Автореферат и диссертация по медицине (14.00.16) на тему:Функционально-морфологические изменения в семенниках в условиях местной гипоксии

1 >

о -J '

ШШСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РС5СР Челябинский медицинский инсткгут

IÏOTS.Î1HA ТАТЬЯНА ЕЗШЪЗВРЛ

ШКШОНАЛШО - МОРЗСШОГГИЕСКИЕ ЯЗГ.ЕЕЕШИ Б СВЯЕЕЕИШ В УСЛОЕШ МЕСТНОЙ ГИПОКСИИ

14.00.16 - патологическая йизлологяя

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой стелеот кандидата медицинских наук

На правах рукописи

Челябинск - 1992

Работа выполнена в Еикетородскон медицинском институте

им. С ЛД. Кирова

Научные руководители -Доктор медицинских наук, профессор Д.Й.Ркяаков; Кандидат медицинских наук, ассистент С.Б.Арти^ексов.

Официальные оппоненты -Доктор медицинских наук, профессор Ю.Н.КоЕалев; Доктор медицинских наук, профессор В.П.Низовцев.

Ведущая организация - Университет Дружбы народов им. Патриса Луыуыбы

Защита состоится "_"_ 1992 г.

в часов на заселения специализированного Совета К.084.04.03 Челябинского медицинского института

Адрес: 454092, Челябинск, уд. Воровского д.64. С диссертацией давно ознакомиться б библиотеке института.

Автореферат разослан "_"__ 1992 года

Учений секретарь специализированного Совета гащикаг недшансвнх наук

Л.В.Кривохшшна

к ■ й £

.... -гад]' ^НЗАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

х^р^ддуяльяоеть текы. Проблема мужского Оесплодия приобретает г астоящее время особуи медицинскую и социальную значимость.Удел*--ый вес бесплодных браков достает 15 £.прячем половина из вех бусловлена ия^ертильностью мукчин.Одной нз причин спипэеия кук-ко* плодовитости являются сосудистне нарушения в полозов сг>ере.

Относительно часто встречаемой патологией у мукчгк молодого юэраста является хроническое затруднение венозного оттока от :ементпгов, сопровождающееся варикозным расширением вен семенного аватика (варикоцеле).

Варикоцеле встречается у 8-2С$ молодых муетин и у 8 - 12 £ мазчиков 10 - 15 лет (Райто, 1949; е4 о£.г 1Ш; £аиро£, :981;СссШ1&1оС)Ш4; йгааков Ю.Д.;198?;АртМексов С.Б..Рыбаков 3Д., 1989).Среда мужчин,состоящих в бесплодно;.; браке,эта патология зетречается в 40$ случаев @ёг/кшс1о еУо^1976;Арти?ексоа С.Б.,Рыжков Ю.Д. ,2389).Но связь меяд7 ухудшением! венозного оттока от головых келез и нарушением сперматогенеза и точные механизмы этих изменений остаются до конца невыясненными (Тиаяе'г, 1983; ¿Ь -&//е/а£1984;Тиктинский 0.1. с соавт.,1990).

В последнее время наиболее вероятной считается гшкжскческая геория лозрездения процессов созревания гамет яри варнкопела.

Неполная ясность в вопросах механизмов нарушения ферткльности з условиях венозного застоя отчасти объясняется трудностями после--цовавая морфо-йушщионального состояния семенников в клинике, £ ганке сложность® создания адекватной модели варякоделе на лпбора-горных нивотннх.Не случайно название одного та последних литературных обзоров по этой теме звучит:"Варикоцеле - все еие загадка." (Тигпег-, 1983). '■ •

' Для объективного изучения сперматогенеза в условиях венозного застоя в яичках в нашей лаборатории была разработана экспериментальная-модель варикоцеле на самцах белых нрнс£Артифексов С.Б., Иогжухин В.Б. ,1983).До недавнего времени процессы созревания мужских гамет изучались на гистологических препаратах семенников. ЕСандый срез представляет собой определенную, ассодигзш клетол еле риатогеиного эпителия и поддерживающих клеток Сертоли и ограпэет только одну конкретную стадии гаметогенсза. Оценка как процесса в целом,гак и состояния отдельных клеток на гистологических препаратах крайне затруднительна.

Для общей количественной характеристики гаметогеяеза с анализом

его продуктивности необходимо использовать цитологические методы исследования семенников.Боличествеевый подход позволит уточнить некоторые стороны ян^ергальноста при варикоцеле.выявив и наиболее-уязвимые клетки,к изменение числа сустевтоцитов и эндокривоцитов, влпядзев ва интегокваость сперматогенеза.

