Автореферат и диссертация по медицине (14.00.02) на тему:Функциональная анатомия лимфатического региона подвздошной кишки в норме и при различных вариантах нарушения микробного равновесия (экспериментальное исследование)

На правах рукописи

Васильева Ольга Валентиновна

ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ АНАТОМИЯ ЛИМФАТИЧЕСКОГО РЕГИОНА ПОДВЗДОШНОЙ КИШКИ В НОРМЕ И ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ВАРИАНТАХ НАРУШЕНИЯ МИКРОБНОГО РАВНОВЕСИЯ (экспериментальное исследование)

14.00.02 - анатомия человека

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук '

Новосибирск - 2005

Работа выполнена кафедре анатомии человека ГОУ ВПО Омской г осударственной медицинской академии

Научный руководитель; доктор медицинских наук, профессор

Путалова Ирина Николаевна

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук

Обухова Лидия Александровна

доктор медицинских наук Голубе ва Ирина Александровна

Ведущая организация: Алтайская государственная

медицинская академия (г. Барнаул)

Защита состоится » ¿у? ¿'-/^¿'¿¿Л^ 20041г. в на заседа-

нии диссертационного совета Д 208.062.05 при Новосибирской государственной медицинской академии (630091, г.Новосибирск, Красный проспект, 52)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Новосибирской государственной медицинской академии

Автореферат разослан « »_ 2004 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук,

профессор A.B. Волков

ЪООК0-+

I щт

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность. Синдром избыточного бактериального роста в тонкой кишке многие авторы расценивают как одно из наиболее часто встречающихся клинических состояний, которое сопровождает практически все заболевания желудочно - кишечного тракта, возникает у онкологических больных, после инфекционных заболеваний и хирургических вмешательств на органах брюшной полости, при заболеваниях почек, на фоне применения цитостатиков и антибиотиков, у реконвалесцентов после острых вирусных и бактериальных инфекций внекишечной локализации и во многих других случаях (Кудинова Т.И. и др., 1975; Карпов П.Ф. и др . 1989; Румянцев В.Г., 1999; Шептулин A.A., 2000; Парфенов А.И., 2002; Машаев С.И., 2003). Несмотря на широкое распространение, диагностика синдрома избыточного роста бактерий трудна, а традиционное лечение, включающее антибактериальную и заместительную терапию, малоэффективно и не приносит желаемых результатов (Гребнев А.Л., Мягкова Л.П., 1996; Коршунов В.М. и др., 1996; Михайлова Т.JI. и др., 1999; Шептулин A.A., 1999; Григорьева Г.А.,2001).

В настоящее время хорошо известно, что в любой патологический процесс вовлекаются структуры лимфатической системы (Бородин Ю.И. и др., 1993 - 2004; Левин Ю.М. и др., 1998 - 2004), в том числе и при повреждении стенки тонкой кишки. При этом функциональная нагрузка на лимфатическую систему многократно возрастает. От состояния дре-нажно—детоксикационной функции лимфатической системы зависят прогноз и исход любого воспалительного процесса (Левин Ю.И., 2001; Бородин Ю.И., 2002). Для протезирования и восстановления функции лимфатической системы при повреждении ее применяют сорбенты. Ю.И. Бородиным и его учениками (1995 - 2004) разработана концепция, в основу которой положен принцип сходности сорбентной терапии и естественного лимфодренажа тканей.

Сорбционными свойствами обладают пищевые добавки, содержащие пектин и пищевые волокна. В последние годы их стали применять в комплексном лечении дисбиоидных состояний (Bengmark S., 1996; Fuller R„ Gibson G.R., 1997; Шендеров Б. A., 1998; Златкина А.Р., 1999; Михайлова Т.Л. и др., 1999; Маянский А.Н., 2000; Klessen et al, 2003). Одним из препаратов, содержащих пектин, является пепидол. Несмотря на широкое применение его в медицинской практике, недостаточно изученным остается механизм его действия.

Морфологические и функциональные изменения в лимфатическом регионе тонкой кишки в условиях синдрома избыточного роста бактерий и после применения пепидопа не изучено, что и послужило основой для настоящего исследования.

Цель исследования. Установить особенности структурно - функцио-

РОС. НАЦНОНЛЛМ№*{ БИБЛИОТЕКА {

¿-ас./я

нальных преобразований лимфатического региона подвздошной кишки

при различных вариантах нарушения микробного равновесия и определить эффективность ГТЕПИДОЛа, используемого для коррекции.

Задачи исследования.

1. Изучить микроанаггомическую организацию стенки подвздошной кишки, пейеровой бляшки и регионарного лимфатического узла у здоровых половозрелых крыс.

2 Провести сравнительный анализ структурно - клеточных показателей лимфатического региона подвздошной кишки при инфицировании здоровых крыс.

3. Создать модель избыточного роста бактерий в тонкой кишке у крыс и выявить морфологические особенности различных звеньев лимфатического региона подвздошной кишки.

4. Изучить реакцию лимфатического региона подвздошной кишки при синдроме избыточного роста бактерий после применения ПЕПИ ДОЛа.

5. Используя комплекс клинико - лабораторных методов исследования, оценить эффективность использования ПЕПИДОЛа.

Научная новизна исследования.

1. Получены новые количественные данные о структурно - клеточной организации различных звеньев лимфатическою региона подвздошной кишки здоровых половозрелых крыс.

2 Впервые в комплексе изучена функциональная анатомия лимфатического региона подвздошной кишки при различных вариантах нарушения микробного равновесия, что позволило провести сравнительный анализ степени и характера морфо - функциональных преобразований основных звеньев региона и оценить возможность направленной лимфосанации.

3. Показано, что при инфицировании крыс условно патогеннной флорой изменения клинико - лабораторных и морфологических показателей слабо выражены и кратковременны, что обусловлено адекватностью дренажно - детоксикационной функции лимфатического региона подвздошной кишки.

4. В первые создана модель избыточного бактериального роста в тонкой кишке у крыс. Установлено, что в динамике синдрома избыточного роста бактерий развивалась недостаточность дренажно - де-токсикационных процессов в кишке, о чем свидетельствует регистрация эндотоксикоза.

5. Выявлено лимфопротекторное и лимфостимулирующее действие пе-пидола в условиях синдрома избыточного роста бактерий в тонкой кишке.

Теоретическая и практическая значимость работы.

