Фармакокинетическая и биофармацевтическая оценка качества твердых лекарственных форм методами in vitro и in vivo

Чижова, Диана Александровна

Диссертации по медицине → Фармакология, клиническая фармакология

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Фармакокинетическая и биофармацевтическая оценка качества твердых лекарственных форм методами in vitro и in vivo

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Чижова, Диана Александровна Москва 2009 г.

Ученая степень: кандидата биологических наук

ВАК РФ: 14.00.25

Автореферат диссертации по медицине на тему Фармакокинетическая и биофармацевтическая оценка качества твердых лекарственных форм методами in vitro и in vivo

На правах рукописи

ЧИЖОВА Диана Александровна

ФАРМАКОКИНЕТИЧЕСКАЯ И БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА КАЧЕСТВА ТВЕРДЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ МЕТОДАМИ IN VITRO И IN VIVO

14.00.25 - Фармакология, клиническая фармакология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

1 8 !'D;j ?.№)

Старая Купавна - 2009

003473953

Работа выполнена в Федеральном Государственном Учреждении «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Росздравнадзора

Научный руководитель:

доктор фармацевтических наук, профессор

Бунятян Наталья Дмитриевна

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор

Митрохин Николай Михайлович

доктор фармацевтических наук, профессор

Раменская Галина Владиславовна

Ведущая организация:

ГОУ ВПО Курский государственный медицинский университет

Защита состоится «_» июня 2009 г. в Ю30 часов на заседании

диссертационного совета Д 217.004.01 при ОАО «Всероссийский научный центр по безопасности биологически активных веществ» (ОАО «ВНЦ БАВ» по адресу: 142450, Московская область, п. Старая Купавна, ул. Кирова, 23.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке и на сайте Всероссийского научного центра по безопасности биологически активных

веществ.

Автореферат разослан «_» мая 2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук, профессор

Л.В. Корольченко

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. В рамках проблемы эффективности и безопасности воспроизведенных лекарственных средств (JIC) важное место отводится изучению их биодоступности и биоэквивалентности по сравнению с зарегистрированными в первую очередь оригинальными лекарственными препаратами [Кукес В.Г. с соавт., 2001, 2004, 2008 г.г.]. Отличия в качестве субстанции, качественном или количественном составе вспомогательных веществ и технологических процессах могут существенным образом изменять фармакокинетику и биодоступность воспроизведенного препарата по отношению к оригиналу. С клинической точки зрения это означает изменение уровней, а также времени достижения необходимых значений концентраций лекарственных веществ (JIB) в биологических жидкостях. И то и/или другое может изменяться как в сторону уменьшения, так и в сторону увеличения значений, что влечет за собой недостаточную эффективность или развитие неблагоприятных побочных реакций при приеме таких препаратов [Кукес В.Г, Раменская Г.В., 2006 г.]. Поэтому выбор качественной субстанции, оптимального состава и рациональной технологии является первоочередной задачей производства ЛС.

В процессе разработки препарата состав лекарственной формы (ЛФ) и технология производства неоднократно могут изменяться с целью получения эффективного конечного продукта, отвечающего требованиям современного фармацевтического рынка. Для доказательства биоэквивалентности нового состава дженерика старой прописи или оригинальному препарату, весьма затруднительно каждый раз на стадии отработки технологии проводить исследования in vivo. Исследования in vitro, позволяющие определять скорость и степень высвобождения/растворения ЛВ из ЛФ, могут быть использованы в качестве предварительного испытания перед окончательным выбором состава и технологии и передачей препарата на исследования in vivo [Арзамасцев А.П. с соавт., 2003 г.; Раменская Г.В. с соавт., 2008 г.].

Важным фактором при этом является установление корреляции результатов исследований in vitro/in vivo.

Таким образом, изучение скорости и степени высвобождения JIB из ЛФ в условиях in vitro/in vivo является актуальной современной проблемой, что определило цель и задачи настоящего исследования.

Цель исследования. Определение биофармацевтических характеристик твердых дозированных лекарственных форм различных фармакологических групп и сопоставление их с фармакокинетическими параметрами соответствующих препаратов методами in vitro и in vivo.

Задачи исследования:

1. Изучить степень влияния изменений в составе вспомогательных веществ и физико-химических свойств активной субстанции (размер частиц) на процесс высвобождения/растворения in vitro и всасывания in vivo на примере таблеток диклофенак и фенкарол.

2. Провести сравнительные биофармацевтические исследования препаратов атенолола.

3. Провести сравнительные фармакокинетические исследования относительной биодоступности и биоэквивалентности препаратов нифедипина.

4. Изучить скорость и степень высвобождения/растворения in vitro твердых лекарственных форм нифедипина с немедленным и замедленным высвобождением с использованием коэффициентов подобия и различия.

5. Провести сравнительное изучение высвобождения/растворения in vitro и препаратов омепразола с немедленным и замедленным высвобождением.

6. Провести сравнительные фармакокинетические исследования относительной биодоступности и биоэквивалентности препаратов омепразола.

Научная новизна. Впервые показана прогностическая ценность исследований in vitro с применением коэффициентов подобия и различия препаратов нифедипина и омепразола для последующих исследований in vivo. Установлено, что использованные в работе фармакокинетические и биофармацевтические подходы на примере коринфара и омеза, позволяют решать вопросы, связанные с биоэквивалентностью и биодоступностью лекарственных

препаратов. Количественно охарактеризованы изменение степени и скорости высвобождения/растворения JIB из таблеток диклофенака и фенкарола при внесении изменений в технологический процесс изготовления таблетированной ЛФ (измельчение субстанции и введение Твин-80 соответственно).

Практическая значимость работы. На основании комплексного фармакокинетического и биофармацевтического исследования доказана биоэквивалентность таблеток Карин-фер, производитель ЗАО «Брынцалов-A» и Коринфар, производитель «Арцнаймиттельверк Дрезден ГмбХ», Лосек, производитель «АстраЗенека» и Омез, производитель «Д-р Редди'с Лабораторис Лтд».

Биофармацевтические исследования с учетом общих рекомендаций FDA для процедуры «Биовейвер» по оценке профилей растворения/высвобождения нифедипина (Кордафлекс, Кордипин, Коринфар) показали их эквивалентность в разных средах, что приведет к снижению затрат на процесс исследования (взаимозаменяемость сред).

Положения, выносимые на защиту:

1. Измельчение субстанции диклофенака перед таблетированием позволяет повысить степень его высвобождения из таблетированной формы в условиях in vitro.

2. Введение в таблетированную форму фенкарола эмульгатора Твин-80 изменяет степень и скорость его высвобождения в условиях in vitro и увеличивает его биодоступность.

3. В опытах in vitro показана эквивалентность высвобождения действующего вещества из зарегистрированных в России таблеток Атенолола 50 мг, отмечена высокая скорость высвобождения атенолола.

4. Изучение скорости и степени высвобождения препаратов омепразола и нифедипина в условиях in vitro имеет прогностическую ценность для исследований биоэквивалентности in vivo.

Внедрение результатов в практику. На основании исследований по биоэквиваленгности изученные препараты нифедипина (Карин-фер) и омепразола (Омез) были рекомендованы к медицинскому применению.

Методики анализа высвобождения/растворения in vitro и всасывания in vivo препаратов нифедипина и омепразола внедрены в Филиале «Клиническая фармакология» НЦ Биомедицинских технологий РАМН и Институте Клинической фармакологии ФГУ НЦЭСМП Росздравнадзора.

Апробация работы. Основные результаты исследования доложены на Всероссийской научно-практической конференции «Клинические протоколы в общей врачебной практике» (Санкт-Петербург, октябрь, 2007); на конференции молодых ученых, посвященной 250-летию ММА им. И.М. Сеченова (Москва, май, 2008); на секции №1 Ученого совета ФГУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Росздравнадзора (Москва, апрель, 2009).

