Автореферат и диссертация по медицине (14.00.10) на тему:Функциональная активность нейтрофилов и моноцитов при вирусных гепатитах, изменения под влиянием лейкинферона

П Г '' 7

I "» ¿1111)

На правах рукописи СОБЧАК Девора Михайловна

Функциональная активность нейтрофилов и моноцитов при вирусных гЕпатитах, изменения под влиянием лейнинферона

14.00.10 — инфекционные болезни

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

С:ш::1-11и1ербург 1995

Работа выполнена в Нижегородском научно-исследовательском институте эпидемиологии и микробиологии Министерства здравоохранения и медицинской промышленности РФ.

Научный руководитель — заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор С. Н. Соринсон.

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор А. Г. Рахманова доктор медицинских наук, профессор Ю. И. Ляшенко

Ведущее учреждение—Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. И. П. Павлова.

Защита диссертации состоится «_»__ 1996 г.

к чяг__мин. на заседании диссертационного совета

Д.074.16.05 в Санкт-Петербургской медицинской академии последипломного образования (193015 Санкт-Петербург, ул. Салтыкова-Щедрина, 41).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке СПбМАПО.

Автореферат разослан « » £—199_;£г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат медицинских наук, доцент

В. к. ПРИГОЖИНА

Актуальность проблемы. Вирусный гепатит В привлекает особое витание клиницистов всвязи с потенциальной возмолснсстьв фульыи -нантных форм инфекции, хронизацки процесса, с развитием хронического гепатита, цирроза печени, гепатоцеллшерной карцинолц. Раз -личнш аспектом проблемы вирусного гепатита В в отечественной и зарубежной литературе уделялось огромное внимание (Балаян U.C. 1963, Кетиладзе Е.С. и др. 1985, Даанов В.М. и др. 1986, Соринсон С.Н. 1987, Блсгер А.Ф.. I9B8, Апросина З.Г. 1988, Михайлов Ы.И.1990, Ивашкин В.Т. 1993, Учайкин В.Ф. и др. 1994,, Safe S Jr. 19-95.. . T-fae/uns U.C. 1995). В последние годы особый интерес представили хронические формы HBV - инфекции. Доказательство;} единой этиологии острых и хронических форы гепатита В явилось одним из существенных достижений современного этапа. Установлено, что хронические формы гепатита В встречаются несравненно чаще, чт острые, и являются основная источником инфекции, поддерживавши высокий гп;;асци«есм1й потенциал НВ\/ - инфекции ( Шувалова Е.П., Рахманова А.Г. 1989, Sfuyt&ii-i SA 1993). Систематизация и анализ литературных материалов свидетельствуют о той; что в патогенезе и иммуногенезе хронического гепатита В решающее значение принадлежит неполноценности реакции заболевших на инфекции, Слабому неадекватному ответу соответствует развитие кммунотолерантности к НВ*/ -инфекции, в чей и "*- следует видеть основную причину формирования хронического гепатита В (Рахманова А.Т. и др. 1995, Шляхтенко Л.И. 1984, Д''/Г f^lufCii J,'M' ^ I9S4).,Сог;исно-иногочиеленньы литературном указанияы в клинической практике оценку иммунного ответа больных гепатитом В з значительной мере ограничивает исследоздни.?н Т -клеточной реакции, учетов соотношения су£>популяциК 2'-лимфоцитов с хеллерн.ой и суппзссорной активностью, "Даннке пойзятел'й шег,? важное значение, особенно при учете реакции больных нп вируенуг пн -

- л -

фекцию и в значительной пере характеризуют изменение клеточного звена иммунитета ( 'I'cMai SPoueef С, d. 1985). Одна-

ко, проведение для этих целей исследования моноклональных актител представляет определенные трудности, существенно ограничивающие возможности широкого использования в клинической практике. С дру- " го* стороны более доступный метод оценки Т-клеточной реакции с учетом ^соотношения теофиллин-чувствительных и теофиллин-резистент-ных лимфоцитов не всегда надежно' характеризует реакцию .больных на ' инфекцию ( J?, fa*-*"«' J. 1986, ^й^/^

CjsM» / ¿cw-fo-idej«/1991)

Согласно общим положениям' клинической иммунологии преимущественную информативность мокет представить оценка изменений макро -фагально-фагоцитарной системы, характеризующей состояние реактив -ности организма ( Маянский Д.Н. I9ÖI, JhvffC 1986). Это справедливо и для бактериальных и для вирусных инфекций. Состояние ре, активности организма соответствует наиболее ранней стадии формиро-. вания иммунного ответа. Клетки макрофагально-фагоцитарной систем^ продуцируют цитокины, а цитохины инициир^тот каскад последовательных иммунных реакций, кот9рые в своей совокупности и характеризуют развиваю 14ийся иммунный ответ на внедрение возбудителя.-Опыт использования показателей макрофагально-фагоцитарной системы для ' оценки особенностей иммунного ответа при вирусных гепатитах, в ча • стности гепатита В, весьма ограничен ( Бодрова Т.В., Бояринова A.B. 1988, Мельник Г.В. IS88, Нагоев B.C. 1989), Этот, полагаем, вакный аспект проблемы следует отнести к числу нерешенных.

