Автореферат и диссертация по медицине (14.00.02) на тему:Регионарные лимфатические узлы конечности при применении лишайника Cetraria cucullata в условиях физиологической жизнедеятельности и при воспалении

На правах рукописи

БЕЛОВА Надежда Владимировна

РЕГИОНАРНЫЕ ЛИМФАТИЧЕСКИЕ УЗЛЫ КОНЕЧНОСТИ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ ЛИШАЙНИКА

CETRARIA CUCULLATA В УСЛОВИЯХ ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ ЖИЗНЕДЕЯТЕЛЬНОСТИ И ПРИ ВОСПАЛЕНИИ (экспериментальное исследование)

14.00.02- анатомия человека 03.00.25- гистология, цитология, клеточная биология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Новосибирск 2004

Работа выполнена в лаборатории общей патологии и физиологии лимфатической системы НИИ клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН (г. Новосибирск).

Научные руководители:

доктор медицинских наук, профессор Асташов

Вадим Васильевич доктор медицинских наук, профессор Горчаков

Владимир Николаевич

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Иванов

Владимир Викторович кандидат медицинских наук, доцент Рынгач

Галина Михайловна

Ведущая организация:

Сибирский государственный медицинский университет (г. Томск)

Защита состоится «____»1 2 ОКТ 200^__2004 года

в_часов на заседании диссертационного совета Д 208.062.05

при Новосибирской государственной медицинской академии МЗ РФ (630091, Новосибирск, Красный проспект, 52).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Новосибирской государственной медицинской академии (630091, Новосибирск, Красный проспект, 52)

Автореферат разослан «_»_2004 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук, профессор А. В. Волков

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования

В настоящее время количество нагноительных заболеваний мягких тканей не имеет тенденции к уменьшению. В структуре хирургической патологии 23% составляют гнойные хирургические заболевания, 16,4% - гнойные осложнения случайных ран (Девятов В.В. с соавт., 1992; Французов В.Н. с соавт., 1999). По данным М.В. Казарезова (1995) более 20% всех гнойных заболеваний составляют тяжелые гнойно-септические поражения конечностей, что обусловливает актуальность изучения патоморфологии данного заболевания для современной медицины.

В остром периоде любого воспалительного заболевания происходят глубокие расстройства гемо- и лимфодинамики, создающие благоприятные условия для накопления в интерстиции всех органов и тканей продуктов клеточного метаболизма и токсинов. (Куприянов В.В. и др., 1983; Кулиев Ш.Б., 1987). Транспорт последних из патологического очага через дренирующие лимфатические сосуды осуществляется непосредственно в регионарные лимфатические узлы. Для нижней конечности узлами первого порядка являются паховые, второго порядка - подвздошные (Привес М.Г., 1978; Чепеленко Г.В., 1983; Севрюкова Н.Ф., 1981).

В последнее время в лечении воспалительных заболеваний широкое распространение получили методы сорбционной терапии как аппликационной, так и в качестве энтеросорбции, направленные на санацию тканевого интерстиция, восстановление адекватного и более раннего лимфатического дренажа (Любарский М.С и др., 1994; Маринкин И.О., 1995; Рачковс-кая Л.Н.,1994,1996). В качестве природного сорбента могут быть использованы лишайники. Они обладают сорбционными свойствами, обусловленными наличием пектиновых веществ - высокомолекулярных биополимеров (Рябкова К.А., 1981), а также анальгезирующим действием, антимикробными и тонизирующими свойствами. Все перечисленное обусловливает актуальность применения лишайников в лечении раневого воспалительного процесса.

Отсутствие точных научных данных об особенностях структурных преобразований в паховых и подвздошных лимфатических узлах в условиях аппликационного и энтерального применения лишайника как в физиологических условиях жизнедеятельности, так и при развитии раневого воспалительного процесса обусловливает актуальность работы с научной и практической точек зрения.

Цель работы

Выявить особенности структурно-функциональной организации регионарных лимфатических узлов конечности и кожно-мышечного лоскута в физиологических условиях жизнедеятельности, при раневом воспалительном процессе мягких тканей бедра и в условиях коррекции лишайником Cetraria cucullata. , .

РОС НАЦИОНАЛЬНАЯ БНБЛ«ОТ£М

Задачи

1. Изучить морфофункциональную организацию пахового и подвздошного лимфатических узлов в физиологических условиях.

2. Изучить морфофункциональную организацию пахового и подвздошного лимфатических узлов в в динамике воспаления мягких тканей конечности

3. Исследовать морфофункциональное состояние паховых и подвздошных лимфатических узлов, кожно-мышечного лоскута в динамике раневого воспалительного процесса мягких тканей конечности в условиях аппликационной коррекции лишайником Cetraria cucullata.

4. Охарактеризовать морфофункциональные изменения паховых и подвздошных лимфатических узлов, кожно-мышечного лоскута в динамике раневого воспалительного процесса мягких тканей конечности в условиях эн-теральной коррекции лишайником Cetraria cucullata.

Новизна исследования

В работе впервые дана характеристика особенностей структурной организации паховых и подвздошных лимфатических узлов при применении лишайника Cetraria cucullata в физиологических условиях жизнедеятельности. Показано, что аппликации лишайника на конечности вызывают наиболее выраженные структурные преобразования в регионарных лимфатических узлах первого порядка (паховый), а энтеральное введение - в регионарных лимфатических узлах второго порядка (подвздошный).

Впервые предоставлены данные о структурных и цитологических преобразованиях в регионарных лимфатических узлах конечности при аппликационной коррекции раневого воспалительного процесса лишайником Cetraria cucullata. Показано, что аппликационное применение лишайника оказывает лимфокоррегирующее действие и способствует восстановлению транспортной функции регионарных лимфатических узлов.

Впервые проведен сравнительный анализ структурных изменений в паховом и подвздошном лимфатических узлах при энтеральном использовании лишайника Cetraria cucullata для коррекции воспаления мягких тканей задней конечности и установлено, что энтералыюе применение лишайника способствует восстановлению структурно-функциональных взаимоотношений в паховых и подвздошных лимфатических узлах.

Показано, что при различных способах введения лишайника для коррекции экспериментального раневого воспалительного процесса происходят разнонаправленные изменения в структуре лимфатических узлов различной локализации, что определяет способ применения лишайника.

Практическая значимость

Доказано, что лишайник Cetraria cucullata обладает выраженным лимфо-коррегирующим действием при воспалении мягких тканей конечности. Детальное изучение структурно-функциональной организации регионарных лимфатических узлов I и II порядка при раневом воспалительном процессе мягких тканей поможет оценить барьерно-детоксикационную и иммунопоэ-тическую функции регионарных лимфатических узлов в динамике патологи-

ческого процесса и расширить имеющиеся представления о патоморфологии данного патологического состояния. Полученные сведения, о различной степени структурных преобразований в регионарных по отношению к раневому воспалительному процессу лимфатических узлах, могут быть использованы для оценки оптимальности выбранного метода лечения.

Результаты исследования структуры регионарных лимфатических узлов конечности при различных способах применения лишайника в коррекции воспаления мягких тканей бедра и сравнительная оценка эффективности их позволяет рекомендовать их к применению в клинической медицине в качестве вспомогательного средства, обладающего лимфокоррегирующим и сор-бционным действием.

Положения, выносимые на защиту

1. Структурная организация регионарных лимфатических узлов задней конечности при аппликационном и энтеральном применении лишайника в физиологических условиях жизнедеятельности экспериментальных животных свидетельствует об активации лимфопролиферативной функции.

