Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Эффекторный потенциал моно- и полиморфонуклеаров и его модуляция специфическими и антигенами при пищевой аллергии, пищевой непереносимости и хронических заболеваниях желудочно-кишечного тракта

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИИ РЕСПУБЛЖЯ КАЗАХСТАН .ВДЧНО-ИССЩЮВАШЬОШ дастшт эщшюлогт, ЫШРОБШОГЛИ И ШЕКЦЯИШХ БОЛЕЗНЕЙ

На правах рукописи

Нерсесов Александр Витальевич

ЭЙЕКГОРНЫЙ ПОТЕНЦИАЛ MOHO- И ЛОЛИЮРФШУКШРОВ И ЕГО МОДУЛЯЩп СПЕЦИФИЧЕСКИМ АНТИГЕНАМИ ¿ТРИ ЛЩЕБОЙ АЛЛЕРГИИ, ЛЩЕВОЙ НЕГЕРЕНООШОСТИ И ХРОНИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ КШДОЧНО-КШЕЧНОГО ТРАКТА

(14.00.36 - аллергология и иммунология)

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученей степени

кандидата медицинских наук

Алма-Ата, I9S2

Работа выполнена з Научном Центре региональных проблем питания ЛНШ.

Научный консультант: академик Российской АМН, профессор

Т.Ш.Шярманов

Научный руководитель: довтор медицинекаг наук

Ж.С.Нугмавова

Офщаалыше оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

Б.В.Кпральнлн

кандидат кедацшеких наук, старший научный сотрудник С.Г.Муратова

Ввдупэв учреждения: 2-Й Московский медицянскжй инсти-

тут имЛ.ИЛЗярогова

Защита, диссертации состоится " 25 " ЧЬОЧ-З 1992 г.

в_ч. _мин. на заседании Специализированного Совета

Д 079.05.01 а ШШ4Б МЗ Н£ (улЛакатаева, 34).

Отзывы на автореферат высылать по адресу: 400002 Адлиь-Ата, ул.йакатаева, 34, НЖШБ

С диссертацией можно ознакомиться в 5г.': зтегге Института.

Автореферат разослан " " М АЛ_ 1932 г.

Ученый секретарь Специализированного Совета., кандидат медигинских наук

Н-М.Нуркива

w»«. fiiifflS.

—-A-jffei

ОБЩАЯ ХАРАКЖРЖТША РАБОТЫ ьность проблемы. В общей структуре заболеваемости одно из

ведуших мест в мире занимает аллергические болезни и тенденции к уменьшению их распространенности в бликайвем будущем не предвидится. Напротив, интенсивное развитие химической, бнстехнологической, лекарственной промышленности и внедрение новых синтетических соединений в ппокзводство и Сыт предопределяет дальнейший рост числа больных аллергозами.

Данные о частоте встречаемости аллергических заболеваний в разных странах и регионах колеблются в широких пределах: от I до 50%. 5 среднем, пазличными формами аллергии страдают примерно 10% населения Земного Шара (Пылкий Б.И. и дп., 1991), причем у Л% патологические реакции организма развивается в результате употребления тех или иных продуктов питания t F.uhne F. , 1939). Несмотря на столь широкую распространенность, пищевая аллергия остается открытой проблемой: отсутствуют единая концепция патогенеза, обшешинятая классификация, четкие диагностические признаки, а главнее, дифференпиальные критерии, позволявшие отличить истинную гощевуваллергию от непереносимости имешеи в основе различные типы псеааоаллепгкчэгких и токсических феноменов, отсутствие или дефкпит дигистибных энзимов, психофизиологические наруиения, з также их комбинации ( Kettlhut B.v.et al., 198?,Sampson K.A.et al. , 1957 ,НазаЪиге?г R.et al. ,19SS,G,чю!in 1^1989). Необходимость разграничения п клево;', аллергии и не переносимости диктуется существенными различиями в терапевтических подходах к дан?:ыы состояниямиГагакий В.И., 1991, Kaliop P.et. al.,19B7, ks Lares U.S., 198?, Lessor K.H., 1990 ■ ). В этой связи представляется ак-

туальными всестороннее исследование количественно-функциональных гдваметооБ клеточного, гуморального и йптоиктарного звеньев тшгут-гета у Сольных с извращенными реакциями на продукты питания и днффэ-рекнииованный акагкз именной зуклглк при истинной пижезой аллергии и лиге вой непепенесимгсти.

Необходимость .ггльнойиего изучения ттаезой гкперчувствотель-ности исходит такие кз возможной взаимообусловленности компонентов гастооинтестика.чькой аллергик к яззекна-всспалительных процессов в рамках хронической патологии систеУА. пищеварения (Нсгаялер A.M. и др.. 193?, Савельева Д.А.,и др., 193?, Краснова А.К. и др., 1998, -Яошапзк! Ь. , 1936, 198У, Song У.-а. , 1989).

Исходя из вышеизложенного, релыо настоящей работы являлось изучение количественно-функциональных показателей нкмунокомпетентных клеток при пнаевой аллергии, пищевой непереносимости, хроническом эрозивном гаетродуодените, язвенной болезни желудка, двенадцати.перс-

гной килки-а хроническом холецистите; выяснение дифференциально-диагностической значимости изменений указанных параметров у больны; с изараагккыми нутритивными реакциями и оценка степени сенсибилизации организма при хронических заболеваниях желудочно-кишечного тра! та.

Решение поставленная цели определялось следующими основными задачами:

- изучить спонтанный и стимулированный неспецифическим митоге-ном, пишзвыьии микробными аллергенами пролиферативный ответ лимфоцитов периферической крови больных пищевой аллергией, пишевой непереносимостью и хроническими заболеваниями желудочно-кишечного тракт

- исследовать спектр иммуноглобулинов и содержание циркулирующих иммунных комплексов при указанных заболеваниях;

- выяснить особенности кинетического профиля продукции активны форм кислорода и оценить полноценность отдельных звеньев каскада реакций окислительного метаболизма пояиморфо- и мононуклеаров периферической крови при указанных заболеваниях;

- определить абсолютное и относительное содержание лейкоцитов и их популяций в периферической крови при указанных заболеваниях;

- проследить динамику спонтанного и индуцированного пролифера-тивного ответа лимфоцитов, а также изменения кинетического профиля

.генерации реактивных кислородных метаболитов пояиморфо-, мононукяеа-рами и клетками цельной крови больных пищевой аллергией и нелерено-симостьв в процессе проведения оральных провокационных тестов с причинными антигенами. Выяснить дифференциально-диагностическую значимость полученных результатов;

- оценить степень сенсибилизации организма при хронических за-, болеваниях желудочно-кишечного тракта;

- выявить направленность и выраженность влияния медиаторов немедленной гиперчувствительности и представителей основных групп противоаллергических препаратов на окислительный метаболизм фагоцитирующих клеток.

Выполнение представленных исследований осуществлялось в рамках темы 053 НйР Научного Центра региональных проблем питания АНРК "Оценка клинических, иммунологических, а также морфофункциональных особенностей желудочно-кишечного тракта при пищевой аллергии и непереносимости для обоснования методов патогенетической (диетической коррекции" (№ гос.регистрации 01500029169).

Научная новизна работы

- Впервые выявлены дифференциальные отличия пищевой аллергии

л непереносимости з пролиферативной активности лимфоцитов, содержании иммуноглобулинов, уровне циркулирующих иммунных комплексов, кинетических параметрах продукции активных форм кислорода фагоцитирующими клетками.

- На основании сравнительного анализа динамики пролиферативной активности лимфоцитов и генерации реактивных кислородных метаболитов нейтвофилами, мононуклеарами и клетками цельной кроаи в ходе оральных провокационных тестов с причинными антигенами определены характерные особенности пищевой аллергии и пишезой непереносимости, позволяющие дифференцировать типы извращенных реакций и идентифицировать причинные нутриекты.

- Впервые при хронических заболеваниях желудочно-кишечного тракта в реакции бласттрансформации показано наличие сенсибилизации лимфоцитов к пищевым и микробным аллергенам.

- Проведение углубленного исследования развернутого результирующего профиля кинетики генерации активных форм кислорода Фагоцитами крови выявило дисфункции отдельных механизмов респираторного •ззрыва (Фагоцитов при аллергии и гастроэнтерологических заболеваниях.

- Для изучения кинетики продукции активных форм кислорода впервые предложены и интерпретиосзаны такие информативные параметры ляминолзависимой хемилшинесиеншш как начальная амплитуда, интегрированный ответ за первую минуту, его доля з обшей светосумме, а такие скорость падения люминесценции, позволившие оценить эффективность и полноценность отдельных звеньез каскада реакций окислительного метаболизма з различные фазы респираторного взрыва.

- Выявление ингибирукэего э&Ьекта на респираторный взоыа г:тс-тамина, сепстсккна, димедоола, гистодила, гистагтобуг.ина, интала и гидоокоитизска расширило представления о рецептерной, медкаторной и фармакологической модуляции окислительного метаболизма.