Для подтверздения гкпоксической теории нарушения созревания гамет 2 в качестве показателя уровня функционирования клеток слерштоген-кого эпителия необходимо исследовать активность .фрмантагивных систем яичек. Феркеятазявяая активность считается однш из самых объективных критериев состояния обменных процессов,но в семенниках с варикоцеле практически аз изучена.

Таким образом, вопрос ияфертильности при затрудненном венозном оттоке от семенников.несмотря на большое количество работ,до сих пор яе разрешен и требует дополнительного изучения.

Цель и задачи последоаания . Провести комплексное:- экспериментальное ЕсследоЕаяиэ.^'Нкдяснально-глорсгологического состояния семенников при венозном застое,включающее цитологическую оценку про* лунтивнсстя сперматогенеза крзученае активности основных окислз-тельпо-Еосстановительных Ферментов ткана яичек.

Били поставлены следующие задачи:

1)разработать кетодику приготовления шзков гомогенатов тканей семенников для цитологического анализа;

2)на экспериментальной модели варикоцеле изучить изменения сперматогенеза с колетеотвепной точки зрения с оценкой его продуктивности в различные сроки после формирования вевазвого застоя;

3)яа зксперкмеитад! :ой модели варикоцеле изучить активность ферментов ЛДГДЩР.ЩГ.СЖГ.НАДНДГ биохимическими и гистохимическими кетодаглх;

4)сопоставить цитологические и метаболические сдвиги в сеыенни-' ках в условиях кислородного голодания.

Новизна проведениях исследований :

В работа Бперзые: -попользован орстияагьныЗ метод приготовления мазков гомогенатов тпанс;: семенников (приоритетная справка й 4939385/14) для цитологического анализа сперматогенеза;

- прозедекс количественное изучение процессов созревания мужских гг-чет с оценка; их продуктивности при варикоцеле;

-воздето резкое ешгаегае клетичаостп в яичках .превде всего заснет зрел:2С ссрц - снеоматцд а сперматозоидов;

- п^.-ггл зог.'пзнсаторная реакция со стороны стводозых клеток -

СЕср^зУогошй,закхзчаа^алоя в уволотсшя! та: .чясза.особсшк» п и^г ваг: сс;.'.спц:же в рашиз срока

-ваязлецз звачиуслыгое уг.звьнзшга тлела кззгоя Сорго;.:: :: э^о-г.с-иэцг.гоз.чго в дсльео-'-шс-гл ухудсаст поглзател:: слзрга'.'зггпоса; -устаиов.".з!:о,чтэ членская возюааэт как в ¿ззо:.:,сак и а иразз:.-, псрв'-лко пспэпрог.-деипэ:,; л:?с;о;

- :'cvaî:0B::ci:a,4T0 жсракуср аеуессяя: Горкевятгя»;: cir.'jxnocr:: со-i.;8!i!i:;i:oa лэдгагрэдазг развитие в п..:; ц-ркуляторззЛ

Тзорагласкоз пгдк"'-~чсо"оо 3i?c':oi::;o paCoga. Получ;-:::: кох:о дашшз о Гуг.г.1с.;о;:;и1Ь;Гэ:.\ состоши::: сс:.:-зшп'-:эв при взсозао:: заегоз. Вскри?а пакогорие доздсгши ил"ар'лгльаосга прг кгр:шо!гз::о.Пэ.-гвзр-i/дока роль цпр«у..-л70снзГ: г::ио:;с,::: в остоганззо варуазк..-:-; сгс-гга-тогзпзза пр:: данной а Еам.таг:Е1.ф:?ояог:пссг;х": аиа:а:з га^сгогопсса с ода1п;оП его продугскшизсга ахг-уаиэц д;хя даагкэстаю: г;у,::с1:сгз ¿осолодел в урояокпюскоЛ проглчзгз.хз консучь^ащггс "Гг..ic :i сгнья". Bosi.ozno его прешшяглз з ::зучешг вдался ироГесслсиЕг;:»!::;:-: вредио-стоД на созревание ivjxcxvî га^сУ.йгопсля сс:.;ош;люз с аоолечт^а цлголог:i43c:::i'j авзжгзом УкакэЛ и '¿оу-:сгл:сп сктцтюо'л: позволит ооьедагшэ дрэгь'оз.'грога'.'ь ояерзухяйгефз ::с-

ЧЗЕ1Я.