Публикации. По результатам диссертационного исследования опубликовано 3 статьи, в том числе одна в издании, рекомендуемом ВАК РФ. Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 139 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, трех глав экспериментальной части, выводов, списка использованной литературы, включающего 129 источников, из них 116 зарубежных авторов и приложения, В приложении представлено 36 графиков. Работа проиллюстрирована 34 рисунками и 29 таблицами.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

I. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Для изучения высвобождения в условиях in vitro были использованы следующие лекарственные средства:

* Диклофенак, таблетки покрытые оболочкой 25 мг, экспериментальные образцы производства ЦХЛС-ВНИХФИ. Субстанция диклофенака, используемая в препарате «нового» состава предварительно тщательно измельчалась. Условия таблетирования и состав вспомогательных веществ были идентичны;

* Фенкарол, таблетки 10 мг, экспериментальные образцы производства ЦХЛС-ВНИХФИ. В препарат «нового» состава добавлено вспомогательное

вещество Твин-80. Остальной состав и условия таблетирования были идентичны;

* Атенолол, таблетки 50 мг - Атенолол-АКОС (ОАО «Синтез АКО», Россия), Атенолол-Акри (ОАО «ХФК «Акрихин», Россия), Атенолол (ОАО «Татхимфармпрепараты», Россия);

+ Нифедипин, таблетки покрытые оболочкой 10 мг - Кордафлекс (Эгис, Венгрия), Кордипин (КРКА, Словения), Коринфар (АВД.фарма, Германия);

+ Нифедипин, таблетки с замедленным высвобождением - Кордафлекс, таблетки пролонгированного действия покрытые оболочкой 20 мг (Эгис, Венгрия), Кордафлекс РД, таблетки с контролируемым высвобождением покрытые оболочкой 40 мг (Зигфрид, Швейцария), Кордипин ретард, таблетки пролонгированного действия покрытые пленочной оболочкой 20 мг (КРКА, Словения), Кордипин XJI, таблетки с модифицированным высвобождением 40 мг (КРКА, Словения), Коринфар ретард таблетки пролонгированного действия покрытые оболочкой 20 мг (АВД.фарма, Германия), Коринфар Уно, таблетки с модифицированным высвобождением покрытые оболочкой 40 мг (Зигфрид, Швейцария);

* Омепразол, капсулы 20 мг - Омез (Д-р Ре дли'с Лабораторис Лтд, Индия), Гастрозол (ОАО «Фармстандарт-Лексредства», Россия);

+ Омепразол, препараты с замедленным высвобождением - Лосек МАПС, таблетки покрытые оболочкой 20 мг (АстраЗенека, Швеция), Ультоп, капсулы 40 мг (КРКА, Словения).

Для изучения высвобождения в условиях in vivo были использованы лекарственные средства:

А Фенкарол, таблетки 10 мг, экспериментальные образцы производства ЦХЛС-ВНИХФИ, изготовленные по «новому» составу (с добавлением Твина-80) и по «старому» составу;

* препараты нифедипина, таблетки покрытые оболочкой 10 мг - Карин-фер (ЗАО "Брынцалов-A", Россия) и Коринфар (Арцнаймитгельверк Дрезден ГмбХ", Германия);

* препараты омепразола, капсулы 20 мг - Омез (Д-р Редди'с Лабораторис

Лтд, Индия) и Лосек (АстраЗенека, Швеция).

В работе использовано следующее оборудование: UV-Vis спектрофотометр Agilent 8453, приборы «Вращающаяся корзинка» и «Вращающаяся лопасть» Erweka, жидкостные хроматографы Gilson и Shimadzu с УФ-детектором, рН-метр MetroHm 744, водяная баня, магнитная мешалка, лабораторная центрифуга, вибровстряхиватель, роторный испаритель с вакуумным насосом.

Все реактивы, используемые в анализе, были марок «ЧДА», «для ВЭЖХ».

Исследование всасывания in vivo препарата Фенкарол проводили на кроликах, а препаратов нифедипина и омепразола - на здоровых добровольцах в рамках работ по биоэквивалентности в соответствии с ФЗ-86 «О лекарственных средствах», а именно при разрешении Федерального органа по контролю качества лекарственных средств.

Фармакокинетические параметры рассчитывали модельно-независимым методом с помощью программы Kinetika2000. Достоверность различий полученных параметров оценивали с помощью дисперсионного анализа (ANOVA). Для оценки параметров биоэквивалентности были рассчитаны также доверительные интервалы. Статистическую обработку результатов проводили с помощью пакета Microsoft Office Excel 2007.

П. ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Влияние состава вспомогательных веществ на процессы растворения и всасывания фенкарола из таблеток Фенкарол. Из препаратов группы антигистаминных средств был исследован Фенкарол, таблетки 10 мг. Исследование проводили на экспериментальных образцах таблеток Фенкарол производства ЦХЛС-ВНИХФИ. В таблетки, имеющие новый состав, добавлено вспомогательное вещество - эмульгатор Твин-80. Остальной состав и условия таблетирования были идентичны. Таблетки по всем физико-химическим показателям соответствовали НД.

Для изучения высвобождения/растворения в условиях in vitro использовали прибор Erweka «лопастная мешалка». Скорость оборотов составляла 100 об/мин. Среда растворения - 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты.

В таблице 1 и на рисунке 1 представлены результаты высвобождения фенкарола в условиях in vitro.

Полученные профили растворения оценивали с помощью фактора различия и фактора подобия по методике, предложенной FDA (1995, 2000г.).

Фактор различия (fl), отражающий процент ошибки между двумя кривыми по всем точкам времени, рассчитывали по формуле:

где п - число точек времени,

К) 11 - процент растворившегося вещества из каждого препарата в каждый момент времени

Фактор различия равен нулю, если профили сравниваемых ЛС идентичны. По мере увеличения несходства между двумя профилями растворения значение фактора различия возрастает.

Фактор подобия представляющий собой логарифмическое

преобразование значения суммы квадратов ошибок, рассчитанных по разности между испытуемым "Ц и стандартным продуктом Д)" во всех точках времени

рассчитывали по формуле:

где п - число точек времени,

и "Ц - процент растворившегося вещества из каждого препарата в

каждый момент времени у

По мере увеличения несходства кривых профилей растворения значение

фактора подобия приближается к 0.

Профили растворения принято считать подобными, если значение ^

находятся в пределах диапазона от 0 до 15 и значение £2 в диапазоне от 50 до 100.

SK-^I

/, = ^-х 100

Таблица 1. Результаты исследования кинетики растворения фенкарола из таблеток Фенкарол

Время, мин 1 2 3 4 5 6 Среднее Ст.откл. RSD (%)

высвобождение фенкарола в %

«старый» состав

10 77,7 79,4 78,5 74,9 76,8 83,5 78,5 2,9 3,7

15 81,8 79,4 79,4 77,2 78,9 84,2 80,2 2,5 зд

20 81,8 79,4 80,2 77,1 79,2 84,5 80,4 2,5 3,2

30 82,6 80,9 82,6 81,2 81,2 84,1 82,1 1,2 1,5

40 82,0 81,1 82,4 81,3 80,8 84,5 82,1 1,2 1,5

«новый» состав

10 97,2 97,9 97,2 99,8 93,5 98,5 97,4 2,1 2,2

15 97,2 96,4 96,4 99,1 94,1 96,6 96,6 1,6 1,7

20 95,6 94,7 93,9 97,2 92,8 93,8 94,7 1,6 1,6

30 95,6 92,3 92,3 95,4 92,5 92,1 93,4 1,7 1,8

40 95,4 92,5 91,8 95,9 92,6 91,9 93,4 1,7 1,8

% юо J

so -ео -40 -20

О -

О Ю SO ЗО 40

Время, мин

Рис. 1. Усредненные кривые высвобождения действующего вещества из таблеток Фенкарол (n=6) (1 - таблетки с Твин-80 «новый состав», 2 - таблетки без Твин-80 «старый состав»).

Как видно из представленных данных кинетика перехода лекарственного средства в раствор из испытуемых препаратов неэквивалентна (/¡=16,0; ./¿=40,4). Добавление в таблеточную массу Твин-80 увеличивает скорость и степень высвобождения действующего вещества в условиях in vitro.

С целью корреляции полученных результатов с данными in vivo было проведено пилотное фармакокинетическое исследование таблеток фенкарола на животных (6 кроликов). Животным вводили внутрижелудочно сначала препарат

«старого состава», а затем спустя 10 дней препарат «нового состава». Пробы крови для анализа отбирали до введения препарата и спустя 0,5; 1; 2; 4; 6 и 10 часов после введения. Образцы проб крови центрифугировали при 3000 об/мин. Плазму переносили в другие пробирки и замораживали. В последующем в каждой пробе методом ВЭЖХ определяли концентрацию фенкарола.

На рисунке 2 представлены усредненные фармакокинетические кривые препарата Фенкарол полученные после однократного внутрижелудочного введения животным. Как видно из представленных данных наблюдается статистически достоверное различие параметров Ттах и АБС (р<0,05). Биодоступность таблеток «нового» состава по отношению к «старому» составляет 130 %.

О -1-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1-1

0123456789 10 11 12 Время, час

Рис. 2. Усредненные фармакокинетические кривые Фенкарола, полученные у животных (п=6).

Влияние физико-химических параметров субстанции на высвобождение/растворение диклофенака из таблеток Дыклофенак в условиях in vitro. Влияние физико-химических свойств субстанции (форма и размеры кристаллов, величина частиц, растворимость и другие) на высвобождение из готовой лекарственной формы широко обсуждается и представлено в литературе [Чистяков В.В. с соавт, 2007 г., Шохин И.Е. с соавт,

4 -

• "Старая" технология -О- "Новая" технология

2008 г., Дорофеев В.Л. с соавт, 2009 г]. Важная роль при этом отводится вопросам измельчения, так как с уменьшением размера частиц резко увеличивается поверхностная энергия измельчаемого лекарственного вещества.