Теоретическая и практическая значимость сабоус

Сравнительный анализ особенностей иммунного статуса при пишевой аллергии и непереносимости продемонстрировал существенную разницу а патофизиологии отих состояний. Обнаруженные изменения актизапии, пролиферации, диФФеренцироаки, эффекториого потенциала и количественного содержания нммунокомпэтентных клеток, з силу своей специфичности, представляот интерес а качестве диагностических и диффг-сенциальных ориентиров аллепгических реакций и оеакций, опосредованных псевдоаллергическими, токсическими феноменами, ферментопа-

тией и другими неиммункыми механизмами. Изучение динамики параметров различных звеньев иммунитета в процессе острой аллергенной индукции позволило разработать принципы индикации различных типов патологических нутритивных реакций и идентификации причинных антигенов, в том числе, с помощью экспресс- метода хемилюминесценции микрообъемов цельной крови, а также показать возможность ассоциации пищевой аллергии и непереносимости.

Расширено представление об иммунобкохимических механизмах гиперчувствительности. Получены, в частности, свидетельства выраженной интенсификации кислородэависимых эффекторных функций фагоцитов в ходе острой аллергической реакции и установлен факт отрицательной регуляции этого процесса медиаторами ранней фазы. Продемонстрирована возможность фармакологической супрессии свободнорадикального ин-флюкса.

идвиги количественно-функциональных показателей иммунокомпе-тентных клеток» выявленные при хронических заболеваниях желудочно-кишечного тракта, позволили констатировать сопряженность иммунных дисфункций с патологическими процессами в системе пищеварения и установить присутствие компонентов аллергии у данной категории больных.

Исследование содержания лейкоцитов и их популяций в периферической крови обнаружило в ряде случаев диссоциативность их абсолютного и относительного количества и отразило гораздо большую информативность абсолютного показателя.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на ХУ Конгрессе Европейской Акарвмяи аллергологии и клинической иммунологии (Париж, 19Э2), объединенном заседании отдела инфекционной иммунологии и аллергологии НИИ эпидемиологии, микробиологии и шгеешионных болезней Минздрава РК и отдела иммунологии и гошевой аллергии НЦ региональных проблем питания АНРК.

Публикации. По теме диссертации подготовлено 10 научных работ, две из которых опубликованы в материалах ХУ Конгресса Европейской Академии аллергологии и.клинической иммунологии (Париж, 1992), остальные приняты в печать.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, 5 глав собственных исследовании, заключения, выводов и указателе литературы (36 работ отечественных и 208 - зарубежных авторов). Работа изложена страницах машинописного текста, содержит 17 таблиц и 3 схемы.

считаю своим понятным долгом выразить искреннюю признательность академику Российской АкН, профессору Шарыанову T.iii. и доктору медицинских наук Нугмановой Е.С. за постоянную научно-консультативную псмопь и содействие на всех этапах работы.

Выражаю глубокую благодарность старшим научном сотрудникам Зсенжаноэой Г.М. и Курмангалинову о.М. за ценные практические рекомендации и участие в выполнении отдельных Фрагментов исследования.

С ОДЕ ЕКАНИЕ РАЪО'ГЬ

Общая характеристика клинического материала. Клинико-иммуноло-гическое исследование было проведено у 309 вольных, находящихся на лечении в гастроэнтерологическом отделении Городской клинической больницы № I, среди которых 46 страдали пгаевой аллергией. Ь6 - пищевой непереносимостью. 16 - хроническим зрсзиеным гастосдуодэнитом. ¿7 - язвенной болезнью желудка. 100 - язвенной болезньп двенадцатиперстной кидки и 64 - хроническим холециститом, а таю*е 105 доноров Республиканской л Дорожной станций пеоеливания крови. ВепиФикалию диагноза проводили с использование?* современных методов габоратоо-чой я инструментальной диагностики.

Методики исследования. Прслиферативный ответ лимсспитов на титэ-гэмагглютиннн (ФГА), пищевые л ми кроеные аллергены I коровьего молока, иелых куриных яиц, кииечяой палочки, гемо литотес кого стрептококка) оценивали оадиомзтрическим методом в реакции 3-х-суточной бласттранс-фориаиии 1?ЬТЛ) а культуре цельной крови (Дж.Клаус, I99ü,Lyte У.., ; ,1Ч89,^езоигл 3. ,1989 ). По включение ЗН-тимидина оп-

ределяли абсолютные значения спонтанной и стимулированной прс.:изера-;:ии, а соотношение г/г их аеличин расценивали как индекс стимуляции. Креме того, зычисляли процент больных, отреагиосвавшх на тот или иной аллерген.

содержание иммуноглобулинов А. М, G- в сыворотке крози определяли методом радиальной иииунсдк<й*узии в геле { Maachir.i ¡**. ai.,lQ65).

Уровень циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) исследовали спактрс'.оотсметрическим методом (Гоиненич Ю.А. и др., ÍS8I).

Продукцию активных форм кислорода (АФК) нейтрс^илами, мононук-.-.eapat/и и клетками цэльной .крови изучали методом люиинолзааисимой хе-милюминесценши (ЛЗХЯ) (Павленко Р.л. и др.,I9S8,fistola 990 результируший ппошиль которой оценивали по зось;.:и кинетическим параметрам: начальной,максимальной амплитуде, времени достижения пика, эбшему интегрированному ответу, интегрированному ответу за инициальную ссазу генерации АФК и его долг а обшей светосумме и скорости пос-лепикового падения люминесценции. Респираторный взрыв нзйтройилов

индуцировали о пс он и з иро ванн ым зимозаном (03), мононуклеаров и к. ток цельной крови - фороолмиристатацетатом (FМЛ).

-ля оценки влияния причинных антигенов на функции иммуноком: тентных клеток Оольных пищевой аллергией и непереносимостью иссл< вали динамику показателей РБТЛ и ЛЗХЛ moho-, гранулоцитов и клет! цельной крови, после перорального введения причинного нутриента. ^ модуляции респираторного взрыва стимулированных FWA нейтрооило! здоровых донороЕ медиаторами немедленной гиперчувствительности и противоаллергическими фармпрепаратами судили по темпу роста или уоьши амплитуды ХД э момент внесения in vitro различных доз ие: дуемых агентов, итатистическуе обработку полученных результатов, i водили на персональной ЭВМ "Искра IQ30.II"c использованием, пакете Программ STAT GSAFh .

Результаты исследований и оосуждение. Согласно нашим данным, величины спонтанной и стимулированной минимальной (2.6 мкг/мл) дс зой ФГа пролиферации лимфоцитов были наибольшими у лиц, страдают истинной пиаевой аллергией ÍII8I+ 18» и 8344 + 920 имп/мин) к дос вернр \j,QC'¿! превышали соответствувшие показатели донороь

оЮ + 66 V.S47G + 355) и сольных других клинических групп, включг лидевуг непереносимости.

эместя с тем, исследование эффекта оптимальной дозу митеген& на РБТЛ вынвило снижение включения радиоактивной метки (2I302+III пэ сравнению с нормальными величинами (26739+17Й9). Значение инде са стимуляции по сравнению с показателями здоровых доноров снижа.1: почти в ¿ раза при использовании фитогемагглотинина в суооптим&льн дозе (Ь мкг/мл) (14,69+1,95 по сравнению с 26,6+3,2'/ в контроле; р - У.ОЬ) и уменьшалось втрое (21,17+2,64 и 62,5+7,23; р 0,00 s прооах с оптимальной (10 мкг/мл) концентрацией митогена. Столь значительное паление индекса стимуляции в первом случае обусловле высоким уровнем спонтанной пролиферации, а во втором - еае и низн зеличиной активированной РБТЛ.

При пипевой непереносимости уровень спонтанной бласттрансфор мации (507+71) был вдвое ниже (р <£ 0,001), чем при пищевой аллер гии и практически не отличался от нормальных величин. Подобная ка тина сохранилась ь пробах с минимальной концентрацией фитогемаггл тинина; соответствующий индекс стимуляции в сравниваемых группах был примерно одинаков (8,21+0,99 и 7,57+0,64). При использовании субоптимальной дозы митогекэ в группе лиц, страдахших пилевой неп рекосимостью, выявилось достоверное (р ^ 0,001) уменьшение велич абсолютной пролиферации (7031+968): на 42% по сраачению с показат лями здоровых доноров (I2I39+I052) и на 53% - больных лишевой алл

'ней (14970+1151). Значение индекса стимуляции (15,15+1,40) в первом глучае оказалось сниженным больше, чем в полтора раза (р 0,001) I не отличалось зо втором. Исследование эффекта оптк:.!аяькой концент-ешги (10 мкг/мл) фитогекатглюткника выявило у больных пкзевой непе-^ксг.гуостыо достоверное падение как уровня абссянтной бласттранс-■г:г»'апии (1634+1499)(р < 0,001) так и индекса стимуляции (40,09+ й,06)(р < 0,05) по сравнению с группой контроля. Сопоставление же показ:г:тзлк:ч больных талевой аллергией продемонстрировало отличкя .чего п.т'на. В с тот.! случае менее существенное снижение пролкфераткв-ого ответа (р 0,05) сочеталось с почти двухкратным увеличение» ндекса (р ■< 0,01).