Вакно было провести анализ клинико-кммунологических паралле -лей, оценить. особенности изменения функциональной активности мак -рофагально-фагоцитарной. системы при раэнж вариантах гепатита В с учетом тяжести, характеристики течения к исходов болезш*. .CyvsvCT -вешю бызю получить инфор^ацто о завксиксстг. отих изменений о? раз-

вития именно HBt/ -инфехции на основе сопоставления результатов аналогичных исследования у больных вирусндо гепатитом А.

Вирусный гепатит В, как иэьестно, нередко осложняется билиар -ной бактериальной суперинфекцией с развитием функциональных и воспалительных изменений - дискинезии желчевыводящих путей, холанги -та, холецистита ( Кийхо Л.Г. 1965, Гайдай В.Н. 1985, Павлова Л.Б. 1989, Пустаиоса H.ÍI. 1991). Поэтому, суцественно было изучить значение контроля за функциональной активностью макрофагально-фагоци-тарной системы в качестве дополнительного критерия ранней диагнос-

• • 4.'iiK.i 3IÍ1X ССЛОЖЦЦШ1Л« .. . ...... ■ . е , -..'."

Не получил решения в литературе л санный вопрос о возможности коррекции недостаточной функциональной активности макрофагально-фа-х'-оцитарной системы. Это ыогло бы явиться обоснованием программы иимукогсорригирущей терапии больных гепатитом В. В этом отношении весьма перспективна! может явиться недавно предложенный отечествен, 'нкй и,следовательно, доступный препарат лейкинферон (Кузнецов В.й.), Лейкинферон представляет комплекс цитокиноп. Имеются указания, о том, что при затякном течении HBV- инфекции развивается дефицит цитокннов, что, собственно, и требует коррекции (Чередеев А,Н.1990, Учайкин В.,Д. 1994). |

Недостаточны литературные материалы и в отношении характеристики функциональной активности макрофагально-фагбцитарной системы у • больных с разньми вариантами уже сформировавшегося хронического гепатита В {Jaincá/! J.J?y С 1990ef а/.

- I990). Наконец, ваано было сопоставить у больных гепатитом.В.ост- ....

i

poro и хронического течения изменения функциональной макрофагально-• фагоцитарной системы и Т-лимфоцитарной реакции. Это важно было для сравнительной оценки лзие'негош реактивности организма и клеточного эвена иммунитета при разных вариантах'НВИ - инфекции.

• г-о-'ЗД.г.кж эъчгх кэрспакных аспектов проблемы гепатита В п поем-' »де.".а настоявдя работа. Она имела целью сравнительное изучение функциональной активности макрофагально-фагоцитарной системы и Тлим -фоцитарной реакции у больных гепатитом В острого и хронического течения в сопоставлении с больньыи гепатитом А, а также оценку воз -«сжности иммунокоррехции при лечении лейкин^еронэч. На основании полученных результатов важно было разработать систему информативного контроля ответной реакции организма на НВУ - инфекцию.

Диссертационная работа выполнялась на базе клиники (руководи -те - канд.м.н. А.А.Бокарев) НИИ эпидемиологии и микробиологии (директор- академик РААМ, профессор И.Н.Блохина) под руководством профессора С.Н.Соринсока.-

Цель и зекачи лсследования. Целью работы явилось изучение функциональной активности нейтрофилов и моноцитов у больных гепатитом : В с разнили вариантами течения и исходов болезни в сравнении с больней гепатитом А, я на этой основе разработка системы контроля отвыкай реакции организма на инфекцию.

Для достижения этой цели в работе решались следующие задачи: ~ I. У больных вируендаи гепатитами А' и В изучить функциональную активность нейтрофилов и моноцитов по дантя шмунохииичееккх исследований в качестве критерия оценки начальной фазы иммунного отве характеризующей состояние общей реактивности организма.-• 2. У больных острш гепатитом В оценить значение' контроля за по-г-'ззателями функциональной активности нейтрофилов и моноцитов в прогнозировании прогредиентного течения инфекции и угрохы хрониза -ции.- - . ~ • .

3. У больных острым и хроническиу гепатитом В,сопоставить ре - . зультаты иыаунохгаичесхих исследований с оценкой Т-лкафоцитарной реляции, в целях сравнительного анализа изменений разных звеньев иммунного ответа. .. • ''

4. У больно острьм гепатитом В изучить значение лечения ле>1-аннфзронои а стимуляции реактивности оргзнизма и предупреждении хро-низации."

5. Б сопоставлении с остры* гепатитом В изучить особенности изменения функциональной активности нейтрофилов и ионоцнтов при -хронических формах гепатита В.

6. У больных вирусными гепатитами А и В изучит, значение конт-• роля за функциональной активностью нейтрофилов в диагностике били-

арной,.бактериальной суперинфекции и дифференциальной д;:аглос7г.1;с с воспалительной заболеваниями желчевыводящих путей.. Положения, выносимые на защиту:

1. У больных вируснши гепатитами- А и В исследования функционально* активности нейтрофилов и ионоцитоз по данным иммунологических методов позволяет оценить наиболее раннюю не специфическую фазу ответной реакции, организна на инфекцию, что существенно допол.-няет характеристику иммунного отпета.