Измельчение может существенным образом влиять на терапевтическую активность лекарственных веществ, вследствие изменения процессов их всасывания. Это приводит к изменению растворимости лекарственных веществ, скорость которой прямо пропорционально площади поверхности и обратно пропорционально величине частиц вещества.

В своей работе мы изучали влияние измельчения субстанции диклофенака на его высвобождение из препарата - Диклофенак, таблетки покрытые оболочкой 25 мг. Исследование проводили на экспериментальных образцах, изготовленных в ЦХЛС-ВНИХФИ. Анализу были подвержены два препарата, отличающиеся степенью измельчения субстанции диклофенака. Субстанция диклофенака, используемая в препарате по «новой» технологии предварительно тщательно размельчалась в течение 30 минут. Другие технологические параметры (условия таблетирования, состав вспомогательных веществ) были идентичны.

Изучение высвобождения in vitro проводили на приборе Erweka с использованием «вращающейся корзинки». Скорость вращения корзинки составляла 100 об/мин. В качестве среды растворения использовали (стадия II) -фосфатный буфер рН 7,4. Количественное определение диклофенака в среде растворения проводили на UV-Vis спектрофотометре Agilent 8453.

На рисунке 3 представлены результаты кинетики растворения изученных таблеток диклофенака.

Рис.3. Усредненные кривые высвобождения из препарата Диклофенак (n=6) (1 - предварительно измельченная субстанция, 2 - обычная субстанция).

Как видно из представленных данных кинетика перехода лекарственного средства в раствор из испытуемых препаратов неэквивалентна (/i=9,l;^=47,7) в условиях in vitro. Предварительно измельченная субстанция позволяет повысить степень высвобождения диклофенака до 25 %.

Изучение кинетики растворения атенолола из фармацевтически эквивалентных ЛФ. Нами изучена кинетика высвобождения/растворения атенолола из отечественных таблеток, широко используемых в клинической практике: Атенолол-АКОС производства ОАО «Синтез АКО», Атенолол-Акри производства ОАО «ХФК «Акрихин», Атенолол производства ОАО «Татхимфармпрепараты».

Исследование по изучению скорости растворения атенолола из таблеток проводили на приборе «Вращающаяся корзинка» Erweka (Германия) в среде растворения - 0,1 М раствор кислоты хлористоводородной (900 мл). Для описания процесса высвобождения атенолола из таблеток использовали уравнение кинетики первого порядка (уравнение прямой линии) у=а+Ьх. Результаты исследования представлены в таблице 2.

Таблица 2. Результаты исследования

Время, мин 1 2 3 4 5 6 Среди ее Ст.откл. RSD (%)

количество высвободившихся лекарственных веществ в %

Ате но по л- АКО С

10 97,1 97,6 96,6 95,5 98,2 97,8 97,1 1,0 1,0

15 97,1 98,1 97,1 95,6 98,8 97,7 97,4 1Д 1,1

20 102,0 100,1 99,5 100,6 100,2 100,6 100,5 0,8 0,8

30 100,5 101,0 98,6 99,5 101,2 99,1 100,0 1,1 1,1

Атенолол-Акри

10 92,4 90,2 95,4 96,3 95,1 96,8 94,4 2,5 2,7

15 96,3 98,2 97,5 97,2 99,3 95,4 97,3 1,4 1,4

20 96,8 96,5 98,2 97,8 99,1 96,3 97,5 1,1 1,1

30 97,2 98,5 98,9 98,4 99,5 99,6 98,7 0,9 0,9

Атенолол

10 94,6 93,2 96,9 97,2 95,2 97,2 95,7 1,7 1,7

15 95,7 96,4 97,7 96,0 97,4 96,5 96,6 0,8 0,8

20 100,9 95,6 98,7 102,9 99,5 98,2 99,3 2,5 2,5

30 96,3 99,0 95,6 102,3 99,3 99,3 98,6 2,4 2,4

Параметры линейной модели высвобождения атенолола из таблеток представлены в таблице 3. Как видно из представленных данных используемая линейная модель удовлетворительно описывает процесс высвобождения атенолола из таблеток различных производителей. Об этом свидетельствуют высокие значения коэффициентов корреляции линейной регрессии.

Таблица 3. Параметры линейной модели высвобождения (у=а+Ьх) атенолола из таблеток различных производителей._

Параметры уравнения Т-1 Т-2 Т-3

а 4,7593 4,3795 4,3834

b -0,1330 -0,1230 -0,1138

г -0,9963 -0,9675 -0,9339

п 6,0 6,0 6,0

Р 0,0003 0,0008 0,0007

Примечание: коэффициент b в уравнении линейной регрессии соответствует константе скорости растворения препарата.

На основании полученных результатов, можно сделать вывод, что константа скорости растворения атенолола является одним из факторов, определяющих скорость всасывания препарата. В то же время, следует подчеркнуть, что данные по растворению/высвобождению ЛВ из ЛФ in vitro ни в

коем случае не подменяют исследования готового продукта in vivo. Они могут быть использованы только для прогнозирования всасывания в живом организме.

Исследование также показало, что высвобождение атенолола из изучаемых препаратов различных производителей эквивалентно в условиях in vitro без расчетов коэффициентов различия и подобия в соответствии с требованиями FDA.

Теоретические и практические основы проведения исследований биоэквивалентности препаратов нифеднпина. Для проявления оптимального терапевттгческого действия активная часть лекарственного средства должна быть доставлена к месту действия в эффективной концентрации в течение желаемого периода времени. Для того чтобы подтвердить наличие терапевтического эффекта, необходимо всесторонне исследовать действие ЛФ.

Главным образом, это относится к дженерикам, содержащим одно и то же действующее вещество в одинаковой дозировке и используемым вместо оригинального ЛС. При этом в клинических условиях генерический препарат должен оказывать такой же терапевтический эффект, как и оригинал.

Сравнительное изучение биоэквивалентности нифедипина проводили для препаратов с обычным высвобождением действующего вещества, на примере препаратов Карин-фер и Коринфар, таблетки покрытые оболочкой 10 мг.

Исследование проводили в соответствии с требованиями Методических указаний Минздравсоцразвития РФ «Проведение качественных исследований биоэквивалентности лекарственных средств» (2004г.) по перекрестной, рандомизированной схеме на 18 здоровых добровольцах. В случайном порядке 9 волонтеров принимали сначала препарат Карин-фер, а затем, спустя 14 дней -препарат Коринфар. Другая группа добровольцев принимала препараты в обратном порядке. Решение, будет ли доброволец первоначально принимать препарат испытуемый или сравниваемый, было принято случайно.

Прием препаратов осуществляли per os в 8 часов утра в дозе 10 мг (1 таблетка) одного из препаратов. Забор крови проводили из кубитальной вены в количестве 5 мл в стеклянные гепаринизированные пробирки до приема препарата и спустя 0.33, 0.66, 1, 1.5, 2, 3, 4, 6 и 8 часов после приема препарата.

Пробы крови центрифугировали 10 минут при 3000 об/мин, отбирали 1,5 мл плазмы и хранили при -35°С до анализа.

В связи с чувствительностью нифедипина к свету все процедуры количественного анализа проводили в затемнённом помещении - в условиях, исключающих попадание света. Кроме того, пробирки и конические колбы, используемые для анализа, оборачивали фольгой. Концентрацию нифедипина в плазме крови добровольцев определяли с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с ультрафиолетовым детектором. Для экстракции нифедипина из плазмы крови использовали смесь хлороформ-гексан. Анализ проводили на высокоэффективном жидкостном хроматографе "ОПвоп" с УФ-спектрофотометрическим детектором с переменной длинной волны при длине волны 238 им.

Фармакокинетические параметры рассчитывали модельно-независимым методом. Достоверность различий полученных параметров оценивали с помощью дисперсионного анализа (АМОУА). Для оценки параметров биоэквивалентности были рассчитаны также доверительные интервалы.

На рисунке 4 представлена динамика концентрации нифедипина в плазме крови здоровых добровольцев после однократного перорального приема 10 мг. В результате исследования было получено, что максимальная концентрация (Сшах) составляет 70,0+20,0 нг/мл и 66,9+14,2 нг/мл и статистически достоверно не различается для препаратов Карин-фер и Коринфар соответственно. Значения параметров Ттах и АиС также статистически достоверно не различались (таблица 4). Среднее значение относительной биодоступности препарата Карин-фер по отношению к препарату Коринфар составило 0,99 + 0,09. Среднее значение отношений максимальных концентраций составило 1,04 + 0,17.