Величины сгтстлчнг.'Г; БТЛ у больных хронически эрозивным гастро-уоденитсм, язвенной Солспль» желудка, двенадцатиперстной килки и роническим холецистите.--' достоверно не отличались как мегду собой, ак и е сравнении с контрольной группой, но были достоверно ниже р <0,001) соствет?твуг^:;л показателей больных гстевой аллергией, нелогичная картина наблюдалась при стимуляции лимфоцитов минимальной эзой фитегемагглотитша. Использование суболтимальной концентрации 1Тогека, помимо сохранявшихся различий с пищевой аллергией, заявило имение абсолютных значений властной тр:шсфор;ящии по сравнении со юрозыми донорами у больных хоон!г:?с:гттм эрозигньд» гастродуоденитом : 42% (8157+1557), язвенной болезнью гзлудха - ¡¡а 49% (6196+893; < 0,001), язвенной болезнью гзенадцятиперстной кип™ - на 43% 1254+1055; р < 0,001); в группе бсльичу хрсническнм холецнетитох! юлифзративкый ответ на субоптимальнус дозу фитогемагглстинина 0627+910) достоверно не отличался от нормальньх показателей. Эффект ггимальной концентрации ^.итогека ка РНТЛ был однотипным при всех следуемых гастпоэнтзролсгнчс-ских заболеваниях и характеризовался ияением абсолютной величины пролиферативной активности лимфоцитов 3? до 43% (1Ы69+2327 - 16634+2202) по сравнению с контрольной уппой (р во всех случаях 0,001).

Анализ значения индекса стимуляции подтвердил отсутствие раэли-й между клиническими группами при активации лимфоцитов минимальной зой фитогэмаггяктинина. Использование субоптигальной концентрации зволило выявить, по сравнения со здоровый; донора:.::;, незначитель-з падение индекса стимуляции у больных хронический эрозивным гас-здуоденитом (20,01+1,50) и хроническим холециститом (21,62+1,53) 1,3 и 1,2 раза соответственно) к более скатанное - в 1,9 и 1,7 за - при язвенной болезни гелудка (12.77/.1,02; р 0,02) и две-щатиперсткой кишки (15,97+0,63; р -— 0Г01) соответственно, при-1 отличияхрокичсского эрозивного г; гг.-о,дуоденит а и хронического

хо^ристита о? язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной киш; а также пкпззой аллергии и непереносимости были достоверны (р<0 0,001). Исследование величины индекса стимуляции пролиферативноп ответа лимфоцитов при действии оптимальной дозы митогена обнаруя депресскв бласттраясформации во всех группах больных по сравненш нормальные величинами. Так, индекс стимуляции при хроническом э[ зизном гастродуодените был снижен в 1,6, язвенной болезни желудкг а 1,7 (39,15+3,60 и 37,34+2,56 соответственно; р < 0,05), язвен? болезни двенадцатиперстной кишки - в 1,4, хроническом холецистите а 2 раза (46,43+2,71 и 30,81+1,81 соответственно; р < 0,001). Тг образом, изучение параметров РБТЛ позволяет констатировать неполк ценность включения клеток в пролиферативный цикл при всех исследу мых заболеваниях.

Не ограничьваясь однократным исследованием пролиферативного ответа лик{;оцито8, мы изучили динамику показателей БТЛ у больных извращенными нутритивны.\:и реакциями в процессе проведения сральны провокационных тестов.

Через I час после введения причинного антигена больным пищев аллергией нами зарегистрировано дсстоверное(р 0,02) увеличение спонтанного пролиферативного ответа (от П81+18Э до 1563+220),. при этом относительный прирост составил 32,4$. Тенденция к повышению абсолютных значений РБТЛ сохранялась при использовании минимально и субопти:.:алькой доз фитегемагглютинина (от 8344+920 и 14970+1151 до 9773*953 и 16053+812 соответственно), хотя существенного измен ния величины индекса стимуляции з этих случаях не было выявлено. Напротив, в пробах с максимальной концентрацией митогена отмечало! почти полуторократкое снижсгие индекса стимуляции (от 21,17+2,64 до 15,32+2,12). Динамика пролиферативного ответа вслед за дачей п; чинного нугрхеита у больных ге-пззаой непереносимостью, в противоположность истинной аллергии, отсутствовала. Естественно, что парам; ры РЕШ после введения специфических антигенов в этих двух группа: существенно разнились. Уровень спонтанной бласттрансформации, нап| мер, при пиасвой непереносимости составил лишь 34% от такового пр> аллергии (р -== 0,01), а величина стимулированной пролиферации а пробах с концентрацией фитогемагглютинина 2,5 мкг/мл не превышала соответственно 36% (р 0,001), 5 мкг/мл - 43% (р 0,001), 10 мкг/мл - 80*. Что касается индекса стимуляции, то его значения пос ле провокационного теста у больных пищевой непереносимостью и алле гией между собой достоверно не отличались при активации лимфоцитос субоптимальны?,:и дозами митогена и были в 2,4 раза выше (р < 0,05) угщ с непереносимостью при использовании фитогемагглютинина в оптимальной концентрации. Таким образом, оценка показателей РБТЛ поз

- э -

воляет дифференцировать типы извращенных реакций на уровне процессов клеточной сенсибилизации.

Вместе с тем, в 10% случаев истинной аллергии, наблюдая характерные изменения пролкферативной активности лимфоцитов после дачи одних причинных антигенов, мы не обнаружили какой-либо динамики показателей РБТЛ в ответ на введение других. Этот факт наводит на мысль о возможности сочетанного течения в организме ряда больных аллергических реакций и реакций по типу непереносимости, в зависимости от провоцирующего нутриекта, что, на нага взгляд, определяет необходимость конкретизации понятий "пиаевая аллергия" и "пипевая непереносимость''.

Аномально высокую величину спонатнной БТЯ и ее дальнейяий рост после оральной провокации причинным продуктом у больных пищевой аллергией мокно объяснить примирозанностью лимфоцитов поступашими в нелудочно-кипечный тракт, а затем диффундирующими в системный кровоток нутритивными антигенами (Andre С.et al. ,1987,Bousquet J. ,19B8)t 1 такхе коактивирусдам бластогенез непосредственным и опосредованным действием различных датокинов и медиаторов аллергических реакций, например, иптерлейкинов I, 2, 5, 6 ( A.riba îi.et al. ,1987,Kowai:ami E.. pt al. ,l9B9,Vi>tzel G.2. ,1989 ), тумороне;фотичсского фзктора-об

Daable Я.£. , 19B9 ), брадикинина ( Rahman S.,

1990 ), ана&илактогенных компонентов комплемента

( Scholz ж., 199^ ). Положительная динамика спонтан-

ной пролиферации лимфоцитов в ответ на индукцию причинным антигеном, кроме того, сйидот°г,ьстзует о наличии специфической клеточной сенсибилизации. Механизм реализации данного феномена, вероятно, связан с возрастанием диффузии экстрааеллюлярного кальция в цитозоль (Шапорова К.Л., 1990, Gray L.S.et al. ,198?, Bismuth G.et al., 1990 ).

Вместе-с тем, неэффективность включения лимфоцитов в пролифсративный цикл у больных ¡тазовой аллергией при действии оптимальной дозы мито-гена отранзет истощение субстратных,ферментных и ионных компонентов клеток, ответственных за митоткческие процессы. Депрессию ЕТЛ моуст обуславливать системный дефицит ионов цинка ( Bulgarini D.et al. ,1939 ), а такте яимитируквий пролиферацию

эффект таких реактактов гиперчувствлтельности, как фактор активации тромбоцитов (Орлов Ü.M. и др., 1989), простагландины серии Е ( I&-спь Т. ft al.,1990 ), igE -содержание иммунные комплексы ( Geis R.-з., f-t al.,1987 ) и реактивные метаболиты кислорода ( Freed З.М. r t al. ,1987).

Исходное сниксниз абсолютных и относительных величин стимулированной пролиферации лимфоцитов у больных пишевой непереносимостью?

аозмо*нс, сзязако с угнетением продукции коактиватара оластогенез. интйрлейкина I - а условиях гипергистамикемии (;.;.inosroi J., 1937 и супрессируетцего эффекта циклооксигеназных метаболитов арахидоно кислоты (iakob Т., 1990 ). Статичность параметров РЫЛ при npoBi деиии провокационных тестов у больных пищевой непереносимостью сш детельстзует об отсутствии клеточной сенсибилизации, т.е. невоспр] тии иммуноцитами антигенного стимула в качестве сигнала трансдукц:

Истощение же функционального резерва лимфоцитов а условиях гастроэнтеропатологии, на наш взгляд, является, в большинстве слу ев, вторичным феноменом и может быть результатом уменьшения проду! ции митогеиного фактора, вовлечения иммунокомпетентных клеток в пэрсистирупаий воспалительный процесс и их функциональной перегруг антигенными продуктами деструкции тканей, низкомолекулярными пони-пептидами, бактериальными токсинами, лимфо- и монокинами и т.д. Снижении показателей РБТЛ, возможно, способствует усиленный хоминг функционально более активных лимфоцитов из периферической крози е пораженные органы и ткани (желудок, тонкий кишечник, желчный ny3t;f и др.НЛогинов A.C. и др., 1986).

