарушения метаболизма андрогенов в печеш, так как, несмотря на etasarae содержания андростврона й этаоходанодоиа, валовой обгген 8Н-тестостерена не изиеиядся.

Анализ подученных данных позаоаяе? предполагать, что кэхачаз-131 сиззкзияя концентрация глэкокортнкоядов к аядрогенов а пяазкэ кровя вря еяяенэктошй .в введения генеральных факторов селезенкя различии. В первом случае происходят изиенегае фосфслппидного состава плазматических ткбран, нарупеияе биосинтеза холастеряна а снижение его содержания а нодпочачкаке« /Рыковская И.А., Якубовская В.Й., 1966/, что, вероятно, опосредовано недостатком фактора ч стабаляаируючего клеточные цййбраш. Во второй случае, до-вядшоцу, наблюдается стабялдзацяя плазкатеадских кекбран н сшкекаа чувствительное«! рецепторов я дэйстекэ тропння гормонов.

Мэучекао влияния гуиораяышх факторов селезенка иа функцяэ Очевидной железы показало, что яссжедуаша препарата ебладез? способностьо повшать содержание гароксина /контроль - 29,8; га-воткреоз - 11,6+0,3; гапотереоэ + ЮС - 28,2*4,06 наоль/л; Р/0,001/ и трайодтяроняна /контроль - 0,37^0,035; гипотиреоз -0,19*0,078; гяпотнреоэ + ЕЭС - 0,65^0,025 ииоаь/я; Р/0,001/ в пяазве крови при экспериментальном гипотиреозе. Зтот эффект определяется фракцией, содержащей елзпш и, вероятно, связан с адапто-генндаи свойствами изучаемых факторов.>

Изменение углеводного обмена при введении гуморальных факторов селезенки проявляется повышением толерантности к глюкозе и снижении концентрации инсулина в плазме крови /контроль -58,0* 3,27; опыт - 45,0^3,80 мкНУмл; 01/. Обнаруженные изменения обусловлены аминами« выделенными из спленина и БЭС. После удале-

пня селезенки концентрация иксулнма s плазыэ крови не изменялось. Возможно фактор селезенки, оказывающий влияние на углеводный обмен, обяедпог инсулиноподобным действием и еорыозит секрецию инсулина.

При оценке взмексння функционального состояния ггшофмза сод воздействием гукор&лышх факторов селезенки установлено, чго БЭС дозоэ&вксшо сшадл содеркаюю соштотропного гормона в адо-иогипофизе крае /контроль - 43,0+3,0; онда - 32+1,6 ш:г/цт; f/0.02/» а снлшиш на оказывая подобного оффвкта. Крот того, об-нарукзно» чго ир» введения ЕЭС /табл. 5/, а также при сплеиоь®-галии ваблвдается повышение содержания АК1Т в плазме крова /контроль - 188,4+12,8| спдекокзггишя - 601,6+44,9 кг/л; Р/0,001/.

Таблица 5

Влияние БЭС на концентрации АКЗГ в плазш крови крыс, иг/а

Контроль ! ЕЭС /1:100/ ! БЗС /1:1000/

244,7+51,5 519,0+114,5 209,0+38,7

/6/ /6/ /6/

Р/0,С01 РАО, 5

Примечание: Р - достоверность различай по ошюш к контроля

Введете спленнт в разседешл ÎSÏ00 вызнваяо виракениоо аовшвше концентрации ÏÏP. Однако еодерг&кие ТЗГ в шгайме крагш крис с бксперакекгальяой спяоноизтешша во изменялось.

■ Исследование вшшшс гуцоразышх ¿¡акторов сслезсики m удь-трос\руктуру отдолышх ïbbob клочок адсногмпофзза, вирабатывш-ï5ix раэлшаша •троияаз'гчзраош, показ ело, что при сшшнэктоши происходят стимуггазргя секреторной (хх?;:еностм гопадо-, хортако-и- соаатотроишх кжаток. Стяцржцая ватраишае« ш цроцвссм вну-тркюш точного свдюзза гориояов, так к их выведения в кровеносное русяо; Она настолько штдасавяа, ч*о коке* привода» в функцно-аалиюыу «отощаюш квотон к их гпбага. Ыиогокрапюо введение ЮС нелвсатаа купирует взнзяошя, выэягтаиз спленэктоыней. Более того,'часть кло?ок вру о том перехода т в затораосекиое состояние. БЭС., в кервуа очородь, блокирует ваведешо секреторного материала пз клеток а шшь оатеы вягшог на ого внутриклеточный синтез.

Влияние гуморальных ¿акторов селезенки на адяптащш суг&-низма к неблагоприятным поздеПствиян.

При изучении актопротекторных свойств гуморальных факторов селезенки било установлено, что вреня ; плавания крыс нпиболео значительно повивалось при введении первой фракции БЗС, содержащей ашнш /контроль - 106+8; опит - 392+1?. мин; Р/0,001/. Установлено такюз, что при введении отдельных полиемпгсв, концентрация которых в исследуешос препаратах относительно высока, физнчесну» работоспособность у шааей повшзал только спершн. Ногшо прадполотатъ, что он является одним из тех весеств, которые окаэываэт гскеоста-тическоо действие.