Проведенный комплексный анализ морфо - функциональных особен-

ностей лимфатического региона подвздошной кишки крыс в норме и при инфицировании условно патогенной флорой позволил выявить стереотипные структурные изменения различных звеньев его, что и объясняет * быстрое восстановление структурно - клеточных показателей и высокую резистентность организма животных. Синдром избыточной колонизации бактерий в тонкой кишке на фоне иммунодефицита, морфологическим критерием которого является гипоплазия пейеровой бляшки и верхнего мезентериального лимфатического узла, сопровождается высоким обсеменением тонкой кишки условно патогенной флорой, что является свидетельством недостаточности дренажно - детоксикационных процессов в регионе. Выявленные особенности обуславливают необходимость разработки и проведения мероприятий, направленных на лимфосанацию. Полученные данные о положительном влиянии ПЕПИДОЛа на функциональную активность различных звеньев лимфатического региона подвздошной кишки и микроанагомическую организацию стенки ее позволяют рекомендовать эту пищевую добавку для коррекции дисбиоидных состояний. Эти сведения могут быть использованы в терапии внутренних и инфекционных болезней, в учебном процессе, для научно - исследовательской работы.

На защиту выносятся следующие положения:

1. Лимфатический регион подвздошной кишки у здоровых крыс характеризуется преобладанием доли интерстициальных пространств слизистой оболочки над таковой в мышечной, широким просветом центрального лимфатического сосуда кишечной ворсинки; доминированием площади вторичных лимфоидных узелюв в структуре пейеровой бляшки; равнозначными значениями площадей Т - и В - зависимых зон и промежуточным морфотипом регионарного лимфатического узла. При различных вариантах нарушения микробного равновесия направленность деструктивных и восстановительных процессов в лимфатическом регионе стереотипна: интерстициальные пути - сосудистое звено - пейерова бляшка - регионарный лимфатический узел; нормализация структурно - функциональных показателей звеньев лимфатического региона возможна при высокой резистентности организма или направленной лимфосанации.

2. Модель синдрома избыточной колонизации бактерий в тонкой кишке максимально приближена к клиническому течению, об иммунодепрес-сивном состоянии организма свидетельствует лимфопения со снижением доли Т - и В - лимфоцитов, на недостаточность дренажно - детоксикационных процессов в лимфатическом регионе указывает эндогоксикоз и массивное обсеменение тонкой кишки условно патогенной флорой.

3. Применение ПЕПИДОЛАа на фоне синдрома избыточного роста бактерий, благодаря эффектам лимфопротекции и лимфостимуляции, способствует нормализации площадей интерстициальных пространств, цен-

трального лимфатического сосуда; увеличению числа и площади вторичных лимфоидных учел ков в пейеровой бляшке, перестройке верхнего ме-зентериального лимфатического узла в компактный морфотип и восстановлению дренажно - детоксикационной функции лимфатического региона, что подтверждается устранением эндотоксикоза.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на научной конференции с международным участием, посвященной 75 - летию со дня рождения и 50 - летию научно - педагогической деятельности академика РАМН Ю.И. Бородина (Новосибирск, 1 - 3 июня 2004г.), VII Конгрессе Международной ассоциации морфологов (Казань, 12-14 сентября, 2004), расширенном заседании кафедр анатомии человека, гистологии, цитологии и эмбриологии, судебной медицины с курсом правоведения Омской государственной медицинской академии, общей биологии и методики ее преподавания Омского государственного педагогического университета (Омск, 9 ноября 2004г.).

Внедрение результатов в практику. Способ моделирования кишечной инфекции (заявка на изобретение№2004100928 от 01.02.2004) внедрен в практику научно - исследовательской работы кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ОмГМА (644099, г. Омск, ул. Ленина, 12). Результаты исследования функциональной анатомии лимфатического региона подвздошной кишки в норме и при различных вариантах нарушения микробного равновесия внедрены в курс лекций и практических занятий кафедры гистологии цитологии и эмбриологии ОмГМА. Полученные данные об особенностях микроанатомической организации лимфатического региона подвздошной кишки внедрены в практику научно - исследовательской работы кафедры анатомии человека ОмГМА.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 8 насучных работ, из них 2 патента.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 197 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, 6 глав собственных исследований, включая описание материала и методов исследования, обсуждения полученных результатов, выводов, иллюстрирована 20 таблицами и 40 рисунками. Указатель литературы содержит 174 отечественных и 32 иностранных источника.

Весь материал, представленный в диссертации, получен, обработан и проанализирован лично автором.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В соответствии с поставленными задачами провели экспериментальное контролируемое проспективное исследование методом рандомизированных блоков. В качестве подопытных животных использовали 49 белых беспородных крыс-самцов.

Учитывая биологические ритмы изменений лимфоидных органов в течение года и суток (Летягин А.Ю., 1984; 1991; Смирнова Т.С., Ермолина И.В., 1 988), экспериментальное исследование и забой животных проводили в весенне - летний период, в послеобеденное время (14 - 15 часов).

Содержание, кормление, уход и выведение из эксперимента крыс осуществляли в соответствии с требованиями «Санитарных правил по устройству, оборудованию и содержанию экспериментально - биологических клиник (утверждены Главным Государственным санитарным врачом СССР от 06. 04. 73 г. № 1045 - 73)» и приказа №755 от 12.08.1977 г. Министерства Здравоохранения СССР «О мерах по дальнейшему совершенствованию организационных форм работы с использованием экспериментальных животных»).

Животные по характеру эксперимента были разделены на 4 серии. Первая серия состояла из 7 здоровых животных (контрольная) Животным 2 серии (14 крыс) внугрижелуцочно вводили культуру Klebsiel lae pneumonia в дозе 10 млрд. микробных тел на кг массы, для чего использовали бактерии рода Klebsiella (вид К. Pneumoniae), штамм NCTC-5054, типичный по морфологическим и биохимическим свойствам, полученный из государственного научно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов имени Л. А.Тарасевича. У животных 3 и 4 серии (по 14 крыс) моделировали синдром избыточной колонизации тонкой кишки по собственной методике. В 3 серии патологический процесс у крыс протекал естественным путем, а животным 4 серии вводили 5% раствор «ПЕПИДОЛ - ПЭГ» (пищевая добавка ТУ-9169-001-51624802-00, которая обладает сорбционными и антибактериальными свойствами, в состав ее входит активный биополимер пектин -вещество растительного происхождения) 4 раза в день внугрижелуцочно через зонд в течение 3 суток. Животных выводили из эксперимента на4 и 7 сутки после инфицирования.

В качестве объекта исследования использовали подвздошную кишку с лимфоидными образованиями, брыжейку тонкой кишки и регионарный лимфатический узел (верхний мезентериальный).

Материал для гистологического исследования фиксировали в растворе Теллесницкого в течение 24 часов. Затем обезвоживали в серии спиртов возрастающей концентрации, просветляли в ксилолах, заключали в парафин - воск. С помощью ротационного микротома изготовляли срезы толщиной 5 мкм и 7-10 мкм, которые окрашивали гематоксилином Майера и эозином, пикрофуксином по методу Ван Гизон, азуром - II - эозином по методу Нохт - Максимова (Лилли Р., 1969).