Помимо оценки пролкферативного ответа на неспецифическкй митс ген-ФГА - мы исследовали показатели РБТЛ при действии наиболее зна чимых пищевых и микробных аллергенов

Результаты, полученные в ходе выполнения данного раздела наше работы, свидетельствуют о наибольшей частоте сенсибилизации к алле гену гемолит!гческого стрептококка, митогениые свойства которого проявились у 10% больных пищевой аллергией, 6,3% - пищевой неперен синостьа, 12,5% - хроническим эрозивным гастродуоденитом, 9,1% -язвенной болезньи желудка, 9,5% - хроническим холециститом и у 8% здоровых доноров. Положительный феномен ЬТЛ на аллерген коровьего молока отмечался в 20% случаез пищевой аллергии и 4,8% - хронического холецистита. На аллерген целых куриных яиц среагировали 10% больных пищевой аллергией и 5% - язьенной болезнью двенадцатиперст ной кишки. Индукция пролиферации лимфоцитов аллергеном кишечной па лочки обнаружена в 6,3% случаев пищевой непереносимости, 5% - язве: ной болезни двенадцатиперстной кишки и 4,8% - хронического холецис тита.

Однако, помимо прямого свидетельства сенсибилизации - наличия БТЛ при действии специфических аллергенов, - на наш взгляд, имеете: еще и косвенный признак, а именно, - высокий уровень спонтанной пролиферации (выявленный в 70% случаев-истинной пищевой аллергии). Осознавая дискуссионность данного предположения, мы, тем не менее, считг"зм небезынтересным отметить, что увеличение спонтанной РБТЛ

на эО% и более по сравнению со среднестатистической кормой наблида-г.ось в 12,51 случаев Афонического эрозивного гастродусденита, 18,2« - чзвенной болезни желудка, 15% - язвенной болезни двенадцатиперстной кклки, 14,3% - хронического холецистита.

Исследование спектра сывороточных иммуноглобулинов выявило у больных пкаевой аллергией наибольгтуп концентрацию ^ А (2,72+0,36 г/л), превышающую контрольные величины (1.27+0,46) более чем в 2 раза (р 0.02). Аналогичные тенденции наблвдались в уровне й (1с,1сч_1,оу и 12,24+1,60). Напротив, содержание М пои гг/лэеой аллергии (I ,¿2-0.11! сыло почти в полтора раза ниже показателей доноров (1,7СчО,16; г 0,02) и больных пкиевой непереносимостью (1,65+0,16; р 0,05). Селективный дефицит М зарегистрирован такте при язЕенноР болезни ('0,97+0,11). Вместе с тем, достоверных отличий в уровнях иммуноглобулинов при пищевой непереносимости и хроническом холецистите по сравнению с нормальными величинами выя-нить не удалось.' Возможной причиной дисл.чмуноглобулинемии при пищевой аллергии является количественный дисбаланс плазматических клеток вследствие нарушения процессов дифф^ренпкровки Ь-лимфоцитов (Кононов А.Б. и др., 1УВу, Аруин Лл1. и др., 1990, Кулыга Е.Н. и др. ,1992). Не исключено, что возрастание системного А и Q - синтеза

компенсирует недостаточность локальной секреции глобулинов в слизистом талудсчно-кгаечного траста (зЬакгЪ Г. ,1?е5,Всаг1еи К.М. ,1989).

При анализе иммунокомплексных процессов уреличенке концентрации более чем на о0% контрольного уровня обнаружено в 43% случаях пивевой аллергии. 16.3% - пищевой непереносимости, 6.7% — язвенной Еолезни, 12.5'?.- хронического холецистита. Вместе с тем, только при тшевой аллергии повьшенное содержание ЦЖ (2о.0у+3,74 ед.оптич. плотности) достоверно отличалось от показателей здоровых доноров (15,76+1,62; р -г 0,С'5), а также Сольных юте вой непереносимостью (16,32+1,57; р С.05) и язвенной Ьолезнью (14.8+1,50; р < С.02). причинами аккумуляции именных комплексов могли быть: интенсификация комплекеоойсазования вследствие избытка антигенного материала, значительная посчность, низкий коэффициент утилизации и пистоли ль-ност>- лревалируплих пли гагаевой аллергии Е- и 1т -есдержвдих {Ш (5-аряас-111 а1., 1987 ). дефицит факторов кокпяекэнта, ответственных за предупреждение иммунной щэеьп-питзции и йК-солкби-лкзацит (БсМПЧгП 1'.А. е*. а1. ,19£5 ), а также редугспия емкости йагоцитарной системы (Виноградова Т.В. и др., 1986), что подтверждается выявленной нами дефектностья кислородзависимых функций фагоцитирующих клеток (рис.1,2).

Рис.1 ЛШИНЖАВИСЖА;! ХЛ'ДОШШЕСЦШШИ ДНГИВИРЦБАКНиХ СЛССКйЗ!!-РСЗАНКШ ЗИМСЗЖМ К£Й5'иЖ5 ЕОДЫЖ ПК2Б311 АГОЕРПЕЛI; .ПЛЕВОЙ НПЕРЕНОСЖ ОСТЬК(2) ,Ц?02ЙЕН1И ГАСТРОДУСдайШиЗ) ,НЗ-£ШС;*1

кшеЖьэ жвлдаи-и х^нддашрсшса кадкэ>.хгаияБсюк хо-

лещсгигсш6) и здоровых дсн0р0б(7>

Рис.2 ЛШЙКОЛЗАВИЗШЯ ХЕМ/С1ШИНЕСЦЕНШ АКТ/ЗИР08АКНКХ ФОРЬСЛ-ЧИРЙСТАТАЦЕТАТСМ М0Н0НУКЛЕАР0В( ОБОЗНАЧЕН® ТЕ «Е )

3 4 Ь лип

В группе больных пищевой аллергией значения максимальной амплитуды (484,8+18,0 мВ) и интегрированного показателя ХЛ за 8 минут (3010+164 мЗ мин) были снижены примерно на 33%, скорости послепико-вого падения люминесценции (22,3+1,8 мВ/мин) - на 49% по сравнении с контролем (788,1+16,0; 4839+2,9 соответственно; р 0,001); время достижения рика (1.10+0,14) оказалось укороченным в 4 раза (в контроле 4,06+0,143; р < 0,001). Вместе с тем,максимальная скорость респираторного взрыва (532,9+51,3 ыЗ/мин) и интегрированный ХЛ-от-вет за первую минуту (336,4+19,9 мВ мин) были существенно увеличены: относительный прирост составил 159% и 76% соответственно (в контроле 205,9+8,3 и 191,0^9,4; р с 0,001). Почти в 3 раза большей была и доля первой минуты в обшей светосумме (11,64+0,76 при норме 3,91+ +0.18%; р -- 0.001). Следует подчеркнуть, что такие выявленные при пищевой аллергии изменения как укороченное время достижения пика, зтеокие максимальная скорость респираторного взрыва, интегрированный показатель ХЛ за первую минуту и его доля в обшей светосумме достоверно отличались не только от показателей доноров, но и больных других клинических групп, включая пипевую непереносимость.

Особенности Л^Хй стимулированных опсонизированным зкмозаном нейтроЛилов при пищевой непереносимости были следующими. Максимальная амплитуда (-468,7+22,7), интегрированный ХЛ-ответ (3021+137) и скорость послепикового падения люминесценции (18,8+2,8) не отличались от таковых при аллергии, но были достоверно ниже контрольных величин на 41, 38 и 58% соответственно (р < 0,001). Время достижения пика (4,0^+0,32), наоборот, соответствовало показателю здороЕых доноров, но оказалось почти в 4 раза удлиненным по сравнению с аллергией (р < 0,001). Максимальная скорость респираторного взрыва при пизевой непеоонссимости (132,0+12,2) составила лишь 25% такозой при аллеогии и была на 36% ките контроля (р 0,001). Интегрированной показатель ХЛ за первую минуту (169,6^15,7) не отличался от нормы и оказался на 50% меньше, чем у больных аллергией (р 0.001),. а его доля з общей светосумме (5,49+0,46) превышала в 1,4 раза (р 0,001) нор'.'альнуго величину, но была сниженной в 2,1 раза по сравнению с соответствующим параметром больных пстевой аллергией (о < 0,001).