2. Воспаление мягких тканей задних конечностей вызывает одновременные структурные преобразования в паховых и подвздошных лимфатических узлах, выраженность которых зависит от регионарной локализации и функциональной специализации лимфатических узлов и стадии процесса.

3. Аппликационное применение лишайника при раневом воспалении мягких тканей задней конечности способствует более выраженному восстановлению структурной организации регионарного лимфатического узла первого порядка-пахового (корково-мозгового соотношение, клеточный состав), увеличивает размеры Т-зависимой зоны в лимфатических узлах второго по-рядка-подвздошных, в ране интенсивно уменьшает отек и инфильтрацию подлежащих тканей.

4. Энтералыюе введение лишайника при раневом воспалении мягких тканей задней конечности активирует лимфопролиферативную функцию паховых и подвздошных лимфатических узлов (увеличение размеров коркового вещества), способствует активации пролиферативных процессов в ране.

Апробация результатов исследования

Основные результаты исследования доложены и обсуждены: на Научно-практической конференции с международным участием «Природные минералы на службе человека», Новосибирск, 1999; Международном симпозиуме «Проблемы экспериментальной, клинической и профилактической лимфологии», Новосибирск, 2000; Научной сессии, посвященной 65-летию Новосибирской государственной медицинской академии, Новосибирск, 2000; II молодежной научной конференции СО РАМН «Фундаментальные и прикладные проблемы современной медицины», Новосибирск, 2000; Научно-практической конференции «Современные проблемы курортологии и физиотерапии», Барнаул, 2000; III молодежной научной конференции СО РАМН «Фундаментальные и прикладные проблемы современ-

ной медицины», Новосибирск, 2001; Научной конференции с международным участием «Проблемы лимфологии и интерстициального массоперено-са», Новосибирск, 2004.

Публикации: По теме диссертации опубликовано 9 работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 167 страницах машинописного текста, содержит 21 рисунок, 16 таблиц, 9 графиков, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, 3 глав собственных исследований с подглавами, обсуждения, выводов, списка литературы, содержащего 187 отечественных и иностранных источников. Весь материал, представленный в диссертации, получен, обработан и проанализирован лично автором.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материал и методы исследования

В качестве экспериментальных животных для исследования были выбраны беспородные самцы крыс массой 180-200 гр. Работа выполнена на 90 животных, которых разделили на следующие группы: 1- интактные животные (контроль); 2 и 3 - животные с экспериментальным раневым воспалением мягких тканей конечности в динамике; 4 - интактные животные на фоне аппликационного применения лишайника; 5 и 6 - животные с экспериментальным раневым воспалением мягких тканей конечности на фоне аппликационного применения лишайника в динамике; 7 -интактные животные на фоне энтерального применения лишайника; 8 и 9 - животные с экспериментальным раневым воспалением мягких тканей конечности на фоне энтералыюго применения лишайника в динамике процесса.

Гнойную рану моделировали по методике Данилиной Е.М. и др. (1983). На боковой поверхности бедра животного наносилась кожная рана размером 1,5 х 1,5 см, мышечный массив некротизировался введением 0,5 мл 10% раствора хлористого кальция, в качестве обезболивания применялась ингаляция диэтиловым эфиром. На 3-е сутки после нанесения раны формировался очаг воспаления с обильным гнойным отделяемым и пе-кротизированными участками кожи, подкожной клетчатки, мышечной ткани. С этого момента вели отсчет времени и начинали лечение.

В качестве лечебного средства использовался измельченный лишайник Cetraria cucullata, коррекция проводилась ежедневно во всех группах в течение 6-и суток, при проведении лечебных процедур животных в наркоз не вводили. У животных с аппликационным применением лишайника последний накладывался через один слой марли на выстриженную и увлажненную физиологическим раствором поверхность задней конечности или на область раны после предварительного ее очищения 1 раз в день и закреплялся 3-я турами бинта. При энтералыюм применении животные получали дополнительно к стандартному рациону лишайник за 1,5 часа до первого кормления из расчета 20 мг/кг веса, ежедневно в течение 6-и

суток проводился туалет раны - обтирание поверхности и краев раны тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором, на рану накладывалась стерильная марлевая повязка. Животным с экспериментальным раневым воспалением мягких тканей конечности ежедневно в течение 6-и суток проводился туалет раны, накладывалась стерильная марлевая повязка.

В качестве объектов исследования были взяты паховые и подвздошные лимфатические узлы, а также кожно-мышечный лоскут, включающий пограничные участки воспаленных и здоровых тканей.

В паховых и подвздошных лимфатических узлах определяли относительную площадь мозгового и коркового вещества и составляющих их структур: первичных и вторичных лимфоидных узелков, межузелковой зоны, паракортикалыюй зоны, мозговых тяжей и синусов, а также краевого синуса, трабекул и капсулы. В каждой экспериментальной группе рассчитывали индекс соотношения удельных площадей коркового и мозгового вещества (К/М индекс), по которому определяли структурно-функциональный тип лимфатических узлов (Бородин Ю.И., 1986). Выделение структурных компонентов и дифференцировку клеточных форм в лимфатических узлах, гистологическое описание кожно-мышечного лоскута производили с учетом Международной гистологической номенклатуры (под ред. Семченко В.В., 1999).

Статистическая обработка полученных результатов производилась с вычислением средней арифметической (М) и ошибки средней арифметической (т). Полученные данные обрабатывались на компьютере Pentium с использованием пакета статистических программ Mikrosoft Exel 2000, Sigmaplot. Различия считали значимыми при Р<0,05 (Иванов Ю.И., Погорелюк О.Н.,1990).

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Морфофункционалыюе исследование пахового и подвздошного лимфатических узлов в динамике раневого воспалительного процесса мягких тканей конечности

Исследование структурной организации пахового и подвздошного лимфатических узлов на 6-е сутки раневого воспаления выявило, что наряду с процессом динамической недостаточности лимфооттока от дренируемой области (увеличены мозговые и краевой синусы) в регионарных лимфатических узлах возрастают площади мозговых тяжей, что обусловлено интенсивным антителообразованием в условиях острой воспалительной реакции и согласуется с литературными данными (Курганов С.А., 1998; Любарский М.С. с соавт, 1995). Выявлено увеличение относительных размеров первичных и вторичных лимфоидных узелков. При цитологическом изучении паховых и подвздошных лимфатических узлов показано, что в герминативных центрах значительно увеличивается процентное отношение бластов и клеток с пикнотическими ядрами, макрофагов и клеток с фигурами митозов.

