Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Анализ иммунотропного действия некоторых психотропных препаратов в эксперименте

}} г с ОД

| I о Ум

1 8 МАР ^¡Ь

На правах рукописи

МАТВИЕНКО Марина Анатольевна

АНАЛИЗ ИММУНОТРОПНОГО ДЕЙСТВИЯ НЕКОТОРЫХ ПСИХОТРОПНЫХ ПРЕПАРАТОВ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

14.00.36 - Аллергология и иммунология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва -1996

Работа вылолнена в Институте иммунологии Минздравмедпрома РФ.

Научный руководитель: академик АЕН РФ, заслуженный деятель

науки РФ, доктор медицинских наук, профессор Н.Г.Арцимович.

Официальные оппоненты: член-корр. АЕН РФ, доктор медицинских

наук, профессор Л.В.Ковальчук, доктор биологических наук, профессор С.В.Магаева.

Ведущая организация: Гематологический научный центр РАМН.

Защита состоится ". 1996 г. в на

заседании диссертационного совета Д 074.09.01 при Институте иммунологии Минздравмедпрома РФ по адресу: 115478, Москва, Каширское шоссе, дом 24, корпус 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института иммунологии Минздравмедпрома РФ.

Автореферат разослан

К " 02)_1996 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук

Л.С.Сеславина

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. В настоящее время большое внимание уделяется механизмам взаимодействия нервной и иммунной систем, а также их роли в поддержании гомеостаза организма. Накоплено значительное количество экспериментальных данных, свидетельствующих о согласованности функционирования организма, благодар^ сложной и совершенной системе нейроиммуногормональ|юй регуляции. Развитие представлений об иммунонейроэндокрини|ом взаимодействии привело к формированию и развитию нового направления в медицине — психонейроиммунологии (G.Solomon, 1974; Корнева, 1987; Абрамов, 1988; Зозуля, 1993). Нарушения нейроиммунного взаимодействия в результате действия неблагоприятных факторов эндо— и экзогенного происхождения являются причиной ряда заболеваний, как со стороны нервной, так и иммунной систем. Патологические изменения нервной системы нередко сопровождаются дисфункциями иммунной системы, приводящие к вторичным иммунодифицитным состояниям (Крыжановский, Магаева, 1990; Судаков, Юматов, 1991; Арцимович, 1993). Несомненный интерес вызывают дисфункции иммунной системы, связанные с различными стрессорными ситуациями, ощутимыми на современном этапе развития общества. Известно, что по своей биологической природе стресс направлен на мобилизацию защитных сил организма для предотвращения патогенного действия на него экстремальных факторов среды.

Однако, расстройства иммунной системы, вследствие действия нежелательных факторов среды обитания человека, повышает риск развития не только соматических, но и нервнопсихических заболеваний. В связи с возрастающим количеством

иммунопатологических состояний, вызванных нарушением ЦНС, особый интерес представляет вопрос, связанный с возможной коррекцией стрессиндуцированных дисфункций организма. В качестве базисной терапии, помимо специфического лечения, обусловленного той или иной патологией, при соматоневрозах на фоне острого или хронического стресса широкое применение находят различные психотропные соединения из классов нейролептиков, транквилизаторов, антидепрессантов,

психостимуляторов и других групп. Известно, что применение целого ряда психотропных соединений, влияющих, | главным образом, на ЦНС, может также сопровождаться нежел;ательными побочными явлениями — блокадой проведения нервных импульсов, ведущих к нарушению эндокринного обмена и изменению иммунологических показателей (Арцимович, 1989, 1992; Москалец, 1994).

При этом нарушается одно из главных свойств живого организма — способность поддержания постоянства внутренней среды — гомеостаза. В связи с этим изучение иммуЦнотропной активности как широко применяемых в медицинской^ практике психотропных препаратов, так и вновь синтезированных, обладающих одновременно иммунно— и психотропным кействием, представляет определенный интерес.

Цель и задачи исследования. Основная цель представленной работы состоит в изучении действия психотропных соединений различных групп на функциональную активность иммунной системы в условиях эксперимента.

В связи с этим были поставлены следующие задачи:

1. Изучить иммунотропную активность аминазина, галоперидола, реланиума и амитриптилина.

2. Оценить зависимость иммунотропной активности психотропных препаратов от длительности их применения.

3. Оценить отсроченные действия психотропных препаратов на функциональную активность антителообразующих клеток.

4. Изучить действие психотропных препаратов на иммунитет на фоне вторичных иммунодефицитных состояний.

5. Выявить возможность применения нового адамантансодержащего соединения — бромантана с целью коррекции

стрессиндуцированных иммунодефицитных состояний.

!

6. Дать конкретные практические рекомендации по

I

применению психотропных препаратов с учетом исходного состояния иммунной системы.

Научная новизна.