У больных хроническим эрозивным гастродуоденитом, язвенной болезнью желудка, двенадцатиперстной кишки и хроническим холециститом величина максимальной амплитуды активированных опсонизированным зимозаном нейтроФилов была сниженной от 27 до -42% по сравнению с показателями доноров (р во всех случаях <. 0,001). Наименее выра-генная депрессия наблюдалась у больных хроническим эрозивным гастро-

дуоденитом {o'."j ,ù*fi7 ,'С), причем различия зтой группы с язвенной fio-гчяЯьа желудка (4бЗ,1'+5Э,о), диенадцатииеоетксй кипим (453,1+18,0) и холециститом (481,&к.0,0) он ¡и достоверны '.>,¿¿-0,002/. гремя

достижения пика ХЛ при хроническом ороэияном гас :родуодените ('1,66+ +0,34) и язвенной болезни желудка 14 ,2оj-0 ) сзотвстстзойало нор--мальным аеличинам, а при яов-знноЯ болезни двенадцатиперстной киакк (5,41+0,29) и хроническом холецистите îb.;îmj,40) оказалось удлиненным по сравнению с контролем (р с 0,001). Отлиния мечду язвенной болезнью желудка и язвенной болезнью двенадцатиперстной килки, а также хроническим гастродуоденитом и холециститом были достоверны (р<С 0,01-0,05). Время достижения пика ХЛ при перечисленных заболеваниях было более продолжительным, чем при пилевой аллергии 'р ао всех случаях < 0,001). Максимальная скорость респираторного взрыва у больных гастроэнтерологическими заболеваниями.по сравнению с.показателями доноров, снижалась, з среднем, на ЗУ-йо% ip<0,0ul), я зависимости от патологии. Наименьшая ее величина зарегистрирована при язвенной болезни двенадцатиперстной кишки (92,1+6,2). Различия этой группы с эрозивным гастродуоденитом ( 130 ,¿>10,3 ) были достоверны (р<0,0и1). Во всех случаях достоверном было и снижение скорости респираторного взрыва по сравнению с показателями больных пиаевой аллергией (р < 0,0-1), Интегрированный УЛ-ответ за 8 минут при исследуемых гастроэнтерологических заболеваниях (2665+125 -3375+168) был ниже контроля на 31-41% (р 0.001). Различий по этг-му параметру между клиническими группами не выявлено. Лнтегрирован-ный ХЛ-ответ за первую минуту, по сравнению со среднестатистической нормой, снижался только при язвенной болезни телудка (I16,3+iû,I) и двенадцатиперстной кишки (116,9+6,7), в обоих случаях на 39% (р 0,001). Отличия этих групп по данному параметру от эрозивного гастродуоденита (183,6+24,6) были также достоверны (р< 0,01-0,001) Во всех случаях интегрированный ХЛ-ответ за первую минуту оказался сниженным по сравнению с показателями больных пищевой аллергией (р< 0,001). Доля первой минуты в общей светосумме при эрозивном гастрсдуодените (5,23+0,44) и хроническом холецистите (4,34+0,26) превышала показатели здоровых доноров (р -- 0,01-0,001). а также больных язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки (¿,12+0,21) (р<0,05). При всех исследуемых гастроонтерологических заболеваниях доля первой минуты в общей светосумме была достоверно меньшей, чем у больных пищевой аллергией (р < 0,001). Скорость послепиково-го падения люминесценции при эрозивном гастродуодените (22,1+4,5), язвенной болезни желудка (19,9+3,0), двенадцатиперстной кишки (15,8+2,4) и хроническом холецистите (16,0+2,6) оказалась примерно з одинаковой степени (на 49-63%) сниженной по сравнению с контролем

íp O,COI).

'Jec!'n.-bKo иная кзрп'на наблюдалась при исследоаании ЛЗХД моно-1уклеароз, стимулиоомннкт р.'А. лак я и "предыдущем случае, макскмаль-1.-1Я амплитуда ("O,8+6,о) :t интегрированный показатель ХЛ за ö кинут '. 3"3,-'+32 Л ) при пкяезои аллергии Сыпи, по сравнению с контролем ' 110.5+3,5 и 560,3+16,1 соответственно), снижены примерно на 40% р 0,001), эремя достижения I I,öö*), II) пика сказалось уксрочен-•км з 4 паза ( у донороз - 3.92+0,22; р 0,001), максимальная еко-:сстъ респираторного азркза (78,9+10,7; превышала нормальные зеличи-:ы (35,3+3,7) на 120% (р 0,001), а .¿эля первой минуты в обпей эетооумме (14,77+0,70) была зоэросщей з полтора саза (в контроле ;,91+0,Ьй; р < 0,001). Указаннье отличия яме-и яссто к при сопос-авлении с показателями сольных других клинических групп, идняко. остозерных изменений интегрированного показателя .01 за первую мину-у (.50,7+15,2) и скорости поелепикозого падения люминесценции (4,'у2+ 0,78), по сравнению с показателями »скосов i.gd,4+3,í и 5,£4+0,73 оответственнс), мы не сснаружиди.

Максимальная амплитуда (77,1+5,4) и интегрированной ХЛ-ответ знснуклеаров (403,4+28,1) при пищевой непереносимости оказались 1кже ниже контроля на 38 и 26% соответственно (р < 0, JC £ : : s,« vT-лчались ог показателей при аллергии. Время'достижения пика 12,26+ ,27) было укорочено з 1,4 раза по сравнения с нормальной величиной : O.Oi) и удлиненным почти з 3 раза по сравнению с пищевой аллео-

Максимальная сксрссть респираторного ззрыва у больных пищевой ¡переносимостью (30,7+3,4) соответствовала показателям здоровых по->роз, но составила лишь 48% таковой при аллергии (р 0,001'!. итерированный показатель ХЛ эа первую минуту (37.9+4,2) оказался на '.% меньше данного параметра в контрольной группе (о •••'. 0,001! и на i% - в группе больных, страдающих истинной пищевой аллергией, доля рвой минуть в общей сзетосумме (9,17+0,57) не отличалась ст нос-льной величины, но была в 1,с раза ниже, чем при аллергии tp^O.GOj орость послепикозого падения люминесценции при пищевой непереноси-сти (3,11+0,54) окапалась достоверно сниженной как по сравнению с назателями доноров {р 0,01), так и больных аллергией ic< 0,02).

Максимальная амплитуда ЛЗХЛ стимулированных ЯЛА монснуклеаров и эрозивном гастродуодените (73,5+0,6), язвецной болезни желудка 1,6+6,2) и двенадцатиперстной кишки (63,4+2,8) была на 37—^5% чьше нормальной величины (р^ 0,001), а при хооническом холецисти-(136,6+4,5) достоверно превышала показатели доноров и Оольньх гальных клинических групп (р 0,001). Время достижения пика ХЛ то укорочено пои хроническом эрозивном гастродуодените (2,41+0,35; с по сравнению с контролем (о< 0,002), так и язвенной болезнь.-;

желудка (3,80+0,76), двенадцатиперстной кишки (3.44+0,¡¿С) и хроническим холециститом (3,45+0,29)(р <-0,01-0,Оо). Во всех группах время достижения пика было существенно продолжительнее такового пр пищевой аллергии (р< 0,001). Максимальная скорость респираторного взрыва оказалась наименьшей при язвенной болезни двенадцатиперстно кишки (20,8+1,5): разница с показателями доноров составила 40% (р 0,001), больных эрозивным гастродуоденитом (35,7+5,0) - 42% (р 0,002;, хроническим холециститом (49,7+6,р) - о8% (р < 0,001). достоверное превышение скорости респираторного взрыва при хроничес ком холецистите отмечалось и б сравнении с язвенной болезнью желуд ка (29,8+4,6; р-^-0,02). В то же время величина дачного параметра во всех исследуемых группах была значительно меньше, чем у больных пищевой аллергией (р < 0,02-0,001). Интегрированный ХЛ-ответ за 6 минут, по сравнению с контролем, снижался при хроническом эрозивно гастродуодените (415,0+28,7) на 26% (р< 0,001), язвенной болезни чегудка (391,6+37,2) - на 30% (о 0,001), язвенной болезни двенас цатиперстной кишки (334.5+ID.3> - на 40% (р< 0,001), и оказался у больных хроническим холециститом (64о,8+20,2) увеличенным на 15% (р <- 0,COI). Отличия по этому параметру хронического холецистита о эрозивного гастродуоденита и язвенной болезни желудка и двенадцати перстной кишии, а также эрозивного гастрог;'оденита от язвенной болезни двенадцатиперстной киски были достоверны (р < 0,02-0,001). Интегрированный ХЛ-ответ за первую минуту был ниже показателей дон ров при хроническом эрозивном гастродуодените (42.5+3,8) на 23% (р< 0,01), язвенной болезни желудка (38,3+4,2) - на 31% (р-С 0,01 язвенной болезни двенадцатиперстной кишки (31,8+1,9) - на 43% (р ^ 0,001) и остазался интактным у больных хроническим холециститов (сЬ,0+4,3). Различия эрозивного гастродуоденита и язвенной болезни ст хронического холецистита, а также эрозивного гастродуоденита и пищевой аллергии с язвенной болезнью двенадцатиперстной ккикк были достоверны 0,01—0,001). Доля первой минуты в общей светоеуг.-. -при гастроэнтерологических заболеваниях соответствовала показателя здоровых доноров, но оказалась значительно меньшей, чем у больных пищевой аллергии (р во всех случаях < 0,001). Величина этого парь метра при хроническом холецистите (8,63+0,62) была также достоверн сниженной по сравнению с ,эрозивнь;м гастродуоденитом (10,13+0,35). скорость послепикового падения люминесценции при хроническом зрози ном гастродуодените (2,07+0,38), язвенной болезни желудка (3,54+0, и дьенадцатиперстно;' кишки (3,15+0,40) уменьшалась соответственно на 63, 36 V. 43% от среднестатистической норма (р< 0,05-0',001) и возрастала ка 55%. у больных хроническим холециститом (8,6+1,35; р