Дисперсионный анализ значений АиСо-и Сшах, Стах/АиСо-ъ проведетшй после их логарифмического преобразования не выявил статистически значимых различий между препаратами (таблица 5).

Время после приема препарата, час

—л— Карин-фер -в- Коринфар

Рис.4. Усредненные фармакокинетические кривые нифедипина (в линейных координатах).

Таблица 4. Фармакокинетические параметры нифедипина

№ Стах, нг/мл Ттах, час AUCo-t, нг*ч/мл Стах /AUCo-t

Коринфар

Mean 66,9 1,2 226,1 0,301

GMean 65,4 1,2 220,1 0,297

S.D. 14,2 0,3 54,9 0,048

Median 67,0 1 226,8 0,297

L-95% 59,8 1,1 198,7 0,277

Up-95% 73,9 1,3 253,4 0,325

Карин-фер

Mean 70,0 1,1 223,9 0,315

GMean 67,2 1,0 216,9 0,310

S.D. 20,0 0,3 57,9 0,058

Median 68,5 1,0 226,7 0,312

L-95% 60,0 0,9 195,1 0,286

Up-95% 130,3 1,3 252,7 0,344

Таблица 5. Результаты дисперсионного анализа _фармакокинетических параметров _

Параметр Факторы вариаций df SS MS F Р

AUCo., Испытуемые 17 2,0402 0,1200 30,39 0,00000<0,001

Периоды 1 0,0062 0,0062 1,58 0,329 > 0,3

Препараты 1 0,0019 0,0019 0,48 0,497 > 0,3

Cmax Испытуемые 17 2,0958 0,1233 11,01 0,0000 <0,001

Периоды 1 0,0403 0,0403 3,60 0,376 > 0,3

Препараты 1 0,0067 0,0067 0,60 0,451 >0,3

Cmax/AUCo-t Испытуемые 17 0,8147 0,0479 4,09 0,00355 <0,01

Периоды 1 0,0149 0,0149 1,27 0,277 >0,1

Препараты 1 0,0158 0,0158 1,35 0,263 >0,1

Таким образом, не выявлено статистически достоверных различий в процессе всасывания (как по полноте, так и по скорости) нифедипина после приема препаратов Карин-фер и Коринфар.

Также нами было проведено сравнительное исследование по оценке профилей растворения таблеток нифедипина с обычным (Кордафлекс, Кордипин, Коринфар) и замедленным высвобождением (Кордафлекс, Кордафлекс РД, Кордипин ретард, Кордипин XJI, Коринфар ретард, Коринфар Уно) с учетом общих рекомендаций FDA для процедуры «биовейвер».

Получение профилей растворения проводилось на аппарате «лопастная мешалка» (USP И) в пяти средах: воде; 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной; буферных растворах с рН 4,5; 6,5 и 7,5. Объем среды - 900 мл. Температура среды составляла 37+0,5°С. Количественное определение содержания нифедипина в среде растворения проводили методом УФ-спекгрофотометрии при аналитической дайне волны 340 нм при 6 параллельных измерениях в каждой среде.

На рисунках 5, 6 приведены примеры полученных профилей растворения.

Для всех сред и препаратов были рассчитаны коэффициенты подобия и различия,

которые показали эквивалентное высвобождение нифедипина из препаратов с

обычным высвобождением. В то же время, расчет указанных коэффициентов для

препаратов с замедленным высвобождением показал, что Коринфар Уно отличается от других препаратов по степени и скорости высвобождения. Это подтверждает то, что Коринфар Уно технологически существенно отличается от других препаратов, так как представляет собой препарат на основе осмотической системы с полупроницаемой нерастворимой оболочкой.

Бремя, час

Рис.5. Высвобождение нифедипина из таблетированных форм с замедленным высвобождением (среда растворения - буферный раствор с рН 6,5).

Рис.6. Высвобождение нифедипина из таблетированных форм с обычным высвобождением (среда растворения - буферный раствор с рН 6,5).

Биофармацевтические в фармакокинетические подходы к оценке препаратов омепразола. Нами бьшо проведено исследование по сравнительной оценке профилей растворения препаратов омепразола с обычным (Гастрозол, Омез) и замедленным высвобождением (Лосек МАПС, Ультоп).

Получение профилей растворения проводилось на аппарате «лопастная мешалка» (USP II) в течение 45 минут в пяти средах: воде; ОД М растворе кислоты хлористоводородной; буферных растворах с рН 4,5; 6,5 и 7,5. Объем среды - 900 мл. Температура среды составляла 37+0,5°С. Количественное определение содержания омепразола в среде растворения, проводили методом УФ-спектрофотометрии при аналитической длине волны 276 нм при 6 параллельных измерениях в каждой среде.

Полученные профили растворения и рассчитанные коэффициенты различия и подобия позволяют говорить об эквивалентности изучаемых препаратов в условиях in vitro.

Исследование относительной биодоступности in vivo бьшо проведено на препаратах Омез и Лосек (капсулы 20 мг) по требованиям Методических указаний Минздравсоцразвития РФ «Проведение качественных исследований биоэквивалентности лекарственных средств» (2004 г.). В исследование бьшо включено 18 здоровых испытуемых, которые методом простой рандомизации разделили на две равные группы. В случайном порядке 9 волонтеров принимали сначала Омез, а затем, спустя 14 дней - Лосек. Другая группа добровольцев принимала препараты в обратном порядке.

Прием препаратов осуществлялся per os в 8 часов утра в дозе 40 мг (2 капсулы) одного из препаратов. Забор крови осуществлялся из кубитальной вены в количестве 5 мл в стеклянные пробирки до приема препарата и спустя 0.5, 1, 1,5; 2; 3; 4; 6; 8 и 12 часов после приема препарата.

Пробы крови центрифугировали 10 минут при 3000 об/мин, отбирали 1,5 мл плазмы и хранили при -35°С до анализа. Концентрацию омепразола в плазме крови добровольцев определяли с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии на жидкостном хроматографе "Shimadzu" с УФ-спектрофотометрическим детектором при длине волны 302 нм. Для извлечения

омепразола использовали экстракцию в хлороформ.

Динамика концентрации омепразола в шлме ' крови здоровых добровольцев после однократного пероралыюго приема 40 мг представлена на рисунке 7.

1.6 1.4 1.2

ё 1 5 0.8

гз

&0.6

Я °-4

0.2

-Test •

-- Reference

6 3

Еремя, час

Рис.7. Усредненные фармакокинетические кривые омепразола после однократного приема 40 мг препаратов Омез и Лосек (в линейных координатах).

Результаты расчетов фармакокинетических параметров омепразола после приема препаратов Омез и Лосек приведены в таблице 6. Как видно из приведенных данных значения фармакокинетических параметров омепразола после приема изучаемых препаратов статистически достоверно не различались.

Среднее значение относительной биодоступности препарата Омез по отношению к препарату Лосек составило 0,99 + 0,07. Среднее значение отношений максимальных концентраций составило 0,93 ± 0,14.

№ Cmax, МКГ/МЛ Тпшх, час AUCo.t, мкг*ч/мл Cmax/AUCo-t

Лосек

Mean 1,47 1,9 6,50 0,231

GMean 1,42 1,8 6,28 0,226

S.D. 0,38 0,2 1,72 0,053

Median 1,59 2,0 6,52 0,218

L-95% 1,29 1,7 5,65 0,205

Up-95% 1,66 2,0 7,35 0,258

Омез

Mean 1,36 1,9 6,42 0,213

GMean 1,30 1,9 6,23 0,209

S.D. 0,38 0,2 1,59 0,040

Median 1,345 2,0 6,27 0,213

L-95% 1,16 1,8 5,6 0,193

Up-95% 1,62 2,0 7,2 0,232

Дисперсионный анализ значений А1_1Со-ь Стах, Стах/АиС0-ь проведенный после их логарифмического преобразования не выявил статистически значимых различий между препаратами (таблица 7).

Таблица 7. Результаты дисперсионного

анализа фармакокинетических параметров

Параметр Факторы вариаций f SS MS F P

AUCo-t Испытуемые 17 2,3200 0,1365 63,70 0,0000000

Периоды 1 0,0088 0,0088 4,09 0,0603

Препараты 1 0,0006 0,0006 0,29 0,5955

Cmax Испытуемые 17 4,5773 0,2693 15,21 0,00000

Периоды 1 0,0554 0,0554 3,13 0,0959

Препараты 1 0,1272 0,1272 7,19 0,0164

Cmax/AUCo-t Испытуемые 17 1,2240 0,0720 5,11 0,0010

Периоды 1 0,0049 0,0049 0,35 0,5645

Препараты 1 0,0539 0,0539 3,83 0,0680

Таким образом, в ходе эксперимента не выявлено статистически достоверных различий в процессе всасывания омепразола после приема препаратов Омез и Лосек (как по полноте, так и по скорости всасывания).