Проведено заранее спланированное исследование с целью изучения механизма иммунотропной активности аминазина, галоперидола, реланиума и амитриптилина. Выявлена возможность коррекции нервной и иммунной систем с помощью психотропных препаратов. Показано, что при широком применении психотропных препаратов как в целях лечения соматоневрозов, так и для снятия

стресса, необходимо учитывать исходное состояние иммунной системы организма. Полученные результаты соответствуют существующей концепции о функциональной взаимосвязи нервной и иммунной систем, а также о роли нервной системы и регуляции иммунного ответа.

Учитывая основные закономерности нейро—гормональной регуляции иммунных процессов, одним из путей иммун^коррекции иммунодефицитных состояний, приобретенных под действием стресса, является поиск и изучение новых нейроиммунотропных средств, в результате чего впервые была выявлена возможность иммунокоррекции антителогенеза с помощью реланиума и бромантана на фоне иммунодепрессивного действия стресса. Показано влияние нейротропного адемантансодержащего соединения — бромантана на регуляцию, функциональной активности гуморального и клеточноопосредованного иммунного ответа в условиях стресса. Обосновано применение бромантана для активации иммунной системы в качестве нейроиммунокорректора на фоне стресса. ,

ЯЪ1

Практическое значение работы. Данные, полун результате работы, позволяют рассматривать препара' нейролептиков и антидепрессантов как средства, ока: преимущественно иммуносупрессивное действие, что н< учитывать при их клиническом пр Иммуномодулирующий эффект реланиума преду назначение данного транквилизатора в условиях иммуноде состояния организма. С практической точки зрения п

енные в группы зывающие еобходимо именении. :матривает ^ицитного олученные

результаты об уменьшении бромантаном депрессивного влияния на иммунную систему ряда психотропных средств на фоне стресса обосновывают целесообразность комбинированного применения психотропных препаратов в неврологической и психиатрической практике.

Данные о характере иммунотропной активности изученных психотропных средств в условиях воздействия стрессогенного фактора могут быть использованы в практических целях для профилактики иммунных нарушений, обусловленных стрессом.

Положения, выносимые на защиту. На защиту выносятся следующие положения:

1. Психотропные препараты из групп нейролептиков, антидепрессантов и транквилизаторов проявляют иммунотропную активность как в норме, так и в условиях иммунных нарушений организма.

2. С целью коррекции вторичных иммунодефицитных состояний различной этиологии возможно применение транквилизатора релаш|ума и нейроиммунорегулятора бромантана.

3. Применение психотропных препаратов с учетом исходного состояния иммунной системы позволяет снизить риск возникновения нарушений нейроиммунного баланса.

Внедрение в практику научных положений и практических рекомендаций. Научные положения и практические рекомендации внедрены в практику Специализированной клинической больницы им. З.П.Соловьева - Клиники неврозов, Центральной клинической

больницы МО РАМ, Института иммунологии Минздравмедпрома РФ.

Апробация работы. Основные результаты работы были доложены и обсуждены на симпозиуме с международным участием "Современные проблемы клинической и экспериментальной психонейроиммунологии", Томск, 1992 г., на I Республиканском съезде "Аллергология и иммунология", Баку, 1992 г., на I Всероссийском съезде иммунологов, Новосибирск, 1992 г., на VIII международной конференции иммунологов, Будапешт, Венгрия, 1992 г., на II съезде иммунологов и аллергологов Белоруссии, Гродно, 1995 г., на конференции с международным участием 1СЕР"95 и ICONE"95, С.-Петербург, 1995 г., на заседании секции Ученого совета Института иммунологии, 1995 г. _

Публикации. По теме диссертации опубликовано g работ, в том числе Патент СССР №1826906.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 112 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, главы, посвященной описанию материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения

результатов, выводов, практических рекомендаций и литературы. Библиография включает 183 источника, в том отечественных и 70 зарубежных. Работа содержит литобзора и 14 таблиц основного текста.

указателя числе 113 таблицы

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Работа выполнена в рамках исследовании Института иммунологии Минздравмедпрома РФ при участии НИИ фармакологии РАМН.

В ходе решений поставленных задач был проведен анализ механизма иммунотропного действия четырех широко используемых в клинической практике психотропных препаратов — аминазина, галоперидола, амитриптилина и реланиума — на отдельные этапы иммуногенеза мышей в норме и при вторичных иммунодефицитах, а также изучено влияние нового адамантансодержащего соединения — бромантана на фоне стресса.

Материалы и методы. В задачу исследования входило изучение иммунотропного действия широко используемых в клинической практике психотропных препаратов из групп нейролептиков, антидепрессантов и транквилизаторов, а также вновь синтезированного адамантансодержащего соединения, обладающего нейротропной активностью:

1. Аминазин (нейролептик) - раствор для инъекций, ампулы 2,5% раствора по 5 мл, Львовлекпрепараты, Украина.

