Автореферат и диссертация по медицине (14.00.36) на тему:Иммуногенетические и структурно-клеточные маркеры при пищевой аллергии, непереносимости некоторых заболеваниях желудочно-кишечного тракта

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН

НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭПИДЕМИОЛОГИИ, МИКРОБИОЛОГИИ И ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ

На правах рукописи

АБИЛАЕо Анзар Ергазиевич

"ИММУНОГЕНЕТИЧЕС гШЕ И СТРУКТУРНО-КЛЕТОЧНЫЕ МАРКЕРЫ ПРИ ПИЩЕВОЙ АЛЛЕРГИИ,НЕПЕРЕНОСИМОСТИ И НЕКОТОРЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАСТА"

14.00.36 - Аллергология и иммунология

А'.В ТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандиДата медицинских наук

Алма-Ата — 1992

Работа выполнена р Научном Центре региональных проблем питания АН Республики Казахстан.

НАУЧНЫЙ КОНСУЛЬТАНТ - академик Ай1Н Р£, профессор

Т.Ш.Шарманов . >

НАУЧНЫЙ

РУКОВОДИТЕЛЬ 3 доктор медицинских наук

Ж.С.Нугманова.

ОФИЦИАЛЬНЫЕ - доктор медицинских наук,

ОППОНЕНТЫ профессор С.Х.Баишева;

доктор медицинских наук В.П.Добрица

ВЕДУЩЕЕ - 2-ой Московский медицинский

УЧРЕВДЕНЛЕ институт имени Н.И.Пирогова

Защита состоится " "_ 1992 г. в_часов на

заседании специализированного Совета Д 079.05.01 ,в Научно-исследовательском институте эпидемиологии, микробиологии и инфекционных болезней Министерства Здравоохранения Республики Казахстан по адресу:

460002, Алма-Ата, ул.Макатаева, 34.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института.

Автореферат разослан "_"_ 1992 г.

Учёный секретарь специализированного совете, кандидат медицинских наук

Н.М.Нуркина

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ

Аллергические заболевания и болезни органой пищеварительного тракта занимают одно из ведущих мест в структуре заболеваемости населения. В настоящее время наблюдается повсеместное увеличение числа аллергических заболеваний, включая пищевую аллергии, -ях> полиморфизм их клинических проявлений. Аллергические состояния являются выражением нарушений в иымуннгЛ системе, проявлением дестабилизации ее структуры и функции (Петров, 1963; Беклемишев, 7986). Пищевая гиперчувствительность тесно взаимосвязана с заболеваниями желудочно-кишечного тракта (Ногаллер, ; Алексейчук, Селиванова, Т9&1). Глстродуоденит, энтероколит, язвенная болезнь, хронический холецистит часто сопутствуют или предшествуют пищевой ечлергии и непереносимости.- В то че время 70"? больных язвенной болезнью имеют .место аллергические реакции, в том числе и напищевне продукты (Будаловская, Вой-тки, Т984; г'н&тапйк1-;.-(' 1968). Аллергический'компонент обнаружен и .п'ч хроническом гастрите и гастро,дуодените" (Краснова и др., ?988).

Многие авторы указывает на важную роль иммунопатологических механизмов в развитии указаннах заболеваний (Бережная, Т986; Логинов и др., 1986;' Сапроненков, '1987; Й°гер,' Т990; Шаг Ьёгю.ъ+М-'! ., 1987). Все это диктует необходимость их детального изучения, а также эндогенных факторов, влияющих на развитие заболевания. Из последних наиболее перспективным считается исследование ассоциаций антигонов главного комплекса гистосовместимости .ОНА) с заболеваниями. ■

Известно, что течение и исход некоторых заболеваний зависят '

от генетических, в тон числе и иммуногенетических факторов (Ша-•балин, Серова, 1989). Дачные литературы сводится к популяционному подходу при определении связи Н1А-комллекса с заболеваниями (Сап-роненков и др., 1387; РГкисИаррай ё.'а.,.1989). Имеются недостаточные и противоречивые данные о связи антигенов системы Н1А с некоторыми аллергическими заболеваниями и болезнями гхлу-до"1'о-кишечного тракта (Монтаг и др., 1986; Аввакумова, и др., 1986; Адамишвилл и др., 1987; Тохадзе, 1990; Йе^ёЗ/а-'а, 1982; Йю^.'в-.а/., 1983).

При гллергии к патологии органов пищеварения выявляется количественный дисбаланс субпоьуляций иммунскомпетентных клеток, с ко-тор^м может быть связана и функциональная недостаточность иммунной системы (йегер, 7990; ¿¿¿'¿¿гто^^е'.''а' ч Т986). Сведения о с состоянии эффекторнвх звеньев иммунитета при аллергии и заболеваниях желудочно-кишечного. тракта неоднозначны и противоречив (Шар-манов, Асылбекс.а, 1951; йпцеХ' е~{ 198-1; Киэ '-е.'ь;'., Т984;

Хпап1а'Ь -е". а'? 1989). В настоящее время широкое распространение получили методы оценки субпопуляционного срстава клеток на основе фенотипирования с помощью моноклональных антител к лейкоцитарным дифференцировочным кластерам. '

До настоящего времени не найдено достаточно информативного метода диагностики истинной и ложной аллергии на пищевые продукты.

Одним из та»чх методов анализа результатов ьлмунофенотипиро-1<анич является иммунофлюоресцентный, позволяющий оценивать коли-чественрще параметры связывания моноклональных антител с субпопу-ляциямй иммунокомпетен'.лых клеток.

Наличие вышеуказанных чриччн определяют актуальность изучения ассоциаций ИТА-гштигенов с пищевей аллергией и непереносимостью и

некотпрьми заболеваниями желудочно-кишечного тракта, а талгке исследование субпопуляционного состава мононуклеарных клеток периферической крови при данных нозология*• Несомненно, сохраняется актуальность дифференциальной диагностики пищевой аллергии и непереносимости к пищевым продуктам, которая частично может быть разрешена новыми, изучаемыми наш подходами к отой проблеме. . .. -

ЦЕЛЬ РАБОТЫ

Определение роли иммуногенетических факторов (ассоциация НТА-антигенов) и структурных особенностей субпопуля-ий иммуно-компетентных клеток периферической крови в патогенезе пищевой аллергии и непереносимости и некоторых заболеваний пищеварительного тракта.