В результате исследования содержания полнамшоа в плазмэ крови обнаружено, что у интакгн;.о; животных концентрация кадаверина виз, чем других аглшов. Посла удаления селезенки наблзздалось по» амзение концентращи путресцииа и снижение кадаверина и спершда-на. Содержание спэрыидкна при этом существенно но изменялось. Введение БЗС с плонэ кто пировал тлд гквоишм знзыаало снижение уровня спермина и ив оказывало влияния на другие полнаизгш.

Обнаружено, что гуноральше факторы селезенки сказывают влияние на содержание в органах и тканях крыс бногошшзс анинов /серо-тоннна и гистамша/, играющих важную роль п реализации ответной реакции организма на стресс /БаЯсфедьд И.Л., Кассаль Т.Н., 1981/. Поело удаления селезенка наб-ждалось увеличение концентрации ги-стагашш: я серотогана в плазме крови, печена, сордцс» козго, семенниках иа 10-й день посла операция. Пра стрессе у сшююкгоми-рованнкх лявотных ныеег место сдегенпо содерзжменг бяогвттх типов в плазш крови и повтенне в пседедованних органах по срав-швнэ с иеотаряровшшымя гнвотншя. Введение салекзктокфованнш ллвотиш иорад стрессом ЕЭС пряиодяло к нернаяпэация изучаемых показателей в большинство из исследованных органов а тканей.

йеязвтся сообщения о рогуяярувщеи влиянии сслозешш на содер-дениб кальция з оргшгазыэ, кзханязи которого окончательно на вн-яензн.

Результат просодстмх исследований дапг основание предполагать, что в селезенке имеется два фактора, способгих оказывать влияние на его вонцзнтрацип п плазмо крови. Один из них содержатся в спяенино и обладает свойствам нормализовать первоначально стакешшй уровень кальция при стрессе, а таназ незначительно снижать этот показатель у интактиых животных. Второй фактор содер-

«ится в БЭС, вероятно, имеет пептидную природу и повшает уровень кальция в плазт крови у интактных гвзвотнш: /контроль - 2,70jP,057; опыт - 3,20^0,089 толь/д; Р/0,05/. По-видимому, этот фактор вызывает выраженное увеличение кощзнтрагрш кальцяя в плазме крови крыс с экспериментальной сшгеиошгаяией, которое наблюдалось в иаяшх эксперамантшс.

Проведенные наш исследования возводите установить, что socas спленэхтоыаи происходит «ашеии® антагипокспческой резистеитаосш. При изучения свойства гуморальных факторов селезенка вовызать устойчивость давотшх к гадмксав, установлено, что выраженный еффз-ктои обладала только яшндивя фракция, в то время как другие фрак-щв оказались ко вффзктявтмя. .

Противовоспалительный оффзкт спденин& исследовали т иодемх ' экспериментального воспаления, вызванного трявсином, овальбукзиои, каррагекинои и форгшзшоу. Dpa os-ou ус тало ess ко, что сжтгаи уско« ряет развитое острой воспалительной рэакцгш в способствует более быстроцу paspes®«!® иосподеная, вызванного формалином. При других видах воспалегаш он иа'$ш©ыэал дойстсля. Учитывая, что форматам проявляет свэа фйогогенноо дзйстаяе пра взшшодайствии с аминогруппа» белка, воано лрзддодашть, что еплешн препятствует этому взаимодействию, вероятно, путей стабилизирующего действия ма мембраны клеток.

В результат®'сравнительного кгучокня влияния гуморальных факторов селезенка на ряд Ещунолоптекйх иоказателей установлено, что в селезенке содзрзштся, по крайней кзрэ, две групам биологически активных соедаизиий, участвугцмх'в рагуляции иммуногенеза. Одна из ник предотавязка кмаке^долокуляртзд фактором /или факторами/, коториЗ содореятся в сшшшне в оказывает икмуносупрссснрую-цее действие, посмел актссиоссь индуцированных антигеном суярас-сороа. (Другой фактор кмоаг паптадяуэ природу, содержится в БЗС и снижает обнрй уровень иммунного ответа, из оказывая влияния на активность овацгфтческих суироссороь антнгелообразоваиня /рис. 3/. Вместе с ven, сплетал и БЭС обладают и иекоторыш общими свойствами. Они на способны индуцировать "in vii.ro образование Б-РОК лимфоцитами периферической крови онкологических больных, являются индукторами интерферона и тонической сывороточной активности у взрослых тииэктоиированных мышей. :

Установлено влияние гуморальных факторов селезенки на функцию тимуса. У епденэктомированных животных наблюдалось снижение

Количество АОК

¡Рлдвдий.

ей.