2. Галоперидол (нейролептик) — раствор для инъекций, ампулы 0,5% раствора по 1 мл, Gedeon Richter, Венгрия.

3. Седуксен (транквилизатор) — раствор для инъекций, ампулы 0,5% раствора по 2 мл, Gedeon Richter, Венгрия.

4. Амитриптилин ампулы 1 % раствора по

(антидепрессант) - раствор для инъекций, 2 мл, Slovakofarma, Словакия.

5. Бромантан (психостимулятор). Соединение растворимо в твинс, НИИ Фармакологии РАМН.

Эксперимента выполнены на 200 мышах линии СВА, 1500 мышах гибридах (СВА х C57BL/6J)F1, самках, массой 20-24г, возрастом 2—8 месяца, полученных из питомника "Столбовая".

Учитывая, что влияние фармакологических средств на гуморальный иммунный ответ зависит от совокупности таких факторов, как кратность и время введения относительно иммунизации, различные исходные иммунные состояния, возрастные и генетические особенности организма, нами были использованы 3-х и многократные курсы введения психотропных препаратов в среднетерапевтической дозе 5мг/кг. Препараты вводили до и после антигенной нагрузки мышам разных возрастных групп.

Количество антителообразующих клеток. (АОК) селезенки определяли методом прямого локального гемолиза (Jeme, Nordin, 1963). На 5—е сутки после иммунизации подсчитывали количество АОК на 1 млн. спленоцитов. Исследуемые соединения вводили внутрибрюшинно от 3 до 30 раз с суточным интервалом. Мышей иммунизировали тимус—зависимым антигеном — бараньими эритроцитами — 200 млн. в 0,5 мл физ. р—ра.

Для создания иммунодефицитного состояния мышам вводили иммунодепресивный препарат циклофосфан за сутки до иммунизации, однократно, внутрибрюшинно, в дозе 150 мг/кг (Арцимович Н.Г. и др., 1977) .

Мышей, получивших циклофосфан, в дальнейшем обрабатывали исследуемыми соединениями, которые вводили трижды: сразу после иммунизации и в последующие двое суток.

Функциональную активность клеток, продуцирующих антитела, оценивали на 5 сутки после введения ЭБ методом прямого локального гемолиза, описанным выше.

Индукцию антигенспецифических Т-супрессоров вызывали иммунизацией доноров — мышей линии СВЛ, гипериммунногенной дозой ЭБ (5х109кл.). Через две недели спленоциты (1х107кл.), обогащенные Т-супрессорами, от гипериммунных доноров переносили сингенным реципиентам вместе с 2x108 ЭБ ^Ы$1ег, 8ЮЬо, 1976). Исследуемые соединения вводили десятикратно.

В качестве модели ГЗТ нами был использован стандартный тест оценки изменения веса стопы у мышей, сенсибилизированных эритроцитами барана. Для выявления сенсибилизации на 5 сутки после иммунизации мышам вводили в подушечку задней конечности разрешающую дозу ЭБ — 1х107 кл. в 0,05 мл физ. р—ра. Местную воспалительную реакцию оценивали через 24 часа по разнице веса опытной (Ро) и контрольной лап (Рк) (КИатига, 1980). Индекс реакции (ИР) в % вычисляли по формуле: ИР = [(Ро - Рк) : Рк] х 100 %.

Для определения клеточного иммунитета применяли метод количественной оценки, основанный на сравнении увеличения массы лимфатических узлов, в которых протекает РТПХ с аналогичными им контралатеральными узлами. Мышам гибридам Р1(СВАхС57ВЬ/6) в подушечку правой задней лапы подкожно вводили 1х106 кл. селезенки родительской линии СВА в 0,05 мл физ. р-ра, в левую - такое же количество сингенных клеток. Индекс реакции, отражающий отношение весов "опытного" и "контрольного" узлов, высчитывали для каждого животного отдельно. Исследуемые

соединения вводили или донорам, или реципиентам в зависимости от целей эксперимента.

Миграцию стволовых кроветворных клеток изучали по методике, разработанной Петровым Р.В. и Хаитовым P.M. (1972). Облучение животных проводили в специальных станках аппаратом РУМ-3 при мощности 20,5 р/мин. Напряжение на трубке - 200 вт, сила тока — 15 ма, фокусное расстояние — 40 см, фильтр - 0,5 Си. Мышей фиксировали к плоской поверхности резиновыми зажимами. 1/2 голени задней конечности защищали от облучения свинцовым экраном толщиной 0,5 см, с алюминиевой пластинкой 0,5 мм. Общая доза — 750 р. Количество экзогенных колоний подсчитывали на поверхности селезенки через 8 суток после облучения. Исследуемые соединения вводили четырехкратно, с суточным интервалом, начиная со дня облучения. Результаты выражали в абсолютном количестве КОЕ на каждую селезенку.