ЗАДО&1 ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Выявить ассоциации антигенов HIA-комплекса с пищевой аллергией, непереносимостью, язвённой болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки, хроническим холециститом, хроническим гастритом, эрозивным -гастритом и бульбитом.

2. Изучить субпопуляционный состав Т-лимфоц1.;ов периферической крови с помощью моноклональкых антител СДЗ, СД4, СД8 - антиген-нь'м кластерам- ; В-лимфоцитов к СД20, СД21 - антигенным кластерам ; мононуклеарных клеток .с СДПв, СД14,СД5б( ИНТ},. HT А-ДК антигенными кластерами у больных указанных групп.

Z. Провести анализ соотношения иммунокомпетентных клеток периферической крови в динамике при провокационных пробах у больных с пищевой аллергией и непереносимостью.

4. На основании полученных данных определить дифференциально-диагностические критерии истинной и ложной аллергии к пищевым продуктам.

НАУЧНАЯ КСВИЗНА P'SOTH

- Впервые показана ассоциация HIA-антигенов с пищевой аллергией и непереносимостью у- взрослых лиц и установлены их существенные различия на иммуногенетчческом уровне, заключающиеся в том, что антигены-маркеры пищевой аллергии' при пищевой непереносимости являются антигенами-протекторами.

- Впервые определена связь антигенов системы HIA с язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки, с хроническим холециститом' у лиц казахской и русской национальностей, с хроническим гастритом, с эрозивным гастритом и бульбитом в г.Алма-Ате.

- Впервые показана взаимосвязь пищевой аллергии и непереносимости с заболеваниями желудочно-кишечного тракта и последних между собой на им"уногенетическом уровне.

- Впервые проведено изучение состава имыунокомпетентных клеток периферической крови в динамике при провокационных пробах у больных с пищевой аллергией, непереносимостью и. предложены критерии дифференциальной диагностики истинной и ложной аллер-. гии.

- Впервые с использованием моноклональных антител проведено комплексное изучение субпопуляций лимфоцитов крори у больных с хроническим холециститом и выявлены его аналогии с пищевой непереносимостью iio распределению НТА-антигенов.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ РЕЗУЛЬТАТОВ

Выявленные ассоциации антигенов системы И1А с пищевой аллергией, непяреноси эстыо и заболеваниями пищеварительного тракта

могут служить одним из критериев формирования групп с повыи-н-ным риском заболеваемости для проведения профилактических мероприятий. На оснований обнаруженных различий в соотношений субпопуляций иммунокомпетентных клеток периферической крови и в распределении НТА-антигенов предложены дифференциально-диагностические критерии пищевой аллергики и непереносимости.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВШЮСИШЕ НА ЗАЩИТУ:

Т. Предрасположенность и резистентность к пищевой аллергии и непереносимости, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, хроническому холециститу, хроническому гастриту, эрозивному гастриту и бульбиту ассоцирована с определенными НТА-маркерами.

2. Иммунофенотипирование мононуклеарных клеток крови с помощью моноклональных антител к 9 дифференцировочным кластерам позволяет оценить соотношение отдельных субпопуляций и установить их значимость в патогенезе указанных эаболпаний. Показано, что при пищевой аллергии и Хроническом холецистите наблюдается увеличение процентного содержания субпопуляций Т-(СДЗ, СД4; и В-лимфоцитов (СД20, СД21) и их снижение - при пищевой непереносимости, язвенной болезни челудка и двенадцатиперстной кишки.

3. На осног'жки изученной га». тноЙ ассоциации, частоты гаплоти-пов, генов и антигенов и установленной ассоциацией Н1А с исследованными заболеваниями возможно формировать группы риска по их возникновению.

4. Распределение Н1А-антигенов и субпопуляций имиунокомпятентных клеток периферической крови и динамика последних при постановке провокационной побы' при пищевой аллергии и непереносимости позволяет выявить специфические особенности этих заболеваний с целью

дифференциальной диагностики.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ , >

Основные положения доложены и обсуждены на Т съезде иммунологов и аллергологов Узбекистана (Ташкент, 1991); на совместном заседании отделов аллергологии и иммунологии НИИЭМИБ МЗ Рк и км-мутг югии и пищевой аллергии НЦ РПП АН РК. . .

ПУБЛИКАЦИИ

По теме диссертации опубликовано 2 работы, в том числе на )С< Конгрессе Европейской Академии Аллергологии и Клинической Иммунологии (Париж, 1992), 8 приняты в печать.

Объем и структура диссертации 5

Диссертация изложена на страницах машинописного текста 140 и состоит из введения * обзор литературы, 3 глав, заключения и выводов. Диссертация иллюстрирована 56 таблицами и 19' . рисунками собственных исследований. Указатель литературы вкл;очае,т201'ист.

МАТЕРИАЛЫ И МРП)ДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Обсл~цоваго 328 болоных и 406 здоровых догэров (202 казахской национальности и 204 русской).

Больные были расг эдблены по следующим клиническим группам: пищевая аллергия - 28 больных, пищевая непереносимость-ЗТбольной; язвенная б езнь ?келу,цка-35 больных; язвенна" болезнь двенадцатиперстной К1; 1КИ-Т08 больных; хронический холецистит-68 больных;

хронический гастрит - 26 больных; эрозивный гастрит-ГЭбольных; эрозивный бульбит-ТЗ больных.

Среди больных язвенной болезнью, хроническим и эрозивным гастритом, эрозивным бульбитом преобладали лица молодого к- среднего вс раста- от 16 до 55 лет.

Возраст больных с пищевой аллергией был от 16 до 63 лет, с пищевой непереносимостью от 17 до 63 лет, с хроническим холециститом от Т6 до 68 лет.