8000 2000

I

1000

II

•I

I

Рис. 3. Влияние гуморальных факторов селезенки на количество антителообразуюврк клеток /АОК/ селезенки /на 10® кврноцитов/ I - первичный ответ; II - вторичный ответ. I - контроль;- 2 - исследуешай фепарат

вюшчэнйя ^С-амниокисяот в белок тнмоцнтов крыс, а введение БЭС нормализовало этот показатель. У янтактних животных препарат повязал включение меченых аминокислот. Наблюдаемый эффект определяется фракцией, содержащей акякн, н, вероятно, связан с обменом аденозина, тан как установлено, что ЮС повышал активность адено-зйядеэашнаэы а тимусе инт4ктных крыс /контроль - 376,9*40,7; опыт - 512,2+40,0 даоль .УНд/иг/иин; Р/0,005/ и на оказывал влияния на активность 5 -нуклеотидазы.

Противоаллергические свойства гуморальных факторов селезенки проявляется в торможении реакции пассивной кожной анафилаксии, Показано, что в спленине содержатся вещества, которые вызывают

лмберацкю гисташна, а БЭС, на оказывая непосредственного влияния

на выделение указанного вещества из тучных клеток, препятствует действии специфического лпбератора - вещества 48/80.

Результаты проведанных исследований свидзтельствупт, что гу-коральныо фактора селезонхи обладаэт радропротекторншш свойства-ш. Установлено, что спяенян и ЮС почти вдвое увеличивает вьиш-ваекость тавотных на 5-с суиш посла облучения. Показано, что положительное дайствнэ сплашша не связано с образованней радиоток-скиоз, а определяемся, вероятно, его геаатотрошшмз свойств&ш. Так, установлено, что после введения препарата происходило восста-новдешт активности холшсстсрадц и ферментов, иотаболлзпруд^х сортшгосторо:!ды .в пзчош облучошаа крыс, в то время как шззздшй экстракт не проявлял аналогичных свойств.

Гуморальный фактоты селезенки п функциональное состопнио гшчепк.

Имеются ьшогочисдендаз сообщения о гепатотрошюи дайстсин гуморальных факторов селезенки /Гояьбзр 1.Ы., 1964; Pranoieeie, 1961/, особенности действия которых и хщшчэская природа подробно не научались.

Установлено, что введение БЗС и еяленина нор«ах-.«>ит экскре-торно-поглотмтеяьнуэ функцяо печени при эксперимен та льном токсическом гепатите /табл. 6/. Геаатотрошп&ш СЕОйстаэмн обладали вторая фракция БЭС и фракция В сплонина, содерлш^ке пгптады. Обнаруженный оффзкт проявлялся при введении БЭС per ов, что свидетельствует о стойкости гепатотропннх факторов к действии протеолита-чаекмх фердаитов Еадудочно-кшаекиого тракта.

Таблица 6

Вляяше препаратов селезенки на восстановительные процессы

в печени крыс при экспериментальной токсической гепатите

Исследованные!__

препараты кои¥роль

_\

Клиренс БСФ

ССЬ | CCI

а и препараты селезенки ! а разведении;_

1 1:10 I 1:100

J_Ii4

Спленкн

/7/ БЭС '

/7/

0,0878f 0|007Г

0,590+ 0,0060

Р/0,05

0,0535+ 0,003?"

Р/0,05

0,0807+ О!0065"

Р^0,05

0,0783+ О!0050-

P^0,05

0,0888+ 0,0049"

Рл0,05

0,1062+ О.ООЬЬ"

Рл0,0Ь

Примечание. Р - достоверность различий по отношению к контролю

Кроив того, показано, что'•„., сменян восстанавливает активность холинэстеразы печени, в то время как мышечный экстракт подобны» свойством не обладал. Нагревание препарата до температуры кипения лишало его активности.

Спленин также нормализовал содержание цАЫФ и метаболизм корта костероидов, повышая активность цктоплазматической 5о6-редукта-зы и не оказывал влияния на процессы, протекающие с участием ми-кросомальной 5с£ -редуктазы.

Нами установлено, что биологически активные вещества, выделенные из селезенки, оказывают стимулирующий эффект на показатели, характеризующие функциональное состояние папени у интактных живо-тннх. Введение спленина повышало синтез парааминогишуровой кислоты из парааминобензойной в печени крыс, активизировало процессы ацеталирования в печени крыс /контроль - 39,6+3,8; опыт - 49,2+ 2,4 Р/0,001/, усиливало включение ^С-ацетата натрия в альбумин сыворотки крови мышей. В последнем случае наиболее интенсивное включение метки наблюдалось через 3 ч после введения препарата /контроль - 320,6+24,8; опы* - 654,3+19,1 иып/ккн/мг; Р/0,001/.

Показано, что гуморальные факторы селезенки оказывают непосредственное стимулирующее влияние на гепатощты в культуре ткани. Характер морфологических и гистохимических изменений зависел от концентрации факторов селезенки и длительности их воздействия на клетки.