Увеличиваются относительные размеры В-зависимой зоны, в то время как Т-зависимая зона уменьшается, что можно расценивать как усиление интенсивности В-зависимых иммунных реакций. Сходные структурно-клеточные преобразования в паховом и подвздошном лимфатических узлах на 6-е сутки раневого воспалительного процесса выражены в разной степени. Это объясняется тем, что для нижней конечности регионарными узлами первого порядка являются паховые, а подвздошные лимфатические узлы являются узлами второго порядка (Привес М.Г., 1978). Наиболее выраженные цитологические изменения выявлены в паховом лимфатическом узле, где в несколько раз возрастает содержание всех клеточных форм, появляются ней-трофильные лейкоциты в синусах мозгового вещества, здесь же увеличивается в 4 раза содержание тучных клеток. В исследованиях Юриной Н.А.(1989) показано стимулирующее действие медиаторов, выделяемых тучными клетками на процесс морфогенеза лимфоидной ткани, то есть активизируется лимфоцитопоэз и плазмоцитопоэз при усилении секреции тучных клеток. Увеличение количества тучных клеток также связывают и с иммуннологическими процессами в организме (Дурихин И.В., Вернет Ф.,1971, Труфакин В.А.и др.,1972, Marguardt D.L.,Gruber Н.Е.,1986). В мозговых тяжах и в паракортикальной зоне пахового лимфатического узла увеличивается количество незрелых форм клеток, макрофагов (в 4-5 раз) и ретикулярных клеток (в 1,5-2 раза), что позволяет говорить о повышенной антигенной стимуляции лимфатического узла. В очаге острого воспаления макрофаги приходят на смену мононуклеарам и запускают программу фиб-рогенеза и заживления дефекта (Маяиский Д.Н., 1995). Макрофагам придается большая роль и во взаимодействии Т- и В-лимфоцитов при иммунологических реакциях организма (Серов В.В., Шахтер А.Б., 1981;Маянс-кий Д.Н., 1995). В подвздошном лимфатическом узле цитологические преобразования выражены в меньшей степени, здесь во всех структурно-функциональных зонах возрастает содержание незрелых форм клеток, макрофагов и клеток с пикнотическими ядрами. Полученные результаты подтверждают активацию лимфатических узлов па фоне острой воспалительной реакции, что согласуется с данными других авторов (Бородин Ю.И., 1981; Любарский М.С., Летягин АЛО. и др., 1995;Маринкии И.О.ссоавт., 1995; Широченко С.Н., Путалова И.Н., 2003).

На 12 сутки воспалительного процесса изменения в регионарных лимфатических узлах приобретают разнонаправленный характер. Неравнозначная ответная реакция лимфатических узлов зависит не только от степени антигенного воздействия и регионариости данных узлов, но может быть обусловлена их различной функциональной специализацией. Так, в паховых лимфатических узлах, уменьшенная в размерах на 6-е сутки па-ракортикальиая зона (31,35±0,69) увеличивается к 12 суткам воспаления (36,15±0,81), здесь возрастает количество иммунобластов, средних лимфоцитов, тучных клеток. Изменения паракортикальной зоны по всей видимости, связаны с регуляцией обмена жидкости и форменных элементов

между кровеносным руслом и лимфатической тканью (Anderson A., 1976; Blau J., 1977; Азнаурян А.А.ссоавт., 1980), и рециркуляцией иммуно-компетентных клеток (GowansJ.,1959), так как именно через посткапиллярные венулы паракортикальной зоны лимфатических узлов осуществляется миграция лимфоцитов из крови в паракортикальную зону и наоборот (Herman P.et al, 1972; Cottier H. et al, 1973). Выявленное нами волнообразное изменение размеров паракортикальной зоны в динамике воспалительной реакции можно объяснить интенсивным обменом между кровеносным и лимфатическим руслами с поступлением или, наоборот, выходом лимфоцитов внутри данной структуры лимфатического узла. В герминативных центрах и в мозговых тяжах на 12-е сутки клеточная реакция выражена меньше, чем на 6-е сутки, относительная площадь В-за-висимой зоны уменьшается (на 6,7%) на фоне увеличения Т-зависимой зоны (на 15,3%), что позволяет говорить об усилении интенсивности к более поздним суткам воспаления Т-зависимого звна иммунного ответа. В подвздошном лимфатическом узле в динамике воспаления размеры вторичных лимфоидных узелков увеличиваются еще больше (в 1,7 раза). Гипертрофия вторичных лимфатических узелков в условиях воспалительной реакции свидетельствует об активной пролиферации и ускоренном созревании В-клеток, что характеризует иммунологическую активность лимфатических узлов всех групп (Сапин М.Р., 1978; Sainte-Marie G., 1990; Бородин Ю.И., Григорьев В.Н., 1983). Удельный вес В-зависимой зоны возрастает, а Т-зависимой зоны уменьшается. Увеличение относительной площади тяжей (на 9,6%) и синусов мозгового вещества в динамике воспаления сохраняется, но изменяется цитологический состав зон. Количественный состав клеточных элементов более близок к показателям интактной группы, чем на 6-е сутки воспалительного процесса за исключением числа зрелых плазмоцитов.

Выявленные структурно-клеточные преобразования лимфатических узлов свидетельствуют об активации всех функций лимфатического узла в ответ на увеличение количества поступающей от очага токсичной лимфы, содержащей большое количество продуктов клеточного и тканевого метаболизма, бактерий и тканевого детрита. Метаболические сдвиги в дренируемой области в динамике воспаления вызывают в регионарных лимфатических узлах морфофункциональные преобразования, направленные на увеличение объема внутриорганных путей транспорта лимфы, так как в расширенных мозговых синусах создаются более благоприятные условия для функционального лимфостаза, при этом активизируется транспорт лимфы из переполненных синусов в паренхиму узла и в мякотиые тяжи, где и происходит в дальнейшем ее биофизическая (барьерно-фильтрационная), биохимическая (ферментативная) и биологическая (иммунная) обработка (Бородин Ю.И., 1996). В то же время в ответ на регионарный эндотоксикоз развивается и выраженная клеточная реакция, свидетельствующая о напряженном иммунном ответе.

Морфофункциональное исследование пахового и подвздошного лимфатических узлов при аппликационном и энтералыюм применении лишайника Cetraria cucullata в физиологических условиях жизнедеятельности

Морфофункционалыюе исследование структуры пахового и подвздошного лимфатических узлов при аппликационном применении лишайника Cetraria cucullata показало увеличение относительной площади и активацию бласттраисформации лимфоцитов в Т-зависимой зоне, при этом выявлена тенденция к уменьшению В-зависимой зоны. В подвздошном лимфатическом узле этот процесс выражен в меньшей степени, чем в паховом, что связано с регионарностью лимфатических узлов относительно места аппликаций лишайника.

Исследование структурной организации пахового и подвздошного лимфатических узлов в условиях энтерального применения лишайника выявило, что они не изменили свою структурно-функциональную специализацию (корково-мозговой индекс пахового лимфатического узла 1,92+0,06, подвздошного - 1,27+0,04), однако наблюдалась тенденция к увеличению относительных размеров коркового вещества за счет паракортикалыюй зоны, особенно в подвздошном лимфатическом узле, что, видимо, связано с тем, что подвздошный лимфатический узел является висцерально-соматическим и у грызунов дренирует в том числе нижние отделы кишечника. В цитоархи-тектонике структурно-функциональных зон лимфатических узлов (особенно подвздошного) уменьшается количество незрелых форм лимфоидных клеток, исключение составляет лишь паракортикальиая зона, где выявлено увеличение содержания бластных форм клеток (на 27,0%). Подобные изменения паракортикалыюй зоны лимфатических узлов у интактных животных, принимавших лишайник, может косвенно свидетельствовать об активации Т-зависимого, клеточного звена иммунного ответа, как филогенетически более древнего и реагирующего практически на все экзогенные факторы, так как именно паракортикальная зона в лимфатическом узле является местом кооперативных взаимодействий Т и В лимфоцитов и макрофагов (Cottier H. et al., 1980; Fossum S., Ford W., 1985). В ней локализуются клетки, осуществляющие оперативную регуляцию иммунного ответа -Т-хелперы и Т-суп-рессоры (Rouse R. et al., 1982; Reesvan E. P. et. al., 1985). Относительные размеры структурных компонентов лимфатических узлов, ответственных за гуморальное звено иммунитета не имеют достоверных отличий от значений интактной группы животных.