Н1А-типированиэ проводили в стандартном двухступенчатом мик-ролим£оцитотс^сическим тесте по^ёгавак1 •' и. ксСПеПапй " (1968) с применением панелей сывороток Всесоюзного банка гистотипирушщих стандартов Санкт-Петербургского НИИ гематологи»: и переливания крови МЗ РЗ.

Субпопуляции Т-лигфоцитов определили с помощью моноклональ-ных антител СДЗ, СД4, СД6; В-лимфоцитов - СД20, СД21; естественных кйллерных клёток -" СД56; моноцитов - СДИв и СД14. Изучались также Н1А-ДР позитивные клетки.

Статистический анализ распределения НТА-антигеьлв проводил-• '* ■__

ся по разработанной нами (совместно сИ^^мми^Х) программе с использованием комплекса г'енетико-статпстических методов: расчет частоты генов, антигенов, гаплотипов, величины гаметной ассоциации, относительного риска, этиологической и превентиьной фракции. Достоверность различий частот« антигенов и гаплоуипов оценивали по критериям Пирсона х^ и Фишера.

Статистическая обработка данных.ишунофенотипирования проводилась совместно с научным сотрудником '¡ИИ онкологии и радиологии МЗ Казахстана Курмангалиновой И.А.

-е-

РЕЗУЛЬТАта И ОБСУЖДЕНИЕ

Распределение КТА-антигенов v больных с пищевой аллергией, непереносимостью и некоторыми зь('одеваниями пищеварительного тракта. Нами было изучено распределение антигенов системы НТА у здоровых доноров казахской и русской национальностей.

Частота HIA-антигенов и генов.локусов А, В, С в контрольной группе представлена т таблице I.

Наиболее часто у представителей казахской национальности встречались антигены А.?, А9, AI, В5, В35, BI3, СИ, CvC. 7 русских наиболее распространенными являются антигены А2, AI, ATO, В5, В7, В35, CV/2, Cw4. Сравнительный анализ распределения антигенов ИТА пс азал, что у казахов по сравнения с лицами русской национальности достоверно чаще встречались антигены А9 и АТ9 (р<0,05), реже - антигены АЗ (р< 0605), А28 (р^ОбОТ), ВТ8 (р< 0,05). Кроме того, представляло ин ерес изучение гаметной ассоциации и частоты гаплотигк'Б в исследуемых группах. У доноров казахской национальности пресблс ,али ганлотипы А2ВТЗ (82~ гапло-типа на Т000П нас.), А2ВТ5 (707), А2В40 (687), А9В5 (629), АТ0В5 (780), AFB35 (598). Для лиц русской национальности наиболее . характерными пвлялись гаплотипы AIB8 (Т007 на 10000 нас.), А2В5 (847), А2В8 (602), А2В35 (912), АЗВЗЗ (8ТЗ), А9В7 (765), АТ0ВТ8 (703). и сравнении частоты гаплотипов двух групп здоровых лиц обнаружилось, что у казахов чаще, чем у русских встречались гал-лоткпы А2БТЗ, А9В5, А9ЕГ,, AI0B8, ATIBI3, АТ9ВТ5, (для всех р< 0,05) реже - гаплотипы А:В8, АЗВТЯ, л28ВТ6 (все р< 0,95), АТ0ВТ8 (рО,01).

Выявлении' нами особенности г распределении НТА-антигенов у пр( ставитепсР двух этнг-еских групп учитывались при изутнии

антигенов гистосовместимости в исследованных группах больных.

Сопоставление данных частоты HIA-антигенов здоровых лиц и больных показало наличие ассоциаций определенных ан:.¡генов с изученными заболеваниями.

Нами установлено, что иммуногенетическими маркерами повышенного риска m-,левой аллергии явялются антигены НТА-В8, В72, BI4, B5I, А25, А32. Из них наибольшие значения этиологической фракции, по::азьшающей степень участия антигенов в развитии предрасположен-' ности к заболеванию,-имели антигены НТА-ВО и ВТ2. Протекторными антигенами являлись 1Ш-АЗ, AI9, BI5, 316. Среди гаплотипов наиболее значимую позитивную связь с пищевой аллергией проявляли ÄI0B8, ^ЭВЗ, ATIB8, Л9ВТ4, ..ITBT2.

Распределение антигенов ИТА при пищевой непереносимости существенно отличалось о; гаковых щ.;, пищевой аллергии, что подтверждает их различный генрз. При сравнении с контрольной группой здоровых доноров обнаружились достоверные различия для некоторых антигенов, являющихся-маркерами пищевой'непереносимости. Это антигены HTA-AI0, Л24, А25, 314, B2I. Из* выявленных ант тенов в раз. >

витие предрасположенности к заболеванию наибольшую долга вносят ATO, ВТ4, и B2I. Креме того, нами был! определены антигены-протекторы непереносимости к пищевым продуктам - НТА-АТ9, В8,-ВТ2,'BI6. Изучение гаметной ассоци ^ии и частоты гаплотипс , у боль, а с пищевой непереносимостью показало, что наиболее характерными для этой группы являются гаплотипы А2В21' (1352 галлотипа на 10000 больных), A93I4 ( 985), A9B2I (895), АТ0В7 (1409), AIIB5 (1103). Мы обнаружили 12 гаплотипов, ассоциированных с пищевой непереносимостью. Среди них галлотипы А2В2Т,_ АТ0В7, А10В14, А9ВТ4, A9B2I имели наибольшую степень достоверности и значимости.

При сопоставлении результатов изучения HTA-антигенов у больнь : с пищевоЛ аллергче" и непереносимостью нами выявлено наличие общих антигенов А25, BI4 и гаплотипа А9ВТ4. Однако, следует отметить существенные различи антигенов HTA-системы в сравниваемых группах больных. Так, имеется разница в гаплотипах A2B2I, АТ0В7, А9В8 и некоторых других. Более того, антигены HIA-B8 и BI2, являющиеся маркерами пшцевой аллергии в случае пищевой не-nepehjciiMocTH, наоборот, проявляют протекторные'свойства.