Иммуногистохими ческое исследование лимфатических узлов выполняли на парафиновых срезах с применением стрептовидин - биотинового

метода ("Dako" , Дания, LSAB2 Systems, HRP). Демаскировку антигена проводили на цитратном буфере (рН=6,0), в бытовой СВЧ - печи. Популяции лимфоцитов определяли с помощью моноклональных антител к CD -рецепторам (CD-4, CD-20). Для иммунного окрашивания использовали авидин -биотиновый пероксидазный метод (Novostain Universal Quick Kit (NCL - RTU - Qu), UK). В качестве хромогена применяли диаминбензи-дин, ядра докрашивали гематоксилином (Цыплаков Д.Е., Петров C.B., 1997; Петров C.B., Райхлин Н.Т., 2000; Эллиниди В H и др., 2002). '

Для изучения структурной организации сгенки тонкой кишки срез производили перпендикулярно всем слоям, для изучения пейеровой бляшки - продольно. Для визуализации всех структур лимфатического узла срез осуществляли в продольном направлении на уровне ворот.

С помощью окулярной сетки при увеличении в 38 раз под микроскопом JTOMO определяли площади основных структурных компонентов органа в относительных и абсолютных значениях. В лимфатических узлах определяли: площади капсулы, краевого синуса, коркового плато, глубокой коры, мозговых синусов и тяжей, лимфоидных узелков без центра размножения и с центром размножения, количество их, площадь герминативных центров. Рассчитывали удельные площади коркового и мозгового вещества, Т - и В - зависимых зон. Вычисляли корково - мозговой индекс (К/М) и Т/В коэффициент. В стенке подвздошной кишки измеряли: площадь интерстициальных пространств в собственной пластинке и мышечной оболочке стенки тонкой кишки, площадь кровеносных капилляров в собственной пластинке и мышечной оболочке, площадь центрального лимфатического сосуда кишечной ворсинки, площадь клеток и межклеточного вещества в собственной пластинке слизистой оболочки и гладкомышечных клеток. В пейеровой бляшке изучали доли первичных и вторичных лимфоидных узелков, центров размножения и мантий в составе последних, межузелковую зону.

В брыжейке тонкой кишки определяли общее количество тучных клеток, соотношение зрелых, дегранулированных и тотально дегранулиро-ванных форм.

Цитоархитсктонику изучали в структурах лимфатического узла (герминативных. центрах, паракортикальной зоне, мозговых тяжах и синусах) и пейеровой бляшки (герминативных центрах, мантии, межфолликулярной зоне) на гистологических срезах толщиной 5 мкм, окрашенных азур - II -эозином.

Клеточный состав лимфа!ических узлов и пейеровых бляшек определяли при увеличении в 900 раз в 10 полях зрения при помощи окулярной морфометрической сетки Г.Г. Автандилова ( 1984), подсчитывали клетки: ретикулярные, зрелые и незрелые плазматические клетки, бластные формы, средние и малые лимфоциты, эозинофилы, нейтрофилы, макрофаги,

митотически делящиеся и дегенерирующие клетки.

Лабораторные методы исследований.

Анализ содержания веществ низкой и средней молекулярной массы осуществляли по методикеМ.Я. Малаховой (1995). Спектрофотомегрию плазмы крови производили в зоне длин волн от238 до 310 нм на спектрофотометре ЛОМО-46. Расчет конечного результата выполняли путем интегрального измерения площади фигуры, образованной осью абсцисс и полученными значениями экстинкций для каждого типа определений плазмы.

Для оценки степени выраженности эндогенной интоксикации определяли СОЭ, составляли лейкограмму. Популяции Т- и В - лимфоцитов периферической крови определяли с помощью моноклональных антител к CD - рецепторам (CD - 4, CD - 20) с последующим подсчетом клеток в фазовом контрасте и ультрафиолетовом освещении (Караулов A.B., 1999).

Показатели функциональной активности лейкоцитов оценивали с помощью теста восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест). Для учета результатов использовали цитохимический метод, основанный на микроскопическом определении процентного содержания нейтрофилов с гранулами формазана темно-синего цвета в цитоплазме. Анализу подвергали 100 сегментоядерных нейтрофилов, подсчитывали процент фор-мазан-позитивных клеток, в которых гранулы красителя занимают не менее 1/4 части цитоплазмы.

Для оценки фагоцитарной активности лейкоцитов исследовали поглотительную и переваривающую активность нейтрофилов крови при контакте их in vitro с суточной культурой Klebsiellae pneumoniae. Для оценки фагоцитоза под микроскопом просматривали 100 нейтрофилов и определяли: фагоцитарный индекс (процент фагоцитов, имеющих поглощенные частицы, от общего числа лейкоцитов), фагоцитарное число (среднее число фагоцитированных частиц на один фагоцит).

Объектом микробиологического исследования служили кровь, содержимое среднего отдела подвздошной кишки, печень, селезенка, верхний мезентериальный узел. Высев материала проводили на среду Эндо и питательный Агар. После инкубации при 37°С в течение 24 часов проводили количественную оценку высеваемости данного микроорганизма и определяли число колониобразующих единиц (КОЕ) на питательной среде с соответствующим разведением. Параллельно высеваемость данного микроорганизма оценивали методом секторного посева. Результаты двух методов микробиологического исследования оказались сопоставимы.

Статистическую обработку полученного материала выполняли при помощи вариационного анализа с применением персонального ГВМ- совместимого компьютера и соответствующего задачам исследования программного обеспечения. Формировали вариационные ряды. Вычисляли средние арифметические величины (М) в абсолютных и относительных

единицах и ошибки их (т). Достоверность отличий при парном сравнении величин определяли по критерию Стьюдента -1 (при всех подсчетах достоверными считали различия при р<0,05). При использовании методов множественного сравнения вводили поправку Бонферрони.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ОБСУЖДЕНИЕ ИХ

У здоровых половозрелых крыс в стенке подвздошной кишки на долю слизистой оболочки с подслизистой основой приходится почти 2/3 общей площади среза. Это связано с большой активностью ее в биохимических и физиологических процессах пищеварения, всасывания и секреции (Хэм А., Нормак Д., 1983; Аруин Л.И. и др., 1998).

Доля межэпителиальных лимфоцитов составляет 10%, что соответствует данным М.Р. Сапина (3 987; 1996). Обращает внимание широкий просвет центрального лимфатического сосуда кишечной ворсинки и площади интерстициальных путей собственной пластинки слизистой. Это обеспечивает беспрепятственное выведение свободной тканевой воды из пе-рицеллюлярного пространства в сосудистое русло лимфатической системы (Бородин Ю.И. и др., 1996; Путалова И.Н., 1996). Среди клеточных элементов, инфильтрирующих стенку подвздошной кишки, преобладают лимфоциты, плазматические и тучные клетки. Они составляют клеточный компонент местного иммунитета (Кононов A.B., 1993).