2. При острой гепатите В контроль за функциональной ахтия -костью нейтрофилов и моноцитов и>/еет за.тное значение в прогнозировании течения и исходов болезни.

3« Ле&кинферон является ахтивш.« стимуляторе?? реоктивкости организма, что определяет значение его применения б превентивной терапии больных острил гепатитом В, направленной на предупреждение

;:ро!Шзац!5И.

• Научная новизна исследований. ЕлерБые показано первостепенное знгчзкие контроля за функциональной .активностью нейтрофилов и чоно-шмоз- у больных гепатитом В в оценке наиболее ранней фаз« ответное

ргг.: '/и оргош'сдаа пг инфекцию, Это позвс-,т.с,;т ;:слоль:.с)::глг, тялую СЛ-

СТС'"/ ! 'Т ГО.*"! /ТЛЯ '; ^!'' ? 1« р..о^

ланк.пкрзиетрк кз~гнений иокро^лгально-^игоцкуармСЯ системы,уорзк -торизуэцме развитие иммукотолерантностя» собственно олроагл.твщез уг-

розу хронизеции. Установлено значение лечения лейкинфероком в стимуляции реактивности организма, предупреждении стабилизации инфекционного процесса.

Практическое значение. Внедрение в клиническую практику разработанной системы динамического контроля за функциональной актив -ностью нейтрофилов"и моноцитов призвано способствовать возможно раннему прогнозированию течения и исходов вирусных гепатитов А и В, распознаванию угрозы хронизации, а также осложнений билиарной суперинфекцией.

Апробация диссертации. Результаты исследования доложены на заседании проблемных семинаров по иммунологии и инфекционной патологии Нижегородского ШИ эпвдемиологии и микробиологии (19901995 гг.) на ко)френции молодых ученых ЖШШ им. Пирогова(Москва,1993), на научно-практической конференции "Биохемилгминесцен -ции. Практическое применение" (Москве, 1993), на заседании Ниже -городсхой ассоциации врачей-инфекционистов.

Внедрение полученных результатов. Основные результаты научных исследований опубликованы в 9 статьях. Подготовлено н издано ин -формационное письмо "Использование ломинолзависимой хемилшинес -ценции нейтрофилов' в ранней комплексной диагностике воспаления жвлчевыводя1цих путей при остром вирусном гепатите".

Оценка показателей функциональной активности нейтрофилов н монацитов методами люмннолзависимой хемилюминесценции нейтрофилов к стимуляции пролиферации лимфоцитов внедрена в практику работы НИИ эпидемиологии к иигробиологин.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введе т ния, 7 глав (обзор литературы, материалы, ыотоды, состав и характеристика больных, 4 главы по результата:! собственник исследова -ни 10, обсуждения результатов с 'выводами и практическими рекоаен -

-данями, указателя литературы, охлючеюцего отечественных и

¿¿, иностранных ^именований. Диссертация изложена к- /^'¿'стра-" ницах машинописного текста, документирована аыписхо:?и. из

историй болезни, иллюстрирована". 3¥ таблицами и у/ рисунками; ■

...... СОДЕРЖАНИЕ РАБОТУ

.Мдгер^лц и методы. 'Исследования проведены у 263 больных острым гепатитом В (109 - с легкой, 154 среднетя*елой формой), . 26. больных хроническим гепатитом В (II - с репликативной, 15 - с ин- -тегратиьной формой), 201 больного гепатитом А (ПО - с легкой,91-среднетяжелой формой). Критерии постановки диагноза соответство -вели приказу Минздрава (1999). Учитывались соответствующе эпидемиологические данные, результаты неспецифических исследова -ний (ферментные, пигментные, белковые тесты)..У гсех больных методами И$А проводилась индикация специфических маркеров НВ (13 А , НВеА^ , энти-НВ^ Уд Л ), а также анти-НД Уд Л для исключения

гепатита Д. Диагноз гепатита А подтверждался обнаружением анти-НА^ Л- м.

Оценка функциональной активности макрофагально-фагоцитарной системы включала изучение функциональной активности нейтрофилов ые-тодои лшинолзависимой хемилюминесценции (X. 1972, в модификации Маянского А.Н. 1986), основанного на регистрации сверхслабо- ' го свечения крови- хемилюминесценции, обусловленного образованием активных форм кислорода, являющихся продуцентами нейтрофилов. Ве -личина возникающей' хемилшинесценции рассматривается как спонтан -пая хемилшинесценция нейтрофилов (СХЛ). При добавлении и смеси хрови с лшинолои неспецифического стимулятора (латекс ^»1,7 ыкм) происходит усиление выхода 'активных фора кислорода. Уровень возни-кашяей хемилюминесценции рассматриваю? как кндуцированну« хеыилп -

^лкзецеиции? иейтрофилов (ИХЛ). Хеымлшинесценция изучалась в ккд-костно-сцнкциляционном счетчике "Бета-г* (Киев, "Цедаппаратура").