ВЫВОДЫ

1. Результаты биофармацевтических исследований по высвобождению/растворению лекарственных веществ различных фармакологических групп их твердых лекарственных форм, полученные в условиях in vitro, имеют прогностическую ценность для опытов in vivo.

2. Фармакокинетические и биофармацевтические исследования на примере таблеток Фенкарол и Диклофенак доказали влияние состава вспомогательных веществ (Твин-80) и размера частиц активной субстанции на процессы всасывания и растворения/высвобождения ЛВ из твердых ЛФ, что требует обязательного сравнительного изучения при изменении технологии ЛС.

3. Константа скорости растворения атенолола из таблеток Атенолола является одним из факторов, определяющих скорость всасывания препарата. Эти данные могут быть использованы для прогнозирования поведения ЛВ в живом организме.

4. Результаты фармакокинетических исследований, проведенных на добровольцах, не выявили статистически достоверных различий в процессе всасывания препаратов Карин-фер и Коринфар (как по степени, так и по скорости). Сравниваемые препараты биоэквивалентны.

5. Биофармацевтические исследования по оценке профилей растворения/высвобождения нифедипина с обычным и замедленным высвобождением с учетом рекомендаций FDA для процедуры «биовейвер» показали их эквивалентность. Исключением был Коринфар Уно, представляющий собой таблетки, изготовленные на основе осмотической системы с полупроницаемой нерастворимой оболочкой.

6. Проведенные фармакокинетические и биофармацевтические исследования не выявили достоверных различий в процессе всасывания после однократного перорального приема препаратов Омез и Лосек у здоровых добровольцев. Относительная биодоступность препарата Омез составляла 99%. Исследуемые препараты биоэквивалентны.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Чижова Д.А. Оценка эффективности и безопасности лекарственных средств в опытах in vitro. / Д.А.Чижова, Н.Д.Бунятян // Сборник докладов Всероссийской научно-практической конференции «Клинические протоколы в общей врачебной практике», Пленум Правления Общероссийской ассоциации врачей общей практики (семейной практики). - СПб., 9-10 октября, 2007. - С. 182-186.

2. Чижова Д.А. Высвобождение веществ из твердых дозированных лекарственных форм. / Д.А.Чижова, Н.Д.Бунятян, Г.Ф.Василенко // Фармация. -2008. -№ 2. - С. 50-52.

3. Чижова Д.А. Оценка скорости и степени высвобождения лекарственных средств в опытах in vitro. / Д.А.Чижова, Н.Д.Бунятян, Х.С.Саядян // Аптечный бизнес. -2009. -№ 2. - С. 26-27.

Оглавление диссертации Чижова, Диана Александровна :: 2009 :: Москва

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. Обзор литературы.

1.1. Современные подходы к оценке биодоступности и биоэквивалентности лекарственных средств.

1.2. Влияние физико-химических характеристик кристаллической субстанции на фармакокинетику лекарственного средства.

1.3. Особенности фармакокинетики лекарственных форм с модифицированным высвобождением.

Экспериментальная часть (материалы собственных исследований)

ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования.

ГЛАВА 3. Изучение влияния различных факторов на высвобождение действующего вещества из твердых дозированных форм.

3.1. Влияние физико-химических параметров субстанции на высвобождение/растворение диклофенака из таблеток Диклофенак в условиях in vitro.

3.2. Влияние состава вспомогательных веществ на процессы растворения и всасывания фенкарола из таблеток Фенкарол.

3.3. Изучение кинетики растворения атенолола из фармацевтически эквивалентных ЛФ.

ГЛАВА 4. Теоретические и практические основы проведения исследований биоэквивалентности препаратов нифедипина.

4.1. Исследование высвобождения препаратов нифедипина in vitro.

4.2. Изучение биоэквивалентности препаратов нифедипина.

4.2.1. Выбор и рандомизация волонтеров.

4.2.2. Тактика проведения исследования.

4.2.3. Методика определения нифедипина в плазме крови.

4.2.4. Расчет фармакокинетических параметров и статистическая обработка полученных результатов.

4.2.5. Динамика концентрации нифедипина после приема препаратов Карин-фер и Коринфар.

4.2.6. Фармакокинетика нифедипина после приема препаратов Карин-фер и Коринфар.

4.2.7. Относительная биодоступность и биоэквивалентность препаратов Карин-фер и Коринфар.

ГЛАВА 5. Биофармацевтические и фармакокинетические подходы к оценке препаратов омепразола.

5.1. Исследование высвобождения препаратов омепразола in vitro.

5.2. Изучение биоэквивалентности препаратов омепразола.

5.2.1. Выбор и рандомизация волонтеров.

5.2.2. Тактика проведения исследования.

5.2.3. Методика определения омепразола в плазме крови.

5.2.4. Расчет фармакокинетических параметров и статистическая обработка полученных результатов.

5.2.5. Динамика концентрации омепразола после приема препаратов Омез и Лосек.

5.2.6. Фармакокинетика омепразола после приема препаратов Омез и Лосек.

5.2.7. Относительная биодоступность и биоэквивалентность препаратов Омез и Лосек.

Введение диссертации по теме "Фармакология, клиническая фармакология", Чижова, Диана Александровна, автореферат

Актуальность темы.

В рамках проблемы эффективности и безопасности воспроизведенных лекарственных средств (JIC) важное место отводится изучению их биодоступности и биоэквивалентности по сравнению с зарегистрированными в первую очередь оригинальными лекарственными препаратами [8,9,13]. Отличия в качестве субстанции, качественном или количественном составе вспомогательных веществ и технологических процессах могут существенным образом изменять фармакокинетику и биодоступность воспроизведенного препарата по отношению к оригиналу. С клинической точки зрения это означает изменение уровней, а также времени достижения необходимых значений концентраций лекарственных веществ (ЛВ) в биологических жидкостях. И то и/или другое может изменяться как в сторону уменьшения, так и в сторону увеличения значений, что влечет за собой недостаточную эффективность или развитие неблагоприятных побочных реакций при приеме таких препаратов. Поэтому выбор качественной субстанции, оптимального состава и рациональной технологии является первоочередной задачей производства J1C.

В процессе разработки препарата состав лекарственной формы (ЛФ) и технология производства неоднократно могут изменяться с целью получения эффективного конечного продукта, отвечающего требованиям современного фармацевтического рынка. Для доказательства биоэквивалентности нового состава генерика старой прописи или оригинальному препарату весьма затруднительно каждый раз на стадии отработки технологии проводить исследования in vivo. Исследования in vitro, позволяющие определять скорость и степень высвобождения/растворения ЛВ из ЛФ, могут быть использованы в качестве предварительного испытания перед окончательным выбором состава и технологии и передачей препарата на исследования in vivo [1,10].

При пероральном введении твердых дозированных ЛФ всасывание ЛВ зависит от высвобождения, растворения или солюбилизации ЛВ в физиологических условиях, а также проницаемости их через стенку ЖКТ. Важным фактором при этом является установление корреляции результатов исследований in vitro/in vivo.

Таким образом, изучение скорости и степени высвобождения ЛВ из ЛФ в условиях in vitro/in vivo является актуальной современной проблемой, что определило цель и задачи настоящего исследования.

Цель исследования.

Определение биофармацевтических характеристик твердых дозированных лекарственных форм различных фармакологических групп и сопоставление их с фармакокинетическими параметрами соответствующих препаратов методами in vitro и in vivo.

Задачи исследования.

2. Провести сравнительные биофармацевтические исследования препаратов атенолола.

Научная новизна.

Впервые показана прогностическая ценность исследований in vitro с применением коэффициентов подобия и различия препаратов нифедипина и омепразола для последующих исследований in vivo. Установлено, что использованные в работе фармакокинетические и биофармацевтические подходы на примере коринфара и омеза, позволяют решать вопросы, связанные с биоэквивалентностью и биодоступностью лекарственных препаратов. Количественно охарактеризованы изменение степени и скорости высвобождения/растворения JIB из таблеток диклофенака и фенкарола при внесении изменений в технологический процесс изготовления таблетированной ЛФ (измельчение субстанции и введение Твин-80 соответственно).

Практическая значимость.

На основании комплексного фармакокинетического и биофармацевтического исследования доказана биоэквивалентность таблеток Карин-фер, производитель ЗАО «Брынцалов-А» и Коринфар, производитель «Арцнай-миттельверк Дрезден ГмбХ», Лосек, производитель «АстраЗенека» и Омез, производитель «Д-р Редди'с Лабораторис Лтд».

Положения, выносимые на защиту.

Апробация работы.