Оснзшас полог»:?:!Ягкотср':о шносятея на запишу.

1. Из.иснзяги аккшности ок:с.,пг-,г.1ько-восо1'анзв",*,с.1ь»2с:

• в се^епппках з условиях загруднэшюгэ воеооюто .пока

ададтсЕпуу рсагода сссзишаюв в otsoî ira раззэт::® гшюкслз.

2, Сакеказ вкгашосгн икшезэтэ дахаши уетзшзао? га газвл-гт. вгорпчко". пкшевей кшскгсхлт.

3.Гцповсш является ведугдо зв-зног- вагогепеза карулс-клл рзкроду-кишной «-уккфгг при варикоцочс,виз:>2зя кетлеезво^г^з œ/enanv: со crcpoûH еяеекатогокиого эявгодпя.а шиш у..:окт,~ош:г числа вссх яопултв*"; зародышевого згштелпя.

4. Гипоксия вызывает а сккЕгшю вазотсегва клотэп Сг$та21::,осесл>-чшшерх тташе спсрлатогениого зш:г.злш а рег/.гсг.'5 спзр:.::.-

тогеяеза, что ведет s дальнейшему нарушению процессов созревания гамет.

5. Нарушения сперматогенеза при затрудненном венозной оттоке зависят и от снижения та ела клеток Дейдига, осуществяяэ-¡зда; гормональную регуляцию, процессов гистогенеза.

Апробация работа. Материалы диссертации долохенн на научной конференции молодых ученых Волго-Вятского региона (Горький, 1988); Еаучной конференции иолоднх учеши г.Горького, посвящеа-aoîl 70-летив ГШ га. С.М.Кирова (Горышй, 1990); на заседают проблемно-плановой комиссии "Регенерация, адаптация, гомеостаз" Mi №. С.'Л.йировэ (1989, 1991); на заседания областного научного общества патофизиологов (Горький, 1968, IS92).

Публикации. Во теме диссертации опубликовано 4 статьи, получено 2 диплома участника Горькоэской областной выставки НТО, получена приоритетная справка на I изобретение.

Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, 3 глав, заключения, выводов а указателя литературн, включающего 194 источника, та которых 126 русских и 68 иностранных. Работы изложена на 120 страницах машинописи, иллюстрирована 14 таблицами, 8 графиками и фотогра^шш.

. СОДЕРЖАЩЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследовавши Исследование проведено на 300-х беспородннх половозрелых садах белых крыс массой 180250 г. в возрасте от 4 месяцев до I года.

У 220 самцов крнс, составляющих опытную группу, моделировалось левостороннее варикоцеле путем дозированного сукекия (перевязки) внутренней семенниковой вены у места её впадения в об-иуэ подвздошную вену. Еа основании сравнительной оценки. изменений, развивающихся в репродуктивной системе подопытных эявоткых s у большое варикоцеле, доказана адекватность экспериментальной модели клиническому варианту варикоцеле (Моазухин В.Б., 1986; Рыганов В.Д., IS87).

Для получения коЕтро.— нщ. показателей исследовалось 80 интакт-анх сайщив крас. Эякулят у гивотшх получали методой стимулирования сеьдазвергенин 2%-вт раствором окситоцина, вводимым вну-гпибрвЕинво 3 дозе 0,2-0,3 ил (Рнгаков Д.И. с соавт., 1984). Полученный эякулят разводили в 2 ал среда S 199 црж Т=37°С.

Определялось количество сперматозоидов в эякуляте и их ясдшг-ность с использованием каперы ГоряеЕа. Подсчитнвалось а количество сперматозоидов в гомогевагах семенников. В гомогенат добавлялся раствор Хенкса, подсчет велся в камере Горяеэа. 1."ор.;'о-логическке изменения в семенниках гавотянх изучались с использованием цитологического (количественного) метода оцепкп состояния сперматогенеза на окрашенных пазках гокогепатов тканей половых келоз. Мазки готовились по разработанной наш «етодике с применением специфических добавок: сшзоротка 1У гр, крови и от-штых эритроцитов 1У гр. крови. Для каждого животного составлялась спермагограмма - процентное соотношение клеток различных генераций зародиаевого эпителия, а такие клеток Сертолл и клеток ЛеЗдига. Для изучения энергетики семенников в условиях венозного застоя исследовались изменения активности ферментов цикла Кребса, терминального окисления и гликолиза -;ак биохшли-ческяшт, так ж гистохимическими методами. Наследовалось ' - количество общего белка в семенниках крнс с затрудненным векозки оттоком. Все цифровые данные обрабатывались методом зариациоя-ной статистики.