Изучение функциональной активности моноцитов г.роьодилось на основании изучения активности синтеза инте'р.:е£кине-1 в культуре активированных лимфоцитов (Г.П.Адй^енко 1990). Моноциты, стимулированные липонолисахаридом, выделяют медиаторы :юл<унного ответа, что приводит х ективации бласттрьнсфориации лимфоцитов. Активность сии-теза интерлеЯкина-1 выражена индексом стимуляции 'пролиферации лимфоцитов (ИСПЛ) пс формуле ИСПЛ « - , где числитель

контроль

процент-.бластних клеток, содеряацих моноциты, активированные ка -пул&сньы методом, в знаменателе - процент бластных клеток в про -бах, содер^а^х кеактивированные моноциты. !

ч '

Клеточное Звено иммунитета изучалось на основании выделения фракций Т-ликфоцитов в градиенте плотности фиколл-верогрэфии и подсчета их количестЕениш методой спонтанного розеткообразования, Выделялась субпопуляция. Т-супрессоров с по^огцьв метода розеткооб - . розования с эритроцитами быка и антителами к ним (к // £

М. 1978). Т-лимфоциты с хелперной активностью оценивались расчетным путем. Таким образом, в работе учитывалось обс;ее содер-¡иание Т-лимфацитов, Т-хелперов и Т-супрессоров и их 'соотношение.

■ '

Состав больных и объеи серологических и иммунологических исследований приведены в таблице I. ■ -

В целях уточнения пределов нормальных колебаний всех изучавшихся показателей шжрофагально-фагоцитарной системы и клеточного эвене иммунитета были проведены у 60 доноров, здоровых людей мужчин й кенвдан в возрасте от 20 до 50 лет. Достоверность отличий результатов исследований, полученных в разных'группах больных, установлена б соответствии с требованиями вариационной статистики (Н.В. Глотон 1982 ). -

Таблица I!

Состав больных? методы и объем исследований •

• \ . ;

Группы обследоьанншс Функциональная ая- Специфические маркеры ' - ■ Т-лкмфоцитарная

тивность С ____________________,____£евкБиЛ___

: схл. ихл- ШХЯ НМ/ гв НВеА^а/НВ,, г* .т. А/НД _ £А_ _ а/НА V обвде „ Т-х содерж. 1-лимф. .Т-с Тх/Тс

.. „ _А_... .........- _ . .А, 3 * 4 5 б 7 8 9 10' ' II 12 13 14

В-о острим,'гепатиток Зг -

легкая форма юё 109 109 109 109 85 109 ' - - 109 : 109 : 109 103 ,

гр .повышенного риска хронизации 65 еб : 85 85 83 05 85 85 ' 85 85. , ►ч 85 *

-сравнительная группе 24 РА : 24 24 24 24 - ' 24 ; 24 24 24

средкзтяжедая форма 146 146; 146 146 127 146 - - : 122. ( 122. 122 122

~ с билиарной оуг.срия-- ^е-;? ослол.чзний Ч ЮС 1 45 : 101 45 101 45 101 45 101 32 95 45 10 - 21 юг' 21 101 , 21 ЮГ 21 101

Б-е гепатитом Л 199 199 159 - - 199 58. 58 58 . 58

- с билиарно" супврин-фекциеЯ 43 '43 ; 44 43 —- 43 ' 18 18 18 , 18

- бея осложнений т 156 Ш - .156 : - - 156 40 ' 40 40 40

I 2 3 4 " 5

Хронический гепатит В 26 26 26 26

- рзпликатианая форма 12 II II

- интегрэтиЕнея форма В 15 75 15

ВСЕГО . . . • 540 540 540 540

Доноры 60 60 60 • 60

(

9

as II 16 • - 26 26 26 26

II N II 9 ■ • - . 11 II II II

Б - 8 . i m Б. 15 15

261 223 271 - - 199 . 315 315 315 315

60 1 - £C ■ te 6C 60

s i

ts t

РЕЗУЛЬТАТУ ИССЛЕДОВАНИЙ -

' >

В соответствии с поставленной задачами работы определение функционально* активности макрофага льно-фагоцитарно Л системы проводилось вэаиисимости от тяжести течения острого гепатита В, в группе риска хрониаации, у больных гепатитом-А, при осложненных формах гепатита А и гепатита В, при хроническом гепатите В, при лечении лейкинфероном.

Представленные материалы подтве рдили существенное повышение показателей функциональной активности нейтрофилов и моноцитов при остром гепатите В.от соответствующих средних величин здоровых лиц. Так, при остром гепатите В, значение СХЛ соответствовали 64,7 ± 4,6 ДО3 имп/мин, ИХЛ - 578 ± 51,3 Др? имп/мин, ИСПЛ- 3,9± 0,18, тогда хах у здоровых лиц СХЛ составляла 46,4'£ 5,3 ДС? имп/мин, ИХ! - 578 ± 51,3 .ГС^иип/минГЙОТЛ - 2,7 ± 0,05. Выявлены длсто -верные отличия показателей функциональной активности нейтрофилов и моноцитов у больных с легкой и среднетяжелой формой острого гепатита В. Об этом свидетельствуют данные первичного обследования больных и динамического контроля. Более высокие показатели мвхро-фагально-фагоцитарной системы и более длительное их повышение встречалось у, больных со среднетяжелой формой болезни. Об этом свиде -тельствуют показатели СХЛ (75,8 - 4,8 ДО? имп/мин), ИХЛ (321,6 ± 51,2 ДО3 имп/мин) и ИСПЛ (4,6 ± 0,32), что было более характерно для данного заболевания и рассматривалось как наиболее адекватный ; ответ на НВУ -инфекцию. Более низкие показатели функциональной активности нейтрофилов и моноцитов и более быстрая их нормализация имели место при легком течении гепатита В, что отразили значения СХЛ (54,6 ±3,2 ДО3 имп/мин), ИХЛ (265,5 ±29.6 ДО3 тп/мин), - ИСПЛ (3,2-± 0,2)..При.легком течении преобладали значения, соот -ветствуюцие нормальным показателям и даже пониженные, что характе-