Высказанное ранее предположение о иембранотропиом действии гуморальных факторов селезенки подтвердили результаты изучения их влияния на микровязкость мембран гепатоцктов крыс с помощью флу-орисцентного зонда /полиметилового красителя/. Обнаружено, что у животных после удаления селезенки набявдадось достоверное сня-хение вязкости мембран /контроль - 0,65+0,06; спленэхтомия - 0,43± 0,04 пуаз; Р/0,01/, а введение БЭС повышало исследуешй показатель до уровня контрольной группы. У интактных животных исследуемый препарат не вызывал изменения микровязкости мембран. В экспериментах о использованием' спинового зонда установлено, что исследуемые факторы селезенки повышают параметр упорядоченности лнпид-ного бислоя и его плотность. При атом полярность фосфолипидов в области локализации зонда не изменялась.

Учитывая, что обнаруженные аффекты могут зависеть от изменения соотношения липидов в плазматических мембранах, изучено влияние гуморальных факторов селезенки на биосинтез холестерина и

фосфодипидов в мембранах гепатоцитов.

Полученные данные показывая?, что общее содержание ыачсных фосфодипидов в тканях печени сплензхгомированных крыс достоверно ним, чеы в контрольной группе, что, очевидно, свидетельствует о снижении их синтеза. После удаления селезенки наблюдалось повше нхе содераакия холестерина в нарушение соотношения отдельных фос фолипидов /табл. 7/. Содержание лизофосфатидидхолина, фосфатидил холхна, фосфатаднлэтаяоламина, фосфатидилсерина повивалось, а фо фатидалинозита и сфингоыиэлкна - снижалось. После введения БЭС спленэктомированным животным происходило значительное снижение /ниже нормы/ содержания лнзофосфатидилхолииа и фосфатидилхолияа, которые играют вашу» роль в регуляции функционального состоииш плазматической мембраны.

Анализ общей направленности выявленных изменений позволяет ваклвчить, что механизм стабилизирующего действия гуморальных фа: торов селезенки на плазматические мембраны клеток печени обусловлен их влиянием на относительное совдканка-овдвльных фракций фосфодипидов и холестерина.

К настоящему времени из селезенки выделен и описан пептид спленил, активной часть© молекулы которого является участок -Арг-Лиз-Глу /спленотрятин/. Учятывая, что это соединение'может являться одашм из факторов, определяющих механизм шыания изучаемых Наш препаратов ио железы внутренней секреции и функциональное состояние печена, проведено исследование его биологических свойств. Спденотритин синтезирован в Научно-исследовательской институте биоорганичесиой химии АНУкраяни.

Установлено, что исследуоиыЯ педтид оказывал аятнденатура-ционный вффект '1п^-«^й'1!ри тепловойденатурации альбумина ."на 37,1^3,81 ЯГапрепятствовал гемолизу эритроцитов в гипотонической среда /0,4$$ у/аС(/ на 13,9+1,44 56* После его введения ирисам с экспериментальный токсическим гепатитом происходила нор: ыялизацяя функционального, состояния печени.

• Назначение пептида интактным животным приводило к снижение концентрация И-ОЙС и кальция в плазме крови /табл. 8/.

Предвари тел ьное введете спленотритмна перед стрессом нормализовало содержание серотонина в плазме крови, сердце и мозге. Концентрации гистамииа при этом не изменялась. Анализ полученных данных дает основание предположить, что некоторые из обнаруженных аффектов гуморальных факторов селезенки могут определяться сплеиотритином.

Таблица 7

Содзргашэ ллгшдоз s ялазиаттозскнх мембранах renasoqasoa грио, í¿J*r~* белка

Группы 1

живот- 1Фосфолнпида ных ' 1

. I___Фракция фоефолипндов_____

Холестерин |дязофосфати-1 фосфатидяд-l' фосфатиди.а-1 фосфата дил-1 сфингоыи-I фосфати-

!далходнн I инозит I холин 1зтанолаыин } элнн ) дялсерин

Контроль 46,5+1,09 52,4+3,03 2,65+0,32 8,25н£,77 20,05+1,57 4,95+0,47 5,96+0,57 4,35+0,43 /6/ „ .

jgg^ 61,4+2,55 73,1±3,12 3,%0,22 4,9+0,47 33,5+1,35 7,4+0,57 4,4+0,4 . 6,0+0,47

/6/ - р-^0,02 pj¿0,001 , . pj¿0,01 pi/0,01 pj¿0,001 pj/0,01 pj¿0,02 p^o.02 Сшвкэкто—

шм+бэс 39,6+1,16 67¿ 1+4,3 0,76+0,05 l,3&+0,12 12,54+0,58 10,4+0,44 1,82+0,1 11,0+0,82

/9/ P¿0,001 p¿0702 . p^otooi pj/otooi pj/0,001 p¿0,001 pj/0,001 pj¿0,001

pg¿0;001-- pgip¿05- í• pg¿0,001 pg/0,001 p2/0,001 p2/o,ooi P2¿0,001 P2/0,00I

Пришчаная; Pj

4

-достоверность различай по отношении к контрольный хивотнын; - достоверность различий по отноаешэ к спденэктоинрованнш хивотиым.