В структуре пейеровой бляшки здоровой половозрелой крысы 2/3 площади приходится на лимфоидныеузелки, причем вторичных лимфоид-ных узелков в 3 раза больше, чем узелков без центров размножения. Учитывая, что пейеровы бляшки, согласно мнения М.Р. Сапина (2002) и Ю.И. Бородина (2004), являются первой линией иммунной защиты, можно объяснить наличие большого количества властных форм, плазматических и ретикулярных клеток, макрофагов и клеток в митозе в структуре герминативных центров.

У здоровой половозрелой крысы в составе верхнего мезентериального лимфатического узла, как и в пейеровой бляшке, лимфатические узелки с I ^нтрами рачм ножения преобладают над первичными лимфоидными узелками. В цен трах размножения их определяли большое количество властных форм, макрофагов, ретикулярных и митотически делящихся клеток Особенность архитектоники верхнего мезентериального лимфатического узла здоровой половозрелой крысы отражает состояние местного иммунитета и позволяет отнести его к смешанному типу строения (Белянин В.Л., 1999), где в равной степени выражены гуморальное и клеточное звенья иммунитета. По классификации Ю.И. Бородина (1968) значение К/М индекса соответствует промежуточному типу лимфатических узлов, которые оптимально сочетают транспортную и биологическую функции.

Полученные результаты о преобладании тучных клеток 0 и 1 степени дегрануляции при исследовании брыжейки тонкой кишки совпадают с

данными О. Г. Маринкиной(1999)отом, что такое соотношение тучных клеток характерно для поддержания местного гоместаза в физиологических условиях.

При инфицировании Klebsielae pneumoniae ухудшение общего состояния животных проявлялось кратковременным снижением активности (первые 1 - 2 суток) и снижением массы тела в среднем на 3 - 5%. Подобная реакция может быть результатом стресса и побочным действием эфирного наркоза.

В лейкограмме и значениях фагоцитарной активности лейкоцитов отличий от нормы не выявили Повышение числа лейкоцитов, содержащих гранулы диформазана, на 4 сутки исследования свидетельствует об активном состоянии их и способности адекватно ответить на антигенное раздражение (Редькин Ю.В., 1988).

На 4 сутки после введения животным 10 - миллиардной взвеси Klebsielae pneumoniae в 1 мл содержимого тонкой кишки определяли до 10 млн КОЕ данного микроорганизма, что превышает допустимую концентрацию в этом отрезке кишки (106). На 7 сутки этот показатель соответствовал данным контроля. Обнаружение скудного количества бактерий при посеве взвеси из верхнего мезентериального лимфатического узла на 4 сутки может быть результатом попадания бактерий в регионарный лимфоузел с афферентной лимфой. Малое число КОЕ из высева взвеси печени может быть следствием бактериальной транслокации между кишечником и печенью по системе воротной вены, минуя общий кровоток, так как высев из полости правого желудочка сердца - стерилен (Белянин B.JL, Рыбакова М.Г., 2004).

В стенке подвздошной кишки на4 сутки после инфицирования регистрировали проявления острого катарального энтерита с мало выраженными дистрофическими и реактивными изменениям в слизистой оболочке Расширение интерстициальных пространств и просвета центрального лимфатического сосуда, увеличение количества межэпителиальных лимфоцитов отражает адекватную ответную реакцию на антигенное раздражение, активацию лимфопродукции и связанную с этим транспортную функцию лимфатического региона тонкой кишки. Кроме того, регистрировали увеличение числа лимфоцитов, плазматических клеток, нейтрофильньгх лейкоцитов в собственной пластинке слизистой оболочки тонкой кишки.

На 7 сутки изменения в стенке кишки были минимальны, выражались дистрофией энтсроцитов, а макрофагальную реакцию и повышение числа тучных клеток можно расценить как показатель активации неспецифической защиты организма. Доли центрального лимфатического капилляра и интерстициальных пространств в динамике возвращались к нормальным значениям.

Обнаружены однонаправленные преобразования в пейеровой бляшке и регионарном лимфатическом узле. Они проявились в увеличении площа-

ди вторичных лимфоидных узелков и их центров размножения с повышением доли макрофагов, митотически делящихся клеток, эозинофилов, бластныхи дегенерирующих форм. Выявленные изменения указывают на то, что при индукции бактерий в стенке тонкой кишки появляются факторы, стимулирующие детоксикационные (иммунные) процессы

Увеличение в межфолликулярной зоне пейеровой бляшки, в глубокой коре и мозговых тяжах лимфатического узла общего числа клеточных элементов и плазматических клеток, в частности, может служить косвенным показателем усиления продукции гуморальных антител (Кривский И. А и др., 1988). Перестройка архитектоники лимфатического узла с преобладанием в структуре его Т - зависимой зоны свидетельствует об активации клеточного звена местного иммунитета и его детоксикационной. Увеличение доли межфолликулярной зоны пейеровой бляшки, расширение краевого и мозговых синусов верхнего мезентериального лимфатического узла можно расценить как усиление дренажной функции регионарных скоплений лимфоидной ткани.

В брыжейке тонкой кишки инфицированных крыс регистрировали преобладание функционально активных форм тучных клеток (I и II степени дегрануляции). Это подтверждает наличие морфогенных патогенетических факторов в стенке тонкой кишки при инфицировании крыс.

Таким образом, здоровые крысы обладают высокой резистентностью к условно патогенной флоре. Патологические изменения в стенке кишки слабо выражены и кратковременны. Изменения в пейеровой бляшке и верхнем мезентериальном лимфатическом узле носят компенсаторный характер и направлены на усиление дренажно - детоксикационной функци и при поступлении в центральное звено лимфатического региона токсичной лимфы, содержащей бактериальные антигены, продукты тканевого распада, перекисного окисления, медиаторы воспаления (Левин Ю.М , 2002). Данную реакцию можно считать стереотипной, так как аналогичные результаты мы находим в работах Ю.И. Бородина (1969), В.И. Григорьева (1988), A.B. Плешакова (1995), И.Н. Путаловой (1996), О.Г Ма-ринкиной (1999), И.А. Голубевой (2004), <

При моделировании синдрома избыточной колонизации бактерий, после подавления иммунитета (инъекциями гидрокортизона ацетата), вводили культуру Klebsiellae pneumonia. На протяжении всего эксперимента 1 отмечали отрицательную динамику клинико - лабораторных данных. Животные становились малоактивными, грязными, отказывались от пищи, теряли массу тела (до20%), у них регистрировали выраженные изменения гематологических показателей, которые сохранялись на протяжении всего эксперимента' лимфопения со снижением доли Т - и В -лимфоцитов, леймэцитоз, повышение СОЭ, стойкое угнетение фагоцитарной и функциональной активность, высокое содержание ВНиСММ в плазме крови (больше нормы в 4,5 раза). При бактериологическом иссле-

довании содержимого проксимальных отделов тонкой кишки обнаруживали массивный рост Klebsielae pneumoniae (до 100 млн КОЕ в 1 мл), сохраняющийся на протяжении всего эксперимента.