- и -

ризовало слабую ответную реакцию организма на инфекционный процесс.

При сопоставлении показателей функциональной активности нейт-рофилов и моноцитов у больных легкой формы гепатита В с разньми ре- , зультатами ицдикации IIBeAy при первичном обследовании больных можно отметить некоторое их снижение у сольных с положительным НВе.^, где СХЛ соответствовал 41,4 i 6,9 ЛО3 имп/мин, ИХЛ - 212,8*58,7 . I03. имп/мин, ИСПЛ - 2,3 Í 0,41, по сравнению с соответствующими показателями у больных с отрицательным НВеА^ , где СХЛ соответст -вовал 58 Í7.8 .V? имп/мин, ИХЛ - 29,9 ±62,8 .10^ имп/мин, ИСПЛ -3,3 t 0;32. При этом статистический анализ не подтвердил достоверности выявленных различий (р>0,05). У больных с прогредиентньы течением гепатита В с наибольшей частотой встречались пониженные значения функциональной ахтивности нейтрофилов и моноцитов (у 4 из 5) по сравнению с болькьки с циклическим течением заболевания, так же относящихся к группе повышенного риска хрониэации (у 3 из 15).

Сравнительный анализ показателей Т-лимфоцитарной реакции и показателей функциональной активности макрофагально-фагоцитарной системы показал, что у большей части больных среднетяжелой формы ( у . 28 из 35) при адекватной Т-лимфоцитарной реакции преобладали по ~ -вишенные показатели функциональной активности нейтрофилов и моно -цитов (СХЛ >65 Л О3 имп/мин, Ш>270Л(£ имп/мин, ИСПЛ^З,7). И,на-оборот, при неадекватной Т-лимфоцитарной реакции наиболее часто встречались более низкие значения макрофагально-фагоцитарной системы (у Ю из 35). У больных с адехватной и неадекватной Т*лслеточной реакцией в отношении изучавшихся показателей (общее содержание Т -лимфоцитов, Т-хелперы, Т-супрессоры, коэффициент Тх/Тс) различия частоты повшения показателей функциональной активности нейтрофи -лов и моноцитов были статистически достоверны (р<0,С6). Поэтому, при среднетяжелой форме гепатита В прямая корреляционная зависи -мость между показателями Т-лимфоцитарной реакции и значениями мак-

рофагально-фагоцитзрной системы особенно очевидна. У йетьньос с легкой формой гепатита также -выявилась прямая связь меяду адек -ватньми изменениями Т-клеточной реахции и показателями маирофа -гально-фагоцитврной системы.,Однако, у больных легхой формой болезни отмеченные различия оказались статистически недостоверны

(р-> 0,С6). —• .............. .. . . ...

- Для сопоставления с показателями функциональной активности. ' нейтрофилов и моноцитов при гепатите В были исследованы соответ ствующие значения иакрофагально-фагоцктарной системы у больных гепатитом А. Полученные материалы подтвердили существенные отличия показателей макрофагально-фагоцитарной системы при гепатите А от соответствующих значений здоровых лиц, что определялось с помощью . .'значений СХД (67,5 1 7,3 .103 имп/мин), ИХЛ (305,8 ±48,6 .10? имп/мин), ИСПЛ (4,1 ± 0,16).

При среднетяжелой форме гепатита А, показатели функциональ -ной активности нейтрофилов и моноцитов были существенно выше со -ответствующих показателей при легкой форме болезни. При среднетяже л ой форме гепатита А СХЛ соответствовала 78,3 ~ 9,1 ЛО^имп/ыин, ■ - ИХЛ - 348 ± 56,4 ЛО3 имп/мин, ИСПЛ- 4,8 ± 2,8, что достоверно выше значений.при легкой форме, где СХЛ соответствовала 58^6 £ 8,7 « 103 имп/мин, ИХЛ - 268,4 ±48,6 Л О3 имп/мин, ИСПЛ - 3,4 10,24. При. легкой форме гепатита А показатели ыакрофагально-фагоцитврной системы мало отличались от контрольных значений. При сопоставлении показателей функциональной активности нейтрофилов и моноцитов у больных гепатитом А и гепатитом В можно отметить, что кривые распределения показателей оказались весьма близкими. Однако, сниже -ние активности нейтрофилов и моноцитов фиксировалось исключительно у больных гепатитом В и'отсутствовало "при гепатите А. " "

Самостоятельна направлением работы явилась оценка клинического значения использования показателей функциональной активности

йакрофагально-фагоцитарной системы при осложненных формах вирусного гепатита. Наиболее значительные различия выявились по даннш *

СХЛ. При осложнениях воспалительного характера показатели СХЛ оказались существенно выше (110,6 118,3 .10? имп/иин) чем при неос -ложненных формах вирусных гепатитов (71,5 ± 7,1 .103 тистический анализ подтвердил достоверность отличий показателей (р<0,05). Подобные отличия были зарегистрированы и при гепатите В и при гепатите А.