Таблица в

Содержание П-ОКС и кальция в плазме крови крыс после введения пептида Лрг-Дкз-Глу

Группа (Концентрация П-ОКС I животных I в плазме крови,! _ I нноль/л_

Концентрация кальция в плазме крови, ммоль/л _

Интактике

Спленотритян

Стресс

Спленотритян при стрессе

471,4*20,3 /15/

269,0*33,2 /5/

1089*36,1

/IV

Р^0,001

706,1+67,5 /6/

Р^О.01 Р^0,001

2,93*0,063 /15/

1,65*0,053 /5/

Рх/0,05

2,33*0,077

/15/

Рх/0,05

2,95*0,079 /5/

Р^О.05 Рз/0,05

Примечания: Р^ - достоверность различий по отношению к «нтактиым животным;

?2 - достоверность различий по отношении к животным, подвергнутым стрессу.

Результаты изучения гуморального влияния селезенки на железы внутренней секреции и процессы адаптации свидетельствует о широте их физиологического действия. £ то же время, говорить об пндокранной фунжщи селезенки нет оснований, так как после спленэктомии, при гипертрофии и введении" выделенных факторов, не обнаружено тех классических закономерностей, которые наблюдается при исследовании желав внутренней секреции. В основе механизма действия гуморальных факторов селезенки лежат другие закономерности, которые, вероятно, определяются двумя группам биологически активных веществ - низхоыолекуллрными пептидами тетинами и полиаминами. Способность селезенки производить их путем аутолиза пептидов и де-карбоксилирования аминокислот, депонировать и,при необходимости, "выбрасывать" в кровоток.имеет важное физиологически необходимое значение, а результатыпрёведенной работа могут служить основой для нового направления исследований в области эндокринологии и гормональной регуляции гомеостаза.

в H в.о д ы

1. В селезенке вырабатывалгея иизкоыолокуляриыэ биологически активные вещества, рагудируйщне гормональный баланс.в организме и обладавшие адаптогеиными свойствами.

2. Избыток и недостаток гуморальных факторов селезенки в организме вызывает снижение содержания кортикостероидов в плазма крови интактных животных. Из селезенки выделены две группы биологически активных веществ, оказывающих влияние на функцию хоры надпочечников. Одни из них относятся в аминам и обладает адаптоге нш-ыя свойствами, нормализуя содержание II-OKC в плазме крови крас при стрессе. Другие относятся я пептидам и снижает концентрации кортикостероидов в плазме кровя у интактных животных, угнетал* их биосинтез в надпочечниках и блокирует стимулирующий аффект АКТГ в культуре ткани кортикоцитов. Метаболизм кортикостероидов в печени при этом не изменяется.

3. При введении гуморальных факторов селезенки / а также при экспериментальной спленомегалии/ уменьаается содержание тестостерона в плазме крови и развитие андроген^увствятельных органов у неполовозрелых животных, изтаболнза андрогенов в печени не изменяется.

После удаления селезенки концентрация тестостерона в глазке кровя снижается, а активность -ол-дэгюдрогеиазы семенников

угнетается.

По хгмачэскоЗ природе бяологпчэеяй актаяина вещества селезенка, регулируете содерааигэ ся^зогенов s оргаяази*, относятся в пэатадаа.- , . _

4. Вгэденяэ гуморальгаг: фахтороз солезенаа спвотныы с экспе-.ряккггалыпл! гаяотяреозоа лоргдаллэуо? спазятае показателя содор-ssmn Т5фокспна а плазко вроэд ejshs.

5. Вгяягаз гуиоральгайе факторов с-злззспкя на углеводом!» об-usa сирпгается э cnnz&isni толергяягсета я глпжозо а уиеиьаенш кещэнтрзцгя пксулнна а плазм» ¡¡рот.

ô. Йрп взэдойаи Саодогичасга активных вецзств селезепкя крысам происходя» повнзгнпе концентрация АКТГ а плазме крова, сии-яеппе содержания соиатотроппого гормона в адонопгаофмзе и нарушим ультраструнтуры соыато-, гсортако- м гонадотропоцитов.

"7. ЕЬологячески активные факторы селезенки обладают иирогаш спектром адаптогениого действия: повншчвт работоспособность, уве-

дичиваат резистентность организма и облученкз и гипоксии, обладаяг игагуномодулируэдиш, противоаллергическими, гепатопротакторншги и вротивовосп&гштеяьншш свойствами.

8. Актопротекторнш свойства гуморальных факторов селезенки обусловлены пх регулирующим влиянием на содержание кортакостереи-доа и кслырш б плазма крови, а такта биогенных аминов /тостакииа и серотонина/ в органах к тканях животных.

' 9. Противоаллергический о$фэк» факторов селезонга обусловлен их имлуиосупресскрую^гл свойствам;!. Одна груша воцэств при этой вызывает снпаенио обцего-уровня кмцушюго ответа, а другая - повы-сйот активность индуцарованных вятагенои супрсссоров.

Биологически активные вещества селезенки, участвуете в регуляции иммуногенеза, индуццруят образованно пнтарфорона, рогулпру-.' u'í либераця» гистамзиа тучзиг^ клоткаш, усславют бпоспнтсз бог-ка и обмен едзноэгша в тщсо с-пошзоз® тишчоскуо активность сыЕороткп крови.