При микроскопическом исследовании стенки подвздошной кишки на 4 сутки эксперимента определяли признаки катарального энтерита с микро-эрозированием слизистой. В динамике отмечали выраженную лимфоци-тарную инфильтрацию всех слоев стенки тонкой кишки, возрастание числа тучных и митотически делящихся клеток. Вместе с тем, повышение числа макрофагов было незначительно, а доля нейгрофильных лейкоцитов уменьшена, что подтверждает снижение неспецифической резистентности организма при вторичном иммунодефиците. По данным Е.П. Бернасовской (1984) повреждающее действие условно патогенных бактерий вида Klebsielae pneumoniae без повышения заражающей дозы их может быть реализовано только при снижении естественных защитных сил организма.

Интерстициальные пространства и центральный лимфатический сосуд кишечной ворсинки в динамике остаются резко расширенными.

Изменения в пейеровой бляшке и верхнем мезентериальном лимфатическом узле крыс при моделировании СИК носят однонаправленный характер. Размеры их резко уменьшены, что было заметно макроскопически и подтверждено при морфометрии (уменьшение общей площади в 2 раза). Число малых и средних лимфоцитов прогрессивно снижается во всех структурных компонентах узла и бляшки.

В структуре пейеровой бляшки и верхнего мезентериапьного лимфатического узла преобладают агггенуированные лимфоидные узелки. Учитывая во многом сходный их клеточный состав с первичными фолликулами, можно предположить, что фолликулы аттенуированнош типа представляют собой гипертрофированные вследствие антигенного воздействия первичные фолликулы с задержкой формирования центров размножения (Бе-лянин B.JL, Цьшлаков Д.Э., 1999). Доля.ретикулярных клеток во всех структурах пейеровой бляшки и регионарного лимфатического узла повышена более, чем в 2 раза. Увеличение числа клеток плазматического ряда в пара-кортикальной зоне, мозговых тяжах узла и в межфолликулярной зоне пейеровой бляшки (в 1,5 раза) можно расценить как ответную реакцию на действие различных факторов (антигенных, токсических, аутоиммунных).

В верхнем мезентериальном лимфатическом узле крыс при синдроме избыточной колонизации расширены краевой и мозговые синусы, что приводит к увеличению площади синусной системы и мозгового вещества. Увеличение общего числа клеток в просвете мозговых синусов происходило, главным образом, за счет макрофагов, эозинофилов, промежуточных и зрелых форм плазматических клеток и, в меньшей степени, средних лимфоцитов В динамике просвет мозговых синусов сохраняется расширенным, клеточная плотность в них нарастает, что является признаками нарушения транспорта из узла и может способствовать склерозированию его.

Несмотря на некоторое преобладание доли мозгового вещества над долей коркового, К/М индекс остается близким к 1,0, соотношение Т - и В - зависимых зон свидетельствует о том, что в иммунных реакциях гуморальное и клеточное звенья иммунитета участвуют в равной степени.

Слабовыраженная реакция функционально активных форм тучных клеток брыжейки тонкой кишки подтверждает наличие морфогенных патогенетических факторов в стенке тонкой кишки при синдроме избыточной колонизации, но снижение общего числа тучных клеток и недостаточно активная реакция их на антигенное раздражение являются проявлениями им мунодепрессивного эффекта.

Таким образом, при моделировании СИК определяли выраженные дистрофические и инволютивные процессы в стенке подвздошной кишки, пейеровой бляшке и регионарном лимфатическом узле крыс. Дренажно-детоксикационная функция лимфатического региона неадекватна потребностям, что проявляется местными и общими патологическими изменениями и эндотоксикозом.

В настоящее время при дисфункциях пищеварительной системы, сопровождающихся нарушением микробного равновесия, большое значение придается поиску натуральных средств, преимущественно растительного происхождения, с высокой биологической активностью и низкой токсичностью (Шендеров Д. А., 1998;ЗлаткинаА.Р, 1999; Михайлова T.JI. и др., 1999; Горчаков В.Н.,СиротеншИ.В., 2002; KlessenB. etal.,2003; АсташоваТ.А., 2004; Казакова Е. С., 2004).

Одним из таких средств является «Пепидол» (ТУ -9169 - 001 -51624802 - 00). В состав его входит активный биополимер пектин - вещество растительного происхождения. «Пепидол», являясь, по существу, пищевым продуктом, не вызывает аллергических реакций, не оказывает токсического воздействия, так как имеет место эволюционно выработанная адаптация к этому органическому веществу (Кочеткова A.A., 1992; Юсупов Ш.Р., 1994,2002; Потиевский Э.Г., Новиков А.И., 2002).

При синдроме избыточной колонизации тонкой кишки после применения пепидола состояние животных улучшалось уже на 3 сутки и сохранялось стабильным в динамике. Нарушения показателей лейкограммы и СОЭ сохранялись на протяжении всего эксперимента, но на 7 сутки регистрировали снижение СОЭ и общего числа лейкоцитов. Параллельно, в плазме крови крыс, определяли снижение ВНиСММ (в 3 раза) по сравнению с данными группы животных без применения пепидола, что свидетельствует об устранении эндотоксикоза.

При бактериологическом исследовании содержимого верхнего отдела подвздошной кишки крыс при синдроме избыточной колонизации после применения пепидола отметили значительное снижение КОЕ исследуемого микроорганизма (в десятки раз). Это может быть результатом и бакге-

рицидного действия пепидола (Мазитова О.П., 1983; Потиевский Э.Г. Дроздов В.Н., 1997).

При исследовании тучных клеток в брыжейке тонкой кишки отмечали уменьшение общего числа клеток при сокращении в популяции их функционально активных дегранулированных форм. По мнению Л.Н. Рачков-ской (1996), прием сорбентов оказывает клеточносберегающий эффект на тучные клетки. Можно предполагать, что прием сорбентов приводит к снижению интоксикации, к более щадящему режиму дегранулирования тучноклеточного аппарата, создавая необходимый биоаминный фон для устойчивости тканей к влиянию токсинов.

При макроскопическом исследовании брюшной полости крыс патологические изменения мало выражены, они ограничивались слабой гиперемией серозной и слизистой оболочек проксимальных отделов тонкой кишки.

При микроскопии отмечали дистрофические изменения железистого эпителия, очаговое расширение и полнокровие кровеносных сосудов, что свидетельствует о снижении повреждающего действия инфекционного агента при СИК после применения пепидола.