Наряду с сопоиавлением средних величин важно было выделить параметры сдвигов. СХЛ абсолютно специфичных для осложненных форы болезни. Зона абсолютной специфичности для гепатита А была выше 86.10?

имп/иин, для гепатита В - вше 95.103 имп/иин. Следовательно, выявление подобных сдвигов у больных гепатитом В и гепатитом А были информативны для распознавания билиарной инфекции. Обоснованность такой рекомендации получила подтверждение при сопоставлении показателей СХЛ с разньми результатами бактериологического контро-

о

ля. Доля высоких показателей СХЛ более 95.10 имп/мин была существенно больше при положительных результатах бактериологического исследования (69%). При отсутствии микрофлоры во всех порциях дуоденального содержимого высокие показатели СХЛ регистрировались существенно реже <31%). Статистический анализ подтвердил достоверность данного различия (р<0,05). Показатели ЙХЛ и ИСПЛ были существенно менее информативна по сравнению с СХЛ.

Самостоятельную группу составили больные хроническим гепати гем В. При репликатквной и интегративной формах ХГВ показатели функциональной активное«« нейтрофилов и моноцитов или находились в-пределах нормы* или были снижены. При репликативной форме снижение уровня показателей макрефагально-фагоциаарной системы регистриро -валось относительно чаще, чем при интегративной. Так, ггри реплиха-тивной форме ХГВ снижение значений СХЛ отмечено у 7 из II, ИХЛ - у

5 из II, ИСПЛ - у 7 из II. При интегративной форме снижение СХЛ имело место у 4 из 15, ИХЛ у 5 из 15, ИСПЛ - у .5. из 15.« Обрада-ет внимание, что показатели макрофагально-фагоцитарной системы при хронических гепатитах В в значительной мере совпадают с соответствующими значениями при остром гепатите В группы повышенного риска хронизации и, прежде всего, с прогредиентньеи течением. Близкие изменения функциональной активности нейтрофилов и моноцитов у больных повышенного риска хронизации и больных хроническим гепатитом В, полагаем, заслуживают внимания. Они дополнительно подтверждают возможность прогнозировать угрозу хронизации с формированием как репликативной, так и интегративной формы болезни..

В целях полноты анализа иммунного ответа при хроническом гепатите В сравнительные исследования были проведены в отношении показателе* Тлимфоцитарной реакции. Наиболее показательны« были изменения содержания Т-супрессоров. У большей части больных ХГВ репликативной и интегративной формы было отмечено увеличение содержания Т-супрессоров, Некоторое повыэекие содержания Т-супрессоров опре -делило снижение коэффициента иммунорегуляции. С наибольшм посто -янствои снижение коэффициента иммунорегуляции наблпдалось при хронической гепатите В репликативного типа. Частично такая же тенденция прослеживалась и по данным результатов Т-лимфоцитарной реакции больных острш гепатитом В группы риска хронизации с прогредиен? -нш течение; 1Ш V _ инфекции.

В дайной работе изучалась эффективность лейкинферока в лоче -ний больных острые ггпатитси В с высокий рисяои хронизации с уче - • гС".; оце»ти -его влияния но показатели »гахре^дгаяыю-фагоцнтариол системы.

ЛсКгкнфврон назначали сразу при поступлении больных, Препарат вводили внутрич^ечно по 10.000 ВД, э первца 3 для ежедневно, в

/

дальнейшем через день. Всего курс лечения лейкинфероном продол жался 25 дней и включал 14 инъекций с курсовой дозой 140.000 ВД. Лейкинферон получали 32 больных. Они составили основную группу (группа I). У 30 больных лечение ограничивалось методом базисной терапии. Они {¡вставили сравнительную группу (группа П). Больные основной и сравнительной группы были сопоставимы по полу и возрасту. Результаты исследования неспецифических функциональных печеночных тестов у больных-обеих групп также оказались весьма близкими. Ре -зультаты первичных исследований показателей функционально* актив -ности нейтрофилов и моноцитов у больных I и П групп были снижены. Так, в I группе-показатели СХЛ соответствовали 18 ДО3 имп/мин, ИХЛ - 97 ± 5,4 ,Ю3 имп/мин, ИЙПЛ - 1,6 - 0,34; во П группе значения СХЛ составляли 22 ± 2,7 ДО3 имп/мин,^ИХЛ - 118,7 ± 6,3 ДО3 иып/мин, ИСПЛ - 1,8 ± 0,21. Это дополнительно подтверждало потенциальную угрозу хронизации. Результаты исследования показателей Т-лимфоцитарной реакции свидетельствовали, о неадекватности Т-лим -фоцитарной реакции.