Результаты исследований. Известно, что исследование эякулята является наиболее информатизнш методом оценки .мугскс;; фертильпости (Молиар Е., 1986; Хадсоя, 1983). Для половых клеток самцов крас характерны высокая подвижность и кизнеслособ-ность параллельно высокой их концентрата! в эякуляте. Общее кс-■ личество сперматозоидов в эякуляте контрольных кивотных составляет 11,6+ 1,1 шгн клеток при 84,8+0,8% шгзяеетособках фора. Уке через 2 неделя после создания венозного застоя в левой половой железе количество гамет в семенной жидкости достоверно уменьшалось до 8,4+0,6 мая клеток при 65+2,подвикннх фор;-.;. На 30-е ентки юрфо-функцяояальные показатели эякулята продолжали ухудшаться, и количество сперматозоидов составляло всего 3,6+0,4 млн, из которых подвикиых наблюдалось 43,5+7,1;". В последующие сроки эксперимента показатели спермограгл достоверно отличались от контрольных показателей. Число сперматозоидов да 120-е сутки было 2,88+0,41 млн. • Подобные изменения количества сперштозоидов выявлялись а другими авторами при действии на организм экстремальных факторов, например, гипотермии (Арткфексов С.Б., 1981; Прохорова A.A., 1982), а гакке аналогичные сдв слерлатограшах наблюди-

лись у больных с варикоцела (Катав С.А., 1959; Рнжаков Ю.Д., 1987 и др.).

Ташл образом, сопоставление спермограш крыс с нарушенным ве-вознш оттоком от левой пологой келезы и спершграш контрольных еивотвых позволяет утверждать, что подобные изменения кровообращения сопровождаются прогрессивны:.? ухудеешгеи иорхофункциональных характеристик гамет.

Кроме исследования клеток эякулята, каш производился подсчет сперматозоидов непосредственно в семенниках. Количество слер^ шев в сеыеяниках интактннх вивотннх составило 67720-1-2723 клетки на I иг вяааной ткани. Абсолютное количество сперматозоидов в келезе составило 98532600+1818 клеток.

Через 2 недели количество сперматозоидов резко снизилось я составило в левом яичке 2938&Л468 клеток аа мг ткани, в правом -53252+893. Общее количество еиершев в семенниках такие достоверно уменьшалось. Впло.ь до конца эксперимента уменьшение количества спэрмаг'озоидов в обоих семанняках прогрессировало, преимущественно в левой половой железе.

Цитологическое исследование гомотенатов тканей семенников гквотных о разнявшимся венозным застоем в половых железах вня-рало количественные нарушения в процессе сперматогенеза практически во все сроки эксперимента»

Црд световой кикроскошш окрашенного мазка клеточного гомогена-та янчка вдеетафицировались слэдуядае метки зародышевого эпп-телия:

- стволоше гслетки - сперматогошш;

- клетки ыейоза - спорматоцктн;

- сцертатвды ранги е (круглые);

- спермагады поздние;

- сперглгозоидн.

Подсчктквалосъ такке количество клеток Сертоли (сустентоцитов) е глетов Лзйдига (эндокриноцитов).. Кроме еяерматограшы (процентного соотношения всех клеток гаыетогенеза между собой), определялось г абсолютное - число клеток каздой популяции, а тзкг.е клеток Сертоли к Клеток Лейдяга.

У крас опытной группы уте через 2 надели после начала эксперимента бито установлено достоверное уменьшение количества зрелых дота счеалатсгеняого эпителия - ранних и поздних сперыатзд ж спешстоэоадов. Патологические изменения касались как левого

семенника, гак к правого - первично кеповрездекного. Снижение доли этих клеток в епегштограше сопровождалось :: уненьсенкек их абсолютного количества, и в левой,и в правой келезе. Бгс? ::.е врегл произошло достоверное увеличение числа наиболее юти; «ср;« сперматогенного эпителия - спериатогояил. В левом севсгвихе насчитывалось 77321250+3567 стволовых клеток, в право:.: -149922710+3989. 7 иэтавтшх заветных количество слерглатогока практически одинаково в обоих яичках и составляло 65246565^ 3461. Подобные изменения количества сгволових клеток, вероятно, носят защитко-прнспособителышй характер и могут рассматриваться как "ответ" на развитие в органе циркулярной гипоксии. Таким образом, упе через 2 недели патологические изменения затрагивают оба семенника. Вовлечение в патологический процесс правого яичка, по-видимому, объясняется содружественным характером вазомоторных реакций в парных органах (Есипот И.К., 1976).