Уменьшение площади интерстициальных пространств и центрального лимфатического сосуда собственной пластинки слизистой оболочки подвздошной кишки после применения пепидола указывает на сокращение продукции тканевой жидкости и улучшение отведения ее по лимфатическим путям. В мышечном слое стенки подвздошной кишки интерстици-альные пространства остаются расширенными. В слизистой оболочке отмечали снижение числа межэпителиальных лимфоцитов, лимфоцитов и нейтрофильных лейкоцитов, инфильтрирующих собственную пластинку слизистой оболочки тонкой кишки. С одной стороны, это может быть результатом иммунодепрессивного действия гидрокортизона, с другой, снижением антигенного воздействия на стенку подвздошной кишки под влиянием пепидола. Особенность состава лейкоцитарного инфильтрата с повышением числа макрофагов и плазматических клеток свидетельствует о том, что организм крыс на антигенное воздействие отвечает стереотипной неспецифической защитной реакцией.

Как и в группе животных с синдромом избыточной колонизации без применения пепидола, в этой группе животных пейерова бляшка и верх1 ний мезентериальный лимфатитческий узел гипоплазированы, что хорошо заметно макроскопически и подтверждено морфометрическим исследованием. Обнаружено снижение и общего числа лимфоидных узелков и клеток в них. Однако, относительно других структур бляшки и узла, доля первичных лимфоидных узелков возрастает, а доля узелков с центрами размножения превышает и значения контроля. В центрах размножения увеличение числа дегенерирующих клеток и повышение митотической активности пропорционально уменьшению числа средних и малых лим-

фоцитов и больше выражено в пейеровой бляшке. Повышение доли плаз-моцитов и ретикулярных клеток определяли во всех исследуемых зонах, но степень выраженности больше в межфолликулярной зоне пейеровой бляшки и мозговых тяжах верхнего мезентериапьного лимфатического узла (увеличение в 3 раза). Плазматическую реакцию можно считать стереотипной при стрессовом воздействии, как и при других воздействиях.

В глубокой коре определяли расширение посткапиллярных венул, набухание их эндотелия, в просве rax венул отмечали увеличение количества малых лимфоцитов, а некоторые из них наблюдали между эндотели-оцитами. Данные изменения свидетельствуют об активации рециркуляции (хоминга) лимфоцитов (Kapp Я. и др., 1980).

В структуре регионарного лимфатического узла крыс при синдроме избыточной колонизации после применения пепидола преобладает корковое вещество, что позволяет отнести узел к компактному типу (Бородин Ю.И., 1968). Увеличение Т/В коэффициента на 4 сутки эксперимента косвенно свидетельствует об активации местного иммунитета по клеточному типу на уровне лимфатического региона тонкой кишки, так как основная функция тимус - зависимой зоны лимфатического узла заключается в образовании клона активированных цитолитических лимфоцитов (Беля-нин B.JI., Цыплаков Д.Э., 1999).

Доля синусной системы, включающей краевой и мозговые синусы, превышает значение здоровых крыс и в динамике не снижается. Сохраняется увеличенным и число клеточных элементов, расположенных в просветах синусов, причем, в большей степени увеличено число макрофагов.

Таким образом, при синдроме избыточного роста бактерий после применения пепидола изменения в стенке подвздошной кишки и в тучнокле-точной популяции свидетельствуют о снижении антигенной и токсической нагрузки на стенку тонкой кишки. Дренажная функция на уровне первого и второго звеньев лимфатического региона достаточна, но на уровне центрального звена остается неадекватной потребностям региона. Перестройка верхнего мезептериального лимфа!ическогоузла в компактный тип с преобладанием в структуре Т - зависимой зоны свидетельствуг ет об оптимизации его детоксикационой функции. Полученные нами данные указывают в пользу того, что пенидол обладает лимфопротектор-ным и лимфостимулирующим действием. Механизм его сходен с действием других препаратов с сорбционными свойствами, описанных в работах сотрудников ИКиЭЛ СО РАМН. Сорбен ты разгружают лимфатическую систему от избытка токсинов и запускают целую цепь реакций на уровне лимфоидной тка'нй (лимфоузла), которые обеспечивают обезвреживание поступивших токсинов в лимфатическое русло. Это «разрывает» патогенетическую цепочку и позволяет лимфатическому узлу начать выполнять свои основные функции (лимфодреьажную, лимфодетоксикационную,

иммунологическую). Применение пепидола полностью не предотвращает токсического воздействия на регионарный лимфоузел, но вместе с тем, структурная и иммунологическая перестройка узла свидетельствует о лучших условиях для регенераторных процессов в регионе.

ВЫВОДЫ

1. Функциональная анатомия лимфатического региона подвздошной кишки характеризуется изменением соотношения площадей интерсти-циальных путей, лимфатических сосудов, структурно - клеточными преобразованиями пейеровой бляшки и регионарного лимфатического узла. Об адекватности дренажно-детоксикационных процессов свидетельствует: отсутствие эндотоксикоза, нормальные значения гематологических и иммунологических (высокая функциональная и фагоцитарная активность лейкоцитов) показателей, отсутствие избыточного роста бактерий в проксимальных отделах тонкой кишки.

2. При инфицировании здоровых крыс культурой Klebsiellae pneumoniae структурно - клеточные преобразования лимфатического региона направлены на усиление дренажно-детоксикационной функции, они выражаются расширением интерспгициальных путей и центрального лимфатического сосуда, увеличением количест ва межэпителиальных лимфоцитов, возрастанием площади вторичных лимфоидных узелков в пейеровой бляшке и регионарном лимфатическом узле с повышением доли макрофагов, клеток в митозе, эозинофилов, бластных форм, поэтому изменения в стенке подвздошной кишки слабо выражены и кратмовременны.

3. Синдром избыточной колонизации тонкой кишки, развивающийся на фоне иммунодефицитного состояния, проявляется лимфопенией со снижением доли Т- и В - лимфоцитов, угнетением функциональной и фагоцитарной активности лейкоцитов, недостаточностью дренажно -детоксикационных процессов в регионе лимфосбора (критериями этого являются гипоплазия пейеровой бляшки и верхнего мезентериального лимфатического узла, преобладание атгенуированных лимфоидных узелков, уменьшение числа средних и малых лимфоцитов и развитие эндотоксикоза), что приводит к обсеменению верхних отделов тонкой кишки условно патогенной флорой.