< u.Üó). Отличия эрозивного гастродуоденита и лзвенной болезни от хронического холецистита были достоверны (р -- 0,00^—0.001). Таким образом, анализ параметров ЛЗХЛ стимулированных спсонизированным ..'имозаном и гсрболмиристатацетатом полиморфо- и мснонуклеарных клеток больных исследуемых клинических групп позволяет констатировать дефектность кислородзависимых зст?ектсрных функций фагоцитоз как на уровне активации Fe и СЗ-рецептсрных структур, так и протеинкиназы 0. • Лс.тгячение составляет тишь мононуклеарная фракция больных хроническим холециститом.

Следует выделить, что у ряда пациентов с патологией а системе пипеварения отмечался "аллергический" тип хемилюминесцентной кривой, т.е. низкий, но значительно более ранний ХЛ-ответ, иногда имеющий бимодальный контур. Характерный, я основном, для пиленой аллергии, данный признак был выявлен в 18% случаев эрозивниго тг-.отродуоденита, 14% - язвенной болезни желудка, 7% - язвенной болезни двенадцатиперстной кишки, &% - хронического холецистита.

Исследование кинетических параметров .'tJXJi а ходе оральных провокационных тестоа у лиц с извращенными нутритивными реакциями выявило интересные особенности. Гак, через I час после введения причинного антигена больным пищевой аллергией максимальная амплитуда лЛ чейтрофи.тов возрастала на 44% (от 468,6+30,4 до 660,0+58,1; p».ü,00Ц максимальная скорость респираторного взрыва - на 27% (от <эс8,7+80,0 до 836,7+104,5), интегрированный показатель ХЛ за 8 минут увеличивался на ЬС% (от 2050+337 до 4С82+504); р <. 0,02), интегрированный показатель за первую минуту - на 27% (от 415,6*18,8 до 526,7+40,1; р 0,05), скорость посяепиксзого падения люминесценции повышалась на üQ% (от 20,1+2,9 до 30,0+3,5)(р < 0,05). Вместе с тем, отмечалась некоторая тенденция к удлинению времени достижения пика (от 0,76+ +0,08 до 0,91^0,14) и уменьшению доли первой минуты з общей светс-сумме (от 14,47+1,25 до 12,17+0,90), однако эти различия были недостоверны. Подобная динамика параметров Л2ХЛ при пипево? непереносимости отсутствовала,вследствие чего максимальная амплитуда лЗлЛ нейтро-филов после провокации в этой группе (371,3+28,8) составила лишь Sb% такозой при аллергии (d<_ 0,001), максимальная скорость респираторного взрыва (97,Ь+[4,4) - 12% (р-' 0,001), интегрированный показатель УЛ за 8 минут (2528+169) - по% (р--- 0,01), интегрированный показатель .ХЛ за ггпвуо минуту (148,3+35,9) - 28% (р-^ 0,001), скорость послепиковсго падения люминесценции (19,3+э,о) - 64%. Время достижения пика при пищевой непереносимости (4,4+0,о9) оставалось, по сравнению с аллергией, удлиненным примерно в о раз (р- 0,001), а доля первой минуты в общей сзетосумме (5,э5+1,13) - сниженной больше чем

б 2 раза (р 0,001).

Почти аналогичная картина наблюдалась и при исследовании ЛЗХЛ мононуклеарной фракции. Б втом случае относительный прирост максимальной амплитуды (с 83,9+11,У дс 123,7+14,2) составил 48% (р<0.0 интегрированного показателя XJi за 6 минут (с 412,7+56,7 до 627,4^ +68,8) - 52% (р< 0,Со), интегрированного показателя за первую мину \ о 64,5+8,2 до 61,2+5,9) - 26% (р <* 0,1). Отмечалась тенденция i: удлинению времени достижения пика (от 1,21+0,22 до I,8«+0,30), сш-*ению максимальной скорости респираторного взрыва (от 83,0+17,4 до 73,2+V,i), уменьшению доли первой минуть: в общей сьетссумме (от Id.IBjtC,9с до 13,6ч+1,03) и повышению скорости послепикового паден! люминесценции ют 5,77+I,3j до 8,20+2,06). введение причинного ант] гена сольным пищевой непереносимостью не сопровождалось увеличение; выработки ii'K мснонуклеарами. Ь рззультате максимальная амплитуда люминесценции мононукграров после провокационного теста в этой rpyi пе (73.2+о,С) составила таковой пои аллергик (р 0,02), макс! мальная скорость респираторного взрыва (23,8+4,93) - 22,5% (р<С,0С интегрирозакнып показатель Х.\ за ь м;:нут (403,3+40,8) - 65% Ср•*'-С,С интегрированный показатель ХЛ за первуп минуту (3»,7-7,0) - 49% (р~г с,01), скорость посяепикового падения люминесценции (1,42+0,Зс

- 17% (р< 0.02). Бремя достижения пика при пищевой licnepeHocuwocTv (3,с6+0,67) было увеличено, по сравнению " аллергией, почти б 2 pat (р<- С,Со), а до г. у. первой минуть' в обпей светосумме (8,46+1,39) оставалась сникеннйй в 1.6 раза (р<0,01).

Изучение Л2П клеток цельной кров;: в ходе провокационных тестс выявило у ссйънкх пищевой аллергией увеличение начальной акплитудь на 184% (от 1,28+0,33 до 3,63+1,16, р<0,1), возрастание скорости респираторного ьзрльа ка 83% (от 0,6:_^0,0е до 1,43+0,26; р< 0,05). прирост интегрированного показателя >„, за 16 минут на 28% (от 118.;. ^ 21,0 до 163,3+26,7), интегрированного показателя за первые 8 мину

- на 82% (от 39.5+6,6 до 71,8+15,I)(р 0,1), повышение скорости послепикового падения люминесценции на 114% (от 0,(7-^0,02 до 0,1ь+ +С,07), Наблвдалась тенденция к увеличению максимальной амплитудь

>ст lj.aa+1.63 до 13,06+1,74), укорочению времени достижения пика (от го.32+1,4о до 10,06+1.80) и возрастании доли первых восьми мину l общей-светосумме (от 34,4+3,V до 42,8+4,6). Анализ хсмилюмикесцен тного ответа клеток цельной крзви у сольных пищевой непереносимость: после провокационного теста выявил тендгштшо к снижению начальной и максимальней амплитуды, максимальной скорости респираторного взрыва, а так*« интегрированного показателя за 16 и 8 минут, вследствие чего отличия от положительной динамики параметров ЛЗ.ХЛ, имевшей мес-

"e 1ллесч:н, '."ли ^ еще а большей '?твп,5"И. Гак, пссле

iwrrwsii ч.-.-^сс-ня на-:.-' -ьная адплнтуда люминесценции клеток цельно?! •'г.олк у 'олънкх- пижечсй цогчоеноск^гстьза Í0,61+0, Ib) составила лишь '.'Л ./: tí при аллеогии о-С О ,'J Г), максимальная анпгитуда

"'.r-j ,&с) - (р 0,02), уаксимальняя скорость респираторного чзо^па (0,69+0,20) - 46';?. \р С,2о), интегрированный показатель Х-1 v'3 Г£ минут i83,6+'?,4) - ó 13 íp - f.\CI), •/нтегркрозанк,,и показатель rri п минут Сг?,с + .,4) - 38Й (с< С.01;, скорость лослеггпксаого л-сминеецекипи _ Время достижения пика при

гиг«; ¡oíi непереносимости (ГЗ ,33+1,21 >, го сравнению с аллергией, ■г'.'лп удлиненно в 1,3 рола, а _:сл:т носы/и кинут т обшей сзе-

то"у;;ме (32,п~3,0! оказалась сниженной почти э полтора раза (р<0,1). 1 л • образом, хеми * г • *к: ¡ее пентны и чцаягз о кис лиге гчке го "'етабопизг.а пел^с^ет диттеренцировать типл: ;«впап;енных реакции ча уровне про-цссоса клеточной еянсмсилиэасии.