В качестве стрессирующего воздействия использовали общепринятый метод иммобилизации мышей в различных вариациях. Необходимый и достаточный для решения конкретных задач эксперимента режим стрессирующего воздействия подбирался в предварительных опытах. При воспроизведении психоэмоционального стресса стрессирующее воздействие заключалось в полужесткой фиксации животных за конечности в положении на спине в течение 3 часов, ежедневно на протяжении 5 дней.

Полученные экспериментальные данные статистически обрабатывали с использованием метода средней арифметической и стандартной ошибки (М±ш) (Плохинский, 1980). Достоверность

различий средних величин в опытных и контрольных группах оценивали по параметрическому критерию Фишера- Стьюдента.

РЕЗУЛЬТАТЫ РАБОТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

В ходе решения поставленных задач был проведен анализ механизма иммунотропного действия четырех широко используемых в клинической практике психотропных препаратов на отдельные этапы иммуногенеза мышей в норме и при вторичном иммунодефиците, а также выявлено действие нового адамантансодержащего соединения бромантана на фоне стресса.

При изучении влияния психотропных средств на интенсивность антителогенеза было выявлено, что трехкратное применение препаратов как до, так и после АГ не влияет на гуморальный иммунитет мышей. Многократное применение психотропных средств в индуктивную фазу вызывает статистически достоверные изменения функциональной активности АОК. При этом нейролептики аминазин и галоперидол наибольшую

иммуносупрессию проявляют при 10—кратном введении.

Транквилизатор реланиум при 10-20-кратном применении приводит к значительному уменьшению количества ^М-образующих клеток селезенки и существенно увеличивает их количество в результате 30—кратного введения. Антидепрессант амитриптилин подавляет гуморальный иммунный ответ мышей только при 30-ти кратной обработке (табл. 1).

Таблица №1 Влияние психотропных препаратов аминазина, галоперидола,

амитриптилина, реланиума в дозе 5 мг/кг на количество АОК селезенки мышей Р, (СВА«С„В1./6)

N9 Группа Схемы введения относительно антигеннного стимула

0, +1, +1 -1,-1.0 - 10, -9...0 -20, -19... • -30. -И...»

п АОК В1 104 сп* п «Ж ы 10* спя п АОК в« 106 спл п АОК на 10* сп п АОК в* 104 сш

1 Контроль 10 119.2 ±12.6 11 164.0 ±29.2 10 163.2 ±14.0 10 159.2 ±21.4 9 136.3 ±11.4.

2 Аминазин 10 104.1 ±13.8 10 142.5 ±21.6 9 81.6 ±14.6** 10 87.3 ±16.1~ 9 155.7 ±17.2.

3 Гаюперидал 10 108.1 ±11.7 9 166.5 ±51.7 10 74.7 ±11.4" 10 115.1 ±15.1" 10 105.3 ±13-6'

4 Амитриптилин 10 95.6 ±13.3 10 128.4 ±21.7 10 133.7 ±21.0 9 146.3 ±25.0 9 76.2

5 Реланиум 10 92.1 ±16.0 10 141.6 ±20.2 10 54.2 ± 8.7" 10 91.6 ±20.0« 10 222.3 ±29.1"

* — р < 0.05 •• — р < 0.01

Таблица №2

Влияние многократного введенния психотропных препаратов аминазина, галоперидола, амитриптилина и реланиума в дозе 5 мг/кг на восстановительные процессы гуморального иммунитета ^СВА*СрВ1./б) после отмены 10-ти кратного курса

№ Группа Дни иммунизации после последней инъекции препарата

0-ой 7-ой 14-ый

п . АОК на 10* спл. п АОК на 10* сп*. п АОК на 10* спя.

1 2 3 4 5 Контроль Аминазин Галоперидал Амитриптилин Реланиум 10 10 10 10 10 163.2 ±14.6. 81.5 ±15.6* 74.7 ±11.2* 133.7 ±21.8 54.2 ± 8.0" 10 9 10 9 10 154.4 ±94 10 1ЛЧЛ +7 0

86.5 ±6.7* 84.5 ±6.3* 80.2 ±22 1218 ±8.3" 10 10 9 10 134.9 ±7.5 15*3 ±7Л 180.0 ±9.2 144.3 ±92

•—р<0.05 ** — р<0.01

Для выявления процесса восстановления антителогенеза мышей после 10—кратного курса применения психотропных средств иммунологические показатели снимались на 0, 7, и 14 сутки (табл. 2).

Через 7 дней после последней инъекции аминазина и галоперидола угнетение антителогенеза сохраняется, о чем свидетельствует 50% снижение количества АОК относительно контрольного уровня.