Аппликационная коррекция лишайником Cetraria cucullata раневого воспалительного процесса

При морфологическом исследовании в паховом и подвздошном лимфатических узлах на 6-е сутки коррекции отмечено значительное уменьшение площади синусной системы узла как за счет относительной площади краевого (на 32,1% в паховом лимфатическом узле), так и мозговых синусов (на 9,8%-43,1%). Наблюдается уменьшение общего числа клеточных элементов в просвете синусов. По всей видимости это связанно с тем, что лишай-

ник, действуя как сорбент, обеспечивает дополнительный дренаж тканей, устраняя часть воспалительного экссудата с микроорганизмами, поэтому возможность распространения инфекции по лмфатическим сосудам уменьшается, тем самым улучшаются дренажно-детоксикационные функции регионарных лимфатических узлов. В паховом лимфатическом узле по сравнению с контролем Т-зависимая зона несколько уменьшена (на 7,3%), а В-зави-симая зона не отличается от контрольных показателей, но в цитоархитекто-нике ее выявлена активация клеточной пролиферации. По сравнению с группой без коррекции в структуре коркового вещества пахового лимфатического узла выявлено увеличение относительных размеров межузелковой зоны (в 2,2 раза) и уменьшение площади, занимаемой вторичными лимфоидными узелками (в 2,2 раза). В герминативных центрах увеличивается процентное содержание малых лимфоцитов, число всех остальных клеточных форм уменьшается, что приближает эти показатели к контролю. При исследовании относительных размеров мозгового вещества выявлено, что относительная площадьи мозговых тяжей и синусов уменьшена (на 9,8% и 17,8% соответственно), цитологическое исследование этих структур показало снижение процентного содержания незрелых форм клеток, макрофагов и клеток с пик-нотическими ядрами на фоне увеличения количества зрелых форм клеток по сравнению с аналогичными показателями группы животных, не получавших лечения. В отличие от пахового, в подвздошном лимфатическом узле на фоне аппликационной коррекции лишайником раневого воспалительного процесса Т-зависимая зона преобладает над В-зависимой. Уменьшение площади В-зависимой зоны происходит за счет первичных (в 1,7 раза), вторичных лимфоидных узелков (в 2,7 раза), и за счет тяжей мозгового вещества (в 1,4 раза), что можно расценивать как усиление интенсивности Т-зависимых иммунных реакций. Подвздошный лимфатический узел к 6-м суткам аппликационной коррекции относится к компактному типу структурно-функциональной специализации (корково-мозговой индекс 2,23±0,08). В структуре подвздошного лимфатического узла при лечении возрастает относительная доля трабекул по сравнению с контролем и воспалением без коррекции. При цитологическом исследовании во всех зонах обнаружено уменьшение про-лиферативной активности и увеличение числа зрелых форм клеток. В обоих узлах происходит изменение паренхиматозно-стромалыюго соотношения в пользу увеличения соединительно-тканного компонента.

К 12-м суткам при морфологическом исследовании пахового и подвздошного лимфатических узлов отмечено более выраженное восстановление их структуры по сравнению с 6-и сутками. Так, цитологический состав и размеры всех структурно-функциональных зон лимфатических узлов на 12-е сутки более приближены к данным группы иитактиых животных. Синусная система во всех группах лимфатических узлов, независимо от их функциональной специализации уменьшалась или не отличалась отданных в группе контроля, выраженного лимфостаза в синусах не отмечено. В паховом лимфа-тичеком узле величина корково-мозгового индекса при аппликационной

коррекции на 6-е сутки приближается (1,78±0,09), а на 12-е сутки практически не отличается (1,86±0,04) от показателей интактных животных, в структуре коркового вещества, в динамике аппликационного лечения, происходит перестройка наружных отделов коркового вещества (увеличение размеров межузелковой зоны на 56,7% и уменьшение площади вторичных лимфоидных узелков на 30,2%), при цитологическом исследовании в герминативных центрах выявлено увеличение зрелых форм лимфоидных клеток. В подвздошном лимфатическом узле площадь мозгового вещества уменьшается (на 20,8%), а коркового не отличается от контрольных данных, по величине корково-мозгового индекса (1,38±0,06) лимфатический узел относится к промежуточному типу структурно-функциональной специализации, что соответствует данным в группе контроля. В подвздошном лимфатическом узле происходит увеличение относительных размеров коркового вещества за счет межузелковой и паракортикальной зон (в 2,2 раза и 1,7 раза соответственно), при этом площадь лимфоидных узелков, особенно вторичных, меньше аналогичных данных в группе не леченных животных. В динамике воспаления на фоне коррекции относительная площадь краевого синуса прогрессивно уменьшается. Относительные размеры мозговых тяжей и синусов уменьшены. Цитологическое изучение лимфатического узла выявило во всех зонах однонаправленные изменения, а именно: увеличение числа зрелых форм клеток на фоне уменьшения количества макрофагов, клеток с пикнотическими ядрами и с фигурами митозов.

В обоих лимфатических узлах наблюдаются структурно-клеточные преобразования, свидетельствующие о снижении антигенной стимуляции из региона лимфосбора. В связи с тем, что структурно-клеточные преобразования пахового лимфатического узла в динамике воспаления на 12-е сутки свидетельствуют о более полном восстановлении функциональных потенций по сравнению с подвздошным лимфатическим узлом, то и на фоне аппликационной коррекции к 12-м суткам более выраженные преобразования отмечены именно в паховых лимфатических узлах.

Энтеральная коррекция лишайником Cetraria cucullata раневого воспалительного процесса

Изучение структурной организации пахового и подвздошного лимфатических узлов на 6-е сутки энтералыюй коррекции выявило, что в в обоих лимфатических узлах площадь коркового вещества достоверно не отличается от показателей у интактных животных, а мозговое вещество уменьшено в размерах -лимфатические узлы становятся более компактными, что позволяет в наибольшей степени подвергать афферентную лимфу биологической обработке, так как создаются оптимальные условия для фагоцитоза, накопления лимфоцитов и максимального сближения их с макрофагами (Бородин Ю.И., Григорьев В.Н., 1986). В лимфатических узлах произошли преобразования , сходные в целом с перестройкой на фоне аппликационной терапии, но для пахового лимфатического узла важным отличием является увеличе-

ние площади, занимаемой Т-зависимой зоной (на 44,0%) и уменьшение В-зависимой зоны (на 23,4%) на 6-е сутки энтералыюй коррекции. Однако структура и клеточный состав пахового лимфатического узла восстанавливаются в большей степени, чем подвздошного. В паховом лимфатическом узле увеличивается площадь межузелковой (в 2,5 раза) и паракортикальной зон, уменьшаются размеры лимфоидных узелков (первичных - в 1,3 раза, вторичных - в 2,3 раза), площадь соединительно-тканных элементов несколько увеличена (капсулы в 1,5 раза, трабекул в 2,1 раза). Цитологический состав герминативных центров, паракортикальной зоны и мозговых тяжей отличается от показателей интактных животных незначительно. В подвздошном лимфатическом узле морфологические преобразования сходны с изменениями в паховом узле, также увеличивается площадь Т-зависимой зоны (на 55,2%), в цитологическом составе ее наблюдается активация клеточной пролиферации, что может косвенно свидетельствовать об активации Т-клеточ-ного звена иммунитета. Во всех зонах обнаружено малое количество макрофагов и бластных форм клеток на фоне увеличения количества зрелых клеточных форм.