Основные результаты исследования доложены на Всероссийской научно-практической конференции «Клинические протоколы в общей врачебной практике» (Санкт-Петербург, октябрь, 2007); на конференции молодых ученых, посвященной 250-летию ММА им. И.М. Сеченова (Москва, май, 2008); на секции №1 Ученого совета ФГУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Росздравнадзора (Москва, апрель, 2009).

Публикации.

По результатам диссертационного исследования опубликовано 3 статьи, в том числе одна в издании, рекомендуемом ВАК РФ.

Заключение диссертационного исследования на тему "Фармакокинетическая и биофармацевтическая оценка качества твердых лекарственных форм методами in vitro и in vivo"

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

2. Фармакокинетические и биофармацевтические исследования на примере таблеток Фенкарол и Диклофенак доказали влияние состава вспомогательных веществ (Твин-80) и размера частиц активной субстанции на процессы всасывания и растворения/высвобождения JIB из твердых ЛФ, что требует обязательного сравнительного изучения при изменении технологии ЛС.

5. Биофармацевтические исследования по оценке профилей растворения/высвобождения нифедипина с обычным и замедленным высвобождением с учетом рекомендаций FDA для процедуры «биовейвер» показали их эквивалентность. Исключением являлся Коринфар Уно, представляющий собой таблетки, изготовленные на основе осмотической системы с полупроницаемой нерастворимой оболочкой.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2009 года, Чижова, Диана Александровна

1. Арзамасцев А.П., Дорофеев B.JL Эквивалентность воспроизведенных лекарственных средств: фармацевтические аспекты. /Ведомости НЦЭСМП. 2007.- №1.

2. Арзамасцев А.П., Садчикова Н.П., Лутцева Т.Ю. Название. //Хим.-фарм. журн. 2003. - Т. 37. - №1. - С.39 - 45.

3. Государственный стандарт качества лекарственных средств. Общая фармакопейная статья «Растворение» М., 2004. - 20 с.

4. Леонова М.В. Пероральные лекарственные формы с модифицированным высвобождением. //Фарматека. 2006. -№11.- С.32-37.

5. Лукьянова М.С., Иванова Р.А., Куриленко В.М. и др. Сравнительная биодоступность двух таблетированных форм циннаризина. //3-я Всесоюзная конф. по фармакокинетике. Москва. - 1991. - С. 162.

6. Мешковский А.П. Обеспечение качества фармацевтических субстанций за рубежом сегодня и завтра. //Фарматека. - 2000. - №1(37). — С.29-34.

7. Проблема калибровки приборов для испытания «Растворение». /А.П.Арзамасцев, Н.П.Садчикова, Т.Ю.Лутцева, Г.В.Раменская, и др. //Фармация. 2003. - Т.37. - №10. - С.12-17.

8. Проведение качественных исследований биоэквивалентности лекарственных средств. Метод, указания МЗСР РФ. Москва, 2004. - 43с.

9. Сереброва С.Ю., Давыдова К.С., Кукес В.Г. Оценка относительной биодоступности и клинической эффективности омепразола (Гастрозо-ла). //Клин. фарм. и терапия 2001. - №10(1). - С.12-14.

10. Чижова Д.А., Бунятян Н.Д. Оценка эффективности и безопасности лекарственных средств в опытах in vitro. //Сб. докладов Всероссийской научно-практической конференции «Клинические протоколы в общей врачебной практике». СПб., 2007. - С.182-186.

11. Чижова Д.А., Бунятян Н.Д. Оценка скорости и степени высвобождениялекарственных средств в опытах in vitro. //Аптечный бизнес. 2009. - № 2. - С.26-27.

12. Чижова Д.А., Бунятян Н.Д., Василенко Г.Ф. Современные подходы к изучению высвобождения лекарственных веществ из твердых дозированных лекарственных форм в условиях in vitro и in vivo. // Фармация. -2008. №2. - С.50-52.

13. Чистяков В.В., Никифорова О.В., Давыдова К.С. Исследование биоэквивалентности гастрозола. //Ремедиум. — 2000. — №5- С.64.

14. Abdelbary GA, Tadros MI. Design and in vitro/in vivo evaluation of novel nicorandil extended release matrix tablets based on hydrophilic interpolymer complexes and a hydrophobic waxy polymer. //Eur J Pharm Biopharm.-2008.-69(3).-P. 1019-1028.

15. Abdullah MD, Bepary S, Rouf AS. Report: in vitro dissolution studies of different brands of sustained release diclofenac sodium matrix tablet available in Bangladesh. //Pak J Pharm Sci.-2008.-21(l).-P.70-77.

16. Adjei A., Garren J. Pulmonary delivary of peptide drugs: effect of particle size on bioavailability of leuprolide acetate in healthy male volunteers. //Pharm. Res. 1990. - Vol.7. - №6. - P.565-569.

17. Amantea M.A., Narang P.K. Improved procedure for quantitation of omeprazole and metabolites using reversed-phase high-performance liquid chromatography. //J.Chromatogr.-l988.-V.426.-P.216-222.

18. Amidon GL, Lennernas H, Shah VP, and Crison JR. A theoretical basis for a biopharmaceutic drug classification: The correlation of in vitro drug product dissolution and in vivo bioavailability.// Pharm. Research.-1995.-Vol. 12-№3.

19. Analytical, biopharmaceutical and regulatory evaluation of topical testosterone preparations. /Baert B, Annavarapu S, Burvenich C, De Spiegeleer B. //Eur J Pharm Biopharm.- 2009-72(1 )-P.275-281.

20. A new rapidly absorbed paracetamol tablet containing sodium bicarbonate. II. Dissolution studies and in vitro/in vivo correlation. /Rostami-Hodjegan A, Shiran MR, Tucker GT, Conway BR, et al. //Drug Dev Ind Pharm.- 2002.-28(5).-P.533-543.

21. A novel pH-dependent gradient-release delivery system for nitrendipine: I. Manufacturing, evaluation in vitro and bioavailability in healthy dogs. /Yang M, Cui F, You B, You J, et al. //J Control Release.- 2004.-98(2).-P.219-229.

22. Aoki I., Okumura M., Yashiki T. High-performance liquid chromatographic determination of lansoprazole and its metabolites in human serum and urine. //J.Chromatogr.-1991 .-V.571 (1 -2)-P.283-290.

23. Application of linear mixed effects models to the evaluation of dissolution profiles. /Adams E, Coomans D, Smeyers-Verbeke J, Massart DL. //Int J Pharm.- 2001 .-226(1 -2).-P. 107-125.

24. Atkinson R.M., Bedford C, Child K.J., Tomich E.G. The effect of griseo-fiilvin particle size on blood levels in man. //Antibiot. Chemother. 1962. -Vol.12. - P.232-238.

25. Baldi F. Lansoprazole oro-dispersible tablet: pharmacokinetic and therapeutic use in acid-related disorders. //Drugs. 2005. - №65(10). - P.1419-1426.

26. Banerjee P.S., Robinson J.R. Novel drug delivery systems: an overview of their impact on clinical pharmacokinetic studies. //Clin.Pharmacokinet-1991.-20(1):1-14.

27. Bioequivalence between omeprazole MUPS 20 mg as tablet and omeprazole MUPS 20 mg as tablet encapsulated in a hard gelatine capsule. /Schaltenbrand R, Huber R, et al. Hint J Clin Pharmacol Ther. -2001.-39(10).-P.453-459.

28. Bioequivalence of two enteric coated formulations of pantoprazole in healthy volunteers under fasting and fed conditions, /de Campos DR, Vieira NR, Bernasconi G, Barros FA, et al. //Arzneimittelforschung.- 2007.-57(6).-P.309-314.

29. Bioequivalence of two oral ciprofloxacin tablets formulations. /Cuadrado A, Gascon AR, Solinis MA, Ramirez E, et al. //Int J Clin Pharmacol Ther.-2004.-42(6).-P.33 6-341.

30. Biowaiver extension potential to BCS Class III high solubility-low permeability drugs: bridging evidence for metformin immediate-release tablet. /Cheng CL, Yu LX, Lee HL, et al. //Eur J Pharm Sci.- 2004.-22(4).-P.297-304.

31. Biowaiver monographs for immediate release solid oral dosage forms: acetaminophen (paracetamol). /Kalantzi L, Reppas C, Dressman JB, et al. //J Pharm Sci.-2006.-95(l).-P.4-14.

32. Bolton S. Correlation in pharmaceutical statistics: practical and clinical applications, 2nd ed., Marcel Dekker Inc., New York, 1991.-P.211-245.

33. British Pharmacopoeia, 2005.

34. Brockmeier D, von Hattingberg HM. In vitro /in vivo correlation, a time scaling problem? Basic considerations on in vitro dissolution testing. //Arzneimittelforschung.-1982.-32(3).-P.248-251.