10. Гепстопротекторниз факторы селезенки икают пептидну» природу, дарказшзуэг обезврзтавагцуа и впскроторно-поглоглтеяь-нув функцяп пачзш!, a тавгз метаболизм кортккостероидов при вкспа-рименталшш токсическом гепатите; стпыулируот активность гепаго-цйтов в культуре ткани. .

11. Показано, чго гукораяьшзз фактора селезеккл обладает выраженным» иаыбракотрохжыдо свойствами стабилизирует овезшти-ческие шшбраны эрй^рощттов и геватоцятов, оказывеат регулирующее, шшяше на состав и биосинтез липлдов.

12. AkthbhuS участок молекулы епдонопентина /рг-Лиз-Глу обладает свойством ешкать содержание кортикостероидов в плазме кроши и оказывать гепатопротеиторшй эффект.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. В патогензэо развития гормональной недостаточности надпочечников и семенников, а такаэ нарушения процессов адаптации могут принимать участие гормональные факторы селезенки, что необходимо учитывать'при выборе адекватного метода и схеыы лечения соответствующих заболеваний.

2. Фармакологические препараты,изготовленные нв основе гуморальных факторов селезенки, могут быть использованы для коррекции повывенной гормональной функции надпочечников, а также при нарушении процессов адаптации, иммуногенеза и функциональ-

кого состояния печени /А.С. & 1481960/. Их целесообразно применять в ветеринарии для повышения резистентности новоронденных поросят.

3. Активная часть иолекули спленопентина Арг-Лиз-Глу ыожзт бать использована в качестве нового фаришояогнческого препарата, сншпщщэго содержание кортикостероидоэ в плазме крови и обладкх>-цаго гепатопротекторннна свойствам!.

4. Разработанные метода выделения биологически активных веществ селезенки на базе производства сплегана дозволяют усовершенствовать технологии его получения, создать новые фармакологические препараты и повысить рентабельность производства.

СПИСОК РАБОТ, ОПУШШОВАШШХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЩИ

1. Ем1ст в!льннх аы1нокислот у сплен!н! // Эариацевтичний ,чурн. -1979. 2. -С. 52-54 (соавт. - А.В.Еевченко).

2. Влияние сшенииа на метаболизм глвкокортикоидов я печени кркс пря облучении и токсической гепатита // Тез. секц. дохл.

II Всессэзного сьезда эндокринологов. -Л., 1980. -С. 502 (сооат. - И.Д.'^зонько, А.В.Шзвченко, Т.И.Перзтятко).

3. Впляв сплен!ну на б1осннтез альбуи!ну // Тези доп. 1У Угср. 61 ох! и. зЧзду, 1982, я. 2. -С. 244 со авт. 0. В. Шевченко

4. Озределешго содерзаннп паразианобензоЯаоЙ а параагано-гпппуровоП В.слот а одной проба // Лабор. дело. -1983. I. -С. 59-60.

5. Препарата солезенкп з лечении заболеваний. -К-'ев: спва-ня./УССР/, 1983. - 15 С.

. б. Етая1я;э сплзнлна на раэгнтлз эксперпызнтальиого воспалена у ирис // Сззаол. зурн. -1983. -1? 4. -С. 489-491 (соазт. - А.В.ПЬзчонко).

7, Снняеше концентрация П-окспкортнкоидов плазм* кровя крь-е пра зоздеЗствпл СС^ и нормаяпзувцеэ влияние сплепина // "Эндокринная система оргшизка п врэдныз факторы: слепней срэды": ТЬз. докл. II Всесоюзной .конф. -Л.» 1983. -С. 103 (соавт. -А.В.Шзвчанко,).

8. Изменение концентрации цАШ в печенн и селезенке врио при воздействии сс£4 а его поррокщя сплешшом // "Зндокраиная систэиа организна и вред из фактора внешней среды": Тез. докл. II Всесоюзной конф. -Л., 1983. -С. 106 ('соавт. - И.М.Космша).

9. Иаучтше биологическое активное!« гуморальных факторов селезенки // Актуальные проблеш эндокринологии. -Фрунзе, 1383. -С. 2I0-II2.

10. Д^накика содержания II-0KC в плазме крови крыс пря сплон-зктодош // Соврекзшше проблемы експеришнтальной и клинической ендохрннологии: Тез. докл. 1У сьеэда ондокринологов УССР. -Каев, 1987. -С. 390-391 (соавт. - Г.В.ТЬленева, А.В.Шзвченко).

11. Специфичность действия биологически активных факторов селевенет Л Соврешнашо проблем зксшрикенгаяьной к клинической эндокринологии: Tss. доея. 1У сьезда ендокринологов УССР. -Шов, 1987. -С. I9&-200 С соавт. - Н.И.ДоровенкоО.