В группе мышей, получавшей амитриптилин в течение 10 дней на 7 сутки после отмены препарата наблюдается двухкратное снижение количества АОК селезенки по сравнению с контролем, что свидетельствует о возможном пролонгирующем иммунотропном эффекте исследуемого препарата. Оценивая последствия 10-кратного введения реланиума на 7 сутки, выявлено резкое, более чем двухкратное увеличение АОК по сравнению с уровнем исходного дня, ведущего к восстановлению функциональной активности антителогенеза до контрольных показателей.

На 14 сутки во всех опытных группах наблюдается восстановление количества АОК до исходного контрольного уровня.

В развитии гуморального и клеточного иммунитета существенная роль принадлежит супрессорной активности Т-лимфоцитов. Для выяснения роли психотропных препаратов в регуляции функциональной активности ИКК необходимо было выявить влияние исследуемых соединений на реализацию функциональной активности Т-супрессоров. В результате эксперимента было отмечено повышение количества АОК только у животных, получавших реланиум. Исходный уровень АОК, равный

252,2±7,3 на 106 спленоцитов, в результате переноса сингенных Т— супрессоров у контрольных реципиентов снижается до 56,6±1,0. При введении мышам реланиума количество АОК увеличивается до 93,1±12,2. Таким образом, под влиянием реланиума наблюдается снижение супрессорной активности донорских Т—лимфоцитов.

Введение аминазина, галоперидола и амитриптилина мышам, получившим сингенные спленоциты, не оказывает влияния на реализацию эффекторной активности Т—супрессоров.

Оценивая развитие РГЗТ, было выявлено, что все препараты наиболее активно работают при 3-кратном применении до антигенного стимула (табл. 3).

Таблица № 3

Влипни* психотропных шмрарго! аминазин», галоперидола, амитриптилина и реланиума на реакцию гмлерчуасттктельности замедленного типа при многократной обработка мышей Р,(С8А* С,,В1ув) I

№ Группа Доза, кг/кг I Схемы введения

-2,-М •10 -9... -1, 0 -20.-19...1 -1.0 -3«. -2» ...-1,0

п ИД п ид п ИД 1 п ИД

1 Контроль 13 18.86 ±1.0 15 17.4 ±1.4 10 18.18 ±0 5 16.6 ±0.7

2 Аминазин 5 10 11.88 ±0.8" 10 16.2 ±1.3 10 10.21 ±1 6' к 17.8 ±1.8

3 Гамперидол 5 10 24.35 ±1.7* 10 20.6 ±1.7 10 21.76 ±1 1 14.1 ±2.3

4 Амитршитиим 5 15 14.14 ±0.9» 10 200 ±1.3" 10 18.42 ±1 0 ь . 13.3 ±0.8*

4 Реланиум 5 10 25.99 ±2.1* ' 10 22.8 ±1.3" 10 23.98 ±1 Iе 10' 19.7 ±1.6*

Примечание:

Р * 0,05

При этом под влиянием аминазина и амитриптилина происходит угнетение трансформации лимфоцитов, обеспечивающей РГЗТ, что можно объяснить способностью препаратов деполяризовывать мембрану лимфоцитов и угнетать

моноаминоксидазу митохондрий макрофагов (АяЫтига, 1971, Ревивоп, 1978).

Трехкратное применение галоперидола и реланиума по данной схеме вызывает стимуляцию местной воспалительной реакции. Увеличение количества| обработок реланиумом дает стойкий эффект иммуностимуляции Р|ГЗТ, что свидетельствует об усилении

I

трансформации мононуклеарных фагоцитов вследствие активации Т-лимфоцитов к увеличенной продукции медиаторов в результате действия препарата.

Стойкое иммуностимулирующее влияние реланиума при всех схемах введения позволяет выделить данный транквилизатор как препарат, повышающий специфическую реакцию

иммунологического надзора.

При изучении роли психотропных препаратов в решении иммунологического конфликта в РТПХ было отмечено отсутствие их иммунотропного действия в случае обработки реципиентов. Только при 3—кратной обработке доноров снижение ИД реакции было отмечено при применении г1лоперидола и амитриптилина, что, вероятно, можно связать со[ способностью данных соединений стимулировать процессы формирования функциональной активности цитотоксических Т-лимфоцитов.

Одним их важнейших механизмов иммунной защиты является миграция СКК из костного мозга в селезенку. Оценивая действие психотропных средств на процесс миграции колониеобразующих клеток при летальном облучении мышей с экранированием конечности, было выявлено, что 4-кратное введение аминазина и амитриптилина вызывает уменьшение количества КОЕ в селезенке

облученных мышей. Так, если у контрольных животных

на 8 сутки

после облучения в селезенке насчитывается 23,7±5,1 КОЕ, то под действием аминазина и амитриптилина количество колоний снижается до 13,3±1,5 и 14,5±3,1 соответственно. Применение галоперидола и реланиума не влияет на процесс миграции СКК.

При изучении действия фармакологических веществ важная роль в исследованиях отводится моделированию на экспериментальных животных различных патологических состояний. С целью изучения возможности применения психотропных препаратов для коррекции вторичной иммунологической недостаточности нами была использована модельная система искусственного иммунодефицита.