Через месяц после создания венозного застоя по системе левой внутренней семенниковой веки ша. баю ошечепо дальнейшее ухудшение количественных показателей сперматогенеза. Число зрелых форм сперматогенного эпителия еще больше снизилось. Сперматозоиды составили в левом семеннике 16,3+0,852, в правой - 15,5+1,1, тогда как у контрольных ннвотннх эта цифра б;ма 19,3+0,9$. АбсолкЗюе их количество в обоих яичках тажне было достоверно вике ворш. Доля ранних округлых спермагнд в левой железе составила 16,3+0,452, в правой - 20,2+1,5$ но сравнения с контрольными показателями - 26,3+0,9$. Поздние слериатздк составили 8,2+0,9$ от клеточности левого яичка и 3,7+0,9$ от клеточности правого (17,5+15? - в норме). Абсолютные количества и ранних, и поздних сперматид били такие достоверно ките контрольных показателей.

Кроме клеток спермиогевеза, че^ез месяц в патологический процесс были вовлечены и клетки кейоза - сперматоциты. Их код;гчество достоверно снизилось в правом яичке до 2268-1000+1112 клеток (11,2+1% от общей клеточности органа), в левой яичке до 16498500+1.742 клеток (12,9+1,9£ от общей клеточности). У инта-ктяих етвотних эти цифры составили 83?50160+/35;2;', Таким образом, через месяц после создания венозного застоя в левой половой г.елезе повреждается ключевой процесс сЕериатоге-неза - мейоз, что, несомненно, ведет к замедления созревания и

- е -

выхода гаг.;ет из семенника.

На 60-е сутки после начала эксперимента насяду с прогрессирующие сяикениеп количества сперматозоидов, сперттид и спермато-цптов отмечается п уменьшение числа стволовых клеток в левой семеннике. В празой половой Еелезе в этот момент таказ отмечается снижение абсолютного количества всех клеток сперматогенно-го эпителия почти вдвое. По данним преднрдазх гистологических исследований ткане'2 семенников при нарушенном венозной оттоке деструктивные изменения в правом яичке на светооптячсском уровне определялись линь на 90-е сутки с начала эксперимента, т.е. цитологическая методика позволила выявить патологические сдвиги в более ракете сроки.

Через 3 месяца после нарушения венозного оттока процессы созревания гамет е^с более углубились, резко снизилось число сперг.;а~ тогокяй и в праьом семеннике, что, по-видимому, свидетельствует об потоамш компенсаторных возшквосгей органа. На 120-е сутки в обоих яичках макроскопически наблюдались явные признаки склерозирования, ткани при разрезе крошились. На протяжении всего эксперимента, отмечалось прогрессируете скиЕсние ыасси обеих половых келез и к концу четвертого месяца ■ касса правого силе ¡пика била 743+6 от, левого - 564+11 мг ко . сревкошт с контрольны.® цифра!.® - 1455+5 мг. Крс;,:е клеток ссерматогевного эпителий, наш анализировалось ко-лотество клетм; Сертоли и клеток ЛеЯдкга в условиях нарастаэщеи цкркуляторной гипоксии.

Клетки Сертоли - сустентоцити - участвует как в питании зародп-певого эпителия, т?..: и в регуляции процессов гаштогенеза (Района С.С., 19с4). Некоторые авторы (Иванов Ю.В., 1984,1586) считаат клетки Сертоли наиболее устойчивыми по сравнению с дру-ка::; клеткаки сег/.енкикаьш.Наш исследования показали нрогресси-рукцеэ снижение количества сустентоцитов, начиная с 25 суток после карусския венозного оттока, причем практически одинаковое и слева,к справа.