На 12-е сутки морфофуикционалыюе исследование выявило, что по сравнению с группой животных без коррекции, в структуре регионарных лимфатических узлов уменьшены в размерах вторичные лимфоидные узелки, в паховом в основном за счет короны (на 42,9%), а в подвздошном за счет герминативных центров (в 3,2 раза), на фоне увеличения межузелковой и паракор-тикальной (Т-зависимой) зон. В динамике процесса в паховом лимфатическом узле площадь соединительно-тканных элементов уменьшается (на 11,8%), но не достигает контрольных показателей. В паховом лимфатическом узле к 12-м суткам размеры Т-зависимой и В-зависимой зон не отличаются от данных интактных животных. Анализ клеточных изменений лимфатического узла первого порядка (пахового) показал уменьшение активности процессов бла-сттрансформации и макрофагалыюй реакции во всех зонах лимфатического узла по сравнению с группой без лечения. В подвздошном лимфатическом узле Т-зависимая зона преобладает над В-зависимой, которая остается уменьшенной в размерах (на 14,5%), но в динамике коррекции наблюдается тенденция к ее увеличению. Морфологические и цитологические изменения в регионарном лимфатическом узле второго порядка (подвздошном) сходны с преобразованиями в паховом, но выражены в меньшей степени.

Изучение микроанатомического состояния регионарных лимфатических узлов при энтералыюй коррекции раневого воспалительного процесса лишайником показало восстановление их структурно-функциональной организации, выраженное в разной степени, что зависит от разной степени антигенной нагрузки, воспринимаемой лимфатическими узлами в связи с регио-нарностью к месту патологического процесса. Выявленные изменения можно объяснить активацией собственных защитных функций лимфатических узлов на фоне общей детоксикации организма и подавления раневого воспалительного процесса лишайниковыми кислотами.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В динамике гнойного воспалительного процесса регионарные лимфатические узлы, как первого, так и второго порядка реагируют однотипно. Выявленные структурно-клеточные преобразования лимфатических узлов свидетельствуют об активации всех функций лимфатического узла в ответ на увеличение количества поступающей от очага токсичной лимфы. Метаболические сдвиги в дренируемой области вызывают в регионарных лимфатических узлах морфофункциональные преобразования и выражешгую клеточную реакцию, свидетельствующие о напряженном иммунном ответе.

Использование лишайника различными способами (аппликационно, эн-тералыю) позволяет в значительной степени снизить нагрузку на дренажно-детоксикационную функцию регионарного лимфатического аппарата конечности. Это может быть связано как с антибиотическим действием лишайника, обусловленным специфическим химическим составом используемого в работе вида (ВшИпга Б., 1954; Голубкова Н.С., 1977; Шапиро И. А., 1991; Решетникова А.В., 1993), так и с сорбционным действием последнего (Бен-дер К.И., 1988; Асеева Т.А., 1991; Минаева В.Г.,1991).

Причем в паховом и подвздошном лимфатических узлах в динамике воспаления более активно реагирует В-зависимая зона, на фоне аппликационной коррекции в обоих узлах в большей степени реагирует Т-зависимая зона, при энтералыюй коррекции в паховом лимфатическом узле более выражено изменяется активность Т-зависимой зоны, а в подвздошном В-зависимой зоны.

Результаты исследования структуры регионарных лимфатических узлов конечности при различных способах применения лишайника в коррекции воспаления мягких тканей бедра и сравнительная оценка эффективности их позволяет рекомендовать их к применению в клинической медицине в качестве вспомогательного средства, обладающего лимфокоррегирующим и сорбционным действием.

ВЫВОДЫ

1. При аппликационном и энтералыюм применении лишайника в физиологических условиях жизнедеятельности выявлены характерные структурные преобразования в регионарных лимфатических узлах конечности, свидетельствующие об активации их лимфопролиферативной функции (увеличиваются размеры Т-зависимой зоны, числа незрелых лимфоидных клеток). Аппликации лишайника на конечности в условиях физиологической жизнедеятельности вызывает наиболее выраженные структурные преобразования (зональность, клеточный состав) в регионарных лимфатических узлах конечности первого порядка (паховый), а энтералыюе введение - в регионарных лимфатических узлах второго порядка (подвздошный).

2. Выявлено, что на 6-е сутки воспаления мягких тканей задней конечности структурные преобразования (зональность, клеточный состав) в регионарных лимфатических узлах первого порядка более выражены, чем в лим-

фатических узлах второго порядка. В паховых лимфатических узлах структурные изменения свидетельствуют об активации барьерно-детоксикацион-ной и лимфопроли-феративной функций - увеличено число незрелых лимфо-идных клеток, клеток с фигурами митозов, макрофагов; в подвздошном лимфатическом узле активизируется транспортная функция - увеличиваются размеры краевого и мозговых синусов, содержание нейтрофильных грану-лоцитов на фоне уменьшения размеров паракортекса.

3. Показано, что на 12-е сутки воспаления мягких тканей задней конечности более выражены изменения в структуре (зональность, клеточный состав) регионарного лимфаического узла второго порядка. В подвздошных лимфатических узлах структурные преобразования свидетельствуют об активации транспортной и детоксикационной функций -фрагментированный мор-фотип, увеличение размеров мозгового вещества, содержания незрелых плаз-моцитов, макрофагов, клеток с пикнотическими ядрами; в паховом лимфатическом узле наблюдается активация лимфопоэтической функции - увеличиваются наружные отделы коркового вещества (вторичные лимфоидные узелки), число незрелых лимфоидных клеток в них.

4. При воспалении мягких тканей бедра (6-е сутки) аппликационное применение лишайника оказывает лимфокоррегирующее действие и способствует восстановлению структурно-функциональных взаимоотношений в регионарных лимфатических узлах: в паховом лимфатическом узле восстанавливается соотношение коркового и мозгового вещества, увеличиваются размеры стромальных соединительнотканных компонентов (капсула, трабекулы); в подвздошном лимфатическом узле увеличиваются размеры Т-зависимой зоны, уменьшается площадь наружных отделов коркового вещества (вторичные лимфоидные узелки).

5. В регионарных лимфатических узлах при воспалении мягких тканей задних конечностей (12-е сутки) в условиях аппликации лишайника выявлены преобразования, свидетельствующие о выраженном восстановлении их структурно-функциональной специализации: в паховом лимфатическом узле восстанавливается цитоархитектоника в структурно-функциональных зонах - увеличивается количество зрелых клеточных форм; подвздошный лимфатический узел по функциональной специализации соответствует промежуточному морфотипу, Т-зависимая зона увеличена, В-зависимая зона уменьшена (за счет вторичных лимфоидных узелков и мозговых тяжей).

6. Энтералыюе приеменение лишайника в условиях раневого воспалительного процесса мягких тканей (6-е сутки) обладает выраженным лимфо-коррегирующим действием на структурную организацию регионарных лимфатических узлов: паховый и подвздошный лимфатические узлы соответствуют выраженному компактному морфотипу, в паховом лимфатическом узле корковое вещество преобладает над мозговым, изменяется лимфопоэ-тическая функция - увеличиваются размеры Т-зависимой зоны, уменьшаются размеры В-зависимой зоны и возрастает количество зрелых лимфоидных клеток в ней; в подвздошном лимфатическом узле увеличиваются от-

носительные размеры паракортикальной (Т-зависимой) зоны и коркового плато.

7. При воспалительном процессе мягких тканей конечности в условиях энтерального применения лишайника на 12-е сутки в большей степени восстанавливается структурная организация регионарного лимфатического узла первого порядка (паховый). В паховом и подвздошном лимфатических узлах выявлена выраженная тенденция к восстанновлению структурно-функциональной организации-уменьшается площадь мозгового вещества и В-зависимой зоны, где уменьшено количество незрелых форм лимфоидных клеток, макрофагов и клеток с пикнотическими ядрами.