;<V,-.C7,; ¡qs HCtkhhgí> аллесгин, каслсдая харак-

терное узег::ч..нп<.' гг>'--рзцп: .-. :л гагепитэми коовк после ¿ачи одних ¡•рнчиннгх антигенов, на с^нвсуй.-я к л. к о й-л и б с динамики показателей .13X2 -з ответ на Я"»дение других. ;?тет такт подтверждает выдвинутое нами предположение отиесмте-ъчо зсс:.!отпости си- "тт-ного гоче-<ия аллергических реакций и сеякцнй по типу нопеоенсснмссти з ерга-

одного и тего "в гольнсг~., i зависимости ст провоцирующего •. .''"нта.

/¡сходя из лат о Ъюиопогйчс-скйх механизме!» аллергии, vo»no предположить, что ,'сходнее снич-мкр максимальной амплитуды и сСяего интегрированного показате.::-: -•.->. чете я следствием супрессии респираторного ззрыза такими кещмтоопмя и цитскинами как гистамин, сепе-тонин, эндогенные простагландинк (£1, £2, (.c^rbut t wnag'T О., 1990 ), аденозин (>Hlb"rteva :?. ,19S7). Fe исключено, что вклад а депрессию отас.:кте.лы»огэ метаболизма вносят дефицит нсноа цинка (Бабенке Г.-... и до., ' , псечал.ноукзагт js-адрене отеческая реактивность < Vaes т..--. il., 1^-лО , а так-»е истечение •^рментных (тос^олипазр a¿, ... гфотеинкуная« , '.!., МА^Н-оксидаза). субстратных (чнозитоловые лигнды, к-тьмодулин), ионных (Оа**, l'g"^, '.{"", :г а+) ¡{ энергетических i. гексозомоносгосфатный шунт, креатинФос-токиназный и другие пути) систем фагоцитирующих клеток.

Что ке касается гиперреактивностм начальной ¿азы генес-ции г.'1:\ (укорочение времени достижения пика, высокая максимальная скорость респираторного взрыва, увеличение интего/.оованного показателя за первую минуту и его доли в обцей светосумме), а таг«з интенсификация окислительного уетаоолизма после аллергенной индукции, то здесь,

вероятно, следует исходить из возможной примированног.?;; полиморФо-и мононуклеарав реактантами гиперчувствктельности: аназилактогенны-ми таеторами комплемента (Hansen G.U.et al.,19E7 ' < 6-липоксигенаэ-ными метаболитами арахидонозой кислоты ( Ga^aon L.ct al., 1989 брадикинином (Stewart A.G.et ь1. ,1=90 ), интерлейжнами - I, 6, 8 ( Csvüiloc. J.l:. , 199° 1, гранулонитар-ю-макрофагальным коло-

ниестимулируюсим Фактором (Cc.fi» у ?..G. ,193? ). туморонекротическ;» л\актсооу- ы, и,ивИк E.S.« td. ,1959)/Фактор:?.: сктивагии трэмбоюто! U-Г' tolsai 11. et ol. ,1957 ) 1 кнтерферонгм ^Casoatflla К.А. ,1983] л, Ir v» ,e~ такте ic Ig Q и Ig Ь-содержаокми имму;

hü:.!!', комплексами (Corter A.et cd. ,1967,Kazi.istio C. ,1457,S.ica L. ,19S: *,-акт активации респираторного sapwaa причини! w.; аллергенами сз: пстельствуст о способности й&гоцитсу опосредовать антигекспгцифичес-кис. очевидно, антктелозавизимие, зФ:»;кторные реакции ( Dt-ssciat Г.-'98?,Campbell ?.А. ,1990 '. а наличие ионоФорнкх снойсть у многих су.п-лиспайероз респираторного взрь'вл заставляет предположить массивкуг. дил^.узик? экстрацеллюлярного кальция через активированные ионные как ль> в питозоль как возможный механизм кондиционирования Фагоцитиру?:-яих клеток (Григорян Ы.Р., I98S, Rsadrimanpita С. rt al., 1990 ).

Депрессия окислительного метаболизма моно- и полиморфонуклоаро при пищевой непереносимости может быть обусловлена присутствием сь1-эоооточнкх Факторов, бяокируэдих респиратордай взрыв, например, гис тамина, ccdotohkhа, простагландиной EI, Е2, jx'i и некоторых других агентов (lEogawa j.K. ,1935,Korbut R.<=t nl. , 1959,Dwr a^rr 0. et al. ,49

Угнетение киссородзависимых зФФзкторннх функций «ißгонитов у больных язвенно-воспалитеяьккмк поражениями гастрздуоденальной зоны возможно. связано с истоаением отвествснннх за генералик АЖ клеточ ных систем вследствие вовлечения нейтрофилоь и ыононуклеаров в хронический патологический процесс, но может бить результатом икгиб*--рующегс действия сывороточных Факторог. (лимфе- и монокинов), инфек-ционно-токсических агентов, продукте я тканевой деструкции, перегрузкой иммунными комплексами, а таг.че усиленной миграцией функционалы; более активных Фагоцитов в ткани пораженных органов (желузка, киаеч иика. »-элчного пузыря и др.) (Логинов A.C. и др., 1966). Обнарукен-но-: ■•»е увеличение» продукции кислородных метаболитов стимулированным Pi'/i ^ононуклеарами больных хроничоским холециститом, свидетельству;: шее с гиперактивации протеинкиназной систем, отракаел1 стандартную реакцию моноцитов в условиях инфекционного воспаления, каковым по своим патслогсанатомпческим особеностнм язляетсь холецистит ( Kuroii л.ot al. ,1969)1 ь? кроме того, может Сыть обусловлено кндуцирушим респираторный взрыу эффектом билирубина ( Eil^ !.:. г.1. , 19&9 )

Ijp? "í'bHo изучением гуннписнатьнь.х параметров иммунскампе-тэнтных клеток было определено их количеотЕеннсе содержание э леои-гесической >гвсви.

Среди всех исследуемых клинических групп у Сольных хроническим со лецнститсм сбшее количество лейкоцитов íc,45+0,22 х!Оэ/л ), а также абсолютное содержание нейгойилов (3,52+0,18, палочкоядерных fO,04+0,01), сегментоядерных лейкоцитов (3,47+0,13), моноцитов (0.18+10,02) и лгайонитов (1,64+0.07) были наименьшими и практически .•о всех случаях достоверно (р-с_ 0,С5-0,С01) отличались от соответст-рупдих показателей при пилавой аллесгин (7,64+0,58; 4,7I+0,20;0,II+ _ч),02; 4,52+0,32; 0,25^0,03; 1.91+0,72). пипеьой непереносимости !9,98+3,41; 4,31+0,29; 0,08+0,02;~4,22+0,23; 0,27+0,03; 2,03+0,11), хроническом эрозивном гастродуоденнте \6,45+0,43; 4,12+0,31; 0,08+ +0,02; 4,04+0,31; 0,19+0,04; 2.00+0.13), яззенной болезни желудка (5,98+0,46; 4,61+0,34; G,C7f),C2; 4.¿5+0.33; 0.26+0.07: 1.33+0,12). ч'звенной болезни двенадцатиперстной, ккаяи (7,21+0,35; 4,81+0,29; 0,10+0,02; 4,71+0,28; 0.2840,03; 1,96+0,10). У больных коническим •солецкститом зарегистрирован так^е самый низкий уровень г>озино4ило? íO.IJM),C2). В лтгм случае достоверными была различия от нишвзой щяергии (0,76+0,40-) м =»5генной Селезни дзенадсатипеос-•■»ой кизки 0,05). Кроме того, анализ абсолютного "одер'кания попул-ций лейкоцитоз з периферической крови обнаружил достозеонсе увеличение количества чекоцитез при язгенней болезни желудка по сравнении с зоозивныу гастсодуоденитом (р ^ 0,02). Обратила на себя внимание эьсог'ап лбеолютная неншнтраиа оезинорнлев з периферической теови еояышх пилоне Я аллостей, превмваотая таковую, наггоккоо. ¡таи пшееой непереносимости i, Io+0,02) больше чем з 5 раз. Однако большой разовое мкчгте параметра (ст 0 до 9,15; предопределил отсутствие достовернее: з елк.-ячиях ппзовоа аляевгми с другими ¡заболеваниями. Аналогникгв картина иайлгздапась и з относительной количестве позино-Ьилоз. следует подчеркнуть, что а целом оценка пооцентлого содержания лейкоцитов сказалась гораздо менее информативной. Мы смогли лишь выявить досто8?знс.» увеличение относительного числа циркулирующих ^оноцитез у больных поденной болезнью гелудка (5,06+0,60%) по сравнению с показателями при теневой аллергии (3,48+0,37), язвенной болезни дзенпдпатиг.епстнс-.й .-;иг:кп (3,91+0.36) и хроническом холецистите (3,37+0,29)(p-i /2-0,01;. У сольных пищевой аллергией, язвенной болезнью телудк: двенадцатиперстной кишки обнаружено достоверное снитение относительного количества лимосцитов (26,6+í,4; 26.7+1,-ч; 27,2+1,0 соответственно) по сравнению с пищевой непереносимостью (31,0+1,4) и хроническим холециститом (30,6+1,1) (во зсех случаях

- с? -

р< 0.05).