Забор крови для исследования изучаемых показателей проводился до начала лечения, затем повторно на 4, II„ 18 день, затем сразу по его окончании и повторно через 2 недели и I, 3 и 6 месяцев.

В I группе больных продолжительность синдрома интоксикации оказалась несколько меньше, чем во П группе. Правда, статистический анализ не подтвердил достоверных различий (р>0,Сб)„ Не отые -чено существенной разницы-в длительности желтухи и в общей продолжительности пребывания больных в стационаре (р>0,Сб)„ В основной группе больных темпы-снижения общего содержания билирубина, АлАт, -тимоловой пробы оказались кёекодько 'предпочтительнее. Однако,стб-чгисгмчаезмй, анализ не подтвердил достоверности различай (р>0,С5}„

Бакно било, получить сравнительную динам;;ку показателзв,характеризующих активность ш-фзхциопного процесса» В наших наблюдениях

».•о относилось к продолжительности циркуллции.НВеАд и сохранению

- - - ' V

высоких титров НВу кд . У больных, получавших лейкин^е;1 и с^рокон-версия НВс-А^ -анти-НВёАу наступала в относительно 6с/ .-; ранние сроки. Так, в I группе Шскд продолжал обнаруживаться',после окончания лечения у 22%, во П'- у 35% больных. К б месячному сроку болезни НВеА^,в крови сохранялся в I группе у 2 больных, во П -у 4. В-„• -¡срути.'е го окончании лечения высокие титры Н% А? обнаруживались у 12$, чо П у больных. Лоррз б месяцев' от начала бо -леэни высокие титры НВ^ к^ сохранялись у крори и оснопной группе, у 2 больных, в сравнительной - у-4, что соответствовало сохране -нию у них НВеА^ Таким образом, при сравнительном анализе сроков исче.шовевия ГОеА^ и НВ^ ку при разных методах лечения можно отстать некоторую тенденцию к более быстрому исчезновении маркеров ЬВУ у Оолыш, лечоннкх' лейкинфероном.

Б соответствии с основным направлением раб'ста самостоятельный интерес представил сравнительный анализ динамики изменений показателей макрофагалыю-фагоцитарной системы у больных I и П групп. В процессе лечения в основной группе показатели функциональной ак -тивности нейтрофилов моноцитов суяюстг-зинс повысились, а в сравнительно?} остались но л ражем уровне. Пик трастами^ показателе!! иакрск»ягальпо-ф9Рош1^арноа системы регистрировался через £5 д«ей, то-есть сразу по ояончанич курса л»з«еняя лзйкийфероном. Так, "в основной группе значения СХЛ соответствовали 5СЙ 2,7 ЛО3 имп/ыин, ИХЛ - 184 ? 7,3 ЛО3 имп/мин, ИСПЛ - 2,9 - 0,18, а в сравнитель ной схл составлял 16 ± 4,2 ЛО3 имп/мин, ИХЛ ->93 ± 6,3 ЛО3 'имп/мин, ИСПЛ - 1,7 t 0,15. Статистический анализ подтвердил дос-тосерность отличий динамики показателей функциональной активности макрофагально-фагоцитарной-системы (р<0,С6). После отмены лей -кинферона наметилось некоторое снижение показателей функциональ -ной активное:-! нейтрофилов и-моноцитов. Вместе с тем они продол -

- -¿О -

жали оставаться на более высоком уровне, сравнительно' с показателями заключительного обследования больных" ¡1 группы. Таким образом, согласно полученньм/результатом, лейкин-;срон оказывает стимулирующее влияние на макрофагально-фагоцитарг.ую систему.

Динамические: изменения показателей Т-Ликфоцитарно.й реакции в группе больных, леченных лейкинфсроном, оказались примерно таки, ми же как у больных сравнительной группы. Это позволило считать, что при оценке влияния лейхинферона анализ динамики показателей макрофагально-фагоцитарной системы оказался более информативным. ч

Прогредиентное течение инфекционного процесса наблюдалось у 14 больных, в том числе у 6 (18%) больных I группы и 8 (26£)боль-ных П группы. У большинства > больных основной и сравнительной групп заболевание закончилось выздоравливанием. Хронизация наступила у б больных. У этих больных сформировался хронический гепатит В, .. НВеА^ позитивный, 4 из них получали базисную терапию, 2- лейкин -ферон.

Полученные результаты обосновывают целесообразность включе -кия лейхинферона в комплексную терапию.больных острьи гепатитом В, прежде всего в группе повышенного риска хрокизации в целях коррекции иммунного ответа и стимуляции механизмов неспецифической ре -зистентности организма.

Таковы основные результаты изучения функциональной активности нейтрофилоа и моноцитов при вирусных гепатитах и ее изменение под влиянием лейхинферона.