Как известно, у лиц, имеющих в фенотипе антигены HIA- AI, В8, BI2, отмечается повышенная поликлональнач активация синтеза антител к аллоантигенам. Мы предполагаем, ч.о такая чрезмерная генетически детермированная активация антителогенеоа на пищевые антигены приводит в какой-то момент к поломке специфической толерантности и трансформв ,ии антигенов в пищевые аллергены. Наоборот, с антигеном НТА-В7, являющимся по нашим данным антигеном-марке-

. ■ I

ром непереносимости К пище, ассоциирована пониженная полйклона-льная активация антитологенрза на многие антигены( Ёазаййк! е.а. VS80jBatory е.1983 )» результатом тго может быть нарушение элиминаций антигенов из организма. Мы полагаем, что среди Возможных Механизмов развития пищебой Непереносимости имеет' место недостаточна элиминация пищевых антигенов из организма в результате сниженйя синтеза сйецифическНх ан1.;тел, следствием чего является избыточное накопление пищевых субстратов; которые определенным образом могут Привести к запуску механизмов патохимичес-кой стадии аллергической Реакции.

Анг-Ио распределения 1ГА-ангигенов у больных язвенной болтаны, двенадцатиперстной кичжи показал наличие у них ассоциации с некоторыми антигенами и гаплотипами. Мы изучили HTA комл-

лекс отдельно у больных казахской и русской национальностей. Нами установлено, что для первых иммуногенетичсскими маркерами ~в-

ляются антигены НТА-АТЭ, А25, BI4, В4Э, CwT. ИЗ перечисленных

2

антигенов самые высокие значения достоверности по и относительного риска имели А25 (х2=т8,4В; РР=Т4.24) и В74 (х2=22,7Э; РР=7,23), а наибольшие значения этиологической фракции антигены АТО (ЕР=0,2Т) и BI4 (ЕР=0,22). Антигенами-протекторами для данной группы являются A3, ВТ2.

Определяя достоверность различий между гаплотипами больных и здоровых лиц, мы обнаружили ТЗ гаплотипов чаце' встречающихся при язвенной болезни двенадцатиперстной кишки у казахов. Из них наиболее значимые AT0BI3, АТСВТ4, АТ7ВТ4, AIIB-Ю которые, вероятно, чаще всего обусловливают предрасположенность к изучаемому заболевание.

У больных язвенной болезнью двенадцатиперсной кишки русской национальности достоверно, чгцце, чем в к нтрольной группе, встречались антигены Ally А25, АЗП, A3I, В40, В56, CwT. Наибольшие значения достоверности и относительного риска имеют антигены HIA-

, г

A3!, ВТ4, а этиологической фракции - антигены ATI, BI4, В40. Про-тективными антигенами являются AT, A3, А79, ВТ5, ВТб, B2I. Среди них наибольшие значения превентивной фракции и наименьшие-отно-ситсльного риска имеют антигены A3, AI9, BI5. Изучение гаметной ассоциации и частоты гаплотипов выявило Т2 достоверно чаще встречающихся гаплотипов КТА-А9ВТ4, АТ0ВТ4", ATIBI4 являются более значимыми для данной группы больных.

При сравнении двух групп больных казахской и русской национальностей обнаружилось, что общими маркерами для них являются антигены НТАтА25, ВТ4, В4С и CwT. А антигены КТА-АЗ и AI9 в обеих группах проявляют протекторные свойства.

Изучение IIJA-антнгенсв при язаенной болезни желудка.выяьи-ло н которые различия с антигенами при язвенной болезни двенадцатиперстной кишки, что указывает на их различное происхождение. Мы установили, «гго антигенами, д; jt о верно чаще встречающимися при язвенной болезни желудка у представителей казахской националь ности являются l'IA-AT0, А25, В14, BI8, B2I, В22, B4I, СЛ. Из псчедних. AI3, А25, Е4Т являются наиболее значимыми. Антигенн-протекгррв для данной группы AI и BI5. Определение достоверности различий гаплстипов между больными и донорами показало наличие 17 гаплотипов-маркеров язвенной болезни желудка у представителей казахской национальности, е том числе AI0B4T и A9B4I, имеющих г~иболыцув значимость.

У болы, х язвенной болезнью желудка русской национальности выявлены 7 антм .нос-маркеров - ATO, А25, ВТ4, BI8, B4I, В56,

С I. Среда них самые высокие значения пркааателей достоверности,

• ' «

относительного риска и этиологической фракции имеют ATO, А25, BI4. Также был обнаружен протекторный антиген A3; Мы выявили 13 гапло-типов-имцунсгенетических маркеров язвенной болезни желудка у русских. Из них АТ0В4Э, AI0B4T,' AIIBI4, ATJB4I и Ä25B4I имеют боль-щую значк-ость в развитии предрасположенности к заболеванию..

При еранцигелЬноы анализе антигенов UTA у больных с язвенной болезнью желудк казахской и русской национальностей, что первые г уличались нали^гем антигенов-маркеров B2I, В22, а также отсутствием В56 антигена.

Сравнение же распределения HIA-антигенов у больных с язвенной болонью желудка и двенадцатиперстной кишки показало различие в антигенах НТА-АГ1, В4Т, BI8 И All, В40, соответственно.

Огчциы ячтигннрм, характерным для язвенной болезни обеих лг-

калираций и национальностей, являются HIA-BT4.

Также нпми было изучено распределение НТАтЯнтигенов у больных с хроническим холециститом казахской и русской ггщионольнис-тей и выявились статистически достоверные различия между здоровыми донорами и изученными больными. Установлено, щи иммуногенетическими маркерами хронического холецистита у больных казахскоЛ национальности являются антигены HTA-АТО, А24, А25, А28, А29, BI4, В40, CwT. Кз них наибольшую степень достоверности, относительного риска и этиологической фракции имеют антигены А23, ВТ4, В40 и Сч/Т.. Также были определены антигеньь-протекторы хронического холецистита у казахов- В8, В12, ВТо, В22 и В35. Изучая достоверность . различий между гаплотипами данных больных и здоровь" лиц, мы об-нарукили ТО гаплотипов-маркеров хронического холецистита, в том числе наиболее значиг/ке АТВТ4, АТ0В7, А TOB 14, АТТВТ4, которые, по-видимому, в большинстве случаев обусловливает предрасположенность к изученному заболеванию.