4. Использование пектиновой пищевой добавки способствует нормализации площадей интерстициальных путей в стенке кишки и центрального лимфатического сосуда кишечной ворсинки; уменьшению лимфо -плазмоцитарной инфильтрации всех слоев; появлению в пейеровой бляшке и регионарном лимфатическом узле лимфоидных узелков с герминативными центрами, повышению в них доли промежуточных и зрелых форм плазматических, ретикулярных клеток, макрофагов, клеток в митозе, перестройке его в компактный морфотип, что свидетельствует о лимфоп-

ротекторном и лимфостимулирующем действии ПЕПИДОЛа, несмотря

на сохраняющуюся гипоплазию.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Состояние слизистой оболочки желудка и частота инфицирования H. pilori у детей поданным биопсийного исследования ! М.Н. Хари-нова, Я.Н. Либман, О.В. Васильева и др. //Омский научный вестник, 2002. - №12. - С.102-103.

2. Клинико - морфологическая характеристика обструкгивных уропа-тийудетей/В.М. Никонов, О.В. Васильева, М.О. Куркина//Омский научный вестник, 2002.-№12.-С. 117-119.

3. Анатомические и функциональные критерии адекватности дренаж-но-детоксикационной функции лимфатической системы / И.Н. Пута-лова, Д.Е. Батушенко, С.Н. Широченко, О.В. Васильева и др. //Вопросы морфологии и клиники: Материалы Республиканской научной конференции с международным участием «Современные проблемы теоретической и клинической морфологии». - Алматы, 2002. - С. 266-268.

4. Батушенко Д. Е. Морфологические и биохимические критерии эффективности лимфатической системы в эксперименте / Д.Е. Батушенко, С.Н. Широченко, О.В. Васильева //Успехи современного естествознания, 2003. -№6.-С.110-111.

5. Васильева О.В. Лимфатический регион тонкой кишки при синдроме избыточной колонизации и в условиях коррекции пектином растительного происхождения в эксперименте /О.В. Васильева, И.Н. Пу-талова// Проблемы лимфологии и интерстициального массоперено-са. Труды ГУ НИИКиЭЛ СО РАМН. - Новосибирск, 2004. - Т.10. -4.1.- С. 107-111.

6. Путалова И.Н. Морфологические и функциональные критерии адекватности лимфатической системы (тезисы) / И.Н. Путалова, Д. Е. Батушенко, О.В. Васильева, Е.Г. Буданов // УП Конгресс Международной ассоциации морфологов. -Казань. - Морфология. 2004. - С. 102.

7. Способ моделирования острого гнойного пиелонефрита: пат 2188456 Рос.

Федерация: МПК7 G 09 В 23/28 /Ситко Л.А., Рейс Б. А., Васильева О.В. и др., заявитель и патентообладатель Омская гос. Мед. Акад.; заявл. 11. 01.2000; опубл .27.08.2002, Бюл. №24; преоритет 11.01.2000. - 6с.

8. Способ моделирования острой кишкечной инфекции: заявка на изобретение 2004100928 1. 02. 2004 / Путалова И.Н., Васильева О.В., Чеснокова М.Г., Клишевич В.П.

На правах рукописи

Васильева Ольга Валентиновна

ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ АНАТОМИЯ ЛИМФАТИЧЕСКОГО РЕГИОНА ПОДВЗДОШНОЙ КИШКИ В НОРМЕ И ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ВАРИАНТАХ НАРУШЕНИЯ МИКРОБНОГО РАВНОВЕСИЯ (экспериментальное исследование)

14.00.02 - анатомия человека

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Новосибирск - 2005

Лицензия ЛР№ 020845

Подписано в печать 21.12.04 Формат 60x84/16 Бумага офсетная П.л.-1,0 Способ печати - оперативный Тираж 100

Издательско-полиграфический центр ОмГМА 644099 г. Омск, ул. Ленина, 12 тел: 23-05-98

»--36 8

РНБ Русский фонд

2006-4 2380

Синдром избыточного бактериального роста в тонкой кишке многие авторы расценивают как одно из наиболее часто встречающихся клинических состояний, которое сопровождает практически все заболевания желудочно — кишечного тракта, возникает у онкологических больных, после инфекционных заболеваний и хирургических вмешательств на органах брюшной полости, при заболеваниях почек, на фоне применения цитостатиков и антибиотиков, у реконвалесцентов после острых вирусных и бактериальных инфекций внекишечной локализации и во многих других случаях (Кудииова Т.И. и др., 1975; Карпов П.Ф. и др., 1989; Румянцев В.Г., 1999; Шептулин А.А., 2000; Парфенов А.И., 2002; Машаев С.И., 2003). Несмотря на широкое распространение, диагностика синдрома избыточного роста бактерий трудна, а традиционное лечение, включающее антибактериальную и заместительную терапию, малоэффективно и не приносит желаемых результатов (Гребнев A.JL, Мягкова Л.П., 1996; Коршунов В.М. и др., 1996; Михайлова Т.Л. и др., 1999; Шептулин А.А., 1999; Григорьева Г.А.,2001).

В настоящее время хорошо известно, что в любой патологический процесс вовлекаются структуры лимфатической системы (Бородин Ю.И. и др., 1993 - 2004; Левин Ю.М. и др., 1998 - 2004), в том числе и при повреждении стенки тонкой кишки. При этом функциональная нагрузка на лимфатическую систему многократно возрастает. От состояния дренажно — детоксикационной функции лимфатической системы зависят прогноз и исход любого воспалительного процесса (Левин Ю.И., 2001; Бородин Ю.И., 2002). Для протезирования и восстановления функции лимфатической системы при повреждении ее применяют сорбенты. Ю.И. Бородиным и его учениками (1995 - 2004) разработана концепция, в основу которой положен принцип сходности сорбентной терапии и естественного лимфодренажа тканей.

Сорбционными свойствами обладают пищевые добавки, содержащие пектин и пищевые волокна. В последние годы их стали применять в комплексном лечении дисбиоидных состояний (Bengmark S., 1996; Fuller R., Gibson G.R., 1997; Шендеров Б.А., 1998; Златкина A.P., 1999; Михайлова ТЛ. и др., 1999; Маянский А.Н., 2000; Klessen et al., 2003). Одним из препаратов, содержащих пектин, является пепидол. Несмотря на широкое применение его в медицинской практике, недостаточно изученным остается механизм его действия.

Морфологические и функциональные изменения в лимфатическом регионе тонкой кишки в условиях синдрома избыточного роста бактерий и после применения пепидола не изучено, что и послужило основой для настоящего исследования.

Цель исследования: Установить особенности структурно -функциональных преобразований лимфатического региона подвздошной кишки при различных вариантах нарушения микробного равновесия и определить эффективность ПЕПИДОЛа, используемого для коррекции.

Задачи исследования.

1. Изучить микроанатомическую организацию стенки подвздошной кишки, пейеровой бляшки и регионарного лимфатического узла у здоровых половозрелых крыс.

2. Провести сравнительный анализ структурно - клеточных показателей лимфатического региона подвздошной кишки при инфицировании здоровых крыс.