3 Ц Б О Д Ы -

>

1. При острых 1зирусн1сс гепатитах А и Б повышение функцио -нзльчой активности нойгрофилов и моноцитов является вакньм хри ~ теряем адекватной ответной реакции на инфекцию. Отсутствие повышения и, тем более, иная направленность сдвигов, характеризует неадекватную начальную фазу жиушюго отаетэ, от ража ¡о ¡дум спито-' ние реактивности организма. - -

2. Адекватная характеристика начальной. ««специфической фазы иммунного ответа соответствует циклическому течешэд инфекционного процесса. Неадекватная реакция регистрируется исключительно у больных гепатитом В с потенциальной угрозой прогредиентного те -чения и хронизации.

3. В группе повышенного риска хронизации отсутствие повыше -кия функциональной активности нейтрофилов'к ".гсноцитов большей часть»-сочетается с ослабленной Т - лиафоцитарной реакцией, что. в совокупности характеризует развитие иимунстолераитности х НВк'-ннфекции.

4. Наибольшей степени выраженности снижения реактивности организма как к ослабление Т - лимфоцитарноЯ реакции достигают при. хронических формах гепатита В. Зво-подтверждает определяющее значение имыунотолерантности к «¡¡фекция в формировании хронического • гепатита. .........

5. У больных острым гепатитом В с повыпе№!ш риском хрони -лг.г{йи (Ьуняциональная активность нейтрофилов и моноцитов законе -ийрно'позьяается в процессе лечгння леЛяинфзрсиом. Ото обоснозц-5ае? его пря-лепсииа п пр2Еа1:т1;п::г>й терапии» направленное"; ма цре-

'дупреадйкие хронизации.

б. При осложнении вирусных гепатитов А и В бактериальной инфекцией желчевыводжцкх путей регистрируется особенно значитель -иое повышение функциональной активности нейтрофилов. сто определяет динамическую информативность контроля, особьнно по данным спонтанной хеыилюминёсценции.

- ПРАКТИЧЕСКИЕ ГЕКШЕКДАЦИИ . .

I. Оценка функциональной активности нейтрофилови »дноийтов по данным иммунохимических методов-исследования призвана дополнить программу обследования больных острым гепатитом В в целях характеристики состояния реактивности организма, прогнозирова -ния течения и исходов болезни, своевременного установления пока- Л\

заний для иммунокорригарутцсй терапии.

«V

Z. Поп!кенИе спонтанной хемилшинесценции свыше 85.10 имп/мин характеризует присоединение бактериальной суперинфекции, а также является важньм критерием дифференциальной диагностики вирусных гепатитов с воспалительной заболеваниями желчевыводящих путей.

- Э. Лсйккнферон мокет быть рекомендован при лечении больных гепатитом В с повциенным риском хрокизации и качестве средства ииыуиокорригирувцеЛ терапшг.

- -гЛ -

. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Травина Н.Ы., Собчак Д.М. Клиническая оценка функциональной активности клеток..макрофагально-фагоцитарной системы при острых вирусных гепатитах // Нижегородский медицинский журнал.-1994. - № I, -с.8-11 ' , -

2. Собчак Д.М.Травина H.H. Диагностика осложнений ,дуодено-панкрёатобилиарной системы при острых вирусных гепатитах //Казанский медицинский журнал.- 1994.- № 4, -. с.314-316

3. Собчак Д.М., Дерзчинская Е.М., Травина K.M. Клиническая оценка' функциональной активности клеток макрофагально-фагоцитарной' системы при хронических гепатитах В //Нижегородский медицинский журнал,- 1594. - # 4, -с.21-24

4. Собчак Д.М., Перфилова К.Ы., Сивухина Н.И. Оценка функциональной активности нейтрофилов и моноцитов при острых вирусных гепатитах // Акт.вопр. мед.вирусологии. Сб.научн.тр.- Екатеринбург, IS94. - с.217-221 ■■ , .

5. Собчак Д.М. Клиническая оценка интерлейкин-I продуцирующей активности клеток макрофагально-фагоцитарной системы при вирусном гепатите В // Акт.проблемы инф.патологии. Сб.научн.тр,- Иваново, IS94, - с.114-115 ' ■ '

6. Собчак Д.М. Использование люминолзавискмой хемилюминесцен-ции нейтрофилов в ранней комплексной диагностике воспаления желче-выводяцих путей при остром вирусном гепатите В // Новые медицинские технологии, Сб.научн.тр,- Н.Новгород, 1994, -с.122

7. Собчак Д.М. Влияние лейкинферона на функциональную актив -ность макрофагально-фагоцитарной системы при остром гепатите В // Нижегородский медицинский журнал.- 1995. - № 2. -с.77-79

8. Собчак Д.М. Опыт применения лейкинферона в терапии острого гепатита В в группе повышенного риска хронизации // Российский

журнал гастроэнтерологии* гепатологии, колонопроктологии,- 1905.-т.5, »3.-. с,221-222 .

9. Собчак Д.М. Характеристика фагоцитарной активности в оценк.-имыункого ответа больных гепатитом В.// Российский куриал гастро -этерологии, гепатологии, колонопроктологии,- 1955. - т.5, №

/

•¿01.маг 60x90 1/16 Печать офоотная. Объш I ш»ч.д. Тярап 70 экз. Заказ /7 ,«' -. ^

Иолиграфцонтр 1М.СД, 603600, Н.Новгород, Ильинская,65