8. В коже и подлежащих тканях задней конечности в динамике воспаления (6-е и 12-е сутки) в условиях коррекции лишайником выявленные особенности структурных преобразований зависят от способа коррекции: при аппликационном способе уменьшение отека и инфильтрации подлежащих тканей происходит интенсивнее, при энтеральном применении лишайника отмечено более активное развитие грануляционной и эпителиальной тканей.

Внедрение результатов в практику

Результаты исследований динамики морфофункциональных преобразований регионарных лимфатических узлов конечности первого и второго порядка при воспалительном процессе внедрены в лекционный курс и практические занятия со студентами на кафедре фундаментальной медицины НГУ по курсу патологическая анатомия (630090, Новосибирск, ул. Пирогова, 2). Способ аппликационного применения лишайника при развитии раневого воспалительного процесса мягких тканей бедра внедрен в практику научно-исследовательской работы лаборатории ультраструктурных исследований ГУНИИКи-ЭЛ СОРАМН (630117, Новосибирск, ул. Академика Тимакова, 2).

Список работ Беловой Н.В., опубликованных по теме диссертации:

1. Профилактические возможности сочетанного применения литовита и лишайника при экзотоксикозе // Природные минералы на службе челове-ка.(Минеральная среда и жизнь): Материалы научно-практической конференции с международным участием. - Новосибирск, 1999г.-С.167-169. (со-авт. Черненко Г.Ф., Горчаков В.Н.)

2. Исследование биохимических показателей крови и лимфы в условиях моделирования воспалительного процесса и его коррекции Cladina stellaris и Cetraria cucullata. // Фундаментальные и прикладные проблемы современной медицины: Материалы молодежной научной конференции СО РАМН -Новосибирск, 2000г.- С.7-8. (соавт. Чикова Е.Д.)

3. Изучение белкового и углеводного обменов у экспериментальных животных в условиях моделирования воспалительного процесса и его коррекции препаратами лишайника. //Проблемы экспериментальной, клинической и профилактической лимфологии: Международный симпозиум - Новосибирск, 2000г.- С.91-92. (соавт. Горчаков В.Н.,Чикова Е.Д.)

4. Изучение эффектов действия смеси лишайников Cladina stellaris и Cetraria cucullata на белковый и углеводный обмен в условиях моделирования воспаления. // Современные проблемы курортологии и физиотерапии: Научно-практическая конференция - Барнаул, 2000г.- С.42-44. (соавт. Чикова Е.Д.)

5. Белковый и углеводный обмен у животных в условиях моделирования воспа-ления и коррекции препаратами лишайника. // Научная сессия, посвященная 65-летию Новосибирской Государственной Медицинской Академии - Новосибирск, 2000г.- С. 115. (соавт. Асташов В.В., Горчаков В.Н.)

6. Цитологические изменения регионарного лимфатического узла в динамике воспаления и при его коррекции лишайниками. // Фундаментальные и прикладные проблемы современной медицины: Материалы III молодежной научной конференции СО РАМН - Новосибирск, 2001г.- С.102-103.

7. Сравнительная характеристика клеточного состава регионарного лимфатического узла при моделировании воспаления мягких тканей конечности в условиях коррекции лишайниками. // Бюллетень СО РАМН №4 окт-дек. -Новосибирск, 2000г.- С.37-40. (соавт. Горчаков В.Н., Асташов В.В.)

8. Структура пахового лимфатического узла в условиях воспаления и при аппликационной коррекции лишайниками. // Проблемы лимфологии и ин-терстициалыюго массопереноса: Материалы научной конференции с международным участием - Новосибирск, 2004г.- С.57-59.

9. Структура подвздошного лимфатического узла в условиях воспаления и применения лишайника энтеральным и аппликациошю-энтеральным способами. // Проблемы лимфологии и интерстициалыюго массопереноса: Материалы научной конференции с международным участием - Новосибирск, 2004г.- С.60-62. (соавт. Горчаков В.Н., Асташов В.В., Старкова Е.В.)

Фомат 60х841/16. Тираж 100. Усл. печл. 1,0. Заказ №9.

Отпечатано в тип. ИД «Манускрипт», тел.: (3832) 33-49-12 630117, г. Новосибирск, ул. Академика Тимакова, 9

Актуальность исследования

В настоящее время количество нагноительных заболеваний мягких тканей не имеет тенденции к уменьшению. В структуре хирургической патологии они достигают 30-35%, из них 23% - гнойные хирургические заболевания, 16,4% - гнойные осложнения случайных ран (Девятов В.В. с соавт., 1992; Французов В.Н. с соавт., 1999). По данным Казарезова М.В. (1995) более 20% всех гнойных заболеваний составляют тяжелые гнойно-септические поражения конечностей, при этом в 2-3% случаев на фоне лечения происходит генерализация процесса, что обусловливает актуальность изучения патоморфологии данного заболевания для современной медицины.

Лимфатическая система поддерживает постоянство внутренней средь1 организма, при этом роль лимфатической системы может быть сформулирована как дренажно-детоксикационная, регуляторная и лимфопоэтическая (Бородин Ю.И., 1999). Наиболее активно защитная функция лимфатической системы проявляется при воспалительном процессе (Зербино Д.Д., 1972; Valkov J., 1973; Сапин М.Р. и др., 1978; Бородин Ю.И. и др., 1986; Алексеев A.A. и др., 1988; Буянов В.М., Алексеев A.A., 1990; Спиженко Ю.П., 1990; Трегубенко А.И. и др., 1993). Транспорт микробных токсинов и метаболитов из патологического очага через дренирующие лимфатические сосуды осуществляется непосредственно в регионарные лимфатические узлы и развитие воспаления в лимфатических узлах может стать новым источником дальнейшего распространения инфекции. Для нижней конечности узлами первого порядка являются паховые, подвздошные лимфатические узлы являются регионарными лимфатическими узлами второго порядка (Привес М.Г., 1978; Чепеленко Г.В., 1983; Севрюкова Н.Ф., Драгун Н.Г., 1981). Эти группы лимфатических узлов объективно отражают изменения со стороны лимфатической системы мягких тканей бедра в физиологических условиях и при различных патологических состояниях, в частности в условиях раневого воспалительного процесса мягких тканей бедра. В литературе отсутствуют точные количественные и качественные данные о структуре паховых лимфатических узлов в динамике раневого воспалительного процесса, являющихся соматическими узлами 1-го порядка, в сочетании со структурным анализом висцерально-соматических подвздошных лимфатических узлов П-го порядка для задней конечности экспериментальных животных.Поиск способов параллельного замещения и восстановления нарушенных функций лимфатической системы: сорбционной, иммунной, транспортной и детоксикационной при гнойно-воспалительных заболеваниях является актуальным (Буянов В.М. и др., 1991; Любарский М.С. и др., 1995). Изучая характер морфофункционального реагирования лимфатических узлов на различные воздействия, можно получить информацию о механизмах адаптации организма к этим влияниям.

Применение в лечении синтетических антибактериальных препаратов осложняется высокой устойчивостью к ним возбудителей инфекции и возникновением аллергических и токсико-аллергических реакций. Поэтому необходимо разрабатывать новые вспомогательные способы лечения, позволяющие снизить выраженность побочных эффектов основной терапии и уменьшить сроки заживления раны.