Учитывая выявленную заинтересованность Фагоцитарного ЗЕена иммунитета при исследуемых заболеваниях и, в частности, вероятную роль реактивных метаболитов кислорода в генезе аллергического воспаления, мы сочли неооходимык оценить направленность медиатсрной и аарг/лкологической модуляции респираторного взрыва.

В данной работе методом ЛЗХЛ исследовалось изменение генерации АФК стимулированными форболмиристатацетатом нейтрофилами периферической крови здоровых доноров при внесении m vitro в момент достижения пика люминесценции стандартных доз 10,1: 0,5; I мг/мл) медиато-оов немедленной гиперчувствительнооти гистамина и серотонина, бло-катора HI-рецепторов димедрола, блокатора Н2-рецепторовгистодила, активатора продукции противогистаминных антител гистаглобулина, стабилизатора мембран тучных клеток интала и глюкокортикостероида гидрокортизона ацетата. Во всех случаях продемонстрирована дозозависимая супрессия респираторного взрыва перечисленными агентами. Коэффициенты ингибирования JI3XJ: гистамино;.' составили 1.19+0,02; 1,51+0,08; 2,99+0,12; серотошноц- 1,08+0,02; 1,62+0,09; 3,12+0.14; димедролом - 1.12+0,03; 1,20+0.03; 1,37+0,08; гистодилсм - 1,29+0,03: 1,58+0,1; 2.11+0,21; гистаглобулинем .V 1,17+0,03; 1,37+0,06; 1,75+0,09; Интелом - 1,07*0,02; 1,14+0,03; 1,23+0,0с; гидоокортизоном - 1,27+0,05; 1,67+0,1и и 2,8о+0,3о. Необратимый эйек ;,:аяо',: дозь отмечен только у гидрокортизона, промежуточной дозь; - у серстснина, гидрокортизона и гистодила,максимальной дозы - у гистамина, серотонина, гидрокортизона, димедрола, гистодила и интала. Действие гистаглобулина во всех концентрациях носило обратимый характер.

Обнаруженное супоессирущее действие медиаторов немедленной гиперчувствительности гистамина и серотонина но респираторный взрыв фагоцитов, наряда с описанной в литературе способностью AI'K потенцировать базоэилы и мастоцить' к нецитотоксической гистаминолиоера-ции (White li.V.Rt al. ,1927,liasini E. ,1939), свидетельствует о функционировании механизма отрицательной ауторегуляции окислительного метаболизма в условиях аллергии и позволяет говорить о протекторно;, роли гистамина и серотонина в отношении последствий свсбоднорадикального инфлюкса. Подобный эффект димедрола, гистодила, гистаглобулина, интала и гидрокортизона свидетельствует о депрессии реактивны:«- метаболитов кислорода как одном из компонентов противовоспалительного действия этих препаратсь.

выводы

1. Латогномоничными для пищевой аллергии являются высокий уровень спонтанной сласттрансФормации и неполноценность включения лимфоцитов в пролитеративный цикл при стимуляции митогенои. Изменения

в гуморальном звене иммунитета характеризуются гиперпродукцией 1в А-, 1р С, -антител и высокой интенсивностью иммунокомплексных процессов. Кинетика генерации реактивных метаболитов кислорода полиморфо- и мо-нонуклеарами отражает гиперреактивность начальной фазы и неэффективность процесса в целом.

2. Развитие пищевой непереносимости сопровождают депрессия индуцированной пролиферации лимфоцитов и угнетение кислорсдзавискмых эфоекторных функций фагоцитирующих клеток.

3. После провокации причинными нутриентами у больных гостевой аллергией возрастает уровень спонтанной пролиферации лимфоцитов, увеличиваются начальная, максимальная амплитуда лшиколзааисимой хемилюминесценции нейтрофилоз, мононуклеаров и клеток цельной крови, повышаются максимальная скорость респираторного взрыва, общий интегрированный ответ к интегрированный ответ за инициальную фазу продукции активных форм кислорода. Пои пищевой непереносимости положительная динамика спонтанной пролиферативной актизногти лкмфопитов и перечисленных параметров окислительного метасолиз.»"- -пагоокткруших клеток ОТСУТСТВУЕТ.

4. Ь организме одного и тоге же бодьного возможно сдкоэвемен-ное развитие истинной пищевой аллергии на один нутриенты у. пищевой непереносимости - на другие при однотипной клинической картине.

о. Антигенспепн^ическая стимуляция продукции реактивных метаболитов кислорода после провокации причинными нутриентами у больных истинной пищевой аллергией свидетельствует об участии данного феномена в патогенезе аллергического зоспаления.

6. Отрицательная регуляция респираторного взрчза гкстамином и серотонином отражает протекторную роль этих медиаторов в отношении последствий свободнорадикальногс инфлихса. Окислительный метаболизм Фагоцитов супрессируют также противоаллергические сермгтрепараты: димедрол, гкстадил, гистаглобулкн, интал и гидрокортизон» Данный зтфект наиболее выражен у антагонистов рецепторов гистамина П типа и 1 люкокортикостероидоЕ.

7. Хронический эрозивный гастродусденкт, язвенная болезнь желудка, двенадцатиперстной кишки и хронический холецистит сопровождаются неспецифической депрессий индуцированной пролиферативной активности и уменьшением продукции кислородных радикалов стимулированными нейтрофилами. Угнетение респираторного взрыва мононуклеаров

имее^ место при язвенно-воспалительных поражениях гастродуоденаль-ной зоны, а его активация - при хроническом холецистите.

8. Индукция бласттрансформацки лимфоцитов специфическими алл< генами, выявление в некоторых случаях высокого содержания циркули] вих иммунных комплексов, а также регистрация у стделоных больных ( патологией желудочно-кишечного тракта хаоактерного для пищевой ал; гии высокого уровня спотанной пролиферации лимфоцитов и "аллесгиие кого" типа кривой хемилюминесценции фагоцитов свидетельствуют об участии процессов сенсибилизации в патогенезе хронических забэлевг системы пищеварения.

СПИСОК ОСНОВНЫХ РАБОТ, ПСДГОТОВЛЕННЫХ ПО ТЕМЕ ДЙСОЕРТШИ

1. ilersesov А.V. ,.lugaanova Zh..S. Stimulating effect of specif: allergens on inaunocasipetent cell oxidative metabolism in allergic inflasaation. XVth Congress of European Academy of Allergol.ix. Clin. Immunol. .Paris,1992. Eur.J. of Allergol.& Clin. Immunol. ,1992.vol.' p. 147

2. liugmanova ,Abilaev A.E.^iersesov A.V.,Esenshanova G.ii. Immunological approaches to discrimination bPtween food allergy an: intolerance.Ibid.,p.316

3. .'iersesov A. V. ,.'lugaanova Zh.S. ,2senz!ianova G.J5. ,Abilaev A.£, Oxygen aietabolitos gpneratioa and orolife rativp resoonse of periphf ral blood's laounocompotent crlls in food allergy ana. intolerance. 8th Congress of Immunol.,Budapest,1992;Abstr.booK:Abstr.3920

У-. tfugmanova Zh.S. Terse so v A.V. ,Abilaev A.£. at al. Imraunopa-thology of duodenum ulcer and chronic cnolecystitis. Ibid.

5. Abilaev A.£. ,^ugaanova 2h.S. ,£seazhanava G.Ji. , .Versesov A.V et al. HLA—complex arm lympaocyte subpopulation m food allergy an; intolerance. Ibid.

6. riepcecos A.B., Яугманоза ¿.С.,- Есенжанова P.M.. и др. Окислительный метаболизм и прслиферативный ответ клеток периферической крови больных пищевой аллергией и непереносимостью, мекдународнья симпозиум по аллергология, и клинической иммунологии, Алма-Ата, 1992

7. Нугманова Ж.С., Есэкганова Г.М., Неосесов А.Б. и др. Блияни ин виво специфических аллергенов на некоторые иммунологические пока аатели при пкцезой аллергии и непереносимости. Там же.

- 2г> -

8. Есенясанова Г.М., Нугманова Ж.С., Абилаев А.Е., Керсесов A.B. Роль пищевого фактора б этиологии некоторых кожно-аллергичесшх заболеваний. Там же.

9. Абилаев А.Е., Нугманова Ж.С., Есенжанова ГХ, Нерсесов A.B. Зубпопуляпионный анализ периферических лимфоцитов у больных пищевой шлергией и непереносимостью. Таи же.

10. Тажиев Е.Б., Нерсесов A.B., Абилаев А.Е. Некоторые ишмуно-кгические показатели у бальных хроническим халециститоц. Там. же.