35. Cho HY, Kang HA, Lee YB. Pharmacokinetics and bioequivalence evaluation of two gabapentin preparations after a single oral dose in healthy Korean volunteers. //Int J Clin Pharmacol Ther.- 2006.-44(8).-P.386-392.

36. Chow SC, Ki FY. Statistical comparison between dissolution profiles ofdrug products. //J Biopharm Stat. -1997.-7(2).-P.241-258.

37. Comparative bioavailability of furosemide from solution and 40 mg tablets with different dissolution characteristics following oral administration in normal men. /Waller ES, Crismon ML, Smith RV, et al. //Biopharm Drug Dispos.- 1988.-9(2).-P.211-218.

38. Comparison of bovine in vivo bioavailability of two sulfamethazine oral boluses exhibiting different in vitro dissolution profiles. /Martinez MN, Kawa-lek JC, Howard KD, Ward JL, et al. //J Vet Pharmacol Ther.-2006.-29(6).-P.459-467.

39. Comparison of dissolution profiles of Ibuprofen pellets. /Costa FO, Sousa JJ, Pais AA, Formosinho SJ. //J Control Release. -2003.-89(2).-P.l99-212.

40. Comparison of dissolution profiles for sustained release resinates of BCS class I drugs using USP apparatus 2 and 4: a technical note. /Prabhu NB, Marathe AS, Jain S, Singh PP, et al. //AAPS PharmSciTech.- 2008.-9(3).-P.769-773.

41. Correlation between in vitro dissolution profiles from enteric-coated dosage forms and in vivo absorption in rats for high-solubility and high-permeability model drugs. /Sakuma S, Ogura R, Masaoka Y, Kataoka M, et al. //J.Pharm.Sci.-2009.- Mar 12.

42. Corrigan OI, Devlin Y, Butler J. Influence of dissolution medium buffer composition on ketoprofen release from ER products and in vitro-in vivo correlation. Hint J Pharm.- 2003.-254(2).-147-154.

43. Desai D, Kothari S, Huang M. Solid-state interaction of stearic acid with povidone and its effect on dissolution stability of capsules. /Ant J Pharm.-2008.-3 54(l-2).-P.77-81.

44. Design and in vitro/in vivo evaluation of multi-layer film coated pellets for omeprazole. /He W, Fan LF, Du Q, Xiang B, et al. //Chem. Pharm. Bull (Tokyo).- 2009.-57(2).-P. 122-128.

45. Development of novel sustained-release system, disintegration-controlled matrix tablet (DCMT) with solid dispersion granules of nilvadipine. /Tanaka

46. N, Imai К, Okimoto К, Ueda S, et al. //Control Release.- 2005.-108(2-3).-P.386-395.

47. Development of tablets for controlled joint release of nifedipine and atenolol. /Iglesias R, Taboada C, Souto C, et al. //Drug Dev Ind Pharm.-1998.-24(9).-P.835-840.

48. Development and validation of dissolution tests for fexofenadine hydrochloride capsules and coated tablets. /Breier AR, Paim CS, Steppe M, Schapoval EE. //J Pharm Pharm Sci. -2005.-8(2).-P.289-298.

49. Devrim B, Canefe K. Preparation and evaluation of modified release ibupro-fen microspheres with acrylic polymers (Eudragit) by quasi-emulsion solvent diffusion method: effect of variables. //Acta Pol Pharm.- 2006.-63(6).-P.-521-534.

50. Diclofenac sodium multisource prolonged release tablets—a comparative study on the dissolution profiles. /Bertocchi P, Antoniella E, Valvo L, et al. //J Pharm Biomed Anal.- 2005.-37(4).-P.679-685.

51. Dissolution kinetics of carboxylic acids II: effect of buffers. /Mooney KG, Mintun MA, Himmelstein KJ, Stella VJ. //J Pharm Sci.-1981.-70(l).-22-32.

52. Dominguez A, Medina R, Hurtado M. Bioequivalence study of paracetamol tablets: in vitro-in vivo correlation. //Drug Dev Ind Pharm.- 2000.-26(8).-P.821-828.

53. Dressman J.B., Amidon G.L., Reppas C., Shah V.P. Dissolution testing as a prognostic tool for oral drug absorption: Immediate Release dosage forms/ Pharmaceutical Research, Vol 15. 1998. - №1.

54. Dynamic dissolution testing to establish in vitro/in vivo correlations for montelukast sodium, a poorly soluble drug. /Okumu A, DiMaso M, Loben-berg R. //Pharm Res.- 2008.-25(12).-P.2778-2785.

55. Effect of polymer type on the dissolution profile of amorphous solid dispersions containing felodipine. /Konno H, Handa T, Alonzo DE, Taylor LS. //Eur J Pharm Biopharm.-2008.-70(2).-P.493-499.

56. Emami J. In vitro-in vivo correlation: From theory to applications. // Pharm.

57. Pharmaceut. Sci. -2006.-9(2)-P.169-189.

58. European Pharmacopoeia 5 th ed., 2005.

59. Evaluation of in vitro dissolution and in vivo absorption for two different film-coated pellets of clarithromycin. /Zhang XR, Chen XY, Hu LD, et al. //Arch Pharm Res.- 2005.-28(8).-P.977-982.

60. Evaluation of in vitro release rate and in vivo absorption characteristics of four metoprolol tartrate immediate-release tablet formulations. /Rekhi GS, Eddington ND, Fossler MJ, et al. //Pharm Dev Technol.-1997.-2(l).-P.l 1-24.

61. Faassen F, Vromans H. Biowaivers for oral immediate-release products: implications of linear pharmacokinetics. //Clin Pharmacokinet.- 2004.-43(15).-P.1117-1126.

62. Fassihi RA, Ritschel WA. Multiple-layer, direct-compression, controlled-release system: in vitro and in vivo evaluation. //J Pharm Sci.- 1993.-82(7).-P.750-754.

63. Gen? L, Jalvand E. Preparation and in vitro evaluation of controlled release hydrophilic matrix tablets of ketorolac tromethamine using factorial design. //Drug Dev Ind Pharm.-2008.-34(8).-P.903-910.

64. Gohel MC, Amin AF. Formulation design and optimization of modified-release microspheres of diclofenac sodium. //Drug Dev Ind Pharm.-1999.-25(2).-P.247-251.

65. Gordon MS, Chowhan Z. In vivo/in vitro correlations for four differently dissolving ketorolac tablets. //Biopharm Drug Dispos.-1996.-17(6).-P.481-492.

66. Guidance for industry: Dissolution testing of immediate release solid oral dosage forms. FDA, CDER, 1997.

67. Guidance for industry: extended release oral dosage forms: development, evaluation and application of an in vitro/in vivo correlation. FDA, CDER, 1997.

68. Guidance for industry: Waiver of in vivo bioavailability and bioequivalencestudies for immediate-release solid oral dosage forms based on a Biophar-maceutics Classification System. FDA, CDER, 2000.

69. Hamed E, Sakr A. Application of multiple response optimization technique to extended release formulations design. //J Control Release.-2001.-73(2-3).-P.329-338.

70. Hassoun M., Dorion P., et al. Drug substance crystallization in pharmaceutical development: key stage for the control of physical properties. STP Phar-ma Pratiques, 2003.

71. Humbert H, Cabiac MD, Bosshardt H. In vitro-in vivo correlation of a modi-fied-release oral form of ketotifen: in vitro dissolution rate specification. //J Pharm Sci. -1994.-83(2).-P.131-136.

72. Improvement in chemical and physical stability of fluvastatin drug through hydrogen bonding interactions with different polymer matrices. /Papageorgiou GZ, Papadimitriou S, Karavas E, Georgarakis E., et al. //Curr.Drug Deliv.-2009.-6(l).-P. 101-112.

73. International harmonization of generic drugs: in vitro dissolution tests for Japanese and American generic tablets. /Otsuka M, Tomita H, Otsuka K, Kamae I, et al. //Biomed Mater Eng.- 2006.-16(2).-P. 129-135.

74. International Pharmacopoeia, 4th ed., 2006.

75. Interpretation of absorption rate data for inhaled fluticasone propionate obtained in compartmental pharmacokinetic modeling. /Krishnaswami S, Hochhaus G, Mollmann H, Barth J. //Int J Clin Pharmacol Ther.- 2005.-43(3).-P. 117-122.

76. In vitro and in vivo sustained-release characteristics of theophylline matrix tablets and novel cluster tablets. /Hayashi T, Kanbe H, Okada M, et al. //Int J Pharm.-2007.-341(l-2).-P. 105-113.

77. In vitro dissolution and in vivo oral absorption of methylphenidate from a bimodal release formulation in healthy volunteers. /Wang Y, Lee L, Somma R, Thompson G, Bakhtiar R, et al. //Biopharm Drug Dispos. -2004.-25(2).-P.91-98.