Раневой процесс представляет собой сложный комплекс биологических реакций, последовательно развивающихся в тканях раны в ответ на повреждение. Основными задачами лечения первой стадии раневого процесса являются подавление инфекции, нормализация местного гомеостаза, активация отторжения некротических тканей, адсорбция токсического отделяемого раны, дегидратация и купирование болевого синдрома (Кузин М.И. и др., 1985; Гончар А.М.и др., 1986; Светухин A.M. и др., 1990; Арутюнян Б.Н., 1991). Многим перечисленным требованиям отвечают лишайники, произрастающие в Сибирском регионе. Они обладают антимикробными и сорбционными свойствами, обусловленными наличием т.н. лишайниковых кислот и пектиновых веществ (Савич В.П., 1953г.; Рябковой К.А., 1981г.)

В последние годы методы аппликационной терапии с использованием разного рода сорбентов все чаще применяются в лечении раневой инфекции. Сорбент, будучи введенным в очаг поражения, дренирует ткань, связывая на своей поверхности микробы и токсические продукты, тем самым дублируя функции регионарного лимфатического узла, он в данном случае выполняет "протезирующую" функцию по отношению к регионарному лимфатическому аппарату. (Григорьев В.Н., Любарский М.С., 1993., Бородин Ю.И., 1994, 1995).

Наряду с аппликационной сорбцией для связывания и выведения из желудочно - кишечного тракта с лечебной или профилактической целью эндогенных или экзогенных веществ применяется и энтеросорбция. Последняя, являясь одним из оптимальных методов детоксикации, метаболической и иммунной коррекции, способна пролонгировать и усиливать действие других способов лечения. Применение сорбции и сорбентов в качестве лимфотропной терапии в настоящее время не вызывает сомнений ( Бородин Ю.И. и др., 1995, 1996; Любарский М.С. и др., 1992, 1994, 1997; Горчаков В.Н., 1998).

В фитотерапии активно используется лишайник Cetraria islandika, как средство, улучшающее пищеварение, снижающее интенсивность гнилостных процессов в кишечнике, сорбирующее токсины эндогенного и экзогенного происхождения и способствующее выведению из организма холестерина (Бендер К.И., 1988; Асеева Т.А., 1991; Минаева В.Г., 1991). При этом остается не изученным влияние лишайников на лимфатическую систему.

Актуальным представляется изучение реактивной способности регионарных лимфатических узлов конечности при раневом воспалительном процессе мягких тканей и в условиях коррекции лишайником различными способами введения, а также непосредственное действие на раневой воспалительный процесс лишайника, обладающего сорбционной и антибиотической активностью.

Цель работы

Выявить особенности структурно-функциональной организации регионарных лимфатических узлов конечности и кожно-мышечного лоскута в физиологических условиях жизнедеятельности, при раневом воспалительном процессе мягких тканей бедра и в условиях коррекции лишайником Cetraria cucullata.

Задачи

1. Изучить морфофункциональную организацию пахового и подвздошного лимфатических узлов в физиологических условиях.

2. Изучить морфофункциональную организацию пахового и подвздошного лимфатических узлов в в динамике воспаления мягких тканей конечности (6 и 12 сутки).

3. Исследовать морфофункциональное состояние паховых и подвздошных лимфатических узлов, кожно-мышечного лоскута в динамике раневого воспалительного поцесса мягких тканей конечности в условиях аппликационной коррекции лишайником Cetraria cucullata.

4. Охарактеризовать морфофункциональные изменения паховых и подвздошных лимфатических узлов, кожно-мышечного лоскута в динамике раневого воспалительного поцесса мягких тканей конечности в условиях энтеральной коррекции лишайником Cetraria cucullata.

Новизна исследования

Выявлены типичные количественные характеристики структурной организации и цитоархитектоники регионарных лимфатических узлов конечности I и II порядка (паховых и подвздошных) в динамике воспалительного процесса мягких тканей конечости.

Впервые изучены лимфокоррегирующие свойства лишайника Cetraria cucullata и возможность коррекции им раневого воспалительного процесса с позиций современной лимфологии.

Впервые предоставленны данные о структурных и цитологических преобразованиях в регионарных лимфатических узлах конечности при аппликационной коррекции раневого воспалительного процесса лишайником Cetraria cucullata.

Впервые проведен сравнительный анализ структурных изменений в паховом и подвздошном лимфатических узлах при энтеральном использовании лишайника Cetraria cucullata для коррекции воспаления мягких тканей задней конечности.

Показано, что при различных способах введения лишайника для коррекции экспериментального раневого воспалительного процесса происходят разнонаправленные изменения в структуре лимфатических узлов различной локализации, заключающиеся в лимфокоррегирующем действии, востановлении танспортной функции и структурно-функциональных взаимоотношений лимфатических узлов.

Практическая значимость

Детальное изучение структурно-функциональной организации регионарных лимфатических узлов I и II порядка при раневом воспалительном процессе мягких тканей поможет оценить барьерно-детоксикационную и иммунопоэтическую функции регионарных лимфатических узлов в динамике патологического процесса и расширить имеющиеся представления о патоморфологии данного патологического состояния. Полученные сведения, о различной степени структурных преобразований в регионарных по отношению к раневому воспалительному процессу лимфатических узлах, могут быть использованы для оценки оптимальнсти выбранного метода лечения.

Доказано, что лишайник Cetraria cucullata обладает выраженным лимфокоррегирующим действием при воспалении мягких тканей конечности.

Результаты исследования структуры регионарных лимфатических узлов конечности при различных способах применения лишайника в коррекции воспаления мягких тканей бедра и сравнительная оценка эффективности их позволяет рекомендовать лишайник Cetraria cucullata к применению в клинической медицине в качестве вспомогательного средства, обладающего лимфокоррегирующим и сорбционным действием.

Положения, выносимые на защиту

1. Структурная организация регионарных лимфатических узлов задней конечности при аппликационном и энтеральном применении лишайника в физиологических условиях жизнедеятельности экспериментальных животных свидетельствует об активации лимфопролиферативной функции.

2. Воспаление мягких тканей задних конечностей вызывает одновременные структурные преобразования в паховых и подвздошных лимфатических узлах, выраженность которых зависит от регионарной локализации и функциональной специализации лимфатических узлов и стадии процесса.

3. Аппликационное применение лишайника при раневом воспалении мягких тканей задней конечности способствует более выраженному восстановлению структурной организации регионарного лимфатического узла первого порядка - пахового (корково-мозгового соотношение, клеточный состав), увеличивает размеры Т-зависимой зоны в лимфатических узлах второго порядка - подвздошных, в ране интенсивно уменьшает отек и инфильтрацию подлежащих тканей.

4. Энтеральное введение лишайника при раневом воспалении мягких тканей задней конечности активирует лимфопролиферативную функцию паховых и подвздошных лимфатических узлов (увеличение размеров коркового вещества), способствует активации пролиферативных процессов в ране.

Выводы

1. При аппликационном и энтеральном применении лишайника в физиологических условиях жизнедеятельности выявлены характерные структурные преобразования в регионарных лимфатических узлах конечности, свидетельствующие об активации их лимфопролиферативной функции (увеличиваются размеры Т-зависимой зоны, числа незрелых лимфоидных клеток). Аппликации лишайника на конечности в условиях физиологической жизнедеятельности вызывает наиболее выраженные структурные преобразования (зональность, клеточный состав) в регионарных лимфатических узлах конечности первого порядка (паховый), а энтеральное введение - в регионарных лимфатических узлах второго порядка (подвздошный).

2. Выявлено, что на 6-е сутки воспаления мягких тканей задней конечности структурные преобразования (зональность, клеточный состав) в регионарных лимфатических узлах первого порядка (паховый) более выражены, чем в лимфатических узлах второго порядка (подвздошный). В паховых лимфатических узлах структурные изменения свидетельствуют об активации барьерно-детоксикационной и лимфопролиферативной функций - увеличено число незрелых лимфоидных клеток, клеток с фигурами митозов, макрофагов; в подвздошном лимфатическом узле активизируется транспортная функция - увеличиваются размеры краевого и мозговых синусов, содержание нейтрофильных гранулоцитов на фоне уменьшения размеров паракортекса.