3. Создать модель избыточного роста бактерий в тонкой кишке у крыс и выявить морфологические особенности различных звеньев лимфатического региона подвздошной кишки.

4. Изучить реакцию лимфатического региона подвздошной кишки при синдроме избыточного роста бактерий после применения ПЕПИДОЛа.

5. Используя комплекс клинико - лабораторных методов исследования, оценить эффективность использования ПЕПИДОЛа.

Новизна исследования.

1. Получены новые количественные данные о структурно — клеточной организации различных звеньев лимфатического региона подвздошной кишки здоровых половозрелых крыс.

2. Впервые в комплексе изучена функциональная анатомия лимфатического региона подвздошной кишки при различных вариантах нарушения микробного равновесия, что позволило провести сравнительный анализ степени и характера морфо - функциональных преобразований основных звеньев региона и оценить возможность направленной лимфосанации.

3. Показано, что при инфицировании крыс условно патогеннной флорой изменения клинико - лабораторных и морфологических показателей слабо выражены и кратковременны, что обусловлено адекватностью дренажно -детоксикационной функции лимфатического региона подвздошной кишки.

4. Впервые создана модель избыточного бактериального роста в тонкой кишке у крыс. Установлено, что в динамике синдрома избыточного роста бактерий развивалась недостаточность дренажно — детоксикационных процессов в кишке, о чем свидетельствует появление эндотоксикоза.

5. Выявлено лимфопротекторное и лимфостимулирующее действие пепидола в условиях синдрома избыточного роста бактерий в тонкой кишке.

Теоретическое и практическое значение работы.

Проведенный комплексный анализ морфо - функциональных особенностей лимфатического региона подвздошной кишки крыс в норме и при инфицировании условно патогенной флорой позволил выявить стереотипные структурные изменения различных звеньев его, что и объясняет быстрое восстановление структурно — клеточных показателей и высокую резистентность организма животных. Синдром избыточной колонизации бактерий в тонкой кишке на фоне иммунодефицита, морфологическим критерием которого является гипоплазия пейеровой бляшки и верхнего мезентериального лимфатического узла, сопровождается высоким обсеменением тонкой кишки условно патогенной флорой, что является свидетельством недостаточности дренажно — детоксикационных процессов в регионе. Выявленные особенности обусловливают необходимость разработки и проведения мероприятий, направленных на лимфосанацию. Полученные данные о положительном влиянии ПЕПИДОЛа на функциональную активность различных звеньев лимфатического региона подвздошной кишки и микроанатомическую организацию ее стенки позволяют рекомендовать эту пищевую добавку для коррекции дисбиоидных состояний. Эти сведения могут быть использованы в терапии внутренних и инфекционных болезней, в учебном процессе, для научно — исследовательской работы.

Положения, выносимые на защиту: 1. Лимфатический регион подвздошной кишки у здоровых крыс характеризуется преобладанием доли интерстициальных пространств слизистой оболочки над таковой в мышечной, широким просветом центрального лимфатического сосуда кишечной ворсинки; доминированием площади вторичных лимфоидных узелков в структуре пейеровой бляшки; равнозначными значениями площадей Т - и В - зависимых зон и промежуточным морфотипом регионарного лимфатического узла. При различных вариантах нарушения микробного равновесия направленность деструктивных и восстановительных процессов в лимфатическом регионе стереотипна: интерстициальные пути - сосудистое звено — пейерова бляшка - регионарный лимфатический узел; нормализация структурно — функциональных показателей звеньев лимфатического региона возможна при высокой резистентности организма или направленной лимфосанации.

2. Модель синдрома избыточной колонизации бактерий в тонкой кишке максимально приближена к клиническому течению, об иммунодепрессивном состоянии организма свидетельствуют лимфопения со снижением доли Т - и В - лимфоцитов, на недостаточность дренажно - детоксикационных процессов в лимфатическом регионе указывает эндотоксикоз и массивное обсеменение тонкой кишки условно патогенной флорой.

3. Применение ПЕПИДОЛАа на фоне синдрома избыточного роста бактерий, благодаря эффектам лимфопротекции и лимфостимуляции, способствует нормализации площадей интерстициальных пространств, центрального лимфатического сосуда; увеличению числа и площади вторичных лимфоидных узелков в пейеровой бляшке, перестройке верхнего мезентериального лимфатического узла в компактный морфотип и восстановлению дренажно - детоксикационной функции лимфатического региона, что подтверждается устранением эндотоксикоза.

выводы

1 .Функциональная анатомия лимфатического региона подвздошной кишки характеризуется изменением соотношения площадей интерстициальных путей, лимфатических сосудов, структурно - клеточными преобразованиями пейеровой бляшки и регионарного лимфатического узла. Об адекватности дренажно — детоксикационных процессов свидетельствуют: отсутствие эндотоксикоза, нормальные значения гематологических и иммунологических ( высокая функциональная и фагоцитарная активность лейкоцитов) показателей, отсутствие избыточного роста бактерий в проксимальных отделах топкой кишки.

2. При инфицировании здоровых крыс культурой Klebsiellae pneumoniae структурно - клеточные преобразования лимфатического региона направлены на усиление дренажно - детоксикационной функции, они выражаются расширением интерстициальных путей и центрального лимфатического сосуда, увеличением количества межэпителиальных лимфоцитов, возрастанием площади вторичных лимфоидных узелков в пейеровой бляшке и регионарном лимфатическом узле с повышением доли макрофагов, клеток в митозе, эозинофилов, бластных форм, поэтому изменения в стенке подвздошной кишки слабо выражены и кратковременны.

3. Синдром избыточной колонизации тонкой кишки, развивающийся на фоне иммунодефицитного состояния, проявляется лимфопенией со снижением доли Т- и В - лимфоцитов, угнетением функциональной и фагоцитарной активности лейкоцитов, недостаточностью дренажно -детоксикационных процессов в регионе лимфосбора (критериями этого являются гипоплазия пейеровой бляшки и верхнего мезентериального лимфатического узла, преобладание аттенуированных лимфоидных узелков, уменьшение числа средних и малых лимфоцитов и развитие эндотоксикоза), что приводит к обсеменению верхних отделов тонкой кишки условно патогенной флорой.

4.Использование пектиновой пищевой добавки способствует нормализации площадей интерстициальных путей в стенке кишки и центрального лимфатического сосуда кишечной ворсинки; уменьшению лимфо - плазмоцитарной инфильтрации всех слоев; появлению в пейеровой бляшке и регионарном лимфатическом узле лимфоидных узелков с герминативными центрами, несмотря на сохраняющуюся гипоплазию, повышению в них доли промежуточных и зрелых форм плазматических, ретикулярных клеток, макрофагов, клеток в митозе, перестройке его в компактный морфотип, что свидетельствует о лимфопротекторном и лимфостимулирующем действии ПЕПИДОЛа.