В группе' больных хроническим холедиститом русской национальности достоверно чаще, ' чем у доноров встречалась антигены А25, А32, ВТ4, В22, В5б, Cwl, Cwb, из которых'НТА-А25, ВГ56 и CwT в большей мере обусловливают предрасположенность к заболеванию у русских. Антигенами-протектор ми являются A3, АТ9, ВТ5. Было обнаружено 8 галлотипов-маркеров исследуемой болезни. Среди них

АТ0В7, АТ0ВТ4, АХТЗТЗ имеют наибольшую степень достоверности по р

X", Р и высокие значения относительного риска и этиологической фракции.

Анапизируя антигенный состав при хроническом сслецистиге я язвенной болезни можно обнаружить наличие общих антигенов (ВТ4, В40, АТО, А25). Возможно, это .связано с некоторыми общими факто-. рами в патогенезе этих заболеваний ведущими к развитию воспаления

в ЖКТ. Известно, что язвенная болезнь и холецистит часто сопут-ствукн' друг другу.

Считается, что холецистит является как бы фонем, на котором возможно развитие пищевой аллергии и непереносимости. Если же сравнивать распределение НТА-ачтигенов при изолированном хроническом холецистите с -антигенами при пищевой непереносимости, то в данном случае выявляются общие для них антигены (маркеры - А10, Б7, 314; протекторы - В8, BI2) и- галлотипы (АТ0В7, AIQBT4). С другой стороны, антигены-протекторы (В8, ВТ2) при хроническом холецистите являются маркерами пищевой аллергии, т.е. проявляется их прямая проти. люложенность на иммуногенетическом уровне. В связи с этим мы предполагаем вторичное развитие пищевой непереносимости при хроническом холецистите, а в случае пищевой аллергии последний развивается, возможно как следствие аллергического воспаления в ЖКТ. . •

Распредег ^ние антигенов систё]. i HIA при хроническом и эрозивном гастрите, эрозивной бульбите также имело свои особенности как и при других изученных наш заболеваниях.

Антигенами, достоверно чаще встречающимися при хроническом гастрите являются ATO, А24, А32, ВТ4, В40, С I и С 5. Из pepe*.' . численных антигенов большую значимость имеют ATO, BI4, В40, С Т. Были выявлены аятиге..ы-протекторы хронического гастрита - АЗ, BI6, ВТ7. Такжр обнаружилось "Л галлотипов - иммуногенетических маркеров данного заболевания, в том числе А9В40, АТ0В7, AT0BI3, A10BI4 в большей мере определяющих предрасположенность к хроническому гастриту.

Пги эг^зивнэм гастрите была повышена частота антигенов FITA -ATO, А25, А32, BI4, В22, В56. Из них ATO, А32 и В14 ока-

2 -15-'

запись наиболее значимыми..Нами также было ьпявлено, что антигенами-протекторами эрозивного гастрита являются A3, А9, ВТ5. Кроме того, мы обнаружили 12 гаплотипов, частота встречаемости которых была ъыше контрольной. Среди них гаплотипш AIBI4, AIB56, A2BI4, AICB40, AIJBI4 имеют самые высокие значения степени достоверности, относительного риска и этиологической фракции.

Распределение HIA-аитигенов при эрозивном бульбите также ймело некоторые особенности. Статистический ¿нализ показал, что иммуногенетическими маркерами эрозивного бульбита являются антигены AIT, А25, BI3, ВТ5, В22, В27, С Т, из которых большее значение имеют ATI, А25 и С Т. Антиген А9 при эрозивном бульбите является протекторным. Изучение гаметной ассоциации и частоты гаплотипв показало наличие 14 гаш.лтипов-маркеров при этом заболевании. Ич них АЗВ40, АТ0В7, AI0B27, AITBT3, А25В7 имеют наибольшую значимость.

HIA-антигены при эрозивном гастрите несколько отличаются it таковых при хроническом гастрите. Так, при эрозивном гастри- . те наблюдается повышенная частота встречаемости ант"генов НТА-В22 и В56 в отличие от хронического гастрита. Причем, эти антигены обнаруживаются и при'язвенной болезни желудка, но не при язвенной болезни двенадцатиперстной кишки. Эрозивный гастрит часто является осложнением последней, „о с другой стороны, является состоянием предгязвы.желудка. Метод НТА-типирования показывает, в данном случае, бо'льшую общность генетической предрас- \ положенности к эрозивному гастриту и язве"ной бол;зни желудка, тем самым косвенно объясняя, что эрозии ж^пудка при язвенной болег-ш двенадцатиперстной кишки вторичны и являются следствием гиперсекреции и гиперацидности желудочного сока.

Эрозивный бульбит как пред" лава двенадцатиперстной килки

танже имеет много общего но НТА-антигеном с язвенной болезнью данной локализации.

I Таким образов следует говорить о наследственной предраспо-ло»-:нност« изученных наш заболеваний ЯК?, антигены НТА-АТО, АН,

А25, ВТ4, достоверно -гщг встречающиеся почти при каждсм из этих

)

эаЙолзвокиЯ, могут быть пх маркерами. Предрасположенность, лоз-мсио, объяс яется генетически обусловленной поименной резис-

I

тплтнгогыэ слкзлстоЯ о'олпчки пицеваритвльного тракта к внешним и внутренним воздействиям, своего рода "готовностью" к развитию воспаления в ИСТ. I

I

■ I':'' .учгфенотппит овпние мпнонуклеернп:: клеток периферической крови у больных с пищевой аллергией, непереносимостью и некоторой заболеваниями ?ИКТ.