Основной функцией клеток Сертоли является метаболическое обеспечение процессов гаметогенеза, что требует високих энергетичес-затрат. Поэтому сустецгоцкты становятся уязвшнаи при нарушении кровообращения в гелезах - в условиях метаболического и энергетического кризиса. Уменьшение колнчесгва клеток Сертоли приводит к дальнему ухудиевив созревания гаиех в семенниках,

т. s. сюкглстся интенсивность их обнепшп процессов. В цитологи îecKirc исследованиях семенников з условиях циркудя-торно:"; гипоксии наш оценивалось и количество эядокраяоцктов -клеток Лейднга, секретирувядх мулекпе половые гормону. По мере увеличения продояЕительнссти нарушения; венозного оттока от левого семенника сшгаается как доля клеток ЛеДдпга в общей сперматогранме, так и m: абсолютное количество и з левом, и з правом яичках.

Так.'ш образом, затруднение венозного оттока от левой половой ~едезы приводит к резкому угнетению процессов сперматогенеза, причем вначале страдают наиболее дш^даренцдроваяяие тарш спер-•латогенного' эпителия: сперматозоиды и слернатздн. На ранних этапах патологического процесса в обеих железах, но препг-туцост-генпо в правой, "вклзчается" зазштно-кошенсаторный механизм, заключающийся в повшгении штотдческой активности и увеличении количества стволовых клеток - сперматоготш. По мере нарастания застойных явлеяиЗ снижается число сяерматодлтов, а к концу 2-го месяца уменьшается и количество сперматогоний, больше слева. К 120-м суткац наблюдаются явные признаки склерозирования обеих деловых желез с достоверным снижением их кассы. Параллельно прогрессированшз застоя и глпоксяческих явлений утзенывается количество клеток Сертоли а клеток Лейдига я в правом, и з левой семеннике, что еще более усугубляет патологические сдвиги сперматогенеза.

Гаыетогенез - сяокннй эяергозавясимый процесс, поэтому любые изменения энергообеспечения тканей вызывают глубокие сдвиги в процессе созревания половых клеток.

Так как одной из ведущих теорий патогенеза субфертильности при варцкоцеле является представление об развивающейся в нелезах одркуляторной гипоксии (Равявк Л., 1984; TazneZ , 1983; ¡Лопухин В.Б., 1986; Рюпаков Ю.£., 1987), ш считали целесообразна.! изучить изменение активности некоторых ферментных систем в тканях семенников с нг?руиением венозного оттока. Исходно з^тспилось, что тианн половых гелез характеризуется, достаточно высокой активностью фермента гликолиза - дактатдэгидрогепззк, насяду с низкой активностью фермента цикла Яребса - шлатдегзгдрогэ-назы.

Через 15 дне?* после создания венозного застоя наблюдалось резкое повышение активности лактатдегидроге-назн до 16,ЭХ-2,55 3/г

ткани в левом семеннике и до 12,925+0,36 £/г ткапи в нравом (по сравнении с контролем - 3,5S+0,3 Е/г гкакн). Шюгпе исследователи связывают подобную активность гликолити-чсских процессов с наступлением так называемого периода гипер-ь.ушодик системы в ответ ка кислородное голодание и недостаток глакрозргов (¡Лейерсон Я.З,, 1973). Большинство авторов считает подобное ловиланне активности ЛДГ одним из ваккеПык.-; механизмов длительной адаптации к гипоксии (Езрбапова З.Н., 1370; Ку^щия E.H., IS78).

Похлллзнпс активности ЛД1 в семенниках через 2 недели после •нарушения венозного оттока от левой половой селезн выявлялось и при. использования гистохимических методик. Ка всех препаратах отмечалось дийТузкое увеличение активности ЛДГ: в клетках слер-иатогеиного эпктелкя в пределах Г балла, в иятерсгицни и особенно в местах локализации клеток ЛеГздига - в пределах 2 баллов. Б исследуемы.! срок имелось и некоторое повышение активности сТ.еркента цикла Крзбса - ЦЕГ, что отражало напрякеяке процессов аэробиоза, водящее адаптивная характер и направленное на компенсацию развивающегося в семенниках дефицита энергетических ре-курсов, В далькейпем в ходе эксперимента активность как ДЕГ, так и ЦДГ, ДДГ, СДГ, НА1Ш-ДГ постепенно сшвалась. Так, активность лактатдегкдрогеназы к 30-м суткам составляла только половину таковой на 15-е сутки, хотя при этой и достоверно превышала контрольные показатели. Активность ке №Г на ЗО-е сутки достоверно пике контрольных цифр как. в левом, тик к в правом семенниках.