Из полученных данных следует, что применение амитриптилина и реланиума в дозе 5мл/кг вызывает частичную отмену вторичной иммунодепрессии, вызванной действием ЦФ, в среднем вдвое увеличивая количество АОК по сравнению с контролем, в то время, как аминазин и галоперидол не влияют на функциональную активность ^М—образующих клеток селезенки мышей с индуцированным иммунодефицитным состоянием.

Широкое применение нейролептиков, транквилизаторов и антидепрессантов на фоне угнетения иммунных процессов, вызванных воздействием на организм экстремальных факторов, представляет практический интерес для оценки характера иммунотропного действия психотропных лекарственных средств на фоне психоэмоционального стресса.

Экспериментальные данные свидетельствуют о том, что влияние иммобилизационного стресса как на гуморальный, так и на

клеточноопосредованный иммунитет выражается в двухкратной иншбиции иммунного ответа по сравнению с контрольными показателями (табл. 4).

Таблица №4

Влияние психотропных препаратов аминазина, галоперидола, амитриптклииа, роланиума на актотелогенвз и реакцию гиперчувствительности замедленного типа у мышей Р,(СВА«С„ВЬ/6) на фоне иммобилизационного стресса

№ Группа Доза, мг/кг Алтителогенез РГЗТ

п АО К на 10* сил. Р п ид Р

1 Контроль ' — 10 212.7 ±20.0 10 15.8 ±2.0

2 Контроль ** — 10 106.3 ±13.7 <0.05 10 9.1 ±1.3 <0.05

Э Аминазин 5 10 68.3 ± 3.4 <0.05 10 5.8 ±1.5 <0.05

4 Галоперидол 5 10 97.7 ± 9.0 >0.05 10 9.9: ±0.8 >0.05

5 Амитриптияин 5 10 92.5 ± 7.8 >0.05 10 8.8: ±1.0 >0.05

6 Реланиум 5 10 191.4 ± 7.8 <0.05 10 10.8 ±1.3 >0.05 !

Примечание: • — у интактных жиютньа

• * — у стрессированных жиютных Схема обработки -4, -3. -2, -1.0

Несмотря на противострессовое действие, применение психотропных препаратов в постстрессорный период иммуногенеза имеет неоднозначный характер влияния на антителообразование и клеточные реакции.

Отмечено, что применение аминазина на фоне иммобилизационного стресса усиливает ингибирующее действие стрессогенного фактора, что приводит к значительному снижению

уровня антителообразующих клеток селезенки и ингибиццш индекса действия РГЗТ.

Введение реланиума, напротив, почти ¡полностью восстанавливает количество АО К до исходных контрольных показателей и не влияет на РГЗТ, сниженную стрессогенным фактором.

Серия экспериментов была выполнена с целью изучения возможности применения нового психоиммун^регулятора бромантана для коррекции вторичных иммунодефицитных состояний, вызванных действием экстремальных факторов (табл. 5).

Таблица №5

Влияние бромантана на показатели клеточного и гуморального иммунитета мышей на фоне иммобилизационного стресса

РГЗТ РТПХ Антителоге

№ п ид п ид п АО К 106 С1

1 Контроль I 10 22,0± 1,05 9 1,90±0,07 9 183±;

2 Контроль II 10 11,7±0,89 10 1,31±0,04 10 93±8

3 Бромантан 0.+ 1.+2, +3,+4 -4,-3, -2,-1, 0 обработка реципиевта обработка донора -4,-3,-: -1,0

(20 мг/кг) 10 17,4±1,32* 9 2,07±0,07* 10 190±13

10 19,4±1,9* 10 1,83±0,06*

Примечание: Контроль I - у интактных животных;

Контроль II — у стрессированных животных; * — р <, 0,05 относительно Контроля II.

В результате экспериментов было показано стресспротекторное действие бромантана, обнаружена его способность повышать до

контрольного уровня функциональную активность АОК селезенки мышей с вторичным иммунодефицитным состоянием, вызванным психоэмоциональным стрессом.

Выявлено, что 5—кратное применение бромантана в дозе 20 мг/кг на фоне иммобилизационного стресса приводит к восстановлению не только гуморального иммунитета, но и существенно стимулирует стрессиндуцированное снижение клеточного иммунитета. Выявлено, что бромантан препятствует развитию стрессобусловленного иммунодефицитного состояния как в экспериментальной модели ГЗТ, так и РТПХ. Изучение совместного применения бромантана и известных психотропных средств во время стресса подтверждает стойкое иммунопротекторное действие бромантана при стрессе, позволяет использовать его в качестве иммунокорректора.

Из выше сказанного следует, что полученные результаты соответствуют существующей концепции о функциональной взаимосвязи нервной и иммунной систем, а также о роли нервной системы в регуляции иммунного ответа (табл. 6).