12. Влпянзо сплешша ш топспчность плазмы кровя облучзшшх . «шютшх Ц Эндокрйиологш. Бш. 17. -К.: Здоров*«, 1987. -С. 84-87 Íсоавт. - А.В.ЕЬвчзнко).

13. Шщйй&ияэ s иэучоюю биологически авгавных факторов селезенки // Актуальною проблеш производства Еровеоскенателой, консервантов крова, rcpiWííaEbíüS к оргаяотэрапавтйчзскйх препаратов: Тез. докл. Ш Воесщгэнойнаучйо-тазааческой коифоренгрш. -M.» 1987. -C.20I.

14. Функциональней состоякзо кора надаочочников крыс посла сигакэкгошя // Дргдадаг АН УССР. -1933. -Р-9. -С.б971.

15. Вякянпа сшшшиа m йигзксябйосуь тш>чгтп Í4C ацетата в альбушн сьгаоротга крови ixaoft //Эндокринология. Вши 18. 18. -К.: Здоров'а, 1988. -С. II4-II6 (coas?. - А.В.йЬвчояко).

16. Роль солезетя в рзтулящш фуз;ксзоиадьио8 активности коры надпочечзШЕОв в оргадозю вра физической нагрузка // Фяэиоя. яури. -1988. -Т. 34, 1М. -С. 47-50 (соавт. - Г.В.ТЬлеиэва, Н.У.

ДрррШ8НХ0>. -,

17. Содарканае сошдалродаого гормона в гапофазо срио прм^введв-шш Ерешратов селезенкг // Аотуальшв проблем даагностяга и ло-чениа вндокршшзх вйболсвшшй: Тез. дохл, симпозиума Датв. науки, об-ва эндокринологов. -Рига", 1983. -Т. 2. -С. 110 (соавт. И.К. UocTàx).

18. Возыоаность приашешя гуморальных факторов селезенки с цвлыэ коррекции нарушений стероидогвнеза // Актуальные проблемы диагностики и лечения эндокринных заболеваний: Тез. докл. симпозиума Дата, научн. об-ва эндокринологов. -Рига, 1986. -Т. 2.

-С. Ш-Н2 ( соавт. - Е.А.Яитвиненко, Г.В.Ткленева, А.В.Шевченко).

19. Угнатаэщай эффэкт биологяческа активная факторов селе-венка па горяональнув активность сешшшкоэ крыс // Современные вопроса репродуктология. -Тбилнся, 1988. -С, 45-46.

20. action of lusaor&l faotors extraoted frota spleen oa the funoticaal state of liver daring experimental toxleal bepati-tis // Hopatologlaahao Зуюроа1гвя. - Jena, 1933. -?. 41

Ссозат. - И.Ц.Доропенко^.

21. Роль селезенки в регуляция содержания кальция а вяазке крова а корне п пря стрессе Ц Фязпол. кури. -1939. -Т. 38, № I. -С. 17-21 (соавт. - Н.Ц.Доропенко).

22. Способ получения вещества, обладающего гэяатопротектор-пой актявиостьо: Авторское свядетельство 3 I48I960, 1987(соавт. -В.П.Кошссаренко, А.В.Шевченко, Н.Н.Доропенко, С.Г.Гасаяоп).

23. Роль аденоаяна в ызхвгшзиз действия гуморальных факторов селезенка // Доклады АН УССР. -1989. 3. -С. 71-74 (соазт. -В.П.Коьстесарэнхо, Е.А.Лятвиненко, А.В.Шэвчанжо).

24. Влияние сялекяна и безбелкового экстраята селезенка на едзиозэн-деззетивзнуэ ахтзвность некоторых органов края I/ Укр, баохин. лурн. -1989. -Т. 61, £ 3. -С. II4-II7 (соавт. - Е.А.Дя-ТЕИнешя)).

25. Сравнительная характеристика специфичности действия биологически активных факторов селезеиет // Эндокринология. Выя. 19. -1С.: Здрров*я, 1989. -С. 112—114 (соавт. - Н.Ц.Дороаанко).

26. Из&знеше функциональной активности сешгазяяов криз посла сплакзктокии и введения гуморальных.факторов селезенка Н Доклада АН УССР. -1989. 4. -С. 65-68 Ссоавт. - В.Н.Деиченко, С-К.Кобяяов).

27. Роль гуморальных факторов селезенка в ендокркнпой регуляция процессов адаптация пря шгечной нагрузка // Тез. докл. Ш Всееотиого съезда эвдокрянояогов. -Тшзкечт: Пэдпцяна Уэ. ССР, 1989.,-С. 132 (соавт.-А.В.Шевченко, И.М.Дрроаеняо, С.В.Покровская). ~

28. Взняние гуморальных факторов селезенки на актавность хо-лянэстеразы ткани печени я сыворотка крова пря анспэря&внтаяьнои товсяяеском гепатите у крыс // йяаиол. иурн. -1989. -Т. 35, ^ 4. С- 24-27 Ссоавт. - А.В.Шевченко, В.А.Тычятда).