78. In vitro-in vivo correlation for wet-milled tablet of poorly water-soluble ci-lostazol. /Jinno J, Kamada N, Miyake M, Yamada K, et al. //J Control Re-lease.-2008.-130(l).-P.29-37.

79. In vitro-in vivo relationship of oral extended-release dosage forms. /Liu FY, Sambol NC, Giannini RP, Liu CY. //Pharm Res. -1996.-13(10).-P.1501-1506.

80. Japanese Pharmacopoeia, 14th ed., 2001.

81. Katz В., Rosenberg A., Frishman W.H. Controlled-release drug delivery systems in cardiovascular medicine. //Am. Heart J.-1995.-129(2):359-368.

82. Kellaway I.W. Scientific rationale and clinical implications of sustained-release formulations.//Br.J.Clin.Pract.-1988.-42(Suppl.60).-P.9-13.

83. Khalafalla N. In vitro dissolution of different brands of griseofulvin tablets. //Pharmazie.- 1980.-35(9).-P.555-558.

84. KramI M., Dubic J., Gaudry R. Gastrointestinal absorption of griseofulvin. II. Influence of particle size in man. //Antibiot. Chemother., Vol.12, p.239-242 (1962).

85. Level A in vitro-in vivo correlation (IVIVC) model with Bayesian approach to formulation series. /Kortejarvi H, Malkki J, Marvola M, et al. //J Pharm Sci. -2006.-95(7).-P. 1595-1605.

86. Lobenberg R, Kramer J, Shah VP, Amidon GL. Dissolution Testing as a Prognostic Tool for Oral Drug Absorption: Dissolution Behavior of Gliben-clamide. //Pharm.Research.-2000.-Vol. 17.-№4.

87. Mclnnes G.T., Asbury M.J., Ramsay L.E., Shelton J.R. Effect of microniza-tion on bioavailability and pharmacologic activity of spironolactone. //J.Clin.Pharmacol. Vol.22. - P.410-417.

88. Methods to compare dissolution profiles and a rationale for wide dissolution specifications for metoprolol tartrate tablets. /Polli JE, Rekhi GS, Augs-burger LL, Shah VP. //J Pharm Sci. -1997.-86(6).-P.690-700.

89. Moore J.W., Flanner H.H. Mathematical comparison of dissolution profiles. //Pharm.Tech.-1996.- 20(6)-P.64-74.

90. Multisource (Generic) Pharmaceutical Products: Guidelines on Registration Requirements to Establish Interchangeability. — WHO Technical Report Series, № 937, 2006.

91. Nimmerfall F., Rosenthaller J. Dependence of area under the curve on pro-quazone particle size and in vitro dissolution rate. //J. Pharm. Sci. 1980. -Vol.69. - №5.- P.605-607.

92. Novel approach for determination of correlation between in vivo and in vitro dissolution using the optimization technique. /Ishii K, Saitou Y, Yamada R, Itai S, Nemoto M. //Chem Pharm Bull (Tokyo).-1996.-44(8).-P.1550-1555.

93. Oral sustained delivery of atenolol from floating matrix tablets-formulation and in vitro evaluation. /Srivastava AK, Wadhwa S, Ridhurkar D, Mishra B. //Drug Dev Ind Pharm.-2005.-3 l(4-5).-P.367-374.

94. Pharmacokinetic analysis of single- or multiple-dose plasma drug concentration data with a microcomputer using multi-fraction absorption models. /Murata K, Tagawa K, Noda K, Samejima M. //J Pharm Sci.- 1989.-78(2).-P.154-159.

95. Preparation and, in vitro, preclinical and clinical studies of aceclofenac spherical agglomerates. /Usha AN, Mutalik S, Reddy MS, Ranjith AK, et al. //Eur J Pharm Biopharm.-2008.-70(2).P.-674-83.

96. Preparation and evaluation of verapamil hydrochloride microcapsules. /Mukherjee B, Mahanti B, Panda P, Mahapatra S. //Am J Ther.- 2005.-12(5).-P.417-424.

97. Proposal to waive in vivo bioequivalence requirements for WHO Model List of Essential Medicines immediate-release, solid oral dosage forms. WHO Technical Report Series, № 937, 2006.

98. Saranadasa H, Krishnamoorthy K. A multivariate test for similarity of two dissolution profiles. /J Biopharm Stat. -2005.-15(2).-P.265-278.

99. Sarfraz MK, Rehman NU, Mohsin S. Naproxen release from sustained release matrix system and effect of cellulose derivatives. // Рак J Pharm Sci. -2006.-19(3).-P.251-255.

100. Sathe PM, Tsong Y, Shah VP. In-vitro dissolution profile comparison: statistics and analysis, model dependent approach. // Pharm Res. -1996.-13(12).-P.1799-1803.

101. Scholz A., Abrahamsson В., Diebold S.M., Kostewicz E., et al. Influence of Hydrodynamics and Particle Size on the Absorption of Felodipine in Labrador. //Pharmaceutical Research. 2002. - Vol. 19. - №1. - P.42-46.

102. Skrdla PJ. A simple model for complex dissolution kinetics: a case study of norfloxacin. //J Pharm Biomed Anal.- 2007.-45(2).-P.251-256.

103. Statistical comparison of dissolution curves. /Bartoszynski R, Powers JD, Herderick EE, Pultz JA. //Pharmacol Res.- 2001.-43(4).-P.369-387.

104. Strauch S, Jantratid E, Dressman JB. Comparison of WHO and US FDA biowaiver dissolution test conditions using bioequivalent doxycycline hy-clate drug products. //J.Pharm.Pharmacol.-2009.-61(3).-P.331-337.

105. Tablet disintegration and drug dissolution in viscous media: paracetamol IR tablets. /Parojcic J, Vasiljevic D, Ibric S, Djuric Z. //Int J Pharm. -2008.-355(l-2).-P.93-99.

106. Tamilvanan S, Sa B. In vitro and in vivo evaluation of single-unit commercial conventional tablet and sustained-release capsules compared with multiple-unit polystyrene microparticle dosage forms of Ibuprofen. //AAPS PharmSciTech. -2006.-7(3).-P.72.

107. The effect of controlled release tablet performance and hydrogel strength onin vitro/in vivo correlation. /Roshdy MN, Schnaare RL, Sugita ET, Schwartz JB. //Pharm Dev Technol.- 2002.-7(2).-155-168.

108. The effect of polyion complex formation on in vitro/in vivo correlation of hydrophilic matrix tablets. /Miyazaki Y, Yakou S, Nagai T, Takayama K. //J Control Release. -2003.-91(3).-P.315-326.

109. The influence of formulation on the dissolution profile of diclofenac sodium tablets. /De Castro WV, Pires MA, Oliveira MA, Vianna-Soares CD, e t al. //Drug Dev Ind Pharm. -2006.-32(9).-P.l 103-1109.

110. The United States Pharmacopeia, 30th revision, 2007.

111. Thurmann P, Bacracheva N. The bioequivalence of two nifedipine fluid capsules. //Arzneimittelforschung.- 1989.-39(12).-P.1597-1599.

112. Tulain U, Ur-Rahman N. Comparative bioavailability and in vitro in vivo correlation of two sustained release brands of theophylline: tablets and pellets. //Рак J Pharm Sci.- 2008.-21(2).-P.131-138.

113. Using biorelevant dissolution to obtain IVIVC of solid dosage forms containing a poorly-soluble model compound. /Lue BM, Nielsen FS, Magnussen T, et al. //Eur J Pharm Biopharm.- 2008.-69(2).-P.648-657.

114. Varshosaz J, Faghihian H, Rastgoo K. Preparation and characterization of metoprolol controlled-release solid dispersions. //Drug Deliv. -2006.-13(4).-P.295-302.

115. Vranic E, Mehmedagic A, Hadzovic S. Mathematical methods for quantification and comparison of dissolution testing data. //Bosn J Basic Med Sci.-2002.-2(1-2).-P.49-52.

116. Wilson WI, Peng Y, Augsburger LL. Comparison of statistical analysis and Bayesian Networks in the evaluation of dissolution performance of BCS Class II model drugs. //J Pharm Sci.-2005.-94(12).-P.2764-2776.

117. Yau MK, Meyer MC. In vivo-in vitro correlations with a commercial dissolution simulator. I: Methenamine, nitrofurantoin, and chlorothiazide. //J Pharm Sci.-l 981 .-70(9).-1017-1024.

118. Yau MK, Meyer MC. In vivo-in vitro correlations with a commercial dissolution simulator II: papaverine, phenytoin, and sulfisoxazole. //J Pharm Sci.-1983 .-72(6).-P.681 -686.

119. Zhang X, Tang X, Yang R. Development of a tamsulosin hydrochloride con-trolled-release capsule consisting of two different coated pellets. //Drug Dev Ind Pharm. -2009.-35(l).-P.26-33.