Анализ экспериментальных данных свидетельствует о том, что психотропные препараты - аминазин, галоперидол, амитриптилин и реланиум оказывают иммунотропное действие на различные звенья иммунного ответа в норме и в условиях иммунных нарушений.

В связи с этим необходимо учитывать исходное состояние иммунной системы организма при широком использовании психотропных препаратов как в целях лечения неврозов, так и для снятия стресса.

Таблица №6

Влияние психотропных лекарственных средств на отдельные этапы иммуногенеза мышей в норме (1-5) и при вторичных нммунодефицитных состояниях (6-9)

Тест система Схема деления Ами- Галопе- Амнтри- Рела-

№ (исходный иммунологи- Сдай) назин ридол птнлнн ннум

ческий фон)

1 Функциональная 0.+ 1.+2 аЬз аЬз аЬБ аЬБ

активность АОК -2,-1, 0 а!» ЭЬБ а!» аЬБ

селезенки мышей -10,-9.....0 4 4 аЬв 4

Р,(СВАХС57ВЬ/6) —20,—19....0 4 4 аЬя 4

—30,—29....0 а)» 4 1 Т

2 Процессы изменения 0 4 4 ЗЬБ 4

антителогенеза после 7 4 4 4- аЬ$

отмены 10—кратного 14 аЬв а!и аЬв аЬв

применения препаратов

3 Гиперчувствительность -2, -1, 0 4 т 4- Т

замедленного типа 0, +1, +2 4. а!к аЬк т

4 Реакция "трансплантат -2,-1,0 аЬв 4- 1 аЬя

против хозяина" (обработка

донора) !

-2, -1,0 а1« аЬв аЬБ аЬз

(обработка

реципиента)

5 Миграция СК.К в селе-

зенку при летальном 0,+ 1,+2,+3,+4 4- аЬ5 4 аЬз

облучении

6 Регуляция 0, +1, +2 аЬв аЬ5 а!« т

антителогенеза на фоне (обработка

Т—супрессоров реципиента)

7 Вторичный иммуноде- 0, +1, +2 аЬз аЬБ Т г

фицит, вызванный ЦФ

8 Антителообразование

на фоне стресса:

2—месячные животные; -4,-3,-2,-1, 0 4 аЬБ аЬв т

8—месячные животные -4,-3,-2,-1, 0 аЬ5 аЬв аЬБ аЬ.ч

0,+ 1,+2,+3,+4 аЬз аЬя аЬв аЬ$

9 Гиперчувствитсльность

замедленного типа -4,-3,-2,-1,0 4. аЬя аЬз а!«

на фоне стресса

Примечание: 4- — иммуносупрессивное действие;

Т — иммуностимулирующее действие; аЬз — отсутствие действия.

Нейролептики — аминазин и галоперидол проявляют преобладающее иммунодепрессивное действие. Многократное применение этих препаратов ведет к угнетению функциональной активности АОК селезенки мышей.

Трех—пятикратное применение аминазина снижает индекс реакции ГЗТ, ингибирует миграцию СКК в селезенку при летальном облучении, угнетает процесс антителообразования и РГЗТ на фоне стресса.

Антидепрессант амитриптилин проявляет выраженную иммунодепрессивную активность в отношении антителообразования при тридцатикратном введении, а также угнетает клеточноопосредованный иммунитет при трехкратном применении. Под действием амитриптилина снижается миграционная способность СКК. Применение амитриптилина на фоне вторичных иммунодисфункций различной этиологии имеет тенденцию нормализовывать иммунодефицитные состояния, вызванные ЦФ, а также не снижает клеточный и гуморальный иммунитет в моделях психоэмоционального стресса.

Транквилизатор реланиум обладает иммуностимулирующим действием в отношении клеточноопосредованного и гуморального иммунитета. Применение препарата на фоне вторичных иммунодефицитов различной этиологии приводит к восстановлению функциональной активности АОК. Выявлено также выраженное протективное влияние реланиума в отношении супрессии гуморального иммунного ответа, вызванной действием иммобилизационного стресса.

ОСНОВНЫЕ ВЫВОДЫ

1. При сравнительном изучении психотропных препаратов различных групп выявлено, что нейролептики (аминазин и галоперидол), антидепрессант (амитриптилин) и транквилизатор (реланиум) обладают иммунотропной активностью.

2. Длительное применение психотропных препаратов (аминазина, галоперидола, амитриптилина и реланиума) вызывает снижение функциональной активности ^М—образующих клеток селезенки, восстановление которой наступает через 14 дней.

3. Аминазин обладает наиболее выраженными иммунодепрессивными свойствами. Трех и пятидневные курсы введения аминазина вызывают снижение клеточноопосредованного иммунитета. Снижение гуморального иммунитета, наблюдается после 10—20—дневных инъекциц препарата.