Проведенный нами анализ состава субпопуляций иммунокомпе-тентгых клеток крови с помощью моноклинальных антител к дифферен-цировочным р.нтигенам показал наличие количественного дисбаланса этих клеток при изученных нозологнлх. -Комплексная оценка изменений субпопуляций клеток при лицевой аллергии позволила выявить увеличение числа СДЗ-, С, ,4-лимфоцитов,- коэффициента СД4/СД8, повышение количестве как зрелых (СД20), так относительно зрелых ' (СД2Т) В-клеток, а также СД56-натуральных киллерных клеток и-СДТТв, СД14. НТА-ДК положительных мононуклеарных клеток. Эти данные свидетельствуют о напряженности как Т-, так и В-системы иммунитета при пищевой аллергии. Увеличение процента естественных киллерных клето", возможно, говорит об усилении их регулирующей функции по отношению к другим иммунокомпетентным клеткам.

Представляло интерес изучение субпопуляций мононуклеарных клеток крови в динамике при проведении перорэльной провокационной пробы с пищевыми аллергенами у больных с пищевой аллергией. Полученные нами при этом результаты показали большую значимость

их в диагностике и огромный теоретический интерес в понимании реакции иммунскомпетентных кле'] о к в аллергическом процессе.

Результаты иммунофенотипирования монснуклеарчых клеток при проведении пероральной провокационной пр~бы

Кластер! сдз ! Сд4 ! сд8 ?СД4/СД8 ! СД20 __!_!___!_?__!_

1. До пробы 63,Т6±3,Т8 39.74^2,26 22,44^1,90 Т,90±0,Т12 Т7,53±Сда

(14) (Т45 (}4) (14)' (т4) . (7)

2. После про?0,29±2.51 53,84±3,27 Те 90+.Т,49 2,94±0,Т68 5,94*0,55 бы * (14) (ТА) ' (14) (Т4) СЬ

3. Доноры 58,70*0,60 37,67±0.55 2? С5±0,49 Т,724±0,031 12,

* (35 5 (35) (351 (35) (22*

рТ,3< 0.05 рТ,2<0,005 р?. ,30,005 р1,2<0,00Т p_.2vO.CC5 р2;3<0,бП1 р21я^о|оот р2|3<п;С01 р^ЗО.ССГ

продолжение

---!--р---,-!-,-

Кластер^ сд?л ^ СД56 ( СДТТв | СДТ4 ( НТА-ДС

1.До пробы 10,11*1,76 II,87*1,22 29.Til.96 76,67*0 43 20,87±Т

Р (Ш (7) (7) (7) (72}

2.Цосле про-9,55±^7^ 5,3*1у06 8,5±0^53 б,07*0^">

3. Доноры 5,78±0(т7 е,9б±0^7 11,59^0,35 Т0.17±0.32 9,68^0р

Р?-

СДЗ-клетки, процент которых изначально был -'сне нормы после пробы увеличились еще больше, чем в контрольной группе. Клетки, несущие СД-1 кластер, после побы ст'шовятст выше контроле и п^кя-31TFJ * до пробы. Процент СД8-клеток после приема аллергена имел тендент1Ш0 К" сни..?нию нияе нормы. Соответственно, соотношение

СД4/СДЭ после пробы увеличилось в среднем в 2 раза. Значительные изменения происходят с антигенами СД20, СДТТв, СД14. Уровень их опускается ниже нормального, хотя до пробы был достоверно вше. Подобные изменения мы объясняем возможным перераспределением иммуно-компетентных клеток и V* миграцией из кровотока в органы-мишени и обратно.

I Таким образом, дгйствие пищевого аллергена запускает целую сер|ш изменений структурных параметров иммунитета, определяя которою можно глубже понять иммунные механизмы пищевой аллергии. Кроме того, нельзя не отметить диагностической роли изучения ко-ли^естве-чых параметров иммунокомпетентных клеток при проведении провокационных проб.

! Изучение плотности диффе^нцировочньтх антигенов на клетках посредством определение суммарной флюоресценции ТОО тыс. клеток показало тенденцию к аналогичным результатам.

У больных с пищевой непереносимостью обнаружилось снижение СДЗ- и СД4-лимфоцитов, СД20-В-лимфоцитор, СД5б-клеток и уменьшение коэффиц1 :нта СД4/СД8. Повышенными оказались СД0-, СД2Т-лимфо-циты и СДНв-клетки. Эти ; шныс показывают возможный иммунодефицит по Т и В системам иммунитета при пищевой непереносимости. Определение субпопуляций клеток прг проведении провокационного, теста с причинно-значимым пищевым продуктом позволило выявить следующие изменения: содержание СДЗ-, СД4-лимфоцитов и соотношение СД4/СД8 имели тенденцию к понижению, а число СД8-супрессоров -к увеличению; СД20 из состояния ниже нормы до пробы, становится после пробы выше контрольного; СДТ1в увеличивается почти в 2 раза; количество СД2Т-клеток понижается.

При язвенной болезни желудка отмечалось угнетение числа почти всех изученных нами клеток (СДЗ, СД4, НТА-ДЯ) и соотношение

-Й-

Результаты иммунофенотипирования клеток периферической крови до и через Т час после проведения провокационной пробы у больных с пищевой непереносимостью О?)