Возможно провести следующую параллель: именно к 30-и суткаы в семенника? резко ■ умекьшалось число не только зрелых клеток -сперматид и.'сперматозоидов, но и клеток мейоза - сперматоцитов, нарушение мейоткческой активности, по~зидимоку, связано с все более углубляющимся сдвигом в системе энергообеспечения гамето-генеза в результате развившейся циркуляторяой гидоксии. В более поздние сроки происходило дальнейшее снижение активности; как оккслигелько-воссгавовйтальннх, так и глннолитичесхого ферментов. Активность ДПГ к 120-м суткам составила всего 2,446+0,341 Е/г ткани. Активность МДГ в этот срок и в правом, и в левом семенниках била также гаше контрольных цифр практически в 4 раза. Активность ферментов, определяеь'^^мстозаши-ческп, резко свивалась к 60-м суткамЛдГТ ПДГ, СДГ, "НАДЕТ )-

В своих исследованиях мы ставили перед собой цель выяснить, имеются ли колебания количества общего белка в мужских половых железах при нарушении венозного оттока от них, Бо мере нарастакая венозного застоя в ортанах мужской репродуктивной системы в обеих келезах увеличивалось количество общего белка. Через 2 недели после начала эксперимента количество общего белка в правом семеннике било равко 37,83+1,96 мг/мл влажной ткани, в лезом семеннике - 48,94+1,83 иг/мл влаяной ткани (по срагнешго с контрольными показателя!/,и - 27,27+1,88 мг/мл влажной ткани). Исследуемый показатель в обоих яичках оставался достоверно внше нормы вплоть до конца эксперимента - до 120 суток - и обставлял к этому сроку в правой яедезе - 48,82+0,81 мг/мл влажной ткани, в левой - 47,92+1,51 мг/мл влакной ткани. Подобные изменения количества обпего белка в семенниках при венозном застое мокно сатаать с развивающимся в них отеком и с нарушением оттока от них крови и метаболитов. В условиях венозного застоя увеличиваетсяфоницаемость сосудистой системы, что ведет к образования транссудата и выходу из сосудистого русхт! в квтерстиций мелкодисперс. ных белков. Накоплению отечной жидкости- и, соответственно, увеличении содержания в органе белка способствует такие и продолждтельносзь нарушения венозного оттока. В наших исследованиях количество общего белка нарастает параллельно увеличению срока венозного застоя в половых железах.

Суммируя цитологические и метаболические изменения в семенниках э условиях нарушенного венозного оттокаможно представить следующую картину морфо-сТункционального состояния мукских половых кеяеэ.

Через 2 недели после начала■эксперимента наблюдались ярко выраженные метаболические сдвиги в обоих семенниках, но преимущественно в левом. Отмечался достоверный рост активности фермента гликолиза - 1ДГ - в обеих железах и достоверное повышение активности некоторых окислительно-восстановительных ферментов - ВДГ и ВАДОр в левом яичке.

Прирост активности этих ферментов в ответ на гипоксии в органах муаской репродуктивной системы рассматривается как компее-саторные механизмы, механизмы адаптации, направленные на поддержание адекватного Функционирования органа в изменению-ловиях. В результате подобных обменных сдвигов дрсисгодит аз-

меаевке в процессе сперматогенеза. В ответ на кислородное голодание сгрэдаэт наиболее слокноорганкэованнце клетки - спер-могозохады и спермогидк.

Отмечалось к достоверное угюньсение абсолютного количества клеток Сертолп , обеспечивающих обменше процесса созревающих гаг-лет и участвующих в регуляции сперматогенеза. Изменение числа еустектоцптов в условиях метаболических перестроек при гипо-ксическом повреждении сег.;еншп;оа кокно такке связать с высокими потребностями этих клеток в энергии. Нарушение уункщЛ клеток Сертолп, снижение их количества, приводит к ещё большим нарушениями в процессе созревания половых клеток. В лселедуемет срок (15 дней) пострадали вследствие обменных нарушений и энергозавлсямае клетки Лзйднга, что такке привело к угдублению патологических изменений в гаметогенезе. В дальнейшем сиияешге интенсивности энергетического обеспечения процессов созревания зародшечого эпителия приводит к постепенному сншг.гкшз клеточностп в семеннике. Через месяц после создания венозного застоя к нарушениям спермиогенеза присоеди-яяется патология вейоза - уменьшается число сперматоцятов. о К концу 2-го и началу 3-его месяца в семеннике наблюдается угнетение всех обменных процессов - к гликолиткческих, и окислительных. Отмечены признаки склерозирования в о^акх половых ке~ лезах. Именно в этот срок резко снижается колгчество стволовых клеток гаметогенеза - сиерди того нал, что является прогностически неблагоприятным цразаакои.