29. Адаптогенные свойства гуморальных факторов еелевенки // Материалы иаучно-практич. конф. "Вопросы иедяцинокой экология и проблемы улучшения здоровья населения Забайкалья и Корейской Народной Демократической Республики.-Чита, 1989.-4. 37-38.

■ас.

30. Ветяша гуиорадьних факторов селезенка на содержание тиреоидин* гормонов в плезиэ врот крас // Гормональная рогуллцая в норда н при патологии. -Харьков, 1989. -С. 36-37 (ссазт. - Г.В. Тслонева).

31. Гууоральная £>упкщя селезенки к розкстьитностъ с гипоксия If Доклада АН УССР. -1983. -Г< 12. -С. 62-55 icoasv.- Т.В.Аитоизн-ito, В.Н.ДтглеПко).

32. СЕщузвфувгиВ вф$ов» биодогичэскй активных вещает» село-зонки на фушщаояальц$э активность гспатощтов // бизпол. кури. -1989. -Т. 35, » 3. -С. 60-83 Ссоавт. - Д.С.Оиищенко).

33. Лечобюш н одоатогскшо свойства препаратов селазсняг // Нарузошз кахеняоаов рогуляцз! в их коррекция г Тез. докл. 1У Всосовзиого сьозда вато$ззиологов, -Кжзшев. -11.» 1989. -С. 651.

34. Вязанке гуморальных факторов солезошш па катаболиза кортакостеропдов и содораеизз цА13 в пачони крис вра экспориааи-

дьиоа тоисачэскэи гоаатитэ // Проба, зндокранологпи. -1990. -Т. 36, Р I. -С. 78-80 (сооат. - Н.Д.Ч>онько, Н.Н.КЬсилна).

35. Вешка Г}хорадмйах факторов селозонж на функциональна активность Еора надазчзчаакеа // До'клады Ш УССР. -1990. -J? I. -С. 66-69. (соовг. - Г.В.Ълонеса, С.В.Покровская.,

33. Особенности дойстгая гуизральны»'фактор > сгл^гнки при облучении // бявгюд» Ejrja; -К80. -Р 3. -С. 63-67 s; соавт.-Я'.Т.Ва-1»р:гашй,''А. В.Орлова, С.В.Пэгфогсншя).

37. ФункцаоягльЕоа сее«оя:г:э тучзшх клеток крыс при действии биологически оясвшз фзд^орэв солозшка Н бязиол. жури. -1990. -Р 3. -С. 67-71 (соаг.?. - С.В.Покровская, В.П.Коииссаренко).

38. Ввшшзз баояогачзскл айтасних веществ селезенки на содар-йазвю соамотроааого гормона в гквофизо крыс // Иробл. эндокринологии. -1990. ~L £5» Р 5. -С. 62-85 (соавт. - И.Н.Шостак).

39. Еюлогпчзску векша» факторы солезонкм - как регуляторы вхзлуногенззп // Паауизгогал в сллсрггя. Выа. 24. -К.: Здоров'я, 1990. -С. 94-96 Ссоавт. - В.®.Чеботарев, Г.А.Зубкова, 0.Д.Черненко.).

40. Гуморальные факторы селезенки и функциональная активность Тимуса U Эндокринология. Вып. 20. -К.: Здоров»п, 1990. -С. 119122 ("соавт. - Н.И.Поликарпова,- Е.А.Литвиненко, Г.А.Зубкова, Л.И. Рубан^.

41. Механизмы повышения физической работоспособности крйс под влиянием препаратов селезенки // Фармакология: состояние и

перспективы исследовании:. Таз. дока. 1У сьезда фдрызкологоз УССР. -Харьков, 1990. -С. 158 (coas?. - Г.В.1Ьле:юва, НЛ.Доро-аанко, В.Э.&райфздьд, Н.Н.Нурищенко).

42. Шдслфованяо экспериментального гипотиреоза с цзльэ тестирования активности лекарственных средств, влияэщах на функ-г?!Э щитовидной железы Ц Лктуалып-'з проблеют лзкарс7Р0НН0П токсикологии: Тез. докл. ВсесоазноП наупн. конф. -М., 1990. -Ч. III. -С. 818 (соазт. - Г.В.ТЪлонава).

43. Гуиоралышо факторы солэзснкя в рэгуллции содэрлштя иа-льцдя в пдаот крога у крыс // 5изаол. журз. -1391. 5. -С. 113116 (соавя, - Н.И.Дороненко).

44. Влияние гуморальных факторов селезенки на дипядньгЯ состав пязэматическкх квкбраи гепагоцятов П Доялдда .АН УССР. -1991. -I? б, -С. 161-164 (соазт. - Н.М.Гуряна, 0.В.Горохова, Е.А.Лвтли-ноико, Г.Л.Еодгоэ).

45. CasoHii! as зас!б корогщ! Г ь»рфо$ушсц1е:шм1ого «телу юч!нгя при есспврямзиталшому гепатнэ* // Ендокр:шояог1п. Бап.22. -К.: Здороэ*я, 1992. -С. 104-108 ( caisap?.- В.1!.Горд18!!иа , О.В. Шззчзиио).