3. Показано, что на 12-е сутки воспаления мягких тканей задней конечности более выражены изменения в структуре (зональность, клеточный состав) регионарного лимфаического узла второго порядка (подвздошный). В подвздошных лимфатических узлах структурные преобразования свидетельствуют об активации транспортной и детоксикационной функций - фрагментированный морфотип, увеличение размеров мозгового вещества, содержания незрелых плазмоцитов, макрофагов, клеток с пикнотическими ядрами; в паховом лимфатическом узле наблюдается активация лимфопоэтической функции - увеличиваются наружные отделы коркового вещества (вторичные лимфоидные узелки), число незрелых лимфоидных клеток в них.

4. При воспалении мягких тканей бедра (6-е сутки) аппликационное применение лишайника оказывает лимфокоррегирующее действие и способствует восстановлению структурно-функциональных взаимоотношений в регионарных лимфатических узлах: в паховом лимфатическом узле восстанавливается соотношение коркового и мозгового вещества, увеличиваются размеры стромальных соединительнотканных компонентов (капсула, трабекулы); в подвздошном лимфатическом узле увеличиваются размеры Т-зависимой зоны, уменьшается площадь наружных отделов коркового вещества (вторичные лимфоидные узелки).

5. В регионарных лимфатических узлах при воспалении мягких тканей задних конечностей (12-е сутки) в условиях аппликации лишайника выявлены преобразования, свидетельствующие о выраженном восстановлении их структурно-функциональной специализации: в паховом лимфатическом узле восстанавливается цитоархитектоника в структурно-функциональных зонах - увеличивается количество зрелых клеточных форм; подвздошный лимфатический узел по функциональной специализации соответствует промежуточному морфотипу, Т-зависимая зона увеличена, В-зависимая зона уменьшена (за счет вторичных лимфоидных узелков и мозговых тяжей).

6. Энтеральное приеменение лишайника в условиях раневого воспалительного процесса мягких тканей (6-е сутки) обладает выраженным лимфокоррегирующим действием на структурную организацию регионарных лимфатических узлов: паховый и подвздошный лимфатические узлы соответствуют выраженному компактному морфотипу, в паховом лимфатическом узле корковое вещество преобладает над мозговым, изменяется лимфопоэтическая функция - увеличиваются размеры Т-зависимой зоны, уменьшаются размеры В-зависимой зоны и возрастает количество зрелых лимфоидных клеток в ней; в подвздошном лимфатическом узле увеличиваются относительные размеры паракортикальной (Т-зависимой) зоны и коркового плато.

7. При воспалительном процессе мягких тканей конечности в условиях энтерального применения лишайника на 12-е сутки в большей степени восстанавливается структурная организация регионарного лимфатического узла первого порядка (паховый). В паховом и подвздошном лимфатических узлах выявлена выраженная тенденция к восстанновлению структурно-функциональной организации уменьшается площадь мозгового вещества и В-зависимой зоны, где уменьшено количество незрелых форм лимфоидных клеток, макрофагов и клеток с пикнотическими ядрами.

8. В коже и подлежащих тканях задней конечности в динамике воспаления (6-е и 12-е сутки) в условиях коррекции лишайником выявленные особенности структурных преобразований зависят от способа коррекции: при аппликационном способе уменьшение отека и инфильтрации подлежащих тканей происходит интенсивнее, при энтеральном применении лишайника отмечено более активное развитие грануляционной и эпителиальной тканей.

Заключение

В динамике гнойного воспалительного процесса регионарные лимфатические узлы, как первого, так и второго порядка реагируют однотипно. Выявленные структурно-клеточные преобразования лимфатических узлов свидетельствуют об активации всех функций лимфатического узла в ответ на увеличение количества поступающей от очага токсичной лимфы, содержащей большое количество продуктов клеточного и тканевого метаболизма, бактерий и тканевого детрита. Метаболические сдвиги в дренируемой области в динамике воспаления вызывают в регионарных лимфатических узлах морфофункциональные преобразования, направленные на увеличение объема внутриорганных путей транспорта лимфы, так как в расширенных мозговых синусах создаются более благоприятные условия для функционального лимфостаза, при этом активизируется транспорт лимфы из переполненных синусов в паренхиму узла и в мякотные тяжи, где и происходит в дальнейшем ее биофизическая (барьерно-фильтрационная), биохимическая (ферментативная) и биологическая (иммунная) обработка (Бородин Ю.И., 1996). В то же время в ответ на регионарный эндотоксикоз развивается и выраженная клеточная реакция, свидетельствующая о напряженном иммунном ответе.

Использование лишайника различными способами (аппликационно, энтерально) позволяет в значительной степени снизить нагрузку на дренажно-детоксикационную функцию регионарного лимфатического аппарата конечности.

На фоне аппликационной коррекции в обоих лимфатических узлах наблюдаются структурно-клеточные преобразования, свидетельствующие о снижении антигенной стимуляции из региона лимфосбора. В связи с тем, что структурно-клеточные преобразования пахового лимфатического узла в динамике воспаления на 12-е сутки свидетельствуют о более полном восстановлении функциональных потенций по сравнению с подвздошным лимфатическим узлом, то и на фоне аппликационной коррекции к 12-м суткам более выраженные преобразования отмечены именно в паховых лимфатических узлах.

Изучение микроанатомического состояния регионарных лимфатических узлов при энтеральной коррекции раневого воспалительного процесса лишайником показало восстановление их структурно-функциональной организации, выраженное в разной степени, что, видимо, зависит от разной степени антигенной нагрузки, воспринимаемой лимфатическими узлами в связи с регионарностью к месту патологического процесса. Эти изменения можно объяснить активацией собственных защитных функций лимфатических узлов на фоне общей детоксикации организма и подавления раневого воспалительного процесса лишайниковыми кислотами.

Причем в паховом и подвздошном лимфатических узлах в динамике воспаления более активно реагирует В-зависимая зона, на фоне аппликационной коррекции в обоих узлах в большей степени реагирует Т-зависимая зона, при энтеральной коррекции в паховом лимфатическом узле более выражено изменяется активность Т-зависимой зоны, а в подвздошном В-зависимой зоны,

В последние годы в рамках профилактической и экологической лимфологии активно используют эфферентные методы коррекции различных патологических состояний, в том числе воспалительных процессов. Много исследований (Любарский М.С. и др., 1992, 1993, 1994; Коваленко А.Е. и др., 1993; Нимаев В.В. и др., 1993, 1994; Рачковская Л.Н., 1994, 1996; Гармаева Д.К. и др., 1995; Плешаков В.П., 1995; Маринкин И.О.,1996; Бгатова Н.П., 1999) посвящено использованию сорбентов и доказаны их «лимфопротекторные» свойства. Для энтеросорбентов природного происхождения высокая эффективность выявлена в отношение пищевых волокон, содержащихся в отрубях. В работах Юровой Е.Г. (2004), Мичурина

И.Е. (2004) показан лимфопролиферативный эффект и снижение эндогенной интоксикации у животных с различными патологическими процессами, принимавшими пищевые волокна в качестве добавки в рацион. Полученные данные в нашем исследовании также показывают сорбционный эффект, снижение эндогенной интоксикации и усиление дренажно-детоксикационной функции лимфатических узлов при использовании лишайника.