Таким образом, яаблвдается четкая коррелшая мевду метаболическими сдвигами в семенниках при нарушении венозного оттока от половых желез и цитологическими изменениями сперматогенеза. Наличке подобней связи является ещё одним подтнградением пшок-си-.еско£ теории нарушения фертильности при формировании еэноз-ного застоя в органах мужской репродуктивной си о теш.

Изменяли возникают как в левом семеннике,так и в первично веповрееденяон правом.

выводы

1. В основе патогенеза нарушений фертильности з условиях затрудненного венозного оттока от семенников летаг царкулятор-вая гипоксия, о чем свидетельствует достоверное изменение активности как окислительных, так п глинолитических ферментов в тканях яичек.

Снижение интенсивности тканевого дыхания указывает ка присоединение вторичной тканевой гидоскии.

2. Параллельно метаболическим сдвигам в семенниках определяются патологические изменения в сперматогенезе, заключающиеся в снижении количества клеток слерматогеяного эпителия по мере нарастания явлений венозного застоя.

На ранних этапах развития патологического процесса наиболее уязвимши является зрелае формы зародышевого эпителия -слерматида и сперматозоиды. В дальнейшем уменьшается количество клеток иейоза - сперг.'лто^ггг^г»,

3. На ранних стадиях нарушения венозного оттока от левого яичка наблюдается значительное увеличение количества стволовых клеток - еперматогошй, лреголущз^ТЕЧнпо в неповрежденном семеннике, что является Еомаенса?о$по1 реакцией аа повреждение процессов гаметогеиеза а уменьшение числа зрелых Форм сперштогенного эпителия. В дальнейшей количество спермато-гонин достоверно снижается.. '

4. В ходе исследования в обоих семенниках выявлено уменьшение числа клеток Сертоли, обеспечивающих питание созревающих гамет и участвующих в регуляции сперматогенеза, что влечет за собой дальнейшее ухудшение состояния процессов созревания половых клеток в зелезах. Наблюдается и снижение количества клеток Дейдига - звдогрпноцитоэ, сиитезирунцих половые гормоны - цо мере нарастания застойют явлений в семенниках, что ведет к нарушении регуляции "сперматогенеза и ухудшение его показателей.

5. При затруднении венозного оттока от одного яичка нарушение функций выявляется с обеих сторон, но степень зыразенности и сроки развития этих явлений преобладай!-ка стороне повреждения.

Развитие патологического процесса в ивтакткой гедезе является проявлением содружественной вазомоторной реакцией в

парных органах. 6. В результате длительного кислородного голодания тканей семенников при нарушенном кровообращении в mix развивается склерозирование паренхимы »:елезы, что ведет к дальнейшему ухудшению процессов сперматогенеза.

Список опубликованных работ по теме диссертации

1. Потешна Т.Е. Енахшкчесяие аспекты сперматогенеза при варшгоцеле // Сб. научя. трудов колодых учевдх Волго-Вятского региона - г. Горький, 1988. - С. 55.

2. Потешна Т.Е., Арти<|ексов С.Е. Цитохимические особено-CTii сперматогенеза при варлхоцеке // Сб. научн. трудов молодых ученик Волго-Вятского региона - г. Горький, 1988. - С.57.

3. Аргкгёексов С.Б., Потеыиаа Т.Е., Арткфексова A.A. Цито-мор;1ологическея оценка гаметогеьзза при некоторых формах курского бесплодия // Регенерация. Адаптация. Годаостаз / Сб. Еаучк. '¿р. I орьковского медицинского института ик. С.Ы.Кирова.

- 1990. - G. 143-146.

4. Аргп£ексов С.Б., Еогемина Т.Е., Артш]ексова A.A. Патогенез гивоговадазма при вазогенных формах мужской субсерткль-

.кости // Сосудисто-тканевые отношения при гилмсска / Сб. научк. тр. Нижегородского медицинского института т. С.М.Ккрова .

- 1991. - С. 80-85.

5. Рябов Н.В,,Малож« A.B.,Рыбаков ДЛ»Дрта*ексов С. к., Потешна Т.Ч. Способ приготовления мазков гшогенатов тканей семеинпко. / Виазгородский медицинский институт пм.С.".'кироза, г'ировскй2* ïï№ гекзгатегш я переливания кровк. - приоритетная справка' й 4<?4S3S5 /14/ от 27 .5.91.