4. Галоперидол и амитриптилин проявляют иммунорегуляторную активность. Галоперидол подавляет антителогенез, РТПХ и стимулирует РГЗТ в индуктивную фазу. Применение амитриптилина малыми курсами приводит к снижению клеточного иммунитета и угнетению миграции СКК. Длительное (30-кратное) введение препарата вызывает снижение функциональной активности АОК. В условиях вторичной иммунологической недостаточности амитриптилин вызывает частичную отмену иммунодепрессивного действия циклофосфамида и не влияет на иммунитет стрессированных животных.

5. Реланиум стимулирует РГЗТ, усиливает антителогенез, сниженный циклофосфамидом и антигенспецифическими Т—

супрессорами. Иммунотропное действие реланиума на гуморальный иммунитет зависит от длительности его применения. 10—20—дневные курсы вызывают снижение антителогенеза. Увеличение курса применения до 30 дней вызывает стимуляцию гуморального йНмунного ответа.

6. Впервые выявлено, что реланиум обладает иммунотропной стресспротекторной активностью, усиливает антителогенез мышей на фоне психоэмоционального стресса.

7. Впервые выявлена способность нейроиммунорегулятора бромантана стимулировать клеточноопосредованный иммунитет .мышей, сниженный в результате психоэмоционального стресса.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Психотропные средства, проявляющие иммунотропную активность, следует считать препаратами комбинированного терапевтического действия. Назначение психотропных препаратов необходимо проводить после предварительной оценки исходного уровня показателей иммунной системы с учетом иммунотропности используемых препаратов.

2. При ИСПОЛЬЗО! галоперидол обладает

вании нейролептиков следует учитывать, что менее выраженным иммунодепрессивным действием по сравнен ию с аминазином. Противопоказанием к применению нейролептиков и антидепрессантов является сниженный иммунный статус больных.

3. При применении психотропных препаратов длительными курсами происходит снижение гуморального иммунного ответа, восстановление которого происходит в течении двух недель.

4. Учитывая иммуностимулирующее действие реланиума на фоне вторичного иммунодефицита рекомендуется использовать данный транквилизатор при сниженных показателях клеточноопосредованного и гуморального иммунитета, вызванных повышенной активностью Т-супрессоров.

5. Рекомендуется использовать бромантан для стимуляции клеточноопосредованного и гуморального иммунного ответа в комплексной терапии при заболеваниях, связанных с дисбалансом нейроиммунных показателей, и для повышения функциональной активности ИКК, сниженной иммунодепрессивным действием психотропных средств.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Изучение влияния некоторых психотропных препаратов на показатели клеточного иммунитета. I Республ. съезд: Аллергология и иммунология. Баку, 1992, С. 77-78 (соавт. Арцимсвич Н.Г., Галушина Т.С., Фадеева Т.А.)

2. Иммунотропная активность новых неййоиммуно-модуляторов. Мат. симп. с межд. участием: "Текущие проблемы клинической и экспериментальной психонейроиммунологии". Томск, 1992, С. 149-151 (соавт. Галушина Т.С., Фадеева Т.А., Морозов И.С., Арцимович Н.Г.).

3. Иммуностимулирующее средство "Бромантан". Патент СССР №1826906. Бюл. №25. Открытия. Изобретения. 1992. 10 с. (соавт. Морозов И.С.} Арцимович Н.Г., Галушина Т..С., Фадеева Т.А., Климова Н.В., Пятин Б.М., Зайцева Н.М., Середенин С.Б., Любимов Б.И., Авдюшина Н.И., Кисляк Н.А., Иванова И.А.).

4. Adamantan derivated neuroimmunomodulators. 8—th Int. Conf. of Immunol. Hungary, Budapest, 1992, v. 112, p. 700 (coaBT.Galushina T.S., Fadeeva T.S., Morozov I.S., Artsimovich N.G.).

5. Изучение влияния длительности применения психотропных препаратов на РГЗТ. Тез. I Всерос. съезда иммунологов. Новосибирск. 1992, С. 24-25.

6. Новые подходы к иммунокоррекции с помощью новых психотропных средств. Тез. II съезда иммунологов и аллергологов Белоруссии. Гродно. 1995, С. 15 (соавт. Галушина Т.С., Арцимович Н.Г.).

7. Immune effects of well known and some new neurotic drugs. Int. Conf. " Neuroimmufie interactions and Enviroment". St. Petersbuig. 1995, p. 24 (соавт. Galushina T.S., Fadeeva T.A., Artsimovich N.G.)

8. 4-оксагомоадамантан - 1-олт5-он, используемый n качестве иммуностимулирующего средства. Положительное решение о выдаче патента по заявке 93015030/14.

( соавт. Петров Р.В., Арцимович Н.Г., Багрий Е.И., Фадеева Т.А., Галушина Т.С., Аккерман С.Б.)