-!-!--!-^--!-

Кластер 1

, СДЗ , СД4 , СД8 , СД4/СД8 , СД20

Т. До пробы 52,8Т±3,4Т 30,1*2.75 25,98*2,26 1,226*0,171 6,57*1,28 * (8) (Й) (8) , (8) (б)

2.После про-4Б ,27*1.61 26,51*3,03 30,49*1,13 0,884*0,112 17.9*4,69 бы (7) (7) (7) (7) {б)

3. Доноры 58,10*0,68 37,67*0,55 22,05*0,40 1,724*0,031 12.75*0,41

(35) (36) (35) (35) (22)

рТ,3<0,05 р1,3<0,00т рХ.ЖО.ОТ р1,3<0,001 рТ,3^0,00т 52|зсо,йпт р;з<о|оот Р;^<о,бо1 ^¡з<о|оо1 р;зсо;о5

р1,'1< 0,05

продолжение

1-!-!-1-Г

Кластер" СД2Т ■ СД56- ) СДПв ( СДТ4 ; НТА-ДР

Т. До пробы 9,9*0,33 4,22*0,38 16,75*2,26 15,7*2,21 9,57*1,28 (5) (б) (6) (6) (б)

2. После 5,04*0,56 5,92*0.74 30,42*5,81 74,23*2,26 Т0,47*Т,67 пробы (5) (б) (6) (б) П)

3. Доноры 5,78*0,17 6,96*0,27 17,59*0,35 10,17*0,32 9,68*0,23

(12) (16) (16) (Г) (20)

рТ,3<0,ООТ РТ,3<0,001 р1,3<0,005 р1,3< 0,001 р! 2<0 001 * ' ы 3<0 00т Ъ2 3< о 05

р 2<Р 05 *

СД4/СД8. Только уровень СД8-супрессоров не отличался от контрольного,

У больных язвеь.юй болезнью желудка также выявилось снижение 1.лсла СДЗ-, СД4-клеток, уменьшение СД4/СД8, но в отличие от язвы желудка концентрация СД8-,,,имфоцитов и НТА-ДР-клеток была повышенной. Таким образом, при язвенной болезни обеих локализаций ¿тмзчается дефицит по Т-клеточному звену иммунитета. | Иммунофенотипирпвание мононуклеаров крови при хроническом холецистите выявило увеличение СДЗ-, СД4-лимфоцитов, индекса СД4/СД8, числа СД21 и НТА-ДК позитивных клеток. Мы обнаружили, что если хроническому холециститу сопутствуют гастрит, дуоденит,, панкреатит в стадиях обострения, то выявленные изменения субпо-пуляционного состава нивел-ругатся.

По субпопулящ; :м Т-лимфоцитов определенные сходства имеют пищевая аллергия .. хронический холецистит с сопутствующими заболеваниями ЖТ, пищевая непереносимость с язвенной болезнью две-надцатйперстной кишки. : . •

СРАВгеШЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИММУН03ЕН0ТИПИР0ВАШ1Я МСНОНУКЛЕРЫХ И HEKOTOFtiX ЗАБОЛЕВАНИЯ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО TPAIfTA К)

КЛАСТЕР ! ! ! '

СДЗ ■ СД4 "ДО ' СД4/

НОЗОЛОГИЯ , ! ! !

I. Пищевая аллергия 64,42 ± 2.94 41,20 ¿ 2,37 2Т.46 ± Т,60 2,0L.-t * (20) (20) (20)

р Пищевая непере- 5I.025Í 3,07 °6,9?> ± 1,97 2б,30± 2,0 1,Т2±

носимость (20) (19) (20)

3. Язвенная болезнь 4Т,34± 0,83 Т9,69Í 0,72 22,94- 0,40 0,859±

желудка (24) (24) (24)

4. Язвенная болезнь 53,F>9¿ 1,78 2С,32 ± Т 0 25,08± 0,81 Т, 142-

12 перстной кишки (34) (32) (32)

5. Хронический холе- 70,92± 1,96 ¿T,80¿ 2,03 Т6,75± 1,04 3,193+

цистит (Т6) (Т7) (TV)

6. Хронический холе- 69,10±3,04 43,44¿ 2.4J 23,Т4± 1,23 I.888Í

цистит с сопу ст. • '(H) (II) (II)

заболеваниями ЖТ

рТс2-4<0,0Т рТс2-5< 0,00т Р1с4-5<Г0,05 рТс2-5 i

р2сЗ,5,5<0,01 p2c3,5,U'0,0T р2с5<Г0 001 р2сЗ-,5,6

рЗс4-6<0,001 Р3с4-6<0,00Т рЗс4<0,05 рЗс4-6

р4с5-6С0,00Т р4с5-6< 0,001 P3c5i0,00I р4с5-6 £

Р4с5<0,00Т

КЛЕТОК ПЕШЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ПРИ ПИЩЕВОЙ АЛЛЕРГИИ, НЕПЕРЕНОСИМОСТИ

!

СД8

СД20

СД2:

СД56

СДПв

СДТ4

Н1А-ДК

(2дР1 1б,4?вр3 9,"(й° П,87(^22 2б,29(8529 Т6'е?7?'43 20'аз!'77

0,08' (19)

8,06± 0,98 9,ЗГ±0,71 4,19^0,64 Т5,57±Т,Э5 Н,52±2,53 И,Т5±1.,41

(ТО)

(10)

! (9)

(ТО)

(9)

0,026 (24 р

0,033 (32)

0,112 (17)

0,07:

(Ц>

9,10± 0,40 (9)

9,34± 1,21

<0,001 р1с2 < 0,0С" <0,01 <0,001 <0,00Т

р!с2< 0,001 р!с2< 0,0Т

сто) ■ 5,31±0,20 (75)

20,88- 0,72 (9)

25,28^0,54 (б)

И,30± 0,60 -(4)

. р1с2-3<0,00 р2сЗ-5 < 0,00 рЗс4-б < 0,00 р4с5-6.< О,ОТ

B U Б О Д Ц

1. НТА-типирование по локусам А. В, С с изучением гаметной ассоциации, частоты гаплотипов, генов и антигенов у больных С пищевой аглергией и непереносимостью, язвенной болезнью желудка

и двенадцатиперстной ки.зки, хроническим холециститом, хроническим гастритом, эрозивным гастритом и эрозивным бульбитом выявило наличие наследственной предрасположенности к этим заболеваниям .

2. Иммуногенетическими маркерами прг пищевой аллергии являются антигены НТА-А32, В8, ВТ2, ВТ4 и антигенами-протекторами '3, AI9, ВТ5, BI6; при пищевой непереносимости ATO, А25, BI4, В2Т и AI9, В8, BI2, ВТР-; при хроническом гастрите ATO, BI4, В40, С Т и AI, ВТб, В17; при эрозивном Гастрите ATO, А25, А32, В74, В5б и A3,-А9, В5, BI5; при эрозивном бульбите ATT, ВТЗ, ВТ4, В40, С Т и

А9; при язвенной болезни желудка ATO, ВТ8, В4Т, двенадцатиперст- ■ ной кииши ATT, ВТ4, В40 и общие антигены-протекторы AI, A3, BI5; при хроническом холецистита А24, А28, BI4, В56, С I л A3, В8, ВТ2, ВТ5. *

3. Установлена взаимосвязь пищевой аллергии и непереносимости с заболеваниями желудочно-кишечного траста и последних между собой по Н1А-антигенам(АЮ; В14) ¿

4. Пищевая аллергия и пигп^ь-я непереносимость существенно разнятся на иммуногенетическом и структурно-клеточном у;эьнях. Маркеры пищевой аллергии - НТА-ВЗ, BI2 -твляются генами-протекторе и пищевой у переносимости. Пищевая аллергия характеризуется повышенным соотношением СД4/СД8 и повышенным содержание,., всех изученных субпопуляций иммуноком^етентных клегж\СДЗ, СД4, СД20,

СД2Т, СД56, СДИв, СДТ4, НГЛ-ДЮ, кроме СД8-супресспров; пищевая непереносимость - сниженным уровнем СДЗ-Т-клеток, СД4-хел-перов, СД20-В-клегок, СД5б-чатуральных киллеров, соотношением СД1/СД8 и возрастанием количества СДО-супрессоров, СД21-относи-тельно зрелых Ь-клети. и СДТТп-клеток.

5.! Прием причинно-значимого нутриотнта больными пищевой аллергией и'непереносимостью вызывает достоверные, но разнонаправленные изменения в составе имцунокомпетентнь\ клеток. При пищевой аллергии происходит дальнейшее увеличение количества СД4-хелперов, коэффициента СД4/СД8 и уменьшений числа, клеток, экспреосирующих СД20, СД56, ОДТТв, СД14 и НТЛ-ДК дифференцировочные антигены; при пищевой непереносимости отличается еще большее снижение числа СДЗ, СД4 позитивных клеток и повышение количества СД20- и СДТТв-кле-

6. Ичмунофенотипирование мононуклеарных кле: ">к крови при хроническом холецистите показало увеличение числа клеток, экспреосирующих СДЗ, СД4, СД2Т и Н1А-ДР дифференцировочные антигены, по-' вышение соотношения С^4/СД8, снижение количества СД8-супрессоров. . Установлены аналогии хронического холецистита с пищевой аллергией по субгопуляциям иммунокомпетентных клеток периферической крови

и с пищевой непереносимостью по распределению НТА-антигенов.

7. СубпопуляционныЙ анализ лимфоцитов крови при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки вырвил наличие дефицита СДЗ, СД4 экспрессируящих клеток, снижение соотношения СД4/СД8 более выраженных при я^ве желудка. Отмечалось также увеличение коли-•честпа СДО и НТА-ДО позитивных клеток при локализации язвы в двенадцатиперстной кишке, уменьшение числа Н1А-ДЯ+клеток - при ее локализации в желудке.

Список опубликованных работ

1. Субпопуляционный анализ периферических лимфоцитов у бо~ь-ных с пищевой аллергией и непереносимостью/ Абилаев А.Е., Нугманова Ж.С., Есенканова Г.М., Нерсесов А.В. // Тез.мат. Международ. Симпоз. по Аллергол. и Клин. ИммунолЛв печати)

2. Влияние ин виво специфических аллергенов на некоторые иммунологические показатели при пищевой аллергии (ПА) и непереносимости (ПН)/ Нугманова И.О., Есенжанова Г.М., Нерсес.ов A.J. Абилаев А.Е., Тажиев Е.Б., Кульсеитов Н.Г. //Тез.мат.Там же.

3. Окислительный метаболизм и пролиферативный ответ клето- периферической крови больных пищевой аллергией (ПА1 и непереносимостью (ПН)/ Нерсесов А.В., Нугманова Ж.С., Есенжанова Г.М.., Абилаев А.Е., Бубб II.И. //Тез.мат. Там же (в печати)

4. Роль пищевого фактора в этиологии некоторых кожно-аллергиче-ских заболеваний / Есенжанова Г.М., Нугманова Ж.С., Абилаев А.Е., Нерсесов А.В. //Тез.мат. Там же (в печати)

5.. Некоторые иммунологические показатели у больных хроническим холнциститом/ Тажиев Е.Б., Нерсесов А.В., Абилаев А7Б. // Тез. мат. Там же (в печати).

6. HLA-typing in ulcer disee.se (DD)/Abilaev A.E., Ilulseitov N. G.// XVth Congress of Europ.Acad. of Allerg. and Clin. Immunol.-Paria, 1992.Ab3tr.from'Eur.J.of Immunol.

7. Immunological aproaches to discrimination between food tile-rgy(PA) and intolerance IFD/Kugmanova Zh.S., • Abilaev A.E., ITeraesov A.V., Esenzhanova G.il.//Ibid. Abstr.

8. HLA-complex and lymphocyte subpopulations in food allergy (ГА) and intolerance(FI)/Abilaav A.E., îîugmanova G.S., E3enzhanova O.M., Nersesov A.V., Karsibekova IJ.M.//8^n \ International Congress of Immunol. - Budapest, 1992.

9. Immunopathology of dtfodenum ulcer(DU) and chronic ohole-cystitia(CC)/Nugmanova Zh.S., Iiereesov A.V., Abilaev A.E., Esenzhanova G.M., Tazhiev E.V., Kulseitov N.Q.//IBID.Abetr.

¡10. Oxygen metabolites génération and proliferative responaa

; of peripheral blood's immunocompetent cells in food

allergy(FA) and itit6Ieranoe(FI)/Nersesov A.V., Nugmanos

' i ■

Ta Zh*S., Esemhartova G.H., Abilaev A.E.//Ibid.Abstr.